[go: up one dir, main page]

CN109337835B - 降解三苯废气的复合微生物菌种及其保藏和活化方法 - Google Patents

降解三苯废气的复合微生物菌种及其保藏和活化方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109337835B
CN109337835B CN201811243732.8A CN201811243732A CN109337835B CN 109337835 B CN109337835 B CN 109337835B CN 201811243732 A CN201811243732 A CN 201811243732A CN 109337835 B CN109337835 B CN 109337835B
Authority
CN
China
Prior art keywords
waste gas
strains
parts
mass
preservation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201811243732.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109337835A (zh
Inventor
张保安
杨秋婵
段磊
赖柏民
罗仕宽
陈浩鹏
黄来云
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangdong Zhongwei Environmental Protection Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Guangdong Zhongwei Environmental Protection Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong Zhongwei Environmental Protection Biotechnology Co ltd filed Critical Guangdong Zhongwei Environmental Protection Biotechnology Co ltd
Priority to CN201811243732.8A priority Critical patent/CN109337835B/zh
Publication of CN109337835A publication Critical patent/CN109337835A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109337835B publication Critical patent/CN109337835B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D53/00—Separation of gases or vapours; Recovering vapours of volatile solvents from gases; Chemical or biological purification of waste gases, e.g. engine exhaust gases, smoke, fumes, flue gases, aerosols
    • B01D53/34—Chemical or biological purification of waste gases
    • B01D53/46—Removing components of defined structure
    • B01D53/72—Organic compounds not provided for in groups B01D53/48 - B01D53/70, e.g. hydrocarbons
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D53/00—Separation of gases or vapours; Recovering vapours of volatile solvents from gases; Chemical or biological purification of waste gases, e.g. engine exhaust gases, smoke, fumes, flue gases, aerosols
    • B01D53/34—Chemical or biological purification of waste gases
    • B01D53/74—General processes for purification of waste gases; Apparatus or devices specially adapted therefor
    • B01D53/84—Biological processes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/04—Preserving or maintaining viable microorganisms
