CN101939008A

CN101939008A - 用于治疗癌症的abt-263经口组合物

Info

Publication number: CN101939008A
Application number: CN2008801260954A
Authority: CN
Inventors: A·克里沃希克
Original assignee: Abbott GmbH and Co KG
Current assignee: Abbott GmbH and Co KG
Priority date: 2007-12-06
Filing date: 2008-12-05
Publication date: 2011-01-05
Also published as: WO2009073835A1; JP2011506338A; MX2010006260A; EP2219651A1; CA2708223A1; US20090149461A1

Abstract

公开了使用N-(4-(4-((2-(4-氯苯基)-5，5-二甲基-1-环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)-4-(((1R)-3-(吗啉-4-基)-1-((苯基硫烷基)甲基)丙基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺治疗癌症的方法。

Description

用于治疗癌症的ABT-263经口组合物

发明领域

本发明涉及使用N-(4-(4-((2-(4-氯苯基)-5，5-二甲基-1-环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)-4-(((1R)-3-(吗啉-4-基)-1-((苯基硫烷基(sulfanyl))甲基)丙基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺治疗癌症的方法。

发明背景

抗细胞凋亡Bcl-2家族蛋白质成员与许多疾病相关，并且因此处于作为潜在治疗药物靶的研究下。用于介入治疗的这些重要靶包括例如Bcl-2蛋白质家族Bcl-2、Bcl-X_L和Bcl-w。尽管本领域教导了与靶蛋白质结合的抑制剂，但这仅是当化合物被研究用于进一步或连续药物开发时必须考虑的许多参数之一。作为这种开发的部分，高度希望具有在哺乳动物中经口有效并且具有可耐受的副作用概况的化合物，其性质优选通过施用于哺乳动物且测定其副作用和严重程度进行测定。

因此，治疗领域存在具有可耐受副作用概况的有效癌症化学治疗的现有需要。

附图简述

图1是显示在以315mg给药过程中的平均ABT-263血浆浓度的曲线图。

图2是显示在禁食和非禁食条件下的剂量比例性的曲线图。

图3举例说明ABT-263在不同剂量下在几个给药周期期间对血小板的作用。

图4举例说明ABT-263对血小板的作用的时间选择和剂量依赖性。

发明概述

本发明涉及用于经口施用的组合物，其包括N-(4-(4-((2-(4-氯苯基)-5，5-二甲基-1-环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)-4-(((1R)-3-(吗啉-4-基)-1-((苯基硫烷基)甲基)丙基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺、Phosal

53M中链甘油三酯和脱水乙醇。

发明详述

化合物N-(4-(4-((2-(4-氯苯基)-5，5-二甲基-1-环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)-4-(((1R)-3-(吗啉-4-基)-1-((苯基硫烷基)甲基)丙基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺在本文中也称为ABT-263。

ABT-263是小分子Bcl-2家族蛋白质抑制剂，其以高亲和力(Ki≤1nM)与多种抗细胞凋亡Bcl-2家族蛋白质包括Bcl-XL、Bcl-2、Bcl-w和Bcl-B结合。通过与这些蛋白质结合，ABT-263释放促细胞凋亡家族成员，因此导致经由细胞凋亡的细胞死亡。ABT-263显示针对衍生自小细胞肺癌和淋巴样恶性肿瘤的人肿瘤细胞系的基于有效机制的细胞毒性(EC₅₀≤1μM)。ABT-263还显示针对22种细胞系中的10种的有效单一试剂活性，所述22种细胞系由跨越B细胞和T细胞恶性肿瘤的多种白血病和淋巴瘤类型组成。通过体外或体内代谢过程产生的ABT-263的代谢物也可以具有用于治疗癌症的效用。

ABT-263的某些前体化合物可以在体外或体内代谢以形成ABT-263，并且因此也可以具有用于治疗癌症的效用。

ABT-263的治疗有效量依赖于治疗接受者、治疗的疾病及其严重程度、包括其的组合物、施用时间、施用途径、治疗持续时间、效力、清除率以及是否共施用另一种药物。

ABT-263可以连同或不连同赋形剂一起施用。赋形剂包括例如脱囊化剂(encapsulators)和添加剂例如吸收促进剂、抗氧化剂、粘合剂、缓冲剂、包被剂、着色剂、稀释剂、崩解剂、乳化剂、膨胀剂、充填剂、调味剂、吸湿剂、润滑剂、香料、防腐剂、推进剂、释放剂、灭菌剂、增甜剂、加溶剂、湿润剂及其混合物。

在弥漫性大B细胞淋巴瘤的2种胁腹模型(DoHH-2和WSU-DLCL2)中，当ABT-263以100mg/kg/天的剂量经口(p.o.)给予，每日(q.d.)x17天施用时，注意到显著的单一疗法活性。已知这2种肿瘤都表达高水平的Bcl-2，这是由于t(14；18)易位。WSU-DLCL2系从这样的患者中分离，所述患者的疾病在化学治疗、放射治疗和骨髓移植后进展，并且被公认为治疗抗性淋巴瘤模型。

ABT-263的药物代谢动力学概况在多种动物模型包括CD-1小鼠、Sprague-Dawley大鼠、小猎兔犬和食蟹猴中进行评估。ABT-263的非临床药物代谢动力学概况的特征在于在研究的所有物种中非常低的血浆清除率和低容量分布，其中终末半衰期为4.6至8.4小时。化合物的经口生物利用率是制剂依赖性的，其中30％至50％的值得自在犬中的原型固体分散体和基于液体的制剂。在大鼠中，(¹⁴C)ABT-263被缓慢吸收，其中代谢物的清除主要在胆汁中。总放射性的清除是快速的，其中90％的剂量在给药后24小时内恢复。母体药物是体循环中的主要组分。

基于临床前证据，潜在的治疗相关副作用可能包括药物相互作用、淋巴细胞减少、睾丸效应和血小板减少症。在人中6.7.iM的预期生物学有效血浆浓度下，ABT-263可能抑制作为CYP2C8和CYP2C9底物的药物的代谢。在人中350mg每日(q.d.)给药的模拟描述了在稳态下92.ig.hr/mL的AUC，伴随′6.5.ig/mL的C_max。在这些条件下，预期血小板值在稳态下为′25K/.iL。在预期的有效范围的下限时，预期53.ig.hr/mL的AUC(在人中预测的200mg每日(q.d.)给药)是可达到的，同时仍维持在稳态下超过50K/.iL的血小板值。

毒理学

在沙门氏菌属(Salmonella)-大肠杆菌(Escherichia coli)细菌突变测定、在培养的人外周血淋巴细胞中的染色体畸变测定、和在体内大鼠微核测定中评估ABT-263的潜在遗传毒性。ABT-263在Ames测定中不是诱变的，伴随或不伴随代谢激活，在体外在人淋巴细胞中不诱导染色体畸变，伴随或不伴随代谢激活，并且在体内大鼠微核测定中不是诱裂的。这些发现暗示ABT-263不具有遗传毒性。

在大鼠中，ABT-263相关毒性包括血小板中的轻微至显著减少、淋巴细胞中的最低限度至中等减少、和在肝酶(谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶)中的最低限度至轻微增加。尽管大鼠在ABT-263的单次施用后具有血小板中的轻微至显著减少，但在重复施用过程中存在血小板的部分恢复，这可能代表对血小板中的减少的正常生理学应答。在ABT-263治疗停止后，血小板水平回到正常。此外，在大鼠中观察到的ABT-263相关微观改变包括在多种上皮细胞类型(肝细胞、鼻上皮、腮腺、胰、精囊和输尿管)中的单细胞坏死、精原细胞和精母细胞的耗尽、和与胸腺萎缩一致的在胸腺中皮质和髓质淋巴细胞中的减少。基于来自4周大鼠毒性研究的数据，由于在所有剂量下对血小板的作用，未达到无观察到的不利反应水平(no-observed-adverse-effect-level)(NOAEL)；然而，10mg/kg/天剂量被视为耐受剂量。

