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CN104884458A - 作为蛋白质激酶抑制剂的稠合杂环化合物 - Google Patents

作为蛋白质激酶抑制剂的稠合杂环化合物 Download PDF

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CN104884458A CN201480003692.3A CN201480003692A CN104884458A CN 104884458 A CN104884458 A CN 104884458A CN 201480003692 A CN201480003692 A CN 201480003692A CN 104884458 A CN104884458 A CN 104884458A
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Abstract

本发明涉及式(I)的稠合杂环化合物、其盐、其组合物，和其使用方法。具体而言，本文公开了可用于抑制蛋白激酶，包括布鲁顿酪氨酸激酶(Btk)和用于治疗由该激酶介导的疾病的某些稠合杂环化合物。

Description

作为蛋白质激酶抑制剂的稠合杂环化合物
布鲁顿酪氨酸激酶(Bruton’s tyrosine kinase，Btk)属于Tec酪氨酸激酶家族(Vetrie等人，Nature 361:226-233，1993；Bradshaw,Cell Signal.22:1175-84,2010)。Btk主要在大多数造血细胞如B细胞、肥大细胞和巨噬细胞中表达(Smith等人，J.Immunol.152:557-565,1994)，并且位于骨髓、脾脏和淋巴结组织中。Btk在B细胞受体(B-cell receptor，BCR)和FcR信号通路中起着重要的作用，这些信号通路参与B细胞发育、分化(Khan，Immunol.Res.23:147，2001)。Btk被上游Src家族激酶活化。一旦被活化，Btk反过来使PLCγ磷酸化，进而影响B细胞的功能和存活(Humphries等人，J.Biol.Chem.279:37651，2004)。这些信号通路必须被精确地调节。编码Btk的基因中的突变会导致人的遗传性B细胞特异性免疫缺陷疾病，被称为X-连锁无丙种球蛋白血症(X-linkedagammaglobulinemia，XLA)(Conley等人，Annu.Rev.Immunol.27:199-227,2009)。BCR介导信号的异常可能会导致B细胞活化的失调，导致许多自身免疫性疾病和炎症疾病。临床前研究表明，Btk缺乏的小鼠对胶原诱导性关节炎的发展有抗性。此外，Rituxan——CD20抗体——用以减少成熟的B细胞临床研究表明B细胞在许多炎症疾病如风湿性关节炎、全身性红斑狼疮、多发性硬化症中起着关键作用(Gurcan等人，Int.Immunopharmacol.9:10-25，2009)。因此，Btk抑制剂可用于治疗自身免疫性疾病和/或炎症疾病。
此外，Btk的异常活化在B细胞淋巴瘤的发病机制中起着重要的作用，这意味着在血液恶性肿瘤的治疗中抑制Btk是有很有用的(Davis等人，Nature 463:88-92,2010)。初步临床试验结果显示，布鲁顿酪氨酸激酶(Bruton’s tyrosine kinase,Btk)抑制剂PCI-32765在治疗几种类型的B细胞淋巴瘤中是有效的(例如,54th ASH annual meeting abstract，Dec.2012:686The Bruton's Tyrosine Kinase(Btk)Inhibitor，Ibrutinib(PCI-32765)，Has Preferential Activity in the ABC Subtype ofRelapsed/Refractory De Novo Diffuse Large B-Cell Lymphoma(DLBCL):Interim Results of a Multicenter,Open-Label,Phase2Study)。由于Btk作为介体在多个信号转导通路中起着核心作用，所以Btk抑制剂作为抗炎和/或抗癌药物成为热点。(Mohamed等人，Immunol.Rev.228:58-73，2009；Pan，Drug News perspect 21:357-362,2008；Rokosz等人，ExpertOpin.Ther.Targets 12:883-903，2008；Uckun等人，Anti-cancer AgentsMed.Chem.7:624-632,2007；Lou等人，J.Med.Chem.55(10):4539-4550，2012)。
正在开发用于抗炎和抗癌治疗的Btk小分子抑制剂。依鲁替尼(Ibrutinib)(PCI-32765，参见：US7514444B2和相关文件，例如，US2012053189A1、WO2011153514、2011046964、US2010254905A1、WO2010009342、WO2008121742、WO2008054827、US20080139582、US20080076921、US7718662B1、WO2007087068、US20100035841)是首入临床的一类Btk抑制剂，目前针对复发性或难治的套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)和慢性淋巴细胞白血病(chroniclymphocytic leukaemia,CLL)正在进行多个临床试验。另一个进入临床试验的Btk抑制剂是AVL-292(参见，例如，US 20100249092、US20100029610、US2010016296、US20120077832、WO2011090760、WO2010028236、WO2009158571、WO2009051822、WO2010123870)。小野制药(Ono pharmaceuticals)和Mannkind公司分别在用自己的Btk小分子抑制剂进行着临床试验(参见，例如，ONO-4059，WO2011152351；WO2007136790A2)。
其他Btk抑制剂也是已知的。参见，例如，US2012/0232054(LOCUSPHARMACEUTICALS INC.)、WO2010126960(LOCUSPHARMACEUTICALS INC.)\WO 2011/162515(HANMI HOLDINGSCO.LTD)、WO 2012135801(UNIVERSITY OF UTAH RESEARCHFOUNDATION)，Kim等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.21:6258–6263，2011(Pfizer)，US8084620B2(BMS)、WO2002050071、WO2008116064、WO2010011837、WO 2011159857(BMS)、US2012058996A1、US2012082702A1、US20100160303(BMS)、US2012129852A1(BMS)、WO 2011019780(BMS)、WO 2011029043、WO 2011029046(BiogenIdec)、US7393848(CGI)、US20060178367、US20060183746(CGI)、EP2068849(CGI)、WO2005005429、WO2005014599、WO2005047290、WO2006053121、WO2008033834、WO2008033858、WO2006099075、WO2008033854、WO2008033857、WO2009039397(CGI)、WO2009137596、WO2010056875、WO2010068788、WO2010068806、WO2010068810(CGI，GENENTECH)、WO2011140488、WO2012030990、WO2012031004(GILEAD&GENENTECH)、US2012040961A1(DANA-FARBER CANCER INSTITUTE),WO2005011597、WO2008045627、WO2008144253(IRM LLC)、WO2007140222、WO2013008095(NOVARTIS)、WO2012170976A2(Merck)、WO2012135944A1(PHARMASCIENCE)、US2010144705A1、US20120028981A1(PRINCIPIA BIOPHARMA)、WO2010065898A2、WO2012158795A1、WO2012158764A1、WO2012158810A1(PRINCIPIABIOPHARMA)、US20090318448A1、US20100016301、US2009105209A1、US20100222325、US20100004231(ROCHE)、WO2012156334A1、WO2012020008、WO2010122038、WO2010006970、WO2010006947、WO2010000633、WO2009077334、WO2009098144(ROCHE)、WO2006065946、WO2007027594、WO2007027729(VERTEX)。
WO2007/026720A1公开了式(A)的环稠合的吡唑化合物用作Lck激酶抑制剂，其中，n表示2或3；A表示式：-O-等；B表示C1-10亚烷基等；C表示单键或式：-O-；R1表示氢原子、吡咯烷基等；R4、R5和R6独立地表示氢原子、卤素原子等；D1＝D2表示式：-CH＝CH-等；E表示式：-O-或-NH-等；G表示C1-10亚烷基等；R7代表氢原子、苯基等：
发明内容
本发明提供了抑制Btk和治疗与不期望的Btk活性相关的疾病(Btk相关的疾病)的方法和组合物。
在一个实施方案中，本发明提供了下式的Btk抑制剂或化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐：
其中：
A为5或6元芳族环，其包含0-3个杂原子N、S或O；
每个W独立地为-(CH2)-或者-C(O)-；
L为键、CH2、NR12、O或者S；
S/D为单键或者双键；且当为双键时，R5和R7不存在；
m为0或1-4的整数；
n为0或1-4的整数，其中当n大于1时，每个R2可以是不同的；
p是0或1-2的整数，其中当p为0时，m为非零的，且当p大于1时，每个R6和每个R7可以是不同的；
R1、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢、卤素、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或者不饱和的杂环基、杂芳基、炔基、-CN、-NR13R14、-OR13、-COR13、-CO2R13、-CONR13R14、-C(＝NR13)NR14R15、-NR13COR14、-NR13CONR14R15、-NR13CO2R14、-SO2R13、-NR13SO2NR14R15或者-NR13SO2R14，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基和饱和或者不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代，其中(R4和R5)或(R4和R6)或(R6和R7)或(当p为2时，R6和R6)连同它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或者不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；
R2为卤素、烷基、-S-烷基、-CN、-NR13R14、-OR13、-COR13、-CO2R13、-CONR13R14、-C(＝NR13)NR14R15、-NR13COR14、-NR13CONR14R15、-NR13CO2R14、-SO2R13、-NR13SO2NR14R15或者-NR13SO2R14；
R12为氢和低级烷基；
R13、R14和R15各自独立地为氢、杂烷基、烷基、烯基、炔基、环烷基、饱和或者不饱和的杂环基、芳基或者杂芳基；其中(R13和R14)和/或(R14和R15)连同它们所连接的原子一起各可形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或者不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；
R16为卤素、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基、氧代、-CN、-OR’、-NR’R”、-COR’、-CO2R’、-CONR’R”、-C(＝NR’)NR”R”’、-NR’COR”、-NR’CONR’R”、-NR’CO2R”、-SO2R’、-SO2芳基、-NR’SO2NR”R”’或者NR’SO2R”，其中R’、R”和R”’独立地为氢、卤素、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基，其中(R’和R”)和/或(R”和R”’)连同它们所连接的原子一起可形成环，所述环选自环烷基、饱和或者不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；
在示例性的具体实施方案中：
(a)S/D为双键，且R5和R7不存在；
(b)R1为氢、卤素、烷氧基、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代；
(c)p为1且m为0、1或2，优选0或者1；
(d)A为苯基；
(e)每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基；
(f)R4和R6与它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；
(g)R4和R6与它们所连接的原子一起形成下式的环：
其中：Q为-CH2；J为-CH2-；且d和b各自独立地为0或1-4的整数；
(h)S/D为单键。
(i)p为0，且R6和R7不存在。
本发明包括所列举的具体实施方案的所有结合，例如，上面的(a)-(i)，如同每个结合被费力地分别列举一样。
具体的实施方案的示例性结合：
(i)S/D为双键，且R5和R7不存在；R1为氢、卤素、烷氧基、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代；且R16为卤素、低级烷基或低级烷氧基；
(ii)S/D为双键，且R5和R7不存在；p为1且m为0或1(或2)；
(iii)S/D为双键，且R5和R7不存在；p为1且m为0或1(或2)；A为苯基；且每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基(参见，式II)；
(iv)S/D为双键，且R5和R7不存在；且R4和R6与它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或不饱和的杂环、芳基和杂芳基环。
(v)S/D为双键，且R5和R7不存在；R4和R6与它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；A为苯基；且每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基。
(vi)S/D为双键，且R5和R7不存在；R4和R6与它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；p为1且m为0或1(或2)；A为苯基；且每个R2独立地选自卤素、低级烷基或低级烷氧基；且R4-R6环为下式的环：
其中Q为-CH2-；J是-CH2-；且d和b各自独立地为0，或1-4的整数(参见，式III)；
(vii)S/D为双键，且R5和R7不存在；R4和R6与它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；p为1且m为0或1(或2)；A为苯基；且每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基；且R4-R6环为下式的环：
其中Q为-CH2-；J为-CH2-；且d和b各自独立地为0，或1-4的整数；且R1是氢、卤素、烷氧基、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代；
(viii)S/D为单键；p为1且m为0、1或2；A为苯基；且每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基(参见，式IV)；
(ix)S/D为单键；p为1且m为0、1或2；A为苯基；每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基，且R1为氢、卤素、烷氧基、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代；且R16为卤素、低级烷基或低级烷氧基；
(x)S/D为单键；p为0，且R6和R7不存在；A为苯基；且每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基(参见，式V)；
(xi)S/D为单键；p是0，且R6和R7不存在；A为苯基；且每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基，且R1是氢、卤素、烷氧基、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代；且R16为卤素、低级烷基或低级烷氧基；
在具体的实施方案中，本发明提供选自式II、III、IV和V的化合物、其立体异构体以及其药学上可接受的盐，其中取代基如本文所定义：
本发明还提供了本文实施例或者表I、II或III(下面)的化合物、其立体异构体以及其药学上可接受的盐。
本发明还提供具有抑制Btk活性的化合物，化合物在BTK激酶试验中具有10uM以下的IC50。
本发明还提供了包含治疗有效量的单位剂量形式的本发明的化合物和一种或多种药学上可接受的载体的药物组合物。
本发明还提供了包含治疗有效量的本发明的化合物和对自身免疫性疾病和/或炎症疾病具有治疗活性的另一试剂的结合物。
本发明还提供了治疗Btk相关的疾病或与不期望的Btk活性相关的疾病、特别是过敏性疾病、自身免疫性疾病(例如，类风湿关节炎)、炎症疾病或癌症(例如：B细胞增殖性病症，如慢性淋巴细胞性淋巴瘤，非霍奇金淋巴瘤，弥漫性大B细胞淋巴瘤，套细胞淋巴瘤，滤泡性淋巴瘤或慢性淋巴细胞白血病)的方法，该方法一般包括向需要的哺乳动物给予有效量的本发明的化合物、其N-氧化物或其前药，和任选地检测疾病或者症状的改善情况，或者Btk抑制。
本发明还提供了包含单位剂量的、可给药形式的本发明的化合物的药物组合物，和诱导细胞自噬的方法，该方法包括向有需要的人给予有效量的本发明的化合物或组合物。
本发明也提供了用作药物的本发明的化合物，以及本发明的化合物在制备用于治疗Btk相关的疾病的药物中的用途。
具体实施方式
本文公开了能够抑制酪氨酸激酶的化合物，例如Btk、Blk、Bmx、EGFR、ERBB2、ERBB4、Itk、Jak3、Tec和Txk激酶。
在本发明中，除非上下文中另有所指，下面所要用到的单词、短语和符号，要表达的含义有如下规定。以下缩写和术语的含义贯穿整文：
术语“烷基”是指烃基，所述烃基选自饱和的直链和支链烃基，其包括1-18或者1-12或者1-6个碳原子。烷基的实例包括甲基、乙基、1-丙基或正丙基("n-Pr")、2-丙基或异丙基("i-Pr")、1-丁基或正丁基("n-Bu")、2-甲基-1-丙基或异丁基("i-Bu")、1-甲基丙基或仲丁基("s-Bu")，以及1,1-二甲基乙基或叔丁基("t-Bu")。其他的烷基的例子包括1-戊基、2-戊基、3-戊基、2-甲基-2-丁基、3-甲基-2-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-1-丁基、1-己基、2-己基、3-己基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、3-甲基-3-戊基、2-甲基-3-戊基、2,3-二甲基-2-丁基和3,3-二甲基-2-丁基基团。
低级烷基是指具有1-8、优选1-6、更优选1-4个碳原子；低级烯基或炔基是指具有2-8、2-6或2-4个碳原子。
术语“烯基”指的是选自直链和支链烃基的烃基，其包括至少一个C＝C双键和2-18或者2-12或者2-6个碳原子。烯基的实例可以选自乙烯基(ethenyl或vinyl)、丙-1-烯基、丙-2-烯基、2-甲基丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、丁-1,3-二烯基、2-甲基丁-1,3-二烯基、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、己-4-烯基，和己-1,3-二烯基基团。
术语“炔基”指的是选自直链和支链烃基的烃基，其包括至少一个C≡C三键和2-18或者2-12或者2-6个碳原子。炔基的实例包括乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基(炔丙基)、1-丁炔基、2-丁炔基和3-丁炔基基团。
术语“环烷基”指的是选自饱和和部分不饱和的环烃基的烃基，其包括单环和多环(例如，双环和三环)基团。例如，环烷基可以具有3-12或者3-8或者3-6个碳原子。另外，例如，环烷基可以是具有3-12或者3-8或者3-6个碳原子的单环基团。单环环烷烃基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、环己基、1-环己-1-烯基、1-环己-2-烯基、1-环己-3-烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一烷基和环十二烷基。双环环烷基的实例包括由7-12个环原子排列组成选自[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]和[6,6]环体系的双环或选自双环[2.2.1]庚烷、双环[2.2.2]辛烷和双环[3.2.2]壬烷的桥连双环的那些。所述环可以是饱和的或具有至少一个双键(即，部分不饱和的)，但不是完全共轭的，且不是芳香族的(如本文所定义的芳香族)。
本文中的术语“芳基”指选自如下的基团：5元和6元碳环芳族环，例如，苯基；双环体系如7-12元双环体系，其中至少一个环是碳环和芳族环，选自例如萘、1,2-二氢化茚和1,2,3,4-四氢喹啉；以及三环体系如10-15元三环体系，其中至少一个环是碳环和芳族环，如芴。
例如，芳基选自5元和6元碳环芳族环，所述碳环芳族环稠合至5-7元环烷基或任选地包含至少一个选自N、O和S的杂原子的杂环上，条件是当所述碳环芳族环稠合至杂环时连接点在碳环芳族环上，当碳环芳族环稠合至环烷基时连接点可在碳环芳族环上或在环烷基上。由取代的苯衍生物形成且在环原子上具有自由价的二价基团被称为取代的亚苯基基团。通过从具有自由价的碳原子移除一个氢原子而衍生自其名称以“基”结尾的单价多环烃的二价基团通过在相应的单价基团的名称中加入“亚基”而命名，如具有两个连接点的萘基称作亚萘基。然而，芳基不包括杂芳基或与杂芳基重叠，其在下面分别定义。因此，如果一个或多个碳环芳族环与杂环芳族环稠合，所得到的环体系为本文中定义的杂芳基，而非芳基。
术语“卤素”或“卤”指的是F、Cl、Br或I。
术语“杂烷基”是指包括至少一个杂原子的烷基。
术语“杂芳基”是指选自如下的基团：
5-7元芳族单环，其包含1、2、3或者4个选自N、O和S的杂原子，其余的环原子为碳；
8-12元双环，其包括1、2、3或者4个选自N、O和S的杂原子，其余的环原子为碳，且其中至少一个环是芳族的，并且至少一个杂原子存在于芳族环中；且
11-14元三环，其包括1、2、3或者4个选自N、O和S的杂原子，其余的环原子是碳，并且其中至少一个环是芳族的，且至少一个杂原子存在于芳族环中。
例如，杂芳基包括稠合至5-7元环烷基环上的5-7元杂环芳族环。对于该稠合的双环杂芳基环体系，其中仅一个环包含至少一个杂原子，连接点可以在杂芳族环或环烷基环上。
当杂芳基中的S和O原子的总数超过1时，这些杂原子彼此不相邻。在一些实施方案中，杂芳基中的S和O原子的总数不超过2。在一些实施方案中，芳族杂环中S和O原子的总数不超过1。
杂芳基的实例包括，但不局限于(从优先指定的连接位置1编号)吡啶基(例如2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基)、噌啉基，吡嗪基、2,4-嘧啶基、3,5-嘧啶基、2,4-咪唑基、咪唑并吡啶基、异噁唑基、噁唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、四唑基、噻吩基、三嗪基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、苯并咪唑基、吲哚基、异吲哚基、二氢吲哚基、酞嗪基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、三唑基、喹啉基、异喹啉基、吡唑基、吡咯并吡啶基(如1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)、吡唑并吡啶基(如1H-吡唑并[3,4-b]吡啶-5-基)、苯并噁唑基(如苯并[d]噁唑-6-基)、蝶啶基、嘌呤基、1-氧杂-2,3-二唑基、1-氧杂-2,4-二唑基、1-氧杂-2,5-二唑基、1-氧杂-3,4-二唑基、1-硫杂-2,3-二唑基、1-硫杂-2,4-二唑基、1-硫杂-2,5-二唑基、1-硫杂-3,4-二唑基、呋吖基、苯并呋吖基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、呋喃并吡啶基、苯并噻唑基(如苯并[d]噻唑-6-基)、吲唑基(如1H-吲唑-5-基)和5,6,7,8-四氢异喹啉。
术语“杂环的”或“杂环”或“杂环基”指的是选自如下的环：4-12元的单环、双环和三环的饱和和部分不饱和的环，其除了选自氧、硫和氮的1、2、3或者4个杂原子外包含至少一个碳原子。“杂环”也指与5、6和/或7元环烷基、碳环芳族或杂芳族环稠合并包含至少一个选自N、O和S的杂原子的5-7元杂环，条件是当杂环与碳环芳族或杂芳族环稠合时连接点在杂环上，且当杂环与环烷基稠合时连接点可在环烷基或杂环上。
“杂环”也指包含至少一个选自N、O和S的杂原子的脂族螺环，条件是连接点在杂环上。所述环可以是饱和的或含有至少一个双键(即部分不饱和的)。所述杂环可被氧代(oxo)取代。连接点可以是杂环中的碳原子或杂原子。杂环不是本文中定义的杂芳基。
杂环的实例包括，但不局限于(从优先指定的连接位置1编号)1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、2,4-咪唑烷基、2,3-吡唑烷基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、2,5-哌嗪基、吡喃基、2-吗啉基、3-吗啉基、环氧乙烷基(oxiranyl)、氮杂环丙烯基(aziridinyl)、环硫乙烷基(thiiranyl)、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、1,2-二硫杂环丁烷基、1,3-二硫杂环丁烷基、二氢吡啶基、四氢吡啶基、硫代吗啉基、噻噁烷基(thioxanyl)、哌嗪基、高哌嗪基、高哌啶基、氮杂环庚烷基(azepanyl)、氧杂环庚烷基(oxepanyl)、硫杂环庚烷基(thiepanyl)、1,4-氧硫杂环己烷基(oxathianyl)、1,4-二氧杂环庚烷基、1,4-氧硫杂环庚烷基、1,4-氧氮杂环庚烷基、1,4-二硫杂环庚烷基、1,4-硫氮杂环庚烷基和1,4-二氮杂环庚烷1,4-二噻烷基、1,4-氮硫杂环己烷基、氧氮杂卓基、二氮杂卓基、硫氮杂卓基、二氢噻吩基、二氢吡喃基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、1,4-二噁烷基、1,3-二氧环戊基、吡唑啉基、吡唑烷基、二硫杂环己烷基、二硫环戊基、吡唑烷基咪唑啉基(pyrazolidinylimidazolinyl)、嘧啶酮基、1,1-二氧代-硫代吗啉基、3-氮杂双环[3.1.0]己烷基、3-氮杂双环[4.1.0]庚烷基、氮杂双环[2.2.2]己烷基。取代的杂环还包括被一个或多个氧代部分取代的环体系，如哌啶基N-氧化物、吗啉基-N-氧化、1-氧代-1-硫代吗啉基和1,1-二氧代-1-硫代吗啉基。
取代基选自：卤素、-R'、-OR'、＝O、＝NR'、＝N-OR'、-NR'R"、-SR'、-SiR'R"R'"、-OC(O)R'、-C(O)R'、-CO2R'、-CONR'R"、-OC(O)NR'R"、-NR"C(O)R'、-NR'-C(O)NR"R'"、-NR'-SO2NR'"、-NR"CO2R'、-NH-C(NH2)＝NH、-NR'C(NH2)＝NH、-NH-C(NH2)＝NR'、-S(O)R'、-SO2R'、-SO2NR'R"、-NR"SO2R、-CN和-NO2、-N3、-CH(Ph)2、全氟(C1-C4)烷氧基和全氟(C1-C4)烷基，取代基个数从0到3，这些基团特别优选具有0、1或者2个取代基。R'、R"和R'"各自独立地选自氢、未取代的(C1-C8)烷基和杂烷基、未取代的芳基、含有1-3个卤素取代的芳基、未取代的烷基、烷氧基或者硫代烷氧基，或者芳基-(C1-C4)烷基。当R'和R"连接在相同的氮原子上时，它们能够结合氮原子形成5、6或者7元环。因此，-NR'R"包括1-吡咯烷基和4-吗啉基，“烷基”包括例如三卤代烷基(如，-CF3和-CH2CF3)，且当芳基是1,2,3,4-四氢萘时，它可以被取代或者未取代的(C3-C7)螺环烷基所取代。(C3-C7)螺环烷基可以按照与本文中定义“环烷基”的方式相同的方式被取代。
优选的取代基选自：卤素、-R'、-OR'、＝O、-NR'R"、-SR'、-SiR'R"R'"、-OC(O)R'、-C(O)R'、-CO2R'、-CONR'R"、-OC(O)NR'R"、-NR"C(O)R'、-NR"CO2R'、-NR'-SO2NR"R'"、-S(O)R'、-SO2R'、-SO2NR'R"、-NR"SO2R、-CN和-NO2、全氟(C1-C4)烷氧基和全氟(C1-C4)烷基，其中R'和R"如上定义。
本文中的术语“稠环”指的是如下的多环体系例如二环或三环体系，其中两个环仅共享两个环原子和一个键。稠环的实例可以包括稠合的双环烷基环，如由7-12个环原子排列组成的选自上述[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]和[6,6]环体系的双环；稠合双环芳基环，例如上述7-12元双环芳基环体系，稠合的三环芳基环，例如上述10-15元三环芳基环体系；稠合的双环杂芳基环，例如上述8-12元双环杂芳基环，稠合的三环杂芳基环，例如上述11-14元三环杂芳基环；以及上述稠合的双环或三环杂环基环。
所述化合物可以含有一个不对称中心，因而可以作为对映异构体存在。当所述化合物具有两个或多个不对称中心，它们另外可以作为非对映异构体存在。对映异构体和非对映异构体落入立体异构体这一更广泛的类型中。所有这些可能的立体异构体包括基本上纯的拆分对映异构体(resolved enantiomer)、其外消旋混合物和非对映异构体混合物。包括所述化合物的所有立体异构体和/或其药学上可接受的盐。除非另作说明，所提及的一个异构体适用于任何可能的异构体。当未具体指明异构体组分时，包括所有可能的异构体。
术语"基本上纯的"指的是目标立体异构体包含不超过35重量％、例如不超过30重量％、进一步例如不超过25重量％、甚至进一步例如不超过20重量％的任何其他的立体异构体。在一些实施方案中，术语“基本上纯的”指的是目标立体异构体包含不超过10重量％、例如不超过5重量％、例如不超过1重量％的任何其他的立体异构体。
当化合物包含烯烃双键时，除非另作说明，这些双键意指包括E和Z几何异构体。
一些化合物可以存在不同的氢连接点，被称为互变异构体。例如，包含羰基-CH2C(O)-基团(酮式)的化合物可以经历互变异构形成羟基-CH＝C(OH)-基团(烯醇式)。应用时，也旨在包含单独的酮式和烯醇式以及其混合物。
将反应产物彼此分离或者与原料分离是有利的。每一步或系列步骤的目标产物通过本领域中常用的技术被分离和/或纯化(下文中使用分离)至期望的均一性。通常，所述分离包括多相提取、从溶剂或混合溶剂中结晶、蒸馏、升华或色谱法。色谱法可以包含许多方法，包括例如：反相和正相；尺寸排阻；离子交换；高、中、低压液相色谱法和设备；小型分析(small scale analytical)；模拟移动床(“SMB”)和制备型薄层或厚层色谱法，以及小型薄层和快速色谱技术。本领域技术人员使用这些技术达到所需分离度。
非对映异构体混合物可基于它们的物理化学差异通过本领域技术人员熟知的方法如通过色谱法和/或分级结晶法被分离成单独的非对映异构体。对映异构体可通过如下方法分离：对映异构体混合物与合适的光学活性化合物(例如，手性助剂如手性醇或Mosher酰氯)反应而转化为非对映异构体混合物，分离非对映异构体并将各非对映异构体转化(如水解)为相应的纯的对映异构体。对映异构体还可用手性HPLC柱分离。
单一的立体异构体(例如基本上纯的对映异构体)可以通过利用如使用光学活性拆分剂形成非对映异构体的方法(Eliel，E.和Wilen，S.Stereochemistry of Organic Compounds.New York:John Wiley&Sons，Inc.，1994；Lochmuller，C.H.，等人."Chromatographic resolution ofenantiomers:Selective review."J.Chromatogr.,113(3)(1975):第283-302页)拆分外消旋混合物而获得。本发明的手性化合物的外消旋混合物可通过任何适合的方法分离，包括：(1)与手性化合物形成离子的、非对映异构的盐，并通过分级结晶或其他方法分离，(2)与手性衍生化试剂形成非对映异构的化合物，分离非对映异构体并转化成纯的立体异构体，(3)在手性条件下直接分离基本上纯的或富集的立体异构体。参见：Wainer，Irving W.，Ed.Drug Stereochemistry:Analytical Methods andPharmacology.New York：Marcel Dekker，Inc.，1993。
“药学上可接受的盐”包括但不限于无机酸的盐，选自例如，盐酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、氢溴酸盐、硫酸盐、亚硫酸盐和硝酸盐；以及有机盐的盐，选自例如苹果酸盐、马来酸盐、延胡索酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、2-羟基乙基磺酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、链烷酸盐如乙酸盐，以及HOOC-(CH2)n-COOH的盐，其中n选自0-4。类似地，药学上可接受的阳离子的实例包括但不限于钠盐、钾盐、钙盐、铝盐、锂盐和铵盐。
另外，如果化合物作为酸加成盐获得，则游离碱可以通过碱化酸式盐的溶液而获得。相反地，如果产物是游离碱，加成盐(例如药学上可接受的加成盐)可以通过将游离碱溶于合适的有机溶剂并且用酸处理溶液而制备，与由碱性化合物制备酸加成盐的常规过程一致。本领域技术人员应了解无需过度实验而可用于制备无毒的药学上可接受的加成盐的各种合成方法。
“治疗(Treating或treat或treatment)”指的是向患有例如癌症的被认为有需要的受试者给予至少一种化合物和/或至少一种其立体异构体和/或至少一种其药学上可接受的盐。
“有效量”指的是至少一种化合物和/或至少一种其立体异构体和/或至少一种其药学上可接受的盐有效“治疗”受试者的疾病或病症的量，该量在一定程度上会引起被研究的组织、系统、动物或者人的生物学或者医学反应，例如当给药时，足以预防所治疗的病症或者疾病的一种或多种症状的发展，或者在一定程度上减轻所治疗的病症或者疾病的一种或多种症状。治疗有效量根据化合物、疾病及其严重程度、待治疗的哺乳动物的年龄、体重等而变化。
术语“至少一个取代基”包括，例如，从1-4、例如1-3、进一步例如1-2个取代基。例如本文中“至少一个取代基R16”包括1-4、例如1-3、进一步例如12个选自本文所述的R16列表中的取代基。
本发明提供了下式的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐：
R1(以及R4、R5、R6和R7)各自独立地为氢、卤素、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或者不饱和的杂环基、杂芳基、炔基、-CN、-NR13R14、-OR13、-COR13、-CO2R13、-CONR13R14、-C(＝NR13)NR14R15、-NR13COR14、-NR13CONR14R15、-NR13CO2R14、-SO2R13、-NR13SO2NR14R15或者-NR13SO2R14，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基和饱和或者不饱和的杂环基可任选地被至少一个取代基R16取代。
R13、R14和R15各自独立地为氢、杂烷基、烷基、烯基、炔基、环烷基、饱和或者不饱和的杂环基、芳基或者杂芳基；其中(R13和R14)和/或(R14和R15)与它们所连接的原子一起各可以形成选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或者不饱和的杂环、芳基和杂芳基环的环；在一些具体的实施方案中，R13、R14和R15各自独立地为氢、低级烷基或低级烷氧基。
R16为卤素、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基、氧代、-CN、-OR’、-NR’R”、-COR’、-CO2R’、-CONR’R”、-C(＝NR’)NR”R”’、-NR’COR”、-NR’CONR’R”、-NR’CO2R”、-SO2R’、-SO2芳基、-NR’SO2NR”R”’或者NR’SO2R”，其中R’、R”和R”’独立地为氢、卤素、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基，其中(R’和R”)和/或者(R”和R”’)与它们所连接的原子一起可以形成选自环烷基、饱和或者不饱和的杂环、芳基和杂芳基环的环；
在一些具体的实施方案中，在R1上的R16为卤素、低级烷基或低级烷氧基。
在一些具体的实施方案中，R1是任选的杂烃、任选取代的烃，选自杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代，其中环状结构优选地为包含0-3个N、S或O杂原子的3-8元环结构，且芳基优选地为包含0-3个N、S或O杂原子的5或6元芳族环，其中烃优选地为C1-C12或C1-C8烃。
在一些具体的实施方案中，R1为杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代。
在一些具体的实施方案中，R1为低级烷基或烯基，任选地为环状且任选地被特别是卤素、低级烷基或低级烷氧基取代，并且包含0-3个N、S或O杂原子。实例包括甲基环丙基、环己基、环戊基、甲氧基乙基、卤化物、甲基、乙基、丙基和丁基。其他示例性R1部分包括5元芳族环，如吡咯、吡唑、咪唑、呋喃和其加氢产物(例如，吡咯烷、吡唑烷、咪唑烷、四氢呋喃)，以及6元环，如苯(苯基)、吡啶、吡喃、二嗪、三嗪和四嗪及其加氢产物(例如，环己烷、二氢吡啶和四氢吡啶、哌啶、四氢吡喃等)，其各自可以被特别是卤素、低级烷基或低级烷氧基取代。
L为键、CH2、NR12、O或者S，其中R12为氢或者低级烷基例如甲基。
A为5或6元芳族环，包含0-3个N、S或O杂原子。优选5元芳族环，包括吡咯、吡唑、咪唑、呋喃，以及6元环，包括苯(苯基)、吡啶、吡喃、二嗪、三嗪和四嗪。
n为0、1、2、3或4，其中当n大于1时，每个R2可以是不同的。在具体的实施方案中，n为0(即A是未取代的)。
R2为卤素、烷基、-S-烷基、-CN、-NR13R14、-OR13、-COR13、-CO2R13、-CONR13R14、-C(＝NR13)NR14R15、-NR13COR14、-NR13CONR14R15、-NR13CO2R14、-SO2R13、-NR13SO2NR14R15或-NR13SO2R14；其中R13、R14和R15各自独立地为氢、杂烷基、烷基、烯基、炔基、环烷基、饱和或者不饱和的杂环基、芳基或者杂芳基；其中(R13和R14)和/或(R14和R15)与它们所连接的原子一起各可以形成选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或者不饱和的杂环、芳基和杂芳基环的环。
在一些具体的实施方案中，R2为卤素、烷基、-S-烷基、-CN、-NR13R14、-OR13、-COR13、-CO2R13、-CONR13R14、-C(＝NR13)NR14R15、-NR13COR14、-NR13CONR14R15、-NR13CO2R14、-SO2R13、-NR13SO2NR14R15和-NR13SO2R14，优选地其中烷基(包括-S-烷基)是低级烷基，且R13、R14和R15各自独立地为氢、低级烷基或低级烷氧基。
在一些具体的实施方案中，R2为卤素、低级烷基或低级烷氧基。
每个W独立地为-CH2-或者-C(O)-，其中如果m是2、3或4，则优选不超过一个W是羰基；
S/D为单键或者双键，且当为双键时，R5和R7不存在；
m为0、1、2、3或者4，优选0、1、2或者3，且在一些具体的实施方案中为0、1或者2，或者0或者1。
p为0(且R6和R7不存在)，或1-2的整数，其中当p为0时，m为非零的，并且当p大于1时，每个R6和R7可能是不同的；通常p+m为1、2、3或者4，优选1、2或者3，在具体实施方案中为1。
在一些实施例中，p为2，且m为0或者1；p为1，且m为0或者1(或者0、1或者2)；或者p为0，且m为1或者2(或者1、2或者3)。
R4和R5，或R4和R6，或R6和R7，或R6和R6(当p为2时)，与它们所连接的原子一起形成选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或者不饱和的杂环、芳基和杂芳基环的环。这些环通常为4-8元环，包括5元芳族环，如吡咯、吡唑、咪唑、呋喃及其加氢产物(例如，吡咯烷、吡唑烷、咪唑烷、四氢呋喃)，以及6元环，如苯(苯基)、吡啶、吡喃、二嗪、三嗪和四嗪及其加氢产物(例如，环己烷、二氢吡啶和四氢吡啶、哌啶、四氢吡喃等)，其每一个可以是未取代或者特别地被卤素、低级烷基、低级烷氧基、-COR’或者NR’COR”取代，其中R’、R”为取代或者未取代的烯基。
在具体实施方案中，R4和R5(或R6和R7，或当p为2时R6和R6)形成哌啶、氮杂环庚烷基或氮杂环丁烷，其任选地被如苄基、酰基、丙烯酰基等部分取代、特别是N-取代。
在具体实施方案中，R4和R6与它们所连接的原子一起形成下式的环：
其中：
Q为-CH2；J为-CH2-；且d和b各自独立地为0，或1-4的整数。
在具体实施方案中，R4和R6形成苯基、哌啶、氮杂环庚烯基、吡咯烷，其任选地被如苄基、酰基、丙烯酰基、甲胺-丙烯酰基等部分取代、特别是N-取代。
