BRPI0919735B1 - método para manter a capacidade de produção de equol de um micro-organismo produtor de equol - Google Patents
método para manter a capacidade de produção de equol de um micro-organismo produtor de equol Download PDFInfo
- Publication number
- BRPI0919735B1 BRPI0919735B1 BRPI0919735-4A BRPI0919735A BRPI0919735B1 BR PI0919735 B1 BRPI0919735 B1 BR PI0919735B1 BR PI0919735 A BRPI0919735 A BR PI0919735A BR PI0919735 B1 BRPI0919735 B1 BR PI0919735B1
- Authority
- BR
- Brazil
- Prior art keywords
- equol
- fermented
- initiator
- medium
- producing
- Prior art date
Links
- 235000019126 equol Nutrition 0.000 title claims abstract description 313
- ADFCQWZHKCXPAJ-GFCCVEGCSA-N equol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1[C@@H]1CC2=CC=C(O)C=C2OC1 ADFCQWZHKCXPAJ-GFCCVEGCSA-N 0.000 title claims abstract description 311
- ADFCQWZHKCXPAJ-UHFFFAOYSA-N indofine Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1CC2=CC=C(O)C=C2OC1 ADFCQWZHKCXPAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 311
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 194
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 125
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 66
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 97
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 41
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 20
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 20
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 20
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 17
- -1 ascorbyl glucosamine Chemical compound 0.000 claims description 14
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 7
- 125000003289 ascorbyl group Chemical group [H]O[C@@]([H])(C([H])([H])O*)[C@@]1([H])OC(=O)C(O*)=C1O* 0.000 claims description 6
- 150000000996 L-ascorbic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- MIJPAVRNWPDMOR-ZAFYKAAXSA-N L-ascorbic acid 2-phosphate Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(OP(O)(O)=O)=C1O MIJPAVRNWPDMOR-ZAFYKAAXSA-N 0.000 claims description 2
- QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N L-ascorbyl-6-palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N 0.000 claims description 2
- OEWBEINAQKIQLZ-CMRBMDBWSA-N [(2s)-2-[(2r)-3,4-bis(2-hexyldecanoyloxy)-5-oxo-2h-furan-2-yl]-2-(2-hexyldecanoyloxy)ethyl] 2-hexyldecanoate Chemical compound CCCCCCCCC(CCCCCC)C(=O)OC[C@H](OC(=O)C(CCCCCC)CCCCCCCC)[C@H]1OC(=O)C(OC(=O)C(CCCCCC)CCCCCCCC)=C1OC(=O)C(CCCCCC)CCCCCCCC OEWBEINAQKIQLZ-CMRBMDBWSA-N 0.000 claims description 2
- LITUBCVUXPBCGA-UHFFFAOYSA-N ascorbyl stearate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)C1OC(=O)C(O)=C1O LITUBCVUXPBCGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 claims description 2
- 239000003999 initiator Substances 0.000 abstract description 132
- ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N daidzein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 119
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 117
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 103
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 75
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 62
- 235000007240 daidzein Nutrition 0.000 abstract description 61
- 241000894007 species Species 0.000 abstract description 46
- 239000000843 powder Substances 0.000 abstract description 42
- 239000007858 starting material Substances 0.000 abstract description 40
- 235000013322 soy milk Nutrition 0.000 abstract description 23
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 11
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 abstract description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 114
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 93
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 64
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 54
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 52
- 241000194040 Lactococcus garvieae Species 0.000 description 45
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 41
- 239000000047 product Substances 0.000 description 39
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 37
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 30
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 22
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 21
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 21
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 21
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 20
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 20
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 18
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 18
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 18
- 235000013597 soy food Nutrition 0.000 description 18
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 18
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 16
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 14
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 14
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 13
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 12
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 11
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 11
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 10
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 8
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 7
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 7
- 235000003687 soy isoflavones Nutrition 0.000 description 7
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 6
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 6
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 6
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 6
- 235000021243 milk fat Nutrition 0.000 description 6
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- JHYXBPPMXZIHKG-CYBMUJFWSA-N Dihydrodaidzein Natural products C1=CC(O)=CC=C1[C@@H]1C(=O)C2=CC=C(O)C=C2OC1 JHYXBPPMXZIHKG-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 5
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 5
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 5
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 5
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N Gluconic acid Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 4
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 description 4
- 235000010724 Wisteria floribunda Nutrition 0.000 description 4
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 4
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 4
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 description 4
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 4
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 4
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 4
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 4
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 4
- 230000009245 menopause Effects 0.000 description 4
- 229940107524 soy germ Drugs 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 4
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 4
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 4
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 4
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)-N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C(=O)NCCC(N1CC2=C(CC1)NN=N2)=O VZSRBBMJRBPUNF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 3
- 241000606125 Bacteroides Species 0.000 description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000186394 Eubacterium Species 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 208000017657 Menopausal disease Diseases 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000228451 Stevia rebaudiana Species 0.000 description 3
- 239000004376 Sucralose Substances 0.000 description 3
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 3
- 235000006468 Thea sinensis Nutrition 0.000 description 3
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 3
- 235000020279 black tea Nutrition 0.000 description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000013353 coffee beverage Nutrition 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 3
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 3
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 3
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 3
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 3
- HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N rebaudioside A Chemical compound O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]1O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)O[C@]12C(=C)C[C@@]3(C1)CC[C@@H]1[C@@](C)(CCC[C@]1([C@@H]3CC2)C)C(=O)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HELXLJCILKEWJH-NCGAPWICSA-N 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- BAQAVOSOZGMPRM-QBMZZYIRSA-N sucralose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](Cl)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@]1(CCl)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CCl)O1 BAQAVOSOZGMPRM-QBMZZYIRSA-N 0.000 description 3
- 235000019408 sucralose Nutrition 0.000 description 3
- 235000015192 vegetable juice Nutrition 0.000 description 3
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 3
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 3
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 2
- 241000452716 Adlercreutzia equolifaciens Species 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 2
- 241000186018 Bifidobacterium adolescentis Species 0.000 description 2
- 241000186012 Bifidobacterium breve Species 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 2
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 2
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 2
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- 101150029664 PELO gene Proteins 0.000 description 2
- 241000583469 Paraeggerthella hongkongensis Species 0.000 description 2
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 2
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 2
- 208000004880 Polyuria Diseases 0.000 description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000862632 Soja Species 0.000 description 2
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 2
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 2
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 2
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001833 anti-estrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- JHYXBPPMXZIHKG-UHFFFAOYSA-N dihydrodaidzein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1C(=O)C2=CC=C(O)C=C2OC1 JHYXBPPMXZIHKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 230000035619 diuresis Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000001076 estrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 2
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 2
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 239000003075 phytoestrogen Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 210000004908 prostatic fluid Anatomy 0.000 description 2
- 235000020185 raw untreated milk Nutrition 0.000 description 2
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 2
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 2
- 241000589291 Acinetobacter Species 0.000 description 1
- 241000466670 Adlercreutzia Species 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 235000000832 Ayote Nutrition 0.000 description 1
- 241001135228 Bacteroides ovatus Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000004244 Cucurbita moschata Species 0.000 description 1
- 235000009854 Cucurbita moschata Nutrition 0.000 description 1
- 235000009804 Cucurbita pepo subsp pepo Nutrition 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001657509 Eggerthella Species 0.000 description 1
- 241001394620 Eggerthella sp. Species 0.000 description 1
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 1
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001617393 Finegoldia Species 0.000 description 1
- 241000192016 Finegoldia magna Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000394636 Lactobacillus mucosae Species 0.000 description 1
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 1
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 1
- AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(CCNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 244000046146 Pueraria lobata Species 0.000 description 1
- 235000010575 Pueraria lobata Nutrition 0.000 description 1
- 241001657520 Slackia Species 0.000 description 1
- 241001291896 Streptococcus constellatus Species 0.000 description 1
- 241000194046 Streptococcus intermedius Species 0.000 description 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 241001148134 Veillonella Species 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000020244 animal milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 description 1
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 description 1
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 description 1
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 1
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- 210000000692 cap cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015190 carrot juice Nutrition 0.000 description 1
- 210000005056 cell body Anatomy 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 1
- 150000001949 daidzein Chemical class 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 235000006694 eating habits Nutrition 0.000 description 1
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol Chemical compound OC.CCOC(C)=O UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- CADNYOZXMIKYPR-UHFFFAOYSA-B ferric pyrophosphate Chemical compound [Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[Fe+3].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O CADNYOZXMIKYPR-UHFFFAOYSA-B 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 235000006539 genistein Nutrition 0.000 description 1
- TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N genistein Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045109 genistein Drugs 0.000 description 1
- ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N genistein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N 0.000 description 1
- 235000008466 glycitein Nutrition 0.000 description 1
- NNUVCMKMNCKPKN-UHFFFAOYSA-N glycitein Natural products COc1c(O)ccc2OC=C(C(=O)c12)c3ccc(O)cc3 NNUVCMKMNCKPKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DXYUAIFZCFRPTH-UHFFFAOYSA-N glycitein Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(C2=O)=C1OC=C2C1=CC=C(O)C=C1 DXYUAIFZCFRPTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020251 goat milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 239000010903 husk Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N isoflavone Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC(OC)=C1C1=COC2=C(C=CC(C)(C)O3)C3=C(OC)C=C2C1=O CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002515 isoflavone derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008696 isoflavones Nutrition 0.000 description 1
- 229930013032 isoflavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000003817 isoflavonoid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000012891 isoflavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 229930013686 lignan Natural products 0.000 description 1
- 150000005692 lignans Chemical class 0.000 description 1
- 235000009408 lignans Nutrition 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 1
- 238000001139 pH measurement Methods 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 208000001685 postmenopausal osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 235000015136 pumpkin Nutrition 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 235000020122 reconstituted milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 235000020254 sheep milk Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229910021654 trace metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 1
- 238000001238 wet grinding Methods 0.000 description 1
- 235000008939 whole milk Nutrition 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1236—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt using Leuconostoc, Pediococcus or Streptococcus sp. other than Streptococcus Thermophilus; Artificial sour buttermilk in general
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
- A23L11/00—Pulses, i.e. fruits of leguminous plants, for production of food; Products from legumes; Preparation or treatment thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
- A23C11/00—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions
- A23C11/02—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins
- A23C11/10—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins containing or not lactose but no other milk components as source of fats, carbohydrates or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
- A23C11/00—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions
- A23C11/02—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins
- A23C11/10—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins containing or not lactose but no other milk components as source of fats, carbohydrates or proteins
- A23C11/103—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins containing or not lactose but no other milk components as source of fats, carbohydrates or proteins containing only proteins from pulses, oilseeds or nuts, e.g. nut milk
- A23C11/106—Addition of, or treatment with, microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/13—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using additives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/13—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using additives
- A23C9/1315—Non-milk proteins or fats; Seeds, pulses, cereals or soja; Fatty acids, phospholipids, mono- or diglycerides or derivatives therefrom; Egg products
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
- A23L11/00—Pulses, i.e. fruits of leguminous plants, for production of food; Products from legumes; Preparation or treatment thereof
- A23L11/50—Fermented pulses or legumes; Fermentation of pulses or legumes based on the addition of microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
- A23L11/00—Pulses, i.e. fruits of leguminous plants, for production of food; Products from legumes; Preparation or treatment thereof
- A23L11/60—Drinks from legumes, e.g. lupine drinks
- A23L11/65—Soy drinks
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/065—Microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
- A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
- C07D311/58—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
- C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
- C07D311/58—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4
- C07D311/60—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/21—Streptococcus, lactococcus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Neurology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Obesity (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
MÉTODO PARA MANTER A CAPACIDADE DE PRODUÇÃO DE EQUOL DE UM MICRO-ORGANISMO PRODUTOR DE EQUOL A presente invenção refere-se um produto fermentado contendo micro-organismos produtores de equol no estado de células vivas pelos quais a capacidade de produção de equol é mantida. Quando produzindo um material fermentado usando um micro-organismo produtor de equol, com pó de soja ou leite de soja como materiais brutos, (1) preparação de um iniciador mãe por fermentação sob condições anaeróbicas usando um micro-organismo produtor de equol na presença de uma espécie de daidzeína em pH 5,0 ou maior, (2) preparação de um iniciador de volume por fermentação sob condições anaeróbicas usando referido iniciador mãe na presença de uma espécie de daidzeína em pH 5,0 ou maior, e (3) preparando um material fermentado por fermentação usando referido iniciador de volume em um meio contendo pó de soja ou leite de soja, possibilita a produção de um material fermentado contendo micro-organismos no estado de células vivas em que a capacidade de produção de equol é mantida.
Description
[0001] A presente invenção refere-se a um produto fermentado contendo micro-organismos produtores de equol no estado de células vivas pelo qual a capacidade de produção de equol é mantida, e um processo de preparação destes. A presente invenção também se refere a uma composição contendo um micro-organismo produtor de equol no estado de uma célula viva, em que a capacidade de produção de equol do micro-organismo pode ser estavelmente mantida, mesmo após armazenagem.
[0002] Isoflavonas contidas na soja (por exemplo, isoflavonas de soja, tais como, daidzeína, genisteína, e gliciteína) têm estruturas similares ao estradiol, e uma ação antiestrogênica e ação similar a estrogênio associadas com ligação a um receptor de estrogênio (a seguir, referido como ER). Estudos epidemiológicos e estudos de intervenção em isoflavonas de soja conduzidos desse modo de longe sugerem que isoflavonas de soja têm um efeito preventivo, atribuível à ação antiestrogênica, em cânceres dependentes de hormônio tais como câncer de mama e câncer de próstata; e um efeito de melhora, atribuível à ação similar a estrogênio, em distúrbios de menopausa, osteoporose pós menopausa e hiperlipidemia.
[0003] Recentemente, foi reportado que o princípio ativo dos efeitos fisiológicos destas isoflavonas de soja pode ser equol, um metabólito de daidzeína. Mais especificamente, foi reportado que equol tem uma maior capacidade para ligar-se ao ER (especialmente ao ERβ) do que isoflavonas de soja, e que ele tem uma capacidade de transição notavelmente elevada para órgãos-alvo tais como tecidos de mama e próstata (referem-se a Documentos de não patente 1-4). Além disso, um estudo de controle de caso relata que existem significantemente poucos pacientes de câncer de mama e câncer de próstata que podem produzir equol. Os efeitos de melhora de metabolismo de lipídeo e densidade óssea de isoflavonas de soja foram examinados em mulheres pós menopausa categorizadas em dois grupos: aquelas que podiam produzir equol, e aquelas que não podiam. Uma melhora significante naquelas que podiam produzir equol foi observada.
