BRPI0618232A2

BRPI0618232A2 - processos para obter extratos de lignana e composições contendo os extratos de lignana

Info

Publication number: BRPI0618232A2
Application number: BRPI0618232-1A
Authority: BR
Inventors: Mark Empie; William Walter Fletcher; Thomas V Gottemoller; Richard D Grabiel; Lawrence P Karcher; Sigmund J Peterson; Sam Zhiyong Sun
Original assignee: Archer Daniels Midland Co
Priority date: 2005-12-02
Filing date: 2006-12-04
Publication date: 2011-08-23
Also published as: NO20082909L; AU2006320353A1; JP2009518311A; WO2007065023A2; EP1973555A2; EP2130544A2; US20070141178A1; IL190611A0; WO2007065023A3

Abstract

PROCESSOS PARA OBTER EXTRATOS DE LIGNANA E COMPOSIçõES CONTENDO OS EXTRATOS DE LIGNANA Processos para obter extratos de lignana de materiais de planta são descritos. As composições incluindo os extratos de lignana como também usos dos extratos de lignana são descritas.

Description

"PROCESSOS PARA OBTER EXTRATOS DE LIGNANA ECOMPOSIÇÕES CONTENDO OS EXTRATOS DE LIGNANA"CAMPO TÉCNICO

A presente invenção está voltada aos processospara obter extratos de lignana de materiais de planta. Ainvenção também está voltada às composições que contêm oextrato de lignana obtidas dos processos descritos aqui comotambém métodos de uso das composições que compreendem osextratos de lignana.

ANTECEDENTES

As lignanas são metabólitos de planta secundários,que são produzidos de ácido shikimic pela via defenilpropanóide. Eles se desenvolvem de precursores deflavonóide e são responsáveis por conceder resistência àsplantas contra patógenos e predadores. As lignanas sãodefinidas serem compostos possuindo uma estrutura de 2,3-dibenzilbutano e incluem matairesinol, secoisolariciresinol,lariciresinol, isolariciresinol, ácido nordiidroguaiarético,pinoresinol, olivil e outros compostos, e modificaçõesdestes, incluindo diglicosideos.

A semente de linho (Linum usitatissimum) épotencialmente a fonte mais rica do lignanas defitoestrogênios. A lignana primária encontrada em semente delinho é 2,3-bis(3-metóxi-4-hidroxibenzil) butano-1,4-diol(secoisolariciresinol) que é armazenado como o diglicosideode secoisolariciresinol conjugado (SDG) em seu estado nativona planta. A semente de linho contém níveis destesfitoestrogênios que são 75-800 vezes maiores do que qualqueroutro fertilizante. A lignana de planta, ácidonordiidroguaiarético catecólico, é um antioxidante potentepreviamente usado pela indústria de comida.

Os compostos fenólicos de planta ocorrem comomonômeros livres ou em combinação com outros fitoquimicos,desse modo formando ésteres ou glicosideos. Os ácidosfenólicos são conhecidos por terem atividade antioxidante.Os constituintes fenólicos principais de semente de linhosão reportados serem ácido cumárico (ácido 4-glicosil-cinâmico), ácido caféico (ácido 3-hidróxi-4-glicosil-cinâmico), ácido de ferúlico (ácido cinâmico de 3-metóxi-4-glucosila) e ácido glutárico de hidroxi metila. Estescompostos têm propriedades antioxidantes ehipercolesterêmicas.

Numerosos relatos na literatura têm documentado osbenefícios fitoquimicos de lignanas de semente de linho.Rickard e outros, reportaram que a alimentação com lignanapurificada a 5 por cento de níveis de dieta de semente delinho significantemente reduz carcinogênese do cólon emamário em animais (Procedimentos do 57° Instituto de Linhodos Estados Unidos, (Fargo, N.D.): 8-13 (1998)). Demark-Wahnefried e outros, também reportaram que a suplementaçãode semente de linho pode ter um efeito benéfico em biologiade câncer de próstata (Demark-Wahnefried e outros, AdultUrology 58(1): 47-52 (2001)).

Adicionalmente, foi reportado que as lignanasprevinem o desenvolvimento de diabete Tipo I e Tipo II em 71por cento (Prasad, K - Proc. da Associação de DiabeteAmericana, (1999)), agem como um agente hipotensivo comcapacidade de baixar, a pressão sangüínea sem afetarfreqüência cardíaca(Pat. U.S. No. 6.498.145), fornecebenefícios contra Nefrite do Lúpus (Pat. U.S. No.5.827.256), e reduz o desenvolvimento de aterosclerosehipercolesterolêmica em animais (Atherosclerosis 132: 69-76(1997)), junto com numerosos relatos nas propriedadesantioxidantes (Mol. & Cell. Biochem., 202:91-100 (1999)) eanticâncer potenciais (Anticancer Research 18:1405-1408(1998)).

A semente de linho, total, na forma moída ou semgordura foi incorporada em alimentos de animal e produtos decomida tal como pães, biscoitos, roscas e bolinhos redondos.Também foi usada para suplementar os níveis de fibra emprodutos de carne (WO 00/19842) . Entretanto, as quantidadesque podem ser usadas são reguladas uma vez que o alto teorde óleo de linho e a presença de mucilagem contribuem com oinfluxo calórico excessivo e laxação (WO 96/30468).

Outro problema associado com o uso do linho emcomidas é a toxicidade associada com glicosídeoscianogênicos presentes em semente de linho. Os glicosídeoscianogênicos são metabolites de planta secundárionitrogenosos que se consumidos em excesso durante um períodolongo de tempo podem resultar em problemas goitrogênicos,danificação aos órgãos humanos, toxicidade de cianeto ou umpossível efeito de tiocianato da tiróide. Estes glicosídeossão toxinas naturais importantes tanto na nutrição de animalquanto humana. Eles foram associados com a propriedade únicada semente de linho de proteger animais contra os efeitostóxicos de selênio ingerido (Smith, e outros, J. Org. Chem.,45:507-510 (1980)). Os glicosídeos cianogênicos principaispresentes na semente de linho são linustatina,neolinustatina e linamarina, com linustatina sendoresponsável por 54-76 por cento do teor de glicosideocianogênico total. 0 desengorduramento da farinha de linhocom hexano é conhecido por produzir um enriquecimento detodos os glicosídeos cianogênicos individuais em base depeso igual na farinha (Maaza & Oomah, em Flaxseed in HumanNutrition, Cunnane & Thomson eds. AOCS Press, Champaign,III. 1995). Portanto, é importante separar os glicosídeoscianogênicos de outros compostos presentes no linho.

Métodos para a preparação de lignanas e outroscompostos fenólicos foram reportados na literatura. Em 1956,Bakke e Klosterman descreveram um processo para extrairlignana de linho sem gordura usando dioxano de metanol(Proceedings of the North Dakota Academy of Sciences 10:18-22 (1956)). Portanto, as lignanas são conhecidas porocorrerem como um "complexo" em linho com glicosídeos deácido cinâmico e outros compostos. Conseqüentemente, aslignanas foram originalmente referidas como um "polímero" emlinho. Os metóxidos de sódio e bário foram usados parametanólise para liberar lignanas livres de outros compostos(Blake & Klosterman; Thompson e outros, Nutr. Câncer 26:59-165 (1996)). Quase todas as lignanas presentes em semente delinho ocorrem como componentes de um complexo ligado aoéster solúvel e não ocorrem como glicosídeos livres ouaglicona. (Muir e outros, Proc. of the 58th Flax Instituteof the US, Fargo, N.D., 1999). Uma revisão detalhada dosvários métodos de extrair Lignana e ácidos cinâmicos podeser encontrada em Muir, supra. A Pat. U.S. No. 5.705.618 ePedidos PCT WO 96/30468 e WO 00/78771 também descrevemmétodos para preparar lignana contendo complexos. Porém,estes processos sofrem de desvantagens pelo fato de que elesnão podem ser aumentados para comercialização devido àdificuldade de se obter a separação e pureza desejada semenvolver sistemas solventes complexos, tal como acetato deetila/água, e são difíceis de separar usando técnicascromatográficas ou emprego de métodos caros tal comocromatograf ia de exclusão de tamanho. A Pat. U.S. No.6.767.565 descreve um processo para a purificação delignanas que usa um processo de cromatografia de membrana eresina. Porém este processo usa resinas e membranas carasque têm estabilidade pobre em etanol.

Desse modo, existe uma necessidade de um processomais eficiente para isolar as lignanas como tambémcomposições que incluem essas lignanas.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Em uma modalidade, uma composição compreende umextrato de lignana que tem de 20-45 por cento dediglicosídeo de secoisolariciresinol. A composição tambémcompreende 50 mg ou menos de glicosídeos cianogênicos por100 gramas da composição.

Em outra modalidade, uma composição compreende umprimeiro extrato de lignana tendo uma quantidade dediglicosídeo de secoisolariciresinol que é menor do que 50por cento e um segundo extrato de lignana tendo umaquantidade de diglicosídeo de secoisolariciresinol que émaior do que 50 por cento.

Em uma outra modalidade, um processo para produzirum extrato de lignana inclui colocar uma lignana que contémmaterial de planta em contato com um solvente de extração,desse modo formando uma solução de extração. O processotambém inclui separar uma fração enriquecida de lignana dasolução de extração com uma densidade com base nodispositivo de separação, e lavar a fração enriquecida delignana com uma solução aquosa. O processo pode tambémincluir secar a fração enriquecida de lignana.

