CN107206059A

CN107206059A - 包含片芯和聚乙烯醇包衣的用于口服胰岛素给药的药物组合物

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Publication number: CN107206059A
Application number: CN201580074826.5A
Authority: CN
Inventors: L.霍夫加亚尔德; H.雷夫斯加亚尔德; T.B.克杰德森; P.马德森; G.D.普雷托罗
Original assignee: Novo Nordisk AS
Current assignee: Novo Nordisk AS
Priority date: 2015-01-29
Filing date: 2015-01-29
Publication date: 2017-09-26
Also published as: US20180000742A1; JP6737793B2; JP2018508491A; EP3250225A1; WO2016119854A1

Abstract

本发明涉及固体口服胰岛素组合物，其包含增强所述酰化胰岛素的生物利用度和/或吸收的癸酸盐以及与其组合的不依赖于pH而可溶于水性介质中的聚乙烯醇包衣。

Description

包含片芯和聚乙烯醇包衣的用于口服胰岛素给药的药物组合物

技术领域

本发明涉及由片芯和聚乙烯醇包衣组成的固体口服胰岛素组合物，其中片芯包含癸酸盐。

背景

由某些大分子(例如蛋白质和肽)的生成缺陷或完全不能生成引起的许多病理状态通过治疗性大分子的侵入性且不方便的肠胃外给药来治疗。其中一个实例是在需要一个或多个胰岛素每日剂量的胰岛素依赖型患者的治疗中施用胰岛素。口服途径由于其非侵入性而是理想的给药途径，并且具有减轻患者与药物给药有关的不适以及增加药物依从性的巨大潜力。然而还存在若干障碍，诸如在胃肠(GI)道中的酶促降解，药物外排泵，来自肠粘膜的不充分且可变的吸收，以及肝脏中的首过代谢。因此迄今为止，在市场上尚未发现用于口服递送胰岛素的产品。

这类大分子的一个实例是被在胃(胃蛋白酶)、肠腔(胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、弹性蛋白酶、羧肽酶等)和胃肠道粘膜表面(氨肽酶、羧肽酶、肠肽酶、二肽基肽酶、内肽酶等)中发现的各种消化酶降解的人胰岛素。

胃肠道的pH从胃中的强酸性pH 1-3到十二指肠中的pH 5.5到回肠中的pH 7.5而变化。然后进入结肠时，pH下降到pH 5，随后在直肠中再次上升至pH 7(Dan MedBull.1999Jun；46(3):183-96.Intraluminal pH of the human gastrointestinaltract.Fallingborg J.)。

提供有利于胰岛素给药的固体口服剂型是所希望的。固体口服剂型相对于其他剂型的优点包括易于制备和给药。也可能存在与给药方便从而提高患者依从性有关的优点。

US2008260820公开了包含蛋白酶抗性多肽的口服剂量制剂，其可含有包括表面活性剂(例如，十二烷基硫酸钠、胆汁盐、棕榈酰肉碱(palmitoylcamitine)和脂肪酸的钠盐)在内的肠吸收增强剂；以及毒素(例如，封闭带毒素(zonula occludens toxin))。

US2006/018874和US2006/019874公开了含有癸酸钠和IN105胰岛素的片剂。WO2010/032140和WO2011/084618公开了包含癸酸钠的胰岛素制剂。WO2011/103920公开了包含由活性药物成分如胰岛素、渗透促进剂、生物利用度促进剂如酶抑制剂组成的片芯以及聚合物包衣的药物组合物。WO0104195A1公开了聚乙烯醇包衣。

口服给药途径相当复杂，因此对建立适合于患者治疗的具有有效胰岛素生物利用度的可接受药物组合物存在需要。

概述

本发明提供了药物组合物，当施用于受试者的胃肠道(例如，根据本发明的药物组合物经口(口服施用))时，其在所述受试者中有效提供治疗有效的酰化胰岛素血液水平。

本发明的一个实施方案涉及由一个或多个片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及由一个或多个片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫键。

本发明的一个实施方案涉及由一个或多个片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含一个或多个片剂的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个片芯和聚乙烯醇包衣组成，其中所述一个或多个片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含至多三个片剂的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个片芯和聚乙烯醇包衣组成，其中所述一个或多个片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含两个片剂的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个片芯和聚乙烯醇包衣组成，其中所述一个或多个片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含150至250个片剂的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个片芯和聚乙烯醇包衣组成，其中所述一个或多个片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含由一个或多个片剂组成的多颗粒体系的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个未包覆的片芯组成，其中所述一个或多个未包覆的片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。本发明的一个实施方案涉及包含由至多三个片剂组成的多颗粒体系的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个未包覆的片芯组成，其中所述一个或多个未包覆的片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含由两个片剂组成的多颗粒体系的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个未包覆的片芯组成，其中所述一个或多个未包覆的片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含由约150至约250个片剂组成的多颗粒体系的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个未包覆的片芯组成，其中所述片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含由约140至约250个重约3.0mg至约5.0mg的片剂组成的多颗粒体系的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个未包覆的片芯组成，其中所述一个或多个未包覆的片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含由约14至约470个重约1.5mg至约50mg的片剂组成的多颗粒体系的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个未包覆的片芯组成，其中所述一个或多个未包覆的片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

附图说明

图1示出了根据本发明的组合物(片芯+来自的II-Yellow包衣(如2013年所售))以及其中片芯上未施加包衣的药物组合物的溶出速率。

图2A示出了相比于在来自的93O包衣(如2013年所售)下方具有II–Yellow底衣(sub coat)的片芯，根据本发明的药物组合物(片芯+来自的II–Yellow包衣(如2013年所售))的生物利用度。

图2B示出了相比于在来自的93O包衣(如2013年所售)下方具有II–Yellow底衣的片芯，根据本发明的药物组合物(片芯+来自的II–Yellow包衣(如2013年所售))的Tmax。

图3示出了这种酰化胰岛素在具有来自的II–Yellow(如2013年所售)底衣和来自Evonik Industries的FS30D(如2013年所售)功能包衣的片芯中的PK谱，正方形示出了在时间0时测试的片剂的PK谱，而圆形示出了在5℃下储存12周或更多周之后测试的片剂的PK谱。

图4示出了A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素(三角形)和癸酸钠(圆形)从填充有小片剂(mini-tablet)(黑线)和整料(monoliths)(灰线)的000号猪明胶胶囊的体外溶出速率。数据以平均值(n＝3)±SD报告。

图5示出了A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素(三角形)和癸酸钠(圆形)从含有Opadry-II包覆的小片剂(黑线)和整料(深灰线)的000号猪明胶胶囊的体外溶出速率。数据以平均值(n＝3)±SD报告。

图6示出了A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素(三角形)和癸酸钠(圆形)从压缩在整料中的Opadry-II包覆的小片剂的体外溶出速率。数据以平均值(n＝3)±SD报告。

图7示出了A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素从没有胶囊(黑色虚线，三角形)或填充至00号胶囊：猪明胶(黑线，圆形)、HPMC(灰色虚线，三角形)、支链淀粉(pullulan)(灰线，正方形)和鱼明胶(黑线，正方形)的未包覆小片剂的体外溶出速率。数据以平均值(n＝3)±SD报告。

图8示出了以下物质从填充在000号猪明胶胶囊中的未包覆小片剂的体外溶出速率：1)酰化胰岛素A(A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素)(黑线，三角形)；2)酰化胰岛素B(A14E,B25H,desB27,B29K(N-(eps)-(十八烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素)(黑线，正方形)；以及3)癸酸钠(灰线，圆形)。数据以平均值(n＝3)±SD报告。

图9示出了A14E,B16H,B25H,B29K(N-(eps)-(二十烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素(三角形)和癸酸钠(圆形)从含有未包覆小片剂的000号猪明胶胶囊的体外溶出速率。数据以平均值(n＝3)±SD报告。

图10示出了A14E,B25H,desB27,B29K(N-(eps)-(十八烷二酰基-gGlu),desB30人胰岛素(三角形)和癸酸钠(圆形)从含有未包覆小片剂的000号猪明胶胶囊的体外溶出速率。数据以平均值(n＝3)±SD报告。

图11示出了A14E,B25H,desB27,B29K(N-(eps)-(十八烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素(三角形，黑线)和癸酸钠(正方形，灰线)从含有4.0mm未包覆小片剂的000号猪明胶胶囊的体外溶出速率。数据以平均值(n＝3)±SD报告。

描述

本发明的一个实施方案涉及包含由约150至约250个重约3.0mg至约5.0mg的片剂组成的多颗粒体系的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个未包覆的片芯组成，其中所述一个或多个未包覆的片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含由至多约300个重约1.5mg至约50mg的片剂组成的多颗粒体系的药物组合物，其中每个片剂由一个或多个未包覆的片芯组成，其中所述一个或多个未包覆的片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

令人惊讶地发现，根据本发明实施方案的药物组合物适合于将所述酰化胰岛素施用于胃肠道(例如，经口(口服施用))。

令人惊讶地发现，对于将所述酰化胰岛素施用于胃肠道(例如，经口(口服施用))而言，根据本发明的片芯与聚乙烯醇包衣的组合以及在根据实施方案的药物组合物的片芯中包含的所述酰化胰岛素的口服生物利用度和PK/PD谱产生了有吸引力的胰岛素总PK/PD谱。

令人惊讶地发现，包含片芯和聚乙烯醇(聚合物)包衣(诸如，来自的II(如2013年所售))的根据本发明的药物组合物在比格犬中显示出所述酰化胰岛素的稳定的PK(参见表1)和生物利用度谱(参见图2A和2B)。

令人惊讶地发现，相比于其中根据本发明的片芯被肠溶衣，如来自的93O(如2013年所售)(参见图2A、2B、3A和3B)或来自Evonik Industries的FS30D(如2013年所售)(参见图4)包覆的组合物，根据本发明的组合物在提高所述酰化胰岛素的生物利用度和降低其Tmax方面更加有效。

已经发现，相对于未包覆的片芯的溶出速率，聚乙烯醇包衣如来自的II–Yellow(如2013年所售)的添加没有在统计学上显著地降低片芯的溶出速率(参见图1)。

令人惊讶地发现，本发明的一些实施方案提供了这样的口服制剂，其允许在所述组合物口服施用约30分钟后进餐而不影响活性物质即酰化胰岛素的生物利用度/变化。

片芯

本发明的一个实施方案为包含一个或多个片剂的药物组合物，其中每个片剂均由片芯和聚乙烯醇包衣组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含至多三个片剂的药物组合物，其中每个片剂均由片芯和聚乙烯醇包衣组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含两个片剂的药物组合物，其中每个片剂均由片芯和聚乙烯醇包衣组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含150至250个片剂的药物组合物，其中每个片剂均由片芯和聚乙烯醇包衣组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含约140至约250个重3.0-5.0mg的片剂的药物组合物，其中每个片剂均由片芯和聚乙烯醇包衣组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含150至250个重约3.6mg的片剂的药物组合物，其中每个片剂均由片芯和聚乙烯醇包衣组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含一个或多个片剂的药物组合物，其中每个片剂均由未包覆的片芯组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含至多三个片剂的药物组合物，其中每个片剂均由未包覆的片芯组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含两个片剂的药物组合物，其中每个片剂均由未包覆的片芯组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含150至250个片剂的药物组合物，其中每个片剂均由未包覆的片芯组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含约140至约250个重约3.0-5.0mg的片剂的药物组合物，其中每个片剂均由未包覆的片芯组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含150至250个重约3.6mg的片剂的药物组合物，其中每个片剂均由未包覆的片芯组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含约14至约470个重约1.5-50mg的片剂的药物组合物，其中每个片剂均由未包覆的片芯组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

本发明的一个实施方案为包含约14至约70个重10-50mg的片剂的药物组合物，其中每个片剂均由未包覆的片芯组成，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐。

在一个实施方案中，本发明中包含的癸酸盐为盐的形式。在一个实施方案中，本发明中包含的癸酸盐为钠盐的形式。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸的钠盐。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯含有癸酸盐。在一个实施方案中，根据本发明的片芯含有癸酸的钠盐。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含50-85％(w/w)的癸酸盐。在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含70-85％(w/w)的癸酸盐。在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含75-85％(w/w)的癸酸盐。在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含约70％(w/w)的癸酸盐。在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含少于75％(w/w)的癸酸盐。在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含少于80％(w/w)的癸酸盐。在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含少于85％(w/w)的癸酸盐。

在一个实施方案中，片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素。

在一个实施方案中，片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸的钠盐，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素。

在一个实施方案中，片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

在一个实施方案中，片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

在一个实施方案中，片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素并任选地包含一个或多个额外的二硫键。

在一个实施方案中，片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫键。

在一个实施方案中，片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸的钠盐，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫键。

在一个实施方案中，片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

在一个实施方案中，片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸的钠盐，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯重约600-900mg和约600-1300mg。

在一个实施方案中，本发明的片芯重约250-475mg。

在一个实施方案中，由片芯和聚乙烯醇包衣组成的根据本发明的药物组合物重约600-900mg。

在一个实施方案中，由片芯和聚乙烯醇包衣组成的根据本发明的药物组合物重约280-500mg。

在一个实施方案中，本发明的片芯重约710mg。在一个实施方案中，本发明的片芯重约355mg。在一个实施方案中，本发明的片芯重约237mg。在一个实施方案中，本发明的片芯重约600-800mg。在一个实施方案中，本发明的片芯重约200-380mg。

在一个实施方案中，本发明的片芯重约1.5-50mg。

在一个实施方案中，本发明的片芯重约3.0-5.0mg。

在一个实施方案中，本发明的片芯重约3.6mg。

在一个实施方案中，由片芯和聚乙烯醇包衣组成的根据本发明的药物组合物重约745mg。在一个实施方案中，由片芯和聚乙烯醇包衣组成的根据本发明的药物组合物重约742mg。

在一个实施方案中，由片芯和聚乙烯醇包衣组成的根据本发明的药物组合物重约373mg。在一个实施方案中，由片芯和聚乙烯醇包衣组成的根据本发明的药物组合物重约258mg。

在一个实施方案中，由片芯和聚乙烯醇包衣组成的根据本发明的药物组合物重约240-400mg。

在一个实施方案中，片芯包含约77％(w/w)的癸酸盐。

在一个实施方案中，片芯包含约0.5％(w/w)的硬脂酸。

在一个实施方案中，片芯包含约22.5％(w/w)的山梨醇。在一个实施方案中，片芯包含约20.5％(w/w)的山梨醇。在一个实施方案中，相对于活性成分的量调节山梨醇的量。在一个实施方案中，相对于酰化胰岛素的量调节山梨醇的量。在一个实施方案中，按照足量(quantum satis)(QS)原则相对于酰化胰岛素的量调节山梨醇的量，该原则的意思是获得具有所需重量的片剂所需要的量。在一个实施方案中，当活性成分的量为约0％(w/w)时，片芯包含约22.5％(w/w)的山梨醇。在一个实施方案中，当活性成分的量为约0％(w/w)时，片芯包含约20.5％(w/w)的山梨醇。在一个实施方案中，当酰化胰岛素的量为约0％(w/w)时，片芯包含约22.5％(w/w)的山梨醇。在一个实施方案中，当酰化胰岛素的量为约0％(w/w)时，片芯包含约20.5％(w/w)的山梨醇。在一个实施方案中，相对于活性成分的量调节山梨醇的量，其中活性成分的量为至少约0.5％(w/w)。在一个实施方案中，相对于活性成分的量调节山梨醇的量，其中活性成分的量为至少0.5％(w/w)。在一个实施方案中，相对于活性成分的量调节山梨醇的量，其中活性成分的量为约0-22.5％(w/w)。在一个实施方案中，相对于活性成分的量调节山梨醇的量，其中活性成分的量为约0-20.5％(w/w)。

在一个实施方案中，当酰化胰岛素的量为约0.5％(w/w)时，片芯包含约21.0％(w/w)的山梨醇。在一个实施方案中，当酰化胰岛素的量为约2％(w/w)时，片芯包含约20.5％(w/w)的山梨醇。在一个实施方案中，当酰化胰岛素的量为约3％(w/w)时，片芯包含约19.5％(w/w)的山梨醇。在一个实施方案中，片芯包含约22.5-X％(w/w)的山梨醇，其中X为酰化胰岛素的量。在一个实施方案中，片芯包含约20.5-X％(w/w)的山梨醇，其中X为酰化胰岛素的量。在一个实施方案中，片芯包含约22.5-X％(w/w)的山梨醇，其中X为酰化胰岛素的量并且X为约0-22.5。在一个实施方案中，片芯包含约20.5-X％(w/w)的山梨醇，其中X为酰化胰岛素的量并且X为约0-20.5。在一个实施方案中，片芯包含约22.5-X％(w/w)的山梨醇，其中X为酰化胰岛素的量并且X为约0、0.5、1、1.5、2、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5或5.0。在一个实施方案中，片芯包含约20.5-X％(w/w)的山梨醇，其中X为酰化胰岛素的量并且X为约0、0.5、1、1.5、2、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5或5.0。在一个实施方案中，片芯包含约22.5-X％(w/w)的山梨醇，其中X为酰化胰岛素的量并且X为约5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9.0、9.5或10.0。在一个实施方案中，片芯包含约22.5-X％(w/w)的山梨醇，其中X为酰化胰岛素的量并且X为约5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9.0、9.5或10.0。在一个实施方案中，片芯包含约20.5-X％(w/w)的山梨醇，其中X为酰化胰岛素的量并且X为约10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14.0、14.5或15.0。在一个实施方案中，片芯包含约22.5-X％(w/w)的山梨醇，其中X为酰化胰岛素的量并且X为约15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19.0、20.5、21.0、21.5、22.0或22.5。在一个实施方案中，片芯包含约20.5-X％(w/w)的山梨醇，其中X为酰化胰岛素的量并且X为约15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19.0或20.5。

在一个实施方案中，本发明的片芯包含癸酸盐和一种或多种赋形剂。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中的一些成分是粘膜粘附的(mucoadhesive)。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中的一种或多种成分是粘膜粘附的。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中没有成分是粘膜粘附的。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中没有赋形剂是粘膜粘附的。在一个实施方案中，根据本发明的片芯中没有成分是粘膜粘附的。在一个实施方案中，根据本发明的片剂中没有赋形剂是粘膜粘附的。在一个实施方案中，根据本发明的聚乙烯醇包衣中没有成分是粘膜粘附的。在一个实施方案中，根据本发明的聚乙烯醇包衣中没有赋形剂是粘膜粘附的。

在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的赋形剂具有低于1000g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的赋形剂具有低于900g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的赋形剂具有低于800g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的赋形剂具有低于700g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的赋形剂具有低于600g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的赋形剂具有低于500g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的赋形剂具有低于400g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的赋形剂具有低于300g/mol的分子量。

在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有低于1000g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有低于900g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有低于800g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有低于700g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有低于600g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有低于500g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有低于400g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有低于300g/mol的分子量。

在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有高于1000g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有高于900g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有高于800g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有高于700g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有高于600g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有高于500g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有高于400g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种赋形剂具有高于300g/mol的分子量。

在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的一种或多种干燥成分具有低于1000g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的所有干燥成分均具有低于900g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的所有干燥成分均具有低于800g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的所有干燥成分均具有低于700g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的所有干燥成分均具有低于600g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的所有干燥成分均具有低于500g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的所有干燥成分均具有低于400g/mol的分子量。在一个实施方案中，包含在根据本发明的片芯中的所有干燥成分均具有低于300g/mol的分子量。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯中的活性成分或赋形剂均不导致任何吸水量。在一个实施方案中，片芯中的活性成分和赋形剂导致零吸水量。在一个实施方案中，片芯中的活性成分和赋形剂导致0-9％的吸水量。在一个实施方案中，片芯中的活性成分和赋形剂导致低于10％的吸水量。在一个实施方案中，片芯中的活性成分和赋形剂导致低于9％的吸水量。在一个实施方案中，片芯中的活性成分和赋形剂导致低于7％的吸水量。

包衣

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中根据本发明的所述聚乙烯醇包衣不依赖于pH而溶解于水性介质中，即，为立即释放包衣。

本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣在所有pH值下均溶解。本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣不依赖于pH而溶解于溶液水性介质中。本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣在整个pH范围内均溶解。本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣不依赖于pH而溶解于溶液水性介质中。

本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素，并且其中所述药物组合物包含在所有pH值下均溶解的聚乙烯醇包衣。本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素，并且其中所述药物组合物包含不依赖于pH而溶解于溶液水性介质中的聚乙烯醇包衣。本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素，并且其中所述药物组合物包含在整个pH范围内均溶解的聚乙烯醇包衣。

本发明的一个实施方案涉及由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫键，并且其中所述药物组合物包含不依赖于pH而溶解于溶液水性介质中的聚乙烯醇包衣。

本发明的一个实施方案涉及由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫键，并且其中所述药物组合物包含在所有pH值下均溶解的聚乙烯醇包衣。

本发明的一个实施方案涉及由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素，并且任选地包含一个或多个额外的二硫键，并且其中所述药物组合物包含在所有pH值下均溶解的聚乙烯醇包衣。

本发明的一个实施方案涉及由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素，并任选地包含一个或多个额外的二硫键，并且其中所述药物组合物包含不依赖于pH而溶解于溶液水性介质中的聚乙烯醇包衣。

本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫键，并且其中所述药物组合物包含在所有pH值下均溶解的聚乙烯醇包衣。本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫键，并且其中所述药物组合物包含不依赖于pH而溶解于溶液水性介质中的聚乙烯醇包衣。本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫键，并且其中所述药物组合物包含在整个pH范围内均溶解的聚乙烯醇包衣。

本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素，并且其中所述药物组合物包含在所有pH值下均溶解的聚乙烯醇包衣。本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素，并且其中所述药物组合物包含不依赖于pH而溶解于溶液水性介质中的聚乙烯醇包衣。本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素，并且其中所述药物组合物包含在整个pH范围内均溶解的聚乙烯醇包衣。

本发明的一个实施方案为由片芯和聚乙烯醇包衣组成的药物组合物，其中所述片芯包含一种或多种酰化胰岛素和癸酸盐，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素，并且其中所述药物组合物包含作为立即释放包衣的聚乙烯醇包衣。

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述包衣包含聚乙烯醇聚合物。本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述包衣包含聚乙烯醇聚合物。在一个实施方案中，聚乙烯醇包衣为水性包衣。在一个实施方案中，聚乙烯醇包衣为根据如WO0104195 A1中所公开的聚乙烯醇包衣的水性包衣。在一个实施方案中，聚乙烯醇包衣为根据如WO0104195 A1中所例示的聚乙烯醇包衣的水性包衣。在一个实施方案中，根据本发明的聚乙烯醇包衣为立即释放包衣。在一个实施方案中，聚乙烯醇包衣溶解于水性介质中。在一个实施方案中，聚乙烯醇包衣溶解于水中。在一个实施方案中，根据本发明的聚乙烯醇包衣中的聚乙烯醇聚合物可溶于水性介质中。

在一个实施方案中，根据本发明的聚乙烯醇包衣在所有pH值下均溶解。在一个实施方案中，根据本发明的聚乙烯醇包衣不依赖于介质的pH而溶解于水性介质中。在一个实施方案中，根据本发明的聚乙烯醇包衣在整个pH范围内均溶解于水性介质。在一个实施方案中，根据本发明的聚乙烯醇包衣在任意pH下均溶解于水性介质。

本发明的一个实施方案涉及药物组合物，其中聚乙烯醇包衣包含至少25-55％的聚乙烯醇聚合物。

本发明的一个实施方案涉及药物组合物，其中聚乙烯醇包衣包含至少38-46％的聚乙烯醇聚合物。

在一个实施方案中，聚乙烯醇包衣为包含聚乙烯醇聚合物的II包衣(诸如例如，来自的(如2013年所售))。在一个实施方案中，聚乙烯醇包衣为包含聚乙烯醇聚合物的II并且是有色的(诸如例如，来自的(如2013年所售))。在一个实施方案中，聚乙烯醇包衣为包含聚乙烯醇聚合物的II并且是透明的(诸如例如，来自的(如2013年所售))。在一个实施方案中，聚乙烯醇包衣为II-Yellow包衣(诸如例如，来自的(如2013年所售))。在一个实施方案中，聚乙烯醇包衣为包含聚乙烯醇聚合物的II-yellow包衣(诸如例如，来自的(如2013年所售))。

在一个实施方案中，聚乙烯醇包衣为包含聚乙烯醇的II-clear包衣(诸如例如，来自的(如2013年所售))。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物和/或聚乙烯醇包衣包含本领域技术人员已知的赋形剂。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含可在水性包覆过程中使用的聚合物，其中所述聚合物可为分散体或溶液的形式。在一个实施方案中，根据本发明的聚合物为聚乙烯醇聚合物。在一个实施方案中，根据本发明的聚合物为形成膜的聚乙烯醇聚合物。在一个实施方案中，根据本发明的聚合物为存在于聚乙烯醇包衣(例如，如例如由Colorcon在2013年所售的II–Yellow)中的聚合物。

在一个实施方案中，根据本发明的聚乙烯醇包衣包含可在水性包覆过程中使用的聚合物，其中所述聚合物可为分散体或溶液的形式。

在一个实施方案中，根据本发明的聚乙烯醇包衣包含如本领域技术人员已知的赋形剂。这类已知赋形剂的非限制性实例公开在L.L.Augsburger和S.W.Hoag,"Pharmaceutical dosage forms:Tablets",Informa Healthcare,N.Y.,vol 2,2008中B.A.C.Carlin的"Direct compression and the role of filler-binders"(p 173-217)，R.C.Moreton的"Disintegrants in tabletting"(p 217-251)，以及N.A.Armstrong的"Lubricants,glidants and adherents"(p 251-269)中，并且通过引用而并入本文。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的聚乙烯醇包衣以相对于片芯约0-10％(w/w)的量包覆在根据本发明的片芯的表面上。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的聚乙烯醇包衣以相对于片芯约0％(w/w)的量包覆在根据本发明的片芯的外表面上。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的聚乙烯醇包衣以相对于片芯约2％(w/w)的量包覆在根据本发明的片芯的外表面上。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的聚乙烯醇包衣以相对于片芯约4％(w/w)的量包覆在根据本发明的片芯的外表面上。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的聚乙烯醇包衣以相对于片芯约4.5％(w/w)的量包覆在根据本发明的片芯的外表面上。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的聚乙烯醇包衣以相对于片芯约5％(w/w)的量包覆在根据本发明的片芯的外表面上。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的聚乙烯醇包衣以相对于片芯约6％(w/w)的量包覆在根据本发明的片芯的外表面上。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的聚乙烯醇包衣以相对于片芯约8％(w/w)的量包覆在根据本发明的片芯的外表面上。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的聚乙烯醇包衣以相对于片芯约10％(w/w)的量包覆在根据本发明的片芯的外表面上。

