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CN104024248A - 丝氨酸/苏氨酸pak1抑制剂 - Google Patents

丝氨酸/苏氨酸pak1抑制剂 Download PDF

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CN104024248A
CN104024248A CN201280052602.0A CN201280052602A CN104024248A CN 104024248 A CN104024248 A CN 104024248A CN 201280052602 A CN201280052602 A CN 201280052602A CN 104024248 A CN104024248 A CN 104024248A
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vacuo
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CN201280052602.0A
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I.阿利亚加斯-马丁
J.克劳福德
W.李
S.马蒂厄
J.鲁道夫
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F Hoffmann La Roche AG
Original Assignee
F Hoffmann La Roche AG
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Abstract

本发明涉及具有式I的化合物，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb和n如本申请所定义，并且所述化合物为PAK1的抑制剂。本申请还披露用于治疗癌症和过度增殖性障碍的组合物和方法。

Description

丝氨酸/苏氨酸PAK1抑制剂
技术领域
本发明涉及抑制丝氨酸/苏氨酸激酶并且用于通过抑制通常在癌组织中活动过度或过表达的信号传导途径来治疗过度增殖性和肿瘤性疾病的化合物。本发明化合物为PAK1抑制剂。本发明进一步涉及用本发明范围内的化合物治疗癌症或过度增殖性疾病的方法。
背景技术
蛋白激酶是催化蛋白质中特定酪氨酸、丝氨酸和苏氨酸残基上的羟基磷酸化的酶。通常，所述磷酸化可显著改变所述蛋白质的功能，因此所述蛋白激酶在调节多种细胞过程包括代谢、细胞增殖和细胞存活中可能是重要的。这些细胞过程的机制是靶向蛋白激酶来治疗由这些细胞过程所导致的或牵涉这些细胞过程的病症的基础。所述疾病的实例包括但不限于癌症和糖尿病。
蛋白激酶可分为两类：蛋白酪氨酸激酶(PTK)和丝氨酸-苏氨酸激酶(STK)。PTK和STK都可为受体蛋白激酶或非-受体蛋白激酶。PAK为非受体STK家族。丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的p21-激活蛋白激酶(PAK)家族在细胞支架机化(organization)、细胞形态发生、细胞过程和细胞存活中发挥重要作用(Daniels et al.,Trends Biochem.Sci.199924:350-355；Sells et al.,Trends Cell.Biol.19977:162-167)。所述PAK家族由六个成员组成，这些成员分为两组:PAK1-3(I组)和PAK4-6(II组)，它们是基于序列同源性和在I组PAK中存在自体抑制区域加以区分的。p21-激活激酶(PAK)用作Rac和Cdc42GTPase功能以及Ras-驱动肿瘤发生所需途径的重要介质。(Manser et al.,Nature1994367:40-46；B.Dummler et al.,Cancer Metathesis Rev.200928:51-63；R.Kumar etal.,Nature Rev.Cancer20066:459-473)。
具体地，PAK和PAK1水平和活性上的变化通常与人恶性肿瘤相关，所述恶性肿瘤包括但不限于膀胱癌、乳癌、结肠直肠癌、胃癌、成胶质细胞瘤、肝细胞癌、卵巢癌和肾细胞癌、原发性乳腺癌、鳞状非小细胞肺癌或鳞状头颈癌。(J.V.Kichina et al.,Expert.Opin.Ther.Targets201014(7):703)。PAK1在11q13处的基因组扩增在管腔乳癌(luminal breast cancer)中是普遍的，并且PAK1蛋白表达与淋巴结转移相关。鳞状非小细胞肺癌(NSCLC)和鳞状头颈癌具有PAK1的异常细胞质表达。(C.C.Ong et al.,Pr℃.Nat.Acad.Sci.,USA2011108(17):7177)。
发明内容
不断需要新颖的可用于治疗癌症和过度增殖性病症的治疗剂。所述PAK家族是重要的信号传导分子，其在多种患癌组织中通常是过表达和/或活动过度的。设计并开发抑制或调节它们活性的药物化合物是有必要的。本发明一个方面提供式I化合物。
A为A1或A2。Z为N或CR2。R1a和R1b(i)各自独立地为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基，或(ii)R1a和R1b一起为(CH2)2-5。R2为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C3-6环烷基或C3-7环烷基-C1-6烷基。Rb为氢、C1-6烷基或C3-6环烷基。Ra为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基、C3-7环烷基-C1-6烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基。R3为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C3-7环烷基-C1-6烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、卤素、C1-6酰基或C1-3卤代烷酰基。R4每次出现时独立地为羟基、巯基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-7环烷基-C1-6烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、卤素、C1-6烷氧基羰基、羧基、C1-6烷基硫基、C1-6羟基烷基、硝基、氨基、C1-3烷基氨基、C1-3二烷基氨基、氨基-C1-3烷基、C1-3烷基氨基-C1-3烷基、C1-3二烷基氨基C1-3烷基、C1-6烷基磺酰基、芳基磺酰基、C1-6烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、C1-6烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、氨基甲酰基、C1-3烷基氨基甲酰基和C1-3二烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、C1-6烷基羰基氨基、芳基羰基氨基。n为0、1、2或3。R5为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、氰基、C1-6卤代烷氧基或OR9。R6为氢、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氰基、C1-6羟基烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基。R7选自(i)C1-10烷基，(ii)C1-10卤代烷基，(iii)任选取代的C3-7环烷基，(iv)C3-7环烷基-C1-6烷基，(v)[C(R10)2]0-6OR9，(vi)C3-7杂环基，和(vii)C3-7杂环基-C1-6烷基。R9每次出现时独立地为C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基-C1-6烷基、苯基-C1-6烷基或苯基。R10每次出现时独立地为氢或C1-6烷基。每次出现时，环烷基独立地任选取代有C1-6烷基、卤素或任选取代的苯基。每次出现时，苯基独立地任选取代有C1-6烷基、卤素或C1-6烷氧基。每次出现时，杂环基独立地取代有卤素或C1-6烷基。本发明进一步包含所述化合物的药用盐。
本发明进一步涉及如上所述的式I化合物的立体异构体、互变异构体或药用盐。
本发明另一个方面涉及通过向有此需要的患者给予治疗有效量的式I化合物来治疗过度增殖性障碍的方法。所述化合物可单独给予或与至少一种其它抗过度增殖性或化疗性化合物共同给予。
本发明另一个方面涉及抑制细胞中PAK活性的方法，包括用有效量的式I化合物处理细胞以削弱或消除PAK活性。
本发明另一个方面涉及本申请所述的式I化合物在制备用于治疗癌症或过度增殖性障碍或改善癌症或过度增殖性障碍的严重程度的药物中的用途。
本发明另一个方面涉及本申请所述的化合物，其用于治疗癌症或过度增殖性障碍或改善癌症或过度增殖性障碍的严重程度。
发明详述
本申请使用的实体是指一个或多个所述实体，例如，化合物是指一个或多个化合物或至少一个化合物。因此，术语“一个”、“一个或多个”和“至少一个”在本申请中可互换使用。
短语"如本申请上面所定义"是指“发明内容”或最宽范围权利要求中所提供的针对每个基团的最宽定义。在下面提供的所有其它实施方案中，存在于每个实施方案中且未明确定义的取代基保留“发明内容”中所提供的最宽定义。
如本说明书中所使用(包括在过渡短语中或在权利要求中)，术语"包含"应被理解为具有开放含义。亦即，所述术语应被理解为与短语"具有至少一个"或"包括至少一个"同义。当用在方法的背景中时，术语"包含"是指所述方法包括至少一个所述步骤，并且可包括其它步骤。当用在化合物或组合物的背景中时，术语"包含"是指所述化合物或组合物包括至少一个所述特征或组分，并且也可包括其它特征或组分。
术语"独立地"用在本申请中是指变量应用在任一种情况下，无需考虑在同一化合物中是否存在或不存在具有相同或不同定义的变量。因此，在R"出现两次并且被定义为"独立地为碳或氮"的化合物中，两个R"都可为碳，两个R"都可为氮，或者一个R"可为碳并且另一个为氮。
当任意变量(例如，R1、R4a、Ar、X1或Het)在描绘和描述本申请所用或所要求保护的化合物的任意部分或式中出现不止一次时，其每次出现时的定义独立于其在每次其它出现时的定义。同样，取代基和/或变量的组合仅在这样的组合得到稳定化合物时才是允许的。
在键结尾处的符号"*"或穿过键绘制的"------"是指官能团或其它化学部分与所述分子剩余部分的连接点，所述官能团或其它化学部分为所述分子的一部分。因此，例如:
MeC(＝O)OR4其中
经绘制插入到环系中(而不是连在一个明确的顶点)的键表明所述键可以连于任意适当的环原子。
本申请使用的术语“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件或状况可能(但不需要)发生，并且所述描述包括所述事件或状况发生的情况和未发生的情况。例如，“任选取代的”是指任选取代的部分可结合氢或取代基。
术语"约"用在本申请中是指近似、附近、大致或大约。当术语"约"与数值范围共同使用时，其通过将边界扩展高于或低于所述数值而调整了所述范围。大体上，术语"约"用在本申请中用于调整数值，使其相对于所述值具有高于或低于20％的偏差。
如本申请所使用的，当以数值范围描述变量时，其预期表明本发明可用等于所述范围内的任意值的变量来实施。因此，对于本质上离散的变量，所述变量可等于所述数值范围的任意整数值，包括所述范围的端点。类似地，对于本质上连续的变量，所述变量可等于所述数值范围的任意真实值，包括所述范围的端点。举例而言，被描述为具有0-2的值的变量，对于本质上离散的变量，其可为0、1或2，和对于本质上连续的变量，其可为0.0、0.1、0.01、0.001或任意真实值。
式I化合物表现出互变异构现象。互变异构化合物可按两种或多种可互转换种类的形式存在。质子转移型互变异构体是由两个原子间共价结合的氢原子的迁移得到的。互变异构体大体上以平衡状态存在，并且当试图分离出单独的互变异构体时，通常产生混合物，该混合物的化学和物理性质与化合物的混合物一致。平衡状态的位置依赖于所述分子内的化学特征。例如，在多种脂肪族醛和酮例如乙醛中，酮形式占主导地位，但是在酚中，烯醇形式占主导地位。常见的质子转移型互变异构体包括酮/烯醇酰胺/亚氨酸和脒互变异构体。后两者在杂芳基环和杂环中是特别常见的，并且本发明涵盖所述化合物的所有互变异构形式。
所述式I化合物可含有酸性或碱性中心，并且适当的盐是从可形成无毒盐的酸或碱形成的，所述适当盐具有类似的抗病毒活性。无机酸的盐的实例包括盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、氯化物盐、溴化物盐、碘化物盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐。有机酸的盐的实例包括乙酸盐、富马酸盐、扑酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、樟脑磺酸盐、D和L-乳酸盐、D和L-酒石酸盐、乙磺酸盐、甲磺酸盐、丙二酸盐、乳清酸盐、葡庚糖酸盐、甲基硫酸盐、硬脂酸盐、葡萄糖醛酸盐、2-萘磺酸盐、甲苯磺酸盐、羟苯酰苯酸盐(hibenzate)、烟酸盐、羟乙磺酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、枸橼酸盐、葡萄糖酸盐、琥珀酸盐、糖二酸盐、苯甲酸盐、乙磺酸盐和扑酸盐。关于适当盐的综述，参见Berge et al,J.Pharm.Sci.,197766:1-19andG.S.Paulekuhn et al.J.Med.Chem.200750:6665。
本发明一个实施方案提供式I化合物其药用盐，其中A为A-1或A-2；Z为N或CR2；R1a和R1b(i)各自独立地为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基，或(ii)R1a和R1b一起为(CH2)2-5；R2为氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基或C3-6环烷基；Rb为氢、C1-6烷基或C3-6环烷基；Ra为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基；R3为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、卤素、C1-6酰基或C1-3卤代烷酰基；R4每次出现时独立地为羟基、巯基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、卤素、C1-6烷氧基羰基、羧基、C1-6烷基硫基、C1-6羟基烷基、硝基、氨基、C1-3烷基氨基、C1-3二烷基氨基、氨基-C1-3烷基、C1-3烷基氨基-C1-3烷基、C1-3二烷基氨基C1-3烷基、C1-6烷基磺酰基、芳基磺酰基、C1-6烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、C1-6烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、氨基甲酰基、C1-3烷基氨基甲酰基和C1-3二烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、C1-6烷基羰基氨基、芳基羰基氨基；n为0、1、2或3；R5为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、氰基或OR9；R6为氢、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氰基、C1-6羟基烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基；R7选自(i)C1-10烷基，(ii)C1-10卤代烷基，(iii)任选取代的C3-7环烷基，(iv)C3-7环烷基-C1-6烷基，(v)R9O[C(R10)2]0-6，(vi)C3-7杂环基和(vii)C3-7杂环基-C1-6烷基；R9每次出现时独立地为C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基-C1-6烷基、苯基-C1-6烷基或苯基；R10每次出现时独立地为氢或C1-6烷基；所述环烷基每次出现时，独立地任选取代有C1-6烷基、卤素或任选取代的苯基；所述苯基每次出现时，独立地任选取代有C1-6烷基、卤素或C1-6烷氧基；所述杂环基独立地任选取代有卤素或C1-6烷基。
本发明一个实施方案提供式I化合物，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义。当短语"如本申请上面所定义"涉及变量时，其通过参考的方式结合了在“发明内容”中或最宽权利要求中就每个基团所提供的最宽定义。在下面提供的所有其它实施方案中，可存在于每个实施方案中且未明确定义的取代基保留“发明内容”中允许的最宽定义。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2，Z为CR2，和R2和Rb为氢。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的吲哚-5-基(A2a)。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2a；R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；以及R7为C1-6卤代烷基、任选取代的C4-7环烷基或C3-7杂环基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2a；R1a为氢或C1-6烷基，Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；和R7为任选取代的C4-7环烷基或C3-7杂环基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2a；R1a为氢或C1-6烷基；Ra为C1-6羟基烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；和R7为C1-6卤代烷基、任选取代的C4-7环烷基或C3-7杂环基。在一个亚实施方案中，R7为任选取代的单-或二氟环丙基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2a；R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；和R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、环氧乙烷、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2a，R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；和R7为单-或二氟环丙基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2a；R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；和R7为任选取代的单-或二氟环丙基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的吲唑-5-基(A2c)；R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；和R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、环氧乙烷、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的吲唑-5-基(A2c)；R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；以及R7为单-或二氟环丙基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2a；R1a为C1-6烷基；R1b为氢，和携带R1a和R1b的碳为S构型；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R5为C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；以及R7为C1-6卤代烷基、任选取代的C4-7环烷基或C3-7杂环基。在亚实施方案中，R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。在另一个亚实施方案中，R7为单-或二氟环丙基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的吲哚-4-基(A2b)。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2b，R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；以及R7为任选取代的C3-7环烷基、C3-7杂环基或C1-6卤代烷基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2b，R1a为氢或C1-6烷基，Ra独立地为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；以及R7为单-或二氟环烷基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2b，R1a为氢或C1-6烷基；Ra独立地为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；以及R7为任选取代的C4-7环烷基或C3-7杂环基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2b，R1a为氢或C1-6烷基；Ra为C1-6羟基烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；以及R7为任选取代的C3-7环烷基、C3-7杂环基或C1-6卤代烷基。在一个亚实施方案中，R7为单-或二氟环丙基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2b，R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢，R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；以及R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2b，R1a为C1-6烷基；R1b为氢，和携带R1a和R1b的碳为S构型；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；以及R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为A-1，和R2为氢或C1-6烷基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的苯并咪唑-5-基(A1a)，和R2为氢或C1-6烷基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A1a；R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R2为氢或C1-6烷基；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；和R7为C1-6卤代烷基、任选氟化的C4-7环烷基或C3-7杂环基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A1a；R1a为氢或C1-6烷基；Ra为C1-6羟基烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基；R1b为氢；R2为氢或C1-6烷基；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素；和R7为C1-6卤代烷基、任选氟化的C4-7环烷基或C3-7杂环基。在一个亚实施方案中，R7为单-或二氟环丙基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A1a；R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R2为氢或C1-6烷基；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素，和R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。在一个亚实施方案中，R7为单-或二氟环丙基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A1a，R1a为氢或C1-6烷基；Ra为C1-6羟基烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素，和R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。在亚实施方案中，R7为单-或二氟-环烷基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A1a，R1a为C1-6烷基；R1b为氢，和携带R1a和R1b的碳为S构型；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R2为氢或C1-6烷基；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素，和R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。在亚实施方案中，R7为单-或二氟-环烷基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A1b。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A1b；R1a和R2为氢或C1-6烷基；R1b为氢；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素，和R7为任选取代的C3-7环烷、C3-7杂环基或C1-6卤代烷基。在亚实施方案中，R7为单-或二氟环烷基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A1b；R1a和R2为氢或C1-6烷基；R1b为氢；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素，和R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。在亚实施方案中，R7为单-或二氟环烷基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A1b；R1a和R2为氢或C1-6烷基；Ra为C1-6羟基烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素，和R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A1b；R1a为C1-6烷基；R1b为氢，和携带R1a和R1b的碳为S构型；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R2为氢或C1-6烷基；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素，和R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。在亚实施方案中，R7为单-或二氟环烷基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2；Z为N，Rb为氢，和R3为氢、C1-6烷基或C1-6烷氧基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A2；Z为N，Rb为氢，和R3为氢、C1-6烷基或C1-6烷氧基；R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素，和R7为任选取代的C3-7环烷基、C3-7杂环基或C1-6卤代烷基。
本发明另一个实施方案提供式I化合物，其中A为任选取代的A-2，Z为N，Rb为氢，和R3为氢、C1-6烷基或C1-6烷氧基；R1a为氢或C1-6烷基；Ra为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；R1b为氢；R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；R6为氢或卤素，和R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。在亚实施方案中，R7为单-或二氟-环烷基。
本发明的一个实施方案提供式I化合物，其为选自表I的化合物I-1至I-117或表II的化合物II-1至II-113中的任意一个或多个化合物。
本发明另一个实施方案提供抑制细胞中PAK1活性的方法，所述方法包括使所述细胞与式I化合物接触，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义。
本发明另一个实施方案提供抑制细胞中PAK活性的方法，所述方法包括使所述细胞与式I化合物接触，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义。
本发明另一个实施方案提供抑制有此需要的患者中的PAK活性的方法，所述方法包括给予式I化合物，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义。
本发明另一个实施方案提供治疗或改善有此需要的患者的癌症或过度增殖性障碍的严重程度的方法，包括给予式I化合物，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义。
本发明另一个实施方案提供治疗或改善有此需要的患者的癌症或过度增殖性障碍的严重程度的方法，所述癌症或过度增殖性障碍选自腺瘤、膀胱癌、脑癌、乳癌、结肠癌、表皮癌、滤泡性癌、生殖泌尿道癌、成胶质细胞瘤、霍奇金病(Hodgkin's disease)、头颈癌、肝癌、角化棘皮瘤、肾癌、大细胞癌、白血病、肺腺癌、肺癌、淋巴障碍、黑素瘤和非-黑素瘤皮肤癌、骨髓增生异常综合征、成神经细胞瘤、非-霍奇金淋巴瘤、卵巢癌、乳头状癌、胰腺癌、前列腺癌、直肠癌、肉瘤、小细胞癌、睾丸癌、畸胎癌(tetracarcinomas)、甲状腺癌和未分化癌，包括给予式I化合物，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义。
本发明另一个实施方案提供治疗或改善有此需要的患者的癌症或过度增殖性障碍的严重程度的方法，其中所述癌症或过度增殖性障碍选自肺癌、乳癌、卵巢癌、膀胱癌和头颈癌，包括给予式I化合物，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义。
本发明另一个实施方案提供改善有此需要的患者的癌症或过度增殖性障碍的严重程度的方法，其中所述癌症或过度增殖性障碍选自原发性乳腺癌、鳞状非小细胞肺癌或鳞状头颈癌，包括给予式I化合物，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义。
本发明另一个实施方案提供治疗或改善有此需要的患者的癌症或过度增殖性障碍的严重程度的方法，包括给予式I化合物，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义，并且其中所述癌症或过度增殖性障碍为原发性乳腺癌。
本发明另一个实施方案提供治疗或改善有此需要的患者的癌症或过度增殖性障碍的严重程度的方法，包括给予式I化合物，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义，并且其中所述癌症或过度增殖性障碍为鳞状非小细胞肺癌。
本发明另一个实施方案提供治疗或改善有此需要的患者的癌症或过度增殖性障碍的严重程度的方法，包括给予式I化合物，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义，并且其中所述癌症或过度增殖性障碍为鳞状头颈癌。
本发明另一个实施方案提供治疗或改善有此需要的患者的癌症或过度增殖性障碍的严重程度的方法，包括共同给予式I化合物和至少一种用于治疗或改善癌症或过度增殖性障碍的其它化疗剂，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义。
本发明另一个实施方案提供治疗或改善有此需要的患者的癌症或过度增殖性障碍的严重程度的方法，包括共同给予式I化合物和化疗剂，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义，并且所述化疗剂选自凋亡蛋白抑制剂(IAP)、EGFR抑制剂或拮抗剂、Ras/Raf/Mek/Erk信号级联放大抑制剂、Akt激酶抑制剂和Src激酶抑制剂。
本发明另一个实施方案提供式I化合物和至少一种药用载体、赋形剂或稀释剂，其中A、Z、R1a、R1b、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R9、R10、Ra、Rb、Rc、Rd和n如本申请上面所定义。
除非另有定义，本申请使用的科技术语具有本发明所述领域的技术人员通常理解的含义。本申请提及本领域技术人员已知的各种方法和物质。描述药理学一般原理的标准参考著作包括Goodman and Gilman's ThePharmacological Basis of Therapeutics,10th Ed.,McGraw Hill Companies Inc.,New York(2001)。在制备这些化合物中使用的起始物质和试剂通常是从供应商(例如Aldrich Chemical Co.)处得到的，或者是通过本领域技术人员已知的方法按照文献中描述的操作制备的。除非另有说明，在下面描述和实施例中提及的物质、试剂等可从商业来源获得。一般合成操作已描述在论文中并且是本领域技术人员熟知的，所述论文为例如Fieser and Fieser’s Reagents for OrganicSynthesis；Wiley&Sons:New York,Volumes1-21；R.C.LaR℃k,ComprehensiveOrganic Transformations,2nd edition Wiley-VCH,New York1999；Comprehensive Organic Synthesis,B.Trost and I.Fleming(Eds.)vol.1-9Pergamon,Oxford,1991；Comprehensive Heter℃yclic Chemistry,A.R.Katritzkyand C.W.Rees(Eds)Pergamon,Oxford1984,vol.1-9；Comprehensive Heter℃yclic Chemistry II,A.R.Katritzky and C.W.Rees(Eds)Pergamon,Oxford1996,vol.1-11；和Organic Reactions,Wiley&Sons:New York,1991,Volumes1-40。
本申请所述定义可被附加形成化学相关组合，例如“杂烷基芳基”、“卤代烷基杂芳基”、“芳基烷基杂环基”、“烷基羰基”、“烷氧基烷基”等。当术语“烷基”在另一个术语后面作为后缀使用时，例如在“苯基烷基”或“羟基烷基”中，这预期是指如上定义的烷基被至少一个选自其它专门指定组的取代基取代。因此，例如，“苯基烷基”是指具有一个至两个苯基取代基的烷基，并且因此包括苄基(苯基甲基)和苯基乙基。“烷基氨基烷基”为具有一个至两个烷基氨基取代基的烷基。“羟基烷基"包括2-羟基乙基、2-羟基丙基、1-(羟基甲基)-2-甲基丙基、2-羟基丁基、2,3-二羟基丁基、2-(羟基甲基)、3-羟基丙基等。因此，如本申请所使用，术语“羟基烷基”用于定义下面定义的一亚组杂烷基。术语-(芳)烷基是指未取代烷基或芳烷基。术语(杂)芳基是指为芳基或杂芳基的部分。
本申请使用的无进一步限定的“烷基”，单独或与其它基团组合，表示含有1-10个碳原子的非支链或支链单价烃残基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、正-丁基、异-丁基、仲-丁基或叔-丁基。术语“低级烷基”表示含有1-6个碳原子的直链或支链烃残基。本申请使用的"C1-6烷基"是指由1-6个碳构成的烷基。
术语“环烷基”表示3-10个环碳原子的单价饱和单环或二环烃基，特别是3-8个环碳原子的单价饱和单环烃基。二环是指由具有一个(例如，螺环)或两个或更多个共同碳原子的两个饱和碳环组成的。例如，本申请使用的"C3-7环烷基"是指所述碳环是由3-7个碳组成的环烷基。单环环烷基的实例为环丙基、环丁基、环戊基、环己基或环庚基。二环环烷基的实例为二环[2.2.1]庚基或二环[2.2.2]辛基。
本申请使用的术语“环烷基烷基”是指基团R'R"-，其中R'为本申请定义的环烷基，R"为本申请定义的亚烷基，应理解的是，环烷基烷基部分的连接点在所述亚烷基上。环烷基烷基的实例包括但不限于环丙基甲基、环己基甲基、环戊基乙基。C3-7环烷基-C1-3烷基是指基团R'R"，其中R'为本申请定义的C3-7环烷基，和R"为本申请定义的C1-3亚烷基。
本申请使用的术语"烷氧基"是指-O-烷基，其中烷基如上所定义，所述烷氧基为例如甲氧基、乙氧基、正-丙基氧基、异-丙基氧基、正-丁基氧基、异-丁基氧基、叔-丁基氧基、戊基氧基、己基氧基，包括它们的异构体。本申请使用的"低级烷氧基"表示具有如之前所定义的"低级烷基"的烷氧基。本申请使用的"C1-10烷氧基"指的是-O-烷基，其中烷基为C1-10。
术语“卤代烷基”表示所述烷基的氢原子中的至少一个已被相同或不同卤素原子特别是氟原子替换的烷基。卤代烷基的实例包括单氟-、二氟-或三氟-甲基、-乙基或-丙基，例如3,3,3-三氟丙基、2-氟乙基、2,2,2-三氟乙基、氟甲基或三氟甲基。
术语“羟基烷基”表示所述烷基的氢原子中的至少一个已被羟基替换的烷基。羟基烷基的实例包括羟基甲基、2-羟基乙基、2-羟基丙基、3-羟基丙基、1-(羟基甲基)-2-甲基丙基、2-羟基丁基、3-羟基丁基、4-羟基丁基、2,3-二羟基丙基、2-羟基-1-羟基甲基乙基、2,3-二羟基丁基、3,4-二羟基丁基或2-(羟基甲基)-3-羟基丙基。
术语“酰基”、"烷酰基"或“烷基羰基”表示式-C(O)-R的基团，其中R为氢或如上所定义的烷基。术语C1-6酰基[或"烷酰基"]是指含有1-6个碳原子的基团-C(＝O)R。所述C1酰基或R＝H的"烷酰基"为甲酰基，和C6酰基是指烷基链为非支链的己酰基。本申请使用的术语"芳基羰基"或"芳酰基"是指式C(＝O)R的基团，其中R为芳基；本申请使用的术语"苯甲酰基"为R为苯基的"芳基羰基"或"芳酰基"基团。
本申请使用的"烷氧基羰基"和"芳基氧基羰基"表示R分别为烷基或芳基(烷基和芳基如本申请所定义)的式C(＝O)OR的基团。
本申请使用的术语"卤代烷氧基"是指基团-OR，其中R为如本申请所定义的卤代烷基。卤代烷氧基的实例包括单氟-、二氟-或三氟-甲氧基-、乙氧基-或丙氧基-、3,3,3-三氟丙氧基-、2-氟乙氧基-、2,2,2-三氟乙氧基-、氟甲氧基-,或三氟甲氧基-。本申请使用的术语"卤代烷基硫基"是指R为如本申请所定义的卤代烷基的基团-SR。
术语“卤代烷酰基”是指所述烷基的氢原子中的至少一个已被相同或不同的卤素原子替换的烷酰基。
术语“卤代”、“卤素”和“卤化物”在本申请中互换使用并且表示氟、氯、溴或碘。
本申请使用的术语"氨基"、"烷基氨基"和"二烷基氨基"分别是指-NH2、-NHR和-NR2，并且R为如上所定义的烷基。二烷基部分中，连于氮的两个烷基可为相同或不同的。本申请使用的术语"氨基烷基"、"烷基氨基烷基"和"二烷基氨基烷基"分别是指NH2(亚烷基)n-、RHN(亚烷基)n–和R2N(亚烷基)n-，其中R为烷基，并且亚烷基和烷基都如本申请所定义，并且n为亚烷基链中的碳原子数。本申请使用的"C1-10烷基氨基"是指烷基为C1-10的氨基烷基。本申请使用的C1-10烷基-氨基-C2-6烷基"是指C1-10烷基氨基(亚烷基)2-6，其中烷基为C1-10，和所述亚烷基为(CH2)2-6。当所述亚烷基含有三个或更多个碳原子时，所述亚烷基可为直链的例如-(CH2)4-，或为支链的例如-(CMe2CH2)-。本申请使用的术语"苯基氨基"是指-NHPh，其中Ph表示任选取代的苯基。
除非另有说明，本申请使用的术语"亚烷基"表示1-10个碳原子的二价饱和直链烃基(例如，(CH2)n)或2-10个碳原子的支链饱和二价烃基(例如，-CHMe-或-CH2CH(i-Pr)CH2-)。"C0-4亚烷基"是指包含1-4个碳原子的直链或支链饱和二价烃基，在C0的情况下，省略亚烷基。条件是，在亚甲基的情况下，亚烷基的开放价不连于同一原子。亚烷基的实例包括但不限于亚甲基、亚乙基、亚丙基、2-甲基-亚丙基、1,1-二甲基-亚乙基、亚丁基、2-乙基亚丁基。
术语”烷基硫烷基”或“烷基硫基”表示基团-S-R’，其中R’为如本申请所定义的烷基。烷基硫基的实例包括甲基硫基和丁基硫基。
本申请使用的术语"烷基磺酰基"和"芳基磺酰基"表示式-S(＝O)2R的基团，其中R分别为烷基或芳基，并且烷基和芳基如本申请所定义。本申请使用的术语C1-3烷基磺酰基氨基是指基团RSO2NH-，其中R为如本申请所定义的C1-3烷基。
本申请使用的术语"氨基磺酰基"是指基团-S(O)2NH2。本申请使用的术语"烷基氨基磺酰基"和"二烷基氨基磺酰基"是指基团-S(O)2NR'R"，其中R'和R"为氢和低级烷基，和R'和R"分别独立地为低级烷基。烷基氨基磺酰基的实例包括但不限于甲基氨基磺酰基、异-丙基氨基磺酰基。二烷基氨基磺酰基的实例包括但不限于二甲基氨基磺酰基、异-丙基-甲基氨基磺酰基。
术语"烷基磺酰氨基"是指基团-NH-S(O)2-烷基。术语烷基可被其它化学相关基团例如芳基或杂芳基替换，从而表示例如苯基磺酰氨基即-NH-S(O)2-Ph。"N-烷基烷基磺酰氨基"是指基团-NR-S(O)2-烷基，其中R为低级烷基。
本申请使用的术语"氨基甲酰基"指的是基团-CONH2。前缀"N-烷基氨基甲酰基"和"N,N-二烷基氨基甲酰基"分别是指基团CONHR'或CONR'R"，其中R'和R"独立地为如本申请所定义的烷基。前缀"N-芳基氨基甲酰基"表示基团CONHR'，其中R'为如本申请所定义的芳基。
本申请使用的术语"烷基羰基氨基"和"芳基羰基氨基"表示式-NC(＝O)R的基团，其中R分别为烷基或芳基，和烷基和芳基如本申请所定义。
本申请使用的术语"杂环基"或"杂环"表示单价饱和环状基团，其由每个环3-8个原子的一个或多个环，优选一个至两个环构成，在每个环的3-8个原子中掺入了一个或多个环杂原子(选自N、O或S(＝O)0-2)，剩余的环原子为碳，并且应理解的是，杂芳基的连接点在碳原子上。除非另有说明，所述杂环基部分可任选独立地取代有一个或多个，优选一个或两个取代基，所述取代基选自羟基、氧代、氰基、低级烷基、低级烷氧基、低级卤代烷氧基、烷基硫基、卤素、卤代烷基、羟基烷基、硝基、烷氧基羰基、氨基、烷基氨基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基。杂环基的实例包括但不限于氮杂环丁烷基、吡咯烷基、六氢氮杂基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、噁唑烷基、噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、哌嗪基、哌啶基、四氢吡喃基、硫吗啉基、奎宁环基和咪唑啉基。
术语"治疗(treat)"和"处置(treatment)"是指治疗性处置，目的是减慢(减轻)不期望的生理变化或障碍，例如癌症的扩散。对于本发明的目的，有益且期望的临床结果包括但不限于缓解症状、减小疾病的程度、稳定(例如，使其不恶化)疾病的状态、推迟或减慢疾病进展、改善或缓和疾病状态和消退(无论是部分消退或全部消退)，无论所述结果是可检测的还是不可检测的。与不接受治疗的预期存活期相比，"治疗"也可指延长存活期。
短语“治疗有效量”表示(i)本发明化合物治疗本申请描述的具体疾病、病症或障碍的量；(ii)本发明化合物削弱、改善或消除本申请描述的具体疾病、病症或障碍的一种或多种症状的量；或(iii)本发明化合物预防或延迟本申请描述的具体疾病、病症或障碍的一种或多种症状的发作的量。对于癌症，治疗有效量的药物可减小癌细胞数目；减小肿瘤尺寸；抑制(即在一定程度上减缓且优选为停止)癌细胞浸润到周围器官中；抑制(即在一定程度上减缓且优选为停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；和/或在一定程度上缓解与癌症相关的一种或多种症状。若药物可防止已有癌细胞生长和/或杀死已有癌细胞，则其可为细胞生长抑制性和/或细胞毒性的。对于癌症治疗，效力可例如通过评价疾病进展时间(TTP)和/或确定应答率(RR)来测量。
术语“癌症”和“癌的”是指或描述哺乳动物中通常以细胞生长失调为特征的生理学状态。“肿瘤”包括一种或多种癌细胞。癌症的实例包括但不限于癌瘤、淋巴瘤、母细胞瘤、肉瘤及白血病或淋巴恶性肿瘤。上述癌症的更具体实例包括鳞状细胞癌(例如上皮鳞状细胞癌)；肺癌，包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌(“NSCLC”)、肺腺癌和肺鳞状细胞癌；腹膜癌；肝细胞癌；胃癌或胃部癌症，包括胃肠癌；胰腺癌；成胶质细胞瘤；子宫颈癌；卵巢癌；肝癌；膀胱癌；肝部癌症；乳癌；结肠癌；直肠癌；结肠直肠癌；子宫内膜癌或子宫癌；唾液腺癌；肾癌或肾部癌症；前列腺癌；外阴癌；甲状腺癌；肝部癌瘤；肛门癌；阴茎癌；及头颈癌。