本发明包括所列举的具体的和优选的实施方案的所有结合，如同各结合被费力地分别列举一样。例如，在上文的具体实施方案中，A为苯基；W为-(CH2)-；L为O；S/D为单键；m为1；n为0；p为1；R1为苯基；R2不存在；R5为H；且R6和R7为H；所得到的组合:
上文中的R4，包括含N的C1-C8烷基，含N的C3-C8环烷基和苯基，例如，甲胺、苯胺、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、氮杂环庚烯基，其各自任选地被如苄基、酰基、丙烯酰基、取代的丙烯酰基、炔丙酰基、取代的炔丙酰基等部分取代、特别是N-取代，如以下结构组合：
在具体实施例中，R4为1-丙烯酰基哌啶-4-基(如化合物27)或1-(丁-2-炔酰基)哌啶-4-基(如化合物176)。
本发明还提供了本文实施例以及表I、II和III中的所有化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐。
本发明的化合物及其立体异构体及其药学上可接受的盐在治疗中可以单独使用或者与至少一种其他治疗剂结合使用。在一些实施方案中，化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐可以与至少一种额外的治疗剂结合使用。至少一种额外的治疗剂例如可以选自抗过度增殖剂、抗癌剂和化疗剂。本文公开的化合物和/或一种药学上可接受的盐可以和至少一种其他治疗剂以单一剂型或者作为不同剂型给药。当作为不同剂型给药时，至少一种其他治疗剂可在本文公开的化合物和/或一种药学上可接受的盐给药之前、同时或者之后给药。
“化疗剂”是一种不考虑作用机制用于治疗癌症的化合物。化疗剂包括用于“靶向治疗”和常规化疗中的化合物。合适的化疗剂可以选自例如引起细胞凋亡的试剂；多核苷酸(如，核酶)；多肽(如，酶)；药物；生物模拟物；生物碱；烷基化试剂；抗肿瘤的抗生素；抗代谢物；激素；铂化合物；与抗癌药物、毒素和/或放射性核素结合的单克隆抗体；生物应答调节剂(例如干扰素，如IFN-a，和白细胞介素，如IL-2)；过继免疫治疗剂；造血生长因子；引起肿瘤细胞分化的试剂(如全反式维甲酸)；基因治疗试剂；反义治疗试剂和核苷酸；肿瘤疫苗；和血管再生抑制剂。
化疗剂的实例包括厄洛替尼(Genentech/OSIPharm.)；硼替佐米(Millennium Pharm.)；氟维司群(AstraZeneca)；舒尼替尼(Pfizer)；来曲唑(Novartis)；伊马替尼甲磺酸盐(Novartis)；PTK787/ZK 222584(Novartis)；奥沙利铂(Sanofi)；5-FU(5-氟尿嘧啶)；亚叶酸钙；雷帕霉素(Sirolimus，Wyeth)；拉帕替尼(GSK572016，Glaxo Smith Kline)；洛那法尼(SCH 66336)；索拉非尼(Bayer)；伊立替康(Pfizer)和吉非替尼(AstraZeneca)；AG1478、AG1571(SU 5271，Sugen)；烷基化试剂，如噻替派和环磷酰胺；烷基磺酸盐，例如白消安、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡；氮杂环丙烷，如benzodopa、卡波醌(carboquone)、meturedopa和uredopa；乙烯亚胺和甲基三聚氰胺(methylamelamine)如六甲蜜胺、三亚乙基三聚氰胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和三羟甲三聚氰胺；多聚乙酰(如泡番枝辛(bullatacin)和bullatacinone)；喜树碱(如托泊替康的合成类似物)；苔藓抑素；callystatin；CC-1065及其阿多来新、卡折来新和比折来新的合成类似物；念珠藻素(cryptophycin)(如念珠藻素1和念珠藻素8)；多拉司他汀；duocarmycin及其合成类似物，如KW-2189和CB1-TM1；五加素(eleutherobin)；pancratistatin；sarcodictyin；软海绵素(spongistatin)；氮芥，如苯丁酸氮芥、chlomaphazine、氯磷酰胺、雌氮芥、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺、双氯乙基甲胺氧化物盐酸盐、马法兰、新恩比兴(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼氮芥(prednimustine)、三芥环磷酰胺、尿嘧啶氮芥；亚硝基脲，如卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和ranimnustine；抗生素，如烯二炔类抗生素(如卡里奇霉素γ1I和卡里奇霉素ωI1(Angew Chem.Intl.Ed.Engl.(1994)33:183-186))；dynemicin，如dynemicin A；二膦酸盐，如氯膦酸盐；埃斯培拉霉素；和新制癌菌素发色团，以及相关的色素蛋白烯二炔类抗生素的发色团、aclacinomysin、放线菌素(actinomycin)、authramycin、重氮丝氨酸、博莱霉素、放线菌素C(cactinomycin)、carabicin、caminomycin、嗜癌菌素(carzinophilin)、chromomycinis、放线菌素D(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸、(阿霉素)、吗啉基-阿霉素、氰基吗啉基-阿霉素、2-吡咯啉基-阿霉素和脱氧阿霉素)、表阿霉素(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素如丝裂霉素C、霉酚酸、诺加霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycins)、培洛霉素、泊非霉素(porfiromycin)、嘌呤霉素、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑菌素、链脲菌素、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物，如氨甲喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，如二甲叶酸(denopterin)、氨甲喋呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物，如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，如环胞苷、阿扎胞苷、6-氮杂尿苷(6-azauridine)、卡莫氟、阿糖胞苷、二脱氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷；雄激素，如卡普睾酮(calusterone)、屈他雄酮丙酸酯(dromostanolone propionate)、环硫雄醇、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯；抗肾上腺素，如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂如亚叶酸(frolinic acid)；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基酮戊酸；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶；bestrabucil；比生群(bisantrene)；edatraxate；defofamine；脱羰秋水仙碱(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；elformithine；依利醋铵(elliptinium acetate)；埃博霉素；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；lonidainine；美登木素生物碱(maytansinoids)，如美登素(maytansine)和安丝菌素(ansamitocins)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌；mopidanmol；nitraerine；喷司他丁；苯来美特(phenamet)；吡柔比星；洛索蒽醌(losoxantrone)；足业草酸(podophyllinic acid)；2-乙基酰肼；甲基苄肼；多糖复合物(JHSNatural Products，Eugene，Oreg.)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；sizofuran；锗螺胺(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2’,2”-三氯三乙胺；单端孢素(如T-2毒素、verracurin A、漆斑菌素A(roridin A)和蛇形菌素(anguidine))；氨基甲酸乙酯；长春地辛；氮烯咪胺；甘露醇氮芥；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；胍血生(pipobroman)；gacytosine；阿拉伯糖苷("Ara-C")；环磷酰胺；塞替派；紫杉烷，例如，(紫杉醇；Bristol-Myers Squibb Oncology，Princeton，N.J.)、(不含氢化蓖麻油)、白蛋白工程紫杉醇纳米颗粒制剂(American Pharmaceutical Partners，Schaumberg，Ill.)，和(doxetaxel；Rhone-Poulenc Rorer，Antony，France)；chloranmbucil；(吉西他滨)；6-硫代鸟嘌呤；巯基嘌呤；氨甲喋呤；铂类似物，如顺铂、卡铂；长春花碱；依托泊苷(etoposide)(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；(长春瑞滨)；米托蒽醌(novantrone)；替尼泊苷；依达曲沙(edatrexate)；道诺霉素；氨基蝶呤；卡培他滨()；伊班膦酸；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视色素，如视黄酸；以及上述任一种的药学上可接受的盐、酸和衍生物。
“化疗剂”也可以选自，例如：(i)用于调节或者抑制激素作用于肿瘤的抗激素剂，如抗雌激素，和选择性雌激素受体调节剂(SERMs)，包括，例如他莫昔芬(包括他莫昔芬柠檬酸盐)、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬、keoxifene、LY117018、奥那司酮和(toremifine柠檬酸盐)；(ii)抑制芳香酶的芳香酶抑制剂，其调节肾上腺中的雌激素产生，例如，4(5)-咪唑、氨鲁米特、(醋酸甲地孕酮)、(依西美坦；Pfizer)、formestanie、法倔唑、(伏氯唑)、(来曲唑；Novartis)和(阿那曲唑；AstraZeneca)；(iii)抗雄激素，如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林(leuprolide)和戈舍瑞林；和曲沙他滨(troxacitabine)(1,3-二氧戊环核苷胞嘧啶类似物)；(iv)蛋白激酶抑制剂；(v)脂质激酶抑制剂；(vi)反义寡核苷酸，如抑制异常细胞增殖的信号通路中的基因表达的那些，如PKC-α、Ralf和H-Ras；(vii)核酶，如VEGF表达抑制剂(如，)和HER2表达抑制剂；(viii)疫苗，如基因治疗疫苗，如和 rIL-2；拓扑异构酶1抑制剂，如 rmRH；(ix)抗血管生成剂，如贝伐单抗(Genentech)；和(x)上述任一种的药学上可接受的盐、酸和衍生物。
“化疗剂”也可以选自，如，治疗抗体，如阿仑单抗(Campath)、贝伐单抗(Genentech)；西妥昔单抗(Imclone)；帕尼单抗(Amgen)、利妥昔单抗(Genentech/Biogen Idec)、帕妥珠单抗(2C4，Genentech)、曲妥珠单抗(Genentech)、托西莫单抗(Bexxar,，Corixia)，和抗体药物结合物，吉妥珠单抗奥唑米星(Wyeth)。
与本发明化合物及其立体异构体、其药学上可接受的盐结合的具有潜在疗效的人源化单克隆抗体——其作为化疗剂——可例如选自：阿仑单抗、阿泊珠单抗、阿塞珠单抗、atlizumab、bapineuzumab、贝伐单抗、bivatuzumab mertansine、cantuzumab mertansine、cedelizumab、赛妥珠单抗、cidfusituzumab、cidtuzumab、达利珠单抗，依库丽单抗(eculizumab)、依法利珠单抗、依帕珠单抗(epratuzumab)、厄利珠单抗(erlizumab)、泛维珠单抗(felvizumab)、fontolizumab、吉妥珠单抗奥唑米星、inotuzumab ozogamicin、易普利姆玛(ipilimumab)、labetuzumab、林妥珠单抗、马妥珠单抗(matuzumab)、美泊利单抗、莫维珠单抗(motavizumab)、motovizumab、那他珠单抗、尼妥珠单抗、nolovizumab、numavizumab、ocrelizumab、奥马珠单抗、帕利珠单抗、帕考珠单抗(pascolizumab)、pecfusituzumab、pectuzumab、帕妥珠单抗、培克珠单抗(pexelizumab)、ralivizumab、雷珠单抗、reslivizumab、reslizumab、resyvizumab、罗维珠单抗(rovelizumab)、卢利珠单抗(ruplizumab)、西罗珠单抗(sibrotuzumab)、希普利珠单抗(siplizumab)、索土珠单抗、替他珠单抗(tacatuzumab tetraxetan)、他度珠单抗(tadocizumab)、他利珠单抗、tefibazumab、托珠单抗、toralizumab、曲妥珠单抗、tucotuzumab celmoleukin、tucusituzumab、umavizumab、urtoxazumab和维西珠单抗(visilizumab)。
也提供了一种药物组合物，其包含本发明的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体。
包含本发明的化合物、其立体异构体、其药学上可接受的盐的组合物可以用各种已知的方式给药，如口服、外敷、直肠给药、肠胃外给药、吸入喷雾给药或者通过植入药盒给药，尽管在任何给定的情况下最适合的给药途径取决于特定的宿主以及将给予活性成分的病症的性质和严重程度。本文使用的术语“肠胃外给药”包括皮下、皮内、静脉、肌肉内、关节内、动脉内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内和颅内注射或者输液技术。本文所公开的组合物可方便地以单位剂型提供，并且可通过本领域中熟知的任何方法制备。
本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐可以固体剂型口服给药，如胶囊、片剂、锭剂、糖衣剂、颗粒剂和粉末剂，或者以液体剂型口服给药，如酏剂、糖浆剂、乳剂、分散剂和悬浮剂。本文公开的本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐也可以无菌液体剂型肠胃外给药，如分散剂、悬浮剂或者溶液剂。本文公开的还可用于给予本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐的其他剂型如下：对于外敷给药，如软膏、乳膏、滴剂、用于外敷给药的透皮贴剂或者粉末剂，对于眼部给药，如眼用溶液剂或悬浮剂形式(即滴眼液)，对于吸入或鼻腔给药，如气溶胶喷雾剂或者粉末剂组合物，对于直肠或阴道给药，如乳膏、软膏、喷雾剂、栓剂。
也可使用包含本文公开的化合物和/或其至少一种药学上可接受的盐和粉末状载体的明胶胶囊，所述载体如乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸等。类似的稀释剂可以用来压片。片剂和胶囊可作为持续释放产品制备，以在一段时间内提供药物的连续释放。压缩的片剂可以用糖包衣或者薄膜包衣以掩盖任何令人不愉快的味道，同时防止片剂接触空气，或者用肠溶包衣以在胃肠道里选择性崩解。
用于口服给药的液体剂型还可包括至少一种选自着色剂和矫味剂的试剂，以增加患者的接受度。
通常，肠胃外给药溶液剂的合适载体的实例可以是水、合适的油、盐、葡萄糖水溶液(葡萄糖)及相关的糖溶液和二醇如丙二醇或者聚乙二醇。肠胃外给药的溶液剂包含本文描述的至少一种化合物的水溶性盐、至少一种合适的稳定剂，如有必要，至少一种缓冲物。合适的稳定剂的实例可为抗氧化剂如亚硫酸氢钠、亚硫酸钠或者抗坏血酸，其单独或者结合使用可以是。合适的稳定剂的实例也可为柠檬酸及其盐和乙二胺四乙酸钠。此外，肠胃外给药溶液剂还可包含至少一种防腐剂，选自如苯扎氯胺、甲基对羟基苯甲酸酯和丙基对羟基苯甲酸酯和氯丁醇。
药学上可接受的载体例如选自与所述组合物的活性成分相容(在一些具体实施方案中，能够稳定活性成分)且不会对被治疗的受试者有害的载体。例如，增溶剂可以用作药物赋形剂来输送活性成分，如环糊精(其能够和本文公开的至少一种化合物和/或者至少一种药学上可接受的盐形成特定的、更易溶的复合物)。其他载体的实例包括胶体二氧化硅、硬脂酸镁、纤维素、十二烷基硫酸钠，和颜料如D&C黄色10号。合适的药学上可接受的载体描述于Remington's Pharmaceutical Sciences,A.Osol中，其为本领域的标准参考文本。
本文公开的本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐可通过体内试验进一步检测治疗Btk相关疾病的功效。例如，本文公开的化合物和/或至少一种其药学上可接受的盐可向患有Btk相关疾病的动物(例如小鼠模型)给药，并评估其治疗效果。在一个或者多个这种测试中得到的阳性结果足以增强科学知识宝库，进而足以显示所测试的化合物和/或盐的实用性。基于这些结果，可以确定对动物如人的合适的剂量范围和给药途径。
对于吸入式给药，本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐可以从压缩包或者喷雾器中以气溶胶喷雾剂的形式方便地给予。本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐也可作为粉末剂给予，其可经配制，且粉末剂组合物可在喷射粉末吸入器装置的辅助下吸入。一个示例性吸入给药体系可以是定量吸入(MDI)气雾剂，，其可配制为本文公开的本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐于至少一种合适的推进物(如选自碳氟化合物和烃)中的悬浮剂或者溶液剂。
对于眼部给药，眼用制剂可用本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐于合适的眼用媒介物中的合适重量百分比的溶液剂或悬浮剂配制，以使本发明的化合物、其立体异构体以及至少一种其药学上可接受的盐保持与眼部表面接触足够长的时间，从而能让化合物渗透到眼睛的角膜和内部区域。
用于给予本文公开的本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐的有用的药物剂型包括但不限于，硬明胶胶囊和软明胶胶囊、片剂、肠胃外注射剂，和口服悬浮剂。
给药剂量将取决于如下因素，如接受者的年龄、健康程度和体重、疾病的程度、同时治疗的种类，如果有，治疗的频率和期望效果的性质。通常，活性成分的每日剂量是可以变化的，例如，每天0.1-2000毫克。例如，每天10-500毫克，分一次或者多次，可有效达到期望的效果。
在一些实施方案中，大量的单位胶囊可通过将标准两件套硬明胶胶囊各填充如下物质而制备：例如，100毫克粉末形式的本文公开的本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐、150毫克乳糖、50毫克纤维素，和6毫克硬脂酸镁。
在一些实施方案中，可制备本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐和可消化的油(如大豆油、棉花籽油或者橄榄油)的混合物并通过正排量泵(positive displacement pump)注入明胶以形成包含100毫克活性成分的软明胶胶囊。所述胶囊经洗涤和干燥。
在一些实施方案中，大量的片剂可以通过常规过程制备，以使剂量单位包含，例如，100毫克本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可以接受的盐、0.2毫克胶体二氧化硅、5毫克硬脂酸镁、275毫克微晶纤维素、11毫克淀粉和98.8毫克乳糖。可施用合适的包衣以提高适口性或者延迟吸收。
在一些实施方案中，适用于注射给药的肠胃外组合物可以通过在10体积％的丙二醇中搅拌1.5重量％的本发明的化合物和/或至少一种对映异构体、非对映异构体或者其药学上可接受的盐而制备。该溶液用注射用水配制成预期体积，再灭菌。
在一些实施方案中，可制备用于口服给药的水性悬浮剂。例如，可使用每5毫升含有100毫克细碎化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐、100毫克羧甲基纤维素钠、5毫克苯甲酸钠、1克山梨醇溶液(美国药典(U.S.P.))和0.025毫升香草醛的水性悬浮剂。
当本发明的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐逐步给药或与至少一种其他治疗剂结合给药时，通常可以使用相同的剂型。当药物以物理结合的方式给药时，应根据结合药物的相容性选择剂型和给药途径。因此，术语“共同给药”应理解为包含至少两种试剂同时或者依次给药，或者作为至少两种活性组分的固定剂量结合。
本文公开的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐可作为单一活性成分给药或者和至少一种其他活性成分结合给药，所述其他活性成分选自例如已知用于治疗患者的Btk相关疾病的其他活性成分。
应理解的是，本文所述的实施例和实施方案仅为列举说明目的，本领域技术人员可以据此进行各种修饰或者改变，并且这些修饰和改变均包括在本发明的主旨和范围内以及所附权利要求的范围内。针对所有目的，本文中所引用的所有公开出版物、专利和专利申请(包括其中的引文)的全部内容均通过参引的方式纳入本文。
化合物制备的一般反应方案
本发明的化合物及其药学上可接受的盐可由如下物质制备：(a)市售可得的起始物质(b)可如文献过程中的记载来制备的已知的起始物质(c)本文的方案和实验过程中所描述的新中间体。在制备本发明的化合物的过程中，可改变合成步骤的顺序，以提高期望产物的收率。本发明中的一些化合物可以通过以下反应方案及其描述产生。
方案I
上述方案I示出了用于制备本发明化合物S-6的一般合成路线，其中A、R1、R2、R4、R6、L和n如本文所述。甲基酮S-1在N,N-二烷基甲酰胺的缩醛或者N,N-二烷基乙酰胺的缩醛中在回流温度下反应若干小时，得到3-二烷基氨基-1-(芳基、杂芳基或烷基)-2-丙烯-1-酮S-2。中间体S-3可通过与国际专利公开号WO2001/019829和WO2011/046964中描述的那些方法基本上类似的方法制备。中间体S-3和适当取代的3-二烷基氨基-1-(芳基、杂芳基或烷基)-2-丙烯-1-酮S-2在弱酸如乙酸，或在含有催化量酸的惰性溶剂如甲苯、乙腈或二甲氧基乙烷中在80℃至回流温度下反应若干小时，得到腈化合物S-4。用还原剂如硼氢化钠(NaBH4)、Pd/C或NaBH4随后用Pd/C还原嘧啶环得到四氢吡唑并嘧啶S-5，随后腈在碱性条件下例如于醇中的NaOH或KOH加H2O2，或者在酸性条件下例如H3PO4、H2SO4或者BF3·HOAc中水解，得到甲酰胺S-6。
方案II
方案II描述了制备甲酰胺S-13的一般合成路线，其中A、R1、R2、R4、R5、L、n和p如本文所述。被保护的肼S-7可通过文献中描述的方法(J.Med.Chem.1992,35,2392)方便地制备。用酸脱保护，随后该结构单元与中间体S-10(也在国际专利公开号WO2001/019829和WO2011/046964中描述)在碱性溶剂如TEA/乙醇中缩合得到吡唑酯S-9。吡唑醇S-11可由酯S-9通过还原过程制备。可用于该过程的还原剂包括，但不限于LiBH4、NaBH4和三乙基硼氢化锂(Super hydride)。分子内N-烷基化或还原胺化得到腈化合物S-12，通过方案Ⅰ中描述的相同方法将其转化成甲酰胺S-13。
方案III
方案III描述了制备甲酰胺S-13的其他路线。
方案IV
上述方案IV示出了已用于制备本发明化合物S-19和S-20的一般合成路线，其中A、R1、R2、R4、R6、L和n如本文所述。腈S-3通过与方案I中描述的方法相同的方法水解得到甲酰胺S-18。吡唑甲酰胺S-18或者吡唑腈S-3与市售可得的或者制备的卤代酮S-23环化得到位置异构体S-19和S-20,或者S-21和S-22。腈S-21和S-22根据方案I水解得到甲酰胺S-19和S-20。
方案V
上述方案V示出了用于制备本发明化合物S-27的一般合成路线，其中A、R1、R2、R4、R6、L、m和n如本文所述。根据方案II的步骤之一，吡唑S-25通过中间体S-10与市售可得的或制备的肼S-24在醇中环化而制备。中间体S-25的分子内环化用包括但并不限于下列方法进行：Cu催化偶联、Buchwald反应、SN2反应或还原胺化。最终，腈S-26根据方案I水解得到甲酰胺S-27。或者，通过亲核取代反应，然后通过分子内环化，得到甲酰胺S-27。
方案VI
上述方案VI示出了已用于制备本发明化合物S-30的一般合成路线，其中A、R1、R2、R4、R6、L、m和n如本文所述。分子内酰胺S-30通过在碱如K2CO3和TEA的存在下在惰性溶剂如DMF中加热腈S-3或甲酰胺S-18和酯S-29的混合物，而制备。
方案VII
上述方案VII示出了已用于制备本发明化合物S-32的一般合成路线，其中A、R1、R2、R4、L和n如本文所述。酰胺S-32通过在弱酸如乙酸或在含有催化量酸的惰性溶剂如甲苯、乙腈或二甲氧基乙烷中加热腈S-3或甲酰胺S-18和β-酮酯S-31的混合物而制备。
方案VIII
上述方案VIII示出了已用于制备本发明化合物S-36的一般合成路线，其中A、R1、R2、R6、R7、L、W、m和n如本文所述。腈S-3或甲酰胺S-18和市售可得的或制备的中间体S-33，的分子间环化在碱如K2CO3和TEA的存在下在惰性溶剂如DMF中进行，得到化合物S-36。或者，腈S-3或甲酰胺S-18和二醛S-34缩合，随后还原，得到化合物S-36。
实施例
下面的实施例纯粹是示例性的，不应被认为以任何方式限制。已作出努力确保使用数据的准确性(如，量、温度等)，但仍应考虑一些实验误差和偏差。除非另有说明，温度是指摄氏度。试剂购自Sigma-Aldrich、Alfa Aesar或者TCI等供货商，除非另有说明，使用时未作进一步的纯化。
除非另有说明，如下反应一般在氮气或者氩气的正压下或者用干燥管在无水溶剂中进行；反应烧瓶配有橡胶塞以便通过注射器加入底物和试剂；玻璃器皿通过烘干和/或者加热干燥。
1H NMR谱在400MHz下用Agilent仪器记录。1H NMR谱采用CDCl3、CD2Cl2、CD3OD、D2O、d6-DMSO、d6-丙酮或(CD3)2CO作为溶剂，四甲基硅烷(0.00ppm)或者残余溶剂(CDCl3：7.25ppm；CD3OD：3.31ppm；D2O：4.79ppm；d6-DMSO：2.50ppm；d6-丙酮：2.05；(CD3)2CO：2.05)作为参考标准获得。当表示峰的多重性时，使用如下缩写：s(单峰)、d(双峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、qn(五重峰)、sx(六重峰)、m(多重峰)、br(宽峰),dd(双二重峰),dt(双三重峰)。给出的耦合常数用赫兹(Hz)表示。
LC-MS光谱仪(Agilent 1260)检测器：MWD(190-400nm)，质谱检测器：6120 SQ
流动相：A：含有0.1％甲酸的乙腈，B：含有0.1％甲酸的水
柱：Poroshell 120 EC-C18，4.6×50mm，2.7μm
梯度方法：流速：1.8mL/min
制备型HPLC在柱(150×21.2mmID，5μm，Gemini NX-C18)上操作，流速为20mL/min，进样体积为2mL，室温，在214nm和254nm进行紫外检测。
在下面的实施例中，使用到下面的缩写：
盐水             饱和氯化钠水溶液
BnNH2            苄胺
CbzCl            氯甲酸苄酯
DCM              二氯甲烷
DCE              1,2-二氯乙烷
DIEA             N,N-二异丙基乙胺
DMF              N,N-二甲基甲酰胺
DMF-DMA          N,N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛
DMAP             N,N-二甲基吡啶-4-胺
DCC              N,N-二环己基碳二亚胺
DHP              3,4-二氢-2H-吡喃
EA               乙酸乙酯
HATU             O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯
HOAc             乙酸
H2O2             30％(w/w)过氧化氢水溶液
IPA              异丙醇
MTBE             甲基叔丁基醚
MsCl             甲磺酰氯
NBS              N-溴代琥珀酰亚胺
Pd/C             钯碳粉
Pd(OH)2/C        氢氧化钯碳粉
PE               石油醚
PPh3             三苯基膦
Pre-TLC          制备型薄层色谱
sat.             饱和的
Tf2O             三氟甲磺酸酐
THF              四氢呋喃
TEA              三乙胺
TMSCHN2          (三甲基甲硅烷基)重氮甲烷
TMSCl            氯三甲基硅烷
实施例1：化合物1-4的合成
化合物1：7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
步骤1：2-(羟基(4-苯氧基苯基)亚甲基)丙二腈
4-苯氧基苯甲酸(300g，1.4mol)于SOCl2(1.2L)的溶液在80℃下在N2下搅拌3小时。混合物真空浓缩得到中间体(315g)，所述中间体未经进一步纯化，直接用于下一步。
在0～5℃下，在2小时的时间段内，向丙二腈(89.5g，1355mmol)和DIEA(350g，2710mmol)于THF(800mL)的溶液中滴加中间体(315g)于甲苯(800mL)中的溶液。所得混合物升温至室温，并搅拌16小时。反应用水(2.0L)淬灭，并用EA(2.0L×3)萃取。有机层用1000ml 3N HCl水溶液、盐水(2.0L×3)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到粗产物(330g，93％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.62(d,J＝8.8Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(d,J＝8.0Hz,2H),6.94(d,J＝8.8Hz,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+262.9。
步骤2：2-(甲氧基(4-苯氧基苯基)亚甲基)丙二腈
将2-(羟基(4-苯氧基苯基)亚甲基)丙二腈(50g，190.8mmol)于CH(OMe)3(500ml)的溶液加热至75℃，持续16小时。随后将混合物浓缩至残余物，并用MeOH(50mL)洗涤，得到25g(47.5％)黄色固体状的2-(甲氧基(4-苯氧基苯基)亚甲基)丙二腈。1H NMR(DMSO-d6)δ7.70(d,J＝8.4Hz,2H),7.52-7.45(m,2H),7.28(t,J＝7.6Hz,1H),7.22-7.06(m,4H),3.93(s,3H)。MS(ESI)m/e[M+1]+276.9。
步骤3：5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈
向2-(甲氧基(4-苯氧基苯基)亚甲基)丙二腈(80g，290mmol)于乙醇(200mL)的溶液中加入水合肼(20mL)。混合物在室温下搅拌16小时，随后浓缩，得到粗产物，并用MeOH(30mL)洗涤，得到55g(68.8％)灰白色固体状的5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈。1H NMR(DMSO-d6)δ12.11(br s,1H),7.80(d,J＝8.8Hz,2H),7.46-7.39(m,2H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.12-7.04(m,4H),6.43(br s,2H)。
步骤4：(E)-N-(3-(3-(二甲基氨基)丙烯酰基)苯基)乙酰胺
N-(3-乙酰基苯基)乙酰胺(1.77g，10.0mmol)于DMF-DMA(6mL)的溶液与分子筛(10份)在100℃下在N2下搅拌2小时。浓缩混合物，并用MTBE(30mL)洗涤，得到2.1g(90％)黄色固体状的(E)-N-(3-(3-(二甲基氨基)丙烯酰基)苯基)乙酰胺。
步骤5：N-(3-(3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)乙酰胺
向(E)-N-(3-(3-(二甲基氨基)丙烯酰基)苯基)乙酰胺(46mg，0.2mmol)于HOAc(5mL)的溶液中加入5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(55mg，0.2mmol)。混合物在118℃下搅拌4小时。随后将反应混合物浓缩至残留物，并在乙酸乙酯(100mL)和盐水(100mL)之间分配。分离有机层，用盐水(100mL×2)洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩，得到80mg(90％)无色油状的N-(3-(3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)乙酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+446。
步骤6：7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向N-(3-(3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)乙酰胺(285mg，0.64mmol)于乙醇(6mL)的溶液中加入HCl(3mL)。混合物在75℃下搅拌3小时。浓缩，得到250mg(97％)黄色固体状的7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.90(d,J＝4.4Hz,1H),8.67(br s,2H),8.15(d,J＝8.8Hz,2H),8.06(s,1H),7.87(d,J＝8.0Hz,1H),7.64(t,J＝8.0Hz,1H),7.57(d,J＝4.4Hz,1H),7.48-7.44(m,3H),7.25-7.18(m,3H),7.13(d,J＝8.0Hz,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+404。
化合物2：7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(150mg，0.372mmol)于乙醇(10mL)的溶液中加入硼氢化钠(70mg，1.86mmol)。混合物在室温下搅拌16小时，在60℃下搅拌2小时。然后将反应混合物浓缩至残留物并在EA(50mL)和盐水(40mL)之间分配。从水层中分离出有机层，用盐水(50mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到135mg(粗)黄色固体状的7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈。MS(ESI)m/e[M+1]+408。
步骤2：7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(130mg，0.32mmol)于DMSO(2mL)和乙醇(2mL)的溶液中加入5N的NaOH水溶液(1mL)和H2O2(1mL)。混合物在60℃下搅拌30分钟，浓缩，并在EA(100mL)和盐水(100mL)之间分配。分离有机层，用盐水洗涤(3×100mL)，用Na2SO4干燥，并通过硅胶色谱柱(用PE/EA洗脱)纯化，得到35mg(26％)黄色固体状的7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.50(d,J＝8.4Hz,2H),7.40-7.33(m,2H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(d,J＝8.0Hz,2H),7.03(d,J＝8.4Hz,2H),6.97(t,J＝7.6Hz,1H),6.76(s,1H),6.44(d,J＝8.4Hz,1H),6.23-6.21(m,2H),5.30-5.25(m,1H),5.09(s,2H),3.30-3.28(m,1H),3.12-3.02(m,1H),2.34-2.26(m,1H),2.05-2.01(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+426。
通过手性制备型HPLC将化合物2分离成两种对映立体异构体化合物2a(峰1，R或S，在手性分析中的保留时间为8.94min)，和化合物2b(峰2，S或R，在手性分析中的保留时间为10.11min)。手性分离条件如下所示：
手性分析条件如下所示：
化合物3和4：7-(3-丙烯酰胺基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-α]嘧啶-3-甲酰胺和7-(3-(3-氯代丙酰胺基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-α]嘧啶-3-甲酰胺
向7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(30mg，0.071mmol)于DCM(2mL)的溶液中加入吡啶(0.2mL)。然后滴加丙烯酰氯(6mg，0.084mmol)。混合物在室温下搅拌0.5小时，并在DCM(20mL)和盐水(20mL)之间分配。从水层中分离出有机层，用盐水(2×20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，并通过制备型TLC(DCM/CH3OH＝10/1)纯化，得到1.82mg(5.38％)白色固体状的7-(3-丙烯酰胺基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-α]嘧啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.58(d,J＝8.8Hz,1H),7.46(d,J＝8.8Hz,2H),7.34-7.26(m,4H),7.10(t,J＝7.6Hz,1H),7.04-6.95(m,4H),6.84(d,J＝7.6Hz,1H),6.39-6.25(m,2H),5.69(dd,J＝2.4,9.6Hz,1H),5.47-5.44(m,1H),3.38-3.31(m,1H),3.22-3.12(m,1H),2.52-2.42(m,1H),2.23-2.17(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+480。
2.21mg白色固体状的副产物7-(3-(3-氯代丙酰胺基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-α]嘧啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.52(d,J＝8.8Hz,2H),7.42-7.30(m,4H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),7.09-7.01(m,4H),6.89(d,J＝8.0Hz,1H),5.53-5.48(m,1H),3.85(t,J＝6.4Hz,2H),3.44-3.37(m,1H),3.26-3.19(m,1H),2.83(t,J＝6.4Hz,2H),2.60-2.44(m,1H),2.33-2.22(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+516.2。
根据与用于化合物3的过程类似的过程，由2a和2b化合物3a(峰1，R或S，保留时间为4.45min)和3b(峰2，R或S，保留时间为7.41min)。
手性分析条件如下所示：
化合物5：7-(2-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
根据与用于7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(步骤4到5)、化合物2(步骤1和2)和化合物68(步骤8)的过程类似的过程在本领域普通技术人员熟知的合适的条件下，由1-(2-硝基苯基)乙酮和5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈制备期望的产物。1HNMR(DMSO-d6)δ7.48-7.44(m,2H),7.40-7.33(m,2H),7.15-7.09(m,1H),7.05-6.97(m,4H),6.92(td,J＝8.0,1.2Hz,1H),6.75(br s,1H),6.64(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),6.46(td,J＝7.6,1.2Hz,1H),6.23(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),5.57-5.52(m,1H),5.19(br s,2H),3.27-3.17(m,1H),2.93(td,J＝2.8,12.0Hz,1H),2.21-2.11(m,1H),2.10-2.05(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+426.0。
通过手性制备型HPLC将化合物5分离成两种对映立体异构体化合物5a(峰1，R或S，在手性分析中的保留时间为7.30min)，和化合物5b(峰2，S或R，在手性分析中的保留时间为9.68min)。手性分离条件如下所示：