在一个实施方案中，向聚乙烯醇分散体中加入赋形剂。

在一个实施方案中，以聚乙烯醇分散体中总干包衣材料的约10％(w/w)的量向所述聚乙烯醇分散体中加入赋形剂。在一个实施方案中，以聚乙烯醇分散体中总干包衣材料的约10％(w/w)的量向所述聚乙烯醇分散体中加入赋形剂，其中所述聚乙烯醇分散体中的所述总干包衣材料包含如本发明所定义的聚乙烯醇聚合物。

在一个实施方案中，以聚乙烯醇分散体中总干包衣材料的约10％(w/w)的量向所述聚乙烯醇分散体中加入赋形剂，其中所述聚乙烯醇分散体中的所述总干包衣材料包含如WO0104195 A1所公开的聚乙烯醇聚合物。

在一个实施方案中，以聚乙烯醇分散体中总干包衣材料的约10％(w/w)的量向所述聚乙烯醇分散体中加入赋形剂，其中所述聚乙烯醇分散体中的所述总干包衣材料包含如WO0104195 A1所例示的聚乙烯醇聚合物。

在一个实施方案中，以所述聚乙烯醇分散体中总干包衣材料的约10％(w/w)的量向所述聚乙烯醇分散体中加入赋形剂，其中所述聚乙烯醇分散体中的所述总干包衣材料包含聚乙烯醇聚合物，如例如来自的II包衣(如2013年所售)中所包含的聚乙烯醇聚合物。

在一个实施方案中，以所述聚乙烯醇聚合物中总干包衣材料的约10％(w/w)的量向所述聚乙烯醇分散体中加入赋形剂，其中所述聚乙烯醇分散体中的所述总干包衣材料包含与例如来自的II包衣(如2013年所售)中所包含的聚乙烯醇聚合物不同的聚乙烯醇聚合物。

在一个实施方案中，以所述聚乙烯醇分散体中总干包衣材料的约10％(w/w)的量向所述聚乙烯醇分散体中加入赋形剂，其中所述聚乙烯醇分散体中的所述总干包衣材料包含聚乙烯醇聚合物，如例如来自的II–Yellow包衣(如2013年所售)中所包含的聚乙烯醇聚合物。

在一个实施方案中，以所述聚乙烯醇聚合物中总干包衣材料的约10％(w/w)的量向所述聚乙烯醇分散体中加入赋形剂，其中所述聚乙烯醇分散体中的所述总干包衣材料包含与例如来自的II–Yellow包衣(如2013年所售)中所包含的聚乙烯醇聚合物不同的聚乙烯醇聚合物。

在一个实施方案中，以所述聚乙烯醇分散体中总干包衣材料的约10％(w/w)的量向所述聚乙烯醇分散体中加入赋形剂，其中所述聚乙烯醇分散体中的所述总干包衣材料包含与II包衣(诸如例如来自的II-Yellow(如2013年所售))中所包含的聚乙烯醇不同的聚乙烯醇，并且其中所述聚乙烯醇包衣在任意pH下均溶解。在一个实施方案中，以所述聚乙烯醇中总干包衣材料的约10％(w/w)的量向所述聚乙烯醇分散体中加入赋形剂，其中所述聚乙烯醇分散体中的所述总干包衣材料包含与II包衣(诸如例如来自的II–Yellow(如2013年所售))中所包含的聚乙烯醇不同的聚乙烯醇，从而产生立即释放包衣。

片芯与包衣之间的接触

当提及聚乙烯醇包衣与片芯之间的接触时，如果没有另外说明，则该接触是在两个界面之间的界面中，因此是在聚乙烯醇包衣的内表面与片芯的外表面之间。

因此，本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣的内表面至少部分地与片芯的外表面直接接触。或者，这可被描述为：本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣至少部分地与片芯直接接触。描述同种接触的另一种替代方式可以是：本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣至少部分地与片芯的外表面直接接触。

本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯0％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯1％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯10％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯20％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯30％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯40％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯50％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯60％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯70％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯80％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯85％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯90％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯95％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯99％或更多的外表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯100％的外表面直接接触。

本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯的大部分表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯的绝大部分表面直接接触。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯的一部分表面直接接触。

在一个实施方案中，可在根据本发明的聚乙烯醇包衣的上方添加一个或多个额外的非功能性包衣。在一个实施方案中，可在根据本发明的聚乙烯醇包衣的下方添加一个或多个额外的非功能性包衣。

本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中在聚乙烯醇包衣与片芯之间没有施加额外的非功能性包衣。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中在聚乙烯醇包衣与片芯之间没有施加连续的额外的非功能性包衣。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中在聚乙烯醇包衣与片芯之间没有施加不间断的额外的非功能性包衣。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中在聚乙烯醇包衣与片芯之间没有施加不连续的额外的非功能性包衣。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中在聚乙烯醇包衣与片芯之间没有施加间断的额外的非功能性包衣。

本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中在聚乙烯醇包衣与片芯之间施加了额外的非功能性包衣。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中在聚乙烯醇包衣与片芯之间施加了连续的额外的非功能性包衣。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中在聚乙烯醇包衣与片芯之间施加了不间断的额外的非功能性包衣。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中在聚乙烯醇包衣与片芯之间施加了不连续的额外的非功能性包衣。本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中在聚乙烯醇包衣与片芯之间施加了间断的额外的非功能性包衣。

本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯外表面处暴露的大部分癸酸盐直接接触。

本发明的一个实施方案涉及这样的药物组合物，其中聚乙烯醇包衣与片芯外表面处暴露的大部分癸酸盐和酰化胰岛素直接接触。

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣与在所述片芯外表面处暴露的大部分癸酸盐和酰化胰岛素直接接触，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣与在所述片芯外表面处暴露的大部分癸酸盐和酰化胰岛素直接接触，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫键。

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣与在所述片芯外表面处暴露的大部分癸酸盐和酰化胰岛素直接接触，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣与在所述片芯外表面处暴露的包含在所述片芯中的大部分癸酸盐和酰化胰岛素以及任何额外赋形剂直接接触，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣与在所述片芯外表面处暴露的包含在所述片芯中的大部分癸酸盐和酰化胰岛素以及任何额外赋形剂直接接触，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫键。

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣与在所述片芯外表面处暴露的包含在所述片芯中的大部分癸酸盐和酰化胰岛素以及任何额外赋形剂直接接触，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链并任选地包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的胰岛素。

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣与在片芯外表面处暴露的包含在所述片芯中的大部分癸酸盐和酰化胰岛素以及任何额外赋形剂直接接触。

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣与在片芯外表面处暴露的包含在所述片芯中的大部分癸酸盐、酰化胰岛素以及任何额外赋形剂直接接触。

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣与在所述片芯外表面处暴露的包含在所述片芯中的大部分癸酸盐、酰化胰岛素、山梨醇及硬脂酸直接接触。

本发明的一个实施方案涉及包含片芯和聚乙烯醇包衣的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣与在所述片芯外表面处暴露的包含在所述片芯中的全部成分的大部分直接接触。

药物组合物

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物为固体口服组合物。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物为片剂。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含多个片剂。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的片芯为重约1.5至约900mg的片剂。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的片芯为至多重约50mg的片剂。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的片芯为至多重约1.5-50mg的片剂。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的片芯为重约50mg至约600mg的片剂。在一个实施方案中，本发明涉及重约100mg至约600mg的包覆或未包覆的片芯，并且其在本文中可被称为“整料中等片剂(monolith midi tablet)”或“中等片剂”。在一个实施方案中，本发明涉及重约600mg至约900mg的包覆或未包覆的片芯。在一个实施方案中，本发明涉及重约600mg至1300mg，优选在600mg至900mg范围内的包覆或未包覆的片芯，并且其在本文中可被称为“整料”或“整料片剂”。在一个实施方案中，本发明涉及重约3.0mg至约5.0mg的片芯。在一个实施方案中，本发明涉及重约3.6mg的片芯。在一个实施方案中，本发明涉及至多重约50mg的片芯，并且其在本文中可被称为“小片剂”。在一个实施方案中，本发明涉及重约3.0mg至约5.0mg的片芯，并且其在本文中可被称为“小片剂”。在一个实施方案中，本发明涉及重约3.6mg的片芯，并且其在本文中也可被称为“小片剂”。在一个实施方案中，本发明涉及为未包覆的片芯的小片剂。在一个实施方案中，本发明涉及为包覆的片芯的小片剂，其包覆有如本申请中定义的聚乙烯醇包衣。

在一个实施方案中，本发明涉及被压缩成中等片剂或整料片剂大小的快速崩解片剂的小片剂。

在本发明的一个实施方案中，将至多约300个小片剂压缩成中等片剂或整料片剂大小的快速崩解片剂。

在本发明的一个实施方案中，在胶囊中提供至多约300个小片剂。在一个实施方案中，在胶囊中提供至多约六个中等片剂。

在本发明的一个实施方案中，在胶囊中提供至多约三个中等片剂。

在本发明的一个实施方案中，在胶囊中提供两个中等片剂。

在本发明的一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的片芯为至多重约900mg的片剂。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约20-300个各自重约1.5-50mg的本发明的片芯。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约20-100个各自重约1.5-50mg的本发明的片芯。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约150-250个各自重约1.5-50mg的本发明的片芯。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约100-250个各自重约3.0-10mg的本发明的片芯。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约20-300个各自重约3.0-10mg的本发明的片芯。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约150-250个各自重约3.0-10mg的本发明的片芯。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约20-100个各自重约3.0-10mg的本发明的片芯。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约150-250个各自重约3.6mg的本发明的片芯。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约150-250个各自重约3.0-5.0mg的本发明的片芯。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约600-900mg本发明的片芯，其中每个片芯重约3.0-5.0mg。在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约600-900mg本发明的片芯，其中每个片芯重约3.6mg。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约710mg本发明的片芯，其中每个片芯重约3.0-5.0mg。在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约710mg本发明的片芯，其中每个片芯重约3.6mg。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约588mg本发明的片芯，其中每个片芯重约3.0-5.0mg。在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约710mg本发明的片芯，其中每个片芯重约3.6mg。

在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约600mg本发明的片芯，其中每个片芯重约3.0-5.0mg。在本发明的一个实施方案中，在一个或多个胶囊中提供约710mg本发明的片芯，其中每个片芯重约3.6mg。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的片芯为多颗粒体系。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的片芯在胶囊中提供。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物的片芯为多颗粒体系，其中所述多颗粒体系可被压缩成片剂的形式或包含在胶囊中。在一个实施方案中，所述压缩的片剂是快速崩解的。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含一个或多个层。在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含一个或多个片剂。在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含至多三个片剂。在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含两个片剂。该片剂可为单层或多层片剂，在一层、全部层或没有层中具有压缩的多颗粒体系。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯为包含相同尺寸的片剂或颗粒的多颗粒体系。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯为包含不同尺寸的片剂或颗粒的多颗粒体系。

在一个实施方案中，根据本发明的多颗粒体系的片剂或颗粒是未包覆的，并且在胶囊中提供。在一个实施方案中，根据本发明的多颗粒体系的片剂或颗粒用聚乙烯醇包衣包覆，并且在胶囊中提供。

在一个实施方案中，根据本发明的多颗粒体系的片剂或颗粒用聚乙烯醇包衣包覆。在一个实施方案中，根据本发明的多颗粒体系的片剂或颗粒用聚乙烯醇包衣包覆，其中聚乙烯醇包衣为诸如例如来自的II Yellow包衣(如2013年所售)。

在一个实施方案中，根据本发明的多颗粒体系的片剂或颗粒单独地用聚乙烯醇包衣包覆。在一个实施方案中，根据本发明的多颗粒体系的片剂或颗粒在被压缩成片剂之前单独地用聚乙烯醇包衣包覆，该片剂可以是快速崩解的并且具有中等片剂或整料片剂的大小，即重约50mg至约600mg，或约600至约900mg。

在一个实施方案中，将根据本发明的多颗粒体系的单独包覆的片剂或颗粒压缩成片芯。在一个实施方案中，将根据本发明的多颗粒体系的单独包覆的片剂或颗粒压缩成片芯，并且所得到的片芯没有用另一层聚乙烯醇包衣包覆。在一个实施方案中，将根据本发明的多颗粒体系的单独包覆的片剂或颗粒压缩成片芯，并且所述得到的片芯还用聚乙烯醇包衣包覆。在一个实施方案中，根据本发明的多颗粒体系的片剂或颗粒单独地用聚乙烯醇包衣包覆并被压缩成片剂，并且所述得到的片剂用额外的非功能性包衣包覆。

在一个实施方案中，根据本发明的多颗粒体系的片剂或颗粒集体地用聚乙烯醇包衣包覆。在一个实施方案中，根据本发明的多颗粒体系的片剂或颗粒在被压缩成片剂后集体地用聚乙烯醇包衣包覆。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含片芯，其中所述片芯包含癸酸盐和一种或多种酰化胰岛素，其中至少一种酰化胰岛素是如本文所述的一种或多种酰化胰岛素。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含片芯，其中所述片芯包含癸酸盐和胰岛素以及一种或多种赋形剂。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含片芯，其中所述片芯包含癸酸盐、酰化胰岛素以及一种或多种赋形剂，诸如但不限于山梨醇、硬脂酸镁、硬脂酸酯和硬脂酸。

在本发明的一个实施方案中，将多于一个重量低于50mg的片芯压缩成片剂，该片剂可以是快速崩解的并且具有中等片剂或整料片剂的大小，即，重约50至600mg，约100mg至约600mg，或约600mg至约900mg，或约600mg至约1300mg。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含片芯，其中所述片芯包含一种或多种赋形剂，如多元醇和/或润滑剂。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含多元醇。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含片芯，其中所述片芯包含多元醇，诸如但不限于山梨醇和甘露醇。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含多元醇，其中所述多元醇选自山梨醇、甘露醇或其混合物。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含片芯，其中所述片芯包含润滑剂，诸如但不限于硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸酯和胶体二氧化硅。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含润滑剂，其中所述润滑剂选自硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸酯或其混合物。

在本发明的某些实施方案中，所述药物组合物包含片芯，其中所述片芯可包含药物组合物中常见的另外的赋形剂，这类赋形剂的实例包括但不限于酶抑制剂、稳定剂、防腐剂、调味剂、甜味剂和其他化合物，如在通过引用并入于此的‘Handbook ofPharmaceutical Excipients’Ainley Wade,Paul J.Weller,Arthur H.Kibbe,第3版,American Pharmacists Association(2000)或通过引用并入于此的‘Handbook ofPharmaceutical Excipients’,Rowe等人编著,第4版,Pharmaceutical Press(2003)中所述。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含本领域技术人员已知的赋形剂。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物包含如本领域技术人员已知的赋形剂。这类已知赋形剂的非限制性实例在L.L.Augsburger和S.W.Hoag,"Pharmaceuticaldosage forms:Tablets",Informa Healthcare,N.Y.,vol 2,2008中B.A.C.Carlin的"Direct compression and the role of filler-binders"(p 173-217)，R.C.Moreton的"Disintegrants in tabletting"(p217-251)，以及N.A.Armstrong的"Lubricants,glidants and adherents"(p251-269)中公开，并通过引用而并入本文。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物为固体口服制剂的形式。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物被制备成片剂。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物被制备成用于口服给药的片剂。

在一个实施方案中，其中提供根据本发明的药物组合物的胶囊选自本领域技术人员已知的胶囊。

在一个实施方案中，其中提供根据本发明的药物组合物的胶囊选自在2015年可商购获得的胶囊。

在一个实施方案中，其中提供根据本发明的药物组合物的胶囊选自包含明胶或明胶样材料的胶囊。

在一个实施方案中，其中提供根据本发明的药物组合物的胶囊选自如下的胶囊：鱼明胶、HMPC、支链淀粉(pullulan)、猪明胶。

在一个实施方案中，其中提供根据本发明的药物组合物的胶囊在口服给药后10分钟内释放其内容物。

在一个实施方案中，其中提供根据本发明的药物组合物的胶囊在口服给药后5分钟内释放其内容物。

本发明组合物的用途

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物用于制备用于治疗或预防高血糖症、2型糖尿病、糖耐量减低和1型糖尿病的药物。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物在口服施用于比格犬后约45-75分钟显示出Tmax。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物在口服施用于比格犬后约45分钟显示出Tmax。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物在约50分钟后显示出Tmax。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物在口服施用于比格犬后约55分钟后显示出Tmax。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物在约60分钟后显示出Tmax。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物在口服施用于比格犬后约65分钟后显示出Tmax。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物在口服施用于比格犬后约70分钟后显示出Tmax。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物在口服施用于比格犬后约75分钟后显示出Tmax。

在一个实施方案中，本发明提供了这样的口服制剂，其允许在所述组合物口服施用30分钟后进餐而不影响活性物质即酰化胰岛素的生物利用度/变化。

制备方法

本发明的一个实施方案涉及用于制备根据本发明的组合物的方法。在一个实施方案中，通过本领域技术人员已知的任何方法进行本发明的聚乙烯醇包覆。

在一个实施方案中，本发明的包覆通过在L.L.Augsburger和S.W.Hoag,"Pharmaceutical dosage forms:Tablets",Informa Healthcare,N.Y.,vol 1,2008p 373-399中D.M.Jones的“Coating processes and equipment”中公开的任意方法进行，该文献通过引用而并入本文。

在一个实施方案中，片芯为通过适用于配制固体口服组合物的方法制备的片芯。

在一个实施方案中，胰岛素粉末在配制前过筛。在一个实施方案中，山梨醇(或任何其他等效的赋形剂)粉末在配制前过筛。在一个实施方案中，将山梨醇和胰岛素粉末混合在一起。在一个实施方案中，将等量的山梨醇和胰岛素粉末混合在一起。在一个实施方案中，手动混合等量的山梨醇和胰岛素粉末。

在一个实施方案中，手动混合山梨醇和胰岛素粉末。在一个实施方案中，首先手动混合山梨醇和胰岛素粉末。在一个实施方案中，通过手动和自动混合过程混合山梨醇和胰岛素粉末。在一个实施方案中，通过手动和自动混合过程混合山梨醇和胰岛素粉末，其中所述自动混合过程在Tubular混合器中进行。

在一个实施方案中，通过自动混合过程混合山梨醇和胰岛素粉末。在一个实施方案中，通过自动混合过程混合山梨醇和胰岛素粉末，其中所述自动混合过程在Tubular混合器中进行。

在一个实施方案中，首先手动混合山梨醇和胰岛素粉末，随后进行自动混合过程。在一个实施方案中，首先手动混合山梨醇和胰岛素粉末直到均匀地共混在一起。在一个实施方案中，首先手动混合山梨醇和胰岛素粉末直到均匀地共混在一起，随后进行自动混合过程。在一个实施方案中，首先手动混合山梨醇和胰岛素粉末，随后进行自动混合混合过程，其中所述自动混合过程在Tubular混合器中进行。

在一个实施方案中，首先手动混合山梨醇和胰岛素粉末直到均匀地共混在一起，其中所述山梨醇和胰岛素粉末共混的程度通过目测进行评估。在一个实施方案中，首先手动混合山梨醇和胰岛素粉末直到共混均匀，其中所述山梨醇和胰岛素粉末共混的程度通过目测进行评估，随后进行自动混合过程。

在一个实施方案中，手动混合等量的山梨醇和胰岛素粉末，并以高达第一次山梨醇加入量的两倍量加入另一份山梨醇，然后也手动搅拌均匀。当所述最后加入的山梨醇混合均匀时，然后使粉末在Turbula混合器或任何等效的混合器中进行机械混合，以完成混合过程，从而产生均匀的粉末。

在一个实施方案中，以1:1的量将癸酸的盐加入所述山梨醇和胰岛素的均匀粉末中。该添加可分两步进行，混合可以首先手动进行，最后在Turbula混合器或任何其他自动化混合装置中进行机械混合。该添加可分两步进行，首先手动进行混合，最后在Turbula混合器或任何等效混合器中进行机械混合。

然后可以如本领域技术人员所知的，在压片机中压缩所述粉末，得到根据本发明的片芯。

然后可以如本领域技术人员所知的，在旋转式压片机中压缩所述粉末，得到根据本发明的片芯。然后可以如本领域技术人员所知的，在单冲压片机中压缩所述粉末，得到根据本发明的片芯。然后可以如本领域技术人员所知的，外心(excenter)压片机中压缩所述粉末，得到根据本发明的片芯。

在一个实施方案中，可将聚乙烯醇包衣包覆在根据本发明的片芯的上方。在一个实施方案中，可将聚乙烯醇包衣包覆在根据本发明的片剂的上方。在一个实施方案中，可将聚乙烯醇包衣包覆在根据本发明的片芯的外表面的上方。

在一个实施方案中，将聚乙烯醇分散体或干燥聚合物包覆在根据本发明的片芯的上方。在一个实施方案中，将聚乙烯醇分散体或干燥聚合物包覆在根据本发明的片剂的上方。

在一个实施方案中，在实际包衣程序之前，聚乙烯醇分散体在实际包衣前通过筛网过滤器过滤。

在一个实施方案中，在实际包衣程序之前，聚乙烯醇分散体在通过筛网过滤器过滤前进行搅拌。在一个实施方案中，在实际包衣程序之前，聚乙烯醇分散体在通过约0.24mm筛网过滤器过滤前进行搅拌。

在一个实施方案中，在实际包衣程序之前，包含其他赋形剂的聚乙烯醇分散体在实际包衣前通过筛网过滤器过滤。

在一个实施方案中，在实际包衣程序之前，进一步包含其他赋形剂的聚乙烯醇分散体在通过筛网过滤器过滤前进行搅拌。在一个实施方案中，在实际包衣程序之前，进一步包含其他赋形剂的聚乙烯醇分散体在通过约0.24mm筛网过滤器过滤前进行搅拌。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯或片剂的实际包衣程序在盘式包衣机或流化床包衣机中进行。在一个实施方案中，根据本发明的片芯或片剂的实际包衣程序在盘式包衣机或流化床包衣机中通过经喷嘴喷射聚乙烯醇分散体进行。在一个实施方案中，根据本发明的片芯或片剂的实际包衣程序在盘式包衣机或流化床包衣机中通过经喷嘴喷射进一步包含其他赋形剂的聚乙烯醇分散体进行。

在一个实施方案中，所述包衣过程和设备可以以如D.M.Jones在“Pharmaceuticaldosage forms:Tablets",Informa Healthcare,N.Y.,vol.1,2008p 373-399,L.L.Augsburger and S.W.Hoag”中所公开的那样使用，该文献通过引用而并入于此。

对于更小片剂的制备，请参考本文提供的方法。

酰化胰岛素

在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含如下文所定义的酰化胰岛素。

在一个实施方案中，用于本发明药物组合物的酰化胰岛素对于蛋白质水解降解是稳定的，即，对于胃肠(GI)道或身体其他各处的快速降解是稳定的。对于蛋白质水解降解稳定的酰化胰岛素在本文中被称为“蛋白酶稳定化的胰岛素”或“蛋白水解稳定的胰岛素”。

对于蛋白质水解降解稳定的酰化胰岛素在本文中应理解为这样的酰化胰岛素，其相对于人胰岛素经历更缓慢的被一种或多种蛋白酶的降解。在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素相对于人胰岛素经历更缓慢的被一种或多种蛋白酶的降解。在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素对于选自下组的一种或多种酶的降解是稳定的：胃蛋白酶(诸如例如，同工型胃蛋白酶A、胃蛋白酶B、胃蛋白酶C和/或胃蛋白酶F)、胰凝乳蛋白酶(诸如例如，同工型胰凝乳蛋白酶A、胰凝乳蛋白酶B和/或胰凝乳蛋白酶C)、胰蛋白酶、胰岛素降解酶(IDE)、弹性蛋白酶(诸如例如，同工型胰弹性蛋白酶I和/或II)、羧肽酶(例如，同工型羧肽酶A、羧肽酶A2和/或羧肽酶B)、氨肽酶、组织蛋白酶D，以及在来源于大鼠、猪或人的肠提取物中存在的其他酶。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素对于选自下组的一种或多种酶的降解是稳定的：胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、胰岛素降解酶(IDE)、弹性蛋白酶、羧肽酶、氨肽酶和组织蛋白酶D。在进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素对于选自下组的一种或多种酶的降解是稳定的：胰凝乳蛋白酶、羧肽酶和IDE。在又一进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素对于选自下组的一种或多种酶的降解是稳定的：胰凝乳蛋白酶和IDE。在又一进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素对于选自下组的一种或多种酶的降解是稳定的：胰凝乳蛋白酶和羧肽酶。

可如WO2011/161125的实施例102中所述将T1/2确定为根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素对诸如胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶和/或羧肽酶A等蛋白酶或对酶混合物如组织提取物(来自肝、肾、十二指肠、空肠、回肠、结肠、胃等)的蛋白水解稳定性的量度。在本发明的一个实施方案中，相对于人胰岛素，T1/2增加。在进一步的实施方案中，相对于没有一个或多个额外的二硫键的酰化胰岛素，T1/2增加。在又一进一步的实施方案中，相对于人胰岛素，T1/2增加至少2倍。在又一进一步的实施方案中，相对于没有一个或多个额外的二硫键的酰化胰岛素，T1/2增加至少2倍。在又一进一步的实施方案中，相对于人胰岛素，T1/2增加至少3倍。在又一进一步的实施方案中，相对于没有一个或多个额外的二硫键的酰化胰岛素，T1/2增加至少3倍。在又一进一步的实施方案中，相对于人胰岛素，T1/2增加至少4倍。在又一进一步的实施方案中，相对于没有一个或多个额外的二硫键的酰化胰岛素，T1/2增加至少4倍。在又一进一步的实施方案中，相对于人胰岛素，T1/2增加至少5倍。在又一进一步的实施方案中，相对于没有一个或多个额外的二硫键的酰化胰岛素，T1/2增加至少5倍。在又一进一步的实施方案中，相对于人胰岛素，T1/2增加至少10倍。在又一进一步的实施方案中，相对于没有一个或多个额外的二硫键的酰化胰岛素，T1/2增加至少10倍。

