[go: up one dir, main page]

CN107474046B - 一类吡啶并三氮唑化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

一类吡啶并三氮唑化合物及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN107474046B
CN107474046B CN201710549928.9A CN201710549928A CN107474046B CN 107474046 B CN107474046 B CN 107474046B CN 201710549928 A CN201710549928 A CN 201710549928A CN 107474046 B CN107474046 B CN 107474046B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
formula
preparation
reaction
compounds
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201710549928.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107474046A (zh
Inventor
吴少瑜
吕琳
张辉武
田楠楠
庄宇鑫
马韵词
陈凯
刘馨
党文政
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Huateng Biomedical Technology Co ltd
Original Assignee
Southern Medical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Southern Medical University filed Critical Southern Medical University
Priority to CN201710549928.9A priority Critical patent/CN107474046B/zh
Publication of CN107474046A publication Critical patent/CN107474046A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107474046B publication Critical patent/CN107474046B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一类吡啶并三氮唑化合物及其制备方法和应用。发明人经过长期深入研究，制备了一类具有SMO靶点抑制活性的化合物A01～A20，属于一类吡啶并三氮唑化合物，通过分子对接实验，可以看出本发明化合物可以能够与标靶蛋白SMO形成强有力的结合作用；并且对多种肿瘤具有优良的抑制作用，有望用于制备SMO靶点抑制剂及抗肿瘤药物。本发明化合物制备方法工艺简单，用时短，大大降低药物的成本，适合大规模生产。

