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CN109077176A - 发酵益母草组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

发酵益母草组合物及其制备方法和应用 Download PDF

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CN109077176A
CN109077176A CN201810997546.7A CN201810997546A CN109077176A CN 109077176 A CN109077176 A CN 109077176A CN 201810997546 A CN201810997546 A CN 201810997546A CN 109077176 A CN109077176 A CN 109077176A
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CN
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motherwort
fermentation
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composition
koji
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CN201810997546.7A
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丁晓刚
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Sichuan Chengbang Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Chengdu Qiankun Veterinary Pharmaceutical Co Ltd
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Abstract

本发明提供了一种发酵益母草组合物及其制备方法和应用，涉及中药、饲料技术领域。该发酵益母草组合物主要由益母草、糯米、黄豆、面粉、红曲、甜酒曲和水等原料制成，其中，该发酵益母草组合物以红曲、甜酒曲作为发酵菌种，以糯米、黄豆和面粉作为发酵基质，益母草与上述原料进行共发酵，从而使得发酵益母草组合物中益母草的有效成分以及药用功效可明显增加，所得到的发酵益母草组合物可提高益母草补气固表、利尿、托毒排脓、生肌功能，又尽可能地降低副作用，提高了益母草的生物利用度，并改善益母草的适口性。本发明还提供了发酵益母草组合物的制备方法，通过复合菌种在不同发酵阶段的联用，使得制得的发酵益母草组合物具有良好的综合性能。

Description

发酵益母草组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及中药、饲料技术领域，具体而言，涉及一种发酵益母草组合物及其制备方法和应用。
背景技术
益母草为唇形科植物益母草(包括白花益母草、细叶益母草、土耳其益母草)的新鲜或干燥地上全草，始载《神农本草经》，列为上品，是常用的中药材。益母草味辛、微苦、性微寒、归心、肝、膀胱经，具有活血调经、利水消肿之功效。现代医学研究表明，益母草具有溶栓、抗凝、降脂、降血黏度、降低红细胞聚集、抑制血小板聚集、改善微循环、抗氧自由基和减少细胞内钙超载等诸多作用。临床上用于月经不调、产后瘀痛、心血管疾病、血液病等。
作为一种产科常用中药，益母草在兽医临床的应用也很常见，但目前还是以传统的饮片入药或作为饲料原料添加，性价比相对较低，同时其“苦味”的特性，也给临床应用带来诸多的不便；有报道认为，益母草对肝肾有一定毒性。因此，为了更好的发挥益母草在畜牧兽医上的作用，需要通过特别的工艺对益母草进行加工处理，以提高其在兽医临床应用的性价比与方便性，尽量降低其毒副作用。
有鉴于此，特提出本发明以解决上述技术问题中的至少一个。
