CN101564446A - 枇杷叶提取物总三萜酸泡腾片 - Google Patents

Abstract

本发明枇杷叶提取物总三萜酸泡腾片，解决已有枇杷叶提取物用于减肥降脂和降糖的药物时纯度低，服用量大，口感差，功能单一的问题。它是由如下重量份的原料制成：枇杷叶提取物0.5－2.0，木脂素0.12－0.18，柠檬酸0.7－1.1，碳酸氢钠0.4－0.8，木糖醇0.08－0.12，乳糖0.24－0.3，先将枇杷叶提取物与木糖醇，乳糖以等量多次混合法混匀，再与其它原料用同法混匀后压片。

Description

枇杷叶提取物总三萜酸泡腾片

技术领域：

本发明与枇杷叶提取物用于降低血糖的药物的剂型有关。

背景技术：

枇杷叶提取物总三萜酸含熊果酸、齐墩果酸、科罗索酸和山楂酸四种三萜酸。有文献服道枇杷叶提取物可用来治疗糖尿病和预防肥胖及减肥作用，可对血糖水平进行有效的控制。枇杷叶总三萜酸能较快恢复胰岛素敏感性，将血糖降到正常水平；同时具有减肥降脂的功能。

枇杷叶提取物在临床应用中的剂型主要是胶囊，颗粒，口服液等，美国以科罗索酸为质量指标的减肥保健品已上市多年，枇杷叶提取物由于纯度低，用于降低血糖的服用剂量比较大，每次约1-2克，每日3-6克，服用不便，口感不好，功能单一。

发明内容：

本发明的目的是提供一种服用方便，安全，口感好，可综合调理身体代谢平衡，降低血糖和减肥效果好的枇杷叶提取物总三萜酸泡腾片。

本发明是这样实现的：

本发明枇杷叶提取物总三萜酸泡腾片，它是由如下重量份的原料制成：

枇杷叶提取物    0.5-2.0

木脂素          0.12-0.18

柠檬酸          0.7-1.1

碳酸氢钠        0.4-0.8

木糖醇          0.08-0.12

乳糖            0.24-0.3

矫味剂          0.01-0.03

先将枇杷叶提取物与木糖醇，乳糖以等量多次混合法混匀，再与其它原料用同法混匀后压片。

它还包括如下重量份的原料：

维生素C         0.03-0.05

维生素B2        0.002-0.004

维生素B6        0.002-0.004

枇杷叶提取物的制备方法如下：

(1)、将干燥的枇杷叶粉碎；

(2)、用乙醇或甲醇或含水量≤30％(w/w)的甲醇或乙醇加热至70-85℃回流提取，枇杷叶与溶剂重量比为1∶4至1∶6，提取3次，每次2至3小时；

(3)、滤出提取液，减压浓缩至浸膏；

(4)、浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加热使其溶解；

(5)、过MCI柱分离纯化，85％-90％(W/W)乙醇洗脱，洗脱液蒸干得淡黄色至类白色粉末，亦即枇杷叶提取物——枇杷叶总三萜酸。

枇杷叶提取物总三萜酸泡腾片服用更加方便。更重要的是该剂型符合大众心理，使服用者感到是在饮用保健食品，而不是在吃药，而且口感极佳，携带方便，人们普遍乐于接受。

本发明还包含各类纯天然维生素，主要包括维生素C、B2、B6等。

维生素是机体维持正常生命活动所必不可少的一类有机物质，参与机体新陈代谢，如果缺乏会导致一定疾病。人体不能够自身合成维生素，必须从食物中获得。维生素种类繁多，分为A、B、C、D、E等等。各种维生素对人体的作用是不同的，它们在人体的储量也是不同的。除了从食物中获得以外，人们应该及时补充维生素特别是那些自身含量很少又不易从食物中获得的。

本发明严格选用天然维生素，与合成品相比，天然维生素更符合人体的需要。人工合成的维生素是在工厂或实验室内合成的化学物质；而天然的维生素则是从食物中分离提取的。天然维生素取自绿色蔬菜和水果，具有许多合成维生素没有的特点和功能，补充蔬菜和水果中所含的各种维生素。

本发明以枇杷叶提取物为主要原料，配以多种维生素，与其他功能性塑身保健产品相比有许多突出优点：

1、安全性高。枇杷叶提取物本身来源于果树枇杷树叶，可以正常代谢而不在体内蓄积。枇杷叶已有上千年的药用历史，已在中国药典2005版收载。安全可靠。本发明的枇杷叶提取物的纯度高，用量少。

