CN107937311A - 一株高产γ‑氨基丁酸的嗜热链球菌、保存培养方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法 - Google Patents
一株高产γ‑氨基丁酸的嗜热链球菌、保存培养方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107937311A CN107937311A CN201711386926.9A CN201711386926A CN107937311A CN 107937311 A CN107937311 A CN 107937311A CN 201711386926 A CN201711386926 A CN 201711386926A CN 107937311 A CN107937311 A CN 107937311A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- streptococcus thermophilus
- aminobutyric acid
- producing gamma
- highly producing
- milk
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 180
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 title claims abstract description 90
- OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N (+/-)-DABA Natural products NCCC(N)C(O)=O OGNSCSPNOLGXSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 89
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 title claims abstract description 76
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 235000020167 acidified milk Nutrition 0.000 title claims description 27
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 23
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 27
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims abstract description 24
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims abstract description 24
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 22
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims abstract description 8
- 235000015138 kumis Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 34
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 20
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 claims description 18
- 108010009736 Protein Hydrolysates Proteins 0.000 claims description 15
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 15
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims description 12
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 11
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 11
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 10
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 9
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 9
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 7
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 claims description 5
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 claims description 4
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 claims description 4
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 claims description 3
- 108010058643 Fungal Proteins Proteins 0.000 claims 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 abstract description 9
- 239000008267 milk Substances 0.000 abstract description 9
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 abstract description 9
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 4
