[go: up one dir, main page]

NO20100446A1 - Fôrsammensetning - Google Patents

Fôrsammensetning Download PDF

Info

Publication number
NO20100446A1
NO20100446A1 NO20100446A NO20100446A NO20100446A1 NO 20100446 A1 NO20100446 A1 NO 20100446A1 NO 20100446 A NO20100446 A NO 20100446A NO 20100446 A NO20100446 A NO 20100446A NO 20100446 A1 NO20100446 A1 NO 20100446A1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
trans
alkadienal
decadienal
accordance
fish
Prior art date
Application number
NO20100446A
Other languages
English (en)
Inventor
Adel El-Mowafi
Jose Miguel Troncoso Kirsten
Nestor Javier Gonzalez Foretic
Jorge Eduardo Pino Marambio
Kari Ruohonen
Jose Luis Gonzalez Vecino
Original Assignee
Ewos Innovation As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ewos Innovation As filed Critical Ewos Innovation As
Priority to NO20100446A priority Critical patent/NO20100446A1/no
Priority to PCT/NO2011/000107 priority patent/WO2011119048A1/en
Publication of NO20100446A1 publication Critical patent/NO20100446A1/no

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K50/00Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/80Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for aquatic animals, e.g. fish, crustaceans or molluscs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K20/00Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10Organic substances
    • A23K20/105Aliphatic or alicyclic compounds

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Feed For Specific Animals (AREA)
  • Farming Of Fish And Shellfish (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Abstract

Sammendrag Det beskrives et fôr for et dyr hvor nevnte fôr omfatter et alkadienal. Nevnte alkadienal eller et fôr omfattende nevnte forbindelse kan anvendes i behandling og profylakse av en parasittinfeksjon og/eller -angrep i et dyr.