发明内容
本发明的第一个目的在于提供一种发酵益母草组合物，该发酵益母草组合物能够提高益母草活血调经、利尿消肿的功能，还能降低肝肾副作用，提高益母草的生物利用度，并改善益母草末的适口性。
本发明的第二个目的在于提供一种发酵益母草组合物的制备方法，该制备方法简单易行，适合于工业上大规模生产。
本发明的第三个目的在于提供一种发酵益母草组合物的应用。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
本发明提供一种发酵益母草组合物，主要由以下重量份数的原料制成：益母草180～220份，糯米8～12份，黄豆7.5～12.5份，面粉2.5～7.5份，红曲1～6份，甜酒曲1～6份和水20～300份。
作为本发明一种优选实施方式，所述发酵益母草组合物主要由以下重量份数的原料制成：益母草185～215份，糯米8.5～11.5份，黄豆8～12份，面粉3～7份，红曲1～5份，甜酒曲1～5份和水30～260份。
作为本发明一种优选实施方式，所述发酵益母草组合物主要由以下重量份数的原料制成：益母草190～210份，糯米9～11份，黄豆8.5～11份，面粉4～6份，红曲2～5份，甜酒曲2～5份和水40～220份。
本发明还提供了一种发酵益母草组合物的制备方法，包括以下步骤：
(a)将配方量的糯米、部分配方量的水和配方量的红曲发酵得到的黄酒酿与部分配方量的益母草、部分配方量的甜酒曲混合，再次发酵，得到发酵物一；
(b)将配方量的黄豆、剩余配方量的水和配方量的面粉发酵得到的黄豆酿与剩余配方量的益母草、剩余配方量的甜酒曲混合，再次发酵，得到发酵物二；
(c)将发酵物一和发酵物二混合，得到发酵益母草组合物。
作为本发明一种优选实施方式，步骤(a)中，将配方量的糯米加入到部分配方量的水中，浸泡，蒸熟，降至室温后再和配方量的红曲混合进行发酵；
优选地，步骤(a)中糯米、水和红曲进行发酵时的发酵温度为25～33℃，发酵时间为25～40天。
作为本发明一种优选实施方式，步骤(a)中益母草的目数为200～300目；
优选地，步骤(a)中黄酒酿与益母草、甜酒曲进行再次发酵时的发酵温度为25～33℃，发酵时间为5～15天。
作为本发明一种优选实施方式，步骤(b)中，将配方量的黄豆加入到剩余配方量的水中，浸泡，蒸熟，降至室温后再和配方量的面粉混合进行发酵；
优选地，步骤(b)中黄豆、水和面粉进行发酵时的发酵温度为18～25℃，发酵时间为2～3天。
作为本发明一种优选实施方式，步骤(b)中，益母草的目数为200～300目；
优选地，步骤(b)中黄豆酿与益母草、甜酒曲进行再次发酵时的发酵温度为18～25℃，发酵时间为5～15天。
作为本发明一种优选实施方式，步骤(c)中，将发酵物一和发酵物二混合后干燥，得到发酵益母草组合物；
优选地，步骤(c)中干燥温度为45～55℃，干燥至发酵益母草组合物中的水分低于10％。
本发明还提供了上述发酵益母草组合物或采用发酵益母草组合物的制备方法制得的发酵益母草组合物在中药或饲料中的应用。
与现有技术相比，本发明提供的发酵益母草组合物及其制备方法具有以下有益效果：
(1)本发明提供了一种发酵益母草组合物，主要由益母草、糯米、黄豆、面粉、红曲、甜酒曲和水等原料制成，其中，该发酵益母草组合物以红曲、甜酒曲作为发酵菌种，以糯米、黄豆和面粉作为发酵基质，益母草与上述原料进行共发酵，从而使得发酵益母草组合物中益母草的有效成分以及药用功效可明显增加，所得到的发酵益母草组合物可提高益母草活血调经、利尿消肿的功能，还能降低肝肾副作用，提高益母草的生物利用度，并改善益母草末的适口性。
(2)本发明提供了一种发酵益母草组合物的制备方法，首先是将糯米与红曲共发酵制得黄酒酿，以及黄豆与面粉自然发酵制得黄豆酿，上述制得的黄酒酿和黄豆酿均与益母草、甜酒曲再次发酵得到发酵物一和发酵物二，将发酵物一和发酵物二混合，即得发酵益母草组合物。该制备方法采用分阶段进行发酵，且在发酵过程中采用不同的发酵菌种，即通过复合菌种在不同发酵阶段的联用，可使得制得的发酵益母草组合物中的益母草的有效成分可大幅度增加，同时又降低了益母草的副作用，提高了益母草的生物利用度和适口性。
另外，该制备方法工艺简单，便于实施，有利于工业上大规模加工生产。