Description

一类吡啶并三氮唑化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及医药领域，更具体地涉及一类吡啶并三氮唑化合物及其制备方法和应用。
背景技术
随着人口老龄化、生态环境日趋恶劣和不健康生活方式等原因的增多，我国肿瘤的发病率持续上升，肿瘤已经成为不可回避的严重威胁生命的重要原因之一。这使得抗肿瘤药物的研发始终是药物研发最活跃的领域。传统的化疗药物基本都是细胞毒药物，由于选择性低、在杀伤肿瘤细胞的同时，导致正常组织和细胞也受到损害。随着对肿瘤发生发展研究的深入，随着药物研发与生命科学的前沿技术如基因组学、蛋白质组学、生物芯片、生物信息学的紧密结合，肿瘤领域的新药研发已经从传统的化疗药物逐渐转向靶向药物。所谓靶向药物是针对肿瘤发生发展过程中特定的分子设计的药物，他们是能选择性杀伤肿瘤细胞，而不会波及肿瘤周围的正常组织的药物，具有高选择性、毒性小等特征。靶向药物的研发已经成为目前抗肿瘤药物研发的热点之一。其中在许多肿瘤中异常活化的刺猬信号通路(Hedgehog，HH)中关键靶点抑制剂的研发越来越受到重视。
Hedgehog信号通路主要参与细胞信号转导，具有高度保守性，最初是由Wieschaus和Nusslein-Volhard在对果蝇进行突变体筛选时发现的，由于Hedghog基因突变会导致果蝇幼虫体出现许多形似受惊刺猬的刺突，故命名为“刺猬”基因(Hedgehog)。随后对其深入研究发现，Hedgehog信号通路在哺乳动物中也存在，主要是由Hedgehog配体，跨膜蛋白受体Patched，Smoothened(SMO)蛋白及下游转录因子Gli蛋白组成。通过对其功能研究表明，Hedgehog信号通路的异常激活在许多恶性肿瘤发生发展中起着重大作用，因此Hedgehog信号通路的靶向抑制剂可用于抑制恶性肿瘤的增殖与转移。在Hh信号通路中，Hh配体、SMO蛋白和Gli转录因子都可以成为靶向抗肿瘤小分子化合物的靶点，其中SMO蛋白在信号通路中具有枢纽作用，成药性最好，所以SMO蛋白已经成为小分子化合物的热门靶点。
目前虽然SMO蛋白靶点小分子化合物层出不穷，但仅有基因泰克公司的Vismodegib和诺华公司的Sonidegib作为Hh通路SMO蛋白的抑制剂在美国成功上市并用于临床的肿瘤靶向治疗，但这两个仅有的SMO靶点抑制剂在临床应用中发现有严重的不良反应，并出现了耐药，目前我国还没有具有自主知识产权的SMO靶点抑制剂进入临床研究，因此新型的SMO靶点小分子化合物并应用于临床是非常重要的。
发明内容
本发明的目的在于提供一类吡啶并三氮唑化合物及其制备方法和应用。
本发明所采取的技术方案是：
吡啶并三氮唑化合物或其药学上可接受的盐，所述吡啶并三氮唑化合物选自以下任意一种结构：
吡啶并三氮唑化合物的制备方法，包括如下步骤：
(1)在三氯氧磷溶剂中，将式(Ⅲ)化合物与式(Ⅳ)化合物加热回流反应，制备式(Ⅴ)化合物；
(2)在乙醇溶剂中，加入催化剂和还原剂，将式(Ⅴ)化合物加热回流反应，制备式(Ⅱ)化合物；
(3)将式(Ⅱ)化合物分别与R1～R20所示化合物进行缩合酰化反应，分别得权利要求1所述的化合物A01～A20；
其中，式(Ⅱ)、(Ⅲ)、(Ⅳ)、(Ⅴ)的结构式分别如下：
R1～R20所示化合物的结构式如下：
进一步的，上述制备方法具体步骤为：
(1)在三氯氧磷溶剂中，在通氮气保护下，将式(Ⅲ)化合物与式(Ⅳ)化合物加热回流反应8～12小时，加热温度为100～120℃，分离纯化产物获得式(Ⅴ)化合物；
(2)在乙醇溶剂中，加入催化剂和还原剂，搅拌均匀后，加入式(Ⅴ)化合物，加热至70～90℃，回流反应3～5h，反应结束后分离纯化，获得式(Ⅱ)化合物；
(3)在甲苯溶剂中，将R1～R20所示化合物分别与二氯亚砜加热至回流反应2.5～3.5小时，获得酰氯，备用；在二氯甲烷溶剂中，加入式(Ⅱ)化合物和催化剂，搅拌均匀后，加入酰氯，室温搅拌反应过夜，分别生成化合物A01～A20。
进一步的，步骤(1)中，分离纯化的具体操作为：反应结束后，蒸除三氯氧磷溶剂，搅拌下将反应液倒入冰水中，析出棕灰色固体，过滤，烘干。
进一步的，步骤(2)中，催化剂为铁粉，还原剂为饱和氯化铵水溶液，分离纯化的具体操作为：反应结束后，蒸除乙醇溶剂，加水，调节pH至8.5～9.5，二氯甲烷萃取，合并有机相，水洗，盐水洗，干燥过滤蒸干，乙酸乙酯冲洗，过滤，得土灰色固体，烘干。
进一步的，步骤(3)中，回流反应结束后，降温至室温，旋蒸除去甲苯溶剂和二氯亚砜，用二氯甲烷溶解酰氯，备用。
进一步的，步骤(3)中，催化剂为DIPEA，生成的A01～A20化合物采用柱层析纯化。
上述所述吡啶并三氮唑化合物和/或其药学上可接受的盐在制备SMO蛋白抑制剂中的应用。
上述所述的吡啶并三氮唑化合物和/或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤制剂中的应用。
进一步的，所述肿瘤为结肠癌、乳腺癌、非小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞癌、肺大细胞癌。
本发明的有益效果是：
发明人经过长期深入研究，制备了一类具有SMO靶点抑制活性的A01～A20所示结构化合物，属于一类吡啶并三氮唑化合物，通过分子对接实验，可以看出本发明化合物可以能够与标靶蛋白SMO形成强有力的结合作用；并且对多种肿瘤具有优良的抑制作用，有望用于制备SMO靶点抑制剂及抗肿瘤药物。本发明化合物制备方法工艺简单，用时短，大大降低药物的成本，适合大规模生产。
附图说明
图1为化合物与SMO蛋白之间的氢键作用，空心箭头提示的为SMO蛋白上的氨基酸分子；实心箭头指示的为化合物的分子结构；化合物与SMO蛋白之间虚线为所形成的氢键。
具体实施方式
本发明中，术语“本发明化合物”是指A01～A20所示结构化合物，该术语还包括A01～A20化合物的各种晶型形式、光学异构体、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物。
本发明中，术语“SMO蛋白”是指平滑蛋白(smoothened protein)，是7个跨膜结构域蛋白，隶属于G蛋白偶联受体FZ/SMO超级家族成员，是肿瘤发生形成相关转导信号通路Hedgehog信号通路的关键调节靶点。
本发明中，术语“药学上可接受的”的成分是指适用于人和/或动物而无过度不良副反应(如毒性、刺激和变态反应)，即有合理的效益/风险比的物质。
本发明中，术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物与酸或碱所形成的适合用作药物的盐。药学上可接受的盐包括无机盐和有机盐。一类优选的盐是本发明化合物与酸形成的盐。适合形成盐的酸包括但并不限于：盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸，甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、苦味酸、甲磺酸、苯甲磺酸，苯磺酸等有机酸；以及天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸。
本发明中，术语“IC50”是指半数抑制浓度，即一定浓度的某种药物诱导肿瘤细胞凋亡50％，该浓度称为IC50。
本发明中，术语“MTT法”是指是一种检测细胞存活和生长的方法，其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。因蓝紫色结晶物的生成量与活细胞数成正比，通过使用二甲亚砜(DMSO)溶解细胞中沉积的蓝紫色结晶物，利用酶联免疫检测仪对溶液吸光度值(OD)进行测定，可以获得相应的细胞活力情况。
下述实施例作为示例，而不应当是以任何方式对本发明的限制。除非另外说明，份数是重量份数，压力为或接近大气压。本发明所用的所有试剂原料均为商业渠道获得。
实施例1、吡啶并三氮唑化合物的制备方法
(1)依次向干燥的反应瓶中投入3-氯-2-肼基吡啶(式Ⅲ)(20g)，2-氯-5-硝基-苯甲酸(式Ⅳ)(30g)，三氯氧磷(400ml)，氮气保护，加热(110℃)至回流反应过夜，蒸除三氯氧磷，搅拌下将反应液倒入冰水中，析出棕灰色固体，过滤，烘干，得8-氯-3-(5-硝基-2-氯苯基)-[1,2,4]三氮唑并[4,3-a]吡啶(式Ⅴ)；
(2)向反应瓶中投入铁粉(10g)，饱和氯化铵水溶液(25ml)，乙醇(25ml)，搅拌，再加入8-氯-3-(5-硝基-2-氯苯基)-[1,2,4]三氮唑并[4,3-a]吡啶(式Ⅴ)(11g)，加热(60℃)至回流反应4h，蒸除乙醇，加水，调节pH＝9，二氯甲烷萃取，合并有机相，水洗，盐水洗，干燥过滤蒸干，乙酸乙酯冲洗，过滤，得土灰色固体，烘干，得8-氯-3-(5-氨基-2-氯苯基)-[1,2,4]三氮唑并[4,3-a]吡啶基本母核结构化合物(式Ⅱ)；
(3)向反应瓶中分别投入化合物R1～R20(见表1)中的一种(262mg)，甲苯(1ml)，再加入二氯亚砜(0.55ml)，加热(90℃)至回流反应3小时，体系溶清，降温至室温，旋蒸除去溶剂和过量的二氯亚砜，用二氯甲烷溶解获得酰氯溶液，备用；向另一反应瓶中投入8-氯-3-(5-氨基-2-氯苯基)-[1,2,4]三氮唑并[4,3-a]吡啶(式Ⅱ)(400mg)，二氯甲烷(15ml)，DIPEA(554mg)，搅拌，室温下滴加上述制备的酰氯溶液(5.5ml)，室温搅拌反应过夜，反应结束后，进行柱层析分离纯化，根据投入的化合物R1～R20分别获得得化合物A01～A20，即为SMO蛋白抑制剂，A01～A20的结构式见表1。
表1化合物R1～R20和A01～A20的结构
对本发明制备获得的化合物A01～A20进行核磁共振氢谱(1H-NMR)分析，各化合物的结构表征如下。
1.化合物A01
1H-NMR(d6-DMSO):δ10.65(s,1H)；8.20(t,1H)；8.17(d,1H)；8.13(q,1H)；7.98(m,2H)；7.76(d,1H)；7.70(d,1H)；7.62(m,1H)；7.55(m,2H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ166.36,147.97,146.19,139.24,134.84,132.41,130.91,128.97,128.20,127.92,127.55,125.60,124.52,124.39,124.13,120.65,114.88；
2.化合物A02
1H-NMR(d6-DMSO):δ10.95(s,1H)；8.15(m,2H)；8.01(m,1H)；7.77(d,1H)；7.71(d,1H)；7.62(m,2H)；7.51(m,2H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ165.78,148.00,146.16,138.87,136.87,131.91,131.10,130.38,130.22,129.44,127.94,127.83,125.87,124.19,123.86,123.76,120.63,114.86；
3.化合物A03
1H-NMR(d6-DMSO):δ10.73(s,1H)；8.17(m,2H)；8.11(m,1H)；8.04(t,1H)；7.94(m,1H)；7.78(d,1H)；7.70(m,2H)；7.60(t,1H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ164.86,147.99,146.14,138.93,136.78,133.76,132.24,131.02,127.93,127.85,127.07,125.66,124.65,124.49,124.15,120.65,114.89；
4.化合物A04
1H-NMR(d6-DMSO):δ10.70(s,1H)；8.17(m,2H)；8.11(q,1H)；8.01(m,2H)；7.77(d,1H)；7.71(q,1H)；7.65(m,2H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ165.22,147.98,146.15,139.03,137.27,133.50,130.95,130.17,129.07,127.93,127.74,125.63,124.60,124.46,124.14,120.65,114.89；
5.化合物A05
1H-NMR(d6-DMSO):δ10.98(s,1H)；8.16(d,1H)；8.11(d,1H)；7.99(q,1H)；7.79(m,2H)；7.70(m,2H)；7.59(m,1H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ164.86,148.00,146.12,138.68,135.69,131.71,131.14,130.87,129.79,128.05,125.91,124.19,123.93,123.80,120.63,114.87；
6.化合物A06
1H-NMR(d6-DMSO):δ10.88(s,1H)；8.21～8.16(m,4H)；8.11(m,3H)；7.79(d,1H)；7.71(q,1H)；7.06(t,1H)；3.31(s,3H).13C-NMR(d6-DMSO):δ165.13,148.00,146.12,143.91,139.32,138.83,131.03,129.24,127.95,127.66,125.72,124.69,124.53,124.15,120.65,114.90,43.73；
7.化合物A07
1H-NMR(d6-DMSO):δ10.81(s,1H)；9.09(d,1H)；8.75(q,1H)；8.29(m,1H)；8.13(m,2H)；8.08(m,1H)；7.74(d,1H)；7.66(d,1H)；7.55(m,1H)；7.02(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ164.85,152.84,149.16,147.94,146.07,138.86,135.98,130.95,130.51,127.87,125.65,124.55,124.42,124.07,123.99,120.62,114.85；
8.化合物A08
1H-NMR(d6-DMSO):δ10.62(s,1H)；8.30(s,1H)；8.24(d,1H)；8.14(m,2H)；7.68(q,2H)；7.01(t,1H)；2.73(s,3H).13C-NMR(d6-DMSO):δ166.97,159.87,149.30,147.89,146.04,138.63,130.81,127.87,127.74,126.30,125.42,124.62,124.59,124.07,120.59,114.84,19.26；
9.化合物A09
1H-NMR(d6-DMSO):δ11.05(s,1H)；8.72(m,1H)；8.33(d,1H)；8.21(q,1H)；8.14(m,2H)；8.05(m,1H)；7.73(d,1H)；7.66(m,2H)；7.02(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ163.49,149.90,148.94,147.89,146.03,138.63,138.48,130.88,127.90,127.88,127.63,125.51,124.59,124.56,124.06,123.06,120.60,114.84；
10.化合物A10
1H-NMR(d6-DMSO):δ10.86(s,1H)；8.28(d,1H)；8.11(m,4H)；7.81(t,1H)；7.76(d,1H)；7.67(d,1H)；7.02(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ164.74,147.95,146.07,141.64,138.79,135.77,133.21,
130.97,130.62,130.34,127.98,127.89,126.58,125.67,124.78,124.61,124.09,120.62,114.84,43.88；
11.化合物A11
1H-NMR(d6-DMSO):δ11.08(s,1H)；8.12(m,2H)；8.06(d,1H)；7.98(m,2H)；7.90(d,1H)；7.75(d,1H)；7.67(d,1H)；7.02(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ164.48,147.97,146.04,143.68,141.08,138.43,131.38,131.17,130.41,128.58,128.19,127.90,126.41,125.95,124.14,123.96,123.81120.59,114.82,43.52；
12.化合物A12
1H-NMR(d6-DMSO):δ10.95(s,1H)；8.16(d,1H)；8.12(d,1H)；8.00(q,1H)；7.73(m,3H)；7.63(q,1H)；7.39(m,1H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ164.98,164.12,161.63,148.00,146.14,138.78,133.56,131.92,131.36,131.12,127.92,125.88,124.18,123.90,123.78,120.63,117.69,115.11,114.87；
13.化合物A13
1H-NMR(d6-DMSO):δ11.08(s,1H)；8.17(d,1H)；8.09(m,2H)；8.00(m,1H)；7.89(s,2H)；7.79(d,1H)；7.71(d,1H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ164.61,148.01,146.10,140.55,138.52,131.47,131.21,130.45,128.19,127.94,127.15,125.98,124.95,124.20,123.99,123.84,120.64,114.87；
14.化合物A14
1H-NMR(d6-DMSO):δ11.03(s,1H)；8.16(d,1H)；8.12(d,1H)；8.01(q,1H)；7.93(m,2H)；7.78(m,2H)；7.70(d,1H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ162.43,160.35,157.85,148.00,146.06,138.49,131.72,131.18,128.79,128.21,127.94,125.93,124.80,124.16,124.12,123.98,122.14,120.64,114.87,114.59；
15.化合物A15
1H-NMR(d6-DMSO):δ11.10(s,1H)；8.24(d,1H)；8.16(d,1H)；8.08(d,1H)；7.97(q,1H)；7.78(m,2H)；7.71(d,1H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ163.46,150.28,148.02,146.31,146.07,141.89,138.43,132.21,131.24,127.95,126.02,124.29,124.19,124.00,123.84,120.64,114.87；
16.化合物A16
1H-NMR(d6-DMSO):δ10.76(s,1H)；8.15(m,2H)；8.01(m,1H)；7.76(d,1H)；7.70(m,1H)；7.55(d,1H)；7.45(d,1H)；7.40(m,1H)；7.06(t,1H)；2.40(s,3H).13C-NMR(d6-DMSO):δ167.61,147.98,146.18,139.06,138.71,135.72,134.90,131.00,130.77,129.69,127.93,127.64,126.14,125.75,124.15,124.00,123.90,120.64,114.87,19.55；
17.化合物A17
1H-NMR(d6-DMSO):δ11.19(s,1H)；8.48(d,1H)；8.17(m,2H)；8.08(d,1H)；7.98(q,1H)；7.81(d,1H)；7.71(d,1H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ163.20,148.03,147.61,147.44,146.04,146.07,141.18,138.29,136.45,131.30,128.47,127.96,126.09,124.21,124.05,123.88,122.31,121.09,120.64,114.87；
18.化合物A18
1H-NMR(d6-DMSO):δ11.25(s,1H)；8.17(d,1H)；8.10(m,1H)；7.98(m,1H)；7.79(d,1H)；7.70(d,1H)；7.58(q,1H)；7.49(d,1H)；7.42(t,1H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ160.99,160.39,157.92,148.02,146.10,138.38,132.64,131.48,131.28,128.28,127.94,126.15,126.09,125.87,124.28,123.81,123.65,120.61,115.42,114.82；
19.化合物A19
1H-NMR(d6-DMSO):δ11.08(s,1H)；8.57(m,1H)；8.14(m,3H)；8.00(m,1H)；7.79(d,1H)；7.71(m,1H)；7.60(m,1H)；7.06(t,1H).13C-NMR(d6-DMSO):δ164.41,151.32,148.01,146.86,146.10,138.79,138.62,133.12,131.20,128.13,127.95,125.98,124.20,123.93,123.79,123.73,120.63,114.87；
20.化合物A20
1H-NMR(d6-DMSO):δ11.16(s,1H)；9.19(d,1H)；8.19(m,2H)；8.12(m,1H)；7.79(d,1H)；7.71(d,1H)；7.06(m,2H).13C-NMR(d6-DMSO):δ162.43,158.45,158.02,147.99,146.00,138.09,131.09,128.51,127.96,125.73,124.79,124.74,124.14,120.65,114.90,105.13。
实施例2、本发明化合物A01～A20对肿瘤细胞活力的影响
采用MTT法检测肿瘤细胞活力，具体实验方法如下：消化对数生长期人肿瘤细胞(HT-29、SW620、RKO、A549、T47D、HCT-116、MDA-MB-231)，调整细胞数为2×103个/孔，接种到96孔细胞培养板(100μl/孔)，37℃，5％CO2培养箱中培养24h，更换完全培养基，每组加入按实验设定的梯度浓度化合物(化合物浓度分别设为1μM、3μM、10μM、30μM、100μM)，每组3个复孔，培养72h后，每孔加入10μl MTT液,孵育4h，终止反应，用酶联免疫检测仪测定每孔OD值(波长570nm)。实验设不接种细胞且用完全培养基代替化合物组(空白组)和接种细胞且用完全培养基代替化合物组(对照组)，通过计算即可得出化合物对肿瘤细胞活力的抑制程度。
按下列公式计算细胞生长抑制率：
抑制率＝[(Ac-As)/(Ac-Ab)]×100％
As:实验孔(含有细胞的培养基、MTT、化合物)
Ac:对照孔(含有细胞的培养基、MTT、无化合物)
Ab:空白孔(不含细胞和化合物的培养基、MTT、无化合物)
根据药物在不同剂量下对细胞增殖的抑制率，通过GraphPad Prism 5软件计算出IC50值，结果如表2所示。
表2本发明化合物A01～A20对不同肿瘤细胞的IC50值
注：HT-29、SW620、RKO、HCT-116是结肠癌细胞；T47D、MDA-MB-231是乳腺癌细胞；A549是非小细胞肺癌细胞。
本实验结果表明：化合物A01～A20对结肠癌、乳腺癌、非小细胞肺癌细胞等癌症有不同程度的抑制作用，可应用于制备抗肿瘤药物。其中，化合物A03对多种肿瘤细胞均有较好的抑制效果，尤其是对HT-29细胞的细胞增殖抑制效果尤为明显，其IC50值为6.2±1.5μM。
实施例3、本发明化合物与靶标蛋白SMO蛋白之间的结合力检测
为了进一步研究本发明化合物抗肿瘤的作用机制，本发明进一步研究了本发明化合物A01～A20与靶标蛋白SMO蛋白之间是否存在结合作用。分子对接是依据配体与受体作用的“锁-钥原理”,模拟小分子配体与受体生物大分子之间的相互作用。通过软件MVD 4.0分析计算小分子配体与受体生物大分子间的结合模式和亲和力，评价配体与受体的靶向结合程度从而进行药物设计以及筛选。小分子化合物与标靶蛋白之间的结合主要是通过两者之间所形成的氢键作用。化合物A03,A14,A15,A18均可对多种肿瘤细胞产生较好的抑制效果，尤其是A03对HT-29细胞的细胞增殖抑制效果尤为明显，其IC50值为6.2±1.5μM。选取化合物A03,A14,A15,A18作为该发明系列化合物的代表性化合物与SMO蛋白进行分子对接实验，以检测该本发明系列化合物与靶标蛋白SMO之间的结合力强弱，而维莫地吉是目前临床上通过靶向抑制SMO蛋白而用于治疗基底细胞瘤的药物，在这里选取其作为阳性对照。
检测结果如图1所示，A03,A14,A15,A18均可通过与SMO蛋白形成多个氢键而与之形成强有力的结合模式，而其中A14,A15与SMO之间形成氢键的数目尤多于阳性对照药物维莫地吉。分子对接的结果表明该发明系列化合物可能通过靶向作用于SMO蛋白而起到抗肿瘤的效果。

Claims (11)

1.吡啶并三氮唑化合物或其药学上可接受的盐，所述吡啶并三氮唑化合物选自以下任意一种结构：
2.权利要求1所述吡啶并三氮唑化合物的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)在三氯氧磷溶剂中，将式(Ⅲ)化合物与式(Ⅳ)化合物加热回流反应，制备式(Ⅴ)化合物；
(2)在乙醇溶剂中，加入催化剂和还原剂，将式(Ⅴ)化合物加热回流反应，制备式(Ⅱ)化合物；
(3)将式(Ⅱ)化合物分别与R1～R20所示化合物进行缩合酰化反应，分别得权利要求1所述的化合物A01～A20；
其中，式(Ⅱ)、(Ⅲ)、(Ⅳ)、(Ⅴ)的结构式分别如下：
R1～R20所示化合物的结构式如下：
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：制备方法具体步骤为：
(1)在三氯氧磷溶剂中，在通氮气保护下，将式(Ⅲ)化合物与式(Ⅳ)化合物加热回流反应8～12小时，加热温度为100～120℃，分离纯化产物获得式(Ⅴ)化合物；
(2)在乙醇溶剂中，加入催化剂和还原剂，搅拌均匀后，加入式(Ⅴ)化合物，加热至70～90℃，回流反应3～5h，反应结束后分离纯化，获得式(Ⅱ)化合物；
(3)在甲苯溶剂中，将R1～R20所示化合物分别与二氯亚砜加热至回流反应2.5～3.5小时，获得酰氯，备用；在二氯甲烷溶剂中，加入式(Ⅱ)化合物和催化剂，搅拌均匀后，加入酰氯，室温搅拌反应过夜，分别生成化合物A01～A20。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，分离纯化的具体操作为：反应结束后，蒸除三氯氧磷溶剂，搅拌下将反应液倒入冰水中，析出棕灰色固体，过滤，烘干。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，催化剂为铁粉，还原剂为饱和氯化铵水溶液，分离纯化的具体操作为：反应结束后，蒸除乙醇溶剂，加水，调节pH至8.5～9.5，二氯甲烷萃取，合并有机相，水洗，盐水洗，干燥过滤蒸干，乙酸乙酯冲洗，过滤，得土灰色固体，烘干。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，回流反应结束后，降温至室温，旋蒸除去甲苯溶剂和二氯亚砜，用二氯甲烷溶解酰氯，备用。
7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，催化剂为DIPEA，生成的A01～A20化合物采用柱层析纯化。
8.权利要求1所述的吡啶并三氮唑化合物和/或其药学上可接受的盐在制备SMO蛋白抑制剂中的应用。
9.权利要求1所述的吡啶并三氮唑化合物和/或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤制剂中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述肿瘤为结肠癌、乳腺癌、非小细胞肺癌。
11.根据权利要求10所述的应用，其特征在于：所述非小细胞肺癌为肺腺癌、肺鳞癌、肺大细胞癌。
CN201710549928.9A 2017-07-07 2017-07-07 一类吡啶并三氮唑化合物及其制备方法和应用 Active CN107474046B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710549928.9A CN107474046B (zh) 2017-07-07 2017-07-07 一类吡啶并三氮唑化合物及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710549928.9A CN107474046B (zh) 2017-07-07 2017-07-07 一类吡啶并三氮唑化合物及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107474046A CN107474046A (zh) 2017-12-15
CN107474046B true CN107474046B (zh) 2019-08-27

