CN105283166A - 包含精油组合的抗微生物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了包含红没药醇和一种或多种选自柠檬醛、香芹酚、牛至提取物和迷迭香的精油的精油抗菌组合或包含香芹酚和一种或更多种选自红没药醇、百里酚和迷迭香的精油的精油抗菌组合，以及包含这些组合的组合物，例如口腔护理组合物，及其用途。

Description

包含精油组合的抗微生物组合物

背景

精油是源自植物的叶子、茎干、花或枝的挥发性油，通常带有植物的气味或香味。已知许多精油具有抗微生物活性。

例如，红没药醇或更通常称为α-(-)-红没药醇(左美诺醇)为天然的单环倍半萜醇。其为无色粘稠的油，主要由来自德国洋甘菊(母菊，Matricariarecutita)和Myoporumcrassifolium的精油组成。红没药醇基本不溶于水和甘油，但可溶于乙醇。对映异构体α-(+)-红没药醇也只在自然界中发现，但非常罕见。合成的红没药醇(“合成红没药醇”)常常为α-(±)-红没药醇两者的外消旋混合物。

另一个例子为香芹酚或香旱芹酚(C₆H₃CH₃(OH)(C₃H₇))为单萜苯酚。其具有牛至特有的气味。香芹酚存在于牛至(Origanumvulgare)的精油、百里香油、得自田字草(pepperwort)和野生佛手柑的油中。百里香亚种的精油包含5%-75%的香芹酚，而香薄荷(Satureja)亚种具有1%-45%含量的香芹酚。马郁兰(Origanummajorana)和白藓牛至(DittanyofCrete)富含香芹酚，分别为50%和60-80%。

但是，当与已知抗微生物剂例如三氯生和氯化十二烷基吡啶鎓比较时，以MIC(最小抑菌浓度)来衡量的所测试的精油的抗微生物活性通常较低。在许多情况下，这些化合物需要足够高的含量来抑制或杀死微生物，从而在配制、气味、味道、成本和/或功效这些方面中存在困难。

因此，存在对包含具有抗微生物性能的精油的改进制剂的需要。

发明概述

虽然单种精油对抑制微生物生长具有局限性，对于许多组合的系统分析表明，当与第二种特定的精油结合时，一些精油具有显著提高的活性。因此，在单种精油的浓度较低的情况下，可以通过与另一种精油结合来获得提高的活性。

本发明因此提供了具有抗微生物活性、特别是抗菌活性的精油组合，例如红没药醇和一种或多种选自柠檬醛、香芹酚、牛至提取物和迷迭香的精油，或香芹酚和一种或多种选自红没药醇、百里酚和迷迭香的精油。在一个实施方案中，所述组合以口腔护理制剂的形式存在。在另一个实施方案中，本发明提供了杀死细菌或治疗由细菌感染口腔而引起的疾病或病症(例如齿龈炎)的方法，所述方法包括将染病区域与有效量的精油组合接触。

从下文所提供的详述，本发明的其他适用范围将变得显而易见的。应当理解当说明本发明的优选实施方案时，详述和具体的实施例只为了阐明而并无意于限制本发明的范围。

发明详述

以下优选实施方案的描述实际上只作为例示而非限制本发明、其应用或用途。

在第一实施方案中，本发明提供了抗菌组合(组合1)，其包含红没药醇和一种或多种选自柠檬醛、香芹酚、牛至提取物和迷迭香的精油，或包含香芹酚和一种或多种选自红没药醇、百里酚和迷迭香的精油。例如，本发明提供了

1.1.组合1，其包含合成的外消旋的红没药醇和一种或多种选自柠檬醛、香芹酚、牛至提取物和迷迭香的精油。

1.2.组合1或1.1，其中以下各个组分当存在时，以低于以下水平，例如低于或等于以下水平的1/2的量存在，例如各个组分以以下水平的10%-50%的量存在：

1.3组合1或1.1，其中在所述组合中各单种精油以少于其各自的单独最小抑菌浓度(例如抗口腔细菌(例如粘放线菌))的一半的量存在。

1.4组合1、1.1或1.2，其包含选自以下的组合：

本发明还提供了一种抗菌组合物，所述抗菌组合物在载体介质中包含上述组合中的任一个。

本发明还提供了一种口腔护理组合物，所述口腔护理组合物在例如洁齿剂或漱口水形式的口腔可接受的载体中包含上述组合中的任一个。

本发明还提供了杀死或控制细菌的方法，所述方法包括将细菌与上述组合或组合物中的任一个接触。

本发明还提供了治疗或控制口腔中的有害细菌的方法,例如治疗或控制齿龈炎的方法，所述方法包括给予有效量的上述组合或组合物，例如包含在洁齿剂或漱口水形式的口腔可接受的载体中的上述组合中的任一个的口腔护理组合物。

本发明还提供了抗菌组合(组合1)在制造杀死或抑制细菌生长、例如治疗或控制口腔中的有害细菌、例如治疗或控制齿龈炎的组合物中的用途，所述抗菌组合包含红没药醇和一种或多种选自柠檬醛、香芹酚、牛至提取物和迷迭香的精油，或包含香芹酚和一种或多种选自红没药醇、百里酚和迷迭香的精油。

贯穿全文所提及的范围均为简略的表达，其实质涵盖落入该范围内的每一个数值。在范围内的任何数值可以选为范围的端点。另外，文中所引用的全部参考文献均以其整体结合到本文中。如果本发明公开中的定义和所引用的参考文献的定义有冲突的话，以本发明为准。

在本发明的另一个实施方案中，可以将一种或多种任选的添加剂加到所述口腔护理组合物中，所述任选的添加剂包括但不限于下文所描述的组分。

研磨剂

如果需要的话，可以将研磨剂加到所述洁齿剂制剂中。可以使用任何合适的口腔护理研磨剂或抛光剂。在用于实施本发明的基料洁齿剂组合物中可以包括例如二氧化硅、煅烧氧化铝、碳酸氢钠、碳酸钙、磷酸二钙和焦磷酸钙的研磨剂。研磨剂的例子包括，但不限于，例如沉淀二氧化硅的二氧化硅研磨剂、偏磷酸钠、偏磷酸钾、磷酸三钙、二水合磷酸二钙、硅酸铝、煅烧氧化铝、膨润土或其他硅质材料，例如三聚氰胺、酚醛和脲醛的颗粒状热固性树脂和交联的聚环氧化物和聚酯。

可以通过使用例如胶体二氧化硅(例如得自HuberCorporation以商标Zeodent115销售的那些)或碱金属硅酸铝络合物(即包含结合在其基质中的氧化铝的二氧化硅)的研磨剂获得视觉上透明的洁齿剂组合物，其中所述研磨剂折射指数与所述洁齿剂组合物中所用的胶凝剂-液体(包含水和/或润湿剂)体系的折射指数接近。

抗菌剂

任选的添加剂包括额外的抗微生物(例如抗菌)剂。可以使用任何口腔可接受的抗微生物剂，包括三氯生(5-氯-2-(2,4-二氯苯氧基)苯酚)；8-羟基喹啉及其盐；锌离子源和亚锡离子源，例如柠檬酸锌、硫酸锌、甘氨酸锌、柠檬酸锌钠和焦磷酸亚锡；铜(II)化合物，例如氯化铜(II)、氟化铜(II)、硫酸铜(II)和氢氧化铜(II)；邻苯二甲酸及其盐，例如邻苯二甲酸钾镁；血根黄碱；季铵化合物，例如氯化烷基吡啶鎓(例如十六烷基氯化吡啶(CPC)、CPC与锌和/或酶的组合、氯化四癸基吡啶鎓和氯化N-四葵基-4-乙基吡啶鎓)；双胍，例如氯己定二葡萄酸盐、海克替啶、奥替尼啶、阿来西啶；卤化双苯酚化合物，例如2,2'-亚甲基-双(4-氯-6-溴苯酚)；氯化苯甲铵；水杨酰苯胺，杜灭芬；碘；磺酰胺；二双胍；苯酚类；哌啶衍生物，例如地莫匹醇和辛哌醇；木兰提取物；葡萄籽提取物；百里酚；丁香酚；薄荷醇；香叶醇；香芹酚；柠檬醛；桉油精；儿茶酚；4-烯丙基儿茶酚；己基间苯二酚；水杨酸甲酯；抗生素，例如安灭菌、阿莫西林、四环素、强力霉素、米诺环素、灭滴灵、新霉素、卡那霉素和克林达霉素；和其混合物。可用的抗菌剂的其他示例性列表参见Gaffar等在1998年7月7日发布的美国专利5,776,435。在一些实施方案中，抗菌剂以约0.001-约1重量%的浓度存在。在一些实施方案中，抗菌剂为氯化十二烷基吡啶鎓。在一些实施方案中，氯化十二烷基吡啶鎓以约0.001-约1重量%的浓度存在。在其他实施方案中，氯化十二烷基吡啶鎓以约0.05重量%的浓度存在。

抗氧化剂

抗氧化剂为另一类任选的添加剂。可以使用任何口腔可接受的抗氧化剂，包括丁基化的羟基苯甲醚(BHA)、丁基化的羟基甲苯(BHT)、维生素A、类胡萝卜素、维生素E、类黄酮、聚苯酚、抗坏血酸、草本抗氧化剂、叶绿素、褪黑素和其混合物。

抗牙斑剂

任选可以包含抗牙斑(例如，牙斑破坏)剂。可以使用任何口腔可接受的抗牙斑剂，包括但不限于亚锡、铜、镁和锶盐、聚二甲基硅氧烷共聚多元醇，例如十二烷基聚二甲基硅氧烷共聚多元醇、木瓜蛋白酶、葡糖淀粉酶、葡糖氧化酶、尿素、乳酸钙、甘油磷酸钙、聚丙烯酸锶和其混合物。

口气清新剂

任选可以提供口气清新剂。可以使用任何口腔可接受的口气清新剂，包括但不限于例如葡糖酸锌、柠檬酸锌和亚氯酸锌的锌盐、α-紫罗酮和其混合物。一种或多种口气清新剂任选以有效的口气清新总量存在。

脱敏剂

任选的脱敏剂包括柠檬酸钾、氯化钾、酒石酸钾、碳酸氢钾、草酸钾、硝酸钾、锶盐及其混合物。

氟离子源

一些实施方案提供其中一种或多种组分中的至少一种为氟离子源的组合物，所述氟离子源选自：氟化亚锡、氟化钠、氟化钾、单氟磷酸钠、氟硅酸钠、氟硅酸铝、氟化胺、氟化铵和其两种或多种的组合。

除非另有指定，否则应当理解在文中和在说明书中别处表达的所有百分数和量是指重量百分数。所给出的量基于材料中活性成份的重量计算。

亚锡离子源

任选可以包含亚锡离子源例如作为牙周活性物、牙石控制剂、防龋剂或牙齿脱敏剂。可以使用任何口腔可接受的亚锡离子源，包括氟化亚锡、例如氯化亚锡二水合物的其他亚锡卤化物、有机羧酸亚锡盐，例如甲酸亚锡、乙酸亚锡、葡萄酸亚锡、乳酸亚锡、酒石酸亚锡、草酸亚锡、丙二酸亚锡和柠檬酸亚锡、亚乙基果绿定亚锡(stannousethyleneglyoxide)等。

