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AR129909A1 - Cetorreductasa mutante con mayor actividad de cetorreductasa así como métodos y usos de esta - Google Patents

Cetorreductasa mutante con mayor actividad de cetorreductasa así como métodos y usos de esta

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Publication number
AR129909A1
AR129909A1 ARP230101831A ARP230101831A AR129909A1 AR 129909 A1 AR129909 A1 AR 129909A1 AR P230101831 A ARP230101831 A AR P230101831A AR P230101831 A ARP230101831 A AR P230101831A AR 129909 A1 AR129909 A1 AR 129909A1
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AR
Argentina
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ketoreductase
mutant
amino acid
seq
acid sequence
Prior art date
Application number
ARP230101831A
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English (en)
Inventor
Hans Iding
Irene Marzuoli
Original Assignee
Hoffmann La Roche
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Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of AR129909A1 publication Critical patent/AR129909A1/es

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    • C12Y101/00—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1)
    • C12Y101/01—Oxidoreductases acting on the CH-OH group of donors (1.1) with NAD+ or NADP+ as acceptor (1.1.1)
    • C12Y101/01184—Carbonyl reductase (NADPH) (1.1.1.184)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C12N9/0006—Oxidoreductases (1.) acting on CH-OH groups as donors (1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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Abstract

La presente invención se refiere a una cetorreductasa mutante, un ácido nucleico que codifica la cetorreductasa mutante, un vector que comprende el ácido nucleico, un método para la reducción enzimática de una cetona proquiral y la formación de un alcohol quiral con la cetorreductasa mutante, el uso de la cetorreductasa mutante para la preparación de alcoholes quirales así como el uso del método para la preparación de compuestos de morfolina farmacéuticamente activos. Reivindicación 1: Una cetorreductasa mutante con mayor actividad de cetorreductasa en relación con la cetorreductasa de tipo silvestre, en donde la cetorreductasa mutante comprende una secuencia de aminoácidos que es al menos 80% idéntica con respecto a la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 1 (cetorreductasa de Lactobacillus brevis ATCC 14869); y en donde la cetorreductasa mutante tiene al menos dos sustituciones de aminoácidos en relación con la secuencia de aminoácidos de SEQ ID Nº 1, en donde el aminoácido en la posición correspondiente a la posición 145 de SEQ ID Nº 1 se sustituye con Leu, Ala, Cys, Met o Thr (Leu145, Ala145, Cys145, Met145 o Thr145, respectivamente) y el aminoácido en la posición correspondiente a la posición 202 de SEQ ID Nº 1 se sustituye con Cys, Glu, Ile, Leu o Thr (Cys202, Glu202, Ile202, Leu202 o Thr202, respectivamente). Reivindicación 6: La cetorreductasa mutante de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde la cetorreductasa mutante no comprende una mutación en una o más de las posiciones correspondientes a las posiciones 94, 96, 153, 190, 195, 206 y 233 de SEQ ID Nº 1. Reivindicación 7: La cetorreductasa mutante de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde la cetorreductasa mutante consiste en o comprende una secuencia de aminoácidos que es al menos 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99%, en particular 100%, idéntica con respecto a la secuencia de aminoácidos de cualquiera de SEQ ID Nº 2 a 14. Reivindicación 10: La cetorreductasa mutante de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en donde la cetorreductasa mutante puede convertir una cetona proquiral en un alcohol quiral. Reivindicación 14: Un método para la reducción enzimática de una cetona proquiral y la formación de un alcohol quiral en presencia de cetorreductasa mutante de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 12. Reivindicación 15: El método de acuerdo con la reivindicación 14, en donde la cetona proquiral tiene la fórmula (2) en donde Rˣ es hidrógeno, alquil C₁₋₄ o un átomo de halógeno y el alcohol quiral resultante tiene la fórmula (1) en donde Rˣ es hidrógeno, alquil C₁₋₄ o un átomo de halógeno. Reivindicación 17: Uso del método de acuerdo con las reivindicaciones 14 a 16 para la preparación de compuestos de morfolina de fórmula (3) en donde R¹ es arilo o heteroarilo, en donde los anillos aromáticos se sustituyen opcionalmente con uno o dos sustituyentes de alquil C₁₋₇.
ARP230101831A 2022-07-15 2023-07-13 Cetorreductasa mutante con mayor actividad de cetorreductasa así como métodos y usos de esta AR129909A1 (es)

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