Usos das composições ou extratos de lignana parareduzir os níveis de colesterol, tratar hiperplasiaprostática benigna, tratar doença do coração, preveniraterosclerose hipercolesterolêmica, reduzir doença cardíaca,reduzir colesterol de soro, reduzir dano isquêmico, aumentara expressão de óxido nítrico em células endoteliais, inibira atividade de ciclooxigenase em macrófagos, aliviar ossintomas associados com diabete, prevenir ou retardar oinício da diabete, modular os níveis de glicose do soro,aumentar a densidade do osso, reduzir a perda de densidadeóssea, aliviar os sintomas associados com artrite, reduzir orisco de câncer de próstata, reduzir o risco de metástase,retardar a metástase, aliviar os sintomas associados com ocomeço da menstruação, aliviar os sintomas associados com oinício de menopausa, reduzir a pressão sangüínea, ou reduzira perda de cabelo ou calvície padrão em homens, também sãodescritos. 0 uso das composições ou extratos para fabricarum medicamento para tratar estas condições também édescrito.

Outros aspectos da invenção estão voltados àscomposições e formulações que contêm o componente de lignanaobtido dos processos e métodos descritos acima de uso dascomposições e formulações.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

Figuras IA até ID são as distribuições de pesomolecular de extratos de lignana produzidos usando oprocesso da presente invenção.

Figura 2 descreve um fluxograma que ilustra osatos em uma modalidade de um processo para extrair umalignana da presente invenção.

Figuras 3-4 são gráficos que ilustram a capacidadede redução de colesterol total (TC) de uma modalidade de umextrato de lignana da presente invenção.

Figuras 5-6 são gráficos que ilustram a capacidadede redução de Colesterol de Lipoproteina de Baixa Densidade(LDLC) de uma modalidade de um extrato de lignana dapresente invenção.

Figuras 7-8 são gráficos que ilustram a capacidadede aumento de Colesterol de Lipoproteina de DensidadeElevada (HDLC) de uma modalidade de um extrato de lignana dapresente invenção.

Figuras 9-10 são gráficos que ilustram acapacidade de redução de triglicerideo (TG) de umamodalidade de um extrato de lignana da presente invenção.

Figura 11 é um gráfico que mostra os níveis deplasma de metabólitos de lignana em indivíduos tratados comuma modalidade de um extrato de lignana da presenteinvenção.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

0 trabalho em isolar ou purificar os extratos delignana continuou. A Patente U.S. 6.767.565 (os teorestotais dos quais estão aqui incorporados por referência)designado para Archer Daniels Midland Company de Decatur,Illinois, descreve o uso de membranas e resinas para obterextratos de lignana de semente de linho. A presente invençãoestá voltada a um processo melhorado para isolar oupurificar extratos de lignana. Em várias modalidades, ainvenção descreve processos para obter extratos de lignanacomo também composições incluindo os extratos de lignana eusos destes.

Em uma modalidade, um processo pode incluircontatar um material de planta que contém lignana com umsolvente de extração para obter uma solução de extração quecompreende um extrato que contém lignan e o solvente deextração; separar os sólidos de material de planta dareferida solução de extração; reduzir o teor de componentemicrobiano na solução de extração; remover de 0 a 100 porcento do solvente de extração da solução de extração, aomesmo tempo em que simultaneamente adicionar um diluenteaquoso à solução de extração; em que uma lignana é obtidadesta. Em outra modalidade, um processo para obter lignanapode compreender conter um material de planta que contémlignana com um solvente de extração para obter uma soluçãode extração que compreende um extrato que contém lignana e osolvente de extração; separar os sólidos de fonte de plantada solução de extração; reduzir o teor de componentemicrobiano na solução de extração; contatar a solução deextração com uma resina adsorvente; lavar o extrato quecontém lignana adsorvida com um diluente aquoso; eluir oextrato que contém lignana; desse modo obter um composto quecontém lignana; e opcionalmente, ajustar o pH da lignanaliberada antes de secar.

Em uma outra modalidade, o processo pode tambémcompreender um método para obter lignana de materiais deplanta que compreendem: contatar um material de planta quecontém lignana com um solvente de extração para obter umasolução de extração que compreende um extrato que contémlignana e o solvente de extração; separar os sólidos dematerial de planta da solução de extração; reduzir o teor decomponente microbiano na solução de extração; remover de 0 a100 por cento do solvente de extração da solução deextração, ao mesmo tempo em que adicionar um diluente aquososimultaneamente à solução de extração; em que uma lignana éobtida deste.

Em uma modalidade, um material de planta tal comolinho, semente de linho ou linho sem gordura pode serpulverizado por qualquer meio adequado tal como moagem,esmagamento e/ou tosquiação. O material de plantapulverizado pode ser extraído com um solvente de extraçãoadequado, tal como um álcool. O álcool pode ser um álcoolaquoso ou um álcool alifático aquoso. Um álcool adequadopode ser selecionado de metanol, etanol, isopropanol ouqualquer combinação destes. Em outra modalidade, uma soluçãode água de acetona pode ser usada. A concentração do álcooldeve ser na' faixa de 50-80 por cento em volume, comodescrito por Westcott e Muir,"Medicinal Lignans from FlaxSeed", Phytochemicals e Phyto-pharmaceuticals, AOCS Press,Champaign, III., 2000, e pode ser 60-70 por cento em volume.

Em certas modalidades, onde a matéria-prima usadaé farinha de linho sem gordura, o material pulverizado podeser peneirado e aspirado para remover as partículas finascriadas pelo processo como também partículas maiores feitasdas finas, que quando postas no extrator se quebrarão. Taispartículas finas podem causar vários problemas nas etapas deextração subseqüentes. A peneiração pode ser obtida usandouma combinação de duas peneiras de tamanho de porodiferentes com a porção mediana sendo usada para a produçãodo extrato de lignana. 0 ato de peneirar remove o materialgrosso, que pode conter lixo, partículas finas aglomeradas ecaroços gordurosos de matéria-prima de sabão presentes nafarinha de linho sem gordura. Em uma modalidade, umaprimeira peneira de 600 mícrons pode ser usada além de umasegunda peneira de 2500 mícrons para peneirar a farinha delinho sem gordura. A porção da farinha de linho que ficaretida entre as duas peneiras pode ser usada para a produçãodo extrato de lignana. Uma peneira fina também pode serusada para remover as partículas finas que tampam a tela deextrator e reduzem as taxas de filtração. 0 corte deseparador mediano pode ser aspirado e a fração "leve"coletada. A fração "leve" de um aspirador é tipicamenteaquela que fornece mais resistência ao movimento do ar e élevada então com a corrente de ar. A aspiração dupla tambémé feita às vezes. Os pedaços revestidos de semente de formairregular coletados na fração leve, são maiores em SDGrelativo às partículas mais densas que também oferecem menosresistência à corrente de ar e são retiradas como a "fraçãopesada". Os pedaços de revestimento de semente de formairregular também previnem a massa do extrator de comprimirfirmemente. 0 produto deste processo filtra bem em extratorlíquido-sólido (tal como aqueles disponibilizados por CrownIronworks, Mineápolis MN) sem tampar a tela usada paraescoar o solvente de extração. As condições de aspiraçãodevem ser facilmente determinadas por aqueles versados natécnica, e deveria garantir a remoção das frações dedensidade mais baixa/mais resistentes ao ar das partículasmais densas/menos resistentes ao ar.

Em certas outras modalidades, o material de plantausado para obter o extrato de lignana pode ser selecionadodo grupo que consiste em: sementes de abóbora; plantas ricasem fibra, por exemplo, grãos incluindo, porém não limitadosa, trigo, cevada ou aveia; legumes tal como feijões,lentilhas ou sojas; e legumes tal como alho, aspargos,brócolis ou cenouras.

A extração pode ser realizada a uma temperaturaadequada para minimizar o crescimento de compostosmicrobianos potencialmente prejudiciais e facilitar aextração do complexo de lignana do material de planta. Astemperaturas adequadas para minimizar o crescimento demicróbios variam dentre temperatura ambiente e o ponto deebulição do solvente tal como entre 40°C e 70°C ou entre 50°Ce 60°C.

A razão de solvente de extração para o material deplanta pulverizado deveria ser adequada para permitiragitação da mistura. Esta razão pode ser de 1:1 a 8:1 ml desolvente por grama de material de planta pulverizado. Outrarazão é de 2:1 a 6:1 ml de solvente por grama de material deplanta pulverizado.

A duração do processo de extração é de cerca de 4-8 horas. Em outra modalidade, a extração pode ser realizadaentre cerca de 5 e 7 horas. Onde as temperaturas elevadassão usadas, um tempo de extração de 6 horas pode ser usado.Em outra modalidade, o processo pode ser realizado em ummodo continuo de um modo corrente ou contra corrente comoentendido por aqueles de experiência ordinária na técnica. Otempo de permanência pode ser variado para obter a extraçãomais adequada da farinha de linho. Tal tempo pode serdeterminado por um tempo, temperatura e razão de solvente deextração para material de planta pulverizado. O tempo paraextrair pode variar de 0,1 horas a 10 horas. Em outramodalidade, um tempo de permanência de 0,7 5 horas pode serusado no extrator contra corrente.