[0004] Equol é produzido pelo metabolismo de daidzeína por bactérias entéricas. A capacidade para produzir equol varia entre os indivíduos, e a porcentagem de japoneses que podem apresentar produção de equol é relatadamente cerca de 50%. Isto é, cerca de 50% de japoneses são incapazes de produzir equol (não produtores de equol). Tais indivíduos podem não gostar dos benefícios fisiológicos úteis fornecidos pela ação de equol, mesmo se eles ingerirem sojas e alimentos de soja processados. Portanto, a fim de um não produtor de equol alcançar os benefícios fisiológicos úteis fornecidos pela ação de equol, a ingestão do próprio equol é suposta ser eficaz.
[0005] Micro-organismos produtores de equol já são conhecidos; por exemplo, Bacteroides E-23-15 (FERM BP-6435), Streptococcus E-23-17 (FERM BP-6436), Streptococcus A6G225 (FERM BP-6437) e Lactococcus 20-92 (FERM BP-10036) foram isolados de dentro do intestino humano pelos presentes inventores (referem-se a Documentos de Patente 1 e 2).
[0006] Consequentemente, é suposto que se um produto fermentado contendo micro-organismos produtores de equol no estado de células vivas podem ser fornecidos, ingestão de um micro-organismo produtor de equol pode tornar-se possível, possibilitando os indivíduos beneficiarem-se dos efeitos úteis dos micro-organismos produtores de equol. Entretanto, se um produto fermentado é produzido usando um micro-organismo produtor de equol de acordo com métodos comuns, a capacidade de produção de equol do micro-organismo é problematicamente perdida; e portanto, um produto fermentado contendo micro-organismos produtores de equol no estado de células vivas não pode ser obtido. Além disso, uma vez que os microorganismos produtores de equol têm uma forte tendência para perder sua capacidade de produção de equol devido a baixas condições de pH ou armazenagem aeróbica, mesmo se um produto fermentado pudesse ser produzido ao mesmo tempo que mantendo a capacidade de produção de equol do micro-organismo, a capacidade de produção de equol, não sendo capaz de suportar a armazenagem, seria perdida no estágio de distribuição.
[0007] Com tal técnica anterior como base, o desenvolvimento de um produto fermentado contendo micro-organismos no estado de células vivas pelo qual a capacidade de produção de equol pode ser mantida é desejado.
[Documento anterior]
[Documento de patente]
[Documento de patente 1] WO99/007392
[Documento de patente 2] Wo2005/000042
[Documento de não patente 1] Morito K, Hirose T, Kinjo J, Hirakawa T, Okawa M, Nohara T, Ogawa S, Inoue S, Muramatsu M, Masamune Y. Interaction of phytoestrogens with estrogen receptors a and β. Biol Pharm Bull 24(4):351-356, 2001
[Documento de não patente 2] Maubach J, Bracke ME, Heyerick A, Depypere HT, Serreyn RF, Mareel MM, Keukeleire DD. Quantitation of soy-derived phytoestrogens in human breast tissue and biological fluids by high-performance liquid chromatography. J Chromatography B 784:137-144, 2003
[Documento de não patente 3] Morton MS, Chan PSF, Cheng C, Blacklock N, Matos-Ferreira A, Abranches-Monteiro L, Correia R, Lloyd S, Griffiths K. Lignans and isoflavonoids in plasma and prostatic fluid in men: Samples from Portugal, Hong Kong, and the United Kingdom. Prostate 32:122-128, 1997
[Documento de não patente 4] Tammy EH, Paul DM, Paul GF, Robert D, Stephen B, Kenneth J, Ray M, Lorraine GO, Kristiina W, Holly MS, Karen JG. Long-term dietary habits affect soy isoflavona metabolism and accumulation in prostatic fluid in Caucasian men. J Nutr 135:1400-1406, 2005
[Documento anterior]
[Documento de patente]
[Documento de patente 1] WO99/007392
[Documento de patente 2] Wo2005/000042
[Documento de não patente 1] Morito K, Hirose T, Kinjo J, Hirakawa T, Okawa M, Nohara T, Ogawa S, Inoue S, Muramatsu M, Masamune Y. Interaction of phytoestrogens with estrogen receptors a and β. Biol Pharm Bull 24(4):351-356, 2001
[Documento de não patente 2] Maubach J, Bracke ME, Heyerick A, Depypere HT, Serreyn RF, Mareel MM, Keukeleire DD. Quantitation of soy-derived phytoestrogens in human breast tissue and biological fluids by high-performance liquid chromatography. J Chromatography B 784:137-144, 2003
[Documento de não patente 3] Morton MS, Chan PSF, Cheng C, Blacklock N, Matos-Ferreira A, Abranches-Monteiro L, Correia R, Lloyd S, Griffiths K. Lignans and isoflavonoids in plasma and prostatic fluid in men: Samples from Portugal, Hong Kong, and the United Kingdom. Prostate 32:122-128, 1997
[Documento de não patente 4] Tammy EH, Paul DM, Paul GF, Robert D, Stephen B, Kenneth J, Ray M, Lorraine GO, Kristiina W, Holly MS, Karen JG. Long-term dietary habits affect soy isoflavona metabolism and accumulation in prostatic fluid in Caucasian men. J Nutr 135:1400-1406, 2005
[0008] Consequentemente, um objetivo da presente invenção é fornecer um produto fermentado contendo um micro-organismo produtor de equol no estado de uma célula viva pelo qual a capacidade de produção de equol é mantida. Outro objetivo da presente invenção é fornecer uma composição contendo micro-organismo produtor de equol contendo um micro-organismo produtor de equol no estado de uma célula viva pelo qual a capacidade de produção de equol é mantida, e que, além disso, permite a capacidade de produção de equol ser estavelmente mantida mesmo após armazenagem.
[0009] Os presentes inventores conduziram pesquisa intensiva para obter os objetivos acima, e descobriram, surpreendentemente, que é possível obter, em uma escala industrialmente aplicável, um material fermentado contendo micro-organismos produtores de equol no estado de células vivas pelo qual a capacidade de produção de equol é mantida trazendo ideias inventivas particulares na seleção da atmosfera de fermentação, pH e similares de acordo com os materiais brutos usados em cada etapa, da preparação de um iniciador mãe à fermentação principal usando um micro-organismo produtor de equol. Os presentes inventores também descobriram que adicionando ácido ascórbico e/ou um derivado deste a uma composição contendo micro-organismos produtores de equol no estado de células vivas, a capacidade de produção de equol dos micro-organismos produtores de equol poderia ser estavelmente mantida, permitindo uma composição contendo microorganismo produtor de equol com excelente estabilidade de armazenagem ser obtida. Especificamente, os presentes inventores descobriram o seguinte.
[00010] Quando produzindo um material fermentado usando um micro-organismo produtor de equol com pó de soja ou leite de soja como materiais brutos, um material fermentado contendo micro-organismos no estado de células vivas pelo qual a capacidade de produção de equol é mantida pode ser preparado por: (1) realizando fermentação sob uma condição anaeróbica usando um micro-organismo produtor de equol na presença de uma espécie de daidzeína em pH 5.0 ou maior para preparar um iniciador mãe; (2) realizando fermentação sob uma condição anaeróbica usando o iniciador mãe acima na presença de uma espécie de daidzeína em pH 5.0 ou maior para preparar um iniciador de volume; e (3) realizando fermentação usando o iniciador de volume acima em um meio contendo pó de soja ou leite de soja para preparar um material fermentado.
[00011] Quando preparando um material fermentado usando microorganismos produtores de equol com leite como um material bruto, um material fermentado contendo micro-organismos no estado de células vivas pelo qual a capacidade de produção de equol é mantida pode ser preparado por: preparando um iniciador mãe conduzindo fermentação na presença de uma espécie de daidzeína sob condições anaeróbicas; e, quando o material bruto de leite é fermentado usando o iniciador mãe, conduzindo a fermentação na presença de uma espécie de daidzeína sob uma condição de pH 4.6 ou maior. O material fermentado pode reter a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol durante um longo período de tempo, e exibe excelente estabilidade de armazenagem. Além disso, realizando todas as etapas de fermentação, isto é, da preparação do iniciador mãe à fermentação do material bruto de leite, na presença de um extrato de levedura, a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol e a estabilidade de armazenagem podem ser também melhoradas.
[00012] A composição pela qual a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol não seria perdida mesmo após armazenagem poder ser obtida adicionando ácido ascórbico e/ou um derivado deste ao produto fermentado contendo micro-organismos produtores de equol no estado de células vivas.
[00013] A presente invenção foi realizada com base nestas descobertas, e também melhoras destas descobertas.
[00014] Especificamente, a presente invenção fornece as seguintes invenções.
[00015] Item 1. Um processo para produzir um material fermentado compreendendo as etapas de:
- (1) conduzir a fermentação anaeróbica em um meio contendo pelo menos um tipo de espécies de daidzeína selecionado do grupo que consiste em glicosídeo de daidzeína, daidzeína e di-hidrodaidzeína, usando um micro-organismo produtor de equol, em um estado onde pH 5.0 ou maior é mantido para preparar um iniciador mãe;
- (2) conduzir a fermentação usando o iniciador mãe obtido na etapa (1) no meio contendo as espécies de daidzeína em um estado onde pH 5.0 ou maior é mantido para preparar um iniciador de volume; e
- (3) conduzir a fermentação usando o iniciador de volume obtido na etapa (2) em um meio contendo pó de soja e/ou leite de soja para obter um material fermentado.
[00016] Item 2. O processo de produção de acordo com Item 1, em que o micro-organismo produtor de equol é uma bactéria de ácido láctico.
[00017] Item 3. O processo de produção de acordo com Item 1, em que o micro-organismo produtor de equol é Lactococcus garvieae.
[00018] Item 4. Um processo para produzir um material fermentado compreendendo as etapas de:
- (I) conduzir a fermentação anaeróbica em um meio contendo pelo menos um tipo de espécies de daidzeína selecionado do grupo que consiste em glicosídeo de daidzeína, daidzeína e di-hidrodaidzeína usando um micro-organismo produtor de equol para preparar um iniciador mãe; e
- (II) conduzir a fermentação usando o iniciador mãe obtido na etapa (I) em um meio contendo o composto de espécies de daidzeína e leite, em um estado onde pH 4.6 ou maior é mantido para obter um material fermentado.
[00019] Item 5. O processo de produção de acordo com Item 4, em que extrato de hipocotila de soja é usado como as espécies de daidzeína.
[00020] Item 6. O processo de produção de acordo com Item 4, em que o meio usado nas etapas (I) e (II) também contém extrato de levedura.
[00021] Item 7. O processo de produção de acordo com Item 4, em que o micro-organismo produtor de equol é uma bactéria de ácido láctico.
[00022] Item 8. O processo de produção de acordo com Item 4, em que o micro-organismo produtor de equol é Lactococcus garvieae.
[00023] Item 9. Um produto fermentado contendo um material fermentado obtido pelo processo de produção de acordo com qualquer um dos itens 1 a 3.
[00024] Item 10. Um produto fermentado contendo um material fermentado obtido pelo processo de produção de acordo com qualquer um dos itens 4 a 8.
[00025] Item 11. O produto fermentado de acordo com Item 10, em que o pH deste é 4.6 ou maior.
[00026] Item 12. Uma composição contendo micro-organismo produtor de equol contendo (A) um micro-organismo produtor de equol em um estado de uma célula viva, e (B) pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em ácido ascórbico, derivados deste e sais deste.
[00027] Item 13. Uma composição de acordo com Item 12, em que o (B) componente é contido em uma proporção de mistura de 0,05 a 5 % peso.
[00028] Item 14. Uma composição de acordo com Item 12, em que o pH deste é 5.0 ou menor.
[00029] Item 15. Uma composição de acordo com Item 12, que compreende um material fermentado que foi fermentado usando um micro-organismo produtor de equol como o micro-organismo produtor de equol no estado de uma célula viva.
[00030] Item 16. Uma composição de acordo com Item 12, que é uma bebida de soja fermentada ou um leite de soja fermentado.
[00031] Item 17. Uma composição de acordo com Item 12, em que o micro-organismo produtor de equol é uma bactéria de ácido láctico.
[00032] Item 18. Uma composição de acordo com Item 12, em que o micro-organismo produtor de equol é Lactococcus garvieae.
[00033] Item 19. Um método para manter a capacidade de produção de equol de um micro-organismo produtor de equol, o método compreendendo: adicionar pelo menos um membro selecionado do grupo consisitindo em ácido ascórbico, derivados deste, e sais deste a uma composição contendo um micro-organismo produtor de equol, no estado de uma célula viva.
[00034] De acordo com o processo de produção da presente invenção, visto que um produto fermentado contendo micro-organismos produtores de equol no estado de células vivas pelo qual a capacidade de produção de equol é mantida pode ser preparado, a provisão de bebidas e alimentos contendo um micro-organismo produtor de equol no estado de uma célula viva pode ser realizada no primeiro momento.
[00035] Além disso, o processo de produção da presente invenção permite a fermentação processando ao mesmo tempo que mantendo a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol, mesmo quando aplicado em um processo de produção de massa industrialmente aplicável. Isto torna a presente invenção altamente prática comercialmente, e extremamente útil.
[00036] Quando bebidas e alimentos que contêm micro-organismos produtores de equol no estado de uma célula viva pelo qual a capacidade de produção de equol é mantida são fornecidos aos humanos que são incapazes de produzir equol (não produtores de equol), os não produtores de equol podem adquirir capacidade de produção de equol, e portanto benefícios das atividades biológicas eficazes atribuíveis ao equol.
[00037] Além disso, de acordo com a composição contendo microorganismo produtor de equol da presente invenção, a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol pode ser estavelmente mantida durante um longo período de tempo; isto é, a estabilidade de armazenagem é fornecida, o que pode permitir o microorganismo produtor de equol para suficientemente resistir à distribuição e vendas. Em particular, se a composição contendo micro-organismo produtor de equol da presente invenção está na forma de uma bebida de soja fermentada ou um leite de soja fermentado, visto que o microorganismo produtor de equol no estado de uma célula viva é contido juntamente com constituintes derivados de soja úteis tais como espécies de daidzeína, é vantajosamente mais fácil para o micro-organismo produtor de equol gerar equol no intestino.
[00038] A figura 1 mostra os resultados de medições da contagem de células viáveis da cepa de Lactococcus contida em cada bebida no exemplo 4.