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D2257/00—Components to be removed
    • B01D2257/70—Organic compounds not provided for in groups B01D2257/00 - B01D2257/602
    • B01D2257/702—Hydrocarbons
    • B01D2257/7027—Aromatic hydrocarbons
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/20—Air quality improvement or preservation, e.g. vehicle emission control or emission reduction by using catalytic converters

Landscapes

  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)

Abstract

本发明涉及污水处理技术领域，具体涉及一种降解“三苯”废气的复合微生物菌种及其保藏和活化方法。复合微生物菌种包括芽孢杆菌属、假单胞菌属、链球菌属、红球菌属以及短杆菌属。其保藏方法包括如下步骤：A1、降解“三苯”废气的复合微生物菌种按9‑11％的接种量接种于无菌富集培养基中，震荡培养，获得菌液；A2、取菌液、保护剂和活性稳定剂，混合均匀后于‑78‑82℃条件下保存。本发明的复合微生物菌种可高效降解“三苯”废气，其保藏方法工艺简单易控，成本低，并且保藏后的复合微生物活化能持续保持良好的“三苯”降解能力，可为苯系物废气生物处理实际工程应用快速提供高活性降解苯系物的微生物菌种。

Description

降解三苯废气的复合微生物菌种及其保藏和活化方法
技术领域
本发明涉及污水处理技术领域，具体涉及一种降解“三苯”废气的复合微生物菌种及其保藏和活化方法。
背景技术
现有技术中，降解“三苯”废气的微生物菌种对“三苯”废气的降解效果不甚理想，且在微生物菌种保存过程中往往伴随着生产活力下降、适应时间长、生长速度缓慢等问题，因此，在生物修复过程中使用常规保存的微生物菌种，常常需要进行长时间的调试过程，有时甚至出现修复效果不佳的情况。所以，得到降解“三苯”废气的高活性复合微生物菌种并对菌种高活性进行保藏及活化是生物修复的必然要求。
发明内容
为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本发明的目的在于提供一种可高效降解“三苯”废气的复合微生物菌种。
本发明的另一目的是提供一种可高效降解“三苯”废气的复合微生物菌种的高活性保藏及活化方法，通过使用该方法保藏活化微生物菌种，可解决常规保藏方法微生物对目标污染物降解能力下降的问题，持续保持复合微生物的降解能力，活化后仍维持其细胞内生物酶活性，可为生物处理实际工程应用快速提供高活性的微生物菌种。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
一种降解“三苯”废气的复合微生物菌种，包括如下组分：芽孢杆菌属、假单胞菌属、链球菌属、红球菌属以及短杆菌属。
进一步的，所述降解“三苯”废气的复合微生物菌种包括如下重量份的组分：芽孢杆菌属40～60份、假单胞菌属13～28份、链球菌属13～28份、红球菌属13～28份以及短杆菌属13～28份。
本发明通过驯化得到的复合微生物菌种成活率高，繁殖快，对环境条件要求低，可高效降解“三苯”废气，且处理成本低，设备工艺操作简单，可实现工业规模化生产，具有显著的环境和经济效益，不需要依赖特殊装置，在实际应用中简单便捷，对“三苯”废气污染治理效果好，能广泛应用于“三苯”废气的治理。
本发明的另一目的通过下述技术方案实现：
一种上述降解“三苯”废气的复合微生物菌种的保藏方法，包括如下步骤：
(A1)降解“三苯”废气的复合微生物菌种按9-11％的接种量接种于仅以“三苯”为碳源的无菌富集培养基中，31-33℃温度下震荡培养23-25h，获得菌液；
(A2)取菌液、保护剂和活性稳定剂，按照重量比为1:0.8-1.2:0.8-1.2的比例混合，混合均匀后于-78-82℃条件下保存。
本发明降解“三苯”废气微生物菌种的保藏方法，可避免常规保藏方法微生物降解能力下降的问题，保藏后的复合微生物能持续保持良好的“三苯”降解能力，可为苯系物废气生物处理实际工程应用快速提供高活性降解苯系物的微生物菌种，该方法工艺简单易控，成本低。
进一步的，所述步骤(A1)中，所述无菌富集培养基包括如下质量百分浓度的组分：苯0.1-1.0％，甲苯0.1-1.0％，二甲苯0.1-1.0％，尿素0.2-1.0％，磷酸氢二钠0.1-0.5％，磷酸二氢钾0.01-0.05％，硫酸镁0.5-1.6％，还包括质量-体积浓度为9.76-10.6mg/L的微量元素，余量为水。所述无菌富集培养基仅以“三苯”为碳源，其制备成本低，工艺简单，便于操作。