“化学治疗剂”为用于治疗癌症的化合物。化学治疗剂的实例包括厄洛替尼(erlotinib)(Genentech/OSI Pharm.)、硼替佐米(bortezomib)(Millennium Pharm.)、氟维司群(fulvestrant)(AstraZeneca),sunitib(Pfizer/Sugen),来曲唑(letrozole)(Novartis),甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate)(Novartis),finasunate(Novartis),奥沙利铂(oxaliplatin)(Sanofi),5-FU(5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)),亚叶酸(leucovorin),雷帕霉素(rapamycin)(Sirolimus,Wyeth),拉帕替尼(lapatinib)(GSK572016,Glaxo Smith Kline),Lonafamib(SCH66336),索拉非尼(sorafenib)(Bayer Labs),吉非替尼(gefitinib)(AstraZeneca),AG1478,烷化剂诸如塞替派和环磷酰胺；烷基磺酸酯诸如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶如benzodopa、卡波醌、meturedopa和uredopa；乙撑亚胺(ethylenimine)和甲基氨基吖啶(methylamelamine)，包括六甲蜜胺、三亚胺嗪(triethylenemelamine)、三亚乙基磷酰胺(triethylenephosphoramide)、三亚乙基硫化磷酰胺(triethylenethiophosphoramide)和trimethylomelamine；番荔枝内酯(acetogenin)(尤其是布拉它辛(bullatacin)和布拉它辛酮(bullatacinone))；喜树碱(包括合成性类似物托泊替康(topotecan))；苔藓抑素(bryostatin)；callystatin；CC-1065(包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成性类似物)；cryptophycins(特别是cryptophycin1和cryptophycin8)；多拉司他汀(dolastatin)；duocarmycin(包括合成性类似物KW-2189和CB1-TM1)；艾榴塞洛素(eleutherobin)；pancratistatin；sarcodictyin；spongistatin；氮芥如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺(chlorophosphamide)、雌莫司汀、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺(mechlorethamine)、盐酸氧氮芥(mechlorethamine oxidehydrochloride)、美法仑、新氮芥(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)；硝基脲如卡莫司汀、氯脲菌素(chlorozotocin)、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫斯汀和雷莫司汀；抗生素如烯二炔(enediyne)抗生素(例如刺孢霉素(calicheamicin)，尤其是刺孢霉素γ1I、刺孢霉素ωI1(Angew Chem. Intl. Ed.Engl.1994 33:183-186)；蒽环类抗生素(dynemicin)，包括dynemicin A；二膦酸盐(bisphosphonate)如氯膦酸盐(clodronate)；埃斯培拉霉素(esperamicin)；以及新抑癌蛋白生色团(neocarzinostatin chromophore)和相关色蛋白烯二炔抗生素生色团(enediyne antibiotic chromophore)、aclacinomysin、放线菌素(actinomycin)、authramycin、偶氮丝氨酸(azaserine)、博来霉素、放线菌素C(cactinomycin)、carabicin、去甲柔红霉素(carminomycin)、嗜癌素(carzinophilin)、色霉素(chromomycin)、放线菌素D(dactinomycin)、柔红霉素(daunorubicin)、地拖比星(detorubicin)、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸(6-diazo-5-oxo-L-norleucine)、(多柔比星)、吗啉代-多柔比星、氰基吗啉代-多柔比星、2-吡咯啉子基-多柔比星和去氧多柔比星、表柔比星(epirubicin)、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素如丝裂霉素C、麦考酚酸(mycophenolic acid)、诺拉霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycins)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(porfiromycin)、嘌罗霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑霉素(streptonigrin)、链佐星(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星；抗代谢物如甲氨喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物如二甲叶酸、甲氨喋呤、喋罗呤(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacytidine)、6-氮鸟苷(6-azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、二脱氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、伊诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素如卡普睾酮(calusterone)、丙酸甲雄烷酮(dromostanolone propionate)、环硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯(testolactone)；抗肾上腺素(anti-adrenal)如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂(folicacid replenisher)如亚叶酸(frolinic acid)；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；bestrabucil；比生群(bisantrene)；伊达曲杀(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；elfornithine；依利醋铵(elliptinium acetate)；埃坡霉素(epothilone)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓(gallium nitrate)；羟基脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；氯尼达明(lonidainine)；美登醇(maytansinoid)如美登素(maytansine)和安丝菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；mopidanmol；根瘤菌剂(nitraerine)；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；2-乙基肼；丙卡巴肼(procarbazine)；多糖复合物(JHS Natural Products,Eugene, OR)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西佐喃(sizofiran)；锗螺胺(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2"-三氯三乙胺；单端孢菌毒素(trichothecene)(尤其是T-2毒素、verracurinA、杆孢菌素A和anguidine)；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(arabinoside)(“Ara-C”)；环磷酰胺；塞替派；紫衫烷，例如TAXOL (紫杉醇；Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N.J.)、(不含克列莫佛)、紫杉醇的白蛋白工程化纳米微粒制剂(albumin-engineered nanoparticleformulations of paclitaxel) (American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Ill.)和(多西他赛, doxetaxel； Sanofi-Aventis)；苯丁酸氮芥；(吉西他滨)；6-硫代鸟嘌呤；巯嘌呤；甲氨喋呤；铂类似物如顺铂和卡铂；长春碱；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨诺消灵(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；伊达曲杀(edatrexate)；柔红霉素；氨基喋呤；卡培他滨伊班膦酸盐(ibandronate)；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(difluoromethylornithine, DMFO)；类视黄醇(retinoid)如视黄酸(retinoic acid)；以及上述任何物质的药用盐、酸和衍生物。
以下物质也包括在"化学治疗剂"的定义中：(i)用于调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素药物，如抗雌激素药物(anti-estrogen)和选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulator, SERM)，包括例如他莫昔芬(包括枸橼酸他莫昔芬)、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬(trioxifene)、雷洛西芬(keoxifene)、LY117018、奥那司酮(onapristone)和(枸橼酸托米芬(toremifine citrate))；(ii)抑制芳香酶(调节肾上腺中雌激素产生)的芳香酶抑制剂，例如4(5)-咪唑、氨鲁米特、(醋酸甲地孕酮(megestrol acetate))、(依西美坦(exemestane)；Pfizer)、formestanie、法倔唑(fadrozole)、(伏氯唑(vorozole))、(来曲唑；Novartis)和(阿那曲唑(anastrozole)；AstraZeneca)；(iii)抗雄激素药物(anti-androgen)，如氟他胺、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)、醋酸亮丙瑞林(leuprolide)和戈舍瑞林(goserelin)以及曲沙他滨(troxacitabine)(1,3-二氧杂环戊烷核苷胞嘧啶类似物)；(iv)蛋白激酶抑制剂；(v)脂激酶抑制剂；(vi)反义寡核苷酸，特别是抑制异常细胞增殖中所涉及的信号转导途径中的基因表达的那些反义寡核苷酸，例如PKC-α、Ralf和H-Ras；(vii)核酶如VEGF表达抑制剂(例如，)和HER2表达抑制剂；viii)疫苗如基因治疗疫苗，例如 rIL-2；拓扑异构酶1抑制剂如 rmRH；(ix)抗血管生成药物如贝伐单抗(Genentech)；以及(x)上述任何物质的可药用盐、酸和衍生物。
常用的缩写包括：乙酰基(Ac)、水溶液(aq.)、大气压(Atm)、叔丁氧基羰基(BOC)、二碳酸二叔丁酯或叔丁氧甲酸酐(BOC2O)、苄基(Bn)、苯并三唑-1-基氧基-三-(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐(BOP)、丁基(Bu)、苯甲酰基(Bz)、化学文摘登记号(CASRN)、苄基氧基羰基(CBZ或Z)、羰基二咪唑(CDI)、二亚苄基丙酮(DBA)、1,5-二氮杂二环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)、N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)、1,2-二氯乙烷(DCE)、二氯甲烷(DCM)、偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)、偶氮二羧酸二异丙酯(DIAD)、二异丁基氢化铝(DIBAL或DIBAL-H)、二异丙基乙基胺(DIPEA)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、4-N,N-二甲基氨基吡啶(DMAP)、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、1,1'-二-(二苯基膦基)乙烷(dppe)、1,1'-二-(二苯基膦基)二茂铁(dppf)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)、乙基(Et)、乙酸乙酯(EtOAc)、乙醇(EtOH)、2-乙氧基-2H-喹啉-1-羧酸乙酯(EEDQ)、乙醚(Et2O)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)、乙酸(HOAc)、1-N-羟基苯并三唑(HOBt)、高压液相色谱法(HPLC)、异丙醇(IPA)、甲醇(MeOH)、熔点(mp)、MeSO2-(甲磺酰基或Ms)、甲基(Me)、乙腈(MeCN)、间氯过氧苯甲酸(MCPBA)、质谱(ms)、甲基叔-丁基醚(MTBE)、N-甲基吗啉(NMM)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、石油醚(pet ether，即烃类)、苯基(Ph)、丙基(Pr)、异-丙基(i-Pr)、磅/平方英寸(psi)、溴-三-吡咯烷子基鏻六氟磷酸盐(PyBrOP)、吡啶(pyr)、室温(rt或RT)、饱和的(saturated)、叔-丁基二甲基甲硅烷基或t-BuMe2Si(TBDMS)、三乙胺(TEA或Et3N)、三氟甲磺酸酯基或CF3SO2-(Tf)、三氟乙酸(TFA)、O-苯并三唑-1-基-N,N,N',N'-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TBTU)、薄层色谱法(TLC)、四氢呋喃(THF)、四甲基乙二胺(TMEDA)、三甲基甲硅烷基或Me3Si(TMS)、对甲苯磺酸一水合物(TsOH或pTsOH)、4-Me-C6H4SO2-或甲苯磺酰基(Ts)、N-氨基甲酸酯-N-羧酸酐(UNCA)。当包括前缀正(n)、异(i-)、仲(sec-)、叔(叔-或-t)和新-的常规命名用于烷基部分时，它们具有常规的含义。(J.Rigaudy and D.P.Klesney,Nomenclature in OrganicChemistry,IUPAC1979Pergamon Press,Oxford.)。
化合物和制备
本发明范围内的代表性化合物的实例提供在下表中。提供下面这些实施例和制备以使本领域技术人员能够更清楚地理解并实施本发明。它们不应被认为是限制本发明的范围，仅是示例性和代表性的。
如果在所绘结构和就该结构所给名称之间存在偏差，以所绘结构为准。此外，如果结构或结构的一部分的立体化学未用例如粗体或虚线表示，则所述结构或所述结构的部分应被理解为涵盖其所有立体异构体。本申请使用下面的编号系统。
本发明的化合物可通过在下面所示和描述的示例性合成反应方案中描绘的多种方法来制备。制备这些化合物中使用的起始物质和试剂通常是从商业供应商(例如Aldrich Chemical Co.)购买的，或者是通过本领域技术人员已知的方法遵照参考文献中描述的操作制备的，所述参考文献为Fieser and Fieser’sReagents for Organic Synthesis；Wiley&Sons:New York,Volumes1-21；R.C.LaR℃k,Comprehensive Organic Transformations,2nd edition Wiley-VCH,NewYork1999；Comprehensive Organic Synthesis,B.Trost and I.Fleming(Eds.)vol.1-9Pergamon,Oxford,1991；Comprehensive Heter℃yclic Chemistry,A.R.Katritzky and C.W.Rees(Eds)Pergamon,Oxford1984,vol.1-9；ComprehensiveHeter℃yclic Chemistry II,A.R.Katritzky and C.W.Rees(Eds)Pergamon,Oxford1996,vol.1-11；和Organic Reactions,Wiley&Sons:New York,1991,Volumes1-40。下面的合成反应方案仅是示例性说明本发明化合物可籍其合成的一些方法，并且可对这些合成方案进行各种改变，本领域技术人员在参考本发明所含公开内容后会得到启示。
可视需要，用常规技术分离并纯化所述合成反应方案的起始物质和中间体，所述常规技术包括但不限于过滤、蒸馏、结晶、色谱法等。所述物质可用常规手段来表征，所述常规手段包括物理常数和光谱数据。
除非有相反说明，本申请所述的反应优选是在惰性气氛中，在大气压和在约-78℃至约150℃的反应温度范围(更优选从约0℃至约125℃，并且最优选和便利的是在约室温(或环境温度)或在约20℃)进行的。
下面方案中的一些化合物被描绘为具有广义取代基；然而，本领域技术人员容易理解的是，R基团的性质可发生变化，从而得到本发明预期保护的各种化合物。然而，所述反应条件是示例性的并且可选择的条件是公知的。
下面实施例中的反应顺序不意在限制权利要求中所述的本发明范围。
本发明化合物可通过两步方法来合成，所述两步方法包括(a)适当取代的吡唑A-1和适当取代的2,4-二氯嘧啶A-2缩合，这导致置换了更具反应活性的4-氯取代基，得到嘧啶A-3，所述嘧啶A-3随后与适当的胺A-4缩合得到本发明的二氨基嘧啶A-5。
步骤1是通过在有机溶剂中和在碱存在下，在足以引发所述反应的温度，通过使A-1与A-2接触进行的。常见的碱包括叔胺例如DIPEA、TEA、DABCO，和常见的溶剂包括EtOH或DMSO。50至100℃的温度，并且通常50至70℃的温度足以维持可接受的反应速度。在C-4处引入胺使所述环对随后的置换失活，从而容易地实现单取代。A-4的引入因此是在类似条件下进行的，不同的是使用较高沸点的溶剂例如n-BuOH或异丙醇，并且所述反应是用热源或微波加热源在较高温度运行的。A-4中，氨基周围的立体位阻可进一步抑制所述反应，所述反应可能需要高达140℃的温度，并且无溶剂运行所述反应以实现可接受的反应速度。本领域技术人员会理解的是，有必要且有利的是在A-4中结合保护基，从而遮蔽潜在的竞争性亲核位点，并且在这样的情况下，会有后续的步骤来除去所述保护基。
5-取代的氨基-吡唑B-3是通过在EtOH中在回流温度，使肼与3-环丙基-3-氧代丙腈衍生物B-2接触来制备的。所述氰基酮化合物可通过使乙腈去质子并使所得共轭碱与酰基等同物缩合来制备，所述酰基等同物可为酰氯B-1b、酯B-1c或甲氧基甲基胺B-1d。所述腈的去质子化可便利地用多种强碱来完成，所述强碱包括例如n-BuLi/THF/-65℃、LiHMDS/THF/-65℃、NaH/二噁烷/RT、戊醇钾/THF/RT。酯和甲氧基甲基酰胺是用任何充分确立的方案制备的。
多种必要的二环杂芳基氨基甲基化合物是商购的或是通过已知途径制备的。下面的实例提供了得到用于制备本发明范围内的化合物的具体片段的途径。
4-氨基甲基吲哚、5-氨基甲基吲哚和6-氨基甲基吲哚是已知化合物。有时，方便的是保护吲哚氮，并且在这些情况下，首先引入甲苯磺酰基。将1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-6-甲腈(CASRN31274-87-1)用氢气和RaNi/7N氨甲醇还原，得到相应的氨基甲基衍生物。将1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-4-甲醛转化成肟并用Zn和NH4Cl/EtOH还原得到(1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-6-基)甲胺。
取代的吲哚可通过多种路径来制备，并且吲哚合成已有广泛综述(参见，例如G.R.Humphrey and J.T.Kuethe Chem.Rev.20062875-2911)。具有其它取代基的氨基甲基吲哚是通过多种方法(方案C)制备的，包括乙烯基格氏试剂与取代的硝基苯的加成(G.Bartoli et al.,Tetrahedron Lett.198930(16):1989；M.Schlosser et al.,Eur.J.Org Chem.,20062956)；取代的邻-硝基甲苯与DMF-二甲缩醛缩合，随后还原并环合(M.M.Faul et al.,Tetrahedron200359:7215)；取代的邻-乙炔基胺的环合(G.Kalbalka et al.,Tetrahedron20018017-8028)。氰基取代基通常是通过钯催化的置换反应引入的，并且随后通过催化氢化被还原成氨基甲基衍生物。
取代的苯并咪唑通常是从邻-二胺制备的，而所述邻-二胺是从邻硝基苯胺制备的。甲酸催化的环合得到苯并咪唑(方案D)。用氰化物置换溴化物并还原所述腈是如前面所述进行的。
抑制PAK1的化合物的其它实例可在表II中找到。在表II中示例的化合物可容易地由本领域技术人员用本申请披露的方法和适当的起始物质来制备。
生物活性
式I化合物的PAK活性的确定是用实施例65中的PAK1抑制测定完成的。报道了示例化合物在PAK1测定中的效力(实施例65)。实施例I-1至I-122的PAK结合活性的范围为小于1nM(纳摩尔)至约10μM(微摩尔)。基于细胞的功能测定(实施例66)用于确定PAK抑制剂对下游信号传导的作用。这些测定的代表值可在实施例65的表III中找到。
剂量&给药
本发明提供含有本发明化合物和至少一种治疗惰性载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物或药物，以及提供用本发明化合物制备所述组合物和药物的方法。在一个实例中，具有所需纯度的式I化合物可通过与生理学可接受的载体混合来配制，所述载体即为在环境温度和在适当的pH，在采用用在剂型中的剂量和浓度时对接受者无毒的载体。所述制剂的pH主要依赖于具体用途和化合物的浓度，但通常为约3至约8内的任意范围。在一个实例中，在pH5的醋酸盐缓冲液中配制式I化合物。在另一个实施方案中，所述式I化合物是无菌的。所述化合物可被例如以固体或无定形组合物形式、以冻干制剂或以水溶液形式贮存。
本发明的药物组合物可以按与良好的医疗实践配制一致的方式进行配制、给药(dose)和给予(administer)。术语“治疗有效量”表示当被给予受试者时(i)治疗或预防本申请描述的具体疾病、病症或障碍的本发明化合物的量，(ii)削弱、改善或消除本申请描述的具体疾病、病症或障碍的一种或多种症状的本发明化合物的量，或(iii)预防或延迟本申请描述的具体疾病、病症或障碍的一种或多种症状的发作的本发明化合物的量。治疗有效量可根据所治疗的具体障碍、所述障碍的严重程度、所治疗的具体患者、个体患者的临床状况、所述障碍的起因、所述药物的递送位点、给药方法、给药方案和医学执业者已知的其它因素而变化。
术语“治疗(treat)”和“处置(treatment)”病症包括(1)抑制所述病症，即阻止所述病症或其临床症状的发展，或(2)减轻所述病症，即，使所述病症或其临床症状临时或永久消退。
用于施用的药物组合物(或制剂)可按多种方式包装，取决于用于给予所述药物的方法。通常，用于分配(distribution)的制品包括具有以合适形式的药物制剂放置其中的容器。合适的容器对于本领域技术人员而言是公知的，且包括如瓶(塑料的和玻璃的)、小袋、安瓿、塑料袋、金属筒等材料。所述容器还可包括防干扰装置(tamper-proff assemblage)以防止对包装内容物的轻率接触。此外，所述容器还可具有置于其表面的标签，其描述容器的内含物。所述标签还可包含适当的警告。
可制备持续释放制剂。持续释放制剂的合适实例包括含有本发明化合物的固态疏水性聚合物的半透性基质，所述基质以成形制品的形式(例如膜或微囊)存在。持续释放基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如聚(甲基丙烯酸2-羟基乙酯)或聚(乙烯醇))、聚丙交酯(polyactide)、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯基酯、可降解的乳酸-羟乙酸共聚物如LUPRON DEPOTTM(由乳酸-羟乙酸共聚物和醋酸亮丙瑞林构成的可注射微球)和聚D-(-)-3-羟基丁酸。
治疗人类患者的剂量的范围为约0.1mg至约1000mg式I化合物。常见剂量为约1mg至约300mg所述化合物。剂量可被每日一次(QID)、每日两次(BID)或更频繁给予，取决于药代动力学和药效学性质，包括具体化合物的吸收、分布、代谢和排泄。此外，毒性因素可影响剂量和给药方案。当经口给药时，丸剂、胶囊或片剂可每日摄入或较不频繁地摄入，持续特定时间。该方案可重复进行数个治疗周期。
本发明化合物可通过任意适当的途径来给药，包括口服途径、局部途径(包括含服和舌下途径)、直肠途径、阴道途径、透皮途径、胃肠外途径、皮下途径、腹膜内途径、肺内途径、皮内途径、鞘内途径和硬膜外和鼻内途径，并且若需要局部处理，则以病灶内给药(intralesional administration)途径。胃肠外灌注包括肌内给药、静脉内给药、动脉内给药、腹膜内给药或皮下给药。
本发明化合物可按任意便利的给药形式来给药，例如片剂、散剂、胶囊、溶液剂、分散剂、混悬剂、糖浆剂、喷雾剂、栓剂、凝胶剂、乳剂、贴剂等。所述组合物可含有药物制剂中的常规组分，例如稀释剂、载体、pH调节剂、增甜剂、增容剂和其它活性剂。
常见的制剂是通过将本发明化合物与载体或赋形剂混合制备的。适当的载体和赋形剂是本领域技术人员公知的并且详细描述在例如Ansel,Howard C.,et al.,Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2004；Gennaro,Alfonso R.,et al.Remington:The Science and Practice of Pharmacy.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2000；和Rowe,Raymond C.Handbook of PharmaceuticalExcipients.Chicago,Pharmaceutical Press,2005中。
所述制剂也可包含一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、增甜剂、芳香剂、矫味剂和提供药物(即本发明化合物或其药物组合物)优质外观或辅助药物产品(即药品)制备的其它已知添加剂。
对于口服给药，含有各种赋形剂例如枸橼酸的片剂可与各种崩解剂例如淀粉、海藻酸和一些复合硅酸盐以及与粘合剂例如蔗糖、明胶和阿拉伯胶一起使用。此外，润滑剂例如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠和滑石通常用于压片目的。相似类型的固体组合物也可用在软和硬填充的明胶胶囊中。因此，优选的物质包括乳糖(lactose或milk sugar)和高分子量聚乙二醇。当需要口服给药的水性混悬液或酏剂时，可将其中的活性化合物与各种增甜剂或矫味剂、着色剂或染料以及视需要的各种乳化剂或助悬剂以及稀释剂(例如水、乙醇、丙二醇、甘油或其组合)组合。
适当的口服剂型的实例为这样的片剂，其含有约25mg,50mg,100mg,250mg或500mg本发明化合物和约90-30mg无水乳糖、约5-40mg交联羧甲基纤维素钠,约5-30mg聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)K30和约1-10mg硬脂酸镁。可先将粉末状成分混合在一起，然后与PVP的溶液混合。可干燥所得组合物，制粒、与硬脂酸镁混合并用常规设备压成片剂形式。气雾剂制剂的一个实例可如下制备：将本发明化合物例如5-400mg溶解在适当的缓冲溶液中例如磷酸盐缓冲液，并视需要添加渗透剂(tonicifier)例如盐(如氯化钠)。可过滤所述溶液(例如用0.2微米滤器)以除去杂质和污染物。
在一个实施方案中，所述药物组合物也可包含至少一种额外的抗增殖药物。
因此，一个实施方案包括药物组合物，其包含式I化合物或其立体异构体或药用盐。另一个实施方案包括药物组合物，所述组合物包含式I化合物或其立体异构体或药用盐和药用载体或赋形剂。
本发明进一步提供了兽医用组合物(veterinary composition)，其包含至少一种如上所定义的活性成分和针对其的兽医用载体(veterinary carrier)。兽医用载体是可用于给予组合物目的的材料，并且可以是惰性或者在兽医领域可接受的并且与活性成分相容的固体、液体或者气体材料。这些兽医学组合物可通过肠胃外、口服或者通过任何其它所需的途径给予。
联合治疗
式I化合物可单独使用或与用于治疗本申请所述疾病或病症(例如过度增殖性疾病(例如，癌症))的其它治疗剂组合使用。在一些实施方案中，式I化合物可与另一种化合物在药物组合物制剂或作为联合治疗的给药方案中联合使用，其中所述另一种化合物具有抗过度增殖或化学治疗性质或可用于治疗过度增殖性疾病(例如，癌症)。所述药物组合物制剂或给药方案的另一种化合物优选对式I化合物具有互补活性，从而使得其不相互产生不利作用。所述联合疗法可提供“协同作用”并证明为“协同的”，即，当活性成分一同使用时取得的效果高于分别使用所述化合物所得的效果之和。。
所述联合治疗可作为同时给药方案或顺序给药方案来进行。当顺序给药时，所述联合使用可在两次或更多次给药中给予。联合给药包括共同给药(coadministration)(使用分开制剂或单一药物制剂并且以任意顺序连续给药)，其中优选地，存在两者(或所有)活性药物同时发挥其生物学活性的一段时间。
上述任何同时服用的药物的合适剂量为现行使用的剂量，且可由于新鉴定的药物与其它化学治疗药物或治疗的联合作用(协同作用)而降低。
因此，本发明的联合疗法包括给药至少一种式I化合物或立体异构体、几何异构体、互变异构体、代谢物或药用盐，和使用至少一种其它癌症治疗方法。为了实现所需的联合治疗效果，要对一种或多种式I化合物的量和其它一种或多种药学活性化疗剂的量和相对给药时间进行选择。
制品
本发明另一个实施方案提供制品或“试剂盒”，其包含用于治疗上述疾病和障碍的物质。在一个实施方案中，所述试剂盒包含装有式I化合物或其立体异构体、互变异构体或药用盐的容器。所述试剂盒进一步包含插在所述容器上的或附属于所述容器的标签或说明书。术语"说明书"用于指通常包括在治疗产品商业包装中的说明，其记载有与使用所述治疗产品有关的适应症、用途、剂量、给药、禁忌症和/或警告的信息。适当的容器包括，例如，瓶、小瓶、注射器、泡罩包装等。所述容器可由多种材料制成，如玻璃或塑料。所述容器装有有效地治疗病症的式I化合物或其制剂，且可具有无菌入口(sterialaccess port)(例如，所述容器可为带有可被皮下注射针刺穿的塞子的静脉内溶液袋或者小瓶)。所述组合物中的至少一种活性剂为式I化合物。可选择地或另外，所述制品还可包含第二个容器，其装有可药用的缓冲液，如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐缓冲的盐水、林格液和右旋糖溶液。其还可包含其它从商业性或使用者角度需要的物质，包括其它缓冲液、稀释剂、过滤器、针头和注射器。
在另一个实施方案中，所述试剂盒适于递送式I化合物的固体口服形式，例如片剂或胶囊。所述试剂盒可包括多种单位剂量。所述试剂盒的一个实例为“泡罩包装”。泡罩包装是包装工业公知的并且广泛用于包装药用单位剂量形式。
根据一个实施方案，所述试剂盒可包含(a)具有在其中包含式I化合物的第一容器；和任选地(b)具有在其中包含第二药物制剂的第二容器，其中所述第二药物制剂包含具有抗过度增殖性活性的第二化合物。可选择地或另外，所述试剂盒还可包含第三个容器，其装有可药用的缓冲液，如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐缓冲的盐水、林格液和右旋糖溶液。其还可包含其它从商业性或使用者角度需要的物质，包括其它缓冲液、稀释剂、过滤器、针头和注射器。
实施例
下面的实施例说明了本发明范围内的化合物的制备和生物评价。提供下面的这些实施例和制备以使本领域技术人员更清楚地理解本发明和实施本发明。它们不应被认为是限制本发明的范围，仅是所述范围的示例和代表。
参考实施例1
外消旋反式-3-(2-苯基环丙基)-1H-吡唑-5-胺(41)
步骤1:在室温和氮气中，向搅拌的叔丁醇锂(124.6g,1.56mol,1.10当量)于DCM(2000mL)中的混合物中加入2-(二乙氧基磷酰基)乙酸乙酯(317g,1.41mol,1.00当量)。然后向搅拌的反应混合物中滴加苯甲醛(150g,1.41mol,1.0当量)，并将所得反应混合物在氮气中和在25℃搅拌过夜。将反应混合物用DCM(2L)稀释。将有机层用水(3x2L)和盐水(1x2L)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空蒸发。将粗制残余物通过SiO2色谱(用EtOAc/石油醚(3.3至1％EtOAc)洗脱)来纯化得到180g(72％)(2E)-3-苯基丙-2-烯酸乙酯(31)，其为浅黄色油状物。
步骤2:氮气中，向搅拌的NaH(40.7g)于DMSO(2.5L)中的混合物中逐份加入碘化三甲基氧化锍(396g,1.80mol,1.76当量)。加入31(180g,1.02mol,1.00当量)于1:1DMSO/THF(2L)中的溶液，并将反应混合物在25℃搅拌过夜。将反应混合物用1N HCl(1L)淬灭并用EtOAc(2x2L)萃取。将合并的有机层用水(2x2L)和盐水(1x2L)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用EtOAc/石油醚(5-12.5％EtOAc)洗脱)来纯化得到153g(79％)反式-2-苯基环丙烷-1-羧酸乙酯(33)，其为浅黄色油状物。
步骤3:向搅拌的33(153g,804.25mmol,1.00当量)于EtOH(1L)中的混合物中加入1M LiOH水溶液(1L)，将所得溶液回流搅拌1小时。减压除去挥发性溶剂并将残余物用EtOAc(1.5L)稀释。将有机相用水(3x1L)和盐水(1x1L)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩得到117.5g(90％)反式-2-苯基环丙烷-1-羧酸(35)，其为白色固体。
步骤4:氮气中，向搅拌的35(117.5g,724.48mmol,1.00当量)于DMF(1.2L)中的溶液中加入甲氧基(甲基)胺盐酸盐(82.3g,844.10mmol,1.17当量)、HATU(329g,775.58mmol,1.07当量)和DIPEA(117.5mL)。将反应混合物在氮气和在25℃搅拌过夜，然后用水(700mL)稀释。将有机相用EtOAc(3x1L)萃取，并将合并的有机层用水(3x1L)和盐水(1x1L)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用EtOAc/石油醚(10至50％EtOAc)洗脱)来纯化得到62.5g(42％)反式-N-甲氧基-N-甲基-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺(37)，其为浅黄色油状物。
步骤5:在-60℃和氮气中，向搅拌的MeCN(208.3mL)和THF(200mL)中的溶液中滴加1M LHMDS/THF(1040mL)。将反应混合物在-60℃搅拌3小时，然后滴加37(62.5g,304.5mmol,1.00当量)。将所得溶液在-60℃搅拌10分钟，然后用饱和NH4Cl水溶液(400mL)淬灭。将反应混合物用EtOAc(3x1L)萃取，干燥(Na2SO4)合并的有机层，过滤并真空浓缩。将粗制残余物通过SiO2色谱法(用EtOAc/石油醚(10至25％EtOAc)洗脱)来纯化得到28.5g(51％)反式-3-氧代-3-(-2-苯基环丙基)丙腈(39)，其为浅黄色油状物。
步骤6:氮气中，向搅拌的39(28.5g,153.87mmol,1.00当量)于EtOH(300mL)中的溶液中加入85％水合肼(5.7g,100mmol,0.65当量)，将反应混合物在80℃搅拌6小时。将反应混合物冷却至室温并真空浓缩。将粗制残余物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH梯度(1至5％MeOH)洗脱)来纯化得到25.4g(83％)反式-3-(2-苯基环丙基)-1H-吡唑-5-胺(41)，其为浅黄色油状物:1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.30-7.10(m,5H),5.15(s,1H),4.90–4.20(br s,2H),2.10–2.07(m,1H),2.00–1.95(m,1H),1.35–1.31(m,2H),1H未观察到；MS(ESI+)m/z＝200[M+1]+。
类似地，反式-3-[-2-(2-氟苯基)环丙基]-1H-吡唑-5-胺(43)是用2-氟苯甲醛代替苯甲醛作为起始物质制备的:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.24–7.06(m,4H),5.17(1H,s),2.33–2.20(m,1H),2.05–2.01(m,1H),1.42–1.24(m,2H)；MS(ESI+)m/z＝218[M+1]+。
参考实施例2
5-(2,2-二氟环丙基)-1H-吡唑-3-胺(45)
在-78℃，向MeCN(1.1g,16.8mmol)于THF(60mL)中的溶液中滴加n-BuLi/THF(11.2mL,40.3mmol)并将反应混合物在-78℃和氮气中搅拌30分钟。在-78℃，加入2,2-二氟环丙烷羧酸叔丁酯(3.0g,16.8mmol)，并历时3小时使反应混合物温热至室温。将反应混合物用水淬灭并用1N HCl调整至pH7。将混合物用EtOAc萃取，并将有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩得到粗制3-(2,2-二氟环丙基)-3-氧代丙腈。将粗制3-(2,2-二氟环丙基)-3-氧代丙腈和肼(2.0g,50.4mmol,85％纯度)于EtOH(30mL)中的混合物回流搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩至干。将粗制残余物通过色谱法(用EtOAc/石油醚梯度(12.5至100％EtOAc)洗脱)来纯化得到2.1g(78.5％)45，其为黄色固体:1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.40(br s,1H),5.26(s,1H),4.80(br s,2H),2.78–2.66(m,1H),2.04–1.75(m,1H),1.73–1.21(m,1H)；MS(ESI+)m/z＝160.1[M+1]+。
外消旋反式-5-(2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-胺(47)是类似制备的，不同的是用反式-2-氟环丙烷-1-羧酸乙酯代替2,2-二氟环丙烷羧酸丁酯作为起始物质:1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.09(s,1H),4.60-4.85(m,1H),4.50(br,2H),3.40(brs,1H),2.28–2.14(m,1H),1.40–1.32(m,1H),1.08–0.92(m,1H)；MS(ESI+)m/z＝142[M+1]+。
外消旋顺式-5-(2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-胺(49)是用与就5-(2,2-二氟环丙基)-1H-吡唑-3-胺所描述的操作类似的操作制备的，使用顺式-2-氟环丙烷-1-羧酸乙酯代替2,2-二氟环丙烷羧酸丁酯作为起始物质:1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ5.16(s,1H),4.67-4.95(m,1H),4.50(br,2H),3.40(br s,1H),1.95–1.84(m,1H),1.20–1.12(m,2H)；MS(ESI+)m/z＝142[M+1]+。
参考实施例3
5-(环丙基甲氧基)-1H-吡唑-3-胺(51)
将Ph3P(75.5g,0.29mol)和DIAD(58.5g,0.29mol)于DCM(1.8L)中的混合物在室温搅拌30分钟。将混合物冷却至0℃，并历时10分钟缓慢加入3-氨基-5-羟基吡唑(24.0g,0.24mol)。添加结束后，将混合物在0℃搅拌10分钟，并在相同温度在10分钟内滴加环丙基甲醇(19.0g,0.265mol)。将混合物在室温搅拌48小时。过滤出未溶解的固体并将滤液浓缩至约1L。向所述溶液中加入HCl水溶液(25mL浓HCl于70mL水中)，直到pH在1至2之间。将所述溶液再搅拌10分钟，然后加入H2O(350mL)。剧烈搅拌30分钟后，分离上层水相并将20g NaOH固体缓慢加至所述水相中直到pH为约9至11。将反应混合物用EtOAc(6x300mL)萃取，并干燥(Na2SO4)合并的有机层，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2柱色谱法(用EtOAc/石油醚梯度(50至100％EtOAc)洗脱)来纯化得到4.8g油状产物。用DCM(200mL)和石油醚(250-300mL)研磨得到3.2g(9％)51，其为白色至浅黄色固体:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.31(m,1H),4.89(m,2H),4.67(s,1H),3.75(d,J＝7.2Hz,2H),1.24–1.11(m,1H),0.52–0.50(m,2H),0.30–0.15(m,2H)；MS(ESI+)m/z＝154.0[M+1]+。
参考实施例4
2-氯-N-(3-环丙基-1H-吡唑-5-基)嘧啶-4-胺(53)
向安装有顶部搅拌器和回流冷凝器的干燥5-L三颈圆底烧瓶中装入2,4-二氯嘧啶(250g,1.678mol)于无水DMSO(2300mL)中的溶液。在室温，依次添加3-环丙基-1H-吡唑-5-胺(227.4g,1.8458mol)和DIPEA(438mL,2.517mol)。将所得溶液在60℃搅拌16小时，冷却至室温并倒入冰水中。真空过滤收集析出的黄色固体，并用水、1.5N HCl(3x1L)充分洗涤，并且最后用水(4x500mL)冲洗。将析出物通过空气抽吸过夜来干燥，得到320g(81％)53，其为黄色固体:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.19(s,1H),10.29(s,1H),8.15(s,1H),7.0(br s,1H),6.0(br s,1H),1.85-1.92(m,1H),0.91-0.95(m,2H),0.7(m,2H)；MS(ESI+)m/z＝236[M+1]+。
2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟嘧啶-4-胺(55)是类似制备的，不同的是用2,4-二氯-5-氟-嘧啶代替2,4-二氯嘧啶:1H NMR(400MHz,DMSO-d6,125℃)δ12.28(s,1H),10.38(s,1H),8.24(s,1H),6.27(s,1H),1.94-1.89(m,1H),0.95-0.93(m,2H),0.71-0.69(m,2H)；MS(ESI+)m/z＝254.1[M+1]+。
2,5-二氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(57)是类似制备的，不同的是用2,4,5-三氯嘧啶代替2,4-二氯嘧啶:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.32(br s,1H),9.68(br s,1H),5.17(1H,s),8.32(s,1H),6.2(s,1H),1.89-1.94(m,1H),0.92-0.97(m,2H),0.5-0.9(m,2H)；MS(ESI+)m/z＝272[M+1]+。
2-氯-N-(5-异丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(59)是类似制备的，不同的是用5-异丙基-1H-吡唑-3-胺代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺:1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.17(s,1H),10.28(s,1H),8.19-8.13(m,1H),7.29(br s,1H),6.12(br s,1H),2.99-2.87(m,1H),1.22(d,J＝6.9Hz,6H).LCMS m/z＝238.1[M+1]+。
2-氯-N-(5-(环丙基甲基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(61)是类似制备的，不同的是用5-(环丙基甲基)-1H-吡唑-3-胺(CASRN852443-64-2)代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺:1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.16(s,1H),10.29(s,1H),8.19-8.12(m,1H),7.22(br s,1H),6.13(br s,1H),1.05–0.91(m,1H),0.54–0.42(m,2H),0.19(q,J＝4.9Hz,2H)。(CH2藏在DMSO信号下)。LCMS m/z＝250.1[M+1]+。
2-氯-N-(5-(3,3-二氟环丁基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(63)是类似制备的，不同的是用5-(3,3-二氟环丁基)-1H-吡唑-3-胺(45)代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.43(s,1H),10.40(s,1H),8.19(s,1H),7.20(brs,1H),6.20(br s,1H),3.43–3.35(m,1H),3.20–2.85(m,2H),2.75–2.72(m,2H)；MS(ESI+)m/z＝286[M+1]+。
2-氯-N-(5-环丁基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(65)是类似制备的，不同的是用3-环丁基-1H-吡唑-5-胺(CASRN326827-21-8)代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺:1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.19(br s,1H)10.30(s,1H),8.17(s,1H),6.91–8.12(br s,1H),6.09–6.39(br s,1H),3.49–3.76(m.1H),2.22–2.24(m,2H),2.09–2.18(m,2H),1.80–1.93(2H,m)；MS(ESI+)m/z＝250[M+1]+。
2-氯-N-(5-环戊基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(67)是类似制备的，不同的是用3-环戊基-1H-吡唑-5-胺(CASRN264209-16-7)代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺:1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.19(s,1H),10.30(s,1H),8.15-8.16(s,1H),7.00(br s,1H),6.10(br s,1H),3.01(m,1H),1.95-2.01(m,2H),1.59-1.71(m,6H)；MS(ESI+)m/z＝264[M+1]+。
N-(5-苄基氧基-1H-吡唑-3-基)-2-氯-嘧啶-4-胺(69)是类似制备的，不同的是用5-苄基氧基-1H-吡唑-3-胺代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺:MS(ESI+)m/z＝302.1[M+1]+。
反式-2-氯-N-[5-(2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基]嘧啶-4-胺(71)是类似制备的，不同的是用反式-5-(2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-胺代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺。
外消旋顺式-2-氯-N-[5-(2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基]嘧啶-4-胺(73)是类似制备的，不同的是用顺式-5-(2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-胺代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺:1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.35(s,1H),10.32(s,1H),8.16(d,J＝7.2Hz,1H),7.23(br,1H),6.10(br,1H),4.80-5.06(m,1H),2.13–2.07(m,1H),1.37–1.22(m,2H)；MS(ESI+)m/z＝254[M+1]+。
2-氯-N-(5-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(75)是类似制备的，不同的是用5-(四氢-呋喃-3-基)-1H-吡唑-3-胺(CASRN1186609-16-4)代替5-环丙基-1H-吡唑-3-胺:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(s,1H),8.17(d,J＝6.0Hz,1H),7.00(br s,1H),6.19(br s,1H),4.10–3.94(m,2H),3.95–3.88(m,2H),3.57–3.51(m,1H),2.46–238(m,1H),2.35–2.01(m,1H),1H未检测到；MS(ESI+)m/z＝266[M+1]+。
外消旋反式-2-氯-N-[3-(2-苯基环丙基)-1H-吡唑-5-基]嘧啶-4-胺(77)是类似制备的，不同的是用反式-3-(2-苯基-环丙基)-1H-吡唑-5-胺代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺作为起始物质。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.29(s,1H),10.33(s,1H),8.17(s,1H),7.17-7.48(m,7H),2.18-2.25(m,2H),1.44-1.48(m,2H)；MS(ESI+)m/z＝312[M+1]+。
外消旋反式-2-氯-N-[3-[2-(2-氟苯基)环丙基]-1H-吡唑-5-基]嘧啶-4-胺(79)是类似制备的，不同的是用反式-3-[2-(2-氟-苯基)环丙基]-1H-吡唑-5-胺代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺作为起始物质:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.31(s,1H),10.34(s,1H),8.37(s,1H),7.36–7.14(m,5H),6.10(br s,1H),2.37–2.24(d,2H),1.56–1.49(m2H)；MS(ESI+)m/z＝330[M+1]+。
2-氯-N-(5-(2,2-二氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(81)是类似制备的，不同的是用5-(2,2-二氟-环丙基)-1H-吡唑-3-胺(CASRN1186609-07-3)代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺:1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.53(s,1H),10.39(s,1H),8.18(d,J＝5.2Hz,1H),7.19(br s,1H),6.21(br s,1H),3.05–2.94(m,1H),2.12–1.88(m,2H).