[00039] A figura 2 mostra os resultados de medições da capacidade de produção de equol da cepa de Lactococcus contida em cada bebida no exemplo 4.
[00040] Na presente invenção, um micro-organismo produtor de equol é um micro-organismo tendo a capacidade para utilizar pelo menos um tipo de espécies de daidzeína selecionado do grupo consisitindo em glicosídeo de daidzeína, daidzeína e di-hidrodaidzeína para produzir equol (atividade metabólica). Exemplos específicos do glicosídeo de daidzeína incluem daidzina, malonildaidzina, acetildaidzina e similares. Não existe nenhuma limitação particular aos micro-organismos produtores de equol usados na presente invenção, contanto que eles possam ser ingeridos como alimento e sua capacidade de produção de equol pode ser mantida. Micro-organismos conhecidos tendo as capacidades acima mencionadas são, por exemplo, micro-organismos pertencentes ao gênero Lactococcus tais como Lactococcus garvieae; micro-organismos pertencentes ao gênero Streptococcus tais como Streptococcus intermedius e Streptococcus constellatus; micro-organismos pertencentes ao gênero Lactobacillus tais como Lactobacillus mucosae; micro-organismos pertencentes ao gênero Bacteroides tais como Bacteroides ovatus; micro-organismos pertencentes ao gênero Enterococcus tais como Enterococcus faecium; micro-organismos pertencentes ao gênero Finegoldia tais como Finegoldia magna; micro-organismos pertencentes ao gênero Veillonella; micro-organismos pertencentes ao gênero Adlercreutzia tais como Adlercreutzia equolifaciens; micro-organismos pertencentes ao gênero Eubacterium tais como Eubacterium limnosus; microorganismos pertencentes ao gênero Eggerthella tais como Eggerthella hongkongensis; micro-organismos pertencentes ao gênero Bifidobacterium tais como Bifidobacterium adolescentis e Bifidobacterium breve; micro-organismos pertencentes ao gênero Slacki, micro-organismos pertencentes ao gênero Acinetobacter, e similares. Entre os micro-organismos produtores de equol, preferivelmente bactérias de ácido láctico tais como do gênero Lactococcus, o gênero Streptococcus, o gênero Lactobacillus e o gênero Bifidobacterium, mais preferivelmente bactérias de ácido láctico pertencentes ao gênero Lactococcus, e particularmente preferivelmente Lactococcus garvieae podem ser usadas. Micro-organismos produtores de equol podem ser isolados, por exemplo, de dentro do intestino humano com a presença e ausência de capacidade de produção de equol como uma indicação. Com respeito aos micro-organismos produtores de equol acima mencionados, bactérias isoladas do intestino humano e identificadas pelos presentes inventores e outros, isto é, Lactococcus 20-92 (FERM BP-10036), Streptococcus E-23-17 (FERM BP-6436), Streptococcus A6G225 (FERM BP-6437), e Bacteroides E-23-15 (FERM BP-6435) foram depositadas, e estas bactérias depositadas podem ser usadas na presente invenção. Além disso, as micro-organismos produtores de equol, Eubacterium limnosus (ATCC 8486), Eggerthella sp. (KCC10490), Adlercreutzia equolifaciens (JCM14793), Eggerthella hongkongensis HKU10 (JCM14552), Bifidobacterium adolescentis TM-1 (FERM P-20325), Bifidobacterium breve (JCM1273), Slackia TM30 (FERM AP-20729), Gram-positive bacterium do03 (AHU-1763) (FERM AP-20905) e similares podem também ser usados. Entre estas bactérias depositadas, Lactococcus 20-92 é preferivelmente usada na presente invenção.
[00041] A seguir, processos de produção (primeiro método e segundo método) para o material fermentado, o produto fermentado, e a composição contendo micro-organismo produtor de equol da presente invenção serão detalhados. O primeiro método é um método para preparar o material fermentado com pó de soja e/ou leite de soja como materiais brutos, e o segundo método é um método para preparar o material fermentado com leite como o material bruto.
[00042] Na presente especificação, um iniciador mãe é um iniciador (inócuo) preparado de uma cultura de cepo, e um iniciador de volume é um iniciador (inócuo) preparado de um iniciador mãe e usado na principal fermentação quando preparando uma grande quantidade de material fermentado.
[00043] O presente primeiro método para preparar um material fermentado compreende uma etapa (1) de preparação de um iniciador mãe (a seguir pode ser referido como "iniciador mãe-1"), uma etapa (2) usando iniciador mãe-1 para preparar um iniciador de volume (a seguir pode ser referido como "iniciador de volume-1") e uma etapa (3) usando iniciador de volume-1 para preparar um material fermentado com pó de soja ou leite de soja como um material bruto. A seguir, o presente primeiro método para preparar o material fermentado será explicado em detalhes etapa por etapa.
[00044] Na presente invenção, primeiro, um micro-organismo produtor de equol é anaerobicamente fermentado em um meio contendo uma espécie de daidzeína (a seguir pode ser referido como "meio de iniciador mãe-1") em um estado onde pH 5.0 ou maior é mantido para preparar um iniciador mãe (a seguir pode ser referido como "iniciador mãe-1") (etapa (1)).
[00045] Não existe nenhuma limitação particular sobre o meio iniciador mãe-1 na medida em que ele permite um micro-organismo produtor de equol desenvolver-se, e é aceitável como um constituinte de alimento; e a composição deste é adequadamente estabelecida de acordo com os tipos do material fermentado finalmente preparados.
[00046] Espécie de daidzeína usada para o meio iniciador mãe-1 é uma incluindo um tipo ou dois ou mais tipos de espécies de daidzeína entre glicosídeo de daidzeína, daidzeína e di-hidrodaidzeína. Exemplos específicos de glicosídeo de daidzeína incluem daidzina, malonildaidzina, acetildaidzina, e similares. Na presente invenção, qualquer produto puro de espécies de daidzeína, um produto grosseiramente purificado de espécies de daidzeína e uma substância contendo espécies de daidzeína podem ser usados como as espécies de daidzeína. Exemplos específicos de substâncias contendo espécies de daidzeína incluem soja, leite de soja, germe de soja, kudzu, raiz de kudzut, arvoredo vermelho, alfalfa, e extratos destes (extratos de solvente polares tais como de água e álcool hidroso), e similares. Do ponto de vista de estavelmente mantendo a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol, as espécies de daidzeína usadas na presente invenção são preferivelmente soja, leite de soja, germe de soja ou extratos destes, e particularmente preferivelmente soja.
[00047] Aqui, a soja a ser usada como as espécies de daidzeína é preferivelmente a soja que foi colocada em pó, mais preferivelmente a soja que foi impregnada de vapor ou fervida e colocada em pó, e particularmente preferivelmente a soja que foi impregnada de vapor ou fervida a 65 a 105°C durante 30 segundos a 30 minutos, e colocada em pó. Além disso, ao mesmo tempo que não existe nenhuma limitação particular sobre o diâmetro de partícula médio da soja colocada em pó, do ponto de vista de fornecer o material fermentado preparado com textura satisfatória, é geralmente desejável que o diâmetro mediano seja na ordem de aproximadamente 50 μm ou menor. Além disso, é desejável que exista 10% ou menos de partículas com diâmetros de partícula de 150 μm ou maior. Note que o diâmetro de partícula é medido usando um metro de distribuição de tamanho de partícula tipo difração/difusão a laser.
[00048] Exemplos das proporções de misturas da substância contendo espécies de daidzeína no meio iniciador mãe-1 são proporções tais que a quantidade total das espécies de daidzeína torna-se 0,002 a 0,04 % peso, preferivelmente 0,004 a 0,02 % peso, e mais preferivelmente 0,008 a 0,012 % peso. Mais especificamente, quando o pó de soja é usado como as espécies de daidzeína, as proporções são tais que o pó de soja convertido em peso seco torna-se 3 a 28 % peso no meio iniciador mãe-1, preferivelmente 5 a 28 % peso, e mais preferivelmente 7 a 17 % peso. Além disso, quando o extrato de germe de soja é usado como as espécies de daidzeína, as proporções são tais que o extrato de germe de soja convertido em peso seco torna-se 0,005 a 0,1 % peso no meio iniciador mãe-1, preferivelmente 0,01 a 0,05 % peso, e mais preferivelmente 0,02 a 0,03 % peso. Incluindo as espécies de daidzeína em tais proporções de misturas, um micro-organismo produtor de equol pode ser desenvolvido sem perder a capacidade de produção de equol, permitindo o iniciador mãe-1 ser obtido.
[00049] Além disso, a fim de promover o desenvolvimento do microorganismo produtor de equol, um aminoácido tal como arginina, vitaminas tal como ácido ascórbico, ou um metal de traço tal como pirofosfato de ferro pode estar contido no meio iniciador mãe-1. A adição de arginina no meio iniciador mãe-1 é desejável a fim de o desenvolvimento do micro-organismo produtor de equol tornar-se satisfatório; exemplos das proporções de misturas de arginina no meio iniciador mãe-1 são 0,01 a 1 % peso, preferivelmente 0,05 a 0,3 % peso.
[00050] Além disso, além dos constituintes acima, nutrientes tais como uma fonte de nitrogênio e uma fonte de carbono podem ser adicionados ao meio iniciador mãe-1, como necessário.
[00051] Visto que o meio iniciador mãe-1 algumas vezes afeta o sabor do material fermentado, os meios de cultura que não afetam negativamente o sabor do material fermentado são dados como exemplos preferíveis.
[00052] O meio de iniciador mãe-1 é preparado misturando, emulsificando como necessário e em seguida esterilizando quantidades dadas de constituintes aditivos.
[00053] Na presente etapa (1), a fermentação anaeróbica de microorganismo produtor de equol pode ser realizada por métodos bem conhecidos convencionais que usam pacotes de gás e jarras anaeróbicas.
[00054] Além disso, na presente etapa (1), a fermentação anaeróbica é realizada mantendo o pH a 5.0 ou maior, preferivelmente 5.5 a 8.0 e mais preferivelmente 6.0 a 8.0. Mantendo o pH desta maneira, o iniciador mãe-1, em que um micro-organismo produtor de equol foi desenvolvido sem perder a capacidade de produção de equol pode ser preparado, permitindo a capacidade de produção de equol do microorganismo ser estavelmente mantida no material fermentado finalmente obtido pelo presente primeiro método de processo de produção. O controle do pH durante tal fermentação anaeróbica pode ser realizado por métodos bem conhecidos. Por exemplo, no meio usado, se a proporção de mistura do carboidrato (por exemplo, glicose ou similares) utilizada pelo micro-organismo produtor de equol for estabelecida a 0,5 % peso ou menos, preferivelmente 0,4 % peso ou menos e mais preferivelmente 0,3 % peso ou menos, o pH não cai mesmo se a fermentação prosseguir, permitindo o pH durante a fermentação anaeróbica ser mantido nas faixas mencionadas acima. Além disso, o controle de pH durante a fermentação anaeróbica pode também ser realizado adequadamente adicionando um ajustador de pH.
[00055] A fermentação anaeróbica na presente etapa (1) é realizada inoculando o meio iniciador mãe-1 com o inócuo de um micro-organismo produtor de equol, e deixar fermentar anaerobicamente em uma região de temperatura possibilitando o desenvolvimento do micro-organismo, preferivelmente em uma região de temperatura muito favorável do micro-organismo durante 20 a 96 horas, mais preferivelmente 72 a 96 horas. Mais especificamente, quando usando uma bactéria de ácido láctico como um micro-organismo produtor de equol, isto é suficiente para fermentar anaerobicamente a, por exemplo, 35 a 39°C durante 72 a 96 horas.
[00056] O iniciador mãe-1 obtido desta maneira contém um microorganismo produtor de equol que foi desenvolvido e que está em um estado em que a capacidade de produção de equol é mantida.
[00057] O iniciador mãe desse modo obtido pode ser diretamente fornecido para Etapa (2). Alternativamente, é também possível usar o iniciador mãe como inócuo para produzir um iniciador mãe adicional, se necessário, da mesma maneira como descrito acima, e em seguida fornecer o iniciador mãe adicional no subsequente processo de produção. O processo de produção reutilizando o iniciador mãe produzido da mesma maneira como descrito acima pode ser repetido uma vez ou mais; por exemplo, o processo de produção pode ser repetido 1 a 10 vezes. Mesmo se a fermentação for repetida reutilizando o iniciador mãe, contanto que as condições acima possam ser encontradas, os micro-organismos produtores de equol podem estar contidos no iniciador mãe 1 ao mesmo tempo que mantendo a capacidade de produção de equol.
[00058] A seguir, usando o iniciador mãe-1 obtido na etapa anterior (1), a fermentação é realizada com um meio contendo as espécies de daidzeína (a seguir pode ser referido como “meio de iniciador de volume-1”) em um estado onde pH 5.0 ou maior é mantido para preparar o iniciador de volume-1 (a seguir pode ser referido como "iniciador de volume-1”) (Etapa (2)).
[00059] Não existe nenhuma limitação particular no meio iniciador de volume -1 na medida em que ele contém as espécies de daidzeína, que permite um micro-organismo produtor de equol desenvolver-se, e ser aceito como um constituinte de alimento; e o meio iniciador de volume- 1 é adequadamente estabelecido de acordo com o tipo do material fermentado.
[00060] Contendo as espécies de daidzeína, o meio iniciador de volume-1 possibilita o desenvolvimento em um estado em que a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol é mantida. Os tipos e proporções de misturas das espécies de daidzeína misturados no meio iniciador de volume-1 são os mesmo como no meio de fermentação principal-1 descrito posteriormente.
[00061] Além disso, os tipos e proporções de misturas dos constituintes aditivos misturáveis além das espécies de daidzeína no meio iniciador de volume-1 são os mesmos como no meio iniciador mãe-1 descrito acima. Além disso, visto que o meio iniciador de volume-1 algumas vezes afeta o sabor do material fermentado, exemplos preferivelmente incluem o meio de cultura que não afeta negativamente o sabor do material fermentado, e mais preferivelmente incluem aqueles tendo a mesma composição como o meio iniciador mãe-1 descrito acima.
[00062] Meio de iniciador de volume-1 é preparado misturando, emulsificando como necessário e em seguida esterilizando quantidades dadas de constituintes aditivos.
[00063] Na presente etapa (2), a fermentação anaeróbica é realizada mantendo o pH a 5.0 ou maior, preferivelmente 5.5 a 8.0, e mais preferivelmente 6.0 a 8.0. Mantendo o pH desta maneira, o iniciador de volume-1, em que um micro-organismo produtor de equol foi desenvolvido sem perder a capacidade de produção de equol, pode ser preparado, permitindo a capacidade de produção de equol do microorganismo ser estavelmente mantida no material fermentado finalmente obtido pelo presente primeiro método de processo de produção. O controle do pH durante tal fermentação pode ser realizado por métodos como os mesmos como aqueles na etapa anterior (1).
[00064] Além disso, na presente etapa (2), ao mesmo tempo que a fermentação pode ser realizada em atmosfera aeróbica ou anaeróbica, dos pontos de vista de decréscimo do custo de fabricação, conveniência operacional e similares, realização da fermentação em uma atmosfera aeróbica é desejável. Apesar dos micro-organismos produtores de equol serem propensos a perder a capacidade de produção de equol em uma atmosfera aeróbica, a capacidade de produção de equol pode ser mantida controlando a condição de pH em uma faixa específica durante a cultura, mesmo em uma atmosfera aeróbica.
[00065] A fermentação na presente etapa (2) é realizada adicionando o iniciador mãe-1 obtido na etapa (1) acima ao meio iniciador de volume-1, por exemplo na ordem de 0,5 a 10 porcento em volume, preferivelmente na ordem de 1 a 5 porcento em volume, e deixa fermentar em uma região de temperatura possibilitando o desenvolvimento do micro-organismo, preferivelmente em uma região de temperatura mais favorável do micro-organismo durante 10 a 28 horas, preferivelmente 14 a 24 horas. Mais concretamente, quando usando uma bactéria de ácido láctico como um micro-organismo produtor de equol, é suficiente para fermentar anaerobicamente, por exemplo, a 35 a 39°C durante 14 a 24 horas.
[00066] O iniciador de volume-1 obtido desta maneira contém um micro-organismo produtor de equol que foi desenvolvido e está em um estado em que a capacidade de produção de equol é mantida.
[00067] Ao mesmo tempo que o iniciador de volume-1 pode ser submetido em seu estado corrente a seguinte etapa (3), o iniciador de volume-1 pode, como necessário, ser usado como um iniciador (iniciador de volume primário), a presente etapa (2) realizada novamente para preparar um iniciador de volume secundário, e este iniciador de volume secundário submetido a seguinte etapa (3).
[00068] A seguir, usando o iniciador de volume-1 obtido na etapa anterior (2), a fermentação é realizada com um meio contendo a pó de soja e/ou leite de soja (a seguir pode ser referido como "o meio de fermentação principal-1”) para preparar um material fermentado (etapa (3)).
[00069] Não existe nenhuma limitação particular ao meio de fermentação principal-1, na medida em que ele contém pelo menos um pó de soja e leite de soja, permite um micro-organismo produtor de equol desenvolver-se, e é aceitável como um constituinte de alimento.
[00070] Um exemplo específico do meio contendo pó de soja usado como o meio de fermentação principal-1 é uma solução aquosa contendo pó de soja. Dos pontos de vista de tornar o sabor e textura satisfatórios e, além disso, eliminando o odor de soja, é desejável usar pó de soja que tenha sofrido tratamento térmico por vapor ou fervura como o pó de soja usado no meio de fermentação principal-1. Um exemplo específico de pó de soja que tenha sofrido tratamento térmico desta maneira é a soja que foi impregnada de vapor ou fervida a 65 a 105°C durante 30 segundos a 30 minutos, e colocada em pó. Além disso, ao mesmo tempo em que não existe nenhuma limitação particular sobre o diâmetro de partícula médio do pó de soja, do ponto de vista de fornecer o material fermentado preparado com uma textura satisfatória, é geralmente desejável que o diâmetro mediano seja na ordem de aproximadamente 50 μm ou menor. Além disso, é desejável que existam 10% ou menos partículas com diâmetros de partícula de 150 μm ou maior. Note que o diâmetro de partícula é medido usando um metro de distribuição de tamanho de partícula tipo difração/difusão a laser. Quando uma solução aquosa contendo pó de soja é usada como o meio de fermentação principal-1, o pó de soja é desejavelmente adicionado à água e submetido a um tratamento de homogeinização usando um homogeinizador ou similares. Conduzindo um tratamento de homogeinização desta maneira, uma excelente textura, em particular maciez, pode ser conferida ao material fermentado preparado. Além disso, quando uma solução aquosa contendo pó de soja é usada como o meio de fermentação principal-1, ao mesmo tempo em que não existe nenhum limite particular na proporção de mistura de pó de soja na solução aquosa, o pó de soja é, por exemplo, convertido em peso seco a 3 a 28 % peso, preferivelmente 5 a 28 % peso, e mais preferivelmente 7 a 17 % peso.
[00071] Quando um meio contendo leite de soja é usado como o meio de fermentação principal-1, leite de soja em seu estado corrente pode ser usado como o meio de fermentação principal-1. Processos de produção para leite de soja são bem conhecidos no correspondente campo técnico. Especificamente, leite de soja pode ser preparado por moagem de material bruto de soja não descascada, adicionando-se a soja não descascada à água para moagem úmida para criar uma suspensão (feijão cru; suco de feijão), tratamento térmico desta suspensão quando necessário, e em seguida removendo o conteúdo sólido (okara) por tratamento de separação sólido-líquido.
[00072] Além disso, o meio de fermentação principal-1 pode também incluir outros constituintes aditivos na composição acima. Visto que a composição do meio de fermentação principal-1 influencia o sabor e textura do material fermentado preparado, os outros constituintes aditivos que devem ser misturados são adequadamente determinados de acordo com o tipo de material fermentado que é o alvo da preparação. Constituintes aditivos misturados no meio de fermentação principal-1 incluem, por exemplo, adoçantes tais como sacarose, sucralose e estévia; aromatizantes tais como extrato de café e extrato de chá preto; aroma; constituintes derivados de planta tais como suco de fruta, fragmentos de fruta, suco de vegetal e fragmentos de vegetal; acidulantes tais como ácido glucônico; metais tais como sódio, potássio, cálcio, zinco e ferro; vitaminas tais como ácido ascórbico; e similares. Visto que uma queda em pH não deve ser suprimida na fermentação da presente etapa (3), constituintes derivados de planta contendo adoçantes incluindo sacarídeos (sacarose, glicose, e similares) e similares utilizados pelo micro-organismo produtor de equol podem ser contidos no meio de fermentação principal-1.
[00073] O meio de fermentação principal-1 é preparado misturando quantidades dadas de constituintes, que são emulsificadas como necessário e em seguida esterilizadas.
[00074] Para a fermentação na presente etapa (3), o iniciador de volume-1 obtido na etapa acima (2) é suficientemente adicionado ao meio de fermentação principal-1 na ordem, por exemplo, de 0,5 a 10% em volume, e preferivelmente na ordem de 1 a 5% em volume; e em seguida agitando ou deixando descansar a mistura em uma região de temperatura possibilitando o desenvolvimento do micro-organismo, preferivelmente em uma região de temperatura mais favorável do microorganismo durante 10 a 28 horas, mais preferivelmente 14 a 24 horas. Especificamente, quando usando uma bactéria de ácido láctico como um micro-organismo produtor de equol, fermentando a, por exemplo, 35 a 39°C durante 14 a 24 horas é suficiente.
[00075] Ao mesmo tempo em que a principal fermentação na presente etapa (3) pode ser realizada na atmosfera aeróbica ou anaeróbica, dos pontos de vista de decréscimo do custo de fabricação, conveniência operacional e similares, realização em uma atmosfera aeróbica é desejável.
[00076] Além disso, na fermentação na presente etapa (3), o pH durante fermentação necessita ser particularmente controlado. Em geral, como uma fermentação na presente etapa (3) prossegue, o pH no material fermentado tende a cair para a ordem de 5.0 ou menor.
[00077] Apesar da forte tendência para perder capacidade de produção de equol ser normalmente observada em um micro-organismo produtor de equol em uma atmosfera aeróbica e na ordem de pH 5.0 ou menor, de acordo com o presente primeiro método de processo de produção, usando o iniciador de volume-1 preparado por meio das etapas acima (1) e (2) para realizar fermentação do estágio final permite um material fermentado contendo micro-organismos produtores de equol no estado de células vivas pelo qual a capacidade de produção de equol é mantida ser produzido.
[00078] Quando um meio contendo pó de soja é usado como o meio de fermentação principal-1, soja fermentada para ser usada como um produto de bebida ou alimento é finalmente obtida como um material fermentado. Além disso, quando um meio contendo leite de soja é usado como o meio de fermentação principal-1, leite de soja fermentado para ser usado como um produto de bebida ou alimento é finalmente obtido como um material fermentado. O presente primeiro método de processo de produção é adequado para preparar produtos de bebida ou alimento de soja fermentada, isto é, para a preparação de um material fermentado em que um meio contendo pó de soja foi fermentado.
[00079] O material fermentado obtido desta maneira contém um micro-organismo produtor de equol como uma célula viva em que a capacidade de produção de equol é ainda mantida.
[00080] O presente segundo método para preparar um material fermentado compreende etapa (I) de preparação de um iniciador mãe (a seguir pode ser referido como "iniciador mãe-2”) e etapa (II) conduzindo fermentação usando iniciador mãe-2 com leite como material bruto. A seguir, o processo de produção da presente invenção será descrito em detalhes etapa por etapa.
[00081] Na presente invenção, primeiro, um micro-organismo produtor de equol é anaerobicamente fermentado em um meio contendo uma espécie de daidzeína (a seguir referido como "meio de iniciador mãe-2”) para preparar um iniciador mãe (Etapa (I)).
[00082] Na medida em que o meio iniciador mãe-2 permite um microorganismo produtor de equol desenvolver-se e é aceitável como um constituinte de alimento, não existe nenhuma limitação particular sobre uma composição deste, que pode ser adequadamente estabelecido de acordo com o tipo de material fermentado.
[00083] Com respeito às espécies de daidzeína usadas no meio iniciador mãe-2, ao mesmo tempo em que elas são as mesmas como aquelas usadas no meio iniciador mãe-1 do primeiro método acima, no presente segundo método de processo de produção, do ponto de vista de estavelmente mantendo a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol, hipocotila de soja ou um extrato desta é desejável, e um extrato de hipocotila de soja é particularmente desejável.
[00084] A proporção de mistura das espécies de daidzeína a ser misturada no meio iniciador mãe-2 é a mesma como aquela do meio iniciador mãe-1 usada no primeiro método acima.
[00085] Também, além dos constituintes acima, o meio iniciador mãe-2 pode também conter outros constituintes aditivos. Os tipos e proporções de misturas do outro constituinte aditivo que são misturáveis no meio iniciador mãe-2 são os mesmos como aqueles no meio iniciador mãe-1 usados no primeiro método acima.
[00086] Em particular, o meio iniciador mãe-2 desejavelmente contém constituintes derivados de levedura tais como extrato de levedura e hidrolisado de levedura, e agentes promotores de fermentação tais como hidrolisado de soro e hidrolisado de caseína. No presente segundo método de processo de produção, um constituinte derivado de levedura, em particular extrato de levedura, pode estavelmente manter a capacidade de produção de equol do microorganismo produtor de equol. Extrato de levedura pode geralmente ser adicionado ao meio iniciador mãe-2 nas proporções de misturas de, por exemplo, 0,0125 % peso ou mais, preferivelmente 0,05 a 1 % peso, e mais preferivelmente 0,1 a 0,2 % peso. Se a concentração de extrato de levedura preenche a faixa mencionada acima, a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol pode também ser estavelmente mantida durante um longo período de tempo no material fermentado finalmente preparado.
[00087] Visto que o meio iniciador mãe-2 algumas vezes afeta o sabor do material fermentado finalmente preparado, o meio de cultura inclui, por exemplo, meios que não afetam negativamente o sabor do material fermentado; exemplos incluem meios contendo leite, e, quando necessário, um constituinte contendo gordura de leite, além dos constituintes acima. Os tipos e proporções de misturas do leite e constituintes contendo gordura de leite misturados no meio iniciador mãe-2 são os mesmos como no meio-2 de fermentação descrito abaixo. Um desejável exemplo de um meio iniciador mãe-2 é um com a mesma composição como o principal meio-2 de fermentação usado na etapa (II).
[00088] O meio de iniciador mãe-2 é preparado misturando, emulsificando como necessário e em seguida esterilizando quantidades dadas de constituintes aditivos.
[00089] Na presente etapa (1), a fermentação anaeróbica de um micro-organismo produtor de equol pode ser realizada por métodos convencialmente conhecidos usando pacotes de gás e jarras anaeróbicas.
[00090] Além disso, na presente etapa (I) é desejável manter o pH durante fermentação anaeróbica a 4,6 ou maior, preferivelmente 5,0 a 7,0, e mais preferivelmente 5,5 a 6,5. Mantendo o pH desta maneira, os efeitos da presente invenção de desenvolvimento de um microorganismo produtor de equol sem perder a capacidade de produção de equol, e também estavelmente mantendo a capacidade de produção de equol do micro-organismo após preparação pode ser realçado. O controle do pH durante tal fermentação anaeróbica pode ser realizado por métodos iguais àqueles da etapa (1) no primeiro método acima.
[00091] A fermentação anaeróbica na presente etapa (I) é realizada por inoculação do meio iniciador mãe-2 com o inócuo de um microorganismo produtor de equol, e deixando a mistura fermentar anaerobicamente em uma região de temperatura que permite o crescimento do micro-organismo, preferivelmente em uma região de temperatura ideal do micro-organismo durante 20 a 28 horas, mais preferivelmente 22 a 26 horas. Especificamente, quando usando uma bactéria de ácido láctico como um micro-organismo produtor de equol, fermentando anaerobicamente, por exemplo, a 35 a 39°C durante 22 a 26 horas é suficiente.
[00092] O iniciador mãe-2 obtido desta maneira contém um microorganismo produtor de equol que foi desenvolvido e que esta em um estado em que a capacidade de produção de equol é mantida.
[00093] A seguir, usando o iniciador mãe-2 obtido na etapa anterior(l), um meio contendo a espécie de daidzeína (a seguir referido como "o meio-2 de fermentação principal”) é fermentado em um estado onde o pH 4,6 ou maior é mantido (a seguir pode ser referido como "a fermentação principal”) (etapa (II)).