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 235000021552 granulated sugar Nutrition 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 108010084695 Pea Proteins Proteins 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 2
- 235000019702 pea protein Nutrition 0.000 description 2
- QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 2-Aminobutanoic acid Natural products CCC(N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001478240 Coccus Species 0.000 description 1
- QWCKQJZIFLGMSD-GSVOUGTGSA-N D-alpha-aminobutyric acid Chemical compound CC[C@@H](N)C(O)=O QWCKQJZIFLGMSD-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 244000088415 Raphanus sativus Species 0.000 description 1
- 235000006140 Raphanus sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000002082 anti-convulsion Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 230000007787 long-term memory Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 238000013081 phylogenetic analysis Methods 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 235000015170 shellfish Nutrition 0.000 description 1
- 230000000192 social effect Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 238000012070 whole genome sequencing analysis Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/46—Streptococcus ; Enterococcus; Lactococcus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1238—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt using specific L. bulgaricus or S. thermophilus microorganisms; using entrapped or encapsulated yoghurt bacteria; Physical or chemical treatment of L. bulgaricus or S. thermophilus cultures; Fermentation only with L. bulgaricus or only with S. thermophilus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/04—Preserving or maintaining viable microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/005—Amino acids other than alpha- or beta amino acids, e.g. gamma amino acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一株高产γ‑氨基丁酸嗜热链球菌，其保藏号为CGMCC No.14810；本申请还公开了该高产γ‑氨基丁酸的嗜热链球菌的保存培养方法，包括如下步骤：(1)从酸马奶中分离出含γ‑氨基丁酸的嗜热链球菌；(2)将步骤(1)得到的产γ‑氨基丁酸嗜热链球菌接种于适合嗜热链球菌生长的斜面培养基上；(3)经步骤(2)斜面培养后，再接种于液体培养基中厌氧培养；本发明还公开了利用产γ‑氨基丁酸嗜热链球菌发酵的方法。本发明的优点在于，该菌种能高产γ‑氨基丁酸，并且在牛奶中生长速度快，用该菌制备的发酵产品中γ‑氨基丁酸的含量高，具有极大的应用价值。
Description
技术领域
本发明属于微生物及微生物发酵技术领域，具体为一株高产γ-氨基丁酸嗜热链球菌、保存培养的方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法。
背景技术
γ-氨基丁酸(γ-amino butyric acid，GABA)，是一种天然的功能性非蛋白质氨基酸，广泛存在于茶、萝卜叶、甲壳类、哺乳动物等各种动植物体内。人体中的γ-氨基丁酸不仅作为抑制性神经传达物质高浓度存在于中枢神经系统，还存在于肠道等末梢脏器中。γ-氨基丁酸是一种生理活性成分，具有激活脑内葡萄糖代谢、降血氨、抗惊厥、降血压、增进脑活力、增加神经营养、增强长期记忆、促进生长激素分泌、活化肾功能、肝功能，改善更年期综合症等重要生理功能。γ-氨基丁酸有很好的医药应用前景；同时又是一种新型食品活性因子，在功能食品中的应用已成为研究热点。
现有技术中，一般的功能食品都是通过外添加的方式使其富含γ-氨基丁酸，而天然的γ-氨基丁酸价格较贵，这限制了其在食品中的添加量，限制了γ-氨基丁酸的大规模应用。现有研究尝试将产γ-氨基丁酸的菌种应用到食品中，但是大部分学者筛选到的产γ-氨基丁酸的菌种或者有的产量过低，或者是不允许在食品中应用的菌种或者在牛奶中不能生长，同样地限制了产γ-氨基丁酸的菌种在发酵乳中的应用，该现状亟待解决。