2、效果显著。本发明可快速减轻体重和起到预防肥胖的作用，不仅能把脂肪转化为能量而不丧失肌肉和水分，还能够达到从根本上减轻体重和改善体型的效果。

3、综合调理身体代谢平衡。杷叶提取物不仅能够减肥，还可以降低血脂和调节血糖，再加上多种纯天然维生素的补充摄取，可为机体提供全方位、健康的营养元素。

4、本发明稳定、性能良好，有较长的有效期；原料来源稳定可靠，生产容易；不仅减肥降脂和降糖，预防肥胖，而且同时还补充多种天然维生素。

5、本发明经体外PTPlB酶抑制活性的测试，枇杷叶总三萜酸的抑制活性IC₅₀为2.8ug/mL。此外，动物试验发现，本发明对四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠模型具有明显的降血糖和减少饮水量、排尿样的作用，并且三个月给药后停止给药，一个月内，76％的小鼠的血糖水平可以基本保持稳定。可见本发明提供的枇杷叶总三萜酸组合物有强PTPlB抑制活性，并且具有标本兼治的效果，对于开发防和治疗糖尿病、肥胖症等由胰岛素抵抗引起的疾病的保健品是可行的。

药效和毒理研究结果表明，本发明具有明显的降糖作用，且安全无明显毒副反应。枇杷叶总三萜酸可以较快速恢复胰岛素敏感性。

枇杷叶三萜酸组合物可以在对血糖水平进行有效的控制的同时，改善胰岛功能，增加胰岛素敏感性，减低胰岛素抵抗，提高机体免疫力，得到治标治本的作用。其作用机理及其活性强度，可以作为II型糖尿病的防治保健药。

本发明工艺简单、易于大规模生产，所得提取物的枇杷叶四种主要三萜酸含量高达85％以上。目前市场上提供的枇杷叶三萜酸的纯度一般为50-60％，本发明采用最新的材料结合优化的工艺条件，使产品的质量得到大大的提高，而且操作简单，易于放大。

具体实施方式：

下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述：

本发明的三种配方如下表：

泡腾片制备工艺：

先将枇杷叶提取物、木糖醇、乳糖、分别过80目筛，再将剩余的分别过100目筛；称取处方量的原辅料，先将原药与木糖醇和乳糖、以等量多次混合法混匀，再与剩余的原料法混匀，用￠25mm平凹压片，经检验合格后包装，即得.

枇杷叶提取物的制备方法如下：

实施例1：

干燥的枇杷叶30kg粉碎过20目筛，用150L 80％乙醇加热至70-85℃回流提取，提取3次，每次2小时；滤出提取液，减压浓缩至浸膏；浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加热使其溶解；通过MCI GEL柱，85％乙醇洗脱，分部收集，TLC检测，蒸干得淡黄色至类白色粉末285g，四种三萜酸含量测定HPLC 85.8％，亦即枇杷叶总三萜酸。

实施例2：

干燥的枇杷叶30kg粉碎过20目筛，用120L 80％乙醇加热至70-85℃回流提取，提取3次，每次2小时；滤出提取液，减压浓缩至浸膏；浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加热使其溶解；通过过MCI GEL柱，90％乙醇洗脱，分部收集，TLC检测，蒸干得淡黄色至类白色粉末315g，四种三萜酸含量测定HPLC 86.5％，亦即枇杷叶总三萜酸。

实施例3：

干燥的枇杷叶30kg粉碎过20目筛，用120L 90％乙醇加热至70-85℃回流提取，提取3次，每次2小时；滤出提取液，减压浓缩至浸膏；浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加热使其溶解；通过过MCI GEL柱，80％乙醇洗脱，分部收集，TLC检测，蒸干得淡黄色至类白色粉末330g，四种三萜酸含量测定HPLC 85.7％，亦即枇杷叶总三萜酸。

实施例4：

干燥的枇杷叶30kg粉碎过20目筛，用120L甲醇加热至70-85℃回流提取，提取3次，每次2小时；滤出提取液，减压浓缩至浸膏；浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加热使其溶解；通过过MCI GEL柱，90％乙醇洗脱，分部收集，TLC检测，蒸干得淡黄色至类白色粉末300g，四种三萜酸含量测定HPLC 85.4％，亦即枇杷叶总三萜酸。

实施例5：

干燥的枇杷叶300kg粉碎过20目筛，用900L 80％乙醇加热至70-85℃回流提取，提取3次，每次2小时；滤出提取液，减压浓缩至浸膏；浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加热使其溶解；通过过MCI GEL柱，90％乙醇洗脱，分部收集，TLC检测，蒸干得淡黄色至类白色粉末2.7kg，四种三萜酸含量测定HPLC 85.9％，亦即枇杷叶总三萜酸。