T1/2还可以表示为相对于如WO2011/161125的实施例102中所述的蛋白水解稳定化胰岛素类似物A14E,B25H,desB30人胰岛素的相对T1/2。

在一个实施方案中，酰化胰岛素可具有相对于人胰岛素增加的溶解度。在进一步的实施方案中，在pH 3-9下，酰化胰岛素具有相对于人胰岛素增加的溶解度。在又一进一步的实施方案中，在pH 4-8.5下，酰化胰岛素具有相对于人胰岛素增加的溶解度。在又一进一步的实施方案中，在pH 4-8下，酰化胰岛素具有相对于人胰岛素增加的溶解度。在又一进一步的实施方案中，在pH 4.5-8下，酰化胰岛素具有相对于人胰岛素增加的溶解度。在进一步的实施方案中，在pH 5-8下，酰化胰岛素具有相对于人胰岛素增加的溶解度。在又一进一步的实施方案中，在pH 5.5-8下，酰化胰岛素具有相对于人胰岛素增加的溶解度。在进一步的实施方案中，在pH 6-8下，酰化胰岛素具有相对于人胰岛素增加的溶解度。

在一个实施方案中，在pH 2-4下，酰化胰岛素具有相对于人胰岛素增加的溶解度。

在一个实施方案中，酰化胰岛素可具有相对于母体胰岛素增加的溶解度。在进一步的实施方案中，在pH 3-9下，酰化胰岛素具有相对于母体胰岛素增加的溶解度。在又一进一步的实施方案中，在pH 4-8.5下，酰化胰岛素具有相对于母体胰岛素增加的溶解度。在又一进一步的实施方案中，在pH 4-8下，酰化胰岛素具有相对于母体胰岛素增加的溶解度。在又一进一步的实施方案中，在pH 4.5-8下，酰化胰岛素具有相对于母体胰岛素增加的溶解度。在又一进一步的实施方案中，在pH 5-8下，酰化胰岛素具有相对于母体胰岛素增加的溶解度。在又一进一步的实施方案中，在pH 5.5-8下，酰化胰岛素具有相对于母体胰岛素增加的溶解度。在进一步的实施方案中，在pH 6-8下，酰化胰岛素具有相对于母体胰岛素增加的溶解度。

在一个实施方案中，在pH 2-4下，酰化胰岛素具有相对于母体胰岛素增加的溶解度。

在一个实施方案中，可使溶液经历30,000g下20分钟的离心，然后可通过RP-HPLC确定上清液中的胰岛素浓度。如果该浓度在实验误差内等于最初用于制备组合物的胰岛素浓度，则该胰岛素完全可溶于本发明的组合物中。在一个实施方案中，可通过肉眼检查包含该组合物的容器而简单地确定胰岛素在本发明的药物组合物中的溶解度。如果肉眼可见该溶液是澄清的并且没有颗粒物质悬浮或沉淀在容器的侧面/底部，则该胰岛素是可溶的。

在一个实施方案中，本发明的酰化胰岛素具有侧链。在一个实施方案中，该侧链与赖氨酸残基的ε氨基基团附接。在一个实施方案中，根据本发明的侧链为酰基部分。在一个实施方案中，该侧链与胰岛素类似物中赖氨酸残基的ε氨基基团附接。在一个实施方案中，该侧链与胰岛素类似物的B链中赖氨酸残基的ε氨基基团附接。

在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素的侧链的脂肪二酸具有6至40个碳原子。在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素的侧链的脂肪二酸具有8至26个碳原子。在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素的侧链的脂肪二酸具有8至22个碳原子。在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素的侧链的脂肪二酸具有14至22个碳原子。在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素的侧链的脂肪二酸具有16至22个碳原子。在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素的侧链的脂肪二酸具有16至20个碳原子。在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素的侧链的脂肪二酸具有16至18个碳原子。在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素的侧链的脂肪二酸具有16个碳原子。在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素的侧链的脂肪二酸具有18个碳原子。在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素的侧链的脂肪二酸具有20个碳原子。在本发明的进一步的实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素的侧链的脂肪二酸具有22个碳原子。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含如专利申请WO2009/115469或WO2011/161125中公开且请求保护的酰化胰岛素。用于制备这类胰岛素的方法以及用于表征这类胰岛素(如物理稳定性和化学稳定性以及效力和T1/2)的试验在专利申请WO2009/115469或WO2011/161125中提供。在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含选自专利申请WO2009/115469或WO2011/161125的实施例的酰化胰岛素。

在一个实施方案中，酰化胰岛素为酰化胰岛素类似物，其中所述酰化胰岛素类似物包含式1的A链氨基酸序列和式2的B链氨基酸序列：

式(1)(SEQ ID No:1)

Xaa_A(-2)-Xaa_A(-1)-Xaa_A0-Gly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Xaa_A8-Ser-Ile-Cys-Xaa_A12-Xaa_A13-Xaa_A14-Xaa_A15-Leu-Glu-Xaa_A18-Tyr-Cys-Xaa_A21

式(2)(SEQ ID No:2)

Xaa_B(-2)-Xaa_B(-1)-Xaa_B0-Xaa_B1-Xaa_B2-Xaa_B3-Xaa_B4-His-Leu-Cys-Gly-Ser-Xaa_B10-Leu-Val-Glu-Ala-Leu-Xaa_B16-Leu-Val-Cys-Gly-Glu-Arg-Gly-Xaa_B24-Xaa_B25-Xaa_B26-Xaa_B27-Xaa_B28-Xaa_B29-Xaa_B30-Xaa_B31-Xaa_B32

其中

Xaa_A(-2)不存在或为Gly；

Xaa_A(-1)不存在或为Pro；

Xaa_A0不存在或为Pro；

Xaa_A8独立地选自Thr和His；

Xaa_A12独立地选自Ser、Asp和Glu；

Xaa_A13独立地选自Leu、Thr、Asn、Asp、Gln、His、Lys、Gly、Arg、Pro、Ser和Glu；

Xaa_A14独立地选自Tyr、Thr、Asn、Asp、Gln、His、Lys、Gly、Arg、Pro、Ser和Glu；

Xaa_A15独立地选自Gln、Asp和Glu；

Xaa_A18独立地选自Asn、Lys和Gln；

Xaa_A21独立地选自Asn和Gln；

Xaa_B(-2)不存在或为Gly；

Xaa_B(-1)不存在或为Pro；

Xaa_B0不存在或为Pro；

Xaa_B1不存在或独立地选自Phe和Glu；

Xaa_B2不存在或为Val；

Xaa_B3不存在或独立地选自Asn和Gln；

Xaa_B4独立地选自Gln和Glu；

Xaa_B10独立地选自His、Asp、Pro和Glu；

Xaa_B16独立地选自Tyr、Asp、Gln、His、Arg和Glu；

Xaa_B24独立地选自Phe和His；

Xaa_B25独立地选自Asn、Phe和His；

Xaa_B26不存在或独立地选自Tyr、His、Thr、Gly和Asp；

Xaa_B27不存在或独立地选自Thr、Asn、Asp、Gln、His、Lys、Gly、Arg、Pro、Ser和Glu；

Xaa_B28不存在或独立地选自Pro、His、Gly和Asp；

Xaa_B29不存在或独立地选自Lys、Arg和Gln；并且优选地，Xaa_B29不存在或独立地选自Lys和Gln；

Xaa_B30不存在或为Thr；

Xaa_B31不存在或为Leu；

Xaa_B32不存在或为Glu；

其中A链氨基酸序列和B链氨基酸序列通过A链位置7的半胱氨酸与B链位置7的半胱氨酸之间的二硫桥，以及A链位置20的半胱氨酸与B链位置19的半胱氨酸之间的二硫桥相连接，并且其中A链的位置6和位置11的半胱氨酸通过二硫桥相连接。

在一个实施方案中，衍生物为酰化胰岛素类似物，其中所述酰化胰岛素类似物包含式3的A链氨基酸序列和式4的B链氨基酸序列：

式(3)(SEQ ID No:3)

Gly-Ile-Val-Glu-Gln-Cys-Cys-Xaa_A8-Ser-Ile-Cys-Xaa_A12-Xaa_A13-Xaa_A14-Xaa_A15-Leu-Glu-Xaa_A18-Tyr-Cys-Xaa_A21

式(4)(SEQ ID No:4)

Xaa_B1-Val-Xaa_B3-Xaa_B4-His-Leu-Cys-Gly-Ser-Xaa_B10-Leu-Val-Glu-Ala-Leu-Xaa_B16-Leu-Val-Cys-Gly-Glu-Arg-Gly-Xaa_B24-His-Xaa_B26-Xaa_B27-Xaa_B28-Xaa_B29-Xaa_B30

其中

Xaa_A8独立地选自Thr和His；

Xaa_A12独立地选自Ser、Asp和Glu；

Xaa_A14独立地选自Thr、Asn、Asp、Gln、His、Lys、Gly、Arg、Pro、Ser和Glu；

Xaa_A15独立地选自Gln、Asp和Glu；

Xaa_A18独立地选自Asn、Lys和Gln；

Xaa_A21独立地选自Asn和Gln；

Xaa_B1独立地选自Phe和Glu；

Xaa_B3独立地选自Asn和Gln；

Xaa_B4独立地选自Gln和Glu；

Xaa_B10独立地选自His、Asp、Pro和Glu；

Xaa_B16独立地选自Tyr、Asp、Gln、His、Arg和Glu；

Xaa_B24独立地选自Phe和His；

Xaa_B26不存在或独立地选自Tyr、His、Thr、Gly和Asp；

Xaa_B28不存在或独立地选自Pro、His、Gly和Asp；

Xaa_B30不存在或为Thr；

在一个实施方案中，酰化胰岛素为酰化胰岛素类似物，

其中

Xaa_A8独立地选自Thr和His；

Xaa_A12独立地选自Ser和Glu；

Xaa_A14独立地选自Asp、His和Glu；

Xaa_A15独立地选自Gln和Glu；

Xaa_A18独立地选自Asn、Lys和Gln；

Xaa_A21独立地选自Asn和Gln；

Xaa_B1独立地选自Phe和Glu；

Xaa_B3独立地选自Asn和Gln；

Xaa_B4独立地选自Gln和Glu；

Xaa_B10独立地选自His、Asp、Pro和Glu；

Xaa_B16独立地选自Tyr、Asp、Gln、His、Arg和Glu；

Xaa_B24独立地选自Phe和His；

Xaa_B25独立地选自Phe、Asn和His；

Xaa_B26独立地选自Tyr、Thr、Gly和Asp；

Xaa_B27独立地选自Thr、Asn、Asp、Gln、His、Lys、Gly、Arg和Glu；

Xaa_B28独立地选自Pro、Gly和Asp；

Xaa_B29独立地选自Lys和Gln；

Xaa_B30不存在或为Thr；

在测量后进行比较时，酰化胰岛素可相对于母体胰岛素具有提高的表观效力和/或生物利用度。

为方便起见，以下为可编码的天然氨基酸的名称，其常用三字母代码和单字母代码包括在括号中：甘氨酸(Gly和G)、脯氨酸(Pro和P)、丙氨酸(Ala和A)、缬氨酸(Val和V)、亮氨酸(Leu和L)、异亮氨酸(Ile和I)、甲硫氨酸(Met和M)、半胱氨酸(Cys和C)、苯丙氨酸(Phe和F)、酪氨酸(Tyr和Y)、色氨酸(Trp和W)、组氨酸(His和H)、赖氨酸(Lys和K)、精氨酸(Arg和R)、谷氨酰胺(Gln和Q)、天冬酰胺(Asn和N)、谷氨酸(Glu和E)、天冬氨酸(Asp和D)、丝氨酸(Ser和S)和苏氨酸(Thr和T)。如果由于打字错误，存在与常用代码的偏差，则应用常用代码。存在于用于本发明的酰化胰岛素中的氨基酸优选为可被核酸编码的氨基酸。在一个实施方案中，胰岛素或胰岛素类似物或衍生物被Gly、Glu、Asp、His、Gln、Asn、Ser、Thr、Lys、Arg和/或Pro置换，并且/或者Gly、Glu、Asp、His、Gln、Asn、Ser、Thr、Lys、Arg和/或Pro添加至胰岛素或胰岛素类似物或衍生物。在一个实施方案中，胰岛素或胰岛素类似物或衍生物被Glu、Asp、His、Gln、Asn、Lys和/或Arg置换，并且/或者Glu、Asp、His、Gln、Asn、Lys和/或Arg添加至酰化胰岛素。

在一个实施方案中，用于根据本发明的药物组合物的酰化胰岛素为包含酰化前胰岛素类似物和侧链的酰化胰岛素类似物，其中所述酰化前胰岛素类似物选自：A14E,B25H,desB30人胰岛素；A14H,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B1E,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B16E,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B28D,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27E,desB30人胰岛素；A14E,B1E,B25H,B27E,desB30人胰岛素；A14E,B1E,B16E,B25H,B27E,desB30人胰岛素；A8H,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A8H,A14E,B25H,B27E,desB30人胰岛素；A8H,A14E,B1E,B25H,desB30人胰岛素；A8H,A14E,B1E,B25H,B27E,desB30人胰岛素；A8H,A14E,B1E,B16E,B25H,B27E,desB30人胰岛素；A8H,A14E,B16E,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B26D,desB30人胰岛素；A14E,B1E,B27E,desB30人胰岛素；A14E,B27E,desB30人胰岛素；A14E,B28D,desB30人胰岛素；A14E,B28E,desB30人胰岛素；A14E,B1E,B28E,desB30人胰岛素；A14E,B1E,B27E,B28E,desB30人胰岛素；A14E,B1E,B25H,B28E,desB30人胰岛素；A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,desB30人胰岛素；A14D,B25H,desB30人胰岛素；B25N,B27E,desB30人胰岛素；A8H,B25N,B27E,desB30人胰岛素；A14E,B27E,B28E,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B28E,desB30人胰岛素；B25H,B27E,desB30人胰岛素；B1E,B25H,B27E,desb30人胰岛素；A8H,B1E,B25H,B27E,desB30人胰岛素；A8H,B25H,B27E,desB30人胰岛素；B25N,B27D,desB30人胰岛素；A8H,B25N,B27D,desB30人胰岛素；B25H,B27D,desB309人胰岛素；A8H,B25H,B27D,desB30人胰岛素；A(-1)P,A(0)P,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B(-1)P,B(0)P,B25H,desB30人胰岛素；A(-1)P,A(0)P,A14E,B(-1)P,B(0)P,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B30T,B31L,B32E人胰岛素；A14E,B25H人胰岛素；A14E,B16H,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B10P,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B10E,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B4E,B25H,desB30人胰岛素；A14H,B16H,B25H,desB30人胰岛素；A14H,B10E,B25H,desB30人胰岛素；A13H,A14E,B10E,B25H,desB30人胰岛素；A13H,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A14E,A18Q,B3Q,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B24H,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29R,desB30人胰岛素；A14E,A21G,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素；A14E,A21G,B25H,B26G,B27G,B28G,B29R,desB30人胰岛素；A14E,A18Q,A21Q,B3Q,B25H,desB30人胰岛素；A14E,A18Q,A21Q,B3Q,B25H,B27E,desB30人胰岛素；A14E,A18Q,B3Q,B25H,desB30人胰岛素；A13H,A14E,B1E,B25H,desB30人胰岛素；A13N,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13N,A14E,B1E,B25H,desB30人胰岛素；A(-2)G,A(-1)P,A(0)P,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B(-2)G,B(-1)P,B(0)P,B25H,desB30人胰岛素；A(-2)G,A(-1)P,A(0)P,A14E,B(-2)G,B(-1)P,B(0)P,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B27R,B28D,B29K,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27R,B28D,B29K,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B26T,B27R,B28D,B29K,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27R,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27H,desB30人胰岛素；A14E,A18Q,B3Q,B25H,desB30人胰岛素；A13E,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A12E,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A15E,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13E,B25H,desB30人胰岛素；A12E,B25H,desB30人胰岛素；A15E,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B25H,desB27,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B26D,B27E,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27R,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27N,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27D,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27Q,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27E,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27G,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27H,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27K,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27P,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27S,desB30人胰岛素；A14E,B25H,B27T,desB30人胰岛素；A13R,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13N,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13D,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13Q,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13E,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13G,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13H,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13K,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13P,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13S,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A13T,A14E,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B16R,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B16D,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B16Q,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B16E,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B16H,B25H,desB30人胰岛素；A14R,B25H,desB30人胰岛素；A14N,B25H,desB30人胰岛素；A14D,B25H,desB30人胰岛素；A14Q,B25H,desB30人胰岛素；A14E,B25H,desB30人胰岛素；A14G,B25H,desB30人胰岛素；A14H,B25H,desB30人胰岛素；A8H,B10D,B25H人胰岛素；以及A8H,A14E,B10E,B25H,desB30人胰岛素，并且该实施方案可任选地包含A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素；B25H,desB30人胰岛素；以及B25N,desB30人胰岛素。

在一个实施方案中，用于根据本发明的药物组合物的酰化胰岛素为包含酰化前胰岛素类似物和侧链的酰化胰岛素类似物，其中所述酰化前胰岛素类似物选自：A14E,B25H,desB30人胰岛素、A14E,B16H,B25H,desB30人胰岛素、A14E,B25H,desB27,desB30人胰岛素以及A14E,desB27,desB30人胰岛素。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素具有两个或更多个半胱氨酸置换，所保留的人胰岛素的三个二硫键，以及与如B链中的赖氨酸残基的ε氨基基团附接的侧链。

二硫键通过两个巯基基团的偶联而产生，并且在本文中应理解为两个硫原子之间的连接，即，具有整体连接性R-S-S-R的结构。二硫键还可被称为连接二硫键、SS键或二硫桥。通过将两个半胱氨酸氨基酸残基引入肽中并随后将两个巯基基团氧化成二硫键而产生二硫键。这样的氧化可化学地进行(如本领域技术人员已知的)或可在例如酵母中的胰岛素表达期间发生。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素为这样的酰化胰岛素，其中两个氨基酸残基已被半胱氨酸残基置换，已引入侧链，并且任选地，相对于人胰岛素的氨基酸序列，在位置B30上的氨基酸已缺失。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素相对于人胰岛素包含侧链和2至9个突变，其中至少两个置换为半胱氨酸残基，或者，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素相对于人胰岛素包含侧链和2至8个突变，其中至少两个置换为半胱氨酸残基，或者相对于人胰岛素包含侧链和2至7个突变，其中至少两个置换为半胱氨酸残基，或者相对于人胰岛素包含侧链和2至6个突变，其中至少两个置换为半胱氨酸残基，或者相对于人胰岛素包含侧链和2至5个突变，其中至少两个置换为半胱氨酸残基，或者相对于人胰岛素包含侧链和2至4个突变，其中至少两个置换为半胱氨酸残基，或者相对于人胰岛素包含侧链和2至3个突变，其中至少两个置换为半胱氨酸残基，或者可替代地，相对于人胰岛素包含侧链和2个半胱氨酸置换。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素为这样的胰岛素类似物(如上文定义的)，其含有相对于人胰岛素的一个或多个额外的二硫键并且含有与存在于该分子的B链中的赖氨酸残基的ε氨基基团附接的侧链。

当将半胱氨酸残基引入至没有一个或多个额外的二硫键的酰化胰岛素中时，半胱氨酸残基位于折叠的胰岛素类似物的三维结构中，以允许形成一个或多个额外的二硫键。例如，如果放置两个新的半胱氨酸残基，则该三维结构中新半胱氨酸残基的接近使得可在这两个新半胱氨酸残基之间形成二硫键。

蛋白质(如胰岛素)中二硫键的数目可容易地通过如例如实施例中所述的准确完整质量测量来确定。可通过本领域已知的标准技术如肽作图(peptide mapping)来验证二硫键连接性。用于胰岛素肽中的二硫键作图(disulfide bond mapping)的一般策略包括以下步骤：1)将未还原的胰岛素破碎成二硫键合的肽，若可能，每个肽仅有单个二硫键。所选择的条件也使得避免了二硫键的重排。2)将二硫键合的肽彼此分离。3)鉴别参与单个二硫键的半胱氨酸残基。

在本发明的一个实施方案中，提供了具有侧链和至少两个半胱氨酸置换的酰化胰岛素，其中保留了人胰岛素的三个二硫键。

在本发明的一个实施方案中，提供了具有两个或更多个半胱氨酸置换的酰化胰岛素，其中保留了人胰岛素的三个二硫键，并且其中在A链的选自A9、A10和A12的位置上的至少一个氨基酸残基被半胱氨酸置换，在B链的选自B1、B2、B3、B4、B5和B6的位置上的至少一个氨基酸残基被半胱氨酸置换，侧链与B链中赖氨酸残基的ε氨基基团附接，并且任选地在位置B30上的氨基酸缺失。

在本发明的一个实施方案中，在A链的位置A10上的氨基酸残基被半胱氨酸置换，在B链的选自B1、B2、B3和B4的位置上的至少一个氨基酸残基被半胱氨酸置换，侧链与B链中赖氨酸残基的ε氨基基团附接，并且任选地在位置B30上的氨基酸缺失。

在本发明的一个实施方案中，在A链的选自A9、A10和A12的位置上的至少一个氨基酸残基被半胱氨酸置换，在B链的选自B1、B2、B3、B4、B5和B6的位置上的至少一个氨基酸残基被半胱氨酸置换，在选自A14、A21、B1、B3、B10、B16、B22、B25、B26、B27、B28、B29、B30、B31、B32的位置上的至少一个氨基酸残基被不是半胱氨酸的氨基酸置换，侧链与B链中赖氨酸残基的ε氨基基团附接，并且任选地在位置B30上的氨基酸缺失。

应当理解，当B1或B3为半胱氨酸时，相同的氨基酸不能为不是半胱氨酸的氨基酸，而如果例如B1为半胱氨酸，则根据本发明的实施方案，B3可被不是半胱氨酸的氨基酸置换，反之亦然。在本发明的一个实施方案中，在A链的位置A10上的氨基酸残基被半胱氨酸置换，在B链的选自B1、B2、B3和B4的位置上的至少一个氨基酸残基被半胱氨酸置换，任选地至少一个氨基酸残基被不是半胱氨酸的氨基酸置换，侧链与B链中赖氨酸残基的ε氨基基团附接，并且任选地在位置B30上的氨基酸缺失。在本发明的一个实施方案中，在A链的位置A10上的氨基酸残基被半胱氨酸置换，在B链的选自B3和B4的位置上的至少一个氨基酸残基被半胱氨酸置换，任选地至少一个氨基酸残基被不是半胱氨酸的氨基酸置换，侧链与B链中赖氨酸残基的ε氨基基团附接，并且任选地在位置B30上的氨基酸缺失。在本发明的一个实施方案中，在A链的位置A10上的氨基酸残基被半胱氨酸置换，在B链的位置B3上的氨基酸残基被半胱氨酸置换，任选地至少一个氨基酸残基被不是半胱氨酸的氨基酸置换，侧链与B链中赖氨酸残基的ε氨基基团附接，并且任选地在位置B30上的氨基酸缺失。在本发明的一个实施方案中，在A链的位置A10上的氨基酸残基被半胱氨酸置换，在B链的B4上的氨基酸残基被半胱氨酸置换，任选地至少一个氨基酸残基被不是半胱氨酸的氨基酸置换，侧链与B链中赖氨酸残基的ε氨基基团附接，并且任选地在位置B30上的氨基酸缺失。

通过本发明获得的额外的二硫键可连接同一条链的两个半胱氨酸(即，胰岛素A链中的两个半胱氨酸或胰岛素B链中的两个半胱氨酸)，或将A链中的半胱氨酸与胰岛素B链中的半胱氨酸相连接。在一个实施方案中，获得了根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素，其中至少一个额外的二硫键连接A链中的两个半胱氨酸，或连接B链中的两个半胱氨酸。在一个实施方案中，获得了根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素，其中至少一个额外的二硫键将A链中的半胱氨酸与B链中的半胱氨酸相连接。

在本发明的一个实施方案中，半胱氨酸被置换至酰化胰岛素的两个位置，其中该位置选自：

A10C，B1C；

A10C，B2C；

A10C，B3C；

A10C，B4C；

A10C，B5C；以及

B1C，B4C。

在本发明的一个实施方案中，半胱氨酸被置换至胰岛素类似物的两个位置，其中该位置选自：

A10C，B1C；

A10C，B2C；

A10C，B3C；

A10C，B4C；以及

B1C，B4C。

A10C，B1C；

A10C，B2C；

A10C，B3C；以及

A10C，B4C。

A10C，B3C；以及

A10C，B4C。

在本发明的一个实施方案中，半胱氨酸被置换至胰岛素类似物的两个位置，其中该位置为A10C和B3C。

在本发明的一个实施方案中，半胱氨酸被置换至胰岛素类似物的两个位置，其中该位置为A10C和B4C。

在本发明的一个实施方案中，除半胱氨酸置换之外，本发明的酰化胰岛素还包含一个或多个选自下组的氨基酸：A8H、A14E、A14H、A18L、A21G、B1G、B3Q、B3E、B3T、B3V、B3K、B3L、B16H、B16E、B22E、B24G、B25A、B25H、B25N、B27E、B27D、B27P、B28D、B28E、B28K、desB1、desB24、desB25、desB27和desB30。在本发明的一个实施方案中，除半胱氨酸置换之外，本发明的酰化胰岛素还包含一个或多个选自下组的氨基酸：A8H、A14E、A21G、desB1、B1G、B3Q、B3E、B10E、B16H、B16E、B24G、B25H、B25A、B25N、B25G、desB27、B27E、B28E、B28D和desB30。

在本发明的一个实施方案中，除半胱氨酸置换之外，本发明的酰化胰岛素还包含一个或多个选自下组的氨基酸：A21G、desB1、B1G、B3Q、B3S、B3T和B3E。

在本发明的一个实施方案中，除半胱氨酸置换之外，本发明的酰化胰岛素还包含一个或多个选自下组的氨基酸：A8H、A14E、A14H、B16H、B10E、B16E、B25H、B25A、B25N、B27E、B27P、desB27、B28E和desB30。

在本发明的一个实施方案中，除半胱氨酸置换之外，本发明的酰化胰岛素还包含一个或多个选自下组的氨基酸：B28E、B28D、desB27、desB30和A14E。

在本发明的一个实施方案中，除半胱氨酸置换之外，本发明的酰化胰岛素还包含一个或多个选自下组的氨基酸：B3K、B29E、B27E、B27D、desB27、B28E、B28D、B28K和B29P。

在本发明的一个实施方案中，除半胱氨酸置换之外，本发明的酰化胰岛素还包含将B链的C末端与A链的N末端相连接的C肽(以形成所谓的单链酰化胰岛素)。在本发明的一个实施方案中，母体胰岛素选自单链胰岛素类似物。在本发明的一个实施方案中，母体胰岛素选自WO2007096332、WO2005054291或WO2008043033中列出的单链胰岛素类似物，这些专利通过引用而特别地并入本文。

在本发明的一个实施方案中，获得了这样的酰化胰岛素，其包含两个半胱氨酸置换，从而产生了相对于人胰岛素的一个额外的二硫键。

在一个实施方案中，除了所保留的人胰岛素的三个二硫键之外，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素还具有两个或更多个半胱氨酸置换。

在本发明的一个实施方案中，选择半胱氨酸置换的位点，使得所引入的半胱氨酸残基位于折叠的酰化胰岛素的三维结构中，以允许形成一个或多个额外的二硫键。

本文的术语如“A1”、“A2”和“A3”等分别表示在胰岛素A链中的位置1、位置2和位置3等位置上的氨基酸(从N末端开始计数)。类似地，术语如“B1”、“B2”和“B3”等分别表示在胰岛素B链中的位置1、位置2和位置3等位置上的氨基酸(从N末端开始计数)。通过采用氨基酸的单字母代码，术语如A10C表示在A10位置上的氨基酸为半胱氨酸。通过采用氨基酸的三字母代码，相应的表示为A10Cys。

“desB30”、“B(1-29)”或“desThrB30”是指天然胰岛素B链或其类似物缺少B30(苏氨酸，Thr)氨基酸，而“A(1-21)”指天然胰岛素A链。因此，例如，A10C,B1C,desB30人胰岛素或可替代地A10Cys,B1Cys,desB30人胰岛素(或可替代地CysA10,CysB1,desThrB30人胰岛素)为人胰岛素的类似物，其中在A链的位置10上的氨基酸被半胱氨酸置换，在B链的位置1上的氨基酸被半胱氨酸置换，并且在B链的位置30上的氨基酸(苏氨酸，Thr)缺失。

本文中，肽或蛋白质的命名根据以下原则进行：名称以相对于母体肽或蛋白质如人胰岛素的突变和修饰(如酰化)给出。对于酰基部分的命名，根据IUPAC命名法以及在其他情况下按照肽命名法来进行命名。例如，可将以下的酰基部分：

命名为，例如，“十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG”、“十八烷二酰基-gGlu-OEG-OEG”、“十八烷二酰基-gGlu-2xOEG”或“17-羧基十七酰基-γGlu-OEG-OEG”，其中OEG为氨基酸残基8-氨基-3,6-二氧杂辛酸、-NH(CH₂)₂O(CH₂)₂OCH₂CO-的速记符号，而γGlu(或gGlu)为氨基酸γL-谷氨酸部分的速记符号。

一个实例为专利申请WO2011/161125中实施例1的胰岛素(序列/结构在下文中给出)，其被命名为“A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素”，以指示在人胰岛素的位置A10上的氨基酸已突变成C；在人胰岛素中的A14,Y已突变成E；在人胰岛素的位置B4,Q的氨基酸已突变成C；在人胰岛素的位置B25,F的氨基酸已突变成H，在人胰岛素的位置B29,K的氨基酸已通过在B29的赖氨酸残基中的ε氮上的酰化(表示为N^ε)被残基十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG修饰，并且在人胰岛素的位置B30,T的氨基酸已缺失。下式中的星号表示与人胰岛素相比，所讨论的残基是不同的(即，突变的)。在人胰岛素中发现的二硫键用硫原子表示，而本发明的额外的二硫键用线表示。

化学式2，(SEQ ID NO:5和6，5为修饰的A链，而6为化学式2的修饰的B链)

此外，本发明的胰岛素还可根据IUPAC命名法(OpenEye，IUPAC形式)进行命名。根据该命名法，上述具有额外的二硫桥的酰化胰岛素被指定以下的名称：

N{ε-B29}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4S)-4-羧基-4-(17-羧基十七酰基氨基)丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]-[CysA10,GluA14,CysB4,HisB25],des-ThrB30-胰岛素(人)。

本文中，术语“氨基酸残基”为已从羧基基团中去除羟基基团并且/或者已从氨基基团中去除氢原子的氨基酸。

在本发明的一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素包含为在例如胰岛素氨基酸序列的Lys残基的ε-氨基基团上的酰基基团形式的侧链。在一个实施方案中，酰化胰岛素包含白蛋白结合残基，即，在体内条件下在附接于肽或蛋白质时与白蛋白结合的残基。

在又一进一步的特定实施方案中，白蛋白结合部分包含在延长部分与肽附接点之间的部分，该部分可被称为“连接体”、“连接体部分”、“间隔区”等。该连接体可以是可选的，因此在这种情况下，白蛋白结合部分可能与延长部分相同。

在一个实施方案中，白蛋白结合残基为亲脂性残基。在进一步的实施方案中，该亲脂性残基经由连接体与胰岛素氨基酸序列附接。

在本发明的进一步的实施方案中，白蛋白结合残基在生理学pH下是带负电荷的。在本发明的另一个实施方案中，白蛋白结合残基包含可带负电荷的基团。一种优选的可带负电荷的基团是羧酸基团。

在一个实施方案中，白蛋白结合残基为α,ω-脂肪二酸残基。

在本发明的进一步的实施方案中，酰化胰岛素中亲脂性残基的α,ω-脂肪二酸残基具有6至40个碳原子，8至26个碳原子，或8至22个碳原子，或14至22个碳原子，或16至22个碳原子，或16至20个碳原子，或16至18个碳原子，或16个碳原子，或18个碳原子，或20个碳原子，或22个碳原子。

在一个实施方案中，酰化胰岛素中亲脂性残基的α,ω-脂肪二酸残基具有18个碳原子。在一个实施方案中，本发明的片芯包含酰化胰岛素，其中亲脂性残基的α,ω-脂肪二酸残基具有18个碳原子，并且相对于包含20个碳原子的那些提供更高的酰化胰岛素生物利用度值。在一个实施方案中，具有亲脂性残基的酰化胰岛素中的α,ω-脂肪二酸残基具有20个碳原子。在一个实施方案中，本发明的片芯包含酰化胰岛素，其中亲脂性残基的α,ω-脂肪二酸残基具有20个碳原子，并且相对于包含18个碳原子的那些提供更低的酰化胰岛素生物利用度值。在一个实施方案中，本发明的片芯包含酰化胰岛素，其中亲脂性残基的α,ω-脂肪二酸残基具有20个碳原子，并且相对于包含18个碳原子的那些提供更低的酰化胰岛素生物利用度值，具有更长的PK/PD谱。

在本发明的另一个实施方案中，白蛋白结合残基是直链或支链烷烃α,ω-二羧酸的酰基基团。在进一步的实施方案中，白蛋白结合残基是包含氨基酸部分诸如γ-Glu(γGlu)部分的直链或支链烷烃α,ω-二羧酸的酰基基团。在又一进一步的实施方案中，白蛋白结合残基是包含两个氨基酸部分诸如γ-Glu(γGlu)部分和8-氨基-3,6-二氧杂辛酸(OEG)部分的直链或支链烷烃α,ω-二羧酸的酰基基团。在又一进一步的实施方案中，白蛋白结合残基是包含更多个氨基酸部分诸如一个γ-Glu(γGlu)部分和连续的8-氨基-3,6-二氧杂辛酸(OEG)部分的直链或支链烷烃α,ω-二羧酸的酰基基团。

在一个实施方案中，附接于母体(例如，蛋白酶稳定化的)胰岛素类似物的酰基部分具有如下通式：

Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-

化学式3

其中n为0，或在1至3范围内的整数；m为0，或在1至10范围内的整数；p为0，或在1至10范围内的整数；Acy为包含约8至约24个碳原子如约14至约22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸；AA1为中性的线性或环状氨基酸残基；AA2为酸性氨基酸残基；AA3为中性的含亚烷基二醇的氨基酸残基；AA1、AA2和AA3在式中出现的顺序可独立地互换；AA2可沿着该式出现若干次(例如，Acy-AA2-AA3₂-AA2-)；AA2可沿着该式独立地(不同地)出现若干次(例如，Acy-AA2-AA3₂-AA2-)；Acy、AA1、AA2和/或AA3之间的连接为酰胺键(肽键)，该键在形式上可通过从Acy、AA1、AA2和AA3的每一个中去除氢原子或羟基基团(水)而获得；并且与胰岛素类似物的附接可来自化学式3的酰基部分中AA1、AA2或AA3残基的C末端，或来自化学式3的部分中存在的AA2残基的一条侧链。

在另一个实施方案中，附接于母体胰岛素类似物的酰基部分具有通式Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-化学式3，其中AA1选自Gly、D-或L-Ala、βAla、4-氨基丁酸、5-氨基戊酸、6-氨基己酸、D-或L-Glu-α-酰胺、D-或L-Glu-γ-酰胺、D-或L-Asp-α-酰胺、D-或L-Asp-β-酰胺，或下式之一的基团：

在上式中氢原子和/或羟基基团已被去除，并且其中q为0、1、2、3或4，并且在该实施方案中，AA1可以可替代地为7-氨基庚酸或8-氨基辛酸。

在另一个实施方案中，附接于母体胰岛素类似物的酰基部分具有通式Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-(化学式3)，其中AA1如上文所定义，并且AA2选自L-或D-Glu、L-或D-Asp、L-或D-homoGlu，或以下的任一种：

在上式中，氢原子和/或羟基基团已被去除，并且其中箭头表示与AA1、AA2、AA3的氨基基团的附接点，或与胰岛素类似物的氨基基团的附接点。

在一个实施方案中，被指定为AA1的中性环状氨基酸残基为含有任选含有氮杂原子的饱和6元碳环的氨基酸，并且该环优选地为环己烷环或哌啶环。优选地，该中性环状氨基酸的分子量在约100至约200Da的范围内。

被指定为AA2的酸性氨基酸残基为分子量至多约200Da的包含两个羧酸基团和一个伯或仲氨基基团的氨基酸。可替代地，被指定为AA2的酸性氨基酸残基为分子量至多约250Da的包含一个羧酸基团和一个伯或仲磺酰胺基团的氨基酸。

被指定为AA3的中性含亚烷基二醇的氨基酸残基为亚烷基二醇部分，任选地为在一端含有羧酸官能团且在另一端含有氨基官能团的寡聚亚烷基二醇部分或聚亚烷基二醇部分。

本文中，术语亚烷基二醇部分涵盖单体亚烷基二醇部分以及寡聚亚烷基二醇部分。单体亚烷基二醇和寡聚亚烷基二醇包括基于单体乙二醇和寡聚乙二醇的链，基于单体丙二醇和寡聚丙二醇的链，以及基于单体丁二醇和寡聚丁二醇的链，即，基于重复单元-CH₂CH₂O-、-CH₂CH₂CH₂O-或-CH₂CH₂CH₂CH₂O-的链。亚烷基二醇部分是单分散的(具有良好限定的长度/分子量)。单体亚烷基二醇部分包含在每端含有不同基团的-OCH₂CH₂O-、-OCH₂CH₂CH₂O-或-OCH₂CH₂CH₂CH₂O-。

如本文提及的，AA1、AA2和AA3在具有化学式3(Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-)的酰基部分中出现的顺序可独立地互换。因此，式Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-还涵盖这样的部分，如例如，式Acy-AA2_m-AA1_n-AA3_p-、式Acy-AA2-AA3_n-AA2-和式Acy-AA3_p-AA2_m-AA1_n-，其中Acy、AA1、AA2、AA3、n、m和p如本文所定义。

如本文提及的，部分Acy、AA1、AA2和/或AA3之间的连接在形式上经由从在形式上构建这些部分的母体化合物中去除水形成酰胺键(肽键)(-CONH-)而获得。这意味着为了得到具有化学式3(Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-，其中Acy、AA1、AA2、AA3、n、m和p如本文所定义)的酰基部分的完整通式，需要在形式上取得针对术语Acy、AA1、AA2和AA3给出的化合物并从其上去除氢和/或羟基，并且在如此获得的游离末端处在形式上连接如此获得的结构单元。

可在本发明的酰化胰岛素类似物中存在的化学式3Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-的酰基部分的非限制性具体实例在WO 2009/115469 A1第27–43页中列出。

式Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-的酰基部分的任一上述非限制性具体实例均可与存在于母体胰岛素类似物的任一上述非限制性具体实例中的赖氨酸残基的ε氨基基团附接，从而得到本发明的酰化胰岛素类似物的其他具体实例。

可通过在赖氨酸残基中引入式Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-的所需基团，将母体胰岛素类似物转化成本发明的含有额外的二硫键的酰化胰岛素。式Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-的所需基团可通过任何方便的方法引入，并且许多方法在这类反应的现有技术中公开。从本文的实施例中可看到更多细节。

可在本发明的酰化胰岛素类似物中存在的式Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-的酰基部分的非限制性具体实例如下：

式Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-的侧链的任一上述非限制性具体实例均可与存在于酰化胰岛素类似物的任一上述非限制性具体实例中的赖氨酸残基的ε氨基基团附接，从而得到本发明的酰化胰岛素类似物的其他具体实例。

式Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-的侧链的任一上述非限制性具体实例均可与存在于酰化胰岛素类似物的任一上述非限制性具体实例中的A1残基的α氨基基团附接，从而得到本发明的酰化胰岛素类似物的其他具体实例。

在一个实施方案中，根据本发明的药物组合物中的酰化胰岛素，即，蛋白酶稳定化的并且/或者含有一个或多个额外的二硫键的酰化胰岛素，比没有蛋白酶稳定化或没有一个或多个额外的二硫键的类似酰化胰岛素更加长效。“更加长效”在本文中是指它们具有更长的消除半衰期，或者换言之，胰岛素效果持续延长的时间段，即，更长的作用持续时间。

稳定化

可根据本发明使用的亲脂性取代基的非限制性实例还可在专利申请WO 2009/115469中找到，包括如在WO 2009/115469的从第25页第3行开始的段落中描述的酰化多肽的亲脂性取代基。

可根据本发明通过半胱氨酸置换而修饰的酰化胰岛素类似物形式的酰化胰岛素的非限制性实例列表可在例如WO 2009/115469A1中找到。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含酰化胰岛素，该酰化胰岛素选自：

1.A14E,B25H,B29K(N^ε-十六烷二酰基),desB30人胰岛素，

2.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

3.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

4.A14E,B25H,B29K(N^ε3-羧基-5-十八烷二酰基氨基苯甲酰基),desB30人胰岛素，

5.A14E,B25H,B29K(N^ε-N-十八烷二酰基-N-(2-羧基乙基)甘氨酰基),desB30人胰岛素，

6.A14E,B25H,B29K(N^ε(N-十八烷二酰基-N-羧基甲基)-β-丙氨酰基),desB30人胰岛素，

7.A14E,B25H,B29K(N^ε4-([4-({19-羧基十九酰基氨基}甲基)反式-环己烷羰基]-γGlu),desB30人胰岛素，

8.A14E,B25H,B29K(N^ε十七烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

9.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

10.A14E,B25H,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

11.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

12.A14E,B25H,B29K(N^ε4-([4-({19-羧基十九酰基氨基}甲基)反式-环己烷羰基]-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

13.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

14.A14E,B28D,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

15.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-PEG7),desB30人胰岛素，

16.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

17.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-(3-(2-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

18.A14E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

19.A14E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

20.A14E,B25H,B29K(N^ε十七烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

21.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

22.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

23.A14E,B25H,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

24.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

25.A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

26.A14E,B16E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

27.A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

28.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-γGlu),desB30人胰岛素，

29.A14E,B16E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

30.A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

31.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

32.A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

33.A14E,B16H,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

34.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-OEG-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

35.A14E,A18L,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

36.A14E,A18L,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

37.A14E,B25H,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

38.A1G(N^α十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素，

39.A14E,B1F(N^α十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),B25H,B29R,desB30人胰岛素，

40.A1G(N^α十六烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素，

41.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-Abu-Abu-Abu-Abu),desB30人胰岛素，

42.A14E,B25H,B29K(N^α二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

43.A14E,B25H,B29K(N^α4-[16-(1H-四唑-5-基)十六酰基氨基磺酰基]丁酰基)，desB30人胰岛素，

44.A1G(N^α十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),A14E,A21G,B25H,desB30人胰岛素，

45.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-OEG),desB30人胰岛素，

46.A14E,B25H,B27K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB28,desB29,desB30人胰岛素，

47.A14E,B25H,B29K(N^ε(5-二十烷二酰基氨基间苯二甲酸)),desB30人胰岛素，

48.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

49.A14E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

50.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

51.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG),desB30人胰岛素，

52.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

53.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-Aoc),desB30人胰岛素，

54.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

55.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

56.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-OEG),desB30人胰岛素，

57.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

58.A14E,B25H,B16H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

59.A1G(N^α十八烷二酰基),A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素，

60.A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

61.A14E,B25H,B27K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB28,desB29,desB30人胰岛素，

62.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

63.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

64.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

65.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

66.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

67.A14E,B25H,B29K(N^ε二十二烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

68.A14E,B25H,B29K(N^ε二十二烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

69.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG-γGlu),desB30人胰岛素，

70.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG-γGlu),desB30人胰岛素，

71.A14E,B25H,B29K(N^ε(N-二十烷二酰基-N-羧基甲基)-βAla),desB30人胰岛素，

72.A14E,B25H,B29K(N^ε3-[2-(2-{2-[2-(17-羧基十七酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]丙酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

73.A14E,B25H,B29K(N^ε3-[2-(2-{2-[2-(19-羧基十九酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]丙酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

74.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-(3-(2-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基),desB30人胰岛素，

75.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-(3-(2-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

76.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-(3-(2-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基),desB30人胰岛素，

77.A14E,B25H,B29K(N^ε4-([4-({17-羧基十九酰基氨基}甲基)反式-环己烷羰基]-γGlu),desB30人胰岛素，

78.A14E,B25H,B29K(N^ε4-([4-({17-羧基十七酰基氨基}甲基)反式-环己烷羰基]-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

79.A14E,B28D,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

80.A14E,B28D,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

81.A14E,B28D,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

82.A14E,B28D,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

83.A14E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

84.A14E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

85.A14E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

86.A14E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

87.A14E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

88.A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

89.A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

90.A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

91.A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

92.A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

93.A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

94.A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

95.A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

96.A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

97.A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

98.A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

99.A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

100.A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

101.A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

102.A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

103.A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

104.A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

105.A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

106.A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

107.A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

108.A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

109.A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

110.A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

111.A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

112.A14E,B28D,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

113.A14E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

114.B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

115.B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

116.B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

117.B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

118.B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

119.B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

120.A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

121.A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

122.A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

123.A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

124.A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

125.A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

126.14E,B25H,B29K(N^ε(N-二十烷二酰基-N-羧基甲基)-βAla-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

127.A14E,B25H,B29K(N^ε(N-十八烷二酰基-N-羧基甲基)-βAla-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

128.A14E,B25H,B29K(N^ε(N-十六烷二酰基-N-羧基甲基)-βAla-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

129.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-2-[(3-{2-[2-(3-氨基丙氧基)乙氧基]乙氧基}丙基氨基甲酰基)甲氧基]乙酰基),desB30人胰岛素，

130.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-2-[(3-{2-[2-(3-氨基丙氧基)乙氧基]乙氧基}丙基氨基甲酰基)甲氧基]乙酰基),desB30人胰岛素，

131.A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-2-[(3-{2-[2-(3-氨基丙氧基)乙氧基]乙氧基}丙基氨基甲酰基)甲氧基]乙酰基),desB30人胰岛素，

132.A14E，B16H，B25H，B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-2-[(3-{2-[2-(3-氨基丙氧基)乙氧基]乙氧基}丙基氨基甲酰基)甲氧基]乙酰基),desB30人胰岛素，

133.B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

134.B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

135.B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

136.B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

137.B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

138.B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

139.B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

140.B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

141.B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

142.B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

143.21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

144.A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

145.A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

146.A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

147.A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

148.A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

149.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

150.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

151.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

152.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

153.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

154.A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

155.A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

156.A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

157.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

158.A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

159.A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

160.A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

161.A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

162.A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

163.A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

164.A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

165.A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

166.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

167.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

168.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

169.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

170.A1G(N^α十八烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

171.A1G(N^α二十烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

172.A1G(N^α十八烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29R,desB30人胰岛素，

173.A1G(N^α二十烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29R,desB30人胰岛素，

174.A1G(N^α十八烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

175.A1G(N^α二十烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

176.A1G(N^α十八烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29R,desB30人胰岛素，以及

177.A1G(N^α二十烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29R,desB30人胰岛素。

在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含蛋白酶稳定化的酰化胰岛素，该酰化胰岛素选自：

1.A14E,B25H,B29K(N^ε-十六烷二酰基),desB30人胰岛素，

2.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

3.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

8.A14E,B25H,B29K(N^ε十七烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

9.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

10.A14E,B25H,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

11.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

13.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

14.A14E,B28D,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

15.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-PEG7),desB30人胰岛素，

16.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

18.A14E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

19.A14E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

20.A14E,B25H,B29K(N^ε十七烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

27.A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

28.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-γGlu),desB30人胰岛素，

29.A14E,B16E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

34.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-OEG-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

40.A1G(N^α十六烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素，

42.A14E,B25H,B29K(N^α二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

45.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-OEG),desB30人胰岛素，

48.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

49.A14E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

51.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG),desB30人胰岛素，

52.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

53.A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-Aoc),desB30人胰岛素，

56.A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-OEG),desB30人胰岛素，

58.A14E,B25H,B16H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

59.A1G(N^α十八烷二酰基),A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素，

60.A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

65.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

66.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

67.A14E,B25H,B29K(N^ε二十二烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

68.A14E,B25H,B29K(N^ε二十二烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

79.A14E,B28D,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

80.A14E,B28D,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

81.A14E,B28D,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

82.A14E,B28D,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

83.A14E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

84.A14E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

85.A14E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

86.A14E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

87.A14E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

88.A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

89.A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

90.A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

94.A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

95.A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

96.A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

100.A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

101.A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

102.A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

112.A14E,B28D,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

113.A14E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

114.B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

115.B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

116.B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

117.B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

118.B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

119.B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

123.A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

124.A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

125.A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

133.B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

134.B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

135.B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

136.B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

137.B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

138.B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

139.B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

140.B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

141.B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

142.B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

143.21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

144.A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

145.A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

146.A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

147.A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

148.A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

149.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

150.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

151.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

152.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

154.A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

155.A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

157.A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

162.A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

163.A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

164.A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

165.A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

167.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

169.A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

174.A1G(N^α十八烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

175.A1G(N^α二十烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含选自下组的酰化胰岛素：

1.A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGluγGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

2.A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGluγGlu),desB30人胰岛素，

3.A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

4.A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGluγGlu),desB30人胰岛素，

5.A10C,A14E,desB1,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGluγGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

6.A10C,A14H,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

7.A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

8.A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEGOEG-OEG),desB30人胰岛素，

9.A10C,A14E,B4C B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

10.A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

11.A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

12.A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

13.A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

14.A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

15.A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

16.A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

17.A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

18.A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

19.A10C,B4C,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

20.A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

21.A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

22.A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

23.A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

24.A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

25.A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

26.A10C,A14E,4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

27.A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

28.A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基),desB30人胰岛素，

29.A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

30.A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

31.A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

32.A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

33.A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

34.A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

35.A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

36.A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

37.A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

38.A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

39.A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

40.A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

41.A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

42.A10C,B1C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

43.A10C,B1C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

44.A10C,B1C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

45.A10C,B1C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

46.A10C,B2C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

47.A10C,B2C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

48.A10C,B2C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

49.A10C,B2C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

50.A10C,B3C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

51.10C,B3C B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

52.A10C,B3C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

53.A10C,B3C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

54.A10C,B4C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

55.A10C,B4C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

56.A10C,B4C B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

57.A10C,B4C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

58.A10C,A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

59.A10C,A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

60.A10C,A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

61.A10C,A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

62.A10C A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

63.A10C,A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

64.A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

65.A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

66.A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

67.A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

68.A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

69.A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

70.A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

71.A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

72.A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

74.A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

75.A10C,A14E,B4C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

76.A10C,A14E,B4C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

77.A10C,A14E,B4C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

78.A10C,A14E,B4C,B16H,B25H B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

79.A10C,A14E,B4C,B16H B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

80.A10C,A14E,B4C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

81.A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

82.A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

83.A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

84.A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

85.A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

86.A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

87.A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)十六烷二酰基l-γGlu),desB30人胰岛素，

88.A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)十六烷二酰基l-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

89.A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)十六烷二酰基l-γGlu),desB30人胰岛素，

90.A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)十六烷二酰基l-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

91.A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

92.A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

93.A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

94.A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

95.A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

96.A10C,A14E,B3C,B16E,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

97.A10C,A14E,B4C,B16E,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

98.A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，以及

99.A10C,A14E,B4C,B16E,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素。

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14H,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素

A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B3C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

10C,B3C B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B3C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B3C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B4C B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B16H,B25H B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B16H B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)十六烷二酰基l-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,desB27,B29K(N(eps)十六烷二酰基l-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)十六烷二酰基l-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)十六烷二酰基l-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B16E,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B16E,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B16E,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，以及

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B16H B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，以及

A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素。

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，以及

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素。

药盒

在一个实施方案中，本发明涉及包含如本文所述的口服药物组合物和使用说明书的药盒。

在一个实施方案中，本发明涉及包含如本文所述的一个或多个片剂形式的口服药物组合物和使用说明书的药盒。在一个实施方案中，本发明涉及这样的药盒，其包含如本文所述的各自包含一个或多个未包覆或包覆的片芯的一个或多个片剂形式的口服药物组合物和使用说明书。在一个实施方案中，本发明涉及这样的药盒，其包含如本文所述的各自包含一个或多个未包覆或包覆的片芯的一个或多个胶囊形式的口服药物组合物和使用说明书。

在一个实施方案中，包含在所述药盒中的所述口服药物组合物在泡罩包装中提供。

在一个实施方案中，包含在所述药盒中的所述口服药物组合物在容器中提供。

在一个实施方案中，包含在所述药盒中的所述口服药物组合物在塑料或玻璃或其组合的容器中提供。

术语和定义

如本文所用的“胰岛素”、“一种胰岛素”或“该胰岛素”意指在CysA7与CysB7之间以及在CysA20与CysB19之间具有二硫桥且在CysA6与CysA11之间具有内部二硫桥的人胰岛素、猪胰岛素或牛胰岛素或其胰岛素类似物或衍生物。术语“胰岛素”、“一种胰岛素”或“该胰岛素”进一步包括“胰岛素类似物”。

如本文所用的术语“人胰岛素”意指人胰岛素激素，其二维和三维结构以及性质是公知的。人胰岛素的三维结构已在许多不同条件下通过例如NMR和X射线晶体学确定，并且这些结构中的许多被存储在蛋白质数据库(http://www.rcsb.org)中。人胰岛素结构的非限制性实例是T6结构(http://www.rcsb.org/pdb/explore.do？structureId＝1MSO)和R6结构(http://www.rcsb.org/pdb/explore.do？structureId＝1EV3)。人胰岛素具有两条多肽链，命名为A链和B链。A链为21个氨基酸的肽而B链为30个氨基酸的肽，这两条链通过以下的二硫键连接：在A链的位置7上的半胱氨酸与B链的位置7上的半胱氨酸之间的第一桥，以及在A链的位置20上的半胱氨酸与B链的位置19上的半胱氨酸之间的第二桥。第三桥存在于A链的位置6和11上的半胱氨酸之间。因此，“保留人胰岛素的三个二硫键的酰化胰岛素”在本文中应理解为包含人胰岛素的三个二硫键的酰化胰岛素，即，在A链的位置7上的半胱氨酸与B链的位置7中的半胱氨酸之间的二硫键，在A链的位置20上的半胱氨酸与B链的位置19上的半胱氨酸之间的二硫键，以及在A链的位置6和11上的半胱氨酸之间的二硫键。

在人体内，胰岛素激素被合成为前肽-B-Arg Arg-C-Lys Arg-A构型的由24个氨基酸的前肽以及随后的含有86个氨基酸的胰岛素原组成的单链前体胰岛素原(前胰岛素原)，其中C为31个氨基酸的连接肽。Arg-Arg和Lys-Arg是该连接肽从A和B链切割的切割位点。

如本说明书和所附实施方案中所用的，单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数指代，除非本文内容另有明确规定。因此，例如，对“一种胰岛素”的提及包括一种或多种胰岛素和一种或多种胰岛素的混合物等。

如本文所用的术语“胰岛素肽”意指为人胰岛素或其具有胰岛素活性的类似物或衍生物的肽。

如本文所用的术语“胰岛素类似物”意指经修饰的胰岛素，其中该胰岛素的一个或多个氨基酸残基被其他氨基酸残基置换，并且/或者其中一个或多个氨基酸残基已从该胰岛素中删除，并且/或者其中一个或多个氨基酸残基已被添加和/或插入到该胰岛素中。如本文所用的胰岛素类似物是具有以下分子结构的多肽，该分子结构在形式上可通过删除和/或置换天然胰岛素中存在的至少一个氨基酸残基和/或通过添加至少一个氨基酸残基而从天然存在的胰岛素的结构，例如人胰岛素的结构衍生得到。

在一个实施方案中，根据本发明的胰岛素类似物包含相对于人胰岛素的少于8个修饰(置换、缺失、添加)。在一个实施方案中，胰岛素类似物包含相对于人胰岛素的少于7个修饰(置换、缺失、添加)。在一个实施方案中，胰岛素类似物包含相对于人胰岛素的少于6个修饰(置换、缺失、添加)。在一个实施方案中，胰岛素类似物包含相对于人胰岛素的少于5个修饰(置换、缺失、添加)。在一个实施方案中，胰岛素类似物包含相对于人胰岛素的少于4个修饰(置换、缺失、添加)。在一个实施方案中，胰岛素类似物包含相对于人胰岛素的少于3个修饰(置换、缺失、添加)。在一个实施方案中，胰岛素类似物包含相对于人胰岛素的少于2个修饰(置换、缺失、添加)。

胰岛素分子中的修饰通过说明置换天然氨基酸残基的氨基酸残基的链(A或B)、位置以及单字母或三字母代码来表示。

“胰岛素的衍生物”、“酰化胰岛素”或“胰岛素衍生物”在本文中作为同义词使用，并且根据本发明为例如通过在胰岛素骨架的一个或多个位置处引入侧链，或通过氧化或还原该胰岛素中的氨基酸残基的基团，或通过将游离羧基基团转化为酯基团或酰胺基团而进行化学修饰的天然存在的人胰岛素或胰岛素类似物。其他衍生物通过酰化如在人胰岛素或desB30人胰岛素的B29位置上的游离氨基基团或羟基基团而获得。这类侧链的非限制性实例可以以附接酰胺、碳水化合物、烷基基团、酰基基团、酯、聚乙二醇化等形式被发现。

因此，胰岛素的衍生物为包含至少一个共价修饰如附接至胰岛素肽的一个或多个氨基酸的侧链的人胰岛素或胰岛素类似物。

在一个实施方案中，根据本发明的胰岛素衍生物为包含至少两个半胱氨酸置换的胰岛素类似物，其中该胰岛素类似物在该胰岛素肽的一个或多个氨基酸处酰化。

因此，术语“酰化胰岛素”包括通过经由连接体将一个或多个侧链附接至该胰岛素而对人胰岛素或胰岛素类似物的修饰，因此如本文所用的术语“酰化胰岛素”包含在“胰岛素衍生物”中。

术语“连接体”在本文中用于侧链与胰岛素肽的附接点之间的部分，该部分也可以被称为“连接体部分”、“间隔区”等。该连接体可以是可选的。在一个实施方案中，该连接体包含中性的线性或环状氨基酸残基、酸性氨基酸残基、和/或中性的含亚烷基二醇的氨基酸残基，其中这些残基出现的顺序可独立地互换。残基、侧链和胰岛素肽之间的连接为酰胺(肽)键。

如本文所用的术语“母体胰岛素”旨在表示相对于例如在用侧链酰化之前的人胰岛素、desB30人胰岛素或具有一个或多个额外的二硫键的胰岛素类似物，任选地具有一个或多个额外的二硫键的胰岛素。

如本文所用的术语“蛋白酶”或“蛋白酶的酶”是指为消化酶的酶，该酶降解蛋白质和肽且发现于人体的多种组织如胃(胃蛋白酶)、肠腔(胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、弹性蛋白酶、羧肽酶等)或胃肠道粘膜表面(氨肽酶、羧肽酶、肠肽酶、二肽基肽酶、内肽酶等)、肝(胰岛素降解酶、组织蛋白酶D等)和其他组织中。

“在给定pH下增加的溶解度”意指相对于母体胰岛素，更大浓度的酰化胰岛素在溶液的pH下溶解于水性或缓冲溶液中。用于确定溶液中含有的胰岛素是否被溶解的方法是本领域已知的。

当在本文使用时，术语“额外的二硫键”或“额外的二硫桥”作为同义词使用，并且意指在人胰岛素或包含与人胰岛素相同的二硫键(也称为桥)的胰岛素类似物中不存在的一个或多个二硫键。

如本文所用的术语“不具有一个或多个额外的二硫键的酰化胰岛素”旨在表示具有人胰岛素中天然存在的三个二硫键(即，在A链的位置7上的半胱氨酸与B链的位置7上的半胱氨酸之间的第一桥，在A链的位置20上的半胱氨酸与B链的位置19上的半胱氨酸之间的第二桥，以及在A链的位置6和11上的半胱氨酸之间的第三桥)以及附接至胰岛素的侧链而没有其他二硫键/桥的酰化胰岛素。

术语“侧链”在本文中旨在表示与用于本发明的母体胰岛素(即，酰化之前的胰岛素肽)偶联(任选经由一个或多个连接体)，例如与母体胰岛素的B链中存在的赖氨酸的ε氨基基团偶联的脂肪酸或脂肪二酸。该侧链的脂肪酸或脂肪二酸部分赋予对血清白蛋白的亲和力，并且连接体用于改变(例如，增加)对白蛋白的亲和力，改变酰化胰岛素的溶解度，和/或调节(增加/减小)酰化胰岛素对胰岛素受体的亲和力。

术语“半胱氨酸置换”在本文意指用半胱氨酸代替存在于人胰岛素中的氨基酸。例如，在人胰岛素的A链中位置10上的异亮氨酸(IleA10)和B链的位置4上的谷氨酰胺(GlnB4)可以分别被半胱氨酸残基代替。术语“其他氨基酸残基置换”在本文中意指用非半胱氨酸的氨基酸代替存在于人胰岛素中的氨基酸。

“亲脂性取代基”或“亲脂性残基”在本文中应理解为由任选地经由连接体在氨基酸位置如LysB29处附接至胰岛素的脂肪酸或脂肪二酸组成的侧链或等同物。

术语“口服生物利用度”在本文中是指口服给药后到达体循环的药物的给药剂量的分数。按照定义，当静脉内施用药物时，其生物利用度为100％。

一般来说，术语生物利用度是指活性药物成分(API，即蛋白酶稳定化的胰岛素)如本发明衍生物的给药剂量中以未改变的形式到达体循环的分数。按照定义，当静脉内施用API时，其生物利用度为100％。然而，当经由其他途径(如口服)施用时，其生物利用度降低(由于不完全吸收和首过代谢)。当为非静脉内给药途径计算剂量时，对于生物利用度的了解是必需的。

绝对口服生物利用度将口服给药后体循环中API的生物利用度(估算为曲线下面积或AUC)与静脉内给药后相同API的生物利用度进行比较。它是与相同API的相应静脉内给药相比，通过非静脉内给药吸收的API的分数。如果使用不同的剂量，则该比较必须进行剂量归一化；因此通过除以施用的相应剂量来校正每个AUC。

在口服和静脉内给药后制作血浆API浓度-时间曲线图。绝对生物利用度(F)是剂量校正的AUC-口服除以AUC-静脉内。

用于测定胰岛素生物利用度的标准试验是本领域技术人员已知的，并且尤其包括测量在同一物种中口服和静脉内(i.v.)施用的所述胰岛素的浓度的相对曲线下面积(AUC)。血液(血浆)样品中酰化胰岛素浓度的定量可以使用例如抗体测定(ELISA)或通过质谱法来进行。

然而，当口服施用药物时，活性成分的生物利用度由于不完全吸收和首过代谢而降低。可以在本领域技术人员已知的试验中测量胰岛素肽的生物活性，例如，如WO2005012347中所描述的。

如本文所用的术语“防腐剂”是指添加到药物组合物中以阻止或延缓微生物活性(生长和代谢)的化学化合物。药学上可接受的防腐剂的实例为苯酚、间甲酚以及苯酚和间甲酚的混合物。

如本文所用的术语“多肽”和“肽”意指由至少两个通过肽键连接的组成氨基酸组成的化合物。组成氨基酸可以来自由遗传密码编码的氨基酸，并且它们可以是不由遗传密码编码的天然氨基酸，以及合成氨基酸。通常已知的不由遗传密码编码的天然氨基酸为，例如，γ-羧基谷氨酸、鸟氨酸、磷酸丝氨酸、D-丙氨酸和D-谷氨酰胺。通常已知的合成氨基酸包括通过化学合成制备的氨基酸，即，由遗传密码编码的氨基酸的D-异构体，如D-丙氨酸和D-亮氨酸、Aib(a-氨基异丁酸)、Abu(α-氨基丁酸)、Tle(叔丁基甘氨酸)、β-丙氨酸、3-氨基甲基苯甲酸、邻氨基苯甲酸。

如本文所用的术语“蛋白质”意指由一个或多个多肽组成的生化化合物。

当在本文使用时，术语“药物”、“药剂”或“治疗剂”是指活性成分，例如在药物组合物中使用的酰化胰岛素。

如本文所用的术语“肠溶衣”是指控制固体口服剂型的崩解和释放的聚合物包衣。固体剂型的崩解和释放部位可以根据肠溶衣抵抗在特定pH范围中崩解的能力来定制。

如本文所用的术语“PK/PD谱”意指药代动力学/药效学谱，并且是本领域技术人员已知的。本发明药物组合物的酰化胰岛素的药代动力学(PK)谱可适当地通过体内PK研究来确定。进行这些研究以评价酰化胰岛素如何在体内吸收、分布和消除以及这些过程如何影响酰化胰岛素的血浆浓度-时间曲线。在药物开发的发现和临床前阶段中，可以使用大量方法和动物模型来了解酰化胰岛素的PK性质。例如，可使用比格犬(beagle dog)来评价口服给药后本发明药物组合物中酰化胰岛素的PK性质。

用于测量胰岛素药代动力学的标准试验是本领域技术人员已知的，并且尤其包括测量在同一物种中口服和静脉内(i.v.)施用的所述胰岛素的浓度。血液(血浆)样品中酰化胰岛素浓度的定量可以使用例如抗体测定(ELISA)或通过质谱法来进行。

类似地，本发明药物组合物的酰化胰岛素的药效动力学(PD)谱可以适当地通过研究所述酰化胰岛素对身体的生化和生理作用和药物作用机制以及药物浓度与效果之间的关系来确定。

如本文所用的术语“Tmax”意指在药物给药后达到最大血浆浓度(即，Cmax)时的时间。

如本文所用的术语“Cmax”意指药物(即胰岛素)的峰值血浆浓度。

如本文所用的术语“空腹”意指比格犬的胃中没有可能干扰根据本发明的药物组合物的吸收或崩解/溶解的食物内容物。

在本文中，术语“脂肪酸”包括具有至少两个碳原子且饱和或不饱和的直链或支链脂肪族羧酸。如本文所用的术语“脂肪酸”还包括如下定义的术语“脂肪二酸”。脂肪酸的非限制性实例为肉豆蔻酸、棕榈酸和硬脂酸。

在本文中，术语“脂肪二酸”包括具有至少两个碳原子且饱和或不饱和的直链或支链脂肪族二羧酸。脂肪二酸的非限制性实例为己二酸、辛二酸、癸二酸、十二烷二酸、十四烷二酸、十六烷二酸、十七烷二酸、十八烷二酸和二十烷二酸。

术语“中链脂肪酸”在本文中用来表示具有中等长度碳链，例如含有6至12个碳原子的碳链的脂肪酸。中链脂肪酸的非限制性实例包括己酸、辛酸、癸酸和十二烷酸。

在本文中，术语“分散体”意指由两种不混溶组分组成的分散体、乳液或体系。

在本文中，术语“溶解”意指将固体物质溶解于溶剂中以制备溶液的过程。

在一个实施方案中，将聚乙烯醇包衣材料分散或溶解于诸如但不限于水的水性介质中，从而产生“聚乙烯醇分散体”。如本文所用的术语“聚乙烯醇分散体”包括溶液和分散体，即聚乙烯醇包衣部分地或完全地溶解在所述水性介质中的情况。在一个实施方案中，将水和所述聚乙烯醇包衣材料的分散体置于合适的搅拌装置上的烧杯中。

术语“崩解”或“崩解的”，如本文所用并且当指代包衣时，应理解为所述包衣被崩解成组分，其中部分或全部组分完全溶解到介质中，触发所述崩解。

在本文中，术语“蛋白酶稳定化的胰岛素”意指相对于人胰岛素具有改善的针对蛋白酶降解的稳定性的胰岛素。可以例如通过相对于人胰岛素的置换、添加和/或缺失使蛋白酶稳定化的胰岛素稳定。可以在例如WO 08/034881和WO 09/115469中找到蛋白酶稳定化的胰岛素的非限制性实例。

在本文中，术语“立即释放包衣”用作本领域技术人员已知的术语。因此，该术语公开了当与任何溶液接触时立即释放的包衣，其不依赖于pH，包括底包衣(prime coating)系统。

如本文所用的术语“约”意味着在所述数值的合理附近，例如加或减10％。如本文所用的术语“主要”和“大部分”是表示相对于其所指的情况大于50％，包括约60％、70％、80％、90％或更大的部分、面积、大小和频率的量化。

术语“稳定性”在本文中用于包含经修饰的胰岛素的药物组合物以描述组合物的保质期。

因此，术语“稳定的”或“稳定”，当指代酰化胰岛素时，是指相对于包含未稳定化的胰岛素的药物组合物，具有增加的化学稳定性或增加的物理和化学稳定性的药物组合物。

如本文所用的术语胰岛素的“化学稳定性”是指蛋白质结构的化学共价变化，其导致形成与天然蛋白质结构相比具有潜在较低的生物效力和/或潜在增加的免疫原性性质的化学降解产物。根据天然蛋白质的类型和性质以及该蛋白质所暴露的环境可以形成多种化学降解产物。化学降解的消除很可能不能完全避免，并且化学降解产物的量的增加在药物组合物的储存和使用过程中较常见，如本领域技术人员所公知的。大多数蛋白质倾向于脱酰胺——谷氨酰胺酰或天冬酰胺酰残基中的侧链酰胺基团被水解以形成游离羧酸的过程。其他降解途径包括高分子量转化产物的形成，其中两个或更多个蛋白质分子通过转酰胺基作用和/或二硫键相互作用彼此共价结合，从而导致共价结合的二聚体、寡聚物和聚合物降解产物的形成(Stability of Protein Pharmaceuticals,Ahern.T.J.&Manning M.C.,Plenum Press,New York 1992)。氧化可以作为化学降解的另一种变型而被提及。酰化胰岛素的化学稳定性可以通过在暴露于不同环境条件之后的多个时间点测量化学降解产物的量来评估(降解产物的形成通常可通过例如升高的温度而加速)。每个单独的降解产物的量通常通过使用多种色谱技术(例如，SEC-HPLC和/或RP-HPLC)根据分子大小、亲水性、疏水性和/或电荷分离降解产物来测定。

因此，如上所述，当指代药物组合物时，“稳定的”或“稳定”是指包含相对于相应未经修饰的母体蛋白质具有增加的化学稳定性或增加的物理和化学稳定性的胰岛素的药物组合物。通常，药物组合物在使用和储存期间(按照推荐的使用和储存条件)必须是稳定的，直到达到失效期。

如本文所用的术语“直接接触”是指本发明的聚乙烯醇包衣与本发明的片芯之间的接触。如本文所用的，“直接接触”意指在片芯的外表面的界面与聚乙烯醇包衣的内表面之间没有物理屏障。因此，当根据本发明的片芯与根据本发明的聚乙烯醇包衣“部分地直接接触”时，片芯与聚乙烯醇之间的界面中的至少一些区域不含物理屏障，这不同于可包含任何种类的物理屏障的不同大小的其他区域。当如本文所用的“大部分”在“聚乙烯醇包衣与片芯的大部分外表面至少部分地直接接触”的语境中使用时，其意在表示片芯的外表面与聚乙烯醇包衣的内表面之间直接接触的面积的总和大于在这两个表面之间的界面中存在物理屏障的面积的总和。如本文所用的术语“物理屏障”包括减少或影响片芯的外表面与聚乙烯醇包衣的内表面之间的物理接触的任何种类的物理屏障。

当用于制剂时，可通过使用多种聚合化合物将“粘膜粘附”性质引入制剂。通常，聚阴离子例如聚丙烯酸发挥这种性质。粘膜粘附性质固有地依赖于生物粘膜和制剂两者中聚合化合物的相互渗透。以这种方式，由于聚合物分子的大尺寸而使物理桥成为可能。低分子量化合物例如癸酸钠或山梨醇将因此不发挥粘膜粘附性质。被认为是“非粘膜粘附”的分子是分子量低于1000g/mol的分子。我们据此将在本专利申请中分子量低于900g/mol、800g/mol、700g/mol、600g/mol、500g/mol、400g/mol和300g/mol的分子均被包含在被认为是非粘膜粘附的分子的定义中。

如本文所用的术语“未包覆的片芯”是指未用任何包衣(例如，聚乙烯醇包衣)进行包覆的片芯。如本文所用的术语“包覆的片芯”是指用聚乙烯醇包衣包覆的片芯，因此包括由片芯和聚乙烯醇包衣组成的片芯。因此，术语“片芯”包括“包覆的片芯”和“未包覆的片芯”，除非另有说明，其涵盖可能包覆或未包覆的片芯。

当在没有另外说明的情况下使用时，术语“片剂”是将被施用的成品，因此在这样施用时可以是“未包覆的片芯”或“包覆的片芯”。另外，一个或多个未包覆或包覆的“片剂”可通过以同时吞咽的一个或多个片剂的方式提供，或通过例如以本文一些实例中所述的胶囊的方式提供而同时(即，同时地)施用，或者多于一个未包覆或包覆的片芯可压缩成一个“片剂”，该片剂可具有任意大小或重量，如中等片剂或整料片剂大小，并且将在随后相比于包含具有与所述一个或多个片芯的总和相等的大小/重量的仅一个片芯的相同大小/重量的普通片剂而相对较快地崩解。

如本文所用的术语“聚乙烯醇包衣”是指包含一种或多种类型的聚乙烯醇聚合物的包衣或膜包衣。如本文所用的术语“聚乙烯醇包衣”包括包含约25-55％(w/w)，优选38-46％(w/w)的聚乙烯醇聚合物的包衣，该术语还包括本领域技术人员理解为“聚乙烯醇膜”的包衣。因此，术语“聚乙烯醇包衣”和“聚乙烯醇膜”在本申请中被视为同义词。如本文所用的术语“基于聚乙烯醇聚合物的包衣”是指包含聚乙烯醇共聚物，即包含多于20％(w/w)或更多的聚乙烯醇的包衣，并因此被术语“聚乙烯醇包衣”所涵盖。

如本文所用的术语“聚乙烯醇包衣材料”是指购买或制备的材料，其通常为干粉末且包含聚乙烯醇包衣的所有组分。WO0104195A1中给出了聚乙烯醇包衣的实例。

商购可得的聚乙烯醇包衣的一个实例是来自的IIYellow，85F32410(如2013年所售)。

在一个实施方案中，将聚乙烯醇包衣材料分散在水性介质中以形成用于将要包覆在片剂或片芯之上的包衣的“聚乙烯醇分散体”，其中该共聚物材料可形成聚乙烯醇包衣或膜。

如本文所用的术语“阴离子共聚物包衣”是指包含约80％(w/w)或更多阴离子共聚物的包衣或膜包衣。在一个实施方案中，术语“阴离子共聚物包衣”包括包衣，如来自EvonikIndustries的FS30D(如2013年所售)和来自的93O(如2013年所售)包衣。如本文所用的术语“阴离子共聚物包衣”包括包含约80％、90％或100％阴离子共聚物的包衣。如本文所用的术语“基于阴离子共聚物的包衣”是指主要包含阴离子共聚物，即包含约80％(w/w)或更多阴离子共聚物的包衣，并因此被术语“阴离子共聚物包衣”所涵盖。

如本文所用的术语“共聚物包衣材料”是指购买或制备的材料，其通常为干粉末且包含共聚物包衣的所有组分。使该共聚物包衣材料悬浮以用于片剂或片芯之上的包衣，其中该共聚物材料可形成共聚物包衣。

当指代包衣时，术语“功能性的”旨在表示所述包衣在所述介质的特定pH间隔和/或时间窗下溶解于水性介质中。

根据上文，当指代包衣时，术语“非功能性的”旨在表示所述包衣溶解于水性介质中，而不论所述介质的pH值如何。功能性在本文并不涉及组合物的物理性质的改变，例如防潮屏障。

如本文所用的术语“额外的分隔层”是指任何非功能性包衣，如另一种类型的PVA包衣或技术人员已知的作为非功能性包衣且还可适于作为肠溶衣的底衣的任何其他包衣。这样的标准分隔层的具体实例是来自的II–Yellow(如2013年所售)，它被本领域技术人员认为是口服制剂中肠溶衣的常用(即，标准)底衣。

如本文所用的术语“额外的非功能性包衣”是指任何非功能性包衣，如另一种类型的PVA包衣或技术人员已知的作为非功能性包衣且还可适于作为肠溶衣的底衣的任何其他包衣。这样的非功能性包衣的具体实例是来自的聚乙烯醇包衣II–Yellow(如2013年所售)，它被本领域技术人员认为是口服制剂中肠溶衣的常用(即，标准)底衣。

如本文所用的术语“胰岛素粉末”是指活性药物成分(API)，其已经干燥并以粉末的形式储存，在这种情况下，API为酰化胰岛素，因此该粉末为“胰岛素粉末”。

如本文所用的术语“山梨醇粉末”是指任何山梨醇或等效的赋形剂如甘露醇，其已经干燥并以粉末的形式储存。

以下是进一步包含在本发明范围内的各方面的非限制性列表：

1.包含一个或多个片芯的药物组合物，其中每个片芯包含中链脂肪酸的盐和一种或多种酰化胰岛素并任选地包含聚乙烯醇包衣，并且其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫桥，或者其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸侧链并任选地进一步包含一个或多个额外的二硫键的蛋白酶稳定化的酰化胰岛素。

1A.包含一个或多个片芯的药物组合物，其中每个片芯包含中链脂肪酸的盐和胰岛素衍生物并任选地包含聚乙烯醇包衣，并且其中所述胰岛素衍生物包含一个或多个额外的二硫桥，或者其中所述胰岛素衍生物为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸侧链并任选地进一步包含一个或多个额外的二硫键的酰化胰岛素。

2.根据方面1所述的药物组合物，其中所述一种或多种酰化胰岛素意指两种不同的酰化胰岛素化合物，即，酰化胰岛素A和酰化胰岛素B。

3.根据方面1A所述的药物组合物，其中所述一种或多种胰岛素衍生物意指两种不同的胰岛素衍生物，即，酰化胰岛素A和酰化胰岛素B。

4.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述任选的聚乙烯醇包衣在任意pH下均溶解于水性介质中。

5.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中任选的所述聚乙烯醇包衣包含约25-55％的聚乙烯醇。

6.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述任选的聚乙烯醇包衣包含约38-46％的聚乙烯醇。

7.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述任选的聚乙烯醇包衣为II包衣(来自如2013年所售)。

8.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述任选的聚乙烯醇选自立即释放包衣，其包括聚乙烯醇包衣，如II-clear的或II–pigmented，其中所述II–pigmented可以是II–Yellow(II–clear、II–pigmented和II–Yellow来自如2013年所售)。