手性分析条件如下所示：
化合物6：7-(2-丙烯酰胺基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
根据与用于化合物3的过程类似的过程由化合物5和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ9.81(s,1H),7.50-7.32(m,5H),7.26(td,J＝7.6,1.2Hz,1H),7.21-7.08(m,2H),7.04-6.98(m,4H),6.79(s,1H),6.60(dd,J＝7.6,1.2Hz,1H),6.50(dd,J＝17.0,10.2Hz,1H),6.24(dd,J＝17.0,1.9Hz,1H),5.77-5.74(m,2H),3.26-3.22(m,1H),2.98-2.92(m,1H),2.32-2.25(m,1H),1.96-1.93(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+480。
根据与用于化合物3的过程类似的过程由5a和5b制备化合物6a(峰1，R或S，保留时间为4.02min)和6b(峰2，R或S，保留时间为6.68min)。
手性分析条件如下所示：
实施例2：化合物7和8的合成
化合物7：7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(4mg，0.01mmol)于DCE(2mL)的溶液中加入活性MnO2(100mg，1.15mmol)。混合物在75℃下搅拌2小时并过滤。滤液用制备型TLC(DCM/CH3OH＝10/1)纯化，得到2mg(50％)黄色固体状的7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,CD3OD-d4和CDCl3-d1)δ8.62(d,J＝4.4Hz,1H),7.88(d,J＝8.8Hz,2H),7.41-7.39(m,2H),7.31-7.26(m,3H),7.11(d,J＝4.4Hz,1H),7.10-7.04(m,1H),7.01-6.97(m,4H),6.90-6.86(m,1H)。
化合物8：7-(3-丙烯酰胺基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg，0.24mmol)于DCM(10mL)的溶液中加入TEA(3滴)，随后加入丙烯酰氯(32mg，0.36mmol)。混合物在室温下搅拌1分钟，并在DCM(50mL)和盐水(50mL)之间分配。从水层中分离出有机层，用Na2SO4干燥、浓缩并通过制备型TLC(DCM/CH3OH＝10/1)纯化，得到12mg(11％)白色固体状的7-(3-丙烯酰胺基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),8.80(d,J＝4.4Hz,1H),8.47(s,1H),8.07(s,1H),7.95(d,J＝8.8Hz,2H),7.89(d,J＝8.4Hz,1H),7.81(d,J＝8.0Hz,1H),7.56(t,J＝8.0Hz,1H),7.47(br s,1H),7.42-7.37(m,3H),7.15(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(d,J＝8.0Hz,2H),7.01(d,J＝8.8Hz,2H),6.44(dd,J＝10.1,16.9Hz,1H),6.26(dd,J＝1.6,16.9Hz,1H),5.76(dd,J＝1.6,10.1Hz,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+476。
实施例3：化合物9-10的合成
化合物9：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(苄氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1、2、3：5-氨基-3-(4-(苄氧基)苯基)-1H-吡唑-4-甲腈
根据与用于5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈的那些过程(步骤1-3)类似的过程，在本领域普通技术人员熟知的合适的条件下，由4-(苄氧基)苯甲酸制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.01(s,1H),7.72(d,J＝8.8Hz,2H),7.50-7.44(m,2H),7.44-7.37(m,2H),7.36-7.32(m,1H),7.11(d,J＝7.2Hz,2H),6.39(br s,2H),5.16(s,2H)。
步骤4、5：2-(4-(苄氧基)苯基)-7-(2-硝基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
根据与用于N-(3-(3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)乙酰胺的那些过程(步骤4和步骤5)类似的过程，在本领域普通技术人员熟知的合适的条件下，由1-(2-硝基苯基)乙酮和5-氨基-3-(4-(苄氧基)苯基)-1H-吡唑-4-甲腈制备期望的产物。
步骤6：7-(2-氨基苯基)-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向2-(4-(苄氧基)苯基)-7-(2-硝基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈于CH3OH(20mL)和DCM(20mL)的溶液中加入10％w/w Pd/C(300mg)。该混合物在H2中在室温下搅拌16小时。过滤并通过硅胶色谱柱(用DCM/CH3OH洗脱)纯化，得到0.92g(62％)黄色固体状的7-(2-氨基苯基)-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈。MS(ESI,m/e)[M+1]+331.9。
步骤7：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(苄氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向7-(2-氨基苯基)-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(331mg，1.0mmol)于丙酮(10mL)的溶液中加入(溴甲基)苯(204mg，1.2mmol)和K2CO3(276mg，2.0mmol)。混合物在室温下搅拌16小时。加入50mL丙酮并过滤。浓缩滤液，得到400mg(95％)黄色固体状的7-(2-氨基苯基)-2-(4-(苄氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈。MS(ESI)m/e[M+1]+421.9。
步骤8：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(苄氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物2的步骤2类似的过程，由7-(2-氨基苯基)-2-(4-(苄氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈制备期望的化合物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.47-7.33(m,7H),7.06(d,J＝8.4Hz,2H),6.96(t,J＝7.6Hz,1H),6.75(br s,1H),6.68(d,J＝7.6Hz,1H),6.50(t,J＝7.6Hz,1H),6.28(d,J＝7.6Hz,1H),5.59-5.54(m,1H),5.19(br s,2H),5.12(s,2H),3.30-3.20(m,1H),3.02-2.92(m,1H),2.25-2.14(m,1H),2.13-2.03(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+439.9。
化合物10：7-(2-丙烯酰胺基苯基)-2-(4-(苄氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由7-(2-氨基苯基)-2-(4-(苄氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.84(s,1H),7.46-7.37(m,7H),7.33-7.28(m,2H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(d,J＝8.8Hz,2H),6.81(brs,1H),6.64(d,J＝7.6Hz,1H),6.53(dd,J＝10.3,16.8Hz,1H),6.27(d,J＝1.8,16.8Hz,1H),5.59-5.57(m,2H),5.12(s,2H),3.30-3.26(m,1H),3.04-2.92(m,1H),2.35-2.27(m,1H),1.95-1.97(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+493.9。
通过手性制备型HPLC将化合物10分离成两种对映立体异构体化合物10a(峰1，R或S，在手性分析中的保留时间为3.15min)，和化合物10b(峰2，S或R，在手性分析中的保留时间为3.91min)。手性分离条件如下所示：
手性分析条件如下所示：
实施例4：化合物11-12的合成
化合物11：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：2-(3-氰基-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基氨基甲酸苄酯
向7-(2-氨基苯基)-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(730mg，2.21mmol),于THF(30mL)的溶液中加入K2CO3(610mg，4.42mmol)、CbzCl(564mg，3.32mmol)。在65℃下搅拌16小时，混合物在真空中浓缩。残余物在150mLDCM和150mL盐水之间分配。从水层分离出有机层，用Na2SO4干燥，并通过硅胶色谱柱纯化(用DCM/CH3OH洗脱)，得到370mg(62％)白色固体状的2-(3-氰基-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基氨基甲酸苄酯。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.71(s,1H),9.33(s,1H),7.66(s,1H),7.58(d,J＝8.4Hz,2H),7.44-7.28(m,7H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),6.79(d,J＝8.4Hz,2H),6.59(d,J＝7.6Hz,1H),5.82-5.77(m,1H),5.17(s,2H),3.25-3.18(m,1H),2.97-2.87(m,1H),2.36-2.24(m,1H),2.08-2.00(m,1H)。
步骤2：2-(3-氰基-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基氨基甲酸苄酯
向2-(3-氰基-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基氨基甲酸苄酯(370mg，0.8mmol)于20mL的DCM的溶液中加入4-氟苯基硼酸(167mg，1.2mmol)、TEA(162mg，1.6mmol)和Cu(OAc)2(216mg，1.2mmol)。在室温下搅拌16小时，向混合物中加入100mLDCM)、10mL CH3OH和100mL盐水。从水层分离出有机层，用盐水(100mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，并通过硅胶色谱柱纯化(用DCM/CH3OH洗脱)，得到334mg(75％)白色固体状的2-(3-氰基-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基氨基甲酸苄酯。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.34(s,1H),7.76-7.74(m,3H),7.45-7.10(m,12H),7.02(d,J＝8.4Hz,2H),6.59(d,J＝8.0Hz,1H),5.85-5.80(m,1H),5.17(s,2H),3.25-3.18(m,1H),2.97-2.87(m,1H),2.36-2.24(m,1H),2.08-2.00(m,1H)。
步骤3：2-(3-氨基甲酰基-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯氨基甲酸苄酯
用与用于化合物2的步骤2类似的过程，由2-(3-氰基-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基氨基甲酸苄酯制备期望的产物。MS(ESI)m/e[M+1]+577.9。
步骤4：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向2-(3-氨基甲酰基-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基氨基甲酸苄酯(100mg，0.17mmol)于5ml DCM和5mlCH3OH的溶液中加入10％w/w Pd/C(50mg)。在H2下在室温下搅拌16小时之后，将混合物过滤，滤饼用DCM/CH3OH(1/1，50mL)洗涤。浓缩滤液，并用硅胶色谱柱纯化(用DCM/CH3OH洗脱)，得到10mg(13％)白色固体状的7-(2-氨基苯基)-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ7.39(d,2H,J＝8.8Hz),7.02-6.91(m,7H),6.66(d,J＝7.6Hz,1H),6.53(t,J＝7.6Hz,1H),6.33(d,J＝7.6Hz,1H),5.54-5.50(m,1H),3.30-3.24(m,1H),3.12-3.06(m,1H),2.31-2.20(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+443.9。
化合物12：7-(2-丙烯酰胺基苯基)-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由7-(2-氨基苯基)-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ7.47(d,J＝8.4Hz,2H),7.39(t,J＝7.6Hz,1H),7.33(t,J＝7.6Hz,1H),7.26(t,J＝7.6Hz,1H),7.12-7.00(m,6H),6.81(d,J＝8.0Hz,1H),6.53-6.46(m,1H),6.39-6.35(m,1H),5.87-5.76(m,1H),5.73-5.69(m,1H),3.36-3.30(m,1H),3.22-3.17(m,1H),2.45-2.39(m,1H),2.17-2.14(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+497.9。
实施例5：化合物13-14的合成
化合物13:7-(2-(甲基氨基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：N-(2-(3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺
向7-(2-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(60mg，0.15mmol)于5mL DCM的溶液中加入3滴DIEA和3滴三氟乙酸酐。反应混合物在室温下搅拌2小时，然后在水(20mL)和DCM(20mL)之间分配。浓缩有机层，得到黄色固体状的产物(50mg，收率：67％),未经进一步纯化直接用于下步反应。
步骤2：7-(2-(甲基氨基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向N-(2-(3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺(50mg，0.1mmol)于5mL丙酮的溶液中加入KOH(11.2mg，0.2mmol)和CH3I(0.5mL)。反应混合物在室温下搅拌15小时，然后浓缩除去丙酮。残余物在20mL水和20mL EA之间分配。浓缩有机层，并通过制备型TLC(PE/EA＝2/1)纯化，得到白色固体状的产物(15mg，收率：37％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.82(d,J＝4.4Hz,1H),7.97(d,J＝8.8Hz,2H),7.47-7.38(m,4H),7.31(dd,J＝1.6,7.2Hz,1H),7.23-7.17(m,3H),7.11(d,J＝8.8Hz,2H),6.77-6.69(m,2H),5.35-5.31(m,1H),2.68(d,J＝4.8Hz,3H)。MS(ESI)m/e[M+1]+417.9。
步骤3：7-(2-(甲基氨基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向7-(2-(甲基氨基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(250mg，0.6mmol)于10mL EtOH的溶液中加入NaBH4(100mg)。反应混合物在室温下搅拌15小时，然后浓缩除去EtOH。残余物在30mL水和30mL EA之间分配。浓缩有机层。残余物溶解在10mL MeOH中，再加入10％w/w Pd/C(50mg)。反应混合物在室温下在1atm.的H2下搅拌15小时。然后，过滤混合物。浓缩滤液，用快速色谱法(PE/EA＝1/1)纯化，得到白色固体状的产物(144mg，收率：56.5％)。MS(ESI)m/e[M+1]+421.9。
步骤4：7-(2-(甲基氨基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物2的步骤2类似的过程，由7-(2-(甲基氨基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ7.49(d,J＝8.8Hz,2H),7.44-7.35(m,2H),7.18-7.01(m,6H),6.76(s,1H),6.58(d,J＝7.6Hz,2H),6.54(t,J＝7.6Hz,1H),6.28(dd,J＝1.2,7.6Hz,1H),5.60-5.57(m,1H),5.50-5.49(m,1H),3.29-3.24(m,1H),2.98-2.93(m,1H),2.76(d,J＝4.8Hz,3H),2.24-2.18(m,1H),2.06-2.03(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+439.8。
化合物14:7-(2-(N-甲基丙烯酰胺基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由7-(2-(甲基氨基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ7.45-7.37(m,6H),7.29-7.24(m,1H),7.15(t,J＝7.6Hz,1H),7.06-7.00(m,5H),6.81(d,J＝7.6Hz,1H),6.25-6.16(m,2H),5.94-5.87(m,1H),5.63-5.51(m,1H),5.41-5.35(m,1H),3.41-3.22(m,5H),2.41-1.97(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+493.9。
实施例6：化合物15-16的合成
化合物15：2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-7-(2-(甲基氨基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：N-(2-(3-氰基-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺
向7-(2-氨基苯基)-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(33.1mg，0.1mmol)于DCM(10mL)的溶液中加入三氟乙酸酐(1滴)和DIEA(1滴)。在室温下搅拌1小时后，混合物在10mL DCM和10mL盐水之间分配。从水层分离出有机层，用Na2SO4干燥并浓缩，得到40mg(93％)黄色固体状的N-(2-(3-氰基-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+427.8。
步骤2：N-(2-(3-氰基-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺
向N-(2-(3-氰基-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺(42.7mg，0.10mmol)于DCM(3mL)的溶液中加入4-氟苯基硼酸(17mg，0.12mmol)、TEA(21mg，0.2mmol)和Cu(OAc)2(22mg，0.12mmol)。在室温下搅拌16小时后，混合物通过制备型TLC(DCM/CH3OH＝20/1)纯化，得到30mg(57％)无色油状的N-(2-(3-氰基-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.33(s,1H),7.90-7.77(m,3H),7.52-7.37(m,3H),7.34-7.27(m,2H),7.22-7.14(m,2H),7.10(d,J＝8.8Hz,2H),6.80(d,J＝6.4Hz,1H),5.80-5.75(m,1H),3.37-3.28(m,1H),3.09-2.95(m,1H),2.50-2.37(m,1H),2.10-1.95(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+521.8。
步骤3：N-(2-(3-氰基-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺
向N-(2-(3-氰基-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺(187mg，0.36mmol)于丙酮(10mL)的溶液中加入K2CO3(100mg，0.72mmol)和CH3I(15滴)。在室温下搅拌2小时后，过滤混合物。浓缩滤液，得到192mg(100％)黄色固体状的N-(2-(3-氰基-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+535.8。
步骤4：2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-7-(2-(甲基氨基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物2的步骤2类似的过程，由N-(2-(3-氰基-2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)苯基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺制备期望的产物。1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ7.39(d,J＝8.8Hz,2H),7.09-6.90(m,7H),6.58(d,J＝8.0Hz,1H),6.51(t,J＝7.2Hz,1H),6.30(d,J＝7.2Hz,1H),5.52-5.48(m,1H),3.27-3.24(m,1H),3.11-3.02(m,1H),2.76(s,3H),2.32-2.10(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+457.9。
化合物16：2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-7-(2-(N-甲基丙烯酰胺基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由2-(4-(4-氟苯氧基)苯基)-7-(2-(甲基氨基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.47-7.37(m,4H),7.30-7.15(m,3H),7.12-7.08(m,2H),6.99(d,J＝8.4Hz,2H),6.81(d,J＝7.2Hz,1H),6.25-5.85(m,2H),5.63-5.49(m,1H),5.42-5.32(m,1H),3.40-3.20(m,6H),2.45-2.20(m,1H),2.15-1.90(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+511.9。
实施例7：化合物17-18的合成
化合物17：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(环戊基氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物9的那些过程(步骤7和8)的类似的过程，在本领域普通技术人员熟知的合适的条件下，由7-(2-氨基苯基)-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈和溴代环戊烷制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.37(d,J＝8.8Hz,2H),6.97-6.92(m,3H),6.74(br s,1H),6.67(d,J＝7.6Hz,1H),6.49(t,J＝7.6Hz,1H),6.27(d,J＝7.6Hz,1H),5.58-5.53(m,1H),5.15(s,2H),4.86-4.80(m,1H),3.24-3.27(m,1H),3.02-2.93(m,1H),2.22-2.16(m,1H),2.14-2.08(m,1H),1.98-1.85(m,2H),1.91-1.70(m,4H),1.64-1.54(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+418.0。
化合物18：7-(2-丙烯酰胺基苯基)-2-(4-(环戊基氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物17和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.83(s,1H),7.45(d,J＝7.6Hz,1H),7.37(d,J＝8.8Hz,2H)7.29(t,J＝7.6Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),6.93(d,J＝8.8Hz,2H),6.81(s,1H),6.64(d,J＝7.6Hz,1H),6.53(dd,J＝10.2,17.0Hz,1H),6.27(d,J＝17.0Hz,1H),5.80-5.77(m,2H),4.86-4.79(m,1H),3.27-3.23(m,1H),3.03-2.94(m,1H),2.36-2.25(m,1H),1.99-1.91(m,3H),1.75-1.53(m,6H)。MS(ESI)m/e[M+1]+471.9。
实施例8：化合物19-20的合成
化合物19：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(环丙基甲氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(环丙基甲氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向7-(2-氨基苯基)-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(331mg，1.0mmol)于丙酮(15mL)的溶液中加入(溴甲基)环丙烷(135mg，1.0mmol)和K2CO3(276mg，2.0mmol)。在56℃下搅拌16h后，将混合物过滤。滤饼用丙酮(20mL×2)洗涤。将滤液浓缩，得到300mg黄色固体状的期望的产物(78％)。MS(ESI)m/e[M+1]+386.0。
步骤2：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(环丙基甲氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向7-(2-氨基苯基)-2-(4-(环丙基甲氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(350mg，0.91mmol)于EtOH(4mL)和DMSO(4mL)的溶液中加入NaOH水溶液(5N，2mL)和H2O2(2mL)。在60℃下搅拌3h后，混合物在100mL水和100mL EA之间分配。从水层分离出有机层，用饱和盐水(100mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。残余物通过硅胶色谱柱(用DCM/MeOH洗脱)纯化，得到150mg(41％)白色固体状的期望产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.37(d,J＝8.8Hz,2H),6.97-6.92(m,3H),6.75(br s,1H),6.67(d,J＝8.0Hz,1H),6.49(t,J＝7.6Hz,1H),6.27(d,J＝7.6Hz,1H),5.58-5.54(m,1H),5.16(s,2H),3.83(d,J＝7.2Hz,2H),3.27-3.24(m,1H),3.01-2.92(m,1H),2.23-2.13(m,1H),2.13-2.07(m,1H),1.24-1.18(m,1H),0.59-0.54(m,2H),0.34-0.30(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+404.0。
化合物20：7-(2-丙烯酰胺基苯基)-2-(4-(环丙基甲氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物19和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.83(s,1H),7.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.37(d,J＝8.4Hz,2H),7.30(t,J＝7.6Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),6.96(d,J＝8.4Hz,2H),6.81(s,1H),6.64(d,J＝8.0Hz,1H),6.53(dd,J＝10.2,16.7Hz,1H),6.27(d,J＝16.7Hz,1H),5.80-5.77(m,2H),3.83(d,J＝7.2Hz,2H),3.27-3.23(m,1H),3.03-2.93(m,1H),2.36-2.25(m,1H),2.02-1.91(m,1H),1.23-1.14(m,1H),0.59-0.53(m,2H),0.34-0.29(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+457.9。
通过手性制备型HPLC，将化合物20分离成两种对映立体异构体化合物20a(峰1，R或S，在手性分析中的保留时间为3.03min)，和化合物20b(峰2，S或R，在手性分析中的保留时间为3.82min)。手性分离条件如下所示：
手性分析条件如下所示：
实施例9：化合物21-22的合成
化合物21：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物9的那些过程(步骤7和8)的类似的过程，在本领域普通技术人员熟知的合适的条件下，由7-(2-氨基苯基)-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈和1-溴-2-甲氧基乙烷制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.38(d,J＝8.6Hz,2H),7.00-6.94(m,3H),6.75(br s,1H),6.69(d,J＝7.6Hz,1H),6.51(t,J＝7.6Hz,1H),6.28(d,J＝7.6Hz,1H),5.59-5.54(m,1H),5.21(br s,1H),4.11(t,J＝4.0Hz,2H),3.66(t,J＝4.0Hz,2H),3.30(s,3H),3.28-3.25(m,1H),3.02-2.92(m,1H),2.24-2.16(m,1H),2.13-2.05(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+407.9。
化合物22：7-(2-丙烯酰胺基苯基)-2-(4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
根据与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物21和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.84(s,1H),7.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.37(d,J＝8.6,2H),7.30(t,J＝7.6Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),6.93(d,J＝8.6Hz,2H),6.81(s,1H),6.64(d,J＝8.0Hz,1H),6.53(dd,J＝10.5,17.0Hz,1H),6.27(dd,J＝1.7,17.0Hz,1H),5.80-5.77(m,2H),4.11(t,J＝4.4Hz,2H),3.66(t,J＝4.4Hz,2H),3.30(s,3H),3.27-3.23(m,1H),3.03-2.94(m,1H),2.36-2.25(m,1H),2.01-1.95(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+462.0。
实施例10：化合物23-24的合成
化合物23：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向7-(2-氨基苯基)-2-(4-羟基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(33mg，0.1mmol)于THF(5mL)的溶液中加入PPh3(78.6mg，0.25mmol)和四氢-2H-吡喃-4-醇(10mg，0.1mmol)。然后，在0℃下，向混合物中滴加DIAD(51mg，0.25mmol)，并在0℃在N2下搅拌10min。使混合物升至室温，并在室温下搅拌16小时。混合物载真空中浓缩，并在DCM(20mL)和盐水(20mL)之间分配。将有机层与水层分离，用硫酸钠干燥，并通过制备型TLC(DCM/CH3OH＝10/1)纯化，得到5mg(12％)无色油状的7-(2-氨基苯基)-2-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.70(d,J＝8.4Hz,2H),7.66-7.58(m,2H),7.58-7.52(m,1H),7.03(d,J＝8.4Hz,2H),6.97(t,J＝7.6Hz,1H),6.69(d,J＝8.0Hz,1H),6.49(t,J＝7.6Hz,1H),6.23(d,J＝8.0Hz,1H),5.63(s,1H),5.21(s,2H),4.66-4.56(m,1H),3.90-3.79(m,2H),3.54-3.43(m,2H),3.25-3.18(m,1H),2.97-2.86(m,1H),2.21-2.07(m,2H),2.02-1.92(m,2H),1.65-1.50(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+415.9。
步骤2：7-(2-氨基苯基)-2-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物2的步骤2类似的过程，由7-(2-氨基苯基)-2-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-腈制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.38(d,J＝8.8Hz,2H),7.02(d,J＝8.8Hz,2H),6.95(t,J＝7.6Hz,1H),6.75(s,1H),6.67(d,J＝7.8Hz,1H),6.49(t,J＝7.6Hz,1H),6.26(d,J＝7.8Hz,1H),5.56(s,1H),5.16(s,2H),4.64-4.54(m,1H),3.91-3.79(m,2H),3.53-3.42(m,2H),3.29-3.19(m,1H),3.01-2.92(m,1H),2.25-2.05(m,2H),2.02-1.91(m,2H),1.64-1.52(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+433.9。
化合物24：7-(2-丙烯酰胺基苯基)-2-(4-(四氢-2H-吡喃-4-基氧基)苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物23和丙烯酰氯期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.83(s,1H),7.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.38(d,J＝8.6Hz,2H),7.30(t,J＝7.6Hz,1H),7.21(t,J＝7.6Hz,1H),7.02(d,J＝8.6Hz,2H),6.81(s,1H),6.63(d,J＝8.0Hz,1H),6.53(dd,J＝17.0,10.3Hz,1H),6.27(dd,J＝17.0,1.6Hz,1H),5.82-5.74(m,2H),4.66-4.51(m,1H),3.90-3.78(m,2H),3.54-3.40(m,2H),3.31-3.18(m,1H),3.03-2.93(m,1H),2.37-2.24(m,1H),2.04-1.92(m,3H),1.64-1.51(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+487.9。
实施例11：化合物25-27的合成
化合物25：7-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
根据用于7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈的过程(步骤4-5)和用于化合物2的过程(步骤1-2)，在本领域普通技术人员熟知的合适的条件下，由4-乙酰基哌啶-1-羧酸叔丁酯和5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈制备期望的产物。1H NMR(CD3OD-d4)δ7.40(d,J＝8.4Hz,2H),7.32-7.25(m,2H),7.06(t,J＝7.6Hz,1H),7.01-6.94(m,4H),4.10-4.00(m,2H),3.98-3.91(m,1H),3.35-3.30(m,2H),2.70-2.58(m,2H),2.18-2.02(m,2H),2.02-1.84(m,1H),1.65-1.45(m,2H),1.39-1.12(m,2H),1.35(s,9H)。MS(ESI)m/e[M+1]+518.0。
化合物26：7-(哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺三氟乙酸盐
根据与用于化合物38的步骤2类似的过程，由化合物25制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ8.47(br s,1H),8.16(br s,1H),7.50(d,J＝8.4Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.10-7.04(m,4H),6.72(br s,1H),4.08-4.01(m,1H),3.34-3.26(m,4H),2.94-2.75(m,2H),2.28-2.14(m,1H),2.07-1.88(m,2H),1.87-1.80(m,1H),1.75-1.66(m,1H),1.60-1.43(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+418.0。
化合物27：7-(1-丙烯酰基哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
根据与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物26和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ7.50(d,J＝8.8Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),7.08(d,J＝7.6Hz,2H),7.05(d,J＝8.8Hz,2H),6.83-6.76(m,1H),6.68(br s,1H),6.07(d,J＝18.4Hz,1H),5.64(d,J＝10.4Hz,1H),4.52-4.42(m,1H),4.11-3.98(m,2H),3.33-3.24(m,2H),3.04-2.94(m,1H),2.67-2.55(m,1H),2.33-2.25(m,1H),2.01-1.93(m,2H),1.78-1.66(m,1H),1.61-1.50(m,1H),1.30-1.18(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+471.9.
