CN107969237A - 一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，属于葡萄的选育领域，其步骤包括：(1)试管苗的获得，选择优质无核葡萄做母本，野生葡萄做父本，采取异地取粉方式；(2)嫁接，将已经成熟的试管苗为接穗，砧木选择当地2‑3年生且长势强的野生葡萄品种，得到一号苗；(3)二次试管苗的获得，选择一号苗做母本，优质香妃葡萄做父本，采取异地取粉方式；(4)二次嫁接，将已经成熟的二次试管苗为接穗，砧木选择当地2‑3年生且长势强的野生葡萄品种，得到二号苗；(5)育种，以二号苗为砧木，以一号苗枝条为接穗进行第三次嫁接，得到葡萄新品种。本发明用于培育优质的葡萄品种。
Description
技术领域
本发明属于葡萄的选育领域，具体涉及到一种优质葡萄的选育方法。
背景技术
世界上果树栽培的面积和产量，葡萄仅次于柑桔居第二位，葡萄以其美丽的色泽和形状、甜甜的口感和丰富的营养，受到人们普遍的喜爱。葡萄的品种甚多，国内引进种植较多的外国葡萄品种有乍娜、白香蕉、巨峰、藤稔等，乍娜具有成熟早的优点，缺点是果粒小、裂果、抗逆性差，白香蕉产量高，但果粒小、易落粒，巨峰具有果粒大的优点，但产量低、长势弱，藤稔具有果粒大、产量高的优点，但存在裂果、难储运的不足，现有的葡萄品种，每年只能一次结果，果期短。
香妃葡萄属于欧亚种品种，是北京市农林科学院林果研究所1982年以玫瑰香和莎芭珍珠(的后代)为母本，绯红为父本杂交的一个新品种。这个品种的特点是早熟、丰产、品质优异，有浓郁的玫瑰香味，丰产性相当不错。另一个特点是抗病，它叶片的绒毛比较厚，主要是抗褐腐病和霜霉病成熟前果皮为绿色，成熟以后呈绿黄色。果实接近圆形，可以切片，切开后可看见每个果粒中含有3～5粒种子，果肉硬脆。和同类的早熟品种相比，香妃葡萄的果穗中等大小，但果粒较大。该品种最大的特点是品质好，比较甜，而且有浓郁的玫瑰香味。但是该品种适宜北方地区生长，南方种植需谨慎。
发明内容
本发明的目的在于：提供一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，将香妃葡萄经过选育后培育出适宜西南地区生长的葡萄品种。
本发明采用的技术方案如下：
一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，步骤如下：
(1)试管苗的获得：
选择优质无核葡萄做母本，野生葡萄做父本，采取异地取粉方式；
在当地的野生葡萄父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；
到优质无核葡萄产区选择当地优质母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋；
授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；
(2)嫁接：
在3月将基部已经成熟的试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为一号苗；
(3)二次试管苗的获得：
选择一号苗做母本，优质香妃葡萄做父本，采取异地取粉方式；
在优质香妃葡萄父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；
选择一号苗母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋；
授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；
(4)二次嫁接：
在3月将基部已经成熟的二次试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为二号苗；
(5)育种：
以二号苗为砧木，以一号苗枝条为接穗进行第三次嫁接，用第三次嫁接成活的种苗枝条进行扦插，培育成优质葡萄新品种。
进一步地，所述胚挽救培养步骤为，首先剥取胚珠；将果穗用流水冲洗3-5分钟，剪成3-5粒的小穗于烧杯中，置于超净工作台上，用75％乙醇浸泡约1分钟，无菌水冲洗3-5次，再用0.1％升汞消毒7分钟，无菌水冲洗3-5次，切开幼果取出胚珠接种于内装40mL 培养基的100mL三角瓶中，每瓶接种10-20粒，胚珠培养基采用B5或Nistch为基本培养基，附加BA(6-苄氨基嘌呤)0.1-1.0mg/L、IAA(吲哚乙酸)1.0-2.0mg/L、GA(赤霉酸)0.3-0.8mg/L、6％蔗糖、0.6％琼脂、0.1％活性炭。
进一步地，在每次葡萄开花前在叶面喷洒0.05～0.1％浓度的硼酸溶液，在幼果期喷洒 1-3％的过磷酸钙溶液，在果实生长后期喷洒0.02％的硫酸钾溶液。
进一步地，所述一号苗在生长时进行避雨和防日灼处理。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