2-氯-N-(5-(四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(83)是类似制备的，不同的是用5-(四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-胺(CASRN1028843-21-1)代替3-环丙基-1H-吡唑-5-胺:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.44(s,1H),10.38(s,1H),8.18(s,1H),8.00–6.00(br s,2H),4.88(t,J＝6.8Hz,1H),3.92–3.86(m,1H),3.79–3.72(m,1H),2.26–2.16(m,1H),1.99–1.83(m,3H)；MS(ESI+)m/z＝266[M+1]+。
参考实施例5
2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基嘧啶-4-胺(189)
将5-环丙基-1H-吡唑-3-胺(1.98g,16.07mmol)、2,4-二氯-6-甲基-嘧啶(2.62g,16.07mmol)、DIPEA(5.7mL,32.15mmol)和无水EtOH(50mL)的混合物在70℃和氮气中搅拌3天。将反应混合物冷却并倒入水(约700mL)中。将反应混合物在室温搅拌过夜直到固体析出。过滤所述固体，用额外的水洗涤并在高真空泵干，得到2.37g(59％)189，其为固体:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.12(s,1H),10.08(s,1H),7.04(br s,1H),5.93(br s,1H),2.27(s,3H),1.93-1.84(m,1H),0.96–0.88(m,2H),0.70–0.64(m,2H)。
2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-甲基嘧啶-4-胺(184)是类似制备的，不同的是用2,4-二氯-5-甲基-嘧啶代替2,4-二氯-6-甲基-嘧啶:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.17(s,1H),9.23(s,1H),7.97(s,1H),6.28(s,1H),2.12(s,3H),1.97–1.85(m,1H),0.93(d,J＝7.4Hz,2H),0.69(d,J＝4.6Hz,2H)；MS(ESI)m/z＝250.2[M+1]+。
2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(186)是类似制备的，不同的是用2,4-二氯-6-(三氟甲基)嘧啶代替2,4-二氯-6-甲基-嘧啶:1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.35(br d,J＝30.2Hz,1H),10.97(s,1H),8.14(s,0.50H,旋转异构体),7.13(s,0.50H,旋转异构体),6.38(s,0.50H,旋转异构体),5.73(s,0.50H,旋转异构体),1.91(s,1H),0.98–0.90(m,2H),0.70(q,J＝5.5Hz,2H)；MS(ESI)m/z＝304.2/306.2[M+1]+。
参考实施例6
5-(3,3-二氟环丁基)-1H-吡唑-3-胺(85)
步骤1:向3-氧代环丁烷羧酸(20.0g,175.3mmol)于DCM(500mL)中的溶液中加入饱和NaHCO3水溶液(293mL)、四丁基溴化铵(75.3g,227.9mmol)和4-甲氧基苄基溴化物(33.0g,210.4mmol)，将所述混合物在室温搅拌过夜。反应结束后，将所述混合物用水稀释并用DCM(250mL)萃取两次。将有机层用水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(8:1)洗脱)来纯化得到15.2g(37％)3-氧代环丁烷羧酸4-甲氧基苄基酯，其为灰白色固体。
步骤2:向3-氧代环丁烷羧酸4-甲氧基苄基酯(15.2g,64.9mmol)于DCM(300mL)中的溶液中加入DAST(20.9g,130mmol)，将所述混合物在室温搅拌过夜。反应结束后，加入5％NaHCO3水溶液，将所述混合物用DCM(300mL)萃取两次。将合并的有机层用水(200mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将所述粗制产物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(10:1)洗脱)来纯化，得到14.0g(84％)3,3-二氟环丁烷羧酸4-甲氧基苄基酯。
步骤3:向NaH(2.85g,71.1mmol)于二噁烷(200mL)中的溶液中加入MeCN(2.92g.71.1mmol)。将所述混合物搅拌20分钟，然后滴加3,3-二氟环丁烷羧酸4-甲氧基苄基酯(14.0g,54.7mmol)于二噁烷(100mL)中的溶液。将所述混合物回流加热4小时后，将反应混合物倒入水(400mL)中并用EtOAc(200mL)萃取。将水层的pH用3N HCl调整至7并用EtOAc萃取。将有机层用盐水(200mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩得到13.5g粗制3-(3,3-二氟环丁基)-3-氧代丙腈，将其不经纯化即用在下一步骤中。
步骤4:向3-(3,3-二氟环丁基)-3-氧代丙腈(12.5g,78.6mmol)于EtOH(250mL)中的溶液中加入水合肼(5.9g,117.9mmol)，将所得混合物在75℃搅拌过夜。在真空浓缩反应混合物后，将残余物重新溶解在EtOAc(500mL)中并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。将水层用EtOAc萃取并将合并的萃取物用盐水(100mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH(10:1)洗脱)来纯化，得到3.46g(39％)85，其为浅黄色固体:1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.20(br s,1H),5.23(s,1H),4.65(br s,2H),3.16–3.13(m,1H),2.88–2.84(m,2H),2.64–2.57(m,2H)；MS(ESI+)m/z＝174[M+1]+。
参考实施例7
3-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)丙腈(87)
步骤1:在0℃，历时30分钟，向(4-甲氧基苯基)甲醇(76.3g,552.4mmol)于无水甲苯(1L)中的溶液中逐份加入NaH(27.6g,630.5mmol)，然后加入3-溴丙酸乙酯(100g,552.4mmol)。将混合物在室温搅拌3小时，然后用20％NH4Cl水溶液(500mL)淬灭。分离有机层，并将水层用EtOAc(2x500mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，然后真空浓缩得到3-((4-甲氧基苄基)氧基)丙酸乙酯(112g,85％)，其为无色油状物。
步骤2:在-78℃，向MeCN(31.8mL,611.0mmol)于无水THF(500mL)中的溶液中加入n-BuLi(2.5M,244.4mL,611.0mmol)。将混合物在相同温度搅拌1小时，并向其中缓慢加入-78℃的溶液。在搅拌的情况下向所述混合物中加入n-BuLi(2.5M,244.4mL,611.0mmol)。搅拌混合物，加入3-((4-甲氧基苄基)氧基)丙酸乙酯(112g,470.0mmol)/THF(200mL)。将所得混合物在-40℃搅拌2小时，然后用1N HCl水溶液(300mL)淬灭。分离有机层，并将水层用EtOAc(3x300mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，然后真空浓缩得到5-((4-甲氧基苄基)氧基)-3-氧代-戊腈(78g,79％)，其为黄色油状物。
步骤3:将5-((4-甲氧基苄基)氧基)-3-氧代-戊腈(78g,334.4mmol)和水合肼(50g,1mol)于EtOH(500mL)中的混合物回流加热16小时。冷却至室温后，真空除去溶剂并使残余物在DCM(400mL)和水(400mL)之间分配。分离有机层并用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用5％MeOH/DCM洗脱)来纯化得到66g(80％)5-(2-((4-甲氧基苄基)氧基)乙基)-1H-吡唑-3-胺，其为黄色固体。
步骤4:将5-(2-((4-甲氧基-苄基)氧基)-乙基)-1H-吡唑-3-胺(66g,334.4mmol)于TFA(300mL)中的溶液回流加热16小时。冷却至室温后，真空除去溶剂，并使残余物在DCM(400mL)和2N NaHCO3水溶液(200mL)之间分配。分离有机层并将水层用DCM(3x100mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，然后真空浓缩得到13g(38％)2-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)乙醇，其为黄色固体。
步骤5:向2-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)乙醇(13g,102.2mmol)于DCM(200mL)中的溶液中加入PBr3(83g,306.7mmol)。将反应混合物回流加热3小时，然后冷却至-10℃并用饱和Na2CO3水溶液(200mL)小心淬灭。将所得混合物用DCM(3x200mL)萃取，加入Na2CO3(200mL)。将所得混合物用DCM(3x200mL)萃取，并且将合并的有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，然后真空浓缩得到5-(2-溴乙基)-1H-吡唑-3-胺(9.3g,48％)，其为黄色固体。
步骤6:向5-(2-溴乙基)-1H-吡唑-3-胺(9.3g,48.9mmoL)于乙腈(100mL)中的溶液中加入NaCN(2.88g,58.6mmol)于水(3mL)中的溶液。将反应混合物在-70℃搅拌16小时，然后真空浓缩以除去溶剂。使残余物在DCM和盐水之间分配。干燥(Na2SO4)有机层，然后真空浓缩。将粗制物用MeOH-EtOAc结晶得到4g(60％)3-(3-氨基-1H-吡唑-5-基)丙腈(87)，其为黄色固体。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.66(2H,t,J＝7.2Hz),2.92(2H,t,J＝7.2Hz),5.54(1H,s)。MS(ESI+)m/z:137[M+1]+。
参考实施例8
5-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-3-胺(91)
步骤1:氮气中，向3L4-颈圆底烧瓶中放入3-硝基-1H-吡唑(100g,884.37mmol,1.00当量)于THF(1.5L)中的溶液，然后在0℃逐份加入NaH(53g,1.32mol,1.50当量,60％悬浮液)。将所得溶液在0℃搅拌1小时。然后在0℃，在搅拌的情况下，滴加[2-(氯甲氧基)乙基]三甲基甲硅烷(117.4g,704.17mmol,1.20当量)于THF(500mL)中的溶液。将所得溶液在25℃搅拌1小时，通过添加EtOH(200mL)来淬灭，真空浓缩并用2L EtOAc稀释。将所得混合物用2x1L盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。将残余物用200mL石油醚研磨。过滤收集固体并用石油醚(2x500mL)洗涤得到125g(52％)3-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑，其为黄色固体。
步骤2:在用惰性气氛氮气吹洗并维持在该气氛中的2L圆底烧瓶中装入3-硝基-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(125.0g,513.69mmol,1.00当量)、MeOH(1L)和Pd/C(13.0g)。将悬浮液置于氢气气氛中。将所得溶液在30℃搅拌4小时。然后过滤所述固体并真空浓缩滤液得到1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-3-胺(110g80％收率)，其为浅黄色固体。
步骤3:氮气中，在2L圆底烧瓶中装入1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-3-胺(110g,515.58mmol,1.00当量)、甲苯(1.2L)、己烷-2,5-二酮(60.0g,525.66mmol,1.00当量)和4-甲基苯-1-磺酸(1.0g,5.81mmol,0.10当量)。将所得溶液回流加热2小时，冷却并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用EtOAc/石油醚(1:50)洗脱)来纯化得到3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(132g,83％)，其为浅黄色固体。
步骤4:氮气中，在5L4-颈圆底烧瓶中装入3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(132.0g,452.89mmol,1.00当量)/THF(2L)，然后在-78℃在搅拌下历时15分钟滴加丁基锂(208mL,2.4M,1.10当量)。将所得溶液在-50℃搅拌40分钟。在-78℃，在搅拌的情况下，历时30分钟向其中滴加氧杂环丁烷-3-酮(40.0g,555.07mmol,1.20当量)/THF(500mL)。将所得溶液在-78℃搅拌30分钟，然后通过添加2L饱和NH4Cl水溶液来淬灭。将所述混合物真空浓缩并用3x1L EtOAc萃取。将合并的有机层用2x1L水和1x500mL盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用EtOAc/石油醚(1:20-1:5)洗脱)来纯化得到3-[3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-5-基]氧杂环丁烷-3-醇(142.0g,82％收率)，其为浅黄色油状物。
步骤5:氮气中，在2L3-颈圆底烧瓶中放入THF(800mL)，然后在0℃，历时十分钟，分数份加入NaH(10.4g,260mmol,1.50当量,60％悬浮液)。然后在0℃，在搅拌下，历时30分钟向该悬浮液中加入3-[3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-5-基]氧杂环丁烷-3-醇(63.0g,173.3mmol,1.0当量)于THF(300mL)中的溶液。将所得溶液在0℃搅拌30分钟。在0℃，在搅拌的情况下，历时20分钟向所述混合物中滴加CS2(19.7g,259.21mmol,1.50当量)于THF(100mL)中的溶液。将所得溶液在0℃搅拌1小时。在0℃，在搅拌的情况下，历时10分钟向所述混合物中滴加碘甲烷(37.0g,260.7mmol,1.5当量)于THF(100mL)中的溶液。将所得溶液在0℃搅拌1小时，然后通过添加300mL饱和NH4Cl水溶液来淬灭，真空浓缩，用1L水稀释并用3x1L EtOAc萃取。将合并的有机层用2x1L水和2x500mL盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并真空浓缩得到([3-[3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]-甲基]-1H-吡唑-5-基]氧杂环丁烷-3-基]氧基)(甲基硫烷基)甲硫酮(80.0g,97％收率)，其为黄色油状物。
步骤6:氮气中，在2L圆底烧瓶中装入([3-[3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑-5-基]氧杂环丁烷-3-基]氧基)(甲基硫烷基)甲硫酮(97.0g,213.8mmol,1.0当量)于甲苯(1.2L)中的溶液、三丁基锡氢化物(74.7g,256.7mmol,1.2当量)和AIBN(7.0g,42.6mmol,0.2当量)。将所得溶液在120℃搅拌3小时，冷却至30℃并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用EtOAc/PE(1:100-1:5)洗脱)来纯化得到3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-5-(氧杂环丁烷-3-基)-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(30.0g,38％收率)，其为黄色油状物。
步骤7:氮气中，在250-mL圆底烧瓶中装入3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-5-(氧杂环丁烷-3-基)-1-[[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基]-1H-吡唑(12.0g,34.5mmol,1.0当量)，然后加入TBAF(120g,5.0当量)于THF(120mL)中的溶液。将所得溶液在88℃搅拌8小时，冷却至30℃，真空浓缩并用200mL EtOAc稀释。将所得混合物用2x300mL水和2x100mL盐水稀释，干燥(Na2SO4)并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用EtOAc/PE(1:100-1:3)洗脱)来纯化得到3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-5-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑(4.0g,48％收率)，其为白色固体。
步骤8:在250-mL3-颈圆底烧瓶中装入3-(2,5-二甲基-1H-吡咯-1-基)-5-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑(4.0g,18.4mmol,1.0当量)、EtOH(100mL)、水(40mL)和NH2OH.HCl(10.3g,148.2mmol,8.0当量)，然后逐份添加NaHCO3(9.9g,117.8mmol,6.4当量)。将所得溶液在100℃搅拌24小时，然后冷却至30℃并真空浓缩。将残余物用150mL THF稀释。过滤收集固体并溶解在200mL EtOH中，过滤并真空浓缩滤液。将残余物通过中性氧化铝上的色谱法(用DCM/MeOH梯度(1至10％MeOH)洗脱)来纯化得到0.5g(19％)5-(氧杂环丁烷-3-基)-1H-吡唑-3-胺(91)，其为白色固体。
MS(ESI)m/z:140[M+H]+；1H NMR(200MHz,DMSO-d6)δ5.39(s,1H),4.82-4.77(m,2H),4.59-4.56(m,2H),4.13-4.02(m,1H)。
参考实施例9
5-(二氟甲基)-1H-吡唑-3-胺(93)
步骤1:惰性气氛中，向火焰干燥的烧瓶中装入正-丁基锂溶液(145mL,363mmol,2.5M于己烷中)/无水THF(800mL)，并冷却至-78℃。缓慢加入MeCN(13.0g,318mmol)并将所得混合物在-70℃搅拌1小时。历时10分钟缓慢加入二氟乙酸乙酯(25.0g,227mmol)，同时维持温度低于-69℃。将反应混合物在-45℃搅拌2小时，然后通过添加2N HCl溶液(4.8mL)来淬灭，同时维持温度低于-20℃。将所得澄清溶液温热至室温，然后真空浓缩得到粗制4,4-二氟-3-氧代丁腈，将其直接用在下一步骤中。
步骤2:向4,4-二氟-3-氧代丁腈于EtOH(200mL)中的溶液中加入水合肼(30mL)。将反应混合物回流加热12小时，然后冷却至室温。真空蒸发后，将残余物萃取到DCM中。将有机层用水、盐水洗涤，干燥(MgSO4)。过滤后，真空蒸发溶剂。将粗制产物通过SiO2色谱法来纯化得到5-(二氟甲基)-1H-吡唑-3-胺(8.0g,两步的收率为27％)，其为油状物:MS(ESI)m/z:134.0[M+1]+。
参考实施例10
(4-乙基-1-四氢吡喃-2-基-苯并咪唑-5-基)甲胺(95)
步骤1:向1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(1.62g,10mmol)于THF(20mL)中的溶液中加入3,4-二氢-2H-吡喃(2mL)和CSA(100mg)。将混合物在氩气中回流加热24小时。除去溶剂，然后通过SiO2色谱法得到1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸，其为浅红色固体(1.5g,60％收率)。
步骤2:向1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(170mg,0.69mmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(190mg,1mmol)、HOBt(160mg,1mmol)、TEA(0.3mL)和N-甲氧基-甲胺盐酸盐(100mg,1mmol)。将所述混合物在室温搅拌过夜。将所述混合物倒入水中并用EtOAc萃取。将有机物依次用水和盐水洗涤，然后干燥(Na2SO4)。除去溶剂，然后通过SiO2色谱法得到N-甲氧基-N-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(140mg,85％收率)，其为浅黄色油状物。
步骤3:在0℃和氩气中，将EtMgBr溶液(0.72mL,1mol/L)加至N-甲氧基-N-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲酰胺(70mg,0.24mmol)/THF中。将所述混合物在0℃搅拌2小时。小心加入NH4Cl溶液以淬灭所述反应。将所述混合物倒入水中并用EtOAc萃取。将有机物依次用水和盐水洗涤，然后干燥(Na2SO4)。除去溶剂，然后通过SiO2色谱法得到1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙-1-酮，其为无色油状物(45mg,72％收率)。
步骤4:将羟胺盐酸盐(54mg,0.78mmol)和乙酸钠(100mg,1mmol)加至1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙-1-酮(100mg,0.39mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中。将所述混合物回流过夜。将混合物倒入水中并用EtOAc萃取。将有机物依次用水和盐水洗涤，然后干燥(Na2SO4)。除去溶剂，然后经SiO2色谱法得到1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙-1-酮肟(95mg,90％收率)，其为浅黄色油状物。
步骤5:向1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙-1-酮肟(30mg,0.11mmol)于THF(3mL)中的溶液中加入兰尼镍(50mg)。将混合物在室温搅拌过夜。除去溶剂，然后通过反相色谱法得到(4-乙基-1-四氢吡喃-2-基-苯并咪唑-5-基)甲胺(10mg,35％收率)，其为无色油状物。
MS(ESI+)m/z:260[M+1]+；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.98(m,1H),7.64(m,1H),7.40(m,1H),7.14-7.36(m,1H),5.40-5.45(m,1H),4.06(m,1H),3.85(m,1H),3.70(m,1H),2.02-2.10(m,3H),1.62-1.72(m,7H),0.77-0.84(m,3H).
参考实施例11
(4-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(97)
步骤1:将安装有顶部搅拌器的20L四颈圆底烧瓶在氮气流中干燥并冷却，然后装入2,4-二硝基苯胺(50g,0.27mol,1.0当量)和KOH颗粒(45.96g,0.82mol,3.0当量)于MeOH(2500mL)中的溶液。将反应混合物在50℃加热。在46-48℃，向该溶液中滴加次溴酸钠水溶液，保持3小时，所述次溴酸钠水溶液是通过将溴(436.70g,2.73mol,10当量)添加至冷的NaOH(275.04g,6.826mol,25.0eq)的水(4L)溶液中制备的。将反应混合物在48℃再保持20分钟，然后冷却至室温。过滤收集黄色析出物并真空干燥得到5-溴-4-甲氧基苯并呋咱氧化物(15g,粗制)。将粗制物直接用于下一步骤。
1H NMR(300MHz,CDCl3):δ4.46(s,3H),6.92-6.94(d,1H),7.27-7.29(d,1H).GCMS(ESI)m/z:244[M-1]+.
步骤2:将2L帕尔振摇瓶干燥并在氮气流中冷却，然后装入5-溴-4-甲氧基苯并呋咱氧化物(100g,0.44mol,1.0当量)/EtOAc(1L)，并添加10％Pd/C(10％w/w,10.0g)。然后将反应混合物在室温在氢气中搅拌过夜。用垫过滤所述反应混合物并真空浓缩得到4-溴-3-甲氧基-苯-1,2-二胺(61.0g,粗制)，其为深棕色半固体。将粗制物直接用于下一步骤。
步骤3:将配备磁力搅拌子的1L四颈圆底烧瓶干燥并在氮气流中冷却，然后加入4-溴-3-甲氧基-苯-1,2-二胺(61g,0.28mol,1.0当量)/甲酸(200mL)。将反应混合物在100℃加热2小时，冷却并用冰水(1L)淬灭。将反应混合物用10％NaOH溶液碱化并用乙酸乙酯(2x1000mL)萃取。合并分离的有机层，用盐水溶液(750mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制物通过SiO2色谱法(用EtOAc/己烷梯度(30-50％EtOAc)洗脱)来纯化得到6-溴-7-甲氧基-1H-苯并咪唑(36g,粗制)，其为棕色固体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ4.26(br,3H),7.16(s,1H),7.29-7.32(d,1H),8.19(s,1H),12.67(br,1H)。
步骤4:在500ml管中装入6-溴-7-甲氧基-1H-苯并咪唑(36g,0.16mol,1.0当量)、二氢吡喃(40.01g,0.48mol,3.0当量)和对甲苯磺酸吡啶鎓(7.96g,0.032mol,0.2当量)/EtOAc(400mL)，密封并将反应混合物在90℃加热过夜。将反应混合物真空浓缩并将粗制产物通过SiO2色谱法(用EtOAc/己烷梯度(30-40％EtOAc)洗脱)来纯化得到5-溴-4-甲氧基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑(30g,60％收率)，其为棕色固体。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ1.54-1.77(m,3H),1.92-1.96(m,2H),1.98-2.00(m,1H),3.66-3.75(m,1H),3.90-3.97(m,1H),4.29(s,3H),5.60-5.64(d,1H),7.24-7.27(d,1H),7.37-7.40(d,1H),8.37(s,1H)。
步骤5:将安装顶部搅拌器的1L三颈圆底烧瓶干燥并在氮气流中冷却，然后装入5-溴-4-甲氧基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑(30g,0.096mol,1.0当量)/1,4-二噁烷(300mL)和水(60mL)。将混合物用氮气脱气。在室温，向脱气的溶液中依次加入反式-β-苯乙烯硼酸(14.26g,0.096mol,1.0当量)、Cs2CO3(62.82g,0.19mol,2.0当量)、Pd(II)Cl2(PPh3)2(3.38g,0.004mol,0.05当量)，然后将反应混合物在搅拌下在100℃加热6小时。将反应混合物用冰冷却的水(1L)淬灭并用EtOAc(2x1L)萃取。合并有机层，用盐水溶液(500mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制物通过SiO2色谱法(用EtOAc/己烷梯度(40-50％EtOAc)洗脱)来纯化得到4-甲氧基-5-苯乙烯基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑(25g,77％)，其为棕色固体。
1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ1.57-1.67(m,2H),1.70-1.75(m,1H),1.97-2.00(m,2H),2.10-2.22(m,1H),3.69-3.77(m,1H),3.87-3.99(m,1H),4.31(s,3H),5.62-5.64(d,1H),7.12-7.43(m,6H),7.51-7.62(m,4H),8.33(s,1H)。MS(ESI)m/z:335[M+1]+。
步骤6:将安装有顶部搅拌器的1L三颈圆底烧瓶干燥并在氮气流中冷却，然后装入4-甲氧基-5-苯乙烯基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑(25g,0.074mol,1.0当量)/二噁烷(250mL)和水(80mL)。在0℃，向该溶液中加入高碘酸钠(36.77g,0.17mol,2.3当量)和四氧化锇(15mL,4％水溶液)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物用冰冷却的水(1L)淬灭并用EtOAc(2x750mL)萃取。合并有机层，用盐水(500mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制物通过SiO2色谱法(用EtOAc/己烷梯度(40-50％EtOAc)洗脱)来纯化得到4-甲氧基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑-5-甲醛(15g,77％)，其为浅黄色固体。
MS(ESI)m/z:261[M+1]+；1H NMR(300MHz,CDCl3):δ1.71-1.84(m,3H),2.04-2.32(m,3H),3.72-3.81(m,1H),4.13-4.18(m,1H),4.58(s,3H),5.47-5.51(d,1H),7.16-7.14(d,1H),7.79-7.82(d,1H),8.11(s,1H),10.52(s,1H)。
步骤7:将配备有磁力搅拌子的1L三颈圆底烧瓶干燥并在氮气流中冷却，然后装入4-甲氧基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑-5-甲醛(15g,0.057mol,1.0当量)、NaOAc(15.67g,0.12mol,2.0当量)、羟胺盐酸盐(8.01g,0.12mol,2.0当量)和MeOH(300mL)，将反应混合物在室温搅拌1小时。然后浓缩反应混合物并将残余物溶解在EtOAc(1000mL)中。将有机层用水(2x300mL)和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩得到4-甲氧基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑-5-甲醛肟(14.5g,93％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.58-1.64(m,2H),1.71-1.75(m,1H),2.01-2.02(m,2H),2.13-2.22(m,1H),3.70-3.77(m,1H),3.97-4.00(d,1H),4.31(s,3H),5.63-5.66(d,1H),7.31-7.33(d,1H),7.59-7.61(d,1H),8.37-8.38(d,1H),11.00(s,1H)；LC-MS:276(M+1)。
步骤8:将1L高压釜在氮气流中冷却并装入4-甲氧基-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑-5-甲醛肟(14.50g,0.052mol,1.0当量)和氨水(30mL)/MeOH(300mL)。向其中加入兰尼镍(15.0g,w/w)并将反应混合物在氢气中(压力为～60psi)在室温搅拌过夜。然后用垫过滤反应混合物并真空浓缩滤液。将粗制物通过中性氧化铝柱色谱法(使用MeOH/DCM梯度(5至10％MeOH))来纯化得到(4-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(97,8.0g,57％)，其为棕色粘性油状液体。
MS(ESI)m/z:262[M+1]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.58-1.64(m,2H),1.68-1.75(m,1H),1.95-1.98(m,2H),2.13-2.25(m,1H),3.68-3.80(m,3H),3.92-3.98(d,1H),4.31(s,3H),5.58-5.61(d,1H),7.10-7.24(m,2H),8.29(s,1H)；1H-NMR(400MHz,CDCl3):δ1.68-1.75(m,3H),2.07-2.10(m,3H),2.85(br,2H),3.73-3.74(m,1H),3.94(br,2H),4.10-4.13(d,1H),4.40(s,3H),5.42-5.44(d,1H),7.08-7.10(d,1H),7.17-7.19(d,1H),7.98(s,1H).
