CN104938088B - 一种促进青风藤种子萌发的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种促进青风藤种子萌发的方法，它属于植物繁育领域。该方法包括：于10月中下旬采集青风藤的成熟果实，静置后熟，去掉果肉并将种子清洗干净，选择沉入水底的种子，晒干；用赤霉素溶液充分浸泡；于种子内侧开口后，消毒并接种到无菌培养基或沙土上，在光照培养箱（25±3℃，光照强度2000Lx，12小时/d的光照）中萌发培养，种子萌发率达到60%以上。本发明的种子萌发方法不仅提高了发芽率；同时还可以通过消毒等环节清除青风藤种子中病虫害源，避免青风藤母株的病虫害源带入到幼苗中，造成大田病虫害的发生的问题。
Description
技术领域
本发明属于植物繁育领域，涉及一种促进青风藤种子萌发的方法。
背景技术
青风藤又名清风藤、寻风藤、青藤，能祛风湿，通经络，利小便。2010年版《中华人民共和国药典》规定青风藤原植物为防己科防己属植物青藤Sinomenium acutum (Thumb)Rehd.et Wils和毛青藤Sinomenium acutum (thumb) Rehd.et Wils. Var cinereumRehd. Et Wils两种。
青风藤常用于风湿痹痛，关节肿胀，麻痹瘙痒；也用于肾小球疾病、骨质增生、脊髓炎治疗；还被用于心率失常、红斑性狼疮等疾病及海洛因依赖症的治疗。临床用其单味药及复方治疗风湿性疾病。市场上销售的青风藤制剂主要有正清风痛宁注射液、正清风痛宁缓释片、风湿止痛药酒、正清风痛宁片、芪麝颈康丸、追风活络胶囊等。
青风藤作为一种具有独特药效的中药材，历来为野生植物，鲜见人工栽培。近年来，随着风湿和类风湿性关节炎、肢体疼痛麻木等疾病的发病率地不断增多，青风藤的需求量随之增大。药农近似疯狂地无序采挖，导致青风藤种群迅速消减。由于野生资源开始匮乏，部分以青风藤为原料的制药企业，如湖南正清制药集团，开始了人工栽培青风藤。但青风藤种子种皮厚、不透水、不透气，存在休眠问题，在自然条件下难以萌发（未经过处理的萌发率＜1%），从而大大限制了青风藤的扩繁。因此，对青风藤种子进行处理，提高种子的发芽率在生产过程中显得至关重要。
发明内容
本发明的目的是，针对上述现有技术的不足，提供一种操作简单、能打破种子休眠、提高发芽率且能降低病虫害风险的促进青风藤种子萌发的方法。
为达上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种促进青风藤种子萌发的方法，该方法步骤如下：
（1）种子选取：将青风藤种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干，选取沉入水底的种子可以提高其饱满度和发芽率；
上述用于清洗的青风藤种子是于10月中下旬采摘当年成熟的青风藤核果，将核果静置后熟2-4天以提高成熟度，然后除去果肉而得到。
（2）种子浸泡与破壳：将晒干的种子用清水洗净后，室温下用100-200ppm赤霉素溶液浸种24-48小时以打破种子休眠，再将种子破壳；
上述的将种子破壳是指于种子半月形内侧开口。
较好的，采用100-150ppm赤霉素溶液或150-200ppm赤霉素溶液进行浸种，最好是采用150ppm赤霉素溶液进行浸种；该赤霉素溶液以浸没种子为宜。
（3）种子消毒：将破壳的青风藤种子放入2-4g/L 多菌灵+ 0.5-1g/L青霉素钠的混合水溶液中浸泡0.5-1小时，该含多菌灵和青霉素钠的混合水溶液以浸没种子为宜；再用70%质量体积浓度的酒精浸泡30秒，然后用0.1%升汞处理3-5分钟，无菌水冲洗干净（一般冲洗4-5次）。
（4）种子催芽萌发：将消毒后的种子均匀铺在灭菌的培养基或湿润的细沙上，于光照培养箱中培养25-30天；种子发芽后，可以将青风藤幼苗移栽到苗圃或大田进行常规种植；
其中，上述培养基为琼脂糖培养基；光照培养箱的培养条件为温度22-28℃、光照强度2000Lx、及每天8-12小时光照。
本发明经过果实收集与处理、种子清洗、晒干、浸泡、破壳、消毒及催芽萌发等步骤，可以有效解决青风藤种子萌发过程中的休眠问题以及易染菌等问题，种子萌发率达到60%以上。本发明的种子萌发方法不仅打破了种子休眠，提高了发芽率；同时还可以通过消毒等环节清除青风藤种子中病虫害源，避免青风藤母株的病虫害带入到幼苗中，造成大田病虫害的发生的问题。
具体实施方式