O processo de extração resulta na formação de lamaque compreende o solvente de extração, que contém ocomponente de lignana desejado, e o material de plantasólido. Após o processo de extração ser concluído, a fraçãolíquida da lama resultante (em seguida, solução deextração), que contém o complexo de lignana desejado podeser separada do material de planta sólido. A separação podeser realizada de qualquer maneira adequada conhecida pararemover sólidos de um líquido. Os exemplos de técnicasadequadas incluem, porém não estão limitados a, filtração,precipitação, sedimentação, centrifugação e qualquercombinação destes. Onde a filtração é usada, o tamanho deporo ou malha da membrana, filtros, ou peneiras éselecionado com base no tamanho do material sendo removido.0 tipo de filtro de membrana selecionado é com base nacompatibilidade do filtro de membrana com o solvente usadopara o processo de extração.

Onde o material de planta é linho, foi observadoque o linho dilata durante a extração e, por conseguinteabsorve uma quantidade grande de solvente ao término deextração. A lama, então, forma um bolo de farinha úmido quepode ser puxado e/ou prensado para remover o extratoalcoólico aquoso de dentro do componente de material deplanta sólido. Desse modo, em uma modalidade, o bolo defarinha úmido pode ser prensado, tal como com uma prensa deparafuso, para obter a solução de extração. Istosubstancialmente aumenta a produção do complexo de lignanaobtido do bolo de farinha úmido de linho.

Para também aumentar o produto da solução deextração, a prensa de parafuso pode ser usada tambémseguinte à separação dos sólidos de material de planta dasolução de extração onde, por exemplo, filtração,precipitação, sedimentação, e/ou centrifugação é usado comouma técnica de separação.

A solução de extração resultante pode ser tambémclarificada passando-se a solução de extração resultante porum filtro de membrana para reduzir o nivel de componentesmicrobianos presente na solução e/ou remover qualquer sólidoresidual não removido da separação inicial. Um tipo defiltro de membrana para esta clarificação pode ser um filtrode fibra sintética; porém, qualquer tipo adequado de filtropode ser usado. Em uma modalidade, a porcentagem de reduçãode teor microbiano é de cerca de 90-100 por cento, 90 porcento, 95 por cento, em que cerca de 98-100 por cento épossível, e 99,9 por cento também é possível.

0 filtro de membrana de náilon pode ter um tamanhode poro de 0,1-10 μm ou 0,2-10 μm. Um filtro de cartucho demembrana, tendo uma avaliação de tamanho de poro similar,também pode ser usado. A solução de extração clarificadaresultante também pode ser processada de acordo com, porémnão limitada a, uma das modalidades descritas abaixo.

O solvente de extração alcoólico pode ser removido(isto é, retirado) da solução de extração clarificada, talcomo por evaporação. Foi observado que a concentração dasolução de extração por evaporação resulta na formação deuma camada viscosa grossa que coalesce e sedimentarapidamente.

Para evitar o efeito de evaporar o solvente deextração e permitir processamento favorável do extratodesejado, um diluente aquoso pode ser adicionado para diluira solução de extração durante a evaporação/extração dosolvente de extração. Em uma modalidade, o diluente aquosopode ser água. Então, a maioria do solvente de extraçãopresente na solução de extração pode ser removida sedesejado. Deste modo, a diluição desejada do extrato podeser mantida pela adição de água durante o procedimento deevaporação/extração.

Em uma modalidade, a solução de extração aquosaresultante (isto é, a camada de sobrenadante aquosa) podeser secada para obter um pó. A secagem pode ser realizadapor qualquer método adequado incluindo, porém não limitadoa, evaporação, secagem a vácuo, Iiofilização, secagem porpulverização ou combinações de qualquer destes.

Para obter um produto menos higroscópico, em outramodalidade, após a redução do teor de álcool na solução deextração clarificada por evaporação e/ou diluição, a soluçãode extração resultante pode ser submetida à ultrafiltraçãopara remover açúcares (por exemplo, glicosideoscianogênicos) presentes nela. A ultrafiltração pode serrealizada usando pelo menos dois volumes de filtro de umdiluente aquoso para remover açúcares cianogênicos e outroscompostos indesejáveis. Em uma modalidade, o diluente aquosopode ser água.

Os filtros de membrana de ultrafiltração adequadosincluem polímeros ou copolímeros orgânicos, tal comopolissulfona, poliacrilonitrila, acetato de celulose, oumateriais inorgânicos tal como materiais de zircônia,alumínio ou cerâmica. Com base na distribuição de pesomolecular do produto de lignana desejado, um filtro demembrana com um corte de peso molecular (MWCO) menor do que5.000 pode ser usado, ou em outra modalidade, um filtro demembrana de 1.000 MWCO pode ser usado.

Devido a estabilidade pobre de membranaspoliméricas em soluções de álcool de concentração elevada(Shukla, R., Ph.D. Thesis, University de Illinois em Urbana-Champaign, 2000), também pode ser possível reduzir aconcentração de álcool por diluição com água ou por extraçãodo álcool, tal como por evaporação. Desse modo, a solução deextração de teor de álcool reduzido resultante não tem umefeito negativo no desempenho do filtro de membrana.

O retentato ultrafiltrado resultante ésubstancialmente livre de açúcares cianogênicos e contém oextrato de lignana desejado em uma forma relativamentepurificada. 0 retentato ultrafiltrado pode ser secadodiretamente ou depois de outra concentração por evaporação,por uma ou mais das seguintes técnicas: secador a vácuo, umsecador de microonda, um secador de radio freqüência, e/ouum Iiofilizador. A secagem a vácuo, por exemplo, pode serrealizada a uma pressão absoluta de 5-20 milli bar, um tempode permanência de 25-40 minutos e a uma temperatura de vaporde 35-46, 11°C. A secagem sob estas condições pode serrealizada com um Secador de Correia a Vácuo.

Os secadores de faixa ou correia a vácuo incluemum alojamento com correias transportadoras embutidas paratransportar o produto a ser secado sobre placas deaquecimento. 0 controle automático da correia garante aprecisão da operação da correia. Tais secadores estãodisponibilizados por Merk Process (Laufenberg, Alemanha). Ascorreias funcionam paralelas umas a outra e uma bomba demedição com um bocal de aplicação oscilante é designada paracada correia individualmente controlada. A troca no ponto deebulição sob vácuo fornece uma baixa temperatura deevaporação e, então, uma temperatura de produto suave. Osprodutos bombeáveis normalmente funcionam por uma fasealtamente viscosa, freqüentemente pegajosa durante oprocesso de secagem que pode resultar na formação de bolhasde vapor no produto, como também um bolo seco que é deixadono cinto em direção ao final do processo de secagem. Atemperatura a qual o produto é submetido durante o processode secagem tem um efeito significante na qualidade doproduto. As correias funcionam sobre várias zonas deaquecimento e sobre uma zona de resfriamento no final. 0óleo térmico ou água pressurizada, vapor, podem ser usadospara aquecer, e cada zona pode ser controlada separadamente,permitindo que a temperatura das superfícies de aquecimentoseja adaptada às exigências específicas do produto que ésecado. A utilização de tais secadores reduz a perda naqualidade de produto e reduz a formação de cor indesejável,como também fornecendo um produto estável para armazenagemde fluxo livre.

Em outra modalidade, a solução de extração podeser diluída com um diluente aquoso e em vez de remover osolvente de extração, a solução de extração diluída pode sersubmetida à ultrafiltração para remover açúcares e outrasimpurezas.

Em outra modalidade, a invenção descreve umprocesso para obter um extrato de lignana que compreende:contatar um material de planta que contém lignana com umsolvente de extração para obter uma solução de extração quecompreende uma lignana que contém extrato e o solvente deextração; separar os sólidos de fonte de planta da soluçãode extração; reduzir o teor de componente microbiano nasolução de extração; contatar a solução de extração com umaresina de adsorvente; lavar o extrato que contém lignanaadsorvida com um diluente aquoso; eluir o extrato que contémlignana; desse modo obtendo uma lignana deste; eopcionalmente, ajustar o pH da lignana liberada antes dasecagem.

Em outra modalidade, a solução de extraçãoclarificada pode ser tratada com uma resina adsorvente em umprocesso tipo cromatografia de coluna de batelada oucontínua. 0 extrato é aplicado à resina adsorvente e lavadocom um diluente aquoso para remover açúcares cianogênicos eoutras impurezas. O diluente aquoso pode ser água.

O complexo de lignana adsorvido na resina pode sereluído com álcool aquoso (20-100 por cento em volume a 25-85°C) em um gradiente ou um único processo de porcentagem. Oálcool pode ser selecionado de, porém não está limitado a,metanol, etanol, isopropanol ou combinações de qualquerdestes. O material resultante pode ser secado por, porexemplo, evaporação, secagem a vácuo, Iiofilização, secagempor pulverização ou combinações de qualquer destes paraproduzir um produto que seja aproximadamente 20-45 por centode lignana em uma base de peso em peso. Descobriu-se que oajuste do pH do produto da separação cromatográfica nãoquebra o complexo de lignana, porém ao contrário facilita asecagem do produto. 0 pH pode ser ajustado com qualquerreagente de álcali ou ácido adequado. Em uma modalidade, oato de ajustar o pH pode incluir ajustar o pH do complexo delignana liberado para entre cerca de 3,0 a cerca de 9,0antes da secagem do produto. Em outra modalidade, o pH podeser ajustado dentre cerca de 75 a cerca de 8,0.