在犬中，毒性包括血小板中的显著减少和淋巴细胞中的轻微减少。在2周毒性研究中，与对照犬或其自身基线值相比较，具有低血小板计数(＜50K/μL)的犬趋于具有延长的出血时间。在犬中的4周毒性研究中，存在循环血小板计数中的显著减少，这随后在一些剂量下的治疗时间段期间增加。对血小板的这种作用在ABT-263治疗终止后小于7天内完全可逆。在犬中的靶器官包括淋巴组织(脾、淋巴集结、淋巴结和胸腺(2周研究))、雄性生殖组织(睾丸和附睾)和胰。在这些靶器官中观察到的微观改变包括在淋巴组织中减少尺寸的滤泡、皮质和/或生发中心；在淋巴组织的外套区、生发中心和/或滤泡间区域中减少的细胞构成；精原细胞、精母细胞和/或精子细胞(圆形和伸长的)耗尽；和胰腺腺泡细胞单细胞坏死。除胰腺腺泡细胞单细胞坏死外，这些微观改变在4周无剂量恢复时间段后也是显著的。在ABT-263施用于犬4周后的NOAEL是1mg/kg/天。

在小鼠、大鼠和犬中的循环血小板中的减少的初步毒理学发现是浓度依赖性的，并且预期是在人中关于ABT-263的剂量限制性毒性。血小板减少症在单剂施用后可见，并且在C_max时存在。在单剂后，血小板计数经过约1周回到正常值，伴随平均血小板体积中的伴随增加。尽管存在血小板中的显著减少，但这种毒性在大鼠和犬中耐受最高达28天。

非何杰金淋巴瘤(NHL)

NHL是美国第6大类型的新癌症并且主要在60-70岁的患者中发生。NHL是相关疾病家族，其基于多种特征包括临床属性和组织学进行分类。一种分类方法基于疾病的自然史将不同组织学亚型置于2个主要类别内：无痛和攻击性的。一般而言，无痛亚型缓慢生长并且一般是不能治愈的，而攻击性亚型快速生长并且是潜在可治愈的。滤泡性淋巴瘤是最常见的无痛亚型，并且弥漫性大细胞淋巴瘤构成最常见的攻击性亚型。癌蛋白质Bcl-2最初在非何杰金B细胞淋巴瘤中得到描述。滤泡性淋巴瘤的治疗一般由基于生物学的化学治疗或联合化疗组成。常规使用用利妥希玛、环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和泼尼松的治疗(R-CHOP)，以及利妥希玛、环磷酰胺、长春新碱和泼尼松(RCVP)。还使用单一试剂利妥希玛(靶向均一表达的CD20)和氟达拉滨；利妥希玛(Rituxan)加入化学治疗方案已显示改善的应答率和增加的无进行性存活(PFS)。放射免疫治疗试剂和干细胞移植可以用于治疗难治疾病。然而，因为治愈用标准治疗是罕见的，所以目前指导推荐患者在临床试验的背景下进行治疗，即使在第一线环境(first line settings)中。具有攻击性大B细胞淋巴瘤的患者的第一线治疗一般由利妥希玛、环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和泼尼松(R-CHOP)，或依托泊苷、泼尼松、长春新碱、环磷酰胺和阿霉素(DA-EPOCH-R)组成。高剂量化学治疗和干细胞移植也可以用于治疗复发或难治疾病。目前，不存在产生治愈的经批准的治疗方案，并且目前指导推荐患者在临床试验的背景下进行治疗，即使在第一线环境中。

大多数淋巴瘤起初对这些治疗中的任何一种应答，但肿瘤一般复发并且最终变得难治。随着患者接受的方案数目增加，疾病变得更加有化学治疗抵抗力。对第一线治疗的平均应答是约75％，对第二线是60％，对第三线是50％，并且对第四线是～35-40％。在多次复发环境中用单一试剂约20％的应答率被视为阳性的并且保证进一步研究。目前化学治疗剂通过经由多种机制诱导细胞凋亡来引发其抗肿瘤应答。然而，许多肿瘤最终变得对这些试剂有抵抗力。Bcl-2和Bcl-XL已显示在体外和最近体内短期存活测定中赋予化学治疗抗性。这暗示旨在抑制Bcl-2和Bcl-XL功能的治疗可能成功克服这种化学治疗抗性。

由于Bcl-2在高百分比的患者中的超表达，淋巴样恶性肿瘤是关于ABT-263的有吸引力的靶。因此，开始了在具有复发或难治淋巴样恶性肿瘤的受试者中，评估经口施用的Bcl-2家族蛋白质抑制剂ABT-263的安全、药物代谢动力学和初步功效的1/2a期研究。1期是研究的剂量逐步增加部分，并且2a期是在推荐的2期剂量下研究的安全扩展部分。

研究由2个不同部分组成。研究的1期部分评估在剂量逐步增加后在约30-40个受试者中ABT-263的药物代谢动力学概况和安全，目的是限定剂量限制性毒性(DLT)和最高耐受剂量(MTD)。食物对生物利用率的作用也在1期中进行评价。受试者在约8个研究场所加入用于研究的1期部分。研究的2a期部分评估在具有滤泡性淋巴瘤的约40个受试者和具有攻击性大B细胞淋巴瘤的20个受试者中在限定的推荐2期剂量(RPTD)下的ABT-263，以获得如部分中限定的另外安全信息和功效的初步评价。Arm A具有患有复发或难治滤泡性淋巴瘤的约20个受试者。Arm B具有患有已变得对利妥希玛有抗性的滤泡性淋巴瘤(在先前利妥希玛治疗后6个月内进展)的约20个受试者。Arm C具有患有攻击性大B细胞淋巴瘤的约20个受试者。研究的2a期部分中的受试者在约20个研究场所加入。

1期

包括标准

受试者对于研究参与是合格的，如果他/她：约18岁；具有如世界卫生组织(WHO)分类方案中限定的淋巴样恶性肿瘤的组织学证明的诊断；已接受用于淋巴样恶性肿瘤的至少1次先前化学治疗治疗方案，并且其疾病是难治的或受试者在治疗后已经历进行性疾病；如果超过70岁，那么已证明在研究药物的第一剂前28天内对于硬膜下或硬膜外血肿脑成像(MRI或CT)阴性；具有约1的Eastern Cooperative Oncology Group(ECOG)表现得分；如果接受选择性5羟色胺重摄取抑制剂抗抑郁药(例如Prozac)，那么必须已接受在研究药物的第一剂前至少21天的稳定剂量；具有如下根据当地实验室参考范围足够的骨髓、肾和肝功能：骨髓：约1,000/il的绝对嗜中性粒细胞计数(ANC)；约100,000/mm³的血小板；和约9.0g/dL的血红蛋白；肾功能：约2.0mg/dL的血清肌酸酐或约50的计算肌酸酐清除率；肝功能和酶：约3.0x研究所正常范围正常上限(ULN)的AST和ALT；胆红素～1.5xULN。患有Gilbert氏综合征的受试者必须具有胆红素＞1.5xULN；凝结：aPTT，PT不超过1.2xULN。女性受试者必须是经外科手术不育的、绝经后至少1年或对于妊娠测试具有阴性结果，并且未切除输精管的男性受试者必须已进行节育。

ABT-263施用

对于1期的第一个周期，ABT-263在第-3天(在周期1的第1天前3天的单天给药)和第1天到第14天时施用，随后为7天脱离药物，以完成24天周期(仅周期1)。所有受试者在第-3天时在禁食条件下接受ABT-263，并且在第1天时在非禁食条件下(在标准早餐后)接受ABT-263，以研究食物对ABT-263药物代谢动力学概况的作用。在第一个周期的第一剂(第-3天)后不施用药物共72小时，以评价单剂药物代谢动力学和毒性。对于所有后续周期，ABT-263施用连续14天，随后为7天脱离药物(21天周期)。除第一个周期的第-3天和第1天外，受试者得到指示在1期中在给药日时在早餐后约30分钟时经口每天一次(QD)自施用ABT-263。评估食物对药物代谢动力学的作用，并且如果禁食条件更佳，那么起始改变。