发明内容
为解决现有技术国内外γ-氨基丁酸强化产品都是通过添加γ-氨基丁酸配料来实现的，生产生本较高，公开报道的产γ-氨基丁酸的菌种不能在牛奶中生长，或者在牛奶中生长产量也比较低，这两种方式生产的产品都可能存在产品中γ-氨基丁酸含量较低，不能达到其功能发挥的添加量的缺陷，本发明提供了一株高产γ-氨基丁酸嗜热链球菌、保存培养的方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法，实现的目的为该菌种能在牛奶中快速生长并且产生较高产量的γ-氨基丁酸，具有极大的应用价值。
为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案：本发明提供的一株高产 γ-氨基丁酸的嗜热链球菌，该嗜热链球菌保藏号为CGMCC No.14810，分 类命名为嗜热链球菌Streptococcus thermophilus。该菌种已于申请日前保藏 于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。地址：北京市 朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101，保藏 日期是2017年10月16日。
本发明提供的产γ-氨基丁酸嗜热链球菌的培养方法，其包括如下步骤：
(1)从酸马奶中分离出产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌；
(2)将步骤(1)得到的产γ-氨基丁酸嗜热链球菌接种于适合嗜热链球菌生长的斜面培养基上；
(3)经步骤(2)斜面培养后，再接种于液体培养基中厌氧培养。
本发明得到的这种嗜热链球菌能够在牛奶中将谷氨酸或谷氨酸钠转化为γ-氨基丁酸，得到的含γ-氨基丁酸发酵乳可以直接食用或者配置饮料或者其他产品，以发挥其保健功效，降低传统生产γ-氨基丁酸配料时需要后提取和加工的成本。
优选的，所述步骤(2)中适合嗜热链球菌生长的斜面培养基为M17培养基。
进一步的，所述步骤(2)中斜面培养的PH为6.5-7.5，温度为37-45℃，培养时间为24-72h。
进一步的，所述步骤(3)中液体培养基为脱脂牛奶。
进一步的，所述步骤(3)中在液体培养基中培养的温度为37-42℃，培养时间为16-24h。
本发明还要求保护经过上述培养方法得到的产γ-氨基丁酸嗜热链球菌，保藏号是CGMCC No.14810。
本发明还公开了制备含上述产γ-氨基丁酸嗜热链球菌的发酵乳的方法，包括如下步骤：(1)斜面活化培养：将产γ-氨基丁酸嗜热链球菌采用 M17斜面培养基活化；
(2)液体种子培养：将步骤(1)活化后的高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养；
(3)接种发酵：将经过步骤(2)培养的液体种子与待发酵乳品按照体积比5％～10％进行接种后厌氧发酵获得富含γ-氨基丁酸的发酵乳。
进一步的，所述步骤(1)中M17斜面培养基的PH为6.5-7.5，活化温度为37-45℃，活化时间为24-72h。
进一步的，所述步骤(2)中液体培养基为脱脂牛奶，液体培养基中培养的温度为37-42℃，培养时间为16-24h。
进一步的，步骤(3)中的待发酵乳品添加有水解蛋白，其添加量为 1-10g/kg。
进一步的，水解蛋白包括大豆水解蛋白、牛奶水解蛋白、豌豆水解蛋白、酵母水解蛋白中任意一种或一种以上。
进一步的，步骤(3)中的待发酵乳品添加有谷氨酸钠，其添加量 1-20g/Kg。
进一步的，以上所述的发酵温度为37-42℃，发酵时间为24-72h。
本发明采用上述技术方案，包括以下有益效果：通过本发明的菌种可以量产γ-氨基丁酸，γ-氨基丁酸产量可以达到1-7g/kg产品，并可以通过控制谷氨酸钠和蛋白水解物的量，富集所需的γ-氨基丁酸产量。传统的γ- 氨基丁酸配料是通过发酵，然后分离纯化获得，产品成本高。传统的富含γ- 氨基丁酸产品仅仅是添加了这种功能配料，所以当添加量高时成本也较高，本发明直接通过发酵法获得含γ-氨基丁酸的乳制品，节约了购买γ-氨基丁酸配料的成本，具有极大的商业价值和市场竞争力。γ-氨基丁酸配料具有多种功能性可以满足消费者的不同健康需求，具有极大的社会意义。
附图说明
图1为本发明嗜热链球菌基于基因组的进化树分析图图谱
该菌的全基因序列在NCBI上的Accession number CP025399。
在ncbi上选取全基因测序的嗜热链球菌16株，其与本菌株的基于全基因组的进化树分析如图1所示。
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明做进一步的详细描述。
实施例一：本发明提供的一种产γ-氨基丁酸嗜热链球菌的培养方法，包括如下步骤：
(1)从酸马奶中分离出含γ-氨基丁酸的嗜热链球菌；
(2)将步骤(1)得到的产γ-氨基丁酸嗜热链球菌接种于适合嗜热链球菌生长的斜面培养基上；
(3)经步骤(2)斜面培养后，再接种于液体培养基中厌氧培养。
所述步骤(2)中适合嗜热链球菌生长的斜面培养基为M17培养基，所述步骤(2)中斜面培养的PH为6.5，温度为37℃，培养时间为24h。所述步骤(3)中液体培养基为脱脂牛奶。所述步骤(3)中在液体培养基中培养的温度为37℃，培养时间为24h。
本发明还公开了利用产γ-氨基丁酸嗜热链球菌发酵的方法，包括如下步骤：(1)斜面活化培养：将高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌采用M17斜面培养基活化；
(2)液体种子培养：将步骤(1)活化后的高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养；
(3)接种发酵：将经过步骤(2)培养的液体种子与待发酵乳品按照体积比5％进行接种后厌氧发酵获得富含γ-氨基丁酸的发酵乳。
所述步骤(1)中M17斜面培养基的PH为6.5，活化温度为37℃，活化时间为24h。所述步骤(2)中液体培养基为脱脂牛奶，液体培养基中培养的温度为37℃，培养时间为24h。所述步骤(3)中添加的水解蛋白包括大豆水解蛋白、牛奶水解蛋白，添加量为1g/kg，所述添加量是指水解蛋白在发酵产物中的质量浓度。所述步骤(3)中厌氧培养后的液体培养基与牛奶的体积比为10:100，还可添加白砂糖、谷氨酸等现有技术发酵乳中常见的原材料，发酵的温度为42℃，发酵时间为24h。获得得含γ-氨基丁酸1.2g/Kg 的富含γ-氨基丁酸的发酵乳。
实施例二：本发明提供的一种产γ-氨基丁酸嗜热链球菌的培养方法，包括如下步骤：
(1)从酸马奶中分离出含γ-氨基丁酸的嗜热链球菌；