Description

OMRÅDE FOR OPPFINNELSEN
Den foreliggende oppfinnelse vedrører et for til et dyr, en alkadienal i samsvar med innledningen i krav 11, for anvendelse i foret og anvendelse av nevnte alkadienal og en fremgangsmåte for fremstilling av foret. Foreliggende oppfinnelse vedrører videre en fremgangsmåte for å hindre infeksjon og/eller angrep av marin lus i fisk.
BAKGRUNN FOR OPPFINNELSEN.
Angrep av lus (( Caligus rogercresseyr) er for tiden en av de viktigste helse-utfordringer for lakseproduksjonsindustrien. Denne eksterne parasitt svekker produksjonseffektivitet, forårsaker stress og skade på fisken og er som en sekundær infeksjon en mulig vektor for andre patogener så som infeksiøs lakseanemi virus (ISAv) og Piscirickettsia salmonis. I Chile, som i mange andre land som produserer Salmonider, har angrepsrater økt signifikant og påvirker i hovedsak arter som Atlantisk laks (( Salmo salar), Regnbueørret ( Onchorhynkuss mykiss) og sølvlaks ( Oncorhynchus kisutch). I Norge vurderes angrep av lus som et av de mest alvorlige helseproblemer i oppdrettsindustrien av laks. Denne høye angrepsrate er sann-synligvis en konsekvens av en kombinasjon av faktorer inkluderende utvikling av utstrakt resistens av lusen til de fleste anvendte kjemiske antiparasittmidler som anvendes i behandling i dag. Forskjellige planteekstrakter, terrestriale og marine planter, har blitt undersøkt for antibakterielle, antifungicidale, antivirale og anti-oksidantaktiviteter for mennesker og dyr. Visse polyumettede aldehyder, produsert av terrestriale planter og diatomer har nylig blitt beskrevet til å inhibere eller ha toksiske effekter i noen andre arter.
Det er en viktig oppgave å finne nye forbindelser og måter å behandle og hindre ektoparasittangrep i fisk, spesielt av lus. Antiparasittiske midler anvendt for lus-behandling eller profylakse må være effektive, men må samtidig ikke være toksiske eller skadelige for fisken, andre organismer eller miljøet generelt.
Basert på problemet beskrevet over er det objektive formål med foreliggende oppfinnelse således å tilveiebringe nye effektive midler og fremgangsmåter for å inhibere angrep av lus og andre kopepodparasitter i fisk, som ikke er skadelige for fisken eller for miljøet.
SAMMENDRAG AV AOPPFINNELSEN
I samsvar med et første aspekt vedrører foreliggende oppfinnelse et for for et dyr hvor nevnte for omfatter en alkadienal.
Fortrinnsvis, en alkadienenhet av nevnte alkadienal inneholder 6 til 16 karboner, mer fortrinnsvis 7 til 12 karboner, enda mer fortrinnsvis er nevnte alkadienal et dekadienal, og mer foretrukket at nevnte dekadienal er 2-4-dekadienal. Mer fortrinnsvis er dette trans-trans-2-4-dekadienal.
Fortrinnsvis er nevnte alkadienal ekstrahert fra peanøttolje, potetjuice, diatomer, alger, marine sopp, en flyktig fraksjon fra plante eller en organisk fraksjon.
Det er også foretrukket at foret ytterligere omfatter vanlig anvendte foringredienser så som proteiner, lipider, vitaminer, karbohydrater og mineraler.
Det er ytterligere foretrukket at nevnte trans-trans-2-4-dekadienal er i en konsentrasjon av minst 0,009 vekt % av foret, basert på våtvekt.
Fortrinnsvis, dyret er et vandig dyr, fortrinnsvis en fisk, mer fortrinnsvis en art valgt blant familien Salmonidae.
Mer fortrinnsvis er nevnte Salmonidae valgt blant Atlantisk laks { Salmo salar), Regnbueørret { Onchorhynkuss mykiss), sølvlaks { Oncorhynchus kisutch), og Artisk ørret ( Salvelinus alpinus).
Fortrinnsvis er foret for en fisk, og administreres til fisk under fiskeoppdrett.
Et andre aspekt ved foreliggende oppfinnelse vedrører et for i samsvar med et av de ovennevnte avsnitt for anvendelse i behandling og/eller profylakse av parasittiske infeksjoner og/eller angrep i et dyr.
Fortrinnsvis, foret anvendes i behandling og/eller for profylakse av lusangrep i Salmonidae.
Et tredje aspekt av foreliggende oppfinnelse vedrører et alkadienal, som fortrinnsvis er et alkadienal hvor en enhet av nevnte alkadienal inneholder 6 til 16 karboner, mer fortrinnsvis 7 til 17 karboner, mer fortrinnsvis at nevnte alkadienal er et dekadienal, enda mer foretrukket et 2-4-dekadienal, og mest foretrukket en trans-trans-2-4-dekadienal for anvendelse i profylakse av en parasittinfeksjon og/eller -angrep i et dyr.
Fortrinnsvis, nevnte alkadienal er for anvendelse i behandling og/eller profylakse av en parasittinfeksjon og/eller angrep i samsvar med ovennevnte avsnitt, hvor dyret er et vandig dyr, fortrinnsvis en fisk og hvor parasitten fortrinnsvis er en ektoparasitt.
Det er foretrukket at nevnte alkadienal er for anvendelse i behandling og/eller profylakse av en lusinfeksjon og/eller -angrep, hvor lusen er fortrinnsvis en kopepodart tilhørende familien Caligidae fortrinnsvis valgt blant Caligus rogercresseyi, Caligus elongateus og Lepeophtheirus salmonis, og fisken er en art valgt blant familien av Salmonidae, fortrinnsvis valgt blant Atlantisk laks ( Salmo salar), Regnbueørret ( Onchorhynkuss mykiss), sølvlaks ( Oncorhynchus kisutch) og Arktisk ørret ( Salvelinus alpinus).
Fortrinnsvis, nevnte alkadienalforbindelse injiseres intraperitonealt, mer fortrinnsvis i en mengde korresponderende til 0,1 ml av 0,5 mg/liter til 60 mg/liter av nevnte alkadienal per dag, fortrinnsvis i en konsentrasjon av mindre enn 28 mg/l/dag.
Det er videre foretrukket at nevnte alkadienalforbindelse administreres oralt.
Et ytterligere aspekt ved foreliggende oppfinnelse vedrører anvendelse av et for i samsvar med ovennevnte for oppdrett av fisk.
Et ytterligere aspekt av foreliggende oppfinnelse vedrører anvendelse av et alkadienal, som fortrinnsvis er et alkadien hvor en enhet av nevnte akladianal inneholder 6 til 16 karboner, mer fortrinnsvis 7 til 12 karboner, mer fortrinnsvis et alkadienal som er et dekadienal, enda mer foretrukket et 2-4-dekadienal, og mest foretrukket en trans-trans-2-4-dekadienal for produksjon av et bioaktivt for og/eller et medikament for profylakse og/eller behandling av en sykdom forårsaket av en ektoparasitt i et dyr.
