CN101155806A - 作为抗菌剂的羟吲哚唑烷酮 - Google Patents

Abstract

本发明提供式I化合物，或其药学上可接受的盐，其中R¹是任选被氟原子取代的C_1－4烷基，或R¹是环丙基或环丙基甲基；且R²是甲基或乙基。该化合物适用作抗菌剂。

Description

作为抗菌剂的羟吲哚唑烷酮

技术领域

本发明涉及羟吲哚唑烷酮衍生物、其作为抗菌剂的用途、含有该化合物的药物组合物以及其制备的方法。

背景技术

抗菌抗药性是一个全球性、临床和公共卫生问题，近年来该问题已以使人担忧的飞快速度出现且无疑地在不久的将来将会增加。抗药性是共同生活团体的问题且还是卫生保健环境中的问题，其中将大大地放大细菌的传播。因为多药抗药性是成长中的问题，现在医生面对对其没有有效治疗的感染。结果是，在治疗细菌感染上，具有新的作用模式的结构新颖的抗菌剂已变得越来越重要。

在较新的抗菌剂中，唑烷酮化合物是最近合成的抗微生物剂类型。本发明提供作为细菌蛋白质合成抑制剂的羟吲哚唑烷酮衍生物，其用于治疗因许多人和兽的病原体(包括多重抗药性细菌菌株)所引起的严重感染。

信息公开

WO 2003072553公开了具有抗菌活性的N-芳基-2-唑烷酮-5-甲酰胺，其适用于治疗微生物感染。WO 200281470公开了唑烷酮化合物，其适用于治疗细菌感染。WO 200073301公开了双环唑烷酮衍生物，其适用作抗微生物剂。WO 200032599公开了唑烷酮衍生物，其适用于治疗微生物感染。WO 200029396公开了3-苯基-5-氨基甲基-唑烷酮衍生物，其适用作抗菌剂。WO 9937630公开了包括组合库的唑烷酮衍生物。DE 19604223公开了新的经取代的唑烷酮化合物，其适用作抗菌剂。DE 19649095公开了5-(酰基氨基甲基)-3-杂-芳基-唑烷酮化合物，其适用作抗菌剂。EP 694543公开了经杂芳基取代的唑烷酮衍生物，其适用作抗菌剂。EP 693491公开了3-杂-芳基-2-唑烷酮衍生物，其适用作抗菌剂。EP 609905公开了吲唑基(indaxolyl)、苯并咪唑基及苯并三唑基(benzofrizxolyl)唑烷酮衍生物，其适用作抗菌剂。US 5164510公开5-吲哚满基(indolinyli)唑烷-2-酮，其适用作抗菌剂。WO 04/074282公开了吲哚酮唑烷酮及其衍生物。美国临时专利申请号60/599822公开了作为抗菌剂的含有羟吲哚的唑烷酮类。

发明概述

本发明提供式I化合物

或其药学上可接受的盐，其中R¹是任选被氟原子取代的C_1-4烷基，或R¹是环丙基或环丙基甲基；且R²是甲基或乙基。

另一方面，本发明还提供：

药物组合物，其包含药学上可接受的载体和式I化合物，

通过给予有需要的哺乳动物治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐，治疗哺乳动物中微生物感染的方法，以及

式I化合物或其药学上可接受的盐制备用于治疗微生物感染的药物的用途。

发明详细说明

除非另有说明，本说明书和权利要求中所使用的下列术语具有下述的意义：

指明该部分中碳原子的最小和最大数目的前缀表示含有不同烃的部分的碳原子含量，即前缀C_i-j表示整数“i”至整数“j”个碳原子(包括端值)的部分。因此，例如，C_1-6烷基是指包括1至7个碳原子(包括端值)的烷基。

术语烷基是指直链和支链基团，但若指个别的基团，例如“丙基”，则仅包含直链基团；支链异构体，例如“异丙基”，将会特别指明。

术语“C_3-5环烷基”是指3至5个碳原子的环状饱和单价烃基，例如环丙基和类似基团。

术语“药学上可接受的载体”意指可用于制备药物组合物的载体，其通常是安全的、无毒性的且在生物上和其它方面不会是不想要的，并包括兽医使用和人药物使用可接受的载体。本说明书和权利要求中所使用的“药学上可接受的载体”包括一种和多种这样的载体。

术语“哺乳动物”是指人或温血动物，其包括家畜和陪伴动物。家畜是指适于人消耗肉品用的动物。实例包括猪、牛、鸡、鱼、火鸡、兔等。陪伴动物是指作为宠物的动物，例如狗、猫等。

术语“任选的”或“任选地”意指随后所描述的事件或情境可能会发生，但不必需发生，且该叙述包括其中该事件或情境发生的情况以及该事件或情境不发生的情况。

术语疾病的“治疗”包括：(1)预防该疾病，即致使可能曝露于该疾病下或易患该疾病但尚未经历或显现该疾病的症状的哺乳动物不会发生该疾病的临床症状；(2)抑制该疾病，即停止或降低该疾病或其临床症状的发展；或(3)减轻该疾病，即致使该疾病或其临床症状退化。

术语“治疗有效量”意指化合物的量，当将该化合物给予哺乳动物用于治疗疾病时，该量足以实现对该疾病的治疗。“治疗有效量”将依化合物、疾病及其严重性以及要治疗的哺乳动物的年龄、体重等而改变。

将具有相同分子式但其原子键合的性质或顺序不同或其原子空间排列不同的化合物称为“异构体”。将其原子的空间排列不同的异构体称为“立体异构体”。

本领域的技术人员将了解的是，本发明化合物具有手性中心并且可以旋光活性形式和外消旋形式被分离。本发明的化合物还可显示多晶型。应该了解的是，本发明包含本发明化合物的任何外消旋、旋光活性、多晶型、互变异构或立体异构形式，或其混合物，其具有本文所描述的有用性质。如何制备旋光活性形式(例如通过再结晶技术拆分外消旋形式、通过由旋光活性原料进行合成、通过手性合成或通过利用手性固定相进行色谱法分离)及如何利用本文所描述的标准试验或利用本领域中所熟知的其它类似试验测定抗病毒活性，是本领域中熟知的。

通常依据IUPAC或CAS命名系统，命名本发明的化合物。

可使用本领域的普通技术人员所熟知的缩写(例如“Ph”表示苯基，“Me”表示甲基，“Et”表示乙基，“h”表示小时及“rt”表示室温)。

方案I和II描述本发明化合物的制备。通过这些方案中描述的程序或通过本领域的普通技术人员已知的程序，制备原料。

方案I

依据方案I，在适当温度下，在适当溶剂(例如乙腈)中，在路易斯酸(例如三氟甲烷磺酸锂)的存在下，使N-取代的-5-氨基-1，3-二氢吲哚-2-酮(A)与适当取代的(S)-环氧乙烷基甲基-氨基甲酸叔丁酯反应。按照WO 02/32857和WO 02/85849中描述的方法，可方便地制备(S)-环氧乙烷基甲基-氨基甲酸叔丁酯。随后在适当温度下，在溶剂(例如乙腈或四氢呋喃)中利用1，1-羰基咪唑，或在适当温度下，在溶剂(例如二氯甲烷或甲苯)中利用光气，可使该氨基醇(B)闭环。在适当溶剂(例如二氯甲烷或二烷)中，在酸条件(利用酸，例如三氟乙酸或盐酸)下，可使(C)中的Boc基团去保护。在适当碱(例如三乙胺或吡啶)的存在下，通过用氯甲酸甲酯(或C_1-4烷基酯)或碳酸二甲酯处理，可将(D)中的胺进一步转化为其氨基甲酸甲酯(或烷基酯)以生成化合物(E)。

方案II

在可替代的方案(方案II)中，如EP 99/00097中所描述的，可使化合物(A)与(S)-环氧乙烷基甲基-氨基甲酸甲酯(WO 99/52855；US6417403)反应。随后在适当温度下，在溶剂(例如乙腈或四氢呋喃)中利用1，1-羰基咪唑，或在适当温度下，在溶剂(例如二氯甲烷或甲苯)中利用光气，可使该氨基醇(F)闭环以生成唑烷酮(E)。

利用文献J.A.Joule，Science of Synthesis，2001，10.13，361-653pp中描述的任一合成方法，可制备N-取代的-5-氨基-1，3-二氢吲哚-2-酮(A)中间产物。

本发明还可提供可用于制备式I化合物的新颖中间产物和新颖方法。

医学和兽医用途

已知的是，作为化学化合物类型，唑烷酮类一般抑制单胺氧化酶(MAO)，该酶是负责防止由内源性和饮食胺(酪胺)所引起的急性血压升高的酶。因此，有需要发现具有最小MAO抑制活性以降低潜在的药物-药物相互作用的风险的唑烷酮类抗生素类。现已发现，本发明的化合物具有令人意外弱的MAO抑制活性，其显示本发明的化合物具有使潜在的药物-药物相互作用最小化或消除该潜在的药物-药物相互作用的能力，因为单胺氧化酶的强抑制作用可造成被其正常代谢的其它化合物(包括数种药物)的清除率改变。

本发明的化合物可用于治疗感染，由多种细菌引起的革兰氏阳性菌感染，包括需要长期(大于28天)治疗的感染。

细菌生物的实例包括革兰氏阳性菌，例如多重抗药性葡萄球菌，例如金黄色葡萄球菌(S.aureus)和表皮葡萄球菌(S.epidermidis)；多重抗药性链球菌，例如肺炎链球菌(S.pneumoniae)和酿脓链球菌(S.pyogenes)；及多重抗药性肠球菌，例如粪肠球菌(E.faecalis)；革兰氏阴性需氧细菌，例如嗜血菌，例如流感嗜血菌(H.influenzae)和莫拉氏菌，例如粘膜炎莫拉氏菌(M.catarrhalis)；以及厌氧菌，例如类细菌和梭状芽胞杆菌物种，以及抗酸性生物，例如分枝杆菌，例如结核分枝杆菌(M.tuberculosis)；和/或鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium)。其它实例包括埃希杆菌，例如大肠杆菌(E.coli)细胞间微生物，例如衣原体和立克次氏体族(Rickettsiae)。

可用本发明化合物治疗的感染的实例包括中枢神经系统感染、外耳感染、中耳感染(例如急性中耳炎)、颅窦感染、眼感染、口腔感染(例如牙、龈及粘膜感染)、上呼吸道感染、下呼吸道感染、生殖泌尿器感染、胃肠感染、妇科感染、败血症、骨和关节感染、皮肤和皮肤构造感染、细菌性心内膜炎、烧伤、手术的抗菌性预防和免疫抑制患者(例如接受癌化学治疗的患者或器官移植的患者)的抗菌性预防。特定而言，可用本发明化合物治疗的感染性疾病是革兰氏阳性菌感染，例如骨髓炎、心内膜炎及糖尿病性脚。

抗菌活性和单胺氧化酶抑制活性

通过下述推荐的方法可评估本发明化合物的体外抗菌活性：

(1)National Committee for Clinical Laboratory Standards(Jan.2003)，Methods for dilution antimicrobial tests for bacteria that growaerobically，Approved Standard(6^th ed)，M7-A6，NCCLS，Wayne，PA；

(2)National Committee for Clinical Laboratory Standards(Mar.2001)，Methods for antimicrobial susceptibility testing of anaerobic bacteria，Approved Standard(5^th ed)，M11-A4，NCCLS，Wayne，PA；(3)NationalCommittee for Clinical Laboratory Standards(Jan.2003)，MIC testingsupplemental tables，M100-S13(用于与M7-A6使用)，NCCLS，Wayne，PA；及(4)Murray PR，Baron EJ，Jorgensen JH，et al.Manual ofClinical Microbiology(8^th ed)Washington，DC：American Society forMicrobiology Press，2003。该抗菌活性可以MIC值的形式呈现。MIC值是药物的最低浓度，该最低浓度在测试条件下防止肉眼可见的生长。

下述的方法可评估本发明化合物的单胺氧化酶抑制活性：

通过测量MAO底物(1-甲基-4-(1-甲基-2-吡咯基(pyrryl))-1，2，3，6-四氢吡啶)转化为其二氢吡啶代谢产物的抑制(λ＝421nm)，分析MAO-A和B抑制作用。底物浓度等于K_m(对MAO-A为64μM且对MAO-B为43μM)。MAO-A浓度为0.01mg/mL且MAO-B浓度为0.008mg/mL。以7种浓度测试每个抑制剂。相对于未经抑制的对照速率，确定每种浓度下的百分比抑制，并计算IC₅₀和K_i值。低的Ki值表示受测试的抑制剂对MAO酶具有紧密结合的能力，因此是一种强MAO抑制剂。

对于实施例2的抗菌和单胺氧化酶抑制活性测试的结果显示于表1中。抗菌活性显示于表2中。

表1

参数	化合物1
		金黄色葡萄球菌(LORSA)MIC90(μg/mL)	4
肺炎链球菌(LRSA)MIC90(μg/mL)	2
		粪肠球菌(VREF)MIC90(μg/mL)	4
屎肠球菌(VREF)MIC90(μg/mL)	4
		MAO-A Ki(μM)	880
MAO-B Ki(μM)	57.4

表2

体外抗菌活性的结果MIC₉₀(μg/mL)

实施例	金黄色葡萄球菌UC-76SA-1	肺炎链球菌SV1 SP-3	粪肠球菌MGH-2EF 1-1
				2	4	1	2
3	4	2	2
				4	8	4	8
5	8	4	4
				6	4	4	4
7	8	4	8
				8	4	4	4

药物盐

可使用式I化合物的天然形式或其盐。在期望形成稳定的非毒性的酸或碱盐的情况下，给予该化合物的药学上可接受的盐可能是适当的。本发明的药学上可接受的盐的实例包括无机盐(例如盐酸盐、氢溴化物、硫酸盐、硝酸盐、碳酸氢盐及碳酸盐)和有机盐(例如甲苯磺酸盐、甲烷磺酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、依托戊二酸盐(etoglutarate)及甘油磷酸盐)。

利用本领域中熟知的标准方法可得到药学上可接受的盐，例如使足够碱性的化合物(例如胺)与适当的酸反应以生成生理学上可接受的阴离子。还可制备羧酸的碱金属(例如钠、钾或锂)或碱土金属(例如钙)盐。

给药途径

在治疗或对抗哺乳动物(即人和动物)中细菌感染的治疗用途中，可口服、肠胃外、局部、经直肠、透粘膜或经肠给予本发明的化合物或其药物组合物。

肠胃外给药包括间接注射以产生全身作用或直接注射至受伤害的区域。肠胃外给药的实例是皮下、静脉内、肌内、皮内、鞘内、眼内、鼻内、心室内注射或输注技术。

局部给药包括对通过局部施用而易于接近的感染区域或器官的治疗，例如眼、耳(包括外耳和中耳感染)、阴道、开放性伤口、皮肤(包括表面皮肤和真皮下结构)或其它下肠道。其还包括透皮给药以产生全身作用。

经直肠给药包括栓剂形式。

透粘膜给药包括鼻气溶胶或吸入应用。

优选的给药途径是口服和肠胃外。

组合物/制剂

通过本领域中熟知的方法，例如使用惯用的混合、溶解、粒化、制成糖衣丸、研磨、乳化、装入胶囊、陷入(entrapping)、冷冻干燥方法或喷雾干燥，可制备本发明的药物组合物。

以惯用的方式，利用一种或多种生理学上可接受的载体(包含赋形剂和助剂)，可配制根据本发明使用的药物组合物，该载体促进活性化合物加工成可药物使用的制剂。适宜的制剂取决于所选择的给药途径。

对于口服给药，可通过使活性化合物与本领域中熟知的药学上可接受的载体结合，配制所述化合物。这样的载体能够使本发明的化合物被配制成供患者口服摄食的片剂、丸剂、锭剂、糖衣丸、胶囊、液体、溶液、乳剂、凝胶剂、糖浆剂、於浆、悬浮液及类似物。载体可为至少一种还可作为稀释剂、娇味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、片剂崩解剂及胶囊化剂的起作用的物质。这样的载体或赋形剂的实例包括但不限于碳酸镁、硬脂酸镁、滑石粉、糖、乳糖、蔗糖、果胶、糊精、甘露糖醇、山梨糖醇、淀粉、明胶、纤维素材料、低熔蜡、可可脂或粉、聚合物(例如聚乙二醇)及其它药学上可接受的材料。

糖衣丸核可提供有适当的包衣。为此目的，可使用浓糖溶液，其可任选地含有阿拉伯胶、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚羧乙烯凝胶、聚乙二醇、和/或二氧化钛、漆溶液、及适当的有机溶剂或溶剂混合物。还可向片剂或糖衣丸包衣中加入染料或颜料以用于鉴别或表征不同活性化合物剂量的组合。

可口服使用的药物组合物包括由明胶制成的卡口式(push-fit)胶囊及由明胶和增塑剂(例如甘油或山梨糖醇)制成的软、密封胶囊。该卡口式胶囊可含有与填料(例如乳糖)、粘合剂(例如淀粉)、和/或润滑剂(例如滑石粉或硬脂酸镁)及任选的稳定剂混合的活性成分。在软胶囊中，可将该活性化合物溶解或悬浮于适当的液体(例如脂肪油、液体石蜡、液体聚乙二醇、聚氧乙烯蓖麻油(cremophor)、甘油单辛酸酯(capmul)、中链或长链单-、二-或三甘油酯)中。还可将稳定剂加入至这些制剂中。

液体形式的组合物包括溶液、悬浮液及乳剂。例如，可提供溶于水和水-丙二醇和水-聚乙二醇系统中的本发明的化合物的溶液，其任选含有适当惯用的着色剂、娇味剂、稳定剂及增稠剂。

还可将所述化合物配制用于肠胃外给药(例如通过注射、一次性大剂量(bolus)注射或连续输注)。用于肠胃外给药的制剂可以单位剂型，例如安瓿或多剂量的容器呈现，并可添加防腐剂。该组合物可采用悬浮液、溶液或在油性或水性介质中的乳剂的形式，且可含有配制物质(例如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂)。

对于注射，可将本发明的化合物配制成水溶液，优选在生理学上可相容的缓冲液或生理盐水缓冲液中。适当的缓冲剂包括正磷酸三钠、碳酸氢钠、柠檬酸钠、N-甲基葡糖胺、L(+)-赖氨酸及L(+)-精氨酸。

肠胃外给药还包括活性化合物的水可溶形式(例如，无限制地，盐)的水溶液。此外，可制备活性化合物在亲脂性介质中的悬浮液。适当的亲脂性介质包括脂肪油(例如芝麻油)、合成的脂肪酸酯(例如油酸乙酯和甘油三酸酯)或其它材料(例如脂质体)。含水注射悬浮液可含有增加该悬浮液的粘度的材料，例如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇或葡聚糖。任选地，该悬浮液还可含有适当的稳定剂和/或增加该化合物溶解度的试剂以制备高度浓缩的溶液。

可替代地，活性成分可为粉末的形式，用于在使用前与适当的介质(例如无菌、无热原的水)组合。对于栓剂给药，还可通过使药剂与适当的非刺激性赋形剂混合来配制所述化合物，该赋形剂在室温下为固体但在直肠温度下为液体，因此将在直肠中融化以释出该药物。该赋形剂包括可可脂、蜂蜡及其它甘油酯。

对于吸入给药，可以通过溶液、干粉或悬浮液形式的气溶胶喷雾，方便地给予本发明的化合物。气溶胶可使用加压的包装或喷雾器及适当的推进剂。对于加压的气溶胶，可通过提供阀以给予计量的量来控制剂量单位。可以配制吸入器中使用的例如明胶的胶囊和药筒，其含有粉末基质，例如乳糖或淀粉。

对于局部施用，可将药物组合物配制为适当的软膏，其含有悬浮或溶解于一种或多种载体中的活性成分。用于局部给予本发明化合物的载体包括但不限于矿物油、液状石蜡、白凡士林、丙二醇、聚氧化乙烯、聚氧化丙烯化合物、乳化蜡及水。可替代地，可将药物组合物配制成适当的洗剂(例如悬浮液、乳剂或乳膏)，其含有悬浮或溶解在一种或多种药学上可接受的载体中的活性成分。适当的载体包括但不限于矿物油、山梨糖醇酐单硬脂酸酯、聚山梨酯60、十六烷基酯蜡、十六烷醇、2-辛基十二烷醇、苄醇及水。

对于眼用和耳用，可将药物组合物配制成等渗、pH经调整的无菌盐水中的微粉化悬浮液，或优选，在等渗、pH经调整的无菌盐水中的溶液，其含有或不含有防腐剂，例如氯化苄基烷(benzylalkonium chloride)。可替代地，对于眼用，可将药物组合物配制成软膏(例如凡士林)。

除了前述制剂以外，还可以将所述化合物配制成贮库制剂。该长效制剂可为移植物的形式。对于此给药途径，可利用适当的聚合物，疏水性材料配制本发明的化合物，或将本发明的化合物配制成微溶的衍生物，例如但不限于微溶的盐。

此外，可利用持续释放系统给予所述化合物。各种不同的持续释放材料已被确定并为本领域的技术人员所熟知。持续释放型胶囊，根据其化学性质，可释放该化合物持续24小时或直到数天。

剂量

适用于本发明的药物组合物包括组合物，其中所包含的活性成分的量足以达到预期目的，即治疗或预防感染性疾病。更具体地说，治疗有效量意指有效预防、减轻或改善疾病征状或延长被治疗的受试者的存活的化合物的量。

依据给药方式、特定化合物的效力及期望的浓度，可广泛地改变或调整药物组合物及其单位剂型中活性成分(其为本发明化合物)的量。治疗有效量的测定完全在本领域技术人员的能力范围之内。一般而言，活性成分的量将介于该组合物重量的0.5％至90％。

通常，活性成分剂量的治疗有效量介于约0.1至约400毫克/千克体重/天，更优选是约1.0至约50毫克/千克体重/天。应了解的是，该剂量可根据每个受试者的需要和要治疗的细菌感染的严重程度而改变。平均而言，活性成分的有效量是约200毫克至800毫克/天，优选是600毫克/天。

期望的剂量可方便地以每天单次剂量或以适当的间隔给予的分隔剂量，例如2、3、4或更多个次剂量提供。该次剂量本身可进一步分为例如多个分离松散间隔的给药；例如从吸入器的多次吸入或将多滴滴液应用至眼中。

同样，应当了解的是，为快速地达到期望的血浆浓度，可增加给予的起始剂量超过上述的上限量。另一方面，该起始剂量可小于最佳剂量，且依据特定情况，在治疗过程期间可递增地增加每日剂量。如有需要，还可将每日剂量分为多个剂量，用于给药，例如每天2至4次。