As resinas adequadas que podem ser usadas sãoselecionadas de, porém não estão limitadas a, polímeros depolimetacrilato, etilvinilbenze-divinilbenzeno, estireno-divinilbenzeno, poliestireno ou formaldeído de fenol, epodem ser iônicas ou não iônicas.

Em outra modalidade, a solução de extração podeser diluída com um diluente aquoso antes do tratamento com aresina adsorvente. 0 diluente aquoso pode ser água.

Em outra modalidade, pode ser desejável ajustar opH da solução de extração a um valor dentre cerca de 3,0 acerca de 9,0. Em uma modalidade, o pH está entre cerca de7,5 a cerca de 8,0. Descobriu-se que o ajuste do pHadequadamente com qualquer reagente de ácido ou álcaliadequado não quebra o complexo de lignana, porém aocontrário facilita a secagem subseqüente do produto delignana.Em outra modalidade, um extrato de lignana éproduzido como descrito no fluxograma da Figura 2. A farinhade semente de linho sem gordura foi obtida removendo-se óleode semente de linho esmagado (Linum uistatissimum) usandoextração de hexano. A farinha de semente de linho semgordura dessolventizada pode opcionalmente ser mecanicamente(isto é, fisicamente) classificada para tamanho/forma departícula ideais. Tal classificação pode ser obtida por umacombinação de peneiramento e aspiração como descrito aqui. Afarinha de semente de linho sem gordura, dessolventizada, eopcionalmente classificada pode ser misturada com etanolaquoso a 60-95 por cento de etanol em volume a 45-75°C. Amistura de farinha de etanol/semente de linho pode serfiltrada para remover qualquer insolúvel, resultando em umextrato solúvel de etanol.

O extrato solúvel de etanol pode ser evaporado sobvácuo para remover substancialmente todo o etanol.Dependendo da temperatura à qual a evaporação aconteça, ovácuo pode ser ajustado para permitir a remoção do etanol. Oextrato solúvel evaporado que contém o complexo de lignanapode ser separado das impurezas solúveis e solúveissuspensiveis. Em uma modalidade, a separação do complexo delignana das impurezas solúveis e solúveis suspensiveis (istoé, substâncias de não lignana) pode ser feita com umdispositivo de separação com base na densidade oudispositivo centrífugo (por exemplo, uma hidroclona ou umacentrífuga contínua) para coalescer e/ou sedimentar umlíquido viscoso enriqueceu no complexo de lignana que podeser decantado de um sobrenadante através de separação com odispositivo centrifugo. Tal processo também pode serreferido como coalescência de sedimentação.

Em outra modalidade, a separação do complexo delignana das impurezas solúveis e solúveis suspensiveis podeser feita por precipitação, sedimentação ou coalescência docomplexo de lignana. 0 uso de tal tanque de precipitação ousedimentação é mais econômico quando comparado com o sistematipo centrifugação ou hidroclonaquando não havendo nenhumaparte mecânica envolvida. Além disso, a simplicidade daprecipitação, sedimentação ou coalescência fornece uma basemais baixa de custo para fabricar o produto. A precipitação,sedimentação ou coalescência podem ser feitas bombeando-se oextrato solúvel evaporado em um tanque e permitindo ocomplexo de lignana sedimentar, coalescer ou cair para ofundo do tanque. Em outras modalidades, a precipitação,sedimentação ou coalescência do complexo de lignana pode serauxiliada ajustando-se o pH. Em ainda outra modalidade aseparação do complexo de lignana das impurezas solúveis esolúveis suspensiveis podem ser feitas com um filtro.Qualquer tal filtro conhecido na técnica pode ser usadoincluindo, porém não limitado a, um filtro polimérico ouinorgânico. 0 tamanho de poro de tais filtros pode variar de0,01 micron a 100 microns.

O intermediário de processo que contém o complexode lignana pode ser lavado contatando-se o intermediário deprocesso com um tampão de citrato aquoso. O ato de lavar ointermediário de processo remove os glicosideos cianogênicosdo complexo de lignana enriquecido (isto é, o intermediáriodo processo) . 0 tampão de citrato pode compreender um tampãode citrato de OfI por cento a um pH de cerca de 5, ou seraté cerca de 10 por cento de tampão de citrato. O pH podeser variado em uma faixa ácida tal como um pH de 3,0 a 6,0para maximizar a remoção de glicosideos cianogênicos eminimizar as perdas de lignanas solúveis. Em outrasmodalidades, os atos de lavar o complexo de lignana podemtambém ser realizados com água, sob condições de pH neutras,ou alternativamente um quelador incluindo, porém nãolimitado a, etilenodiaminatetraacetato (isto é, EDTA).

0 complexo de lignana enriquecido lavado pode sersecado, opcionalmente sob vácuo, com ou sem pré-aquecimento.O complexo de lignana enriquecido seco pode ser moidomecanicamente (isto é, usando um Fitzmill, moinho de marteloou outro dispositivo similar) para um tamanho especificado epode ser empacotado em poli tambores, poli revestidos, paratransporte, colocados em um produto de comida, ou colocadosem cápsulas ou comprimidos. Em uma modalidade, o complexo delignana enriquecido pode ser moido tal que pelo menos 90 porcento da lignana enriquecida seja 425 pm (micrômetros) oumenor. 0 etanol evaporado pode ser reciclado ou re-usado semretificação combinando-se os vapores condensados daevaporação de etanol e ajustando-se a prova da solução deetanol se desejado.

Em uma modalidade adicional, o extrato de lignanapode ser configurado para administração oral a um indivíduotal como na forma de um aditivo de comida, um aditivo debebida, um comprimido, uma cápsula, um suplementonutricional de multi-ingrediente ou qualquer combinaçãodestes. Por exemplo, o extrato de lignana pode seradicionado aos suplementos de óleo de semente de linho,suplementos de óleo de peixe, suplementos de ácido graxo deômega-3 ou outros suplementos dietéticos para consumohumano. 0 extrato de lignana pode ser usado diretamente comoum aditivo de comida ou misturado com um portador consumivela ser usado como o aditivo de comida, uma composição decomida, um aditivo de bebida ou uma composição de bebida. Osexemplos não limitantes de produtos de comida incluem, porémnão estão limitados a,, barras nutricionais, cereais,lanches, chips, bolachas, biscoitos, mercadorias assadas,produtos de leiteria, barras alimentícias, torrones ouqualquer outro produto alimentício. 0 extrato de lignanatambém pode ser misturado dentro ou com um produto de comidaconsumivel tal como uma composição de comida para consumohumano, gado ou uma comida animal.

Também é contemplado que o extrato de lignana podeser preparado na forma de cápsula, comprimido, capsela oulíquida para administração regular para ajudar a tratarcondições associadas com a redução do nível de colesterol,tratar hiperplasia prostática benigna, tratar doençacardíaca, prevenir aterosclerosee hipercolesterolêmica,reduzir a doença cardíaca, reduzir o colesterol de soro,reduzir lesão isquêmica, aumentar a expressão de óxidonítrico em células endoteliais, inibir a atividade deciclooxigenase em macrófago, aliviar os sintomas associadoscom diabete, prevenir ou retardar o começo de diabete,modular os níveis de glicose do soro, aumentar a densidadeóssea, reduzir a perda de densidade óssea, aliviar ossintomas associados com artrite, reduzir o risco de câncerde próstata, reduzir o risco de metástase, retardarmetástase, aliviar os sintomas associados com o começo damenstruação, aliviar os sintomas associados com o começo damenopausa, reduzir a pressão sangüínea, ou reduzir a perdade cabelo ou calvície padrão masculina. As bebidasenriquecidas para o extrato de lignana podem ser preparadaspara um propósito igual, tornando os benefícios conhecidosde lignanas disponíveis para indivíduos. As bebidas incluem,porém não estão limitados a, suco de maçã, suco de uva, sucode arando, suco de laranja, bebidas energéticas, bebidasdesportivas, bebidas de substituição de refeição, outrossucos de fruta, qualquer outro refrigerante, e produtos deleiteria tal como leite, bebidas alcoólicas ou combinaçõesde qualquer destes.

Em ainda uma modalidade adicional, o extrato de'lignana pode ser combinado com qualquer outro composto ouaditivo de comida tal como esteróis, isoflavonas, adoçantes,concentrados ou isolados de proteína, adoçantes nãonutritivos, fibras solúveis ou não solúveis, estatinas,vitamina E, proantocianidinas, extrato de palmito da serra,extrato de Pygeum, óleo de linho, óleo de peixe, vitamina B,vitamina C, um tocoferol, um fitosterol, um polifenol, umacatequina, uma antocianina, uma astaxantina, umaglicosamina, e combinações de qualquer destes.Em ainda uma outra modalidade, um extrato delignana produzido com um dos processos da presente invençãopode ser usado em um produto cosmético tal como para umefeito cosmético, dérmico ou epidérmico em uma experiênciade alterar a pigmentação. 0 produto cosmético pode serconfigurado para liberação oral como descrito aqui ouaplicação tópica tal como com uma loção, protetor solar ououtra aplicação tópica.