[00094] Na presente etapa (II), enquanto o iniciador mãe-2 obtido na etapa acima (I) pode ser adicionado ao meio-2 de fermentação principal para realizar a fermentação principal, quando preparando uma grande quantidade de produto de leite fermentado, o iniciador mãe-2 pode ser usado para também preparar um iniciador de volume (a seguir pode ser referido como "iniciador de volume-2”), e o iniciador de volume-2 adicionado ao meio de fermentação principal para realizar a fermentação principal.
[00095] Para o meio usado na preparação do iniciador de volume-2 (a seguir mencionado "meio iniciador de volume-2”), um meio contendo a espécie de daidzeína é usado. Misturando-se a espécie de daidzeína desta maneira, o crescimento é possível em um estado que mantém a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol. Os tipos e proporções de misturas da espécie de daidzeína a serem misturados no meio iniciador de volume-2 são os mesmos daqueles no meio iniciador mãe-2 acima.
[00096] Não existe nenhuma limitação particular sobre o meio iniciador de volume-2, na medida em que ele contém a espécie de daidzeína, permite um micro-organismo produtor de equol desenvolver-se, e é aceitável como um constituinte de alimento; e o meio iniciador de volume-2 é adequadamente estabelecido de acordo com o tipo do material fermentado. Os tipos e proporções de misturas dos constituintes aditivos misturáveis em adição à espécie de daidzeína no meio iniciador de volume-2 são os mesmos daqueles no meio iniciador mãe-2 descritos acima. Observe que, a fim de estavelmente manter a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol, é desejável que o meio iniciador de volume-2 também contenha um constituinte derivado de levedura, em particular um extrato de levedura. Além disso, visto que o meio iniciador de volume-2 algumas vezes afeta o sabor do material fermentado, o meio iniciador de volume-2 desejavelmente contém leite, e, quando necessário, um constituinte contendo gordura de leite.
[00097] Exemplos do meio iniciador de volume-2 preferivelmente inclui um meio que não influencia negativamente o sabor do material fermentado, e, mais preferivelmente, é um com a mesma composição do meio-2 de fermentação principal.
[00098] O meio iniciador de volume-2 é preparado misturando, emulsificando quando necessário, e em seguida esterilizando as quantidades dadas de constituintes de misturas.
[00099] A fim de preparar o iniciador de volume-2, o iniciador mãe-2 obtido na etapa acima (I) é adicionado ao meio iniciador de volume-2 na ordem, por exemplo, de 1 para 10% em volume, preferivelmente na ordem de 1 para 5% em volume; e deixado fermentar em uma região de temperatura possibilitando o crescimento do microrganismo, preferivelmente em uma região de temperatura ideal do microorganismo durante 20 a 28 horas, mais preferivelmente 22 a 26 horas. Especificamente, quando usando uma bactéria de ácido láctico como um micro-organismo produtor de equol, fermentando em, por exemplo, 35 a 39°C durante 22 a 26 horas é suficiente.
[000100] Na preparação do iniciador de volume-2, ao mesmo tempo em que a fermentação pode ser realizada em uma atmosfera aeróbica ou anaeróbica, do ponto de vista de diminuir o custo de fabricação, conveniência operacional e similares, a realização em uma atmosfera aeróbica é desejável.
[000101] Além disso, na preparação do iniciador de volume-2, ao mesmo tempo em que não existe nenhuma limitação particular com respeito ao pH durante a fermentação, mantendo um pH de 4,6 ou maior, preferivelmente 5,0 a 7,0, e mais preferivelmente 5,5 a 6,5 é desejável. Mantendo o pH desta maneira, o micro-organismo produtor de equol pode ser desenvolvido sem perder a capacidade de produção de equol. Tal controle de pH durante fermentação pode ser realizado por métodos iguais àqueles na etapa anterior(l).
[000102] Ao mesmo tempo em que o iniciador de volume-2 pode ser submetido em seu estado atual à seguinte fermentação principal, o iniciador de volume-2 pode, quando necessário, ser usado como um iniciador (iniciador de volume primário), com a fermentação realizada novamente nas mesmas condições daqueles para o iniciador de volume-2 para preparar um iniciador de volume secundário, e em seguida o iniciador de volume secundário submetido à seguinte fermentação principal.
[000103] Não existe nenhuma limitação particular quanto ao meio-2 de fermentação principal usado na presente etapa (II), na medida em que o meio-2 de fermentação principal contém a espécie de daidzeína e leite, permite um micro-organismo produtor de equol desenvolver-se, e é aceitável como um constituinte de alimento.
[000104] Uma espécie de daidzeína usada no meio-2 de fermentação principal são os mesmos daqueles usado no meio iniciador mãe-1 do primeiro método acima. Entretanto, do ponto de vista de estavelmente mantendo a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol, no segundo método presente de processo de produção, hipocotila de soja ou extrato da mesma é desejável, e extrato de hipocotila de soja é particularmente desejável.
[000105] As proporções de misturas da espécie de daidzeína a serem misturados no meio-2 de fermentação principal são os mesmos daqueles no meio iniciador mãe-2 acima.
[000106] Além disso, como o leite usado no meio-2 de fermentação principal, um leite aceitável como alimento é suficiente. Exemplos de tais leites incluem leites animais tais como leite de vaca, leite de cabra e leite de ovelha; leite não gorduroso; leite recontituido obtido dissolvendo-se leite seco não gorduroso ou leite integral seco; e similares.
[000107] Além disso, no meio-2 de fermentação principal, a fim de melhorar o sabor do material fermentado preparado, o meio-2 de fermentação principal pode conter constituinte contendo gordura de leite tais como creme fresco e manteiga. Exemplos gerais das proporções de misturas deste constituinte contendo gordura de leite convertido na quantidade de gordura de leite são 0,1 a 4,5 % de peso, preferivelmente 0,5 a 4,2 % de peso , e mais preferivelmente 1,0 a 3,5 % de peso.
[000108] Além disso, os tipos e proporções de misturas dos constituintes aditivos que são misturáveis no meio-2 de fermentação principal em adição às constituintes acima são as mesmas daquelas no meio iniciador mãe-2 acima. Observe que, a fim de estavelmente manter a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol, é desejável que o meio-2 de fermentação principal também contenha um constituinte derivado de levedura, em particular extrato de levedura.
[000109] O meio-2 de fermentação principal é preparado misturando, emulsificando quando necessário e em seguida respectivamente esterilizando uma quantidade dada de leite, a espécie de daidzeína, e, quando necessário, outros constituintes aditivos.
[000110] Para a fermentação principal na presente etapa (II), é suficiente adicionar o iniciador mãe-2 obtido na etapa acima (I) ou o iniciador de volume-2 acima ao meio-2 de fermentação principal na ordem, por exemplo, de 1 a 10% em volume, preferivelmente 1 a 5% em volume; e agitando ou deixando descansar a mistura em uma região de temperatura possibilitando o crescimento do micro-organismo, preferivelmente em uma região de temperatura ideal do microorganismo durante 20 a 28 horas, mais preferivelmente 22 a 26 horas. Especificamente, quando usando uma bactéria de ácido láctico como um micro-organismo produtor de equol, fermentando a, por exemplo, 35 a 39°C durante 22 a 26 horas é suficiente.
[000111] Ao mesmo tempo em que a fermentação principal na presente etapa (II) pode ser realizada em uma atmosfera aeróbica ou anaeróbica, do ponto de vista de diminuir o custo de fabricação, conveniência operacional e similares, a realização em uma atmosfera aeróbica é desejável.
[000112] Além disso, na fermentação principal na presente etapa (II), o pH durante fermentação é mantido a 4,6 ou maior, preferivelmente 5,0 a 7,0, e mais preferivelmente 5,5 a 6,5. Mantendo o pH desta maneira, um micro-organismo produtor de equol pode ser desenvolvido sem perder a capacidade de produção de equol, e a capacidade de produção de equol do micro-organismo pode ser estavelmente mantido mesmo após a preparação. O controle do pH durante tal fermentação anaeróbica pode ser realizado por métodos iguais àqueles da etapa (I).
[000113] No segundo método presente de processo de produção, leite fermentado é preparado como o material fermentado. O material fermentado contém um micro-organismo produtor de equol no estado de uma célula viva sem perder a capacidade de produção de equol.
[000114] Além disso, a presente invenção fornece um produto fermentado contendo o material fermentado obtido no primeiro método acima e no segundo método. Isto equivale dizer, o material fermentado obtido no primeiro método acima e no segundo método pode ser fornecido como produtos fermentados em seu estado atual; ou, quando necessário, misturando constituintes aditivos tais como, por exemplo, adoçantes tais como sacarose, sucralose e estévia; aromatizantes tais como extrato de café e extrato de chá preto; aroma; constituintes derivados de planta tais como pó de soja, fragmentos de soja, suco de fruta, fragmentos de fruta, suco de vegetal e fragmentos de vegetal; metais tais como sódio, potássio, cálcio, zinco e ferro; vitaminas tais como ácido ascórbico; agentes de gelação; estabilizantes tais como ácido glucônico; e diluentes tais como água. Acima de tudo, o material fermentado obtido pelo primeiro método acima descrito é fornecido desejavelmente como um produto fermentado misturado com uma solução aquosa contendo pó de soja.
[000115] No presente produto fermentado, não existe nenhum limite particular com respeito às proporções de misturas dos materiais fermentados obtidos no primeiro método acima e no segundo método; por exemplo, as proporções de misturas podem ser 5 a 100 % de peso, preferivelmente 10 a 100 % de peso.
[000116] Não existe nenhuma limitação particular com respeito ao pH do presente produto fermentado. Por exemplo, se o foco está em estavelmente manter a capacidade de produção de equol do microorganismo produtor de equol dentro do produto fermentado durante um longo período de tempo, é desejável que o pH seja ajustado para 4,6 ou maior, preferivelmente 5,0 a 7,0, e mais preferivelmente 5,5 a 6,5. Por outro lado, com a proliferação de bactérias contaminantes na região neutra sendo uma preocupação, se o foco está na supressão da proliferação de bactérias contaminantes, é desejável que o pH seja ajustado para 5,0 ou menos, preferivelmente 4,0 para 4,8, e mais preferivelmente 4,2 para 4,6.
[000117] A morfologia do presente produto fermentado é determinado pelo tipo do meio de fermentação principal usado no tempo de preparação, o tipo do material fermentado obtido no primeiro método acima ou no segundo método, o tipo de constituinte aditivo misturado no material fermentado, e similares; e pode ser qualquer de uma forma líquida, forma semissólida, forma sólida ou forma de gel. Exemplos desejáveis de uma morfologia do presente produto fermentado inclui bebidas e alimentos de soja fermentado, bebidas e alimentos de leite de soja fermentado, leite fermentado e similares. Aqui, leite fermentado inclui yogurte (tipo duro, tipo macio, tipo bebida), bebidas de bactérias de ácido láctico, e similares.
[000118] Visto que o presente produto fermentado contém um microorganismo produtor de equol no estado de uma célula viva, a distribuição e vendas sob baixa temperatura é desejável.
[000119] Visto que o presente produto fermentado contém um microorganismo produtor de equol que mantém a capacidade de produção de equol mesmo no estado de uma célula viva, várias atividades biológicas e atividades farmacológicas com base no micro-organismo podem ser expressas. Consequentemente, o presente produto fermentado pode ser especificamente usado em bebidas e alimentos para saúde, bebidas e alimentos suplementos dietéticos, bebidas e alimentos funcionais, bebidas e alimentos para os doentes, e similares, em adição a bebidas e alimentos gerais.
[000120] Por exemplo, visto que o presente produto fermentado, quando consumido, permite o equol ser gerado pela ação do micro- organismo produtor de equol no intestino, e permite as atividades biológicas de equol serem recebidas efetivamente, o presente produto fermentado é útil em aplicações tal como, por exemplo: a prevenção ou tratamento de doenças e sintomas tais como distúrbios de menopausa, osteoporose, hipertrofia da próstata e síndrome metabólica; diminuir o valor de colesterol sanquíneo; branqueamento da pele; melhora de acne; regulação intestinal; melhora de obesidade; e diurese. Entre este, o presente produto fermentado é particularmente útil na prevenção ou melhora de enfermidade indefinida, ou em sintomas associados com menopausa (por exemplo, osteoporose, distúrbios de menopausa e similares) em meia idade e mulheres mais velhas.
[000121] Ao mesmo tempo em que a ingestão diária do presente produto de leite fermentado varia de acordo com a contagem de célula do micro-organismo produtor de equol no presente produto de leite fermentado, a idade e peso corporal do consumidor, o número de ingestões e similares, a ingestão de adulto diária pode ser, por exemplo, uma quantidade correspondente a 10 para 500 g do presente produto fermentado.
[000122] Adicionando pelo menos um membro selecionado do grupo consistindo de ácido ascórbico, derivados dos mesmos e sais dos mesmos para uma composição contendo um micro-organismo produtor de equol no estado de uma célula viva, a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol pode ser estavelmente mantido mesmo sob baixa pH ou condições de armazenagem aeróbica; e a perda da capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol em uma composição pode ser suprimida, mesmo se armazenada durante um longo período de tempo. Desse modo, a presente invenção também fornece uma composição contendo micro- organismo de produtor de equol (a seguir pode ser referida simplesmente como "a presente composição") contendo um microorganismo produtor de equol no estado de uma célula viva (a seguir pode ser referido como simplesmente "constituinte (A)"), bem como pelo menos um membro selecionado do grupo consistindo de ácido ascórbico, derivados dos mesmos e sais dos mesmos (a seguir pode ser referido simplesmente como “constituinte (B)”).
[000123] Na presente composição, células vivas isoladas ou grosseiramente purificadas de um micro-organismo produtor de equol podem ser usadas como o micro-organismo produtor de equol; além disso, um material fermentado usando um micro-organismo produtor de equol pode também ser usado.
[000124] Ao mesmo tempo em que não existe nenhuma limitação particular com respeito à concentração de micro-organismo produtor de equol contido na presente composição, exemplos da concentração inclui 1x105 a 1010 cfu/g, preferivelmente 1x106 a 1010 cfu/g, e mais preferivelmente 1x107 a 1010 cfu/g.