对于局部给药或选择性摄取，药物的有效局部浓度可能与血浆浓度无关，且可以使用本领域中已知的其它方法测定期望的剂量。

依据下面讨论的方法中的一种或多种，可制备本发明的化合物。所有原料可购得或可通过有机化学领域的技术人员熟知的方法进行制备。同样，在下面的制备中，下列的缩写具有下列的意义。如果没有一个缩写没有被定义，则该缩写具有其通常被接受的意义。

bm     ＝宽多重峰

BOC    ＝叔丁氧羰基

bd     ＝宽双峰

bs     ＝宽单峰

bt     ＝宽三重峰

CDI    ＝碳二咪唑(carbodiimidazole)

d      ＝双峰

dd     ＝双峰的双峰

dq     ＝四重峰的双峰

dt     ＝三重峰的双峰

dm     ＝多重峰的双峰

DMF    ＝二甲基甲酰胺

DMAP   ＝二甲氨基吡啶

DIEA   ＝二异丙基乙胺

DMSO   ＝二甲亚砜

eq.    ＝当量

g      ＝克

h      ＝小时

HPLC   ＝高效液相色谱法

HATU   ＝N-[(二甲氨基)-1H-1，2，3-三唑-[4，5-b〕吡啶-1-基-亚

         甲基]-N-甲基甲铵(methanaminium)六氟磷酸盐

         N-氧化物

LG     ＝离去基团

m      ＝多重峰

M      ＝摩尔浓度

M％    ＝摩尔百分比

max    ＝最大值

meq    ＝毫当量

mg   ＝毫克

mL   ＝毫升

mm   ＝毫米

mmol ＝毫摩尔

q    ＝四重峰

s    ＝单峰

t或tr＝三重峰

TBS  ＝三丁基甲硅烷基

TFA  ＝三氟乙酸

THF  ＝四氢呋喃

TLC  ＝薄层色谱法

p-TLC＝制备性薄层色谱法

μL  ＝微升

N    ＝当量浓度

MeOH ＝甲醇

DCM  ＝二氯甲烷

HCl  ＝盐酸

ACN  ＝乙腈

MS   ＝质谱法

rt   ＝室温

EtOAc＝乙酸乙酯

EtO  ＝乙氧基

Ac   ＝乙酸酯

NMP  ＝1-甲基-2-吡咯烷酮

μL  ＝微升

J    ＝偶合常数

NMR  ＝核磁共振

MHz  ＝兆赫兹

Hz   ＝赫兹

m/z  ＝质荷比

min  ＝分钟

Boc  ＝叔丁氧羰基

CBZ  ＝苄氧羰基

DCC  ＝1，3-二环己基碳二亚胺

PyBop＝苯并三唑-1-基-氧基-三吡咯烷基六氟磷酸盐

实施例1.制备(5S)-[3-(1-乙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

步骤1.制备1-乙基-5-硝基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(8)

方法A

步骤1a：制备1-乙基-1H-吲哚-2，3-二酮(6)

室温下搅拌1H-吲哚-2，3-二酮(5，5.00g，0.034mol)、碘乙烷(5.44ml，0.068mol)及碳酸钾(9.28g，0.068mol)的DMF(50ml)溶液72小时。利用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，干燥(Na₂SO₄)及蒸发，生成固体产物(5.95g，100％)；HPLC r.t.3.96min；C₁₀H₉NO₂的MS m/z 176.1(M+H)⁺。

步骤1b：制备1-乙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(7)

在130℃下加热1-乙基-1H-吲哚-2，3-二酮(6，5.60g，31.9mmol)和纯水合肼(20ml)达1小时。冷却该反应混合物，用冰水稀释并经乙酸乙酯萃取。利用盐水冲洗有机层，经干燥(Na₂SO₄)和蒸发，生成固体产物(4.85g，94％)；HPLC r.t.4.12min；C₁₀H₁₁NO的MS m/z162.1(M+H)⁺。

步骤1c：1-乙基-5-硝基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(8)

将1-乙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(7，4.00g，24.8mmol)加入至硝酸钠(2.10g，24.8mmol)的三氟乙酸(100ml)搅拌溶液中。室温下搅拌该反应混合物30分钟，并随后倒至冰上。过滤所生成的沉淀物，用水冲洗并于真空下干燥，生成固体产物(3.7g，72％)；HPLC r.t.4.29min；C₁₀H₁₀N₂O₃的MS  m/z 207.2(M+H)⁺。

方法B

步骤1a：(2-乙基氨基-5-硝基-苯基)-乙酸乙胺盐(10)

将2-氟-5-硝基苯基乙酸(9)(25g，126mmol)和乙胺(125ml)加载压力反应容器中。密封内容物并于60℃下搅拌14小时。真空下浓缩所生成的反应，生成期望的盐(42.35g，157mmol，定量)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ1.27(t，3H)，1.32(t，3H)，2.96(q，4H)，3.45(s，2H)，6.63(d，1H)，8.01-8.04(m，2H)。MS-APCI(m/z⁺)：225(M-45+1)。

步骤1b：1-乙基-5-硝基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(11)

将盐酸溶液(6M，15ml)加入至(2-乙基氨基-5-硝基-苯基)-乙酸乙胺盐(9)(6.762g，25.11mmol)的水(120ml)悬浮液中。加入盐酸溶液时，该反应中产生沉淀物。室温下搅拌该混合物18小时。过滤所生成的沉淀物并经水冲洗，生成期望的产物(5.34g，25.90mmol，定量)。¹HNMR(400MHz，CDCl3)：δ1.29(t，3H)，3.61(q，2H)，3.82(s，2H)，6.91(d，1H)，8.15(dd，1H)，8.27(dd，1H)。

步骤2：制备5-氨基-1-乙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(1)

方法A

于90℃下将铁粉(3.89g，69.8mmol)分批加入至1-乙基-5-硝基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(8，3.60g，17.5mmol)和氯化铵(9.24g，175mmol)在乙醇(150ml)和水(75ml)中的混合物中。激烈搅拌该反应混合物并加热30分钟，冷却至室温并用二氯甲烷(300ml)稀释。通过硅藻土(celite)过滤该混合物，分离有机层并用水和盐水冲洗，用硫酸钠干燥，经蒸发生成固体产物(2.74g，89％)；HPLC r.t.1.86min；C₁₀H₁₂N₂O的MS m/z 177.1(M+H)⁺。

方法B

使1-乙基-5-硝基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(11)(5.30g，25.70mmol)溶解于THF(100ml)中，并置入于50psi下含有阮内镍并供应氢气的Parr摇动器中达16小时。过滤所生成的溶液，经浓缩生成期望的固体产物(5.78g，32.8mmol，定量)。¹H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.24(t，3H)，3.44(q，2H)，3.72(s，2H)，6.58-6.60(m，2H)，6.67-6.69(m，1H)。MS-APCI(m/z⁺)：177(M+1)。

步骤3：制备(5R)-[3-(1-乙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-2-羟基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(2)

于70℃下加热5-氨基-1-乙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(1，0.91g，5.16mmol)、(S)-环氧乙烷基甲氨基甲酸叔丁酯(0.893g，5.16mmol)及三氟甲烷磺酸锂(0.798g，5.16mmol)的乙腈(10ml)溶液2小时。利用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，随后干燥(Na₂SO₄)和蒸发。通过急骤色谱法(30％丙酮/DCM)进行最后纯化，生成纯固体产物(0.90g，50％)；HPLC r.t.3.39min；C₁₈H₂₇N₃O₄的MS m/z 350.4(M+H)⁺。