Family

ID=60595614

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710549928.9A Active CN107474046B (zh) 2017-07-07 2017-07-07 一类吡啶并三氮唑化合物及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107474046B (zh)

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104470902A (zh) * 2012-07-19 2015-03-25 南京英派药业有限公司 N-(3-杂芳基芳基)-4-芳基芳基甲酰胺和类似物作为Hedgehog通路抑制剂及其应用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013028445A1 (en) * 2011-08-19 2013-02-28 Glaxosmithkline Llc Fatty acid synthase inhibitors
KR20170003553A (ko) * 2014-04-04 2017-01-09 사이로스 파마수티컬스, 인크. 사이클린-의존성 키나제 7(cdk7)의 저해제

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104470902A (zh) * 2012-07-19 2015-03-25 南京英派药业有限公司 N-(3-杂芳基芳基)-4-芳基芳基甲酰胺和类似物作为Hedgehog通路抑制剂及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN107474046A (zh) 2017-12-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111973601B (zh) 作为egfr抑制剂的肉桂酰氨基喹唑啉类化合物在制备药物中的应用
Cui et al. Design, synthesis and evaluation of acridine derivatives as multi-target Src and MEK kinase inhibitors for anti-tumor treatment
Cui et al. Design, synthesis and evaluation of azaacridine derivatives as dual-target EGFR and Src kinase inhibitors for antitumor treatment
CN106220641B (zh) 含愈创兰烃薁结构的吲哚螺环类化合物及其制备方法与应用
CN103467456B (zh) 3,5-二取代吲哚酮类衍生物及其制备方法和应用
CN104367575B (zh) 一种Bouchardatine和Bouchardatine衍生物及其制备方法和应用
CN118772143A (zh) 一种具有双靶点的双功能铁死亡诱导剂及其制备方法和应用
CN103724251B (zh) 一种靶向stat3的小分子化合物及其制备方法和应用
CN105037279B (zh) 含戊二烯酮结构的4‑n取代喹唑啉类衍生物及制备和应用
JP7101781B2 (ja) Ａｋｔ阻害剤としての塩形態及びその結晶形態
CN110734391B (zh) 2,3-二酮吲哚类化合物及其制备方法与应用
CN107474046B (zh) 一类吡啶并三氮唑化合物及其制备方法和应用
CN106074557B (zh) D型鸟嘌呤丙氨酸在制备抗肝癌药物中的应用
Liu et al. Design, synthesis, and bioactivity study on Lissodendrins B derivatives as PARP1 inhibitor
CN106866684B (zh) 用于治疗肿瘤的大环衍生物
CN109369620B (zh) 吡啶类化合物及其制备方法与抗胃癌应用
CN105601618B (zh) 芳香族酰亚胺类化合物及其制备方法与应用
CN112209884B (zh) 1-h苯并咪唑衍生物、制备方法及其应用
CN101407515A (zh) 用作cdk抑制剂的喹啉类多环化合物
Simić et al. Synthesis, cytotoxicity and computational study of novel protoberberine derivatives
CN112876414A (zh) 一种基于多胺修饰的萘酰亚胺缀合物、其制备方法及应用
Min et al. Discovery of a novel and potent MET transcription Inhibitor targeting promoter G-quadruplex for the treatment of NSCLC
CN115572247B (zh) 一类维生素k3衍生物及其医药用途
CN104230786B (zh) 一种具有抗肿瘤活性的含吲哚结构的化合物及其合成方法
CN113527225B (zh) 一种丙烯酰噻二唑衍生物及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20210112

Address after: 510700 unit 214-46, 2nd floor, office area, No.1 helix 4th Road, Guangzhou International Biological Island, Huangpu District, Guangzhou City, Guangdong Province

Patentee after: Guangzhou Huateng Biomedical Technology Co.,Ltd.

Address before: 510515, No. 1023 Sha Sha Road, Baiyun District, Guangdong, Guangzhou

Patentee before: SOUTHERN MEDICAL University

TR01 Transfer of patent right
PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right
PE01 Entry into force of the registration of the contract for pledge of patent right

Denomination of invention: A class of PYRIDINO triazole compounds and their preparation and Application

Effective date of registration: 20210615

Granted publication date: 20190827

Pledgee: Bank of China Limited Guangzhou Development Zone Branch

Pledgor: Guangzhou Huateng Biomedical Technology Co.,Ltd.

Registration number: Y2021440000198

CP02 Change in the address of a patent holder
CP02 Change in the address of a patent holder

Address after: Room B1201, No. 29, Bishan Street, Huangpu District, Guangzhou, Guangdong 510000

Patentee after: Guangzhou Huateng Biomedical Technology Co.,Ltd.

Address before: 510700 unit 214-46, 2nd floor, office area, No.1 helix 4th Road, Guangzhou International Biological Island, Huangpu District, Guangzhou City, Guangdong Province

Patentee before: Guangzhou Huateng Biomedical Technology Co.,Ltd.

PC01 Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right
PC01 Cancellation of the registration of the contract for pledge of patent right

Granted publication date: 20190827

Pledgee: Bank of China Limited Guangzhou Development Zone Branch

Pledgor: Guangzhou Huateng Biomedical Technology Co.,Ltd.

Registration number: Y2021440000198