[000125] Na presente composição, (B) constituinte é misturado a fim de estavelmente manter a capacidade de produção de equol do microorganismo produtor de equol. Entre os constituintes (B), não existe nenhuma limitação particular com respeito a derivados de ácido ascórbico, contanto que eles tenham um substituinte ligado ao ácido ascórbico por meio de uma ligação de éster ou uma ligação de éter, e sejam admitidos como constituinte de alimentos; exemplos específicos incluem 2,6-dipalmitato de ascorbila, 6-estearato de ascorbila, 2-fosfato de ascorbila, 2-sulfato de ascorbila, 2-glucosídeo de ascorbila, glucosamina de ascorbila, 6-palmiato de ascorbila, tetra-isopalmitato de L-ascorbila, decanoato de tetra 2-hexila de ascorbila, e similares. Além disso, exemplos de sais de ácido ascórbico e derivados dos mesmos, embora não particularmente limitados, contanto que eles sejam aceitáveis como constituinte de alimentos, incluem sais de metal alcalino tal como sais de metal alcalino de sódio. Exemplos desejáveis entre os constituintes (B) incluem ácido ascórbico e sais dos mesmos. Na presente composição, os constituintes (B) podem ser usados individualmente ou em combinação.
[000126] Exemplos gerais das proporções de misturas do constituinte (B) acima na presente composição inclui 0,05 a 5 % de peso, preferivelmente 0,05 a 2 % de peso, e mais preferivelmente 0,1 a 2,0 % de peso. Satisfazendo tais proporções de misturas, a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol pode ser estavelmente retido.
[000127] Não existe também nenhuma limitação particular com respeito ao pH da presente composição, que é adequadamente estabelecido de acordo com o tipo da presente composição. Do ponto de vista de supressão da proliferação de bactérias contaminantes na presente composição, é desejável que o pH seja ajustado para 5,0 ou menos, preferivelmente 4,0 a 4,8, e mais preferivelmente 4,2 a 4,6. Embora a tendência de um micro-organismo produtor de equol para perder a capacidade de produção de equol geralmente torne-se mais forte sob um ambiente de pH 5,0 ou menos, após o que a capacidade de produção de equol pode não mais ser estavelmente mantida, de acordo com a presente composição, a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol pode ser estavelmente mantido mesmo sob condições em que o pH é 5,0 ou menos, devido a ação de ácido ascórbico e/ou derivado do mesmo.
[000128] A presente composição pode conter, quando necessário, constituintes aditivos tais como, por exemplo, adoçantes tais como sacarose, sucralose e estévia; aromatizantes tais como extrato de café e extrato de chá preto; aroma; constituintes derivados de planta tais como suco de fruta, fragmentos de fruta, suco de vegetal e fragmentos de vegetal; metais tais como sódio, potássio, cálcio, zinco e ferro; vitaminas tais como β-caroteno; agentes de gelação; estabilizantes tais como ácido glucônico; e diluentes tais como água. Aqui, os constituintes aditivos a serem misturados na presente composição são preferivelmente aqueles que não são utilizados pelo micro-organismo produtor de equol afim de não perder a capacidade em armazenar.
[000129] Não existe também nenhuma limitação particular com relação a morfologia da presente composição, que pode ser qualquer de uma forma líquida, forma semissólida, forma sólida ou forma de gel.
[000130] Um exemplo de uma morfologia desejável da presente composição é um produto fermentado obtido adicionando ácido ascórbico e/ou um derivado do mesmo, e, se necessário, outros constituintes aditivos a um material fermentado que foi fermentado usando um micro-organismo produtor de equol. Aqui, exemplos do material fermentado usando um micro-organismo produtor de equol preferivelmente inclui materiais fermentados preparados pelo primeiro método acima e pelo segundo método. Além disso, exemplos específicos do produto fermentado inclui bebidas e alimentos de soja fermentado, bebidas e alimentos de leite de soja fermentado, leite fermentado, e similares. Aqui, leite fermentado inclui iogurte (tipo duro, tipo macio, tipo bebida), bebida de bactéria de ácido láctico, e similares. Entre estes, os produtos fermentados são preferivelmente bebida e alimento de soja fermentados, e bebida e alimento de leite de soja fermentado; e mais preferivelmente bebida e alimento de soja fermentados.Além disso, outro exemplo preferido de uma morfologia da presente composição é uma composição contendo células vivas isoladas ou grosseiramente purificadas de micro-organismo produtor de equol, ácido ascórbico e/ou a derivado do mesmo, veículos comestíveis, bem como outros constituintes aditivos, quando necessário. Exemplos de veículos comestíveis inclui uma solução aquosa contendo pó de soja, leite de soja, água, gel comestível, leite, várias soluções de sal e similares.
[000131] Visto que o presente produto fermentado contém um microorganismo produtor de equol no estado de uma célula viva, distribuição e vendas sob baixa temperatura é desejável.
[000132] Visto que a presente composição contém um microorganismo produtor de equol em um estado que mantém a capacidade de produção de equol mesmo como uma célula viva, várias atividades biológicas e atividades farmacológicas com base no micro-organismo podem ser expressas. Consequentemente, a presente composição pode ser usada nos campos de medicina, ou bebida e alimento.
[000133] Quando a presente composição é usada no campo de bebida e alimento, a presente composição é fornecida, como bebidas e alimentos específicos para saúde, bebidas e alimentos suplementos dietéticos, bebidas e alimentos funcionais, bebidas e alimentos para os doentes, e similares, em adição a bebidas e alimentos gerais.
[000134] Por exemplo, porque a presente composição, quando consumida, permite o equol ser gerado pela ação do micro-organismo produtor de equol no intestino, e permite os indivíduos beneficiarem-se efetivamente das atividades biológicas e atividades farmacológicas de equol, a presente composição é preferivelmente usada por pessoa procurando benefício da ação de equol nos campos de medicina, ou bebida e alimento. Especificamente, a presente composição é útil em aplicações tais como, por exemplo, prevenção ou tratamento de doenças e sintomas tais como de distúrbios de menopausa, osteoporose, hipertrofia da próstata e síndrome metabólica; diminuir valor de colesterol sanquíneo; branqueamento da pele; melhora de acne; regulação intestinal; melhora de obesidade; e diurese. Entre este, a presente composição é particularmente útil na prevenção ou melhora de enfermidade indefinida, ou sintomas associado com menopausa (por exemplo, osteoporose, distúrbios de menopausa e similares) em meia idade e mulheres mais velhas.
[000135] Ao mesmo tempo em que a ingestão diária da presente composição varia dependendo da contagem de célula de microorganismo produtor de equol no presente produto de leite fermentado, a idade e peso corporal do consumidor, o número de ingestões e similares, um exemplo de uma ingestão de adulto diária é uma quantidade correspondente a 10 a 500 g da presente composição.
[000136] Além disso, como descritos acima, adicionando o (B) acima a uma composição contendo um micro-organismo produtor de equol no estado de uma célula viva, a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol pode ser estavelmente retido, e a perda da capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol pode ser suprimido, mesmo se armazenado durante um longo período de tempo. Consequentemente, a presente invenção também fornece o método para manter a capacidade de produção de equol do micro-organismo produtor de equol compreendendo adicionar pelo menos um membro selecionado do grupo consistindo de ácido ascórbico, derivados dos mesmos, e sais dos mesmos a uma composição contendo um micro-organismo produtor de equol no estado de uma célula viva. A capacidade de produção de equol é medida de acordo com o método descrito nos seguintes exemplos. Como modalidades específicas do método de estabilização em armazenagem, o teor da descrição da composição acima contendo micro-organismo de produtor de equol é adotado.
[000137] A seguir, a presente invenção será descrita em detalhe com base em exemplos; entretanto, a presente invenção não é limitada a estes exemplos.
[000138] O pó de soja usado nos seguintes exemplos e nos exemplos comparativos foram preparados pelo seguinte método.
[000139] Sojas com casca foram descascadas, divididas ao meio, e submetidas a tratamento a vapor. O tratamento a vapor continuou a enviar vapor contra as sojas com casca até a temperatura de 100°C ser alcançada, após o que a temperatura foi mantida a 100°C durante 140 segundos. A seguir, as sojas após tratamento a vapor foram convertidas em flocos após serem passadas entre os cilindros de um moinho de cilindro. A seguir, as sojas em forma de flocos foram secadas por realização de secagem por ar quente a 80°C até o teor de umidade torna-se na ordem de 3 a 6%; e os flocos foram em seguida moídos com um moedor a ar para obter um pó de soja. A moagem com o moedor a ar foi realizada de modo que o número de partículas moídas com um diâmetro de 150 μm ou maior fosse de 10% ou menos.
[000140] Uma quantidade predeterminada de pó de soja obtida como descrito acima foi em seguida adicionada a quantidades adequadas de carbonato de hidrogênio de sódio e citrato de trissódio dissolvidas em água, dispersa e dissolvida, e deixada dilatar-se durante 15 minutos ou mais. Em seguida, a solução obtida foi aquecida a 95°C durante 10 minutos para extrair constituintes solúveis em água no pó de soja, bem como para inativar enzimas tais como LOX e inibidor de tripsina contido no pó de soja. Após aquecimento, ao mesmo tempo em que a temperatura de 80°C ou maior foi mantida, uma quantidade adequada de ácido cítrico foi adicionada para reverter o pH para neutro. A seguir, tratamento de homogenização foi realizado usando um homogenizador (LAB40 fabricado por GAULIN), sob condições na faixa de 200-1,000 kgf/cm2 para preparar uma solução de pó de soja (contendo 14 % de peso de pó de soja por peso seco).
[000141] Lactococcus garvieae (cepa de Lactococcus 20-92, FERM BP-10036) tendo capacidade de produção de equol, foi usado para realizar a preparação do iniciador mãe, a preparação do iniciador de volume, a fermentação principal, e carregamento do recipiente, sob as seguintes condições.
[000142] Preparação de iniciador mãe
[000143] Um meio iniciador mãe foi preparado por esterilização por autoclave (121°C, 15 minutos) de 100 ml de uma solução (pH 7,48) contendo 80 % de peso de solução de pó de soja (contendo 14% de pó de soja em peso seco), 0,1 % de peso de glicose, 0,1 % de peso de L-arginina, e o resíduo em água purificada. Este meio iniciador foi inoculado com um inócuo de cepa de Lactococcus 20-92, e uma cultura anaeróbica foi realizada com um pacote de gás a 37°C durante 96 horas para obter um iniciador mãe (pH 6,64).
[000144] Preparação de iniciador de volume
[000145] A meio iniciador de volume foi preparado por esterilização por autoclave (121°C, 15 minutos) de 5 L de uma solução (pH 7,48) contendo 80 % de peso de solução de pó de soja (contendo 14% de pó de soja por peso seco), 0,1 % de peso de glicose, 0,1 % de peso de L-arginina, e o resíduo em água purificada. Este meio iniciador foi inoculado com o iniciador mãe obtido acima a um volume de 1%, e uma cultura estacionária foi realizada a 37°C durante 15 horas sob condições aeróbicas para obter um iniciador de volume (pH 6,72).
[000146] Fermentação principal
[000147] O meio de fermentação principal foi preparado esterilizando-se 200 L de uma solução (pH 6,78) contendo 50 % de peso de solução de pó de soja (contendo 14% de pó de soja em peso seco), 6 % de peso de suco de cenoura (Miyazaki Nokyokaju), 6 % de peso de pasta de abóbora (Nagano Sanyo Foods), e o resíduo em água purificada com um esterilizador de tubo duplo a 95°C durante 30 segundos. O meio de fermentação principal recuperado após esterilização foi inoculado com 4 L do iniciador de volume obtido acima, e uma cultura estacionária foi realizada a 37°C durante 15 horas sob condições aeróbicas para obter uma solução de soja fermentada (pH 4,56).
[000148] Mistura de materiais crus secundários e carregamento do recipiente
[000149] Uma solução de material cru secundário foi obtido esterilizando-se 800 L de uma solução contendo 65 % de peso de solução de pó de soja (contendo 14% de pó de soja por peso seco), 7,4 % de peso de açúcar, 1,0 % de peso de formulação de agente de gelação FG2524 (fabricado por Nitta Gelatin), 0,8 % de peso de ácido glucônico, 0,4 % de peso de aroma, 0,1 % de peso de ácido L-ascórbico e o resíduo em água purificado com um esterilizador de tubo duplo a 95°C durante 30 segundos. 80 partes por peso da solução de material cru secundário e 20 partes por peso da solução de soja fermentado obtido acima foram misturados a 37 a 40°C. Ao mesmo tempo em que mantendo a temperatura da solução de mistura, uma xícara de polietileno (130 ml de capacidade total, 71 mm de diâmetro da boca) foi carregada com 100 g de solução de uma maneira estéril, e selada com uma tampa de alumínio. O material foi colocado dentro de um refrigerador a 5°C e solidificado por resfriamento para obter um alimento de soja fermentado contendo célula vivas da cepa de Lactococcus garvieae 20-92.
[000150] O alimento de soja fermentado lacrado obtido acima foi armazenado a 10°C durante 3 semanas. O pH do alimento de soja fermentado foi medido imediatamente após preparação, 1 semana após a preparação, 2 semanas após a preparação, e 3 semanas após a preparação; além disso, a contagem de célula de Lactococcus garvieae contido no alimento de soja fermentado, e a presença ou ausência da capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae contido no alimento de soja fermentado foram avaliadas pelos seguintes métodos. Além disso, a contagem de célula de Lactococcus garvieae e a capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae de cada do iniciador mãe e do iniciador de volume preparado acima e o produto fermentado após a fermentação principal foram medidos do mesmo modo.
[000151] A medição de contagem de células viáveis de Lactococcus garvieae, foi determinada por realização de uma cultura fluida usando meio de ágar de contagem de placa adicionado BCP (fabricado por Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) a 37°C durante 72 horas, e medição do número de colônias desenvolvidas.
[000152] 200 μΙ de alimento de soja fermentado foram adicionados a 5 ml de GAM bouillon modificado contendo daidzeína a uma concentração de 10 μg/ml (fabricado por Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) para realizar uma cultura anaeróbica a 37°C durante 96 horas com um pacote de gás. Em seguida, a solução de cultura obtida foi submetida a análise de HPLC para determinar a quantidade equol na solução de cultura. A análise de HPLC foi realizada como segue. Primeiro, 0,5 ml da solução de cultura foi adicionada a 5,0 ml de acetato de etila para realizar extração osmótica, o extrato obtido foi centrifugado a 3,000 rpm durante 10 minutos. O sobrenadante foi submetido à evaporação para solidificar o solvente por secagem sob pressão reduzida. Em seguida, o sólido obtido foi redissolvido em 1,0 ml de solvente (fase A móvel /fase B móvel = 50/50) para ser usado como um espécime de HPLC. Série D7000 (Fabricada por Hitachi) foi usada para a análise de HPLC e Capcell Pack UGL 205 μm 4,6 Φ x 250 mm (fabricada por Shiseido) foi usada como a coluna. Para a fase móvel, uma solução compreendendo solução de tampão de fosfato a 0,05% (contendo EDTA) e acetato de etila-metanol (1:10) misturado a 8:2 foi usado como a fase móvel A, e 2% de acetato de etila-contendo metanol foi usado como a fase móvel B. A taxa de fluxo foi 1,0 ml/minuto pelo método gradiente. Detector SPD-10AVP UV-VIS foi usado para detecção, e os comprimentos de onda de detecção foram de 254 nm e 280 nm.
[000153] O resultado de medição de contagem de célula e capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae
[000154] Os resultados de medição são mostrados na tabela 1. Os resultados revelam que se o pH do iniciador mãe e do iniciador de volume foi 5 ou maior, mesmo se o pH do produto fermentado após a fermentação principal e do alimento de soja fermentado foi de 4,6 ou menos, um alimento de soja fermentado contendo Lactococcus garvieae retendo a capacidade de produção de equol pode ser preparado. Observe que a contagem de célula em si de Lactococcus garvieae no alimento de soja fermentado foi observada permanecer constante durante um longo período de tempo, ao mesmo tempo em que sendo pouco afetada pelo pH ou a presença ou ausência da capacidade de produção de equol.
*1 Capacidade de produção de equol foi medida com n=2, e a determinação foi Δ quando apenas um caso de capacidade de produção de equol foi observado, e O quando a capacidade de produção de equol foi observada em ambos os casos.
[000155] O alimento de soja fermentado imediatamente após preparação e o alimento de soja fermentado após armazenagem de 3 semanas foram satisfatório como alimentos com bom sabor de soja, e nenhum sabor estranho ou odor estranho.
[000156] A preparação do iniciador mãe, preparação do iniciador de volume e a fermentação principal para preparar um alimento de soja fermentado (exemplo comparativo 1-1) foram realizados nas mesmas condições como no exemplo 1, exceto que a quantidade de glicose adicionada seja modificada de 0,1 % de peso para 1,0 % de peso na preparação do iniciador mãe.
[000157] Além disso, a preparação do iniciador mãe, preparação do iniciador de volume e a fermentação principal para preparar um alimento de soja fermentado (exemplo comparativo 1-2) foram realizados nas mesmas condições como no exemplo 1, exceto que a quantidade de glicose adicionada seja modificada de 0,1 % de peso para 1,0 % de peso na preparação do iniciador de volume.
[000158] O pH, a contagem de célula da cepa Lactococcus garvieae 20-92 e a presença ou ausência da capacidade de produção de equol do alimento de soja fermentado de exemplos comparativos 1-1 e 1-2 foram avaliados como no exemplo 1. Além disso, a contagem de célula da cepa Lactococcus garvieae 20-92, e a presença ou ausência de capacidade de produção de equol foram também medidas do mesmo modo para o iniciador mãe, o iniciador de volume e a solução principal de fermentação.
[000159] Os resultados são mostrados na tabela 2. No exemplo comparativo 1-1, que usou um meio em que os decréscimos de pH na preparação de iniciador mãe, embora nenhuma diferença fosse observada na contagem de célula da cepa Lactococcus garvieae 2092, a capacidade de produção de equol foi perdida. Similarmente no subsequente iniciador de volume, solução preparação de fermentação principal e preparação de alimento de soja fermentado, embora nenhuma grande diferença do exemplo 1 fosse observada na contagem celular, pH e aspectos sensoriais, a capacidade de produção de equol não melhorou. Além disso, como com o exemplo comparativo 1-1, que usou um meio em que os decréscimos de pH durante o iniciador de volume de preparação, embora nenhuma diferença na contagem de célula da cepa Lactococcus garvieae 2092 seja observada, a capacidade de produção de equol foi perdida. Similarmente na subsequente fermentação principal e preparação de alimento de soja fermentado, embora nenhuma grande diferença fosse observada na contagem celular, pH e aspectos sensoriais, a capacidade de produção de equol não melhorou.
*1 Capacidade de produção de equol foi medida com n=2, e a determinação foi Δ quando apenas um caso de capacidade de produção de equol foi observada, O quando a capacidade de produção de equol foi observado em ambos os casos, e χ quando nenhuma capacidade de produção de equol foi observada.
[000160] Lactococcus garvieae (Cepa de Lactococcus 20-92, FERM BP-10036) tendo capacidade de produção de equol foi usado para realizar a preparação do iniciador mãe, a preparação do iniciador de volume, a fermentação principal, e o carregamento do recipiente sob as seguintes condições.
[000161] Um meio iniciador mãe foi preparado por esterilização por autoclave (115°C, 15 minutos) de 500 mL de uma solução (pH 6,14) contendo 10 % de peso de leite seco não gorduroso, 6,67 % de peso de creme fresco, 0,1 % de peso de extrato de levedura ("SK extrato de levedura Hi-K", Nippon Paper Chemicals Co., Ltd.), 0,025 % de peso de extrato de hipocotila de soja ("Soya Flavone HG”, Fuji Oil Co., Ltd.; o conteúdo da espécie de daidzeína no extrato de hipocotila de soja é aproximadamente 37 % de peso) e o resíduo em água purificada. Este meio iniciador foi inoculado com um inócuo de cepa Lactococcus 20-92, e uma cultura anaeróbica foi realizado com um pacote de gás a 37°C durante 24 horas para obter um iniciador mãe.
[000162] Um meio iniciador de volume foi preparado por UHT (temperatura ultra elevada) esterilização (140°C, 4 segundos) de 10 L de uma solução contendo 10 % de peso de leite seco não gorduroso, 6,67 % de peso de creme fresco, 0,1 % de peso de extrato de levedura ("SK extrato de levedura Hi-K”, Nippon Paper Chemicals Co., Ltd.), 0,025 % de peso de extrato de hipocotila de soja ("Soya Flavone HG”, Fuji Oil Co., Ltd.) e o resíduo em água purificada. O meio iniciador de volume recuperado após esterilização de UHT foi inoculado com o iniciador mãe obtido acima para uma quantidade de 1 v/v%, e uma cultura aeróbica foi realizada a 37°C durante 24 horas para obter um iniciador de volume.
[000163] O meio de fermentação principal foi preparado por UHT (temperatura ultra elevada) esterilização (140°C, 4 segundos) de 10 L de uma solução contendo 10 % de peso de leite seco não gorduroso, 6,67 % de peso de creme fresco, 0,1 % de peso de extrato de levedura ("SK extrato de levedura Hi-K”, Nippon Paper Chemicals Co., Ltd.), 0,025 % de peso de extrato de hipocotila de soja ("Soya Flavone HG”, Fuji Oil Co., Ltd.) e o resíduo em água purificada. O meio de fermentação principal recuperado após esterilização de UHT foi inoculado com o iniciador de volume obtido acima para uma quantidade de 1 v/v%, e uma cultura aeróbica foi realizada a 37°C durante 24 horas para obter um leite fermentado.
[000164] O leite fermentado obtido pela fermentação principal acima foi introduzido em um recipiente com capacidade de 600 mL esterilizado de uma maneira estéril, e uma quantidade dada de ácido láctico foi também introduzido no recipiente de uma maneira estéril; após mistura, o recipiente foi selado.
[000165] Cada dos leites fermentados lacrados obtido acima foi armazenado a 10°C durante 74 semanas. O pH do leite fermentado foi medido imediatamente após preparação, 2 semanas após preparação, 6 semanas após preparação, e 74 semanas após preparação; além disso, a contagem de célula de Lactococcus garvieae contida no leite fermentado, e a presença ou ausência da capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae contidas no leite fermentado foram avaliadas por métodos iguais àqueles no Exemplo 1. Além disso, a contagem de célula de Lactococcus garvieae, e a capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae contidas no leite fermentado foram também medidas para o iniciador mãe e o iniciador de volume preparado acima.
[000166] Os resultados são mostrados na tabela 3. Estes resultados revelam que quando o pH do leite fermentado ficou 4,6 ou maior, o leite fermentado contendo Lactococcus garvieae retendo capacidade de produção de equol pode ser preparado. Além disso, a capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae foi observado para ser estavelmente retido durante 2 semanas se o pH do leite fermentado foi de 5,28 ou maior, 6 semanas se o pH do leite fermentado foi de 5,79 ou maior, e 74 semanas se o pH do leite fermentado foi de 5,92 ou maior. Por outro lado, a capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae foi revelada estar perdida quando o pH do leite fermentado foi de 4,09 e 3,53, mesmo imediatamente após a preparação. Observe que a contagem de célula em si de Lactococcus garvieae no leite fermentado foi observada permanecer constante durante um longo período de tempo ao mesmo tempo em que sendo pouco afetada pelo pH, ou a presença ou ausência da capacidade de produção de equol.
#1 Capacidade de produção de equol foi medida com n=3, e a determinação foi χ quando a capacidade de produção de equol foi observado uma vez, e O quando a capacidade de produção de equol foi observado em todos os três casos.
[000167] O leite de fermentação (nenhuma adição de ácido lático) imediatamente após preparação e o leite de fermentação (nenhuma adição de ácido lático) após 74 semanas de armazenagem foram ambos satisfatórios como alimentos sem nenhum azedume e, além disso, facilmente bebível.
[000168] A preparação do iniciador mãe, preparação do iniciador de volume e a fermentação principal foram realizadas nas mesmas condições como nos exemplos 2 acima, exceto que como o meio iniciador mãe, meio iniciador de volume e o meio de fermentação principal, aqueles preparados adicionando-se determinadas quantidades dos agentes promotores de fermentação mostrados na tabela 4 a um meio com base na composição descrita abaixo forem usados.
<Composição do meio>
Leite seco não gorduroso10 % de peso
Creme fresco 6,67 % de peso
Extrato de hipocotila de soja
("Soya Flavone HG”, Fuji Oil Co., Ltd.) 0,025 % de peso
Agente promotor de fermentação mostrados na tabela 2
Concentração mostrada na Tabela 2
Água purificada resíduo
Total 100% de peso
<Composição do meio>
Leite seco não gorduroso10 % de peso
Creme fresco 6,67 % de peso
Extrato de hipocotila de soja
("Soya Flavone HG”, Fuji Oil Co., Ltd.) 0,025 % de peso
Agente promotor de fermentação mostrados na tabela 2
Concentração mostrada na Tabela 2
Água purificada resíduo
Total 100% de peso
[000169] Nome do produto "SK extrato de levedura Hi-K” (fabricado por Nippon Paper Chemicals Co., Ltd.) foi usado para o extrato de levedura.
[000170] "FE135” (fabricado por DMV Japan) foi usado para o hidrolisado de soro.
[000171] "FE150” e "FE135” (fabricado por DMV Japan) foram usados para a caseína/hidrolisada de levedura.
[000172] 500 g de leite fermentado obtido desta maneira foi introduzido em um recipiente com capacidade de 600 mL esterilizado de uma maneira estéril, e armazenado a 10°C durante 10 semanas.
[000173] Imediatamente após preparação, 2 semanas após preparação, 4 semanas após preparação, e 10 semanas após preparação, o pH do leite fermentado foi medido; além disso, a contagem de célula de Lactococcus garvieae contida no leite fermentado, e a presença ou ausência da capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae contida no leite fermentado foram avaliadas por métodos iguais àqueles no exemplo 1. Além disso, para o iniciador mãe e o iniciador de volume, a contagem de célula de Lactococcus garvieae, e a capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae contida no leite fermentado foram também medidas do mesmo modo.
[000174] Os resultados obtidos são mostrados na tabela 5. Estes resultados revelam que a capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae pode ser retida adicionando-se extrato de levedura, hidrolisado de soro ou caseína/hidrolisado de levedura ao meio. Em particular, descobriu-se que se o meio contiver 0,1 % de peso ou mais de extrato de levedura ou 0,1 % de peso ou mais de caseína/hidrolisado de levedura, a capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae no leite fermentado pode ser estavelmente retida durante um período tão longo quanto 10 semanas ou mais.
#1 Capacidade de produção de equol foi medida com n=3, e a determinação foi χ quando capacidade de produção de equol não foi observada, e O quando capacidade de produção de equol foi observada em todos os três casos.
[000175] A preparação do iniciador mãe, preparação do iniciador de volume e a fermentação principal foram realizadas na mesma condição como no exemplo 2, exceto que cultura aeróbica foi executada na preparação do iniciador mãe.
[000176] O pH do leite fermentado obtido desta maneira foi medido; além disso, a contagem de célula de Lactococcus garvieae contida no leite fermentado, e a presença ou ausência da capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae contida no leite fermentado foram avaliadas por métodos iguais àqueles no exemplo 2. Além disso, para o iniciador mãe e o iniciador de volume, a contagem de célula de Lactococcus garvieae, e a capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae contida no leite fermentado foram também medidas do mesmo modo.
[000177] Como um resultado, quando o iniciador mãe foi preparado por fermentação aeróbica em condições aeróbicas, embora a capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae no iniciador mãe seja mantida, a capacidade de produção de equol de Lactococcus garvieae no produto de leite fermentado obtido foi finalmente perdida. Observe que, mesmo se o iniciador mãe for preparado por fermentação aeróbica, o pH e a contagem de célula de Lactococcus garvieae no leite fermentado foram da mesma ordem como quando o iniciador mãe for preparado por fermentação aneróbica.
[000178] Um inócuo de Lactococcus garvieae (20-92 cepas de Lactococcus, FERM BP-10036) foi inoculado em 5 mL de meio GAM modificado (fabricado por Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.), e uma cultura anaeróbica foi realizada com um pacote de gás a 37°C durante 24 horas. Em seguida, 50 mL de meio GAM modificado (Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) foi inoculado com 2 mL da cultura obtido, e a cultura anaeróbica foi realizada com um pacote de gás a 37°C durante 24 horas. Além disso, 200 mL de meio GAM modificado (Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) foi inoculado com 8 mL da cultura obtida, e a cultura anaeróbica foi realizada com um pacote de gás a 37°C durante 24 horas.
[000179] A cultura obtida foi centrifugada (4.500 rpm x 15 minutos) para recuperar os corpos celulares, e as células obtidas foram adicionadas a cada bebida das composições mostradas na Tabela 6 de modo que a concentração de célula seja cerca de 1x108cfu/mL para preparar um micro-organismo produtor de composição contendo equol; a composição foi em seguida dividida em tubos de polipropileno com capacidade de 15 mL (feito por IWAKI) em 10 mL de alíquotas.
[000180] Cada dos micro-organismos produtores de composição contendo equol obtido acima foi armazenado a 10°C durante 21 dias. Durante o período de armazenagem, as avaliações de pH, contagem de célula e capacidade de produção de equol foram executadas para cada micro-organismo produtor de composição contendo equol. O método para medir a contagem de célula foi o mesmo como no exemplo acima 1. Além disso, a capacidade de produção de equol foi analisada por HPLC da mesma maneira como no exemplo 1 acima foi executado, e a taxa de conversão de equol foi calculada de acordo com a seguinte fórmula.
[000181] Taxa de conversão de equol (%) = {(área de pico de equol)/(área de pico total de daidzeína, di-hidrodaidzeína e equol)}x100
[000182] Os resultados da medição do pH são mostrados na tabela 7. Além disso, os resultados da medição da contagem de célula são mostrados na figura 1, e os resultados da medição da capacidade de produção de equol são mostrados na figura 2. Como é evidente a partir da tabela 7, em todas as bebidas, o pH imediatamente após a preparação foi mantido mesmo quando armazenado, e um ambiente em que bactérias contaminantes não podem proliferar-se foi mantido dentro das bebidas. Além disso, como é evidente a partir da figura 1, com cada micro-organismo produtor de composição contendo equol, pequena diferença foi observada na contagem de célula viável durante o período de armazenagem. Por outro lado, como mostrado na figura 2, embora a capacidade de produção de equol seja perdida 14 dias após armazenagem no micro-organismo produtor de composição contendo equol sem nenhum ácido ascórbico adicionado, no micro-organismo produtor de composição contendo equols em que ácido ascórbico foi adicionado, a capacidade de produção de equol foi mantida mesmo após 21 dias de armazenagem. Em particular, no micro-organismo produtor de composição contendo equols com 1 % em peso ou 2% em peso de ácido ascórbico, a capacidade de produção de equol foi descoberta ser mantida no modo extremamente estável.
[000183] Um iniciador mãe foi obtido por inoculação de 5 ml de um meio tendo a mesma composição como o meio iniciador mãe usado no exemplo 1 com um inócuo de 20-92 cepas de Lactococcus, e conduzindo uma cultura anaeróbica com um pacote de gás a 37°C durante 96 horas.
[000184] A seguir, 10 ml de um meio tendo a mesma composição como o meio iniciador de volume usado no exemplo 1 foram inoculados com 0,2 ml do iniciador mãe obtido acima, e uma cultura anaeróbica foi realizada durante 15 horas usando um pacote de gás a 37°C para obter um iniciador de volume primário. Além disso, 300 ml de um meio tendo a mesma composição como o meio iniciador de volume usado no exemplo 1 foram inoculados com 6 ml do iniciador mãe obtido acima, e uma cultura anaeróbica foi realizada durante 15 horas usando um pacote de gás a 37°C para obter um iniciador de volume secundário.
[000185] A seguir, 2.000 ml de um meio tendo a mesma composição como o meio de fermentação principal usado no exemplo 1 foram inoculados com 40 mL do iniciador de volume secundário obtido acima, e uma cultura estacionária foi realizada a 37°C durante 15 horas sob condições aeróbicas para obter uma solução de soja fermentada.
[000186] Seis tipos de antioxidantes foram adicionados à solução de soja fermentada obtida, como mostrado na tabela 8, para preparar um produto fermentado; posteriormente, xícaras de papel foram separadamente carregadas com 130 g de solução, e seladas com tampas de alumínio. Estas xícaras foram armazenadas a 10°C, abertas 7 dias depois para medir a contagem de célula dos micro-organismos produtores de equol, e a capacidade de produção de equol dos mesmos foi medida por métodos iguais àqueles no exemplo 4.
[000187] O resultado da medição de contagem de célula de microorganismo de produção de equol é mostrado na tabela 9, e o resultado da medição de capacidade de produção de equol é mostrado na tabela 10. No começo da armazenagem, a capacidade de produção de equol foi observada em todos os casos em que o inibidor de oxidação foi misturado. Entretanto, 7 dias após a armazenagem, com exceção do produto fermentado ao qual ácido ascórbico foi adicionado, as capacidades de produção de equol desapareceram em todos os casos.
Claims (1)
- Método para manter a capacidade de produção de equol de um micro-organismo produtor de equol, caracterizado pelo fato de que compreende: adicionar (B) pelo menos um membro selecionado dentre o grupo consistindo em ácido ascórbico, derivados deste, e sais deste a uma composição contendo um micro-organismo produtor de equol, no estado de uma célula viva,
em que, na composição em que o componente (B) foi adicionado, o componente (B) está contido em uma proporção de mistura de 0,05 a 5 % em peso, e
em que os derivados de ácido ascórbico são pelo menos um membro selecionado dentre o grupo que consiste em 2,6-dipalmitato de ascorbila, 6-estearato de ascorbila, 2-fosfato de ascorbila, 2-sulfato de ascorbila, 2-glucosídeo de ascorbila, glucosamina de ascorbila, 6-palmiato de ascorbila, tetra-isopalmitato de L-ascorbila e decanoato de tetra 2-hexila de ascorbila.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2008-240937 | 2008-09-19 | ||
| JP2008240937 | 2008-09-19 | ||
| PCT/JP2009/066413 WO2010032838A1 (ja) | 2008-09-19 | 2009-09-18 | エクオール産生能が維持されたエクオール産生微生物を含む発酵製品、及びその製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BRPI0919735A2 BRPI0919735A2 (pt) | 2015-08-18 |
| BRPI0919735B1 true BRPI0919735B1 (pt) | 2020-07-21 |
Family
ID=42039658
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BRPI0919735-4A BRPI0919735B1 (pt) | 2008-09-19 | 2009-09-18 | método para manter a capacidade de produção de equol de um micro-organismo produtor de equol |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9101159B2 (pt) |
| EP (2) | EP3563689B1 (pt) |
| JP (1) | JP5769419B2 (pt) |
| KR (3) | KR20110056419A (pt) |
| CN (2) | CN105707899A (pt) |
| AU (1) | AU2009293724B2 (pt) |
| BR (1) | BRPI0919735B1 (pt) |
| CA (1) | CA2737545C (pt) |
| ES (2) | ES2753889T3 (pt) |
| MX (2) | MX336135B (pt) |
| MY (1) | MY158628A (pt) |
| SG (3) | SG10201912614RA (pt) |
| TW (3) | TWI637056B (pt) |
| WO (1) | WO2010032838A1 (pt) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5777287B2 (ja) * | 2009-09-18 | 2015-09-09 | 大塚製薬株式会社 | エクオール産生能が維持されたエクオール産生微生物を含む発酵製品、及びその製造方法 |
| ITMI20111283A1 (it) * | 2011-07-08 | 2013-01-09 | Paladin Pharma S P A | Composizione comprendente microorganismi del genere enterococcus thailandicus ed equolo, metodo di preparazione ed uso della stessa come agente prebiotico |
| CN104031875B (zh) * | 2014-05-30 | 2016-04-20 | 浙江省农业科学院 | 一种s-雌马酚产生工程菌及应用 |
| BR102015014499A2 (pt) * | 2015-06-18 | 2016-12-27 | Unicamp | processo de biotransformação de compostos fenólicos do extrato de soja em equol e isoflavonas bioativas através de fermentação e/ou aplicação enzimática, composição assim obtido e uso |
| KR102064055B1 (ko) | 2018-02-08 | 2020-01-08 | 신선옥 | 에쿠올이 생성된 발효커피생두, 그 제조방법 및 그 추출물 |
| WO2019189388A1 (ja) * | 2018-03-27 | 2019-10-03 | 株式会社ヤクルト本社 | エコール産生菌の培養方法 |
| CN108576807A (zh) * | 2018-04-04 | 2018-09-28 | 江瀚生物科技（上海）有限公司 | 一种有效提高老年人群钙质吸收率的小分子营养素及其制备方法 |
| JP7462868B2 (ja) * | 2018-10-26 | 2024-04-08 | 炭プラスラボ株式会社 | 乳酸菌生産物質含有組成物、エクオール生成方法および乳酸菌生産物質含有組成物の製造方法 |
| KR20200070502A (ko) | 2018-12-07 | 2020-06-18 | 전북대학교산학협력단 | 에쿠올함유 발효커피음료 및 그 제조방법 |
| KR102362968B1 (ko) * | 2019-11-25 | 2022-02-17 | 주식회사 쎌바이오텍 | 유산균 및 프리바이오틱스를 포함하는 갱년기 증상의 예방, 완화 또는 치료용 조성물 |
| CN110810621A (zh) * | 2019-12-13 | 2020-02-21 | 长江大学 | 一种用于提高家畜肌肉中脂肪含量的富含雌马酚的生物饲料添加剂的制备方法 |
| JP7422056B2 (ja) * | 2020-11-17 | 2024-01-25 | 株式会社ダイセル | エクオール含有食品組成物およびその製造方法 |
| CN113106031A (zh) * | 2021-03-02 | 2021-07-13 | 华南农业大学 | 一种分离人源粪便中雌马酚产生菌的选择性培养基 |
| WO2023224086A1 (ja) * | 2022-05-19 | 2023-11-23 | 株式会社ダイセル | エクオールを含む食品組成物およびその製造方法 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2077389A1 (en) * | 1992-03-19 | 1993-09-20 | Richard Nohner | Composition and method of making yogurt and juice blended beverage |
| EP1025850B1 (en) * | 1997-08-08 | 2005-11-23 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | Isoflavone-containing compositions |
| US7396855B2 (en) * | 2002-07-24 | 2008-07-08 | Children's Hospital Medical Center | Compositions and products containing S-equol, and methods for their making |
| JP4610525B2 (ja) | 2003-06-30 | 2011-01-12 | 大塚製薬株式会社 | エクオール産生乳酸菌含有組成物 |
| SG157232A1 (en) * | 2003-06-30 | 2009-12-29 | Otsuka Pharma Co Ltd | Equol-producing lactic acid bacteria-containing composition |
| ITMI20041342A1 (it) * | 2004-07-05 | 2004-10-05 | Marfarma Holding S P A | Estratto di trigoflio rosso arricchito in equolo per fermentazione |
| CN102845685A (zh) * | 2005-12-06 | 2013-01-02 | 大塚制药株式会社 | 含雌马酚的大豆发酵物 |
-
2009
- 2009-09-18 MX MX2011003021A patent/MX336135B/es unknown
- 2009-09-18 EP EP19175944.8A patent/EP3563689B1/en active Active
- 2009-09-18 US US13/119,353 patent/US9101159B2/en active Active
- 2009-09-18 TW TW105137883A patent/TWI637056B/zh active
- 2009-09-18 TW TW103146563A patent/TWI621712B/zh active
- 2009-09-18 ES ES09814682T patent/ES2753889T3/es active Active
- 2009-09-18 SG SG10201912614RA patent/SG10201912614RA/en unknown
- 2009-09-18 SG SG2013069513A patent/SG193883A1/en unknown
- 2009-09-18 KR KR1020117008760A patent/KR20110056419A/ko not_active Ceased
- 2009-09-18 AU AU2009293724A patent/AU2009293724B2/en active Active
- 2009-09-18 KR KR1020167036991A patent/KR101730309B1/ko active Active
- 2009-09-18 KR KR1020177010467A patent/KR101844202B1/ko active Active
- 2009-09-18 CA CA2737545A patent/CA2737545C/en active Active
- 2009-09-18 MX MX2016000139A patent/MX382322B/es unknown
- 2009-09-18 SG SG10201701701RA patent/SG10201701701RA/en unknown
- 2009-09-18 WO PCT/JP2009/066413 patent/WO2010032838A1/ja not_active Ceased
- 2009-09-18 CN CN201610096187.9A patent/CN105707899A/zh active Pending
- 2009-09-18 CN CN200980136848.4A patent/CN102159092B/zh active Active
- 2009-09-18 BR BRPI0919735-4A patent/BRPI0919735B1/pt active IP Right Grant
- 2009-09-18 MY MYPI2011001248A patent/MY158628A/en unknown
- 2009-09-18 TW TW098131551A patent/TWI567198B/zh active
- 2009-09-18 ES ES19175944T patent/ES2904349T3/es active Active
- 2009-09-18 EP EP09814682.2A patent/EP2335500B1/en active Active
- 2009-09-18 JP JP2010529817A patent/JP5769419B2/ja active Active
-
2015
- 2015-06-30 US US14/755,550 patent/US9951360B2/en active Active
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| BRPI0919735B1 (pt) | método para manter a capacidade de produção de equol de um micro-organismo produtor de equol | |
| Cui et al. | Comparative studies on the effect of probiotic additions on the physicochemical and microbiological properties of yoghurt made from soymilk and cow's milk during refrigeration storage (R2) | |
| WO2002032441A1 (en) | Bone metabolism improving agent | |
| JP5946559B2 (ja) | エクオール産生能が維持されたエクオール産生微生物を含む発酵製品、及びその製造方法 | |
| Elkot | Preparation and properties of bio-yoghurt using Jerusalem artichoke tubers powder amd different probiotic strains. | |
| AU2006309706B2 (en) | Equol level regulator | |
| BRPI1007567B1 (pt) | Processo para modificar o sabor de um substrato contendo proteína de soja | |
| AU2014240200B2 (en) | Fermentation product containing equol-producing microorganism having maintained equol-producing ability, and method for producing same | |
| HK1162875A (en) | Fermentation product containing equol-producing microorganism having maintained equol-producing ability, and method for producing same | |
| HK1162875B (en) | Fermentation product containing equol-producing microorganism having maintained equol-producing ability, and method for producing same | |
| HK40015792B (en) | Method for producing a fermentation product containing equol-produing microorganism having maintained equol-producing ability | |
| HK40015792A (en) | Method for producing a fermentation product containing equol-produing microorganism having maintained equol-producing ability | |
| Rajesh | Development and quality evaluation of spray dried probiotic flavoured yoghurt containing Lactobacillus bulgaricus |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B06F | Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette] | ||
| B15K | Others concerning applications: alteration of classification |
Ipc: A23C 11/10 (2006.01), A23C 9/123 (2006.01), A23C 9 |
|
| B07A | Application suspended after technical examination (opinion) [chapter 7.1 patent gazette] | ||
| B07A | Application suspended after technical examination (opinion) [chapter 7.1 patent gazette] | ||
| B06A | Patent application procedure suspended [chapter 6.1 patent gazette] | ||
| B09A | Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette] | ||
| B16A | Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette] |
Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 21/07/2020, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. |