牙石控制剂

任选所述组合物可以包含牙石控制(抗牙石)剂。可用于本发明的牙石控制剂包括磷酸盐和多磷酸盐，例如焦磷酸盐；聚氨基丙烷磺酸(AMPS)；聚烯烃磺酸盐；聚烯烃磷酸盐；二磷酸盐，例如氮杂环烷烃-2,2-二磷酸盐(例如氮杂环庚烷-2,2-二磷酸)、N-甲基氮杂环戊烷-2,3-二磷酸、乙烷-1-羟基-1,1-二磷酸(EHDP)和乙烷-1-氨基-1,1-二磷酸盐；膦酰基烷烃羧酸；和这些试剂中任一种的盐，例如其碱金属盐和铵盐。有用的无机磷酸盐和聚磷酸盐包括磷酸二氢钠、磷酸氢二钠和磷酸三钠、三聚磷酸钠、四聚磷酸钠、焦磷酸一钠、焦磷酸二钠、焦磷酸三钠和焦磷酸四钠、三偏磷酸钠、六偏磷酸钠及其混合物，其中钠可以任选被钾或铵置换。其他有用的抗牙石剂包含聚羧酸酯聚合物和聚乙烯基甲醚/马来酸酐(PVME/MA)共聚物，例如以Gantrez^TM商标得自ISP,Wayne,N.J.的那些。在一些实施方案中，磷酸盐以约0.01-约10重量%的浓度存在。在一些实施方案中，磷酸盐以约1重量%的浓度存在。

增白剂

任选所述组合物可以包含增白剂。本发明的组合物中可以引入增白剂。增白剂为有效影响其所施加的牙齿表面的增白的材料，例如过氧化氢和过氧化脲、高清洁二氧化硅(highcleaningsilica)、防腐剂、硅酮和叶绿素化合物。在各实施方案中，本发明的组合物包含含有过氧化合物的过氧化物增白剂。过氧化合物为包含二价的氧-氧基的氧化化合物。过氧化合物包括过氧化物和氢过氧化物(例如过氧化氢)、碱金属过氧化物和碱土金属过氧化物、有机过氧化合物、过氧酸、其药用可接受的盐及其混合物。碱金属过氧化物和碱土金属过氧化物包括过氧化锂、过氧化钾、过氧化钠、过氧化镁、过氧化钙、过氧化钡及其混合物。有机过氧化合物包括过氧化脲(也称为过氧化氢脲)、甘油基过氧化氢、烷基过氧化氢，二烷基过氧化物、烷基过氧酸、过氧酯、二酰基过氧化物、苯甲酰基过氧化物和单过氧邻苯二甲酸酯及其混合物。过氧酸及其盐包括有机过氧酸及其混合物，例如烷基过氧酸和单过氧邻苯二甲酸盐；和无机过氧酸盐及其混合物，例如碱金属和碱土金属，例如锂、钾、钠、镁、钙和钡的过硫酸盐、二过硫酸盐、过碳酸盐、过磷酸盐、过硼酸盐和过硅酸盐。在各实施方案中，过氧化合物包括过氧化氢、过氧化脲、过碳酸钠及其混合物。在一些实施方案中，过氧化合物包括过氧化氢。在一些实施方案中，过氧化合物基本上由过氧化氢组成。在一些实施方案中，可以提供非过氧化物增白剂。在本发明中可用的增白剂中可包括非过氧化合物，例如二氧化氯、亚氯酸盐和次氯酸盐。亚氯酸盐和次氯酸盐包括例如锂、钾、钠、镁、钙和钡的碱金属和碱土金属的亚氯酸盐和次氯酸盐。非过氧化物增白剂还包括着色剂，例如二氧化钛和羟磷灰石。一种或多种增白剂任选地以增白牙齿的有效总量存在。在一些实施方案中，将增白剂与水性载体分隔开。在一些实施方案中，通过将增白剂包封来与水性载体分隔开。

锌盐

任选所述组合物可以包含锌盐，所述锌盐包括但不限于乙酸锌、硼酸锌、丁酸锌、碳酸锌、柠檬酸锌、甲酸锌、葡萄酸锌、甘油酸锌、羟基乙酸锌、乳酸锌、氧化锌、磷酸锌、吡啶甲酸锌、丙酸锌、水杨酸锌、硅酸锌、硬脂酸锌、酒石酸锌、十一烷酸锌及其混合物。