Et ytterligere aspekt av foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for fremstilling av et for i samsvar med et av ovennevnte avsnitt, hvor nevnte alkadienal er oppløst i et oppløsningsmiddel og deretter belegges på og/eller tilsettes til foret.
Et ytterligere aspekt av foreliggende oppfinnelse vedrører en fremgangsmåte for å hindre en infeksjon og/eller av lus i fisk, kjennetegnet ved at nevnte fisk fores med et for omfattende et alkadienal, som fortrinnsvis er et alkadien hvor en enhet av nevnte alkadienal inneholder 6 til 16 karboner, mer fortrinnsvis 7 til 12 karboner, mer fortrinnsvis er dette alkadienal et dekadienal, enda mer fortrinnsvis en 2-4 dekadienal, og mest fortrinnsvis en trans-trans-2-4-dekadienal og/eller at nevnte fisk infiseres med en sammensetning omfattende nevnte alkadienal.
Fortrinnsvis, konsentrasjonen av nevnte trans-trans-2-4-dekadienal i foret er minst 0,009 vekt % av foret, basert på våtvekt.
Det er også foretrukket at mengden av inntatt trans-trans-2-4-dekadienal er minst 0,052 mg/fisk, fortrinnsvis fra 0,052 mg til 0,311 mg/fisk.
Fortrinnsvis, fisken fores med nevnte for i minst 4 dager, mer fortrinnsvis i en periode mellom 4 og 12 dager.
Oppfinnelsen vedrører også en anvendelse av et alkadienal, som fortrinnsvis er et alkadien hvor enheten av nevnte alkadien inneholder 6 til 16 karboner, mer fortrinnsvis 7 til 12 karboner, mer fortrinnsvis er nevnte alkadienal et dekadienal, enda mer foretrukket en 2-4-dekadienal, og mest foretrukket en trans-trans-2-4-dekadienal, eller et fiskefor omfattende nevnte alkadienal for å inhibere uttrengning (morfogenese) av det frontale filament i lus-kopepodider og/eller for å redusere modning eller reproduksjonsevne i lusen og/eller forekomst av luslarver.
Oppfinnelsen vedrører videre en anvendelse av nevnte alkadienal eller av et fiskefor omfattende nevnte alkadienal for å redusere antallet lus i nauplius II utviklingstrinn, idet det fores til en fisk i minst 12 dager.
Foretrukket utførelse er også definert i de uselvstendige krav.
Alkadienalforbindelsene i samsvar med foreliggende oppfinnelse omfatter følgende formel (I):
(CAS Nr. [25152-84-5]).
Gruppen vist i formel (I) er antatt å representere den biologisk effektive del i samsvar med foreliggende oppfinnelse.
Overraskende, oppfinnerne av foreliggende oppfinnelse gjorde det mulig å tilveiebringe et nytt middel som er nyttig i behandling og profylakse av ektoparasittangrep, spesielt forårsaket av lus i Salmonidae.
Idet en direkte behandling av fisk i et vannbad omfattende nevnte alkadienalforbindelse, spesifikt trans-trans-2-4-dekanienal, ikke, eller kun i mindre grad påvirket angrep av lus, var det overraskende mulig å påvirke lusangrep og kvantitativ mengde indirekte med å fore fisken med en diett omfattende nevnte aktive alkadienalforbindelse.
Fra et praktisk ståsted er det en fordel at fisken ikke trenger å isoleres eller fjernes fra dyrkningsenheten slik som en sjømerd for å behandles, siden fisken enkelt kan mates en diett omfattende den aktive forbindelse. Ved anvendelse av for eksempel et vannbad for ytre behandling må fisk ofte holdes isolert eller overføres til en isolert/lukket enhet. Dette betyr mer behandling og er således mer arbeidskrevende og videre mer stressende for fisken. Ifølge foreliggende oppfinnelse er det således mulig å behandle fisken i dyrkningsenheter uten å isolere fisken.
Med foreliggende oppfinnelse ble det mulig å identifisere et nytt middel egnet for profylakse og behandling av ektoparasittinfeksjoner i fisk, som kan administreres direkte endogent til fisken så som med injeksjon av fisken eller ved oral administrering.
Det skal anerkjennes at trekk ifølge oppfinnelsen beskrevet ovenfor kan kombineres
i enhver kombinasjon uten å avvike fra rammen av oppfinnelsen.
BESKRIVELSE AV OPPFINNSELSEN
Utførelser av foreliggende oppfinnelse vil nå bli beskrevet, ved hjelp av eksempler med referanse til de følgende tegninger, hvor: Figur 1 viser trans-trans-2-4-dekanienal persistens i sjøvann i en periode av 15 dager for tre temperaturer (10 °C, 12 °C og 14 °C). Figur 2 viser spesifikk foringsrate (SFR %) i S. salar opptatt daglig for hver behandling med trans-trans-2-4-dekadienal, og for kontrollgruppen. Figur 3 viser estimater av parametere som beskriver effektene av trans-trans-2-4-dekadienal dosering i for matet til laks, og eksponeringstid for forskjellige lus (C. rogercresseyi) faser (figurer 3 A-F). "DxT" angir gjennomsnittlig estimat, tykke linjer angir 50 % konfidensintervall og tynne linjer angir 95 % konfidens intervall. Figur 4 viser inhibering av frontal filament av kopepodider av C. rogercresseyi. Kopepodidene ble samlet fra hunnkjønn lus fra kontrollfor behandling eller fra behandling med for som omfatter den høyere dosering av trans-trans-2-4-dekadienal (0,0018 vekt % av foret, våtvekt). Små bokstaver indikerer statistisk signifikante forskjeller.
EKSPERIMENTELL SEKSJON
Eksperiment 1:
Undersøkelse av trans- trans- 2- 4- dekanienal resistens i sjøvann
Persistensen av trans-trans-2-4-dekadienal i sjøvann ble testet ved tre forskjellige temperaturer ((10 °C, 12 °C og 14 °C). 0,5 g/l trans-trans-2-4-dekadenal ble fortynnet i sjøvann og inkubert i triplikat for hver temperaturbehandling i 250 ml kar med lufting ved anvendelse av en inkubator i en periode på 15 dager. Prøver (6 ml/prøve/kar) ble tatt ved starten av testen og etter 1, 3, 6,10 og 15 dager.
Hver av prøvene ble prosessert som følger:
Faststoffekstrahering:
Faststoffekstrahering ble anvendt for å isolere trans-trans-2-4-dekadienalforbind-elsen fortynnet i vann i samsvar med metoden beskrevet i Pino-Marambio et al.
(2007). Trans-trans-2-4-dekadienal ble ekstrahert i en EFS (Biotage, Uppsala - Sweden) kolonne med en glassinnsats på 6 ml (sjikt C2 (500 mg) over ENV+ (200 mg)), ved anvendelse av en innsats per replika. Innsatsen ble forhåndsfremstilt med 2 ml metanol HPLC kvalitet, og metanolen ble fjernet med vann HPLC kvalitet (2 ml). Etter ekstrahering av trans-trans-2-4-dekadienal ble urenheter fjernet med mer vann HPLC kvalitet (2 ml). De kjemiske forbindelser absorberte i begge faser, C2 og ENV+, og ble eluert med 2 ml etanol HPLC kvalitet.
Destillering med vakuum:
Flyktige og ikke-flyktige fraksjoner ble opptatt gjennom en vakuumdestillasjon. Destillering ble utført i løpet av 24 timer med et trykk på 0,04 torr og en omgivelses-temperatur (gjennomsnittlig 20 °C).
Væske-til-væske-ekstrahering:
Flyktige og organiske fraksjoner av det destillerte ble opptatt gjennom en væske-til væske-ekstrahering, ved anvendelse av dietyleter (20 ml) og destillert eter (3 x 20 ml). Organiske faser ble blandet og tørket med CaS04. Ekstraktet som ble oppnådd ble konsentrert inntil 100 ul og lagret i rør (-18 °C) inntil ytterligere analyse. Trans-trans-2-4-dekadienal ble bestemt ved anvendelse av GC-MS-analyser (Pino-Marambio et al., 2007).
Resultater:
Etter 10 dager av sjøvanneksponering av trans-trans-2-4-dekadienal-løsninger ble det observert at ved alle temperaturer som ble testet hadde trans-trans-2-4-dekadienal forsvunnet fullstendig i løsningene (figur 1). I tilfellet med trans-trans-2-4-dekadienal-løsning inkubert ved 10 °C ble en høyere persistens fra den tredje dag inntil den sjette dag observert, sammenlignet med trans-trans-2-4-dekadienal løsninger inkubert ved 12 °C eller ved 14 °C (figur 1).
Eksperiment 2: Undersøkelse av trans-trans-2-4-dekadienal i for for laks mot lusangrep av C. rogercresseyi og reproduksjon. Effekten av trans-trans-2-4-dekadienal ble testet for av laks S. salar med C. rogercresseyi og på reproduksjon av C. rogercresseyi.
Løsninger av trans-trans-2-4-dekadienal (SIGMA Aldrich (85 % renhet)) ble fremstilt med metanol og deretter tilsatt til belagt for for laks (tabell 1).
Eksperimentoppsett av foringsforsøket vist i tabell 2.
Tre hundre Atlantiske laks { Salmo salar), med en gjennomsnittlig vekt på 150 g, ble angrepet med kopepodider av C. rogercresseyi (80 lus/fisk) i en 1,5 m<2>tank med et åpent sjøvannstrømningssystem og en gjennomsnittstemperatur på ca 13 °C.
Idet 80 % av lusen nådde voksenfasen, ble 250 fisk selektert for eksperiment-perioden, som ble allokert i 25 tanker av 350 I (10 fisk/tank), i et åpent sjøvann-strømningssystem med en gjennomsnittlig temperatur på 13 °C.
Atlantisk laks ble foret i en periode av 12 dager med en gjennomsnittlig SFR (spesifikk foringsrate) på 0,9 % av de forskjellige testdietter inneholdende trans-trans-2-4-dekadienal i konsentrasjonene som vist i tabell 1 og 2. For hver behandling var det 5 replikattanker.
For å unngå tap av luslarver under forsøket ble et gitter (80 um) installert i utgangen av hver tank. Gitteret ble renset daglig, og oppsamlete luslarver ble fiksert med
formaldehyd (5 %) og deretter talt. Larvene i vannet ble bestemt hver dag for hver av behandlingene (dag 4, 8 og 12, respektivt). I tillegg, ble de forskjellige livstrinn av lus som var festet til Atlantisk laks (25 fisk/tank) telt, i samsvar med dagene angitt i tabell 2 for hver behandling.
Variablene av analysene var som følger:
a) antall modne hunnkjønnlus ved dager 4, 8 og 12.
b) antall hunnkjønnlus med eggstrenger ved dager 4, 8 og 12.
c) antallet totale embryoer per streng av lus ved dager 4, 8 og 12.
d) antall totale larver av lus ved dag 4, 8 og 12.
e) antallet ikke-levedyktige larver av lus ved dag 4, 8 og 12.
f) antallet neuplius II av lus ved dag 4, 8 og 12.
For å undersøke larvelevedyktigheten av lus, ble det anvendt et in vitro frontal
filament inhiberingsmetode for kopepodidangrep som beskrevet i detalj nedenfor. Ti hunnkjønnlus med eggstrimler ble samlet fra hver tank og deretter inkubert (ved 14 °C) i 2 dager i filtrert (1 um sjøvann). Kopepodidene ble samlet og inkubert for aangrep i Petriskåler med agar og laksemukus.
Frontal filament inkuberingsmetoder for undersøkelse av kopepodidangrep { in vitro) : Mukus ble opptatt direkte fra Salmo salar. Fisk ble anestetisert med AQUi-S (BAYER, Tyskland) i et bad i ca 5 minutter. Mukus ble samlet ved skraping av kroppen til fisken, for dermed å unngå noe kontaminering. Den opptatte mukus ble frosset i væskeformig nitrogen og lagret ved - 80 °C inntil videre bruk. Mukusprøvene ble tint ved romtemperatur og filtrert ved 100 um for retensjon av skjellene og restvev av fisken, dersom nødvendig. 1 I agar omfattende mukusattraktant ble oppløst ved 30 g agar i 1 I destillert vann med oppvarming og konstant omrøring. 100 ul av det tinte Salmo Salar mukus ble tilsatt til den oppnådde løsning ved mindre enn 35 °C etterfulgt av blanding. Ca 60 ml av den oppnådde blanding ble tilsatt i Petri skåler (10 cm i diameter og 2 cm dybde), og beholdt inntil en gel ble oppnådd. 2 Petri skåler med agar blandet med Salmo salar mukus (9:1) ble plassert på bun-nen av et 2 I plastbeholder som ble fylt med 2 I filtrert (0,1 um) og UV-sterilisert sjøvann og luftet konstant. Testene ble utført ved anvendelse av tre replikater for hver konsentrasjon, hvor hvert replikat plasseres i en 2 I plastbeholder. Et minimum av femti innsamlete kopepodider for hver behandling ble deponert per beholder og satt med lufting i 48 t. Etter 48 t ble alle kopepodider av hver beholder og Petriskålene ekstrahert. Lus ble overført i Petriskålene inneholdende en blanding av alkohol, destillert vann og glyserol (45 %, 45 % og 10 %, respektivt) for fiksering, og tørket i en ovn ved en konstant temperatur på 35 °C i 4 timer. Hver av de fikserte prøvene ble undersøkt individuelt under et mikroskop (12 subprøver per behandling). Nærvær av det frontale filament i hver kopepodid fiksert på en mikroskopglassplate ble telt ved å studere nivået av utvikling av det frontale filament.
Resultater:
Vanntemperaturen i forsøket varierte mellom 12 °C til 13 °C og oksygenmetningen varierte fra 80 % til 110 %, med et gjennomsnitt på 92 %.
Den spesifikke foringsrate (SFR %) oppnådd for hver behandling var tilsvarende i forsøksperioden. (Figur 2). Det høyeste gjennomsnittlige SFR (1,3 %) ble registrert ved den syvende dag for alle behandlinger, mens den første dag viste lavest SFR (0,57 %) for doseringer på 0,0009 % trans-trans-2-4-dekadienal i for og 0,0018 % trans- trans-2-4-dekadienal i for, sammenlignet med kontroll (SFR 0,7 %). Mengden av trans-trans-2-4-dekadienal konsumert per fisk er vist i tabell 3.