9.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述中链脂肪酸为癸酸。

10.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述中链脂肪酸的盐为癸酸钠，即，癸酸的钠盐。

11.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯进一步包含山梨醇、硬脂酸和胰岛素。

12.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯进一步包含其他药学上可接受的赋形剂。

13.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量低于约300-1000g/mol的成分。

14.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量低于约1000g/mol的成分。

15.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量低于约800g/mol的成分。

16.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量低于约700g/mol的成分。

17.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量低于约600g/mol的成分。

18.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量低于约500g/mol的成分。

19.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量低于约400g/mol的成分。

根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量低于约300g/mol的成分。

20.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量大于约300-1000g/mol的成分。

21.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量大于约1000g/mol的成分。

22.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量大于约800g/mol的成分。

23.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量大于约700g/mol的成分。

24.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量大于约600g/mol的成分。

25.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量大于约500g/mol的成分。

26.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量大于400g/mol的成分。

27.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含分子量大于约300g/mol的成分。

28.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯不是粘膜粘附的。

29.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯不是粘膜粘附的并且/或者不包含粘膜粘附成分。

30.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯不是粘膜粘附的但包含粘膜粘附成分。

根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含具有零吸水量的成分和赋形剂。

31.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含导致约0-9％的总吸水量的成分和赋形剂。

32.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含导致约0-9％的总吸水量的成分和赋形剂。

33.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含导致低于约10％的总吸水量的成分和赋形剂。

34.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含导致约9％的总吸水量的成分和赋形剂。

35.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含导致低于约8％的总吸水量的成分和赋形剂。

36.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含导致低于约10％或更多的总吸水量的成分和赋形剂。

37.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约50-85％(w/w)的癸酸钠。

38.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约70-85％(w/w)的癸酸钠。

39.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约70-80％(w/w)的癸酸钠。

40.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约75％(w/w)的癸酸钠。

41.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约75-80％(w/w)的癸酸钠。

42.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约77％(w/w)的癸酸钠。

43.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约80％(w/w)的癸酸钠。

44.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约85％(w/w)的癸酸钠。

45.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约77％(w/w)的癸酸钠、约22.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：0.1、0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5。

46.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约77％(w/w)的癸酸钠、约22.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5或10。

47.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约77％(w/w)的癸酸钠、约22.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14、14.5或15。

48.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约77％(w/w)的癸酸钠、约22.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19、19.5、20、20.5、21或21.5。

49.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均低于50mg，并且包含约75％(w/w)的癸酸钠、约22.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：0.1、0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5。

50.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均低于50mg，并且包含约77％(w/w)的癸酸钠、约22.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5或10。

51.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均低于50mg，并且包含约77％(w/w)的癸酸钠、约22.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14、14.5或15。

52.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约77％(w/w)的癸酸钠、约20.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：0.1、0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5。

53.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约77％(w/w)的癸酸钠、约20.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5或10。

54.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约77％(w/w)的癸酸钠、约22.0-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14、14.5或15。

55.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯包含约77％(w/w)的癸酸钠、约20.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19、19.5、20、20.5、21或21.5。

56.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均低于50mg，并且包含约75％(w/w)的癸酸钠、约20.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：0.1、0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5。

57.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均低于50mg，并且包含约77％(w/w)的癸酸钠、约20.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5或10。

58.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均低于50mg，并且包含约77％(w/w)的癸酸钠、约22.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5、14、14.5或15。

59.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均低于50mg，并且包含约77％(w/w)的癸酸钠、约20.5-X％(w/w)的山梨醇、约X％(w/w)的胰岛素和约0.5％(w/w)的硬脂酸，其中X选自：15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19、19.5、20、20.5、21或21.5。

60.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯是未包覆的，即不包含包衣。

61.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约1.5-800mg或约1.5-900mg。

62.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约600-800mg或约600-900mg。

63.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约250-475mg。

64.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约710mg。

65.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约200-380mg。

66.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约335mg。

67.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约237mg。

68.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约1.5-50mg。

69.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约3.0-50mg。

70.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约3.0-10mg。

71.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约3.0-5.0mg。

72.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均是未包覆的并且重约3.6mg。

73.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包覆有所述任选的聚乙烯醇包衣并且重约1.5-50mg。

74.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包覆有所述任选的聚乙烯醇包衣并且重约3.0-50mg。

75.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包覆有所述任选的聚乙烯醇包衣并且重约3.0-10mg。

76.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包覆有所述任选的聚乙烯醇包衣并且重约3.0-5.0mg。

77.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包覆有所述任选的聚乙烯醇包衣并且重约3.6mg。

78.根据前述方面61和68-77中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯通过使用直径为1.0-5.0mm，优选1.5-4.0mm，更优选1.5mm或4.0mm的冲压机(punch)形成。

79.根据前述方面61和68-77中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯通过使用直径为1.0-5.0mm的冲压机形成。

80.根据前述方面61和68-77中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯通过使用直径为1.5-4.0mm的冲压机形成。

81.根据前述方面61和68-77中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯通过使用直径为1.5mm或4.0mm的冲压机形成。

82.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包含聚乙烯醇包衣并且重约280-500mg。

83.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包含聚乙烯醇包衣并且重约600-900mg。

84.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包含聚乙烯醇包衣并且重约745mg。

85.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包含聚乙烯醇包衣并且重约742mg。

86.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包含聚乙烯醇包衣并且重约373mg。

87.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包含聚乙烯醇包衣并且重约258mg。

88.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述一个或多个片芯中的每一个均包含聚乙烯醇包衣并且重约240mg。

89.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，在一个或多个胶囊中提供约20-300个各自重约1.5-50mg的本发明的片芯。

90.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约70-240个各自重约3.0-10mg的本发明的片芯。

91.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约150-250个各自重约1.5-50mg的本发明的片芯。

92.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约100-250个各自重约3.0-10mg的本发明的片芯。

93.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约20-300个各自重约3.0-10mg的本发明的片芯。

94.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约150-250个各自重约3.0-10mg的本发明的片芯。

95.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约20-100个各自重约3.0-10mg的本发明的片芯。

96.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约100-250个各自重约3.0-10mg的本发明的片芯。

97.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约150-250个各自重约3.6mg的本发明的片芯。

98.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约150-250个各自重约3.0-5.0mg的本发明的片芯。

99.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约140-240个各自重约3.0-5.0mg的本发明的片芯。

100.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约150-250个各自重约3.6mg的本发明的片芯。

101.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约200个各自重约3.6mg的本发明的片芯。

102.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约600-1300mg，优选600-900mg的本发明的片芯，其中每个片芯重约3.6mg。

103.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约710mg的本发明的片芯，其中每个片芯重约3.0-5.0mg。

104.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约710mg的本发明的片芯，其中每个片芯重约3.6mg。

105.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约588mg的本发明的片芯，其中每个片芯重约3.0-5.0mg。

106.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约710mg的本发明的片芯，其中每个片芯重约3.6mg。

107.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约600mg的本发明的片芯，其中每个片芯重约3.0-5.0mg。

108.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，包括在一个或多个胶囊中提供约710mg的本发明的片芯，其中每个片芯重约3.6mg。

109.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述重1.5-50mg的片芯通过使用直径为约1.0-5.0mm，优选约1.5-4.0mm，更优选约1.5mm或约4.0mm的冲压机形成。

110.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其包含一个或多个片芯、至多六个片芯、至多三个片芯或两个片芯。

111.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其包含一个或多个片芯、至多六个片芯、至多三个片芯或两个片芯。

112.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其包含一个或多个重约200mg至900mg的片芯，包括至多六个片芯、至多三个片芯或两个片芯。

113.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其包含用根据前述方面中任一方面所述的聚乙烯醇包衣包覆的一个或多个片芯，包括至多六个片芯、至多三个片芯或两个片芯。

114.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约100％的所述外表面直接接触。

115.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约99％的所述外表面直接接触。

116.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约90％的所述外表面直接接触。

117.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约85％的所述外表面直接接触。

118.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约80％的所述外表面直接接触。

119.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约70％的所述外表面直接接触。

120.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约60％的所述外表面直接接触。

121.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约50％的所述外表面直接接触。

122.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约40％的所述外表面直接接触。

123.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约30％的所述外表面直接接触。

124.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约20％的所述外表面直接接触。

125.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约10％的所述外表面直接接触。

126.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约1％的所述外表面直接接触。

127.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中与所述一个或多个片芯的外表面直接接触的所述聚乙烯醇包衣与所述一个或多个片芯的约0％的所述外表面直接接触。

128.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣以相对于所述一个或多个片芯约0-10％(w/w)的量存在。

129.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣以相对于所述一个或多个片芯约0％(w/w)的量存在。

130.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣以相对于所述一个或多个片芯约2％(w/w)的量存在。

131.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣以相对于所述一个或多个片芯约4％(w/w)的量存在。

132.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣以相对于所述一个或多个片芯约4.5％(w/w)的量存在。

133.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣以相对于所述一个或多个片芯约5％(w/w)的量存在。

134.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣以相对于所述一个或多个片芯约6％(w/w)的量存在。

135.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣以相对于所述一个或多个片芯约8％(w/w)的量存在。

136.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣以相对于所述一个或多个片芯约10％(w/w)的量存在。

137.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣导致未包覆的片芯的重量增加约20-30％(w/w)、约25％-26％(w/w)。

138.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中在所述聚乙烯醇包衣的上方施加额外的非功能性包衣。

139.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中在所述聚乙烯醇包衣的上方施加额外的连续的非功能性包衣。

140.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中在所述聚乙烯醇包衣的上方施加额外的不连续的非功能性包衣。

141.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中在所述一个或多个片芯和所述聚乙烯醇包衣的下方施加额外的非功能性包衣。

142.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中在所述一个或多个片芯和所述聚乙烯醇包衣的下方施加额外的连续的非功能性包衣。

143.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中在所述一个或多个片芯和所述聚乙烯醇包衣的下方施加额外的不连续的非功能性包衣。

144.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中在所述一个或多个片芯和所述聚乙烯醇包衣的下方不施加额外的非功能性包衣。

145.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中在所述一个或多个片芯与所述聚乙烯醇包衣之间不施加额外的连续的非功能性包衣。

146.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中在所述一个或多个片芯与所述聚乙烯醇包衣之间不施加额外的不连续的非功能性包衣。

147.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中口服施用所述组合物。

148.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为片剂的形式。

149.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式。

150.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含一个或多个片剂，至多三个片剂或两个片剂。

151.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为压缩成片剂的多颗粒体系的形式，其中所述压缩的片剂是快速崩解的并且具有中等片剂或整料片剂的大小，即，重约50mg至约600mg，或约600mg至约900mg。

152.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为压缩成片剂的多颗粒体系的形式，其中每个片芯重1.5-50mg且所述压缩的片剂为约50mg至约600mg。

153.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为压缩成片剂的多颗粒体系的形式，其中每个片芯重3.0-5.0mg且所述压缩的片剂为约600mg至约900mg。

154.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为压缩成片剂的多颗粒体系的形式，其中每个片芯重3.6mg且所述压缩的片剂为约600mg至约900mg，或约600mg至约1300mg。

155.根据方面148-154中任一方面所述的药物组合物，其中所述药物组合物用如本发明所定义的聚乙烯醇包衣包覆。

156.根据方面148-154中任一方面所述的药物组合物，其中所述药物组合物为包含一个或多个片芯的未包覆的片剂。

157.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含一个或多个聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

158.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含一个或多个同时施用的聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

159.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含一个或多个同时施用的聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

160.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含一个或多个在相对于每个片剂施用的5分钟内施用的聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

161.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含至多六个聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

162.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含至多三个聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

163.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含至多三个同时施用的聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

164.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含至多三个同时施用的聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

165.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含至多三个在相对于每个片剂施用的5分钟内施用的聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

166.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含两个聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

167.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含两个同时施用的聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

168.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含两个同时施用的聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

169.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含两个在相对于每个片剂施用的5分钟内施用的聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式，其中每个包覆或未包覆的片剂各自包含一个或多个包覆或未包覆的片芯。

170.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含一个或多个包覆或未包覆的片剂、至多三个包覆或未包覆的片剂或两个包覆或未包覆的片剂，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述一个或多个包覆或未包覆的片剂的总重量，所述至多三个包覆或未包覆的片剂的总重量，或所述两个包覆或未包覆的片剂的总重量，达到约600-1300mg，优选600-900mg。

171.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含一个或多个包覆或未包覆的片剂、至多三个包覆或未包覆的片剂或两个包覆或未包覆的片剂，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述一个或多个包覆或未包覆的片剂的总重量，所述至多三个包覆或未包覆的片剂的总重量，或所述两个包覆或未包覆的片剂的总重量，达到约600-800mg。

172.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含一个或多个包覆或未包覆的片剂、至多三个包覆或未包覆的片剂或两个包覆或未包覆的片剂，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述一个或多个包覆或未包覆的片剂的总重量，所述至多三个片剂的总重量，或所述两个包覆或未包覆的片剂的总重量，达到约250-475mg。

173.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含一个或多个包覆或未包覆的片剂、至多三个包覆或未包覆的片剂或两个包覆或未包覆的片剂，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述一个或多个包覆或未包覆的片剂的总重量，所述至多三个包覆或未包覆的片剂的总重量，或所述两个片剂的总重量，达到约200-380mg。

174.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含一个或多个包覆或未包覆的片剂、至多三个包覆或未包覆的片剂或两个包覆或未包覆的片剂，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述一个或多个包覆或未包覆的片剂的总重量，所述至多三个包覆或未包覆的片剂的总重量，或所述两个包覆或未包覆的片剂的总重量，达到约280-500mg。

175.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含至多500个包覆或未包覆的片芯，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述至多500个包覆或未包覆的片芯的总重量，达到约600-900mg。

176.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含至多500个包覆或未包覆的片芯，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述至多500个包覆或未包覆的片芯的总重量，达到约600-1300mg。

177.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含至多500个包覆或未包覆的片芯，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述至多300个包覆或未包覆的片芯的总重量，达到约600-800mg。

178.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含至多300个包覆或未包覆的片芯，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述至多300个包覆或未包覆的片芯的总重量，达到约600-800mg。

179.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含至多300个包覆或未包覆的片芯，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述至多300个包覆或未包覆的片芯的总重量，达到约250-475mg。

180.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含至多300个包覆或未包覆的片芯，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述至多300个包覆或未包覆的片芯的总重量，达到约200-380mg。

181.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含至多300个包覆或未包覆的片芯，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述至多300个包覆或未包覆的片芯的总重量，达到约280-500mg。

182.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含至多300个包覆或未包覆的片芯，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述至多300个包覆或未包覆的片芯的总重量，达到约588mg。

183.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含至多约300个包覆或未包覆的片芯，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述至多约300个包覆或未包覆的片芯的总重量，达到约600mg。

184.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含至多300个包覆或未包覆的片芯，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述至多300个包覆或未包覆的片芯的总重量，达到约710mg。

185.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中多颗粒体系包含至多300个包覆或未包覆的片芯，其中所述多颗粒体系的总重量，即，所述至多300个包覆或未包覆的片芯的总重量，达到约895mg。

186.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含在胶囊中施用的一个或多个聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式。

187.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含在胶囊中施用的至多三个聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的多颗粒体系的形式。

188.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为在胶囊中施用的两个聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的形式。

189.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为在胶囊中施用的一个或多个聚乙烯醇包覆或未包覆的片剂的形式。

190.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为包含在胶囊中施用的一个或多个片剂的多颗粒体系的形式。

191.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其为多颗粒体系的形式，其中所述体系中的所述颗粒是未包覆的或单独地或集体地用所述聚乙烯醇包衣包覆的。

192.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其形式为均匀片剂、单层或多层片剂、多颗粒体系、胶囊、容纳在胶囊中的片剂、包含容纳在胶囊中的多个片剂的多颗粒体系、包含压缩成一个片剂的多个片剂的多颗粒体系、以容纳在胶囊中的至多三个片剂的形式的多颗粒体系、以容纳在胶囊中的至多两个片剂的形式的多颗粒体系、所述一个或多个片芯。

193.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素。

194.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有16个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素。

195.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有18个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素。

196.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有20个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素。

197.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链的蛋白酶稳定化的胰岛素。

198.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素具有两个或更多个半胱氨酸置换和附接至该胰岛素的侧链，其中人胰岛素的三个二硫键得到保留，并且选择半胱氨酸置换的位点使得引入的半胱氨酸残基置于折叠的酰化胰岛素的三维结构中，以允许形成人胰岛素中不存在的一个或多个额外的二硫键。

199.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素具有两个或更多个半胱氨酸置换和附接至该胰岛素的侧链，其中人胰岛素的三个二硫键得到保留，并且选择半胱氨酸置换的位点使得引入的半胱氨酸残基置于折叠的酰化胰岛素的三维结构中，以允许形成人胰岛素中不存在的一个或多个额外的二硫键，其中所述链包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链。

200.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素具有两个或更多个半胱氨酸置换和附接至该胰岛素的侧链，其中人胰岛素的三个二硫键得到保留，并且选择半胱氨酸置换的位点使得引入的半胱氨酸残基置于折叠的酰化胰岛素的三维结构中，以允许形成人胰岛素中不存在的一个或多个额外的二硫键，其中所述链包含连接体和具有14个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链。

201.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素具有两个或更多个半胱氨酸置换和附接至该胰岛素的侧链，其中人胰岛素的三个二硫键得到保留，并且选择半胱氨酸置换的位点使得引入的半胱氨酸残基置于折叠的酰化胰岛素的三维结构中，以允许形成人胰岛素中不存在的一个或多个额外的二硫键，其中所述链包含连接体和具有16个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链。

202.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素具有两个或更多个半胱氨酸置换和附接至该胰岛素的侧链，其中人胰岛素的三个二硫键得到保留，并且选择半胱氨酸置换的位点使得引入的半胱氨酸残基置于折叠的酰化胰岛素的三维结构中，以允许形成人胰岛素中不存在的一个或多个额外的二硫键，其中所述链包含连接体和具有18个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链。

203.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素具有两个或更多个半胱氨酸置换和附接至该胰岛素的侧链，其中人胰岛素的三个二硫键得到保留，并且选择半胱氨酸置换的位点使得引入的半胱氨酸残基置于折叠的酰化胰岛素的三维结构中，以允许形成人胰岛素中不存在的一个或多个额外的二硫键，其中所述链包含连接体和具有20个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链。

204.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素具有两个或更多个半胱氨酸置换和附接至该胰岛素的侧链，其中人胰岛素的三个二硫键得到保留，并且选择半胱氨酸置换的位点使得引入的半胱氨酸残基置于折叠的酰化胰岛素的三维结构中，以允许形成人胰岛素中不存在的一个或多个额外的二硫键，其中所述链包含连接体和具有22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸链。

205.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中选择半胱氨酸置换的位点以使得：

(1)引入的半胱氨酸残基置于折叠的酰化胰岛素的三维结构中，以允许形成人胰岛素中不存在的一个或多个额外的二硫键，并且

(2)人酰化胰岛素保留与人胰岛素相关的所需生物活性。

206.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中选择半胱氨酸置换的位点以使得：

(1)引入的半胱氨酸残基置于折叠的酰化胰岛素的三维结构中，以允许形成人胰岛素中不存在的一个或多个额外的二硫键，

(2)人酰化胰岛素保留与人胰岛素相关的所需生物活性，并且

(3)人酰化胰岛素具有相对于人胰岛素和/或母体胰岛素提高的物理稳定性。

207.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中选择半胱氨酸置换的位点以使得：

(2)人酰化胰岛素保留与人胰岛素相关的所需生物活性，并且

(3)人酰化胰岛素针对蛋白质降解是稳定的。

208.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中在A链的位置A10上的氨基酸残基被半胱氨酸置换，在选自B链的B1、B2、B3和B4的位置上的氨基酸残基被半胱氨酸置换，并且任选地，在位置B30上的氨基酸缺失。

209.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中在所述A链与所述B链之间获得一个或多个额外的二硫键。

210.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫键，并且与不具有一个或多个额外的二硫键的酰化胰岛素相比具有更长效的谱。

211.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述侧链附接至胰岛素的N末端或胰岛素中的赖氨酸残基的ε氨基基团。

212.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣为水性包衣。

213.根据方面102所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣包含至少25-55％的聚乙烯醇聚合物。

214.根据方面102所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣包含至少38-46％的聚乙烯醇聚合物。

215.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣为II–Yellow膜(诸如例如，来自(如2013年所售))。

216.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣不是阴离子共聚物包衣。

217.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣不是pH敏感的，即，不具有依赖于pH的溶解曲线。

218.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣不是生物粘附的。

219.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣不是粘膜粘附的。

220.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素包含在位置A14处的谷氨酰胺，即，包含氨基酸A14Glu。

221.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素包含在位置B25处的组氨酸，即，包含氨基酸B25His。

222.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素包含在位置B16处的组氨酸，即，包含氨基酸B16His。

223.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素在位置B27处的氨基酸缺失，即，所述酰化胰岛素包含desB27。

224.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素在位置B30处的氨基酸缺失，即，所述酰化胰岛素包含desB30。

225.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素选自：

A14E,B25H,B29K(N^ε-十六烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε3-羧基-5-十八烷二酰基氨基苯甲酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε-N-十八烷二酰基-N-(2-羧基乙基)甘氨酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε(N-十八烷二酰基-N-羧基甲基)-β-丙氨酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε4-([4-({19-羧基十九酰基氨基}甲基)反式-环己烷羰基]-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十七烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε4-([4-({19-羧基十九酰基氨基}甲基)反式-环己烷羰基]-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-PEG7),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-(3-(2-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十七烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B16E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-OEG-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,A18L,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,A18L,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A1G(N^α十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素，

A14E,B1F(N^α十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),B25H,B29R,desB30人胰岛素，

A1G(N^α十六烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-Abu-Abu-Abu-Abu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^α二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^α4-[16-(1H-四唑-5-基)十六酰基氨基磺酰基]丁酰基)，desB30人胰岛素，

A1G(N^α十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),A14E,A21G,B25H,desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B27K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB28,desB29,desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε(5-二十烷二酰基氨基间苯二甲酸)),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-Aoc),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B16H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A1G(N^α十八烷二酰基),A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B27K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB28,desB29,desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十二烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十二烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε(N-二十烷二酰基-N-羧基甲基)-βAla),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε3-[2-(2-{2-[2-(17-羧基十七酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]丙酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε3-[2-(2-{2-[2-(19-羧基十九酰基氨基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)乙氧基]丙酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-(3-(2-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-(3-(2-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-(3-(2-{2-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙氧基)丙酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε4-([4-({17-羧基十九酰基氨基}甲基)反式-环己烷羰基]-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε4-([4-({17-羧基十七酰基氨基}甲基)反式-环己烷羰基]-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B27E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

14E,B25H,B29K(N^ε(N-二十烷二酰基-N-羧基甲基)-βAla-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε(N-十八烷二酰基-N-羧基甲基)-βAla-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε(N-十六烷二酰基-N-羧基甲基)-βAla-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-2-[(3-{2-[2-(3-氨基丙氧基)乙氧基]乙氧基}丙基氨基甲酰基)甲氧基]乙酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-2-[(3-{2-[2-(3-氨基丙氧基)乙氧基]乙氧基}丙基氨基甲酰基)甲氧基]乙酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-2-[(3-{2-[2-(3-氨基丙氧基)乙氧基]乙氧基}丙基氨基甲酰基)甲氧基]乙酰基),desB30人胰岛素，

A14E，B16H，B25H，B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-2-[(3-{2-[2-(3-氨基丙氧基)乙氧基]乙氧基}丙基氨基甲酰基)甲氧基]乙酰基),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A1G(N^α十八烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

A1G(N^α二十烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

A1G(N^α十八烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29R,desB30人胰岛素，

A1G(N^α二十烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29R,desB30人胰岛素，

A1G(N^α十八烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

A1G(N^α二十烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

A1G(N^α十八烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29R,desB30人胰岛素，以及

A1G(N^α二十烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29R,desB30人胰岛素。

226.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素选自：A14E,B25H,B29K(N^ε-十六烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十七烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-PEG7),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十七烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B16E,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-OEG-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,A18L,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,A18L,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A1G(N^α十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素，

A14E,B1F(N^α十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),B25H,B29R,desB30人胰岛素，

A1G(N^α十六烷二酰基-γGlu),A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^α二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A1G(N^α十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),A14E,A21G,B25H,desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-Aoc),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B16H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A1G(N^α十八烷二酰基),A14E,B25H,B29R,desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十二烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B29K(N^ε二十二烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B27E,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B1E,B25H,B28E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B28D,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B28E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A8H,B25N,B27E,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,A21G,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29K(N^ε二十烷二酰基),desB30人胰岛素，

A1G(N^α十八烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

A1G(N^α二十烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,desB30人胰岛素，

A1G(N^α二十烷二酰基),A14E,B25H,B26G,B27G,B28G,B29R,desB30人胰岛素。

227.在一个实施方案中，根据本发明的片芯包含选自下组的酰化胰岛素：

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,desB1,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素

A10C,A14E,B4C,B25H,desB27,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B1C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B1C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B1C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B1C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B2C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B2C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B2C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B2C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B3C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

10C,B3C B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B3C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B3C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B4C B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B1C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B1C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B2C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B16H,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素，以及

A10C,A14E,B4C,B16E,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-γGlu),desB30人胰岛素。

228.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素选自：

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε肉豆蔻基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B3C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

10C,B3C B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B3C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B3C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B4C B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A10C,B4C,B29K(N^ε十六烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B4C,B25H,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,desB27,B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

229.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素选自：

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，以及

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A10C,A14E,B3C,B25H,desB27，B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

230.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素选自：

A10C,A14E,B3C,B25H,B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

231.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素选自：

A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，

A14E,B16H,B25H,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，

A14E,B25H,desB27,B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu),desB30人胰岛素，以及

232.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其用作药物。

233.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其用于治疗糖尿病。

234.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物，其用于治疗1型和/或2型糖尿病。

235.根据方面1-234中任一方面所述的药物组合物，其在药盒中提供，所述药盒包含在泡罩包装中的所述药物组合物以及使用说明书。

236.根据方面1-234中任一方面所述的药物组合物，其在药盒中提供，所述药盒包含在容器中的所述药物组合物以及使用说明书。

237.根据方面1-234中任一方面所述的药物组合物，其在药盒中提供，所述药盒包含在附带使用说明书的容器中提供的一个或多个片剂、胶囊或压缩成片剂的多颗粒体系的形式的所述药物组合物。