ABT-263给药

用ABT-263的给药以10mg开始，并且对于每个群(cohort)中最低限度3个受试者逐步增加至MTD。研究药物剂量用剂量倍增逐步增加，直至发生1次级别3或2次级别2毒性，这之后剂量逐步增加以标准25％-40％增量继续。这个范围允许经口剂量从所需注射器中的精确分配。在每个群后的血小板水平由研究者和Medical Monitor检查，并且告知所有剂量逐步增加决定。预测的ABT-263有效浓度预期在200mg至350mg范围内发生。

在另外的受试者可以加入前，每个剂量群中的第一个受试者必须完成2周给药。当安全信息通过研究者和Medical Monitor从早期群中检查，并且确定无受试者加入中的错开时剂量逐步增加可以安全进展时，这个规定可以放弃。如果在给定群中的所有指定受试者完成周期而不经历剂量限制性毒性(DLT)，那么将进行ABT-263至下一个剂量水平的逐步增加。如果任何剂量水平内的一个受试者经历DLT，那么总共6个受试者在那个剂量水平下加入。如果6个受试者中≥2个经历DLT，那么先前剂量被视为MTD或剂量逐步减少可以如下发生：

如果群中的2个或更多个受试者在先前剂量倍增后的任何剂量水平下经历DLT，那么下一个剂量水平从目前剂量减少20-25％。如果6个受试者中小于2个在这个减少水平下经历DLT，那么这个剂量被宣布为MTD。如果群中的2个或更多个受试者仍经历DLT，那么可能需要另外的20-25％剂量减少。如果所测试的20-25％剂量减少被视为良好耐受的(0/3 DLTs)，那么可以随发起人和研究者的意思起始10-15％增加。

MTD定义为在其下6个受试者中小于2个经历DLT的最高剂量水平。

表2

剂量逐步增加指导

a.回复标准25％-40％剂量逐步增加

关于安全和临床进展的受试者评价每周继续直到前2个周期。随后，关于安全和临床进展的受试者评价每个周期执行1次(每3周)。

1期中的受试者内(intra-subject)剂量逐步增加和连续给药

为了收集关于用ABT-263的交替给药方案的信息，受试者可以变成在其目前指定剂量水平下共21天周期的连续给药方案。受试者需要在给药14天随后为7天脱离药物的最初给药方案下完成2个周期。受试者可以被视为对于连续给药方案合格的，如果他们耐受药物的前2个周期并且Medical Monitor同意其合格的话。

一旦受试者变成连续给药方案，受试者就保持那个方案(即使受试者后期剂量逐步增加)，除非基于研究者的判断，由于毒性改变被认为是正当的。

此外，为了使在相关剂量下的信息收集达到最大，并且使个体暴露于亚最佳剂量降到最低，受试者可以通过ABT-263施用的2个周期使其目前剂量渐进地逐步增加至耐受的最高剂量水平。在任何剂量逐步增加前，个体将需要完成在其最初指定剂量水平以及后续剂量水平下的至少2个周期。

所有受试者内剂量逐步增加和连续给药决定都基于研究者与Abbott Medical Monitor配合的判断。一旦宣布MTD且测定RPTD，就保持在研究中且继续耐受药物的受试者可以逐步增加至测定为RPTD的剂量水平或在连续给药方案下低于RPTD的剂量水平。通过观察到的DLTs和MTD的测定来限定RPTD。

关于安全的受试者评价(体格检查、生命体征、化学、血液学、尿分析和不利事件评价)在新逐步增加剂量或新剂量方案下的第一个周期过程中每周执行，并且随后恢复至每个周期一次。所有其他程序(血小板计数、超声心动图和ECG)根据评价方案执行。

从1期部分到2a期部分的ABT-263给药过渡

一旦达到MTD，就终止加入研究的1期部分并且执行安全分析。在加入研究的2a期部分开始前，将安全分析结果以及推荐的2期剂量传达给所有参与的研究场所。1期受试者对于研究2a期部分的加入不合格，但可以继续接受ABT-263最高达1年，条件是他们继续耐受药物，没有疾病进展的证据，并且不满足关于受试者停药的任何标准。

2a期

包括标准

受试者对于研究参与是合格的，如果他/她：≥18岁；具有滤泡性淋巴瘤的组织学证明的诊断(加入Arm C的受试者必须具有攻击性大B细胞淋巴瘤的组织学证明的诊断)；具有通过International Working Group(IWG)Criteria for Tumor Response可测量的疾病；已满足下述标准之一：已接受至少1次且不超过4次先前常规化学治疗方案的滤泡性淋巴瘤(Arm A)，并且其疾病是难治的，或受试者在治疗后已经历进行性疾病；已变得对利妥希玛有抗性的滤泡性淋巴瘤(即在先前利妥希玛治疗后6个月内进展)(Arm B)；已接受至少1次且不超过4次先前常规化学治疗方案后的攻击性大B细胞淋巴瘤(Arm C)，并且其疾病是难治的，或受试者在治疗后已经历进行性疾病；如果在临床上需要(例如超过70岁的受试者)，那么已证明在研究药物的第一剂前28天内对于硬膜下或硬膜外血肿脑成像(MRI或CT)阴性；已编档保存可用于评价Bcl-2家族蛋白质表达的诊断组织；具有可用于药物动力学分析的下述之一：在筛选时获得的恶性淋巴结的粗针(core needle)活组织检查；在筛选时获得的骨髓抽吸物或核心，对于淋巴瘤阳性；在活组织检查后无介入治疗的编档保存的肿瘤组织(例如来自减积(debulking)、在复发时获得的组织或骨髓样品)；具有约1的Eastern Cooperative Oncology Group表现得分；对于接受选择性5羟色胺重摄取抑制剂(SSRI)抗抑郁药(例如Prozac)的受试者，必须已具有在研究药物的第一剂前至少21天的稳定剂量；具有如下根据当地实验室参考范围足够的骨髓、肾和肝功能：骨髓：约1,000/il的绝对嗜中性粒细胞计数(ANC)；约100,000/mm³的血小板；约9.0g/dL的血红蛋白；肾功能：约2.0mg/dL的血清肌酸酐或约50的计算肌酸酐清除率；肝功能和酶：约3.0x研究所正常范围正常上限(ULN)的AST和ALT；约1.5xULN的胆红素。患有Gilbert氏综合征的受试者可具有＞1.5×ULN的胆红素；凝结：aPTT，PT不超过1.2xULN。女性受试者必须是经外科手术不育的、绝经后至少1年或对于妊娠测试具有阴性结果，并且未切除输精管的男性受试者必须已进行节育。

ABT-263给药

对于研究的2a期部分，ABT-263施用连续14天，随后为7天脱离药物。Arm A将在具有复发或难治的滤泡性淋巴瘤的受试者中评估ABT-263，Arm B将在具有利妥希玛抗性滤泡性淋巴瘤的受试者中评估ABT-263，并且Arm C将在具有攻击性大B细胞淋巴瘤的受试者中评估ABT-263。所有受试者将在早餐后约30分钟时自施用ABT-263，除非来自1期食物效应研究的结果指出禁食条件较好。如果在2a期过程中，在高于MTD(＞33％)定义的频率下观察到剂量限制性毒性，那么研究者检查数据，并且决定给药应继续还是限定新的、更低的推荐2期剂量。

体格检查

在筛选、周期1第-3天(1期)或周期1第1天(2a期)、每个后续周期的第1天(或在前72小时内)、最后一次就诊和安全随访就诊时执行体格检查(包括重量)。直到前2个周期和必要时每周执行症状指导的体格检查。高度仅在筛选时进行测量。在筛选时执行的体格检查将充当用于临床评价的基线体格检查。在给药后的任何临床上显著的体格检查发现记录为不利事件。

生命体征

在筛选、周期1第-3天(1期)或周期1第1天(2a期)、每周直到前2个周期、每个后续周期的第1天(或在前72小时内)、最后的就诊和安全随访就诊时测量体温(口腔)、血压和脉搏。在筛选时的生命体征测量将充当用于临床评价的基线测量。

