CN1082374C - 桑枝的醇和/或水浸膏在制备降血糖药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种具有降血糖活性的中药组合物，其特征在于，它是通过用6-14倍重量比的水、醇或含水醇溶剂，在室温、加热或回流下提取粉碎的桑枝，然后浓缩得到的提取液而制得的。本发明的中药组合物可用于制备降血糖药物。

Description

桑枝的醇和/或水浸膏在制备降血糖药物中的应用

本发明涉及桑枝的醇和/或水提取物在制备降血糖药物中的应用。

据“中药大词典”(上海科学技术出版社，1986出版)记载，桑枝为桑科植物桑(Morus albal L.)的干燥嫩枝，春末夏初采收，去叶，晒干，或趁新切片，晒干。其呈长圆柱形，少有分支，长短不一，直径0.5-1.5cm，表面灰黄色或黄褐色，有多数黄褐色点状皮孔及细纵纹，并有灰白色略呈半园形的叶痕和黄棕色的胚芽。质坚韧，不易折断，断面纤维性。切片厚0.2-0.5cm，皮部较薄，木部黄白色，射线放射状，髓部白色或黄白色，气微，味淡。

桑枝含有上百种化合物，初步分离试验结果证明，其中含有多糖、单糖、植物蛋白、酚类、黄酮类及皂甙、有机酸、氨基酸等成分。具体地讲，桑枝含鞣质，游离的蔗糖、果糖、水苏糖、葡萄糖、麦芽糖、阿拉伯糖、木糖；茎含桑素(Mulberrin)、桑色烯(Mulberrochromene)、环桑素(Cyclomulberrin)、环桑色烯(Cyclomullberrochromene)；木材含桑色素(Morin)、树宁(Cudranin)、桑酮(Maclurin)、四羟基芪(Tetrahydroxystilbene)、二氢桑色素(Dihydromorin)、二氢山奈酚(Dihydrokaempferol)。

桑枝的常规炮制方法主要是，拣去杂质，洗净，用水浸泡，润透后切段晒干。再有炒制法，即：取净桑枝段，置锅内用文火炒至淡黄色，放凉。桑枝的功用主治为，祛风湿、利关节、行水气，治风寒湿痹、四肢拘挛、脚气浮肿、肌体风痒。

本发明的发明者经广泛深入的研究发现，桑枝不仅具有以上所述的功用主治，而且还表现出非常好的降血糖活性。因此，本发明的目的也就在于提供一种由桑枝制备的中药组合物及其在制备降血糖药物中的应用。

根据本发明的中药组合物是通过用醇和/或水提取粉碎的桑枝，然后浓缩得到的提取液而制得的。

上述的“用醇和/或水提取”是本领域普通技术人员所熟知的方法，一般采用水、醇或其混合物对桑枝进行浸泡或加热提取，这些都可以适用于本发明。

具体地，本发明之中药组合物是通过用6-14倍重量比的水、醇或含水醇溶剂，在室温、加热或回流下提取粉碎的桑枝，然后浓缩得到的提取液而制得的。

原药材经粉碎后，用水，醇类如甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇等或50-80％的含水醇类在静态或动态下，室温或加热(或回流)提取，提取溶剂量为原药重量的6-14倍，提取可连续或间歇进行，间歇提取时可重复1-4次，然后滤去药渣，滤液在常压或减压、动态状态下浓缩至一定浓度后，保温离心除去不溶物，滤液可进一步浓缩成膏状进行制剂成型。浸膏可经冷冻干燥或真空干燥成干粉，也可把浓缩液体直接喷雾干燥成干粉进行制剂成型。

以上提取滤液又可直接用交换柱，如：大孔树脂、离子交换树脂、凝胶等交换柱，和膜技术进行精制浓缩后，再制成浸膏或干粉。

提取溶剂以水-乙醇较好，提取温度以80-95℃较好，而水提取更好，此时的提取温度以95℃为优选。

溶剂与桑枝的重量比以10-12倍较好，水提取时以12倍更好。

在大型生产中，动态提取较静态提取效果要好。

以上制备的浸膏干粉为棕黄色固状物，易吸潮，味微甜。其质量控制方法如下。

一、鉴别：

1)多糖反应：取制得的浸膏干粉少量，加80％乙醇振摇后离心，弃上清液，沉淀以80％乙醇洗涤两次，沉渣加1ml水溶解后，加入碱性酒石酸铜试剂4-5滴，在沸水加热5分钟。产生棕红色沉淀。

2)薄层色谱：取制得的浸膏干粉约0.1g，加甲醇2ml，用力振摇后取上清液10μl点于硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇(8∶2)展开后，在紫外灯下观察显有3个紫色荧光斑点。