通过手性制备型HPLC，将化合物27分离成两种对映立体异构体化合物27a(峰1，R或S，在手性分析中的保留时间为6.49min)，和化合物27b(峰2，S或R，在手性分析中的保留时间为8.03min)。手性分离条件如下所示：
手性分析条件如下所示：
实施例12：化合物28-29的合成
化合物28：7-(氮杂环丁烷-3-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：3-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
向1-(叔丁氧基羰基)氮杂环丁烷-3-羧酸(5.15g，25.6mmol)于THF(100mL)的溶液中加入DCC(7.11g，34.5mmol)、Et3N(5.18g，51.2mmol)和N,O-二甲基羟基胺盐酸盐(3.44g，35.3mmol)，反应物在室温下搅拌约16小时。减压浓缩以除去溶剂，残余物在EA(100mL)和水(50mL)之间分配，水相进一步用EA(50mL×3)萃取。有机相用盐水(20mL)洗涤，减压浓缩以除去溶剂，然后通过硅胶柱色谱法(200-300目，CH2Cl2/MeOH＝20/1)纯化，得到无色油状的粗产物(～8.0g)。MS(ESI)m/e[M+23]+266.9,[M-55]+189.0。
步骤2：3-乙酰基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
在0℃下，向3-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(7.0g，28.7mmol)于THF(150mL)的溶液中加入CH3MgBr(43mL，43mmol)，然后在约2小时的时间内缓慢升至室温。向混合物中加入10％柠檬酸水溶液(30mL)，并用EA(50mL×3)萃取，有机相用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，浓缩，并通过硅胶柱色谱法(200-300目，PE/EA＝2/1)纯化，得到无色油状的粗产物(4.0g，70％)。MS(ESI)m/e[M-55]+144.0。
化合物28：7-(氮杂环丁烷-3-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
根据用于7-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈的过程(步骤4到5)和用于化合物2的过程(步骤1到2)和用于化合物38的过程(步骤2)，在本领域普通技术人员熟知的合适的条件下，由3-乙酰基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯和5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ8.70(brs,1H),8.44(br s,1H),7.50(d,J＝8.6Hz,2H),7.45-7.40(m,2H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.08(d,J＝7.4Hz,2H),7.06(d,J＝8.6Hz,2H),6.72(br s,1H),4.46-4.38(m,1H),4.24-4.15(m,1H),4.07-3.94(m,3H),3.29-3.24(m,2H),3.19-3.10(m,1H),2.13-2.04(m,1H),1.78-1.69(m,1H).MS(ESI)m/e[M+1]+390.0。
化合物29：7-(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
根据与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物28和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ7.50(d,J＝8.4Hz,2H),7.44-7.40(m,2H),7.20-7.15(m,1H),7.10-7.04(m,4H),6.69(br s,1H),6.37-6.26(m,1H),6.12-6.04(m,1H),5.68-560(m,1H),4.43-4.25(m,2H),4.18-4.08(m,1H),4.04-3.96(m,1H),3.86-3.80(m,1H),3.32-3.26(m,2H),3.02-2.92(m,1H),2.14-2.06(m,1H),1.79-1.70(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+444.0。
通过手性制备型HPLC，将化合物29分离成两种对映立体异构体化合物29a(峰1，R或S，在手性分析中的保留时间为10.54min)，和化合物29b(峰2，S或R，在手性分析中的保留时间为13.98min)。手性分离条件如下所示：
手性分析条件如下所示：
实施例13：化合物30-31的合成
化合物30:顺-7-丙烯酰基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,5a,6,7,8,9,9a-八氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[3,4-e]嘧啶-3-甲酰胺和顺-7-丙烯酰基-2-(4-苯氧基苯基)-4,4a,5,6,7,8,8a,9-八氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[4,3-d]嘧啶-3-甲酰胺
根据用于化合物27的过程，在本领域普通技术人员熟知的合适的条件下，由4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯和5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ7.51(d,J＝8.4Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),7.11-7.01(m,4H),6.90-6.78(m,1H),6.65(s,1H),6.18-6.06(m,1H),5.73-5.63(m,1H),4.45-4.33(m,1H),3.84-3.34(m,5H),3.22-3.16(m,1H),2.40-2.32(m,1H),2.21-2.10(m,1H),2.00-1.90(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+443.9。
通过手性制备型HPLC，将化合物30分离成两种对映立体异构体化合物30a(峰1，R或S，在手性分析中的保留时间为10.64min)，和化合物30b(峰2，S或R，在手性分析中的保留时间为15.18min)。手性分离条件如下所示：
手性分析条件如下所示：
化合物31作为在制备化合物30的过程中的一个副产物而获得。1HNMR(DMSO-d6at 80℃)δ7.53(d,J＝8.4Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),7.11-7.02(m,4H),6.82(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.42(br s,1H),6.10(dd,J＝16.8,2.3Hz,1H),6.01(br s,2H),5.68(dd,J＝10.6,2.3Hz,1H),4.17(dd,J＝5.4,12.2Hz,1H),3.67(t,J＝12.2Hz,1H),3.28(td,J＝4.0,10.4Hz,1H),2.24-2.17(m,1H),1.93-1.81(m,1H),1.47-1.33(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+443.9。
实施例14:化合物32-33的合成
化合物32：7-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：(E)-2-(4-(二甲胺基)-2-氧代丁-3-烯基)异吲哚啉-1,3-二酮
向2-(2-氧代丙基)异吲哚啉-1,3-二酮(1g，4.9mmol)于20mLDMF-DMA的溶液中加入一些4A的分子筛。反应混合物在氮气下在100℃下搅拌15小时。冷却至室温，过滤混合物，收集600mg(47.5％)固体状的粗产物(E)-2-(4-(二甲基氨基)-2-氧代丁-3-烯基)异吲哚啉-1,3-二酮。MS(ESI)m/e[M+1]+259.1。
步骤2：7-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
将(E)-2-(4-(二甲基氨基)-2-氧代丁-3-烯基)异吲哚啉-1,3-二酮(600mg，2.33mmol)和5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(642mg，2.33mmol)于20mLHOAc中的混合物搅拌并加热到120℃，持续15小时。浓缩混合物，并悬浮于30mL溶剂(PE/EA＝4/1)中。过滤混合物，通过制备型TLC(DCM/EA＝50/1)纯化，得到430mg(40％)固体状的7-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈。1H NMR(DMSO-d6)δ8.74(d,J＝4.4Hz,1H),8.05(d,J＝8.8Hz,2H),,7.96-7.90(m,1H),7.88-7.85(m,2H),7.5(d,J＝4.4Hz,1H),7.46-7.37(m,2H),7.21-7.09(m,5H),5.32(s,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+472.1。
步骤3：7-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向7-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(290mg，0.62mmol)于5mLMeOH和5mL二烷的溶液中加入12滴水合肼。搅拌反应混合物并加热至60℃，持续3小时。浓缩混合物，并悬浮于20mL溶剂(DCM/MeOH＝10/1)中。过滤混合物，浓缩滤液，并通过快速色谱法(用EA随后用DCM/MeOH＝10/1洗脱)纯化，得到150mg(71％)固体状的7-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑[1,5-a]嘧啶-3-甲腈。MS(ESI)m/e[M+1]+342.1。
步骤4：7-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向7-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(150mg，0.44mmol)于20mL乙醇的溶液中加入NaBH4(200mg)。将反应混合物在室温下搅拌15小时。浓缩混合物除去溶剂。残余物在EA(20mL)和水(20mL)之间分配。浓缩有机层，得到150mg(100％)固体状的粗产物7-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈，其未经进一步纯化直接用于下一步骤。MS(ESI)m/e[M+1]+346.0。
步骤5：7-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向7-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(15mg，0.043mmol)于2mL EtOH的溶液中加入1mL DMSO、0.5mL NaOH(5N)和0.5mLH2O2(30％水溶液)。在60℃下搅拌2小时后，浓缩混合物以除去EtOH。残余物在水(30mL)和EA(20mL)之间分配。浓缩有机相，并通过制备型HPLC纯化(用20％-40％CH3CN于含有0.1％TFA的水中的溶液洗脱)。合并含有期望的产物的级分，冻干过夜，得到作为TFA盐的产物(10mg，64％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.07(br s,3H),7.62(d,J＝8.8Hz,2H),7.43-7.35(m,2H),7.25(t,J＝7.6Hz,1H),7.15-7.12(m,4H),6.77(br s,1H),4.38-4.30(m,1H),3.40-3.20(m,4H),2.16-2.06(m,1H),2.00-1.80(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+364.0。
化合物33:7-(丙烯酰胺基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向7-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(125mg，0.344mmol)于5mL DCM的溶液中加入Et3N(4滴)和丙烯酰氯(46.5mg，0.52mmol)。在室温下搅拌30分钟后，混合物在水(10mL)和DCM(5mL)之间分配。浓缩有机层，并通过制备型TLC(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到40mg(28％)产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(t,J＝6.0Hz,1H),7.59(d,J＝8.8Hz,2H),7.54-7.43(m,2H),7.25(t,J＝7.6Hz,1H),7.16-7.11(m,4H),6.76(s,1H),6.33(dd,J＝10.1,17.0Hz,1H),6.18(dd,J＝1.9,17.0Hz,1H),5.69(dd,J＝1.9,10.1Hz,1H),4.28-4.22(m,1H),3.92-3.80(m,1H),3.50-3.30(m,3H),2.14-1.94(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+417.9。
通过手性制备型HPLC，将化合物33分离成两种对映立体异构体化合物33a(峰1，R或S，在手性分析中的保留时间为6.04min)，和化合物33b(峰2，S或R，在手性分析中的保留时间为8.87min)。手性分离条件如下所示：
手性分析条件如下所示：
实施例15:化合物34-35的合成
化合物34：7-((甲基氨基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：N-((3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)甲基)-2,2,2-三氟乙酰胺
向7-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(50mg，0.147mmol)于5mL DCM的溶液中加入3滴DIEA和2滴三氟乙酸酐。在室温搅拌2小时后，向混合物加入10mL水，并用DCM(5mL×2)萃取。浓缩DCM层，得到黄色固体(50mg，78％)，其未经进一步纯化直接用于下步反应。
步骤2：N-((3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)甲基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺
向N-((3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)甲基)-2,2,2-三氟乙酰胺(40mg，0.091mmol)于5mL丙酮的溶液中加入K2CO3(50mg)和CH3I(0.5mL)。在室温下搅拌4小时后，浓缩混合物。残余物在10mL水和10mL DCM之间分配。浓缩有机层，并通过制备型TLC(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到黄色固体(30mg，73％)。MS(ESI)m/e[M+1]+451.9。
步骤3：7-((甲基氨基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向N-((3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)甲基)-2,2,2-三氟-N-甲基乙酰胺(40mg，0.089mmol)于15mL EtOH的溶液中加入NaBH4(50mg)。在室温下搅拌30min后，浓缩混合物。残余物在20mL水和20mL EA之间分配。浓缩EA层，并通过制备型TLC(DCM/MeOH＝5/1)纯化，得到白色固体(20mg，63％)。MS(ESI)m/e[M+1]+359.9。
步骤4：7-((甲基氨基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向7-((甲基氨基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(20mg，0.0557mmol)于2mL EtOH的溶液中加入1mLDMSO、0.5mL NaOH(5N)和0.5mL H2O2(30％溶液)。反应混合物在60℃下搅拌1小时。随后浓缩混合物以除去EtOH。残余物在水(20mL)和EA(20mL)之间分配。浓缩EA层，得到白色固体状产物(10mg，收率：48％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.51(d,J＝8Hz,2H),7.47-7.40(dm,2H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.11-7.04(m,4H),6.61(s,1H),4.26-4.16(m,1H),3.34-3.27(m,2H),2.97-2.95(m,1H),2.83-2.77(m,1H),2.33(s,3H),2.08-2.02(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+378.0。
化合物35：7-((N-甲基(丙烯酰胺基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向7-((甲基氨基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(92mg，0.244mmol)于5mL DCM的溶液中加入Et3N(3滴)和丙烯酰氯(33mg，0.366mmol)。反应混合物在室温下搅拌30min。混合物随后在水(30mL)和DCM(20mL)之间分配。浓缩有机层，并通过制备型TLC(DCM/MeOH＝15/1)纯化，得到白色固体状的产物(25mg，收率：24％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6和D2O at 80℃)δ7.51(d,J＝8.4Hz,2H),7.44-7.39(m,2H),7.20-7.14(m,1H),7.10-7.04(m,4H),6.75-6.57(m,2H),6.10-5.85(m,1H),5.67-5.50(m,1H),4.45-4.38(m,1H),4.00-3.70(m,2H),3.40-3.30(m,2H),3.00(s,3H),2.14-1.90(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+432.0。
实施例16:化合物36-37的合成
化合物36：7-(氨基甲基)-2-(1-苄基-1H-吡唑-4-基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺三氟乙酸盐
步骤1:1-苄基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯
向1H-吡唑-4-羧酸乙酯(35.0g，250mmol)和K2CO3(69.0g，500mmol)于CH3CN(250mL)中的混合物中加入BnBr(42.7g，250mmol)。混合物在室温下搅拌18小时并浓缩。残余物悬浮于EA(500mL)中，用水(200mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到白色固体状的期望产物(53.0g，91.2％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.46(s,1H),7.88(s,1H),7.41-7.19(m,5H),5.37(s,2H),4.21(q,2H,J＝5.4Hz),1.25(t,3H,J＝5.4Hz)。MS(ESI)m/e[M+1]+231.0。
步骤2：1-苄基-1H-吡唑-4-羧酸
将1-苄基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(53.0g，0.23mol)和LiOH(19.4g，0.46mol)于THF(100mL)和水(100mL)中的混合物回流搅拌6小时。然后，除去THF，残余物用6NHCl酸化，形成沉淀，过滤并干燥，得到白色固体状的期望的产物(44.0g，92.8％)。1H NMR(DMSO-d6)δ12.36(s,1H),8.39(s,1H),7.85(s,1H),7.38-7.27(m,5H),5.37(s,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+202.9。
步骤3:2-((1-苄基-1H-吡唑-4-基)(羟基)亚甲基)丙二腈
将1-苄基-1H-吡唑-4-羧酸(25.0g，123.8mmol)于SOCl2(250mL)中的溶液加热回流3小时。真空浓缩混合物，得到中间体，其未经进一步纯化直接用于下一步反应。在0-5℃下，在1小时的时间内，向丙二腈(8.2g，12.8mmol)和DIEA(32.0g，247.6mmol)于THF(250mL)的溶液中滴加中间体于甲苯(250mL)中的溶液。使所得混合物升温至室温并搅拌16小时。用水(500mL)淬灭反应，并用EA(500mL×3)萃取。有机层用3N HCl(500mL)、盐水(500mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色固体状的粗产物(26.5g，85.0％)。MS(ESI)m/e[M+1]+250.9。
步骤4：2-((1-苄基-1H-吡唑-4-基)(甲氧基)亚甲基)丙二腈
将2-((1-苄基-1H-吡唑-4-基)(羟基)亚甲基)丙二腈(26.5g，106mmol)于CH(OMe)3(250mL)中的溶液加热至75℃，持续16小时。随后浓缩溶液。残余物用MeOH(50mL)洗涤，得到14.5g(51.8％)灰白色固体状的2-((1-苄基-1H-吡唑-4-基)(甲氧基)亚甲基)丙二腈。1H NMR(DMSO-d6)δ8.71(s,1H),8.08(s,1H),7.42-7.24(m,5H),5.46(s,2H),4.12(s,3H)。MS(ESI)m/e[M+1]+264.9。
步骤5：5-氨基-2'-苄基-3,4'-双(1H-吡唑)-4-甲腈
将2-((1-苄基-1H-吡唑-4-基)(甲氧基)亚甲基)丙二腈(14.5g，54.9mmol)和水合肼(10mL)于EtOH(500mL)中的混合物在室温下搅拌4小时。浓缩混合物，得到粗产物，用MeOH洗涤，得到10g(69.0％)灰白色固体状的5-氨基-2'-苄基-3,4'-双(1H-吡唑)-4-甲腈。1H NMR(DMSO-d6)δ11.76(br s,1H),8.18(s,1H),7.82(s,1H),7.34-7.26(m,5H),6.11(br s,2H),5.40(s,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+264.9。
化合物36：7-(氨基甲基)-2-(1-苄基-1H-吡唑-4-基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺三氟乙酸盐
根据用于化合物32的过程(步骤2-5)，在本领域普通技术人员熟知的合适的条件下，由5-氨基-2'-苄基-3,4'-双(1H-吡唑)-4-甲腈和(E)-2-(4-(二甲基氨基)-2-氧代丁-3-烯基)异吲哚啉-1,3-二酮制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(s,1H),7.97(br s,3H),7.74(s,1H),739-7.24(m,5H),5.37(s,2H),4.40-4.25(m,1H),3.37-3.16(m,4H),2.16-2.08(m,1H),1.99-1.89(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+352.0。
化合物37：7-(丙烯酰胺基甲基)-2-(1-苄基-1H-吡唑-4-基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物36和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.27(t,J＝6.1Hz,1H),8.11(s,1H),7.67(s,1H),7.41-7.21(m,5H),6.58(s,1H),6.25(br s,2H),6.25(dd,J＝17.1,10.1Hz,1H),6.10(dd,J＝17.1,2.1Hz,1H),5.62(dd,J＝10.1,2.1Hz,1H),5.36(s,2H),4.16-4.10(m,1H),3.83-3.72(m,1H),3.42-3.30(m,1H),3.30-3.22(m,2H),2.00-1.96(m,1H),1.95-1.86(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+405.9。
实施例17:化合物38-40的合成
化合物38：1'-苄基-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲酰胺
步骤1：1-(1-苄基-4-(乙氧基羰基)哌啶-4-基)肼-1,2-二羧酸二叔丁酯
在氮气下，在-75℃下，向二异丙基胺(153mg，1.5mmol)于THF(20mL)的溶液中加入n-BuLi(2.5M，0.6mL)。5min后，加入1-苄基哌啶-4-哌啶羧酸乙酯(247mg，1.0mmol)，随后所得混合物在-70℃下搅拌10min，然后再加入偶氮二羧酸二叔丁酯(345mg，1.5mmol)。反应搅拌30min，然后用NH4Cl水溶液(10mL)淬灭反应，并用EA(10mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到灰白色固体状的粗产物(350mg，72％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+478.3。
步骤2：1-苄基-4-肼基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐
将1-(1-苄基-4-(乙氧基羰基)哌啶-4-基)肼-1,2-二羧酸二叔丁酯(1.0g，2.09mmol)和浓HCl(1.0mL)于MeOH(10mL)中的混合物加热回流2小时。随后浓缩混合物，得到黄色固体状的粗产物(650mg，88.9％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+278.0.
步骤3：4-(5-氨基-4-氰基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-1-基)-1-苄基哌啶-4-羧酸乙酯
在氮气下，将1-苄基-4-肼基哌啶-4-羧酸乙酯盐酸盐(580mg，1.57mmol)、2-(甲氧基(4-苯氧基苯基)亚甲基)丙二腈(433mg，1.57mmol)和TEA(475mg，4.71mmol)于CHCl3(20mL)中的混合物加热回流16小时。浓缩混合物，并通过硅胶色谱柱纯化(用50％EA于PE中的溶液作为洗脱液)，得到黄色固体状的产物(280mg，34.2％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+521.9。
步骤4：5-氨基-1-(1-苄基-4-(羟基甲基)哌啶-4-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-4-甲腈
向4-(5-氨基-4-氰基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-1-基)-1-苄基哌啶-4-羧酸乙酯(52mg，0.1mmol)于MeOH(5mL)的溶液中加入NaBH4(8mg，0.2mmol)。10min后，用水(5mL)淬灭反应，并用EA(10mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到灰白色固体状的粗产物(34mg，70.9％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+480.0。
步骤5：甲磺酸(4-(5-氨基-4-氰基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-1-基)-1-苄基哌啶-4-基)甲基酯
在0℃下，向5-氨基-1-(1-苄基-4-(羟基甲基)哌啶-4-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(50mg，0.1mmol)和TEA(20mg，0.20mmol)于DCM(5mL)的溶液中加入MSCl(14mg，0.12mmol)。5min后，用水(5mL)淬灭反应，并用DCM(5mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，并通过制备型TLC(10％MeOH于DCM中)纯化，得到黄色固体状的产物(35mg，62.8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.80(d,J＝8.8Hz,2H),7.45-7.36(m,2H),7.37-7.22(m,5H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),7.11(d,J＝8.8Hz,2H),7.06(d,J＝8.0Hz,2H),6.49(br s,2H),4.48(s,2H),3.40(s,2H),3.10(s,3H),2.88-2.55(m,4H),2.19-2.16(m,2H),1.92-1.86(m,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+557.9。
步骤6：1'-苄基-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲腈
将甲磺酸(4-(5-氨基-4-氰基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-1-基)-1-苄基哌啶-4-基)甲基酯(35mg，0.06mmol)和Cs2CO3(31mg，0.09mmol)于DMF(2mL)中的混合物加热到50℃，持续16小时。用水(5mL)淬灭反应，并用EA(5mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，通过制备型TLC(10％MeOH于DCM中)纯化，得到黄色固体状的产物(12mg，43.2％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.79(d,J＝8.4Hz,2H),7.43-7.40(m,3H),7.38-7.29(m,4H),7.26(br s,1H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.12-7.05(m,4H),3.85(s,2H),3.53(s,2H),2.89-2.80(m,2H),2.22-2.12(m,2H),2.10-1.96(m,2H),1.85-1.75(m,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+462.0。
步骤7：1'-苄基-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲酰胺
根据与用于化合物2的步骤2类似的过程，由1'-苄基-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲腈制备期望的产物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.63(d,J＝8.4Hz,2H),7.45-7.39(m,3H),7.37-7.31(m,4H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),7.12-6.94(m,4H),6.43(s,1H),3.78(s,2H),3.55(br s,2H),2.89-2.82(m,2H),2.15-2.11(m,2H),1.84-1.72(m,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+479.9。
化合物39：6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲酰胺
将1'-苄基-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲酰胺(50mg，0.10mmol)、10％w/w Pd(OH)2/C(5mg)于MeOH(10mL)中的溶液和HOAc(1滴)的混合物在氢气下搅拌16小时。过滤混合物，并浓缩滤液，得到黄色固体状的粗产物(20mg，51.4％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+390.0。
化合物40：1'-丙烯酰基-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲酰胺
根据与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物39和丙烯酰氯制备化合物40。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.64(d,J＝8.8Hz,2H),7.44-7.37(m,2H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),7.05(d,J＝7.6Hz,2H),6.97(d,J＝8.8Hz,2H),6.86(dd,J＝10.5,16.7Hz,1H),6.51(br s,1H),6.12(dd,J＝2.3,16.7Hz,1H),5.69(dd,J＝2.3,10.5Hz,1H),4.13-3.95(m,2H),3.83(s,2H),3.60-3.38(m,2H),1.99-1.76(m,4H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+443.9。
实施例18:化合物41-43的合成
化合物41：1-苄基-2'-(4-苯氧基苯基)-5',6'-二氢-4'H-螺[哌啶-4,7'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺
步骤1：2-(1-苄基哌啶-4-亚基)乙酸乙酯
在0℃下，在30min的时间内，向NaH(318mg，7.94mmol)于THF(20mL)的悬浮液中滴加2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(1.78g，7.94mmol)于THF(5mL)中的溶液。搅拌10min后，在0℃下，在20min的时间内，滴加1-苄基哌啶-4-酮(1.0g，5.29mmol)于THF(5mL)中的溶液。混合物搅拌60min。随后，用水(10mL)淬灭反应。混合物用EA(10mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥、浓缩，并通过硅胶色谱柱纯化(用25％EA于PE中的溶液洗脱)，得到黄色油状的产物(1.2g，87.3％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+260.0。
步骤2：1-苄基-5'-氧代-2'-(4-苯氧基苯基)-5',6'-二氢-4'H-螺[哌啶-4,7'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲腈
将5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(1.0g，3.6mmol)、2-(1-苄基哌啶-4-亚基)乙酸乙酯(1.1g，4.3mmol)和K2CO3(745mg，5.4mmol)于DMF(20mL)中的混合物在氮气下加热至80℃，持续16小时。用水(20mL)淬灭反应，并用EA(20mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥，浓缩，并通过硅胶色谱柱纯化(用30％EA于PE中的溶液作为洗脱液)，得到黄色固体状的产物(950mg，54.9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.92(s,1H),7.84(d,J＝8.8Hz,2H),7.48-7.40(m,2H),7.36-7.29(m,4H),7.27-7.23(m,1H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),7.15-7.07(m,4H),3.55(s,2H),3.01(s,2H),2.81-2.73(m,2H),2.39-2.27(m,2H),2.26-2.16(m,2H),1.83-1.74(m,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+489.9。
步骤3：1-苄基-5'-氧代-2'-(4-苯氧基苯基)-5',6'-二氢-4'H-螺[哌啶-4,7'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺
将1-苄基-5'-氧代-2'-(4-苯氧基苯基)-5',6'-二氢-4'H-螺[哌啶-4,7'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲腈(500mg，1.02mmol)于H3PO4(5mL)中的溶液加热至130℃，持续1小时。将混合物倒入水(20mL)中，用EA(20mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥，浓缩，并通过硅胶色谱柱纯化(用5％MeOH于DCM中的溶液作为洗脱液)，得到黄色固体状的产物(180mg，34.8％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+507.9。
步骤4：1-苄基-2'-(4-苯氧基苯基)-5',6'-二氢-4'H-螺[哌啶-4,7'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺
将1-苄基-5'-氧代-2'-(4-苯氧基苯基)-5',6'-二氢-4'H-螺[哌啶-4,7'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺(180mg，0.36mmol)于BH3/THF(1N，20mL)中的溶液加热回流3小时。用MeOH(20mL)和浓HCl(2mL)淬灭反应。混合物在60℃下搅拌1小时，随后用NaHCO3碱化，并用EA(20mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥，浓缩，并通过硅胶色谱柱纯化(用5％MeOH于DCM中的溶液洗脱)，得到黄色固体状的产物(120mg,67.6％)。1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ7.39-7.22(m,9H),7.09-7.04(m,1H),6.99-6.94(m,4H),3.86(s,2H),3.35(t,J＝5.6Hz,2H),3.19-3.11(m,2H),2.80-2.66(m,2H),2.50-2.40(m,2H),2.10(t,J＝5.6Hz,2H),1.87-1.78(m,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+493.9。
化合物42：2'-(4-苯氧基苯基)-5',6'-二氢-4'H-螺[哌啶-4,7'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺三氟乙酸盐
根据与用于化合物39的过程类似的过程，由1-苄基-2'-(4-苯氧基苯基)-5',6'-二氢-4'H-螺[哌啶-4,7'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺制备化合物42。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.66(br s,2H),7.51(d,J＝8.6Hz,2H),7.46-7.37(m,2H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.11-7.04(m,4H),6.79(s,1H),3.40-3.33(m,4H),3.17-3.06(m,2H),2.46-2.35(m,2H),2.17-2.10(m,2H),1.96-1.87(m,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+403.9。
化合物43：1-丙烯酰基-2'-(4-苯氧基苯基)-5',6'-二氢-4'H-螺[哌啶-4,7'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺
根据与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物42和丙烯酰氯制备化合物43。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.50(d,J＝8.8Hz,2H),7.45-7.37(m,2H),7.17(t,J＝.2Hz,1H),7.12-7.01(m,4H),6.85(dd,J＝10.4,16.7Hz,1H),6.73(s,1H),6.11(dd,J＝2.4,16.7Hz,1H),5.68(dd,J＝2.4,10.4Hz,1H),4.23(d,J＝13.2Hz,1H),4.03(d,J＝13.2Hz,1H),3.43(t,J＝12.0Hz,1H),3.37-3.33(m,2H),3.16(t,J＝12.0,1H),2.24-2.08(m,4H),1.82-1.73(m,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+457.9。
实施例19:化合物44-46的合成
化合物44：1-苄基-6'-(4-苯氧基苯基)-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-咪唑并[1,2-b]吡唑]-7'-甲酰胺
步骤1：1-苄基氮杂环丁烷-3-羧酸甲酯
在0℃下，在10min的时间内，向氮杂环丁烷-3-羧酸甲酯(5.0g，33.1mmol)和DIEA(10.7g，82.8mmol)于DMF(50mL)的溶液中滴加溴甲基苯(5.7g，33.1mmol)。在室温下搅拌2小时后，将混合物倒入水(50mL)中，并用EA(50mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥，浓缩，并通过二氧化硅色谱柱纯化(EA/PE＝1/4)，得到淡黄色油状的产物(3.5g，51.6％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.34-7.20(m,5H),3.62(s,3H),3.53(s,2H),3.41-3.35(m,1H),3.29-3.31(m,2H),3.19-3.22(m,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+206.0。
步骤2：1-(1-苄基-3-(甲氧基羰基)氮杂环丁烷-3-基)肼-1,2-二羧酸二叔丁酯
用与用于化合物38的步骤1类似的过程，由1-苄基氮杂环丁烷-3-羧酸甲酯和偶氮二羧酸二叔丁酯制备期望的产物。MS(ESI,m/e)[M+1]+435.9。
步骤3-5：5-氨基-1-(1-苄基-3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈
用与用于化合物38的那些过程(步骤2-4)类似的过程，由1-(1-苄基-3-(甲氧基羰基)氮杂环丁烷-3-基)肼-1,2-二羧酸二叔丁酯制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ7.78(d,J＝8.8Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.36-7.21(m,5H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.11-7.04(m,4H),6.17(s,2H),5.50(t,J＝5.2Hz,1H),3.89(d,J＝5.2Hz,2H),3.61-3.63(m,4H),3.38(d,J＝6.4Hz,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+451.9。
步骤6：甲磺酸(3-(5-氨基-4-氰基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-1-基)-1-苄基氮杂环丁烷-3-基)甲基酯
用与用于化合物38的步骤5类似的过程，由5-氨基-1-(1-苄基-3-(羟基甲基)氮杂环丁烷-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ7.82-7.74(m,2H),7.46-7.38(m,2H),7.36-7.23(m,5H),7.21-7.15(m,1H),7.13-7.04(m,4H),6.52(s,2H),4.69(s,2H),3.70(d,J＝8.4Hz,2H),3.66(s,2H),3.49(d,J＝8.4Hz,2H),3.13(s,3H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+529.9。
步骤7,8：1-苄基-6'-(4-苯氧基苯基)-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-咪唑并[1,2-b]吡唑]-7'-甲酰胺
用与用于化合物38的那些过程(步骤6和7)类似的过程，由甲磺酸(3-(5-氨基-4-氰基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-1-基)-1-苄基氮杂环丁烷-3-基)甲基酯。1H NMR(DMSO-d6)δ7.66(d,J＝8.8Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.35-7.28(m,4H),7.28-7.21(m,1H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(d,J＝8.0Hz,2H),7.01(d,J＝8.8Hz,2H),6.52(s,1H),4.19(s,2H),3.67(s,2H),3.54(s,4H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+451.9。
化合物45：6'-(4-苯氧基苯基)-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-咪唑并[1,2-b]吡唑]-7'-甲酰胺
用与用于化合物39的过程类似的过程，由化合物44制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ7.67(d,J＝8.4Hz,2H),7.46-7.36(m,2H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(d,J＝7.6Hz,2H),7.00(d,J＝8.4Hz,2H),6.62(s,1H),4.19-4.20(m,4H),3.78(d,J＝9.6Hz,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+361.9。
化合物46：1-丙烯酰基-6'-(4-苯氧基苯基)-1',2'-二氢螺[氮杂环丁烷-3,3'-咪唑并[1,2-b]吡唑]-7'-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物45和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(DMSO-d6)δ7.66(d,J＝8.8Hz,2H),7.45-7.37(m,2H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),7.06(d,J＝7.6Hz,2H),7.00(d,J＝8.8Hz,2H),6.62(s,1H),6.36(dd,J＝17.0,10.3Hz,1H),6.15(dd,J＝17.0,2.1Hz,1H),5.72(dd,J＝10.3,2.1Hz,1H),4.62(d,J＝9.6Hz,1H),4.56(d,J＝9.6Hz,1H),4.32(d,J＝11.2Hz,1H),4.27(d,J＝11.2Hz,1H),4.22(s,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+415.9。
实施例20:化合物47-50的合成
化合物47：2-(3-氨基苯基)-6-(4-苯氧基苯基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺
步骤1：5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
将5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(1.0g，3.6mmol)于H3PO4(20ml)中的溶液加热至120℃，持续4小时。随后将混合物倒入水(100mL)中，并用EA(100mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥，浓缩，得到黄色固体状的产物(850mg，77.5％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+295.1。
步骤2：2-(3-硝基苯基)-6-(4-苯氧基苯基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺
将5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(29.4mg，0.1mmol)和2-溴-1-(3-硝基苯基)乙酮(24.4mg，0.1mmol)于EtOH(2mL)中的混合物在80℃下搅拌16小时。过滤混合物，得到5mg黄色固体状的粗产物2-(3-硝基苯基)-6-(4-苯氧基苯基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+440.0。
步骤3：2-(3-氨基苯基)-6-(4-苯氧基苯基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺
向2-(3-硝基苯基)-6-(4-苯氧基苯基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺(600mg，1.37mmol)于10mL MeOH和10mL DCM的溶液中加入10％w/w Pd/C(100mg)。在H2下在室温下搅拌4小时后，过滤混合物。浓缩滤液，并通过制备型HPLC纯化(30％-90％CH3CN于含有0.1％TFA的水中的溶液洗脱)。合并含有期望产物的级分，冻干过夜，得到73mg(13％)白色固体状的2-(3-氨基苯基)-6-(4-苯氧基苯基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.03(d,J＝10.4Hz,1H),8.14(d,J＝8.0Hz,1H),7.73(d,J＝8.4Hz,2H),7.44(d,J＝7.6Hz,1H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.38-7.26(m,3H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.10(d,J＝8.0Hz,2H),7.03(d,J＝8.4Hz,2H),6.98-6.86(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+409.9。
化合物48：2-(3-丙烯酰胺基苯基)-6-(4-苯氧基苯基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由2-(3-氨基苯基)-6-(4-苯氧基苯基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺和丙烯酰氯制备期望的产物。1HNMR(400MHz,CD3OD-d4)δ8.06(s,1H),7.83(s,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,1H),7.52-7.38(m,5H),7.15(t,J＝7.6Hz,1H),7.09-7.05(m,4H),6.49-6.37(m,2H),5.80(dd,J＝4.0,8.8Hz,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+463.9。
化合物49：3-(3-氨基苯基)-6-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[1,5-a]咪唑-7-甲酰胺
在化合物48的步骤2中，期望的产物作为另一异构体分离。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.22(d,J＝2.4Hz,1H),8.03(s,1H),7.89(d,J＝2.4Hz,1H),7.81-7.68(m,3H),7.46-7.37(m,4H),7.19(t,J＝7.6Hz,1H),7.13-7.08(m,5H),6.98(d,J＝7.6Hz,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+410.1。
化合物50：3-(3-丙烯酰胺基苯基)-6-(4-苯氧基苯基)-1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-7-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物49和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.18(d,J＝2.4Hz,1H),10.31(s,1H),8.38(s,1H),7.85(d,J＝8.0Hz,1H),7.80-7.73(m,4H),7.46-7.40(m,3H),7.19(t,J＝8.0Hz,1H),7.13-7.07(m,4H),6.50(dd,J＝10.2,17.0Hz,1H),6.27(d,J＝17.0Hz,1H),5.76(d,J＝10.2Hz,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+463.9。
实施例21：化合物51-60的合成
化合物51：2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺三氟乙酸盐
步骤1：3-溴-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯
在室温下，向4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(5g，25mmol)于30mLDMF的溶液中加入TEA(7.7mL，55mmol)和TMSCl(3.5mL，27.6mmol),混合物在75℃下搅拌过夜。反应冷却到室温，加入冷的饱和NaHCO3水溶液(200mL)，随后加入冷的正己烷(200mL)。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物，其直接用于下步反应。残余物溶解在15mL THF中，并在0℃下搅拌15min。缓慢加入NBS(4.47g，25mmol)于80mL THF中的溶液。加入之后，反应在室温下搅拌过夜。向反应中加入水(200mL)，随后加入正己烷(200mL)。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到的粗产物，该粗产物用60g硅胶色谱(用PE/EA(20/1-8/1)作为洗脱液)纯化，得到5.56g(78％)白色固体状的3-溴-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.85-4.70(m,1H),4.20-4.00(m,1H),3.90-3.55(m,3H),2.80-2.68(m,1H),2.54-2.44(m,1H),1.43(s,9H)。MS(ESI)m/e[M-t-Bu]+221.9,224.0。
步骤2：3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-7(8H)-羧酸叔丁酯
将5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(1.5g，5.4mmol)和K2CO3(2.24g，16.3mmol)于50mL DMF中的混合物在80℃下在氮气下搅拌45min，随后加入一份3-溴-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.5g，16.3mmol)。随后，反应混合物在80℃下搅拌1小时。冷却至室温后，加入150mL水和150mL EA。水相进一步用EA(100mL×3)萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物，其用15g硅胶色谱(DCM/MeOH(400/1-200/1)作为洗脱液)纯化，得到850mg(35％)灰白色固体状的3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-7(8H)-羧酸叔丁酯。MS(ESI)m/e[M+1]+455.9。
步骤3：2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺三氟乙酸盐
将3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(130mg，0.28mmol)于H3PO4(85wt.％于H2O中,20mL)中的溶液在100℃下搅拌1.5小时，直到TLC和LCMS分析显示大部分起始物质已消耗。混合物冷却到室温，并倒入水(100mL)中。用固体K2CO3调节混合物的pH＝9-10。悬浮液用EA(100mL×4)萃取。有机层用盐水(200mL)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物，其用制备型HPLC纯化(用10％-90％CH3CN于含有0.1％TFA的H2O中的溶液洗脱)。合并含有期望产物的级分，冻干过夜，得到15mg(11％)白色固体状的2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺三氟乙酸盐。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.99(s,1H),9.32(s,2H),7.66(d,J＝8.6Hz,2H),7.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.41(d,J＝7.6Hz,1H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.10-7.06(m,4H),4.44(s,2H),3.49(m,2H),2.95-2.92(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+373.9。
化合物52:7-丙烯酰基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物51和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6at 80℃)δ11.55(s,1H),7.71(d,J＝8.6Hz,2H),7.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.41(d,J＝7.6Hz,1H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.10-7.05(m,4H),6.88(dd,J＝10.6,17.1Hz,1H),6.24(s,2H),6.15(d,J＝17.1Hz,1H),5.74(d,J＝10.6Hz,1H),4.78(s,2H),3.94-3.91(m,2H),2.80-2.76(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+427.9.
化合物53：7-(3-氯丙酰基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
将7-丙烯酰基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(40mg，0.09mmol)悬浮于饱和HCl(气体)/二
烷(50mL)中，随后混合物在室温下搅拌约1.5小时，浓缩至干。残余物悬浮于2mL MeOH和2mL水中。弃去有机层，冻干水层，得到40mg(90％)灰白色固体状的7-(3-氯丙酰基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79-11.76(m,1H),7.68(d,J＝8.6Hz,2H),7.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.41(d,J＝7.6Hz,1H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.10-7.04(m,4H),4.71-4.70(m,2H),3.85-3.79(m,4H),3.02(t,J＝6.4Hz,2H),2.79-2.69(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+463.8,465.8。
化合物54和55：(E)-7-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺和7-乙酰基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
(E)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸盐酸盐(147mg，0.88mmol)、HATU(611mg，1.6mmol)和TEA(328mg，3.2mmol)于50ml DCM中的混合物在室温下搅拌约2小时，随后加入2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(300mg，0.8mmol)。混合物在室温下搅拌过夜。TLC和LCMS分析表明，起始物质被消耗。向反应中加入100mL水和50mL DCM。水相进一步用50ml DCM萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物，该粗产物用5g硅胶色谱(用DCM/MeOH(20/1-10/1)作为洗脱液)纯化，得到145mg(37％)(E)-7-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺，其通过冻干干燥。1HNMR(400MHz,DMSO-d6at 80℃)δ11.52(s,1H),7.69(d,J＝8.6Hz,2H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.41(d,J＝7.6Hz,1H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),7.12-6.99(m,4H),6.78-6.56(m,2H),6.22(s,2H),4.75(s,2H),3.89(t,J＝5.6Hz,2H),3.12(d,J＝5.6Hz,2H),2.80-2.72(m,2H),2.22(s,6H)。MS(ESI)m/e[M+1]+484.9。
由于上步中的一些HOAc残余物，7-乙酰基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺作为副产物而制备。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.77-11.73(m,1H),7.70-7.66(m,2H),7.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.41(d,J＝7.6Hz,1H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.13-6.94(m,4H),4.68(s,2H),3.83-3.76(m,2H),2.82-2.77(m,2H),2.14(s,3H)。MS(ESI)m/e[M+1]+416。
化合物56：7-(2-氰基乙酰基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
根据与用于化合物54的过程类似的过程，由2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺和2-氰基乙酸制备期望的化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6at 80℃)δ11.55(s,1H),7.68(d,J＝8.6Hz,2H),7.41(d,J＝7.6Hz,1H),7.39(d,J＝7.6Hz,1H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),7.11-6.93(m,4H),6.22(br s,2H),4.68(s,2H),4.14(s,2H),3.86-3.79(m,2H),2.84-2.73(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+440.9。
化合物57：7-(3-(二甲基氨基)丙酰基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺三氟乙酸盐
在室温下，向7-丙烯酰基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(6mg，0.014mmol)于5mLMeOH的溶液中加入NaOMe(15mg，0.28mmol)，随后加入二甲基胺盐酸盐(12mg，014mmol)，随后混合物在50℃下搅拌过夜。冷却至室温后，浓缩混合物。残余物通过制备型HPLC纯化(用0％-60％CH3CN于H2O中的溶液洗脱)。合并含有期望的产物的级分，冻干过夜，得到2.5mg(35％)黄色固体状的6-(3-(二甲基氨基)丙酰基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.84-11.82(m,1H),9.55(s,1H),7.69-7.66(m,2H),7.44(d,J＝7.6Hz,1H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.10-7.04(m,4H),4.75-4.72(m,2H),3.87-3.82(m,2H),3.02-3.00(m,2H),2.84-2.78(m,2H),2.77(s,6H),2.71-2.68(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+472.9。
化合物58：7-(丁-2-烯酰基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
根据与用于化合物54的过程类似的过程，由2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺和丁-2-烯酸制备期望的化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.78-11.71(m,1H),7.68(d,J＝8.6Hz,2H),7.46-7.39(m,2H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.11-7.04(m,4H),6.73-6.63(m,2H),4.80-4.71(m,2H),3.90(s,2H),2.76-2.70(m,2H),1.88-1.86(m,3H)。MS(ESI)m/e[M+1]+441.9。
化合物59和60：(E)-7-(3-氰基烯丙基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺和(Z)-7-(3-氰基烯丙基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
在室温下，向2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(100mg，0.268mmol)于10mL丙酮的溶液中加入K2CO3(140mg，1.07mmol)。在室温下搅拌2小时后，加入4-溴丁-2-烯腈(40mg，0.268mmol)于2mL丙酮中的溶液，并在室温下搅拌过夜。然后，混合物在EA(50mL)和水(100mL)之间分配。水相进一步用50mL EA萃取，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物，该粗产物进一步通过制备型TLC(DCM/MeOH＝15/1)纯化，得到7mg(6％)淡黄色固体状的(E)-7-(3-氰基烯丙基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ10.45(s,1H),7.59(d,J＝8.4Hz,2H),7.42-7.30(m,2H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),7.10(d,J＝8.4Hz,2H),7.06(d,J＝7.6Hz,2H),6.76(dt,J＝16.3,4.6Hz,1H),5.67(d,J＝16.3Hz,1H),5.62(s,2H),3.82(s,2H),3.41(d,J＝4.6Hz,2H),2.95-2.75(m,4H)。MS(ESI)m/e[M+1]+439.9。
4mg(3.4％)淡黄色固体状的(Z)-7-(3-氰基烯丙基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[5',1':2,3]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ10.22(s,1H),7.60(d,J＝8.4Hz,2H),7.41-7.33(m,2H),7.16(t,J＝7.6Hz,1H),7.10(d,J＝8.4Hz,2H),7.06(d,J＝7.6Hz,2H),6.70-6.59(m,1H),5.58(s,2H),5.53(d,J＝11.2Hz,1H),3.85(s,2H),3.64(d,J＝6.4Hz,2H),2.99-2.80(m,4H)。MS(ESI)m/e[M+1]+439.9。
实施例22：化合物61-64的合成
化合物61：2-(4-苯氧基苯基)-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1：3-溴-4-肼基吡啶
将3-溴-4-氯吡啶(5g，0.026mol)和水合肼(80％于水中，80mL)于二烷(100mL)中的混合物在100℃下搅拌过夜。冷却至室温后，浓缩混合物。残余物在300mL EA和300mL饱和NH4Cl水溶液之间分配。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物，其悬浮于30mL冷的异丙醇中，过滤。收集的固体在空气中干燥，得到4.2g(87％)白色固体状的3-溴-4-肼基吡啶。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.18(s,1H),8.07(d,J＝5.6Hz,1H),7.37(s,1H),7.01(d,J＝5.6Hz,1H),4.36(s,2H)。
步骤2：5-氨基-1-(3-溴吡啶-4-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈
将2-(甲氧基(4-苯氧基苯基)亚甲基)丙二腈(7.3g，0.026mol)和3-溴-4-肼基吡啶(4.2g，0.022mol)于乙醇(300mL)中的混合物在氮气下回流搅拌过夜。反应缓慢冷却至室温，并在室温下搅拌约4小时，直到产生固体沉淀。过滤固体，收集，并用己烷洗涤，得到3.38g(35％)淡黄色固体状的5-氨基-1-(3-溴吡啶-4-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈。MS(ESI)m/e[M+1]+431.8,433.8。
步骤3：5-氨基-1-(3-溴吡啶-4-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
根据与用于化合物51的步骤3类似的过程，由5-氨基-1-(3-溴吡啶-4-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈制备期望的产物。MS(ESI)m/e[M+1]+449.8,451.8。
步骤4：2-(4-苯氧基苯基)-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
将5-氨基-1-(3-溴吡啶-4-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(3.96g，8.8mmol)、CuI(836mg，4.4mmol)、N1,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(77mg，0.88mmol)和K3PO4(5.59g，26.4mmol)于100mL DMF中的混合物在100℃下在氮气下搅拌2小时，直至TLC表明大部分起始物质被消耗。冷却至室温后，过滤混合物并浓缩。残余物用30g硅胶色谱(用DCM/MeOH(20/1-10/1)作为洗脱液)纯化，得到3.2g(99％)褐色固体状的2-(4-苯氧基苯基)-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.63(br s,1H),8.85(s,1H),8.46(s,1H),7.96(d,J＝4.6Hz,1H),7.81(d,J＝8.6Hz,2H),7.45(d,J＝7.6Hz,1H),7.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.20(t,J＝7.6Hz,1H),7.14-7.09(m,4H)。MS(ESI)m/e[M+1]+369.9。
化合物62：2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
步骤1：6-苄基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
向2-(4-苯氧基苯基)-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(2.46g,0.0067mol)于150mL THF的悬浮液中滴加苄溴(1.14g，0.0067mol)，然后混合物在65℃下搅拌过夜。冷却至室温后，浓缩混合物，残余物悬浮于150mL MeOH中，分批加入NaBH4(10g，0.26mol)。混合物在室温下搅拌过夜。向反应中加入200mL水，随后加入200mL DCM。水相进一步用100mL DCM萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物，该粗产物用10g硅胶色谱(用DCM/MeOH(200/1-80/1)作为洗脱液)纯化，得到0.786g(26％)褐色泡沫状的6-苄基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+463.9。
步骤2：2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺
将6-苄基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺(640mg，0.00138mol)和10％w/w Pd/C(700mg)于60mL MeOH中的混合物在室温下在1atm的H2下搅拌过夜。TLC和LCMS分析表明起始物质被消耗。过滤反应，浓缩滤液，得到397mg(77％)2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ7.65-7.55(m,2H),7.43-7.33(m,2H),7.18-7.12(m,1H),7.11-6.99(m,4H),4.18(s,2H),3.44(t,J＝5.8Hz,2H),3.01(t,J＝5.8Hz,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+373.9。
化合物63：6-丙烯酰基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺三氟乙酸盐
根据与用于化合物8的过程类似的过程，由2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺和丙烯酰氯制备期望的化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),7.73(d,J＝8.6Hz,2H),7.50(d,J＝7.6Hz,1H),7.48(d,J＝7.6Hz,1H),7.24(t,J＝7.6Hz,1H),7.17-7.11(m,4H),7.06-6.98(m,1H),7.22-6.26(m,1H),5.84-5.82(m,1H),4.72(s,2H),4.00-3.97(m,2H),2.94-2.90(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+427.9。
化合物64：(E)-6-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺三氟乙酸盐
根据与用于化合物54的过程类似的过程，由2-(4-苯氧基苯基)-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1',5':1,2]咪唑并[4,5-c]吡啶-3-甲酰胺和(E)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸盐酸盐制备期望的化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.82-11.74(m,1H),10.06(br s,1H),7.66(d,J＝8.6Hz,2H),7.43(d,J＝7.6Hz,1H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.10-7.05(m,4H),6.74-6.54(m,2H),4.66(s,2H),3.99-3.86(m,4H),2.88-2.76(m,2H),2.78(s,6H)。MS(ESI)m/e[M+1]+484.9。
实施例23：化合物65-67的合成
化合物65：7-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-4H-苯并[4,5]咪唑并[1,2-b]吡唑-3-甲酰胺
步骤1：(2-溴-5-硝基苯基)肼
在0℃下，向2-溴-5-硝基苯胺(1g，4.6mmol)于浓HCl(10mL)的悬浮液中缓慢加入NaNO2(382mg，5.5mmol)于水(1.5mL)中的溶液。随后，混合物在0℃下搅拌3小时，直至TLC和LCMS分析表明大部分2-溴-5-硝基苯胺被消耗。缓慢加入SnCl2(1.90g，10mmol)于浓HCl(3mL)中的溶液。随后，混合物在室温下搅拌2小时，随后重新冷却到0℃。随后，用饱和的NaHCO3水溶液调节pH至7-8。混合物用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物，该粗产物进一步用10g硅胶色谱(用PE/EA(20/1到4/1)作为洗脱液)纯化，得到560mg(51％)橙色固体状的(2-溴-5-硝基苯基)肼。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.89(d,J＝2.8Hz,1H),7.60(d,J＝8.6Hz,1H),7.29(dd,J＝2.8,8.6Hz,1H),7.04(s,1H),4.38(s,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+232,234。
步骤2：5-氨基-1-(2-溴-5-硝基苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈
向2-(甲氧基(4-苯氧基苯基)亚甲基)丙二腈(392mg，1.42mmol),于乙醇(30mL)的溶液中加入一份(2-溴-5-硝基苯基)肼(300mg，1.29mmol)，随后，混合物在70℃下在氮气下搅拌过夜。混合物浓缩至干，并用5g硅胶色谱(用PE/EA(10/1-2/1)作为洗脱液)纯化，得到128mg(21％)黄色固体状的5-氨基-1-(2-溴-5-硝基苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈。MS(ESI)m/e[M+1]+476,478。
步骤3：5-氨基-1-(2-溴-5-硝基苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
将5-氨基-1-(2-溴-5-硝基苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(137mg，0.287mmol)于磷酸(85wt.％于H2O中，10mL)中的混合物在100℃下搅拌1小时，直至TLC和LCMS分析表明大部分起始物质被消耗。反应冷却至室温，并在水(40mL)和EA(40mL)之间分配。将有机层与水层分离。随后水相用EA(20mL)萃取。有机层用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物(149mg)，该粗产物未经进一步纯化直接用于下一步反应。MS(ESI)m/e[M+1]+494,496。
步骤3：7-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-4H-苯并[4,5]咪唑并[1,2-b]吡唑-3-甲酰胺
将5-氨基-1-(2-溴-5-硝基苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(149mg，0.3mmol，粗品)、CuI(5.7mg，0.03mmol)、N1,N2-二甲基乙烷-1,2-二胺(3mg，0.03mmol)、K3PO4(64mg，0.3mol)于15mL DMF中的混合物在氮气下在60℃下搅拌5小时，直至TLC分析表明大部分起始物质被消耗。反应冷却至室温。在减压下除去溶剂。残余物用5g硅胶色谱(用DCM/MeOH(200/1-20/1))纯化，得到62mg(52％)褐色固体状的7-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-4H-苯并[4,5]咪唑并[1,2-b]吡唑-3-甲酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+414。
化合物66：7-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4H-苯并[4,5]咪唑并[1,2-b]吡唑-3-甲酰胺
向7-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-4H-苯并[4,5]咪唑并[1,2-b]吡唑-3-甲酰胺(9mg，0.022mmol)于3mL HOAc的溶液中加入锌粉(14mg，0.22mmol)。随后混合物在室温下搅拌20分钟，直到TLC和LCMS分析表明大部分起始物质被消耗。滤出反应固体。浓缩滤液，悬浮于10mL EA中并过滤。浓缩滤液，得到白色固体状的产物(4mg，50％)。1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ7.60(d,J＝8.6Hz,2H),7.32(d,J＝8.0Hz,1H),7.30(d,J＝8.0Hz,1H),7.23(d,J＝8.4Hz,1H),7.16(s,1H),7.08(t,J＝8.0Hz,1H),7.05-6.95(m,4H),6.79(dd,J＝1.6,8.4Hz,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+384。
化合物67：7-丙烯酰胺基-2-(4-苯氧基苯基)-4H-苯并[4,5]咪唑并[1,2-b]吡唑-3-甲酰胺
在0℃下，向7-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4H-苯并[4,5]咪唑并[1,2-b]吡唑-3-甲酰胺(45mg，0.11mmol)于10mL DCM的溶液中加入TEA(36mg，0.35mmol)。在20min的时间内，滴加丙烯酰氯(11mg，0.12mmol)于2mL DCM中的溶液。搅拌混合物，直到TLC和LCMS分析表明大部分起始物质被消耗。随后混合物在水(50mL)和DCM(20mL)之间分配，用额外的20mL DCM萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，并通过制备型TLC(DCM/MeOH＝20/1)纯化，得到4mg(7.8％)灰色固体状的7-丙烯酰胺基-2-(4-苯氧基苯基)-4H-苯并[4,5]咪唑并[1,2-b]吡唑-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ8.25(s,1H),7.61(d,J＝8.4Hz,2H),7.44(d,J＝8.8Hz,1H),7.39(d,J＝8.8Hz,1H),7.32(d,J＝7.6Hz,1H),7.30(d,J＝7.6Hz,1H),7.08(t,J＝7.6Hz,1H),7.05-6.90(m,4H),6.42-6.25(m,2H),5.69(dd,J＝9.6,1.9Hz,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+438。
实施例24：化合物68-69的合成
化合物68：8-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺
步骤1：(2-氟-4-硝基苯基)甲醇
向2-氟-4-硝基苯甲醛(1.0g，5.92mmol)于CH3OH(10mL)的溶液中加入NaBH4(814mg，22mmol)。在室温下搅拌15分钟后，浓缩混合物。残余物在100mL EA和100mL盐水之间分配。有机层用盐水(100mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到1.0g(99％)红色固体状的(2-氟-4-硝基苯基)甲醇。MS(ESI)m/e[M+1]+172.0。
步骤2：2-(2-氟-4-硝基苄氧基)-四氢-2H-吡喃
向(2-氟-4-硝基苯基)甲醇(755mg，4.42mmol)于10mL DCM的溶液中加入TsOH(100mg，0.13mmol)和DHP(408mg，4.86mmol)。在室温下搅拌16小时后，浓缩混合物。残余物在100mL EA和100mL盐水之间分配。有机层用盐水(100mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，并通过硅胶色谱柱(用PE/EA洗脱)纯化，得到900mg(80％)无色油状的2-(2-氟-4-硝基苄氧基)-四氢-2H-吡喃。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(dd,J＝3.0,6.2Hz,1H),8.26-8.30(m,1H),7.53(t,J＝9.2Hz,1H),4.82-4.76(m,2H),4.62(d,J＝12.0Hz,1H),3.80-3.74(m,1H),3.52-3.47(m,1H),1.76-1.64(m,2H),1.58-1.45(m,4H)。
步骤3：5-氨基-1-(5-硝基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
向5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(27.6mg，0.1mmol)于DMF(3mL)和CH3CN(5mL)的溶液中加入2-(2-氟-4-硝基苄氧基)-四氢-2H-吡喃(25.5mg，0.1mmol)和K2CO3(27.6mg，0.2mmol)。在氮气下在80℃下搅拌16小时后，浓缩混合物，并用PE/EA重结晶，得到40mg(80％)黄色固体状的5-氨基-1-(5-硝基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+512.2。
步骤4：5-氨基-1-(2-(羟基甲基)-5-硝基苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
向5-氨基-1-(5-硝基-2-((四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲基)苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(690mg，1.3mmol)于10mL CH3CN的溶液中加入盐酸(3mL)。在室温下搅拌15min后，浓缩混合物，得到550mg(95％)黄色固体状的5-氨基-1-(2-(羟基甲基)-5-硝基苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺。
步骤5：5-氨基-1-(2-甲酰基-5-硝基苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
向5-氨基-1-(2-(羟基甲基)-5-硝基苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(550mg，1.24mmol)于20mL DCM的溶液中加入MnO2(500mg，5.75mmol)。在室温下搅拌16小时后，过滤混合物。浓缩滤液，得到400mg(73％)黄色固体状的5-氨基-1-(2-甲酰基-5-硝基苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺。
步骤6：8-硝基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺
向5-氨基-1-(2-甲酰基-5-硝基苯基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(400mg，0.9mmol)于5mL CH3OH和5mL DCM的溶液中加入HOAc(1滴)。在室温下搅拌16小时后，浓缩混合物，通过硅胶色谱柱(用PE/EA洗脱)纯化，得到240mg(63％)黄色固体状的8-硝基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+425.8。
步骤7：8-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺
在室温下，向8-硝基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺(240mg，0.57mmol)于10mL EtOH和10mL DCM的溶液中加入NaBH4(86mg，2.26mmol)。在室温下搅拌20分钟后，加入10mL水。浓缩混合物。加入5mL水并过滤。滤饼用叔丁基甲基醚(30mL)洗涤并干燥，得到200mg(83％)黄色固体状的8-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+427.9。
步骤8：8-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺和8-氨基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺
向8-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺(200mg，0.47mmol)于30mL CH3OH和30mL DCM的溶液中加入10％w/w Pd/C(100mg)。在室温下搅拌1小时后，过滤混合物。浓缩滤液，得到130mg(70％)黄色固体状的粗产物8-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺和8-氨基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+398.0,395.9。
步骤9：8-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺
向8-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺和8-氨基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺(130mg，0.33mmol)于10mL DCM和10mL CH3OH的溶液中加入NaBH4(277mg，3.3mmol)。在室温下搅拌15min后，加入50mL水。浓缩混合物并过滤。滤饼用水(50mL×2)洗涤，得到60mg(46％)黄色固体状的8-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.60(d,J＝8.0Hz,2H),7.44(d,J＝7.6Hz,1H),7.42(d,J＝7.6Hz,1H),7.28(d,J＝7.6Hz,1H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.14-7.16(m,4H),6.81(s,1H),6.52(d,J＝8.0Hz,1H),6.43(s,1H),5.16(s,2H),4.37(s,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+397.9。
化合物69：8-丙烯酰胺基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物68和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.26(s,1H),7.39-7.63(m,4H),7.52(d,J＝8.8Hz,1H),7.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.42(d,J＝8.0Hz,1H),7.19(t,J＝8.0Hz,1H),7.14-7.07(m,4H),7.01(s,1H),6.44(dd,J＝10.4,17.0Hz,1H),6.26(dd,J＝1.6,17.0Hz,1H),5.77(dd,J＝1.6,10.4Hz,1H),4.51(s,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+451.9。
实施例25:化合物70-72的合成
化合物70:8-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-苯并[f]吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂卓-3-甲酰胺
步骤1：2-(2-氟-5-硝基苯基)乙醇
向2-(2-氟-5-硝基苯基)乙酸(2.0g，10mmol)于THF(50mL)的溶液中加入硼烷二甲硫醚络合物溶液(4.0g，25mmol)。反应升温到60℃，搅拌约12小时。冷却到室温后，向反应中缓慢加入CH3OH(20mL)，在减压下浓缩，以除去溶剂。残余物通过硅胶柱色谱法(200-300目，PE/EA＝2:1)纯化，得到无色油状的产物(1.6g，86.1％)。1H NMR(DMSO-d6)δ8.27(dd,J＝3.2,6.4Hz,1H),8.19-8.14(m,1H),8.45(t,J＝9.2Hz,1H),4.80(t,J＝5.6Hz,1H),3.66(dt,J＝5.6,6.2Hz,1H),2.86(t,J＝6.2Hz,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+186。
步骤2：8-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-苯并[f]吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂卓-3-甲酰胺
向5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(30mg，0.10mmol)于DMF(5.0mL)的溶液中加入K2CO3(28mg，0.20mmol)，随后加入2-(2-氟-5-硝基苯基)乙醇(37mg，0.20mmol)。混合物升温到80℃，搅拌约16小时。冷却至室温后，在减压下浓缩混合物。残余物在乙酸乙酯(15mL)和水(15mL)之间分配，水相用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。有机层用盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，浓缩，并通过制备型TLC(DCM/CH3OH＝20/1)纯化，得到约5.0mg(11.1％)产物。1HNMR(DMSO-d6)δ8.35(dd,J＝3.2,4.0Hz,1H),8.27(d,J＝2.6Hz,1H),8.22(dd,J＝2.6,9.2Hz,1H),8.12(d,J＝9.2Hz,1H),7.64-7.60(m,2H),7.45-7.41(m,2H),7.22-7.17(m,1H),7.14-7.09(m,4H),3.72-3.65(m,2H),3.29-3.24(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+442。
化合物71：8-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-苯并[f]吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂卓-3-甲酰胺
向8-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-苯并[f]吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂卓-3-甲酰胺(80mg，0.18mmol)于乙醇(20mL)的溶液中加入10％w/w Pd/C(20mg)，反应在氢气下在室温下搅拌约3小时。过滤并用CH3OH(20mL)洗涤，在减压下滤液浓缩，残余物通过制备型TLC(DCM/CH3OH＝20/1)纯化，得到白色固体状的产物(20mg,26.8％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.73-7.69(m,1H),7.59-7.55(m,2H),7.45-7.40(m,3H),7.21-7.16(m,1H),7.13-7.07(m,4H),6.59-6.54(m,1H),6.50-6.47(m,1H),5.70-5.40(brs,2H),3.64-3.59(m,2H),2.99-2.94(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+412。
化合物72：8-丙烯酰胺基-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-苯并[f]吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂卓-3-甲酰胺
根据与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物71和丙烯酰氯制备期望的化合物。1H NMR(DMSO-d6)δ10.25(s,1H),7.95(t,J＝4.0Hz,1H),7.76(d,J＝8.8Hz,1H),7.65-7.58(m,4H),7.46-7.41(m,2H),7.21-7.17(m,1H),7.13-7.08(m,4H),6.44(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H),6.27(dd,J＝2.0,16.8Hz,1H),5.77(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),3.68-3.65(m,2H),3.05-3.03(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+466。
实施例26：化合物73-75的合成
化合物73：8-硝基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-苯并[f]吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂卓-3-甲酰胺
步骤1：2-(2-氟-5-硝基苯基)乙酸甲酯
向2-(2-氟-5-硝基苯基)乙酸(1.0g，5.0mmol)于CH3OH(20mL)的溶液中加入浓H2SO4(0.50mL)，反应温度升至80℃并搅拌约3小时。冷却至室温后，将反应倒入水(20mL)中并浓缩以除去CH3OH。水相用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，有机相用盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，浓缩，得到约1.0g(93.4％)无色油状的产物。MS(ESI)m/e[M+1]+214。
步骤2：8-硝基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-苯并[f]吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂卓-3-甲酰胺
向5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(30mg，0.10mmol)于DMF(5mL)的溶液中加入K2CO3(28mg，0.20mmol)和2-(2-氟-5-硝基苯基)乙酸甲酯(21mg，0.10mmol)。混合物温度升至80℃，搅拌约16小时。冷却至室温后，在减压下浓缩混合物以除去溶剂。残余物在DCM(10mL)和水(10mL)之间分配，水相用DCM(10mL×2)萃取，有机相用饱和氯化钠(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并通过制备型TLC(DCM/CH3OH＝20/1)纯化，得到约10mg(21.9％)产物。1H NMR(DMSO-d6)δ10.66(br s,1H),8.51(d,J＝2.6Hz,1H),8.37(dd,J＝2.6,9.2Hz,1H),8.07(d,J＝9.2Hz,1H),7.85(d,J＝8.8Hz,2H),7.65-7.53(br s,2H),7.45-7.40(m,2H),7.22-7.16(m,1H),7.12-7.05(m,4H),3.92(s,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+456。
化合物74：8-氨基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-苯并[f]吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂卓-3-甲酰胺
根据与用于化合物71的过程类似的过程，由8-硝基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-苯并[f]吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂卓-3-甲酰胺制备化合物74。1H NMR(CD3OD-d4)δ7.72-7.67(m,2H),7.52(d,J＝8.8Hz,1H),7.42-7.37(m,2H),7.19-7.14(m,1H),7.11-7.05(m,4H),6.80(dd,J＝2.6,8.8Hz,1H),6.69(d,J＝2.6Hz,1H),3.59(s,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+426.1。
化合物75：8-丙烯酰胺基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-苯并[f]吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂卓-3-甲酰胺
根据与用于化合物8的过程类似的过程，由8-氨基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-5,6-二氢-4H-苯并[f]吡唑并[1,5-a][1,3]二氮杂卓-3-甲酰胺和丙烯酰氯制备化合物75。1H NMR(CD3OD-d4)δ7.85-7.79(m,3H),7.75-7.71(m,2H),7.43-7.37(m,2H),7.20-7.14(m,1H),7.12-7.06(m,4H),6.50-6.35(m,2H),5.81(dd,J＝2.6,9.0Hz,1H),3.75(s,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+480.1。
实施例27：化合物76-79的合成
化合物76：7-硝基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺
将5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(220mg，0.75mmol)、2-氯-5-硝基苯甲酸甲酯(160mg，0.75mmol)和K2CO3(155mg，1.13mmol)于DMF(10mL)中的混合物在氮气下加热至80℃，持续16小时。将反应物倒入水(30ml)中，并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥，在减压下浓缩至残余物，该残余物通过硅胶柱(用10％-50％EA于PE中的溶液洗脱)纯化，得到85mg(27.3％)黄色固体状的7-硝基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺。MS(ESI,m/e)[M+1]+442.1。
化合物77：7-氨基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺
根据与用于化合物71的过程类似的过程，由7-硝基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺制备化合物77。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.88(br s,1H),7.80(d,J＝8.4Hz,1H),7.71(d,J＝6.8Hz,2H),7.36-7.42(m,2H),7.27(s,1H),7.02-7.17(m,6H),5.62(s,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+412.1。
化合物78：7-丙烯酰胺基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺
根据与用于化合物8的过程类似的过程，由7-氨基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺和丙烯酰氯制备化合物78。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.37(s,1H),10.77(s,1H),8.65(s,1H),8.24(d,J＝8Hz,1H),8.15(d,J＝8Hz,1H),7.85(d,J＝7.6Hz,2H),7.48-7.52(m,2H),7.2-7.15(m,5H),6.57(dd,J＝9.2,18.0Hz,1H),6.37(d,J＝18.0Hz,1H),5.87(d,J＝9.2Hz,1H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+466.1。
化合物79：8-氨基-5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]喹唑啉-3-甲酰胺
用与用于化合物76和77的过程类似的过程，由2-氯-4-硝基苯甲酸甲酯和5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺制备期望的产物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.61(s,1H),7.77(d,J＝8.4Hz,1H),7.71(d,J＝8.0Hz,2H),7.44-7.36(m,2H),7.19-7.02(m,6H),6.64(d,J＝8.4Hz,1H),6.55(br s,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+412.1。
实施例28：化合物80-81的合成
化合物80：5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-7-(哌啶-4-基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：4-(2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二烷-5-羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
向1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(1.15g，5mmol)和DMAP(61mg，0.5mmol)于DCM(50mL)的搅拌混合物中加入DCC(1.14g，5.5mmol)和2,2-甲基-1,3-二烷-4,6-二酮(0.8g，5.5mmol)。所得混合物在室温下搅拌16小时并过滤。在真空下浓缩滤液，得到2g(粗产物)黄色油状的4-(2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二烷-5-羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯，其未经进一步纯化直接用于下一步反应。MS(ESI)m/e[M+23]+378.1。
步骤2：4-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
将4-(2,2-二甲基-4,6-二氧代-1,3-二烷-5-羰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(2g，5.63mmol)于乙醇(50ml)中的溶液回流20小时，随后在真空下除去溶剂，残余物通过硅胶色谱纯化(用DCM洗脱)，得到0.5g(30％)微红色油状的4-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯。MS(ESI)m/e[M+23]+322.2。
步骤3：5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-7-(哌啶-4-基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(412mg，1.4mmol)和4-(3-乙氧基-3-氧代丙酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(420mg，1.4mmol)于HOAc(20mL)中的混合物在90℃下搅拌16小时。在真空下除去溶剂，且残余物在NaHCO3水溶液和乙酸乙酯之间分配。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。残余物通过制备型HPLC纯化(用25％-90％CH3CN于含有0.1％TFA的水的溶液洗脱)。合并含有期望产物的级分，冻干过夜，得到白色固体状的5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-7-(哌啶-4-基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(0.3g，50％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.71(br s,1H),8.68-8.65(m,1H),8.42-8.39(m,1H),7.74(d,J＝8.4Hz,2H),7.47-7.41(m,2H),7.22-7.18(m,1H),7.14-7.09(m,4H),5.72(s,1H),3.50-3.35(m,2H),3.17-3.06(m,1H),3.01-2.87(m,2H),2.15-2.05(m,2H),1.83-1.72(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+430.1。
化合物81:5-氧代-2-(4-苯氧基苯基)-7-(1-丙酰基哌啶-4-基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物80和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.74(s,1H),7.75(d,J＝8.4Hz,2H),7.47-7.41(m,2H),7.20(t,J＝7.2Hz,1H),7.12-7.09(m,4H),6.85(dd,J＝10.6,16.6Hz,1H),6.12(dd,J＝2.4,16.6Hz,1H),5.76(s,1H),5.69(dd,J＝2.4,10.6Hz,1H),4.63-4.58(m,1H),4.24-4.20(m,1H),3.15-3.05(m,2H),2.69-2.63(m,1H),1.99-1.91(m,2H),1.61-1.58(m,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+483.9。
实施例29：化合物82-83的合成
化合物82：2-氧代-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲酰胺
步骤1：1'-苄基-2-氧代-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲腈
1-苄基-4-肼基哌啶-4'-羧酸乙酯基盐酸盐(350mg，1.0mmol)、2-(甲氧基(4-苯氧基苯基)亚甲基)丙二腈(276mg，1.0mmol)和K2CO3(414mg，3.0mmol)于MeOH(20mL)中的混合物加热回流16小时。过滤混合物，浓缩滤液，得到黄色固体状的粗产物(280mg，58.9％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+475.9。
步骤2：1'-苄基-2-氧代-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲酰胺
将1'-苄基-2-氧代-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲腈(200mg，0.42mmol)于H3PO4(15mL)中的溶液加热至120℃，持续2小时。将溶液倒入水(10mL)中，并用EA(10mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到灰白色固体状的粗产物(120mg，58.0％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+493.9。
步骤3：2-氧代-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑3,4'-哌啶]-7-甲酰胺
向1'-苄基-2-氧代-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲酰胺(120mg，0.24mmol)于MeOH(10mL)的溶液中加入10％w/w Pd(OH)2/C(5mg)，并在H2下搅拌16小时。过滤混合物，浓缩滤液，得到黄色固体状的粗产物(280mg，58.9％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+403.9。
化合物83：1'-丙烯酰基-2-氧代-6-(4-苯氧基苯基)-1,2-二氢螺[咪唑并[1,2-b]吡唑-3,4'-哌啶]-7-甲酰胺
根据与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物82和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.91(s,1H),7.71(d,J＝8.4Hz,2H),7.47-7.37(m,2H),7.25(br s,1H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),7.08-7.02(m,4H),6.88(dd,J＝16.6,10.4Hz,1H),6.80(br s,1H),6.16(d,J＝16.6Hz,1H),5.72(d,J＝10.4Hz,1H),4.32-4.14(m,1H),4.12-3.99(m,1H),3.97-3.81(m,1H),3.76-3.60(m,1H),1.86-1.91(m,4H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+457.9。
实施例30：化合物84-85的合成
化合物84：6-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：6-硝基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(83mg，0.3mmol)于HOAc(2mL)的溶液中加入2-硝基-1,3-二氧代丙烷-2-化钠(47mg，0.3mmol)。在室温下搅拌1小时后，加水(2mL)。混合物在EA(25mL)和盐水(25mL)之间分配。有机层用盐水(25mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到90mg黄色固体状的6-硝基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(84％)。MS(ESI)m/e[M+1]+358.2。
步骤2：6-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
在室温下，向6-硝基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(90mg，0.25mmol)于2mL乙醇和2mL DCM的溶液中加入NaBH4(19mg，0.5mmol)。在室温下搅拌30分钟后，加入5mL水。浓缩混合物。残余物在50mL DCM和50mL盐水之间分配。有机层用盐水(50mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到50mg黄色固体状的6-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(55％)。MS(ESI)m/e[M+1]+362.1。
步骤3：6-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向6-硝基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(600mg，1.67mmol)于30mL甲醇和10mL DCM的溶液中加入10％w/w Pd/C(100mg)。混合物在氢气下在室温西搅拌2小时并过滤。浓缩滤液，并通过硅胶色谱柱纯化(用PE/EA洗脱)，得到200mg(36％)白色固体状的6-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈。MS(ESI)m/e[M+1]+332.1。
步骤4：6-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物2的步骤2类似的过程，由6-氨基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.53-7.48(m,2H),7.46-7.40(m,2H),7.22-7.16(m,1H),7.11-7.03(m,4H),6.58(br s,1H),4.15-4.08(m,1H),3.72-3.67(m,1H),3.40-3.30(m,2H),3.06-2.98(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+350.2。
化合物85：6-丙烯酰胺基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物84和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(d,J＝7.2Hz,1H),7.52(d,J＝8.8Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.18(dd,J＝7.2,7.6Hz,1H),7.09(d,J＝8.0Hz,2H),7.05(d,J＝8.8Hz,2H),6.67(br s,1H),6.34(dd,J＝10.0,17.2Hz,1H),6.15(dd,J＝2.0,17.2Hz,1H),5.63(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),4.32-4.40(m,1H),4.22(dd,J＝4.8,12.4Hz,1H),3.91(dd,J＝4.8,12.4Hz,1H),3.40(m,1H),3.26(dd,J＝5.2,12.0Hz,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+404.1。
实施例31：化合物86的合成
化合物86：6-(丙烯酰胺基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯
向5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(276mg，1.0mmol)于EtOH(10mL)的溶液中加入2-甲酰基-3-氧代丙酸乙酯(144mg，1.0mmol)和HOAc(5滴)。在室温下搅拌16小时后，过滤混合物。用H2O(10mL×2)洗涤滤饼并干燥，得到250mg(65％)黄色固体状的3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯。MS(ESI)m/e[M+1]+384.9。
步骤2：6-(羟基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向3-氰基-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯(250mg，0.65mmol)于DCM(5mL)和CH3OH(5mL)的溶液中加入NaBH4(250mg，6.5mmol)。在室温下搅拌16小时后，混合物在DCM/CH3OH(100mL/5mL)和盐水(100mL)之间分配。有机层与水层分离，用Na2SO4干燥并浓缩，得到250mg(100％)6-(羟基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈。MS(ESI)m/e[M+1]+346.9。
步骤3：6-(羟基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物2的步骤2类似的过程，由6-(羟基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈制备期望的产物。MS(ESI)m/e[M+1]+364.9。
步骤4：6-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向异吲哚啉-1,3-二酮(74mg,0.5mmol)于THF(20mL)的溶液中加入PPh3(393mg，1.5mmol)和6-(羟基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(180mg，0.5mmol)。在0℃下，滴加DIAD(253mg，1.25mmol)，并搅拌10分钟。混合物升至室温并搅拌16小时。浓缩并通过5g硅胶色谱柱(用DCM/CH3OH洗脱)纯化，得到200mg(62％)黄色固体状的6-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+493.9。
步骤5：6-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向6-((1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg，0.40mmol)于CH3OH(5mL)的溶液中加入水合肼(1mL,80％的水溶液)。混合物在70℃下在N2下搅拌4小时，浓缩，并通过5g硅胶色谱柱(用DCM/CH3OH洗脱)纯化，得到63mg(43％)无色油状的6-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。MS(ESI)m/e[M+1]+363.9。
步骤6：6-(丙烯酰胺基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由6-(氨基甲基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(t,J＝5.6Hz,1H),7.51(d,J＝8.8Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.17(t,J＝7.6Hz,1H),7.08(d,J＝7.6Hz,2H),7.04(d,J＝8.8Hz,2H),6.61(s,1H),6.25(dd,J＝17.1,10.1Hz,1H),6.11(dd,J＝17.1,2.2Hz,1H),5.62(dd,J＝10.1,2.2Hz,1H),4.07(dd,J＝12.4,6.0Hz,1H),3.73(dd,J＝12.4,8.0Hz,1H),3.41-3.34(m,1H),3.27-3.21(m,2H),3.09-2.96(m,1H),2.37-2.24(m,1H)。MS(ESI)m/e[M+1]+417.9。
实施例32：化合物87-88的合成
化合物87：2'-(4-苯氧基苯基)-5',7'-二氢-4'H-螺[氮杂环丁烷-3,6'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺
步骤1：1-苄基氮杂环丁烷-3,3-二羧酸二乙酯
在-20℃下，向2,2-双(羟基甲基)丙二酸二乙酯(4.4g，20mmol)于CH3CN(50mL)的溶液中加入Tf2O(7.1mL，11.85g，42mmol)，然后加入两批DIEA(6.45g，50mmol)。0.5小时后，在-20℃下，加入苄胺(3.21g，35mmol)。混合物在70℃下搅拌2小时。加入100mL EA和100mL盐水。有机层用Na2SO4干燥。通过硅胶色谱柱纯化(用PE/EA洗脱)，得到4.8g(82％)黄色油状的1-苄基氮杂环丁烷-3,3-二羧酸二乙酯。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.29-7.34(m,2H),7.22-7.27(m,3H),4.17(q,J＝7.2Hz,4H),3.56(s,2H),3.51(s,4H),2.39(s,3H),1.17(t,J＝7.2Hz,6H)。
步骤2：(1-苄基氮杂环丁烷-3,3-二基)二甲醇
向1-苄基氮杂环丁烷-3,3-二羧酸二乙酯(4.8g，16.5mmol)于CH3OH(10mL)的溶液中加入NaBH4(1.25g，33mmol)。混合物在室温下搅拌1小时。加入100mL盐水和200mL DCM。有机层与水层分离，用Na2SO4干燥，浓缩，得到2.328g(68％)黄色油状的(1-苄基氮杂环丁烷-3,3-二基)二甲醇。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.21-7.31(m,5H),4.15-4.05(m,2H),3.48(d,J＝4.8Hz,2H),3.17(d,J＝4.8Hz,4H),2.89(s,2H)。
步骤3：(1-苄基氮杂环丁烷-3,3-二基)双(亚甲基)二甲磺酸酯
向(1-苄基氮杂环丁烷-3,3-二基)二甲醇(50mg，0.24mmol)于DCM(10mL)的溶液中加入TEA(222mg，2.2mmoL)和MsCl(249mg，2.2mmol)。在室温下搅拌4小时后，浓缩混合物。残余物在盐水(100mL)和EA(100mL)之间分配。有机层用盐水(100mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到300mg(83％)黄色油状的粗产物(1-苄基氮杂环丁烷-3,3-二基)双(亚甲基)二甲磺酸酯。MS(ESI)m/e[M+1]+363.9。
步骤4：1-苄基-2'-(4-苯氧基苯基)-5',7'-二氢-4'H-螺[氮杂环丁烷-3,6'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲腈
向(1-苄基氮杂环丁烷-3,3-二基)双(亚甲基)二甲磺酸酯(300mg，0.83mmol)于DMF(10mL)的溶液中加入5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(230mg，0.83mmol)和K2CO3(230mg，1.66mmol)。混合物在N2下在80℃下搅拌16小时。浓缩混合物。残余物用H2O(100mL×2)洗涤，干燥，并通过制备型TLC(DCM/CH3OH＝10/1)纯化，得到30mg(10％)黄色液体状的期望产物。MS(ESI)m/e[M+1]+447.9。
步骤5：1-苄基-2'-(4-苯氧基苯基)-5',7'-二氢-4'H-螺[氮杂环丁烷-3,6'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺
用与用于化合物2的步骤2类似的过程，由1-苄基-2'-(4-苯氧基苯基)-5',7'-二氢-4'H-螺[氮杂环丁烷-3,6'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲腈制备期望的产物。MS(ESI)m/e[M+1]+465.9。
步骤6：2'-(4-苯氧基苯基)-5',7'-二氢-4'H-螺[氮杂环丁烷-3,6'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺
向1-苄基-2'-(4-苯氧基苯基)-5',7'-二氢-4'H-螺[氮杂环丁烷-3,6'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺(200mg，0.43mmol)于10mL DCM和10mLCH3OH的溶液中加入10％w/w Pd/C(100mg)。在H2下在室温下搅拌16小时后，过滤混合物并浓缩。残余物通过制备型HPLC纯化(用25％-90％CH3CN于含有0.1％TFA的水中的溶液洗脱)。合并含有期望产物的级分，冻干过夜，得到30mg(19％)白色固体状的期望产物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.94(br s,1H),8.84(br s,1H),7.50(d,J＝8.4Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.18(t,J＝8.0Hz,1H),7.08(d,J＝8.0Hz,2H),7.05(d,J＝8.4Hz,2H),6.81(br s,1H),4.23(s,2H),3.90-4.00(m,2H),3.78-3.87(m,2H),3.47(s,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+375.9。
化合物88：1-丙烯酰基-2'-(4-苯氧基苯基)-5',7'-二氢-4'H-螺[氮杂环丁烷-3,6'-吡唑并[1,5-a]嘧啶]-3'-甲酰胺
用与用于化合物8的过程类似的过程，由化合物87和丙烯酰氯制备期望的产物。1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ7.49(d,J＝7.6Hz,2H),7.41-7.32(m,2H),7.14(t,J＝8.0Hz,1H),7.05(d,J＝8.0Hz,2H),7.04(d,J＝7.6Hz,2H),6.35(dd,J＝16.8,10.1Hz,1H),6.25(dd,J＝16.8,1.6Hz,1H),5.74(dd,J＝10.1,1.6Hz,1H),4.20-4.27(m,4H),3.92-3.98(m,2H),3.54(s,2H)。MS(ESI)m/e[M+1]+429.9。
实施例33：化合物89-90的合成
化合物89:6-(2-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：6-溴-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
将5-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲腈(28mg，0.1mmol)和2-溴丙二醛(15mg，0.1mmol)于EtOH(5mL)中的混合物在室温下搅拌2小时。然后过滤混合物，得到黄色固体状的粗产物(20mg，62.9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.89(d,J＝2.0Hz,1H),8.95(d,J＝2.0Hz,1H),8.08(d,J＝8.4Hz,2H),7.52-7.43(m,2H),7.27-7.19(m,3H),7.15(d,J＝7.6Hz,2H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+391.9。
步骤2：6-(2-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
将6-溴-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(500mg，1.28mmol)、2-氨基苯基硼酸(175mg，1.28mmol)、Cs2CO3(623mg，1.92mmol)和Pd(PPh3)4(74mg，0.06mmol)于1,4-二噁烷(30mL)和水(1.0mL)中的混合物在N2下加热到80℃，持续16小时。过滤混合物，浓缩滤液，并通过硅胶色谱柱纯化(用50％EA于PE中的溶液作为洗脱液)，得到黄色固体状的粗产物(320mg，59.1％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+403.9。
步骤3：6-(2-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向6-(2-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(320mg，0.79mmol)于MeOH(20mL)的溶液中加入NaBH4(86mg，2.28mmol)。溶液在室温下搅拌30分钟，然后倒入水(50mL)中，并用EA(50mL×3)萃取。有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到黄色固体状的粗产物(240mg，75％)。MS(ESI,m/e)[M+1]+406.0。
步骤4：6-(2-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
用与用于化合物68的步骤8类似的过程，由6-(2-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈制备期望的产物。MS(ESI,m/e)[M+1]+407.9。
步骤5：6-(2-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物2的步骤2类似的过程，由6-(2-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈制备期望的产物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.58(d,J＝8.4Hz,2H),7.53-7.44(m,2H),7.24(t,J＝7.6Hz,1H),7.19-7.09(m,4H),7.06-7.99(m,2H),6.84(d,J＝1.6Hz,1H),6.74(d,J＝7.2Hz,1H),6.61(t,J＝7.6Hz,1H),5.20(s,2H),4.24(t,J＝12.0,Hz,1H),4.07(t,J＝12.0Hz,1H),3.56-3.41(m,3H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+425.9。
化合物90:6-(3-氨基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
根据与用于化合物89类似的过程(步骤2-5)，在本领域普通技术人员熟知的合适的条件下，由6-溴-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈和3-氨基苯基硼酸制备期望产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.59(d,J＝8.4Hz,2H),7.52-7.45(m,2H),7.24(t,J＝7.6Hz,1H),7.15(d,J＝8.4Hz,2H),7.12(d,J＝7.6Hz,2H),7.07(t,J＝7.6Hz,1H),6.85(br s,1H),6.62-6.54(m,3H),5.23(br s,2H),4.24(dd,J＝12.0,4.8Hz,1H),4.09(t,J＝12.0Hz,1H),3.56-3.50(m,1H),3.40-3.35(m,1H),3.28-3.19(m,1H)。MS(ESI,m/e)[M+1]+425.9。
实施例34：化合物91的合成
化合物91：6-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
步骤1：6-(3-羟基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
向6-溴-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈(782mg，2.0mmol)于二噁烷(10mL)和水(10mL)的溶液中加入3-羟基苯基硼酸(276mg，2.0mmol)、Pd(PPh3)4(240mg，0.2mmol)和Na2CO3(424mg，4.0mmol)。在N2下在65℃下搅拌16小时后，浓缩该混合物，并加入100mL DCM、10mL CH3OH和100mL水。有机层与水层分离，用Na2SO4干燥，并通过硅胶色谱柱纯化(用DCM/CH3OH洗脱)，得到500mg(62％)黄色固体状的6-(3-羟基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈。MS(ESI)m/e[M+1]+404.9。
步骤2：6-(3-羟基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-6,7-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈和6-(3-羟基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5-二氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
用与用于化合物89的步骤3类似的过程，由6-(3-羟基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈制备期望的产物。MS(ESI)m/e[M+1]+406.9。
步骤3：6-(3-羟基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈
用与用于化合物89的步骤4类似的过程，由上一步的中间体制备期望的产物。MS(ESI)m/e[M+1]+406.9。MS(ESI)m/e[M+1]+408.9。
步骤4：6-(3-羟基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物2的步骤2类似的过程，由6-(3-羟基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲腈。MS(ESI)m/e[M+1]+426.9。
步骤5：6-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
用与用于化合物9的步骤7类似的过程，由6-(3-羟基苯基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和2-氯-N,N二甲基乙胺盐酸盐制备期望的产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.52(d,J＝8.4Hz,2H),7.46-7.38(m,2H),7.29(t,J＝7.6Hz,1H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.10-7.05(m,4H),6.98-6.96(m,2H),6.90-6.88(m,1H),6.81(d,J＝2.4Hz,1H),4.25-4.20(m,1H),4.16-4.11(m,3H),3.50-3.47(m,1H),3.43-3.38(m,2H),2.96-2.84(m,2H),2.43(s,6H)。MS(ESI)m/e[M+1]+497.9。
化合物178:N1-(2-(4-((E)-4-(4-((S)-3-氨基甲酰基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)哌啶-1-基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)哌嗪-1-基)乙基)-N5-(15-氧代-19-((3aR,4R,6aS)-2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)-4,7,10-三氧杂-14-氮杂十九烷基)戊二酰胺三氟乙酸盐
根据下述方案、步骤和中间体制备期望的化合物。
步骤1：(E)-4-(4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)哌嗪-1-基)丁-2-烯酸
将(E)-4-溴丁-2-烯酸(500mg，3.03mmol)、(2-(哌嗪-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(694mg，3.03mmol)和Et3N(612mg，6.06mmol)于20mLTHF中的混合物在室温下搅拌15小时。浓缩混合物，未经进一步纯化直接用于下一步骤。MS(ESI)m/e[M+1]+314.0。
步骤2：(S)-2-(4-苯氧基苯基)-7-(哌啶-4-基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将2-(4-苯氧基苯基)-7-(哌啶-4-基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(2.0g,，4.8mmol)在于MeOH/H2O＝3/1(110mL)的溶液升温至50℃，搅拌约20分钟，直至所有起始物质均溶解所有原料，然后向溶液中加入L-DBTA(600mg,，1.6mmol)的于MeOH/H2O＝3/1(10mL)中的溶液，将溶液于50℃下搅拌约30分钟，然后缓慢冷却至40℃(约2h)。向溶液中加入晶种(10mg)。混合物在40℃下搅拌2h，然后缓慢冷却至常室温并搅拌约48小时h。过滤，将固体用MeOH/H2O＝3/1(5mL)洗涤，在减压下干燥，得到约1.1g(收率为38％，ee值为93％)白色固体状的产物。该固体(500mg)加入到THF/H2O＝1/1(20mL)溶剂中，将溶液升温至70℃并搅拌约1小时，直到所有固体溶解。然后缓慢冷却至40℃(3小时)，并加入晶种(10mg)，搅拌约2小时后，将溶液缓慢冷却至常温并搅拌约48小时。过滤，固体用水(4mL)洗涤，在减压下干燥，得到330mg(收率为65％，ee值为>99.5％)作为其L-DBTA盐的白色固体状的产物。该L-DBTA盐的合适的单晶在MeOH/H2O(1:1，v/v)中缓慢冷却而得到。在游离碱中手性碳的构型被测定为S。DBTA盐通过使用NaOH水溶液并用DCM萃取而转化为游离碱。
用于手性拆分的手性分析条件如下所示：
步骤3：(S,E)-(2-(4-(4-(4-(3-氨基甲酰基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)哌啶-1-基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)哌嗪-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯
将(S)-2-(4-苯氧基苯基)-7-(哌啶-4-基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(1.26g，3.03mmol)、(E)-4-(4-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙基)哌嗪-1-基)丁-2-烯酸(948.4mg，3.03mmol)、HATU(1.21g，3.18mmol)和DIEA(782mg，6.06mmol)于30mL DMF中的混合物在室温下搅拌15小时。混合物倒入300mL水中，并用EA(100mL)萃取。有机相用水(100mL×3)洗涤并浓缩，得到1.25g(58％)黄色固体状的产物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.50(d,J＝8.4Hz,2H),7.42(t,J＝8.4Hz,2H),7.17(t,J＝7.4Hz,1H),7.12-7.02(m,4H),6.67(br s,1H),6.64-6.53(m,3H),4.53-4.40(m,1H),4.14-4.05(m,1H),3.32-3.25(m,2H),3.10-2.91(m,5H),2.45-2.15(m,11H),2.10-2.00(m,1H),1.96-1.84(m,1H),1.78-1.65(m,1H),1.62-1.50(m,1H),1.37(s,9H),1.31-1.10(m,3H)。MS(ESI)m/e[M+1]+713.0.
步骤4：(S,E)-7-(1-(4-(4-(2-氨基乙基)哌嗪-1-基)丁-2-烯酰基)哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺三氟乙酸盐
向(S,E)-(2-(4-(4-(4-(3-氨基甲酰基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)哌啶-1-基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)哌嗪-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，0.21mmol)10mL DCM的溶液中加入2mL的TFA。反应混合物在室温下搅拌15小时，并浓缩以除去溶剂。残余物未经进一步纯化直接用于下一步骤。MS(ESI)m/e[M+1]+613.0。
化合物178:N1-(2-(4-((E)-4-(4-((S)-3-氨基甲酰基-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-7-基)哌啶-1-基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)哌嗪-1-基)乙基)-N5-(15-氧代-19-((3aR,4R,6aS)-2-氧代六氢-1H-噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)-4,7,10-三氧杂-14-氮杂十九烷基)戊二酰胺三氟乙酸盐
将(S,E)-7-(1-(4-(4-(2-氨基乙基)哌嗪-1-基)丁-2-烯酰基)哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺三氟乙酸盐(129mg，0.21mmol，粗品)、N-BIOTINYL-NH-(PEG)2-COOH-DIEA(118mg，0.21mmol)、HATU(80mg，0.21mmol)和TEA(63.6mg，0.63mmol)于5mL DMF中的混合物在40℃下搅拌15小时。浓缩混合物，并通过制备型HPLC纯化，得到160mg(60％)白色固体状的产物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04(t,J＝5.2Hz,1H),7.80(t,J＝5.6Hz,1H),7.76(t,J＝5.6Hz,1H),7.50(d,J＝8.5Hz,2H),7.42(t,J＝8.5Hz,2H),7.18(t,J＝7.6Hz,1H),7.12-7.03(m,4H),6.89-6.77(m,1H),6.62-6.51(m,1H),6.44(s,1H),4.55-4.40(m,1H),4.35-4.27(m,1H),4.17-3.95(m,3H),3.74-3.60(m,2H),3.55-3.44(m,9H),3.41-3.27(m,10H),3.14-3.02(m,9H),2.82(dd,J＝12.4,5.0Hz,1H),2.65-2.53(m,3H),2.36-2.18(m,1H),2.13-2.00(m,7H),1.96-1.85(m,1H),1.80-1.67(m,3H),1.66-1.55(m,6H),1.55-1.40(m,3H),1.38-1.21(m,4H)。MS(ESI)m/e[M+1]+1155.0,[M+23]+1176.9.
化合物181:(S)-7-(1-(2-氰基-3-环丙基丙烯酰基)哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
将化合物180(60mg，0.124mmol)、环丙基甲醛(43.4mg，0.62mmol)和哌啶(52.7mg，0.62mmol)于MeOH(10mL)中的混合物在室温下搅拌15小时。浓缩后，向残余物中加入EA(50mL)和水(50mL)。浓缩有机相，通过硅胶色谱柱纯化(用DCM/MeOH(50/1)洗脱)，得到30mg(45％)白色固体状的期望化合物。MS(ESI)m/e[M+1]+537.0.
化合物182:(S)-7-(1-氰基哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺
向(S)-2-(4-苯氧基苯基)-7-(哌啶-4-基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(417mg，1mmol)于DCM(20mL)的溶液中加入NaHCO3(168mg，2mmol)和水(5mL)，随后加入BrCN(127mg，1.2mmol)。混合物在室温下搅拌16小时。向混合物中加入DCM(50mL)和盐水(20mL)。有机相进一步用盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥。浓缩，并通过制备型TLC(DCM/MeOH，50/1)纯化，得到330mg(75％)白色固体。MS(ESI)m/e[M+1]+443.0.
许多其他化合物已通过与上述实施例的方法基本上类似的方法制备。这些化合物中的一些的表征数据总结于下表1中，其包括LC/MS(实测的)、手性HPLC和1H NMR数据。
表1.所选化合物的表征数据
BTK激酶试验
在基于时间分辨荧光共振能量转移方法的试验中，测试本文公开的化合物对Btk激酶活性的抑制作用。重组的Btk与本文公开的化合物在室温下在含有50mM Tris pH7.4、10mM MgCl2、2mM MnCl2、0.1mMEDTA、1mM DTT、20nM SEB、0.1％BSA、0.005％tween-20的试验缓冲液中预先温育1小时。通过加入ATP(在ATP Km浓度下)和肽底物(Biotin-AVLESEEELYSSARQ-NH2)来引发反应。在室温下温育1小时后，加入等体积的含有50mM HEPES pH7.0、800mM KF、20mMEDTA、0.1％BSA、连接Eu穴合物的p-Tyr66抗体和链霉亲和素标记的XL665的终止液以终止反应。盘在室温下再温育1小时，然后在BMGPHERAstar FS仪器上读取TR-FRET信号(ex337nm，em 620nm/665nm)。基于615nm处的荧光与665nm处的荧光的比值，计算化合物浓度增加情况下残余酶活性与。各化合物的IC50通过Graphpad Prism软件的四参数逻辑方程拟合数据而得到。
BTKpY223细胞试验：
BtkpY223细胞试验为基于HTRF的试验，意在测定Tyr223处磷酸化Btk的内生水平。磷酸化的Tyr223对于Btk的完全活化是必须的。试验在Ramos细胞(CRL-1596，ATCC)中用BtkpY223试验试剂盒(63IDC000，Cisbio)进行。
简而言之，Ramos细胞在含有0.5％FBS的RPMI1640中血清饥饿培养2小时。饥饿培养之后，细胞用不同浓度的化合物在CO2恒温箱中温育培养1小时。温育后，用1mM过钒酸盐(PV)或者Na3VO4刺激细胞20分钟。然后，离心收集细胞，并在室温下用1×裂解液裂解细胞10分钟(提供于试剂盒中的4×裂解液)。温育期间，通过在检测缓冲液(在试剂盒中提供)中稀释抗Btk-d2和抗pBtk-K制备1×抗体混合物。将2μl/孔的1×抗体混合物置于OptiPlate-384试验盘中(6005620，PerkinElmer)。然后，将18μl细胞裂解液转移至预先载有抗体溶液的试验盘中。温和混合且简单离心之后，将盘密封并在室温下于黑暗中保存18小时。在兼容HTRF读取器(PHERAstar FS，BMG)上在两个不同波长(665nm和620nm)处测量发射荧光。基于对665nm处和620nm处信号强度之间的比值的抑制计算化合物的效力。借助GraphPad Prism软件用S形剂量反应方程计算IC50值。
对本文公开的代表性的化合物进行测试，并发现它们能够抑制Btk且抑制Btk在Tyr-223处的自动磷酸化，IC50值的范围从亚纳摩尔到10微摩尔。
表II代表性化合物的试验数据
n.d.：无数据
表III

Claims (15)

1.下式的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐：
其中：
A为5或6元芳族环，其包含0-3个杂原子N、S或O；
每个W独立地为-CH2-或者-C(O)-；
L为键、CH2、NR12、O或者S；
S/D为单键或者双键，且当为双键时，R5和R7不存在；
m为0或1-4的整数；
n为0或1-4的整数，其中当n大于1时，每个R2可以是不同的；
p为0或1-2的整数，其中当p为0时，m为非零的，且当p大于1时，每个R6和每个R7可以是不同的；
R1、R4、R5、R6和R7各自独立地为氢、卤素、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或者不饱和的杂环基、杂芳基、炔基、-CN、-NR13R14、-OR13、-COR13、-CO2R13、-CONR13R14、-C(＝NR13)NR14R15、-NR13COR14、-NR13CONR14R15、-NR13CO2R14、-SO2R13、-NR13SO2NR14R15或者-NR13SO2R14，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基和饱和或者不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代，其中(R4和R5)或(R4和R6)或(R6和R7)或(当p为2时，R6和R6)连同它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或者不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；
R2为卤素、烷基、-S-烷基、-CN、-NR13R14、-OR13、-COR13、-CO2R13、-CONR13R14、-C(＝NR13)NR14R15、-NR13COR14、-NR13CONR14R15、-NR13CO2R14、-SO2R13、-NR13SO2NR14R15或者-NR13SO2R14；
R12为氢或低级烷基；
R13、R14和R15各自独立地为氢、杂烷基、烷基、烯基、炔基、环烷基、饱和或者不饱和的杂环基、芳基或者杂芳基；其中(R13和R14)和/或(R14和R15)连同它们所连接的原子一起各可形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或者不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；
R16为卤素、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基、氧代、-CN、-OR’、-NR’R”、-COR’、-CO2R’、-CONR’R”、-C(＝NR’)NR”R”’、-NR’COR”、-NR’CONR’R”、-NR’CO2R”、-SO2R’、-SO2芳基、-NR’SO2NR”R”’或者NR’SO2R”，其中R’、R”和R”’独立地为氢、卤素、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基，其中(R’和R”)和/或(R”和R”’)连同它们所连接的原子一起可形成环，所述环选自环烷基、饱和或者不饱和的杂环、芳基和杂芳基环。
2.权利要求1的化合物，包括以下一种或多种实施方案：
(a)S/D为双键，且R5和R7不存在；
(b)R1为氢、卤素、烷氧基、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代；
(c)p为1且m为0、1或2；
(d)A为苯基；
(e)每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基；
(f)R4和R6与它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；
(g)R4和R6与它们所连接的原子一起形成下式的环：
其中：
Q为-CH2-；J为-CH2-；d和b各自独立地为0或1-4的整数；
(h)S/D为单键；和/或
(i)p为0，且R6和R7不存在。
3.权利要求1的化合物，其中：
(i)S/D为双键，且R5和R7不存在；R1为氢、卤素、烷氧基、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代；且R16为卤素、低级烷基或低级烷氧基；或者
(ii)S/D为双键，且R5和R7不存在；p为1且m为0、1或2；或者
(iii)S/D为双键，且R5和R7不存在；p为1且m为0、1或2；A为苯基；且每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基；或者
(iv)S/D为双键，且R5和R7不存在；且R4和R6与它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；或者
(v)S/D为双键，且R5和R7不存在；且R4和R6与它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；A为苯基；且每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基；或者
(vi)S/D为双键，且R5和R7不存在；R4和R6与它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；p为1且m为0、1或2；A为苯基；每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基；且R4-R6环为下式的环：
其中Q为-CH2-；J为-CH2-；且d和b各自独立地为0，或1-4的整数；或者
(vii)S/D为双键，且R5和R7不存在；R4和R6与它们所连接的原子一起形成环，所述环选自任选地被至少一个取代基R16取代的环烷基、饱和或不饱和的杂环、芳基和杂芳基环；p为1且m为0、1或2；A为苯基；每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基；且R4-R6环为下式的环：
其中Q为-CH2-；J为-CH2-；且d和b各自独立地为0，或1-4的整数；且R1为氢、卤素、烷氧基、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代；或者
(viii)S/D为单键；p为1且m为0、1或2；A为苯基；每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基；或者
(ix)S/D为单键；p为1且m为0、1或2；A为苯基；每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基，且R1为氢、卤素、烷氧基、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代；且R16为卤素、低级烷基或低级烷氧基；或者
(x)S/D为单键；p为0，且R6和R7不存在；A为苯基；且每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基；或者
(xi)S/D为单键；p为0，且R6和R7不存在；A为苯基；且每个R2独立地为卤素、低级烷基或低级烷氧基，且R1为氢、卤素、烷氧基、杂烷基、烷基、烯基、环烷基、芳基、饱和或不饱和的杂环基、杂芳基，其中烷基、烯基、炔基、环烷基、杂芳基、芳基、饱和或不饱和的杂环基任选地被至少一个取代基R16取代。
4.权利要求1的化合物，其中：
S/D为双键，且R5和R7不存在；p为1且m为0、1或2；A为苯基(参见，式II)；
S/D为双键，且R5和R7不存在；p为1且m为0、1或2；A为苯基；且R4和R6与它们所连接的原子一起形成下式的环：
其中Q为-CH2-；J为-CH2-；且d和b各自独立地为0或1-4的整数(参见，式III)；
S/D为单键；p为1且m为0、1或2；A为苯基(参见，式IV)；或者
S/D为单键；p为0，且R6和R7不存在；A为苯基(参见，式V)。
5.权利要求1的化合物，其中：
A为苯基；W为-(CH2)-；L为O；S/D为单键；m为1；n为0；p为1；R1为苯基；R2不存在；R5为H；且R6和R7为H；得到的结构组合:
6.权利要求5的化合物，其中R4为含N的C1-C8烷基、含N的C3-C8环烷基和苯基，各基团任选地被取代。
7.权利要求5的化合物，其中R4为甲胺、苯胺、氮杂环丁烷、吡咯烷、哌啶、氮杂环庚烯基，各基团被选自苄基、酰基、丙烯酰基、取代的丙烯酰基、炔丙酰基、取代的炔丙酰基的部分N-取代。
8.权利要求5的化合物，其中R4选自如下结构：
9.权利要求5的化合物，其中R4为1-丙烯酰基哌啶-4-基(化合物27)或1-(丁-2-炔酰基)哌啶-4-基(化合物176)。
10.本文实施例或表I、II或III的化合物、其立体异构体及其药学上可接受的盐。
11.权利要求1至10中任一项的化合物，其具有抑制Btk活性，在Btk激酶试验中对应于10uM以下的IC50。
12.一种药物组合物，其包含治疗有效量的单位剂量形式的权利要求1至10中任一项的化合物和一种或多种药学上可接受的载体。
13.一种结合物，其包含治疗有效量的权利要求1至10中任一项的化合物和对自身免疫性疾病和/或炎症疾病或癌症具有治疗活性的另一试剂。
14.一种治疗与不期望的Btk活性相关的疾病的方法，该方法包括向有需要的人给予有效量的权利要求1至10中任一项的化合物、其N-氧化物或其前药，其中所述疾病为过敏性疾病、自身免疫性疾病、炎症疾病或癌症。
15.权利要求14的方法，其中所述疾病是B细胞增殖性疾病，选自慢性淋巴细胞性淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤和慢性淋巴细胞白血病。
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Cited By (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105732638A (zh) * 2016-01-22 2016-07-06 成都倍特药业有限公司 一种具有螺环或桥环结构的布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法
CN106588913A (zh) * 2015-10-16 2017-04-26 陈剑 具有咪唑并吡啶类衍生物，其制备及其在医药上的应用
CN108467397A (zh) * 2018-05-25 2018-08-31 陈海鹏 一种含有氰基的三环类化合物及其在抗肿瘤药物中的用途
CN108484615A (zh) * 2018-05-25 2018-09-04 陈海鹏 一种化合物、合成方法及其在制备抗肿瘤药物中的用途
CN108558886A (zh) * 2018-05-25 2018-09-21 陈海鹏 一种含有氰基的三环类化合物及其在制备抗肿瘤药物中的用途
CN109563099A (zh) * 2016-08-16 2019-04-02 百济神州有限公司 (s)-7-(1-丙烯酰基哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的晶型、其制备和用途
CN110845504A (zh) * 2019-12-19 2020-02-28 武汉九州钰民医药科技有限公司 合成赞布替尼的新方法
CN110997677A (zh) * 2017-08-12 2020-04-10 百济神州有限公司 具有改进的双重选择性的Btk抑制剂
CN111909152A (zh) * 2019-05-08 2020-11-10 百济神州(苏州)生物科技有限公司 Btk抑制剂及其中间体的制备方法
CN111909133A (zh) * 2019-05-10 2020-11-10 河南师范大学 作为布鲁诺酪氨酸激酶抑制剂的取代的1-氨基-1h-咪唑-5-甲酰胺
WO2021110142A1 (en) * 2019-12-04 2021-06-10 Henan Normal University Substituted imidazolecarboxamide as bruton's tyrosine kinase inhibitors
WO2021170045A1 (en) * 2020-02-27 2021-09-02 Beigene Switzerland Gmbh Methods of treating dlbcl using btk inhibitors and combinations thereof
US11186637B2 (en) 2013-09-13 2021-11-30 Beigene Switzerland Gmbh Anti-PD1 antibodies and their use as therapeutics and diagnostics
CN113943293A (zh) * 2020-07-16 2022-01-18 百济神州(北京)生物科技有限公司 用于制备作为protac btk降解剂的双官能化合物的方法
WO2022143856A1 (en) * 2020-12-31 2022-07-07 Beigene, Ltd. Degradation of bruton's tyrosine kinase (btk) by conjugation of btk inhibitors with e3 ligase ligand and methods of use
US11512132B2 (en) 2014-07-03 2022-11-29 Beigene, Ltd. Anti-PD-L1 antibodies and their use as therapeutics and diagnostics
US11534431B2 (en) 2016-07-05 2022-12-27 Beigene Switzerland Gmbh Combination of a PD-1 antagonist and a RAF inhibitor for treating cancer
WO2022268052A1 (en) * 2021-06-21 2022-12-29 Beigene, Ltd. (r) -glutarimide crbn ligands and methods of use
US11555038B2 (en) 2017-01-25 2023-01-17 Beigene, Ltd. Crystalline forms of (S)-7-(1-(but-2-ynoyl)piperidin-4-yl)-2-(4-phenoxyphenyl)-4,5,6,7-tetrahydropyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carboxamide, preparation, and uses thereof
US11597768B2 (en) 2017-06-26 2023-03-07 Beigene, Ltd. Immunotherapy for hepatocellular carcinoma
CN116018138A (zh) * 2020-07-13 2023-04-25 河南知微生物医药有限公司 作为布鲁诺酪氨酸激酶抑制剂的取代的1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-3-甲酰胺
US11701357B2 (en) 2016-08-19 2023-07-18 Beigene Switzerland Gmbh Treatment of B cell cancers using a combination comprising Btk inhibitors
US11786529B2 (en) 2017-11-29 2023-10-17 Beigene Switzerland Gmbh Treatment of indolent or aggressive B-cell lymphomas using a combination comprising BTK inhibitors
US12233069B2 (en) 2019-06-10 2025-02-25 Beigene Switzerland Gmbh Oral solid tablet comprising Bruton's Tyrosine Kinase inhibitor and preparation method therefor
US12552798B2 (en) 2019-12-04 2026-02-17 Henan Zhiwei Biomedicine Co., Ltd. Substituted imidazolecarboxamide as Bruton's tyrosine kinase inhibitors

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2014256633B2 (en) * 2013-04-25 2017-02-02 Beone Medicines I Gmbh Fused heterocyclic compounds as protein kinase inhibitors
US9951056B2 (en) 2013-09-30 2018-04-24 Beijing Innocare Pharma Tech Co., Ltd. Substituted nicotinamide inhibitors of BTK and their preparation and use in the treatment of cancer, inflammation and autoimmune disease
US9937171B2 (en) 2014-04-11 2018-04-10 Acerta Pharma B.V. Methods of blocking the CXCR-4/SDF-1 signaling pathway with inhibitors of bruton's tyrosine kinase
WO2015185998A2 (en) 2014-04-11 2015-12-10 Acerta Pharma B.V. Methods of blocking the cxcr-4/sdf-1 signaling pathway with inhibitors of bone marrow x kinase
AR101476A1 (es) 2014-08-07 2016-12-21 Acerta Pharma Bv Métodos para tratar cánceres, enfermedades inmunes y autoinmunes, y enfermedades inflamatorias en base a la tasa de ocupación de la tirosin quinasa de bruton (btk) y a la tasa de resíntesis de la tirosin quinasa de bruton (btk)
WO2016024232A1 (en) 2014-08-11 2016-02-18 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor, a pi3k inhibitor, a jak-2 inhibitor and/or a cdk 4/6 inhibitor
US20170231995A1 (en) 2014-08-11 2017-08-17 Acerta Pharma B.V. BTK Inhibitors to Treat Solid Tumors Through Modulation of the Tumor Microenvironment
SI3179992T1 (sl) 2014-08-11 2022-09-30 Acerta Pharma B.V. Terapevtske kombinacije zaviralca BTK, zaviralca PD-1 in/ali zaviralca PD-L1
RS62713B1 (sr) 2014-08-11 2022-01-31 Acerta Pharma Bv Terapeutske kombinacije btk inhibitora i bcl-2 inhibitora
KR20170080647A (ko) * 2014-11-03 2017-07-10 바이엘 파마 악티엔게젤샤프트 피페리디닐피라졸피리미디논 및 그의 용도
WO2016087994A1 (en) 2014-12-05 2016-06-09 Acerta Pharma B.V. Btk inhibitors to treat solid tumors through modulation of the tumor microenvironment
US20190008859A1 (en) 2015-08-21 2019-01-10 Acerta Pharma B.V. Therapeutic Combinations of a MEK Inhibitor and a BTK Inhibitor
WO2017046746A1 (en) 2015-09-15 2017-03-23 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor and a gitr binding molecule, a 4-1bb agonist, or an ox40 agonist
MA44909A (fr) 2015-09-15 2018-07-25 Acerta Pharma Bv Association thérapeutique d'un inhibiteur du cd19 et d'un inhibiteur de la btk
US10316040B2 (en) 2015-10-16 2019-06-11 Eisai R&D Management Co., Ltd. EP4 antagonists
WO2017122175A1 (en) 2016-01-13 2017-07-20 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of an antifolate and a btk inhibitor
CN107021963A (zh) 2016-01-29 2017-08-08 北京诺诚健华医药科技有限公司 吡唑稠环类衍生物、其制备方法及其在治疗癌症、炎症和免疫性疾病上的应用
MA46285A (fr) 2016-09-19 2019-07-31 Mei Pharma Inc Polythérapie
JP6933413B2 (ja) * 2017-11-03 2021-09-08 華南農業大学 窒素含有縮合三環式化合物及び農業・林業殺虫剤としての使用
EP3789040A4 (en) 2018-04-27 2022-03-09 ONO Pharmaceutical Co., Ltd. PREVENTIVE AND/OR THERAPEUTIC AGENT FOR AUTOIMMUNE DISEASES WITH A COMPOUND WITH BTK INHIBITING ACTIVITY AS AN INGREDIENT
WO2019220155A1 (en) 2018-05-17 2019-11-21 Avidin Kft. Imidazo-pyrazole carboxamide derivatives as anticancer agents and the synthesis thereof
JOP20210017A1 (ar) 2018-07-25 2021-01-21 Novartis Ag مثبطات جسيم التهابي nlrp3
WO2020043321A1 (en) 2018-08-31 2020-03-05 Stichting Katholieke Universiteit Synergistic combinations of amino acid depletion agent sensitizers (aadas) and amino acid depletion agents (aada), and therapeutic methods of use thereof
UY38687A (es) 2019-05-17 2023-05-15 Novartis Ag Inhibidores del inflamasoma nlrp3, composiciones, combinaciones de los mismos y métodos para su uso
JP2022538215A (ja) * 2019-06-10 2022-09-01 ベイジーン スウィッツァーランド ゲーエムベーハー 経口カプセルおよびその調製方法
CN114174299B (zh) * 2019-07-26 2024-10-25 百济神州有限公司 通过btk抑制剂与e3连接酶配体缀合对布鲁顿氏酪氨酸激酶(btk)的降解以及使用方法
US12516053B2 (en) 2019-10-28 2026-01-06 Beone Medicines I Gmbh Bcl-2 inhibitors
US12391697B2 (en) 2019-10-30 2025-08-19 Biogen Ma Inc. Condensed bi-heterocycles as inhibiting agents for Bruton's tyrosine kinase
JP2023520843A (ja) 2020-04-15 2023-05-22 ベイジーン リミテッド Ｂｃｌ－２阻害剤
WO2021259732A1 (en) 2020-06-24 2021-12-30 Sandoz Ag Multi-component compounds comprising zanubrutinib and a benzoic acid derivative
PE20230855A1 (es) 2020-08-14 2023-05-29 Novartis Ag Derivados de espiropiperidinilo sustituidos con heteroarilo y usos farmaceuticos de los mismos
WO2022101939A1 (en) * 2020-11-13 2022-05-19 Msn Laboratories Private Limited, R&D Center Novel process for the preparation of (s)-7-(1-acryloylpiperidin-4-yl)-2-(4-phenoxyphenyl)-4,5,6,7-tetrahydropyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carboxamide or its salts thereof
KR20230107866A (ko) * 2020-11-20 2023-07-18 베이진 스위찰랜드 게엠베하 Btk 억제제를 사용한 전신성 홍반성 루푸스의 치료 방법
CN114573586B (zh) * 2020-11-28 2023-11-03 杭州和正医药有限公司 一种抑制布鲁顿酪氨酸激酶活性的多环化合物、药物组合物及其应用
US20240124461A1 (en) 2020-12-11 2024-04-18 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Processes for the preparation of zanubrutinib and intermediates thereof
WO2022140246A1 (en) 2020-12-21 2022-06-30 Hangzhou Jijing Pharmaceutical Technology Limited Methods and compounds for targeted autophagy
WO2022161484A1 (en) * 2021-01-30 2022-08-04 Beigene, Ltd. Methods of treating chronic active antibody-mediated rejection using btk inhibitors
CN116348453B (zh) * 2021-04-25 2025-07-04 烨辉医药科技(上海)有限公司 杂芳族甲酰胺化合物及其用途
WO2023014817A1 (en) 2021-08-03 2023-02-09 Syros Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating lymphomas with a cdk7 inhibitor in combination with a btk inhibitor
IT202100025997A1 (it) * 2021-10-11 2023-04-11 Olon Spa Processo per la preparazione di zanubrutinib
US11786531B1 (en) 2022-06-08 2023-10-17 Beigene Switzerland Gmbh Methods of treating B-cell proliferative disorder
UY40374A (es) 2022-08-03 2024-02-15 Novartis Ag Inhibidores de inflamasoma nlrp3

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003004497A1 (en) * 2001-07-05 2003-01-16 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Novel heterocyclic compound
CN1771231A (zh) * 2002-08-26 2006-05-10 武田药品工业株式会社 钙受体调节性化合物及其用途
WO2007026720A1 (ja) * 2005-08-31 2007-03-08 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. 縮環ピラゾール誘導体
WO2012143522A1 (en) * 2011-04-20 2012-10-26 Glaxo Group Limited Tetrahydropyrazolo [1,5 -a] pyrimidine as anti -tuberculosis compounds
WO2012158795A1 (en) * 2011-05-17 2012-11-22 Principia Biopharma Inc. Pyrazolopyrimidine derivatives as tyrosine kinase inhibitors

Family Cites Families (94)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BE792533A (fr) 1971-12-09 1973-06-08 Int Chem & Nuclear Corp Nouvelles pyrazolo (1,5a) pyrimidines et leur procede de preparation
JP2778921B2 (ja) 1994-11-18 1998-07-23 三共株式会社 イミダゾピラゾール誘導体
ATE267830T1 (de) 1999-08-27 2004-06-15 Abbott Lab Als cox-hemmer verwendbare sulfonylphenylpyrazol- verbindungen
NZ517758A (en) 1999-09-17 2004-06-25 Abbott Gmbh & Co Pyrazolopyrimidines useful as therapeutic agents
DK1347971T3 (da) 2000-12-21 2006-05-15 Bristol Myers Squibb Co Thiazolylinhibitorer af tyrosinkinaser fra Tec-familien
WO2002072576A1 (en) 2001-03-09 2002-09-19 Pfizer Products Inc. Benzimidazole anti-inflammatory compounds
BRPI0313880B8 (pt) * 2002-08-26 2021-05-25 Takeda Pharmaceuticals Co composto
US20060183746A1 (en) 2003-06-04 2006-08-17 Currie Kevin S Certain imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines and method of inhibition of Bruton's tyrosine kinase by such compounds
US7405295B2 (en) 2003-06-04 2008-07-29 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain imidazo[1,2-a]pyrazin-8-ylamines and method of inhibition of Bruton's tyrosine kinase by such compounds
US7393848B2 (en) 2003-06-30 2008-07-01 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain heterocyclic substituted imidazo[1,2-A]pyrazin-8-ylamines and methods of inhibition of Bruton's tyrosine kinase by such compounds
BRPI0413005A (pt) 2003-07-29 2006-09-26 Irm Llc compostos e composições como inibidores da proteìna cinase
WO2005047290A2 (en) 2003-11-11 2005-05-26 Cellular Genomics Inc. Imidazo[1,2-a] pyrazin-8-ylamines as kinase inhibitors
CA2587192A1 (en) 2004-11-10 2006-05-18 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Imidazo[1 , 2-a] pyrazin-8-ylamines useful as modulators of kinase activity
US8101770B2 (en) 2004-12-16 2012-01-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyridones useful as inhibitors of kinases
US7947835B2 (en) 2005-03-10 2011-05-24 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain substituted amides, method of making, and method of use thereof
CA2620352A1 (en) 2005-08-29 2007-03-08 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 3, 5-disubstituted pyrid-2-ones useful as inhibitors of tec family of non-receptor tyrosine kinases
US7691885B2 (en) 2005-08-29 2010-04-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyridones useful as inhibitors of kinases
KR20080049758A (ko) 2005-09-01 2008-06-04 아스텔라스세이야쿠 가부시키가이샤 통증 치료용으로 사용되는 피리다지논 유도체
CN101421269A (zh) 2006-01-13 2009-04-29 环状药物公司 酪氨酸激酶抑制剂及其用途
WO2007136790A2 (en) 2006-05-18 2007-11-29 Mannkind Corporation Intracellular kinase inhibitors
JO3235B1 (ar) 2006-05-26 2018-03-08 Astex Therapeutics Ltd مركبات بيررولوبيريميدين و استعمالاتها
AR063946A1 (es) 2006-09-11 2009-03-04 Cgi Pharmaceuticals Inc Determinadas pirimidinas sustituidas, el uso de las mismas para el tratamiento de enfermedades mediadas por la inhibicion de la actividad de btk y composiciones farmaceuticas que las comprenden.