De skadelige effekter av trans-trans-2-4-dekadienal i hunnkjønn, embryo og larve-trinn av Caligus rogercresseyi er vist i figurer 3 A-F. generelt, alle data analysert var overdispergert.
Totale egg.
Det ble ikke funnet en relevant interaksjonseffekt mellom trans-trans-2-4-dekadienal dosering og eksponeringstid (= antallet dager idet fisken ble foret med de forskjellige dietter), men det ble observert klare effekter på både trans-trans-2-4-dekadienal dosering og eksponeringstid (figur 3A). For høyere trans-trans-2-4-dekadienal doseringer i for ble det oppnådd lavere mengder av egg per hunnkjønn. Mens for lengre behandlinger (eksponeringstid), ble det oppnådd høyere mengder egg, som er relatert med tiden nødvendig for inkubering av eggstrengene til hunnkjønnene.
Gravide hunner.
Det var ingen klare effekter på hverken trans-trans-2-4-dekadienal dosering eller eksponeringstid på gravide hunner (Figur 3B). Der er en indikasjon på at antall gravide hunner ble redusert med økende eksponeringstid. Dette kan forklares med det faktum at med økende tid så blir flere egg modne og larver forlater eggstrengene, som dermed reduserer antall gravide hunner.
Modne hunner.
Trans-trans-2-4-dekadienal dosering og eksponeringstid viste klare negative effekter på antallet modne hunner, men det syntes ikke å være noen interaksjon mellom disse parametere (figur 3C). Dette indikerer at effektene er additive. Både en øket dosering og en øket eksponeringstid reduserer tallene for modne hunner, hvor øket eksponeringstid er omtrent dobbelt så effektiv. Basert på modellen (Montgomery, 1997; Myers & Montgomery, 1995) vil en økning i dosering fra null til 0,0018 % redusere antallet modne hunner fra ca 99 hunner til 85 hunner (15 % fall). Tilsvarende, øking av eksponeringstiden fra 4 til 12 timer med dosering 0,0018 % reduserte antallet fra ca 98 hunner til 73 hunner (25 % fall).
Totalt antall larver.
Trans-trans-2-4-dekadienaldoseringen viste ingen effekt på totalt larvetall, mens eksponeringstid påvirket det totale larvetall (figur 3D). Det siste kan forklares med konstant frigjørelse av larver fra eggstrengene og deres akkumulering i de forskjellige larvelivsfaser (naupilus I, naupilus II og kopepodider).
Ikke-levedyktige larver.
En tilsvarende effekt som for det totale larvetall ble også observert for antallet ikke-levedyktige larver. Trans-trans-2-4-dekadienaldoseringen viste ikke en effekt på antallet av levedyktige larver, mens eksponeringstiden klart øker antallet ikke-levedyktige larver (figur 3E), som forklares på samme måte som for det totale antall larver, og er en akkumulering av ikke-levedyktige larver med tiden.
Nauplius II.
Tolkning av effektene på nauplius II fasen er tilsvarende som for det totale antall larver og for ikke-levedyktige larver. Der var ingen effekt av trans-trans-2-4-deka-dienaldosering og eksponeringstid, på grunn av en akkumulering over tid av larver i nauplius II fasen (figur 3F). I dette tilfellet var der en svak indikasjon på en negativ interaksjon mellom dosering og eksponeringstid som kan indikere at økende eksponeringstid med trans-trans-2-4-dekadienal har en effekt på nauplius II fasen.
Frontal filament inhibering (respons).
En sammenligning mellom kontrollgruppen (ikke eksponert til trans-trans-2-4-dekadienal), og gruppen eksponert til den høyere dosering av 0,0018 % trans-trans-2-4-dekadienal ble utført, ved anvendelse av inhibering av metoden for frontalt filament i kopepodider av C. rogercresseyi. En signifikant forskjell ble observert mellom kontrollresponsen og doseresponsen av trans-trans-2-4-dekadienal (0,0018 %). Således, der er en sterk inhibering av frontal filament (58 %) i kopepodider som eksponeres til trans-trans-2-4-dekadienal (figur 4).
Eksperiment 3.
Undersøkelse av skadelige effekter, letale eller sub-letale, av trans-trans-2-4-dekadienal injisert i Atlantisk laks og dets vev.
Et LD50 (letal dose, 50 %) forsøk ble utført for å evaluere den letale dosering av trans-trans-2-4-dekadienal for Atlantisk laks (Salmo salar). 138 fisk ble pit-merket og allokert i seks tanker (23 fisk/tank; biomasse per tank: 15 kg/m<3>), hver med en total kapasitet på 350 I, med en gjennomsnittlig vekt på 75 g/fisk. Etter 7 dager ble fisken injisert en gang intraperitonealt med 0,1 ml av følgende konsentrasjoner av trans-trans-2-4-dekadienal i en saltserum: 0,57 mg trans-trans-2-4-dekadienal/l/dag, 1,13 mg trans-trans-2-4-dekadienal/l/dag, 5,65 mg trans-trans-2-4-dekadienal/l/dag, 28,24 mg trans-trans-2-4-dekadienal/l/dag eller 56,47 mg trans-trans-2-4-dekadienal/l/dag.
Ikke-injisert fisk ble anvendt som en kontroll. Miljømessige variabler ble registrert daglig, så som sjøvanntemperatur (grader celsius) og oksygenmetning i sjøvann (%). Fisk ble ikke matet under eksponeringsforsøket (7 dager).
Vevsprøver av hjerne, tarm, skinn, lever og muskel fra laks ble tatt per hver dosering injisert 7 dager etter første injeksjon. Triplikatprøve per vev ble tatt per dosering, samlet og deretter splittet i subprøver for histologiske analyser og for GC-MS analyser av transtrans24dekadienal.
GC-MS- analyser:
For prøvefremstilling ble 0,1 g avfiskevev (lever, muskel, hjerne, nyre eller tarm) homogenisert og plassert i et Falcon-rør (NALGENE, Centrifuge Tube Oak Ridge™
Sealing Cap P 10 ml_). 1 ml NaCI (1 mg/ml) og 1 ml heksan (HPLC kvalitet) ble tilsatt til prøven og omrørt for homogenisering. Deretter ble prøvene sentrifugert ved 10000 rpm i 20 min og plassert i en fryser (-18 °C) i 1 time. Supernatanten ble trukket av og filtrert (DURAPORE membrane GV (PVDF), 0,22 um, 13mm diameter, Hydrophilic, 100/CX). Den filtrerte løsning ble konsentrert til 100 ul under en strøm av nitrogen. 1 ul av denne løsning ble injisert for GC-MS-analyser ved anvendelse av en kalibrert gasskromatograf (Focus GC) koplet til et massespektrometer (Thermo) og utstyrt med en BP-1 kappelærkolonne (30 m, 0.22 mm, 0,25 um; SGE, Australia). Ovn-temperaturen ble holdt ved 40 °C i 2 min, og deretter programmert med en gradient med 10 °C min -1 til 250 °C. Bærergassen var helium. Injeksjonstemperaturen og overføringslinje til massedetektor ble holdt ved 250 °C. Elektron impakt ionisering ble benyttet med energier på 70 eV ved 250 °C.
Resultater:
Under perioden av forsøket (7 dager) ble ingen mortalitet registrert i Atlantisk laks (S.Salar), som var injisert med forskjellige trans-trans-2-4-dekadienal doseringer eller i kontroll. Derfor, en LD50-undersøkelse var ikke relevant for dette forsøk.
Registrering av miljøbetingelser for forsøket, temperatur på sjøvann var i gjennomsnitt 12 °C med variabilitet mindre enn 1 %, mens oksygenmetning varierte fra 90 % til 100%.
Ingen viktige forandringer i cellestruktur i vevsprøvene ble observert (tabell 4 og 5) mellom fisk behandlet med trans-trans-2-4-dekadienal doseringer og kontroll. Skade av type 2 ble observert med mer frekvens i lever og i tarm. Ingen skader ble observert i skinn og muskel.
En høyere skade (type 3 ble observert i lever, for trans-trans-2-4-dekadienal
dosering av 28,24 mg/l (tabell 4 og 5), med et nekrotisk område kun i en prøve. En høyere frekvens av vevsskade ble observert i lever og tarm, som prinsipielt var type 2 (tabell 4). Kun et tilfelle av skadenivå 1, ble observert i hjerne og dette var en mild meningitt (tabell 4 og 5).
Konsentrasjonene av trans-trans-2-4-dekadienal detektert i hvert analyserte vev er vist i tabell 6. Trans-trans-2-4-dekadienal ble funnet i alle vevene analysert (lever, hjerne, tarm, skinn og muskel). Høyere konsentrasjoner ble registrert for tarmvevet. Ingen konsentrasjoner av trans-trans-2-4-dekadienal ble detektert i kontrollvevet.
Diskusjoner og konklusjoner.
Med hensyn til forskjellige tider av persistens av trans-trans2-4-dekadienal, oppløst i sjøvann, ved 10 °C sammenlignet med 12 °C og 14 °C, syntes trans-trans-2-4-dekadienal å vedvare i lengre tid ved en lavere vanntemperatur. Trnas-trans-2-4-dekadienal oppløst i sjøvann, vedvarer for maksimum 10 dager ved temperaturer mellom 10 °C og 14 °C. Resultatene i denne testen ifølge foreliggende oppfinnelse viser at det umettede aldehyd ikke er en persistent forbindelse i sjøvann. Dette vurderes som en stor fordel og forhåndsbetingelser for egnethet av dette middel ved anvendelse i behandling av fisk i et vandig miljø, spesielt idet det anvendes i et åpent system.
En direkte administrering av trans-trans-2-4-dekadienal til sjøvann gav liten eller ingen effekt på lus angrep i Atlantisk laks (resultater ikke vist). Overraskende, det ble funnet ifølge foreliggende oppfinnelse at det er mulig å negativt påvirke luspopula-sjonen, idet trans-trans-2-4-dekadienal ble tilsatt til foret og matet til fisk angrepet med nevnte lus.
Dette er en fordel ut fra et praktisk ståsted siden fisken ikke må isoleres eller fjernes fra dyrkningsenheten så som sjømerden for å kunne behandles, siden fisken enkelt kan fores dietten som omfatter den aktive forbindelse.
En vannmerdbehandling krever mer behandling og er således mer arbeidskrevende og vil videre være stressende for fisken. Ifølge foreliggende oppfinnelse er det således mulig å behandle fisken i dyrkningsenhetene uten å isolere fisken.
LD50- analysen viste at ingen mortalitet ble observert i laks injisert med trans-trans-2-4-dekadienal. Det ble observert noen milde skader i lever og tarmkanal etter behandling med økete doseringer av de umettete aldehyder. Skadene vurderes som reversible.
Med hensyn til resultater av effektivitetsforsøkene ble et lavere antall modne hunner og egg av Caligus rogercresseyi oppnådd idet laksen ble foret høyere doseringer av trans-trans-2-4-dekadienal i lakseforet.
Samtidig, med en økende eksponeringstid til trans-trans-2-4-dekadienal i foret, ble et redusert antall gravide og modne hunner oppnådd. En reduksjon på 25 % i antallet modne hunner av C. rogercresseyi ble oppnådd. Det ble også vist at trans-trans-2-4-dekadienal har en skadelig effekt i gonadikal modning av hunner av C. rogercresseyi, idet Atlantisk laks (S. salar) behandles med umettet aldehyd tilsatt til foret. Dette indikerer at trans-trans-2-4-dekadienal effektivt reduserer modningen og reproduktiv evne til lus. Det ble vist at trans-trans-2-4-dekadienal også har en skadelig effekt i tilgjengelighet av egg i eggstrengene av C. rogercresseyi, idet Atlantisk laks (S. salar) behandles med umettet aldehyd tilsatt i foret. De påviste effekter av de forskjellige lusfaser vil føre til en kvantitativ reduksjon av tilgjengelighet av luslarver i sjøburene anvendt i fiskeoppdrett og, gjennom dette, en reduksjon av sannsynlighet for angrep av kopepodider til fisken.
Den viste inhibitoriske effekt av eversjon av frontalt filament (morfogenese) i kopepodider oppnådd fra hunner av fisk behandlet med 0,0018 % dosering i for indikerer at trans-trans-2-4-dekadienal negativt påvirker levedyktigheten av kopepodider av C. rogercresseyi under prosessen. trans-trans-2-4-dekadienal i samsvar med foreliggende oppfinnelse vurderes således som å være en bioaktiv forbindelse som effektivt hindrer en og tilfestingen av ektoparasitten til fiskens skinn.
Injiserte doseringer av trans-trans-2-4-dekadienal, 0,1 mg/l, 0,5 mg/l og 1,5 mg/l i Atlantisk laks ( Salmo salar) produserer ikke mortalitet. Derfor, det umettede aldehyd kan vurderes som å være sikkert idet det anvendes som et laksefor.
Tarmen var det organ i Atlantisk laks { Salmo salar) som akkumulerte det meste av trans-trans-2-4-dekadienal og en høyere frekvens av milde skader foreligger i dette organ.
Det skal anerkjennes at egenskapene med foreliggende oppfinnelse beskrevet i det overnevnte kan modifiseres uten å avvike fra oppfinnelsens ramme.
Referanser:
Montgomery, D. 1997. Design and Analysis of Experiments. John Wiley & Sons, New York, 684 pp.
Myers, R. & D. Montgomery. 1995. Response Surface Methodology. John Wiley
& Sons, New York, 700 pp.
Pino-Marambio, J.E., Mordue (Luntz), A.J., Birkett, M.A., Carvajal, J., Asencio, G., Mellado, A., Quiroz, A.E., (2007). Behavioural Studies of Host, Non-Host and Mate Location by the Sea Louse, Caligus rogercresseyi. Boxshall & Bravo, 2000 (Copepoda: Caligidae). Aquac 271, 70-76.

