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CN104328053A - 一种高产油栅藻及其培养方法和应用 - Google Patents

一种高产油栅藻及其培养方法和应用 Download PDF

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CN104328053A
CN104328053A CN201410628249.7A CN201410628249A CN104328053A CN 104328053 A CN104328053 A CN 104328053A CN 201410628249 A CN201410628249 A CN 201410628249A CN 104328053 A CN104328053 A CN 104328053A
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CN
China
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sdec
scenedesmus
algae
culture
application
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CN201410628249.7A
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裴海燕
宋明明
胡文容
张硕
韩琳
韩飞
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Shandong University
Original Assignee
Shandong University
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Publication date
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Abstract

本发明公开了一种高产油栅藻及其培养方法和应用。自富营养化水域分离获得的藻种经18S rDNA序列分析和显微形态鉴定,确定该藻为栅藻属(Scenedesmus sp.)成员,其序列号为KF999043。该藻株命名为四尾栅藻SDEC-8(Scenedesmus quadricauda SDEC-8),已于2014年10月8日保藏于中国典型培养物保藏中心,其保藏编号:CCTCC NO:M2014448。其产油培养方法为分离出四尾栅藻SDEC-8的单个藻细胞,获得的纯种细胞于实验室条件下进行曝气扩大培养。本发明四尾栅藻SDEC-8富含优质油脂,油脂含量可达到细胞干重的31.8%,脂肪酸中饱和脂肪酸可达到80%,可作为生物柴油原料。高十六烷值(61.38)和低碘值(29.38 gI2/100g)决定了以该株微藻为原料制备的生物柴油具有很好的氧化安定性。

Description

一种高产油栅藻及其培养方法和应用
技术领域
本发明属于微藻生物技术领域,特别涉及一种高产油栅藻及其培养方法和应用。
背景技术
近年来,由于全球石化燃料消费量激增,石化储量的减少,引起了世界范围内的能源危机,再加上石化燃料燃烧排放二氧化碳带来的环境问题,因此,寻找一种廉价的绿色再生能源已成为世界各国政府以及民众广泛关注的科学与社会问题。研究发现,某些藻类具有含油量高,易于培养,单位面积产量大,不与农业争地等优点,被视为新一代的,甚至是唯一能实现替代化石燃料的生物柴油原料。其含有的16碳和18碳的脂肪酸对于生物柴油的生产最为有利。然而生产成本高是制约微藻生物柴油规模生产的主要因素。而筛选获得容易培养、生长快、产油高的藻种是克服微藻规模化生产瓶颈的首要的一步。早在上世纪70年代,美国就启动了耗资2500万美元由美国国家可再生能源实验室(NREL)运作的水生物物种项目。NREL已从海洋和湖泊中分离到3000多种藻类,从中筛选出生长快、含有高的包括硅藻、绿藻和蓝藻等藻种300多种,但当时未解决成本问题。世界上其它各国的研究者也都利用各种手段积极地筛选寻找能适应商业化生产的优良藻种。微藻制备生物柴油的研究主要集中在以下几个方面:藻种分离与筛选、藻类培养、收获和脱水、油脂提取技术、藻类生物燃料转化技术。因此,分离筛选生长速度快、油脂含量高、油质质量好的优质藻种成为从源头上降低生物柴油产品成本的重中之重。近几年,国内多家实验室已经开始开展大规模采集和筛选高产油藻株的工作,并且取得了一些进展。选自自然环境的微藻往往在温度、光照和盐度适应方面具有一定的抗逆性,适于大量培养生产。