本发明将用以下实施例作进一步地说明，但并不限于这些实施例的任一或类似实例。
实施例1
10月中下旬摘取当年成熟的青风藤核果，在容器中静置后熟3天，然后除去果肉并将种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干；取50粒晒干的种子用清水洗净后，室温下用100ppm赤霉素溶液浸种48小时，然后在种子半月形内侧开口；将破壳的青风藤种子放入2g/L 多菌灵+ 1g/L青霉素钠的混合水溶液中浸泡1小时，然后用70%质量体积浓度的酒精浸泡30秒，再用0.1%升汞处理5分钟，无菌水冲洗5次；将消毒后的种子均匀地铺在灭菌的琼脂糖培养基上，于光照培养箱中催芽萌发，条件为22-28℃、光照强度2000Lx、12小时/d的光照；培养30天后，种子的发芽率为60%。
实施例2
10月中下旬摘取当年成熟的青风藤核果，在容器中静置后熟2天，然后除去果肉并将种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干；取50粒晒干的种子用清水洗净后，室温下用200ppm赤霉素溶液浸种36小时，然后在种子半月形内侧开口；将破壳的青风藤种子放入2g/L 多菌灵+ 0.5g/L青霉素钠的混合水溶液中浸泡1小时，然后在70%质量体积浓度的酒精浸泡30秒，再用0.1%升汞处理5分钟，无菌水冲洗5次；将消毒后的种子均匀地铺在灭菌的琼脂糖培养基上，于光照培养箱中催芽萌发，条件为22-28℃、光照强度2000Lx、8小时/d的光照；培养25天后，种子的发芽率为64%。
实施例3
10月中下旬摘取当年成熟的青风藤核果，在容器中静置后熟2天，然后除去果肉并将种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干；取50粒晒干的种子用清水洗净后，室温下用200ppm赤霉素溶液浸种24小时，然后在种子半月形内侧开口；将破壳的青风藤种子放入4g/L 多菌灵+ 0.5g/L青霉素钠的混合水溶液中浸泡0.8小时，然后用70%质量体积浓度的酒精浸泡30秒，然后用0.1%升汞处理3分钟，无菌水冲洗4次；将消毒后的种子均匀地铺在灭菌的琼脂糖培养基上，于光照培养箱中催芽萌发，条件为22-28℃，光照强度2000Lx，12小时/d的光照；待培养25天后，种子的发芽率为62%。
实施例4
10月中下旬摘取当年成熟的青风藤核果，在容器中静置后熟3天，然后除去果肉并将种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干；取50粒晒干的种子用清水洗净后，室温下用150ppm赤霉素溶液浸种24小时，然后在种子半月形内侧开口；将破壳的青风藤种子放入3g/L 多菌灵+ 0.8g/L青霉素钠的混合水溶液中浸泡0.5小时，然后用70%质量体积浓度的酒精浸泡30秒，再用0.1%升汞处理4分钟，无菌水冲洗4次；将消毒后的种子均匀地铺在150℃灭菌后用无菌水湿润的细沙上，于光照培养箱中催芽萌发，条件为22-28℃、光照强度2000Lx、10小时/d的光照；培养25天后，种子的发芽率为62%。
实施例5
10月中下旬摘取当年成熟的青风藤核果，在容器中静置后熟4天，然后除去果肉并将种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干；取50粒晒干的种子用清水洗净后，室温下用150ppm赤霉素溶液浸种24小时，然后在种子半月形内侧开口；将破壳的青风藤种子放入2g/L 多菌灵+ 0.5g/L青霉素钠的混合水溶液中浸泡1小时，然后用70%质量体积浓度的酒精浸泡30秒，再用0.1%升汞处理3分钟，无菌水冲洗5次；将消毒后的种子均匀铺在150℃灭菌后用无菌水湿润的细沙上，于光照培养箱中催芽萌发，条件为22-28℃、光照强度2000Lx、8小时/d的光照；培养27天后，种子的发芽率为64%。
实施例6
10月中下旬摘取当年成熟的青风藤核果，在容器中静置后熟3天，然后除去果肉并将种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干；取50粒晒干的种子用清水洗净后，室温下用100ppm赤霉素溶液浸种36小时，然后在种子半月形内侧开口；将破壳的青风藤种子放入2g/L 多菌灵+ 0.5g/L青霉素钠的混合水溶液中浸泡1小时，然后用70%质量体积浓度的酒精浸泡30秒，再用0.1%升汞处理5分钟，无菌水冲洗5次；将消毒后的种子均匀铺在150℃灭菌后用无菌水湿润的细沙上，于光照培养箱中催芽萌发，条件为22-28℃、光照强度2000Lx、10小时/d的光照；培养30天后，种子的发芽率为60%。
实施例7
10月中下旬摘取当年成熟的青风藤核果，在容器中静置后熟4天，然后除去果肉并将种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干；取50粒晒干的种子用清水洗净后，室温下用200ppm赤霉素溶液浸种24小时，然后在种子半月形内侧开口；将破壳的青风藤种子放入2g/L 多菌灵+ 0.5g/L青霉素钠的混合水溶液中浸泡1小时，然后用70%质量体积浓度的酒精浸泡30秒，再用0.1%升汞处理4分钟，无菌水冲洗5次；将消毒后的种子均匀铺在150℃灭菌后用无菌水湿润的细沙上，于光照培养箱中催芽萌发，条件为22-28℃、光照强度2000Lx、12小时/d的光照；培养30天后，种子的发芽率为62%。
对比实施例1
10月中下旬摘取当年成熟的青风藤核果，除去果肉并将种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干；取100粒晒干的种子用清水洗净后，室温下用清水浸种48小时，然后将浸泡的青风藤种子直接播种到盛有营养土的容器中。于光照培养箱中催芽萌发，条件为22-28℃、光照强度2000Lx、8小时/d的光照；培养30天后，种子完好无损，发芽率为0%。
对比实施例2
10月中下旬摘取当年成熟的青风藤核果，在容器中静置后熟4天，然后除去果肉并将种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干；取50粒晒干的种子用清水洗净后，室温下用清水浸种24小时，然后在种子半月形内侧开口；然后将破壳的青风藤种子直接播种到盛有营养土的容器中。于光照培养箱中催芽萌发，条件为22-28℃、光照强度2000Lx、10小时/d的光照；少数种子早期见萌动现象，培养7天后，种子全部染菌，发芽率为0%。
对比实施例3
10月中下旬摘取当年成熟的青风藤核果，在容器中静置后熟3天，然后除去果肉并将种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干；取50粒晒干的种子用清水洗净后，室温下用清水浸种24小时，然后在种子半月形内侧开口；将破壳的青风藤种子放入2g/L 多菌灵+0.5g/L青霉素钠的混合水溶液中浸泡1小时，然后用70%质量体积浓度的酒精浸泡30秒，再用0.1%升汞处理4分钟，无菌水冲洗5次；将消毒后的种子均匀铺在150℃灭菌后用无菌水湿润的细沙上，于光照培养箱中催芽萌发，条件为22-28℃、光照强度2000Lx、12小时/d的光照；培养30天后，种子的发芽率为26%。
Claims (6)
1.一种促进青风藤种子萌发的方法，其特征在于，该方法步骤如下：
(1)种子选取：将青风藤种子清洗干净，收集沉入水底的种子并晒干；该青风藤种子是取自当年采摘的成熟的且已静置后熟2-4天的青风藤核果；
(2)种子浸泡与破壳：将晒干的种子用清水洗净后，室温下用100-200ppm赤霉素溶液浸种24-48小时，将种子破壳；
(3)种子消毒：将破壳的青风藤种子放入2-4g/L多菌灵+0.5-1g/L青霉素钠的混合液中浸泡0.5-1小时，再用70％质量体积浓度的酒精浸泡30秒，然后用0.1％升汞处理3-5分钟，无菌水冲洗干净；
(4)种子催芽萌发：将消毒后的种子均匀铺在灭菌的琼脂糖培养基或湿润的细沙上，于光照培养箱中培养25-30天。
2.如权利要求1所述的一种促进青风藤种子萌发的方法，其特征在于，所述步骤(2)中是采用100-150ppm赤霉素溶液进行浸种。
3.如权利要求1所述的一种促进青风藤种子萌发的方法，其特征在于，所述步骤(2)中是采用150-200ppm赤霉素溶液进行浸种。
4.如权利要求1所述的一种促进青风藤种子萌发的方法，其特征在于，所述步骤(2)中是采用150ppm赤霉素溶液进行浸种。
5.如权利要求1所述的一种促进青风藤种子萌发的方法，其特征在于，所述步骤(2)中将种子破壳是指于种子半月形内侧开口。
6.如权利要求1所述的一种促进青风藤种子萌发的方法，其特征在于，所述步骤(4)中光照培养箱的培养条件为温度22-28℃、光照强度2000Lx、及8-12小时/d的光照。
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