(2)将步骤(1)得到的产γ-氨基丁酸嗜热链球菌接种于适合嗜热链球菌生长的斜面培养基上；
(3)经步骤(2)斜面培养后，再接种于液体培养基中厌氧培养。
所述步骤(2)中适合嗜热链球菌生长的斜面培养基为M17培养基，所述步骤(2)中斜面培养的PH为7.5，温度为45℃，培养时间为72h。所述步骤(3)中液体培养基为脱脂牛奶。所述步骤(3)中在液体培养基中培养的温度为42℃，培养时间为16h。
经上述方法培养的产γ-氨基丁酸嗜热链球菌，保藏号为CGMCC No.14810。
本发明还公开了利用产γ-氨基丁酸嗜热链球菌制备发酵乳的方法，包括如下步骤：(1)斜面活化培养：将高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌采用M17 斜面培养基活化；
(2)液体种子培养：将步骤(1)活化后的高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养；
(3)接种发酵：将经过步骤(2)培养的液体种子与待发酵乳品按照体积比10％进行接种后厌氧发酵获得富含γ-氨基丁酸的发酵乳。
所述步骤(1)中M17斜面培养基的PH为7.5，活化温度为45℃，活化时间为72h。所述步骤(2)中液体培养基为脱脂牛奶，液体培养基中培养的温度为42℃，培养时间为16h。所述步骤(3)中添加的水解蛋白包括豌豆水解蛋白、酵母水解蛋白，添加量为10g/kg，所述添加量是指水解蛋白在发酵产物中的质量浓度。所述步骤(3)中厌氧培养后的液体培养基与牛奶的体积比为5:100，还可添加白砂糖、谷氨酸等现有技术发酵乳中常见的原材料，发酵的温度为37℃，发酵时间为72h。获得含γ-氨基丁酸6g/Kg的发酵乳。
实施例三：本发明提供的一种产γ-氨基丁酸嗜热链球菌的培养方法，包括如下步骤：
(1)从酸马奶中分离出产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌；
(2)将步骤(1)得到的产γ-氨基丁酸嗜热链球菌接种于适合嗜热链球菌生长的斜面培养基上；
(3)经步骤(2)斜面培养后，再接种于液体培养基中厌氧培养。
所述步骤(2)中适合嗜热链球菌生长的斜面培养基为M17培养基，所述步骤(2)中斜面培养的PH为7，温度为42℃，培养时间为48h。所述步骤(3)中液体培养基为脱脂牛奶。所述步骤(3)中在液体培养基中培养的温度为39℃，培养时间为20h。
经上述方法培养的γ-氨基丁酸嗜热链球菌，保藏号为CGMCC No.14810。
本发明还公开了利用产γ-氨基丁酸嗜热链球菌制备发酵乳的方法，包括如下步骤：(1)斜面活化培养：将高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌采用M17 斜面培养基活化；
(2)液体种子培养：将步骤(1)活化后的高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养；
(3)接种发酵：将经过步骤(2)培养的液体种子与待发酵乳品按照体积比7％进行接种后厌氧发酵获得富含γ-氨基丁酸的发酵乳。
所述步骤(1)中M17斜面培养基的PH为7，活化温度为42℃，活化时间为48h。所述步骤(2)中液体培养基为脱脂牛奶，液体培养基中培养的温度为38℃，培养时间为20h。所述步骤(3)中添加的水解蛋白包括豌豆水解蛋白、酵母水解蛋白，添加量为5g/kg，所述添加量是指水解蛋白在发酵产物中的质量浓度。所述步骤(3)中厌氧培养后的液体培养基与牛奶的体积比为8:100，还可添加白砂糖、谷氨酸等现有技术发酵乳中常见的原材料，发酵的温度为39℃，发酵时间为48h。获得含γ-氨基丁酸7g/Kg的富含γ- 氨基丁酸的发酵乳。
本发明得到的产γ-氨基丁酸嗜热链球菌菌株在只添加MSG的情况下发酵72h产量可以达到5g/kg，在添加蛋白水解物的情况下产量在48h就可以达到5g/kg，缩短了发酵时间提高了生产效率。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (13)
1.一株高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌，其特征在于，该嗜热链球菌保藏号为CGMCCNo.14810。
2.权利要求1所述的高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌的保存培养方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：
(1)从酸马奶中分离出高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌，其保藏号为CGMCC No.14810；
(2)将步骤(1)得到的高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌接种于适合嗜热链球菌生长的斜面培养基上；
(3)嗜热链球菌经步骤(2)斜面培养后，再接种于液体培养基中厌氧培养。
3.根据权利要求2所述的高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌的保存培养方法，其特征在于，步骤(2)中适合嗜热链球菌生长的斜面培养基为M17培养基。
4.根据权利要求2所述的高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌的保存培养方法，其特征在于，步骤(2)中斜面培养基的PH为6.5-7.5，温度为37-45℃，培养时间为24-72h。
5.根据权利要求2所述的高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌的保存培养方法，其特征在于，步骤(3)中液体培养基为脱脂牛奶。
6.根据权利要求2所述的高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌的保存培养方法，其特征在于，步骤(3)中在液体培养基中培养的温度为37-42℃，培养时间为16-24h。
7.利用高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌制备发酵乳的方法，其特征在于，该方法包括步骤如下：
(1)斜面活化培养：将高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌采用M17斜面培养基活化；