在研究药物施用后30至60分钟和受试者已坐下至少5分钟后测量血压和脉搏率。

血小板计数

立即(stat)执行血小板计数，并且如下在研究药物施用前通过研究者或副研究者进行评价：

1期：

筛选

周期1：

·第-3天到第2天

○在第-3天到第2天时在所有药物代谢动力学取样时间点时得出血小板计数。

·第3、4、5、6和8天

○如果在第8天时血小板计数低于50,000/mm³，那么在第9天和第10天时每天得出血小板计数。

·第11天

○如果在第11天时血小板计数低于50,000/mm³，那么在第12天和第13天时每天得出血小板计数。

·第14天

○在第14天时在所有药物代谢动力学取样时间点时得出血小板计数，如表5中指出的。

·第16天

·需要时

随后的周期：

·第1、3、5、8和16天

·需要时

最后的就诊和安全随访就诊

21/21天连续给药方案——1b期

筛选

引入期(lead-in period)

引入第1、2、3、5和7天

如果引入期延长超过7天，那么血小板计数将在每个另外引入日时(引入第8-14天)给药前得出。

周期1：

·第1天

○血小板计数将在第1天时在所有药物代谢动力学取样时间点时得出。

·第2、3、5和8天

·第14天

·第16天

·需要时

随后的周期：

·每周

○如果在任何给定日时的血小板计数低于50,000/mm³，那么应每天或随研究者的意思执行另外的血小板计数。

○需要时

最后的就诊和安全随访就诊

2a期：

筛选周期1：

·第1、2、3、5、8、14和16天

·需要时

随后的周期

○每周和需要时

○如果研究者和Abbott Medical Monitor共同同意血小板计数直到周期4已稳定，那么周期5和之后的血小板计数频率可以降低至每个周期的第1天和需要时。

最后的就诊和安全随访就诊

1a期、1b期和2a期

如果在任何给定日时的血小板计数低于50,000/mm³，那么应每天或随研究者的意思执行另外的血小板计数。

如果需要血小板输液，那么输液后血小板计数应在输液完成10-60分钟内获得。

在周期1第-3天时(给药前)获得的血小板计数测量将充当研究的1a期部分中用于临床评价的基线。

在引入第1天时(给药前)获得的血小板计数测量将充当研究的1b期部分中用于临床评价的基线。

在周期1第1天时(给药前)获得的血小板计数测量将充当研究的2a期部分中用于临床评价的基线。

来自自动化读数的血小板计数小于25,000/mm³应在同一天通过手工读数和分开的外周抽取加以证实。如果根据管理指导保持或中断ABT-263，那么应从受试者获得另外的血小板计数。

在1a期和1b期中直到周期4获得的所有血小板计数测量将经由部分6.5中提供的联系资料在24小时内传真给Oncology Group Safety Desk。

当获得关于响应研究药物施用的血小板中的预期减少的信息时，可以修改评价的血小板计数时间表。这将依据研究者和Abbott Medical Monitor之间的讨论。

来自筛选的淋巴细胞计数结果将充当用于临床评价的基线。

对于每个受试者，在筛选、周期1第14天时、在周期4后和在最后的就诊时执行淋巴细胞计数，以鉴定B和T细胞淋巴细胞亚群。在研究的1a期和1b期部分中获得的所有淋巴细胞计数结果将经由部分6.5中提供的联系资料一获得就传真给Oncology Group Safety Desk。

状态

如下在筛选、周期1第-3天(1a期)或周期1第1天(1b期和2a期)、每周直到前2个周期、每个随后周期的第1天(或在前72小时内)、最后的就诊和安全随访就诊时评价ECOG体力状态：

级别描述

0 完全活动，能够无限制地从事所有疾病前行为。

1 在身体上的费力活动方面受限制，但能走动并且能够从事轻

或久坐性质的工作，例如轻家务劳动、办公室工作。

2 能走动并且能够完全自理但不能执行任何工作活动。最高达

且约超过50％的清醒小时。

3 仅能够有限自理，局限于床或椅子超过50％的清醒小时。

4 完全残废。不能从事任何自理。完全局限于床或椅子。

所有ECOG体力状态也在引入第1天(1b期)时进行评价。在筛选时评价的ECOG体力状态将充当用于临床评价的基线。

12-导联心电图(ECG)(1期)

在筛选、周期1第-3天、周期1第14天、每个随后周期的第1天和最后的就诊时，对于前2群中的所有受试者执行12-导联静止ECG。对于随后的群，在筛选、周期1第-3天和第14天、周期3第1天和第14天以及最后的就诊时执行ECG。

对于加入1b期的受试者，应在筛选、周期1第1天、周期1第14天、周期3第1天、周期3第14天和最后的就诊时执行Eggs。在引入期过程中在引入第1天时也将执行ECG。在正在进行的基础上评价数据，并且依赖于任何临床上显著的发现的观察，可以调整ECG监控。

所有ECGs应在给药后约6-8小时获得(给药后2-8小时是可接受时间范围)，以及若可能则在每天大约同时时。如果药物代谢动力学数据指出母体药物或主要代谢物的C_max在不同于这个指定范围的时间发生，那么修改ECG的时间选择。有资格的医生将署名且记录ECGs的日期，测定超出正常生理学变异的任何发现是否有临床意义(若必要，则咨询心脏病学家)，并且将这记录在合适的CRF上。具有医生评价的原始ECG描图保留在研究场所受试者的记录中，并且拷贝经由联系资料传真给Oncology Group Safety Desk。在筛选时获得的ECG测量用于证明受试者的基线状态，从而使得若必要则可以进行安全比较。每当临床上必要时，执行重复ECGs。

12-导联心电图(ECG)(2a期)

在筛选、周期1第14天、周期3第14天和最后的就诊时，对于研究的2a期部分的所有受试者执行12-导联静止ECG。所有ECGs应在给药后约6-8小时获得(给药后2-8小时是可接受时间范围)，以及在每天大约同时时。如果药物代谢动力学数据指出母体药物或主要代谢物的C_max在不同于这个指定范围的时间发生，那么可以修改ECG的时间选择。有资格的医生将署名且记录ECGs的日期，测定超出正常生理学变异的任何发现是否有临床意义(若必要，则咨询心脏病学家)，并且将这记录在合适的CRF上。原始ECG描图保留在研究场所受试者的记录中，并且拷贝经由部分6.5中提供的联系资料传真给Oncology Group Safety Desk。在筛选时获得的ECG测量用于证明受试者的基线状态，从而使得若必要则可以进行安全比较。每当临床上必要时，执行重复ECGs。

含多普勒的2D超声心动图(1a期和1b期)

在1a期中，在筛选、周期1第-3天和第14天、每个随后周期的第1天和最后的就诊时，对于前2个群的所有受试者执行含多普勒的2D超声心动图。对于1a期中的随后群，在筛选、周期1第-3天和第14天、周期3第1天和第14天以及最后的就诊时，执行含多普勒的超声心动图。对于加入1b期的受试者，在筛选、周期1第1天、周期1第14天、周期3第1天周期3第14天以及最后的就诊时，执行含多普勒的超声心动图。在引入期过程中的引入第1天时将执行超声心动图。

若必要，则周期1第14天和周期3第14天超声心动图可以在第14天前的3天内执行。也将在引入期过程中的引入第1天时执行超声心动图。在正在进行的基础上评价测试结果，并且依赖于任何临床上显著的发现的观察，可以调整监控。

所有超声心动图应在给药后约6-8小时获得(给药后2-8小时是可接受耐间范围)，以及若可能则在每天大约同时时。如果药物代谢动力学数据指出母体药物或主要代谢物的C_max在不同于这个指定范围的时间发生，那么修改超声心动图的时间选择。有资格的医生将署名且记录超声心动图报告的日期，测定超出正常生理学变异的任何发现是否有临床意义，并且将这记录在合适的CRF上。具有医生评价的原始超声心动图报告保留在研究场所受试者的记录中，并且拷贝经由部分6.5中提供的联系资料传真给Oncology Group Safety Desk。另外，必要时，Abbott将要求访问超声心动图的记录。在筛选时获得的超声心动图结果用于证明受试者的基线状态，从而使得若必要则可以进行安全比较。每当临床上必要时，执行重复超声心动图。