进一步的，所述步骤(A1)中，所述微量元素包括如下质量-体积浓度的组分：无水氯化钙4.0-4.2mg/L，七水硫酸亚铁3.4-3.6mg/L，七水硫酸锌 1.4-1.6mg/L，五水硫酸锰0.9-1.1mg/L，五水硫酸铜0.04-0.06mg/L，硼酸 0.02-0.04mg/L。
进一步的，所述步骤(A1)中，震荡培养的转速为150-250rpm。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述保护剂为质量百分浓度为20％～75％的无菌甘油或质量百分浓度为10％～50％二甲亚砜。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯0.3％～3.0％、甲苯0.3％～3.0％、二甲苯0.3％～3.0％以及吐温80 0.3～15％。活性稳定剂的溶剂是水。通过使用该方法添加高活性稳定剂来保存活化降解“三苯”废气微生物菌种，可持续保持复合微生物的“三苯”降解能力，活化后仍维持其细胞内生物酶活性，对“三苯”废气污染治理效果好。
一种采用上述保藏方法保藏的复合微生物菌种的活化方法，包括如下步骤：
(B1)将保藏的复合微生物菌种从-78～-82℃条件下取出后，放置38℃ -40℃水浴中复苏并摇动直到内部结冰全部溶解为止，得到经溶解的菌液；
(B2)取经溶解的菌液放置于无菌富集培养基中，添加活性稳定剂，其中菌液、无菌无菌富集培养和活性稳定剂的比例为1:3-6:3-6，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯0.3％～3.0％、甲苯0.3％～3.0％、二甲苯0.3％～3.0％以及吐温80 0.3～15％，于32℃31-33℃温度下震荡培养23-25h，获得经活化的复合微生物菌种。
进一步的，所述经溶解的菌液的添加量为无菌富集培养基重量的0.8-1.2％。
进一步的，所述步骤(B2)中，震荡培养的转速为150-250rpm。
本发明的有益效果：本发明的复合微生物菌种成活率高，繁殖快，对环境条件要求低，可高效降解“三苯”废气，且处理成本低，设备工艺操作简单，可实现工业规模化生产，具有显著的环境和经济效益；其保藏方法工艺简单易控，成本低，并且保藏后的复合微生物活化能持续保持良好的“三苯”降解能力，避免了常规保藏方法微生物降解大幅能力下降的问题，可为苯系物废气生物处理实际工程应用快速提供高活性降解苯系物的微生物菌种，适用于微生物菌种的长期保藏。
具体实施方式
为了便于本领域技术人员的理解，下面结合实施例对本发明作进一步的说明，实施方式提及的内容并非对本发明的限定。
实施例1
本实施例中，一种降解“三苯”废气的复合微生物菌种，包括如下重量份的组分：芽孢杆菌属50份、假单胞菌属20份、链球菌属20份、红球菌属15份以及短杆菌属18份。
一种上述降解“三苯”废气的复合微生物菌种的保藏方法，包括如下步骤：
(A1)降解“三苯”废气的复合微生物菌种按10％的接种量接种于仅以“三苯”为碳源的无菌富集培养基中，32℃温度下震荡培养24h，获得菌液；
(A2)取菌液、保护剂和活性稳定剂，按照重量比为1:1:1的比例混合，混合均匀后于-80℃条件下保存。
进一步的，所述步骤(A1)中，所述无菌富集培养基包括如下质量百分浓度的组分：苯0.1％，甲苯0.1％，二甲苯0.1％，尿素0.5％，磷酸氢二钠0.5％，磷酸二氢钾0.03％，硫酸镁0.5％，还包括微量元素，所述微量元素包括如下质量-体积浓度的组分：无水氯化钙4.1mg/L，七水硫酸亚铁3.5mg/L，七水硫酸锌 1.5mg/L，五水硫酸锰1.0mg/L，五水硫酸铜0.05mg/L，硼酸0.03mg/L。
进一步的，所述步骤(A1)中，震荡培养的转速为200rpm。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述保护剂为质量百分浓度为50％无菌甘油。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯0.3、甲苯0.3％、二甲苯0.3％以及吐温80 2％。
一种采用上述保藏方法保藏的复合微生物菌种的活化方法，包括如下步骤：
(B1)将保藏的复合微生物菌种从-80℃条件下取出后，放置于40℃水浴中复苏并摇动直到内部结冰全部溶解为止；
(B2)取经溶解的菌液放置于无菌富集培养基中，添加活性稳定剂，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯0.3％％、甲苯0.3％％、二甲苯 0.3％％以及吐温802％，于32℃温度下震荡培养24h，震荡培养的转速为 150-250rpm，获得经活化的复合微生物菌种。所述经溶解的菌液的添加量为无菌富集培养基重量的1％。
对比例1
本对比例中，一种降解“三苯”废气的复合微生物菌种，包括如下重量份的组分：芽孢杆菌属50份、假单胞菌属20份、链球菌属20份、红球菌属15份以及短杆菌属18份。
一种上述降解“三苯”废气的复合微生物菌种的保藏方法，包括如下步骤：
(A1)降解“三苯”废气的复合微生物菌种按10％的接种量接种于常规富集培养基—LB培养基(NaCl 10g/L，蛋白胨10g/L，酵母浸膏5g/L)中，32℃温度下震荡培养24h，获得菌液；