发明内容
本发明的目的就在于克服现有技术中用于生产微藻油脂的优良藻株不足的问题,提供一种高产油栅藻及其培养方法和应用,即在富营养化水域采集水样,分离纯化获得的了一种具有抗逆性、易开放培养的产油微藻,并建立培养方法。
为解决上述技术问题,本发明是通过以下技术方案实现的:
本发明提供了一种高产油栅藻,命名为Scenedesmus quadricauda SDEC-8,分离于济南市泉城公园富营养化湖泊中,已保藏于中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为:CCTCCNO:M 2014448。保藏日期:2014年10月8日。地址:武汉,中国典型培养物保藏中心(武汉大学);邮编:430072;保藏编号:CCTCC NO:M 2014448。四尾栅藻SDEC-8富含优质油脂,油脂含量可达到细胞干重的31.8%,脂肪酸中饱和脂肪酸可达到80%,可作为生物柴油原料。高十六烷值(61.38)和低碘值(29.38gI2/100g)决定了以该株微藻为原料制备的生物柴油具有很好的氧化安定性。
在一个方面中,本发明提供了一种四尾栅藻SDEC-8培养基,成份和用量为NaNO31500mg·L-1,K2HPO422.5~84.3mg·L-1,MgSO4·7H2O 75mg·L-1,CaCl2·2H2O 36mg·L-1,柠檬酸6mg·L-1,柠檬酸铁铵6mg·L-1,EDTANa21mg·L-1,Na2CO320mg·L-1,H3BO32.86mg·L-1,MnCl2·4H2O 1.86mg·L-1,ZnSO4·7H2O 0.22mg·L-1,Na2MoO4·2H2O 0.39mg·L-1,CuSO4·5H2O 0.08mg·L-1,Co(NO3)2·6H2O 0.05mg·L-1,初始pH值在7~8之间,接种后的藻细胞密度为0.35~0.40×106cells·mL-1
优选的是,培养基成份和用量为:NaNO31500mg·L-1,K2HPO440mg·L-1,MgSO4·7H2O75mg·L-1,CaCl2·2H2O 36mg·L-1,柠檬酸6mg·L-1,柠檬酸铁铵6mg·L-1,EDTANa21mg·L-1,Na2CO320mg·L-1,H3BO32.86mg·L-1,MnCl2·4H2O 1.86mg·L-1,,ZnSO4·7H2O 0.22mg·L-1,Na2MoO4·2H2O 0.39mg·L-1,CuSO4·5H2O 0.08mg·L-1,Co(NO3)2·6H2O 0.05mg·L-1,初始pH值=7.1,接种后的藻细胞密度为0.37×106cells·mL-1
在另一个方面中,本发明提供一种四尾栅藻SDEC-8培养基的应用,用于培养四尾栅藻SDEC-8,得到四尾栅藻SDEC-8藻粉。
在一个实施例方案中,所述四尾栅藻SDEC-8藻粉的脂肪酸甲酯含量9.55mg·g-1,饱和脂肪酸含量为80%,十六烷值为61.38,碘值为29.38gI2/100g。
本发明还提供了一种培养四尾栅藻SDEC-8的培养方法,包括如下步骤:
a)将四尾栅藻SDEC-8培养于添加BG11的培养基中,培养温度为25±1℃,全光照,光照强度2000-3000Lux,培养7天,
b)将所得藻细胞转移至BG11培养基中进行扩大培养,曝气气液比为0.1-0.2vvm,培养温度为25±1℃,全光照,光照强度2000-3000Lux,待四尾栅藻SDEC-8生长到稳定期两天时离心、干燥即得到培养后四尾栅藻SDEC-8藻粉。四尾栅藻SDEC-8在BG11培养基中的生长曲线见图3。四尾栅藻SDEC-8在静置BG11培养液中的比生长速率和生物量浓度分别为0.17d-1、0.25g·L-1,而在曝气BG11培养液中比生长速率和生物量浓度分别为0.27d-1、1.29g·L-1。因此,在BG11培养基中曝气极大促进了四尾栅藻SDEC-8的生长和生物量积累。
优选的是,步骤b)中培养条件:培养温度为25±1℃,光照为2500Lux的连续光照,曝气气液比为0.2vvm。四尾栅藻SDEC-8在曝气的BG11培养液中的油脂产率比静置培养下的提高3倍多,而脂肪酸甲酯产率提高近9倍。曝气极大促进了栅藻SDEC-8的油脂积累。
本方明提供了四尾栅藻SDEC-8在处理富营养化湖泊中的应用。四尾栅藻SDEC-8进行含氮和/或含磷废水的净化的应用。四尾栅藻SDEC-8的生产应用,用于生产高效油脂、脂肪酸、蛋白质、淀粉、色素、多糖和/或核酸的应用。四尾栅藻SDEC-8基本上包含了C14:0、C16:0、C18:0和C18:1等脂肪酸,且C16和C18系含量高达96%,其中C16:0和C18:1的含量丰富,从以上脂肪酸组成上分析符合制备生物柴油的要求。
本发明的有益效果
本发明在当地受污染水体中筛得一株优势富油四尾栅藻SDEC-8(Scenedesmusquadricauda SDEC-8),该株藻的生长不需要有机质营养,可以在廉价的无机营养中通过规模培养源源不断地获得含油脂的生物质。其培养基中适当曝气,可以加速藻液的混合,提高藻细胞光能利用率和生长速率,本发明的四尾栅藻SDEC-8在曝气下很明显的提高了油脂产率和生物柴油产率,具有比较好的应用前景。本发明的四尾栅藻SDEC-8(Scenedesmus quadricaudaSDEC-8)富含油脂,且比普通的淡水藻有更高的生物柴油含量,更适合的生物柴油性质例如饱和脂肪酸含量高达80%。利用该株微藻为原料制备的生物柴油具有很好的氧化安定性。
附图说明
图1:四尾栅藻SDEC-8在系统关系树中的位置。
图2:四尾栅藻SDEC-8的显微形态学照片
图3:18S rRNA的PCR扩增产物电泳照片
图4:四尾栅藻SDEC-8在BG11中曝气和不曝气的生长曲线。
其中,1光学显微照片,2扫描电子显微照片、比例尺6μm,3、4透射电子显微照片、比例尺500nm.c,叶绿体;m,线粒体;n,细胞核;py,蛋白核;s,淀粉粒;v,液泡;A代表四尾栅藻SDEC-8。
具体实施方式
以下通过实施例的方式进一步说明本发明,但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,按照常规的方法和条件进行选择。
实施例1四尾栅藻SDEC-8的分离鉴定:
一、样品采集
2012年7月从山东省济南市泉城公园富营养化湖泊采集含有绿藻的水样。
二、四尾栅藻SDEC-8的分离纯化
分离纯化步骤:通过血球板计数法在显微镜下对植物园水样计数,将藻液密度稀释到约3000个/ml。在超净实验台上,将BG11固体培养液倒平板(已放置过夜,无杂菌生长),将待分离的藻液使用医用喉头喷雾器分别喷在标记好的平板上,然后盖好,放在培养箱内培养十余天,就可在培养基上发生互相隔离的藻类群落,并通过显微镜检查纯藻群落,然后用消毒过的接种环直接移植到装有培养液并经过灭菌的100ml三角烧瓶中,用纱布及无菌膜封口,进行培养。BG11;pH控制在7.1。上述培养基如制成半固体培养基,则添加琼脂5~6‰。在显微镜下观察藻细胞是否被纯化,若有杂藻将已经扩大培养的藻细胞用改进的96孔板进一步分离纯化:充分振摇培养基,如藻细胞成聚合体尽量使藻细胞群体破裂为单细胞。在显微镜下用细胞计数板计数(浓度大时需稀释后重新计数),根据所计藻细胞密度,将培养液稀释至每50μl含0.9个藻细胞单位。充分混匀后,用移液枪依次吸取50μL培养液于96孔培养板孔中,每个培养孔中预先放有新鲜的BG11培养液(300-500μl),加盖用封口膜将培养板密封,防止液体挥发。将培养板孔在光照培养箱中培养,6~12h后,在倒置显微镜下仔细观察并标记单细胞孔。待标记的单细胞孔内细胞增至500个以上或出现颜色时,可进行转接扩大培养。选择单细胞生长的孔用移液枪将其培养物转移至装有200mL的新鲜培养基的培养瓶中进行扩大培养。得到一株纯藻株,命名为SDEC-8。
三、四尾栅藻SDEC-8的鉴定
1.四尾栅藻SDEC-8的形态鉴定
四尾栅藻SDEC-8的藻落形态特征:在培养基平板上培养后,可观察到绿色藻落,呈圆形、边缘整齐、光滑、有光泽。
四尾栅藻SDEC-8的菌体形态特征:在显微镜和扫描电镜下观察其形态符合栅藻属特征,具有片状叶绿体,藻细胞真性定形群体扁平,由2-4个细胞组成,群体细胞并列直线排成一列;细胞长圆形、卵形,细胞上下两端广圆,群体外侧细胞的上下两端各具一向外斜的直或略弯曲的刺,细胞壁较平滑。细胞群体长宽取决于生长时期,一般长9-26μm,宽8-14μm。透射电镜观察结果显示,每个藻细胞内含有一个单独的叶绿体,并占据半个细胞,叶绿体中包含一个很明显的蛋白核,蛋白核周围被淀粉粒包被。在细胞中可发现大小不一的液泡,在一些液泡中可以看到深灰色的不规则油状物质。如图2;
2.四尾栅藻SDEC-8的分子鉴定
(1)18S rRNA的PCR扩增与测序:
实验仪器:小型离心机(Eppendorf,转速>12000r/min);电泳仪(北京六一仪器厂);PCR热循环扩增仪(Eppendorf);凝胶成像仪(美国Bio-Rad公司)。
实验方法:按照试剂盒法,从适量新鲜藻液离心并提取藻种的总DNA,对DNA样品进行18S rRNA扩增。扩增引物如下。
正向引物为:18 S-F(CCTGGTTGATCCTGCCAG);
反向引物为:18 S-R(TTGATCCTTCTGCAGGTTCA)。
PCR反应在50μL体系中进行。反应体系的组成为:模板DNA 1μL;1.0U Taq PCR混合物;正向引物2μL;反向引物0.5μL;双蒸水20μL。
PCR扩增条件:94℃变性4min;94℃1min,55℃1min,72℃1.5min。循环30次;72℃延伸10min,4℃放置。用1%的琼脂糖凝胶对菌株的18S rRNA扩增产物做电泳检测,验证后切下胶条,用DNA凝胶回收试剂盒(上海生工生物工程有限公司)纯化PCR产物。回收后的PCR扩增产物委托上海生工生物工程有限公司进行测序。
18S rRNA序列分析与系统发育分析:
18S rRNA的PCR扩增产物电泳照片如图3所示。通过与两侧Marker对照,可知目标扩增产物的片段长度约为1.8kb。
测序后得到四尾栅藻SDEC-8的18S rRNA长度为1054bp的序列,提交到Genbank与其他藻株进行比对(登录号为KF999643),发现四尾栅藻SDEC-8与Scenedesmus sp.的进化距离最为接近,确定其属于栅藻属,结合显微形态鉴定,初步认定其为四尾栅藻,命名为Scenedesmus quadricauda SDEC-8。
基于形态鉴定和分子鉴定的结果,将SDEC-8鉴定为四尾栅藻(Scenedesmusquadricauda),已于2014年10月8日保藏于中国典型培养物保藏中心,其保藏编号:CCTCCNO:M 2014448。地址:武汉,中国典型培养物保藏中心(武汉大学);邮编:430072。
实施例2四尾栅藻SDEC-8的生长条件优化
为了使四尾栅藻SDEC-8更快更好的生长,在BG-11培养基基础上进行培养方式、K2HPO4投加量(22.5~84.3mg·L-1)、培养条件、是否曝气的组合优化。
(1)所使用的培养基为BG11
BG11培养基成分如表1所示,使用前,pH控制在7.1,120℃,灭菌30分钟。
(2)四尾栅藻SDEC-8在BG11中的生长情况
四尾栅藻SDEC-8培养活化7天后,准备接种,待接种的四尾栅藻SDEC-8藻液需先经过离心(4000转/分钟×10分钟,在4℃)并且用15mg·L-1的NaHCO3溶液冲洗两遍藻液。然后,藻种要在1.0ml的NaHCO3溶液中重悬后再接种于BG11培养液中,移入1L锥形瓶中,封口。置于光照培养箱中培养,培养温度为25~30℃,全光照,光照强度2500Lux,静置和通气培养。每日进行pH监测,pH值在8-10间波动。在培养初期,藻液的pH较初始值有所上升,pH上升至10左右,在第2至4天较高,最高达10.3,之后开始降低,并逐渐处于平稳水平,在9左右。
结果表明:四尾栅藻SDEC-8在BG11培养基中的生长曲线见图4。四尾栅藻SDEC-8在静置BG11培养液中的比生长速率和生物量浓度分别为0.17d-1、0.25g·L-1,而在曝气BG11培养液中比生长速率和生物量浓度分别为0.27d-1、1.29g·L-1。因此,在BG11培养基中曝气极大促进了四尾栅藻SDEC-8的生长和生物量积累。
实施例3四尾栅藻SDEC-8的产油特性
一、四尾栅藻SDEC-8的培养
根据实施例2的条件和培养基培养四尾栅藻SDEC-8,置于光照培养箱中培养,培养温度为25~30℃,全光照,光照强度2500Lux,静置和通气培养。所使用的培养基为BG11,BG11培养基成分如表1所示,使用前,pH控制在7.1,120℃,灭菌30分钟。
二、四尾栅藻SDEC-8的生长及油脂产量确定
1.四尾栅藻SDEC-8生物量测定
通过对藻液细胞密度的观察,当藻细胞生长阶段进入稳定期后对藻液进行收获。确定收获体积,用50ml离心管盛装藻液,放入大容量冷冻离心机中进行离心,去除上清液保留底泥四尾栅藻,在60℃低温烘干得到藻粉。生物量计算如方程(1):
式中:m—藻类干重,g;
V—藻液体积,L。
2.四尾栅藻SDEC-8油脂含量的测定
称取0.1g干藻粉于50ml离心管中,加入10ml氯仿/甲醇(2:1)溶液,用超声破碎仪破碎10min,然后4000r/min离心分离10min,保留有机相,将有机相转移到60ml分液漏斗中,整个提取过程重复两次。根据分离的有机相体积,投加0.9%的氯化钠溶液(1:5),充分摇匀1min,并静置分层15min,回收下层油脂提取溶液并测量其体积,取5ml回收溶液于10ml玻璃试管中,用氮气吹干,将玻璃管放置于80℃烘箱中烘至衡重(约30分钟)。方程计算油脂含量:
LW = ( m 2 - m 0 ) × V 5 × m 1
式中:LW—基于干重下的油脂含量,g/g;
m1—藻粉干重,g;
m0—10ml玻璃管干重,g;
m2—带有油脂的10ml玻璃管干重,g;
V—低相油脂的体积,ml。
结果如表3所示,本发明所得结果为四尾栅藻SDEC-8在曝气的BG11培养液中的油脂产率比静置培养下的提高3倍多,而脂肪酸甲酯产率提高近9倍。曝气极大促进了栅藻SDEC-8的油脂积累。
表3四尾栅藻SDEC-8在BG11培养中的油脂产率及脂肪酸甲酯产率
3.四尾栅藻SDEC-8脂肪酸甲酯成分分析
称取0.1g藻粉(200mg)平行样,放入离心管中,加入藻粉质量10%的固体酸;加入甲醇2mL在60度下水浴40分钟,然后每个样品加入与甲醇相同体积2ml的4%KOH-甲醇溶液,并水浴60分钟;将混合液从离心管中倒入已烘干的带刻度的10mL玻璃管中,加入1mL正己烷,超声破碎10分钟;待分层后,取上清液200μL于已烘干的具塞玻璃小管中,每个样中加入25μL十七烷酸甲酯内标液(2mg/mL),封口,取1μL进行气相色谱质谱联用(GC-MS)测定;剩余的脂肪酸甲酯,用移液枪移出,并计量体积。
气相色谱分析仪器:Trace GC-DSQII(热电)气相色谱分析仪;色谱柱:VF-23ms石英毛细管柱,其规格为30m×0.25mm×0.25μm;分流比:50:1;进样口温度:210℃;氦气流速:恒流,1mL/min;升温程序::150℃保持1min,以1℃每分钟的速度升到165℃;离子源温度:250℃;进样量:lμL;数据被NIST质量光谱数据库分析。采用内标定量法。
表4四尾栅藻SDEC-8在BG11中的脂肪酸组分
SFA=饱和脂肪酸(14:0,16:0,18:0,24:0);MUFA=单不饱和脂肪酸(16:1,18:1);PUFA=多不饱和脂肪酸(16:2,16:3,18:2,18:3,20:4,20:5,22:6).
结果表明(如表4)四尾栅藻SDEC-8基本上包含了C14:0、C16:0、C18:0和C18:1等脂肪酸,且C16和C18系含量高达96%,其中C16:0和C18:1的含量丰富,从以上脂肪酸组成上分析符合制备生物柴油的要求。C16:0在曝气培养收获的四尾栅藻SDEC-8中含量在70%左右,显著高于其他文献报道的藻种中C16:0含量(Converti,A.,Casazza,A.A.,Ortiz,E.Y.,Perego,P.,Del Borghi,M.,2009.Effect of temperature and nitrogen concentration on the growthand lipid content of Nannochloropsis oculata and Chlorella vulgaris for biodiesel production.Chem.Eng.Process.48,1146–1151)。
4.四尾栅藻SDEC-8生物柴油性质评价
根据如下公式计算藻类脂肪酸甲酯混合物的平均不饱和度:
ADU=∑M╳Yi
其中,ADU指的是藻油的平均不饱和度;
Yi指的是每一个脂肪酸组分的质量分数;
M是每一个脂肪酸组分中碳碳双键的数目。
并由生物柴油不饱和度计算得到生物柴油性质如黏度、密度、浊点、十六烷值、碘值和热值,它们的关系分别由如下公式表示。
y=-0.6316x+5.2065
y=0.0055x+0.8726
y=-13.356x+19.994
y=-6.6684x+62.876
y=74.373x+12.71
y=1.7601x+38.534
表5四尾栅藻SDEC-8的生物柴油性质和生物柴油、ASTM生物柴油及EN生物柴油标准对比
结果如表5所示,通过与美国ASTM D6751,欧洲EN 14214生物柴油质量标准及常见生物柴油原料油质质量范围的比较,得出在曝气和未曝气两种培养条件下,四尾栅藻SDEC-8油脂的黏度、密度、十六烷值及热值都符合这些标准,且两个培养条件下生物柴油性质差别不大。该藻油的高十六烷值和低碘值决定了以该株微藻为原料制备的生物柴油具有很好的氧化安定性。
上述虽然结合附图对本发明的具体实施方式进行了描述,但并非对本发明保护范围的限制,所属领域技术人员应该明白,在本发明的技术方案的基础上,本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围以内。

Claims (10)

1.一种高产油栅藻,其特征在于,分离于富营养化湖泊中,命名为Scenedesmusquadricauda SDEC-8,已于2014年10月8日保藏于中国典型培养物保藏中心,其保藏编号为:CCTCC NO:M 2014448。
2.一种如权利要求1所述的四尾栅藻SDEC-8培养基,其特征在于:成份和用量为NaNO3 1500mg·L-1,K2HPO4 22.5~84.3mg·L-1,MgSO4·7H2O 75mg·L-1,CaCl2·2H2O 36mg·L-1,柠檬酸6mg·L-1,柠檬酸铁铵6mg·L-1,EDTANa2 1mg·L-1,Na2CO3 20mg·L-1,H3BO32.86mg·L-1,MnCl2·4H2O 1.86mg·L-1,ZnSO4·7H2O 0.22mg·L-1,Na2MoO4·2H2O 0.39mg·L-1,CuSO4·5H2O 0.08mg·L-1,Co(NO3)2·6H2O 0.05mg·L-1,初始pH值在7~8之间,接种后的藻细胞密度为0.35~0.40×106cells·mL-1
3.一种如权利要求2所述的四尾栅藻SDEC-8培养基,其特征在于:培养基成份和用量为NaNO3 1500mg·L-1,K2HPO4 40mg·L-1,MgSO4·7H2O 75mg·L-1,CaCl2·2H2O 36mg·L-1,柠檬酸6mg·L-1,柠檬酸铁铵6mg·L-1,EDTANa2 1mg·L-1,Na2CO3 20mg·L-1,H3BO3 2.86mg·L-1,MnCl2·4H2O 1.86mg·L-1,ZnSO4·7H2O 0.22mg·L-1,Na2MoO4·2H2O 0.39mg·L-1,CuSO4·5H2O 0.08mg·L-1,Co(NO3)2·6H2O 0.05mg·L-1,初始pH值=7.1,接种后的藻细胞密度为0.37×106cells·mL-1
4.一种如权利要求3所述的四尾栅藻SDEC-8培养基的应用,其特征在于,所述的培养基培养四尾栅藻SDEC-8,得到四尾栅藻SDEC-8藻粉。
5.如权利要求4的应用,其特征在于,所述四尾栅藻SDEC-8藻粉的脂肪酸甲酯含量9.55mg·g-1,饱和脂肪酸含量为80%,十六烷值为61.38,碘值为29.38gI2/100g。
6.一种培养权利要求1的四尾栅藻SDEC-8的培养方法,其特征在于,包括如下步骤:
a)将四尾栅藻SDEC-8培养于添加BG11的培养基中,培养温度为25±1℃,全光照,光照强度2000-3000Lux,培养7天;
b)将所得藻细胞转移至BG11培养基中进行扩大培养,曝气气液比为0.1-0.2vvm,培养温度为25±1℃,全光照,光照强度2000-3000Lux,待四尾栅藻SDEC-8生长到稳定期两天时离心、干燥即得到培养后四尾栅藻SDEC-8藻粉。
7.如权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤b)中培养条件:培养温度为25±1℃,光照为2500Lux的连续光照,曝气气液比为0.2vvm。
8.一种如权利要求1所述的四尾栅藻SDEC-8在处理富营养化湖泊中的应用。
9.权利要求1所述的四尾栅藻SDEC-8进行含氮和/或含磷废水的净化的应用。
10.权利要求1所述的四尾栅藻SDEC-8用于生产高效油脂、脂肪酸、蛋白质、淀粉、色素、多糖和/或核酸的应用。
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