其他添加剂

根据需要，出于例如制造、稳定性、美学、疗效、消费者需求等原因，所述洁齿剂组合物中可以包含任何其他添加剂。例示性的添加剂包括所有其他常规洁齿剂添加剂、粘度调节剂、稀释剂、气泡调节剂、唾液刺激剂、脱敏剂、增白剂、酶、pH调节剂、口感剂、增甜剂、着色剂、乳浊剂和口气清新剂。例示性的添加剂包括但不限于2012年第14版的InternationalCosmeticIngredientDictionaryandHandbook中引用的那些试剂，其通过引用结合到文中。

实施例

本发明的实施方案进一步在以下的实施例中描述。所述实施例只作为阐述而决不限制所描述的和所要求保护的本发明的范围。

实施例1：测定单种精油的MIC

如下评估最小抑菌浓度(MIC)：

96孔微量滴定板的各个孔中接种100μlTSB(大豆胰蛋白胨肉汤)基质。根据需要的百分比(基于w/v)制备活性物的储液。不同的储液(>1%)用于获得活性物的最终MIC浓度。制备阳性对照(三氯生)的0.1%储液。使用无菌TSB将各个活性物以1:10稀释。在第一列中加入活性物和对照物的100μl储液。将100μl溶液从第一列转移到下一列，混合并重复转移以沿着板连续稀释两倍。将最后的100μl弃去。在37℃TSB中生长整夜来制备0.2-0.3O.D.的粘放线菌ATCC43146的活性培养物。将100μl调节过的细菌培养物加到各个孔。在37℃下将板孵育24小时。通过测量610nm的O.D.来测定生长。将数据转移到Excel电子表格来比较O.D.值。高于最低浓度且O.D.大大提高的浓度被视为MIC。根据所获得的数值，使用更高或更低的储液浓度来重复MIC。这提供了最接近由连续稀释所测定的、其中微生物被抑制的浓度的数值(MIC)。

表1：单种精油抗粘放线菌的MIC值

精油	MIC值(ppm)
		丁香酚	2000
二氢丁香酚	500
		水杨酸甲酯	1000
柠檬醛	250
		桉油精	250
百里酚(98%纯净)	900
		楝树油	100
苯甲醇	700
		合成红没药醇	125
儿茶素水合物	100
		迷迭香	6000
欧芹	4000
		牛至	550
香芹酚	80
		绿茶儿茶素	80
生姜汁	625
		氧化锌	625
柠檬酸锌	160
		IPMP(99.8%纯净)	160

实施例2：测定精油组合的活性

如下评估以上活性物的组合的最小抑菌浓度(MIC)：使用8通道微量吸液管在96孔微量滴定板的各个孔中分配100μl生长培养基。准备活性物储液以在合适的溶剂中测试。选择最小抑菌浓度作为起始点。在生长培养基中稀释各个活性物、阳性对照物和溶剂对照物(1ml活性储液+9mlTSB)。还将各活性的TSB溶液稀释成(1ml活性物‘1’+1ml活性物‘2’+8mlTSB)以得到活性物的组合溶液。将100μl在生长培养基(1A和1B)中稀释(1:9)的乙醇加到第一列的孔。活性物1在生长培养基(1C和1D)中稀释，活性物2在生长培养基(1E和1F)中稀释，活性物的组合在生长培养基(1G和1H)中稀释。第一列中的各个孔当前具有200μl溶液。使用8通道微量吸液管，在孔中将该200μl溶液混合且随后将100μl输送到下一列中的孔，再次在第二列中混合这些溶液并将100μl输送到下一列。所有12列重复这个过程，之后应当弃去100μl来自最后一列中的各个孔的溶液。这允许我们获得活性物的梯度，从板左侧第一个孔的最小抑菌浓度起，所有行上的孔均以2倍的梯度被连续稀释。将细菌生长培养过夜并进行革兰氏染色以检查纯度。如果培养物是纯净的，进行下一步骤。在分光光度计中，以610nm的波长测量过夜培养物的OD。使用合适的生长培养基(对于粘放线菌，使用TSB)将过夜培养物稀释到约0.2的OD(610nm)。随后将100μl在生长培养基中调节到0.2的OD(610nm)的细菌培养物加到各个孔。板上的各个孔当前具有200μl总体积。在微量滴定板盖上盖子的情况下，在37℃下将板孵育12-16小时以培养需氧细菌。通过使用微量滴定板读数器测量各个孔中的浑浊度来测量生长。将数值在Excel电子表格中制表并观察OD值相对于稀释的变化。将显示没有生长的较高浓度作为抑制浓度。如果活性物的组合的抑制浓度低于各活性物的单独MIC值，该组合被认为具有抗微生物(抗菌)作用。