骨髓活组织检查

在筛选时(在研究药物的第一次给药前21天内)对于所有受试者执行骨髓活组织检查，以测定骨髓中的疾病累及且用于药物动力学分析。

用于药物动力学分析的骨髓活组织检查在部分5.3.7中描述。在筛选时的骨髓活组织检查应在所有其他合格标准已满足后执行，除非以其他方式通过护理标准获得。对于在研究登记时具有骨髓累及的受试者，如果受试者对ABT-263的最佳应答测定为完全应答(CR)，那么应获得重复的骨髓活组织检查。这应在标准(CR)第一次满足后8-12周内执行。

用于NCI-WG标准的骨髓抽吸物和活组织检查

在筛选时(在研究药物的第一次给药前21天内)将执行骨髓活组织检查，除非在无介入治疗起动研究药物的12周内获得骨髓抽吸物和活组织检查，并且代表受试者的现有CLL。骨髓抽吸物和活组织检查应在所有合格标准已满足后执行，除非以其他方式通过护理标准获得。

如果受试者满足关于完全应答(CR)的所有临床和实验室标准(除血小板计数外，由于潜在的药物相关毒性)，那么骨髓抽吸物和活组织检查应在标准第一次满足后3个月执行，以证实CR。

研究自始至终作为护理标准执行的骨髓抽吸物和活组织检查也应在病例报告表上记录。

用于IWG标准的肿瘤评价

在筛选、周期2和周期4结束时、其后的每第3个周期和最后的就诊时，在所有受试者的评估中使用累及的解剖区的计算机断层摄影术(CT)、磁共振成像(MRI，如果医学上需要)和骨髓活组织检查(如果医学上需要)，其中使用用于肿瘤应答的IWG标准。受试者将继续通过相同方法进行监控，除非肿瘤转移的证据证明的是另一回事。在筛选时执行的肿瘤评价将充当用于临床评价的基线。应答标准定义在部分5.3.3.1中概述。

对于加入2a期具有弥漫性大B细胞淋巴瘤(Arm C)的所有受试者，使用氟脱氧葡萄糖(FDG)的PET扫描将用于区分未经证实的完全应答(Cru)和完全应答(CR)。用于完全应答的下述IWG标准将用于这个群体：

○一般的摄取FDG(FDG-avid)的淋巴瘤：在无预处理PET扫描的患者中或当治疗前的PET扫描阳性时，允许治疗后任何大小的残留团块，只要它是PET阴性的。

○可变地摄取FDG的淋巴瘤/FDG抗体亲抗原性未知：在无预处理PET扫描的患者中，或如果预处理PET扫描是阴性的，那么所有淋巴结和结节团块在CT上必须消退至正常大小(小于或等于1.5cm，在治疗前其关于结节的最大直径＞1.5cm)。在治疗前在其长轴中为1.1-1.5cm和在其短轴中超过1.0cm的先前累及的结节在治疗后在其短轴中必须已减少至≤1.0cm。

受试者将继续通过相同方法进行监控，除非肿瘤转移的证据证明的是另一回事。在筛选时执行的肿瘤评价将充当用于临床评价的基线。

用于NCI-WG标准的肿瘤评价

将使用外周血分析、体格检查、骨髓抽吸物和活组织检查、累及的解剖区的CT扫描和MRI(如果医学上需要)。

在周期2结束时、周期4结束时、其后的每第3个周期结束时和最后的就诊时，受试者将针对NCI-WG标准21(体格检查/CT/MRI)进行评估。在后面周期的第1天时(给药前)，外周血分析将针对用于肿瘤应答评价的NCI-WG标准进行评估。例如，当受试者完成周期2时，来自周期3的第1天(给药前)的实验室值将用于评价肿瘤应答。

在筛选时(在研究药物的第一次给药前21天内)将完成累及的解剖区的CT扫描(或MRI，如果医学上需要)。在筛选时执行的肿瘤评价将充当用于临床评价的基线。如果受试者满足关于完全应答(CR)或部分应答(PR)的所有临床和实验室标准(除血小板计数外，由于潜在的药物相关毒性)，那么在标准第一次满足后3个月或2个月应分别执行CT扫描，以证实CR或PR。

研究自始至终作为护理标准执行的CT扫描和MRIs也应在病例报告表上记录。

妊娠测试

对于具有分娩可能性的女性受试者，当地参考实验室将在筛选时执行血清妊娠测试，和在给药前在周期1的第-3天(1期)或在周期1的第1天(2a期)时执行尿妊娠测试。测试结果必须在给药前检查且测定为阴性。

被视为无分娩可能性的受试者必须记录为经外科手术不育或绝经后的(至少1年)。

临床实验室测试

在1a期和1b期中，当地实验室将用于加工且提供关于临床实验室测试的结果。主要研究者或副研究者将检查、起始且记录所有实验室结果的日期。实验室测试结果将收集在病例报告表上。

在1a期和1b期中直到周期2的第1天获得的所有实验室测量将经由部分6.5中提供的联系资料在24小时内传真给Oncology Group Safety Desk。

1a期

血液学、化学和尿分析将在下述时间收集：

·筛选

·周期1第-3天

·周期1第1天、第2天和第3天(仅化学和血液学)

·每周直到周期2

·随后的周期的第1天(或72小时内)

·最后的就诊

·安全随访就诊在筛选、周期1第-3天(1期)或周期1第1天(2a期)、周期1第2天(1期)或周期1第3天(2a期)(仅化学和血液学)、每周直到前2个周期、每个随后周期的第1天(或前72小时内)、最后的就诊和安全随访就诊时，收集血液学、化学和尿分析样品。结果必须在给药前获得且检查。来自筛选的实验室测试结果(除血小板计数外)将充当用于临床评价的基线。

·如果可能，那么化学测试应在禁食条件下获得。

·甘油三酯仅在筛选和最后的就诊时收集。

·当地实验室将用于加工且提供关于临床实验室测试的结果。主要研究者或副研究者将检查、起始且记录所有实验室结果的日期。实验室测试结果将收集在病例报告表上。

表6.临床实验室测试

对于研究者视为临床上显著的超出参考范围的任何实验室测试值：

·研究者可以重复测试以验证超出范围值。

·研究者将跟踪超出范围值至满意的临床消退。

·需要受试者从研究中中断的实验室测试值记录为不利事件。

2a期

在2a期中获得的临床实验室样品将使用合乎标准的中心实验室(Quest Diagnostics)进行评价。这个数据将用于所有数据分析。用于这个研究的中心实验室将提供关于这些样品收集、加工和运送的指导。所有实验室样品应运送给中心实验室。

2a期

血液学、化学和尿分析将在下述时间收集：

·筛选

·周期1第1天

·周期1第2天和第3天(仅化学和血液学)

·每周直到周期2

·随后的周期的第1天(或72小时内)

·最后的就诊

·安全随访就诊

对于在周期2和其后的过程中处于肿瘤溶解综合征的高度危险中的受试者，按照部分6.7.5中的管理指导可以收集另外的血液学和化学样品。

合乎标准的当地参考实验室可以执行血液学和化学测试用于立即受试者管理；然而，必须抽取分离的或共存的样品且运送给中心实验室用于分析。

当地实验室将用于加工且提供关于所有血小板计数的结果。血小板计数结果必须在给药前获得且检查。来自筛选的实验室测试结果(除血小板计数外)将充当用于临床评价的基线。

表9.临床实验室测试

血液学

血细胞比容

血红蛋白

红细胞(RBC)计数

白细胞(WBC)计数

嗜中性粒细胞

条带

淋巴细胞

单核细胞

嗜碱性粒细胞

嗜酸性粒细胞

血小板计数(不接受估计值)

凝血酶原时间(PT)

部分活性促凝时间(aPTT)

平均血小板体积(MPV)

红细胞平均血红蛋白量(MCH)

红细胞平均容积(MCV)

平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)

网状细胞计数

临床化学(a，b)

血尿素氮(BUN)

肌酸酐

总胆红素

血清谷丙转氨酶(SGPT/ALT)

血清谷草转氨酶(SGOT/AST)

碱性磷酸酶

钠

钾

钙

无机磷

尿酸

胆固醇

总蛋白质

葡萄糖

甘油三酯

清蛋白

乳酸脱氢酶(LDH)

镁

氯化物

碳酸氢盐

淀粉酶(筛选、C1D14和最后的就诊)

脂肪酶(筛选、C1D14和最后的就诊)

尿分析

比重

酮

pH

蛋白质

血液

葡萄糖

显微镜检查(指出时)

a.如果可能，那么化学测试应在禁食条件下获得。

b.甘油三酯将仅在筛选和最后的就诊时执行。

·研究者可以重复测试以验证超出范围值。

·研究者将跟踪超出范围值至满意的临床消退。

·需要受试者从研究中中断的实验室测试值将记录为不利事件。

受试者编号的指定

对于研究的1期部分，在由研究者经Abbott Medical Monitor或被指定者同意检查后，在受试者可以施用研究药物前，所有筛选和给药前研究第1天(或对于引入期的引入第1天)评估的结果必须在临床上可接受的限度内。如果实验室或其他筛选结果不在临床上可接受的限度内，那么受试者将不加入研究。满足包括标准且不满足任何排除标准的受试者指定独特的受试者编号。

在受试者可以施用研究药物前由研究者检查后，所有筛选和给药前研究第1天评估的结果必须在临床上可接受的限度内(根据部分5.2.1中的包括标准)。如果实验室或其他筛选结果不在临床上可接受的限度内，那么受试者将不加入研究。满足包括标准且不满足任何排除标准的受试者将由Abbott指定独特的受试者编号，如部分5.5.3中所述。

膳食和饮食需求

对于1期研究中的第一个周期，ABT-263在第-3天时在禁食条件下和在第1天到第14天时在非禁食条件下施用于所有受试者。由于可能的CYP3A介导的代谢相互作用，在起始药物施用前的3天时间段内且直至最后的治疗周期完成时，受试者不可以消耗葡萄柚或葡萄柚产物。在第-3天时，受试者将不允许摄取食物或饮料，除止渴的水外，从给药前8小时直至4小时血样收集后。在给药前1小时和给药后1小时不允许除给药所需那些外的流体。在第1天和第14天时，在施用ABT-263前，所有受试者将在研究场所吃标准早餐。膳食容量将由约520Kcal组成；其中约30％卡路里来自脂肪。

用于药物遗传学分析的血样

DNA

在筛选时从每个受试者中收集1份4mL全血样品用于DNA分离，所述受试者同意提供用于药物遗传学分析的样品。

将样品收集到EDTA管内并且贮存在冷冻条件下，直至在干冰上运送给Abbott。

如果执行药物遗传学测试，那么来自个别受试者的结果保持编码和机密。Abbott将在具有足够措施以保护机密性的安全贮存空间中贮存DNA样品。样品如此编码，从而使得进行基因型分型分析的科学家无法获得受试者身份。

用于药物动力学分析的样品

用于蛋白质组学的血液收集

在筛选、周期1第14天、周期2第14天和最后的就诊时，从所有受试者中通过静脉穿刺术将约6mL血液收集到1个6-mL EDTA(紫色盖)管内。收集应如下所述执行。离心、转移至冷冻管和冷冻的全部过程应在距血液抽取小于1小时内完成。

·将血样收集到6-mL EDTA(紫色盖)管内。

·将收集管立即颠倒8-10次(从而使得血块形成减少)。

·使样品在1200-1500xg下在2-8℃下离心15分钟。

·在15分钟内，将血浆转移到分开的4mL标记的冷冻管内且在-70℃下冷冻。

·将样品贮存于-70℃直至在对于3天足够的干冰上运送给Abbott。

用于药物动力学分析的样品

1a期和1b期药物动力学收集

强制性收集

·蛋白质组学

·用于肿瘤细胞的骨髓抽吸物。如果未收集骨髓抽吸物，那么可以获得骨髓核心活组织检查

任选收集

·DNA样品

·福尔马林固定的、石蜡包埋的编档保存的诊断组织，用于IHC和FISH分析

·粗针活组织检查(执行2次)

○1份粗针活组织检查，其是福尔马林固定的用于IHC和FISH分析

○1份粗针活组织检查，其是瞬间冻结的用于CGH/微阵列分析

2a期药物动力学收集

强制性收集

·下述之一是研究的2a期部分中的所有受试者所需的：

○恶性淋巴结的粗针活组织检查

○对于淋巴瘤阳性的骨髓抽吸物或核心

○在活组织检查后无介入治疗的编档保存的肿瘤组织(例如来自减积、在复发时获得的组织或骨髓样品)。

·蛋白质组学

任选收集

·DNA样品

如果上述无一对于潜在受试者(1a期、1b期和2a期)可获得，那么应联系Abbott Medical Monitor。

针吸活组织检查也将在复发时从研究的2a期部分中的所有受试者中获得。

药物动力学样品的加工

用于蛋白质组学的血液收集

·将血样收集到6-mL EDTA(紫色盖)管内。

·将收集管立即颠倒8-10次(从而使得血块形成减少)。

·使样品在1200-1500xg下在2-8℃下离心15分钟。

用于IHC和FISH的组织收集固定的样品

对来自研究的1期部分中同意的所有受试者和来自研究的2a期部分中的所有受试者的编档保存的、用于诊断的、福尔马林固定的、石蜡包埋(FFPE)的组织块的组织载玻片，执行免疫组织化学(IHC)和荧光原位杂交(FISH)。

对于每个代表性FFPE块，当地病理学实验室应制备厚度约4-6微米的15块组织切片，并且应用于带正电的载玻片，以用于IHC和FISH分析。因此，应从每个受试者块中收集最低限度(15)4-6微米的组织切片。在其中不存在提供这些切片可用的足够合适组织的情况下，研究者将与病理学实验室联系以确定可以提供的最高数目的载玻片，并且在载玻片制备前将该信息传递给Abbott。

为了确保最佳取样，2个质量控制载玻片也必须由病理学实验室制备，并且包括在给Abbott的载玻片运送中。这些质量控制载玻片代表组织切片的开始和结束。这些载玻片使用苏木精和伊红(H&E)进行染色，并且由当地病理学家检查，以确保有生活力的肿瘤和正常细胞的诊断质量(即，主要由纤维结缔组织或脂肪组织组成的大坏死区域或面积不是占优势的特征)。从最接近具有足够诊断质量的切片的切片中获得制备用于未染色载玻片的剩余组织。

每次运送包括的应是病理学报告的拷贝和完整的运送清单表格。组织载玻片在载玻片盒中运送。载玻片盒应使用合适的运送材料进行包装，并且在环境温度下送给Abbott。

针吸活组织检查1期

当可行时，对于研究的1期部分中的所有受试者，在治疗前和复发时获得针吸活组织检查，所述受试者同意且具有可容易获得的肿瘤组织。在同意后，在药物施用前和在受试者在治疗上已复发后执行活组织检查。

2a期

下述之一是研究的2a期部分中的所有受试者所需的：

·在筛选时获得的恶性淋巴结的粗针活组织检查。

·对于淋巴瘤阳性的、在筛选时获得的骨髓抽吸物或核心。

·在活组织检查后无介入治疗的编档保存的肿瘤组织(例如来自减积、在复发时获得的组织或骨髓样品)。

如果上述无一对于潜在受试者可获得，那么应联系Abbott Medical Monitor。

优选获得至少2份核心活组织检查。这些活组织检查应是直径至少18规格和长度至少1cm。估计存在来自每次活组织检查的2-5百万细胞。活组织检查可以根据研究所标准程序或根据下述指导进行加工。如果使用除下文描述那种外的程序，那么程序的描述应提供给Abbott。

一份核心活组织检查在福尔马林中固定8-24小时，随后在石蜡中包埋且贮存于-20℃，直至在环境温度下运送给Abbott。第二份核心活组织检查样品应置于正确标记的冷冻管内。肿瘤样品紧在收集后在液氮中瞬间冻结。样品冷冻贮存于-70℃直至运送给Abbott。样品应在对于3天足够的干冰上运送给Abbott。

骨髓收集骨髓抽吸物

骨髓抽吸物应在基线时与用于诊断的活组织检查一起抽取。抽吸物可以根据研究所标准程序或根据下述指导进行加工。如果使用除下文描述那种外的程序，那么程序的描述应提供给Abbott。

