CN104800200B - 高良姜素的医药用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及医药学领域，特别是涉及一种高姜良素的医药用途及其药物组合物。本发明的高姜良素可用于制备防治视网膜新生血管性疾病的药物。
Description
技术领域
本发明涉及医药保健品领域，特别是涉及一种高良姜素的医药用途及其药物组合物。
背景技术
视网膜新生血管性疾病是指因为视网膜内新生血管的生长，并伴随出血、渗出、增生等病理性的改变从而致盲的眼部疾病。目前，视网膜新生血管性疾病已经日渐成为世界范围内最严重的致盲性眼病之一，包括糖尿病性视网膜病变（Diabetic retinopathy，DR）、早产儿视网膜病变（Retinopathy of prematurity，ROP）、年龄相关性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）、视网膜血管阻塞性疾病、视网膜静脉周围炎等。研究证实，血管内皮细胞的分化、增殖、迁移、微血管形成等活动是视网膜新生血管性疾病整个病理过程的中心环节，故而抑制血管内皮细胞增殖和新生血管生长是治疗这类疾病的关键。
糖尿病性视网膜病变（Diabetic retinopathy，DR）是糖尿病性微血管病变中最重要的表现之一，是一种具有特异性改变的眼底病变，是糖尿病的严重并发症之一。临床上根据是否出现视网膜新生血管为标志，将没有视网膜新生血管形成的糖尿病性视网膜病变称为非增殖性糖尿病性视网膜病变（nonproliferative diabetic retinopathy，NPDR）（或称单纯型或背景型），而将有视网膜新生血管形成的糖尿病性视网膜病变称为增殖性糖尿病性视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy，PDR）。
早产儿视网膜病变（Retinopathy of prematurity，ROP）是由于新生儿的视网膜血管异常增殖所致的一类疾病，与早产、低出生体重、接受氧疗等因素有关。常见于出生后3～6周，临床上分成活动期及纤维膜形成期。早产儿视网膜病变的治疗主要依靠外科手术以及新生血管抑制剂等内科治疗。
年龄相关性黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）又称老年性黄斑变性，为黄斑区结构的衰老性改变。主要表现为视网膜色素上皮细胞对视细胞外节盘膜吞噬消化能力下降，结果使未被完全消化的盘膜残余小体潴留于基底部细胞原浆中，并向细胞外排出，沉积于Bruch膜，形成玻璃膜疣。玻璃膜疣继而引起Bruch膜本断裂，脉络膜毛细血管通过破裂的Bruch膜进入RPE下及视网膜神经上皮下，形成脉络膜新生血管。由于新生血管壁的结构异常，导致血管的渗漏和出血，进而引发一系列的继发性病理改变。年龄相关性黄斑变性大多发生于45岁以上，其患病率随年龄增长而增高，是当前老年人致盲的重要疾病。本病在临床上分为干性与湿性两型。湿性年龄相关性黄斑变性的特点是色素上皮层下有活跃的新生血管，从而引起一系列渗出、出血、瘢痕改变。
高良姜素（Galangin）是姜科植物高良姜Alpinia officinarum Hance根中含有的主要成分。高良姜是具有重要药用价值的中药之一，其有广泛的药理作用，如抗溃疡、抗腹泻、镇痛抗炎、抗血栓形成、抗氧化、抗菌以及抗促癌等。
发明内容
本发明的目的旨在提供一种高良姜素的新的医药用途及其药物组合物。
具体地说，本发明的第一方面是提供了高良姜素在制备RF-6A细胞增殖抑制剂中的应用。
在一优选例中，所述的RF-6A细胞增殖由VEGF诱导产生。
本发明的第二方面是提供了高良姜素在制备防治视网膜新生血管性疾病的药物中的应用。
本发明的第三方面是提供了高良姜素在制备防治糖尿病性视网膜病变的药物中的应用。
在一优选例中，所述的糖尿病性视网膜病变为增殖性糖尿病性视网膜病变。
本发明的第四方面是提供了高良姜素在制备防治早产儿视网膜病变的药物中的应用。
本发明的第五方面是提供了高良姜素在制备防治年龄相关性黄斑变性的药物中的应用。
在一优选例中，所述的年龄相关性黄斑变性为湿性年龄相关性黄斑变性。
本发明的第六方面是提供了一种可抑制视网膜血管新生的药物组合物，它包含治疗有效量的高良姜素。
本发明各个方面的细节将在随后的章节中得以详尽描述。通过下文以及权利要求的描述，本发明的特点、目的和优势将更为明显。
附图说明
图1a为视网膜局部放大图（100×），体现了CD31免疫荧光染色检测本发明的高良姜素对STZ诱导DR小鼠及正常小鼠视网膜中新生血管的作用；
a.正常对照组，b.糖尿病视网膜病模型组，c.高良姜素1mg/kg，d.高良姜素10mg/kg；
图1b为血管计数统计图（Data=Mean±SD，n=6-8，与Control组比较***P<0.001，与DR Model组比较##P<0.01，###P<0.001）；
图2体现了本发明的高良姜素对糖尿病小鼠血清和玻璃体腔中VEGF含量的影响（Data=Mean±SD，n=6-8，与Control比较***P<0.001，与DR模型组比较###P<0.001）；
图3a为视网膜局部放大图（100×），体现了CD31免疫荧光染色检测高良姜素（Galangin）对OIR小鼠视网膜中新生血管的作用；
a.正常对照组，b.OIR模型组，c.Galangin20mg/kg；
图3b为血管计数统计图（Data=Mean±SEM，n=6-8，与Control组比较***P<0.001，与OIR Model组比较###P<0.001）。
具体实施方式
本发明的问世部分是基于这样一个意外发现：高良姜素（Galangin）可以显著抑制VEGF诱导的视网膜血管内皮细胞RF-6A的增殖。因此，上述化合物可有望开发成为一种抑制RF-6A细胞增殖的物质即RF-6A细胞增殖抑制剂。如本领域的技术人员所知，所述的“RF-6A细胞增殖抑制剂”可以是各种形式的物质，包括但不限于：药物、保健品、日用品等等。进而，用高良姜素制备的“RF-6A细胞增殖抑制剂”可用于防治各种视网膜新生血管性疾病，这些疾病包括但不限于：糖尿病性视网膜病变（Diabetic retinopathy，DR）、早产儿视网膜病变（Retinopathy of prematurity，ROP）、年龄相关性黄斑变性（age-related maculardegeneration，AMD）、视网膜血管阻塞性疾病、视网膜静脉周围炎等。
进而，本发明的第一方面是提供了高良姜素在制备RF-6A细胞增殖抑制剂中的应用。
较优选地，所述的RF-6A细胞增殖由VEGF诱导产生。
本发明的第二方面是提供了高良姜素在制备防治视网膜新生血管性疾病的药物中的应用。
本发明的第三方面是提供了高良姜素在制备防治糖尿病性视网膜病变的药物中的应用。
较优选地，所述的糖尿病性视网膜病变为增殖性糖尿病性视网膜病变。
本发明的第四方面是提供了高良姜素在制备防治早产儿视网膜病变的药物中的应用。
本发明的第五方面是提供了高良姜素在制备防治年龄相关性黄斑变性的药物中的应用。
较优选地，所述的年龄相关性黄斑变性为湿性年龄相关性黄斑变性。
本发明的第六方面是提供了一种可抑制视网膜血管新生的药物组合物，它包含治疗有效量的高良姜素。
如本领域的技术人员所知，高良姜素（Galangin）具有如下结构通式：
分子式：C15H10O5分子量：270.2369
本发明的高良姜素可通过商业途径从上海中药标准化研究中心等处购买获得，亦用本领域的常规方法从姜科植物高良姜Alpinia officinarum Hance根中提取获得。其纯度均符合药用标准。
以将本发明的高良姜素制成药物为例。本发明的高良姜素可以单独使用或以药物组合物的形式使用。药物组合物包括作为活性成分的本发明的高良姜素及可药用载体。较佳地，本发明的药物组合物含有0.1～99.9%重量百分比的作为活性成分的本发明的高良姜素。“可药用载体”不会破坏本发明的高良姜素的药学活性，同时其有效用量，即能发挥药物载体作用时的用量对人体无毒。
所述可药用载体包括但不限于：软磷脂、硬脂酸铝、氧化铝、离子交换材料、自乳化药物传递系统、吐温或其他表面活化剂、血清蛋白、缓冲物质如磷酸盐、氨基乙酸、山梨酸、水、盐、电解质如硫酸盐精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅酸镁、饱和脂肪酸部分甘油酯混合物等。
其他常用的药物辅料如粘合剂（如微晶纤维素）、填充剂（如淀粉、葡萄糖、无水乳糖和乳糖珠粒）、崩解剂（如交联PVP、交联羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素）、润滑剂（如硬脂酸镁）以及吸收促进剂、吸附载体、香味剂、甜味剂、赋形剂、稀释剂、润湿剂等。
本发明的高良姜素以及其药物组合物可按本领域常规方法制备并可以通过肠道或非肠道或局部途径给药。口服制剂包括胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂等；非肠道给药制剂包括注射液等；局部给药制剂包括霜剂、贴剂、软膏剂、喷雾剂等。优选为口服制剂。
本发明的高良姜素以及其药物组合物的给药途径可以为口服、舌下、经皮、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、静脉、尿道、阴道等。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本专利说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。
实施例1 高良姜素体外抑制视网膜血管新生的活性
血管内皮细胞的增殖、迁移、管腔形成是体外评价血管新生的主要实验方法。我们在恒河猴视网膜血管内皮细胞RF/6A细胞上，观察了高良姜素对重要的促血管因子血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）促进血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成的影响。在VEGF诱导的RF/6A细胞增殖实验中，高良姜素（10μM，25μM）能显著抑制VEGF诱导的RF/6A细胞增殖，而对静息期的RF/6A细胞没有明显的影响。高良姜素（2.5μM，5μM，10μM，25μM）都可以明显抑制VEGF诱导的RF/6A细胞迁移。高良姜素（2.5μM，5μM，10μM，25μM）都可以明显抑制VEGF诱导的RF/6A细胞的管腔形成。由此可见，高良姜素在体外可以抑制由VEGF诱导的视网膜血管新生，而VEGF是参与调控视网膜血管新生的最主要的促血管新生因子。
1.1实验材料
1.1.1细胞
RF-6A细胞株：购于中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。
1.1.2药物
高良姜素购自上海中药标准化研究中心，纯度98%以上。
1.1.3试剂
明胶和溴化-3（4,5-二甲基噻唑-2）2,5-二甲苯基四氮唑（MTT）购自美国Sigma公司，胎牛血清（FBS）、Matrigel、RPMI1640培养液、0.25%胰蛋白酶购自美国Invitrogen公司。血管内皮生长因子（VEGF）购自美国PeproTech公司。实验中所用其它试剂均为国产分析纯。
1.2实验方法：
1.2.1药物配制
高良姜素用二甲基亚枫（DMSO）溶解，配成母液浓度为0.1mol/L，母液均用一次性灭菌滤器（0.22μM）过滤灭菌。加药时用无血清RPMI1640培养基配制所需的5个浓度，使DMSO在培养中总浓度不超过0.1％。
1.2.2高良姜素抑制RF/6A细胞增殖实验
取对数生长期的细胞，将细胞制成细胞悬液，按一定的浓度铺入96孔板中，待细胞贴壁生长状态良好时加入待测药物与细胞共孵48小时后，加入10μl MTT（终浓度0.5mg/ml）置培养箱反应4小时，加入50μl三联剂（10%SDS-5%异丁醇-0.01M HCL）于培养箱中充分溶解12小时以上，最后在OD570/630nm处测定吸光值。细胞存活率（%）=给药组OD（570nm-630nm）/对照组OD（570nm-630nm）×100%，对照组加含等量DMSO的细胞培养液而不加任何药物。
1.2.3高良姜素抑制VEGF诱导的RF/6A细胞增殖实验
取对数生长期的细胞，将细胞制成细胞悬液，按一定的浓度铺入96孔板中，待细胞贴壁生长状态良好时，弃原培养基，换含1%胎牛血清的RPMI1640培养基，加入待测药物15分钟后，加入生长因子（VEGF）与细胞共孵48小时后，加入10μl MTT（终浓度0.5mg/ml）置培养箱反应4小时，加入50μl三联剂（10%SDS-5%异丁醇-0.01M HCL）于培养箱中充分溶解12小时以上，最后在OD570/630nm处测定吸光值。细胞存活率（%）=给药组OD（570nm-630nm）/对照组OD（570nm-630nm）×100%，对照组加含等量DMSO的细胞培养液而不加任何药物。
1.2.4迁移实验
Transwell小室用0.1%明胶包被1h后，取出晾干，将消化好的RF/6A细胞用无血清培液洗3次，稀释为4×105/ml，于上室加入100ul（4×104cells/well）细胞悬液。下室加入600μl的无血清培液，并加入VEGF（10ng/ml），穿膜8小时。吸去上下室培液，以4℃4％多聚甲醛室温固定30min，用棉签擦去内室上层未迁移细胞，0.1%结晶紫常温染色10min。以PBS漂洗多余染。显微镜下拍照并计数，最后用10％乙酸100ul/孔抽提10min，用酶标仪600nm下测定OD值。
1.2.5管腔形成实验
96孔板每孔铺上冷的液体基质胶30μl，在37℃下固化45分钟。每孔加100μl细胞悬液（1×104cells/well）同时加不同浓度的药物或对照，孵育4小时。用倒置差像显微镜记录图像，计算完整的管腔形成数。
1.2.6统计学处理
实验数据均用平均值±标准误表示，采用SPSS11.5统计软件进行分析，以One-WayANOVA方式进行方差分析，两两比较采用LSD法，P<0.05为具有统计学显著性差异标准。
1.3实验结果
1.3.1高良姜素对RF/6A细胞静息期和血管内皮生长因子（VEGF）诱导增殖的影响。
由表1可见，高良姜素于0～25μM，对静息期RF/6A细胞的增殖无影响，说明对RF/6A细胞无明显的细胞毒性。而高良姜素于2.5μM浓度开始均能够显著性地抑制VEGF诱导RF/6A细胞的增殖，并呈剂量依赖性。
表1高良姜素对RF/6A细胞静息期和VEGF诱导增殖的抑制率（n=10）
与溶媒组比较，**P<0.01；***P<0.001；
1.3.2.高良姜素对VEGF诱导RF/6A细胞迁移的影响
由表2可见，高良姜素于1μM开始均能够明显性地抑制VEGF诱导RF/6A细胞的迁移，并呈剂量依赖性。
表2高良姜素对VEGF诱导RF/6A细胞迁移的影响（n=6）
与溶媒组比较，**P<0.01；***P<0.001；
1.3.3.高良姜素对VEGF诱导RF/6A细胞管腔形成的影响。
由表3可见，高良姜素于1μM开始均能够明显性地抑制VEGF诱导RF/6A细胞的管腔形成，并呈剂量依赖性。
表3高良姜素对VEGF诱导RF/6A细胞管腔形成的影响（n=6）
与溶媒组比较，**P<0.01；***P<0.001
实施例2高良姜素改善糖尿病视网膜病药效活性
2.1实验材料和方法
2.1.1动物：SPF级C57小鼠，雄性，体重18-24g，购自中国科学院上海实验动物中心。动物合格证编号：SCXK（沪）2012-0002。饲养于上海中医药大学SPF级动物房，饲养一周后使用。饲养条件为：温度22±1℃，湿度55±5%，12小时光暗循环，饲料与水消毒后自由摄取。实验严格按照国家和上海中医药大学动物中心动物使用管理条例进行。
2.1.2药物的配制：取适量高良姜素溶于DMSO中，配制成0.1M的母液，用生理盐水稀释后腹腔注射给药，浓度为1mg/kg和10mg/kg。
2.1.3动物实验：
（1）将0.1M柠檬酸溶液与柠檬酸三钠溶液以14:11的比例混匀，调混合液PH至4.3-4.5，待用。称取适量STZ粉末，避光溶解，使之成为5.5mg/ml的溶液，立即给予已禁食12h的小鼠腹腔注射，0.1ml/10g，最终给予STZ的剂量为55mg/kg，连续给药5天。
（2）末次给药一周后用割尾法测小鼠血糖浓度，血糖值≥16.7mmol/L（250mg/dl）视为造模成功。将造模成功的小鼠随机分为3组：DR模型组（DR model组）、高良姜素1mg/kg组、高良姜素10mg/kg组，每组10只。另外未i.p STZ的10只正常C57小鼠作为正常组（Control组）。每两周检测体重变化，每月检测血糖变化。
（3）造模成功2个月后开始给药，腹腔注射，0.1ml/10g，高良姜素1mg/kg组、高良姜素10mg/kg组分别给予不同浓度的高良姜素溶液，终剂量分别为：1mg/kg，10mg/kg，Model组给予同体积的溶媒对照，给药2个月后处死，取视网膜观察视网膜新生血管情况，视网膜病理切片H&E染色观察；取血清进行Elisa实验，检测细胞因子的变化。
2.1.4视网膜铺片CD31免疫荧光检测高良姜素对糖尿病视网膜病小鼠视网膜血管新生治疗情况：
（1）视网膜分离：将处死后小鼠的眼球取下，固定于4%多聚甲醛（in PBS）中，4℃过夜。在解剖镜下将视网膜剥离，PBS中略漂洗3-4次。
（2）封闭：将漂洗后的视网膜放入装有Blocking Buffer（5%BSA，0.5%Trixton X-100inPBS）的1.5ml Epp管中，常温摇床慢摇孵育3h。
（3）一抗孵育：将封闭好的视网膜放于CD31一抗反应液中（抗体1:200稀释，抗体稀释液为1%BSA，0.5%Trixton X-100in PBS），4℃摇床慢摇孵育1-2天。
（4）洗涤一抗：以Wash Buffer（0.5%Trixton X-100in PBS）在室温下摇床上清洗6次，每次20min。
（5）二抗孵育：将视网膜封入含FITC conjugated anti-Rat IgG的二抗反应液中（1:200稀释），室温避光孵育2h。
（6）洗涤二抗：以Wash Buffer（0.5%Trixton X-100in PBS）在室温下摇床上避光清洗6次，每次20min。
（7）封片：在解剖镜下将视网膜铺于载玻片上，剪开成花瓣状，滴加数滴抗荧光猝灭剂，以Gelatin moutin solution（2g/ml Gelatin）封片，盖上盖玻片。
（8）拍照：将视网膜免疫荧光铺片稍晾干后于荧光显微镜下拍照，观察视网膜中血管新生情况。
（9）血管密度计数：选取CD31免疫荧光照片（200×），每个组选3-5张照片，计算照片中心点横竖对称轴上的血管数目作为血管密度。
2.1.5血清和玻璃体腔中VEGF含量测定
（1）在VEGF抗体包被的酶标版各孔中刚加入50μl Assay Diluent RD1-41，然后分别加入50μlStandard（共8个浓度，分别为1000pg/ml，500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.2pg/ml），Control（Rat VEGF Kit Control）及样本。
（2）酶标版以封膜封好，在水平摇床上500±50rpm，室温孵育2h。
（3）弃去孔中液体，加满Wash Buffer清洗5次，最后一次将孔中余液吸尽。
（4）每孔加入100μl Rat VEGF Conjugate，封膜，相同条件于水平摇床室温孵育1h。
（5）弃去孔中液体，加满Wash Buffer清洗5次，最后一次将孔中余液吸尽。
（6）每孔加入100μl Substrate Solution（Color Reagents A：Color Reagents B=1:1），避光孵育30min。
（7）每孔加入100μl Stop Solution，在450nm、540nm处测定各孔吸光度值。
（8）根据不同浓度Standard的OD值，求出标曲，在将样本OD值代入标曲，计算孔中VEGF含量。
2.1.6统计学处理
实验数据均用平均值±标准误表示，采用SPSS11.5统计软件进行分析，以One-WayANOVA方式进行方差分析，两两比较采用LSD法，P<0.05为具有统计学显著性差异标准。
2.2实验结果
2.2.1高良姜素对糖尿病小鼠血糖和体重的影响
从表4可见，高良姜素各剂量组均不能改善糖尿病小鼠体重的减轻，也不能降低升高的血糖。说明高良姜素没有明显改善糖尿病的药效活性。
表4高良姜素对糖尿病小鼠血糖和体重的影响
***P<0.001与正常相比
2.2.2高良姜素对糖尿病小鼠视网膜血管新生的影响
从图1可见，糖尿病小鼠视网膜中血管明显新生，而高良姜素各剂量组可以明显降低视网膜的血管新生。
2.2.3高良姜素对糖尿病小鼠血清和玻璃体腔中VEGF含量的影响
从图2可见，高良姜素可以剂量依赖性降低血清和玻璃体腔中促血管新生因子VEGF的含量。提示高良姜素可以抑制促血管因子的释放，抑制视网膜的血管新生，从而改善糖尿病视网膜病。
实施例3高良姜素改善氧诱导的新生小鼠视网膜病变的药效活性
早产儿视网膜病变（retinopathy of prematurity,ROP）已成为一种严重威胁新生儿视力健康的疾病。由Smith等建立的氧诱导新生小鼠视网膜病变模型（OIR）成功复制了早产儿视网膜病变（ROP）的特点，在ROP研究中得到广泛应用。
3.1材料与方法
3.1.1动物：SPF级C57BL小鼠，雌雄各5只，8周龄，购自中国科学院上海实验动物中心（合格证号:SCXK（沪）2012-0002）。饲养于上海中医药大学动物实验中心，雌雄随机组合为5对进行繁殖，温度22±1℃，湿度55±5%，饲料与水消毒后自由摄取，12小时光暗循环。实验严格按照国家和上海中医药大学动物中心动物使用管理条例进行。
3.1.2药物的配制：取适量高良姜素溶于DMSO中，配制成0.1M的母液，用生理盐水稀释后腹腔注射给药，浓度为20mg/kg.
3.1.3OIR模型建立：C57BL小鼠出生后第7天（P7），随机分为正常组与缺氧组，每组10只。正常组小鼠饲养于正常氧环境中；缺氧组小鼠饲养于75.5%氧分压氧舱中，高氧环境5天后即第12天返回至正常氧环境中，继续饲养5天至第17天（P17），期间每天腹腔注射给药高良姜素20mg/kg，连续给药5天。
3.1.4视网膜免疫荧光铺片：取P17天小鼠处死，摘取眼球，于4%多聚甲醛（in PBS）中4℃固定过夜，于解剖显微镜下，用虹膜剪缘角膜边缘剪开，移除晶状体和玻璃体，取出完整视网膜，PBS洗2～3次，Blocking Buffer（5%BSA，0.5%Trixton X-100in PBS）封闭2小时，与CD31抗体于4℃孵育2天，Wash Buffer（0.5%Trixton X-100in PBS）洗6次，与二抗避光孵育2小时，Wash Buffer洗6次，剪视网膜成花瓣状，平铺于载玻片上，明胶（2g/ml）固定并封片，于荧光显微镜下观察并拍照。
3.1.5数据分析
数据结果以means±SE表示。实验数据采用SPASS16.0软件统计，两两比较采用独立样本t检验。P<0.05时认为具有统计学显著性差异。
3.2实验结果
高良姜素对氧诱导新生小鼠视网膜血管新生的影响
从图3可见，OIR模型组小鼠视网膜有大量血管新生，同时血管扭曲变形形成大量血管瘤（b），而给予高良姜素后增生的血管明显减少，血管瘤也有所减少（c）。提示高良姜素可以抑制OIR模型组小鼠视网膜血管新生，从而改善早产儿视网膜病变。
本发明所涉及的多个方面已做如上阐述。然而，应理解的是，在不偏离本发明精神之前提下，本领域专业人员可对其进行等同改变和修饰，所述改变和修饰同样落入本申请所附权利要求的覆盖范围。
Claims (5)
1.高良姜素在制备RF-6A细胞增殖抑制剂中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的RF-6A细胞增殖由VEGF诱导产生。
3.高良姜素在制备防治视网膜新生血管性疾病的药物中的应用。
4.高良姜素在制备防治增殖性糖尿病性视网膜病变的药物中的应用。
5.高良姜素在制备防治早产儿视网膜病变的药物中的应用。
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Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Correlation between antiangiogenic activity and antioxidant activity of various components from propolis;Mok-Ryeon Ahn et al.;《Mol. Nutr. Food Res.》;20091231;第53卷;第643-651页，尤其是第643页摘要、第645页右栏图1 |
| Quercetin inhibits choroidal and retinal angiogenesis in vitro;Yi Chen et al.;《Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol》;20071218;第246卷;第373-378页，尤其是第373页右栏第2段、第376页左栏第3段 |
| 抗VEGF药物治疗新生血管性眼病的研究进展;卜荔等;《临床眼科杂志》;20111231;第19卷(第1期);第91-94页 |
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