(A2)取菌液和50％甘油溶液，按照重量比为1:1的比例混合，混合均匀后于-80℃条件下保存。
进一步的，所述步骤(A1)中，震荡培养的转速为200rpm。
一种采用上述保藏方法保藏的复合微生物菌种的活化方法，包括如下步骤：
(B1)将保藏的复合微生物菌种从-80℃条件下取出后，放置于40℃水浴中复苏并摇动直到内部结冰全部溶解为止；
(B2)取经溶解的菌液放置于LB培养基中，其比例为1％，于32℃温度下震荡培养24h，震荡培养的转速为150-250rpm，获得经活化的复合微生物菌种。
实施例1和对比例1的降解能力如表1所示。
表1对比例1和实施例1的高活性保藏方法下微生物降解能力的对比
Figure BDA0001840011330000061
实施例2
本实施例中，一种降解“三苯”废气的复合微生物菌种，包括如下重量份的组分：芽孢杆菌属40份、假单胞菌属13份、链球菌属28份、红球菌属13份以及短杆菌属28份。
一种上述降解“三苯”废气的复合微生物菌种的保藏方法，包括如下步骤：
(A1)降解“三苯”废气的复合微生物菌种按9％的接种量接种于仅以“三苯”为碳源的无菌富集培养基中，31℃温度下震荡培养25h，震荡培养的转速为 150rpm，获得菌液；
(A2)取菌液、保护剂和活性稳定剂，按照重量比为1:0.8:1.2的比例混合，混合均匀后于-78℃条件下保存。
进一步的，所述步骤(A1)中，所述无菌富集培养基包括如下质量百分浓度的组分：苯0.5％，甲苯0.5％，二甲苯0.5％，尿素0.2％，磷酸氢二钠0.1％，磷酸二氢钾0.03％，硫酸镁1.0％，还包括微量元素，所述微量元素包括如下质量-体积浓度的组分：无水氯化钙4.2mg/L，七水硫酸亚铁3.4mg/L，七水硫酸锌 1.6mg/L，五水硫酸锰0.9mg/L，五水硫酸铜0.06mg/L，硼酸0.02mg/L。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述保护剂为质量百分浓度为10％的二甲亚砜。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯1.5％、甲苯1.5％、二甲苯1.5％以及吐温80 0.3％。
一种采用上述保藏方法保藏的复合微生物菌种的活化方法，包括如下步骤：
(B1)将保藏的复合微生物菌种从-78℃条件下取出后，放置38℃水浴中复苏并摇动直到内部结冰全部溶解为止；
(B2)取经溶解的菌液放置于无菌富集培养基中，添加活性稳定剂，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯1.5％、甲苯1.5％、二甲苯1.5％以及吐温80 0.3％，于32℃温度下震荡培养25h，震荡培养的转速为150rpm，获得经活化的复合微生物菌种。
表2对比例1和实施例2高活性保藏方法下微生物降解能力的对比
Figure BDA0001840011330000071
实施例3
本实施例中，一种降解“三苯”废气的复合微生物菌种，包括如下重量份的组分：芽孢杆菌属60份、假单胞菌属28份、链球菌属13份、红球菌属28份以及短杆菌属13份。
一种上述降解“三苯”废气的复合微生物菌种的保藏方法，包括如下步骤：
(A1)降解“三苯”废气的复合微生物菌种按11％的接种量接种于仅以“三苯”为碳源的无菌富集培养基中，33℃温度下震荡培养23h，震荡培养的转速为 250rpm，获得菌液；
(A2)取菌液、保护剂和活性稳定剂，按照重量比为1:1.2:0.8的比例混合，混合均匀后于-82℃条件下保存。
进一步的，所述步骤(A1)中，所述无菌富集培养基包括如下质量百分浓度的组分：苯1.0％，甲苯1.0％，二甲苯1.0％，尿素1.0％，磷酸氢二钠0.4％，磷酸二氢钾0.01％，硫酸镁1.6％，还包括微量元素，所述微量元素包括如下质量-体积浓度的组分：无水氯化钙4.0mg/L，七水硫酸亚铁3.6mg/L，七水硫酸锌 1.4mg/L，五水硫酸锰1.1mg/L，五水硫酸铜0.04mg/L，硼酸0.04mg/L。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述保护剂为质量百分浓度为75％的无菌甘油。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯3.0％％、甲苯3.0％％、二甲苯3.0％％以及吐温80 15％。
一种采用上述保藏方法保藏的复合微生物菌种的活化方法，包括如下步骤：
(B1)将保藏的复合微生物菌种从-80℃条件下取出后，放置40℃水浴中复苏并摇动直到内部结冰全部溶解为止；
(B2)取经溶解的菌液放置于无菌富集培养基中，添加活性稳定剂，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯3.0％％、甲苯3.0％％、二甲苯 3.0％％以及吐温8015％，于33℃温度下震荡培养23h，震荡培养的转速为 250rpm，获得经活化的复合微生物菌种。
表3对比例1和实施例3高活性保藏方法下微生物降解能力的对比
Figure BDA0001840011330000081
Figure BDA0001840011330000091
实施例4