WO2008033858A2 (en) 2006-09-11 2008-03-20 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Kinase inhibitors, and methods of using and identifying kinase inhibitors
AR063706A1 (es) 2006-09-11 2009-02-11 Cgi Pharmaceuticals Inc Determinadas amidas sustituidas, el uso de las mismas para el tratamiento de enfermedades mediadas por la inhibicion de la actividad de btk y composiciones farmaceuticas que las comprenden.
AR063707A1 (es) 2006-09-11 2009-02-11 Cgi Pharmaceuticals Inc Determinadas amidas sustituidas, el uso de las mismas para el tratamiento de enfermedades mediadas por la inhibicion de la actividad de btk y composiciones farmacéuticas que las comprenden.
EP2526934B1 (en) 2006-09-22 2015-12-09 Pharmacyclics LLC Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
CA2664147A1 (en) 2006-10-06 2008-04-17 Irm Llc Protein kinase inhibitors and methods for using thereof
WO2008054827A2 (en) 2006-11-03 2008-05-08 Pharmacyclics, Inc. Bruton's tyrosine kinase activity probe and method of using
EP2125819B1 (en) 2007-03-21 2014-10-22 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterocyclic compounds useful for the treatment of proliferative, allergic, autoimmune or inflammatory diseases
WO2008144253A1 (en) 2007-05-14 2008-11-27 Irm Llc Protein kinase inhibitors and methods for using thereof
CL2008002793A1 (es) 2007-09-20 2009-09-04 Cgi Pharmaceuticals Inc Compuestos derivados de amidas sustituidas, inhibidores de la actividad de btk; composicion farmaceutica que los comprende; utiles en el tratamiento del cancer, trastornos oseos, enfermedades autoinmunes, entre otras
US7989465B2 (en) 2007-10-19 2011-08-02 Avila Therapeutics, Inc. 4,6-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
AU2008314632B2 (en) 2007-10-19 2015-05-28 Celgene Avilomics Research, Inc. Heteroaryl compounds and uses thereof
CA2701275C (en) 2007-10-23 2016-06-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Kinase inhibitors
WO2009077334A1 (en) 2007-12-14 2009-06-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel imidazo[1,2-a]pyridine and imidazo[1,2-b]pyridazine derivatives
JP5259739B2 (ja) 2008-02-05 2013-08-07 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 新規ピリジノン及びピリダジノン
ES2554615T3 (es) 2008-05-06 2015-12-22 Gilead Connecticut, Inc. Amidas sustituidas, método de preparación y utilización como inhibidores de Btk
US8338439B2 (en) 2008-06-27 2012-12-25 Celgene Avilomics Research, Inc. 2,4-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
MX382352B (es) 2008-06-27 2025-03-13 Celgene Car Llc Compuestos de heteroarilo y usos de los mismos.
RU2507202C2 (ru) 2008-07-02 2014-02-20 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Новые фенилпиразиноны в качестве ингибиторов киназы
CA2726460C (en) 2008-07-15 2017-02-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel phenyl-imidazopyridines and pyridazines
ES2660418T3 (es) 2008-07-16 2018-03-22 Pharmacyclics Llc Inhibidores de la tirosina quinasa de Bruton para el tratamiento de tumores sólidos
MX2010013190A (es) 2008-07-18 2010-12-20 Hoffmann La Roche Fenilimidazopirazinas novedosas.
JP2011529073A (ja) 2008-07-24 2011-12-01 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー キナーゼ調節因子として有用な縮合ヘテロ環化合物
WO2010028236A1 (en) 2008-09-05 2010-03-11 Avila Therapeutics, Inc. Algorithm for designing irreversible inhibitors
RU2539568C2 (ru) 2008-10-31 2015-01-20 Дженентек, Инк. Пиразолопиримидиновые соединения-ингибиторы jak и способы
US20120028981A1 (en) 2008-11-05 2012-02-02 Principia Biopharma Inc. Kinase Knockdown Via Electrophilically Enhanced Inhibitors
US8598174B2 (en) 2008-11-12 2013-12-03 Genetech, Inc. Pyridazinones, method of making, and method of use thereof
US8426428B2 (en) 2008-12-05 2013-04-23 Principia Biopharma, Inc. EGFR kinase knockdown via electrophilically enhanced inhibitors
WO2010068806A1 (en) 2008-12-10 2010-06-17 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Amide derivatives as btk inhibitors in the treatment of allergic, autoimmune and inflammatory disorders as well as cancer
WO2010068810A2 (en) 2008-12-10 2010-06-17 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Certain substituted amides, method of making, and method of use thereof
WO2010068788A1 (en) 2008-12-10 2010-06-17 Cgi Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic amides as btk inhibitors
EP2391602B1 (en) 2008-12-19 2013-12-04 Bristol-Myers Squibb Company Carbazole carboxamide compounds useful as kinase inhibitors
EP2379559B1 (en) 2009-01-06 2017-10-25 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Pyrimido-diazepinone kinase scaffold compounds and methods of treating disorders
US8299077B2 (en) 2009-03-02 2012-10-30 Roche Palo Alto Llc Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
ES2513915T3 (es) 2009-04-24 2014-10-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibidores de la tirosina quinasa de Bruton
EP2424368B1 (en) 2009-04-29 2014-12-31 Locus Pharmaceuticals, Inc. Pyrrolotriazine compounds
JP2012529535A (ja) 2009-06-12 2012-11-22 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー キナーゼモジュレーターとして有用なニコチンアミド化合物
AR077468A1 (es) 2009-07-09 2011-08-31 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo (1,5 -a) pirimidina sustituidos como inhibidores de trk- quinasa
EP2789614B1 (en) 2009-08-11 2017-04-26 Bristol-Myers Squibb Company Azaindazoles as Btk kinase modulators and use thereof
NZ598985A (en) 2009-09-04 2013-07-26 Biogen Idec Inc Bruton's tyrosine kinase inhibitors
WO2011029043A1 (en) 2009-09-04 2011-03-10 Biogen Idec Ma Inc. Heteroaryl btk inhibitors
US7718662B1 (en) 2009-10-12 2010-05-18 Pharmacyclics, Inc. Pyrazolo-pyrimidine inhibitors of bruton's tyrosine kinase
CN103038233B (zh) 2010-05-07 2017-06-20 吉利德康涅狄格有限公司 吡啶酮和氮杂吡啶酮化合物及使用方法
TWI500617B (zh) 2010-05-31 2015-09-21 Ono Pharmaceutical Co Purine ketone derivatives
CA3240281A1 (en) 2010-06-03 2011-12-08 Pharmacyclics Llc Use of inhibitors of bruton's tyrosine kinase (btk) in the treatment of follicular lymphoma
WO2011159857A1 (en) 2010-06-16 2011-12-22 Bristol-Myers Squibb Company Carboline carboxamide compounds useful as kinase inhibitors
BR112012033253A2 (pt) 2010-06-23 2016-11-22 Hanmi Science Co Ltd novos derivados de pirimidina fundidos para inibição da atividade de tirosina quinase
US20120053189A1 (en) 2010-06-28 2012-03-01 Pharmacyclics, Inc. Btk inhibitors for the treatment of immune mediated conditions
NZ607845A (en) 2010-08-10 2015-03-27 Celgene Avilomics Res Inc Besylate salt of a btk inhibitor
AR082590A1 (es) 2010-08-12 2012-12-19 Hoffmann La Roche Inhibidores de la tirosina-quinasa de bruton
WO2012031004A1 (en) 2010-09-01 2012-03-08 Gilead Connecticut, Inc. Pyridinones/pyrazinones, method of making, and method of use thereof
US8975260B2 (en) 2010-09-01 2015-03-10 Genetech, Inc Pyridazinones, method of making, and method of use thereof
US8703767B2 (en) 2011-04-01 2014-04-22 University Of Utah Research Foundation Substituted N-(3-(pyrimidin-4-yl)phenyl)acrylamide analogs as tyrosine receptor kinase BTK inhibitors
CA2760174A1 (en) 2011-12-01 2013-06-01 Pharmascience Inc. Protein kinase inhibitors and uses thereof
ES2590491T3 (es) 2011-05-17 2016-11-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibidores de la tirosina quinasa de Bruton
WO2012158810A1 (en) 2011-05-17 2012-11-22 Principia Biopharma Inc. Tyrosine kinase inhibitors
US8962831B2 (en) 2011-05-17 2015-02-24 Principia Biopharma Inc. Tyrosine kinase inhibitors
JP2014517016A (ja) 2011-06-10 2014-07-17 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｂｔｋ阻害活性を有するピリミジンおよびピリミジン化合物の組成物と製造方法
MX2014000338A (es) 2011-07-08 2014-05-01 Novartis Ag Derivados de pirrolo-pirimidina novedoso.
AU2014256633B2 (en) 2013-04-25 2017-02-02 Beone Medicines I Gmbh Fused heterocyclic compounds as protein kinase inhibitors
WO2015035606A1 (en) 2013-09-13 2015-03-19 Beigene, Ltd. Anti-pd1 antibodies and their use as therapeutics and diagnostics
EA201690746A1 (ru) 2013-10-25 2016-12-30 Фармасайкликс Элэлси Лечение с применением ингибиторов тирозинкиназы брутона и иммунотерапии
WO2016087994A1 (en) 2014-12-05 2016-06-09 Acerta Pharma B.V. Btk inhibitors to treat solid tumors through modulation of the tumor microenvironment
ES2843323T3 (es) 2014-12-18 2021-07-16 Principia Biopharma Inc Tratamiento de pénfigo
LT3236943T (lt) 2014-12-24 2023-04-11 Principia Biopharma Inc. Kompozicija, skirta vaistų pristatymui per klubinę ir tiesiąją žarną
WO2017046746A1 (en) 2015-09-15 2017-03-23 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor and a gitr binding molecule, a 4-1bb agonist, or an ox40 agonist
JP2018530550A (ja) 2015-10-01 2018-10-18 ギリアド サイエンシズ， インコーポレイテッド 癌を治療するためのｂｔｋ阻害剤とチェックポイント阻害剤との組合せ
EP4353322A3 (en) 2016-08-16 2024-07-31 BeiGene Switzerland GmbH Crystalline form of (s)-7-(1-acryloylpiperidin-4-yl)-2-(4-phenoxyphenyl)-4,5,6,7-tetra-hydropyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carboxamide, preparation, and uses thereof
US11701357B2 (en) 2016-08-19 2023-07-18 Beigene Switzerland Gmbh Treatment of B cell cancers using a combination comprising Btk inhibitors
TWI774726B (zh) 2017-01-25 2022-08-21 英屬開曼群島商百濟神州有限公司 (S)-7-(1-(丁-2-炔醯基)哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氫吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲醯胺的晶型、及其製備和用途
CN110869765A (zh) 2017-04-20 2020-03-06 Adc治疗有限公司 组合疗法
WO2019034009A1 (en) 2017-08-12 2019-02-21 Beigene, Ltd. BTK INHIBITOR WITH ENHANCED DOUBLE SELECTIVITY
CN111801334B (zh) 2017-11-29 2023-06-09 百济神州瑞士有限责任公司 使用包含btk抑制剂的组合治疗惰性或侵袭性b-细胞淋巴瘤

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003004497A1 (en) * 2001-07-05 2003-01-16 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Novel heterocyclic compound
CN1771231A (zh) * 2002-08-26 2006-05-10 武田药品工业株式会社 钙受体调节性化合物及其用途
WO2007026720A1 (ja) * 2005-08-31 2007-03-08 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. 縮環ピラゾール誘導体
WO2012143522A1 (en) * 2011-04-20 2012-10-26 Glaxo Group Limited Tetrahydropyrazolo [1,5 -a] pyrimidine as anti -tuberculosis compounds
WO2012158795A1 (en) * 2011-05-17 2012-11-22 Principia Biopharma Inc. Pyrazolopyrimidine derivatives as tyrosine kinase inhibitors

Cited By (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11673951B2 (en) 2013-09-13 2023-06-13 Beigene Switzerland Gmbh Anti-PD1 antibodies and their use as therapeutics and diagnostics
US11186637B2 (en) 2013-09-13 2021-11-30 Beigene Switzerland Gmbh Anti-PD1 antibodies and their use as therapeutics and diagnostics
US11512132B2 (en) 2014-07-03 2022-11-29 Beigene, Ltd. Anti-PD-L1 antibodies and their use as therapeutics and diagnostics
CN106588913A (zh) * 2015-10-16 2017-04-26 陈剑 具有咪唑并吡啶类衍生物，其制备及其在医药上的应用
CN106588913B (zh) * 2015-10-16 2018-11-02 陈剑 具有咪唑并吡啶类衍生物，其制备及其在医药上的应用
CN105732638A (zh) * 2016-01-22 2016-07-06 成都倍特药业有限公司 一种具有螺环或桥环结构的布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂及其制备方法
US11534431B2 (en) 2016-07-05 2022-12-27 Beigene Switzerland Gmbh Combination of a PD-1 antagonist and a RAF inhibitor for treating cancer
US11970500B1 (en) 2016-08-16 2024-04-30 Beigene Switzerland Gmbh Crystalline form of (s)-7-(1-acryloylpiperidin-4-yl)- 2-(4-phenoxyphenyl)-4,5,6,7-tetra- hydropyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carboxamide, preparation, and uses thereof
US11851437B2 (en) 2016-08-16 2023-12-26 Beigene Switzerland Gmbh Crystalline form of (S)-7-(1-acryloylpiperidin-4-yl)-2-(4-phenoxyphenyl)-4,5,6,7-tetra-hydropyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carboxamide, preparation, and uses thereof
US11814389B2 (en) 2016-08-16 2023-11-14 Beigene Switzerland Gmbh Crystalline form of (S)-7-(1-acryloylpiperidin-4-yl)-2-(4-phenoxyphenyl)-4,5,6,7-tetra-hydropyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carboxamide, preparation, and uses thereof
CN116478166A (zh) * 2016-08-16 2023-07-25 百济神州(苏州)生物科技有限公司 一种化合物的晶型、其制备和用途
US11884674B2 (en) 2016-08-16 2024-01-30 Beigene Switzerland Gmbh Crystalline form of (S)-7-(1-acryloylpiperidin-4-yl)-2-(4-phenoxyphenyl)-4,5,6,7-tetra- hydropyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carboxamide, preparation, and uses thereof
US11591340B2 (en) 2016-08-16 2023-02-28 Beigene Switzerland Gmbh Crystalline form of (S)-7-(1-acryloylpiperidin-4-yl)-2-(4-phenoxyphenyl)-4,5,6,7-tetra- hydropyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carboxamide, preparation, and uses thereof
CN109563099A (zh) * 2016-08-16 2019-04-02 百济神州有限公司 (s)-7-(1-丙烯酰基哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的晶型、其制备和用途
US11999743B2 (en) 2016-08-16 2024-06-04 Beigene Switzerland Gmbh Crystalline form of (S)-7-(1-acryloylpiperidin-4-yl)-2-(4-phenoxyphenyl)-4,5,6,7-tetra-hydropyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carboxamide, preparation, and uses thereof
US12103931B2 (en) 2016-08-16 2024-10-01 Beigene Switzerland Gmbh Crystalline form of (S)-7-(1-acryloylpiperidin-4-yl)-2-(4-phenoxyphenyl)-4,5,6,7-tetra-hydropyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carboxamide, preparation, and uses thereof
US11701357B2 (en) 2016-08-19 2023-07-18 Beigene Switzerland Gmbh Treatment of B cell cancers using a combination comprising Btk inhibitors
US11555038B2 (en) 2017-01-25 2023-01-17 Beigene, Ltd. Crystalline forms of (S)-7-(1-(but-2-ynoyl)piperidin-4-yl)-2-(4-phenoxyphenyl)-4,5,6,7-tetrahydropyrazolo[1,5-a]pyrimidine-3-carboxamide, preparation, and uses thereof
US11597768B2 (en) 2017-06-26 2023-03-07 Beigene, Ltd. Immunotherapy for hepatocellular carcinoma
CN110997677A (zh) * 2017-08-12 2020-04-10 百济神州有限公司 具有改进的双重选择性的Btk抑制剂
US11786529B2 (en) 2017-11-29 2023-10-17 Beigene Switzerland Gmbh Treatment of indolent or aggressive B-cell lymphomas using a combination comprising BTK inhibitors
CN108467397A (zh) * 2018-05-25 2018-08-31 陈海鹏 一种含有氰基的三环类化合物及其在抗肿瘤药物中的用途
CN108484615A (zh) * 2018-05-25 2018-09-04 陈海鹏 一种化合物、合成方法及其在制备抗肿瘤药物中的用途
CN108558886A (zh) * 2018-05-25 2018-09-21 陈海鹏 一种含有氰基的三环类化合物及其在制备抗肿瘤药物中的用途
CN111909152B (zh) * 2019-05-08 2023-12-15 百济神州(苏州)生物科技有限公司 Btk抑制剂及其中间体的制备方法
CN111909152A (zh) * 2019-05-08 2020-11-10 百济神州(苏州)生物科技有限公司 Btk抑制剂及其中间体的制备方法
WO2020228637A1 (en) 2019-05-10 2020-11-19 Henan Normal University Substituted 1-amino-1h-imidazole-5-carboxamide as bruton's tyrosine kinase inhibitors
US12291516B2 (en) 2019-05-10 2025-05-06 Henan Zhiwei Biomedicine Co., Ltd. Substituted 1-amino-1H-imidazole-5-carboxamide as Bruton's tyrosine kinase inhibitors
CN111909133A (zh) * 2019-05-10 2020-11-10 河南师范大学 作为布鲁诺酪氨酸激酶抑制剂的取代的1-氨基-1h-咪唑-5-甲酰胺
CN111909133B (zh) * 2019-05-10 2023-07-14 河南知微生物医药有限公司 作为布鲁诺酪氨酸激酶抑制剂的取代的1-氨基-1h-咪唑-5-甲酰胺
US12233069B2 (en) 2019-06-10 2025-02-25 Beigene Switzerland Gmbh Oral solid tablet comprising Bruton's Tyrosine Kinase inhibitor and preparation method therefor
AU2020395741B2 (en) * 2019-12-04 2023-08-10 Henan Zhiwei Biomedicine Co., Ltd. Substituted imidazolecarboxamide as Bruton's Tyrosine Kinase inhibitors
KR20220110260A (ko) * 2019-12-04 2022-08-05 허난 즈웨이 바이오메디슨 씨오., 엘티디. 브루톤 티로신 키나제 억제제인 이미다졸 카복사마이드 유도체
AU2020395741C1 (en) * 2019-12-04 2023-11-16 Henan Zhiwei Biomedicine Co., Ltd. Substituted imidazolecarboxamide as Bruton's Tyrosine Kinase inhibitors
KR102801205B1 (ko) 2019-12-04 2025-04-29 허난 즈웨이 바이오메디슨 씨오., 엘티디. 브루톤 티로신 키나제 억제제인 이미다졸 카복사마이드 유도체
WO2021110142A1 (en) * 2019-12-04 2021-06-10 Henan Normal University Substituted imidazolecarboxamide as bruton's tyrosine kinase inhibitors
CN114761399B (zh) * 2019-12-04 2024-03-26 河南知微生物医药有限公司 作为布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂的咪唑甲酰胺衍生物
US12552798B2 (en) 2019-12-04 2026-02-17 Henan Zhiwei Biomedicine Co., Ltd. Substituted imidazolecarboxamide as Bruton's tyrosine kinase inhibitors
CN114761399A (zh) * 2019-12-04 2022-07-15 河南知微生物医药有限公司 作为布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂的咪唑甲酰胺衍生物
CN110845504A (zh) * 2019-12-19 2020-02-28 武汉九州钰民医药科技有限公司 合成赞布替尼的新方法
WO2021170045A1 (en) * 2020-02-27 2021-09-02 Beigene Switzerland Gmbh Methods of treating dlbcl using btk inhibitors and combinations thereof
CN116018138A (zh) * 2020-07-13 2023-04-25 河南知微生物医药有限公司 作为布鲁诺酪氨酸激酶抑制剂的取代的1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-3-甲酰胺
CN116018138B (zh) * 2020-07-13 2025-08-15 河南知微生物医药有限公司 作为布鲁诺酪氨酸激酶抑制剂的取代的1H-咪唑并[1,2-b]吡唑-3-甲酰胺
CN113943293A (zh) * 2020-07-16 2022-01-18 百济神州(北京)生物科技有限公司 用于制备作为protac btk降解剂的双官能化合物的方法
CN116981675A (zh) * 2020-12-31 2023-10-31 百济神州有限公司 通过布鲁顿氏酪氨酸激酶（btk）抑制剂与e3连接酶配体的缀合降解btk和使用方法
WO2022143856A1 (en) * 2020-12-31 2022-07-07 Beigene, Ltd. Degradation of bruton's tyrosine kinase (btk) by conjugation of btk inhibitors with e3 ligase ligand and methods of use
WO2022268052A1 (en) * 2021-06-21 2022-12-29 Beigene, Ltd. (r) -glutarimide crbn ligands and methods of use

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Publication number Publication date
HUS2200010I1 (hu) 2022-04-28
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US20160083392A1 (en) 2016-03-24
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US20180251466A1 (en) 2018-09-06
CA2902686C (en) 2017-01-24
NL301161I2 (nl) 2022-04-06
US20240254128A1 (en) 2024-08-01
JP6204568B2 (ja) 2017-09-27
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CY2022004I2 (el) 2022-07-22
US20230013862A1 (en) 2023-01-19
US11142528B2 (en) 2021-10-12
KR101793807B1 (ko) 2017-11-03
EP2989106B1 (en) 2016-12-14
BR112015025260A2 (pt) 2017-07-18
US9556188B2 (en) 2017-01-31
US20200148690A1 (en) 2020-05-14
CN104884458B (zh) 2017-04-12
AU2014256633A1 (en) 2015-09-17
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US10570139B2 (en) 2020-02-25

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