(3)本发明提供了发酵益母草组合物的应用，鉴于上述发酵益母草组合物所具有的优势，使得其作为中药或者作为可饲用天然植物在中药或者饲料领域有良好的应用。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
根据本发明的第一个方面，提供了一种发酵益母草组合物，主要由以下重量份数的原料制成：益母草180～220份，糯米8～12份，黄豆7.5～12.5份，面粉2.5～7.5份，红曲1～6份，甜酒曲1～6份和水20～300份。
本发明提供了一种发酵益母草组合物，主要由益母草、糯米、黄豆、面粉、红曲、甜酒曲和水等原料制成，其中，红曲、甜酒曲作为发酵菌种，糯米、黄豆和面粉作为发酵基质，在上述各原料的配合作用下，将益母草制成发酵益母草组合物的形式，从而使得益母草中的有效成分以及药用功效可明显增加，且所得到的发酵益母草组合物可提高益母草补气固表、利尿、托毒排脓、生肌功能，同时还可有效降低副作用，提高了益母草的生物利用度，并改善益母草的适口性。
具体的，益母草作为该发酵益母草组合物中的主要功效成分，通过将益母草制成发酵益母草组合物的形式，可大大促进益母草的有效成分的溶出，有利于药用功效的增强，同时减轻益母草本身副作用所带来的不利影响，提高益母草作为中药或可饲用天然植物在体内的生物利用度，同时改善了益母草的口感，显著提高了其适口性。益母草典型但非限制性的重量份数为180份、185份、190份、195份、200份、210份或220份。
在本发明中，糯米、黄豆和面粉作为发酵基质，为菌体的生长提供了营养和能量等。
发酵基质的用量需控制在一定用量范围内。糯米典型但非限制性的重量份数为8份、9份、10份、11份或12份；黄豆典型但非限制性的重量份数为7.5份、8份、9份、10份、11份、12份或12.5份；面粉典型但非限制性的重量份数为2.5份、3份、4份、5份、6份、7份或7.5份。
红曲为曲霉科真菌红曲霉Monascus purpureus Went.的菌丝体寄生在粳米上而成的红曲米。红曲典型但非限制性的重量份数为1份、2份、3份、4份、5份或6份。
甜酒曲是糖化菌及酵母制剂，其所含的微生物主要有根霉、毛霉及少量酵母。甜酒曲典型但非限制性的重量份数为1份、2份、3份、4份、5份或6份。
红曲和甜酒曲作为菌种与益母草混合后，可促进益母草的发酵，促进益母草有效成分的溶出，同时，发酵过程中菌种的代谢产物也能丰富和提升益母草的药用功效。
水典型但非限制性的重量份数为20份、50份、80份、100份、120份、140份、150份、160份、180份、200份、220份、240份、260份、280份或300份。
本发明所述的“主要由……制成”，意指其除所述原料外，还可以包括其他原料，比如说其他中药组分等，这些其他组份赋予所述发酵益母草组合物不同的特性。除此之外，本发明所述的“主要由……制成”，还可以替换为封闭式的“为”或“由……制成”。
作为本发明一种优选实施方式，所述发酵益母草组合物主要由以下重量份数的原料制成：益母草185～215份，糯米8.5～11.5份，黄豆8～12份，面粉3～7份，红曲1～5份，甜酒曲1～5份和水30～260份。
优选地，所述发酵益母草组合物主要由以下重量份数的原料制成：益母草190～210份，糯米9～11份，黄豆8.5～11份，面粉4～6份，红曲2～5份，甜酒曲2～5份和水40～220份。
通过对该发酵益母草组合物中各原料用量的进一步限定，使得各原料之间的配合作用更为显著，发酵益母草组合物的效用更突出。
需要说明的是，该发酵益母草组合物可制作成不同的剂型，比如片剂、丸剂、颗粒剂、粉剂、胶囊剂等，此处不作特殊限定。
根据本发明的第二个方面，还提供了一种发酵益母草组合物的制备方法，包括以下步骤：
(a)将配方量的糯米、部分配方量的水和配方量的红曲发酵得到的黄酒酿与部分配方量的益母草、部分配方量的甜酒曲混合，再次发酵，得到发酵物一；
(b)将配方量的黄豆、剩余配方量的水和配方量的面粉发酵得到的黄豆酿与剩余配方量的益母草、剩余配方量的甜酒曲混合，再次发酵，得到发酵物二；
(c)将发酵物一和发酵物二混合，得到发酵益母草组合物。
本发明提供的发酵益母草组合物的制备方法，首先是将糯米与红曲共发酵制得黄酒酿，以及黄豆与面粉自然发酵制得黄豆酿，上述制得的黄酒酿和黄豆酿均与益母草、甜酒曲再次发酵得到发酵物一和发酵物二，将发酵物一和发酵物二混合，即得发酵益母草组合物。该制备方法采用分阶段进行发酵，且在发酵过程中采用不同的发酵菌种，即通过复合菌种在不同发酵阶段的联用，可使得制得的发酵益母草组合物中的益母草的有效成分可大幅度增加，同时又降低了益母草的副作用，提高了益母草的生物利用度和适口性。
另外，该制备方法工艺简单，便于实施，有利于工业上大规模加工生产。
黄酒酿或者黄豆酿口味香甜，分别与益母草、甜酒曲再次发酵时，可有效改善益母草的不良口感，进而提高发酵益母草组合物的适口性。
作为本发明一种优选实施方式，步骤(a)中，将配方量的糯米加入到部分配方量的水中，浸泡，蒸熟，降至室温后再和配方量的红曲混合进行发酵。
优选地，步骤(a)中糯米、水和红曲进行发酵时的发酵温度为25～33℃，发酵时间为25～40天。
糯米、水和红曲进行发酵时典型但非限制性的发酵温度为25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃或33℃。典型但非限制性的发酵时间为25天、26天、28天、30天、32天、34天、35天、36天、38天或40天。
通过对糯米的预处理步骤的限定以及糯米、水与红曲进行发酵时发酵温度和发酵时间的限定，使得糯米在红曲的作用下达到良好的发酵效果。
作为本发明一种优选实施方式，步骤(a)中益母草的目数为200～300目；
优选地，步骤(a)中黄酒酿与益母草、甜酒曲进行再次发酵时的发酵温度为25～33℃，发酵时间为5～15天。
黄酒酿与益母草、甜酒曲进行再次发酵时典型但非限制性的发酵温度为25℃、26℃、27℃、28℃、29℃、30℃、31℃、32℃或33℃。典型但非限制性的发酵时间为5天、6天、8天、10天、12天、14天或15天。
发酵时间和发酵温度对于发酵程度有重要的影响，通过对发酵时间和发酵温度的限定，使得黄酒酿与益母草、甜酒曲进行再次发酵时，能够达到适宜的发酵程度。
作为本发明一种优选实施方式，步骤(b)中，将配方量的黄豆加入到剩余配方量的水中，浸泡，蒸熟，降至室温后再和配方量的面粉混合进行发酵；
优选地，步骤(b)中黄豆、水和面粉进行发酵时的发酵温度为18～25℃，发酵时间为2～3天。
黄豆、水和面粉进行发酵时典型但非限制性的发酵温度为18℃、19℃、20℃、21℃、22℃、23℃、24℃或25℃。典型但非限制性的发酵时间为2天或3天。
作为本发明一种优选实施方式，步骤(b)中，益母草的目数为200～300目；
优选地，步骤(b)中黄豆酿与益母草、甜酒曲进行再次发酵时的发酵温度为18～25℃，发酵时间为5～15天。
黄豆酿与益母草、甜酒曲进行再次发酵时典型但非限制性的发酵温度为18℃、19℃、20℃、21℃、22℃、23℃、24℃或25℃。典型但非限制性的发酵时间为5天、6天、8天、10天、12天、14天或15天。
作为本发明一种优选实施方式，步骤(c)中，将发酵物一和发酵物二混合后干燥，得到发酵益母草组合物；
优选地，步骤(c)中干燥温度为45～55℃，干燥至发酵益母草组合物中的水分低于10％。
步骤(c)中典型但非限制性的干燥温度为45℃、46℃、48℃、49℃、50℃、51℃、52℃、53℃、54℃或55℃。
在发酵物一和发酵物二混合干燥过程还实现了发酵物一和发酵物二的后续发酵，从而达到良好的发酵程度。
需要说明的是，根据具体的后处理工艺不同，该发酵益母草组合物可制作成不同的剂型，比如片剂、丸剂、颗粒剂、粉剂、胶囊剂等。
另外，该制备方法采用的生产设备均为常规，不需要另置设备，且整个制备过程简单易行，适合于工业上大规模生产。
根据本发明的第三个方面，还提供了上述发酵益母草组合物或采用发酵益母草组合物的制备方法制得的发酵益母草组合物在中药或饲料中的应用。
鉴于上述发酵益母草组合物所具有的优势，使得其作为中药或者作为可饲用天然植物在中药或者饲料领域有良好的应用。
下面结合具体实施例和对比例，对本发明作进一步说明。其中，红曲购自河北蔺氏中药饮片有限公司，益母草购自巴中科伦中药饮片有限公司，甜酒曲购自安琪酵母股份有限公司。
实施例1
本实施例提供一种发酵益母草组合物，主要由以下重量份数的原料制成：益母草200份，糯米10份，黄豆10份，面粉5份，红曲3份，甜酒曲2份和水60份。
本实施例提供的一种发酵益母草组合物的制备方法，包括以下步骤：
(a)将10重量份的糯米加入到30重量份的水中，浸泡，蒸熟，摊晾至室温后再和3重量份的红曲进行混合发酵，发酵温度为26℃，发酵时间为30天，得到黄酒酿；
将100重量份的益母草粉碎为200目极细粉后与黄酒酿和1重量份的甜酒曲混合，再次发酵，再次发酵温度为26℃，再次发酵时间为10天，得到发酵物一；
(b)将10重量份的黄豆去壳并粉碎为8目颗粒后加入到30重量份的水中，浸泡，蒸熟，摊晾至室温后再和5重量份的面粉混合，置竹篾上摊开，保持3cm左右厚度，盖上棉布，置于阴凉库内进行发酵，发酵温度为25℃，发酵时间为2天，得到黄豆酿；
将100重量份的益母草粉碎为200目极细粉后与黄豆酿和1重量份的甜酒曲混合，再次发酵，再次发酵温度为25℃，再次发酵时间为10天，得到发酵物二；
(c)将发酵物一和发酵物二混合均匀，用制粒机制备成20目细颗粒，于55℃干燥至水分含量低于10％，得到发酵益母草组合物。
实施例2
本实施例提供一种发酵益母草组合物，主要由以下重量份数的原料制成：益母草200份，糯米8份，黄豆12份，面粉7份，红曲5份，甜酒曲6份和水100份。
本实施例提供的一种发酵益母草组合物的制备方法，包括以下步骤：
(a)将8重量份的糯米加入到50重量份的水中，浸泡，蒸熟，摊晾至室温后再和5重量份的红曲进行混合发酵，发酵温度为30℃，发酵时间为40天，得到黄酒酿；
将100重量份的益母草粉碎为300目极细粉后与黄酒酿和1重量份的甜酒曲混合，再次发酵，再次发酵温度为30℃，再次发酵时间为15天，得到发酵物一；
(b)将12重量份的黄豆去壳并粉碎为8目颗粒后加入到50重量份的水中，浸泡，蒸熟，摊晾至室温后再和7重量份的面粉混合，置竹篾上摊开，保持3cm左右厚度，盖上棉布，置于阴凉库内进行发酵，发酵温度为30℃，发酵时间为3天，得到黄豆酿；
将100重量份的益母草粉碎为200目极细粉后与黄豆酿和5重量份的甜酒曲混合，再次发酵，再次发酵温度为30℃，再次发酵时间为15天，得到发酵物二；
(c)将发酵物一和发酵物二混合均匀，用制粒机制备成20目细颗粒，于45℃干燥至水分含量低于10％，得到发酵益母草组合物。
实施例3
本实施例提供一种发酵益母草组合物，主要由以下重量份数的原料制成：益母草200份，糯米9份，黄豆11份，面粉7份，红曲4份，甜酒曲6份和水100份。
本实施例提供的一种发酵益母草组合物的制备方法，步骤(a)中采用的甜酒曲的重量份数为2份，步骤(b)中采用的甜酒曲的重量份数为4份，其余步骤以及参数与实施例2相同。
实施例4
本实施例提供一种发酵益母草组合物，主要由以下重量份数的原料制成：益母草200份，糯米10份，黄豆10份，面粉5份，红曲3份，甜酒曲6份和水100份。
本实施例提供的一种发酵益母草组合物的制备方法，步骤(a)中采用的甜酒曲的重量份数为3份，步骤(b)中采用的甜酒曲的重量份数为3份，其余步骤以及参数与实施例2相同。
实施例5
本实施例提供一种发酵益母草组合物，主要由以下重量份数的原料制成：益母草200份，糯米11份，黄豆9份，面粉4份，红曲2份，甜酒曲6份和水100份。
本实施例提供的一种发酵益母草组合物的制备方法，步骤(a)中采用的甜酒曲的重量份数为4份，步骤(b)中采用的甜酒曲的重量份数为2份，其余步骤以及参数与实施例2相同。
实施例6
本实施例提供一种发酵益母草组合物，主要由以下重量份数的原料制成：益母草200份，糯米12份，黄豆8份，面粉3份，红曲1份，甜酒曲6份和水100份。
本实施例提供的一种发酵益母草组合物的制备方法，步骤(a)中采用的甜酒曲的重量份数为5份，步骤(b)中采用的甜酒曲的重量份数为1份，其余步骤以及参数与实施例2相同。
实施例7
本实施例提供一种发酵益母草组合物，主要由以下重量份数的原料制成：益母草180份，糯米10份，黄豆10份，面粉5份，红曲4份，甜酒曲5份和水200份。
本实施例提供的一种发酵益母草组合物的制备方法，步骤(a)中采用的益母草的重量份数为90份，甜酒曲的重量份数为1份，加入水的重量份数为100份，步骤(b)中采用的益母草的重量份数为90份，甜酒曲的重量份数为4份，加入水的重量份数为100份，其余步骤以及参数与实施例2相同。
对比例1
本对比例提供一种发酵益母草组合物，主要由以下重量份数的原料制成：益母草200份，糯米7份，黄豆13份，面粉8份，红曲5份，甜酒曲6份，水100份。
本对比例提供的一种发酵益母草组合物的制备方法，步骤(a)中采用的糯米的重量份数为7份，步骤(b)中采用的黄豆的重量份数为13份，面粉的重量份数为8份，其余步骤以及参数与实施例2相同。
对比例2
本对比例提供一种发酵益母草组合物，主要由以下重量份数的原料制成：益母草200份，糯米13份，黄豆7份，面粉2份，红曲1份，甜酒曲6份和水100份。
本对比例提供的一种发酵益母草组合物的制备方法，步骤(a)中采用的糯米的重量份数为13份，步骤(b)中采用的黄豆的重量份数为7份，面粉的重量份数为2份，其余步骤以及参数与实施例2相同。
为了进一步验证上述实施例和对比例的效果，特设以下实验例。
实验例1药效实验
实验方法：取临产母猪220头，随机分为11组，分别为空白组、对照组、实验组1-7和对比组1-2。实验组1-7母猪饲料中分别添加质量分数为1％的实施例1-7的发酵益母草组合物；对比组1-2母猪饲料中分别添加质量分数为1％的对比例1-2的发酵益母草组合物；对照组母猪饲料中添加质量分数为1％的益母草末，空白组母猪饲料中添加质量分数为1％的稻草末；母猪产仔前投喂5天，产后投喂7天，除饲料外，其他饲养条件相同；分别观察记录各组母猪平均产程(average stages of labor，简称ASL)，产后恶露不尽(prolonged lochia，简称PL)发病率，母猪产后三联症(子宫中内膜炎、乳房炎、无乳及泌乳不足，简称MMA)发病率及仔猪发病率与仔猪日增重平均值(ADG)；
记录各组的相关评价指标，将实验组的结果与对照组比较，其中一个指标优于对照组得一个“+”，与对照组相当则忽略，与空白组相当或差于对照组则评为“-”，一个“+”一个“-”相互抵消，结果见表1。
表1不同实验组和对比组的产后保健功能评价结果
由表1可知，实验组1-7的平均产程、PL发病率、MMA发病率及仔猪发病率与仔猪日增重平均值均优于对照组和空白组。本发明各实施例制备的发酵益母草组合物能够大大提高母猪产后保健功能。而对比组2产后保健功能与对照组相当，说明不同的物料组合对发酵益母草组合物的功能疗效有影响，不同的物料组合对ASL、PL发病率、MMA发病率、仔猪发病率及仔猪ADG的影响各不相同。
实验例2毒理实验
实验动物：昆明种小鼠，SPF级，体重18～22g，雌雄各半，共110只，由四川省医学科学院实验动物中心提供，动物合格证号SYXK(军)2002-005。动物饲养于屏障动物房，动物房合格证号SYXK(军)2002-005。室温(20±2)℃，相对湿度60～70％，通风良好、环境安静，室内保持12h照明，12h黑暗，并定期消毒。
实验方法：将小鼠随机分为11组，分别为空白组、对照组和实验组1-7(对应实施例1-7组)和对比组1-2(对应对比例1-2)，每组10只，雌雄各半。
对照组按38g·kg-1的每日剂量灌胃益母草末混悬液，实验组1-7和对比组1-2按38g·kg-1的每日剂量分别灌胃实施例1-7和对比例1-2提供的发酵益母草组合物混悬液，空白组灌胃等容量蒸馏水；连灌14天；给药期间动物自由饮食，每日观察给药前后动物的外观体征，行为活动毛发变化、大小便形状、颜色，眼、耳、口、鼻、肛门有无异常分泌物等。分别在给药0、1、3、7、11、14d称量动物体重，计算增长率。连续给药14d后，小鼠摘眼球取血，分离血清，检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌苷(CREA)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、A/G、总胆红素(TBIL)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(CHOL)指标。动物取血后处死，对心、肝脾、肺、肾、脑、性腺、甲状腺、胸腺、回肠等进行肉眼观察，称重并计算脏器系数。取肝、肾组织，用10％中性甲醛溶液固定，经梯度乙醇脱水、二甲苯透明石蜡包埋、切片(厚4～5μm)、HE染色，光学显微镜下观察组织病理变化。
表2不同实验组和对比组对肝脏副作用评价结果
表3不同实验组和对比组对肾脏副作用评价结果
实验组别 BUN/mmol·L<sup>-1</sup> CREA/μmol·L<sup>-1</sup> 综合评价
实验组1 7.06±1.72 54.28±8.48 正常
实验组2 6.48±2.43 55.60±7.68 正常
实验组3 7.44±2.24 56.76±9.40 正常
实验组4 7.44±1.84 54.33±8.45 正常
实验组5 6.89±2.42 54.30±4.79 正常
实验组6 6.67±2.65 54.49±8.20 正常
实验组7 6.88±2.24 55.13±7.54 正常
对比组1 7.64±1.75 55.38±7.39 正常
对比组2 7.07±2.24 55.39±5.75 正常
空白组 6.68±1.24 54.92±7.84 正常
对照组 7.88±2.26 58.82±10.63 微弱
由表2和3中数据可见，各组无死亡例，一般体征未见异常。
结果显示，各给药组的ALT、AST、BUN、CREA指标均有不同程度的改变，其中对比组1小鼠肝肾副作用与对照组相当，肝/肾副作用评为“微弱”，而其他实验组与空白组差异不显著，肝/肾副作用评为“正常”。ALP、ALB、TP、GLO、A/G、TBIL、CHOL、Glu等指标变化不明显。从表2和3中结果可以看出，在较高剂量下连续给药14d，除对比组1小鼠肝肾副作用与对照组相当外，其他各组小鼠肝肾副作用均小于对照组，结果说明，发酵辅料组合不同对发酵益母草组合物的肝肾副作用有不同的影响。
综合表2-3分析，实验组1-7的小鼠肝肾功能得到提升，肝肾副作用得到减弱或消除。实验结果表明，相对于益母草末，本发明提供的发酵益母草组合物具有增效减毒的功效。
实验例3适口性评价
取益母草末，按质量分数为1％的用量拌料供健康猪群自由采食，为对照组；取实施例1-7和对比例1-2提供的发酵益母草组合物，分别按质量分数为1％的用量拌料供健康猪群自由采食；设空白组投喂正常饲料；记录采食情况。
以空白组采食量对应适口性为“一般”作为判断基准，分为以下等级：优：与空白组相比，采食量增加；差：与空白组相比，采食量下降；一般：与空白组相比，采食量无变化。
根据各组采食情况评价相应产品的适口性，评价标准与结果见表4。
表4不同实验组和对比组适口性评价标准与结果
分组 评价结果
实验组1 优
实验组2 一般
实验组3 优
实验组4 优
实验组5 一般
实验组6 优
实验组7 优
对比组1 差
对比组2 优
空白组 一般
对照组 差
结果显示，不同的物料组合对发酵益母草组合物适口性的影响不一样，且这种影响未呈现规律性。
表5不同实验组和对比组综合质量评价结果
综合表1-5分析，由于对比组1在降低肝肾副作用和适口性方面表现不佳，尽管其产后保健效果很好，综合评价依然为“差”；对比组2在降低肝肾副作用与适口性方面表现不错，但是其产后保健效果很差，综合评价依然为“差”；其他组别综合质量评价均为“优”。
实验例4发酵益母草组合物对多系统衰竭综合征(PMWS)的防治效果
材料：益母草末(成都乾坤动物药业股份有限公司)；发酵益母草组合物(仅以实施例5为代表)；
实验猪场：双流县某断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)多发猪场。
方法：在相同饲养条件下随机选取猪场哺乳母猪27头，平均分成实验组、阳性对照组和阴性对照组(每组9头)；实验组采用实施例5制备的发酵益母草组合物按质量分数1.0％拌料投喂，阳性对照组用益母草末按质量分数为1.0％拌料投喂，断奶前后各连续用药7天；阴性对照组按日常饲养方式饲养，不给药；记录PMWS发病情况，结果见表6。
表6不同实验组和对比组对猪PMWS的防治效果
实验组别 PMWS发病率(％)
实验组 0
阳性对照组 11
阴性对照组 27
结果表明，实验组对猪PMWS的防治效果优于其他组，说明发酵益母草组合物对猪PMWS的防治效果优于益母草末。
实验例6发酵益母草组合物对猪场RSY的影响
材料：益母草末(成都乾坤动物药业股份有限公司)；发酵益母草组合物(仅以实施例5为代表)；
实验猪场：双流县某自繁自养猪场。
方法：在相同条件下随机将母猪分成实验组、对照组和空白组(每组9头)；实验组用实施例5制备的发酵益母草组合物按质量分数为1.0％拌料投喂，阳性对照组用益母草末按质量分数为1.0％拌料投喂，产前连续用药5天，产后连续用药15天；实验组仔猪用实施例5制备的发酵益母草组合物按质量分数为1.0％拌料投喂，阳性对照组仔猪用益母草末按质量分数为1.0％拌料投喂，断奶前连续用药5天，断奶后连续用药10天；阴性对照组按日常饲养方式饲养，不给药；记录各组总投入与总产出，计算RSY(单头母猪年投资回报率)，RSY＝(总产出-总投入)/总投入，具体结果见表7。
表7不同实验组和对比组对猪场RSY的影响结果
实验组别 RSY(％)
实验组 21.6
阳性对照组 10.1
阴性对照组 5.6
结果表明，实验组在提高猪场RSY方面优于其他组，说明发酵益母草组合物在提高猪场RSY方面的效果优于益母草末。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

Claims (10)

1.一种发酵益母草组合物，其特征在于，主要由以下重量份数的原料制成：益母草180～220份，糯米8～12份，黄豆7.5～12.5份，面粉2.5～7.5份，红曲1～6份，甜酒曲1～6份和水20～300份。
2.根据权利要求1所述的发酵益母草组合物，其特征在于，主要由以下重量份数的原料制成：益母草185～215份，糯米8.5～11.5份，黄豆8～12份，面粉3～7份，红曲1～5份，甜酒曲1～5份和水30～260份。
3.根据权利要求1所述的发酵益母草组合物，其特征在于，主要由以下重量份数的原料制成：益母草190～210份，糯米9～11份，黄豆8.5～11份，面粉4～6份，红曲2～5份，甜酒曲2～5份和水40～220份。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的发酵益母草组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(a)将配方量的糯米、部分配方量的水和配方量的红曲发酵得到的黄酒酿与部分配方量的益母草、部分配方量的甜酒曲混合，再次发酵，得到发酵物一；
(b)将配方量的黄豆、剩余配方量的水和配方量的面粉发酵得到的黄豆酿与剩余配方量的益母草、剩余配方量的甜酒曲混合，再次发酵，得到发酵物二；
(c)将发酵物一和发酵物二混合，得到发酵益母草组合物。
5.根据权利要求4所述的发酵益母草组合物的制备方法，其特征在于，步骤(a)中，将配方量的糯米加入到部分配方量的水中，浸泡，蒸熟，降至室温后再和配方量的红曲混合进行发酵；
优选地，步骤(a)中糯米、水和红曲进行发酵时的发酵温度为25～33℃，发酵时间为25～40天。
6.根据权利要求4所述的发酵益母草组合物的制备方法，其特征在于，步骤(a)中益母草的目数为200～300目；
优选地，步骤(a)中黄酒酿与益母草、甜酒曲进行再次发酵时的发酵温度为25～33℃，发酵时间为5～15天。
7.根据权利要求4～6任意一项所述的发酵益母草组合物的制备方法，其特征在于，步骤(b)中，将配方量的黄豆加入到剩余配方量的水中，浸泡，蒸熟，降至室温后再和配方量的面粉混合进行发酵；
优选地，步骤(b)中黄豆、水和面粉进行发酵时的发酵温度为18～25℃，发酵时间为2～3天。
8.根据权利要求4～6任意一项所述的发酵益母草组合物的制备方法，其特征在于，步骤(b)中，益母草的目数为200～300目；
优选地，步骤(b)中黄豆酿与益母草、甜酒曲进行再次发酵时的发酵温度为18～25℃，发酵时间为5～15天。
9.根据权利要求4～6任意一项所述的发酵益母草组合物的制备方法，其特征在于，步骤(c)中，将发酵物一和发酵物二混合后干燥，得到发酵益母草组合物；
优选地，步骤(c)中干燥温度为45～55℃，干燥至发酵益母草组合物中的水分低于10％。
10.根据权利要求1～3任意一项所述的发酵益母草组合物或采用权利要求4～9任意一项所述的发酵益母草组合物的制备方法制得的发酵益母草组合物在中药或饲料中的应用。
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