3)紫外光谱：取制得的浸膏干粉0.1g加甲醇10ml超声提取10分钟，离心或取上层清液经稀释后作紫外吸收光谱，在208和283nm波长处有吸收峰。

二、检查：

1)pH值：取制得的浸膏干粉0.1g，加水20ml溶解后依法测定其pH值在5-6范围内。

2)干燥失重：取制得的浸膏干粉在100℃干燥至恒重，减失不超过10％。

三、含量测定：

对以上制得的浸膏或浸膏干粉进行多糖含量测定，以控制其质量。方法如下：

精密称定0.1g，加80％乙醇10ml，超声处理10分钟后过滤。不溶物用80％乙醇20ml分4次洗涤后，用热水溶出沉渣，至100ml，备用。精密吸取上述溶液0.5ml，置10ml具塞试管中，加水至1.0ml。加入1.0ml 5％的苯酚水溶液，摇匀，沿管壁缓缓加入浓硫酸5.0ml，摇匀，置沸水浴中5分钟，冷却。以1.0ml水加试剂作为空白，在490nm波长测定吸光度值。由校正曲线算出含量

本发明的浸膏或浸膏干粉的多糖含量应大于7％。

以上制备的浸膏或浸膏干粉，加入相关剂型的辅助，可以制成冲剂、散剂、胶囊剂、片剂、口服液等剂型。

1、冲剂

包括可溶性颗粒剂及块状剂，用上述的干粉和适量赋型剂，如糊精、淀粉、微晶纤维素、纤维素、海藻酸、海藻酸钠、羧甲基淀粉、低取代羟丙基纤维素等，混合均匀后，干压成颗粒，经整粒分装于防湿包装材料如：厚塑料、铝箔等中。也可用浸膏加上述赋型剂后湿法制粒，干燥后压成块剂。分装于防湿包装材料中。

2、胶囊剂

用上述的干粉或浸膏加入适量辅料如碳酸钙、甘露醇、碳酸镁、氧化镁、微粉硅胶等，适量润滑剂如滑石粉、硬脂酸镁、乙二醇酯、聚硅酮类等，以及适量的粘合剂如矿物油、食油等，混合成干粉或制成颗粒，填充入胶囊。也可用适量赋型剂如聚乙二醇、油类等，制成软材用泵压法进囊，分装入密闭铝塑包装中。

3、片剂

包括普通片、薄膜衣片等。用上述的浸膏或干粉，加入适量的稀释剂如淀粉、糊精、甘露醇、微品纤维等，适量的粘合剂如水、乙醇、淀粉浆、明胶、纤维素类等，适量的崩解剂如干淀粉，羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、海藻酸钠、海藻酸等，以及适量的润滑剂如硬脂酸镁，滑石粉、聚乙二醇等，按常规湿法制粒，干燥后整粒或干法制粒整粒后压片。如是包薄膜衣片，可用成膜材料如纤维素类、聚乙醇类等，按常规包衣，分装入密闭瓶或铝塑板中。

4、口服液

按常规可溶性口服液工艺配制，将上述的浸膏或干粉溶于水或乙醇中，加适量的稳定剂如乙二胺四醋酸二钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、VC衍生物等，或适量的防腐剂如苯甲酸、对羟苯甲酸酯类、山梨酸等，分装于密闭瓶中。

5、散剂

用上述干粉和适量的稀释剂、吸收剂，如糊精、淀粉、微晶纤维素，纤维素、海藻酸、海藻酸钠、羟甲基淀粉、低取代羟丙基淀粉等，经粉碎、过筛后，分装入铝箔袋中，密封即可。

以上各剂型可加入适量甜味剂，如D-木糖、木糖醇、麦芽糖醇、甜叶菊素、天冬甜母等。为增加稳定性，散剂、冲剂等颗粒剂可增加外薄膜包衣。

在将本发明的中药组合物应用于四氧嘧啶高血糖小鼠、大鼠模型的研究中发现，其使小鼠和大鼠的血糖值明显地下降。对于人而言，本发明的中药组合物及其进一步的制剂也可降低血糖浓度，用于治疗糖尿病(消渴病)，其用量为2-3g/次，一日三次。

以下将在实施例中对本发明进行更为详细的说明。但应理解的是，这些实施例仅为说明之目的，而非用于限制本发明的范围。

附图简要说明：

图1是桑枝提取浸膏对四氧嘧啶小鼠糖耐量影响的曲线。

                            实施例

实施例1：水提浸膏(以下有时简称为SZ)

将桑枝原药材粉碎至约3-10目，然后加入其重量12倍的去离子水，在动态下回流4小时，过滤除去药渣，以上过程重复二次，合并滤液，减压(真空度16-3Kpa)加热(温度60-80℃)，在动态下浓缩至相对密度1.05-1.06，70℃保温离心除去不溶物，滤液进一步真空浓缩成膏状，进行真空干燥得干粉，提出率9-12％，多糖含量大于7％。实施例2：颗粒冲剂颗粒剂组成：

实施例1中制得的浸膏于粉	3g
		低取代羟丙基纤维素(LHPC)	适量
甜味剂天冬甜母	5％

将上表中的原料混合均匀，过80目筛，干法制粒，粉碎得20-60目筛的颗粒，分装于铝箔袋中，密封即得。

以下用实施例1中制得的桑枝浸膏(SZ)进行药效学实验和毒理学研究。

一、主要药效学

1、实验动物：

昆明种雄性小鼠，体重22-25g；Wistar大鼠，雄性，体重180-250g，均购自中国医学科学院动物研究所繁育厂。动物质量合格证号分别为：京动管质字(1994)第029号，第030号。四氧嘧啶高血糖小鼠、大鼠模型：给正常动物静脉注射四氧嘧啶(小鼠90-100mg/kg，大鼠45-50mg/kg)，给药72小时后预测血糖(葡萄糖氧化酶法)，选用血糖值在11.1mmol/L以上者进行实验(陈其明，谢明智，黄连及小辟碱降血糖作用的研究，药理学学报，21(6)，401，1988)。

2、实验方法与结果

四氧嘧啶高血糖小鼠4组(10只/组)，第一组喂正常饲常料作为对照组，第二组喂正常料加SZ(0.6g/100g饲料，折合剂量约为2.5g/kg/天)，第三组喂合50％蔗糖料作为高糖料对照组，第四组喂高糖饲料加SZ(0.86g/100g饲料)，使小鼠每天服SZ约为2.5g/kg。分别于第11天和第14天测定禁食后和不禁食时的血糖值(表1)。

    表1.SZ对四氧嘧啶高血糖小鼠血糖的影响(Mean±SD，n＝10)

	血糖值mmol/L，mean±SD
			组别	禁食	未禁食
1、正常饲料组	21.64±3.13	33.90±4.62
			2、正常饲料+SZ	18.82±4.91	27.59±4.31**
3、高糖饲料组	20.93±3.47	27.91±4.98
			4、高糖饲料+SZ	13.42±4.31***	21.26±8.02*

1vs2，**p＜0.01；3vs4，*P＜0.05，***P＜0.001

结果说明，长期服用SZ能使进食正常饲料的四氧嘧啶高血糖小鼠未禁食时(相当于餐后)的血糖下降；使进食高蔗糖饲料的四氧嘧啶小鼠禁食和未禁食(餐后)时的血糖下降。

2)、SZ对四氧嘧啶高血糖小鼠糖耐量的影响：

四氧嘧啶高血糖小鼠3组，每组10只，禁食过夜，一组灌胃淀粉(3.0g/kg)作为对照组，另两组给淀粉和不同剂量的SZ(2.5g/kg，1.25g/kg)，测定0min及给药后30min、60min、120min时的血糖值，结果见图1及表2。

表2、SZ对四氧嘧啶高血糖小鼠糖耐量血糖峰值和曲线下面积的影响(Mean±SD，n＝10)

组别	血糖峰值(mmol/L)+	AUC(mmol/L.hr)
			对照组	22.51±1.87	34.01±3.90
SZ1.25g/kg	16.43±2.48***	27.73±3.98**
			SZ2.5g/kg	15.11±1.37***	26.52±2.70***

AUC为血糖曲线下面积；与对照组比较，**P＜0.01，***P＜0.001

结果说明，SZ在1.25g/kg、2.5g/kg剂量时，对四氧嘧啶高血糖小鼠淀粉负荷后血糖的升高有非常明显的抑制作用，明显减少血糖曲线下面积，呈一定量效关系。

二、毒理学研究

1、急性毒性：以SZ浸膏粉36g/Kg(相当于450g生药/kg)给小鼠灌胃，12小时内分三次给完，连续观察7天，未发现动物有任何毒性症状，亦无死亡。

2、慢性毒性：对大白鼠进行了24周的慢性毒性试验，观察生长、死亡等。在给药12周、24周及停药后4周分别处死动物，检测血常规，肝、肾功能，血糖等，对心、肝、脾、肺、肾等组织进行了病理形态学观察，未见异常变化，说明本品毒性甚低，使用安全。

Claims (2)

1、桑枝的醇和/或水浸膏或者膏粉在制备降糖药物中的应用。

2、如权利要求1所述的应用，其特征在于所述浸膏或者膏粉可添加药学上可接受的载体。

Images