本发明的实验例如下：

下面通过药理试验来说明本发明枇杷叶总三萜酸的生物活性：

一、PTPlB抑制活性测试

(一)测试原理：利用分子生物学手段在大肠杆菌系统表达人源蛋白质酪氨酸磷酸酯酶1B(hPTPlB)催化结构域，经纯化后的hPTPlB重组蛋白能水解底物对硝基苯基磷酸酯(PNPP)的磷酯键，得到的产物在410nnl处有很强的光吸收，因此可以通过直接检测410nm处光吸收的变化以观察酶的活性变化以及化合物对酶活性的抑制情况。标准的测活体系如下：10mM三羟甲基氨基甲烷盐酸盐，PH7.6，10mM对硝基苯基磷酸酯，2％二甲亚砜(DMSO)，100nM hPTPlB。

(二)观察指标：动态测定波长为410nlm处的光吸收，时间为3分钟，其动力学曲线一级反应的斜率作为酶的活性指标。

(三)样品测试：将所有被测样品黄芪多糖、总三萜酸及两者的不同比例组合物用DMSO配成1mg/ml溶液，从中取2uL的样品放入一微孔，然后加入2uL的底物PNPP，93uL的缓冲液，5uL的PTPlB酶，摇匀后放入酶标仪读取数据，经数据处理得到抑制率。对抑制活性高于50％时，再配制系列浓度如10ug/mL，5ug/mL，1ug/mL，0.5ug/mL，0.1ug/mL等，测试抑制率，经数据处理得出IC₅₀值。阳性对照品为正钒酸钠(4ug/ml的DMSO溶液)。

测试结果：黄芪多糖的抑制活性IC₅₀为6.1ug/mL，枇杷叶总三萜酸的抑制活性IC₅₀为2.8ug/mL。两者最佳组合物的总抑制活性IC₅₀为1.9ug/mL。

二、药理活性实验

枇杷叶总三萜酸对四氧嘧啶诱发的糖尿病模型小鼠糖耐量的影响：

雄性四氧嘧啶诱发的糖尿病模型小鼠50只，体重23-26g，以生理盐水为空白对照；60mg/kg正钒酸钠水溶液为阳性对照晶；受试样品为、枇杷叶总三萜酸，根据实施例1的方法制备，模型小鼠随机分为5组，每组10只，分别灌服生理盐水、正钒酸钠水溶液(60mg/kg)和受试样品的1％羧甲基纤维素钠悬液，(200mg/kg)，每日一次，连续4周，末次给药后禁食12小时，灌服葡萄糖溶液(2g/kg)，30min后取血测定血糖。

试验结果见下表

	生理盐水组	正钒酸钠组	枇杷叶总三萜酸组
				血糖浓度	27.8	21.2	19.5
剂量		60mg/kg	200mg/kg
						24％	30％

从上表可以看出，对于四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠模型‘枇杷叶总三萜酸均有明显的降血糖作用。

本发明各测定方法如下：

枇杷叶总三萜酸的高效液相色谱含量测定：

色谱条件与系统适应性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1％醋酸溶液(85∶15)为流动相；检测波长为215nm。理论板数按科罗索酸峰计算应不低于4000。

Claims (3)

1、枇杷叶提取物总三萜酸泡腾片，它是由如下重量份的原料制成：

枇杷叶提取物    0.5-2.0

木脂素          0.12-0.18

柠檬酸          0.7-1.1

碳酸氢钠        0.4-0.8

木糖醇          0.08-0.12

乳糖            0.24-0.3

矫味剂          0.01-0.03

先将枇杷叶提取物与木糖醇，乳糖以等量多次混合法混匀，再与其它原料用同法混匀后压片。

2、根据权利要求1所述的泡腾片，其特征在于它还包括如下重量份的原料：

维生素C          0.03-0.05

维生素B2         0.002-0.004

维生素B6         0.002-0.004

3、根据权利要求1所述的泡腾片，其特征在于枇杷叶提取物的制备方法如下：

(1)、将干燥的枇杷叶粉碎；

(2)、用乙醇或甲醇或含水量≤30％(w/w)的甲醇或乙醇加热至70-85℃回流提取，枇杷叶与溶剂重量比为1∶4至1∶6，提取3次，每次2至3小时；

(3)、滤出提取液，减压浓缩至浸膏；

(4)、浸膏中加入2-5倍重的乙醇，加热使其溶解；

(5)、过MCI柱分离纯化，85％-90％(W/W)乙醇洗脱，洗脱液蒸干得淡黄色至类白色粉末，亦即枇杷叶提取物——枇杷叶总三萜酸。