本实施例与实施例1不同之处在于：
进一步的，所述步骤(A1)中，所述无菌富集培养基包括如下质量百分浓度的组分：苯0.4％，甲苯0.4％，二甲苯0.4％，尿素0.6％，磷酸氢二钠0.3％，磷酸二氢钾0.05％，硫酸镁0.8％，还包括微量元素，所述微量元素包括如下质量-体积浓度的组分：无水氯化钙4.1mg/L，七水硫酸亚铁3.5mg/L，七水硫酸锌 1.5mg/L，五水硫酸锰1.0mg/L，五水硫酸铜0.05mg/L，硼酸0.03mg/L。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述保护剂为质量百分浓度为20％的无菌甘油。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯1.2％、甲苯1.2％、二甲苯1.2％以及吐温80 1.2％。
一种采用上述保藏方法保藏的复合微生物菌种的活化方法，包括如下步骤：
(B1)将保藏的复合微生物菌种从-80℃条件下取出后，放置39℃水浴中复苏并摇动直到内部结冰全部溶解为止；
(B2)取经溶解的菌液放置于无菌富集培养基中，添加活性稳定剂，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯1.2％、甲苯1.2％、二甲苯1.2％以及吐温80 1.2％，于32℃℃温度下震荡培养24h，震荡培养的转速为200rpm，获得经活化的复合微生物菌种。所述经溶解的菌液的添加量为无菌富集培养基重量的1.2％。
本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。
表4对比例1和实施例4的高活性保藏方法下微生物降解能力的对比
Figure BDA0001840011330000101
实施例5
本实施例与实施例1不同之处在于：
进一步的，所述步骤(A1)中，所述无菌富集培养基包括如下质量百分浓度的组分：苯0.4％，甲苯0.4％，二甲苯0.4％，尿素0.6％，磷酸氢二钠0.3％，磷酸二氢钾0.05％，硫酸镁0.8％，还包括微量元素，所述微量元素包括如下质量-体积浓度的组分：无水氯化钙4.1mg/L，七水硫酸亚铁3.5mg/L，七水硫酸锌 1.5mg/L，五水硫酸锰1.0mg/L，五水硫酸铜0.05mg/L，硼酸0.03mg/L。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述保护剂为质量百分浓度为20％的无菌甘油。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯1.2％、甲苯1.2％、二甲苯1.2％以及吐温80 1.2％。
一种采用上述保藏方法保藏的复合微生物菌种的活化方法，包括如下步骤：
(B1)将保藏的复合微生物菌种从-80℃条件下取出后，放置39℃水浴中复苏并摇动直到内部结冰全部溶解为止；
(B2)取经溶解的菌液放置于无菌富集培养基中，添加活性稳定剂，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯1.2％、甲苯1.2％、二甲苯1.2％以及吐温80 1.2％，于32℃℃温度下震荡培养24h，震荡培养的转速为200rpm，获得经活化的复合微生物菌种。所述经溶解的菌液的添加量为无菌富集培养基重量的0.8％。
本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。
表5对比例1和实施例5的高活性保藏方法下微生物降解能力的对比
Figure BDA0001840011330000111
对比例2
对比例2的复合微生物菌种为：不动杆菌属25份、微小杆菌属25份、芽孢杆菌属15份、假单胞菌属10份、厌氧粘杆菌属10份、产碱杆菌属10份以及酸枣菌属5份。本对比例的菌种来自一种生活污水常用复合降解菌剂。
一种上述复合微生物菌种的保藏方法，包括如下步骤：
(A1)将复合微生物菌种按10％的接种量接种于仅以“三苯”为碳源的无菌富集培养基中，32℃温度下震荡培养24h，获得菌液；
(A2)取菌液、保护剂和活性稳定剂，按照重量比为1:1:1的比例混合，混合均匀后于-80℃条件下保存。
进一步的，所述步骤(A1)中，所述无菌富集培养基包括如下质量百分浓度的组分：苯0.1％，甲苯0.1％，二甲苯0.1％，尿素0.5％，磷酸氢二钠0.5％，磷酸二氢钾0.03％，硫酸镁0.5％，还包括微量元素，所述微量元素包括如下质量-体积浓度的组分：无水氯化钙4.1mg/L，七水硫酸亚铁3.5mg/L，七水硫酸锌1.5mg/L，五水硫酸锰1.0mg/L，五水硫酸铜0.05mg/L，硼酸0.03mg/L。
进一步的，所述步骤(A1)中，震荡培养的转速为200rpm。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述保护剂为质量百分浓度为50％无菌甘油。
进一步的，所述步骤(A2)中，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯0.3、甲苯0.3％、二甲苯0.3％以及吐温80 2％。
一种采用上述保藏方法保藏的复合微生物菌种的活化方法，包括如下步骤：