Claims (27)

1. For for et dyr,karakterisert vedat nevnte for omfatter et alkadienal.
2. For i samsvar med krav 1,karakterisert vedat en alkadienal enhet av nevnte alkadienal inneholder 6 til 16 karboner, mer fortrinnsvis 7 til 12 karboner.
3. For i samsvar med et av de foregående krav,karakterisert vedat nevnte alkadienal er et dekadienal.
4. For i samsvar med krav 3,karakterisert vedat nevnte dekadienal er 2-4-dekadienal, mer fortrinnsvis trans-trans-2-4-dekadienal.
5. For i samsvar med et av de foregående krav,karakterisert vedat nevnte alkadienal er ekstrahert fra peanøttolje, potetjuice, diatomer, alger, marine fungus, en vegetal volatil fraksjon eller en organisk fraksjon.
6. For i samsvar med et av de foregående krav,karakterisert vedat foret ytterligere omfatter vanligvis anvendte foringredienser så som proteiner, lipider, vitaminer, karbohydrater og mineraler.
7. For i samsvar med et av de foregående krav,karakterisert vedat nevnte trans-trans-2-4-dekadienal er i en konsentrasjon av minst 0,009 vekt % av foret, våtvekt.
8. For i samsvar med et av de foregående kravkarakterisert vedat dyret er et vanndyr, fortrinnsvis en fisk, mest fortrinnsvis en art valgt blant familien Salmonidae.
9. For i samsvar med krav 8,karakterisert vedat nevnte Salmonidae er valgt blant Atlantisk laks ( Salmo salar), Regnbueørret ( Onchorhynkuss mykiss), sølvlaks ( Oncorhynchus kisutch), og Arktisk ørret ( Salvelinus alpinus).
10. For i samsvar med et av de foregående krav,karakterisert vedat nevnte for er for en fisk og administreres til fisk i fiskeoppdrett.
11. For i samsvar med et av de foregående krav, for anvendelse i behandling og/eller profylakse av parasittiske infeksjoner og/eller angrep i et dyr.
12. For i samsvar med krav 5, for anvendelse i behandling og/eller profylakse av lusangrep i laks.
13. Alkadienal, som fortrinnsvis er et alkadien hvor enheten av nevnte alkadien inneholder 6 til 16 karboner, mer fortrinnsvis 7 til 12 karboner, mer fortrinnsvis et alkadienal er et dekadienal, enda mer foretrukket en 2-4 dekadienal og mest foretrukket en trans-trans-2-4-dekadienal for anvendelse i behandling og profylakse av en parasitt infeksjon og/eller angrep i et dyr.
14. Alkadienal i samsvar med krav 13, for anvendelse i behandling og/eller profylakse av en parasittinfeksjon og/eller angrep i samsvar med krav 13, hvor dyret er et vanndyr, fortrinnsvis en fisk, og parasitten fortrinnsvis er en ektoparasitt.
15. Alkadienal i samsvar med krav 13, for anvendelse i behandling og/eller profylakse av en lusinfeksjon og/eller angrep, hvor lusen fortrinnsvis er et kopepodart tilhørende familien Caligidae, fortrinnsvis valgt blant Caligus rogercresseyi, Caligus elongateus, og Lepeophtheirus salmonis og fisken er en art valgt blant familien av Salmonidae, fortrinnsvis valgt blant Atlantisk laks ( Salmo salar), Regnbueørret ( Onchorhynkuss mykiss), sølvlaks ( Oncorhynchus kisutch) og Arktisk ørret ( Salvelinus alpinus).
16. Alkadienal i samsvar med krav 13 for anvendelse i behandling og/eller profylakse av en parasittinfeksjon og/eller angrep i samsvar med et av kravene 13-15, hvor nevnte alkadienalforbindelse injiseres intraperitonealt.
17. Alkadienal i samsvar med krav 13 for anvendelse i behandling og/eller profylakse av en parasittinfeksjon og/eller angrep i samsvar med et av kravene 13-16, hvor nevnte alkadienal forbindelse injiseres i en mengde korresponderende til 0,1 ml av 0,5 mg/l til 60 mg/l av nevnte alkadienal per dag, fortrinnsvis en konsentrasjon av mindre enn 28 mg/l/dag.
18. Alkadienal i samsvar med krav 13 for anvendelse i behandling og/eller profylakse av en parasittinfeksjon og/eller angrep i samsvar med et av kravene 13-15, hvor nevnte alkadienal forbindelse administreres oralt.
19. Anvendelse av et for i samsvar med et av kravene 1-12 for oppdrett av fisk.
20. Anvendelse av et alkadienal, som fortrinnsvis er et alkadien hvor enheten av nevnte alkadienal inneholder 6 til 16 karboner, mer fortrinnsvis 7 til 12 karboner, mer fortrinnsvis et alkadienal er et dekadienal, enda mer fortrinnsvis et 2-4-dekadienal, mest foretrukket et trans-trans-2-4-dekadienal for produksjon av et biokativt for og/eller et medikament for profylakse og/eller behandling av en sykdom forårsaket av en (ekto)parasitt i et dyr.
21. Fremgangsmåte for fremstilling av et for i samsvar med et av kravene 1-12,karakterisert vedat nevnte alkadienal oppløses i et oppløsningsmiddel og deretter belegges på og/eller tilsettes til foret.
22. Fremgangsmåte for å hindre en infeksjon og/eller angrep av lus i fisk,karakterisert vedat nevnte fisk fores med et for omfattende et alkadienal, som fortrinnsvis er et alkadien hvor enheten av nevnte alkadienal inneholder 6 til 16 karboner, mer fortrinnsvis 7 til 12 karboner, mer fortrinnsvis at nevnte alkadienal er et dekadienal, enda mer foretrukket et 2-4-dekadienal, og mest foretrukket en trans- trans-2-4-dekadienal og/eller at nevnte fisk injiseres med en sammensetning omfattende nevnte alkadienal.
23. Fremgangsmåte i samsvar med krav 22,karakterisert vedat konsentrasjonen av trans-trans-2-4-dekadienal i foret er minst 0,009 vekt % av våtvekten av foret.
24. Fremgangsmåte i samsvar med krav 22,karakterisert vedat mengden innsatt trans-trans-2-4-dekadienal er minst 0,052 ml/fisk, fortrinnsvis fra 0,052 mg til 0,311 mg/fisk.
25. Fremgangsmåte i samsvar med et av kravene 22- 24,karakterisertved at fisken fores med nevnte for i minst 4 dager, fortrinnsvis i en periode på mellom 4 og 12 dager.
26. Anvendelse av et alkadienal, som fortrinnsvis er et alkadien hvor en enhet av nevnte alkadienal inneholder 6 til 16 karboner, mer fortrinnsvis 7 til 12 karboner, mer fortrinnsvis at nevnte alkadienal er et dekadienal, enda mer foretrukket en 2-4-dekadienal, mest foretrukket en trans-trans-2-4-dekadioenal, eller et fiskefor omfattende nevnte alkadienal, for å inhibere eversjon av frontalt filament i lus kopepodider og/eller for å redusere modning, reproduktiv evne av lus og/eller for forekomst av lus larver.
27. Anvendelse av alkadienal i samsvar med krav 26 eller et fiskefor omfattende nevnte alkadienal for å redusere antallet lus i neuplius II utviklingsfase, idet det fores til en fisk i minst 12 dager.
NO20100446A 2010-03-26 2010-03-26 Fôrsammensetning NO20100446A1 (no)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NO20100446A NO20100446A1 (no) 2010-03-26 2010-03-26 Fôrsammensetning
PCT/NO2011/000107 WO2011119048A1 (en) 2010-03-26 2011-03-28 Feed composition for preventing infection or infestation of a parasite in fish

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NO20100446A NO20100446A1 (no) 2010-03-26 2010-03-26 Fôrsammensetning

Publications (1)

Publication Number Publication Date
NO20100446A1 true NO20100446A1 (no) 2011-09-27

Family

ID=44123512

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20100446A NO20100446A1 (no) 2010-03-26 2010-03-26 Fôrsammensetning

Country Status (2)

Country Link
NO (1) NO20100446A1 (no)
WO (1) WO2011119048A1 (no)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103404689A (zh) * 2013-08-19 2013-11-27 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 利用响应曲面优化水产饲料中蛋白与脂肪配比的方法
DK3344065T5 (da) * 2015-09-04 2023-02-13 Ewos Innovation As Fodersammensætning til forebyggelse og behandling af parasitinfektion af fisk

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH10139602A (ja) * 1996-11-14 1998-05-26 Nof Corp 害虫忌避剤
WO1999046986A1 (en) * 1998-03-20 1999-09-23 The United States Of America, Represented By The Secretary Of Agriculture An ant repellent

Also Published As

Publication number Publication date
WO2011119048A1 (en) 2011-09-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20080026083A1 (en) Antimicrobial and pesticidal compositions and methods comprising reduced monoterpene oil extracted from myrtaceae
Hakalahti et al. Efficacy of emamectin benzoate in the control of Argulus coregoni (Crustacea: Branchiura) on rainbow trout Oncorhynchus mykiss
Tucker et al. An investigation into the larval energetics and settlement of the sea louse, Lepeophtheirus salmonis, an ectoparasitic copepod of Atlantic salmon, Salmo salar
Rostás et al. Induction of systemic acquired resistance in Zea mays also enhances the plant’s attractiveness to parasitoids
Becerra et al. Wolbachia-free heteropterans do not produce defensive chemicals or alarm pheromones
Walker et al. Organochlorine insecticide residues in wild birds in Britain
Tan Sex pheromone components in defense of melon fly, Bactrocera cucurbitae against Asian house gecko, Hemidactylus frenatus
CN114557359A (zh) 一种用于防治松材线虫病的农药组合物及其复配制剂和应用
US20230285490A1 (en) Additive to fish food comprising two plant extracts and a seaweed (palmaria palmata) extract as taste masking agent; and a method to combat/eliminate infestations of caligus by sterilization of female individuals in fish farming centers and marine concessions
Bisseleua et al. Toxicity, growth regulatory and repellent activities of medicinal plant extracts on Musca domestica L.(Diptera: Muscidea)
Kaczmarek et al. Octanoic acid kills Lucilia sericata (Diptera: Calliphoridae) by affecting two major defence systems: cuticular free fatty acids and immunocompetent cells
NO20100446A1 (no) Fôrsammensetning
NO333012B1 (no) Anvendelse av nellikolje mot fiskelus.
CN101984828A (zh) 一种复配杀虫剂
Ishikawa et al. 2-Phenylethanol: an attractant for the onion and seed-corn flies, Hylemya antiqua and H. platura (Diptera: Anthomyiidae)
Mafi et al. Biology of Chrysocharis pentheus, an endoparasitoid wasp of the citrus leafminer Phyllocnistis citrella Stainton
Yasuda et al. A supplemental component of aggregation attractant pheromone in the bean bug Riptortus clavatus (Thunberg)(Heteroptera: Alydidae), related to food exploitation
Kumar Effect of Medicinal plant Potentilla fulgens against fecundity, hatchability and survival of Fasciola host snail Indoplanorbis exustus
CN114304185A (zh) 一种蝗虫提取物及其应用
CN117426382A (zh) 用于防治草地贪夜蛾的食诱剂及其制备方法与应用
Mohammed Abed Falhi Al-Murmidhi et al. The toxicity of phenolic compounds to some plants in the cumulative loss of the adult stages of domestic flies. Musca domestica (Diptera: Muscidae)
NO347932B1 (no) Forbindelse og sammensetning for kontroll av parasitter
Al-Janae'e et al. Efficacy of some aromatic plant extracts on treating the eggs of the common carp (Cyprinus carpio L.) against fungal infection in comparison with traditional fungicide malachite green
Wahyudi et al. THE EFFECT OF CORN SILK EXTRACT (Zea mays) AS BIOLARVICIDES OF Aedes aegypti MOSQUITO LARVAE IN EFFORTS TO CONTROL SPREAD OF DENGUE HEMORRHAGIC FEVER
Řehulka Determining the optimum doses of Kurasan (ethoxiquinolin) and butylhydroxytoluol (BHT) in dry pellets: effect of both anti‐oxidants on some haematological and condition parameters of rainbow trout, Salmo gairdneri Richardson

Legal Events

Date Code Title Description
FC2A Withdrawal, rejection or dismissal of laid open patent application