步骤4：制备(5S)-[3-(1-乙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯(3)

方法A

于0℃下将光气(20％甲苯溶液，0.140ml，1.43mmol)加入至(5R)-[3-(1-乙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-2-羟基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(2，0.05g，0.143mmol)和二异丙基乙胺(0.245ml，1.43mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液中。使该反应温至室温并搅拌2小时。利用二氯甲烷稀释该混合物，用水和盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)和蒸发。通过PTLC(5％MeOH/DCM)纯化残余物，生成固体产物(0.04g，75％)；HPLC r.t.4.48min；C₁₉H₂₅N₃O₅的MS m/z 376.3(M+H)⁺。

方法B

于55℃下搅拌[3-(1-乙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5(R)-基氨基)-2-羟基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(2，10g，28.6mmol)、1，1′-羰基二咪唑(5.8g，35.8mmol)及CH₃CN(125mL)达18小时。经冷却至室温后，加入10％柠檬酸水溶液(100mL)和CH₂Cl₂(200mL)，并分离相。利用10％柠檬酸水溶液、水及盐水冲洗有机层，经干燥(Na₂SO₄)及真空下浓缩后，生成标题化合物，其未经进一步纯化而使用或可替代地经柱色谱法纯化。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.55(m，1H)，7.25(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，6.79(d，J＝8.4Hz，1H)，4.98(m，1H)，4.73(m，1H)，4.00(t，J＝8.8Hz，1H)，3.82(dd，J＝8.8，7.2Hz，1H)，3.73(q，J＝7.2Hz，2H)，3.50(m，2H)，3.50(s，2H)，1.39(s，9H)，1.23(t，J＝7.2Hz，3H)。MS-APCI(m/z+)：276，376。

步骤5：制备(5R)-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-乙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(4)

方法A

于室温下将(5S)-[3-(1-乙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯(3，0.25g，0.665mmol)用50％TFA/DCM(4ml)处理30分钟。蒸发反应并分离为TFA盐的产物(0.257g，99％)；HPLC r.t.2.68min；C₁₄H₁₇N₃O₃的MS m/z 276.2(M+H)⁺。

方法B

将4M HCl的二烷溶液(100mL)逐滴地加入至3-(1-乙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5(S)-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯(3，4.44g，11.8mmol)、THF(25mL)及苯甲醚(0.1mL)的溶液中。室温下过夜搅拌所生成的混合物。逐滴地加入乙醚，导致固体生成。减压下浓缩该混合物至其原体积的约三分之一。通过过滤收集固体，用乙醚清洗及真空下干燥，生成标题化合物，其未经进一步纯化而使用。¹H NMR(400MHz，DMSO)：δ8.31(br s，3H)，7.54(m，1H)，7.33(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，7.06(d，J＝8.4Hz，1H)，4.92(m，1H)，4.17(t，J＝9.2Hz，1H)，3.85(dd，J＝9.2，6.8Hz，1H)，3.69(q，J＝7.2Hz，2H)，3.58(s，2H)，3.24(m，2H)，1.14(t，J＝7.2Hz，3H)。MS-APCI(m/z+)：276，317(M+CH₃CN)。

步骤6：制备(5S)-[3-(1-乙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

方法A

于0℃下将氯甲酸甲酯(0.026ml，0.33mmol)逐滴地加入至(5R)-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-乙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(4，0.065g，0.167mmol)和二异丙基乙胺(0.114ml，0.668mmol)的二氯甲烷(3ml)溶液中。于0℃下搅拌该反应30分钟，随后使其温至室温。利用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水、柠檬酸及盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过PTLC(5％MeOH/DCM)纯化残余物，生成固体产物(0.04g，72％)；HPLC r.t.3.597min。

方法B

室温下搅拌5-(5(S)-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-乙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮盐酸盐(4，3.7g，11.8mmol)、THF(50mL)、水(25mL)、碳酸氢钠(3.0g，35.5mmol)及氯甲酸甲酯(1.4mL，17.7mmol)2小时。利用CH₂Cl₂(100mL)稀释该反应混合物并分离相。利用3×100mL的水、盐水冲洗有机层，经干燥(Na₂SO₄)及真空下浓缩，生成标题化合物，其从异丙醇中再结晶。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：δ7.55(m，1H)，7.26(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，6.79(d，J＝8.4Hz，1H)，5.11(m，1H)，4.75(m，1H)，4.03(t，J＝8.8Hz，1H)，3.82-3.49(m，10H)，1.24(t，J＝7.2Hz，3H)。¹H NMR(400MHz，DMSO)：δ7.53(m，2H)，7.32(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，7.04(d，J＝8.4Hz，1H)，4.68(m，1H)，4.09(t，J＝9.2Hz，1H)，3.75(dd，J＝9.2，6.4Hz，1H)，3.68(q，J＝7.0Hz，2H)，3.57(s，2H)，3.54(s，3H)，3.33(m，2H)，1.13(t，J＝7.0Hz，3H)。MS-APCI(m/z+)：276，334。

实施例2.制备(S)-[3-(1-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

步骤1：制备1-甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

于130℃下加热1-甲基-1H-吲哚-2，3-二酮(5.00g，31.0mmol)和纯水合肼(30ml)达1.5小时。冷却该反应混合物，用冰水稀释并用乙酸乙酯萃取。利用盐水冲洗萃取液，经硫酸钠干燥及蒸发，生成微黄褐色固体的标的化合物。HPLC r.t.3.69min；C₉H₉NO的MS m/z148.1(M+H)⁺。

步骤2：制备1-甲基-5-硝基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

于-10℃下将1-甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(步骤1，2.10g，14.3mmol)分批加入至70％硝酸(10ml)中。加入完成后，使该反应温至室温并随后搅拌5小时。利用冰水稀释该混合物，过滤所生成的沉淀物，用水冲洗及真空下干燥，生成褐色固体的标题化合物。HPLC r.t.3.97min；C₉H₈N₂O₃的MS m/z 193.9(M+H)⁺。

步骤3：制备5-氨基-1-甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

于90℃下将铁粉(2.09g，37.46mmol)以小部分加入至1-甲基-5-硝基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(步骤2，1.8g，9.36mmol)和氯化铵(4.96g，93.6mmol)在乙醇(100ml)和水(50ml)中的混合物中。激烈搅拌该反应混合物并加热30分钟，冷却至室温并用二氯甲烷(200ml)稀释。通过硅藻土过滤该混合物，分离有机层并用水和盐水冲洗，用硫酸钠干燥及蒸发，生成暗褐色固体的标题化合物。HPLC r.t.1.06min；C₉H₁₀N₂O的MS m/z 163.2(M+H)⁺。

步骤4：制备(R)-[2-羟基-3-(1-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯

于70℃下加热5-氨基-1-甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(1.20g，7.40mmol)、(S)-环氧乙烷基甲氨基甲酸叔丁酯(1.28g，7.40mmol)及三氟甲烷磺酸锂(1.14g，7.398mmol)的乙腈(10ml)溶液1小时。利用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，并经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过急骤柱色谱法(70％EtOAc/己烷)纯化残余物，生成淡褐色固体的标题化合物。HPLC r.t.3.20min；C₁₇H₂₅N₃O₄的MS m/z 336.4(M+H)⁺。

步骤5：制备(S)-[3-(1-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯

搅拌(R)-[2-羟基-3-(1-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(步骤1，0.10g，0.298mm0l)和1，1-羰基二咪唑(0.053g，0.327mmol)的乙腈(3ml)溶液并于60℃下加热2小时。利用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)和蒸发。通过PTLC(10％MeOH/DCM)纯化残余物，生成淡褐色固体的标题化合物。HPLC r.t.4.24min；C₁₈H₂₃N₃O₅的MS m/z 362.3(M+H)⁺。

步骤6：制备(R)-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

室温下将(S)-[3-(1-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯(步骤2，0.20g，0.553mmol)用50％TFA/DCM(3ml)处理30分钟。蒸发反应，生成为TFA盐的标题化合物。HPLC r.t.2.46min；C₁₃H₁₅N₃O₃的MS m/z 262.2(M+H)⁺。

步骤7：制备(S)-[3-(1-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

于0℃下将氯甲酸甲酯(0.0256ml，0.332mmol)加入至(R)-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(制备1，0.062g，0.166mmol)和二异丙基乙胺(0.172ml，0.996mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中。于0℃下搅拌反应30分钟，随后使其温至室温。利用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水、柠檬酸及盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)及蒸发，生成灰白色固体的标题化合物。HPLC r.t.3.351min；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：7.59(s，1H)，7.27(dd，J＝2.1，8.4Hz，1H)，6.79(d，J＝8.7Hz，1H)，5.16(m，1H)，4.73-4.81(m，1H)，4.05(t，J＝8.7Hz，1H)，3.82(dd，J＝6.3，9Hz，1H)，3.69(s，3H)，3.56-3.64(m，2H)，3.54(s，2H)，3.21(s，3H)；C₁₅H₁₇N₃O₅的MS m/z 320(M+H)⁺。

实施例3.制备(S)-{3-[1-(2-氟乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基]-2-氧代-唑烷-5-基甲基}-氨基甲酸甲酯

步骤1：制备(R)-{3-[1-(2-氟-乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基]-2-羟基-丙基}-氨基甲酸叔丁酯

于90℃下加热5-氨基-1-(2-氟-乙基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮(1.00g，5.15mmol)、(S)-环氧乙烷基甲氨基甲酸叔丁酯(0.894g，5.15mmol)及三氟甲烷磺酸锂(0.793g，5.15mmol)的乙腈(10ml)溶液1小时。利用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过急骤色谱法(70％乙酸乙酯/己烷)进行最后的纯化，生成淡黄褐色固体的标题化合物。HPLC r.t.3.28min；C₁₈H₂₆FN₃O₄的MS m/z368.3(M+H)⁺。

步骤2：制备(S)-{3-[1-(2-氟-乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基]-2-氧代-唑烷-5-基甲基}-氨基甲酸叔丁酯

于0℃下将光气(20％甲苯溶液，0.532ml，5.44mmol)加入至(R)-{3-[1-(2-氟-乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基]-2-羟基-丙基}-氨基甲酸叔丁酯(步骤1，0.20g，0.544mmol)和三乙胺(0.378ml，2.72mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中，并搅拌30分钟。利用二氯甲烷稀释该混合物，用水和盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)和蒸发，生成淡褐色固体的标题化合物。HPLC r.t.4.37min；C₁₉H₂₄FN₃O₅的MS m/z394.1(M+H)⁺

步骤3：制备(R)-5-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-(2-氟-乙基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

室温下使(S)-{3-[1-(2-氟-乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基]-2-氧代-唑烷-5-基甲基}-氨基甲酸叔丁酯(步骤2，0.110g，0.280mmol)用50％TFA/DCM(3ml)处理15分钟。蒸发反应并分离为TFA盐的标题化合物。HPLC r.t.2.61min；C₁₄H₁₆FN₃O₃的MS m/z294.0(M+H)⁺。

步骤4：制备(S)-{3-[1-(2-氟-乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基]-2-氧代-唑烷-5-基甲基}-氨基甲酸甲酯

于0℃下将氯甲酸甲酯(0.033ml，0.42mmol)逐滴地加入至(R)-5-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-(2-氟-乙基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮(0.114g，0.279mmol)和二异丙基乙胺(0.194ml，1.12mmol)的二氯甲烷(4ml)溶液中。于0℃下搅拌该反应30分钟并随后使其温至室温。利用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)和蒸发。通过PTLC(10％MeOH/DCM)纯化残余物，生成灰白色固体的标题化合物。HPLC r.t.3.45min；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：7.63(m，1H)，7.24(m，1H)，6.92(d，J＝8.1Hz，1H)，5.13(t，1H)，4.75(m，1H)，4.74(t，J＝4.8Hz，1H)，4.59(t，J＝5.1Hz，1H)，4.06(t，J＝5.1Hz，1H)，4.05(t，J＝9Hz，1H)，3.97(t，J＝5.1Hz，1H)，3.81(dd，J＝6.6，9Hz，1H)，3.69(s，3H)，3.58(s，2H)，3.50-3.64(m，2H)；C₁₆H₁₈FN₃O₅的MS m/z352.1(M+H)⁺。

实施例4.制备(S)-[3-(1-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

步骤1：制备1-异丙基-1H-吲哚-2，3-二酮

室温下搅拌1H-吲哚-2，3-二酮(5.0g，0.034mol)、碘丙烷(6.83ml，0.068mol)及碳酸钾(9.28g，0.068mol)的DMF(30ml)溶液72小时。利用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)及蒸发，生成橙色固体的标题化合物。HPLC r.t.4.38min；C₁₁H₁₁NO₂的MS m/z 190.1(M+H)⁺。

步骤2：制备1-异丙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

于130℃下加热1-异丙基-1H-吲哚-2，3-二酮(3.00g，15.9mmol)和纯水合肼(10ml)达1.5小时。冷却反应物，用冰水稀释，用乙酸乙酯萃取。利用盐水冲洗有机层，干燥(Na₂SO₄)及蒸发，生成淡褐色固体的标题化合物。HPLC r.t.4.54min；C₁₁H₁₃NO的MS m/z176.1(M+H)⁺。

步骤3：制备1-异丙基-5-硝基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

将1-异丙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(2.50g，14.3mmol)加入至硝酸钠(1.20g，14.26mmol)的三氟乙酸(50ml)搅拌溶液中，并于室温下搅拌5小时。利用冰水稀释该反应，过滤所生成的沉淀物，用水冲洗及真空下干燥，生成褐色固体的标题化合物。HPLC r.t.4.71min；C₁₁H₁₂N₂O₃的MS m/z 219.0(M-H)^-。

步骤4：制备5-氨基-1-异丙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

于90℃下将铁粉(2.63g，47.2mmol)以小部分加入至1-异丙基-5-硝基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(2.60g，11.8mmol)和氯化铵(6.27g，118mmol)在乙醇(80ml)和水(40ml)中的混合物中。激烈搅拌该反应混合物并加热45分钟，随后冷却至室温并用二氯甲烷(250ml)稀释。经通过硅藻土过滤该混合物，分离有机层并用水和盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)及蒸发，生成暗褐色胶粘性固体的标题化合物。HPLC r.t.2.51min；C₁₁H₁₄N₂O的MS m/z 191.1(M+H)⁺。

步骤5：制备(R)-2-羟基-3-(1-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-丙酸甲酯

于70℃下加热5-氨基-1-异丙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(1.00g，5.25mmol)、(2R)-缩水甘油酸甲酯(0.536g，5.25mmol)及三氟甲烷磺酸锂(0.81g，5.25mmol)的乙腈(10ml)溶液3小时。利用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过急骤色谱法(70％EtOAc/己烷)纯化残余物，生成淡褐色固体的标题化合物。HPLC r.t.2.95min；C₁₅H₂₀N₂O₄的MS m/z 293.0(M+H)⁺。