(B1)将保藏的复合微生物菌种从-80℃条件下取出后，放置于40℃水浴中复苏并摇动直到内部结冰全部溶解为止；
(B2)取经溶解的菌液放置于无菌富集培养基中，添加活性稳定剂，所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯0.3％％、甲苯0.3％％、二甲苯 0.3％％以及吐温802％，于32℃温度下震荡培养24h，震荡培养的转速为 150-250rpm，获得经活化的复合微生物菌种。
实施例1和对比例2的降解能力如表1所示。
表6对比例2和实施例1的微生物降解能力的对比
Figure BDA0001840011330000121
由表1-6可知，本发明实施例1-5的降解“三苯”废气的复合微生物菌种经过采用本发明的高活性保藏方法保藏3个月、6个月、9个月以及12个月后，其降解“三苯”废气能力超过采用常规保藏方法的微生物菌种；尤其9个月以及12个月后，采用对比例1的常规保藏方法的微生物菌种的降解能力大大下降；同时对比例2的采用了其他复合微生物菌中，其对“三苯”的降解能力相对于实施例1也大大降低。而实施例1-5的复合微生物菌种在保藏12个月后活化，仍能持续保持良好的“三苯”降解能力，避免了常规保藏方法微生物降解大幅能力下降的问题，可为苯系物废气生物处理实际工程应用快速提供高活性降解苯系物的微生物菌种，且保藏方法工艺简单易控，成本低，适用于微生物菌种的长期保藏。
上述实施例为本发明较佳的实现方案，除此之外，本发明还可以其它方式实现，在不脱离本发明构思的前提下任何显而易见的替换均在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种降解“三苯”废气的复合微生物菌种的保藏方法，其特征在于：包括如下步骤：
A1、降解“三苯”废气的复合微生物菌种按9-11％的接种量接种于无菌富集培养基中，31-33℃温度下震荡培养23-25h，获得菌液；所述复合微生物菌种，包括如下重量份的组分：芽孢杆菌属40～60份、假单胞菌属13～28份、链球菌属13～28份、红球菌属13～28份以及短杆菌属13～28份；所述无菌富集培养基包括如下质量百分浓度的组分：苯0.1-1.0％，甲苯0.1-1.0％，二甲苯0.1-1.0％，尿素0.2-1.0％，磷酸氢二钠0.1-0.5％，磷酸二氢钾0.01-0.05％，硫酸镁0.5-1.6％，还包括质量-体积浓度为9.76-10.6mg/L的微量元素；
A2、取菌液、保护剂和活性稳定剂，按照重量比为1:0.8-1.2:0.8-1.2的比例混合，混合均匀后于-78～-82℃条件下保存；所述保护剂为质量百分浓度为20％～75％的无菌甘油或质量百分浓度为10％～50％二甲亚砜；所述活性稳定剂包括如下质量百分浓度的组分：苯0.3％-3.0％、甲苯0.3％-3.0％、二甲苯0.3％-3.0％以及吐温80 0.3-15％。
2.根据权利要求1所述的保藏方法，其特征在于：所述步骤A1中，所述微量元素包括如下质量-体积浓度的组分：无水氯化钙4.0-4.2mg/L，七水硫酸亚铁3.4-3.6mg/L，七水硫酸锌1.4-1.6mg/L，五水硫酸锰0.9-1.1mg/L，五水硫酸铜0.04-0.06mg/L，硼酸0.02-0.04mg/L。
3.根据权利要求1所述的保藏方法，其特征在于：所述步骤A1中，震荡培养的转速为150-250rpm。
4.一种采用权利要求1所述保藏方法保藏的复合微生物菌种的活化方法，其特征在于：包括如下步骤：
B1、将保藏的复合微生物菌种从-78～-82℃条件下取出后，放置38℃-40℃水浴中复苏并摇动直到内部结冰全部溶解为止，得到经溶解的菌液；
B2、取经溶解的菌液放置于权利要求1中所述的无菌富集培养基中，并添加权利要求1中所述的活性稳定剂，31-33℃温度下震荡培养23-25h，获得经活化的复合微生物菌种。
5.根据权利要求4所述的复合微生物菌种的活化方法，其特征在于：所述步骤B2中，震荡培养的转速为150-250rpm。
CN201811243732.8A 2018-10-24 2018-10-24 降解三苯废气的复合微生物菌种及其保藏和活化方法 Active CN109337835B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811243732.8A CN109337835B (zh) 2018-10-24 2018-10-24 降解三苯废气的复合微生物菌种及其保藏和活化方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811243732.8A CN109337835B (zh) 2018-10-24 2018-10-24 降解三苯废气的复合微生物菌种及其保藏和活化方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109337835A CN109337835A (zh) 2019-02-15
CN109337835B true CN109337835B (zh) 2021-07-20

Family

ID=65312021