1、本发明中，采用一种无核葡萄快速育种方法，通过胚培手段，可以采用优质无核葡萄品种做母本，野生葡萄做父本在胚发育到一定阶段，还没有退化之前取出，接种在外来培养基上进行诱导萌发，继代培养后成为正常的一号苗，然后以一号苗作母本，香妃葡萄作父本获得二次试管苗，嫁接到当地的野生葡萄上，然后将一号苗在嫁接到二号苗上从而提高优质葡萄育种效率，缩短育种年限，得到适合西南地区生长的优质葡萄品种。
2、本发明中，提供的胚挽救技术，通过胚培手段，可以采用有无核倾向的品种做母本，在胚发育到一定阶段，还没有退化之前将胚取出，接种在外来培养基上进行诱导萌发，继代培养后成为正常的试管苗，具有成苗率高的特点，且成苗后通过在试管内炼苗，将所得的试管苗继代培养，促进成熟，待基部几节半木质化后，嫁接在成龄葡萄上，通过特别的管理方式，促其当年结果，鉴定是否为无核品种，从而缩短育种年限3-4年。
3、本发明中，在每次葡萄开花前在叶面喷洒0.05～0.1％浓度的硼酸溶液，在幼果期喷洒1-3％的过磷酸钙溶液，在果实生长后期喷洒0.02％的硫酸钾溶液。如此是为了利于葡萄品种的生长。
4、本发明中，一号苗在生长时进行避雨和防日灼处理，保护植株，便与其生长。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，步骤如下：
(1)试管苗的获得：
选择优质无核葡萄做母本，野生葡萄做父本，采取异地取粉方式；
在当地的野生葡萄父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；
到优质无核葡萄产区选择当地优质母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋；
授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；
(2)嫁接：
在3月将基部已经成熟的试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为一号苗；
(3)二次试管苗的获得：
选择一号苗做母本，优质香妃葡萄做父本，采取异地取粉方式；
在优质香妃葡萄父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；
选择一号苗母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋；
授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；
(4)二次嫁接：
在3月将基部已经成熟的二次试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为二号苗；
(5)育种：
以二号苗为砧木，以一号苗枝条为接穗进行第三次嫁接，用第三次嫁接成活的种苗枝条进行扦插，培育成优质葡萄新品种。
进一步地，所述胚挽救培养步骤为，首先剥取胚珠；将果穗用流水冲洗3-5分钟，剪成3-5粒的小穗于烧杯中，置于超净工作台上，用75％乙醇浸泡约1分钟，无菌水冲洗3-5次，再用0.1％升汞消毒7分钟，无菌水冲洗3-5次，切开幼果取出胚珠接种于内装40mL 培养基的100mL三角瓶中，每瓶接种10-20粒，胚珠培养基采用B5或Nistch为基本培养基，附加BA(6-苄氨基嘌呤)0.1-1.0mg/L、IAA(吲哚乙酸)1.0-2.0mg/L、GA(赤霉酸)0.3-0.8mg/L、6％蔗糖、0.6％琼脂、0.1％活性炭。
进一步地，在每次葡萄开花前在叶面喷洒0.05～0.1％浓度的硼酸溶液，在幼果期喷洒 1-3％的过磷酸钙溶液，在果实生长后期喷洒0.02％的硫酸钾溶液。
进一步地，所述一号苗在生长时进行避雨和防日灼处理。
实施例1
一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，步骤于下：
(1)试管苗的获得：
选择优质的甜蜜蓝宝石做母本，野生葡萄做父本，采取异地取粉方式。
在当地野生葡萄父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；
到优质无核葡萄产区选择当地优质母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋。
授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；
(2)嫁接：
在3月将基部已经成熟的试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为一号苗；
(3)二次试管苗的获得：
选择一号苗做母本，优质香妃葡萄做父本，采取异地取粉方式；
在优质香妃葡萄父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；