238.根据前述方面中任一方面所述的药物组合物的制备方法，其包括制备片芯以及在所述一个或多个片芯的所述外表面上包覆所述聚乙烯醇包衣的步骤。

239.根据方面238所述的方法，其中所述一个或多个片芯为均匀片剂、单层或多层片剂、多颗粒体系、胶囊、容纳在胶囊中的片剂、包含容纳在胶囊中的多个片剂的多颗粒体系或包含容纳在一个片剂中的多个片剂的多颗粒体系的形式。

本发明还可以解决将从示例性实施方案的公开内容将会明显看出的其他问题。

材料与方法

缩写列表

βAla是β-丙氨酰基，

Aoc是8-氨基辛酸，

tBu是叔丁基，

CV是柱体积，

DCM是二氯甲烷，

DIC是二异丙基碳二亚胺，

DIPEA＝DIEA是N,N-二异丙基乙胺，

DMF是N,N-二甲基甲酰胺，

DMSO是二甲基亚砜，

EtOAc是乙酸乙酯，

Fmoc是9-芴基甲氧羰基，

γGlu是γL-谷氨酰基，

HCl是盐酸，

HOBt是1-羟基苯并三唑，

NMP是N-甲基吡咯烷酮，

MeCN是乙腈，

OEG是[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]乙基羰基，

Su是琥珀酰亚胺-1-基＝2,5-二氧代-吡咯烷-1-基，

OSu是琥珀酰亚胺-1-基氧基＝2,5-二氧代-吡咯烷-1-基氧基，

RPC是反相色谱法，

RT是室温，

TFA是三氟乙酸，

THF是四氢呋喃，

TNBS是2,4,6-三硝基苯磺酸，

TRIS是三(羟甲基)氨基甲烷

TSTU是O-(N-琥珀酰亚胺基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐。

方法1：制备胰岛素的一般方法

多肽和肽如胰岛素的制备是本领域公知的。胰岛素可以例如通过经典肽合成来生产，例如使用t-Boc或Fmoc化学法的固相肽合成或其他确立的技术，参见，例如，Greene和Wuts,“Protective Groups in Organic Synthesis”,John Wiley&Sons,1999。胰岛素还可以通过这样的方法来生产，该方法包括在允许肽表达的条件下，在合适的营养培养基中培养含有编码胰岛素的DNA序列并且能够表达胰岛素的宿主细胞。对于包含非天然氨基酸残基的胰岛素，应该修饰重组细胞，使得非天然氨基酸掺入GLP-1肽中，例如通过使用tRNA突变体。

为了实现侧链与胰岛素的共价附接，以活化的形式，即具有反应性官能团的形式，提供侧链的羟基末端基团。合适的活化聚合物分子可商购自例如Shearwater Corp.,Huntsville,Ala.,USA或PolyMASC Pharmaceuticals plc,UK。或者，可通过本领域已知的，例如WO 09/115469中公开的常规方法将侧链活化。

胰岛素和活化侧链的缀合通过使用任何常规方法来进行，例如，如以下参考文献(其还描述了用于活化侧链的合适的方法)中所述：R.F.Taylor,(1991),"Proteinimmobilisation.Fundamental and applications",Marcel Dekker,N.Y.；S.S.Wong,(1992),"Chemistry of Protein Conjugation and Crosslinking",CRC Press,BocaRaton；G.T.Hermanson等人(1993),"Immobilized Affinity Ligand Techniques",Academic Press,N.Y.。技术人员将意识到，待使用的活化方法和/或缀合化学法取决于胰岛素的附接基团(其实例在上文进一步给出)以及侧链的官能团(例如，为胺、羟基、羧基、醛、巯基、琥珀酰亚胺基、马来酰亚胺、乙烯砜(vinysulfone)或卤代乙酸酯)。

以下实例以说明而非限制的方式提供。

在本发明的药物组合物中使用的酰化胰岛素的制备通过在所述制备的一般适用性方面所描述的化学反应进行描述。偶尔，该反应可能并不如所述的那样适用于包含在本发明公开范围内的每种化合物。本领域技术人员将容易认识到发生这种情况的酰化胰岛素。在这些情况下，该反应可以通过本领域技术人员已知的常规改动，即通过对干扰基团的适当保护、通过更换成其他常规试剂或通过反应条件的常规修改而成功进行。或者，本文公开的或常规的其他反应将适用于本发明中使用的相应酰化胰岛素的制备。在所有制备方法中，所有起始材料都是已知的或可以从已知的起始材料容易地制备。所有温度均以摄氏度表示，并且除非另有说明，当提及产量时，所有份数(parts)和百分比都按重量计，而当提及溶剂和洗脱液时，所有份数都按体积计。

可以通过采用在本领域内典型的一种或多种以下程序来纯化用于本发明的酰化和非酰化胰岛素。若需要，这些程序可以在梯度、pH、盐、浓度、流动、柱等方面进行修改。根据诸如杂质分布、所讨论的胰岛素的溶解度等因素，本领域技术人员可以容易地认识到并作出这些修改。

在酸性HPLC或脱盐后，通过将纯级分冻干来分离酰化胰岛素。

在中性HPLC或阴离子交换色谱分析后，将该化合物脱盐，在等电pH下沉淀，或通过酸性HPLC来纯化。

方法2：典型的胰岛素纯化程序

HPLC系统是由以下组件组成的Gilson系统：215型液体处理器、322-H2型泵和155型UV检测器。检测通常在210nm和280nm下进行。

Purifier FPLC系统(GE Health Care)由以下组件组成：P-900型泵、UV-900型UV检测器、pH/C-900型pH与电导率检测器、Frac-950型级分收集器。UV检测通常在214nm、254nm和276nm下进行。Explorer Air FPLC系统(Amersham BioGE HealthCaresciences)由以下组件组成：P-900型泵、UV-900型UV检测器、pH/C-900型pH与电导率检测器、Frac-950型级分收集器。UV检测通常在214nm、254nm和276nm下进行。

酸性HPLC：

柱：Phenomenex,Gemini,5μ,C18,250x30cm

流速：20ml/min’

洗脱液：A：在水中的0.1％TFA B：在CH₃CN中的0.1％TFA

梯度：0-7.5min：10％B

7.5-87.5min：10％B至60％B

87.5-92.5min：60％B

92.5-97.5min：60％B至100％B

中性HPLC：

柱：Phenomenex,Gemini,C18,5μm 250x 30.00mm,

流速：20ml/min

洗脱液：A：在水性10mM TRIS+15mM(NH₄)SO₄中的20％CH₃CN pH＝7.3

B：80％CH₃CN，20％水

梯度：0-7.5min：0％B

7.5-52.5min：0％B至60％B

52.5-57.5min：60％B

57.5-58min：60％B至100％B

58-60min：100％B

60-63min：10％B

阴离子交换色谱法：

柱：RessourceQ,6ml,

流速：6ml/min

缓冲液A：0.09％NH₄HCO₃、0.25％NH₄OAc、42.5％乙醇，pH 8.4

缓冲液B：0.09％NH₄HCO₃、2.5％NH₄OAc、42.5％乙醇，pH 8.4

梯度：在30CV中，100％A至100％B

柱：Source 30Q,30x250mm

流速：80ml/min

缓冲液A：15mM TRIS、30mM乙酸铵、50％乙醇，

pH 7.5(1.25mS/cm)

缓冲液B：15mM TRIS、300mM乙酸铵、50％乙醇

pH 7.5(7.7mS/cm)

梯度：在40CV中，15％B至70％B

脱盐：

柱：Daiso15um FeFgel 304,30x250mm

缓冲液A：20v/v％乙醇、0.2％乙酸

缓冲液B：80％v/v％乙醇、0.2％乙酸

梯度：在1.5CV中，0-80％B

流速：80ml/min

柱：HiPrep 26/10

流速：10ml/min，

梯度：6CV

缓冲液：10mM NH₄HCO₃

用于固相合成通式化学式3的酰化试剂的一般程序

化学式3：Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-Act，

其中AcyAA1、AA2、AA3、n、m和p如上文所定义，而Act是活性酯的离去基团，如N-羟基琥珀酰亚胺(OSu)或1-羟基苯并三唑，并且

其中酰基部分的Acy和AA2部分内的羧酸作为叔丁酯得到保护。

可以采用固相肽合成领域中的技术人员公知的程序在固体支持体上合成根据本发明使用的通式化学式3的胰岛素类似物或衍生物。该程序包括Fmoc保护的氨基酸与聚苯乙烯2-氯三苯甲基氯树脂的附接。例如，可以在叔胺如三乙胺或N,N-二异丙基乙胺的存在下采用游离的N-保护的氨基酸实现该附接(参见以下参考文献)。该氨基酸的C末端(附接至该树脂)处于偶联至本发明母体胰岛素的合成序列的末端处。在Fmoc氨基酸附接至树脂后，采用例如仲胺如哌啶或二乙胺将Fmoc基团脱保护，随后偶联另一种(或相同的)Fmoc保护的氨基酸并脱保护。通过偶联单叔丁基保护的脂肪(α,ω)二酸如十六烷二酸单叔丁酯、十七烷二酸单叔丁酯、十八烷二酸单叔丁酯或二十烷二酸单叔丁酯来终止合成序列。采用稀酸如0.5-5％TFA/DCM(在二氯甲烷中的三氟乙酸)、乙酸(例如，在DCM中的10％乙酸，或HOAc/三氟乙醇/DCM 1:1:8)或在DCM中的六氟异丙醇来实现该化合物从树脂上的切割(参见，例如，“Organic Synthesis on Solid Phase”,F.Z.Wiley-VCH,2000.ISBN 3-527-29950-5,“Peptides:Chemistry and Biology”,N.Sewald&H.-D.Jakubke,Wiley-VCH,2002,ISBN 3-527-30405-3或“The Combinatorial Chemistry Catalog”1999,NovabiochemAG，以及其中引用的参考文献)。这确保在该化合物中作为羧酸保护基团存在的叔丁酯没有被脱保护。最后，将C-末端羧基(从该树脂上释放的)活化为例如N-羟基琥珀酰亚胺酯(OSu)，并直接用作或在纯化后用作附接本发明母体胰岛素的偶联剂。该程序在WO09115469的实施例9中描述。

或者，以上通式化学式3的酰化试剂可通过如下所述的溶液相合成来制备。

将单叔丁基保护的脂肪二酸如十六烷二酸、十七烷二酸、十八烷二酸或二十烷二酸单叔丁酯活化为例如如下所述的OSu-酯或本领域技术人员已知的任何其他活化酯，如HOBt-或HOAt-酯。在合适的碱如DIPEA或三乙胺的存在下，使该活性酯在合适的溶剂如THF、DMF、NMP(或溶剂混合物)中与氨基酸AA1、单叔丁基保护的AA2或AA3中的一个进行偶联。例如通过提取程序或通过色谱程序分离该中间体。使得到的中间体再次经历活化(如上所述)并经历与如上所述的氨基酸AA1、单叔丁基保护的AA2或AA3中的一个的偶联。重复该程序直到获得所需的经保护的中间体Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-OH。继而将其活化以提供通式化学式3Acy-AA1_n-AA2_m-AA3_p-Act的酰化试剂。该程序在WO09115469的实施例11中描述。

通过任何上述方法制备的酰化试剂可以在活化为OSu酯之后进行(叔丁基)脱保护。这可通过OSu-活化的叔丁基保护的酰化试剂的TFA处理来进行。在任何胰岛素的酰化之后，获得了未受保护的本发明酰化的蛋白酶稳定化的胰岛素。该程序在WO09115469的实施例16中描述。

如果通过任何上述方法制备的试剂在活化为OSu酯之后没有进行(叔丁基)脱保护，则任何胰岛素的酰化提供相应的叔丁基保护的本发明的酰化胰岛素。为了获得未受保护的本发明的酰化胰岛素，经保护的胰岛素将要进行脱保护。这可通过TFA处理来进行以提供未受保护的本发明的酰化胰岛素。该程序在WO05012347的实施例1中描述。

可在WO09115469中找到用于制备酰化胰岛素的方法。

在本发明的一个实施方案中，酰化胰岛素在根据本发明的组合物中使用，其中所述胰岛素是酰化的、蛋白酶稳定化的胰岛素。

方法3：制备根据本发明的重约100至900mg的片芯(即，中等或整料片芯)

制备重约100mg至约900mg的根据本发明的片芯，使得药物片剂生产领域的技术人员能够容易地制备所述片剂。根据本发明的片芯材料的配制如本文所概述的进行，该实施例涉及本发明的制剂，其包含：

●酰化胰岛素 1.17％(w/w)

●癸酸钠(即，癸酸的钠盐) 77.00％(w/w)

●山梨醇 21.33％(w/w)

●硬脂酸 0.50％(w/w)

当根据以上所列的成分并按照相应的比例制备100g包含酰化胰岛素、癸酸钠(即，癸酸的钠盐)、山梨醇和硬脂酸的片芯材料时，使用以下步骤：

该程序如下进行：

使胰岛素粉末通过筛孔尺寸为0.25mm的筛子。筛分后，称量准确量的酰化胰岛素。使山梨醇粉末通过筛孔尺寸为0.5mm的筛子。筛分后，称量准确量。

在小容器中混合胰岛素和山梨醇。向所述容器中添加与酰化胰岛素的量相当的量的山梨醇并手动搅拌。然后添加相对于先前添加量为双倍量的山梨醇并手动搅拌，直到胰岛素与所有山梨醇混合均匀。该步骤之后为在Turbula混合器中机械混合以完成混合，从而获得均匀的粉末。

然后按照等体积原则，向胰岛素-山梨醇粉末中添加癸酸的钠盐(以微粒的形式)。这分两步完成，并且以在Turbula混合器中的机械混合步骤结束。

最后，使硬脂酸通过筛孔尺寸为0.25mm的筛子。称取硬脂酸，并将其添加至该粉末中，并进行机械混合。

将制备的粉末压缩到压片机中以根据所需的胰岛素剂量形成片剂。

方法4：制备具有聚乙烯醇包衣如来自的II–YELLOW(如2013年所售)的重约100mg至约900mg的片芯(即，中等和/或整料片剂)

为了举例说明如何制备中等片剂和整料片剂，该方法将描述整料片剂的制备。如果需要较小的片剂，即，重量较小且因而具有较小尺寸的片剂，则必须将成分相应地调整到较低的总重量并压缩成所需的片剂尺寸。将按照方法3制备的粉末压缩到压片机中以形成例如重710mg的片剂。然后用包含聚乙烯醇的立即释放包衣包覆通过该方法制备的片芯。通过将包含聚乙烯醇的20g立即释放包衣材料分散在80g纯水中制备包衣溶液。包衣溶液中包含聚乙烯醇的立即释放包衣的浓度为20％-体积。在使用标准磁力搅拌器剧烈混合下，将聚合物粉末加入水中。加入聚合物后，在低强度下搅拌该混合物30分钟。对所得包衣溶液进行筛分以去除结块。片芯的包衣在盘式包衣机或流化床包衣机中进行。在带有具有1.0mm孔口的常规模式化(patterned)空气Schlick喷嘴、盘大小为8.5”的盘式包衣机中，在0.5巴的雾化和模式化空气压力、38℃的入口空气温度以及130kg/小时的空气流下，通过泵送聚合物溶液通过喷嘴进行包衣。在添加4.5％(w/w)的聚合物均匀分布在片芯上后，停止喷射并使片剂在盘内干燥至多30分钟。根据所需片剂重量、因此所需大小的表面积调节包衣聚合物的量。

方法5：制备根据本发明的重约100mg至约900mg的阴离子共聚物包覆的片芯(即，中等和/或整料片剂)或具有底衣的片芯

为了举例说明如何制备中等片剂和整料片剂，该方法将描述整料片剂的制备。如果需要较小的片剂，即，重量较小且因而具有较小尺寸的片剂，则必须将成分以成分之间相同的比例调整到较低的总重量并压缩成所需的片剂尺寸。

如果用阴离子共聚物包覆片剂，则根据方法3或方法4来制备片芯并如下所述用阴离子共聚物进行包覆：

将根据方法3的片芯或根据方法4的具有底衣的片芯用外包衣进行包覆。

为此，使用了命名为“丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸”(商标名93O，来自(如2013年所售))的共聚物家族的聚合物。

在合适的搅拌装置上的烧杯中制备“丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸”(商标名93O，来自(如2013年所售))的200g水性分散体。将40g来自的93O(如2013年所售)小心地混合到160ml纯水中。将该混合物搅拌至少30分钟，之后通过0.24mm筛网过滤器过滤以去除结块。在盘式包衣机或流化床包衣机中进行具有内包衣的片芯以及不具有内包衣的片剂的包衣。在带有具有1.0mm孔口的常规模式化空气Schlick喷嘴、盘大小为8.5”的盘式包衣机中，在0.5-0.6巴的雾化和模式化空气压力、36℃的入口空气温度以及95kg/小时的空气流下，通过泵送聚合物溶液通过喷嘴进行包衣。在添加约9％(w/w)的聚合物均匀分布在片芯(其包括和不包括如方法3和方法4中制备的内包衣)上后，停止喷射。根据所需片剂重量、因此所需大小的表面积调节包衣材料的量。

方法6：体外测量溶出速率

可以在合适的溶出装置，例如USP溶出装置2a中进行根据药典的标准溶出试验以在体外测定溶出度。在该试验中，将片剂暴露于pH为6.8的溶出介质中。在搅拌下，片剂溶出之后以预定的时间间隔采样并通过HPLC色谱法进行分析。

方法7：从比格犬采集样品以测量组合物的生物利用度、Tmax

将犬在测试之前禁食过夜(没有食物，仅自来水)。在实验前一天，将犬称重并将这些犬带出数小时。

在实验当天，将犬置于测试椅上，并将venflon 20G置于头静脉中。从导管采集血液样品。在给药后6小时取出venflon并将犬送回其空间，并提供室外奔跑方式的运动。此后，将犬领入测试室以从颈静脉(或头静脉)进行血液采样。

经口施用。在以下时间点采集血液样品以供血糖和胰岛素分析：

0、15、30、45、60、75、90、105、120、135、150、165、180、210、240、270、300、360、480、600、720、1440、1800、2880和4320分钟。

在t＝0min抽样之后立即施用片剂。将片剂置于口腔后部，以使犬在不咀嚼的情况下吞咽片剂。在犬吞咽片剂之后，通过注射器向口中施用10ml水。

血液采样：

在采样之前，在纸巾上收集前几滴血液。

将大约800μl血液收集在1.5ml EDTA eppendorf管中以供制备血浆，并在10μL毛细管中装入全血以供血糖分析。

将EDTA血液样品在4000x g(4℃)下离心4min。

将所有样品保持在湿冰上直到分析，或在-80℃下储存直到分析。

在每次采样之后，用0.5ml肝素(10IU)冲洗Venflon。

所用的雄性比格犬大约重12kg至18kg。

通过夹心免疫测定或液相色谱-质谱法分析血浆样品。使用WinNonlinProfessional 5.2(Pharsight Inc.,Mountain View,CA,USA)通过非房室药代动力学分析来分析血浆浓度-时间曲线。

方法8：生物利用度和药代动力学谱

一般来说，术语生物利用度是指活性药物成分(API)如本发明衍生物的给药剂量中以未改变的形式到达体循环的分数。按照定义，当静脉内施用API时，其生物利用度为100％。然而，当经由其他途径(如口服)施用时，其生物利用度降低(由于降解和/或不完全吸收和首过代谢)。当为非静脉内给药途径计算剂量时，对于生物利用度的了解是重要的。

在口服和静脉内给药后制作血浆浓度-时间曲线图。绝对生物利用度(F)是(AUC-口服除以剂量)除以(AUC-静脉内除以剂量)。

延长的终末半衰期和/或降低的清除率意味着所述化合物较慢地从体内消除。对于本发明的衍生物，这需要延长的药理作用持续时间。

增加的口服生物利用度意味着较大分数的口服给药剂量到达体循环，其可以从体循环进行分布以表现出药理作用。

本发明衍生物的药代动力学谱可以适合当地在药代动力学(PK)研究中在体内确定。进行这类研究以评价随着时间的进程，药物化合物如何在体内吸收、分布和消除，以及这些过程如何影响化合物在体内的浓度。

在药物开发的发现和临床前阶段，可以使用动物模型如小鼠、大鼠、猴子、犬或猪来进行这种表征。可使用这些模型中的任意一种来测试本发明衍生物的药代动力学谱。

在这样的研究中，通常在相关制剂中给动物静脉内、皮下(s.c.)或经口(p.o.)施用单一剂量的药物。在给药后的预定时间点抽取血液样品，并采用相关定量测定分析样品中的药物浓度。根据这些测量，绘制研究化合物的时间-血浆浓度曲线，并进行数据的所谓非房室药代动力学分析。

对于大多数化合物，当以半对数图的方式绘图时，血浆-浓度曲线的末端部分将会是线性的，这反映了在最初吸收和分布之后，药物以恒定的分数比率从体内消除。该比率(λZ或λ_z)等于该曲线末端部分的斜率的负数。由该比率还可以计算终末半衰期，t1/2＝ln(2)/λ_z(参见，例如，Johan Gabrielsson和Daniel Weiner:Pharmacokinetics andPharmacodynamic Data Analysis.Concepts&Applications,第3版.,SwedishPharmaceutical Press,Stockholm(2000))。

清除率可以在静脉内给药后进行测定，且被定义为剂量(D)除以血浆浓度-时间曲线的曲线下面积(AUC)(Rowland,M和Tozer TN:Clinical Pharmacokinetics:Conceptsand Applications,第3版,1995Williams Wilkins)。

在新的药物化合物的评估中，终末半衰期和/或清除率的估算与药物开发中给药方案和重要参数的评估相关。

方法9：鉴定“吸收体”用于犬研究

已知在比格犬的血液/血浆样品中可检测的酰化胰岛素的口服暴露随犬的不同而不同。如果犬不显示暴露，即，如果在施用口服胰岛素之后在血液/血浆样品中没有可检测到的胰岛素，则该犬为“非吸收体”。然而，当犬显示暴露，即，在血液/血浆样品中识别到酰化胰岛素的可检测值时，则该犬为“吸收体”。

对于生物利用度研究，“非吸收体”不被排除在外。

方法10：测试食物相互作用

通过连续口服施用本发明的药物组合物和食物来研究食物相互作用的测试。设置如下：根据描述的方法口服给予本发明的组合物。在预定的间隔之后，向犬给予食物并根据上述方法8测量生物利用度和药代动力学。

方法11：制备根据本发明的未包覆的小片芯

通过直接压缩表1a、表1b和表1c中列出的粉末混合物之一来制备根据本发明的小片芯。

制剂1A

组分	wt％
		酰化胰岛素	1.68
癸酸钠	77.46
		山梨醇	20.36
硬脂酸	0.5

表1a：小片芯的粉末掺合物组成

制剂1B

组分	wt％
		酰化胰岛素	2.02
癸酸钠	77.46
		山梨醇	20.01
硬脂酸	0.5

表1b：小片芯的粉末掺合物组成

制剂1C

组分	wt％
		酰化胰岛素A	0.82
酰化胰岛素B	0.83
		癸酸钠	77.46
山梨醇	20.39
		硬脂酸	0.5

表1c：小片芯的粉末掺合物组成

根据以下步骤制备小片芯(即，各重3.6mg的片芯)：

粉末掺混：将酰化胰岛素类似物和山梨醇分别通过0.25mm和0.5mm网筛进行筛分。筛分后，将全部量的酰化胰岛素类似物和等量的山梨醇在防静电容器中手动混合。通过逐步添加将剩余量的稀释剂(山梨醇)添加到先前的粉末掺合物中。在Turbula中以32rpm进行7min的最终机械混合。

随后通过逐步添加将癸酸钠(微粒的形式)添加至胰岛素-山梨醇混合物中，并在Turbula混合器中掺混。

准确地称量通过0.25mm筛孔尺寸的筛子进行筛分的硬脂酸并将其添加至先前的粉末混合物中。

压片：使用装配有1.5mm(内径)冲头的旋转式压片机使用3.2-3.9KN的压缩力且在10rpm的旋转速度下进行压片。制备的小片芯具有1.5mm的直径和2.0mm至2.5mm的高度。每个小片芯的平均重量为3.6mg。

为了制备较大的小片剂，向旋转式压片机装配4mm冲头。使用3.7KN的平均压缩力且在10rpm的旋转速度下进行压片。制备的小片芯的平均高度为3.2mm且重量为35.5mg。

如果需要不同尺寸或重量/大小的小片芯，则应根据成分与选择的冲头大小和形式之间的相同比例相应地调整成分的选择。

方法12：用聚乙烯醇包衣如II(如2013年所售)包覆小片芯

通过以下步骤，使用装配有Wurster插件(于2014年出售)的流化床装置进行小片剂的包衣：

包衣溶液的制备：为了制备100g包衣溶液，将20g的II(如在2014年所售)分散在80g RO水中。使用标准磁力搅拌器搅拌该悬浮液30分钟，然后进行筛分以去除最终的结块。在包衣过程中在搅拌下保持该悬浮液。

包衣：在装配有Wurster插件(于2014年出售)的流化床装置中进行小片剂的包衣。预热流化床室，直到在该室内达到30-35℃的温度。将准确称重的量的如方法1所述制备的小片剂(20g)置于该流化床室中，升温2min或直到温度达到30℃。通过在0.9巴的雾化压力下泵送溶液通过具有0.8mm孔口的喷嘴进行喷射分层。在整个过程中在50-55℃范围内调节入口空气温度，以保持产品温度处于30-35℃。当达到8mg/cm²的包衣水平(相当于26％的重量增加)时，停止包衣。

小片剂的干燥：将小片剂在同一设备中在50℃下干燥3min。

如果包覆不同尺寸或重量/大小的小片芯，则应根据表面积调节包衣的量。

方法13：制备参考整料片芯以供与小片芯进行比较

通过直接压缩表1d中描述的粉末掺合物来制备常规的整料片芯(19*8mm)。

组分	wt％
		酰化胰岛素	1.68
癸酸钠	77.46
		山梨醇	20.36
硬脂酸	0.5

表1d：参考整料片芯的组成

根据以下步骤制备参考整料片芯：

粉末掺混：粉末掺混步骤与针对制备小片芯所述的步骤(参见方法11)相同。

压片：使用装配有19*8mm冲头的旋转式压片机使用9-11KN的压缩力且在10rpm的旋转速度下进行压片。制备的片剂具有6.3mm的平均高度和120kN的硬度。

为了举例说明如何制备中等片剂和整料片芯。如果需要较小的片剂，即，重量较小且因而具有较小尺寸的片剂，则必须将成分以成分之间相同的比例调整到较低的总重量并压缩成所需的片剂尺寸。

方法14：用聚乙烯醇包衣如II(如2013年所售)包覆参考整料片芯以供与小片芯进行比较

使用盘式包衣机(O’Hara LabCoat M，如2013年所售)经由以下步骤进行整料片剂的包覆：

包衣溶液的制备：如方法12中所述制备包衣溶液。

包覆：在盘式包衣机中进行整料片芯的包覆，该盘式包衣机具有8.5”的盘大小和具有1.0mm孔口的常规模式化空气Schlick喷嘴。使用0.5巴的雾化和模式化空气压力、38℃的入口空气温度以及130kg/小时的空气流速进行包覆。预热盘式包衣机室直到在该室内部达到30-35℃的温度。将准确称量的量的如方法3中所述制备的片剂(230g)置于盘式包衣机室中，并升温直到这些片剂的温度达到30℃。当达到8mg/cm²的包衣水平(相当于4.5％的重量增加)时，停止包衣。

小片剂的干燥：将小片剂在同一设备中在50℃下干燥10min。

如果包覆不同尺寸或重量/大小的片芯，则应根据表面积调节包衣的量。

方法15：制备含有根据本发明的小片芯或整料片芯的胶囊剂型

将准确称重的量的如方法11所述制备、未包覆或如方法12所述包覆的小片芯手动填充至胶囊(猪明胶、鱼明胶、HPMC或支链淀粉)中。根据实验，选择小片剂的量以使每个胶囊具有1600±100nmol的总胰岛素含量(相当于大约11.9mg的酰化胰岛素)并使得具有550mg或450mg的癸酸钠的量。

将如方法13所述制备、未包覆或如方法14所述包覆的整料片芯手动填充至000号明胶胶囊中。

方法16：将小片剂压缩成根据本发明的快速崩解整料片剂

将如方法11所述制备(制剂1A)且根据方法12用II悬浮液包覆至8mg/cm²的小片芯压缩成快速崩解整料片剂。将894.6mg的II包覆的小片剂(对应于710mg未包覆的片芯)与200mg微晶纤维素(Avicel PH200，如2014年所售)和114mgIsolmalt 721(如2013年所售)手动混合。使用装配有9*18mm冲头的单冲压片机(Diaf)压缩小片剂/粉末混合物。每个片剂均手动制备。

方法17：体外溶出速率的测定

溶出设置基于使用100ml的50mM磷酸盐缓冲液(pH 6.8)作为溶出介质的USP装置1(Basket Apparatus)。使用以下所述的定量方法分析样品的定量。

定量方法：使用C18反相液相色谱柱和基于TFA/CH3CN的洗脱液系统进行定量测定。相对于待测化合物的参考物质计算样品的含量。

纯度方法：为了评价化学稳定性，使用C18反相色谱柱和基于磷酸盐/CH3CN的洗脱液系统分析样品。纯度报告为面积。

实施例

除非另有说明，否则描述为II的包衣或包衣材料意指II-Yellow。

实施例1-包含具有/不具有来自的II–Yellow(如2013年所售)的整料片芯以及A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的本发明组合物的溶出速率

通过根据方法3混合表2的成分来制备整料片芯，在本专利申请的研究中犬的酰化胰岛素的剂量设为120nmol/kg。因此，所述片芯中的酰化胰岛素的绝对量根据犬的体重进行调整，该犬接受所述片剂以进行口服给药。在本实施例中，该犬体重为18kg并且胰岛素因此达到14.8mg(120nmol/kg)。根据方法6测试溶出。

一批整料片芯未进行包覆。另一批根据方法4用来自的II–Yellow(如2013年所售)进行包覆。

表2显示了根据本发明的组合物，其包含在整料片芯中的14.8mg A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素，该整料片芯包含癸酸钠并用来自的II–Yellow包衣(如2013年所售)包覆。未包覆的整料片芯的重量经测量为710.1mg，Opadry包覆的片芯，即，制成的整料片剂的重量经测量为742.1mg。

表2

结果在图1中给出，图1显示未包覆和II包覆的片剂的溶出曲线非常相似，然而包覆的片剂相对于未包覆的片剂具有轻微降低的溶出速率。

实施例2-在II的底衣之上采用来自的II-Yellow(如2013年所售)(本发明的实施方案)或来自的93O(如2013年所售)包覆的本发明整料片芯中A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度和Tmax

通过混合根据表1(实施例1)的成分，根据方法3制备该实施例的整料片芯。所有片芯均采用4.5％(w/w)的来自的II–Yellow(如2013年所售)根据方法4进行包覆，并且得到的组合物将在本实施例中被命名为“片剂”。一批没有进行进一步包覆，而另一批根据方法5采用9％(w/w)的来自的93O包衣(如2013年所售)在来自的II–Yellow包衣(如2013年所售)之上进一步包覆。

根据方法6从比格犬中抽取用于测定生物利用度的样品。

图2A显示了具有来自的II–Yellow(如2013年所售)的根据表2的片剂中的A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度；n＝47(方格图案)，与具有来自的93O包衣(如2013年所售)的片芯中的相同胰岛素进行比较；n＝24(虚线)。

图2B显示了具有来自的II–Yellow(如2013年所售)的根据表2的片芯中的A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的Tmax；n＝47(方格图案)，与具有来自的93O包衣(如2013年所售)的片芯中的相同胰岛素进行比较；n＝24(虚线)。

结果表明，相对于具有来自的93O包衣(如2013年所售)的片芯，具有来自的II–Yellow(如2013年所售)的片芯中的A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度增加且Tmax减小。统计比较基于log(F)和log(Tmax)。

实施例3-关于在本发明整料片剂中的A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的食物相互作用和生物利用度

根据本发明的整料片芯根据表3和方法3进行制备并根据方法4进行包覆，并且得到的组合物将在本实施例中被命名为“片剂”。将片剂施用于比格犬，并如方法6所述采集样品。根据方法10测试食物相互作用。

结果示于以下表3中。食物摄取与所述片剂的施用之间的时间越短，观察到食物摄取对A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度(F％)的影响越大，但不像对该制剂的Tmax一样显著。

表3

实施例4-关于在用来自的II–Yellow(如2013年所售)包覆的本发明整料片芯中的A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度的0-12周实时稳定性研究

具有表2(实施例1)的组成的整料片剂(即，包覆的整料片芯)根据方法3来制备并根据方法4采用来自的II–Yellow(如2013年所售)进行包覆。针对体内性能稳定性对包覆的片剂进行评估。因此，制备并包覆片剂，将片剂包装在具有干燥剂的duma容器中，在5℃下储存并施用于比格犬。如方法7所述采集样品。

在表3中列出了该测试的时间点，即0、3、6、9和12周。

表4

图3显示了在用来自的II–Yellow(如2013年所售)作为在来自Evonik Industries的FS30D包衣(如2013年所售)下方的底衣的片芯中，如上测试的相同胰岛素的PK谱，正方形显示了在时间0时测试的片剂的PK谱，而圆形显示了在5℃下储存14周之后测试的片剂的PK谱。平均值±SEM；n＝8。该图中的PK谱显示在这类组合物储存后生物利用度减小。表4显示了在来自的II–Yellow(如2013年所售)包覆的整料片芯中的相同胰岛素的生物利用度。

比较图3和表4中显示的结果，显然相对于也包含肠溶衣的组合物，在根据本发明的组合物中生物利用度出乎意料地稳定。

实施例5-在本发明整料片芯中的γGlu-OEG-OEG-γGlu酰化胰岛素的生物利用度

根据本发明的整料片剂(即，包覆的整料片芯)根据表2(实施例1)和方法3进行制备并根据方法4进行包覆。将片剂施用于8只比格犬并如方法7所述采集样品。结果示于表5中。

表5表明了在本发明药物组合物中使用稳定化的胰岛素，例如蛋白酶稳定化的胰岛素的重要性。

实施例6-具有肠溶衣的包含A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的整料片芯的生物利用度

包含A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的整料片芯根据方法3进行制备，并根据方法4用II–Yellow(当施加底衣时)以及根据方法5用FS30D联合进行包覆，或单独根据方法5进行包覆(当未在所述FS30D包衣下方施加底衣时)。

在时间0时(即，在完成片剂制备之后不久)和在完成制备之后在5℃下储存12至14周之后测试生物利用度。

结果在表6中给出。

根据方法8中的体内实验的方法描述评估生物利用度。

将犬在测试之前禁食过夜(没有食物，仅自来水)。在实验前一天，将犬称重并将犬带出数小时。

在实验当天，将犬置于测试椅上，并将Venflon 20G置于头静脉中。从导管采集血液样品。在给药后6小时取出venflon并将犬送回其空间，并提供了室外奔跑方式的运动。此后，将犬领入测试室以从颈静脉(或头静脉)进行血液采样。

经口施用。在以下时间点采集血液样品以供血糖和胰岛素分析：0、15、30、45、60、75、90、105、120、135、150、165、180、210、240、270、300、360、480、600、720、1440、1800、2880和4320分钟。

在t＝0min抽样之后即时施用片剂。将片剂置于口腔后部，以使犬在不咀嚼的情况下吞咽片剂。在犬吞咽片剂之后，通过注射器向口中施用10ml水。

血液采样：在采样之前，在纸巾上收集前几滴血液。将大约800μl血液收集在1.5mlEDTA Eppendorf管中以供制备血浆，并在10μL毛细管中装入全血以以供血糖分析。将EDTA血液样品在4000x g(4℃)下离心4min。将所有样品保持在湿冰上直到分析，或在-80℃下储存直到分析。在每次采样之后，用0.5ml肝素(10IU)冲洗Venflon。雄性比格犬大约重12kg至18kg。通过夹心免疫测定或液相色谱-质谱法(LC-MS)分析血浆样品。使用WinNonlinProfessional 5.2(Pharsight Inc.,Mountain View,CA,USA)通过非房室药代动力学分析来分析血浆浓度-时间曲线。

表6

实施例7-A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素从含有未包覆整料片芯或未包覆小片芯的胶囊中的体外溶出速率。

分别如方法11和方法13所述制备小片芯和整料片芯，并根据方法15将其填充至000号猪明胶胶囊中。多颗粒和整料胶囊制剂的详细组成列于表7中。

表7：含有未包覆的小片剂或整料片芯的000号猪明胶胶囊的组成(*每个小片芯的平均重量为3.6mg)

根据方法16测定表7中描述的胶囊制剂的体外溶出速率。曲线示于图4中，其显示了A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素(三角形)和癸酸钠(圆形)从填充有小片剂(黑线)和整料片芯(灰线)的000号猪明胶胶囊中的体外溶出速率。数据报告为平均值(n＝3)±SD。

在体外，未包覆的小片剂的溶出速率被确定为比猪明胶胶囊中等价的整料片芯的溶出速率高>3倍。

实施例8-在口服施用含有未包覆的小片芯或整料片芯的猪明胶胶囊之后，A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度和T_max。

对雄性比格犬给予实施例7中描述的含有未包覆的小片剂或整料片芯的000号猪明胶胶囊。根据方法8和方法9测定口服生物利用度、Tmax和非吸收体的数目。结果示于表8中。

表8在口服施用含有未包覆的小片芯或整料片芯的000号猪明胶胶囊之后的平均生物利用度(F)、中值T_max和非吸收体的数目。

在口服施用含有整料和小片剂的胶囊之后，A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度和变化没有显著不同。小片剂的Tmax短于等价的整料制剂的Tmax。

实施例9-在口服施用含有未包覆的小片剂的胶囊之后，关于A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的食物相互作用和生物利用度。

在药物-食物相互作用研究中，根据方法10对如实施例7和实施例8所述的含有未包覆的小片芯的猪明胶胶囊进行测试。将结果与对Opadry-II包覆的整料片芯进行的类似食物相互作用研究的结果(参见实施例3)进行比较。结果总结在表9中。

表9：在口服施用Opadry-II包覆的整料片芯或含有未包覆小片芯的猪明胶胶囊之后的平均生物利用度(F)、中值T_max。在给药后360min、60min、30min或15min之后给犬喂食。

与在禁食状态(360min)下给药相比，当整料片芯在喂食之前60min、30min和15min施用时，测得酰化胰岛素生物利用度等于33％、63％和72％的降低。出乎意料地，当在喂食前最长30min给予小片剂制剂时未观察到生物利用度的降低。仅当在给药后15min给犬喂食时，测得等于55％的酰化胰岛素生物利用度的降低。已证实，与具有相同胰岛素和癸酸钠含量的整料剂型相比，未包覆的小片剂制剂缓和了药物-食物相互作用。

实施例10-A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素从含有Opadry-II包覆的整料或小片芯的猪明胶胶囊中的体外溶出速率。

如方法11所述制备小片芯(制剂1A)，并根据方法12用Opadry-II悬浮液对其进行包覆，直到8mg/cm²的包覆水平(对应于26％的重量增加)。如方法13所述制备整料片剂，并如方法14中所述用Opadry-II yellow悬浮液对其进行包覆，直到8mg/cm²的包覆水平(对应于4.5％的重量增加)。

如方法15所述，将Opadry-II包覆的小片芯和Opadry-II包覆的整料片芯填充至000号猪明胶胶囊中。测试的制剂的详细组成列于表10中。

表10：填充有Opadry-II包覆的小片芯或Opadry-II包覆的整料片芯的000号猪明胶胶囊的组成。

根据方法17对Opadry-II包覆的整料片芯和Opadry-II包覆的小片剂制剂的体外溶出速率进行测试。曲线示于图5中，其显示了A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素(三角形)和癸酸钠(圆形)从含有Opadry-II包覆的小片剂(黑线)和整料片芯(深灰线)的000号猪明胶胶囊中的体外溶出速率。数据报告为平均值(n＝3)±SD。

从Opadry-II包覆的小片剂的溶出速率稍慢于等价的未包覆的制剂(实施例7)。然而，猪明胶胶囊中Opadry-II包覆的小片剂的溶出速率比猪明胶胶囊中等价的整料片芯的溶出速率高>2倍。

实施例11-口服施用含有Opadry-II包覆的小片剂和Opadry-II包覆的整料片芯的猪明胶胶囊后，A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度和T_max。

将实施例10中所述的含有Opadry-II包覆的小片剂或整料片芯的000号猪明胶胶囊给药至雄性比格犬。根据方法8和方法9确定口服生物利用度、Tmax和非吸收体的数目。结果在表11中示出。

表11：口服施用含有Opadry-II包覆的小片剂或Opadry-II包覆的整料片芯的000号猪明胶胶囊后的平均生物利用度(F)、中值T_max和非吸收体的数目。

经测定，口服施用含有Opadry-II包覆的小片剂的胶囊后，A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度显著高于等价整料制剂的生物利用度。

实施例12-A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素和癸酸钠从压缩成快速崩解整料片剂的Opadry-II包覆的小片芯中的体外溶出速率。

如方法11所述制备小片芯(制剂1A)，并如方法12所述用Opadry-II Yellow将其包覆直至8mg/cm²的包覆水平。如方法16所述将包覆的小片芯压缩成快速崩解整料片剂。制剂的详细描述在表12中列出。

表12：含有Opadry-II包覆的小片芯的快速崩解整料片剂的组成。

如方法17所述测试的压缩的小片剂的体外溶出速率在图6中示出，图6示出了A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素(三角形)和癸酸钠(圆形)从压缩成整料片剂的Opadry-II包覆的小片剂中的体外溶出速率。数据报告为平均值(n＝3)±SD。

经测定，相比于等价的胶囊制剂，压缩成快速崩解整料片剂的小片芯的酰化胰岛素和癸酸钠的溶出发生更快。(参见实施例10，图2)。

实施例13-口服施用压缩成快速崩解整料片剂的Opadry-II包覆的小片芯后，A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度和T_max。

将实施例12中所述的由Opadry-II包覆的小片芯组成的快速崩解整料片剂给药至雄性比格犬。根据方法7和方法8确定口服生物利用度、Tmax和非吸收体的数目。结果在表13中示出。

表13：口服施用由Opadry-II包覆的小片芯组成的快速崩解整料片剂后的平均生物利用度(F)、中值T_max和非吸收体的数目。

令人惊讶地，口服施用压缩成快速崩解整料片剂的Opadry-II包覆的小片剂后，经测定，A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度比在猪明胶胶囊中递送的等价片芯的生物利用度高大约33％(参见表11，实施例11)。压缩的小片剂的Tmax也高于封装的小片剂的Tmax。

实施例14-A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素从不同胶囊材料中的未包覆小片芯的体外溶出速率。

如方法11所述制备小片芯(制剂1B)，并如方法15所述将其填充至00号胶囊中。研究了不同的胶囊材料，即，猪明胶(Licaps，如2014年所售)、鱼明胶(EMBO CAPS，如2014年所售)、HPMC(Vcaps plus，如2014年所售)和支链淀粉(Plantcaps，如2014年所售)。不同胶囊制剂的详细描述在表14中列出。

表14：含有未包覆小片芯的00号胶囊的组成。

图7示出了A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素从没有胶囊(黑色虚线，三角形)或填充至00号胶囊——猪明胶(黑线，圆形)、HPMC(灰色虚线，三角形)、支链淀粉(灰线，正方形)和鱼明胶(黑线，正方形)中的未包覆小片剂的体外溶出速率。数据报告为平均值(n＝3)±SD。图7显示，没有观察到填充在猪明胶胶囊中的小片剂与在没有胶囊的情况下测试的小片剂之间酰化胰岛素溶出速率的显著区别。鱼明胶胶囊的性能与猪明胶胶囊的性能相似。

对于HPMC胶囊，观察到更长的滞后时间和持续释放曲线。对于填充在支链淀粉胶囊中的小片剂，也观察到胰岛素类似物的延迟释放。

总体上，酰化胰岛素从填充在不同胶囊材料中的微芯片剂的溶出速率如下：

猪明胶>鱼明胶>支链淀粉>HPMC

所测试的全部胶囊均适用于开发基于小片芯的多颗粒制剂。

实施例15-口服施用填充在不同胶囊材料中的未包覆小片芯后，A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度和T_max。

在雄性比格犬中测试如实施例14中所述的含有未包覆小片剂的不同胶囊制剂。根据方法7和方法8确定口服生物利用度、Tmax和非吸收体的数目。结果在表15中示出。

表15：口服施用填充有未包覆小片芯的不同胶囊后的平均生物利用度(F)、中值T_max和非吸收体的数目。

经测定，口服施用填充有含有450mg癸酸钠的未包覆小片剂的00号猪明胶胶囊后，A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度比含有550mg增强剂的未包覆片芯的生物利用度(表，实施例2)低大约43％(没有显著不同)。对于鱼明胶胶囊，确定有相似的生物利用度和变化。另一方面，对于支链淀粉和HPMC胶囊制剂，确定有更高的生物利用度(不显著)。对于HPMC胶囊，观察到更长的Tmax，这与在体内观察到的更长的滞后时间(实施例14)一致。

实施例16-A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素、A14E,B25H,desB27,B29K(N-(eps)-(十八烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素和癸酸钠从含有未包覆小片芯的猪明胶胶囊中的体外溶出速率。

如方法11所述制备小片芯(制剂1C)，并如方法15所述将其填充至000号胶囊中。不同胶囊制剂的详细描述在表16中列出。

表16：含有未包覆小片芯的000号猪明胶胶囊的组成。

根据方法17测试了含有未包覆小片芯的胶囊的体外溶出速率。曲线在表8中示出，其示出了以下物质从填充在000号猪明胶胶囊中的未包覆小片剂的体外溶出速率：1)酰化胰岛素A(A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素)(黑线，三角形)；2)酰化胰岛素B(A14E,B25H,desB27,B29K(N-(eps)-(十八烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素)(黑线，正方形)；和3)癸酸钠(灰线，圆形)。数据报告为平均值(n＝3)±SD。

实施例17-来自含有未包覆小片芯的猪明胶胶囊的A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素和A14E,B25H,desB27,B29K(N-(eps)-(十八烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素的生物利用度和T_max。

在雄性比格犬中测试了实施例16中所述的小片芯。根据方法7和方法8测定口服生物利用度、Tmax和非吸收体的数目。结果在表17中示出。

表17：口服施用含有未包覆小片芯的000号胶囊后的平均生物利用度(F)、中值T_max和非吸收体的数目。

实施例18-A14E,B16H,B25H,B29K(N-(eps)-(二十烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素和癸酸钠从含有未包覆小片芯的猪明胶胶囊中的体外溶出速率。

如方法11所述制备小片芯(制剂1A)，并如方法15所述将其填充至000号胶囊中。胶囊制剂的详细描述在表18中列出。

表18：含有未包覆小片芯的000号胶囊的组成。

根据方法17测试了含有未包覆小片芯的胶囊的体外溶出速率。曲线在图9中示出，其示出了A14E,B16H,B25H,B29K(N-(eps)-(二十烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素(三角形)和癸酸钠(圆形)从含有未包覆小片芯的000号猪明胶胶囊中的体外溶出速率。数据报告为平均值(n＝3)±SD。

实施例19-A14E,B25H,desB27,B29K(N-(eps)-(十八烷二酰基-gGlu),desB30人胰岛素和癸酸钠从含有未包覆小片芯的猪明胶胶囊中的体外溶出速率。

如方法11所述制备小片芯(制剂1A)，并如方法15所述将其填充至000号胶囊中。胶囊制剂的详细描述在表19中列出。

表19：含有未包覆小片芯的000号胶囊的组成。

根据方法17测试了含有未包覆小片芯的胶囊的体外溶出速率。曲线在图10中示出，其示出了A14E,B25H,desB27,B29K(N-(eps)-(十八烷二酰基-gGlu),desB30人胰岛素(三角形)和癸酸钠(圆形)从含有未包覆小片剂的000号猪明胶胶囊中的体外溶出速率。数据报告为平均值(n＝3)±SD。

实施例20-A14E,B25H,desB27,B29K(N-(eps)-(十八烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素和癸酸钠从含有4.0mm未包覆小片芯的猪明胶胶囊中的体外溶出速率。

如方法11所述制备4.0mm小片芯(制剂1A)，并如方法15所述将其填充至000号胶囊中。胶囊制剂的详细描述在表20中列出。

表20：含有未包覆的4.0小片芯的000号胶囊的组成。

根据方法17测试了含有未包覆小片剂的胶囊的体外溶出速率。曲线在图11中示出，其示出了A14E,B25H,desB27,B29K(N-(eps)-(十八烷二酰基-gGlu-2xOEG),desB30人胰岛素(三角形，黑线)和癸酸钠(正方形，灰线)从含有4.0mm未包覆小片剂的000号猪明胶胶囊中的体外溶出速率。数据报告为平均值(n＝3)±SD。

实施例21-在明胶胶囊中的六个根据本发明的片芯形式的A14E,B25H,B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG),desB30人胰岛素的生物利用度和Tmax(本发明的实施方案)。

根据方法3，通过混合根据表1(实施例1)的各成分来制备本实施例的片芯。然后将单独的片剂压缩成各重118mg的中等片剂。将未包覆形式的六个片剂置于硬明胶胶囊中。

将胶囊中的片剂施用于16只比格犬，并如方法6所述采集样品。结果在表21中示出。

表21

Claims

1.药物组合物，其包含一个或多个片芯以及可选的聚乙烯醇包衣，其中所述一个或多个片芯包含中链脂肪酸的盐和酰化胰岛素，其中所述酰化胰岛素包含一个或多个额外的二硫桥，或者

其中所述酰化胰岛素为包含连接体和具有14-22个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸侧链的蛋白酶稳定化的胰岛素，并且任选地包含一个或多个额外的二硫键。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣在任意pH下均溶解于水性介质。

3.根据前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣为包含聚乙烯醇的来自的(如2013年所售)。

4.根据前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其中所述中链脂肪酸的盐为癸酸盐。

5.根据前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其中所述片芯进一步包含山梨醇、硬脂酸和胰岛素，并任选地进一步包含药学上可接受的赋形剂。

6.根据前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其中所述片芯包含约50-85％(w/w)的癸酸钠。

7.根据前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其中所述聚乙烯醇包衣以相对于所述片芯约0-10％(w/w)的量存在。

8.根据前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其中所述癸酸盐为癸酸钠。

9.根据前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素包含具有18或20个碳原子的脂肪酸或脂肪二酸侧链。

10.根据前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其中所述酰化胰岛素选自：

A14E，B25H，B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A14E，B16H，B25H，B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A14E，B16H，B25H，B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A14E，B25H，desB27，B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A14E，B16H，B25H，B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu)，desB30人胰岛素，

A14E，B25H，desB27，B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu)，desB30人胰岛素，

A14E，B25H，desB27，B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu)，desB30人胰岛素，以及

A14E，B25H，desB27，B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A10C，A14E，B4C，B25H，B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A10C，A14E，B3C，B25H，B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu)，desB30人胰岛素，

A10C，A14E，B4C，B25H，desB27，B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu)，desB30人胰岛素，

A10C，A14E，B3C，B16H，B25H，B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A10C，A14E，B3C，B25H，desB27，B29K(N(eps)十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A10C，A14E，B3C，B25H，desB27，B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A10C，A14E，B3C，B16H，B25H，B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A10C，A14E，B4C，B16H，B25H B29K(N^ε十八烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，

A10C，A14E，B4C，B16H B25H，B29K(N^ε二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素，以及

A10C，A14E，B4C，B25H，desB27，B29K(N(eps)二十烷二酰基-γGlu-OEG-OEG)，desB30人胰岛素。

11.根据前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其为包含一个或多个片芯的片剂或胶囊的形式。

12.根据前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其中所述片芯重约1.5-50mg、约100-600mg、约600-900mg或约600-1300mg。

13.根据前述权利要求中任一项所述的药物组合物，其用作药物。

14.根据前述权利要求所述的药物组合物，其用于治疗糖尿病。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的药物组合物的制备方法，其包括制备片芯和将所述聚乙烯醇包衣包覆在所述片芯的所述外表面上的步骤。