Os seguintes Exemplos não limitantes sãofornecidos para também descrever a invenção. Aqueles deexperiência ordinária na técnica apreciarão que váriasvariações destes Exemplos são possíveis dentro do espíritoda invenção e que vários atos nos processos descritos podemser empregados em combinação.

EXEMPLOS

EXEMPLO 1.

Um extrato de lignana foi produzido como descritono fluxograma da Figura 2. A farinha de semente de linho semgordura foi obtida removendo-se o óleo da semente de linhoesmagada (Linum uistatissimum) usando extração de hexano. Afarinha semente de linho sem gordura dessolventizada podeopcionalmente ser mecanicamente (isto é, fisicamente)classificada quanto ao tamanho/forma de partícula ideal comodescrito aqui. A farinha de semente de linho sem gorduradessolventizada, e opcionalmente classificada foi misturadacom etanol aquoso a 60-95 por cento de etanol em volume a45-75°C. A mistura de farinha de etanol/semente de linhopode opcionalmente ser filtrada para remover qualquer26

insolúvel, resultando em um extrato solúvel de etanol.

O extrato solúvel de etanol também pode serevaporado sob vácuo para remover substancialmente todo oetanol. A precipitação ou sedimentação podem ser feitasbombeando-se o extrato solúvel evaporado em um tanque epermitindo o complexo de lignano coalescer e/ou sedimentarou cair para o fundo do tanque. Opcionalmente um dispositivode separação com base na densidade, como uma hidroclona ouuma centrifuga, também pode ser usado para obter estaseparação. 0 intermediário de processo (Figura 2) contendo ocomplexo de lignana pode ser lavado contatando-se ointermediário de processo com um tampão de citrato aquoso.Em uma modalidade alternativa uma solução que contém umácido orgânico tal como ácido acético, ácido fumárico, ácidoláctico, ácido ascórbico, pode ser usada. 0 complexo delignana enriquecido lavado foi secado, opcionalmente sobvácuo, com ou sem pré-aquecimento, ou opcionalmente usandoum liofilizador ou um secador de correia a vácuo. A Tabela 1fornece uma análise de extratos de lignana produzidos nesteexemplo.

O extrato de lignana obtido com os processosdescritos aqui compreendem SDG ou β-D-Glicopiranosídeo,(2R, 3R)-2, 3-bis[(4-hidróxi-3-metoxifenil)] metil]-l,4-

butanodiila bis-(9Cl), tendo uma fórmula de C32H46O16 e umpeso molecular calculado de cerca de 686,7. 0 extrato delignana pode estar em uma forma de pó e pode ter uma cormarrom, um "chá" como odor e sabor, ser ligeiramente solúvelem água a pH neutro e moderadamente solúvel em 70 por centode etanol, e ter um caráter higroscópico baixo.

Cinco bateladas de extratos de lignana forampreparadas com o processo deste exemplo. 0 extrato delignana das cinco bateladas teve as seguintes propriedades:

<table>table see original document page 28</column></row><table>

Os extratos de lignana produzidos com este exemplotambém foram analisados quanto aos níveis de glicosídeocianogênicos usando os métodos descritos aqui. É recomendadotipicamente que a quantidade de glicosideos cianogênicosconsumidos por um humano seja menor do que cerca de 50mg/adulto/dia. Como mostrado na Tabela 1, os extratos delignana contêm 50 mg ou menos de glicosideos cianogênicostotal por 100 g de extrato de lignana.

Vários extratos enriquecidos de lignana (isto é,extratos de lignana 1-6) foram produzidos com o processo doExemplo 1 e analisados. Os vários produtos analisados foramdeterminados para ter as seguintes propriedades:

<table>table see original document page 29</column></row><table><table>table see original document page 30</column></row><table>Vários extratos enriquecidos de lignana (isto é,extrato de lignana 7) produzidos com o processo do Exemplo1, semente de linho inteiro, farinha de linho sem gordura,farinha de linho classificada, e dois intermediários de processo também foram analisados. Os vários produtosanalisados foram determinados ter as propriedades seguintescomo mostrado na Tabela 3:

<table>table see original document page 31</column></row><table><table>table see original document page 32</column></row><table><table>table see original document page 33</column></row><table>

Todos os produtos analisados foram hidrolisados

antes da análise e os compostos fenólicos e lignana foramanalisados com HPLC. O ato de hidrólise incluiu colocar oproduto em uma solução de 56 por cento de metanol em águacontendo 0,1 M de NaOH e aquecendo a 65°C durante uma hora,como também a neutralização com ácido acético diluído.Outras medições foram realizadas usando métodos de análiseconvencionais.

EXEMPLO 2.

Uma vez obteve dos métodos descritos acima, oproduto de lignana pode ser incorporado em uma formulação decomida, bebida, nutracêutico ou farmacêutica. As formulaçõespodem ser preparadas para qualquer rotina de administraçãopara humanos ou animais tal como, por exemplo, formulaçõesde liberação oral. Em uma modalidade, as formulações quecompreendem o extrato de lignana obtido podem compreender de15-25 por cento em peso do extrato de lignana obtido dequaisquer dos métodos descritos acima; 60-84 por cento empeso de um componente de carga; e 1-25 por cento em peso deum nutriente suplementar dietético.

Em outras modalidades, o extrato de lignanacolocado em uma comida ou outra composição pode compreenderde cerca de 7 a cerca de 90 por cento de SDG dependendo douso desejado do extrato de lignana.

EXEMPLO 3.

O extrato de lignan é colocado em uma cápsula oucomprimido para administração a um indivíduo. A cápsula oucomprimido pode ser colocado em um recipiente tal como umagarrafa associada com indícios ou instruções voltadas a umusuário de uma dosagem recomendada do extrato de lignana. Emvárias modalidades, a dosagem recomendada pode ser de cercade 86-860 mg de extrato de lignana por dia que é cerca de30-300 mg de SDG por dia ou em outra modalidade, cerca de86-1720 mg de extrato de lignana por dia que é cerca de 30-600 mg de SDG por dia. Quando tais quantidades de extratosde lignana são combinadas com excipientes, cargas e outrosingredientes, uma dosagem recomendada de um suplementodietético pode ser de cerca de 250 mg a cerca de 1,5 gramas.Os indícios ou instruções também podem ser associados com osuplemento dietético ou um recipiente que contém osuplemento dietético para indicar ao usuário que o extratode lignana contém uma quantidade pequena de glicosídeoscianogênicos tal como 50 mg ou menos de glicosídeoscianogênicos totais por 100 g de extrato de lignana.

Embora as várias modalidades descritas aqui sejamindicadas conter certa concentração de SDG, será evidentepara alguém de experiência ordinária na técnica que aconcentração de SDG no extrato de lignana pode variar. Porexemplo, a lignana analisada ou teor de SDG do material deplanta do qual o extrato de lignana de origina pode variar epode ser afetada por vários fatores incluindo, semlimitação, variedade do material de planta, local domaterial de planta, ano de colheita do material de planta,método de extração para extrair o extrato de lignana, ouhidrólise e técnica analítica para medir o teor de SDG. Porexemplo, o teor de SDG em produtos de linho foi reportadoconter entre 29-1055 mg/100 g de semente ou entre 200-1300mg/100 g de dieta de semente de linho. Além disso, o teor deSDG foi reportado variar de 0,96-3,15 μιηοΐ63^ em variedadesdiferentes de linho. Desse modo, usando as váriasmodalidades descritas aqui, um extrato de lignana oucomposição que tenha qualquer concentração desejada de SDGde cerca de 7-8 9 por cento pode ser obtida e pode serincorporada em uma comida, um nutracêutico, ou umacomposição farmacêutica usando os métodos descritos aqui.

EXEMPLO 4.

Em outra modalidade, o efeito de uma lignanaextraída produzida com o processo do exemplo 1 usandocentrifugação foi estudado em experiências clínicas. Asexperiências clínicas analisaram lipídios de plasma emindivíduos hipercolesterolêmicos (20 mulheres, 35 homens,idades de 28-79) usando um desígnio duplo cego,aleatorizado, de placebo controlado durante 8 semanas. Oextrato de lignana foi formulado em comprimidos desuplemento dietético nas seguintes doses de SDG: 0 mg de SDG(placebo) , 300 mg de SDG e 600 mg de SDG administrados acada indivíduo por dia. O colesterol total (TC) e colesterolde lipoproteina de densidade baixa (LDLC) foramsignificantemente reduzidos para a dose de tratamento de. SGDde 300 mg e 600 mg quando comparados com o placebo comoilustrado nas Figuras 3-6. O colesterol de lipoproteina dedensidade alto (HDLC) também foi reduzido como ilustrado nasFiguras 7-8. Os níveis de triglicerídeos (TG) também foramreduzidos como ilustrado nas Figuras 9-10. O nível de plasmade metabólitos de lignana nos indivíduos é ilustrado naFigura 11.

As experiências clínicas também indicaram que osníveis de creatina, nitrogênio de uréia do sangue (BUN),alanina aminotransferase (ALT) e gama glutamila transferase(GGT) foram observados serem similares entre os grupos detratamento e todos estes parâmetros estão dentro da faixanormal. Os dados são mostrados na tabela 4 e indicam que oextrato de lignana não teve nenhum efeito notável na funçãodo rim ou fígado.

<table>table see original document page 36</column></row><table><table>table see original document page 37</column></row><table>

Nesta modalidade, os níveis de protoplasma de

enterolignanas (isto é, enterodiol e enterolactona) nosindivíduos também foram analisados. Os níveis de plasma deenterodiol foram uma média de 8,0 ng/ml em todos osindivíduos no grupo de controle e 229,8 ng/ml em todos osindivíduos recebendo 600 mg de SDG ao longo do período desuplementação (também uma diferença de dobra de 28), comodescrito na Tabela 5. Os níveis de plasma de enterolignanassugerem que a administração de um extrato de lignanaproduzido com o processo do exemplo 1 usando centrifugaçãoeleva os níveis de sangue de enterolignanas e enterodióis emindivíduos humanos._

Tabela 5: Níveis de Plasma de Enterolignanas (Enterodiol e<table>table see original document page 38</column></row><table>

** Valor médio exclui o nível do valor de referência para mostraro efeito de suplementação de SDG Vs. Grupo de controle

EXEMPLO 5.

Em uma outra modalidade, o efeito de um extrato delignana produzido com um processo do exemplo 1 usandocentrifugação foi estudado em experiências clinicas. Umestudo foi realizado para determinar o efeito de extratos delignana em hiperplasia prostática benigna (BPH) e antigenoespecífico de próstata (PSA) em 60 homens afligidos com acondição de BPH. Um desígnio duplo cego aleatorizado deplacebo controlado foi usado. A quantidade de extrato delignana foi formulada em suplementos dietéticos parafornecer 0 mg de extrato de lignana (placebo), 300 mg de SDGno extrato de lignana, ou 600 mg de SDG no extrato delignana em doses diárias durante um período de 16 semanas.Os níveis de creatina, nitrogênio de uréia do sangue (BUNT),alanina aminotransferase (ALT) e gama glutamila transferase(GGT) no sangue foram medidos em 0, 2 e 4 meses. Com basenos resultados mostrados na Tabela 6, a administração doextrato de lignana neste estudo não afetou a função do rimou fígado.

Tabela 6: Dados de segurança de Eictrato de Lignana em Experiência Clinica de SDG-BPH <table>table see original document page 39</column></row><table><table>table see original document page 40</column></row><table>

Os efeitos de alivio significantes das lignanas delinho foram observados em certos sintomas de BPH. Os níveisde creatinina, nitrogênio de uréia do sangue (BUN), alaninaaminotransferase (ALT) e gama glutamila transferase (GGT) nosangue foram medidos a 0, 8 e 16 semanas, nenhuma diferençaentre e dentro dos grupos de tratamento foi observada. Osresultados deste estudo também indicaram que o extrato delignana não afetou a função do rim ou fígado adversamentecom base nos níveis normais de biomarcadores comodemonstrado na Tabela 7.<table>table see original document page 41</column></row><table><table>table see original document page 42</column></row><table>

Os resultados resumidos na qualidade de vida(QOL), escores de sintoma de próstata internacional (IPSS) ,e grau de bloqueio de urinação são apresentados na Tabela 8-9. Comparado com placebo, o grupo de tratamento de SDG de600 mg obteve um efeito de melhora significante global emescores de QOL (p=0,0115). Para o grupo de tratamento de SDGde 300 mg, os escores de QOL foram melhorados, asignificância estatística não foi alcançada (p=0,1377). Opercentual de alteração de escores de QOL de linha dereferência teve um resultado estatístico similar como opróprio escore de QOL (comparado com placebo, p=0,0085 e= 0, 1248 para tratamento de SDG de 600 e 300 mg,respectivamente). Os efeitos do tratamento significantes nosindivíduos apareceram em todos os grupos. Porém, os gruposde tratamento de SDG tiveram efeitos mais fortes na reduçãode escore de QOL e valores p menores do que teve o grupo deplacebo.

Os dados de IPSS foram coletados com base em setequestões relacionadas a uma experiência de sofrimento deurinação. Cada questão indicou um sintoma de urinaçãoexperimentado por pacientes de BPH. Cada sintoma foiclassificado de 0 a 5. A contagem mais alta representa osintoma que foi mais severo. Desse modo, o pior IPSS podeser 35. Neste estudo, os IPSS foram significantementereduzidos em todos os grupos. Entre os grupos de tratamento,nenhum efeito significante global foi alcançado quandocomparado com placebo. Porém, após 4 meses de tratamento, osIPSS de grupos tratamento de SDG de 30Q e 600 mg foramsignificantemente mais baixos do que o grupo de placebo(p=0,002 e 0,018, respectivamente). Os resultadosestatísticos do percentual de alteração do valor dereferência foram similares como aqueles da alteração deIPSS. 0 percentual de efeito de redução de IPSS foi um poucosignificante em ambos os grupos de tratamento de SDG de 300e 600 mg (p=0,056 e 0,081, respectivamente) para os dados domês 3 e 4; e o efeito de redução foi significante nos doisgrupos de tratamento (p=0,0414 e 0,0412, respectivamente)para os dados do mês 4 somente. A significância notável foiprincipalmente porque o efeito de redução de IPSS de grupode placebo diminuiu depois de um período de tempo, ao mesmotempo em que, que o efeito de redução de grupos detratamento de SDG permaneceu ao longo do estudo.

No grupo, o efeito apareceu no placebo e nosgrupos de tratamento. Comparado com o valor de referência,os IPSS foram significantemente reduzidos no mês 2, 3, ou 4.Os dados de percentual de alteração de IPSS do valor dereferência são apresentados na Tabela 8. Os efeitos muitosignificantes na redução de IPSS foram obtidos em ambos osgrupos de tratamento, porém não no grupo de placebo (Tabela8) .O grau de bloqueio de urinação é usado paraespecificar a dificuldades de urinação em pacientes de BPH.O grau de bloqueio de urinação inclui escores de um grupo desintomas de urinação com ajustes idênticos como IPSS. 0 grau de bloqueio também contribui com uma parte do IPSS. A Tabela9 mostra que os efeitos de tratamento significantes no graude bloqueio foram obtidos até o mês 4, quando comparado como placebo, p=0,019 e 0,012 para grupos de tratamento de SDGde 300 e 600 mg, respectivamente. A significância alcançadafoi principalmente devido ao efeito de placebo na redução dograu de bloqueio voltando ao valor de referência ao mesmotempo em que o efeito dos grupos de tratamento permaneceu.Dentro do efeito do grupo na redução do grau de bloqueio, osdados de grupos de SDG de 300 e 600 mg foram todossignificantemente reduzidos (p>0,005) quando comparados como valor de referência do mês 2, 3, ou 4. Para o grupo deplacebo, somente os dados no mês 2 e 3 alcançaram níveissignificantes (p < 0,05). 0 efeito de tratamentosignificante na redução de grau de bloqueio foi observadosomente no mês 4 (comparado com placebo," p=0, 024 e 0,013para grupos de SDG de 300 e 600 mg, respectivamente) . Notratamento do grupo, o efeito fortemente abriu em ambos osgrupos de tratamento de SDG de 300 e 600 mg (p < 0, 005 paraos dados de todos os meses). No grupo de placebo, somente osdados no mês 3 alcançaram valores significantes (p < 0,05).

<table>table see original document page 44</column></row><table><table>table see original document page 45</column></row><table>

Tabela 9: Percentual de alterações do grau de bloqueio do valor de referência seguinte o tratamento com extrato de liganana

<table>table see original document page 45</column></row><table><table>table see original document page 46</column></row><table>

EXEMPLO 6.

Em outra modalidade, o efeito de um extrato de

lignana produzido pelo processo do exemplo 1 usandocentrifugação foi estudado em experiências clinicas. Umaexperiência clinica foi conduzida para estudar o efeito defitosteróis sozinhos, ou em combinação com extrato delignana no efeito de colesterol de soro em 25 homens e 11mulheres durante 8 semanas. Um desígnio duplo cego,controlado de placebo aleatorizado, foi usado para designaros indivíduos para os seguintes grupos de tratamento:placebo, 1,3 g de esteróis, e 1,3 g de esteróis + 300 mg deextrato de lignana. Os níveis de creatinina, nitrogênio deuréia do sangue (BUNT), alanina aminotransferase (ALT) egama glutamila transferase (GGT) no sangue foram medidos em0, 1 2, 4, 6 e 8 semanas. Nesta modalidade, não houvenenhuma diferença na concentração destes biomarcadores entree dentro dos grupos de tratamento que indicam que aslignanas de linho não afetam adversamente a função do rim oufígado como mostrado na Tabela 10A. Os dados mostram que osfitosteróis em. combinações com o extrato de lignana reduzemo colesterol total em 13,5 por cento e LDL-C em 18,9 porcento como mostrado nas Tabelas 10B-10D.

<table>table see original document page 46</column></row><table><table>table see original document page 47</column></row><table>

1 Todas as médias acima estão dentro das faixas normais. *L= extrato de lignina

<table>table see original document page 47</column></row><table><table>table see original document page 48</column></row><table>

Comparado com o valor de referência, a = ρ < 0,05; = b ρ

<0:01,0. *L = extrato de lignana

Tabela 10C: Efeitos do Tratamento no Colesterol LDL total do Plasma (LDL-C) <table>table see original document page 48</column></row><table><table>table see original document page 49</column></row><table>

Comparado com o valor de referencia, a=p <0,005; b=p <0,01.