选择一号苗母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋。
授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；
(4)二次嫁接：
在3月将基部已经成熟的二次试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为二号苗；
(5)育种：
以二号苗为砧木，以一号苗枝条为接穗进行第三次嫁接，用第三次嫁接成活的种苗枝条进行扦插，培育成优质葡萄新品种。
所述胚挽救培养步骤为，首先剥取胚珠；将果穗用流水冲洗3-5分钟，剪成3-5粒的小穗于烧杯中，置于超净工作台上，用75％乙醇浸泡约1分钟，无菌水冲洗3-5次，再用0.1％升汞消毒7分钟，无菌水冲洗3-5次，切开幼果取出胚珠接种于内装40mL培养基的100mL三角瓶中，每瓶接种10-20粒，胚珠培养基采用B5或Nistch为基本培养基，附加 BA(6-苄氨基嘌呤)0.1-1.0mg/L、IAA(吲哚乙酸)1.0-2.0mg/L、GA(赤霉酸)0.3-0.8mg/L、6％蔗糖、0.6％琼脂、0.1％活性炭。
在每次葡萄开花前在叶面喷洒0.05～0.1％浓度的硼酸溶液，在幼果期喷洒1-3％的过磷酸钙溶液，在果实生长后期喷洒0.02％的硫酸钾溶液。
所述一号苗在生长时进行避雨和防日灼处理。
该实施例得到的葡萄品种适合西南西区高温高湿的环境，品质好，产量高，耐湿、耐热、抗病。过冬无需任何保温防护措施。该品种葡萄对常见病，如：灰霉病、黑痘病、黑腐病的抗性较强。同时具有不裂果、耐贮运的优势。
实施例2
一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，步骤于下：
(1)试管苗的获得：
选择优质的巨峰做母本，野生葡萄做父本，采取异地取粉方式。
在野生葡萄父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部约一半发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；
到巨峰产区选择当地优质母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋；
授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；
(2)嫁接：
在3月将基部已经成熟的试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为一号苗；
(3)二次试管苗的获得：
选择一号苗做父本，优质香妃葡萄做母本，采取异地取粉方式；
在优质的香妃葡萄父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用。
选择一号苗母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋。
授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；
(4)二次嫁接：
在3月将基部已经成熟的二次试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为二号苗；
(5)育种：
以二号苗为砧木，以一号苗枝条为接穗进行第三次嫁接，用第三次嫁接成活的种苗枝条进行扦插，培育成适合西南地区生长的优质葡萄新品种。
所述胚挽救培养步骤为，首先剥取胚珠；将果穗用流水冲洗3-5分钟，剪成3-5粒的小穗于烧杯中，置于超净工作台上，用75％乙醇浸泡约1分钟，无菌水冲洗3-5次，再用0.1％升汞消毒7分钟，无菌水冲洗3-5次，切开幼果取出胚珠接种于内装40mL培养基的100mL三角瓶中，每瓶接种10-20粒，胚珠培养基采用B5或Nistch为基本培养基，附加 BA(6-苄氨基嘌呤)0.1-1.0mg/L、IAA(吲哚乙酸)1.0-2.0mg/L、GA(赤霉酸)0.3-0.8mg/L、 6％蔗糖、0.6％琼脂、0.1％活性炭。
在每次葡萄开花前在叶面喷洒0.05～0.1％浓度的硼酸溶液，在幼果期喷洒1-3％的过磷酸钙溶液，在果实生长后期喷洒0.02％的硫酸钾溶液。
所述一号苗在生长时进行避雨和防日灼处理。
该实施例得到的葡萄品种适合西南西区高温高湿的环境，品质好，产量高，耐湿、耐热、抗病。过冬无需任何保温防护措施。该品种葡萄对常见病，如：灰霉病、黑痘病、黑腐病的抗性较强。同时具有不裂果、耐贮运的优势。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，其特征在于，步骤如下：
(1)试管苗的获得：
选择优质无核葡萄做母本，野生葡萄做父本，采取异地取粉方式；
在当地的野生葡萄父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；