(2)液体种子培养：将步骤(1)活化后的高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌添加到液体培养基中进行厌氧培养；
(3)接种发酵：将经过步骤(2)培养的液体种子与待发酵乳品按照体积比5％～10％进行接种后厌氧发酵获得富含γ-氨基丁酸的发酵乳。
8.根据权利要求7所述的利用高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌制备发酵乳的方法，其特征在于，步骤(1)中M17斜面培养基的pH为6.5-7.5，活化温度为37-45℃，活化时间为24-72h。
9.根据权利要求7所述的利用高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌制备发酵乳的方法，其特征在于，步骤(2)中液体培养基为脱脂牛奶，液体培养基中培养的温度为37-42℃，培养时间为16-24h。
10.根据权利要求7所述的利用高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌制备发酵乳的方法，其特征在于，步骤(3)中的待发酵乳品添加有水解蛋白，其添加量为1-10g/kg。
11.根据权利要求10所述的利用高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌制备发酵乳的方法，其特征在于，水解蛋白包括大豆水解蛋白、牛奶水解蛋白、豌豆水解蛋白、酵母水解蛋白中任意一种或一种以上。
12.根据权利要求7所述的利用高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌制备发酵乳的方法，其特征在于，步骤(3)中的待发酵乳品添加有谷氨酸钠，其添加量1-20g/Kg。
13.根据权利要求7、10、11或12所述的利用高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌制备发酵乳的方法，其特征在于，发酵的温度为37-42℃，发酵时间为24-72h。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201711386926.9A CN107937311B (zh) | 2017-12-20 | 2017-12-20 | 一株高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌、保存培养方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201711386926.9A CN107937311B (zh) | 2017-12-20 | 2017-12-20 | 一株高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌、保存培养方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107937311A true CN107937311A (zh) | 2018-04-20 |
| CN107937311B CN107937311B (zh) | 2021-05-28 |
Family
ID=61941565
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201711386926.9A Active CN107937311B (zh) | 2017-12-20 | 2017-12-20 | 一株高产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌、保存培养方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN107937311B (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109486727A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-03-19 | 光明乳业股份有限公司 | 一种富含γ-氨基丁酸的乳品发酵剂及其制备方法 |
| CN110283855A (zh) * | 2019-06-20 | 2019-09-27 | 绿雪生物工程(深圳)有限公司 | 一种提高嗜热链球菌210202菌株产gaba能力的方法 |
| CN112616936A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-04-09 | 光明乳业股份有限公司 | 一种辅助睡眠的乳粉及其制备方法 |
| CN113272418A (zh) * | 2021-03-17 | 2021-08-17 | 微康益生菌(苏州)股份有限公司 | 一种产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌及其应用 |
| CN114437971A (zh) * | 2022-01-24 | 2022-05-06 | 浙江一鸣食品股份有限公司 | 一株高产γ-氨基丁酸并高效转化谷氨酸钠的嗜热链球菌及其培养方法和应用 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1710088A (zh) * | 2005-06-24 | 2005-12-21 | 南京农业大学 | 利用唾液链球菌嗜热亚种生产γ－氨基丁酸的方法 |
| WO2007097374A1 (ja) * | 2006-02-21 | 2007-08-30 | Kikkoman Corporation | γ-アミノ酪酸生産能を有する乳酸菌 |
| KR20080100068A (ko) * | 2007-05-11 | 2008-11-14 | 우석대학교 산학협력단 | 락토바실러스 부크네리 ｏｐυ-2 균주 및 이를 함유하는발효유 |
| CN104293699A (zh) * | 2014-09-17 | 2015-01-21 | 山东大学 | 一株具有γ-氨基丁酸和谷胱甘肽合成能力的嗜热链球菌及其应用 |
-
2017
- 2017-12-20 CN CN201711386926.9A patent/CN107937311B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1710088A (zh) * | 2005-06-24 | 2005-12-21 | 南京农业大学 | 利用唾液链球菌嗜热亚种生产γ－氨基丁酸的方法 |