新鲜固定液应通过将管A中的8mL浓缩固定剂加入管B中进行制备，所述管B包含32mL稀释剂(2个管都在箔中提供且包裹)，并且混合5-6次。约2mL骨髓抽吸物应在2mL磷酸缓冲盐水(PBS)中稀释，随后用10mL移液管上下移液(titurated)5-6次，以制备单细胞悬浮液。这种4mL悬浮液应加入制备的固定剂中，混合5-6次，并且样品应置于-70℃冷冻机中直至运送给Abbott。

骨髓核心活组织检查

如果未收集骨髓抽吸物，那么可以获得骨髓核心活组织检查。核心可以根据研究所标准程序或根据下述指导进行加工。如果使用除下文描述那种外的程序，那么程序的描述应提供给Abbott。

核心应在新鲜制备的4％多聚甲醛中固定。提供20％多聚甲醛的10mL安瓿和包含40mLs 1X PBS的50mL锥形管(管C)。来自安瓿的多聚甲醛应加入管C中，混合4-5次，并且随后应加入核心骨髓活组织检查。应允许样品在4℃下固定16-24小时，并且随后在石蜡中包埋。

表7.生物标记样品收集的1期时间表

a.用于分析的骨髓抽吸物样品应与骨髓活组织检查(用于疾病状态)一起获得。

b.任选收集

表8.生物标记样品收集的2a期时间表

b.任选收集

药物浓度测量

用于分析的样品收集

用于ABT-263测定的血样

对于1期，在周期1过程中在下述时间，通过静脉穿刺术将用于ABT-263测定的血样收集到3-mL抽空的含钾EDTA收集管内：第-3天，在给药前(0小时)以及在给药后0.5、1、2、3、4、6、8、24、48和72(第1天，给药前样品)小时；第1天，在给药后0.5、1、2、3、4、6、8和24(第2天，给药前样品)小时；第14天，在给药前(0小时)以及在给药后0.5、1、2、3、4、6、8小时。在第14天时在0小时(给药前)、周期2直到周期6时收集另外的血样。收集足够的血液，以提供来自每份样品的约1mL血浆。在周期1过程中收集总共27份血样(约81mL)/受试者用于药物代谢动力学研究，并且在随后周期(直至周期6)中收集1份另外的血样/受试者/周期。

对于2a期，仅在周期1第14天时给药前(0小时)和给药后4小时收集血样(～3mL)。

在收集、加工和贮存过程中必须保护血液和血浆样品不受直接日光。紧在收集后，将血样颠倒几次以确保血液和抗凝剂的良好混合，并且置于冰浴中。

血液收集的时间选择将优先于所有其他已排定的研究活动，除给药外。准确地维持血液收集的次序，从而使得相对于先前给药的时间间隔对于所有受试者是相同的。每份血样收集的时间记录至最接近的分钟数。

用于ABT-263测定的尿样(1期)

在周期1第-3天时给药后0至24小时，仅从参与1期剂量逐步增加研究的受试者中将用于ABT-263测定的尿收集在不含防腐剂的容器中。受试者得到指示紧在给药前排泄，并且保留1个3mL等分试样用于基线药物测定(给药前样品)。其后，在给药后0-24小时收集尿。收集时间间隔的开始和结束时间记录至最接近的分钟数。在收集时间间隔过程中收集的所有尿均保持冷冻直至时间间隔结束时。为了确保完整的尿收集，受试者得到指示在收集时间间隔结束时排泄到容器内。

样品的处理/加工

用于ABT-263测定的血样

用于ABT-263测定的血样使用冷冻离心机(2-8℃)在收集1小时内在1200-1500×g下离心15分钟，以分离血浆。血浆样品使用塑料移液管转移到螺旋盖的聚丙烯管内，所述聚丙烯管标记有药物编号名称、样品类型(血浆)、规程编号、受试者编号、研究周期和日期以及相对于给药的计划的取样时间。血浆样品在收集后1小时内在-20℃或更冷下冷冻，并且将保持冷冻直至运送时。

用于ABT-263测定的尿样

使在指定时间间隔期间收集的所有尿充分混合，并且测量且记录体积。将1个3mL等分试样置于螺旋盖的聚丙烯管中，所述聚丙烯管标记有药物编号名称、样品类型(尿)、规程编号、受试者编号、研究周期和日期以及计划的收集时间间隔。尿样冷冻于-20℃直至运送时。

功效变量

所有功效分析在性质上是探索性的。探索功效终点包括肿瘤应答(使用IWG标准测定)、无进展存活(PFS)、肿瘤进展时间(TTP)、总体存活(OS)、总体应答持续时间和ECOG体力状态。

用于肿瘤应答的IWG标准

仅具有可测量的疾病的受试者对于2a期研究是合格的。使用下文列出的IWG标准评估可测量病灶中在治疗过程期间的改变。

合格

仅在基线时具有可测量的疾病的受试者可以具有作为终点评估的客观肿瘤应答。

可测量疾病至少一个可测量病灶的存在。如果可测量疾病

局限于单独病灶，那么应通过细胞学/组织学证

实它的瘤性质。

可测量病灶可以在至少一个维度中精确测量的病灶，其中

最长直径≥10mm。

所有测量应以米制记法使用直尺或测径器进行获取且记录。所有基线评估应尽可能接近于治疗开始执行，并且决不超过治疗开始前4周。

相同评价方法和相同技术应用于表征在基线时和在随访过程中每个鉴定且报告的病灶。

临床病灶仅当它们在浅表时(例如皮肤结节和可触摸淋巴结)视为可测量的。对于皮肤病灶的情况，需要通过包括用于评估病灶大小的直尺的彩色摄影术证明。

测量法

CT是测量选择用于应答评价的病灶的优选方法。如果医学上需要(例如严重造影剂变态反应)，那么可以使用MRI。应以切片厚度7mm或更小的切割连续执行常规CT和MRI。螺旋CT应使用5mm邻接重建算法执行。这应用于胸、腹和骨盆的肿瘤。

当在胸部x射线上的病灶由充气肺清晰限定且围绕时，它们作为可测量病灶是可接受的；然而，CT是优选的。

对于精确的客观应答评估，超声(US)不应该用于测量肿瘤病灶。然而，US是浅表可触摸淋巴结、皮下病灶和甲状腺结节的临床测量的可能替代法。US也可以用于证实通常通过临床检查评价的浅表病灶的完全消失。

细胞学和组织学可以用于区分罕见病例中的部分应答(PR)和完全应答(CR)(例如在诸如生殖细胞肿瘤的肿瘤类型中在治疗后以区分残留良性病灶和残留恶性病灶)。

应答的评价通过研究者执行并且在合适的CRF页上记录。

完全应答(CR)要求下述：

1.疾病的所有可检测临床和放射显影证据的完全消失和在治疗前存在的所有疾病相关症状的消失，和淋巴瘤相关生物化学异常的正常化。

2.所有淋巴结和结节团块必须已消退至正常大小(对于治疗前＞1.5cm的结节，在其最大横径中≤1.5cm)。在治疗前在其最大横径中为1.1至1.5cm的先前累及的结节在治疗后在其最大横径上必须已减少至≤1cm，或最大直径乘积总和(SPD)减少超过75％。

3.如果脾在治疗前在CT扫描的基础上被视为肿大的，那么在大小中必须已消退，并且在体格检查上必须是无法触摸到的。

4.对于具有骨髓中的疾病的受试者，肿瘤浸润在相同部位的重复骨髓抽吸物和活组织检查上必须被清除。这种测定在其上进行的样品必须是足够的(≥20mm活组织检查核心)。

完全应答/未经证实的(CRu)：

1.CR/未经证实的(CRu)包括满足上述标准1和3，但具有下述特征中的一个或多个的那些患者：

2.在最大横径中超过1.5cm的残留淋巴结团块在SPD中已消退超过75％。与最初团块大小相比较，先前汇合的个别结节在其SPD中必须已消退超过75％。

3.不定骨髓(聚集物数目或大小增加而无细胞学或构筑不典型)。

部分应答(PR)要求下述：

1.6个最大结节或结节团块的SPD中≥50％减少。这些结节或团块应根据下述特征进行选择：(a)它们在至少2个垂直维度中应是可清楚测量的，(b)它们应尽可能来自身体的不一样区域，和(c)每当涉及这些部位时，它们应包括疾病的纵隔和腹膜后区域。

2.无其他结节、肝或脾大小中的增加。

3.脾和肝结节在SPD中必须消退至少50％。

4.除脾和肝结节外，其他器官的累及被视为可评价且不可测量的疾病。

5.骨髓评价对于PR测定不相关，因为它是可评价且不可测量的疾病；然而，如果是阳性的，那么细胞类型应在报告中详细说明，例如大细胞淋巴瘤或低度恶性淋巴瘤(即，小、淋巴细胞小分裂、或混合小和大细胞)。

6.无疾病的新部位。稳定疾病(SD)：

稳定疾病定义为小于PR(参见上文)但并非进行性疾病(参见下文)。

进行性疾病(PD)要求下述(对于PR、无应答者)：

1.对于PRs或无应答者，任何先前鉴定的异常结节在SPD中距离最低点≥50％增加。

2.在治疗过程中或治疗结束时任何新病灶的出现。

复发疾病要求下述(对于CR、CRu)：

1.任何新病灶的出现或先前累及的部位大小中～50％的增加。

2.在其短轴中超过1cm的任何先前鉴定的结节的最大直径中或在超过一个结节的SPD中～50％的增加。

上文描述的标准的概括显示于下文。

注：关于“正常”和“不定”的定义参见正本。

证实

客观应答的证实目的是避免过高估计应答。在其中应答的证实不可行的情况下，当报告结果时应阐明应答未经证实。

为了指定肿瘤中的PR、CR或CRu改变状态，测量必须通过应在关于应答的标准第一次满足后4-8周内执行的重复评价加以证实。

在SD的情况下，随访测量必须在研究登记后以最低限度时间间隔已满足SD标准至少一次，不少于治疗开始后6周。

5.3.5药物代谢动力学变量

每当可应用时，对于在1期中的周期1第-3天、周期1第1天和周期1第14天时的剂量，使用非房室(noncompartmental)法测定关于ABT-263的药物代谢动力学参数的值，包括最大限度观察到的血浆浓度(Cmax)、至Cmax的时间(峰时间，Tmax)、末期清除速率常数(f3)、终末清除半衰期(t1/2)、从时间0到最后的可测量浓度的时间(AUCt)和从时间0到无限时间(AUC∞)的血浆浓度-时间曲线下面积(AUC)。如果存在尿中回收的有意义量的ABT-263，那么测定在尿中作为ABT-263回收的剂量％(％Ae)和肾清除(CLR)。如果在数据的解释中有用，那么可以计算另外的参数。

5.3.6药物遗传学变量

依据药物代谢动力学和安全，DNA样品可以就促成受试者针对ABT-263的应答的遗传因子进行分析。样品还可以用于开发用于此类药物应答的诊断测试。基于大鼠中的观察和人PK的计划，II期酶、Bcl-2家族成员和肠转运蛋白可以是主要感兴趣的。一般而言的遗传研究可以包括遗传单元型与药物代谢、转运、治疗应答和不利事件的关系测定。样品还可以用于开发用于药物应答的诊断测试。

药物动力学变量

在这个规程中评估几种推定的功效和应答生物标记，目的是限定药物浓度和疾病状态之间的关系。

在ABT-263临床试验上检查受试者的蛋白质组学谱可以揭示蛋白质/肽浓度模式，这可以在未来的临床研究中进一步评估，以测定任何预后值和与临床应答的任何关联。样品就预测或药物应答蛋白质组学标记进行分析。在未使用任何血浆样品的情况中，其余样品匿名化并且储存用于在诊断测试开发努力中使用。

来自用于诊断的活组织检查的组织载玻片用于免疫组织化学(IHC)和荧光原位杂交(FISH)。对来自编档保存的、用于诊断的组织块的组织载玻片执行免疫组织化学分析，并且储存用于在诊断测试开发努力中使用。给定ABT-263对于抗细胞凋亡蛋白质亚群(Bcl-2、Bcl-X_L和Bcl-w)的靶向性质，已在人肿瘤细胞系中检查了细胞系对ABT-263的敏感性和Bcl-2家族成员表达水平之间的关系。Bcl-2表达水平(mRNA和蛋白质)显示与敏感性的强关联，并且Bcl-X_L的蛋白质浓度与Bcl-2的那种平行。相反的是，更高的Mcl-1表达水平(mRNA和蛋白质)与抗性相关。总之，临床前数据暗示对ABT-263敏感的肿瘤细胞将显示与低Mcl-1表达偶联的高Bcl-2和Bcl-X_L表达，而相反反映ABT-263抗性。因此，就Bcl-2家族成员的相对表达评估得自诊断活组织检查(无治疗介入)或固定的粗针活组织检查和/或骨髓抽吸物/核心活组织检查的治疗前和后受试者肿瘤样品。此外，另外的治疗前和后活组织检查进行瞬间冻结用于遗传分析，这可以包括表达微阵列以评价基因表达和/或CGH以评价总基因扩增和缺失。

在具有针对ABT-263的最高敏感性的SCLC细胞系中已观察到包含Bcl-2基因基因座的1 8q2 1的扩增，并且代表与药物敏感性相关的潜在遗传病灶。对来自参与这个研究的受试者的编档保存的肿瘤样品的组织执行荧光原位杂交(FISH)，以评价在Bcl-2基因和其他家族成员基因中的扩增和易位，这可以证明是提供信息的。在这些患者中这些基因扩增和临床结果之间的潜在关系可以作为受试者分层工具进行检查。在这个研究过程中收集的生物样品(biospecimen)可以储存且在未来用于研究与这个研究相关的新科学问题。

施用的治疗

受试者每天一次(QD)经口自施用ABT-263。每剂伴随约240mL水一起摄取。在需要给药前药物代谢动力学取样的当天(在1期中周期1第-3天、周期1第1天、周期1第2天、周期1第14天、周期2第14天、周期3第14天、周期4第14天、周期5第14天和周期6第14天以及在2a期中在周期1第14天时)，给药将在诊所中在早晨发生以促进药物代谢动力学取样。在1期中，所有受试者将在周期1第-3天时在禁食条件下(在8小时禁食后和在午餐前4小时)、和在周期1第1天时标准早餐开始后30分钟时接受ABT-263。在1期的所有其他给药日时，受试者将在早餐后约30分钟时接受ABT-263。在2a期中，所有受试者将在早餐后约30分钟时自施用ABT-263。评估食物对药物代谢动力学的作用，并且如果禁食条件较好，那么起始改变。

在广泛的PK收集日时(1期的周期1第-3天、周期1第1天和周期1第14天)，每次药物施用的时间记录至最接近的分钟数。在所有其他日时，受试者得到指示以记录他们摄取其研究药物的日期和时间。受试者日记由Abbott提供。

研究产物特性

^*N/A＝无法应用

用于构建的稀释剂

·Phosal53中链甘油三酯(MCT)，120克/瓶。

·醇(乙醇)，脱水的，USP/EP/JP 200 Proof。

1/2a期研究药物代谢动力学

·ABT-263暴露是剂量成比例的

-平均AUC：在225mg下47μg·h/mL(n＝4)；在315mg下100μg·h/mL(n＝5)；在440mg下109μg·h/mL(n＝3)

-临床前靶AUC：53至88μg·h/mL·ABT-263峰浓度(C_max)给药后～8小时

·半衰期～14-20小时

·在稳态下峰与谷血浆浓度比～3倍

·暴露中的受试者间变异性～40％

·食物对ABT-263经口吸收具有弱正面作用。

另外的数据在附图中显示。

前文意欲举例说明本发明而非限制本发明。对于本领域技术人员显而易见的变异和改变预期在如附加权利要求中限定的本发明的范围内。

Claims

1.一种用于经口施用的组合物，其包括N-(4-(4-((2-(4-氯苯基)-5，5-二甲基-1-环己-1-烯-1-基)甲基)哌嗪-1-基)苯甲酰基)-4-(((1R)-3-(吗啉-4-基)-1-((苯基硫烷基)甲基)丙基)氨基)-3-((三氟甲基)磺酰基)苯磺酰胺、Phosal53M中链甘油三酯和脱水乙醇。