到优质无核葡萄产区选择当地优质母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋；
授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；
(2)嫁接：
在3月将基部已经成熟的试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为一号苗；
(3)二次试管苗的获得：
选择一号苗做母本，优质香妃葡萄做父本，采取异地取粉方式；
在优质香妃父本品种开花初期，采下发育正常的花序，去除顶部发育不好的小花序以及已经展开的花朵；将保留的健康花朵取下花冠及花药后用纱网过筛，在室温下凉干至花药裂开，装入处理干净的小瓶或光滑的纸袋中，封口，放在装有无水CaCO3的干燥器中，4℃低温保存，待用；
选择一号苗优质母本树上发育一致的花序若干，开花前1-2天进行人工去雄，去雄时间为早晨或上午，并去除发育不良及已经打开的花朵，保证母本的纯度；之后立即套袋和挂牌标记，待花朵柱头上开始分泌水滴状粘液时用脱脂棉蘸取备好的花粉点到柱头上，进行人工授粉，每天1次，连续授粉2-3次，授粉后立即套袋；
授粉40-55天后，视母本胚败育情况，从园间取回果穗，回到西南地区进行胚挽救培养；培养8周后，在无菌条件下剥取裸胚接种于胚萌发培养基中，继续培养10-15天，转移至成苗培养基进行继代培养直至成苗，培养条件为温度25℃±2℃，光照每天8h，光强度2000Lux；
(4)二次嫁接：
在3月将基部已经成熟的二次试管苗为接穗，枝条粗度1.5-2.0mm，长度3-4cm，砧木选择当地2-3年生且长势强的野生葡萄品种，采用常规劈接法进行嫁接，待新品种葡萄成活后命名为二号苗；
(5)育种：
以二号苗为砧木，以一号苗枝条为接穗进行第三次嫁接，用第三次嫁接成活的种苗枝条进行扦插，培育成优质葡萄新品种。
2.根据权利要求1所述的一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，其特征在于：所述胚挽救培养步骤为，首先剥取胚珠；将果穗用流水冲洗3-5分钟，剪成3-5粒的小穗于烧杯中，置于超净工作台上，用75％乙醇浸泡约1分钟，无菌水冲洗3-5次，再用0.1％升汞消毒7分钟，无菌水冲洗3-5次，切开幼果取出胚珠接种于内装40mL培养基的100mL三角瓶中，每瓶接种10-20粒，胚珠培养基采用B5或Ni stch为基本培养基，附加BA(6-苄氨基嘌呤)0.1-1.0mg/L、IAA(吲哚乙酸)1.0-2.0mg/L、GA(赤霉酸)0.3-0.8mg/L、6％蔗糖、0.6％琼脂、0.1％活性炭。
3.根据权利要求1所述的一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，其特征在于：在每次葡萄开花前在叶面喷洒0.05～0.1％浓度的硼酸溶液，在幼果期喷洒1-3％的过磷酸钙溶液，在果实生长后期喷洒0.02％的硫酸钾溶液。
4.根据权利要求1所述的一种基于异花授粉的优质葡萄选育方法，其特征在于：所述一号苗在生长时进行避雨和防日灼处理。
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| CN109006156A (zh) * | 2018-07-20 | 2018-12-18 | 南京农业大学 | 一种葡萄快速育苗方法 |
| CN109105251A (zh) * | 2018-08-22 | 2019-01-01 | 张东风 | 一种提高葡萄人工授粉成功率的方法 |
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| CN115517088A (zh) * | 2022-10-10 | 2022-12-27 | 宁夏大学 | 一种优质葡萄嫁接苗繁育方法 |
| CN116806688A (zh) * | 2023-08-03 | 2023-09-29 | 广西壮族自治区农业科学院 | 一种加快葡萄新品种选育的育种方法 |
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| CN103340102A (zh) * | 2013-06-26 | 2013-10-09 | 常德市宏户葡萄种植有限公司 | 一种适合湘北生长的优质高产葡萄品种的选育方法 |
| CN105850710A (zh) * | 2016-03-30 | 2016-08-17 | 山东省葡萄研究院 | 无核葡萄快速育种方法 |
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2017
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