步骤6：制备(S)-[3-(1-异丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

将氯甲酸甲酯(0.029ml，0.371mmol)逐滴地加入至(R)-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-异丙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(0.075g，0.185mmol)中并于0℃下加入二异丙基乙胺(0.126ml，0.74mmol)的二氯甲烷(3ml)溶液。于0℃下搅拌该反应30分钟，并随后使其温至室温。利用二氯甲烷稀释该混合物，用水、柠檬酸及盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过PTLC(10％MeOH/DCM)纯化残余物，生成灰白色固体的标题化合物。HPLC r.t.3.905min；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：7.55(s，1H)，7.24(dd，J＝2.4，8.7Hz，1H)，6.97(d，J＝8.7Hz，1H)，5.12(m，1H)，4.76(m，1H)，4.61-4.71(m，1H)，4.05(t，J＝8.7Hz，1H)，3.80(dd，J＝6.6，9Hz，1H)，3.68(s，3H)，3.54-3.62(m，2H)，3.51(s，2H)，1.46(d，J＝6.9Hz，6H)；C₁₇H₂₁N₃O₅的MS m/z 348(M+H)⁺。

实施例5.制备(S)-[2-氧代-3-(2-氧代-1-丙基-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

步骤1：制备(R)-[2-羟基-3-(2-氧代-1-丙基-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯

于90℃下加热5-氨基-1-丙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(0.530g，2.78mmol)、(S)-环氧乙烷基甲基-氨基甲酸叔丁酯(0.483g，2.78mmol)及三氟甲烷磺酸锂(0.428g，2.78mmol)的乙腈(7ml)溶液1小时。利用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过急骤色谱法(70％乙酸乙酯/己烷)进行最后的纯化，生成淡褐色固体的纯标题化合物。HPLC r.t.3.66min；C₁₉H₂₉N₃O₄的MS m/z364(M+H)⁺。

步骤2：制备(S)-[2-氧代-3-(2-氧代-1-丙基-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯

于0℃下将光气(20％甲苯溶液，0.978ml，10.0mmol)加入至(R)-[2-羟基-3-(2-氧代-1-丙基-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(步骤1，0.520g，1.43mmol)和三乙胺(0.998ml，7.15mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中，并搅拌30分钟。利用二氯甲烷稀释该混合物，用水和盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)及蒸发，生成淡褐色固体的标题化合物。HPLC r.t.4.88min；C₂₀H₂₇N₃O₅的MS m/z 390(M+H)⁺。

步骤3：制备(R)-5-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-丙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

室温下将(S)-[2-氧代-3-(2-氧代-1-丙基-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯(步骤2，0.220g，0.564mmol)用50％TFA/DCM(4ml)处理15分钟。蒸发反应并分离为TFA盐的标题化合物。HPLC r.t.3.05min；C₁₅H₁₉N₃O₃的MS m/z 290.2(M+H)⁺。

步骤4：制备(S)-[2-氧代-3-(2-氧代-1-丙基-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

于0℃下将氯甲酸甲酯(0.053ml，0.669mmol)逐滴地加入至(R)-5-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-丙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(0.180g，0.446mmol)和二异丙基乙胺(0.326ml，1.78mmol)的二氯甲烷(4ml)溶液中。于0℃下搅拌该反应30分钟，并随后使其温至室温。利用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过PTLC(10％MeOH/DCM)纯化残余物，生成灰白色固体的标题化合物。HPLC r.t.3.97min；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：7.56(m，1H)，7.22-7.27(m，1H)，6.79(d，J＝8.4Hz，1H)，5.13(t，1H)，4.76(m，1H)，4.05(t，J＝8.7Hz，1H)，3.81(dd，J＝6.6，9Hz，1H)，3.69(s，3H)，3.54(s，2H)，3.49-3.67(m，4H)，1.69(m，2H)，0.96(t，J＝7.5Hz，3H)；C₁₇H₂₁N₃O₅的MS m/z 348.3(M+H)⁺。

实施例6.制备(S)-[3-(1-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

步骤1：制备(R)-[3-(1-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-2-羟基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯

于90℃下加热5-氨基-1-环丙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(1.30g，6.90mmol)、(S)-环氧乙烷基甲基-氨基甲酸叔丁酯(1.20g，6.90mmol)及三氟甲烷磺酸锂(1.06g，6.90mmol)的乙腈(10ml)溶液3小时。利用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过急骤色谱法(70％乙酸乙酯/己烷)进行最后的纯化，生成淡褐色固体的纯标题化合物。HPLC r.t.3.48min；C₁₉H₂₇N₃O₄的MS m/z362.3(M+H)⁺。

步骤2：制备(S)-[3-(1-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯

于0℃下将光气(20％甲苯溶液，1.95ml，19.9mmol)加入至(R)-[3-(1-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-2-羟基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(步骤1，0.720g，1.99mmol)和三乙胺(1.38ml，9.96mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中，并搅拌30分钟。利用二氯甲烷稀释该混合物，用水和盐水冲洗，再经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过急骤柱色谱法(70％乙酸乙酯/己烷)纯化残余物，生成灰白色固体的标题化合物。HPLC r.t.4.63min；C₂₀H₂₅N₃O₅的MS m/z 388.2(M+H)⁺。

步骤3：制备(R)-5-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-环丙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

室温下将(S)-[3-(1-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯(步骤2，0.240g，0.619mmol)用50％TFA/DCM(4ml)处理15分钟。蒸发反应并分离为TFA盐的标题化合物。HPLC r.t.2.81min；C₁₅H₁₇N₃O₃的MS m/z 288.1(M+H)⁺。

步骤4：制备(S)-[3-(1-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

于0℃下将氯甲酸甲酯(0.043ml，0.559mmol)逐滴地加入至(R)-5-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-环丙基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(0.150g，0.373mmol)和二异丙基乙胺(0.273ml，1.49mmol)的二氯甲烷(3ml)溶液中。于0℃下搅拌该反应30分钟，并随后使其温至室温。利用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，再经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过PTLC(10％MeOH/DCM)纯化残物，生成灰白色固体的标题化合物。HPLC r.t.3.67min；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：7.54(m，1H)，7.26(m，1H)，7.06(d，J＝8.4Hz，1H)，5.13(t，1H)，4.76(m，1H)，4.04(t，J＝8.7Hz，1H)，3.81(dd，J＝6.6，9Hz，1H)，3.69(s，3H)，3.51-3.64(m，2H)，3.49(s，2H)，2.63(m，1H)，1.06(m，2H)，0.89(m，2H)；C₁₇H₁₉N₃O₅的MS m/z 346.2(M+H)⁺。

实施例7.制备(S)-[3-(1-环丙基甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

步骤1：制备(R)-[3-(1-环丙基甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-2-羟基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯

于90℃下加热5-氨基-1-环丙基甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(0.400g，1.98mmol)、(S)-环氧乙烷基甲基-氨基甲酸叔丁酯(0.344g，1.98mmol)及三氟甲烷磺酸锂(0.304g，1.98mmol)的乙腈(5ml)溶液4小时。利用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，再经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过急骤色谱法(70％乙酸乙酯/己烷)进行最后的纯化，生成淡褐色泡沫状固体的标题化合物。HPLC r.t.3.76min；C₂₀H₂₉N₃O₄的MS m/z 376.3(M+H)⁺。

步骤2：制备(S)-[3-(1-环丙基甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯

于0℃下将光气(20％甲苯溶液，0.728ml，7.45mmol)加入至(R)-[3-(1-环丙基甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基)-2-羟基-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(步骤1，0.280g，0.745mmol)和三乙胺(0.520ml，3.73mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中。使该反应温至室温并搅拌1小时。利用二氯甲烷稀释该混合物，用水和盐水冲洗，再经干燥(Na₂SO₄)及蒸发，生成适于直接用于下一个步骤中的标题化合物。HPLC r.t.5.01min；C₂₁H₂₇N₃O₅的MS m/z 402(M+H)⁺。