精油的组合在下表2中描述。(合成红没药醇=合成的红没药醇)

表2：各种精油组合的抑菌浓度值

组分组合	协同产生的MIC值
		合成红没药醇+柠檬醛	合成红没药醇31.25ppm+柠檬醛62.5ppm
合成红没药醇+香芹酚	合成红没药醇62.5ppm+香芹酚40ppm
		合成红没药醇+牛至	合成红没药醇62.5ppm+牛至275ppm
合成红没药醇+迷迭香	合成红没药醇62.5ppm+迷迭香3000ppm
		香芹酚+百里酚	香芹酚40ppm+百里酚450ppm
香芹酚+迷迭香	香芹酚40ppm+迷迭香3000ppm

还将来自表2的精油组合与产生相同作用的各单种精油的浓度进行比较。这些数值在下文的表3中公开。

表3：各精油组合的单独MIC值

合成红没药醇+柠檬醛	合成红没药醇31.25ppm+柠檬醛62.5ppm
		合成红没药醇	125ppm
柠檬醛	250ppm
合成红没药醇+香芹酚	合成红没药醇62.5ppm+香芹酚40ppm
		合成红没药醇	125ppm
香芹酚	80ppm
合成红没药醇+牛至	合成红没药醇62.5ppm+牛至275ppm
		合成红没药醇	125ppm
牛至	550ppm
合成红没药醇+迷迭香	合成红没药醇62.5ppm+迷迭香3000ppm
		合成红没药醇	125ppm
迷迭香	6000ppm
香芹酚+百里酚	香芹酚40ppm+百里酚450ppm
		香芹酚	80ppm
百里酚	900ppm
香芹酚+迷迭香	香芹酚40ppm+迷迭香3000ppm
		香芹酚	80ppm
迷迭香	6000ppm

从上文数据可以发现，在本发明的组合物中可以大大降低精油的量。

这些结果表明特定精油组分的组合彼此协同影响抗菌功效，如MIC值所体现。

本领域的技术人员能够理解，在不偏离本发明的精神的情况下，可以对文中所描述的实施方案进行许多改变和修改。所有这些改变将落入随附权利要求的范围内。

Claims (9)

1.精油的抗菌组合，所述抗菌组合包含(i)红没药醇和一种或多种选自柠檬醛、香芹酚、牛至提取物和迷迭香的精油，或(ii)香芹酚和一种或多种选自红没药醇、百里酚和迷迭香的精油。

2.权利要求1的抗菌组合，所述抗菌组合包含合成的外消旋的红没药醇和一种或多种选自柠檬醛、香芹酚、牛至提取物和迷迭香的精油。

3.权利要求1或2的抗菌组合，其中以下各个组分当存在时，以以下水平的10%-50%的量存在：

。

4.前述权利要求中任一项的抗菌组合，其中在所述组合中的各单种精油以少于其各自的单独最小抑菌浓度的一半的量存在。

5.前述权利要求中任一项的抗菌组合，所述抗菌组合包括选自以下的组合：

。

6.一种抗菌组合物，所述抗菌组合物包括在载体介质中的前述权利要求中任一项的抗菌组合。

7.一种口腔护理组合物，所述口腔护理组合物包括在口腔可接受的载体中的权利要求1-5中任一项的抗菌组合。

8.杀死或控制细菌的方法，所述方法包括将所述细菌与权利要求1-5中任一项的抗菌组合接触。

9.治疗或控制口腔中的有害细菌的方法，所述方法包括将有效量的权利要求5的口腔护理组合物给予有需要的受试者的口腔。