*L= extrato de Ligana.

<table>table see original document page 49</column></row><table><table>table see original document page 50</column></row><table>

Comparado com o valor de referência, a = ρ <0,05; b= ρ<0:01,0. *L = extrato de lignana

EXEMPLO 7

Em uma outra modalidade, para manter umaquantidade constante de SDG no extrato de lignana, umaprimeira quantidade de um extrato de lignana tal como oextrato de lignana obtido com os métodos da presenteinvenção, isto é, cerca de 20-45 por cento de SDG, émisturada com uma segunda quantidade de um extrato delignana tal como um extrato de lignana substancialmentepuro, isto é, tendo pelo menos 90 por cento de SDG. Umextrato de lignana que tem 90 por cento de SDG é descrito naPatente U.S. 5.705.618 de Westcott e outros, os teorestotais da qual está incorporado aqui por referência.

A Tabela 11 descreve as composições quecompreendem várias concentrações de SDG (37,75 por cento -88,8 por cento de SDG) que é produzido misturando-se umprimeiro extrato de lignana tendo cerca de 35 por cento deSDG com um segundo extrato de lignana tendo cerca de 90 porcento de SDG.

Tabela 11: Composições Representativas de Extratos de Lignana Percentual Primeiro Extrato Segundo Extrato de<table>table see original document page 51</column></row><table>

EXEMPLO 8

Os pesos moleculares de produtos de lignanaproduzidos pelo processo do exemplo 1 usando centrifugaçãoforam determinados por Cromatografia de Permeação de Gel(Exclusão de Tamanho). Os kits padrões obtidos de Phenomenex(Torrance, CA): Número de Parte de poli(etileno glicol) AL0-2774 e número de parte de poli(óxido de etileno) A10-2775foram usados. Phenomenex PolySep-GFC-P 4000, coluna decromatografia de permeação de gel de 300 χ 7,8 mm foi usada.Uma mistura solvente de 50 por cento de Acetonitrila/50 porde cento água foi usada para eluição a uma taxa de fluxo de0,350 mL/min. Os padrões foram determinados por revelação dedifusão de luz evaporativa. As amostras foram determinadaspor revelação visível por UV a 280 nanômetros. O softwareClasse-VP Versão 7.2.1 SPl de Shimadzu InstrumentosScientific, com o pacote SEC (cromatografia de exclusão detamanho), foi usado para calcular os parâmetros de peso moleculares das amostras. Estes cromatogramas são mostradosnas Figuras 1A-1D.

EXEMPLO 9

Cinco extratos de lignana produzidos pelasmodalidades desta invenção foram ensaiados quanto aos seusconstituintes e os resultados são fornecidos na Tabela 12.Os lotes A-C são produzidos usando as modalidades do exemplo1 com coalescência/precipitação e os lotes D-E sãoproduzidos usando as modalidades do exemplo 1 usandocentrifugação.

<table>table see original document page 52</column></row><table><table>table see original document page 53</column></row><table>2 componentes de carboidrato Líquido excluindo glicosídeos

3 Total = (Linamarin, Linustatina, Neolinustatina)

ND = Não detectado (Limite baixo de detecção para o respectivo teste)

** NA = Não Analisado

Todas as publicações mencionadas aqui estão dessemodo incorporadas em sua totalidade por referência.

Ao mesmo tempo em que a invenção precedente foidescrita em alguns detalhes para propósitos de claridade eentendimento, será apreciado por alguém versado na técnicade uma leitura desta descrição que várias mudanças na formae detalhe, podem ser feitas sem afastar-se do escopo dainvenção e reivindicações anexas. Por exemplo, ao mesmotempo em que certas espécies de planta, extratos,composições, processos e usos desta foram descritos, seráreconhecido por aqueles de experiência ordinária na técnicaque várias substituições ou modificações químicas dequaisquer das modalidades exemplares podem ser feitas semafastar-se do espírito e escopo da invenção. Além disso,quaisquer dos ingredientes, compostos, composições, ou açõesem processos da invenção podem ser feitos em combinação.

Claims

1. Composição, CARACTERIZADA pelo fato de quecompreende:um primeiro extrato de lignana tendo umaquantidade de diglicosideo de secoisolariciresinol que émenor do que 50 por cento; eum segundo extrato de lignana tendo uma quantidadede diglicosideo de secoisolariciresinol que é maior do que 50 por cento.

2. Composição, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADA pelo fato de que a composição compreende 50-600 mg do diglicosideo de secoisolariciresinol.

3. Composição, de acordo com a reivindicação 1 oureivindicação 2, CARACTERIZADA pelo fato de que a composiçãoé selecionada do grupo que consiste em uma comida, umabebida, uma cápsula, um comprimido, e uma capsela.

4. Composição, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 1-3, CARACTERIZADA pelo fato de queadicionalmente compreende um composto selecionado do grupoque consiste em esteróis, isoflavonas, adoçantes, isoladosde proteína, concentrado de proteína, adoçantes nãonutritivos, fibras solúveis, fibras não solúveis, estatinas,vitamina E, proantocianidinas, extrato de palmito da serra,extrato de Pygeum, óleo de linho, óleo de peixe, vitamina B,vitamina C, um tocoferol, um fitosterol, um polifenol, umacatequina, uma antocianina, uma astaxantina, umaglicosamina, e combinações de qualquer destes.

5. Composição, CARACTERIZADA pelo fato de quecompreende:um extrato de lignana que tem de 20-45% dediglicosídeo de secoisolariciresinol;em que a composição compreende 50 mg ou menos deglicosideos cianogênicos por 100 g da composição.

6. Composição, de acordo com a reivindicação 5,CARACTERIZADA pelo fato de que a composição compreende 300-600 mg do diglicosídeo de secoisolariciresinol.

7. Recipiente que contém a composição, de acordocom a qualquer uma das reivindicações 1-6, CARACTERIZADOpelo fato de que o recipiente é associado com indíciosvoltados a um usuário de uma dose recomendada da composição.

8. Composição, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADA pelo fato de que o primeiro extrato de lignanaé 30 a 40 por cento de diglicosídeo de secoisolariciresinole o segundo extrato de lignana é pelo menos 90 por cento dediglicosídeo de secoisolariciresinol.

9. Uso da composição, de acordo com qualquer umadas reivindicações 1-6 ou 8, CARACTERIZADO pelo fato de quefabrica um medicamento para reduzir os níveis de colesterol,tratar hiperplasia prostática benigna, tratar doençacardíaca, prevenir aterosclerose hipercolesterolêmica,reduzir a doença cardíaca, reduzir o colesterol do soro,reduzir a lesão isquêmica, aumentar a expressão de óxidonítrico em células endoteliais, inibir a atividade deciclooxigenase em macrófagos, aliviar os sintomas associadoscom a diabete, prevenir ou retardar o começo de diabete,modular os níveis de glicose do soro, aumentar a densidadeóssea, reduzir a perda de densidade óssea, aliviar ossintomas associados com a artrite, reduzir o risco de câncerde próstata, reduzir o risco de metástase, retardar ametástase, aliviar os sintomas associados com o começo damenstruação, aliviar os sintomas associados com o começo damenopausa, reduzir a pressão sangüínea, ou reduzir a perdade cabelo ou calvície padrão masculina.

10. Extrato de lignana, CARACTERIZADO pelo fato deque compreende 46-89 por cento de diglicosídeo desecoisolariciresinol.

11. Uso do extrato de lignana, de acordo com areivindicação 10, CARACTERIZADO pelo fato de ser nafabricação de um medicamento para reduzir os níveis decolesterol, tratar hiperplasia prostática benigno, tratardoença cardíaca, prevenir aterosclerosehipercolesterolêmica, reduzir a doença cardíaca, reduzir ocolesterol do soro, reduzir a lesão isquêmica, aumentar aexpressão de óxido nítrico em células endoteliais, inibir aatividade de ciclooxigenase em macrófagos, aliviar ossintomas associados com diabete, enquanto prevenindo ouretardando o começo de diabete, modular os níveis de glicosedo soro, aumentar a densidade óssea, reduzir a perda dedensidade óssea, aliviar os sintomas associados com artrite,reduzir o risco de câncer de próstata, reduzir o risco demetástase, retardar a metástase, aliviar os sintomasassociados com o começo de menstruação, aliviar os sintomasassociados com o começo de menopausa, redução da pressãosangüínea, redução da perda de cabelo ou calvície padrãomasculina.

12. Método, para reduzir os níveis de colesterol,tratar hiperplasia prostática benigno, tratar doençacardíaca, prevenir aterosclerose hipercolesterolêmica,reduzir a doença cardíaca, reduzir o colesterol do soro,reduzir a lesão isquêmica, aumentar a expressão de óxidonítrico em células endoteliais, inibir a atividade deciclooxigenase em macrófagos, aliviar os sintomas associadoscom diabete, enquanto prevenindo ou retardando o começo dediabete, modular os níveis de glicose do soro, aumentar adensidade óssea, reduzir a perda de densidade óssea, aliviaros sintomas associados com artrite, reduzir o risco decâncer de próstata, reduzir o risco de metástase, retardar ametástase, aliviar os sintomas associados com o começo demenstruação, aliviar os sintomas associados com o começo demenopausa, redução da pressão sangüínea, redução da perda decabelo ou calvície padrão masculina, CARACTERIZADO pelo fatode que compreende administrar a composição, de acordo comqualquer uma das reivindicações 1-6 ou reivindicação 8, ou oextrato de lignana, de acordo com a reivindicação 10 a umindivíduo.

13. Método para reduzir os níveis de colesterol,tratar hiperplasia prostática benigna, tratar doençacardíaca, prevenir aterosclerose hipercolesterolêmica,reduzir doença cardíaca, reduzir colesterol do soro, reduzirlesão isquêmica, aumentar a expressão de óxido nítrico emcélulas endoteliais, inibir a atividade de ciclooxigenase emmacrófago, aliviar os sintomas associados com diabete,prevenir ou retardar o começo de diabete, modular os níveisde glicose do soro, aumentar a densidade óssea, reduzir aperda de densidade óssea, aliviar os sintomas associados comartrite, réduzir o risco de câncer de próstata, reduzir orisco de metástase, retardar a metástase, aliviar ossintomas associados com o começo de menstruação, aliviar ossintomas associados com o começo de menopausa, reduzir apressão sangüínea, reduzir a perda de cabelo ou calvíciepadrão masculina, CARACTERIZADO pelo fato de quecompreendendo administrar uma composição que compreende umcomplexo de lignana que tem um peso molecular de pelo menos-100.000 a um indivíduo.

14. Método, para tratar hiperplasia prostáticabenigna, CARACTERIZADO pelo fato de que compreendeadministrar um complexo de lignana que tem um peso molecularde pelo menos 100.000 a um indivíduo.

15. Método, para reduzir o colesterol de sorohumano, CARACTERIZADO pelo fato de que compreendeadministrar um complexo de lignana que tem um peso molecularde pelo menos 100.000 a um indivíduo.

16. Método, para reduzir pressão sangüíneaCARACTERIZADO pelo fato de que compreende administrar umcomplexo de lignana que tem um peso molecular de pelo menos-100.000 a um indivíduo.

17. Método, para reduzir os escores de sintoma depróstata internacionais, CARACTERIZADO pelo fato de quecompreende administrar um complexo de lignana a umindivíduo.

18. Método, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 12-17, CARACTERIZADA pelo fato de que oindivíduo é um humano.

19. Método, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 12-18, CARACTERIZADO pelo fato de que aadministração é oralmente feita.

20. Processo, por produzir um extrato de lignana,CARACTERIZADO pelo fato de que compreende:colocar um material de planta que contém lignanaem contato com um solvente de extração, desse modo formandouma solução de extração;separar uma fração enriquecida de lignana dasolução de extração com um dispositivo de separação com baseem densidade;lavar a fração enriquecida de lignana com umasolução aquosa; esecar a fração enriquecido de lignano.

21. Processo, de acordo com a reivindicação 20,CARACTERIZADO pelo fato de que adicionalmente compreendedecantar uma porção da solução de extração longe da fraçãoenriquecida de lignana.

22. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-21, CARACTERIZADO pelo fato de que asolução aquosa compreende um tampão de citrato aquoso.

23. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-22, CARACTERIZADO pelo fato de queadicionalmente compreende remover uma porção do solvente deextração da solução de extração.

24. Processo, de acordo com a reivindicação 23,CARACTERIZADO pelo fato de que adicionalmente compreende:remover a porção do solvente de extração dasolução de extraçãocompreende evaporar o solvente de extração; ere-usar o solvente de extração evaporado.

25. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-24, CARACTERIZADO pelo fato de que osolvente de extração compreende um álcool.

26. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-25, CARACTERIZADO pelo fato de queadicionalmente compreende moer a fração enriquecida delignana.

27. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-26, CARACTERIZADO pelo fato de queadicionalmente compreende empacotar a fração enriquecida delignana.

28. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-27, CARACTERIZADO pelo fato de queadicionalmente compreende colocar a fração enriquecida delignana em um produto de comida, uma cápsula, um comprimido,uma capsela, ou uma bebida.

29. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-28, CARACTERIZADO pelo fato de que afração enriquecida de lignana tem um teor de diglicosideo desecoisolariciresinol de pelo menos 35 por cento em peso.

30. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-29, CARACTERIZADO pelo fato de que afração enriquecida de lignana compreende 50 mg ou menos deglicosideos cianogênicos por 100 g da fração enriquecida delignana.

31. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-30, CARACTERIZADO pelo fato de que odispositivo de separação com base na densidade é selecionadode um grupo que consiste em uma hidroclona, um tanque desedimentação, uma centrifuga e um filtro.

32. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-31, CARACTERIZADO pelo fato de que asecagem da fração enriquecida de lignana ocorre em umsecador selecionado do grupo que consiste em um secador decorreia a vácuo, um secador de microonda, um secador deradio freqüência, e um Iiofilizador.

33. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-32, CARACTERIZADO pelo fato de queadicionalmente compreendendo um ato selecionado do grupo queconsiste em peneirar o material de planta que contémlignana, aspirar o material de planta que contém lignana, ouuma combinação destes.

34. Processo, de acordo com a reivindicação 33,CARACTERIZADO pelo fato de que duas peneiras de tela dearame são usadas para peneirar o material de planta quecontém lignana.

35. Processo, de acordo com a reivindicação 34,CARACTERIZADO pelo fato de que as duas peneiras de tela dearame compreendem uma tela de 500 microns e uma tela de 2500microns.

36. Processo, de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-35, CARACTERIZADO pelo fato de queadicionalmente compreende misturar a fração enriquecida delignana com um composto selecionado do grupo que consiste emesteróis, isoflavonas, adoçantes, isolados ou concentradosde proteína, adoçantes não nutritivos, fibras solúveis ounão solúveis, estatinas, vitamina E, proantocianidinas,extrato de palmito da serra, extrato de Pygeum, óleo delinho, óleo de peixe, vitamina B, vitamina C, um tocoferol,um fitosterol, um polifenol, uma catequina, uma antocianina,uma astaxantina, uma glicosamina, e combinações de quaisquerdestes.

37. Produto, CARACTERIZADO pelo fato de serproduzido pelo processo de acordo com qualquer uma dasreivindicações 20-36.

38. Produto, de acordo com a reivindicação 37,CARACTERIZADO pelo fato de ser para reduzir os níveis decolesterol, tratar hiperplasia prostática benigno, tratardoença cardíaca, prevenir aterosclerosehipercolesterolêmica, reduzir a doença cardíaca, reduzir ocolesterol do soro, reduzir a lesão isquêmica, aumentar aexpressão de óxido nítrico em células endoteliais, inibir aatividade de ciclooxigenase em macrófagos, aliviar ossintomas associados com diabete, enquanto prevenindo ouretardando o começo de diabete, modular os níveis de glicosedo soro, aumentar a densidade óssea, reduzir a perda dedensidade óssea, aliviar os sintomas associados com artrite,reduzir o risco de câncer de próstata, reduzir o risco demetástase, retardar a metástase, aliviar os sintomasassociados com o começo de menstruação, aliviar os sintomasassociados com o começo de menopausa, redução da pressãosangüínea, redução da perda de cabelo ou calvície padrãomasculina.

39. Uso do produto, de acordo com a reivindicação-38, CARACTERIZADO pelo fato de ser para fabricar ummedicamento para reduzir os níveis de colesterol, tratarhiperplasia prostática benigno, tratar doença cardíaca,prevenir aterosclerose hipercolesterolêmica, reduzir adoença cardíaca, reduzir o colesterol do soro, reduzir alesão isquêmica, aumentar a expressão de óxido nítrico emcélulas endoteliais, inibir a atividade de ciclooxigenase emmacrófagos, aliviar os sintomas associados com diabete,enquanto prevenindo ou retardando o começo de diabete,modular os níveis de glicose do soro, aumentar a densidadeóssea, reduzir a perda de densidade óssea, aliviar ossintomas associados com artrite, reduzir o risco de câncerde próstata, reduzir o risco de metástase, retardar ametástase, aliviar os sintomas associados com o começo demenstruação, aliviar os sintomas associados com o começo demenopausa, redução da pressão sangüínea, redução da perda decabelo ou calvície padrão masculina.

40. Processo, para remover glicosídeoscianogênicos de um extrato de linho CARACTERIZADO pelo fatode que compreende:lavar o extrato de linho com uma combinaçãoselecionada do grupo que consiste em ácido cítrico,etilenodiaminotetraacetato, ácido acético, ácido fumárico,láctico e qualquer combinação destes.

41. Processo, de acordo com a reivindicação 40,CARACTERIZADO pelo fato de que o composto tem um pH dentrepH 3,0-6,0.

42. Método, para aumentar a enterolactona,enterodiol ou uma combinação destes no plasma de umindivíduo CARACTERIZADO pelo fato de que compreende:administrar uma quantidade efetiva da composiçãode qualquer uma de reivindicações 1-6 ou 8 ou o produto dareivindicação 37 ao indivíduo.

43. Método, para aumentar a enterolactona,enterodiol ou uma combinação destes no protoplasma de umindivíduo, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende:Administrar entre 300mg/dia e 600mg/dia dacomposição de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-6ou 8 ou o produto da reivindicação 37 ao indivíduo.