步骤3：制备(R)-5-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-环丙基甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮

于室温下将(S)-[3-(1-环丙基甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯(步骤2，0.210g，0.523mmol)用50％TFA/DCM(4ml)处理30分钟。蒸发反应并分离为TFA盐的标题化合物。HPLC r.t.3.21min；C₁₆H₁₉N₃O₃的MS m/z302.1(M+H)⁺。

步骤4：制备(S)-[3-(1-环丙基甲基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯

于0℃下将氯甲酸甲酯(0.044ml，0.560mmol)逐滴地加入至(R)-5-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-环丙基甲基-1，3-二氢-吲哚-2-酮(实施例59，步骤3，0.155g，0.373mmol)和二异丙基乙胺(0.273ml，1.49mmol)的二氯甲烷(4ml)溶液中。于0℃下搅拌该反应30分钟，并随后使其温至室温。利用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，再经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过PTLC(5％MeOH/DCM)纯化残余物，生成黄色固体的标题化合物。HPLC r.t.4.10min；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：7.57(d，J＝0.9Hz，1H)，7.27(m，1H)，6.88(d，J＝8.4Hz，1H)，5.14(t，1H)，4.73-4.81(m，1H)，4.05(t，J＝8.7Hz，1H)，3.81(dd，J＝6.6，9Hz，1H)，3.69(s，3H)，3.59(d，J＝6.6Hz，2H)，3.55(s，2H)，3.49(m，2H)，1.14(m，1H)，0.52(m，2H)，0.39(m，2H)；C₁₈H₂₁N₃O₅的MS m/z360.2(M+H)⁺。

实施例8.制备(S)-{3-[1-(2-氟-1-甲基-乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基]-2-氧代-唑烷-5-基甲基}-氨基甲酸甲酯

步骤1：制备(R)-{3-[1-(2-氟-1-甲基-乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基]-2-羟基-丙基}-氨基甲酸叔丁酯

于90℃下加热5-氨基-1-(2-氟-1-甲基-乙基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮(0.370g，1.77mmol)、(S)-环氧乙烷基甲基-氨基甲酸叔丁酯(0.308g，1.77mmol)及三氟甲烷磺酸锂(0.271g，1.77mmol)的乙腈(5ml)溶液3小时。利用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，再经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过PTLC(5％甲醇/二氯甲烷)进行最后的纯化，生成灰白色固体的标题化合物。HPLC r.t.3.59min；C₁₉H₂₈FN₃O₄的MS m/z 382.3(M+H)⁺。

步骤2：制备(S)-{3-[1-(2-氟-1-甲基-乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基]-2-氧代-唑烷-5-基甲基}-氨基甲酸叔丁酯

于0℃下将光气(20％甲苯溶液，0.635ml，6.48mmol)加入至(R)-{3-[1-(2-氟-1-甲基-乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基氨基]-2-羟基-丙基}-氨基甲酸叔丁酯(步骤1，0.330g，0.865mmol)和三乙胺(0.600ml，4.32mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液中。使该反应温至室温并搅拌1小时。利用二氯甲烷稀释该混合物，用水和盐水冲洗，再经干燥(Na₂SO₄)及蒸发，生成适于直接用于下一个步骤中的标题化合物。HPLC r.t.4.78min；C₂₀H₂₆FN₃O₅的MS m/z 408.1(M+H)⁺。

步骤3：制备(R)-5-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-(2-氟-1-甲基-乙基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮

室温下将(S)-{3-[1-(2-氟-1-甲基-乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基]-2-氧代-唑烷-5-基甲基}-氨基甲酸叔丁酯(步骤2，0.250g，0.614mmol)用50％TFA/DCM(4ml)处理30分钟。蒸发反应并分离为TFA盐的标题化合物。HPLC r.t.2.95min；C₁₅H₁₈FN₃O₃的MS m/z308.0(M+H)⁺。

步骤4：制备(S)-{3-[1-(2-氟-1-甲基-乙基)-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基]-2-氧代-唑烷-5-基甲基}-氨基甲酸甲酯

于0℃下将氯甲酸甲酯(0.024ml，0.313mmol)逐滴地加入至(R)-5-(5-氨基甲基-2-氧代-唑烷-3-基)-1-(2-氟-1-甲基-乙基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮(实施例63，步骤3，0.088g，0.208mmol)和二异丙基乙胺(0.153ml，0.835mmol)的二氯甲烷(3ml)溶液中。于0℃下搅拌该反应30分钟，并随后使其温至室温。利用二氯甲烷稀释该反应混合物，用水和盐水冲洗，再经干燥(Na₂SO₄)及蒸发。通过PTLC(5％MeOH/DCM)纯化残余物，生成黄色固体的标题化合物。HPLC r.t.3.85min；¹HNMR(300MHz，CDCl₃)：7.59(m，1H)，7.24(m，1H)，6.97(d，J＝8.7Hz，1H)，5.12(t，1H)，4.93(m，1H)，4.52-4.77(m，3H)，4.04(t，J＝9Hz，1H)，3.80(dd，J＝6.6，9Hz，1H)，3.69(m，3H)，3.55(s，2H)，3.49-3.69(m，2H)，1.50(d，J＝7.2Hz，3H)；C₁₇H₂₀FN₃O₅的MS m/z 366.1(M+H)⁺。

Claims (18)

1.一种式I的化合物

或其药学上可接受的盐，其中R¹是任选被氟原子取代的C_1-4烷基，或R¹是环丙基或环丙基甲基；且R²是甲基或乙基。

2.权利要求1的化合物，其中R²是甲基。

3.权利要求2的化合物，其中R¹是乙基。

4.权利要求2的化合物，其中R¹是甲基、氟乙基、异丙基、丙基、环丙基、环丙基甲基或2-氟-1-甲基-乙基。

5.一种药物组合物，其包含权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。

6.一种治疗细菌感染的方法，它包括给予要治疗的哺乳动物治疗有效量的权利要求1的化合物。

7.权利要求6的方法，其中口服给予权利要求1的化合物。

8.权利要求6的方法，其中肠胃外、局部、直肠或鼻内给予权利要求1的化合物。

9.权利要求6的方法，其中以约0.1至约100毫克/千克体重/天的量给予所述化合物。

10.权利要求6的方法，其中以约1至约50毫克/千克体重/天的量给予所述化合物。

11.权利要求6的细菌感染，它是耳感染、眼感染、呼吸道感染、皮肤和皮肤结构感染、细菌性心内膜炎、骨髓炎、心内膜炎或糖尿病性脚。

12.权利要求6的细菌感染，它由革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、厌氧性生物及抗酸性生物引起。

13.权利要求6的细菌感染，它由细菌引起，该细菌包含葡萄球菌、链球菌、肠球菌、嗜血菌、莫拉氏菌、类细菌、梭状芽胞杆菌、分枝杆菌或衣原体。

14.权利要求13的细菌，其中葡萄球菌是金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌；其中链球菌是肺炎链球菌或酿脓链球菌；其中肠球菌是粪肠球菌；其中嗜血菌是流感嗜血菌；其中莫拉氏菌是粘膜性莫拉氏菌；且其中分枝杆菌是结核分枝杆菌或鸟分枝杆菌。

15.权利要求3的细菌感染，其中感染由多药抗药性金黄色葡萄球菌引起。

16.权利要求1的化合物，其是(5S)-[3-(1-乙基-2-氧代-2，3-二氢-1H-吲哚-5-基)-2-氧代-唑烷-5-基甲基]-氨基甲酸甲酯。

17.权利要求16的化合物，其中该化合物本质上不含其相反对映异构体。

18.权利要求16的化合物，其中该化合物为至少90％对映体过量。