| WO2007097374A1 (ja) * | 2006-02-21 | 2007-08-30 | Kikkoman Corporation | γ-アミノ酪酸生産能を有する乳酸菌 |
| KR20080100068A (ko) * | 2007-05-11 | 2008-11-14 | 우석대학교 산학협력단 | 락토바실러스 부크네리 ｏｐυ-2 균주 및 이를 함유하는발효유 |
| CN104293699A (zh) * | 2014-09-17 | 2015-01-21 | 山东大学 | 一株具有γ-氨基丁酸和谷胱甘肽合成能力的嗜热链球菌及其应用 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| LIN CHEN等: "γ-Aminobutyric acid-rich yogurt fermented by Streptococcus salivarius subsp. thermophiles fmb5 apprars to have anti-diabetic effect on streptozotocin-induced diabetic mice", 《JOURNAL OF FUNCTIONAL FOODS》 * |
| 杨胜远等: "一株产谷氨酸脱羧酶乳酸菌的鉴定及其酶学性质", 《工业微生物》 * |
| 许本发等编著: "《酸奶和乳酸菌饮料加工》", 31 January 1994, 中国轻工业出版社 * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109486727A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-03-19 | 光明乳业股份有限公司 | 一种富含γ-氨基丁酸的乳品发酵剂及其制备方法 |
| CN110283855A (zh) * | 2019-06-20 | 2019-09-27 | 绿雪生物工程(深圳)有限公司 | 一种提高嗜热链球菌210202菌株产gaba能力的方法 |
| CN112616936A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-04-09 | 光明乳业股份有限公司 | 一种辅助睡眠的乳粉及其制备方法 |
| CN113272418A (zh) * | 2021-03-17 | 2021-08-17 | 微康益生菌(苏州)股份有限公司 | 一种产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌及其应用 |
| WO2022193163A1 (zh) * | 2021-03-17 | 2022-09-22 | 微康益生菌(苏州)股份有限公司 | 一种产γ-氨基丁酸的嗜热链球菌及其应用 |
| CN114437971A (zh) * | 2022-01-24 | 2022-05-06 | 浙江一鸣食品股份有限公司 | 一株高产γ-氨基丁酸并高效转化谷氨酸钠的嗜热链球菌及其培养方法和应用 |
| CN114437971B (zh) * | 2022-01-24 | 2023-08-08 | 浙江一鸣食品股份有限公司 | 一株高产γ-氨基丁酸并高效转化谷氨酸钠的嗜热链球菌及其培养方法和应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN107937311B (zh) | 2021-05-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107937311A (zh) | 一株高产γ‑氨基丁酸的嗜热链球菌、保存培养方法及利用该嗜热链球菌制备发酵乳的方法 | |
| CN104472879A (zh) | 一种茶渣饲料添加剂及其制备方法 | |
| CN104351901A (zh) | 一种益生菌发酵小球藻饮料及其制作方法 | |
| CN113969242B (zh) | 一种高产γ-氨基丁酸的酿酒酵母菌以及在制备γ-氨基丁酸产品中的应用 | |
| CN105249100A (zh) | 发酵果蔬汁与甜酒酿复合功能饮料的生产方法 | |
| CN102925504B (zh) | 微生物发酵合成γ-氨基丁酸的方法及发酵培养基 | |
| CN106754619A (zh) | 一种在谷物培养基中添加中药组分促进益生菌生长的方法 | |
| CN103609881B (zh) | 一种含益生菌的肉羊发酵精饲料及其制备方法 | |
| WO2020140319A1 (zh) | 副干酪乳杆菌及其应用 | |
| CN104164459A (zh) | 利用发酵提高糙米γ—氨基丁酸的方法 | |
| CN109007370A (zh) | 复合功能仔猪饲料添加剂及其制备方法 | |
| CN109315605A (zh) | 一种花生粕的发酵方法、该方法制备的发酵花生粕及其应用 | |
| CN105661230A (zh) | 小扁豆发酵生产益生菌功能性饮料和食品 | |
| CN104783167B (zh) | 无糖复合代餐酵素液及其制备工艺 | |
| CN105670959A (zh) | 一株益生菌菌株及其应用 | |
| CN102860375B (zh) | 一种红茶型乳酸菌茶饮料及其生产方法 | |
| CN104522812B (zh) | 一种冬虫夏草活菌饮料及其生产方法 | |
| CN107361275A (zh) | 一种采用复合乳酸菌发酵浓缩苹果汁的方法及发酵果汁 | |
| CN112890134B (zh) | 一种发酵牛油果及其制备方法 | |
| CN104975051B (zh) | 一种富集桑叶中gaba的方法 | |
| CN102754696A (zh) | 一种冬虫夏草菌株及其制备的虫草核桃肽保健饮品 | |
| CN104757275B (zh) | 枯草芽孢菌液体发酵甘草微生态制剂、制备方法及其作为畜禽饲料添加剂的应用 | |
| CN109864233A (zh) | 一种富含活性植物乳杆菌的发酵苹果汁及其制备方法 | |
| CN104432373B (zh) | 一种乳酸菌发酵茶树菇制备gaba饮料的方法 | |
| CN108410917A (zh) | 一种乳酸杆菌产γ-氨基丁酸的培养基及其制剂和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |