BRPI0711801A2

BRPI0711801A2 - sistema e método para o preparo de amostras

Info

Publication number: BRPI0711801A2
Application number: BRPI0711801-5A
Authority: BR
Inventors: Kurt J Halverson; Stephen C P Joseph; Matthew T Scholz
Original assignee: 3M Innovative Properties Co
Priority date: 2006-05-22
Filing date: 2007-05-22
Publication date: 2011-12-06
Also published as: CN101680874B; EP2024742B1; JP2009543026A; WO2007137257A3; CN101680874A; US8272255B2; JP5074485B2; US8991239B2; EP2024742A2; EP2024742A4; US20090193880A1; US20120322052A1; WO2007137257A2

Abstract

SISTEMA E MéTODO PARA O PREPARO DE AMOSTRAS. Trata-se de um sistema e de um método para preparar amostras para teste de analito. O sistema de preparação de amostra pode incluir um receptáculo com sustentação independente. O método pode incluir fornecer uma composição líquida que compreende uma fonte e um diluente, e posicionar uma composição líquida em um reservatário definido pelo receptáculo com sustentação independente. O método pode incluir adicionalmente filtrar a composição líquida para formar um filtrado que compreende um analito de interesse, remover ao menos uma porção do filtrado do sistema de preparação de amostra para formar uma amostra, e analisar a amostra para o analito de interesse.

Description

"SISTEMA E MÉTODO PARA O PREPARO DE AMOSTRAS"

Antecedentes

A presente invenção refere-se a um sistema e método para preparação de amostra e, particularmente, a um sistema e método para preparação de amostra para um teste de analito.

A análise de várias fontes alimentares e não-alimentares quanto a microorganismos (por exemplo, bactérias, vírus, fungos, esporos) e/ou outros analitos (por exemplo, toxinas) pode ser relevante para a saúde pública. Os alimentos cultivados, comprados e consumidos pela po- pulação em geral podem conter ou adquirir microorganismos ou outros analitos, os quais podem crescer ou se desenvolver em função do ambiente no qual estão situados. Este crescimento pode levar à deterioração acelerada do produto alimentício ou à proliferação de organismos pa- togênicos, que podem produzir toxinas ou alérgenos.

Itens que perecem na vida em prateleira podem ter uma relevância particular pa- ra o monitoramento qualitativo ou quantitativo dos analitos. Um meio conveniente e eficaz para remover os analitos de uma fonte para análise pode ser importante na determinação da vida de prateleira do produto e da segurança para o consumo humano e animal. Al- guns sistemas existentes foram projetados para liberar os analitos das fontes alimentares. Um misturador para homogeneizar as amostras de 10.000 a 12.000 rpm foi recomendado pela Food and Drug Administration, "Food Sampling and Preparation of Sample Homoge- nate", Capítulo 1; FDA Bacteriological Manual, 8a. Edição; 1998, seção 1.06. A patente U.S. n°. 3.819.158 (Sharpe et al.) descreve um dispositivo de "homogeneização" ("stoma- ching"), que mistura uma fonte e diluentes em uma bolsa, por meio do uso de duas pás em uma ação do tipo amassamento. Um dispositivo oscilante conhecido como PULSIFIER® é descrito na patente U.S. n°. 6.273.600 (Sharpe), que emprega uma bolsa situada dentro de um anel metálico agitador. Outra técnica, a de vórtice, para suspensão de analito foi descrita na patente U.S. n°. 6.273.600 (Sharpe).

Sumário

Alguns métodos e dispositivos de preparação de amostra existentes apresentam resultados inconsistentes e, às vezes, indesejáveis. O sistema misturador pode homogenei- zar a amostra, porém, também pode criar uma grande quantidade de detritos particulados, de modo que o recipiente precisa ser limpo e esterilizado antes do uso subseqüente. O dis- positivo de homogeneização (stomaching) e o sistema PULSIFIER® usam bolsas de plásti- co, que são descartáveis, porém, podem ser de manuseio pouco prático. As bolsas são fle- xíveis e, portanto, não se sustentam de forma independente quando removidas dos disposi- tivos de mistura. A remoção de amostras de composições líquidas (ou filtrados) do fundo das bolsas pode ser, muitas vezes, difícil, devido a possível contaminação de uma pipeta em contato com os lados da bolsa. Adicionalmente, as amostras que contêm objetos duros podem perfurar a bolsa, criar vazamentos e contaminar a amostra. Além disso, alguns sis- temas existentes também exigem um meio separado para a preparação e o teste subse- qüente das amostras individuais. Além disso, alguns sistemas existentes exigem a limpeza e a esterilização extensiva entre as amostras, o que pode ser entediante, demorado e caro.

Algumas modalidades da presente invenção proporcionam um método para preparar amostras para teste de analito. O método pode incluir o fornecimento de uma composição líquida, que compreende uma fonte e um diluente e, fornecer um sistema de preparação de amostra compreendendo um receptáculo de sustentação independente. O método pode inclu- ir, ainda, posicionar a composição líquida em um reservatório definido pelo receptáculo com sustentação independente e filtrar a composição líquida para formar um filtrado que compre- ende um analito de interesse. O método pode incluir, ainda, remover ao menos uma porção do filtrado do sistema de preparação de amostra de modo a formar uma amostra e analisar a amostra para o analito de interesse.

Em algumas modalidades, proporciona-se um método para preparar amostras para teste de analito. O método pode incluir o fornecimento de uma composição líquida, compreen- dendo uma fonte e um diluente e o fornecimento de um sistema de preparação de amostra, que compreende um forro deformável com sustentação independente, um recipiente com sus- tentação independente, que é mais rígido que o forro de sustentação independente deformá- vel e uma tampa. O método pode incluir, ainda, posicionar a composição líquida em um reser- vatório definido pelo forro deformável com sustentação independente e acoplar a tampa no forro deformável com sustentação independente. O método pode incluir, ainda, posicionar o forro deformável com sustentação independente no recipiente com sustentação independente e filtrar a composição líquida, de modo a formar um filtrado que compreende um analito de interesse. O método pode incluir, ainda, remover ao menos uma porção do filtrado do sistema de preparação de amostra de modo a formar uma amostra e, analisar a amostra para o analito de interesse.

Outras características e aspectos da invenção tornar-se-ão evidentes consideran- do-se a descrição detalhada e os desenhos em anexo.

Breve Descrição dos Desenhos

As configurações exemplificadoras do sistema de preparação de amostra da pre- sente invenção são mostradas nas Figuras seguintes, sendo que números similares repre- sentam elementos similares.

A FIGURA 1 é um fluxograma esquemático que representa um método de prepara- ção de amostra, de acordo com uma modalidade da presente invenção.

A FIGURA 2 é uma vista em perspectiva explodida de um sistema de preparação de amostra, de acordo com uma modalidade da presente invenção, sendo que o sistema de preparação de amostra inclui uma tampa. A FIGURA 3 é uma vista em seção transversal a curta distância da tampa da FIGURA 2.

A FIGURA 4 é uma vista em perspectiva de um sistema de preparação de amostra, de acordo com outra modalidade da presente invenção.

A FIGURA 5 é uma vista inferior de uma tampa de um sistema de preparação de amostra, de acordo com outra modalidade da presente invenção.

A FIGURA 6 é uma vista em seção transversal da tampa da FIGURA 5, tomada ao longo da linha 6-6 na FIGURA 5.

Descrição Detalhada

Antes de qualquer modalidade da invenção ser explicada em detalhes, deve-se entender que a invenção não se limita, em sua aplicação, aos detalhes da construção e da disposição dos componentes estabelecidos na descrição a seguir ou ilustrados nos desenhos. A invenção pode compreender outras modalidades e ser praticada ou realizada de várias maneiras. Deve-se entender também que a fraseologia e terminologia usadas na presente invenção têm propósito descritivo, e não devem ser consideradas limitadoras. O uso das expressões "que inclui", "que compreende", "que contém" ou "que tem" e vari- ações das mesmos na presente invenção, têm por objetivo abranger os itens menciona- dos posteriormente e seus equivalentes, bem como itens adicionais. Exceto quando for especificado, ou quando for limitado de alguma maneira, os termos "sustentado" e "aco- piado" e variações dos mesmos, são amplamente usados e abrangem os suportes e aco- plamentos diretos e indiretos. Deve-se compreender que outras modalidades podem ser utilizadas e alterações estruturais ou lógicas podem ser feitas sem que se afaste do es- copo da presente descrição. Além disso, os termos como "parte frontal", "parte traseira", "topo", "fundo" e similares são usados apenas para descrever a relação mútua entre os elementos, porém, não pretendem de forma alguma se referir às orientações específicas do aparelho, indicar ou conferir orientações necessárias ou requeridas do aparelho ou especificar como a invenção aqui descrita será usada, montada, exibida ou posicionada em uso.

A presente invenção é geralmente voltada para um sistema e método para a prepa- ração de amostras. As amostras podem ser adicionalmente analisadas quanto à presença ou ausência de uma diversidade de analitos.

O termo "fonte" é geralmente usado para se referir ao alimento ou não alimento que se deseja testar no que se refere a analitos. A fonte pode ser um material sólido, líqui- do, semi-sólido, gelatinoso e combinações dos mesmos. Toda a fonte ou uma porção da fonte pode ser usada no sistema e método para preparação da amostra. Quando é usada uma porção da fonte, esta por vezes pode ser chamada de uma "amostra" da fonte. Entre- tanto, o termo "amostra" é geralmente usado na presente invenção para se referir ao pe- queno volume de material que é extraído do sistema de preparação de amostra para a aná- lise posterior (por exemplo, detecção de analitos).

O termo "alimento" é geralmente usado para se referir a uma composição comestível sólida, líquida ou semi-sólida. Os exemplos de alimentos incluem, mas não se limitam a, carnes, aves, ovos, peixe, frutos do mar, vegetais, frutas, alimentos preparados (por exemplo, sopas, molhos, pastas), produtos em grão (por exemplo, farinha, cereais, pães), alimentos enlatados, queijo, leite, outros produtos laticínios (por exemplo, queijo, iogurte, creme azedo), gorduras, óleos, sobremesas, condimentos, especiarias, pastas, bebidas, água, outros materiais comestí- veis adequados e combinações dos mesmos.

O termo "não alimento" é geralmente usado para se referir a fontes de interesse que não se encontram dentro da definição de "alimento". Particularmente, as fontes de não alimen- to podem incluir, mas não se limitam a, substâncias que geralmente não são comestíveis e podem ser categorizados como um ou mais dos seguintes: um Iisato celular, sangue ou uma porção do mesmo (por exemplo, soro), outros fluidos corporais (por exemplo, saliva, suor, se- bo, urina), fezes, células, tecidos, órgãos, materiais de origem vegetal, madeira, sujeira, sedi- mento, alimento animal, medicamentos, cosméticos, outros materiais não comestíveis ade- quados e combinações dos mesmos.

O termo "analito" é geralmente usado para se referir a uma substância a ser detec- tada (por exemplo, através de um teste de laboratório). Uma fonte pode ser testada quanto à presença ou ausência de analitos particulares. Tais analitos podem estar presentes dentro de uma fonte (por exemplo, no interior) ou exterior (por exemplo, na superfície externa) de uma fonte. Os exemplos de analitos podem incluir, mas não se limitam a, microorganismos, bio-moléculas, produtos químicos (por exemplo pesticidas, antibióticos), íons metálicos (por exemplo, íons de mercúrio, íons metálicos pesados), complexos contendo íon metálico (por exemplo, complexos que compreendem íons metálicos e Iigandos orgânicos) e combina- ções dos mesmos. Uma variedade de métodos de teste pode ser usada para identificar e/ou quantificar um analito, incluindo, mas não se limitando a, ensaios microbiológicos, ensaios bioquímicos (por exemplo imunoensaio) ou uma combinação dos mesmos. Os exemplos específicos de métodos de teste que podem ser usados incluem, mas não se limitam a, titu- lação, análise térmica, espectroscopia (por exemplo, espectroscopia de massa, espectros- copia de ressonância magnética nuclear (NMR), espectroscopia Raman, espectroscopia por infravermelho, espectroscopia por raios X, espectroscopia de reflectância total atenuada, espectroscopia de transformação de Fourier, espectroscopia de raio gama, etc.), espectro- fotometria (por exemplo, absorbância, fluorescência, luminescência, etc.), cromatografia (por exemplo, cromatografia gasosa, cromatografia líquida, cromatografia de troca iônica, cromatografia de afinidade, etc.), análise eletroquímica, crescimento (por exemplo, cresci- mento sobre placa (por exemplo, em um meio de crescimento, como ágar)), técnicas gené- ticas, como reação em cadeia da polimerase (PCR) ou outras técnicas conhecidas na técni- ca, como aquelas que podem ser convenientemente produzidas usando Placas Petrifilm™ e quantificadas usando um Leitor de Placa Petrifilm™ (3M Company1 St. Paul, MN), outros métodos de teste de analito adequados ou uma combinação dos mesmos. termo "microorganismo" é geralmente usado como referência a qualquer organismo microscópico que inclua, sem limitação, um ou mais dentre bactérias (por exemplo, móveis ou vegetativas), vírus (por exemplo, vírus DNA, vírus RNA, encapsulado, não-encapsulado, etc.), esporos, algas, fungos (por exemplo, levedura), príon e protozoários. Em alguns casos, os mi- croorganismos de interesse particular são aqueles que são patogênicos, e o termo "patógeno" é usado para se referir a qualquer microorganismo patogênico. Os exemplos de patógenos podem incluir, mas não se limitam a, Escherichia coli 0157Ή7, Pseudomonas aeruginosa, salmonela, Listeria monocytogene, Clostridium botuiinun, Staphylococcus aureus, Campylobaeter jejuni, Yersinia enteroeolitiea, Vibrio vulnifieus e Enterobaeter sakazakii. Os fatores ambientais que po- dem afetar o crescimento de um microorganismo podem incluir pH, teor de umidade, potencial de oxidação-redução, compostos microbicidas e estruturas ou barreiras biológicas.

O termo "bio-molécula" é geralmente usado como referência a uma molécula ou a um derivado da mesma, que ocorra em, ou seja formada por, um organismo. Por exemplo, uma bio-molécula pode incluir, mas não se limita a, ao menos um dentre um aminoácido, um ácido nucléico, um polipeptídeo, uma proteína, um polinucleotídeo, um lipídio, um fosfo- lipídeo, um sacarídeo, um polissacarídeo e combinações dos mesmos. Os exemplos especí- ficos de bio-moléculas podem incluir, mas não se limitam a, um metabólito, um alérgeno (por exemplo, pólens, ácaros, mofos, caspas, proteínas), uma toxina, RNA (por exemplo, mRNA, RNA total, tRNA, etc.), DNA (por exemplo, DNA de plasmídio, DNA de planta, etc.), uma proteína marcada, um anticorpo, um antígeno e combinações dos mesmos.

Os termos "matéria solúvel" e "matéria insolúvel" são geralmente usados com refe- rência à matéria que é relativamente solúvel ou insolúvel em um dado meio, sob certas con- dições. Especificamente, sob um dado conjunto de condições, a "matéria solúvel" é a maté- ria que penetra na solução e que pode ser dissolvida no solvente (por exemplo, diluente) de um sistema. "Matéria insolúvel" é a matéria que, sob um dado conjunto de condições, não penetra na solução e não é dissolvida no solvente de um sistema. Uma fonte pode incluir matéria solúvel (por exemplo, incluindo o(s) analito(s) de interesse) e matéria insolúvel (por exemplo, resíduos celulares). A matéria insolúvel é chamada, às vezes, de particulado(s) ou de fragmento, e pode incluir porções do próprio material da fonte (isto é, de porções inter- nas ou porções externas (por exemplo, a superfície externa) da fonte) ou outros resíduos ou fragmentos de fonte que resultam de um processo de agitação.

O termo "agitar" e seus derivados são geralmente usados para descrever o pro- cesso de dar movimento a uma composição líquida, por exemplo, misturar ou mesclar o conteúdo de tal composição líquida. Uma variedade de métodos de agitação pode ser usada, incluindo, mas não se limitando a, sacudimento manual, sacudimento mecânico, vibração ultra-sônica, agitação rotativa em vórtice, agitação rotativa manual, agitação ro- tativa mecânica (por exemplo, através de um propulsor mecânico, uma barra de agitação rotativa magnética ou outro auxiliar para agitação, como rolamentos de esfera), batimento manual, batimento mecânico, mesclagem, amassamento e combinações dos mesmos.

O termo "filtração" é geralmente usado para descrever o processo de separação de matéria solúvel e um solvente (por exemplo, diluente) a partir da matéria insolúvel. Uma variedade de métodos de filtração pode ser usada, incluindo, mas não se limitando a, pas- sar a composição líquida através de um filtro, precipitação seguida de aspiração ou decan- tação, outros métodos de filtração adequados e combinações dos mesmos. A "precipitação" é usada para permitir que a matéria insolúvel na composição líquida assente. A precipitação pode ocorrer por gravidade ou centrifugação. A matéria insolúvel pode ser, então, separada da matéria solúvel e do solvente aspirando-se a matéria solúvel e o solvente da matéria in- solúvel, decantando-se a matéria solúvel e o solvente ou uma combinação dos mesmos.

Um "filtro" é geralmente usado para descrever o dispositivo usado para separar a matéria solúvel e o solvente da matéria insolúvel em uma composição líquida. Os exemplos de filtros podem incluir, mas não se limitam a, uma rede tecida (por exemplo, uma rede de fio, uma rede de pano, uma rede de plástico, etc.), uma peneira, um filme ou membrana desgastada (por exemplo, um filme ou membrana desgastada a laser, um filme ou mem- brana termicamente desgastada, etc.), um filme ou membrana perfurada, lã de vidro, uma frita, papel filtro, etc., e combinações dos mesmos.

O termo "filtrado" é usado geralmente para descrever o líquido restante após a ma- téria insolúvel ter sido removida da composição líquida. Devido ao fato de a filtração incluir uma ampla gama de métodos, o termo "filtrado" também pode ser usado para se referir ao sobrenadante resultante ao se permitir que a matéria insolúvel em uma mistura, assente.

A FIGURA 1 ilustra um método de preparação de amostra 10, de acordo com uma modalidade da presente invenção. Conforme mostrado na FIGURA 1, o método de prepara- ção de amostra 10 pode começar com a obtenção de uma fonte 12. Um diluente 13 pode ser combinado com toda ou com uma porção da fonte 12 e ser agitado de modo a formar uma composição líquida 14 que compreende a fonte 12 dissolvida, dispersa, suspensa ou emulsionada no diluente 13. Sendo assim, a composição líquida 14 é geralmente uma mis- tura, e pode ser uma solução, uma emulsão, uma dispersão, uma suspensão, ou uma com- binação das mesmas.

A fonte 12, quando combinada com o diluente 13, pode incluir matéria solúvel e matéria insolúvel 15, de modo que algumas porções (por exemplo, o(s) analito(s) de inte- resse) da fonte 12 sejam dissolvidas no diluente 13, enquanto outras porções da fonte 12 são suspensas, dispersas ou emulsionadas no diluente 13. A composição líquida 14 é, então, filtrada para que se forme o filtrado 16. Uma amostra 18 do filtrado 16 pode, então, ser removida para análise adicional.

O diluente 13 é geralmente um líquido e, em algumas modalidades, é um líquido estéril. Em algumas modalidades, o diluente 13 pode incluir uma série de aditivos, incluin- do, mas não se limitando a, tensoativos, ou outros aditivos adequados que auxiliam na dispersão, dissolução, suspensão ou emulsificação da fonte para subseqüente teste do analitoç agentes reológicosç neutralizantes microbicidas (por exemplo, que neutralizam os conservantes ou outros agentes microbicidas); nutrientes (por exemplo, que promovem crescimento seletivo de microorganismos desejados); agentes de tamponamento de pH; enzimas; moléculas indicadoras (por exemplo, indicadores de pH ou de oxida- ção/redução); ou uma combinação dos mesmos. Em algumas modalidades, o diluente 13 inclui água estéril (por exemplo, água duplamente destilada (ddH20)); um ou mais solven- tes orgânicos que seletivamente dissolvem, dispersam, suspendem ou emulsificam a fon- te; solventes orgânicos aquosos ou uma combinação dos mesmos. Em algumas modali- dades, o diluente 13 é uma solução tamponada estéril (por exemplo, tampão de Butterfi- eld, disponível junto à Edge Biological, Memphis TN). Em algumas modalidades, o diluen- te 13 é uma formulação nutritiva seletiva ou semi-seletiva, de modo que o diluente 13 possa ser usado no crescimento seletivo ou semi-seletivo do(s) analito(s) desejado(s) (por exemplo, bactérias). Nestas modalidades, o diluente 13 pode ser incubado com a fonte 12, durante um período de tempo, para promover o dito crescimento do(s) analito(s) dese- jado^).

Em algumas modalidades, a fonte 12 inclui o diluente 13. Por exemplo, uma fonte alimentar que inclua uma quantidade substancial de água ou de outro líquido pode ser mis- turada sem a adição do diluente adicional. Em algumas modalidades, a fonte 12 pode ser completamente dissolvida no diluente 13, de modo que a composição líquida 14 inclua uma quantidade mínima de matéria insolúvel 15, tornando desnecessária a etapa de filtração.

A FIGURA 2 ilustra um sistema de preparação de amostra 100, de acordo com uma modalidade da presente invenção. Conforme mostrado na FIGURA 2, o sistema de preparação de amostra 100 inclui um recipiente 102, um forro 104, uma tampa 106, um colar 108 e uma cobertura 109. Em algumas modalidades, um ou mais dos componentes do sistema de prepara- ção de amostra 100 são estéreis ou podem ser esterilizados por meio de procedimentos de este- rilização e desinfecção, como vapor, radiação gama, óxido de etileno, peróxido de hidrogênio, ácido peracético, soluções hidroalcoólicas, alvejante e combinações dos mesmos. Um sistema que tem características similares àquelas do sistema de preparação de amostra 100 é descrito na Publicação PCT N0 WO 98/32539, patente U.S. n°. 6.536.687 e patente U.S. n°. 6.588.681, cada uma das quais sendo incorporada à presente invenção em sua totalidade, por referência. Algumas modalidades da presente invenção empregam uma pluralidade de siste- mas de preparação de amostra 100 para permitir que múltiplos sistemas de preparação de amostra 100 sejam empregados paralelamente para agilizar a preparação de amostra e aumentar a produtividade/rendimento. Nestas modalidades, a pluralidade de sistemas de preparação de amostra 100 pode ser ao menos parcialmente formada, de maneira integral, ou pode ser separadamente formada.

Em algumas modalidades, conforme mostrado na FIGURA 2, o recipiente 102 tem sustentação independente (isto é, auto-suportado) e inclui uma base 127 e uma parede late- ral 129. O recipiente 102 pode ser formado de uma variedade de materiais que incluem, mas não se limitam a, materiais poliméricos, metais (por exemplo, alumínio, aço inoxidável, etc.), cerâmicas, vidros, e combinações dos mesmos. Os exemplos de materiais poliméricos podem incluir, mas não se limitam a, poliolefinas (por exemplo, polietileno, polipropileno, combinações dos mesmos, etc.), policarbonato, acrílicos, poliestireno, polietileno de alta densidade (HDPE), polipropileno de alta densidade, outros materiais poliméricos adequados capazes de formar recipiente auto-suportado ou uma combinação dos mesmos. O recipien- te 102 pode ser translúcido (ou mesmo transparente) ou opaco, e pode ter qualquer tama- nho adequado, dependendo do tipo, quantidade e tamanho da fonte a ser analisada. Por exemplo, em algumas modalidades, o recipiente 102 pode ter uma capacidade de 50 ml_, 100 mL, 250 mL ou mais.

Em algumas modalidades, conforme mostrado na FIGURA 2, o sistema de prepa- ração de amostra 100 inclui um forro 104, que é conformado e dimensionado para ser rece- bido no interior do recipiente 102. O forro 104 pode ser descartável (por exemplo, feito para um único uso), para permitir que o recipiente 102 seja reutilizado sem risco substancial de contaminação e sem a limpeza extensiva exigida entre os usos.

Conforme mostrado na FIGURA 2, o recipiente 102 define um primeiro reservató- rio 120 e o forro 104 define um segundo reservatório 122. O forro 104 é conformado e dimensionado para ser recebido dentro do primeiro reservatório 120 do recipiente 102. Em algumas modalidades, uma fonte 112 e um diluente 113 podem ser adicionados ao primeiro reservatório 120. Em algumas modalidades, conforme mostrado na FIGURA 2, o forro 104 é empregado, e a fonte 112 e o diluente 113 são posicionados dentro do segun- do reservatório 122, e o forro 104 é posicionado dentro do primeiro reservatório 120. Quer sejam adicionados ao primeiro reservatório 120 ou ao segundo reservatório 122, a fonte 112 e o diluente 113 podem ser combinados (e agitados) para formarem uma composição líquida 114. O forro 104 ou o recipiente 102 pode servir como um receptáculo de susten- tação independente que pode conter a composição líquida 114.

A fonte 112 pode ser adicionada ao recipiente 102 ou ao forro 104 primeiro, segui- da da adição do diluente 113, o diluente 113 pode ser adicionado primeiro, seguido da fonte 112, ou a fonte 112 e o diluente 113 podem ser adicionados simultaneamente. Alternativa- mente, a fonte 112 e o diluente 113 podem ser combinados antes de serem adicionados ao sistema de preparação de amostra 100. Em algumas modalidades em que o diluente 113 é adicionado ao recipiente 102 ou ao forro 104 primeiro, uma quantidade pré-medida do dilu- ente 113 (por exemplo, um diluente líquido estéril) pode ser lacrada no recipiente 102 ou no forro 104 com uma sobretampa acoplada de forma removível, de modo que a sobretampa possa ser removida pouco antes da adição da fonte 112. Alternativamente, em algumas modalidades, uma quantidade pré-medida de um meio pulverizado seco (por exemplo, um nutriente) pode ser lacrado no recipiente 102 ou no forro 104 com uma sobretampa acopla- da de forma removível. Nestas modalidades, a sobretampa pode ser removida e um solven- te (por exemplo, ddH20) pode ser adicionado para formar o diluente 113, antes ou no mes- mo momento em que a fonte 112 é adicionada. Alternativamente, se a fonte 112 incluir uma quantidade suficiente de um líquido capaz de dissolver o meio, a fonte 112 pode ser adicio- nada ao meio pulverizado seco para formar a composição líquida 114 que compreende a fonte 112 e um diluente 113 (por exemplo, o meio dissolvido em um solvente fornecido pela fonte 112).

O forro 104 pode ser formado de uma variedade de materiais, incluindo uma varie- dade de materiais poliméricos, que incluem, mas não se limitam a, uma poliolefina, que in- clui, mas não se limita a, polipropileno (por exemplo, polietileno de baixa densidade (LDPE)), polietileno e poli(metilpenteno), poliamida (por exemplo, NYLON®) ou uma combi- nação dos mesmos. Em algumas modalidades, o forro 104 é formado a partir de um pro- cesso de moldagem, como um processo de termoformação. O forro 104 pode ser translúci- do (ou mesmo transparente) ou opaco.

Em algumas modalidades, conforme ilustrado na FIGURA 2, o forro 104 tem sustenta- ção independente (isto é, auto-suportado) e semi-rígido, de modo que a fonte 112 e o diluente 113 possam ser carregados para dentro do forro 104 antes de posicionar o forro 104 no interior do recipiente 102, sem o forro 104 sofrer colapso ou distorção. Além disso, um forro auto- suportado 104 pode auxiliar na pesagem, adição de fonte e diluente, transporte e/ou remoção de amostra.

Em algumas modalidades, o forro 104 é auto-suportado embora também seja de- formável. O termo "deformável" é usado para se referir a uma estrutura que pode ser alte- rada em seu formato ou estado original por meio de pressão (por exemplo, positiva ou negativa) ou estresse. Em modalidades que empregam um forro deformável 104, pode-se aplicar pressão ao forro 104 para reduzir o tamanho de suas dimensões originais (isto é, não tensionado). Esta pressão pode ser usada para promover a remoção da composição líquida 114 (ou um filtrado da mesma) do forro 104.

Em algumas modalidades, conforme mostrado na FIGURA 2, o recipiente 102 inclui uma abertura 124 formada em sua base 127, através da qual um usuário pode acessar o forro 104, para aplicar pressão ao forro 104 e fazer com que o mesmo sofra deformação. Esta pres- são pode ser diretamente aplicada com as mãos ou por meio de um dispositivo adicional, po- dendo ser um processo manual ou automatizado. A abertura 124 pode ser conformada e dimen- sionada, de acordo com a aplicação de uso que se desejar. Em modalidades que não empre- guem o forro 104, o recipiente 102 não precisa incluir a abertura 124.

Em algumas modalidades, o forro 104 inclui uma base relativamente rígida 126 e uma parede lateral relativamente fina e deformável 128, de modo que quando a pressão for aplicada à base 126 em uma direção paralela ao eixo longitudinal do forro 104 (por exemplo, através da abertura 124 no recipiente 102), o forro 104 deforma na direção longitudinal (por exemplo, em virtude do colapso da parede lateral 128, ao invés da base 126). Alternativamen- te, ou adicionalmente, a base 126 pode ser mais espessa que a parede lateral 128. A título de exemplo apenas, em algumas modalidades, a espessura da parede lateral 128 é pelo menos 50 pm, em algumas modalidades, ao menos 100 pm, em algumas modalidades, ao menos 150 pm e em algumas modalidades, ao menos 200 pm. Em algumas modalidades, a espessu- ra da base 126 é pelo menos 225 pm, em algumas modalidades, 275 pm, em algumas moda- lidades, ao menos 300 pm e em algumas modalidades, ao menos 350 pm.

O forro 104 pode incluir, ainda, um ou mais defletores, pregas, corrugações, costu- ras, junções, entretelas ou uma combinação dos mesmos, que podem auxiliar no controle da deformabilidade do forro 104 e/ou podem reduzir ainda mais o volume interno do forro 104. Em algumas modalidades, o forro 104 não inclui quaisquer sulcos em sua superfície interna, particularmente, na junção interna entre a base 126 e a parede lateral 128.

Em algumas modalidades, o forro 104 é deliberadamente deformado para conferir uma distorção à geometria da superfície do forro 104. Esta geometria de superfície distorci- da pode auxiliar no esfacelamento da fonte 112 durante a agitação. Por exemplo, em algu- mas modalidades, uma obstrução (por exemplo, um material relativamente rígido) pode ser posicionado entre a parede lateral 128 do forro 104 e do recipiente 102 para criar uma geo- metria de superfície diferente na parede lateral 128 do forro 104.

Conforme mostrado na FIGURA 2, o recipiente 102 pode incluir marcações 130 pa- ra indicar o nível (isto é, volume) do conteúdo no interior do recipiente 102. As marcações 130 podem ser usadas para se obter uma razão de peso desejada da composição líquida 114, por exemplo, onde a razão de peso entre a fonte 112 e o diluente 113 fica na faixa de 1:100 a 1:1. Um exemplo de marcação adequada é descrito na patente U.S. n°. 6.588.681. Alternativamente, ou adicionalmente, o forro 104 pode incluir marcações. Para permitir o uso das marcações 130 no recipiente 102 e/ou no forro 104, o recipiente 102 e/ou o forro 104 podem ser translúcidos, ou mesmo transparentes para permitir a visualização da com- posição líquida 114 através da parede lateral 129 do recipiente 102 e/ou da parede lateral 128 do forro 104. As paredes laterais 128 e 129 também podem ostentar outros tipos de marcações, como marcas registradas, nomes comerciais e similares.

Na modalidade ilustrada na FIGURA 2, a tampa 106 é acoplada de maneira removível ao forro 104, e o colar 108 é empregado para fixar adicionalmente a tampa 106 ao recipiente 102. Por exemplo, na FIGURA 2, o recipiente 102 inclui roscas 131 na extremidade superior da superfície externa da parede lateral 129, que são conformadas e dimensionadas para que o co- lar 108 (que tem roscas internas 133 capazes de se engatarem nas roscas 131 no recipiente 102) seja rosqueado sobre a extremidade superior do recipiente 102. Como uma alternativa ao uso do colar 108 para prender a tampa 106 no recipiente 102, outros meios de acoplamento podem ser empregados, incluindo grampeamento e/ou quaisquer dos outros meios de acopla- mento descritos a seguir. Em algumas modalidades, o forro 104 não é empregado e a tampa 106 pode ser acoplada diretamente no recipiente 102. Nestas modalidades, o colar 108 não pre- cisa ser empregado. Dessa forma, a tampa 106 pode formar um lacre e, particularmente, um lacre hermético com o recipiente 102 ou com o foro 104. Em algumas modalidades, a tampa 106 e o recipiente 102 (ou a tampa 106 e o forro 104) são integralmente formados ou permanen- temente acoplados em conjunto.

Uma variedade de meios de acoplamento pode ser empregada entre a tampa 106 e o forro 104, entre a tampa 106 e o recipiente 102 e/ou entre o colar 108 e o recipiente 102 para permitir que os respectivos componentes sejam acoplados de maneira removível uns aos outros, incluindo, mas não se limitando a, gravidade (por exemplo, um componente pode ser ajustado em cima de outro componente ou a uma porção correspondente do mesmo), fios de rosca, engate de ajuste por compressão (também referido algumas vezes como "engate de encaixe por fricção" ou "engate de encaixe por interferência"), engate de encaixe por pressão, magnetos, outros meios de acoplamento removíveis adequados e combinações dos mesmos. Em algumas modalidades, o sistema de preparação de amostra 100 não precisa ser reaberto após a fonte 112 e o diluente 113 serem adicionados, de modo que o recipiente 102, o forro 104, a tampa 106 e o colar 108 não precisam ser acoplados de maneira removível uns aos outros mas, de preferência, possam ser acoplados permanente ou semi-permanentemente uns aos outros. Estes meios de acoplamento permanentes ou semi-permanentes podem in- cluir, porém sem se limitar, adesivos, suturas, grampos, roscas, pregos, rebites, pregos sem cabeça, frisagem, soldagem (por exemplo, soldagem sônica (por exemplo, ultra-sônica)), qualquer técnica de termossolda (por exemplo, calor e/ou pressão aplicada a um ou a ambos os componentes a serem acoplados), engate de encaixe por pressão, engate de encaixe por prensa, selagem a quente, outros meios de acoplamento permanentes ou semi-permanentes e combinações dos mesmos.

Conforme mostrado nas FIGURAS 2 e 3, a tampa 106 inclui, ainda, uma porta 132, que pode ser acoplada a um filtro 134, uma porção cilíndrica 136 que é dimensiona- da para ser recebida no interior do forro 104 e uma porção cônica (por exemplo, frusto- cônica) 138 que se estende a partir da porção cilíndrica 136 até porta de amostragem 132. Na junção entre a porção cilíndrica 136 e a porção cônica 138, a tampa 106 inclui, ainda, um rebordo 140 que se estende radialmente para fora a partir da porção cilíndrica 136 e da porção cônica 138.

Em algumas modalidades, o filtro é acoplado diretamente à tampa 106. Em algu- mas modalidades, conforme mostrado nas FIGURAS 2-3, o filtro 134 pode ser sustentado por uma estrutura 135 e acoplado à tampa 106 através da estrutura 135. A estrutura 135 pode formar uma porção do filtro 134, a estrutura 135 pode ser uma parte da tampa 106, ou a estrutura 135 pode ser um elemento separado que é acoplado ao filtro 134 e à tampa 106. A estrutura 135 pode ser formada de uma variedade de materiais, incluindo, mas não se limitando a, uma variedade de polímeros, metais, cerâmicas, vidros e combinações dos mesmos. Na modalidade ilustrada nas FIGURAS 2-3, o filtro 134 é formado por uma rede de metal, e a estrutura 135 é formada por um polímero que é ligado ao filtro de metal 134. A estrutura 135 é acoplada à tampa 106, conforme descrito em maiores detalhes abaixo.

O filtro 134 e a estrutura 135 da modalidade ilustrada nas FIGURAS 2 e 3 são con- formados e dimensionados a fim de se estenderem abaixo da extremidade de fundo da tampa 106, de modo que quando o sistema de preparação de amostra 100 for montado, o filtro 134 e a estrutura 135 se estendem para dentro do segundo reservatório 122 do forro 104 (ou do primeiro reservatório 120 do recipiente 102). Entretanto, o filtro 134 e a estrutura 135 podem adotar uma variedade de formatos e tamanhos. Em algumas modalidades, por exemplo, a estrutura 135 pode incluir uma porção superior rígida (por exemplo, que é acoplada à tampa 106) e uma porção inferior rígida, e o filtro 134 pode ser acoplado entre as mesmas, e o filtro 134 pode ser retrátil.

A porção cilíndrica 136 da tampa 106 inclui uma pluralidade de protuberâncias cir- cunferenciais que se projetam para fora 142 para permitir que a porção cilíndrica 136 seja encaixada por pressão ou ajuste por prensa na superfície interna do forro 104. Em algumas modalidades, a superfície interna do forro 104 pode incluir protuberâncias que se projetam para dentro que são usadas em vez das protuberâncias que se projetam para fora 142, ou em adição às protuberâncias que se projetam para for a 142 (por exemplo, para formar uma relação de acoplamento entre as mesmas).

O forro 104 pode incluir um rebordo 144 que se projeta radialmente para fora a par- tir da parede lateral 128 do forro 104, e que pode formar uma relação de contigüidade com uma superfície superior 146 do recipiente 102 e do rebordo 140 da tampa 106, de modo que quando o sistema de preparação de amostra 100 for montado, o rebordo 144 do forro 104 fique posicionado entre o rebordo 140 da tampa 106 e a superfície superior 146 do recipien- te 102 e um lacre (por exemplo, um lacre hermético) é formado. Conforme mostrado na FIGURA 2, o colar 108 inclui um rebordo que se projeta para dentro 156, de modo que quando o colar 108 for acoplado ao recipiente 102, o rebordo 156 do colar 108 pressione o rebordo 140 da tampa 106 para que este entre em contato com o rebordo 144 do forro 104, que é pressionado para que entre em contato com a superfície superior 146 do recipiente 102 (por exemplo, para formar um lacre com integridade mais alta). Os meios descritos a- cima para montagem do sistema de preparação de amostra 100 e para formação de um lacre entre os componentes do sistema de preparação de amostra 100 são descritos e ilus- trados apenas a título de exemplo. O elemento versado na técnica irá entender, entretanto, que uma variedade de outros mecanismos poderia ser empregada para montar os compo- nentes do sistema de preparação de amostra 100 e para formar um lacre (por exemplo, um lacre impermeável a líquidos, um lacre hermético ou uma combinação dos mesmos), de modo a inibir o vazamento do sistema de preparação de amostra 100 sob condições de o- peração normais.

A tampa 106 da modalidade ilustrada nas FIGURAS 2 e 3 é ilustrada como tendo um formato geralmente cônico ou frusto-cônico. Deve-se compreender que a tampa 106 poderia ter uma variedade de outros formatos, incluindo, mas não se limitando a, um for- mato cilíndrico, um formato tubular que tem uma área em seção transversal retangular ou quadrada, ou outros formatos adequados para serem acoplados aos outros componentes do sistema de preparação de amostra 100. Similarmente, o recipiente 102, o forro 104 e o colar 108 poderiam ter uma variedade de outros formatos além dos formatos substanci- almente cilíndricos ilustrados na FIGURA 2. Além disso, a tampa 106 pode ser dimensio- nada para acomodar os outros componentes do sistema de preparação de amostra 100.

A tampa 106 pode ser formada de uma variedade de materiais, incluindo os mate- riais mencionados acima com relação ao recipiente 102. A tampa 106 pode ser translúcida (ou mesmo transparente) ou opaca, dependendo da aplicação de uso.

O colar 108 pode ser formado de uma variedade de materiais, incluindo, mas não se limitando a, uma variedade de materiais poliméricos, materiais metálicos e combina- ções dos mesmos. Por exemplo, o colar 108 pode ser formado de um componente de plástico moldado ou um componente de metal usinado (como alumínio). Em algumas mo- dalidades, o colar 108 é formado de um componente de plástico moldado que compreen- de polipropileno reforçado com fibra de vidro.

Conforme mostrado na FIGURA 2, a porta de amostragem 132 da tampa 106 tem for- mato geralmente cilíndrico e tubular, de modo que a porta de amostragem 132 defina uma por- ção 152 da superfície interna 153 da tampa 106 e uma abertura 154 na tampa 106. A tampa 106 é oca e fica em comunicação fluida com o segundo reservatório 122 quando o sistema de prepa- ração de amostra 100 é montado. A porta de amostragem 132 não precisa ser cilíndrica e pode, em vez disso, adotar qualquer formato desejado para uma dada aplicação. Na modalidade ilus- trada nas FIGURAS 2 e 3, o filtro 134 é acoplado à porta de amostragem 132 (isto é, através da estrutura 135), de modo que o filtro 134 fique em comunicação fluida com a abertura de tampa 154, bem como com o segundo reservatório 122.

Na modalidade mostrada na Figura 2, a cobertura 109 é conformada e dimensio- nada para receber ao menos uma porção da porta de amostragem 132. Como resultado, a cobertura 109 pode ser acoplada à porta de amostragem 132 da tampa 106 para fechar a abertura na tampa 106 e para lacrar (por exemplo, lacrar hermeticamente) o sistema de preparação de amostra 100 do ambiente. A cobertura 109 pode ser acoplada à tampa 106 usando qualquer um dos meios de acoplamento descritos acima. A cobertura 109 pode ser integralmente formada com a tampa 106 (por exemplo, uma tampa que permaneça presa (do tipo flip top) de encaixe superior), ou a cobertura 109 pode ser separada da tampa 106 (por exemplo, uma tampa de rosca). A cobertura 109 pode ser formada de uma variedade de materiais, incluindo os materiais mencionados acima com relação ao recipiente 102.

Em algumas modalidades, a tampa 106 inclui uma membrana penetrável ou um filme removível que separa ao menos uma porção do interior da tampa 106 do ambiente, de modo que a membrana possa ser perfurada ou o filme removido para que se acesse o inte- rior da tampa 106. Nestas modalidades, a cobertura 109 não precisa ser empregada.

Conforme mostrado na FIGURA 3, a superfície interna 153 da tampa 106 pode incluir uma variedade de bordas circunferenciais internas nas quais outros componentes (por exemplo, filtros adicionais ou alternativos, o conceito dos quais é ilustrado nas FIGURAS 5-6 e descrito a seguir) podem ser acoplados. As bordas circunferenciais internas podem ter qualquer orientação desejada, dependendo de quais outros componentes deseja-se acoplar às bordas. Em algumas modalidades, as bordas circunferenciais internas são orientadas de forma substancialmente or- togonal ao eixo longitudinal central da tampa 106, de modo que as bordas estejam substancial- mente em posição horizontal na FIGURA 3.

Além disso, a tampa 106 pode incluir uma variedade de elementos que se estendem para dentro aos quais outros componentes (por exemplo, filtros) podem ser acoplados. Por exemplo, conforme mostrado na FIGURA 3, o filtro 134 é sustentado pela estrutura 135 e a tampa 106 inclui elementos que se estendem para dentro 155, aos quais a estrutura 135 pode ser acoplada através de uma variedade de meios de acoplamento, incluindo, mas não se limi- tando a, qualquer um dos meios de acoplamento descritos acima. Os elementos que se es- tendem para dentro 155 podem ser integralmente formados com a tampa 106.

O filtro 134 pode ter qualquer formato geométrico para filtrar suficientemente a com- posição líquida 114. Em algumas modalidades, o filtro 134 é deformável e/ou retrátil (isto é, de modo que o filtro 134 se dobre sob seu próprio peso). Em algumas modalidades, o filtro 134 é rígido e retém seu formato (isto é, não se dobra sob seu próprio peso). O tamanho e o número de filtros 134 usados em um sistema de preparação de amostra 100, e a porosidade dos mesmos, pode variar, dependendo do(s) analito(s) desejados e da matéria insolúvel na fon- te 112. A título de exemplo apenas, em algumas modalidades, a fonte 112 compreende ali- mento, o analito desejado consiste em bactérias e a matéria insolúvel consiste em partículas de alimento ou detritos. Nestas modalidades, por exemplo, o filtro 134 pode ser selecionado para reter e/ou separar as partículas de alimento, ao mesmo tempo em que permite que as bactérias passem através do filtro 134 para a análise subseqüente. Por meio de exemplo adi- cional, em algumas modalidades, a fonte 112 compreende uma cultura celular bacteriana Iisa- da, o analito desejado consiste em um ou mais dentre os seguintes: DNA1 RNA, uma proteína ou um metabólito, e a matéria insolúvel consiste em fragmentos celulares. Nestas modalida- des, por exemplo, o filtro 134 pode ser selecionado para reter e/ou separar os fragmentos ce- lulares, ao mesmo tempo em que permite que o DNA, RNA, proteína ou metabólito desejado passe através do filtro 134 para a análise subseqüente.

O filtro 134 pode ter uma variedade de tamanhos de poro suficientes para reter partí- culas da composição líquida 114, enquanto permite que o(s) analito(s) desejado(s) na compo- sição líquida 114 passe(m) através do filtro 134 para extração e/ou amostragem. Em algumas modalidades, o filtro 134 tem um tamanho de poro ou de trama médio de ao menos 5 μιτι, em algumas modalidades, ao menos 40 pm, em algumas modalidades, ao menos 80 pm e, em algumas modalidades, ao menos 120 pm. Em algumas modalidades, o filtro 134 tem um ta- manho de poro ou de trama médio de no máximo 2000 pm, em algumas modalidades, no má- ximo 1000 pm, em algumas modalidades, no máximo 500 pm e, em algumas modalidades, no máximo 200 pm.

Na modalidade ilustrada nas FIGURAS 2 e 3, o filtro 134 está situado na tampa 106, geralmente em linha com o eixo longitudinal central da tampa 106. Entretanto, em algumas modalidades, o filtro 134 está posicionado em uma posição "fora do eixo" da tampa 106. Por exemplo, uma abertura 158 é mostrada em linhas tracejadas na FIGURA 2 para representar uma possível posição "fora de eixo" do filtro 134 na tampa 106. Uma porta de amostragem alternativa ou adicional pode ser posicionada no local da abertura 158 e acoplada à mesma. O filtro 134 pode ser acoplado de maneira permanente ou re- movível em um ou em ambos os locais.

Em algumas modalidades, particularmente nas modalidades que não empregam o forro 104, o filtro 134 pode acessar, de maneira alternativa ou adicional, o interior do siste- ma de preparação de amostra 100 (isto é, o primeiro reservatório 120 do recipiente 102) através de uma abertura 160 na parede lateral 129 do recipiente 102 ou da abertura 124 na base 127 do recipiente 102 (ou uma abertura formada em um local diferente da base 127 do recipiente 102). Nestas modalidades, o filtro 134 pode ser acoplado de maneira permanente ou removível à parede lateral 129 ou à base 127 do recipiente 102. Uma porta de amostra- gem alternativa ou adicional pode ser posicionada no local das aberturas 160 e 124 e aco- piada às mesmas. Em algumas modalidades, o sistema de preparação de amostra 100 po- de incluir mais de uma porta de amostragem, como a porta de amostragem 132 na tampa 106, uma porta de amostragem adicional no local da abertura 158 na tampa 106, uma porta de amostragem adicional no local da abertura 160 na parede lateral 129 do recipiente 102, e/ou uma porta de amostragem adicional no local da abertura 124 na base 127 do recipiente 102. A cobertura 109 ou um dispositivo de fechamento similar pode ser usado para lacrar qualquer uma das portas de amostragem em qualquer local do sistema de preparação de amostra 100.

Devido às diferentes localizações possíveis para o filtro 134, o filtro 134 pode ser con- formado e dimensionado para acomodar sua posição no sistema de preparação de amostra 100 e na aplicação particular de uso. Em qualquer um dos possíveis locais para o filtro 134, o filtro 134 pode ser posicionado completamente acima ou completamente abaixo do nível 165 da composição líquida 114, ou o filtro 134 pode ser parcialmente posicionado acima e parci- almente abaixo do nível 165 da composição líquida 114, dependendo do tipo de filtração dese- jada e de como o filtro 134 se destina a filtrar a composição líquida 114. Por exemplo, na mo- dalidade ilustrada na FIGURA 2, o filtro 134 é acoplado à porta de amostragem 132 e, depen- dendo de quão alto o nível 165 da composição líquida 114 estiver, poderia se estender tipica- mente a partir da porta de amostragem 132 para o interior do sistema de preparação de a- mostra 100, de modo que o filtro 134 fique parcialmente posicionado acima e parcialmente abaixo do nível 165 da composição líquida 114.

O filtro 134 fica em comunicação fluida com o interior do forro 104 e a composição líquida 114, e atua de modo a filtrar a composição líquida 114 para formar um filtrado 116. O filtrado 116 fica disposto dentro do volume do filtro 134 e pode ser extraído e/ou amostrado a partir da porta de amostragem adjacente 132. Nas modalidades que empregam filtros 134 em múltiplos locais, pode-se fazer a amostra do filtrado 116 a partir de qualquer uma das portas ou aberturas de amostragem descritas acima.

O filtro 134 pode ser formado de uma variedade de materiais, incluindo, mas não se limitando a, um ou mais dos seguintes: polipropileno, polietileno, náilon, poliéster, poli- carbonato, acrílicos como metacrilato de polimetila, polímeros fluorados (por exemplo, poli- tetrafluoro etileno (PTFE)), derivados de celulose (por exemplo, celuloses modificadas como acetato de celulose), fibra de vidro, poliuretanos, metais e combinações dos mesmos. Em algumas modalidades, o filtro 134 pode ser formado de um substrato tecido, de um substra- to não-tecido, de uma estrutura moldada, pode compreender outros tecidos ou materiais fibrosos e/ou pode ser formado de um material de membrana. A área superficial do filtro 134 pode ser aumentada pregueando-se o filtro 134 ou através de outras técnicas similares.

Em algumas modalidades (não importando o local em que o filtro 134 se encon- tra), o filtro 134 pode ser usado como um retentor ou suporte da fonte 112. Um exemplo deste conceito é ilustrado na FIGURA 4 e descrito a seguir.

Conforme mencionado acima, o forro 104 pode ser descartável. Além disso, em al- gumas modalidades, um ou mais dentre os seguintes, a tampa 106, a cobertura 109 e o filtro 134, também pode ser descartável. Por exemplo, em algumas modalidades, a tampa 106 pode ser acoplada ao forro 104, e a cobertura 109 e o filtro 134 podem ser acoplados à tampa 106. O forro 104, a tampa 106, o filtro 134 e a cobertura 109 podem formar uma por- ção descartável do sistema de preparação de amostra 100 que pode ser usado sem conta- minar o recipiente 102. A porção descartável pode ser removida do recipiente 102 e ser descartada. Então, o recipiente 102 pode ser reutilizado com um novo forro 104, tampa 106, filtro 134 e cobertura 109.

A FIGURA 4 ilustra outro sistema de preparação de amostra 200, de acordo com a pre- sente invenção, em que números similares representam elementos similares. O sistema de pre- paração de amostra 200 compartilha muitos dos mesmos elementos e características descritos acima com referência à modalidade ilustrada das FIGURAS 2-3. Conseqüentemente, os ele- mentos e características que correspondem aos elementos e características na modalidade ilus- trada das FIGURAS 2-3 são dotados dos mesmos números de referência na série 200. Faz-se referência à descrição acima das FIGURAS 2-3 em anexo para uma descrição mais completa das características e elementos (e alternativas às ditas características e elementos) da modali- dade ilustrada na FIGURA 4.

O sistema de preparação de amostra 200 não inclui um forro e a tampa 206 é dire- tamente acoplada ao recipiente 202. O sistema de preparação de amostra 200 inclui, ainda, um filtro 234 que é acoplado de maneira fluida a uma abertura 260 formada na parede late- ral 229 do recipiente 202. Diferente do filtro 134 do sistema de preparação de amostra 100, o filtro 234 funciona como um retentor ou suporte para a fonte 212.

O filtro 234 pode ser permanentemente acoplado ao recipiente 202 e a fonte 212 pode ser adicionada ao filtro 234, ou o filtro 234 pode ser acoplado de maneira removível ao recipiente 202, e a fonte 212 pode ser adicionada ao filtro 234 antes ou após o filtro 234 ser acoplado ao recipiente 202. Em algumas modalidades, o filtro 234 pode ter flutuação livre dentro do primeiro reservatório 220 do recipiente 202, de modo que o filtro 234 contenha a fonte 212 e o diluente 213 seja capaz de fluir para dentro e para fora do interior do filtro 234 para se misturar com a fonte 212.

A fonte 212 fica posicionada no filtro 234 e o filtro 234 fica posicionado ao menos parcialmente abaixo do nível do diluente 213 no recipiente 202 e fica em comunicação fluida com o interior do recipiente 202, de modo que a fonte 212 possa ser combinada com o dilu- ente 213 para formar uma composição líquida 214 dentro do filtro 234. A composição líqui- da 214 posicionada dentro do filtro 234 inclui o(s) analito(s) de interesse no diluente 213, bem como, qualquer matéria insolúvel da fonte 212. Durante a agitação, a fonte 212 e o diluente 213 podem ser misturados para permitir que a fonte 212 seja dissolvida, dispersa, suspensa e/ou emulsionada no diluente 213. O diluente 213 e quaisquer analitos de interes- se no diluente 213 são livres para fluir para dentro e para fora do filtro 234, de modo que o filtrado resultante 216 fique posicionado na parte externa do filtro 234 e dentro do reservató- rio 220 do recipiente 202 e inclua o(s) analito(s) de interesse no diluente 213.

Pode-se fazer amostra do filtrado 216 a partir de qualquer uma dentre uma variedade de portas ou aberturas de amostragem, que inclui a porta de amostragem 232 na tampa 206, a abertura 258 na tampa 206, uma abertura adicional na parede lateral 229 do recipiente 202 e/ou a abertura 224 na base 227 do recipiente 202. Em algumas modalidades, conforme mos- trado na FIGURA 4, uma ou mais das portas de amostragem podem incluir um filtro adicional 234' que funciona do mesmo modo que o filtro 134 do sistema de preparação de amostra 100. Nestas modalidades, o filtrado 216 é adicionalmente filtrado pelo filtro 234' e o filtrado resultan- te 216' fica disposto dentro do filtro 234' e pode-se fazer sua extração e/ou amostragem a par- tir da porta de amostragem adjacente (isto é, porta de amostragem 232 na FIGURA 4).

O sistema de preparação de amostra 200 pode incluir, ainda, um forro, neste caso, o diluente 213 e o filtrado resultante 216 podem ser posicionados dentro do forro, desde que seja fornecida uma vedação suficiente entre o forro e o recipiente 202 no local da abertura 260.

As FIGURAS 5-6 ilustram outro sistema de preparação de amostra 300, de acordo com a presente invenção, em que números similares representam elementos similares. O sistema de preparação de amostra 300 compartilha muitos dos mesmos elementos e características descri- tos acima com referência à modalidade ilustrada das FIGURAS 2-3. Conseqüentemente, os e- lementos e características que correspondem aos elementos e características na modalidade ilustrada das FIGURAS 2-3 são dotados dos mesmos números de referência na série 300. Faz- se referência à descrição acima das FIGURAS 2-3 em anexo para uma descrição mais completa das características e elementos (e alternativas para estas características e elementos) da moda- lidade ilustrada nas FIGURAS 5-6.

As FIGURAS 5-6 mostram apenas a tampa 306 do sistema de preparação de a- mostra 300. Pode-se presumir que os outros componentes do sistema de preparação de amostra 300 são iguais aos do sistema de preparação de amostra 100 descrito acima e, dessa forma, por uma questão de clareza, não são mostrados nas FIGURAS 5-6.

A tampa 306 é substancialmente similar à tampa 106 descrita acima e ilustrada nas FIGURAS 2-3, exceto pelo fato de que a tampa 306 inclui um filtro 334 que é substancialmente plano e acoplado à superfície interna 353 da tampa 306. A superfície interna 353 da tampa 306 inclui uma borda circunferencial interna superior 370 e uma borda circunferencial interna inferior 368. Conforme mostrado na Figura 5, a borda circunferencial interna superior 370 inclui uma superfície voltada para baixo que se estende a partir de uma circunferência externa 371 até uma circunferência interna 373. Similarmente, a borda circunferencial interna inferior 368 inclui uma superfície voltada para baixo que se estende a partir de uma circunferência externa 376 até uma circunferência interna 378. A periferia externa do filtro 334 é acoplada à borda circunferencial interna superior 370 da superfície interna 353. Além disso, o filtro 334 fica em contato com as paredes de retenção 372. As paredes de retenção 372 se estendem para baixo a partir da super- fície interna 353 da tampa 106 para reter a periferia externa do filtro 334.

O filtro 334 pode ser acoplado à tampa 306 usando o mesmo meio de acoplamento descrito acima com relação à tampa 106.O filtro 334 pode ser acoplado de maneira perma- nente ou removível à tampa 306.O grau de acoplamento entre o filtro 334 e a tampa 306 pode variar dependendo de inúmeros fatores que incluem, mas não se limitam, ao material do filtro 334, ao material da tampa 306, ao tamanho e textura da área superficial acoplada e ao tipo de meio de acoplamento usado. Por exemplo, se o filtro 334 incluir bordas desgastadas, uma área superficial de acoplamento mais larga e/ou frisada pode ser usada (por exemplo, a borda circunferencial interna superior 370 pode ser frisada). Esta solda ultra-sônica mais larga e/ou frisada pode apreender as bordas desgastadas do filtro 334. Para minimizar a quantidade de desgaste, o filtro 334 pode ser cortado usando um laser, o qual pode fundir as bordas do filtro 334. Devido ao fato de o filtro cortado a laser resultante 334 incluir uma quantidade mínima de desgaste, se houver, uma área de acoplamento mais estreita pode ser usada. Em algumas modalidades, a área de acoplamento se estende completamente ao redor da periferia externa do filtro 334. Em algumas modalidades, a the área de acoplamento pode ter uma largura mé- dia (isto é, uma dimensão dentro do mesmo plano e substancialmente perpendicular à perife- ria externa do filtro 334) de até 5,0 mm e, em algumas modalidades, na faixa de 1,0 mm a 3,0 mm. Alternativamente, o filtro 334 pode ser integralmente formado com a tampa 306, por exemplo, através de um processo de moldagem.

O filtro 334 pode ser formado do mesmo material que a tampa 306 ou de um material diferente. O filtro 334 pode ser flexível ou semi-rígido. Em algumas modalidades, o filtro 334 é formado a partir de um náilon não-tecido ou de um pano tecido, enquanto a tampa 306 é uma parte moldada por injeção formada de polipropileno. Nestas modalidades, o filtro de náilon 334 pode ser acoplado à tampa 306 através de uma técnica de soldagem ultra-sônica. Durante a soldagem ultra-sônica, ao menos uma porção da borda circunferencial interna superior 370 pode se fundir de modo a se ligar mecanicamente ao filtro 334. Uma vez que o náilon tem uma temperatura de fusão mais alta que o polipropileno, o filtro de náilon 334 pode manter sua integridade estrutural durante o processo de soldagem ultra-sônica. Nestas modalidades, ao menos uma porção da borda circunferencial interna superior 370 pode entrar em uma por- ção do filtro 334 que encapsula, assim, uma porção do filtro 334.

O filtro 334 pode ter dimensões e formatos que variam para uma dada aplicação. O fil- tro 334 pode ter qualquer formato desejado incluindo, mas não se limitando a, um formato circu- lar, um formato quadrado, um formato retangular, um formato triangular, um formato poligonal, um formato de estrela, outros formatos adequados e combinações dos mesmos. Na modalidade ilustrada nas FIGURAS 5 e 6, o filtro 334 tem um formato substancialmente circular.

As dimensões do filtro 334 podem variar dependendo do tamanho da tampa 306. Em algumas modalidades, o filtro 334 tem uma dimensão maior (isto é, comprimento, largura ou diâmetro) na faixa de 15 mm a 100 mm, embora o filtro 334 possa ter dimensões menores ou maiores. Por exemplo, em algumas modalidades, o filtro 334 pode ter um formato circular e um diâmetro de 56 mm.

Ainda com referência às FIGURAS 5 e 6, as paredes de retenção 372 podem ser inte- gralmente formadas com a tampa 306. Em algumas modalidades, conforme mostrado na FIGURA 5, a tampa 306 compreende duas ou mais paredes de retenção 372, sendo que (i) ca- da parede de retenção 372 tem um comprimento circunferencial maior que sua espessura, (ii) cada parede de retenção 372 é posicionada ao longo de uma periferia externa do filtro 334 e (iii) o comprimento circunferencial total de duas ou mais paredes de retenção 372 é menor do que o comprimento circunferencial total da periferia externa do filtro 334.

Conforme mostrado na FIGURA 5, a tampa 306 inclui quatro paredes de retenção 372 igualmente espaçadas entre si ao longo da circunferência externa 371 da borda circun- ferencial interna superior 370. Em algumas modalidades, cada parede de retenção 372 tem uma espessura na faixa de 800 μm a 1200 μm, um comprimento (isto é, nesta modalidade exemplificadora, um comprimento de arco) que se estende em uma distância na faixa de 1,0 mm a 22,0 mm ao longo da circunferência externa 371 e uma altura na faixa de 1,0 mm a 5,0 mm. Em algumas modalidades, cada parede de retenção 372 tem uma configuração segmentada, a fim de não impedir (ou minimizar o efeito sobre) o fluxo de fluido ao redor da parede de retenção 372.

A tampa 306 inclui uma abertura 354 e elementos que se estendem para dentro 355. Os elementos que se estendem para dentro 355 podem ser usados para acoplar um filtro adicional (não mostrado) à tampa 306 do mesmo modo que o filtro 134 é acoplado à tampa 106 nas FIGURAS 2 e 3. Nestas modalidades, o filtro 334 se situa abaixo do filtro adicional, e o filtro adicional pode ter uma dimensão de comprimento menor que a distân- cia do topo da tampa 306 até o filtro 334.

Em algumas modalidades, conforme mostrado nas FIGURAS 5 e 6, o elemento de fil- tro 334 tem uma área de superfície total que é maior que a menor área em seção transversal da tampa 306. Na tampa 306, a menor área em seção transversal é a área em seção trans- versal da abertura de tampa 354. Em algumas modalidades, mais de um filtro é acoplado à tampa 306 de uma maneira similar ao filtro 334. Por exemplo, em algumas modalidades, o filtro 334 ou um filtro adicional (não mostrado) pode ser acoplado à borda circunferencial inter- na inferior 368. Ou seja, um ou mais filtros 334 podem ser acoplados à tampa 306 e posicio- nados em qualquer lugar ao longo da superfície interna 353 da tampa 306. Nas modalidades que empregam mais de um filtro 334, os filtros 334 podem ser similares uns aos outros ou diferentes. Ou seja, os filtros 334 podem ser formados de materiais iguais ou de materiais dife- rentes, e os filtros 334 podem ter tamanhos de poro iguais ou seqüencialmente menores.

Como um Exemplo, um primeiro filtro 334 pode ser acoplado à borda circunferencial interna superior 370 e pode ter um diâmetro de 56 mm, um tamanho de poro do elemento de 80 pm e pode ser ao menos parcialmente circundado por uma ou mais paredes de retenção 372, enquanto um segundo filtro 334 pode ser acoplado à borda circunferencial interna inferior 368 e pode ter um diâmetro de 96 mm, um tamanho de poro do elemento de 200 pm e pode ser ao menos parcialmente circundado pela superfície interna 353 da tampa 306.

Qualquer um dos filtros descritos acima 134, 234 e 334 pode ser usado em combi- nação uns com os outros em um sistema de preparação de amostra. Por exemplo, confor- me descrito acima, o filtro 134 pode ser usado em combinação com o filtro 234 e/ou filtro 334, para fornecer uma série de filtros para diferentes aplicações e/ou para a remoção de particulados sucessivamente menores da composição líquida.

Alternativamente, ou adicionalmente, mais de um entre cada tipo de filtro 134, 234 ou 334 pode ser empregado (e, em algumas modalidades, podem ser encaixados telescopi- camente) para a remoção de particulados sucessivamente menores da composição líquida. Por exemplo, os filtros podem ser dispostos onde um filtro grosso atua como um pré-filtro com tamanho de poro maior em relação aos filtros subseqüentes, que têm tamanhos de poro sucessivamente menores para a coleta de um filtrado. Os filtros podem ser dispostos para uso do sistema de preparação de amostra em uma posição vertical e/ou os filtros po- dem ser dispostos para uso do sistema de preparação de amostra quando o mesmo é inver- tido.

Qualquer um dos sistemas de preparação de amostra 100, 200, 300 aqui descritos pode ser usado para preparar as amostras seguindo geralmente o método de preparação de amostra 10 descrito acima e ilustrado na FIGURA 1. Um método exemplificador será descrito agora em detalhes usando o sistema de preparação de amostra 100 das FIGURAS 2 e 3.

Uma fonte 112 e um diluente 113 podem ser adicionados ao primeiro reservatório 120 do recipiente 102 e combinados para formarem uma composição líquida 114. Conforme mencionado acima, o forro 104 ou o recipiente 102 pode servir como um receptáculo de sus- tentação independente que pode conter a composição líquida 114. A tampa 106 pode ser a- coplada ao forro 104 antes ou após o forro 104 ser posicionado no interior do recipiente 102. O colar 108 pode ser acoplado ao recipiente 102 para fixar os componentes em conjunto e a abertura de tampa 154 pode ser fechada usando a cobertura 109.

O sistema de preparação de amostra 100 pode ser agitado para misturar a fonte 112 e o diluente 113 e para dissolver, dispersar, suspender e/ou emulsificar a fonte 112 no diluente 113. A agitação pode ser em uma órbita circular, em uma órbita elíptica, em uma órbita aleatória, em uma combinação das mesmas ou outros meios para assegurar a mistu- ração eficaz e eficiente da fonte 112 e do diluente 113. O sistema de preparação de amos- tra 100 pode ser preso por garras ou por outro meio durante a agitação para minimizar o derramamento e/ou perda da composição líquida 114.

Em algumas modalidades, a composição líquida 114 no sistema de preparação de amostra 100 pode ser agitada por um Agitador Burell Model 75 Wrist Action (Burrell Scienti- fic, Pittsburgh, PA), a uma freqüência de 10 a 2000 ciclos/minuto e, em algumas modalida- des, a uma freqüência de 200 a 500 ciclos/minuto por um período de tempo selecionado. Em algumas modalidades, o sistema de preparação de amostra 100 pode ser montado a uma distância do braço agitador entre 5 cm e 50 cm e, em algumas modalidades, entre 10 cm e 20 cm. Em algumas modalidades, o sistema de preparação de amostra 100 pode inscrever um arco de 5 graus a 30 graus e, em algumas modalidades, entre 15 graus e 20 graus. A composição líquida 114 pode ser agitada durante ao menos 10 segundos, em algumas modalidades, ao menos 15 segundos, em algumas modalidades, ao menos 30 segundos, em algumas modalidades, ao menos 40 segundos e, em algumas modalida- des, ao menos 60 segundos. Em algumas modalidades, a composição líquida 114 pode ser agitada durante no máximo 15 minutos, em algumas modalidades, no máximo 10 minutos, em algumas modalidades, no máximo 5 minutos e, em algumas modalidades, no máximo 3 minutos.

Em algumas modalidades, a composição líquida 114 pode ser agitada em vórtice em um Tubo de Vórtice Múltiplo VX-2500 (VWR Scientific Products, West Chester, PA) em uma freqüência de agitação de 200 a 5000 rpm e, em algumas modalidades, de 1000 a 3000 rpm por um período de tempo selecionado. A órbita do vórtice pode ser circular, elípti- ca, aleatória ou uma combinação das mesmas. Em algumas modalidades, a órbita tem en- tre 0,25 cm e 5 cm e, em algumas modalidades, entre 1 cm e 3 cm.

Conforme mencionado acima, um conjunto ou uma pluralidade de sistemas de prepa- ração de amostra 100, 200 e/ou 300 pode ser simultaneamente agitado, ao ser colocado so- bre uma placa, um braço ou outro dispositivo e preso através da gravidade, garras ou outro meio para a subseqüente agitação. Por exemplo, em algumas modalidades, de 1 a cerca de 50 sistemas de preparação de amostra 100, 200 e/ou 300 são simultaneamente agitados e, em algumas modalidades, cerca de 10 a cerca de 25 sistemas de preparação de amostra 100, 200 e/ou 300 são simultaneamente agitados em um único dispositivo agitação ou em múltiplos dispositivos de agitação.

Em algumas modalidades, a composição líquida 114 pode ser agitada por meio da adição de um agitador mecânico que tem uma haste e lâminas de agitação, que podem ser inseridas através da abertura de tampa 154 (por exemplo, quando nenhum filtro 134 estiver presente) ou, alternativamente, através de quaisquer outras possíveis aberturas. A agitação da composição líquida 114 pode ser adicionalmente realizada com rolamentos de esfera de aço, barras de agitação magnéticas, lâminas e outros meios para auxiliar na dissolução e/ou dispersão da fonte 112 no diluente 113 para liberação do(s) analito(s) de interesse da fonte 112. Os métodos de agitação descritos acima são incluídos apenas a título de exemplo e não se destinam a limitar os mesmos. O elemento que seja versado na técnica irá entender que outros métodos de agitação similares podem ser empregados.

A composição líquida 114 pode ser filtrada usando o filtro 134 para formar um fil- trado 116 posicionado dentro do filtro 134 que inclui o diluente 113 e qualquer analito de interesse no diluente 113. Todo ou uma porção (por exemplo, uma amostra) do filtrado 116 pode ser removida do interior do filtro 134 para análise adicional.

Em algumas modalidades, o nível 165 da composição líquida 114 é alto o suficien- te, de modo que o filtro 134 seja posicionado parcialmente acima e parcialmente abaixo do nível 165 da composição líquida 114. O sistema de preparação de amostra 100 pode ser posicionado para cima, inclinado, enviesado ou invertido para ajustar o nível 165 da compo- sição líquida 114 conforme necessário. Nestas modalidades, o interior do filtro 134 pode ser acessado através da abertura de tampa 154 e uma amostra do filtrado 116 pode ser remo- vida através da aspiração (por exemplo, por pipetagem) do interior do filtro 134. Alternati- vãmente, o filtrado 116 pode ser removido decantando-se o o filtrado 116 a partir da abertu- ra de tampa 154 e/ou o forro 104 pode ser deformado, e o filtrado 116 ser forçado a partir da abertura de tampa 154 aplicando-se pressão ao forro 104 (por exemplo, à base 126 do forro 104 através da abertura 124 na base 127 do recipiente 102).

Em algumas modalidades, o nível 165 da composição líquida 114 fica abaixo do fundo do filtro 134, de modo que o filtro 134 seja posicionado completamente acima do nível 165 da composição líquida 114. Nestas modalidades, o sistema de preparação de amostra 100 pode ser invertido para fazer com que a composição líquida 114 seja filtrada pelo filtro 134, de modo que o filtrado 116 se situe dentro do filtro 134. Pode-se aplicar pressão ao forro 104, conforme descrito acima, para forçar o filtrado 116 para o interior do filtro 134 e/ou a partir da abertura de tampa 154. Alternativamente, o filtro 134 pode ser configurado de modo que, quando o sistema de preparação de amostra 100 seja retornado até uma posição vertical após a inversão, o filtro 134 retenha um filtrado 116 em seu interior que pode ser removido por aspiração e/ou decanta- ção.

Conforme descrito acima, em algumas modalidades, como o sistema de preparação de amostra 200 ilustrado na FIGURA 4, o filtro 234 pode agir como um retentor ou suporte para a fonte 212. Nestas modalidades, um diluente 213 pode ser adicionado ao primeiro reservatório 220 do recipiente 202 (ou o recipiente 202 pode ser pré-carregado com uma quantidade pré- medida de diluente 213) e a fonte 212 pode ser posicionada dentro do filtro 234. A tampa 206 pode ser acoplada ao recipiente 202 e o sistema de preparação de amostra 200 pode ser fecha- do usando uma cobertura ou dispositivo de fechamento similar. O sistema de preparação de amostra montado e fechado 200 pode ser agitado para permitir que o diluente 213 flua para den- tro e para fora do filtro 234, de modo que a composição líquida 214 se situe dentro do filtro 234 e o filtrado 216 se situe fora do filtro 234 e dentro do primeiro reservatório 220 do recipiente 202.

Conforme mencionado acima, o filtrado 216 pode ser removido de qualquer uma en- tre uma variedade de portas de amostragem (por exemplo, a porta de amostragem 232) e pode ser adicionalmente filtrado para remover particulados adicionais que ainda possam estar presentes no filtrado 216. Por exemplo, o filtrado 216 pode ser adicionalmente filtrado através de um filtro 234' que tem um tamanho de poro menor que o do filtro 234 acoplado à parede lateral 229 do recipiente 202, de modo que o segundo filtrado 216' seja formado dentro do filtro 234'. O segundo filtrado 216' ou uma amostra do mesmo, pode ser removido usando qualquer uma das técnicas descritas acima.

Os exemplos de trabalho a seguir destinam-se a ser ilustrativos, e não limitadores da presente invenção.

Exemplos

Todos os solventes e reagentes foram obtidos junto a Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WI, exceto onde especificado em contrário. Todas as porcentagens e quantidades são expressas em peso, exceto onde for especificado em contrário. Os forros 3M™ Company Paint Preparation System (número de peça 16114) e os recipientes de sustentação indepen- dente (número de peça 16115) e tampas e colares associados foram fornecidos pela 3M Company of St. Paul, Minnesota. O agitador usado foi o agitador de ação de pulso 75 modelo Burrell, disponível junto a Burrell Scientific Company de Pittsburgh, PA. O diluente estéril (tampão de Butterfield) foi adquirido junto a Edge Biological de Memphis, TN1 EUA. O agitador em vórtice era um modelo VX-2500 de Tubo de Vórtice Múltiplo disponível junto a VWR Scien- tific Products de West Chester, PA, E.U.A. A contagem aeróbica foi determinada usando Pla- cas de Contagem Aeróbica 3M™ Petrifilm™ e os Leitores de Placa foram obtidos a partir de 3M Company de St. Paul, MN, EUA.

As amostras de carne bovina e suínas moídas (com teor estimado de 25% de gordura) foram adquiridas junto a armazéns locais. As porções (150 gramas) foram sepa- radas, colocadas em bolsas de plástico e armazenadas em um congelador a -20°C. Tam- bém foram adquiridas folhas de espinafre junto às mercearias locais e elas foram arma- zenadas a 4°C em seus recipientes originais. Antes do uso, as porções necessárias de carne bovina e suína moídas foram retiradas do congelador, mantidas por aproximada- mente 2 horas à temperatura ambiente (isto é, 25°C para descongelar as amostras, se- guida da mistura cuidadosa na bolsa usando uma espátula de madeira antes do uso. As amostras de espinafre foram imediatamente testadas após a remoção do armazenamento a 4°C.

Exemplo Comparativo 1

Este Exemplo demonstra a quantificação de analitos liberados de uma amostra de car- ne bovina moída que usa o procedimento de homogeneização (stomaching). Uma porção de carne bovina moída (11 g) foi colocada dentro do filtro de uma bolsa do tipo homogeneizadora filtrada (misturador de laboratório Seward STOMACHER®, bolsa de filtro Modelo 400 disponível junto a Seward, Inc. de Norfolk, UK) e após a adição do tampão de Butterfield (99 mL), a bolsa foi colocada em um misturador de laboratório STOMACHER® (Modelo 400, disponível junto a Seward, Inc., de Norfolk, UK). A composição líquida foi homogeneizada (por "stomaching") a 230 rpm nos períodos designados, conforme relatado na Tabela 1. Um filtrado foi formado no volume entre o filtro e a parede da bolsa. Após cada intervalo de tempo, 2 mL do filtrado foram coletados por pipeta a partir do espaço entre a parte externa do filtro e a parede da bolsa e fo- ram transferidos para um tubo de ensaio estéril. Uma porção dos filtrados coletados (500 μΙ_) foi diluída com Tampão de Butterfield (99 mL) e manualmente agitada por aproximadamente 10 segundos, após os quais, uma contagem aeróbica para cada filtrado foi determinada e rela- tada na Tabela 1.

Exemplo Comparativo 2 (C2)

Este Exemplo demonstra a quantificação de analitos liberados de uma amostra de car- ne suína moída que usa o procedimento de homogeneização (stomaching). Uma porção de car- ne suína moída (11 g) foi colocada dentro do filtro de uma bolsa do tipo homogeneizadora filtra- da (misturador de laboratório Seward STOMACHER®, bolsa de filtro Modelo 400 disponível junto a Seward, Inc. de Norfolk, UK) e após a adição do tampão de Butterfield (99 mL), a bolsa foi colocada em um misturador de laboratório STOMACHER® (Modelo 400, disponível junto a Se- ward, Inc., de Norfolk, UK). A composição líquida foi homogeneizada (por "stomaching") a 230 rpm nos períodos designados, conforme relatado na Tabela 1. Um filtrado foi formado no volume entre o filtro e a parede da bolsa. Após cada intervalo de tempo, 2 mL do filtrado foram coletados por meio de pipeta a partir do espaço entre a parte externa do filtro e a parede da bol- sa e foram transferidos para um tubo de ensaio estéril. Uma porção dos filtrados coletados (1000 μL) foi diluída com Tampão de Butterfield (9 mL) e manualmente agitada por aproxima- damente 10 segundos, após os quais, uma contagem aeróbica para cada filtrado foi determina- da e relatada na Tabela 1.

Exemplo Comparativo 3 (C3)

Este Exemplo demonstra a quantificação de analitos liberados por folhas de espi- nafre, utilizando-se o procedimento de homogeneização (stomaching). Uma porção de fo- lhas de espinafre (11 g) foi colocada dentro do filtro de uma bolsa do tipo homogeneizadora filtrada (misturador de laboratório Seward STOMACHER®, bolsa de filtro Modelo 400 dispo- nível junto a Seward, Inc. de Norfolk, UK) e após a adição do tampão de Butterfield (99 mL), a bolsa foi colocada em um misturador de laboratório STOMACHER® (Modelo 400, disponí- vel junto a Seward1 Inc., de Norfolk, UK). A composição líquida foi homogeneizada (por "stomaching") a 230 rpm nos períodos designados, conforme relatado na Tabela 1. Um fil- trado foi formado no volume entre o filtro e a parede da bolsa. Após cada intervalo de tem- po, 2 mL do filtrado foram coletados por pipeta a partir do espaço entre a parte externa do filtro e a parede da bolsa e foram transferidos para um tubo de ensaio estéril. Uma porção dos filtrados coletados (1000 μL) foi diluída em série com o Tampão de Butterfield até uma concentração final de 1:20.000, após a qual uma contagem aeróbica para cada filtrado foi determinada e relatada na Tabela 1.

Exemplo 1 (E1)

Este Exemplo demonstra a quantificação de analitos liberados a partir de uma amos- tra de carne bovina moída utilizando-se agitação mecânica e um sistema de preparação de amostra da presente descrição. Um forro vazio foi colocado em uma balança, e a carne bovina moída (11 g), que serviu como a fonte, foi transferida para o forro. O forro foi, então, removido da balança e colocado em um recipiente. O diluente estéril (99 mL) foi adicionado ao forro que contém a fonte de carne bovina moída e uma tampa foi acoplada ao forro e ao recipiente. A tampa compreendia um filtro sob a forma do filtro 134 das FIGURAS 2 e 3. Um colar rosquea- do foi, então, rosqueado sobre o recipiente para prender o sistema de preparação de amostra em um estado montado. Uma abertura na tampa foi lacrada com uma cobertura separada. O sistema de preparação de amostra que contém uma composição líquida que compreende a carne bovina moída e o diluente foi colocado em uma garra presa a um braço de um agitador. A distância a partir do centro do sistema de preparação de amostra até a haste no agitador era de aproximadamente 20 cm. A amostra foi agitada por 15 segundos com um ajuste do indicador do equipamento de 10, correspondente a uma freqüência de aproximadamente 6 ciclos por segundo em um arco aproximado de 17 graus. Após este período de tempo, com a cobertura removida, aproximadamente 2 mL da composição líquida foram decantados através do filtro na tampa (isto é, como um filtrado) em um tubo de ensaio estéril. O sistema de prepa- ração de amostra foi tampado, devolvido para o dispositivo de agitação e agitado por períodos de tempo adicionais, conforme requerido. O ciclo de mistura/decantação foi repetido, confor- me descrito, e os filtrados foram coletados em pontos de tempo de 60, 120, e 240 segundos. Uma porção de filtrados coletados (500 pL) foi diluída com Tampão de Butterfield (99 mL) e manualmente agitada por aproximadamente 10 segundos após os quais uma contagem aeró- bica para cada filtrado foi determinada e relatada na Tabela 1.

Exemplo 2 (E2)

Este Exemplo demonstra a quantificação de analitos liberada a partir de uma amos- tra de carne bovina moída que usa um misturador em vórtice e um sistema de preparação de amostra da presente descrição. Um forro vazio foi colocado em uma balança, e a carne bovina moída (11 g), que serviu como a fonte, foi transferida para o forro. O forro foi, então, removido da balança e colocado em um recipiente. O diluente estéril (99 mL) foi adicionado ao forro que contém a fonte de carne bovina moída e uma tampa foi acoplada ao forro e ao recipiente. A tampa compreendia um filtro sob a forma do filtro 134 das FIGURAS 2 e 3. Um colar dotado de rosca foi, então, rosqueado ao recipiente para prender o sistema de prepa- ração de amostra em um estado montado. Uma abertura na tampa foi lacrada com uma cobertura separada. O sistema de preparação de amostra que contém uma composição líquida que compreende a carne bovina moída e o diluente, foi colocado e preso na plata- forma do misturador por Vórtice com uma órbita excêntrica (aproximadamente 6 mm χ 4 mm). A composição líquida foi misturada por 15 segundos com um ajuste do indicador do equipamento de 10, que corresponde à velocidade de rotação de aproximadamente 2500 rpm. Após este período de tempo, a cobertura foi removida e aproximadamente 2 mL da composição líquida foi decantada através do filtro na tampa (isto é, como um filtrado) em um tubo de ensaio estéril. O sistema de preparação de amostra foi tampado, devolvido para o dispositivo de vórtice e misturado por períodos de tempo adicionais, conforme requerido. O ciclo de mistura/decantação foi repetido, conforme descrito, e os filtrados foram coletados em pontos de tempo de 60, 120, e 240 segundos. Uma porção dos filtrados coletados (500 pL) foi diluída com Tampão de Butterfield (99 mL) e manualmente agitada por aproxi- madamente 10 segundos, após os quais uma contagem aeróbica para cada filtrado foi de- terminada e relatada na Tabela 1.

Exemplo 3 (E3)

Este Exemplo demonstra a quantificação de analitos liberados a partir de uma amostra de carne suína moída que usa um misturador em vórtice e um sistema de prepa- ração de amostra da presente descrição. Um forro vazio foi colocado em uma balança, e a carne bovina moída (11 g), que serviu como a fonte, foi transferida para o forro. O forro foi, então, removido da balança e colocado em um recipiente. O diluente estéril (99 mL) foi adicionado ao forro contendo a fonte de carne suína moída e uma tampa foi acoplada ao forro e ao recipiente. A tampa compreendia um filtro sob a forma do filtro 134 das FIGURAS 2 e 3. Um colar dotado de rosca foi, então, rosqueado sobre o recipiente para prender o sistema de preparação de amostra em um estado montado. Uma abertura na tampa foi lacrada com uma cobertura separada. O sistema de preparação de amostra, contendo uma composição líquida que compreende a carne suína moída e o diluente, foi colocado e preso na plataforma do Vórtice com uma órbita excêntrica (aproximadamente 6 mm x 4 mm). A composição líquida foi misturada por 15 segundos, com um ajuste do indicador de equipamento de 10, que corresponde à velocidade de rotação de aproxima- damente 2500 rpm. Após este período de tempo, a cobertura foi removida e aproximada- mente 2 mL da composição líquida foi decantada através do filtro na tampa (isto é, como um filtrado) em um tubo de ensaio estéril. O sistema de preparação de amostra foi tam- pado, devolvido para o dispositivo de vórtice e misturado por períodos de tempo adicio- nais, conforme requerido. O ciclo de mistura/decantação foi repetido, conforme descrito, e os filtrados foram coletados em pontos de tempo de 60, 120, e 240 segundos. Uma por- ção dos filtrados coletados (1000 pL) foi diluída com Tampão de Butterfield (mL) e foi ma- nualmente agitada por aproximadamente 10 segundos, após os quais uma contagem ae- róbica para cada filtrado foi determinada e relatada na Tabela 1.

Exemplo 4 (E4)

Este Exemplo demonstra a quantificação de analitos liberados a partir de uma amos- tra de folhas de espinafre que usa um agitador mecânico e um sistema de preparação de a - mostra da presente descrição. Um forro vazio foi colocado em uma balança e uma folha de espinafre (11 g), que serviu como a fonte, foi transferida para o forro. O forro foi, então, remo- vido da balança e colocado em um recipiente. O diluente estéril (99 mL) foi adicionado ao forro que contém a fonte de folha de espinafre e uma tampa foi acoplada ao forro e ao recipiente. A tampa compreendia um filtro sob a forma do filtro 134 das FIGURAS 2 e 3. Um colar dotado de rosca foi, então, rosqueado sobre o recipiente para prender o sistema de preparação de amostra em um estado montado. Uma abertura na tampa foi lacrada com uma cobertura se- parada. O sistema de preparação de amostra contendo uma composição líquida, que com- preende a folha de espinafre e o diluente, foi colocado em uma garra presa ao braço do agita- dor. A distância a partir do centro do sistema de preparação de amostra até a haste no agita- dor era de aproximadamente 20 cm. A composição líquida foi agitada por 15 segundos, com um ajuste do indicador do equipamento de 10, o que corresponde a uma freqüência de apro- ximadamente 6 ciclos por segundo em um arco aproximado de 17 graus. Após este período de tempo, com a cobertura removida, aproximadamente 2 mL da composição líquida foram decantados através do filtro na tampa (isto é, como um filtrado) em um tubo de ensaio estéril. O sistema de preparação de amostra foi tampado, devolvido para o dispositivo de agitação e agitado por períodos de tempo adicionais, conforme requerido. O ciclo de mistura/decantação foi repetido, conforme descrito, e os filtrados foram coletados em pontos de tempo de 60, 120, e 240 segundos. Uma porção dos filtrados coletados (1000 pL) foi diluída de modo serial com o Tampão de Butterfield até uma concentração final de 1:20.000, após a qual uma contagem aeróbica para cada filtrado foi determinada e relatada na Tabela 1.

Exemplo 5 (E5)

Este Exemplo demonstra a quantificação de analitos liberados por uma amostra de uma folha de espinafre que usa um misturador em vórtice e um sistema de preparação de amos- tra da presente descrição. Um forro vazio foi colocado sobre uma balança e uma folha de espi- nafre (11 g) foi transferida para o forro. O forro foi, então, removido da balança e colocado em um recipiente. O diluente estéril (99 mL) foi adicionado ao forro contendo a fonte de folha de espinafre e uma tampa foi acoplada ao forro e ao recipiente. A tampa compreendia um filtro sob a forma do filtro 134 das FIGURAS 2 e 3. Um colar dotado de rosca foi, então, rosqueado ao recipiente para prender o sistema de preparação de amostra em um estado montado. Uma aber- tura na tampa foi lacrada com uma cobertura separada. O sistema de preparação de amostra, contendo uma composição líquida que compreende a folha de espinafre e o diluente, foi coloca- do e preso na plataforma do vórtice com uma órbita excêntrica (aproximadamente 6 mm x 4 mm). A composição líquida foi misturada por 15 segundos com um ajuste do indicador do e- quipamento de 10, que corresponde à velocidade de rotação de aproximadamente 2500 rpm. Após este período de tempo, com a cobertura removida, aproximadamente 2 mL da composição líquida foram decantados através do filtro na tampa (isto é, como um filtrado) em um tubo de ensaio estéril. O sistema de preparação de amostra foi tampado, devolvido para o dispositivo de vórtice e misturado por períodos de tempo adicionais, conforme requerido. O ciclo de mistu- ra/decantação foi repetido, conforme descrito, e os filtrados foram coletados em pontos de tem- po de 60, 120, e 240 segundos. Uma porção dos filtrados coletados (1000 μL) foi diluída de mo- do serial com o Tampão de Butterfield até uma concentração final de 1:20.000, após a qual uma contagem aeróbica para cada filtrado foi determinada e relatada na Tabela 1.

A Tabela 1 contém dados da contagem aeróbica para os filtrados obtidos em cada um dos tempos (em segundos) abaixo usando diferentes técnicas para liberar analitos da fonte. Tabela 1

<table>table see original document page 31</column></row><table> Os resultados da Tabela 1 mostram que a recuperação de analitos com a utilização do sistema de preparação de amostra da presente descrição, é comparável àquela do dis- positivo de homogeneização ("stomaching"). A preparação das composições líquidas foi bastante facilitada por meio do uso dos sistemas de preparação de amostra da presente descrição, em combinação com a agitação mecânica e a mistura por vórtice.

As modalidades descritas e exemplificadas acima e ilustradas nas Figuras são a- presentadas apenas a título de exemplo e não se devem ser entendidas como uma limita- ção dos conceitos e princípios da presente invenção. Como tal, deve ser avaliado por um elemento versado na técnica que são possíveis várias alterações nos elementos e em sua configuração e disposição, sem que se afaste do caráter e do âmbito da presente invenção. Várias características e aspectos da invenção são estabelecidos nas reivindicações a se- guir.

Claims

1. Método para preparar amostras para teste de analito, CARACTERIZADO pelo fato de que o método compreende: fornecer uma composição líquida que compreende uma fonte e um diluente; fornecer um sistema de preparação de amostra que compreende um receptáculo de sustentação independente; posicionar a composição líquida em um reservatório definido pelo receptáculo de sustentação independente; filtrar a composição líquida para formar um filtrado que compreende um analito de interesse; remover ao menos uma porção do filtrado do sistema de preparação de amostra para formar uma amostra; e analisar a amostra quanto ao analito de interesse.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de compre- ender adicionalmente, agitar a composição líquida.

3. Método, de acordo com a reivindicação 2, CARACTERIZADO pelo fato de que a agitação da composição líquida inclui agitar o sistema de preparação de amostra.

4. Método, de acordo com a reivindicação 2, CARACTERIZADO pelo fato de que a agi- tação da composição líquida inclui ao menos um dentre sacudimento manual, sacudimento me- cânico, vibração ultra-sônica, agitação rotativa por vórtice, agitação manual, agitação mecânica, batimento manual, batimento mecânico, mesclagem, amassamento e uma combinação dos mesmos.

5. Método, de acordo com a reivindicação 2, CARACTERIZADO pelo fato de com- preender adicionalmente fechar o sistema de preparação de amostra antes de agitar a composição líquida.

6. Método, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o fechamento do sistema de preparação de amostra inclui acoplar uma tampa ao receptáculo de sustentação independente.

7. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que remover ao menos uma porção do filtrado do sistema de preparação de amostra inclui ao menos um dentre: inclinar o sistema de preparação de amostra, inverter o sistema de preparação de amostra, decantar o filtrado do sistema de preparação de amostra, aspirar o filtrado do sistema de preparação de amostra, aplicar a pressão ao receptáculo de sustentação independente e combinações dos mesmos.

8. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservatório e acoplado ao receptáculo com sustentação independente, sendo que a remoção de ao menos uma porção do filtrado inclui remover ao menos uma porção do filtrado de uma porta de amostragem do receptáculo com sustentação independente.

9. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o sis- tema de preparação de amostra inclui adicionalmente: uma tampa que tem uma porta de amostragem, e um filtro em comunicação fluida com o reservatório e acoplado à tampa, e em que a remoção de ao menos uma porção do filtrado inclui remover ao menos uma porção do filtrado pela porta de amostragem da tampa.

10. Método, de acordo com a reivindicação 9, CARACTERIZADO pelo fato de que a remoção de ao menos uma porção do filtrado pela porta de amostragem da tampa inclui ao menos um dentre: decantar o filtrado da porta de amostragem, aspirar o filtrado da porta de amostragem, e combinações dos mesmos.

11. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui adicionalmente: uma tampa, e um filtro em comunicação fluida com o reservatório, sendo que o filtro é substan- cialmente plano e acoplado a uma superfície interna da tampa.

12. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui adicionalmente um filtro em comunicação fluida com o reservatório, sendo que o filtro é substancialmente tubular e inclui um eixo longitudinal que é voltado em direção ao reservatório.

13. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o analito de interesse inclui ao menos um dos seguintes: um microorganismo, uma bio- molécula, um produto químico, um íon metálico, um complexo contendo íon metálico e combinações dos mesmos.

14. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a fonte compreende o diluente.

15. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a fonte inclui ao menos um de uma fonte alimentar e uma fonte não alimentar.

16. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o diluente inclui ao menos um dos seguintes: um tensoativo, um agente reológico, um neutrali- zador microbicida, um nutriente, um agente tampão de pH, uma enzima, uma molécula indica- dora, água estéril, um solvente orgânico e uma combinação dos mesmos.

17. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o posicionamento da composição líquida em um reservatório definido pelo receptáculo com sus- tentação independente inclui o posicionamento da composição líquida em um reservatório defi- nido por um recipiente rígido.

18. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que po- sicionar a composição líquida em um reservatório definido pelo receptáculo com sustentação independente inclui posicionar a composição líquida em um reservatório definido por um forro deformável.

19. Método, de acordo com a reivindicação 18, CARACTERIZADO pelo fato de compreender adicionalmente posicionar o forro deformável dentro de um segundo reserva- tório definido por um recipiente com sustentação independente que é mais rígido que o forro deformável.

20. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que posicionar a composição líquida em um reservatório inclui ao menos um dentre: posicionar a fonte que compreende o diluente no reservatório, adicionar a fonte e o diluente ao reservatório simultaneamente, adicionar a fonte ao reservatório antes de adicionar o diluente ao reservatório, adicionar o diluente ao reservatório antes de adicionar a fonte ao reservatório, combinar a fonte e o diluente para formar uma composição líquida e adicionar a composição líquida ao reservatório.

21. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservató- rio, e em que a filtração da composição líquida para formar um filtrado, que compreende um analito de interesse, inclui passar o diluente e o analito de interesse a partir do reservatório para o interior do filtro, de modo que o reservatório inclua a composição líquida, e o filtro inclua o filtrado.

22. Método, de acordo com a reivindicação 21, CARACTERIZADO pelo fato de que a filtração da composição líquida, passando-se o diluente e o analito de interesse a partir do reservatório para o interior do filtro, inclui ao menos um dentre: inverter o sistema de preparação de amostra, aplicar a pressão ao receptáculo com sustentação independente, posicionar o filtro ao menos parcialmente abaixo de um nível da composição líquida no reservatório e combinações dos mesmos.

23. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservatório, e em que a filtração da composição líquida para formar um filtrado, que compreende um analito de interesse, inclui passar o diluente e o analito de interesse a partir do interior do filtro dentro do reservatório, de modo que o filtro inclua a composição líquida, e o reservatório inclua o filtrado.

24. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de com- preender adicionalmente incubar a composição líquida durante um período de tempo antes de remover ao menos uma porção do filtrado do sistema de preparação de amostra.

25. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservató- rio, e em que o filtro é retrátil.

26. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservató- rio, sendo que o filtro é rígido.

27. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui uma pluralidade de filtros em comunicação fluida com o reservatório, e em que a filtração da composição líquida inclui passar a composição líquida sucessivamente através da pluralidade de filtros.

28. Método para preparar amostras para teste de analito, CARACTERIZADO pelo fato de que o método compreende: fornecer uma composição líquida que compreende uma fonte e um diluente; fornecer um sistema de preparação de amostra que compreende um forro defor- mável com sustentação independente, um recipiente com sustentação independente que é mais rígido que o forro deformável de sustentação independente e uma tampa; posicionar a composição líquida em um reservatório definido pelo forro deformável com sustentação independente; acoplar a tampa ao forro deformável com sustentação independente; posicionar o forro deformável com sustentação independente no recipiente com sustentação independente; filtrar a composição líquida de modo a formar um filtrado que compreende um ana- lito de interesse; remover ao menos uma porção do filtrado do sistema de preparação de amostra para formar uma amostra; e analisar a amostra quanto ao analito de interesse.

29. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de compreender adicionalmente agitar a composição líquida.

30. Método, de acordo com a reivindicação 29, CARACTERIZADO pelo fato de que a agitação da composição líquida inclui agitar o sistema de preparação de amostra.

31. Método, de acordo com a reivindicação 29, CARACTERIZADO pelo fato de que a agitação da composição líquida inclui ao menos um dentre sacudimento manual, sacudimento mecânica, vibração ultra-sônica, agitação rotativa por vórtice, agitação rota- tiva manual, agitação mecânica, batimento manual, batimento mecânico, mesclagem, amassamento e uma combinação dos mesmos.

32. Método, de acordo com a reivindicação 29, CARACTERIZADO pelo fato de compreender adicionalmente fechar o sistema de preparação de amostra antes de agitar a composição líquida.

33. Método, de acordo com a reivindicação 32, CARACTERIZADO pelo fato de que fechar o sistema de preparação de amostra inclui fechâr a tampa.

34. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra compreende uma porção descartável que compreende a tampa acoplada ao forro deformável com sustentação independente, e que compreende adicio- nalmente remover a porção descartável do sistema de preparação de amostra do recipiente com sustentação independente e o descarte da porção descartável.

35. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que remover ao menos uma porção do filtrado do sistema de preparação de amostra inclui ao menos um dentre: inclinar o sistema de preparação de amostra, inverter o sistema de preparação de amostra, decantar o filtrado do sistema de preparação de amostra, aspirar o filtrado do sistema de preparação de amostra, aplicar pressão ao forro deformável com sustentação independente e combinações dos mesmos.

36. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservató- rio e acoplado ao recipiente com sustentação independente, e em que remover ao menos uma porção do filtrado inclui remover ao menos uma porção do filtrado de uma porta de amostragem do recipiente com sustentação independente.

37. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservató- rio e acoplado à tampa, e em que remover ao menos uma porção do filtrado inclui remover ao menos uma porção do filtrado de uma porta de amostragem da tampa.

38. Método, de acordo com a reivindicação 37, CARACTERIZADO pelo fato de que a remoção de ao menos uma porção do filtrado da porta de amostragem da tampa inclui ao menos um dentre: decantar o filtrado da porta de amostragem, aspirar o filtrado da porta de amostragem e combinações dos mesmos.

39. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservató- rio, e em que o filtro é substancialmente plano e acoplado a uma superfície interna da tam- pa.

40. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservatório, e em que o filtro é substancialmente tubular e inclui um eixo longitudinal que é voltado em direção ao reservatório.

41. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o analito de interesse inclui ao menos um dentre um microorganismo, uma bio-molécula, um produto químico, um íon metálico, ufm complexo contendo íon metálico e combinações dos mesmos.

42. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que a fonte compreende o diluente.

43. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que a fonte inclui ao menos um dos seguintes: uma fonte alimentar e uma fonte não alimentar.

44. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o diluente inclui ao menos um dos seguintes: um tensoativo, um agente reológico, um neutrali- zador microbicida, um nutriente, um agente tampão de pH, uma enzima, uma molécula indica- dora, água estéril, um solvente orgânico e uma combinação dos mesmos.

45. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que posicionar a composição líquida no reservatório inclui ao menos um dentre: posicionar a fonte que compreende o diluente no reservatório, adicionar a fonte e o diluente ao reservatório simultaneamente, adicionar a fonte ao reservatório antes de adicionar o diluente ao reservatório, adicionar o diluente ao reservatório antes de adicionar a fonte ao reservatório, combinar a fonte e o diluente para formar uma composição líquida e adicionar a composição líquida ao reservatório.

46. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservatório, e em que a filtração da composição líquida para formar um filtrado que com- preende um analito de interesse inclui passar o diluente e o analito de interesse a partir do reservatório para o interior do filtro, de modo que o reservatório inclua a composição líquida, e o filtro inclua o filtrado.

47. Método, de acordo com a reivindicação 46, CARACTERIZADO pelo fato de que filtrar a composição líquida passando-se o diluente e o analito de interesse a partir do reservatório para o interior do filtro inclui ao menos um dentre: inverter o sistema de preparação de amostra, aplicar pressão ao forro deformável com sustentação independente, posicionar o filtro ao menos parcialmente abaixo de um nível da composição líquida no reservatório e combinações dos mesmos.

48. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservatório, e em que a filtração da composição líquida para formar um filtrado, que compreende um analito de interesse, inclui passar o diluente e o analito de interesse a partir do interior do filtro para dentro do reservatório, de modo que o filtro inclua a compo- sição líquida, e o reservatório inclua o filtrado.

49. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de compreender adicionalmente incubar a composição líquida durante um período de tempo antes de remover ao menos uma porção do filtrado do sistema de preparação de amostra.

50. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservató- rio, e em que o filtro é retrátil.

51. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO fato de que o sistema de preparação de amostra inclui um filtro em comunicação fluida com o reservató- rio, e em que o filtro é rígido.

52. Método, de acordo com a reivindicação 28, CARACTERIZADO pelo fato de que o sistema de preparação de amostra inclui uma pluralidade de filtros em comunicação fluida com o reservatório, e em que filtrar a composição líquida inclui filtrar, sucessivamente, a composição líquida usando a pluralidade de filtros.