参考实施例12
(4-乙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(99)
步骤1:在室温，向5-硝基-1H-苯并[d]咪唑(100g,0.613mol)于THF(750mL)中的溶液中加入TEA(171.71mL,1.23mol,2当量)和一缩二碳酸二叔丁酯(133.65g,0.61mol,1.5当量)，将反应混合物搅拌16小时。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，然后干燥(MgSO4)，过滤并浓缩得到5-硝基-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁酯(150g,94％收率)，其为灰白色固体。将粗制物不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤2:在-15℃，向5-硝基-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁酯(150g,0.56mol)于无水THF(1500mL)中的溶液中滴加EtMgBr(3.0M于THF中,1.12mol,2当量)。将反应混合物在-15℃搅拌2小时。在-15℃，加入DDQ(129g,1.12mol,2当量)于THF(120mL)中的溶液，然后将反应混合物温热至室温并继续搅拌2小时。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，然后干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将粗制物通过SiO2色谱法(用10％EtOAc/己烷洗脱)来纯化得到4-乙基-5-硝基-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁酯(20g,12％收率)，其为黄色固体。
步骤3:向4-乙基-5-硝基-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁酯(20.0g,0.07mol)于无水MeOH(500mL)中的溶液中加入Pd/C(1.5g)。然后将所述悬浮液在氢气中(3kg压力)搅拌6小时。结束后，将反应混合物用硅藻土垫过滤并浓缩得到5-氨基-4-乙基-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁酯(13.6g,76％收率)。将粗制产物不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤4:向4-乙基-5-硝基-1H-苯并[d]咪唑-1-羧酸叔丁酯(13.6g,0.052mol)于无水DCM(140mL)中的溶液中加入TFA(20mL,0.26mol,5.0当量)，将反应混合物在40℃加热16小时。将反应混合物浓缩并将粗制固体重新溶解在丙酮和水的混合物(1:1,40mL)中。然后在0℃，加入浓HCl(14mL)和亚硝酸钠(3.95g,0.057mol,1.1eq.)并将反应混合物在相同温度搅拌30分钟。在0℃，将所得溶液滴加至氰化钠(10.21g,0.21mol,4当量)和CuCN(10.5g,0.084mol,1.6当量)于EtOAc和水的混合物(1:1,40ml)中的溶液中。然后将反应混合物温热至室温并再搅拌2小时。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，然后干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用25％EtOAc/己烷洗脱)来纯化得到4-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(6.8g,76％收率)，其为黄色固体。
步骤5:向4-乙基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(6.8g,0.04mol)于无水甲苯(70mL)中的溶液中加入四氢-2H-吡喃(10.53g,0.12mol,3当量)和对甲苯磺酸吡啶鎓(4g,0.02mol,0.5当量)并将反应混合物回流加热16小时。将反应混合物浓缩，用水淬灭并用EtOAc萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，然后干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用50％EtOAc/己烷洗脱)来纯化得到4-乙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(7g,69％收率)，其为黄色油状物。
步骤6:在0℃，向4-乙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈6(7.0g,0.027mol)于无水MeOH(70mL)中的溶液中加入COCl2(5.69g,0.043mol,1.6当量)和NaBH4(12.44g,0.33mol,12当量)。将反应混合物温热至室温并搅拌16小时，然后用垫过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用5％MeOH/CHCl3洗脱)来纯化得到(4-乙基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(5.2g,73％)，其为灰白色固体。
MS(ESI)m/z:259.2[M+H]+；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)；δ1.19-1.23(m,3H),1.60-1.63(m,2H),1.72-1.76(m,1H),1.96-1.99(m,2H),2.15-2.20(m,1H),3.01-3.07(m,2H),3.70-3.76(m,1H),3.96-3.99(m,3H),5.61-5.64(d,1H),7.29-7.31(d,1H),7.45-7.47(d,1H),8.32(s,1H)。
参考实施例13
1-(6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙胺(101)
步骤1:将5-溴-6-甲基-1H-苯并[d]咪唑(2.0g,9.6mmol)、p-TsOH(17mg,0.1mmol)和二氢吡喃(8.1g,96mmol)于THF(30mL)中的混合物回流加热过夜。真空浓缩溶剂并向残余物中加入EtOAc(50mL)和水(50mL)。用K2CO3将pH调整至约8。将水相用EtOAc(50mL×2)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(2:1)洗脱)来纯化得到5-溴-6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑，其为黄色固体(2.1g,71％)。MS(ESI):m/z＝295.2[M+1]+。
步骤2:将5-溴-6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(2.1g,7.1mmol)、Zn(CN)2(1.7g,14.2mmol)、Pd(dppf)2Cl2(579mg,0.71mmol)于NMP(10mL)中的混合物在80℃搅拌过夜。向反应混合物中加入EtOAc(50mL)和水(50mL)。将水相用EtOAc(50mL×2)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(2:1)洗脱)来纯化得到6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈，其为固体(1.1g,62％)。MS(ESI):m/z＝242.3[M+1]+。
步骤3:在0℃和氮气中，向6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(1.1g,4.6mmol)于无水THF(20mL)中的溶液中滴加CH3MgBr的THF溶液(8mL,24mmol)，加入速度是使内部反应温度低于10℃。添加后，将反应混合物在室温搅拌过夜。将混合物缓慢倒入冰-水(20mL)中并在室温搅拌0.5小时。通过使用枸橼酸将溶液的pH调整至5.0～6.0，并且将混合物用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4),并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(1:1)洗脱)来纯化得到1-(6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙酮，其为黄色固体(1.1g,90.1％)。MS(ESI):m/z＝259.2[M+1]+。
步骤4:在室温，向1-(6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙酮(1.1g,4.3mmol)和NaOAc(3.5g,43mmol)于MeOH(20mL)中的混合物中加入羟胺盐酸盐(896mg,12.9mmol)。将反应混合物在80℃搅拌0.5小时，然后真空浓缩。加入水(200mL)并将混合物用EtOAc(50mL×3)萃取，干燥(MgSO4),并真空浓缩得到1-(6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙酮肟，其为黄色固体(1.1g,90.2％)。MS(ESI):m/z＝194.3[M+1]+。
步骤5:将1-(6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙酮肟(1.1g,4.0mmol)、锌(2.6g,40.0mmol)和NH4Cl(2.2g,40.0mmol)于MeOH(20mL)和HOAc(4mL)中的混合物在80℃搅拌4小时。过滤反应混合物并真空浓缩滤液。向残余物中加入氨水溶液(50mL)并将混合物用DCM(50mL×3)萃取，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH/TEA(10:1:0.2)洗脱)来纯化得到1-(6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙胺(101)，其为黄色固体(840mg,80％)。MS(ESI):m/z＝260.2[M+1]+。
参考实施例14
1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙胺(103)
步骤1:将2-溴-6-硝基苯胺(2.0g,9mmol)和SnCl2(10.2g,54mmol)于EtOH(20mL)中的悬浮液回流加热2小时，然后冷却至室温并真空浓缩。将残余物用EtOAc(100mL)稀释并用NaHCO3饱和溶液(200mL)洗涤。将所得浆液用垫过滤并用EtOAc(50mL×3)洗涤。将滤液用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到3-溴苯-1,2-二胺，其为棕色油状物(1.5g,90％)。MS(ESI):m/z＝186.9[M+1]+。
步骤2:将3-溴苯-1,2-二胺(1.5g,8mmol)于甲酸(10mL)中的混合物回流加热2小时。真空浓缩反应混合物。向残余物中加入饱和NaHCO3水溶液并将混合物用EtOAc萃取。干燥(MgSO4)合并的萃取物，过滤并真空蒸发得到4-溴-1H-苯并[d]咪唑，其为灰色固体(1.5g,95％)。MS(ESI):m/z＝197[M+1]+。
步骤3:将4-溴-1H-苯并[d]咪唑(1.5g,7mmol)、TsOH.H2O(0.1g,0.7mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(2.9g,35mmol)于THF(10mL)中的混合物回流加热过夜。真空浓缩反应混合物。向残余物中加入水并将混合物用EtOAc萃取。干燥(MgSO4)合并的萃取物，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc梯度(10:1至3:1)洗脱)来纯化得到4-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑，其为灰色固体(1.6g,75％)。MS(ESI):m/z＝281[M+1]+。
步骤4.将4-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(1.6g,6mmol)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(2.4g,6mmol)、Pd(PPh3)4(0.7g,0.6mmol)、K3PO4(2.5g,12mmol)于NMP(10mL)中的混合物在80℃加热6小时。将混合物冷却至室温，加入水并将混合物用EtOAc(50mL×3)萃取。向合并的萃取物中加入HCl(1.0eq)并将所得混合物搅拌30分钟。通过添加NH4OH水溶液(35％)将混合物的pH调整至～8。将水相用EtOAc(50mL×3)萃取。干燥(MgSO4)合并的萃取物，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚:EtOAc(10:1)洗脱)来纯化得到1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙酮，其为灰色固体(0.8g,59％)。MS(ESI):m/z＝245.1[M+1]+。
步骤5.在室温，向1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙酮(800mg,3mmol)和NaOAc(2.5g,30mmol)于MeOH(15mL)中的混合物中加入羟胺盐酸盐(325mg,4.7mmol)。将反应混合物在80℃搅拌1小时，然后真空浓缩。加入水(100mL)并将混合物用EtOAc(50mL×3)萃取，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙酮肟，其为黄色固体(538mg,85.0％)。MS(ESI):m/z＝260.3[M+1]+。
步骤6:将1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙酮肟(538mg,1.02mmol)、Zn(651mg,10.2mmol)和NH4Cl(541mg,10.2mmol)于MeOH(20mL)和HOAc(5mL)中的混合物在80℃搅拌16小时。过滤反应混合物并真空浓缩滤液。向残余物中添加NH4OH水溶液(50mL)并将所得混合物用DCM(50mL×3)萃取。干燥(MgSO4)合并的萃取物，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH/TEA(10:1:0.2)洗脱)来纯化得到1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙胺(103)，其为黄色固体(458mg,收率,90.1％)。MS(ESI):m/z＝246.1[M+1]+。
参考实施例15
(2-甲基-1H-吲哚-4-基)甲胺(105)
步骤1:在室温，向1-(2-溴苯基)丙-2-酮(1.5g,7.04mmol)和NaOAc(693mg,8.45mmol)于MeOH(50mL)中的混合物中加入羟胺盐酸盐(539mg,7.8mmol)。在室温将反应混合物搅拌18小时后，将其真空浓缩。加入水(100mL)，并将混合物用EtOAc(50mL×3)萃取，干燥(MgSO4)并真空浓缩得到1-(2-溴苯基)丙-2-酮肟，其为黄色固体(1.51g,94％)。MS(ESI):m/z＝228.1[M+1]+。
步骤2:在室温，向1-(2-溴苯基)丙-2-酮肟(1.36g,5.96mmol)和TEA(722mg,7.15mmol)于无水THF(50mL)中的溶液中滴加甲磺酰氯(819mg,7.15mmol)于无水THF(5mL)中的溶液。在室温搅拌1小时后，加入1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯(2.26g,14.9mmol)并继续在室温搅拌1小时。使反应混合物通过SiO2垫，真空浓缩并通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(10:1)洗脱)来纯化得到2-(2-溴苯基)-3-甲基-2H-氮杂环丙烯(azirine)，其为黄色油状物(758mg,收率,60.5％)。MS(ESI):m/z＝242.1[M+33]+。
步骤3:将2-(2-溴苯基)-3-甲基-2H-氮杂环丙烯(758mg,3.61mmol)于二甲苯(20mL)中的溶液在160℃搅拌7天。将反应混合物真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(10:1)洗脱)来纯化得到4-溴-2-甲基-1H-吲哚，其为黄色油状物(572mg,75.5％)。MS(ESI):m/z＝210.1[M+1]+。
步骤4:氩气中，将4-溴-2-甲基-1H-吲哚(572mg,2.72mmol)、Zn(CN)2(351mg,3.0mmol)、Zn(35mg,0.54mmol)、dppf(606mg,1.09mmol)和Pd2(dba)3(498mg,0.54mmol)于NMP(10mL)中的混合物在120℃加热18小时。冷却至室温后，使反应混合物在EtOAc(300mL)和水(50mL)之间分配。将有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(3:1)洗脱)来纯化得到2-甲基-1H-吲哚-4-甲腈，其为黄色油状物(408mg,96％)。MS(ESI):m/z＝157.2[M+1]+。
步骤5:向2-甲基-1H-吲哚-4-甲腈(408mg,2.61mmol)于NH3/MeOH(7M,20mL)中的溶液中加入兰尼镍(100mg)。将混合物在1大气压氢气中在室温搅拌3小时。用过滤混合物并真空浓缩滤液得到(2-甲基-1H-吲哚-4-基)甲胺(105)，其为黄色固体(398mg,95.1％)。MS(ESI):m/z＝144.3[M-16]+。
参考实施例16
(5-氟-1H-吲哚-4-基)甲胺(107)
步骤1:在-78℃，向5-氟-1H-吲哚(2.5g,18.52mmol)和氯三异丙基硅烷(3.92g,20.4mmol)于无水THF(75mL)中的混合物中滴加n-BuLi的THF溶液(1.6mol/L,12.7mL,20.37mmol)，加入速度是维持内部温度低于-70℃。添加结束后，将混合物在-78℃搅拌1小时，然后倒入水(250mL)中，用DCM(100mL×3)萃取，并真空浓缩得到5-氟-1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吲哚，其为黄色油状物(5.27g,97.6％)。MS(ESI):m/z＝292.3[M+1]+。
步骤2:氮气中和在-78℃，向5-氟-1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吲哚(2.5g,8.58mmol)、2,2,6,6-四甲基哌啶(2.42g,17.15mmol)、2-甲基丙-2-醇化钾(1.92g,17.15mmol)于无水THF(75mL)中的溶液中滴加n-BuLi的THF溶液(1.6M,10.7mL,17.15mmol)，加入速度是维持内部温度低于-70℃。然后将混合物在-78℃搅拌2小时。将反应混合物倒入冰(100g)、水(200mL)和DCM(100mL)的浆液中。将水相的pH用HCl(2M)调节至4.0。形成析出物，将其过滤并用水(10mL)和乙氧基乙烷(10mL)洗涤得到5-氟-1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吲哚-4-羧酸，其为白色固体(580mg,20.2％)。MS(ESI):m/z＝336.2[M+1]+。
步骤3:将5-氟-1-(三丙基甲硅烷基)-1H-吲哚-4-羧酸(500mg,1.49mmol)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(851mg,2.24mmol)和TEA(452mg,4.48mmol)于DMF(5mL)中的混合物在室温搅拌1小时。向所述混合物中添加氨水(1mL)，然后在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(100mL)中并用EtOAc(50mL×3)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(2:1)作为洗脱溶剂洗脱)来纯化得到5-氟-1H-吲哚-4-甲酰胺，其为白色固体(260mg,52.2％)。MS(ESI):m/z＝179.2[M+1]+。
步骤4.将5-氟-1H-吲哚-4-甲酰胺(240mg,1.35mmol)和BH3的THF溶液(1.0M,16mL,16mmol)的混合物在室温搅拌18小时。将反应用HCl溶液(1.0M,20mL)淬灭，然后在室温搅拌1.5小时。通过添加饱和Na2CO3水溶液将反应混合物的pH调整至约10。将混合物用EtOAc(50mL×3)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH/TEA(10:1:0.1)洗脱)来纯化得到(5-氟-1H-吲哚-4-基)甲胺(107)，其为黄色固体(190mg,86.4％)。MS(ESI):m/z＝148.1[M-16]+。
参考实施例17
N-甲基-1-(3-甲基-1H-吲唑-4-基)甲胺(109)
步骤1:氮气中，将4-溴-1H-吲哚(10g,50.7mmol)、Pd(PPh3)4(8.78g,7.6mmol)、Zn(CN)2(9.22g101.4mmol)于NMP(150mL)中的混合物在110℃加热16小时。将反应混合物冷却，过滤，将滤液用水稀释，并用EtOAc(100mL×5)萃取。将合并的萃取物用盐水(300mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到1H-吲唑-4-甲腈(3.76g,52.5％)，其为白色固体，将其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤2:将1H-吲唑-4-甲腈(1.65g,11.1mmol)、KOH(1.86g,33.3mmol)和I2(5.6g,22.2mmol)于DMF(30mL)中的混合物在室温搅拌过夜。过滤反应混合物。将滤液用水(100mL)稀释并用EtOAc(200mL)萃取。将有机层真空浓缩得到3-碘-1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(2.01g,64.7％)。MS(ESI):m/z＝270[M+1]+。
步骤3:氮气中，将3-碘-1H-吲唑-4-甲腈(3.0g,11.1mmol)、二氢吡喃(1.84g,22.2mmol)和TsOH(212mg,1.1mmol)于THF(40mL)中的混合物在85o加热过夜。加入水(40mL)并将混合物用EtOAc(50mL×3)萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(5:1)洗脱)来纯化得到3-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(3.31g,84.0％)。MS(ESI):m/z＝354[M+1]+。
步骤4:氮气中，在密封小瓶中，将3-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈(50mg,0.142mmol)、K3PO4(61.34mg,0.284mmol)、Pd(dppf)Cl2(10.3mg,0.0142mmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼烷(2,4,6-trimethyl-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinane)(18mg,0.142mmol)于DMF(0.5mL)中的混合物在微波炉中在120℃加热100分钟。过滤反应混合物并将滤液用H2O稀释，用EtOAc萃取。干燥(MgSO4)合并的萃取物，过滤并真空浓缩得到3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(12mg,35.5％)。MS(ESI):m/z＝242[M+1]+。
步骤5:向3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈(130mg,0.54mmol)于NH3/MeOH(7N,10mL)中的溶液中加入兰尼镍(20mg)。将混合物在氢气中搅拌过夜。过滤反应混合物，浓缩滤液得到(3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(120mg,91.5％)。MS(ESI):m/z＝246[M+1]+。
步骤6:向(3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(120mg,0.5mmol)于DCM(8mL)中的混合物中加入(BOC)2O(109mg,0.5mmol)和TEA(3滴)。将混合物在室温搅拌5小时。真空浓缩反应混合物。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(3:1)洗脱)来纯化得到(3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲基氨基甲酸叔丁酯，其为白色固体(100mg,59.2％)。MS(ESI):m/z＝346[M+1]+。
步骤7:向(3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲基氨基甲酸叔丁酯(100mg,0.29mmol)于THF(2mL)中的混合物中加入NaH(21.6mg,0.9mmol)。搅拌30分钟后，向反应混合物中加入CH3I(127mg,0.9mmol)并将反应混合物在室温搅拌过夜。过滤混合物并真空蒸发。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(3:1)洗脱)来纯化得到甲基((3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯，其为白色固体(85mg,81.6％)。MS(ESI):m/z＝360[M+1]+。
步骤8:将甲基((3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(85mg,0.23mmol)于DCM(8mL)和TFA(1mL)中的混合物在室温搅拌过夜。真空浓缩反应混合物。将残余物用SiO2色谱法(用石油醚:EtOAc洗脱)纯化得到N-甲基-1-(3-甲基-1H-吲唑-4-基)甲胺(109)，其为白色固体(30mg,72.4％)。MS(ESI):m/z＝176[M+1]+。
参考实施例18
(6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲胺(111)
步骤1:将4-氯-2-硝基苯胺(2.0g,11.59mmol)和1-溴吡咯烷-2,5-二酮(2.3g,12.75mmol)于MeCN(30mL)中的混合物在70℃搅拌14小时。将反应混合物倒入水(100mL)中并在室温搅拌1小时。过滤析出物并用水洗涤。真空干燥固体得到3-溴苯-1,2-二胺，其为黄色固体(2.6g,86.7％)。
步骤2:将3-溴苯-1,2-二胺(4.0g,15.90mmol)和SnCl2(17.9g,79.50mmol)于EtOH(40mL)中的悬浮液回流加热4小时。冷却至室温后，加入1,1,1-三甲氧基乙烷(12.9g,79.50mmol)。将反应混合物在120℃搅拌4小时，冷却至室温并真空浓缩。将残余物用EtOAc(100mL)稀释，用饱和NaHCO3溶液(200mL)处理，用过滤并用EtOAc(50mL×3)洗涤。将滤液用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到4-溴-6-氯-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑，其为黄色固体(3.5g,89.7％)。MS(ESI):m/z＝244.9[M+1]+。
步骤3:将4-溴-6-氯-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(3.5g,14.26mmol)、p-TsOH.H2O(272mg,1.43mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(5.9g,71.30mmol)于THF(20mL)中的混合物在75℃搅拌4小时。真空浓缩反应混合物并加入水。将混合物用EtOAc萃取并干燥(MgSO4)合并的萃取物，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用DCM:MeOH梯度(0至9％MeOH)洗脱)来纯化得到4-溴-6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑，其为白色固体(3.2g,69.6％)。MS(ESI):m/z＝329.0[M+1]+。
步骤4:将4-溴-6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(3.2g,9.70mmol)、Zn(CN)2(2.3g,19.40mmol)和Pd(PPh3)4(1.1g,0.97mmol)于NMP(20mL)中的混合物在90℃搅拌3小时。过滤反应混合物并将滤液用EtOAc(50mL)稀释。将有机层用水(50mL×3)洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH梯度(0至6％MeOH)洗脱)来纯化得到6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈，其为白色固体(1.0g,37.2％)。MS(ESI):m/z＝276.2[M+1]+。
步骤5:将6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈(1.0g,3.16mmol)和兰尼镍(100mg)于NH3/MeOH(7N,10mL)中的混合物在氢气中搅拌2小时。将反应混合物用过滤并真空浓缩滤液得到粗制(6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲胺(111,600mg,59.0％)，其为黄色固体。MS(ESI):m/z＝280.3[M+1]+。
参考实施例19
(6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(113)
步骤1:氮气中，将4-溴-6-甲基-1H-吲唑(1.05g,5mmol)、DHP(2.1g,25mmol)和TsOH.H2O(96mg,0.5mmol)于THF(50ml)中的混合物回流加热过夜。真空浓缩反应混合物并向所述残余物中添加DCM(300mL)和水(50mL)。将有机层用MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用石油醚:EtOAc(100:1)作为洗脱剂)来纯化得到4-溴-6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑，其为浅黄色油状物(1.1g,90％)MS(ESI):m/z＝295.1[M+1]+。
步骤2:氮气中，将4-溴-6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(1.1g,3.74mmol)、Zn(CN)2(873mg,7.46mmol)和Pd(PPh3)4(646mg,0.56mmol)于NMP(25mL)中的混合物在100℃加热过夜。之后，将其冷却至室温，使反应混合物在EtOAc(300mL)和水(50mL)之间分配。将有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(用石油醚:EtOAc(10:1)作为洗脱溶剂)来纯化得到6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(400mg,50％)。MS(ESI):m/z＝242.3[M+1]+。
步骤3:向6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈(120mg,0.5mmol)于NH3/MeOH溶液(7N,10mL)中的溶液中加入兰尼镍(50mg)。将混合物在氢气中在室温搅拌2小时。将其用Celite过滤，真空浓缩滤液得到(6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(113)，其为棕色固体(120mg,～100％)。MS(ESI):m/z＝246.3[M+1]+。
参考实施例20
(6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲胺(115)
步骤1:将4-氯-2-硝基苯胺(2.0g,11.59mmol)和1-溴吡咯烷-2,5-二酮(2.3g,12.75mmol)于MeCN(30mL)中的混合物在70℃搅拌14小时。将反应混合物倒入水(100mL)中并在室温搅拌1小时。过滤析出物并用水洗涤。真空干燥固体得到3-溴苯-1,2-二胺，其为黄色固体(2.6g,86.7％)。
步骤2:将3-溴苯-1,2-二胺(4.0g,15.90mmol)和SnCl2(17.9g,79.50mmol)于EtOH(40mL)中的悬浮液回流加热4小时。冷却至室温后，向混合物中加入1,1,1-三甲氧基乙烷(12.9g,79.50mmol)。将反应混合物在120℃搅拌14小时，然后冷却至室温并真空浓缩。将残余物用EtOAc(100mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(200mL)处理，用过滤并用EtOAc(50mL×3)洗涤。将滤液用饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到4-溴-6-氯-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑，其为黄色固体(3.5g,89.7％)。MS(ESI):m/z＝244.9[M+1]+。
步骤3:将4-溴-6-氯-2-甲基-1H-苯并[d]咪唑(3.5g,14.26mmol)、p-TsOH.H2O(272mg,1.43mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(5.9g,71.30mmol)于THF(20mL)中的混合物在75℃搅拌4小时。真空浓缩反应混合物。将残余物用水稀释并用EtOAc萃取。干燥(MgSO4)合并的萃取物，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH梯度(0至9％MeOH)洗脱)来纯化得到4-溴-6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑，其为白色固体(3.2g,69.6％)。MS(ESI):m/z＝329.0[M+1]+。
步骤4:将4-溴-6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(3.2g,9.70mmol)、Zn(CN)2(2.3g,19.40mmol)和Pd(PPh3)4(1.1g,0.97mmol)于NMP(20mL)中的混合物在90℃搅拌3小时。过滤反应混合物并将滤液用EtOAc(50mL)稀释。将有机层用水(50mL×3)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用DCM:MeOH梯度(0至6％MeOH)洗脱)来纯化得到6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈，其为白色固体(1.0g,37.2％)。MS(ESI):m/z＝276.2[M+1]+。
步骤5:将6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈(1.0g,3.16mmol)和兰尼镍(100mg)于NH3/MeOH(7N,10mL)中的混合物在氢气中搅拌2小时。将反应混合物用过滤，真空浓缩滤液得到粗制(6-氯-2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲胺(115,600mg,59.0％)，其为黄色固体。MS(ESI):m/z＝280.3[M+1]+。
参考实施例21
1-(6-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-N-甲基甲胺(117)
步骤1:向(6-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲胺(700mg,2.63mmol)于DCM(10mL)中的溶液中加入(BOC)2O(632mg,2.90mmol)和TEA(800mg,7.90mmol)。将混合物在室温搅拌2小时。真空浓缩反应混合物。将残余物通过硅胶色谱法(用石油醚:EtOAc(1:1)作为洗脱溶剂)来纯化得到(6-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基氨基甲酸叔丁酯，其为白色固体(900mg,93％)。MS(ESI):m/z＝366.2[M+1]+。
步骤2:在0℃，向(6-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.82mmol)于DMF(10mL)中的溶液中加入NaH(60％于矿物油中,98.4mg,2.46mmol)。在室温搅拌30分钟后，加入CH3I(349mg,2.46mmol)并将反应混合物在室温搅拌过夜，然后用0℃的H2O淬灭。将混合物用EtOAc(100mL)萃取并将萃取物用H2O(50mL×3)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(1:1)洗脱)来纯化得到(6-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基(甲基)氨基甲酸叔丁酯，其为黄色油状物(310mg,99％)。MS(ESI):m/z＝380.3[M+1]+。
步骤3:向(6-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(310mg,0.82mmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入TFA(1mL)，将反应混合物在室温搅拌2小时。将混合物用0℃的NH4OH淬灭并用EtOAc(100mL)萃取。将萃取物用H2O(50mL×3)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用MeOH/DCM(1:30)洗脱)来纯化得到1-(6-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)-N-甲基甲胺(117)，其为黄色油状物(200mg,88％)。MS(ESI):m/z＝280.1[M+1]+。
参考实施例22
(3-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(119)
步骤1:氮气中，将4-溴-1H-吲哚(10g,50.7mmol)、Pd(PPh3)4(8.78g,7.6mmol)、Zn(CN)2(9.22g,101.4mmol)于NMP(150mL)中的混合物在110℃加热16小时。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc(100mL×5)萃取。将合并的萃取物用盐水(300mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(3.76g,52.5％)。
步骤2:向1H-吲唑-4-甲腈(1.65g,11.1mmol)于DMF(30mL)中的混合物中加入KOH(1.86g33.3mmol)和I2(5.6g22.2mmol)。将混合物在室温搅拌5小时。将反应混合物用水(100mL)淬灭并用EtOAc(200mL)萃取。真空浓缩萃取物得到3-碘-1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(2.01g,64.7％)。MS(ESI):m/z＝270[M+1]+。
步骤3:氮气中，将3-碘-1H-吲唑-4-甲腈(3.0g,11.1mmol)、DHP(1.84g,22.2mmol)和TsOH(212mg,1.1mmol)于THF(40mL)中的混合物在85℃加热过夜。将反应混合物用水(40mL)淬灭并用EtOAc(50mL×3)萃取。将合并的萃取物用洗涤盐水，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(使用石油醚/EtOAc(5:1))来纯化得到3-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(3.31g,84.0％)。MS(ESI):m/z＝354[M+1]+。
步骤4:氮气中，将3-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈(50mg,0.142mmol)、CuI(13.5g0.071mmol)、CsCO3(2.7mg,0.0142mmol)和3,4,7,8-四甲基-1,10-菲咯啉(0.0142mg,3.5mmol)于EtOH(0.5mL)中的混合物在密封小瓶中在微波炉中在90℃加热100分钟。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc萃取。干燥(MgSO4)萃取物，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚:EtOAc洗脱)来纯化得到3-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(13mg,35.7％)。MS(ESI):m/z＝258[M+1]+。
步骤5:将3-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈(140mg,0.544mmol)和兰尼镍(20mg)于NH3/MeOH(7N,10mL)中的混合物在氢气中搅拌过夜。将反应混合物用过滤并真空浓缩滤液得到(3-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲胺，其为油状物(119)130mg,91.4％)。MS(ESI):m/z＝262[M+1]+。
参考实施例23
1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙胺(121)
步骤1:在0℃，向4-氟-2-硝基苯胺(10.0g,42.55mmol)于DCM(150mL)和HOAc(75mL)中的混合物中滴加Br2(9.9ml,130mmol)，加入速度是维持内部温度低于10℃。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后倒入水(500mL)中，接着分离出有机相。通过添加NH4OH将水相的pH调节至约7，并将混合物用DCM(100mL×3)萃取。干燥(MgSO4)合并的萃取物，过滤并真空浓缩得到2-溴-4-氟-6-硝基苯胺，其为黄色固体(14g,93％)。MS(ESI):m/z＝233[M-1]-。
步骤2:将2-溴-4-氟-6-硝基苯胺(14g,59mmol)和SnCl2(66g,295mmol)于EtOH(50mL)中的悬浮液回流加热5小时。真空浓缩反应混合物。向残余物中加入EtOAc(100mL)和饱和NaHCO3水溶液(200mL)。将混合物用过滤并用EtOAc(100mL×3)洗涤。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到3-溴-5-氟苯-1,2-二胺，其为灰色固体(10.1g,100％)。MS(ESI):m/z＝205[M+1]+。
步骤3:将3-溴-5-氟苯-1,2-二胺(10.1g,49mmol)于甲酸(20mL)中的混合物在110℃加热过夜。浓缩反应混合物并向残余物中添加MeOH(5mL)以形成析出物。过滤析出物并用MeOH(2mL)洗涤得到4-溴-6-氟-1H-苯并[d]咪唑，其为黄色固体(10g,收率,73％)。MS(ESI):m/z＝215[M+1]+。
步骤4:氮气中，将4-溴-6-氟-1H-苯并[d]咪唑(3g,14mmol)、对甲苯磺酸(240mg,1.4mmol)和二氢吡喃(11.7g,140mmol)于THF(30mL)中的混合物回流加热3小时。真空浓缩反应混合物。使残余物在EtOAc(50mL)和水(50mL)之间分配，并通过添加K2CO3将pH调节至约8。将混合物用EtOAc(50mL×2)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(2:1)洗脱)来纯化得到4-溴-6-氟-1H-苯并[d]咪唑，其为白色固体(2.3g,64％)。MS(ESI):m/z＝300[M+1]+。
步骤5:氮气中，将4-溴-6-氟-1H-苯并[d]咪唑(1.4g,4.6mmol)、Zn(CN)2(1.1g,9.2mmol)和Pd(PPh3)4(535mg,0.46mmol)于NMP(10mL)中的混合物在100℃搅拌过夜。向反应混合物中添加EtOAc(50mL)和水(50mL)。将水相用EtOAc(50mL×2)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚:EtOAc(2:1)洗脱)来纯化得到6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈，其为黄色固体(1.04g,85％)。MS(ESI):m/z＝246[M+1]+。
步骤6:氮气中和在-78℃，向6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈(1g,4mmol)于无水THF(50mL)中的溶液中缓慢滴加MeMgBr的THF溶液(3.0M,7mL,21mmol)。在室温搅拌过夜后，将混合物倒入水(200mL)中并通过添加HCl溶液(1.0M)将pH调节至约5-6。将混合物用EtOAc(50mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚:EtOAc(1:1)洗脱)来纯化得到1-(6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙酮，其为黄色固体(1.0g,93.5％)。MS(ESI):m/z＝263[M+1]+。
步骤7:将1-(6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙酮(1.0g,3.82mmol)和TsOH(1.97g,11.45mmol)于水(10mL)和MeOH(50mL)中的混合物在80℃加热3小时。将反应混合物用EtOAc(50mL)和水(50mL)淬灭。将水相用EtOAc(50mL×2)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩得到1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙酮，其为黄色固体(678mg,99.8％)。MS(ESI):m/z＝179.3[M+1]。
步骤8:将1-(6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙酮(676mg,3.8mmol)、NaOAc(3.12g,38mmol)和羟胺盐酸盐(792mg,11.4mmol)于MeOH(60mL)中的混合物在80℃加热1小时。真空浓缩反应混合物。向所述残余物中添加水(200mL)并将所得混合物用EOAc(50mL×3)萃取。真空浓缩合并的萃取物得到1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙酮肟，其为黄色固体(658mg,89.8％)。MS(ESI):m/z＝194.3[M+1]+。
步骤9:将1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙酮肟(351mg,1.82mmol)、Zn粉(1.18g,18.2mmol)和NH4Cl(973mg,18.2mmol)于MeOH(50mL)和HOAc(10mL)中的混合物在80℃加热4小时。过滤反应混合物并真空浓缩滤液。向残余物中添加NH4OH(50mL)，并将混合物用DCM(50mL×3)萃取。干燥合并的萃取物(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将粗制混合物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH/TEA(10:1:0.2)洗脱)来纯化得到1-(6-氟-1H-苯并[d]咪唑-4-基)乙胺(121)，其为黄色固体(318mg,97.7％)。MS(ESI):m/z＝180.1[M+1]+。
参考实施例24
(6-氯-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(123)
步骤1:氮气中，将4-溴-6-氯-1H-吲唑(3.0g,12.9mmol)、Pd(PPh3)4(2.24g,1.94mmol)和Zn(CN)2(9.22g,25.8mmol)于DMF(50mL)中的混合物在120℃加热16小时。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc(50mL×5)萃取。将合并的萃取物用盐水(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到6-氯-1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(2.0g,86.9％)。
步骤2:向6-氯-1H-吲唑-4-甲腈(2.0g,11.26mmol)于DMF(30mL)中的溶液中添加KOH(1.89g,33.78mmol)和I2(5.72g,22.52mmol)。将混合物在50℃加热过夜。将反应混合物用EtOAc(200mL)和水(100mL)淬灭。真空浓缩有机层得到6-氯-3-碘-1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(2.01g,58.8％)。MS(ESI):m/z＝304[M+1]+。
步骤3:氮气中，将6-氯-3-碘-1H-吲唑-4-甲腈(2.0g,6.59mmol)、二氢吡喃(1.09g,13.18mmol)和TsOH一水合物(127mg,0.659mmol)于THF(40mL)中的混合物在80℃加热过夜。将反应混合物用水(40mL)淬灭并用EtOAc(50mL×3)萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(5:1)洗脱)来纯化得到6-氯-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(2g,78.4％)。MS(ESI):m/z＝388[M+1]+。
步骤4:氮气中，在密封小瓶中，将6-氯-3-碘-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈(600mg,1.550mmol)、K3PO4(644mg,3.037mmol)、PdCl2(dppf)(186mg,0.228mmol)和2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼烷(290mg,1.52mmol)于二噁烷(2mL)中的混合物在微波炉中在100℃加热18小时。将反应混合物用EtOAc和水淬灭。真空浓缩有机层得到6-氯-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈，其为白色固体(230mg,53.9％)。MS(ESI):m/z＝276[M+1]+。
步骤5:将6-氯-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈(150mg,0.545mmol)和兰尼镍(20mg)于NH3/MeOH(7N,10mL)中的混合物在氢气中在室温搅拌过夜。将反应混合物用Celite过滤并浓缩滤液得到(6-氯-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(123)，其为油状物(130mg,72.3％)。MS(ESI):m/z＝280[M+1]+。
参考实施例24
1-(6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-N-甲基甲胺(125)
步骤1:氮气中，将6-溴-5-氟-1H-苯并[d]咪唑(10.0g,46.5mmol)、Pd(PPh3)4(7.97g,6.9mmol)和Zn(CN)2(8.46g，93mmol)于NMP(150mL)中的混合物在110℃加热16小时。将反应混合物用水淬灭并用EtOAc(100mL×5)萃取。将合并的萃取物用盐水(300mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到6-氟-3H-苯并[d]咪唑-5-甲腈，其为白色固体(7.0g,93.5％)。
步骤2:氮气中，将6-氟-3H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(1.78g,11.1mmol)、DHP(1.84g,22.2mmol)和TsOH(212mg,1.1mmol)于THF(20mL)中的混合物在85℃加热过夜。将反应混合物用水(40mL)淬灭并用EtOAc(50ml×2)萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚:EtOAc(5:1)洗脱)来纯化得到5-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲腈，其为白色固体(2.0g,73.8％)。
步骤3:将5-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-甲腈(1.2g,4.9mmol)和兰尼镍(40mg)于NH3/MeOH溶液(7N,20mL)中的混合物在氢气中在室温搅拌过夜。将反应混合物用过滤并真空浓缩滤液得到(5-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)甲胺，其为油状物(350mg,28.7％)。MS(ESI):m/z＝250[M+1]+。
步骤4:向(5-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)甲胺(2.5g,10mmol)于DCM(16mL)中的混合物中添加(BOC)2O(1.18g,10mmol)和TEA(6滴)。将混合物在室温搅拌5小时。真空浓缩反应混合物。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(3:1)洗脱)来纯化得到(5-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)甲基氨基甲酸叔丁酯，其为白色固体(2.2g,60.3％)。MS(ESI):m/z＝350[M+1]+。
步骤5:向冷却至–60℃的(5-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)甲基氨基甲酸叔丁酯(200mg,0.57mmol)于无水THF(2mL)中的混合物中添加NaH(60％于矿物油中,21.6mg,0.9mmol)。在–60℃搅拌30分钟后，添加CH3I(127mg,0.9mmol)，然后在室温搅拌过夜。过滤反应混合物并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(3:1)洗脱)来纯化得到(5-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)甲基(甲基)氨基甲酸叔丁酯，其为白色固体(170mg,97％)。MS(ESI):m/z＝364[M+1]+。
步骤6:在0℃，将(5-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-6-基)甲基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(200mg,0.56mmol)和TFA(1mL)于DCM(8mL)中的溶液搅拌2小时。真空浓缩反应混合物。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(3:1)洗脱)来纯化得到1-(6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-N-甲基甲胺(125,120mg,83.3％)，其为白色固体。MS(ESI):m/z＝264[M+1]+。
参考实施例25
(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(127)
步骤1:在圆底烧瓶中装入4-溴-6-(三氟甲基)-1H-吲唑(1.00g,3.8mmol)、TsOH一水合物(27mg,0.15mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(1.59g,18.9mmol)和THF(25mL)。将反应混合物用氮气脱气并回流加热18小时，然后真空除去溶剂。将残余物通过SiO2色谱法来纯化得到4-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6-(三氟甲基)-1H-吲唑(1.03g,78％)，其为黄色油状物。MS(ESI)m/z:265.2[(M–THP基团)+1]+。
步骤2:向带密封盖的小瓶中装入4-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6-(三氟甲基)-1H-吲唑(1.03g,2.95mmol)、Zn(CN)2(0.38g,3.24mmol)、Pd(PPh3)4(0.24g,0.21mmol)和NMP(8mL)。将混合物在氮气中脱气5分钟，然后将混合物在氮气中在85℃搅拌16小时。过滤混合物并真空浓缩滤液。将粗制混合物通过SiO2色谱法来纯化得到1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-甲腈，其为固体(0.69g,79％)。MS(ESI)m/z:296.3[M+1]+。
步骤3:向1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-甲腈(440mg,1.49mmol)于氨(2M的甲醇溶液,10mL)中的溶液中加入兰尼镍(1.27g,于水中的悬浮液)。将混合物在室温在氢气气氛(1atm.)中搅拌16小时，然后过滤。真空浓缩滤液得到粗制(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-6-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(127,267mg,收率:60％)。MS(ESI)m/z:300.2[M+1]+。
参考实施例26
(6-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(129)
步骤1:在圆底烧瓶中装入4-溴-6-甲氧基-1H-吲唑(1.00g,4.40mmol)、TsOH一水合物(39mg,0.22mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(1.48g,17.6mmol)和THF(40mL)。将反应混合物用氮气脱气并回流18小时，然后真空除去溶剂。将残余物通过SiO2色谱法来纯化得到4-溴-6-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(1.53g,定量的)，其为黄色固体。MS(ESI)m/z:311.2[M+1]+。
步骤2:在密封的微波小瓶中装入4-溴-6-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(1.50g,4.82mmol)、Zn(CN)2(0.62g,5.30mmol)、Pd(PPh3)4(0.22g,0.19mmol)和DMF(13mL)。将混合物在氮气中脱气5分钟，然后在微波反应器中在145℃加热25分钟。将混合物用EtOAc稀释并过滤。使滤液在水和EtOAc之间分配，并分离各层。将有机层用水(3x)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制混合物通过SiO2色谱法来纯化得到6-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈，其为固体(1.06g,86％)。MS(ESI)m/z:258.2[M+1]+。
步骤3:向6-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈(350mg,1.36mmol)于氨(2M的甲醇溶液,15mL)中的溶液中添加兰尼镍(1.17g,于水中的悬浮液)。将混合物在室温在氢气气氛(1atm.)中搅拌16小时，然后过滤。真空浓缩滤液得到粗制(6-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(129,270mg,收率:76％)。MS(ESI)m/z:262.4[M+1]+。
参考实施例27
1-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-4-基)乙胺(131)
步骤1:向4-溴-6-氟-1H-吲唑(2.3g,10.7mmol)于无水DMF(36mL)中的溶液中加入氢化钠(60％于矿物油中的悬浮液,0.51g,12.8mmol,1.2eq.)。在室温搅拌5分钟后，加入碘甲烷(2.2mL)，并将所得混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(200mL)中并用EtOAc(2×100mL)萃取。将合并的萃取物用水(200mL)和盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空蒸发。将残余物通过SiO2色谱法(用己烷:EtOAc(3:1)洗脱)来纯化得到4-溴-6-氟-1-甲基-1H-吲唑，其为褐色固体(1.42g,58％)，和4-溴-6-氟-2-甲基-2H-吲唑(0.29g,12％)，其为褐色固体。MS(ESI):m/z＝229.1[M+1]+。
步骤2:氩气中，向4-溴-6-氟-1-甲基-1H-吲唑(1.42g,6.25mmol)和三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(2.74mL,8.13mmol,1.3eq.)于NMP(24mL)中的混合物中加入Pd(0)(PPh3)4(1.08g,0.94mmol,0.2eq.)。将混合物在110℃加热过夜后，将其冷却并在EtOAc和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空蒸发。将粗制物通过SiO2色谱法(用己烷:乙酸乙酯(3:1)洗脱)来纯化得到4-(1-乙氧基乙烯基)-6-氟-1-甲基-1H-吲唑，其为黄色油状物(1.24g,90％)。MS(ESI):m/z＝221.3[M+1]+。
步骤3:将4-(1-乙氧基乙烯基)-6-氟-1-甲基-1H-吲唑(1.24g,5.62mmol)于THF(10mL)和HCl水溶液(2.0N,10mL)中的溶液在室温搅拌2小时，然后倒入水(200mL)中并用EtOAc(2×50mL)萃取。将合并的萃取物用NH4OH水溶液(30mL)和盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空蒸发得到1-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-4-基)乙酮，其为白色固体(600mg,55％)。MS(ESI):m/z＝193.2[M+1]+。
步骤4:向1-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-4-基)乙酮(900mg,4.68mmol)于EtOH(20mL)中的悬浮液中加入羟胺盐酸盐(1.64g,23.4mmol,5.0eq.)和NaOAc(3.84g,46.8mmol,10eq.)。将混合物在400C搅拌过夜，真空浓缩溶剂得到1-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-4-基)乙酮肟，其为白色固体(848mg,87％)。MS(ESI):m/z＝208.2[M+1]+.
步骤5:向1-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-4-基)乙酮肟(848mg,4.10mmol)于MeOH(60mL)中的溶液中加入Zn粉(13.6g,212.5mmol,50.0eq.)和NH4Cl(13.6g,251mmol,60.0eq.)。将混合物回流加热过夜，过滤并真空浓缩。向残余物中加入DCM，并将混合物用水洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩得到1-(6-氟-1-甲基-1H-吲唑-4-基)乙胺(131)，其为糖浆状物(785mg,87％)。MS(ESI):m/z＝177.2[M-NH2]+。
参考实施例28
(3-氯-1H-吲哚-4-基)甲胺(133)
步骤1:在0℃，向1H-吲哚-4-甲腈(514.0mg,3.61mmol)于无水DMF(2.8mL)中的溶液中滴加溶解在DMF(8.5mL)中的NCS(517.3mg,3.80mmol)。将反应混合物缓慢温热至室温。搅拌20小时后，将混合物用EtOAc稀释。将有机层用饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制残余物通过SiO2色谱法(用庚烷:EtOAc洗脱)来纯化得到3-氯-1H-吲哚-4-甲腈，其为白色固体(630mg,98.7％)。MS(ESI)m/z:177.1[M+1]+.1HNMR(400MHz,DMSO)δ11.99(br s,1H),7.80(d,J＝2.8Hz,1H),7.78(d,J＝8.2Hz,1H),7.61(d,J＝7.2Hz,1H),7.37–7.26(m,1H)。
步骤2:向3-氯-1H-吲哚-4-甲腈(630.0mg,3.57mmol)于氨/MeOH(2M,45mL)中的溶液中加入兰尼镍(3.05g)/水(2mL)。然后将反应混合物在氢气囊条件下在1atm氢化20小时。将反应混合物用垫过滤，并将所述垫用MeOH(10mL×3)和水(10mL x3)交替洗涤。从滤液中除去挥发性溶剂。将剩余的粗制物用EtOAc(3x75mL)萃取。干燥(Na2SO4)合并的有机层，过滤并真空浓缩。用乙醚/庚烷结晶得到(3-氯-1H-吲哚-4-基)甲胺(133)，其为白色固体(633mg,98.2％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.33(br s,1H),7.44(s,1H),7.27(d,J＝8.0Hz,1H),7.11–7.01(m,2H),4.18(s,2H),1.73(br s,2H)。
实施例1
N2-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-13)
步骤1:将亚硫酰氯(10mL)滴加至冷却至0℃的1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸(4.8g,30mmol)于MeOH(150mL)中的溶液中。将反应混合物回流加热18小时，然后减压浓缩溶剂(约2/3)。冷却后，有黄色固体从所述溶液中析出，过滤得到4g(90％)1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(20):MS(ESI)m/z＝177[M+1]+。
步骤2:向圆底烧瓶中装入20(1.76g,10mmol)、p-TsOH.H2O(38mg,0.2mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(1.26g,15mmol)和THF(20mL)。将反应混合物用氮气脱气并回流加热18小时，然后减压除去溶剂。将残余物用DCM(250mL)和水(50mL)稀释。干燥(MgSO4)有机层，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH梯度(0.5至1.0％MeOH)洗脱)来纯化得到2.5g(90％)1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-羧酸甲酯(22)，其为灰色油状物:MS(ESI)m/z＝261.2[M+1]+。
步骤3:在0℃和氮气中，将22(2.5g,9.61mmol)于无水THF(10mL)中的溶液滴加至LiAlH4(0.55g,14.42mmol)于无水THF(20mL)中的混合物中。将反应混合物在0℃搅拌30分钟，然后依次用水(2mL)和10％NaOH(1.8mL)处理。将所得混合物用乙醚(2x100mL)萃取。干燥(Na2SO4)合并的有机层，过滤并真空浓缩得到2.24g(95％)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲醇(24)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝233.2[M+1]+。
步骤4:氮气中和在室温，向搅拌的24(2.2g,9.6mmol)于THF(20mL)中的溶液中加入叠氮化磷酸二苯酯(3.96g,14.4mmol)和DIPEA(5mL)。将反应混合物搅拌18小时，然后用DCM(200mL)和水(50mL)稀释。干燥(MgSO4)有机层，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(2:1)洗脱)来纯化得到1.2g(48％)5-(叠氮基甲基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(26)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝258.2[M+1]+。
步骤5:向26(1.0g,3.9mmol)于MeOH(20mL)中的溶液中加入20％Pd-C(200mg)，将混合物在氢气(1atm.)中在室温剧烈搅拌18小时。将反应混合物用垫过滤并真空浓缩得到740mg(82％)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(28)，其为黄色油状物，将其不经进一步纯化即在下一步骤中：MS(ESI)m/z＝232.2[M+1]+。
步骤6:在微波小瓶中装入53(750mg,3.20mmol),28(740mg,3.20mmol)、DIPEA(2.0mL)和EtOH(10.0mL)，密封并在120℃加热18小时。真空浓缩反应混合物并通过SiO2色谱法(用DCM:MeOH(8:1)洗脱)纯化得到1.12g(81％)N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(32)，其为白色固体:MS(ESI)m/z＝431.2[M+1]+。
步骤7:向32(406mg,0.94mmol)于MeOH(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入p-TsOH.H2O(178mg,0.94mmol)。将反应混合物回流加热18小时。减压除去溶剂并将残余物通过制备性HPLC来纯化得到180mg(55％)N2-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)-甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-13)，其为白色固体。
实施例2
N2-((1H-吲哚-6-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-35)
步骤1:在剧烈搅拌下，向1H-吲哚-6-甲腈(70mg,0.5mmol,CASRN15861-36-6)于冷却至0℃的THF(5mL)中的溶液中加入NaH(25mg,60％于油中,0.65mmol)。搅拌30分钟后，向混合物中添加TsCl(140mg,0.75mmol)。将反应混合物在室温搅拌18小时，然后在DCM(300mL)和水(50mL)之间分配。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将所得残余物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc梯度(5至10％EtOAc)洗脱)来纯化得到100mg(67％)1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-6-甲腈(34)，其为白色固体:MS(ESI)m/z＝297.1[M+1]+。
步骤2:向34(100mg,0.34mmol)和7M氨的MeOH溶液(5mL)的溶液中加入兰尼镍(10mg)，将混合物在氢气(1atm.)中在室温剧烈搅拌18小时。过滤催化剂并真空浓缩滤液得到80mg(78％)(1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-6-基)甲胺(36)，其为糖浆状物:MS(ESI)m/z＝301.2[M+1]+。
步骤3:在微波小瓶中装入53(80mg,0.34mmol),36(80mg,0.27mmol),DIPEA(0.2mL)和n-BuOH(2.0mL)，密封并在微波反应器中在180℃照射80分钟。将反应混合物浓缩并通过纯化得到130mg(95％)N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-6-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(38)，其为黄色固体；MS(ESI)m/z＝500.1[M+1]+。
步骤4:T向38(130mg,0.25mmol)于MeOH(2mL)中的溶液中加入2.0NKOH的水溶液(2mL)。将混合物在100℃搅拌18小时。减压蒸发溶剂并将残余物通过制备性HPLC来纯化HPLC得到20mg(22％)I-35，其为白色固体。
实施例3
N2-((1H-吲哚-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-15)
N2-((1H-吲哚-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺是按照实施例2制备的，不同的是在步骤1中，1H-吲哚-6-甲腈被1H-吲哚-5-甲腈代替，得到100mg(30％)I-15，其为白色固体。
实施例4
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-38)
步骤1:在剧烈搅拌下，向1H-吲哚-4-甲醛(2.9g,20mmol)于在冰浴中冷却的THF(50mL)中的溶液中加入NaH(0.96g,60％于油中,24mmol)。搅拌30分钟后，加入4-甲苯磺酰氯(5.73g,30mmol)。将混合物在室温搅拌过夜并真空除去溶剂。将残余物用DCM(500mL)和水(50mL)稀释。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc梯度(5至10％EtOAc)洗脱)来纯化得到900mg(15％)1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-4-甲醛(42)，其为白色固体:MS(ESI)m/z＝300.1[M+1]+。
步骤2:向42(900mg,3mmol)于EtOH(10mL)中的溶液中加入羟胺盐酸盐(1.0g,15mmol)和吡啶(1.0mL)。在将反应混合物在70℃搅拌过夜后，真空除去溶剂得到800mg(85％)1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-4-甲醛肟(44)，其为白色固体:MS(ESI)m/z＝315[M+1]+。
步骤3:向44(620mg,2mmol)于EtOH(15mL)中的溶液中加入锌粉(320mg,5.0mmol)和NH4Cl(0.53g,10mmol)。将反应混合物回流加热过夜，过滤并将滤液浓缩至干。将残余物用DCM(100mL)和水(20mL)稀释。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩得到600mg(100％)(1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-4-基)甲胺(46)，其为黄色糖浆状物:MS(ESI)m/z＝284.1[M-15]+。
步骤4:在管中装入53(415mg,1.38mmol)、46(486mg,2.07mmol)、DIPEA(1.0ml)和IPA(3mL)，脱气，密封并在120℃加热过夜。真空浓缩混合物。将残余物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH梯度(3.3至5％MeOH)洗脱)来纯化得到330mg(48％)N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(50)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝500.3[M+1]+。
步骤5:向50(330mg,0.73mmol)于MeOH(5.0mL)中的溶液中加入KOH溶液(2.0N,5mL)。将混合物在密封管中在100℃加热过夜，然后真空浓缩。将残余物通过制备性HPLC来纯化得到145mg(57％)I-38，其为白色固体。
实施例5
N2-((1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-39)
步骤1:向3-溴-2-硝基苯胺(4.7g,21.66mmol)于甲酸(98％,50mL)中的溶液中加入10％Pd/C和甲酸铵(13.6g,216.6mmol)，将反应混合物在氮气中在120℃搅拌24小时。过滤催化剂，浓缩滤液，将残余物溶解在水(100mL)中并用EtOAc(2x150mL)萃取。将合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩得到1.3g(30％)粗制4-溴-1H-苯并[d]咪唑(52)，其为深棕色固体:MS(ESI)m/z＝197.1[M+1]+。
步骤2:向52(1.30g,6.6mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(2.78g,33.0mmol)于THF(15mL)中的混合物中加入p-TsOH.H2O(0.11g,0.66mmol)。将混合物在80℃搅拌14小时，然后真空除去溶剂。将残余物通过SiO2色谱法(用10％石油醚/EtOAc洗脱)来纯化得到1.3g(70％)4-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(54)，其为棕色油状物:MS(ESI)m/z＝281.0[M+1]+。
步骤3:将54(1.30g,4.62mmol),Zn(CN)2(1.08g,9.24mmol),Pd(PPh3)4(0.53g,0.46mmol)和NMP(15mL)的混合物在氮气中在85℃搅拌14小时。过滤混合物并将滤液通过反相色谱法(用35％MeCN/H2O(含有0.5％氨)得到0.75g(70％)洗脱)来纯化得到1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-甲腈(56)，其为棕色固体:MS(ESI)m/z＝228.3[M+1]+。
步骤4:56的还原是按照实施例2的骤2进行的，得到0.7g(92％)粗制(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲胺58，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝232.3[M+1]+。
步骤5:将58(200mg,0.87mmol)、DIPEA(335mg,2.61mmol)和53(203mg,0.87mmol)于IPA(3mL)中的混合物在微波反应器中在120℃照射2小时。减压除去溶剂得到110mg(30％)粗制N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(60)，其为棕色固体，将其不经进一步纯化即用在下一步骤中：MS(ESI)m/z＝431.7[M+1]+。
步骤6:将60(110mg,0.26mmol)和p-TsOH.H2O(44mg,0.26mmol)于MeOH(5mL)和水(1mL)中的混合物在80℃加热14小时。真空除去溶剂。将粗制产物通过制备性HPLC来纯化得到45mg(51％)I-39，其为白色固体。
实施例6
N2-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-12)
步骤1:在-70℃，向草酰氯(1.17g,9.23mol)于DCM(10mL)中的溶液中滴加DMSO(1.41g,18.09mmol)。将反应混合物在-70℃搅拌30分钟。历时30分钟向所得溶液中滴加24(1.4g,6.03mmol)于DCM(20mL)中的溶液。添加后，使反应温度升至-55℃。将反应混合物搅拌1小时，同时维持温度在-55℃至-45℃之间，然后历时5分钟滴加DIPEA(6.0mL)。历时10分钟，将反应混合物温热至0℃，然后用1M HCl(50mL)淬灭。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到1.0g(72％)1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲醛(64)，其为红色油状物:MS(ESI)m/z＝231.1[M+1]+。
步骤2:在0℃，向64(1.0g,4.34mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加MeNH2的EtOH溶液(33％,2mL)。在室温搅拌2小时后，减压浓缩混合物得到1.0g(94％)N-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)亚甲基)-甲胺(66)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝244.2[M+1]+。
步骤3:向冷却至0℃的66(1.0g,4.11mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加NaBH4(300mg,8.23mmol)。在室温搅拌过夜后，将混合物用水(3mL)淬灭并用DCM(3x50mL)萃取。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到880mg(66％)N-甲基-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(68)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝246.2[M+1]+。
步骤4:在管中装入53(846mg,3.6mmol)、68(880mg,3.6mmol)、DIPEA(5mL)和IPA(10mL)，脱气、密封，然后在120℃加热过夜。真空蒸发溶剂得到444mg(27％)N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-甲基-N2-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-嘧啶-2,4-二胺(70)，其为黄色固体；MS(ESI)m/z＝445.2[M+1]+。
步骤5:在管中装入70(444mg,1.0mmol)于MeOH(5mL)和水(1mL)中的溶液，然后加入TsOH·H2O(190mg,1.0mmol)。将所述管密封并在80℃加热过夜。真空蒸发溶剂并将残余物通过制备性HPLC来纯化得到240mg(66％)I-12，其为白色固体。
实施例7
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((7-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-嘧啶-2,4-二胺(I-26)
步骤1:向4-溴-2-甲基-6-硝基苯胺(2.0g,8.7mmol)于EtOH(20mL)中的悬浮液中加入SnCl2(5.0g,26.1mmol)。将反应混合物回流加热14小时，冷却至室温并真空浓缩。将残余物用EtOAc(100mL)稀释并在饱和NaHCO3水溶液(200mL)之间分配。将所得浆液用垫过滤并将湿的滤饼用EtOAc(3x50mL)洗涤。将滤液依次用饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到1.27g(72％)5-溴-3-甲基苯-1,2-二胺(72)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝201.1[M+1]+。
步骤2:将72(1.27g,6.32mmol)于甲酸(10mL)中的混合物回流加热过夜。真空浓缩反应混合物得到棕色油状物，将其用饱和NaHCO3水溶液处理。将水溶液用EtOAc(3x300mL)萃取。干燥(MgSO4)萃取物，过滤并浓缩得到1.09g(82％)5-溴-7-甲基-1H-苯并[d]咪唑(74)，其为黄色固体；MS(ESI)m/z211.1[M+1]+。
步骤3:将74(1.09g,5.19mmol)、TsOH·H2O(98mg,0.51mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(2.4mL,26mmol)于THF(15mL)中的混合物脱气，然后回流加热过夜。真空除去溶剂。使残余物在DCM(300mL)和水(50mL)之间分配。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用MeOH/DCM梯度(0.5％至1％MeOH)洗脱)来纯化得到1.45g(95％)5-溴-7-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(76)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝295.1[M+1]+。
根据实施例5步骤3-6描述的操作将5-溴-7-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(76)转化成I-26。将粗制产物通过制备性HPLC来纯化得到71mg(25％)I-26。
实施例8
(S)-N2-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-9)和(R)-N2-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-55)
步骤1:将4-溴苯-1,2-二胺(4.0g,21.5mmol)和甲酸(95％,100mL)的混合物在100℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温并真空浓缩得到黑色油状物。使所述粗制油状物在EtOAc(500mL)和NH3/H2O(50mL)之间分配。分离EtOAc层并真空浓缩得到4.5g(100％)5-溴-1H-苯并[d]咪唑(78)，其为棕色固体:MS(ESI)m/z＝197.0(M+1)。
步骤2:将78(4.5g,23mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(9mL,0.1mol)、p-TsOH.H2O(1.0g,3.4mmol)于THF(200mL)中的混合物在氮气中在80℃搅拌18小时。真空浓缩反应混合物。将粗制产物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH(100:1)洗脱)来纯化得到6.0g(100％)5-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(80)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝281.0(M+1)。
步骤3:将80(2.81g,0.01mol)、丁基乙烯基乙醚(1.5g,0.015mol)、PdCl2(26mg,0.14mmol)、(邻甲苯基)3P(88mg,0.29mmol)、K3PO4(1.5g,0.02mol)和IPA(20ml)的混合物在氮气中回流加热过夜。将混合物冷却至室温并真空除去溶剂。向残余物中添加6M HCl(60mL)并将所得溶液搅拌15分钟。用NH4OH水溶液(35％)将混合物调整至pH8并用EtOAc(300mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH梯度(5至10％MeOH)洗脱)来纯化得到1.2g(86％)1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙酮(82)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝245.3(M+1)。
步骤4:将82(1.2g,4.9mmol)/30％甲胺于MeOH(50mL)中的溶液在室温搅拌15小时。在室温，向反应混合物中分数份添加NaBH4(186mg,4.9mmol)并搅拌过夜。真空浓缩反应混合物。将粗制产物先后通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH(100:1)洗脱)和在上的反相色谱法(用0.01％NH4OH氨/水(溶剂A)和MeCN(溶剂B)洗脱)来纯化得到200mg(15％)(±)-N-甲基-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙胺(84)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝260.3(M+1)。
步骤5:在管中装入84(200mg,0.77mmol)、53(181mg,0.77mmol)和DIPEA(200mg,1.5mmol)于IPA(5mL)中的混合物，密封并在120℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温并减压浓缩。将粗制残余物通过SiO2色谱法(用MeOH/DCM梯度(5％至15％MeOH)洗脱)来纯化得到68mg(19％)(±)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-甲基-N2-(1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)嘧啶-2,4-二胺(86)，其为白色固体:MS(ESI)m/z＝459.2(M+1)。
步骤6:向86(68mg,0.148mmol)于MeOH(50mL)和水(10mL)中的溶液中加入TsOH·H2O(44mg,0.148mmol)。将反应混合物在50℃加热18小时。真空蒸发溶剂并将残余物通过制备性HPLC来纯化得到25mg(45％)(±)-N2-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-甲基嘧啶-2,4-二胺(88)，其为白色固体:MS(ESI)m/z＝375.3(M+1)。
步骤7:88的手性拆分是如下进行的：使用CHIRALPAK AS-H柱(5μm,30×250mm)，柱温为40℃，10mM二乙醇胺(DEA)缓冲液于MeOH/CO2中(82:18v/v)作为流动相，流速为60mL/min。每次注射的负载量为10mg。分析性手性纯度检测是如下进行的：使用CHIRALPAK AS-H柱(5μm,4.6×150mm)，柱温为40℃，10mM DEA缓冲液/MeOH(70:30v/v)作为流动相，流速为2.1mL/min。注射体积为3μL。从一个馏分中除去溶剂得到4.5mg I-9，其为白色固体(4.5mg,8.18％)。从第二个馏分中除去溶剂得到6.0mg(10.8％)I-55，其为黄色固体。
实施例9
N2-(2-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙-2-基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-17)
步骤1:将3,4-二氨基苯甲腈(2.0g,15.04mmol)于98％甲酸(35mL)中的混合物在110℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温并真空浓缩。将粗制残余物用NH3/H2O(3x20mL)和水(20mL)洗涤得到1.63g(75.8％)1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(90)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝144.2[M+1]+。
步骤2:将90(1.63g,11.4mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(2.87g,34.2mmol)和p-TsOH.H2O(196mg,1.14mmol)于THF(60mL)中的混合物在氮气中在80℃搅拌18小时。真空浓缩反应混合物。将粗制产物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(1:1)洗脱)来纯化得到2.48g(95.9％)1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(92)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝228.1[M+1]+。
步骤3:在室温和氮气中，将甲基溴化镁溶液(1.4M于甲苯和THF中,21.4mL,29.96mmol)滴加至搅拌的92(1.70g,7.49mmol)于无水甲苯(50mL)中的混合物中。添加后，将混合物在氮气中在室温搅拌40分钟，然后添加四异丙氧基钛(IV)(259mg,0.912mmol)。将混合物在氮气中在40℃搅拌18小时，然后冷却至室温并倒入1N NaOH水溶液(100mL)中。过滤所述溶液并将湿的滤饼用DCM(3x20mL)洗涤。将水层用DCM(3x80mL)萃取。将合并的有机萃取物真空浓缩。将粗制产物通过制备性HPLC来纯化得到1.08g(55.7％)2-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)丙-2-胺(94)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝260.2[M+1]+。
步骤4:将94(691mg,2.67mmol)和53(210mg,0.89mmol)的净混合物在氮气中在140℃搅拌18小时。将深棕色混合物冷却至室温并通过制备性HPLC纯化得到25mg(7.5％)I-17，其为白色固体。
实施例10
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((6-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-28)
步骤1:将5-氟-2-硝基苯胺(1.5g,9.61mmol)和NBS(1.7g,9.55mmol)于HOAc(75mL)中的溶液回流加热90分钟。然后将反应混合物倒入冰水(300mL)中并搅拌10分钟。过滤收集亮黄色析出物并真空干燥过夜得到1.57g(76％)4-溴-5-氟-2-硝基苯胺(96):MS(ESI)m/z＝235[M+1]+。
步骤2:向96(1.57g,6.74mmol)于EtOH(16mL)中的悬浮液中添加SnCl2(3.82g,20.2mmol)。将反应混合物回流加热14小时，冷却至室温并真空浓缩。使残余物在EtOAc(100mL)和饱和水溶液NaHCO3(200mL)之间分配。用垫过滤所得浆液并将湿的滤饼用EtOAc(3x50mL)洗涤。将有机层依次用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到600mg(43％)4-溴-5-氟苯-1,2-二胺(98)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝205[M+1]+。
步骤3:将98(600mg,2.93mmol)于甲酸(5.0mL)中的混合物回流加热过夜。真空浓缩反应混合物得到棕色油状物，使所述油状物在EtOAc(300mL)和饱和水溶液NaHCO3(100mL)之间分配。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并真空蒸发得到550mg(87％)5-溴-6-氟-1H-苯并[d]咪唑(100)，其为白色固体(550mg,87％):MS(ESI)m/z＝215，[M+1]+。
步骤4:将100(550mg,2.57mmol)、TsOH·H2O(50mg,0.26mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(1.08g,12.85mmol)于THF(10mL)中的混合物回流加热过夜。真空除去溶剂后，使残余物在DCM(300mL)和水(100mL)之间分配。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用MeOH/DCM梯度(0.5至1％MeOH)洗脱)来纯化得到817mg(100％)5-溴-6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(102)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝299[M+1]+。
步骤5:按照实施例5的步骤3将102转化成6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(104)。将粗制产物通过SiO2色谱法(用MeOH/DCM(1:150)洗脱)来纯化得到500mg(79％)104，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝246[M+1]+。
步骤6:向104(245mg,1.0mmol)于7N NH3/MeOH(20mL)中的溶液中添加兰尼镍(50mg)，然后将其在氢气中(1atm)在室温搅拌过夜。过滤黑色混合物并真空浓缩滤液得到230mg(96％)(6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(106)，其为黄色油状物:MS(ESI):m/z＝250[M+1]+。
步骤7:在管中装入53(235mg,1.0mmol)、106(237mg,0.95mmol)、DIPEA(1.0mL)和IPA(3mL)，脱气，密封并在120℃加热过夜。真空蒸发溶剂得到170mg(39％)N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(108)，其为白色固体:MS(ESI)m/z＝449.2[M+1]+。
步骤8:将108(170mg,0.38mmol)和TsOH·H2O(72mg,0.38mmol)于MeOH(5mL)和水(1mL)中的混合物回流加热2小时。真空除去溶剂后，将残余物通过制备性HPLC来纯化得到60mg(43％)of I-28，其为白色固体。
实施例11
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((7-氟-1H-吲哚-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-47)
步骤1:在-40℃和氮气中，向4-溴-1-氟-2-硝基苯(1.1g,5.0mmol)于THF(20mL)中的溶液中缓慢添加乙烯基溴化镁(1M于THF,15.5mL,15.5mmol)。将反应混合物搅拌1.5小时，然后用NH4Cl饱和水溶液(10mL)淬灭。使混合物在EtOAc(300mL)和水(50mL)之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空蒸发。将残余物通过SiO2色谱法(用2.5％EtOAc/石油醚洗脱)来纯化得到0.125g(12％)4-溴-7-氟-1H-吲哚(110)，其为棕色油状物:MS(ESI)m/z＝214[M-1]+。
步骤2:按照实施例5的步骤3将110转化成7-氟-1H-吲哚-4-甲腈，其为白色固体(112)。将粗制产物通过SiO2色谱法(用MeOH/DCM(1:180)洗脱)来纯化得到43mg(56％)112:MS(ESI)m/z＝161.1[M+1]+。
步骤3:向112(43mg,0.27mmol)于7N NH3/MeOH(10mL)中的溶液中添加兰尼镍(10mg)，将混合物在氢气中(1atm)在室温搅拌过夜。过滤黑色混合物并真空浓缩滤液得到44mg(100％)(7-氟-1H-吲哚-4-基)甲胺(114)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝148.1[M-16]+。
步骤4:在管中装入53(63mg,0.27mmol)、114(44mg,0.27mmol)、DIPEA(2mL)/IPA(5mL)，脱气、密封并在120℃加热过夜。真空蒸发溶剂并将残余物通过制备性HPLC来纯化得到56mg(57％)I-47，其为白色固体。
实施例12
N2-[(1S)-1-(1H-苯并咪唑-5-基)乙基]-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-5)
步骤1:在室温，向(R)-2-甲基丙-2-亚磺酰胺(6.9g,57.31mmol)和Ti(OEt)4(26.1g,114.62mmol)于THF(200mL)中的溶液中添加82(14g,57.31mmol)。将反应混合物加热至75℃过夜。MS分析表明122完全转化，将混合物冷却至室温，然后冷却至-48.0℃。滴加三仲丁基硼氢化锂(L-selectride)((172mL,1M的THF溶液)。温热反应混合物。当还原结束时，将反应混合物冷却至0℃并滴加MeOH，直到不再观察到气体放出。将粗制反应混合物倒在等体积的快速搅拌盐水中。将所得悬浮液用塞过滤并将滤饼用EtOAc洗涤。将滤液用盐水洗涤，并将盐水层用EtOAc萃取，干燥(Na2SO4)并减压蒸发。将残余物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH(20:1)洗脱)来纯化得到10g(50％)(S)-2-甲基-N-((1S)-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)丙-2-亚磺酰胺(124)，其为黄色油状物。
步骤2:向124(3g,8.58mmol)于EtOAc(10mL)中的溶液中滴加HCl/EtOAc(25mL,2M于EtOAc中)并在室温搅拌。当反应结束时，过滤反应混合物，收集固体并用EtOAc洗涤得到2g(83％)(1S)-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙胺盐酸盐(126)，其为白色固体。
步骤3:在5mL微波管中装入126(208.2mg,0.85mmol)、53(100mg,0.42mmol)和n-BuOH(1.2mL)，然后加入DIPEA(0.371mL)，将所述管密封并在油浴中加热至140℃，保持18小时。将反应混合物冷却并用EtOAc(50mL)稀释。加入水(25mL)和一些MeOH(1mL)并分离各相。将有机层用盐水(25mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将残余物通过HPLC和SFC来纯化得到34.4mg(22％)I-5，其为白色固体:SFC RT＝0.72min。
实施例13
N2-[(4-氯-1H-苯并咪唑-5-基)甲基]-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-3)
步骤1:将4-溴-3-氯-苯-1,2-二胺(CASRN1008361-80-5,27g,0.1221mol)和甲酸(80mL)的混合物回流加热1.5小时。反应结束后，加入10％NaOH直到溶液呈碱性。过滤所得固体并用水充分洗涤，然后抽吸干燥过夜得到22g(78％)5-溴-4-氯-1H-苯并咪唑(128)，其为浅黄色固体，将其不经额外纯化即使用。
步骤2:向128(22g,0.095mol)于无水THF(660mL)中的溶液中添加3,4-二氢-2H-吡喃(24g,0.286mol)和樟脑磺酸(2.2g,0.00948mol)，将溶液回流加热16小时。浓缩所得混合物，并将所得残余物通过SiO2色谱法(用20％EtOAc/石油醚洗脱)来纯化得到27g(90％)5-溴-4-氯-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑(130)，其为浅黄色固体。
步骤3:将130(26g,0.082mol)于无水DMF(550mL)中的溶液脱气10分钟。向所述溶液中依次添加Pd2(dba)3(1.5g,0.00164mol)、dppf(1.8g,0.00328mol)和Zn(CN)2(9.19g,0.0657mol)。脱气15分钟后，将所得溶液加热至110℃，保持6小时。反应结束后，将反应混合物用垫过滤。将所述垫用EtOAc充分洗涤。将滤液用水和饱和盐水溶液洗涤。干燥(Na2SO4)有机相，过滤并真空浓缩得到15g(70％)4-氯-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑-5-甲腈(132)，其为浅黄色固体。
步骤4:向132(15g,0.057mol)于用氨气饱和的MeOH(500mL)中的溶液中添加兰尼镍(75g)。将所得混合物在5kg/cm2氢气压搅拌16小时。将混合物用垫过滤以除去催化剂。浓缩所得滤液并将粗制产物通过SiO2色谱法(用5％MeOH/CHCl3洗脱)来纯化得到6.8g(46％)(4-氯-1-四氢吡喃-2-基-苯并咪唑-5-基)甲胺(134)，其为黄色固体:在室温的1H-NMR-(400MHz,DMSO-d6)δ1.6-1.75(m,3H),1.96-2.02(m,2H),2.16-2.24(m,1H),3.72-3.77(m,1H),3.97-4.00(m,1H),4.1-4.2(br,2H),5.7-5.73(dd,1H),7.0(br,2H),7.47(br,1H),7.74(br,1H)和8.53(s,1H)。
步骤5:在5mL微波管中装入134(169.1mg,0.63648mmol,1.5当量)、53(100mg,0.42432mmol)和n-BuOH(1.2mL)。加入DIPEA(5当量,0.371mL276,2.1216mmol)，将所述管密封并加热至140℃，保持过夜。将反应混合物冷却至室温，过滤并真空浓缩得到约200mg粗制油状物，将其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤6:将来自步骤5的物质吸收在MeOH(4.32mL)中，加入p-TsOH.H2O(73.8mg；0.42432mmol)。将混合物在密封小瓶中加热至100℃，保持过夜。减压蒸发溶剂并将残余物通过制备性HPLC纯化得到45.4g(28.1％)of I-3，其为黄色固体。
5-氯-N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-106)是类似制备的，不同的是用57代替53，在步骤5中用TEA代替DIPEA，并且在1:1MeOH/DCM中除去THP。将粗制混合物通过反相HPLC来纯化得到3.3mg(1.6％)I-106。
N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环戊基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-107)是用与在I-106制备中所使用的那些操作类似的操作制备的，不同的是用67代替57。
N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环丁基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-108)是用与在I-106制备中所使用的那些操作类似的操作制备的，不同的是用65代替57。
N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-(四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-109)是用与在I-106制备中所使用的那些操作类似的操作制备的，不同的是用83代替57。
N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟嘧啶-2,4-二胺(I-117)是用与在I-106制备中所使用的那些操作类似的操作制备的，不同的是用55代替57。
实施例14
N2-[(1S)-1-(1H-苯并咪唑-5-基)乙基]-N4-(5-苄基氧基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-21)
步骤1:在2mL微波小瓶中装入69(155mg,0.41mmol)、136(151.2mg,0.62mmol)、DIPEA(0.358mL)和n-BuOH(1mL)，密封并在油浴中加热至140℃，保持过夜。将反应混合物冷却，然后在EtOAc(50mL)和水(25mL)之间分配。将有机层用水(2x25mL)洗涤。将水层用EtOAc(2x20mL)回提并将合并的有机物用盐水(50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩得到粗制油状物，将其不经进一步纯化即用于下一步骤:MS(ESI)m/z＝427.2[(M-THP)+1]+。
步骤2:在小瓶中装入来自步骤1的物质、MeOH(4mL)和p-TsOH.H2O(35.7mg,0.206mmol)，密封并加热至100℃。2天后，将反应混合物浓缩并吸收在EtOAc(50mL)中，用水洗涤。将有机层用EtOAc回提并合并有机物，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将残余物通过HPLC来纯化得到7.5mg(4.3％)I-21，其为灰白色固体。
实施例15
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-[(4-氟-1H-苯并咪唑-5-基)甲基]嘧啶-2,4-二胺(I-29)
步骤1:向1,3-二氟-2-硝基-苯(30g,0.188moles)于EtOH(300mL)中的溶液中加入25％氨水溶液(300mL)，将所得混合物加热至75℃，保持16小时，然后冷却并真空浓缩。将残余物溶解在EtOAc中，用水和盐水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩得到25g(85％)3-氟-2-硝基-苯基胺(138)，其为棕色固体，将其不经任何进一步的纯化即使用。
步骤2:在0℃，向138(25g,0.160mol)于DMF(250mL)中的溶液中滴加NBS(28.5g,0.160mol)的DMF(100mL)溶液。将所得混合物在0℃搅拌1小时，然后在室温再搅拌一小时。反应结束后，将混合物倒入水(4L)中并用EtOAc萃取。将合并的有机层用水和盐水溶液洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩得到34g(90％)4-溴-3-氟-2-硝基-苯基胺(140)，其为黄色固体，将其不经进一步的纯化即使用。
步骤3:向140(34g,0.144mol)和EtOH(510mL)的溶液中添加SnCl2.2H2O(130.1g,0.576mol)，将所得混合物回流加热4小时。反应结束后，真空除去溶剂。将残余物吸收在水中并用10％NaHCO3使其呈轻微碱性。过滤所得固体并用EtOAc充分洗涤。分离出水层并用EtOAc萃取。干燥(Na2SO4)合并的有机层，过滤并真空浓缩得到25g(84％)4-溴-3-氟-苯-1,2-二胺(142)，其为黄色固体，将其不经进一步的纯化即使用。
步骤4:将142(25g,0.121mol)和甲酸(75mL)的混合物回流加热1.5小时。反应结束后，将反应混合物冷却并用10％NaOH使其呈碱性。过滤所得固体并用水洗涤。抽吸干燥过夜得到24g(92％)5-溴-4-氟-1H-苯并咪唑(144)，其为浅黄色固体，将其不经进一步的纯化即使用。
步骤5:向144(24g,0.111mol)于无水THF(720mL)中的溶液中添加3,4-二氢-2H-吡喃(28.1g,0.334mol)和樟脑磺酸(2.6g,0.011mol)，然后回流加热16小时。将所得混合物浓缩并将残余物通过SiO2色谱法(用20％EtOAc/石油醚洗脱)来纯化得到26g(78％)5-溴-4-氟-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑(146)，其为浅黄色油状物:1H-NMR(400MHz,RT,DMSO-d6):δ1.57-1.63(m,2H),1.70-1.74(m,1H),1.91-2.04(m,2H),2.15-2.19(m,1H),3.73-3.77(m,1H),3.96-4.03(m,1H),5.68-5.71(dd,1H),7.50-7.53(d,2H)和8.51(s,1H)；。MS(ESI):m/z＝301.0[M+1]+。
步骤6:在-78℃，向146(10g,0.034mol)于无水THF(100mL)中的溶液中滴加1.6M正丁基锂的己烷溶液(23mL,0.0374mol)。在-78℃搅拌45分钟后，滴加DMF(5g,0.068mol)的THF(20mL)溶液。在-78℃1小时后，通过添加水将反应混合物缓慢淬灭。分离水相并用EtOAc萃取，将合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用15％EtOAc/石油醚洗脱)来纯化得到7.7g(93％)4-氟-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑-5-甲醛(148)，其为黄色固体。
步骤7:向148(7.7g,0.031mol)于无水MeOH(120mL)中的溶液中添加NaOAc(3.31g,0.0372摩尔)和羟胺盐酸盐(2.57g,0.0372mol)。将反应混合物在室温搅拌16小时。真空浓缩溶液，将残余物吸收在水中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物依次用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩得到5.8g(71％)4-氟-1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑-5-甲醛肟(150)，其为白色固体，将其不经进一步的纯化即使用。
步骤8:向150(5.8g,0.022mol)于MeOH(100mL)中的溶液中添加锌粉(2.9g,0.044mol)和甲酸铵(2.8g,0.044mol)。将所得混合物加热至75℃，保持2小时。用垫过滤混合物。浓缩滤液并将粗制产物通过SiO2色谱法(用5％MeOH/DCM洗脱)来纯化得到2.6g(47％)(4-氟-1-四氢吡喃-2-基-苯并咪唑-5-基)甲胺(152)，其为黄色固体:1H-NMR(400MHz,RT,CDCl3):δ1.66-1.80(m,3H),1.92-1.96(m,1H),2.06-2.14(m,2H),3.68-3.74(m,1H),4.23-4.26(m,1H),4.40(br,2H),5.49-5.52(dd,1H),6.94-6.99(dd,1H),7.18-7.23(t,1H),and7.37-7.39(d,1H)；MS(ESI)m/z＝250.2[M+1]+。
步骤9:在5mL微波小瓶中装入152(1.5当量,158.7mg,0.65mmol)、53(100mg,0.42mmol)和正丁醇(1.2mL)。向所述溶液中添加DIPEA(0.371mL)，将所述管密封并将反应混合物加热至140℃，保持过夜。将反应混合物冷却至室温，过滤并真空浓缩。将粗制油状物不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤10:将来自步骤9的粗制油状物吸收在MeOH(4.32mL)中，加入p-TsOH.H2O(73.8mg)。将混合物加热至100℃，保持过夜。真空蒸发溶剂并将残余物通过制备性HPLC来纯化得到25.6mg(16.6％)I-29，其为白色固体。
实施例16
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-[(6-甲基-1H-苯并咪唑-5-基)甲基]嘧啶-2,4-二胺(I-30)
步骤1:在室温和氮气中，向搅拌的6-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(7.9g,50mmol,CASRN952511-47-6)和THF(85mL)的溶液中添加3,4-二氢-2H-吡喃(34g,0.4mol)和p-TsOH.H2O(0.9g,5mmol)，将所得混合物在75℃加热3小时。将反应混合物冷却至室温，用EtOAc(200mL)稀释并依次用饱和Na2CO3水溶液(300mL)和盐水(300mL)洗涤。干燥(Na2SO4)有机相，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用MeOH/DCM梯度(0至5％MeOH)洗脱)来纯化得到7.2g(60％)6-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(176)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝242[M+1]+。
步骤2:将176(4.6g,19mmol)兰尼镍(>15eq)/7N NH3溶液于MeOH(10mL)中的悬浮液在氢气中在25℃搅拌2小时。过滤混合物并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用MeOH/DCM梯度(3至5％MeOH)洗脱)来纯化得到3.2g(69％)(6-甲基-1-四氢吡喃-2-基-苯并咪唑-5-基)甲胺(178)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝246[M+1]+。
步骤3:在5mL微波小瓶中装入178(208.2mg,0.85mmol)、53(100mg,0.42mmol)和n-BuOH(1.2mL)。加入DIPEA(0.37mL)，将所述管密封并在油浴中加热至140℃，保持18小时。然后将反应混合物冷却并在水(10mL)和EtOAc(50mL)之间分配。分离各层并将有机相用盐水(25mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩得到粗制橙色固体，将其不经进一步的纯化即使用。
步骤4:在微波管中，将来自步骤3的粗制物吸收在MeOH(8.62mL)中，加入p-TsOH.H2O(30mg)，将所述小瓶密封并在搅拌下加热至100℃，保持16小时。加入额外的p-TsOH.H2O(30mg)，并将反应混合物在110℃搅拌3天。除去MeOH并将粗制物吸收在EtOAc(100mL)中，过滤。将NaHCO3(50mL)加至滤液中并分离各层，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将来自反应混合物的滤液悬浮在MeOH中，超声处理，然后过滤，将所得滤液与其它有机物合并并浓缩得到粗制橙色固体。将残余物通过制备性HPLC来纯化得到72.2mg(47％)I-30，其为白色固体；MS(ESI)m/z＝361.3[M+1]+。
实施例17
N2-[(1S)-1-(1H-苯并咪唑-5-基)丙基]-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-6)
步骤1:向1H-苯并咪唑-5-羧酸(1.62g,10mmol)于THF(20mL)中的溶液中加入3,4-二氢-2H-吡喃(2mL)和樟脑磺酸(100mg,0.42mmol,0.04当量)。将混合物在氩气中回流24小时。浓缩并经色谱法得到1.5g(60％)1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸(166)，其为浅红色固体。
步骤2:向166(170mg,0.69mmol)于DCM(5mL)中的溶液中加入EDC.HCl(190mg,1mmol)、HOBt(160mg,1mmol)、TEA(0.3mL)和N-甲氧基甲胺盐酸盐(100mg,1mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。将混合物倒入水中，用EtOAc萃取，并依次用H2O和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法来纯化得到140mg(85％)1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲氧基-甲基-酰胺(168)，其为浅黄色油状物。
步骤3:氩气中，向冷却至0℃的168(70mg,0.24mmol)和THF的溶液中添加EtMgBr(0.72mL,1M溶液)。将混合物在0℃搅拌2小时，然后小心加入NH4Cl溶液。将混合物用EtOAc萃取，依次用H2O和盐水洗涤并干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法来纯化得到45mg(72％)1-[1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑-5-基]-丙-1-酮(170)，其为无色油状物。
步骤4:向170(100mg,0.39mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中加入羟胺盐酸盐(54mg,0.78mmol)和NaOAc(100mg,1mmol)。将混合物回流过夜。将混合物用EtOAc萃取，依次用H2O和盐水洗涤并干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩得到95mg(90％)1-[1-(四氢-吡喃-2-基)-1H-苯并咪唑-5-基]-丙-1-酮肟(172)，其为浅黄色油状物。
步骤5:向172(30mg,0.11mmol)于THF(3mL)中的溶液中添加兰尼镍(50mg)，将混合物在室温搅拌过夜，过滤并真空浓缩。通过HPLC纯化得到10mg(35％)1-(1-四氢吡喃-2-基苯并咪唑-5-基)丙-1-胺(174)，其为无色油状物:1HNMR(400MHz,CDCl3):δ7.98(m,1H),7.64(m,1H),7.40(m,1H),7.14-7.36(m,1H),5.40-5.45(m,1H),4.06(m,1H),3.85(m,1H),3.70(m,1H),2.02-2.10(m,3H),1.62-1.72(m,8H),0.77-0.84(m,3H)；MS(ESI+)m/z＝260[M+1]+。
步骤6:在微波小瓶中装入174(165.1mg)、53(100mg,0.42432mmol)和n-BuOH(1.2mL)，然后加入DIPEA(0.37mL)，将所述管密封并将反应混合物在油浴中至140℃，保持18小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并真空浓缩得到粗制油状物，将其不经进一步纯化即用于下一步骤中。
步骤7:将来自步骤6的粗制物吸收在MeOH(3mL)中并加入p-TsOH.H2O(73.8mg)，将小瓶密封并加热至100℃，保持过夜。减压蒸发溶剂并将残余物通过制备性HPLC纯化，随后经SFC色谱法分离对映异构体，得到7.9mg(5％)I-6，其为白色固体:SFC保留时间:0.84min。所述SFC纯化式用Chiralcel OJ(21.2x250mm,5micron)进行的，采用70mL/min的35％MeOHw/0.1％NH4OH，并且在40℃压力为100巴。
在最终SFC步骤中分离出N2-[(1R)-1-(1H-苯并咪唑-5-基)丙基]-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-43)，其为白色固体(8.7mg):SFC保留时间:1.06min。
实施例18
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((4-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-16)
步骤1:在有效搅动的条件下，在维持温度在0-10℃的同时，向冷的(0℃)2-溴-6-硝基甲苯(43.2g,0.2mol)于浓H2SO4(600mL)中的溶液中分小份添加HNO3(37g,0.24mol)。在搅拌过夜的条件下，使反应混合物缓慢温热至室温，然后倒入碎冰(1600g)中。过滤收集固体，用水充分洗涤并风干。将粗制物用EtOAc/己烷重结晶得到40g(77％)1-溴-2-甲基-3,4-二硝基苯(154)，其为浅白色固体:MS(ESI)m/z＝262[M+1]+。
步骤2:将154(40g,154mmol)、SnCl2.2H2O(208g,920mmol)、EtOAc(300mL)和EtOH(150mL)的混合物加热至80℃，保持12小时，冷却至室温，倒入碎冰(2Kg)中并用固体NaHCO3将pH调节至pH7-8。过滤固体并用EtOAc洗涤。将滤液用萃取三次。将合并的萃取物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用EtOAc/己烷梯度(10至50％EtOAc)洗脱)来纯化得到28g(91％)4-溴-3-甲基-1,2-苯二胺(156)，其为棕色油状物:MS(ESI)m/z＝202[M+1]+。
步骤3:将156(28g,140mmol)、甲酸(240mL)和37％浓HCl(400mL)的混合物加热至60℃，保持12小时，在冰-水浴中冷却并用28％浓NH4OH将pH缓慢调节至8-9。过滤收集固体，用水洗涤并风干得到25g(98％)5-溴-4-甲基-1H-苯并[d]咪唑(158)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝213[M+1]+。
步骤4:惰性气体中，将158(21g；99mmol)、Zn(CN)2(23.2g；198mmol)、Pd(dppf)Cl2(6.4g；9.9mmol)和锌(258mg；4mmol)于无水DMF(150mL)中的混合物在120℃加热2小时。将反应混合物用垫过滤，并将所述垫用EtOAc洗涤。将有机物用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空蒸发。将粗制产物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH梯度(0至10％MeOH)洗脱)来纯化得到8.3g(53％)4-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(160)，其为棕色固体:MS(ESI)m/z＝158[M+1]+。
步骤5:在室温和氮气中，向搅拌的160(8.3g,52.5mmol)和THF(100mL)的溶液中加入3,4-二氢-2H-吡喃(35g,420mmol)和p-TsOH.2H2O(0.9g,5.3mmol)并将反应混合物在75℃加热4小时。将混合物冷却至室温，用EtOAc稀释并依次用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。干燥有机萃取物(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用MeOH/DCM梯度(0至5％MeOH)洗脱)来纯化得到9.8g(77％)4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(162)，其为浅黄色固体:MS(ESI)m/z＝242[M+1]+。
步骤6:将162(9.8g,52.5mmol)、MeOH(NH3/MeOH)和兰尼镍(>15eq)的混合物在氢气中在25℃搅拌2小时。过滤混合物并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用MeOH/DCM梯度(0％至10％MeOH)洗脱)来纯化得到7.0g(70％)(4-甲基-1-四氢吡喃-2-基-苯并咪唑-5-基)甲胺(164)，其为淡黄色油状物:LC/MS:m/z＝246[M+1]+。
步骤7:在微波管中装入164(156.1mg,0.64mmol)、53(100mg,0.42mmol)、n-BuOH(1.2mL)，加入DIPEA(0.371mL)，将所述管密封并加热至140℃，保持17小时。将反应混合物用水(2mL)和EtOAc(5mL)稀释。加入水(25mL)和额外的EtOAc(50mL)，并分离各相。用Na2SO4干燥管过滤有机层，过滤并浓缩。将所得粗制油状物不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤8:将来自步骤7的粗制物吸收在MeOH(4.32mL)中，加入p-TsOH.2H2O(36.9mg)。将反应混合物在密封小瓶中在100℃加热过夜，冷却并真空浓缩。将残余物通过制备性HPLC来纯化得到58mg(38％)I-16，其为白色固体。
实施例19
(S)-N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-8)
步骤1:在容器中装入53(665mg,2.82mmol)、1-(1H-吲哚-5-基)乙胺己二酸盐(1.45g mg,6.20mmol,CASRN1282097-87-3)、DIPEA(7.4mL)和n-BuOH(57mL)，密封并在120℃加热12天。将反应混合物冷却并用EtOAc稀释。将有机层依次用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制物通过反相HPLC纯化法来纯化得到250.0mg(24.7％)外消旋N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(180)，其为白色固体。
外消旋I-8是通过手性HPLC用SFC纯化法拆分的。收集第一个洗脱剂峰得到104.9mg(41.9％)I-8(S)-N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(104.9mg,41.9％)，其为白色固体:SFC LC-MS,RT＝1.06min。
第二个洗脱剂峰得到105.0mg(42.0％)(R)-N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-60,105.0mg,42.0％)，其为白色固体:SFC LC-MS,RT＝1.69min。
SFC手性色谱法是如下进行的：使用Chiralcel OJ(21.2x250mm,5微米)，用含有0.1％NH4OH的35％MeOH以70mL/min洗脱，压力为100巴和温度为40℃。
实施例20
(S)-N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-7)
步骤1:将53(1.98g,16.07mmol,CASRN175137-46-9)、2,4-二氯-6-甲基-嘧啶(2.62g,16.07mmol,CASRN5424-21-5)、DIPEA(5.7mL,32.15mmol)和无水EtOH(50mL)的混合物在70℃和氮气中搅拌3天。将反应混合物冷却，倒入水(约700mL)中并在室温搅拌过夜，得到析出物。过滤固体，用额外的水洗涤并高真空泵干得到2.037g(59％)固体2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基-嘧啶-4-胺(185):1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.12(s,1H),10.08(s,1H),7.04(br s,1H),5.93(br s,1H),2.27(s,3H),1.93-1.84(m,1H),0.96–0.88(m,2H),0.70–0.64(m,2H)。
步骤2:I-7是按照实施例19的操作制备的，不同的是用185(CASRN5424-21-5)代替53:SFC LC-MS,RT＝1.09min。
N2-((4-氯-1H-吲哚-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-19)是按照实施例19的操作制备的，不同的是在步骤1中，用185和5-(氨基甲基)-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯代替2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺和1-(1H-吲哚-5-基)乙胺己二酸盐，得到I-19。
N2-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-10)是类似制备的，不同的是用28代替5-(氨基甲基)-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯作为起始物质，得到N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基-N2-[(1-四氢吡喃-2-基苯并咪唑-5-基)甲基]嘧啶-2,4-二胺(182):1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ8.03(s,1H),7.80–7.70(m,1H),7.55–7.43(m,1H),7.30(dd,J＝13.7,8.4Hz,1H),6.05(br s,1H),5.83(br s,1H),5.58-5.37(m,2H),4.71(t,J＝6.1Hz,2H),4.11–4.06(m,1H),3.73(t,J＝10.8Hz,1H),2.63(br s,2H),2.23(d,J＝4.4Hz,3H),2.18-2.04(m,4H),1.84-1.60(m,5H),1.09(s,2H)；MS(ESI)m/z＝445.3[M+1]+。
将182(230.0mg,0.52mmol)和p-TsOH.H2O(36.0mg,0.20mmol)于无水MeOH(9.4mL)中的混合物在100℃搅拌6天。将反应混合物冷却并真空浓缩。将粗制物用EtOAc稀释。将有机层依次用饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过反相HPLC来纯化得到94.9mg(50.9％)I-10，其为白色固体。
(S)-N2-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-4)是按照用于制备I-10的操作制备的，不同的是用126代替28作为起始物质。除去吡喃保护基得到I-4。
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-54)是按照用于制备I-10的操作制备的，不同的是用1H-吲哚-4-基甲胺代替5-(氨基甲基)-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯。经反相HPLC纯化法得到I-54的甲酸盐。
实施例21
(S)-N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-31)
步骤1:2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-甲基-嘧啶-4-胺(184)是用实施例20中描述的操作制备的，不同的是在步骤1中用2,4-二氯-5-甲基-嘧啶代替2,4-二氯-6-甲基-嘧啶:1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.17(s,1H),9.23(s,1H),7.97(s,1H),6.28(s,1H),2.12(s,3H),1.97–1.85(m,1H),0.93(d,J＝7.4Hz,2H),0.69(d,J＝4.6Hz,2H)；MS(ESI)m/z＝250.0.2[M+1]+。
步骤2:I-31是用实施例19中描述的操作制备的，不同的是用184代替89:SFC LC-MS,RT＝0.73min.
N2-(1H-苯并咪唑-5-基甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-甲基-嘧啶-2,4-二胺(I-32)是按照实施例20中用于制备I-10的操作制备的，用2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-甲基-嘧啶-4-胺代替2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-4-甲基-嘧啶-4-胺。
实施例22
(S)-N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-18)
步骤1:将5-环丙基-1H-吡唑-3-胺(1.42g,11.5mmol)、2,4-二氯-6-(三氟甲基)嘧啶(2.50g,11.5mmol)、DIPEA(4.05mL,23.0mmol)和无水EtOH(35mL)的混合物在氮气中在70℃搅拌22小时。真空浓缩反应混合物。将残余物用EtOAc稀释并将有机层依次用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。用DCM研磨得到1.80g(51.5％)2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(186)，其为白色固体:1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ12.35(br d,J＝30.2Hz,1H),10.97(s,1H),8.14(s,0.50H,旋转异构体),7.13(s,0.50H,旋转异构体),6.38(s,0.50H,旋转异构体),5.73(s,0.50H,旋转异构体),1.91(s,1H),0.98–0.90(m,2H),0.70(q,J＝5.5Hz,2H)；MS(ESI)m/z＝304.2/306.2[M+1]+。
步骤2:外消旋N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺(188)是按照实施例19中的操作制备的，不同的是用186代替53:MS(ESI)m/z＝428.2[M+1]+。
步骤3:外消旋188(400.0mg,0.936mmol)是用SFC纯化法通过手性色谱分离拆分的。收集第二个洗脱剂峰得到143.3mg(35.8％)I-18，其为白色固体:SFC LC-MS,RT＝1.96min。
N2-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-11)是用实施例20中描述的操作按照用于制备I-10的操作制备的，不同的是用186代替53作为起始物质。
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-41)是按照实施例20中用于I-54的操作制备的，不同的是用1H-吲哚-4-基甲胺代替5-(氨基甲基)-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯:MS(ESI)m/z＝414.2[M+1]+。
实施例23
N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-((反式)-2-苯基环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-24)
步骤1:向装有77(156mg,0.5mmol)的n-BuOH(5mL)溶液的管中添加126(184mg,0.75mmol)。滴加DIPEA(0.26mL,1.5mmol)，将所述管用盖子盖住并置于座式振摇器(shaker block)中，加热至120℃，保持20小时。真空浓缩溶剂。使粗制残余物在EtOAc(5mL)和水(3mL)之间分配。除去有机层并真空浓缩。将粗制N4-(5-((反式)-2-苯基环丙基)-1H-吡唑-3-基)-N2-((1S)-1-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)嘧啶-2,4-二胺(190)不经进一步纯化即用在下一步骤中：MS(ESI)m/z＝521.4[M+1]+。
步骤2:向190于MeOH(5mL)中的溶液中加入p-TsOH.H2O(258mg,1.5mmol)。将反应混合物在座式振摇器中在60℃加热18小时。真空浓缩溶剂。将粗制残余物在DMF(2mL)中稀释并过滤以除去未溶的固体。真空浓缩剩余的液体。将残余物通过反相HPLC来纯化得到9.6mg(4％)I-24。
下面的产物是用实施例23中描述的操作制备的，使用下表中详细描述的物质。
N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-((反式)-2-(2-氟苯基)环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-23)、(S)-N2-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-环丁基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-1)、(S)-N2-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-环戊基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-2)、N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-(四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-44)和(S)-N2-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-(环丙基甲基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-45)是类似制备的，分别从作为吡唑部分的5-(反式-2-(2-氟苯基)环丙基)-1H-吡唑-3-胺,5-环丁基-1H-吡唑-3-胺(CASRN326827-21-8)、5-环戊基-1H-吡唑-3-胺(CASRN264209-16-7)、5-(四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-胺(CASRN1028843-21-1)和5-(环丙基甲基)-1H-吡唑-3-胺(CASRN852443-64-2)开始。
N2-(1H-苯并咪唑-5-基甲基)-N4-[5-[(反式)-2-苯基环丙基]-1H-吡唑-3-基]嘧啶-2,4-二胺(I-27)是类似制备的，从91开始并与(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(28)缩合，随后按照实施例1步骤6和7的操作除去吡喃。
实施例24
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-((反式)-2-苯基环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-57)
向77(156mg,0.5mmol)于n-BuOH(5mL)中的溶液中加入(1H-吲哚-4-基)甲胺(110mg,0.75mmol,CASRN3468-18-6)，然后滴加DIPEA(0.26mL,1.5mmol)。将反应混合物置于座式振摇器中并加热至130℃，保持20小时。真空浓缩溶剂，然后将粗制残余物在DCM(5mL)和MeOH(5mL)中稀释，然后再次真空浓缩溶剂。将粗制残余物在DMF(2mL)中稀释并过滤以除去未溶的固体。真空浓缩所得液体。将残余物通过反相HPLC来纯化得到121.4mg(82％)I-57。
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4(5-(环丙基甲氧基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-42)是类似制备的，不同的是77被(2-氯-嘧啶-4-基)-(5-环丙基甲氧基-1H-吡唑-3-基)-胺代替，和(1H-吲哚-4-基)甲胺被116代替。
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-环丁基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-36)是类似制备的，不同的是77被65代替。
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-环戊基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-50)是类似制备的，不同的是77被67代替。
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-51)是类似制备的，不同的是77被89代替。
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-(环丙基甲基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-48)是类似制备的，不同的是77被61代替。
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-56)是类似制备的，不同的是77被2-氯-N-(5-甲基吡唑-3-基)-4-嘧啶胺(CASRN543712-91-0)代替。
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-异丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-58)是类似制备的，不同的是77被59代替。
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-5-氯-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-49)是类似制备的，不同的是77被57代替。
实施例25
N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-14)
步骤1:向89(133mg,0.5mmol)于n-BuOH(5mL)中的溶液中加入126(184mg,0.75mmol)，然后滴加DIPEA(0.26mL,1.5mmol)。将反应混合物放置在座式振摇器中并加热至120℃，保持60小时。真空浓缩溶剂。将粗制残余物用EtOAc(5mL)和水(3mL)稀释。移出有机层并真空浓缩。将粗制反应混合物不经进一步纯化即用于下一步骤中：MS(ESI)m/z＝475.4[M+1]+。
步骤2:向来自步骤1的粗制产物溶于MeOH(5mL)中的溶液中添加p-TsOH.H2O(258mg,1.5mmol)。将反应混合物在座式振摇器中在60℃放置18小时。真空浓缩溶剂。将粗制残余物在DMF(2mL)中稀释并过滤以除去未溶固体。真空浓缩滤液并将残余物通过反相HPLC来纯化得到3.3mg(2％)I-14:
实施例26
(S)-N2-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-5-氯-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-46)
步骤1:在微波小瓶中，向57(135mg,0.5mmol)于n-BuOH(3mL)中的溶液中添加126(184mg,0.75mmol)，然后滴加DIPEA(0.26mL,1.5mmol)。将所述小瓶用橡胶隔片密封并在微波中在160℃加热90分钟。减压蒸发溶剂并将粗制残余物吸收在DCM(5mL)和MeOH(5mL)中，再次真空浓缩所述溶剂。将残余物在DMF(2mL)中稀释并过滤以除去任意未溶的固体。真空浓缩滤液。将残余物通过反相HPLC来纯化得到13mg(6％)I-46。
实施例27
1-(4-((4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶-2-基氨基)甲基)-1H-吲哚-3-基)-2,2,2-三氟乙酮(I-37)
步骤1:在小瓶中装入53(300mg,1.27mmol)、(1H-吲哚-4-基)甲胺(279mg,1.903.20mmol,CASRN3468-18-6)、DIPEA(0.67mL)和n-BuOH(3mL)，密封并在140C加热72小时。真空浓缩反应混合物，使残余物在EtOAc和H2O之间分配。将水层用EtOAc萃取一次。干燥(Na2SO4)合并的有机萃取物，过滤并真空浓缩。将粗制产物直接溶解在TFA(3mL)中，并将混合物在70℃加热2小时。减压浓缩反应混合物并将残余物通过制备性HPLC纯化得到38.3mg(7％)I-37。
实施例28
(S)-N2-(1-(1H-吲哚-6-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-34)
按照实施例19中的操作制备标题化合物，不同的是用(1S)-1-(1H-吲哚-6-基)乙胺(CASRN3468-17-5)代替1-(1H-吲哚-5-基)乙胺己二酸盐作为起始物质.
实施例29
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((3-甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-25)
步骤1:在容器中装入5-溴-3-甲基-1H-吲哚(1.06g,5.05mmol)、氰化亚铜(I)(542.83mg,6.0608mmol)和脱气NMP(10mL)，密封并在搅拌下加热至200℃，保持5小时，然后在110℃加热16小时。将冷却的反应混合物用EtOAc稀释并将有机层依次用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用EtOAc/庚烷梯度(0至100％EtOAc)洗脱)来纯化得到640mg(81.1％)3-甲基-1H-吲哚-5-甲腈(192):1H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.22(br s,1H),7.91(s,1H),7.42–7.35(m,2H),7.07(s,1H),2.32(s,3H)。
步骤2:将兰尼镍(湿的,1.0g)加至搅拌的192(220.0mg,1.41mmol)于2.0M氨的MeOH溶液(10mL)中的溶液中。将反应混合物在氢气囊条件下在1大气压和在室温氢化3天。将反应混合物用垫过滤并将所述垫用MeOH和水充分冲洗。真空除去滤液中的挥发性溶剂。将滤液的水相用EtOAc萃取三次。干燥(Na2SO4)合并的有机萃取物，过滤并真空浓缩。用DCM/庚烷结晶得到219.1mg(97％)(3-甲基-1H-吲哚-5-基)甲胺(194)，其为白色固体:1HNMR(400MHz,CDCl3):δ7.87(br s,1H),7.49(s,1H),7.29(d,J＝8.3Hz,1H),7.12(d,J＝8.3Hz,1H),6.95(s,1H),3.95(s,2H),2.31(s,3H),1.59(br s,2H)。
步骤3:标题化合物I-25是用实施例19步骤1中描述的操作制备的，不同的是用194代替1-(1H-吲哚-5-基)乙胺己二酸盐作为起始物质。
实施例30
N2-((1H-吲唑-4-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-59)
步骤1:将4-溴-1H-吲唑(0.5g,2.53mmol)、p-TsOH.H2O(50mg,0.25mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(0.64g,7.61mmol)于THF(20mL)中的混合物脱气，然后回流加热过夜。除去溶剂后，使残余物在DCM(300mL)和水(50mL)之间分配。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。将粗制残余物通过SiO2色谱法(用DCM/MeOH梯度(0.5至1％MeOH)洗脱)来纯化得到570mg(81％)4-溴-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(196)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝282.2[M+1]+。
步骤2:氩气中，向196(0.57g,2.05mmol)、Zn(CN)2(264mg,2.25mmol)于NMP(6mL)中的混合物中加入(Ph3P)4Pd(0)(356mg,0.31mmol)。将混合物在85℃加热过夜，冷却并在EtOAc(300mL)和H2O(50mL)之间分配。分离有机层并用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用1％MeOH/DCM洗脱)来纯化得到430mg(75％)1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲腈(198)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝228[M+1]+。
步骤3:向198(430mg,1.89mmol)于7N NH3的MeOH溶液(20mL)中的溶液中加入兰尼镍(50mg)，将混合物在氢气中(1atm)在室温搅拌过夜。过滤除去兰尼镍。浓缩滤液得到340mg(79％)(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲胺(199)，其为黄色糖浆状物:MS(ESI)m/z＝232.2[M+1]+。
步骤4:在管中装入53(350mg,1.47mmol)、199(340mg,1.47mmol)和DIPEA(5mL)/IPA(10mL)，脱气、密封并在120℃加热48小时。真空蒸发溶剂。将粗制产物通过SiO2色谱法来纯化得到600mg(94％)N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(200)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝431.2[M+1]+。
步骤5:向200(215mg,0.5mmol)于MeOH(5mL)和水(1mL)中的溶液中添加p-TsOH·H2O(95mg,0.5mmol)，将混合物在密封管中在80℃加热过夜。真空蒸发溶剂。将残余物通过制备性HPLC来纯化得到110mg(63％)I-59，其为白色固体。
实施例31
N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-((S)-2,2-二氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-61)和N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-((R)-2,2-二氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-62)
步骤1:在小瓶中装入外消旋81(125mg,0.46mmol)、126(169mg,0.69mmol)、DIPEA(0.28mL)和n-BuOH(1.5mL)，密封并在125℃加热96小时。减压浓缩反应混合物。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化，然后经手性SFC色谱法得到相应的2个非对映异构体:N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-((S)-2,2-二氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-61,20.4mg,11％)和N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-((R)-2,2-二氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-62,13.9mg,8％)。
实施例32
2-(((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)(4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶-2-基)氨基)乙醇(I-63)
步骤1:向126(1.7g,7.3mmol)于THF(35mL)中的溶液中添加1M NaOH水溶液(37mL)，将反应混合物冷却至0℃并加入一缩二碳酸二叔丁酯(1.7g,7.6mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌16小时，然后加入额外的一缩二碳酸二叔丁酯(477mg,2.19mmol)。将反应混合物再搅拌4小时，然后真空除去THF并将含水萃取物用EtOAc萃取三次。干燥(Na2SO4)合并的萃取物，过滤并真空浓缩得到2.0g(82％)粗制(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基氨基甲酸叔丁酯(202):MS(ESI)m/z＝332.4[M+1]+。
步骤2:在0℃，向202(0.75g,2.26mmol)于DMF(7mL)中的溶液中添加NaH(118mg,2.94mmol,60％于油中)。将反应混合物温热至室温并搅拌25分钟，然后重新冷却至0℃并依次加入2-溴乙氧基-叔丁基-二甲基-甲硅烷(812mg,3.40mmol)和四丁基碘化铵(42.7mg,0.11mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌72小时。由于向所期望产物的转化率较低，因此，将反应混合物冷却回至0℃并加入额外的NaH(91mg,2.26mmol,60％于油中)。将反应混合物在室温温热并搅拌20分钟，然后重新冷却回到0℃，并因此加入额外2-溴乙氧基-叔丁基-二甲基-甲硅烷(541mg,2.26mmol)和TBAI(42.7mg,0.11mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌3小时。使反应混合物在EtOAc和水之间分配。将有机层用水洗涤三次，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制残余物通过SiO2色谱法来纯化得到434mg(39％)2-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙基((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(204):MS(ESI)m/z＝490.4[M+1]+。
步骤3:向204(434mg,0.89mmol)于MeOH(6mL)中的溶液中添加4NHCl/二噁烷(2.66mL,10.6mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时，然后真空浓缩得到306mg(99％)粗制2-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基氨基)乙醇(206)，其为二HCl盐:MS(ESI)m/z＝276.4[M+1]+。
步骤4:在小瓶中装入53(90mg,0.38mmol)、206的二-HCl盐(160mg,0.46mmol)、DIPEA(0.33mL)和n-BuOH(0.8mL)，密封并在120℃加热60小时。真空浓缩反应混合物。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化得到58.6mg(39％)I-63。
实施例33
N2-((S)-1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-((1S,2S)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-64)和N2-((S)-1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-((1R,2R)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-65)
步骤1:在小瓶中装入外消旋49(75mg,0.30mmol)、(S)-1-(1H-吲哚-5-基)乙胺(177,72mg,0.45mmol,CASRN1213145-32-3)、DIPEA(0.18mL)和n-BuOH(1mL)，密封并在115℃加热48小时。真空浓缩反应混合物。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化，然后经手性SFC色谱法得到13.2mg(12％)N2-((S)-1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-((1S,2S)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-64)和16.0mg,(14％)N2-((S)-1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-((1R,2R)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-65).
实施例34
N2-((S)-1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-(2,2-二氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-66)
在小瓶中装入外消旋81(125mg,0.46mmol)、177(147mg,0.92mmol)、DIPEA(0.32mL)和n-BuOH(1.5mL)，密封并在115℃加热60小时。真空浓缩反应混合物。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化得到51.8mg(29％)I-66，其为两种非对映异构体的混合物。MS(ESI)m/z＝396.2[M+1]+.
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-(2,2-二氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-82)是类似制备的，不同的是用(1H-吲哚-4-基)甲胺代替177。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化得到84.4mg(48％)I-82。
实施例35
N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-((1S,2S)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-67)和N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-((1R,2R)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-68)
在小瓶中装入外消旋73(80mg,0.32mmol)、126(139mg,0.57mmol)、DIPEA(0.19mL)和n-BuOH(0.8mL)，密封并在120℃加热48小时。真空浓缩反应混合物。将粗制产物通过制备性HPLC来纯化，然后经手性SFC色谱法得到9.1mg(8％)I-67和9.4mg(8％)I-68。立体化学归属是推测性的。
N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-((1S,2S)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-76)和N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-((1R,2R)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-77)是类似制备的，不同的是用(4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(134)代替177。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化，然后经手性SFC色谱法得到相应的2个对映异构体。
顺式-N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-81)是类似制备的，不同的是用(1H-吲哚-4-基)甲胺代替126并且没有必要进行脱保护步骤。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化得到77.3mg(72％)I-81。
实施例36
N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-((1S,2R)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-69)和N2-((S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-((1R,2S)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-70)
在小瓶中装入外消旋71(80mg,0.32mmol)、126(139mg,0.57mmol)、DIPEA(0.19mL)和n-BuOH(0.8mL)，密封并在120℃加热48小时。真空浓缩反应混合物。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化，然后经手性SFC色谱法得到4.2mg(4％)I-69和4.6mg(4％)I-70。
N2-((S)-1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-((1S,2R)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-72)和N2-((S)-1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-((1R,2S)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-73)是类似制备的，不同的是(S)-1-(1H-吲哚-5-基)乙胺(177)代替126，并且没有必要进行脱保护步骤，得到17.0mg,(15％)I-72和17.2mg(15％)I-73。
N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-((1S,2R)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-78)和N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-((1R,2S)-2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-79)是类似制备的，不同的是126被134代替。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化，然后经手性SFC色谱法以拆分两种对映异构体。
反式-N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-(2-氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-80)是类似制备的，不同的是用4-氨基甲基-吲哚代替126。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化得到I-80，其为外消旋混合物。
实施例37
N2-((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-乙基嘧啶-2,4-二胺(I-71)
步骤1:在0℃，向202(600mg,1.81mmol)于DMF(4.5mL)中的溶液中加入NaH(101mg,2.54mmol,60％于油中)。将反应混合物温热至室温并搅拌25分钟，然后重新冷却至0℃并加入碘乙烷(0.27mL,3.26mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌5小时。使反应混合物在EtOAc和H2O之间分配。将EtOAc萃取物用水洗涤三次，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制残余物通过SiO2色谱法来纯化得到360mg(55％)乙基((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(208):MS(ESI)m/z＝360.3[M+1]+。
步骤2:向208(360mg,1.00mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中加入4NHCl/二噁烷(1.00mL,4.01mmol)，将反应混合物在室温搅拌4小时，然后加入额外的4N HCl/二噁烷(0.75mL,3.00mmol)。将反应混合物在室温维持2小时，然后真空浓缩得到318mg(100％)N-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)乙胺(210)，其为二-HCl盐:MS(ESI)m/z＝260.4[M+1]+。
步骤3:在小瓶中装入53(100mg,0.42mmol)、210的二-HCl盐(169mg,0.51mmol)、DIPEA(0.37mL)和n-BuOH(1.2mL)，密封并在125℃加热96小时。真空浓缩反应混合物。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化得到8.5mg(5％)I-71。
实施例38
(S)-N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-(2,2-二氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-74)和(R)-N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-(2,2-二氟环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-75)
I-74和I-75是按照实施例34的操作制备的，不同的是用(4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(134)代替177。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化，然后经手性SFC色谱法得到20.7mg(11％)I-74和19.3mg(10％)I-75。
实施例39
(S)-2-(2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基氨基)-6-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶-4-基)丙-2-醇(I-83)
步骤1:在圆底烧瓶中装入2,6-二氯嘧啶-4-羧酸甲酯(6.9g,33.2mmol)、5-环丙基-1H-吡唑-3-胺(4.13g,33.6mmol)、DIPEA(11.6mL)和DMSO(40mL)。将反应混合物在室温搅拌4小时，然后加入H2O(150mL)。将混合物剧烈搅拌20分钟，过滤所得析出物并用水洗涤，然后高真空干燥得到10.87g(>100％)2-氯-6-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶-4-羧酸甲酯(212):MS(ESI)m/z＝294.2[M+1]+。
步骤2:在0℃，向212(3.0g,10.2mmol)于THF(50mL)中的溶液中加入甲基氯化镁(24mL,71.5mmol,3M乙醚溶液)。将反应混合物在室温温热并搅拌4小时。真空除去THF并使残余物在EtOAc和饱和NH4Cl水溶液之间分配。将水层用EtOAc萃取并干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制残余物通过SiO2色谱法来纯化得到1.11g(27％)2-(2-氯-6-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶-4-基)丙-2-醇(214)。
步骤3:在小瓶中装入214(115mg,0.39mmol)、177(113mg,0.70mmol)、DIPEA(0.24mL)和n-BuOH(1.0mL)，密封并在115℃加热48小时。真空浓缩反应混合物。将粗制产物通过制备性HPLC来纯化得到40.4mg(25％)I-83。
2-(2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基氨基)-6-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶-4-基)丙-2-醇(I-84)是按照实施例13的步骤5和6中所描述的操作从214和134类似制备的。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化得到33.4g(19％)I-84。
2-(2-((1H-吲哚-4-基)甲基氨基)-6-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基氨基)嘧啶-4-基)丙-2-醇(I-85)是按照实施例13步骤5中的操作从214和(1H-吲哚-4-基)甲胺类似制备的。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化得到93.9g(60％)I-85。
实施例40
N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟-N2-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-86)
步骤1:向134(550mg,2.1mmol)于THF(10mL)中的溶液中添加1MNaOH水溶液(8.3mL,8.3mmol)。将反应混合物冷却至0℃并加入一缩二碳酸二叔丁酯(593mg,2.7mmol)。将反应混合物温热至室温，搅拌16小时，然后真空除去THF。将所得水性残余物用EtOAc萃取两次。干燥(Na2SO4)合并的萃取物，过滤并真空浓缩得到659mg(70％)粗制(4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基氨基甲酸叔丁酯(216)，将其不经额外纯化即使用:MS(ESI)m/z＝366.2[M+1]+。
步骤2:在0℃，向216(620mg,1.7mmol)于DMF(8mL)中的溶液中加入NaH(102mg,2.54mmol,60％于油中)。将反应混合物温热至室温并搅拌25分钟，然后重新冷却至0℃并加入碘甲烷(0.19mL,3.05mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌3小时。由于转化率很低，因此将反应混合物冷却回至0℃并加入额外NaH(67mg,1.69mmol,60％于油中)。将反应混合物温热至室温并搅拌20分钟，重新冷却至0℃并加入碘甲烷(0.11mL,1.69mmol)。将反应混合物温热至室温并搅拌3小时，然后在EtOAc和H2O之间分配。将合并的有机层萃取物用H2O稀释，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制残余物通过SiO2色谱法来纯化得到363mg(56％)(4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(218):MS(ESI)m/z＝380.2[M+1]+。
步骤3:向218(363mg,0.96mmol)于MeOH(6mL)中的溶液中加入4NHCl/二噁烷(2.87ml,11.5mmol)，将反应混合物在室温搅拌2小时，然后真空浓缩得到394g(100％)1-(4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-N-甲基甲胺(220)，其为二-HCl盐:MS(ESI)m/z＝280.1[M+1]+。
步骤4:在小瓶中装入2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟嘧啶-4-胺(55,95mg,0.37mmol,CASRN854434-98-5)、220的二-HCl盐(185mg,0.52mmol)、DIPEA(0.33mL)和n-BuOH(0.8mL)，密封并在120℃加热96小时。真空浓缩反应混合物。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化得到93.2mg(60％)I-86:MS(ESI)m/z＝413.1[M+1]+。
N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-87)是类似制备的，不同的是在步骤4中，用53代替55，并且将粗制产物通过制备性HPLC来纯化得到78.7mg(52％)I-87。
实施例41
N4-(5-环丁基-1H-吡唑-3-基)-N2-((6-氟-1H-吲哚-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺甲酸盐(I-88)
步骤1:在室温，向1-溴-5-氟-2-甲基-3-硝基苯(4.69g,20mmol)于1,4-二噁烷(25mL)中的溶液中缓慢添加DMF二甲缩醛(13.3mL)和吡咯烷(1.7mL)。将所述溶液在100℃加热18小时，然后真空浓缩得到黑色残余物。向所述残余物中添加HOAc(30mL)和铁粉(11g,200mmol)，然后将所述混合物回流加热1小时，冷却至室温并通过添加50％NaOH水溶液来中以及用EtOAc(2×200mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机萃取物，过滤并真空浓缩。将残余物通过SiO2色谱法(用EtOAc/石油醚梯度(5至30％EtOAc)洗脱)来纯化得到1.16g(27％)4-溴-6-氟-1H-吲哚(224)-其为棕色固体:MS(ESI)m/z＝213.9[M+1]+。
步骤2:氮气中，向224(1.16g,5.42mmol)于NMP(8.5mL)中的溶液中添加Zn(CN)2(634mg,5.42mmol)、锌粉(70mg,1.1mmol)、Pd2(dba)3(743mg,0.81mmol)和dppf(900mg,1.62mmol)。将反应混合物在140℃搅拌18小时，冷却并在EtOAc(200mL)和H2O(50mL)之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩至干。将残余物通过SiO2色谱法(用15％EtOAc/石油醚洗脱)来纯化得到588mg(68％)6-氟-1H-吲哚-4-甲腈(226)，其为黄色固体(588mg,68％):MS(ESI)m/z＝161.1[M+1]+。
步骤3:向226(588mg,3.68mmol)于7N NH3/MeOH(20mL)中的溶液中添加兰尼镍(20mg)，然后将反应混合物在氢气中(1atm.)在室温搅拌过夜。过滤黑色混合物并真空浓缩滤液得到500mg(85％)(6-氟-1H-吲哚-4-基)甲胺(228)，其为白色固体:MS(ESI)m/z＝148.1[M-16]+。
步骤4:在密封的管中装入65(114mg,0.46mmol)、228(114mg,0.69mmol)、DIPEA(0.1mL)/己-3-醇(1mL)，脱气、密封并在140℃加热过夜。将溶剂真空浓缩至干。将残余物通过制备性HPLC来纯化得到35mg(20％)I-88，其为白色固体。
实施例42
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((6-氟-1H-吲哚-4-基)甲基)-6-甲基嘧啶-2,4-二胺甲酸盐(I-89)
标题化合物(I-89)是按照实施例41步骤4的操作制备的，不同的是65被185替换。将残余物通过制备性HPLC来纯化得到40mg(21％)I-89，其为白色固体。
N4-(5-环丁基-1H-吡唑-3-基)-5-氟-N2-((6-氟-1H-吲哚-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺甲酸盐(I-90)是按照实施例41步骤4的操作制备的，不同的是65被2-氯-N-(5-环丁基-1H-吡唑-3-基)-5-氟嘧啶-4-胺(根据55的制备而制备的，不同的是使用了5-环丁基-1H-吡唑-3-胺(CASRN326827-21-8))代替。将残余物通过制备性HPLC来纯化得到30mg(23％)I-90，其为白色固体(30mg,23％)。
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟-N2-((6-氟-1H-吲哚-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺二甲酸盐(I-91)是按照实施例41步骤4的操作制备的，不同的是65被55代替。将残余物通过制备性HPLC来纯化得到31mg(24％)I-91。
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((6-氟-1H-吲哚-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-53)是按照实施例41步骤4的操作制备的，不同的是65被53代替。
实施例43
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((3-甲基-1H-吲哚-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-92)
步骤1:向4-溴-lH-吲哚-3-甲醛(644mg,2.87mmol)于无水THF(20mL)中的回流溶液中分数小份加入LiAlH4(218mg,5.75mmol)。继续回流加热1小时，将反应混合物冷却至室温并用水(220μL)、15％NaOH水溶液(w/w,220μL)和水(650μL)淬灭。过滤所得析出物并将滤液减压浓缩至干。向残余物中添加NaOH水溶液(10mL)并将溶液用DCM(2×10mL)萃取两次。干燥(MgSO4)合并的萃取物，过滤并真空浓缩得到454mg(75％)4-溴-3-甲基-1H-吲哚(230)，其为浅棕色油状物:MS(ESI)m/z＝210.1[M+1]+。
步骤2:氩气中，向230(454mg,2.16mmol)于NMP(4.5mL)中的溶液中添加Zn(CN)2(252mg,2.16mmol)、锌粉(27mg,0.43mmol)、Pd2(dba)3(0)(293mg,0.32mmol)和dppf(358mg,0.65mmol)。将所述溶液在140℃加热18小时，将混合物冷却并在EtOAc(100mL)和H2O(30mL)之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩至干。将残余物通过SiO2色谱法(用10％EtOAc/石油醚洗脱)来纯化得到200mg(59％)3-甲基-1H-吲哚-4-甲腈(232)，其为白色固体:MS(ESI)m/z＝157.1[M+1]+。
步骤3:向232(200mg,1.28mmol)于7N NH3/MeOH(10mL)中的溶液中加入兰尼镍(20mg)并将溶液在氢气中(1atm.)在室温搅拌过夜。过滤黑色混合物并将滤液减压浓缩至干得到200mg(91％)(3-甲基-1H-吲哚-4-基)甲胺(234)，其为白色固体:MS(ESI)m/z＝144.3[M-16]+。
步骤4:在管中装入53(200mg,0.85mmol)、234(181mg,1.13mmol)、DIPEA(0.2mL)和IPA(2mL)，脱气、密封并在120℃加热过夜。将溶剂真空浓缩至干。将残余物通过制备性HPLC来纯化得到80mg(26％)I-92，其为白色固体。
实施例44
N2-((6-氯-1H-吲哚-5-基)甲基)-N4(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-93)
步骤1:将4-氨基-2-氯苯甲腈(5.0g,0.033mol)和N-碘琥珀酰亚胺(8.28g,0.036mol)于HOAc(35mL)中的混合物在室温搅拌过夜。形成棕色固体，过滤收集所述固体，用己烷洗涤并真空干燥得到3.6g(39％)4-氨基-2-氯-5-碘苯甲腈(236)，其为浅棕色固体:MS(ESI)m/z＝278.8[M+1]+。
步骤2:在圆底瓶中装入236(2.78g,0.01mol)、CuI(95mg,0.5mmol)、Pd(PPh3)Cl2(200mg,0.5mmol)、DIPEA(3.87g,0.03mol)和乙炔基三甲基甲硅烷(2.94g,0.03mol)。将混合物在氮气中在70℃加热过夜，然后冷却并在EtOAc(500mL)和H2O(100mL)之间分配。将有机层真空浓缩至干。将粗制物通过SiO2色谱法(用10％EtOAc/石油醚洗脱)来纯化得到1.2g(48％)4-氨基-2-氯-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)苯甲腈(238)，其为棕色固体:MS(ESI)m/z＝249.1[M+1]+。
步骤3:向238(1.0g,4mmol)于THF(100mL)中的溶液中添加四丁基氟化铵(2.0g,7.6mmol)。将混合物在75℃加热过夜，然后浓缩并使残余物在EtOAc(500mL)和H2O(50mL)之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，真空浓缩至干。将粗制物通过CombiFlash色谱法(用EtOAc/石油醚梯度(10％至45％EtOAc)洗脱)来纯化得到700mg(48％)4-氨基-2-氯-5-乙炔基苯甲腈(240)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝177.0[M+1]+。
步骤4:向240(50mg,0.284mmol)于THF(100mL)中的溶液中添加t-BuOK(160mg,1.42mmol)。将混合物在75℃加热3小时，在此期间，反应混合物的颜色从黄色变为棕色。在混合物冷却后，使其在EtOAc(200mL)和H2O(50mL)之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，干燥并真空浓缩得到43mg(86％)6-氯-1H-吲哚-5-甲腈(242)，其为白色固体:1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ11.80(s,1H),8.21(s,1H),7.70(s,1H),7.60(d,1H),6.61(d,1H)；MS(ESI)m/z＝177.0[M+1]+。
步骤5:向242(43mg,0.24mmol)于MeOH(10mL)和7M NH3/MeOH(5mL)中的溶液中添加兰尼镍并将反应混合物在氢气中(1atm.)在室温剧烈搅拌3小时。将反应混合物用垫过滤并减压浓缩得到(6-氯-1H-吲哚-5-基)甲胺(244)，其为浅色油状物:MS(ESI)m/z＝164.1[M-NH2]+。
步骤6:在密封的小瓶中装入53(80mg,0.34mmol)、244(45mg,0.25mmol)、DIPEA(100mg,0.75mmol)和IPA(3.0mL)。将反应混合物在120℃加热18小时。将溶液浓缩并通过制备性HPLC纯化得到40mg(42％)I-93，其为白色固体。
实施例45
N2-((6-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-嘧啶-2,4-二胺(I-94)
步骤1:将5-氯-2-硝基苯胺(6.0g,34.9mmol)和NBS(6.06g,34.0mmol)于HOAc(240mL)中的混合物在110℃加热1小时。将溶液冷却至室温并将反应混合物倒入冰-水(800mL)中。过滤所得固体，用水(50mL×3)洗涤并真空干燥得到4.0g(44％)4-溴-5-氯-2-硝基苯胺(246)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝250.9(M-1)。
步骤2:将246(500mg,2.0mmol)和SnCl2(2.26g,10.0mmol)于EtOH(10mL)中的混合物在80℃加热3小时。冷却至室温后，过滤反应混合物，并真空浓缩滤液。向残余物中加入水(100mL)，然后加入固体NaHCO3。接着将混合物用EtOAc(3x50mL)萃取，用盐水洗涤(50mL)并真空浓缩得到440mg黄色固体。向所述固体中加入甲酸(10mL)并将混合物在100℃搅拌2小时，然后真空浓缩。向残余物中加入水(100mL)，然后加入固体NaHCO3。将混合物用EtOAc(3x50mL)萃取，干燥合并的萃取物(Na2SO4)，过滤并浓缩得到400mg(86％)5-溴-6-氯-1H-苯并[d]咪唑(248)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝231.1(M+1)。
步骤3:将248(550mg,2.38mmol)、Pd(PPh3)4(275mg,0.238mmol)和Zn(CN)2(279mg,2.38mmol)于NMP(10mL)中的混合物在氮气中在120℃搅拌18小时。将反应混合物倒入水(50mL)中，用EtOAc(3x20mL)萃取并真空浓缩至干。将粗制物通过SiO2色谱法(用DCM:MeOH(12:1)洗脱)来纯化得到217mg(51.5％)6-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(250)，其为黄色固体(217mg,51.5％):MS(ESI)m/z＝178.2(M+1)。
步骤4:还原250得到(6-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(252)的反应是用实施例5步骤4中的操作进行的，得到120mg(54.1％)252:MS(ESI)m/z＝182.2(M+1)。
步骤5:在管中装入252(110mg,0.608mmol)、53(143mg,0.608mmol)和DIPEA(235mg,1.823mmol)/IPA(3mL)，密封并在搅拌下在120℃加热18小时。将反应混合物冷却至室温并真空浓缩。将粗制产物通过制备性HPLC来纯化得到72mg(31.3％)I-94，其为白色固体。
实施例46
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-甲基-N2-((4-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-95)
步骤1:向5-溴-4-甲基-1H-苯并[d]咪唑(1.0g,4.74mmol,CASRN952511-48-7)和3,4-二氢-2H-吡喃(2.0g,23.70mmol)于THF(10mL)中的溶液中添加p-TsOH.H2O(90mg,0.47mmol)。将混合物在80℃加热过夜，冷却并真空除去溶剂。将残余物用DCM(100mL)和水(50mL)稀释。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩至干。将粗制产物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc梯度(10至50％EtOAc)洗脱)来纯化得到800mg(57％)5-溴-4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(254)，其为浅黄色固体:MS(ESI)m/z＝295.1[M+1]+。
步骤2:4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]-咪唑-5-甲腈是使用实施例45步骤3的操作从254制备的。将残余物通过SiO2色谱法(用3％MeOH/DCM洗脱)来纯化得到450mg(92％)4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]-咪唑-5-甲腈(256)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝242.3[M+1]+。
步骤3:还原256得到(4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]-咪唑-5-基)甲胺(258)的反应是用实施例2步骤2中的操作进行的，这得到430mg(94％)258，其为黄色糖浆状物:MS(ESI)m/z＝246.1[M+1]+。
步骤4:(4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]-咪唑-5-基)甲基氨基甲酸叔丁酯(260)是用实施例40步骤1中描述的操作从258制备的。将粗制产物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc梯度(10至50％EtOAc洗脱)来纯化得到400mg(71％)260，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝346.3[M+1]+。
步骤5:甲基((4-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(262)是用实施例40步骤2中描述的操作从260制备的，这得到100mg(48％)262，其为棕色固体(100mg,48％):MS(ESI)m/z＝361.3[M+1]+。
步骤6:将262(100mg,0.28mmol)于DCM(2mL)和TFA(2mL)中的溶液在室温搅拌30分钟。除去溶剂并将残余物溶解在EtOAc中，用氨中和。分离出有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩得到40mg(82％)N-甲基(4-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺(264):MS(ESI)m/z＝176.3[M+1]+。
步骤7:在管中装入264(40mg,0.23mmol)、53(100mg,0.57mmol)和DIPEA(0.3ml)/IPA(3mL)，脱气、密封并在120℃加热过夜。真空除去溶剂后，将粗制物通过制备性HPLC来纯化得到25mg(29％)I-95，其为白色固体。
实施例47
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((7-氟-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-96)
步骤1:向5-溴-7-氟-1H-苯并[d]咪唑(650mg,3.02mmol,CASRN1197944-33-2)和3,4-二氢-2H-吡喃(1.27g,15.12mmol)于THF(10mL)中的溶液中添加p-TsOH.H2O(58mg,0.30mmol)。将反应混合物在80℃搅拌过夜，冷却并真空除去溶剂。将残余物用DCM(100mL)和水(50mL)稀释。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc梯度(10至50％EtOAc)洗脱)来纯化得到580mg(64％)5-溴-7-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(266)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝299.1[M+1]+。
步骤2:使用实施例45步骤3的操作从266制备7-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-甲腈(268)。将粗制产物通过SiO2色谱法(用3％MeOH/DCM洗脱)来纯化得到280mg(89％)268，其为黄色固体(280mg,89％)。MS(ESI)m/z＝246.3[M+1]+。
步骤3:还原268得到(7-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]-咪唑-5-基)甲胺(270)的反应是用实施例2步骤2的操作进行的，这得到260mg(92％)270，其为棕色糖浆状物:MS(ESI)m/z＝182.2(M+1)。
步骤4:在管中装入270(260mg,1.04mmol)、53(100mg,0.57mmol)、DIPEA(0.5ml)/IPA(3mL)，脱气、密封并在120℃加热过夜。减压蒸发溶剂得到160mg(34％)N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((7-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(272)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝449.2[M+1]+。
步骤5:将272(140mg,0.31mmol)和p-TsOH.H2O(59mg,0.31mmol)于MeOH(5mL)和H2O(1mL)中的混合物回流加热2小时。将混合物冷却并真空浓缩。将粗制产物通过制备性HPLC来纯化得到50mg(44％)I-96，其为白色固体。
实施例48
N2-((3H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)-N4-(3-环丙基-1H-吡唑-5-基)-5-氟嘧啶-2,4-二胺(I-97)
步骤1:在管中装入58(273mg,1.18mmol)、55(150mg,0.59mmol),DIPEA(0.5ml)和IPA(4mL)，脱气、密封并在120℃加热72小时。真空蒸发溶剂得到150mg(57％)N4-(3-环丙基-1H-吡唑-5-基)-5-氟-N2-((1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(280)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝449.7[M+1]+。
步骤2:将280(150mg,0.33mmol)和p-TsOH.H2O(62mg,0.33mmol)于MeOH(5mL)和H2O(1mL)中的溶液回流加热2小时。真空浓缩溶液并将残余物通过制备性HPLC纯化得到40mg(33％)I-97。
实施例49
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-[(1S)-1-(1H-吲哚-4-基)乙基]嘧啶-2,4-二胺(I-98)
步骤1:在0℃，向搅拌的1-(1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-4-基)乙酮(500mg,1.4mmol,CASRN112970-73-7)于无水MeOH(5mL)中的溶液中添加NaBH4(80mg,2.1mmol)，将混合物在室温搅拌过夜。真空浓缩混合物并将残余物用EtOAc稀释，依次用水和盐水洗涤。干燥(Na2SO4)有机物，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法来纯化得到420mg(95％)1-(1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-4-基)乙醇(282)，其为白色半固体:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.85(d,J＝8.4Hz,2H),7.81-7.76(m,2H),7.37(d,J＝8.0Hz,2H),7.31-7.23(m,2H),6.98(d,J＝3.6Hz,1H),5.23(d,J＝4Hz,1H),5.04-5.01(m,1H),2.30(s,3H),1.33(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤2:在0℃和氩气中，向282(400mg,1.27mmol)于无水DCM(2mL)和无水Et2O(2mL)中的溶液中加入PBr3(515mg,1.91mmol)，将混合物在室温搅拌过夜。将混合物倒入冷NaHCO3(水溶液)中并用EtOAc萃取。将合并的萃取物依次用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩得到450mg(92％)4-(1-溴乙基)-1-甲苯磺酰基-1H-吲哚(284)，其为黄色油状物，将其不经进一步纯化即用在下一步骤中：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94(d,J＝8.0Hz,1H),7.78(d,J＝8.0Hz,2H),7.65(d,J＝2.8Hz,1H),7.35-7.23(m,4H),6.89(d,J＝2.8Hz,1H),5.53-5.50(m,1H),2.36(s,3H),2.13(d,J＝6.8Hz,3H).
步骤3:在0℃和氩气中，向异二氢吲哚-1,3-二酮(3.83g,20.0mmol)于无水DMF(70mL)中的溶液中添加NaH(1.04g,26mmol)。将所得混合物在室温搅拌30分钟。加入284(9.8g,26mmol)于无水DMF(30mL)中的溶液并将混合物在室温搅拌4小时。真空浓缩混合物并通过SiO2色谱法来纯化得到10g(86％)2-(1-(1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-4-基)乙基)异二氢吲哚-1,3-二酮(286)，其为白色固体:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.87-7.81(m,8H),7.48(d,J＝7.6Hz,1H),7.38-7.33(m,3H),6.82(d,J＝3.6Hz,1H),5.77-5.74(m,1H),2.29(s,3H),1.84(d,J＝6.8Hz,3H)。
步骤4:向286(200mg,0.45mmol)于EtOH(3mL)中的溶液中添加N2H4.H2O(0.06mL,1.35mmol)，将混合物回流加热2小时。过滤混合物并真空浓缩滤液，然后通过SiO2色谱法来纯化得到120mg(85％)1-(1-甲苯磺酰基-1H-吲哚-4-基)乙胺(288)，其为浅黄色半固体:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.85(d,J＝8.4Hz,1H),7.78-7.75(m,2H),7.36(d,J＝8.0Hz,1H),7.34-7.25(m,2H),7.01(d,J＝3.6Hz,1H),4.33(q,J＝6.4Hz,1H),2.30(s,3H),1.25(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤5:向288(500mg,1.59mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加KOH(446mg,7.95mmol)，将混合物回流加热4小时。真空浓缩混合物并通过SiO2色谱法来纯化得到200mg(79％)1-(1H-吲哚-4-基)乙胺(290)，其为浅黄色固体:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.02(br,s,1H),7.30-7.23(m,1H),7.22(d,J＝7.6Hz,1H),7.06-6.99(m,2H),6.53(br,s,1H),4.37(,J＝6.4Hz,1H),1.33(d,J＝6.4Hz,3H)。
步骤6:向53(200mg；0.85mmol)和290(204mg；1.5当量,1.27mmol)于n-BuOH(2.4mL)中的溶液中添加DIPEA(554mg；4.24mmol)，将反应混合物加热至140℃，保持2天。将反应混合物冷却并真空除去溶剂。将粗制产物通过HPLC来纯化。随后采用SFC色谱法以分离对映异构体，并得到64.1mg(21％)I-98(甲酸盐)，其为灰白色固体:SFC保留时间:0.90min。
从SFC色谱法分离出N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-[(1R)-1-(1H-吲哚-4-基)乙基]嘧啶-2,4-二胺(292)，得到57.3mg292，其为灰白色固体:1H NMR(400MHz,DMSO)δ12.18–11.51(m,1H),11.02(s,1H),9.39–8.93(m,1H),7.75(d,J＝5.6Hz,1H),7.39–7.12(m,2H),7.10–6.83(m,3H),6.60(s,1H),6.06(s,2H),5.63–5.38(m,1H),1.92–1.68(m,1H),1.53(d,J＝7.0Hz,3H),0.98–0.52(m,4H)；MS(ESI)m/z＝360.2[M+1]+；SFC保留时间:1.36min。
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟-N2-[(1S)-1-(1H-吲哚-4-基)乙基]嘧啶-2,4-二胺(I-99)是类似制备的，不同的是在步骤6中，用221替换53得到14.1mg(9％)I-99，其为灰白色固体。在手性柱上从SFC洗脱出的峰在0.58min。
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟-N2-[(1R)-1-(1H-吲哚-4-基)乙基]嘧啶-2,4-二胺(I-100)是从在0.95min洗脱的峰回收的，这得到16mg(11％)，其为灰白色固体。
实施例50
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-(1H-吲唑-5-基甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-102)
在5mL微波小瓶中装入1H-吲唑-5-基甲胺(312.3mg；2.12mmol,CASRN267413-25-2)、53(100mg；0.42mmol)和n-BuOH(1.2mL)。加入DIPEA(277mg；2.12mmol)，将所述管密封并加热至140℃，保持17小时。使粗制反应混合物在EtOAc(50mL)和水(25mL)之间分配，并将有机相用盐水(25mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过HPLC来纯化得到82.2mg(56％)I-102，其为灰白色固体。
实施例51
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-(1H-吲唑-6-基甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-103)
在微波小瓶中装入1H-吲唑-6-基甲胺(187.4mg；1.27mmol)、53(100mg；0.42mmol)和n-BuOH。加入DIPEA(277.0mg；2.12mmol)，将所述管用盖子盖住并在微波中在170℃照射5小时。使粗制反应混合物在EtOAc(50mL)和水(25mL)之间分配，用干燥管(Na2SO4)过滤，并将滤液用EtOAc(50mL)洗涤。减少粗制有机相并通过HPLC纯化得到99.7mg(68％)of I-103，其为浅黄色固体.
N2-[(1S)-1-(1H-苯并咪唑-5-基)丙基]-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟-嘧啶-2,4-二胺(I-101)是类似制备的，不同的是用55代替53。将粗制产物通过HPLC来纯化并随后通过手性SFC来拆分对映异构体。在1.21min洗脱的峰得到4.6mg(6％)I-101，其为白色固体。
实施例52
(S)-N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-5-氯-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-110)
向57(135mg,0.5mmol)于n-BuOH(2mL)中的溶液中添加177(120mg,0.75mmol)，然后滴加TEA(0.21mL,1.5mmol)。将反应混合物在微波合成仪中在110℃照射1小时。然后将反应混合物在油浴中在100℃加热24小时。真空除去溶剂并将粗制残余物吸收在DCM(5mL)和MeOH(5mL)中，然后真空浓缩。将残余物在DMF(1mL)中稀释并过滤。将粗制产物通过反相HPLC来纯化得到83mg(42％)I-110。
(S)-N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-(3,3-二氟环丁基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-111)是类似制备的，不同的是用63代替57。
(S)-N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-112)是类似制备的，不同的是用2-氯-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)-嘧啶-4-胺(CASRN543712-91-0)代替57。
(S)-N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环戊基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-113)是类似制备的，不同的是用67代替57。
(S)-N2-(1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丁基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-114)是类似制备的，不同的是用65代替57。
N2-((S)-1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-115)是类似制备的，不同的是用753代替57。
N2-((S)-1-(1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-(四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-116)是类似制备的，不同的是用83代替57。
实施例53
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-(反式-2-(2-氟苯基)环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-118)
向2-氯-N-(5-(反式-2-(2-氟苯基)环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(79,165mg,0.5mmol)于n-BuOH(5mL)中的溶液中添加(1H-吲哚-4-基)甲胺(110mg,0.75mmol)。滴加DIPEA(0.26mL,1.5mmol)，然后将反应混合物放置在座式振摇器中并在130℃加热20小时。将反应混合物冷却并真空蒸发。将粗制残余物在DCM(5mL)和MeOH(5mL)中稀释，然后真空蒸发溶剂。将粗制残余物在DMF(2mL)中稀释并过滤。真空除去剩余的液体。将残余物通过反相HPLC来纯化得到114mg(52％)I-118。
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-(四氢呋喃-2-基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-119)和N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-5-氟嘧啶-2,4-二胺(I-120)是类似制备的，不同的是2-氯-N-(5-(反式-2-(2-氟苯基)环丙基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺分别被83和55代替。
实施例54
(S)-N2-(1-(1H-苯并[d]咪唑-5-基)乙基)-N4-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-121)
在微波小瓶中，向2-氯-N-(5-甲基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(105mg,0.5mmol)于n-BuOH(2mL)中的溶液中添加126(184mg,0.75mmol)。向溶液中滴加TEA(0.21mL,1.5mmol)，将所述小瓶密封并在微波合成仪中在110℃照射6小时。减压蒸发溶剂并将粗制残余物吸收在DCM(5mL)和MeOH(5mL)中，再次真空浓缩溶剂。将残余物在DMF(1mL)中稀释并过滤。将粗制混合物通过反相HPLC来纯化得到9mg(5％)I-121。
实施例55
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-40)
步骤1:向甲胺(536mg,17.24mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中添加1H-吲哚-4-甲醛(500mg,3.45mmol)。将反应混合物在室温搅拌14小时。将反应混合物在冰浴中冷却并分数份加入NaBH4(130mg,3.45mmol)。将反应混合物在0℃搅拌5分钟，然后在室温搅拌4小时。减压除去溶剂得到300mg(54.5％)(1H-吲哚-4-基)-N-甲基甲胺(116)，将其不经进一步纯化即用于下一步骤:MS(ESI)m/z＝161.3[M+1]+。
步骤2:在管中装入116(280mg,1.75mmol)、53(412mg,1.75mmol)、DIPEA(678mg,5.25mmol)和IPA(5mL)，密封并在120℃加热14小时。真空浓缩混合物并将残余物通过制备性HPLC来纯化得到260mg(41.4％)I-40。
实施例56
N2-((1H-吲哚-4-基)甲基)-N4-(5-(3,3-二氟环丁基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-104)
向63(143mg,0.5mmol)于n-BuOH(2mL)中的溶液中添加(1H-吲哚-4-基)甲胺(110mg,0.75mmol)。然后滴加TEA(0.21mL,1.5mmol)并将反应混合物在微波合成仪中在150℃照射150分钟。然后将反应混合物放置在油浴中，在100℃保持30小时。将粗制残余物在DCM(5mL)和MeOH(5mL)中稀释并真空除去溶剂。将粗制残余物在DMF(2mL)中稀释并过滤以除去未溶的固体。真空除去剩余的液体。将粗制产物通过反相HPLC来纯化得到42mg(21％)I-104。
N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-(3,3-二氟环丁基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-105)是分两步制备的。步骤1是类似进行的，不同的是用134代替(1H-吲哚-4-基)甲胺。按照实施例13步骤6的操作除去THP保护基。将粗制混合物通过反相HPLC来纯化得到3mg(1％)I-105。
实施例57
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((1-甲基-1H-吲哚-5-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-33)
步骤1:在0℃，在剧烈搅拌下，向1H-吲哚-5-甲腈(600mg,4.2mmol)于DMF(5mL)中的溶液中加入NaH(201mg,60％于油中,8.4mmol)。将溶液搅拌30分钟，然后加入碘甲烷(1.8g,12.6mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。将反应混合物用水(50mL)淬灭并用EtOAc(3x100mL)萃取。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤并减压浓缩得到800mg1-甲基-1H-吲哚-5-甲腈(294)，其为白色固体:MS(ESI)m/z＝157.3[M+1]+。
步骤2:向294(800mg,5.12mmol)于7M氨/MeOH(50mL)中的溶液中添加兰尼镍(2.0g)并将反应混合物在氢气中(1atm.)在室温剧烈搅拌18小时。将反应混合物用垫过滤并真空浓缩得到800mg(1-甲基-1H-吲哚-5-基)甲胺(296)，其为黄色油状物:MS(ESI)m/z＝144.3[M-NH2]+。
步骤3:在微波小瓶中装入2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(160mg,0.68mmol)、296(800mg,5.59mmol)、DIPEA(1ml)和IPA(5.0mL)，密封并在120℃加热18小时。将其浓缩并通过SiO2色谱法来纯化，然后经制备性HPLC得到30mg(12％)I-33，其为白色固体。
实施例58
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((5-甲基-1H-吲哚-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-122)
步骤1:在-10℃，向2-溴-1,3-二甲基苯(5.0g,27.03mmol)于硫酸(98％,40mL)中的混合物中滴加硝酸(68％,2.74g,27.03mmol)的硫酸(98％,10mL)溶液。反应结束后，将混合物在-10℃搅拌1小时。将反应混合物倒在冰(200g)上并过滤所得固体，用水洗涤并真空干燥。将粗制物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(100:1)作为洗脱溶剂洗脱)来纯化得到2.3g(37％)2-溴-1,3-二甲基-4-硝基苯，其为黄色固体(298):1H NMR(500MHz,DMSO-d6):δ7.79(d,J＝8.5,1H),7.43(d,J＝8.5,1H),2.47(s,3H),2.44(s,3H)。
步骤2:氮气中，将298(3.0g,13.04mmol),吡咯烷(926mg,13.04mmol)和DMF-DMA(7.76g,65.22mmol)于1,4-二噁烷(20mL)中的混合物在100℃加热18小时。将反应混合物真空浓缩至干并向残余物中添加铁(3.65g,65.22mmol)和HOAc(40mL)。将所得混合物在110℃加热4小时，冷却至室温并过滤。真空浓缩滤液。将粗制物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(10:1)洗脱)来纯化得到150mg(5.5％)4-溴-5-甲基-1H-吲哚(300)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝210.1(M+1)。
步骤3:氮气中，将300(150mg,0.714mmol)、Pd2(dba)3(131mg,0.143mmol)、dppf(159mg,0.286mmol)、Zn(CN)2(84mg,0.714mmol)和锌(4.6mg,0.0714mmol)于NMP(10mL)中的混合物在145℃加热18小时。将反应混合物倒入水(50mL)中并用EtOAc(20mL×3)萃取。干燥(MgSO4)合并的萃取物，过滤并浓缩至干。将粗制物通过SiO2色谱法(用石油醚/EtOAc(3:1)洗脱)来纯化得到54mg(48.5％)5-甲基-1H-吲哚-4-甲腈(302)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝157.1(M+1)。
步骤4:将302(54mg,0.346mmol)和兰尼镍(100mg)于7M氨/MeOH(20mL)中的混合物在氢气中在室温搅拌3小时。将其用过滤并减压浓缩滤液得到53mg(95.7％)(5-甲基-1H-吲哚-4-基)甲胺(304)，其为黄色固体:MS(ESI)m/z＝144.3(M-16)。
步骤5:氮气中，将304(53mg,0.331mmol)、53(94mg,0.397mmol)和DIPEA(128mg,0.993mmol)于IPA(2mL)中的混合物在密封管中在120℃加热18小时。将粗制物通过制备性HPLC来纯化得到38mg(32％)I-122。
实施例59
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((7-甲基-1H-吲哚-4-基)甲基)嘧啶-2,4-二胺(I-52)
步骤1:在-40℃和氮气中，向4-溴-1-甲基-2-硝基苯(10g)于THF(130mL)中的溶液中缓慢添加乙烯基溴化镁(1M于THF中,162mL)。将反应混合物搅拌1.5小时，然后用饱和NH4Cl水溶液(50mL)淬灭。使混合物在EtOAc(500mL)和水(150mL)之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空蒸发。将残余物通过SiO2色谱法(用2.5％EtOAc/石油醚洗脱)来纯化得到1.54g(16％)4-溴-7-甲基-1H-吲哚(306)，其为棕色固体:MS(ESI)m/z＝209.9[M+1]+。
步骤2:氩气中，向306(300mg,1.43mmol)于NMP(3mL)中的溶液中添加Zn(CN)2(167mg,1.43mmol),锌粉(18mg,0.28mmol),Pd2(dba)3(198mg,0.21mmol)和dppf(237mg,0.42mmol)。在140℃搅拌18小时后，将混合物冷却并在EtOAc(200mL)和水(50mL)之间分配。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤并真空蒸发。将残余物通过SiO2色谱法(用15％EtOAc/石油醚洗脱)来纯化得到222mg(85％)7-甲基-1H-吲哚-4-甲腈(308)，其为黄色固体。
步骤3:向308(222mg,1.42mmol)于7M氨/MeOH(15mL)中的溶液中添加兰尼镍(20mg)，然后将其在氢气中在室温搅拌过夜。过滤黑色混合物并真空浓缩滤液得到(137mg(62％)7-甲基-1H-吲哚-4-基)甲胺(310)，其为黄色固体。MS(ESI)m/z＝144.1[M-16]+。
步骤4:将53(116mg,0.50mmol)、310(137mg,0.86mmol)、DIPEA(2ml)于IPA(5mL)中的混合物脱气，然后在密封管中在120℃加热过夜。减压蒸发溶剂并将残余物通过制备性HPLC来纯化得到109mg(35％)I-52，其为白色固体。
实施例60
N2-((4-氯-1H-吲哚-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-20)
步骤1:向搅拌的2-氯-1,3-二甲基苯(100.0g,0.71mol)于冰HOAc(500mL)中的溶液中滴加发烟HNO3(200mL)。将反应混合物在80℃搅拌3小时。将冷却的反应混合物倒入冰-水中并用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用己烷洗脱)来纯化得到101.0g(77％)2-氯-1,3-二甲基-4-硝基苯和2-氯-1,3-二甲基-5-硝基苯的4:1的混合物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.61(d,J＝8.4Hz,1H),7.19(d,J＝8.4Hz,1H),2.54(s,3H),2.44(s,3H)。
步骤2:向搅拌的来自步骤1的4:1混合物(100.0g,0.539mol)于无水DMF(500mL)中的溶液中添加DMF-DMA(77.5g,0.650mol)，然后加入DABCO(72.9g,0.650mol)。将反应混合物在110℃搅拌过夜，然后冷却至室温。加入兰尼镍(湿的,20g)并将所得混合物在30psi和在50℃氢化过夜。用垫过滤催化剂。将滤液用EtOAc稀释并将有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用EtOAc/己烷梯度(5至10％EtOAc)洗脱)来纯化得到20.1g(23％)4-氯-5-甲基-1H-吲哚(312)，其为固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.17(br s,1H),7.22–7.19(m,2H),7.05(d,J＝8.2Hz,1H),6.64–6.62(m,1H),2.48(s,3H)。
步骤3:将312(27.0g,0.163mol)、一缩二碳酸二叔丁酯(53.0g,0.243mol)和DMAP(2.0g,0.0164mol)于无水MeCN(200mL)中的混合物在室温搅拌4小时。将反应混合物用EtOAc稀释并将有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用EtOAc/己烷梯度(2至10％EtOAc)洗脱)来纯化得到38.0g(88％)4-氯-5-甲基-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(314)，其为无色油状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.92(br s,1H),7.57(s,1H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),6.66(d,J＝3.7Hz,1H),2.46(s,3H),1.67(s,9H)。
步骤4:在80℃，向搅拌的314(38.1g,0.143mol)于CCl4(300mL)中的溶液中添加NBS(30.6g,0.172mol)，然后加入AIBN(1.2g,7.31mmol)，将反应混合物在80℃搅拌过夜。将冷却的反应混合物用EtOAc稀释并将有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用EtOAc/己烷梯度(2至20％EtOAc)洗脱)来纯化得到16.1g(33％)5-(溴甲基)-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(316)，其为白色固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.63(s,1H),7.36(d,J＝8.4Hz,1H),6.71(d,J＝3.8Hz,1H),4.75(s,2H),1.67(s,9H)。
步骤5:将316(16.1g,0.0467mol)和邻苯二甲酰亚胺钾(26.1g,0.141mol)于无水DMF(150mL)中的混合物在80℃搅拌过夜。将冷却的反应混合物用EtOAc稀释并将有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用EtOAc/己烷梯度(5至20％EtOAc)洗脱)来纯化得到10.8g(56％)4-氯-5-((1,3-二氧代异二氢吲哚-2-基)甲基)-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(318)，其为白色固体:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.96(d,J＝8.2Hz,1H),7.88–7.86(m,2H),7.74–7.72(m,2H),7.62(d,J＝3.7Hz,1H),7.27–7.25(m,2H),5.12(s,2H),1.65(s,9H)。
步骤6:向搅拌的318(10.75g,0.026mol)于EtOH(200mL)中的悬浮液中添加水合肼(2.52mL,0.052mol)，将所得反应混合物在100℃加热1小时。将冷却的反应混合物用水稀释并用DCM萃取三次。将合并的有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将所述固体悬浮在己烷(100mL)和乙酸乙酯(5mL)中并过滤。减压浓缩滤液得到5.34g(73％)5-(氨基甲基)-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(320)，其为白色固体:1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.97(d,J＝8.5Hz,1H),7.73(s,1H),7.50(d,J＝8.5Hz,1H),6.71(d,J＝3.7Hz,1H),2.09(s,2H),1.63(s,9H)；2H未观察到；MS(ESI)m/z＝281.5[M+1]+。
步骤7:标题化合物(I-20)是用与I-8步骤1的制备类似的操作制备的，用5-(氨基甲基)-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯代替1-(1H-吲哚-5-基)乙胺己二酸盐作为起始物质。
N2-((4-氯-1H-吲哚-5-基)甲基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基嘧啶-2,4-二胺(I-19)用与I-8步骤1的制备类似的操作制备的，不同的是用2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-6-甲基-嘧啶-4-胺185和5-(氨基甲基)-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯分别代替53和1-(1H-吲哚-5-基)乙胺己二酸盐，得到I-19；MS(ESI)m/z＝394.1[M+1]+。
实施例61
(S)-N2-(1-(4-氯-1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(I-22)
步骤1:将5-(氨基甲基)-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(1.147g,4.087mmol)和二苯酮亚胺(0.75mL,4.496mmol)于无水DCM(39.3mL)中的混合物在氮气中在40℃搅拌4天。将反应混合物用EtOAc稀释，并将有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(用EtOAc/庚烷梯度(0至70％EtOAc)洗脱)来纯化得到1.22g(67％)5-[(二苯亚甲基氨基)甲基]-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(322)，其为油状物:1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01(d,J＝8.5Hz,1H),7.82–7.77(m,1H),7.69(d,J＝7.2Hz,2H),7.60–7.56(m,1H),7.48(d,J＝8.2Hz,1H),7.43(d,J＝8.9Hz,2H),7.37(d,J＝7.0Hz,1H),7.33(t,J＝7.3Hz,2H),7.25-7.20(m,2H),6.66(d,J＝3.7Hz,1H),4.75(s,2H),1.66(s,9H)；MS(ESI)m/z＝445.2[M+1]+。
步骤2:在0℃，历时5分钟，向搅拌的322(1.22g,2.74mmol)和碘甲烷(0.17mL,2.74mmol)于无水THF(22.3mL)中的溶液中滴加叔丁醇钾(358.4mg,3.098mmol)溶于THF(～0.50mL)的溶液。将反应混合物在室温和氮气中搅拌3小时。将反应混合物用EtOAc稀释，并将有机层用水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩得到1.19g(94.6％)5-[1-(二苯亚甲基氨基)乙基]-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(324)，其为泡沫:MS(ESI)m/z＝459.1[M+1]+。
步骤3:向搅拌的324(880.0mg,1.92mmol)于无水MeOH(20mL)中的溶液中添加羟胺盐酸盐(532.9mg,7.70mmol)，将反应混合物在40℃和在氮气中搅拌16小时。真空除去挥发性溶剂并将残余物用EtOAc稀释。将有机层用饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩。将粗制产物通过SiO2色谱法(先用EtOAc/庚烷梯度(20至100％EtOAc)洗脱，然后用MeOH/EtOAc(+1％TEA)梯度(0至80％MeOH)洗脱)来纯化得到290mg(51.3％)5-(1-氨基乙基)-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯(326)，其为白色固体.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.99(d,J＝8.7Hz,1H),7.73(d,J＝3.7Hz,1H),7.64(d,J＝8.7Hz,1H),6.71(d,J＝3.7Hz,1H),4.49(d,J＝6.6Hz,1H),2.36–1.90(m,2H),1.63(s,9H),1.26(d,J＝6.6Hz,3H)。
步骤4:外消旋N2-(1-(4-氯-1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺是用实施例19,步骤1中所述的操作制备的，使用5-(1-氨基乙基)-4-氯-1H-吲哚-1-羧酸叔丁酯代替1-(1H-吲哚-5-基)乙胺己二酸盐作为起始物质。MS(ESI)m/z＝394.2[M+1]+。
步骤5:使用SFC纯化，使外消旋N2-(1-(4-氯-1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺(182.7mg,0.46mmol)经历手性分离。收集第一个洗脱剂峰得到20.2mg(7.5％)(S)-N2-(1-(4-氯-1H-吲哚-5-基)乙基)-N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺，其为白色固体。对映异构体归属基于来自已知立体化学的SAR；SFC LC-MS,RT＝1.02min。
实施例62
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-(1H-吲哚-4-基甲基)-N2-(3-吡啶基甲基)嘧啶-2,4-二胺(II-10)
向5mL微波管中装入N-(1H-吲哚-4-基甲基)-1-(3-吡啶基)甲胺(200mg,0.843mmol,2当量)、2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(100mg,0.424mmol)和正丁醇(1.2mL)。加入DIPEA(5当量,276.98mg,2.1216mmol,0.371mL)，并将反应混合物在油浴中加热至140℃，保持17小时。过滤反应混合物并真空蒸发溶剂。将残余物通过制备性HPLC来纯化得到5836mg(32％)N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-(1H-吲哚-4-基甲基)-N2-(3-吡啶基甲基)嘧啶-2,4-二胺(II-10)，其为浅棕色固体。
实施例63
N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-(二氟甲基)-1H-吡唑-3-基)-N2-甲基嘧啶-2,4-二胺(II-81)
步骤1:向5-(二氟甲基)-1H-吡唑-3-胺(8.0g,60.1mmol)于EtOH(350mL)中的溶液中加入2,4-二氯嘧啶(10.7g,72.1mmol)和DIPEA(10.9g,84.1mmol)。将反应混合物在70℃搅拌30小时。真空浓缩反应混合物。将粗制产物通过SiO2色谱法来纯化得到2-氯-N-(5-(二氟甲基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(1.00g,7％)。1H NMR(400MHz,DMSO)δ13.23(d,J＝68.6Hz,1H),10.57(s,1H),8.22(d,J＝4.9Hz,1H),7.08(m,3H).MS(ESI)m/z:246.0[M+1]+。
步骤2:向小瓶中加入2-氯-N-(5-(二氟甲基)-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(80mg,0.33mmol)、1-(4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-N-甲基甲胺的二HCl盐(138mg,0.39mmol)、DIPEA(0.29mL,1.63mmol)和n-BuOH(1.5mL)，密封并在90℃加热8小时。然后将反应混合物冷却至室温，并加入4N HCl/二噁烷(0.81mL,3.26mmol)。将混合物在40℃搅拌3小时，然后真空浓缩。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化得到15.1mg(12％)N2-((4-氯-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)-N4-(5-(二氟甲基)-1H-吡唑-3-基)-N2-甲基嘧啶-2,4-二胺(II-81)。
实施例64
N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((6-氟-1H-吲唑-4-基)甲基)-N2-(2-(甲基氨基)乙基)嘧啶-2,4-二胺(II-47)
步骤1:在-78℃，历时30分钟，向正丁基锂(13mL,21.4mmol,1.6M于己烷中)于THF(60mL)中的溶液中加入4-溴-6-氟-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(4.00g,13.4mmol)于THF(20mL)中的溶液。将反应混合物温热至-40℃，保持5分钟，重新冷却至-78℃，并加入DMF(4.2mL,53.5mmol)。使反应混合物温热至室温并搅拌2小时。然后将反应用0℃的饱和NH4Cl水溶液淬灭。加入EtOAc并分离各层，将水层用EtOAc萃取一次。干燥(Na2SO4)合并的萃取物，过滤并真空浓缩。将粗制混合物通过SiO2色谱法来纯化得到6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-甲醛(2.18g,66％)，其为白色固体。MS(ESI)m/z:249.3[M+1]+。
步骤2:向6-氟-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-甲醛(175mg,0.71mmol)于MeOH(7mL)中的溶液中加入N-(2-氨基乙基)-N-甲基-氨基甲酸叔丁酯(184mg,1.06mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时，然后加入NaBH4(35.4mg,0.92mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时并加入水。减压除去MeOH并将残余物用1N NaOH溶液稀释。将水溶液用EtOAc萃取两次。干燥(Na2SO4)合并的有机层，真空浓缩得到粗制(2-(((6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,定量收率)。MS(ESI)m/z:407.2[M+1]+。
步骤3:向小瓶中装入2-氯-N-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)嘧啶-4-胺(100mg,0.42mmol)、(2-(((6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)甲基)氨基)乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(207mg,0.51mmol)、DIPEA(0.22mL,1.27mmol)和n-BuOH(0.9mL)，密封并在115℃加热4天。然后将所述反应混合物冷却至室温，并加入4N HCl/二噁烷(1.06mL,4.24mmol)。将反应混合物在室温搅拌16小时，然后真空浓缩。将粗制混合物通过制备性HPLC来纯化得到22.4mg(13％)N4-(5-环丙基-1H-吡唑-3-基)-N2-((6-氟-1H-吲唑-4-基)甲基)-N2-(2-(甲基氨基)乙基)嘧啶-2,4-二胺(II-47)。
实施例65
GST-PAK1-KD(激酶结构域)IC50生化测定方案
人重组GST-PAK1-KD蛋白的活性是在体外测定中通过观察荧光肽底物的磷酸化来评估的。将催化活性的GST-标记的人重组PAK1-KD蛋白(人PAK1的残基#249-545,在N-末端具有His6-GST融合蛋白的UniProtKP/SwissQ13153)克隆到pAcGP67杆状病毒表达载体(EMD Biosciences)中，并转染到Sf9细胞中。
GST-PAK1-KD的活性/抑制是通过测量荧光肽底物(5FAM-RRRLSFAEPG)的磷酸化用微流体移动迁移测定估测的。所述肽底物为基于科技文献中报道的各种PAK1底物的共有序列。20μL测定混合物含有25mM Tris-HCl(pH7.5)、1mM DTT、0.01％Triton X-100、10mM MgCl2、5mMβ-磷酸甘油、0.1mM Na3VO4、0.1％BGG(牛血清丙种球蛋白)、1μM肽底物(5FAM-RRRLSFAEPG)和250pM GST-PAK1-KD。孵育是在22℃在MatriCalMP101384-孔MetriplatesTM中进行的。测定前，将GST-PAK1-KD和测试化合物在2x浓度(5μL浓度为500pM的酶和5μL连续稀释的化合物)的测定缓冲液中预孵育10分钟，并通过添加含有2μM肽底物(2x)和80μM ATP(2x)的10μL测定缓冲液来引发所述测定。孵育30-分钟后，将所述测定混合物通过添加3μL浓度为250mM的EDTA来淬灭，通过毛细管电泳法分离底物和磷酸化产物，并用Caliper3000(Caliper Life Sciences)检测。
实施例66
细胞PAK IC50测定方案
I组PAK(PAK1-3)在与Rho GTPases、Rac1和Cdc42结合后被激活。经激活的I组PAK使丝氨酸298(S298)的MEK1磷酸化，所述丝氨酸298(S298)是对Raf和MEK1之间的稳定缔合和随后MAPK活化重要的催化结构域中的两个位点之一。通过用均相时间分辨荧光(HTRF)检测S298处MEK1磷酸化水平的变化来评估EBC1细胞中I组PAK的抑制。通过在含有0.1％FBS的介质中用PAK抑制剂处理2x104个EBC1细胞来估测抑制活性。用抑制剂处理后，将细胞用含有1x细胞激酶阻断试剂(Cisbio)的25μL1x细胞激酶溶解缓冲液(Cisbio)溶解。细胞溶解物在恒定振摇下在4℃进行了2小时，然后将溶胞产物(16μL)转移到白色384-孔ProxiPlatesTM(Perkin Elmer)中。在1x检测缓冲液(CisBio)中制备标记有铕穴状物供体的抗-总MEK1抗体(1ng/孔)(CellSignaling Technologies目录号为2352)和标记有d2受体的抗-磷酸MEK1(S298)抗体(Cell Signaling Technologies目录号为9128)(10ng/well)，并且添加至所述测定板的每个孔中并将其在室温孵育过夜。第二天，在(Perkin Elmer)中，在激发波长330nm和双发射波长615nm和665nm测量每个孔的荧光发射。每个孔在665nm的信号乘以10,000并除以相同孔在615nm的信号得到比率。将比值([665·10,000]÷615)作为化合物浓度的函数作图，从而确定IC50值。
实施例67
本发明化合物的用于通过数种途径给药的药物组合物可如该实施例中所述来制备。
用于口服给药的组合物(A)
将所述成分混合并分配到胶囊中，每个胶囊含有约100mg；一个胶囊接近每日总剂量。
用于口服给药的组合物(B)
将所述成分组合并用溶剂例如甲醇制粒。然后干燥所述制剂并用适当的压片机成型为片剂(含有约20mg活性化合物)。
用于口服给药的组合物(C)
将所述成分混合并形成用于口服给药的混悬剂。
胃肠外制剂(D)
将活性成分溶解在一部分注射用水中。然后在搅拌下添加足量的氯化钠以使溶液等渗。然后将所述溶液用剩余的注射用水补足重量，用0.2微米膜滤器过滤并在无菌条件下包装。
栓剂(E)
将所述成分融在一起并在蒸气浴上混合，倒入含有2.5g总重量的模具中。
局部用制剂(F)
将除水外的所有成分组合并在搅拌下加热至约60℃。然后在剧烈搅拌下添加约60℃的足量的水以使所述成分乳化，然后添加适量的水至约100g。
为了以本发明不同形式实现本发明，在前述说明书或在随附权利要求书中以它们具体形式或就实施所披露功能或就实施用于获得所披露结果的方法或手段所表达的特征可视需要单独使用或以所述特征的任意组合形式使用。
出于清楚和理解的目的，已通过说明和举例的方式稍微详细地描述了前述本发明。本领域技术人员显而易见的是，可在随附权利要求的范围内进行变化和改变。因此，应当理解的是，上述描述意为说明性的而不是限制性的。因此，本发明的范围不应根据上述说明书来确定，而是应根据随附权利要求以及所述权利要求赋予的等同物的全部范围来确定。
本申请提及的专利、公开的申请和科技文献为本领域技术人员的知识，因此将它们的全部内容并入本申请，并入的程度视为每一篇都被专门且独立地指示并入作为参考。本申请引用的任意参考文献与本说明具体教导内容之间的任意矛盾应以后者为准来解决。同样，本领域就词或短语所理解的定义与本说明书就所述词或短语所具体教导的定义之间的矛盾应以后者为准来解决。

Claims (25)

1.式I化合物或其药用盐，
其中：
A为A-1或A-2；
Z为N或CR2；
R1a和R1b(i)各自独立地为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基，或(ii)R1a和R1b一起为(CH2)2-5；
R2为氢、C1-6烷基、C1-6烷氧基或C3-6环烷基；
Ra为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、C4-7环烷基、吡咯烷基、哌啶基或RcRdN[C(R10)2]2-6；
Rb为氢、C1-6烷基或C3-6环烷基；
Rc和Rd独立地为(i)氢或C1-6烷基，或(ii)Rc和Rd与它们连接的氮一起为吡咯烷环或哌啶环；
R3为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、卤素、C1-6酰基或C1-3卤代烷酰基；
R4每次出现时独立地为羟基、巯基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、卤素、C1-6烷氧基羰基、羧基、C1-6烷基硫基、C1-6羟基烷基、硝基、氨基、C1-3烷基氨基、C1-3二烷基氨基、氨基-C1-3烷基、C1-3烷基氨基-C1-3烷基、C1-3二烷基氨基C1-3烷基、C1-6烷基磺酰基、芳基磺酰基、C1-6烷基氨基磺酰基、芳基氨基磺酰基、C1-6烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、氨基甲酰基、C1-3烷基氨基甲酰基和C1-3二烷基氨基甲酰基、芳基氨基甲酰基、C1-6烷基羰基氨基、芳基羰基氨基；
n为0、1、2或3；
R5为氢、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基、C1-3烷氧基-C1-6烷基、氰基或OR9；
R6为氢、卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、氰基、C1-6羟基烷基或C1-3烷氧基-C1-6烷基；
R7选自(i)C1-10烷基、(ii)C1-10卤代烷基、(iii)任选取代的C3-7环烷基、(iv)C3-7环烷基-C1-6烷基、(v)R9O[C(R10)2]0-6、(vi)C3-7杂环基和(vii)C3-7杂环基-C1-6烷基(viii)C1-6氰基烷基；
R9每次出现时独立地为C1-10烷基、C1-6卤代烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基-C1-6烷基、苯基-C1-6烷基、吡啶基-C1-6烷基、吡啶基或苯基；
R10每次出现时独立地为氢或C1-6烷基；
所述环烷基在每次出现时，独立地任选取代有C1-6烷基、卤素或任选取代的苯基；
所述苯基在每次出现时，独立地任选取代有C1-6烷基、卤素或C1-6烷氧基；
所述杂环基任选独立地取代有卤素或C1-6烷基。
2.权利要求1的化合物，其中A为A2，Z为CR2，和R2和Rb为氢。
3.权利要求1-2中任一项的化合物，其中A为任选取代的吲哚-5-基(A2a):
4.权利要求1-2中任一项的化合物，其中A为任选取代的吲哚-4-基(A2b):
5.权利要求1的化合物，其中A为A2，Z为N，Rb为氢，和R3为氢、C1-6烷基或C1-6烷氧基。
6.权利要求1或5中任一项的化合物，其中A为A2c(任选取代的苯并咪唑-4-基):
7.权利要求1的化合物，其中A为A-1，和R2为氢。
8.权利要求1或7中任一项的化合物，其中A为任选取代的苯并咪唑-5-基(A1a):
9.权利要求1或7中任一项的化合物，其中A为任选取代的苯并咪唑-4-基(A1b):
10.权利要求1-9中任一项的化合物，其中：
Ra独立地为氢、C1-6烷基或RcRdN[C(R10)2]2-6；
R1a为氢或C1-6烷基；
R1b为氢；
R5为氢、C1-6烷基或C1-6卤代烷基；
R6为氢或卤素；
R7为任选取代的C3-7环烷基、C3-7杂环基或C1-6卤代烷基。
11.权利要求1-10中任一项的化合物，其中，R7为任选取代的C3-7环烷基、C1-6卤代烷基、氧杂环丁烷-2-基、氧杂环丁烷-3-基、四氢呋喃-2-基、四氢呋喃-3-基或四氢吡喃基。
12.权利要求1-11中任一项的化合物，其中，R1a为C1-6烷基，R1b为氢，以及与R1a和R1b两者都连接的碳原子的构型为(S)。
13.权利要求1的化合物，所述化合物为选自表I的化合物I-1至I-117和表II的化合物II-1至II-113中的任一个或多个化合物。
14.抑制细胞中PAK1活性的方法，包括使所述细胞与权利要求1-13中任一项的化合物接触。
15.抑制有此需要的患者的PAK活性的方法，包括向所述患者给予权利要求1-13中任一项的化合物。
16.治疗或改善有此需要的患者的癌症或过度增殖性障碍的严重程度的方法，包括向所述患者给予权利要求1-13中任一项的化合物。
17.权利要求16的方法，其中所述癌症或过度增殖性障碍选自腺瘤、膀胱癌、脑癌、乳癌、结肠癌、表皮癌、滤泡性癌、生殖泌尿道癌、成胶质细胞瘤、霍奇金病、头颈癌、肝癌、角化棘皮瘤、肾癌、大细胞癌、白血病、肺腺癌、肺癌、淋巴障碍、黑素瘤和非-黑素瘤皮肤癌、骨髓增生异常综合征、成神经细胞瘤、非-霍奇金淋巴瘤、卵巢癌、乳头状癌、胰腺癌、前列腺癌、直肠癌、肉瘤、小细胞癌、睾丸癌、畸胎癌、甲状腺癌和未分化癌。
18.权利要求17的方法，其中所述癌症或过度增殖性障碍选自肺癌、乳癌、卵巢癌、膀胱癌和头颈癌。
19.权利要求18的方法，其中所述癌症或过度增殖性障碍选自原发性乳腺癌、鳞状非小细胞肺癌或鳞状头颈癌。
20.权利要求15的方法，其中将权利要求1-13中任一项的化合物与用于治疗或改善癌症或过度增殖性障碍的至少一种其它化疗剂共同给药。
21.权利要求20的方法，其中所述其它化疗剂选自细胞凋亡蛋白的抑制剂(IAP)、EGFR抑制剂或拮抗剂、Ras/Raf/Mek/Erk信号级联放大的抑制剂、Akt激酶的抑制剂和Src激酶抑制剂。
22.权利要求1-13中任一项的化合物在制备用于治疗癌症或过度增殖性障碍或改善癌症或过度增殖性障碍的严重程度的药物中的用途。
23.权利要求1-13中任一项的化合物，其用于治疗癌症或过度增殖性障碍或改善癌症或过度增殖性障碍的严重程度。
24.组合物，其包含权利要求1-13中任一项的化合物和至少一种药用载体、赋形剂或稀释剂。
25.如本申请说明书所述的本发明。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108689901A (zh) * 2018-05-05 2018-10-23 西北大学 一种氮杂环丙烯类化合物的合成方法
WO2024125551A1 (zh) * 2022-12-16 2024-06-20 杭州阿诺生物医药科技有限公司 细胞周期蛋白k降解剂及其应用

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101955691B1 (ko) 2010-03-30 2019-03-07 베르선 코포레이션 트롬빈 억제제로서의 다중치환된 방향족 화합물
BR112014026952B1 (pt) * 2012-05-03 2022-03-15 Genentech, Inc Derivados de aminopirimidina pirazol e composição que os compreende
CN103724276A (zh) * 2013-12-13 2014-04-16 成都丽璟科技有限公司 一种由硝基苯胺制备苯并咪唑类化合物的新方法
WO2016025641A1 (en) * 2014-08-13 2016-02-18 Celgene Avilomics Research, Inc. Combinations of an erk inhibitor and an egfr inhibitor and related methods
LT3261639T (lt) * 2015-02-27 2022-11-25 Verseon International Corporation Pakaitiniai pirazolo junginiai kaip serino proteazės inhibitoriai
WO2017144546A1 (en) 2016-02-23 2017-08-31 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of nasopharyngeal carcinoma
US10851108B2 (en) 2016-04-20 2020-12-01 Bristol-Myers Squibb Company Substituted bicyclic heterocyclic compounds
WO2017205425A1 (en) * 2016-05-24 2017-11-30 President And Fellows Of Harvard College Compounds for organic light emitting diode materials
WO2018108627A1 (de) 2016-12-12 2018-06-21 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Verwendung substituierter indolinylmethylsulfonamide oder deren salze zur steigerung der stresstoleranz in pflanzen
CA3056970A1 (en) 2017-03-21 2018-09-27 Bayer Pharma Aktiengesellschaft 2-methyl-quinazolines
EP3781565A1 (en) 2018-04-18 2021-02-24 Bayer Pharma Aktiengesellschaft 2-methyl-aza-quinazolines
EP3825303A4 (en) 2018-07-17 2022-07-06 Nippon Chemiphar Co., Ltd. T-type calcium channel blocker
US20220226299A1 (en) 2019-03-29 2022-07-21 Nippon Chemiphar Co., Ltd. Use of t-type calcium channel blocker for treating pruritus
WO2020212484A1 (en) 2019-04-17 2020-10-22 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treatment of nlrp3 inflammasome mediated il-1beta dependent disorders
EP4073102A4 (en) 2019-12-12 2024-05-08 Ting Therapeutics LLC Compositions and methods for the prevention and treatment of hearing loss
WO2021198511A1 (en) 2020-04-03 2021-10-07 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and compositions for treatment of sars-cov-2 infection
WO2022008597A1 (en) 2020-07-08 2022-01-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical composition for the treatment of infectious diseases
US20230382856A1 (en) * 2020-10-30 2023-11-30 Daiichi Sankyo Company, Limited Method of producing 3-methyl-4-halo-indole derivative
US20250177393A1 (en) * 2022-02-25 2025-06-05 Nalo Therapeutics Modulators of myc family proto-oncogene protein
WO2024261302A1 (en) 2023-06-22 2024-12-26 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Nlrp3 inhibitors, pak1/2 inhibitors and/or caspase 1 inhibitors for use in the treatment of rac2 monogenic disorders
WO2025078334A1 (en) 2023-10-09 2025-04-17 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Combination of pak1 inhibitors and clk inhibitors for preventing resistance to chemotherapy in patients suffering from acute myeloid leukemia
WO2025257786A1 (en) * 2024-06-13 2025-12-18 Iama Therapeutics S.R.L. Benzoimidazole derivatives as nkcc1 inhibitors

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002050065A2 (en) * 2000-12-21 2002-06-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
WO2005049033A1 (en) * 2003-11-17 2005-06-02 Astrazeneca Ab Pyrazole derivatives as inhibitors of receptor tyrosyne kinases
WO2006074057A2 (en) * 2004-12-30 2006-07-13 Exelixis, Inc. Pyrimidine derivatives as kinase modulators and method of use
WO2006123113A2 (en) * 2005-05-16 2006-11-23 Astrazeneca Ab Pyrazolylaminopyrimidine derivatives useful as tyrosine kinase inhibitors
WO2007049041A1 (en) * 2005-10-28 2007-05-03 Astrazeneca Ab 4- (3-aminopyrazole) pyrimidine derivatives for use as tyrosine kinase inhibitors in the treatment of cancer
WO2011060295A1 (en) * 2009-11-13 2011-05-19 Genosco Kinase inhibitors

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7473691B2 (en) 2000-09-15 2009-01-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
US6660731B2 (en) 2000-09-15 2003-12-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
US6613776B2 (en) 2000-09-15 2003-09-02 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
US6610677B2 (en) 2000-09-15 2003-08-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
CA2422367C (en) 2000-09-15 2010-05-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
GB0128134D0 (en) 2001-11-23 2002-01-16 Syngenta Participations Ag A product for use in agriculture or horticulture
WO2005013996A2 (en) 2003-08-07 2005-02-17 Rigel Pharmaceuticals, Inc. 2,4-pyrimidinediamine compounds and uses as anti-proliferative agents
WO2005118544A2 (en) 2004-05-18 2005-12-15 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Cycloalkyl substituted pyrimidinediamine compounds and their uses
EP1877057A1 (en) 2005-04-27 2008-01-16 AstraZeneca AB Use of pyrazolyl-pyrimidine derivatives in the treatment of pain
BRPI0619706A2 (pt) 2005-11-03 2011-10-11 Vertex Pharma composto, composição, método para inibir a atividade da proteìna aurora quinase numa amostra biológica, método para tratar um distúrbio proliferativo num paciente, método para tratar cáncer num indivìduo
US20070179125A1 (en) 2005-11-16 2007-08-02 Damien Fraysse Aminopyrimidines useful as kinase inhibitors
CA2656290A1 (en) 2006-07-05 2008-01-10 Exelixis, Inc. Methods of using igf1r and abl kinase modulators
MX2009011810A (es) 2007-05-02 2010-01-14 Vertex Pharma Tiazoles y pirazoles utiles como inhibidores de cinasa.
AU2008257044A1 (en) 2007-05-24 2008-12-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiazoles and pyrazoles useful as kinase inhibitors
EP2265270A1 (en) * 2008-02-04 2010-12-29 OSI Pharmaceuticals, Inc. 2-aminopyridine kinase inhibitors
US8815877B2 (en) * 2011-12-22 2014-08-26 Genentech, Inc. Serine/threonine kinase inhibitors

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002050065A2 (en) * 2000-12-21 2002-06-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
WO2005049033A1 (en) * 2003-11-17 2005-06-02 Astrazeneca Ab Pyrazole derivatives as inhibitors of receptor tyrosyne kinases
WO2006074057A2 (en) * 2004-12-30 2006-07-13 Exelixis, Inc. Pyrimidine derivatives as kinase modulators and method of use
WO2006123113A2 (en) * 2005-05-16 2006-11-23 Astrazeneca Ab Pyrazolylaminopyrimidine derivatives useful as tyrosine kinase inhibitors
WO2007049041A1 (en) * 2005-10-28 2007-05-03 Astrazeneca Ab 4- (3-aminopyrazole) pyrimidine derivatives for use as tyrosine kinase inhibitors in the treatment of cancer
WO2011060295A1 (en) * 2009-11-13 2011-05-19 Genosco Kinase inhibitors

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108689901A (zh) * 2018-05-05 2018-10-23 西北大学 一种氮杂环丙烯类化合物的合成方法
CN108689901B (zh) * 2018-05-05 2020-04-28 西北大学 一种氮杂环丙烯类化合物的合成方法
WO2024125551A1 (zh) * 2022-12-16 2024-06-20 杭州阿诺生物医药科技有限公司 细胞周期蛋白k降解剂及其应用

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