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811243732.8A Active CN109337835B (zh) 2018-10-24 2018-10-24 降解三苯废气的复合微生物菌种及其保藏和活化方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109337835B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110237697B (zh) * 2019-06-12 2021-10-08 河北科技大学 一种生物净化废气的装置
CN113817651A (zh) * 2021-10-26 2021-12-21 广东中微环保生物科技有限公司 除臭复合菌剂及其除臭剂和除臭生物液

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101327405A (zh) * 2008-07-25 2008-12-24 浙江工业大学 降解“三苯”VOCs废气的复合微生物菌剂的制备方法
CN101646778A (zh) * 2007-02-20 2010-02-10 纽莱特科技公司 多羟基链烷酸的制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101646778A (zh) * 2007-02-20 2010-02-10 纽莱特科技公司 多羟基链烷酸的制备方法
CN101327405A (zh) * 2008-07-25 2008-12-24 浙江工业大学 降解“三苯”VOCs废气的复合微生物菌剂的制备方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
石油降解菌的筛选及复合菌群的构建;李乐等;《当代化工》;20180430;第47卷(第4期);672-676 *
石油降解菌的筛选及生物学特性研究;杨智;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技I辑》;20131215;第2013年卷(第S1期);B027-57 *
苯系化合物降解的微生物筛选及其特性初探;章剑丽等;《净水技术》;20101231;第29卷(第3期);29-33 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN109337835A (zh) 2019-02-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104031870A (zh) 一种微生物复合菌剂及由其制备的土壤联合修复剂及二者的应用
CN105950512B (zh) 一种去除污水中cod的微生物菌剂及其制备方法与应用
CN109337835B (zh) 降解三苯废气的复合微生物菌种及其保藏和活化方法
CN102250788A (zh) 降解高浓度甲苯的嗜麦芽寡养单胞菌及其应用
CN105400723A (zh) 一种用于河道治理的复合微生物制剂
CN107236687A (zh) 一株兼具六价铬去除和好氧反硝化性能的施氏假单胞菌及其应用
CN103395893A (zh) 赖氨酸芽孢杆菌Lysinibacillus sp Cr-6的应用
CN110964687A (zh) 用于废水处理的复合微生物菌剂的制备方法
CN100537746C (zh) 具有好氧反硝化性能的戴尔福特菌及其处理废水的方法
CN103395894B (zh) 一种间歇共基质调控共代谢分解难降解酚类污染物的方法
CN107299066B (zh) 一种含油污泥的微生物降解液的制备方法以及降解处理方法
CN104371939B (zh) 一种培养处理焦化废水所用复合菌的培养基及其应用
CN111849956A (zh) 纳米材料固定化微生物修复剂及其制备方法和应用
CN114031189B (zh) 一种低碳氮比污水处理的方法
CN111040970A (zh) 一种复合微生物菌剂及其制备方法和在黑臭水体修复中的应用
CN102730840A (zh) 一种降解废水中硝基苯的方法
CN111778187B (zh) 一种微生物修复菌剂及其制备方法
CN112760255A (zh) 一种降解cod的复合菌剂及其制备方法
CN100537745C (zh) 具有好氧反硝化性能的睾丸酮丛毛单胞菌及其处理废水的方法
CN105668806A (zh) 一种生物降解磺胺甲恶唑的方法
CN109081450A (zh) 一种脱硫弧菌微生物燃料电池处理鸡场废水的方法
CN108928932A (zh) 一种基于混合菌群微生物燃料电池处理羊场废水的方法
Xie et al. Degradation performance and optimal parameters of two bacteria in degrading nonylphenol
CN115895994A (zh) 一种高效降氰菌及其富集方法和降解复杂含氰废水的应用
CN110283744B (zh) 一株耐受锌离子毒性的无色杆菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant