CN106359455A

CN106359455A - 一种淡紫拟青霉可湿性粉剂及制备方法

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Publication number: CN106359455A
Application number: CN201610763261.8A
Authority: CN
Inventors: 吴俊杰; 李肖宇; 石峥; 曾升华; 石仕福; 梁小文; 罗建辉; 李英武; 罗双燕; 王根豪; 严艺波
Original assignee: JIANGXI TIANREN ECOLOGY CO Ltd
Current assignee: JIANGXI TIANREN ECOLOGY CO Ltd
Priority date: 2016-08-29
Filing date: 2016-08-29
Publication date: 2017-02-01

Abstract

本发明提供了一种淡紫拟青霉可湿性粉剂，包括以下重量份数的组分：药物活性组分2～10份，所述的药物活性组分为淡紫拟青霉；助剂5.4～9.5份；载体78.5～94.6份。在本发明中，淡紫拟青霉可湿性粉剂高效、低毒，杀虫效果稳定，且对人畜和作物安全，安全性高。实验结果表明，淡紫拟青霉可湿性粉剂防治虫害的效果最高可达81％以上。

Description

一种淡紫拟青霉可湿性粉剂及制备方法

技术领域

本发明涉及农药技术领域，具体涉及到一种淡紫拟青霉可湿性粉剂及制备方法。

背景技术

中国是农业大国，数千年来一直以种植业为主，农业是人类的衣食之源、生存之本，是其它部门得以独立和发展的基础，是国民经济的基础，因此农业的发展将直接影响着国民经济的发展。但是在农业生产中，虫害的发生往往会严重影响农作物生长，使农作物从生理机能到组织结构发生了一系列的变化和破坏，进而导致农作物大量减产，给种植者带来了巨大的经济损失。因此对农作物虫害的有效防治是刻不容缓的，以保证粮食安全和种植者的经济利益。

目前农作物虫害的种类有很多种，其中线虫可侵袭和寄生植物，被侵袭和寄生的植物因线虫吸收体内营养而影响正常的生长发育，并且线虫代谢的分泌物会刺激寄主植物的细胞和组织，导致植株畸形。大多数植物线虫侵害植物的地下部分，如根、块茎等，根部可表现为结瘤、坏死、根短粗和丛生，导致农作物大量减产或质量严重下降。常见的植物线虫病有根结线虫病、大豆胞囊线虫病、小麦粒线虫病、甘薯茎线虫病、水稻干尖线虫病、柑橘半穿刺线虫病等。

现有技术中，常常选用抗病品种或化学杀虫剂来防治害虫病害。采用化学杀虫剂进行防治时，防治效果虽然理想，但是化学杀虫剂具有难降解，容易破坏生态系统的平衡，对人畜危害较大。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于针对现有技术的不足，而提供一种淡紫拟青霉可湿性粉剂及其制备方法。

本发明提供了一种淡紫拟青霉可湿性粉剂，包括以下重量份数的组分：

药物活性组分2～10份，所述药物活性组分为淡紫拟青霉；

助剂5.4～9.5份；

载体78.5～94.6份。

优选的，所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的有效孢子量为0.4～2.0×10⁹cfu/g。

优选的，所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂的杂菌率≤0.1％。

优选的，所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的悬浮率≥80％。

优选的，所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的淡紫拟青霉的活孢率≥90％。

优选的，所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的润湿时间≤120s。

优选的，所述助剂包括脂肪醇与环氧乙烷缩合物、萘磺酸盐缩聚物、润湿剂EFW、异辛基琥珀酸钠、亚甲基二萘磺酸钠和十二烷基硫酸钠中的一种或几种。

优选的，所述载体包括白炭黑、膨润土、硫酸钠、陶土、煅烧硅藻土和煅烧高岭土中的一种或几种。

本发明提供了上述技术方案的淡紫拟青霉可湿性粉剂的制备方法，包括以下步骤：

1)将载体、药物活性组分和助剂混合，得到混合料；

2)将所述步骤1)得到的混合料进行粉碎，得到淡紫拟青霉可湿性粉剂。

进一步，所述淡紫拟青霉可湿性粉剂在防治农作物虫害方面的应用。

生物保藏说明

淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)，于2013年8月13日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，生物保藏编号为CGMCCNo.7994。

具体实施方式

本发明提供了一种淡紫拟青霉可湿性粉剂，包括以下重量份数的组分：药物活性组分2～10份，所述药物活性组分为淡紫拟青霉；助剂5.4～9.5份；载体78.5～94.6份。

本发明提供的淡紫拟青霉可湿性粉剂优选包括2～10份的淡紫拟青霉，更优选为3～8份，最优选为5份。

在本发明中，所述淡紫拟青霉优选为选自生物保藏编号为CGMCC No.7994的菌种活化培养得到。

在本发明中，所述淡紫拟青霉的制备方法优选包括以下步骤：

1)将淡紫拟青霉菌种活化；

2)将所述活化后的淡紫拟青霉接种于淡紫色拟青霉液体培养基中进行液体培养，培养55～75h停止培养，得到淡紫拟青霉培养液；

3)将所述步骤2)得到的淡紫拟青霉培养液液接种于淡紫拟青霉固体培养基中，进行固体培养，得到淡紫拟青霉。

在本发明中，所述淡紫拟青霉菌种的活化优选为将保藏的淡紫拟青霉菌种接种于装有营养琼脂培养基的茄型瓶中，25～30℃培养10～14h进行活化培养。

所述活化培养后，本发明将所述活化后的淡紫拟青霉接种于淡紫色拟青霉液体培养基中进行液体培养。在本发明中，所述淡紫拟青霉液体培养的接种量优选为10～30％，更优选为15～25％，最优选为20％。

在本发明中，所述淡紫拟青霉培养液接种于固体培养基的接种量优选为10～30％，更优选为15～25％，最优选为20％。

在本发明中，所述淡紫拟青霉液体培养基优选包括以下组分：蔗糖20～40g/L，黄豆粉1.0～10g/L，硝酸铵1.0～2.0g/L，磷酸氢二钠1.5～3.0g/L，硫酸镁0.15～0.32g/L，氯化钾0.1～1.0g/L，硫酸铁0.01～0.10g/L；更优选为蔗糖25～35g/L，黄豆粉3.0～7g/L，硝酸铵1.3～1.7g/L，磷酸氢二钠1.8～2.4g/L，硫酸镁0.20～0.28g/L，氯化钾0.3～0.7g/L，硫酸铁0.03～0.07g/L；最优选为蔗糖30g/L，黄豆粉5g/L，硝酸铵1.5g/L，磷酸氢二钠2.06g/L，硫酸镁0.24g/L，氯化钾0.5g/L，硫酸铁0.05g/L。本发明对上述组分的来源没有特殊限定，采用本领域技术人员常规配制培养基的药品即可。

在本发明中，所述淡紫拟青霉液体培养基优选经120～130℃灭菌30～45min后使用。在本发明中，所述灭菌温度更优选为125℃；所述灭菌时间更优选为40min。本发明对培养基的灭菌设备没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的灭菌设备即可，如高压蒸汽灭菌锅。

本发明对所述液体培养的设备没有特殊的限定，采用本技术领域熟知的发酵设备即可，如发酵罐。

在本发明中，所述淡紫拟青霉液体培养的温度优选为25～30℃，更优选的为26～29℃，最优选为28℃；所述淡紫拟青霉液体培养发酵的pH值优选为6.6～7.2，更优选的为6.8～7.0，最优选为6.9；所述淡紫拟青霉液体培养的环境压力优选为0.05～0.1MPa，更优选的为0.07～0.08MpPa；本发明在所述淡紫拟青霉液体培养中进行通气，所述通气量优选为0.8～1.2V/V·min，更优选的为1V/V·min；所述淡紫拟青霉液体发酵的时间优选为55～75h，更优选为60～70h，更优选为65h。

得到淡紫拟青霉培养液后，本发明将得到的淡紫拟青霉培养液接种于固体培养基中，进行固体培养，得到淡紫拟青霉。在本发明中，所述固体培养的接种量优选为10～30％，更优选为15～25％，最优选为20％。

在本发明中，所述淡紫拟青霉固体培养基优选包括以下重量份的组分：麦麸60～100份，玉米粉5～15份，谷壳5～15份；更优选为麦麸70～90份，玉米粉7～12份，谷壳7～12份；最优选为麦麸80份，玉米粉10份，谷壳10份。本发明优选在所述淡紫拟青霉固体培养基中添加蒸馏水，使固体培养基含水量优选为45％～55％，更优选为47％～52％，最优选为50％，然后进行固体发酵。本发明对上述组分的来源没有特殊限定，采用本领域技术人员常规配制培养基的药品即可。

在本发明中，所述淡紫拟青霉固体培养的温度优选为24～30℃，更优选的为26～29℃，最优选为28℃；所述淡紫拟青霉固体培养的时间优选为5～10d，更优选为6～9d，最优选为7d；所述淡紫拟青霉固体培养的湿度前三天优选为60％～90％，剩余时间优选为10％～40％；更优选为70％～85％，15％～35％；最优选为80％，30％。

本发明对所述玫烟色拟青霉固体培养基的厚度优选为3～8cm，更优选为5～7cm，最优选为6cm。

完成所述淡紫拟青霉固体培养后，本发明优选将得到固体培养后的培养基烘干、粉碎和过筛，得到固体粉状淡紫拟青霉。在本发明中，所述烘干的温度优选为30～50℃，更优选为35～45℃，最优选为40℃；所述烘干的时间优选为20～45h，更优选为30～40h，最优选为35h。本发明将固体发酵培养基烘干至水分含量优选在25～35％之间，更优选为27～32％，最优选为30％。本发明对所述固体培养后的培养基粉碎的方法没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的粉碎方法即可。在本发明中，所述淡紫拟青霉过筛优选采用80～100目，更优选为85～95目，最优选为90目。

在本发明中，所述固体培养得到的淡紫拟青霉的有效孢子量为2.0×10¹⁰cfu/g以上。

本发明提供的淡紫拟青霉可湿性粉剂优选包括5.4～9.5份助剂，更优选为5.7～8.2份，最优选为7份。本发明对所述助剂的种类和来源没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的农用可湿性粉剂的助剂的市售商品即可。助剂的种类具体的可优选为脂肪醇与环氧乙烷缩合物、萘磺酸盐缩聚物、润湿剂EFW、异辛基琥珀酸钠、亚甲基二萘磺酸钠和十二烷基硫酸钠中的一种或几种更优选为脂肪醇与环氧乙烷缩合物、亚甲基二萘磺酸钠和十二烷基硫酸钠，最优选为异辛基琥珀酸钠、萘磺酸盐缩聚物和润湿剂EFW。当所述助剂为脂肪醇与环氧乙烷缩合物、亚甲基二萘磺酸钠和十二烷基硫酸钠时，所述脂肪醇与环氧乙烷缩合物、亚甲基二萘磺酸钠和十二烷基硫酸钠的重量分数比优选为(3.0～5.0)：(2.0～3.0)：(0.4～1.5)，更优选为(3.4～4.5)：(1.5～2.5)：(0.8～1.2)，最优选为4：2：1。当所述助剂为异辛基琥珀酸钠、萘磺酸盐缩聚物和润湿剂EFW时，所述异辛基琥珀酸钠、萘磺酸盐缩聚物和润湿剂EFW的重量份数比优选为(3.0～5.0)：(2.0～3.0)：(0.4～1.5)，更优选为(3.4～4.5)：(1.5～2.5)：(0.8～1.2)，最优选为4：2：1。在本发明中，所述润湿剂EFW为烷基萘磺酸盐和阴离子润湿剂混合物，本发明对所述润湿剂EFW的来源没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的市售商品即可。在本发明中，所述助剂使药物性状稳定，提高药效。

本发明提供的淡紫拟青霉可湿性粉剂优选包括78.5～94.6份载体，更优选为82.8～92.3份，最优选为88份。在本发明中，所述载体优选为白炭黑、膨润土、硫酸钠、陶土、煅烧硅藻土和煅烧高岭土中的一种或几种。本发明对所述载体的来源没有特殊的限定，采用市售商品即可。在本发明中，所述载体具体的可优选为上述物质中的任意几种，可任意比例混合。在本发明中，所述载体具体的更优选为上述物质中的白炭黑和煅烧硅藻土，具体的可优选为2.0～4.0份白炭黑和76.5～90.6份煅烧硅藻土，更优选为2.5～3.5份白炭黑和80.3～88.8份煅烧硅藻土，最优选为3份白炭黑和85份煅烧硅藻土；最优选为上述物质中的白炭黑和煅烧高岭土，具体的可优选为2.0～4.0份白炭黑和76.5～90.6份煅烧高岭土，更优选为2.5～3.5份白炭黑和80.3～88.8份煅烧高岭土，最优选为3份白炭黑和85份高岭土。本发明所述载体具有良好的药物稳定性，亦可提高药物的药效。

本发明提供了上述技术方案所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的制备方法，包括以下步骤：

1)将载体、药物活性组分和助剂混合，得到混合料；

在本发明中，所述载体、药物活性组分和助剂的混合优选为将载体、药物活性组分和助剂分别平均分成3～5份，更优选为4份，将第1份载体与第1份药物活性组分混合后，再与第1份助剂混合，然后再与第2份载体混合，再与第2份药物活性组分混合，再与第2份助剂混合，以此类推，直到添加完所有的原料，再继续优选混合20～40min，更优选为25～35min，最优选为30min。本发明对所述混合的设备没有特殊的限制，采用本领域技术人员熟知的混合设备即可，比如混合灌。

在本发明中，对所述粉料的粒度优选为10～45μm，更优选为20～35μm，最优选为25～30μm。本发明对所述粉碎的条件没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的粉碎条件即可。在本发明中，所述粉碎具体的可优选为气流式粉碎，气流式粉碎的轴密封压力优选为0.05～0.20MPa，更优选为0.1～0.15MPa，最优选为0.13MPa；气流式粉碎的出料气封压力优选为0.1～0.2MPa，更优选为0.15MPa；气流式粉碎的脉冲压力优选为0.3～0.7MPa，更优选为0.4～0.6MPa，最优选为0.5MPa；气流式的进料压力优选为0.7～0.9MPa，更优选为0.75～0.85MPa，最优选为0.8MPa。本发明对所述粉碎的设备没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的粉碎设备即可。

在本发明中，所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂的有效孢子量优选为0.4～2.0×10⁹cfu/g，更优选为0.8～1.6×10⁹cfu/g，最优选为1.0～1.2×10⁹cfu/g。在本发明中，所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的活孢率≥90％；所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的杂菌率≤0.1％；所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的悬浮率≥80％；所述淡紫拟青霉的润湿时间≤120s。

本发明所述淡紫拟青霉可湿性粉剂可应用于农作物防治虫害的方面，提供了一种所述淡紫拟青霉可湿性粉剂在防治农作物虫害方面的应用。具体的，可应用的农作物种类包括粮食作物、经济作物、蔬菜作物、果类作物、饲料作物等。本发明所述淡紫拟青霉油悬浮剂可防治根结线虫病、大豆胞囊线虫病、小麦粒线虫病、甘薯茎线虫病、水稻干尖线虫病、柑橘半穿刺线虫病等。

本发明对所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂的施药方法没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的施药方法即可。

下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

淡紫拟青霉的制备：将保藏的淡紫拟青霉菌种接种于装有营养琼脂培养基的茄型瓶中，28℃培养12h进行活化培养；活化培养后的淡紫拟青霉以20％的接种量接种于121℃灭菌35min后的液体培养基中，在发酵罐中进行液体培养，具体培养的条件为：温度为28℃；pH值为6.9；罐内压力为0.08MPa，培养通气量为1V/V·min；65h后停止培养，得到淡紫拟青霉培养液；将得到的淡紫拟青霉培养液以20％的接种量接种于固体培养基中，在固体培养基中加入蒸馏水，使固体培养基含水量为50％，然后进行固体培养，培养条件为：培养温度为28℃，培养湿度前三天为80％，后四天培养湿度为30％，培养时间为7天；固体培养结束后将得到的固体培养的淡紫拟青霉在40℃条件下烘干35h，烘干至固体培养的淡紫拟青霉的水分含量为30％，粉碎过90目筛，得到淡紫拟青霉，经检测，淡紫拟青霉的有效孢子量为2.0×10¹⁰cfu/g以上。

实施例2

淡紫拟青霉可湿性粉剂的制备：以重量份数计，将3份白炭黑、85份煅烧高岭土、5份实施例1制备的淡紫拟青霉、4份异辛基琥珀酸钠、2份萘磺酸盐缩聚物和1份润湿剂EFW分别平均分成4堆，将第1堆白炭黑与第1堆煅烧高岭土混合后，再与第1堆淡紫拟青霉混合，再与第1堆异辛基琥珀酸钠混合，再与第1堆萘磺酸盐缩聚物混合，再与第1堆润湿剂EFW混合，再与第2堆白炭黑混合，以此类推，直到所有原料全部混合完，再继续混合30min，得到混合料；混合料经气流式粉碎，得到25μm的粉料，即得到淡紫拟青霉可湿性粉剂。

表1实施例2制备的淡紫拟青霉可湿性粉剂的质量控制指标

实施例3

淡紫拟青霉可湿性粉剂的制备：以重量份数计，将3份白炭黑、85份煅烧硅藻土、5份实施例1制备的淡紫拟青霉、4份脂肪醇与环氧乙烷缩合物、2份亚甲基二萘磺酸钠、1份十二烷基硫酸钠分别平均分成4堆，将第1堆白炭黑与第1堆煅烧硅藻土混合后，再与第1堆淡紫拟青霉混合，再与第1堆脂肪醇与环氧乙烷缩合物混合，再与第1堆亚甲基二萘磺酸钠混合，再与第1堆十二烷基硫酸钠混合，再与第2堆白炭黑混合，以此类推，直到所有原料全部混合完，再继续混合20min，得到混合料；混合料经气流式粉碎，得到20μm的粉料，即得到淡紫拟青霉可湿性粉剂。

实施例4

淡紫拟青霉可湿性粉剂的制备：以重量份数计，将3.5份白炭黑、80.3份煅烧高岭土、8份实施例1制备的淡紫拟青霉、4.5份异辛基琥珀酸钠、2.5份萘磺酸盐缩聚物和1.2份润湿剂EFW分别平均分成4堆，将第1堆白炭黑与第1堆煅烧高岭土混合后，再与第1堆淡紫拟青霉混合，再与第1堆异辛基琥珀酸钠混合，再与第1堆萘磺酸盐缩聚物混合，再与第1堆润湿剂EFW混合，再与第2堆白炭黑混合，以此类推，直到所有原料全部混合完，再继续混合30min，得到混合料；混合料经气流式粉碎，得到20μm的粉料，即得到淡紫拟青霉可湿性粉剂。

实施例5

药效试验：本次试验在江西省进行，防治品种为番茄，管理良好，根结线虫发生中等偏重。本次试验将实验田均分为三个区域，区域1为对照组，只喷施清水；区域2喷施实施例2中制备的淡紫拟青霉可湿性粉剂2000倍稀释液；区域3喷施50％辛硫磷乳油2000倍稀释液，药物活性组分的浓度与区域2相同；三个区域的用药量相同，施药后1天，3天，7天各调查一次活虫数，计算虫口减退率。具体结果如表2所示，由表2的数据可以得出，区域2的虫口减退率最高，表明本发明制备的淡紫拟青霉可湿性粉剂的杀虫效果最好。

表2淡紫拟青霉可湿性粉剂的杀虫(根结线虫)效果

从表2的试验数据可以得出，本发明制备的淡紫拟青霉可湿性粉剂7天的虫口减退率可高达81.6％，其杀虫效果要高于50％辛硫磷乳油。

由以上实施例可知，本发明制备的淡紫拟青霉可湿性粉剂，对根结线虫的防治率可高达81％以上，杀虫效果要高于高效氯氰菊酯。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种淡紫拟青霉可湿性粉剂，包括以下重量份数的组分：

药物活性组分2～10份，所述药物活性组分为淡紫拟青霉；

助剂5.4～9.5份；

载体78.5～94.6份。

2.根据权利要求1所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂，其特征在于，所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的有效孢子量为0.4～2.0×10⁹cfu/g。

3.根据权利要求1～2任意一项所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂，其特征在于，所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂的杂菌率≤0.1％。

4.根据权利要求2所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂，其特征在于，所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的悬浮率≥80％。

5.根据权利要求2或4所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂，其特征在于，所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的淡紫拟青霉的活孢率≥90％。

6.根据权利要求2所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂，其特征在于，所述淡紫拟青霉可湿性粉剂的润湿时间≤120s。

7.根据权利要求1所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂，其特征在于，所述助剂包括脂肪醇与环氧乙烷缩合物、萘磺酸盐缩聚物、润湿剂EFW、异辛基琥珀酸钠、亚甲基二萘磺酸钠和十二烷基硫酸钠中的一种或几种。

8.根据权利要求1或6所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂，其特征在于，所述载体包括白炭黑、膨润土、硫酸钠、陶土、煅烧硅藻土和煅烧高岭土中的一种或几种。

9.权利要求1～8任意一项所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂的制备方法，包括以下步骤：

1)将载体、药物活性组分和助剂混合，得到混合料；

10.权利要求1～8任意一项所述的淡紫拟青霉可湿性粉剂或权利要求9所述的方法制备得到的淡紫拟青霉可湿性粉剂在防治农作物虫害方面的应用。