NL8400312A - Optisch aktief gesubstitueerd boterzuuramide alsmede werkwijze voor de optische scheiding van gesubstitueerd boterzuuramide. - Google Patents
Optisch aktief gesubstitueerd boterzuuramide alsmede werkwijze voor de optische scheiding van gesubstitueerd boterzuuramide. Download PDFInfo
- Publication number
- NL8400312A NL8400312A NL8400312A NL8400312A NL8400312A NL 8400312 A NL8400312 A NL 8400312A NL 8400312 A NL8400312 A NL 8400312A NL 8400312 A NL8400312 A NL 8400312A NL 8400312 A NL8400312 A NL 8400312A
- Authority
- NL
- Netherlands
- Prior art keywords
- amino
- amide
- dimethylbutyric
- acid
- acid amide
- Prior art date
Links
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 title claims description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 12
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 title description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims description 16
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 14
- 241000187469 Mycobacterium neoaurum Species 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 241001494009 Mycobacterium neoaurum ATCC 25795 Species 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 12
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 9
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 9
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 5
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 3
- 108700023418 Amidases Proteins 0.000 description 2
- 102000004400 Aminopeptidases Human genes 0.000 description 2
- 108090000915 Aminopeptidases Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000589776 Pseudomonas putida Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 2
- 125000000266 alpha-aminoacyl group Chemical group 0.000 description 2
- 102000005922 amidase Human genes 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- GPYTYOMSQHBYTK-LURJTMIESA-N (2s)-2-azaniumyl-2,3-dimethylbutanoate Chemical compound CC(C)[C@](C)([NH3+])C([O-])=O GPYTYOMSQHBYTK-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- LZYQGRPLRDSXLC-UHFFFAOYSA-N 2-(5-butylpyridin-2-yl)-4-methyl-4-propan-2-yl-1h-imidazol-5-one Chemical compound N1=CC(CCCC)=CC=C1C1=NC(=O)C(C)(C(C)C)N1 LZYQGRPLRDSXLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RJNKBEQRBIJDNM-UHFFFAOYSA-N 2-acetamido-3-(4-hydroxyphenyl)propanamide Chemical compound CC(=O)NC(C(N)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 RJNKBEQRBIJDNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710099461 Aminopeptidase N Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108090000317 Chymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000001557 animal structure Anatomy 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 108010079058 casein hydrolysate Proteins 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229960002376 chymotrypsin Drugs 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/006—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by reactions involving C-N bonds, e.g. nitriles, amides, hydantoins, carbamates, lactames, transamination reactions, or keto group formation from racemic mixtures
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/863—Mycobacterium
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
" * _φ JAS/MH/JB/WP/ag * STAMICARBON B.V., LICENSING SUBSIDIARY OF DSM Uitvinders: Wilhelmus H-J. Boesten, te Sittard Peter J.H. Peters, te Geleen -l- PN 3533
OPTISCH AKTIEF GESUBSTITUEERD BOTERZUURAMIDE ALSMEDE WERKWIJZE VOOR DE OPTISCHE SCHEIDING VAN GESUBSTITUEERD BOTERZUURAMIDE
De uitvinding heeft betrekking op de verbinding D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide. Deze verbinding is als optisch aktieve verbinding nieuw- De uitvinding heeft eveneens betrekking op een werkwijze voor de bereiding van D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide 5 en/of van L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur. Deze verbindingen kunnen tevens D-a-methylvalineamide respectievelijk L-a-methylvaline worden genoemd.
Het is bekend dat bepaalde enzymen in staat zijn om in . waterig milieu a-aminozuuramiden te hydrolyseren tot a-aminozuren.
10 Deze zogenaamde a-aminoacylamidasen (α-aminoacylpeptide hydrolase EC 3-4-11), ook wel aminopeptidasen genoemd, vertonen, zoals de meeste enzymen, een zeer stereo-speclfieke werking en bewerken alleen de hydrolyse van L-a-aminozuuramiden- D-a-aminozuuramiden worden in het geheel niet of uitermate langzaam gehydrolyseerd· 15 Aminoacylamidasen kunnen onder andere worden toegepast voor de optische splitsing van aminozuren, door een DL-a-aminozuuramide in aanraking te brengen met het aminoacylamidase en het door hydrolyse gevormde L-a-aminozuur en/of het D-a-aminozuuramide te isoleren, zie Greenstein & Winitz ’Chemistry of the amino-acids’ vol 3 pp 1778-1781 20 (New York 1961).
Uit de ter inzage gelegde Nederlandse octrooiaanvrage 7513551 is het bekend om DL-aminozuuramiden te splitsen in de overeenkomstige D-aminozuuramiden en L-aminozuren in aanwezigheid van een aminopep-tidase preparaat verkregen uit een cultuur van Pseudomonas putida-25 In het algemeen verloopt echter de optische scheiding van 8400312 r I Ή «Λ * , \ t -2- a-aminozuuramiden die een α-methylgroep bezitten niet zo eenvoudig.
Zo is in Tetrahedron Letters Vol 23, No. 33 pp 3335-3336 (1982) beschreven dat door de invoering van een α-methylgroep in een goed * substraat voor chymotrypsine, bijvoorbeeld acetyl-L-tyrosineamide, de 5 enzymatische hydrolysesnelheid hiervan met een factor 1C)5 afneemt. Deze afname zou te maken hebben met een ongunstige oriëntatie van de te splitsen binding ten opzichte van het actieve centrum (sterische hindering ten gevolge van de methylgroep). Verder is het aanvraagster gebleken dat splitsing van DL-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide in 10 aanwezigheid van een aminoacylamidase bevattend preparaat afkomstig uit Pseudomonas putida niet optreedt.
Het doel van de uitvinding is gelegen in het vinden van een enzymbevattend preparaat dat in staat is selectief DL-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide te splitsen in D-2-amino-2,3-dimethyl-boter-15 zuuramide en L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur. De uitvinding is gebaseerd op de toepassing van een dergelijk preparaat.
De werkwijze volgens de uitvinding voor de bereiding van D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide en van L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur is hierdoor gekenmerkt, dat men een waterige oplossing van 20 DL-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide in aanraking brengt met een aminoacylamidase bevattend preparaat verkregen uit een cultuur van Mycobacterium neoaurum en vervolgens uit het verkregen hydrolyse-mengsel D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide en/of L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur wint.
25 Bij de enzymatische hydrolyse van DL-2-amino-2,3-dimethyl- boterzuuramide volgens de uitvinding wordt vrijwel uitsluitend de L-vorm gehydrolyseerd, zodat het hydrolysemengsel in hoofdzaak het D-amide en het L-zuur bevat. De opwerking van het hydrolysemengsel tot het D-amide en/of het L-zuur kan op op zichzelf bekende wijze plaats-30 vinden, bijvoorbeeld door toepassing van een selectief oplosmiddel of door kristallisatie. Men kan de opwerking van het D-amide en/of het L-zuur doorvoeren totdat deze verbindingen in kristalvorm zijn verkregen. Ook kan men deze verbindingen tot oplossing of suspensie opwerken.
35 D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide kan worden toegepast 8400312 j? .....-« -3- als functionele groep in de bereiding van herbiciden van het type 2-(5-butyl-2-pyridyl)-5-isopropyl-5-methyl-2-imidazoline-4-on zoals bijvoorbeeld is beschreven in de ter inzage gelegde Europese octrooiaanvrage 41623 in voorbeeld 17.
5 L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur racemiseert niet bij normale reacties. Hierdoor is het goed mogelijk om bijvoorbeeld het N-acyl-derivaat van dit L-zuur te bereiden en dit toe te passen als optisch actieve hulpstof voor diastereoisomere zoutvorming.
Enzympreparaten met a-aminoacylamide activiteit kunnen 10 verkregen worden uit dierlijke organen zoals bijvoorbeeld runderogen of varkensnieren, of langs microbiologische weg. Het a-aminoacyl-amidase kan volgens de uitvinding in het algemeen gebruikt wórden in zuivere vorm of als een ruw preparaat. Desgewenst kan het enzym worden geïmmobiliseerd door absorptie op of chemische binding aan een drager.
15 Bijzonder geschikt voor de bereiding van preparaten met α-aminoacylamidase activiteit volgens de uitvinding is Mycobacterium neoaurum ATCC 25795.
Mycobacterium neoaurum kan gekweekt worden in de gebruikelijke media. Het is van voordeel om aan een dergelijk medium een 20 gebruikelijk gistextract toe te voegen ter verhoging van de opbrengst van de kweek, alsmede L- of DL-2-amino-2,3-dimethylboterzuuramide.
Naar alle waarschijnlijkheid wordt het enzym met aminoacyl-amidase activiteit intracellulair geproduceerd. Een aanwijzing hiervoor is dat het medium waarin Mycobacterium neoaurum werd gekweekt 25 nauwelijks a-aminoacylamidase activiteit vertoonde. Voor toepassing van dit enzym kan men gebruik maken van al dan niet gevriesdroogde hele cellen. Ook kan de celwand op gebruikelijke wijze doorlaatbaar worden gemaakt, waardoor de hydrolyse efficiënter kan verlopen. Verder is het mogelijk om gebruik te maken van een celvrij extract. Desge-30 wenst kan het enzym op verder bekende wijze in zuivere vorm uit het celvrije extract gewonnen worden. Bij bovengenoemde toepassingsvormen van het enzym kan gebruik worden gemaakt van bekende immobilisatie technieken zoals bijvoorbeeld beschreven in 'Applied Biochemistry and Bioengineering* Vol 1 (1976) en Vol 4 (1983), Academie Press.
35 De hydrolyse kan uitgevoerd worden bij een temperatuur tussen 8400312 -4- ‘ * ' "a \ 0°C en 60° C, bij voorkeur tussen 20°C en 45°C, en bij een pH tussen 8 en 11,5 omdat onder deze condities de hydrolyse het snelst verloopt.
De duur van de hydrolyse kan variëren van bijvoorbeeld 10-100 uur. Bij langdurige hydrolyse is het echter mogelijk dat toch enig 5 D-amide wordt gehydrolyseerd tot het overeenkomstige D-zuur.
De uitvinding zal nader worden toegelicht aan de hand van de volgende voorbeelden.
Voorbeelden
Bereiding van een cultuur van Mycobacterium neoaurum ATCC
10 25795.
In een 10 liter fermentor werden per 1000 ml water 10 g glucose, 2 g gistextract (in de handel verkrijgbaar als Difco 0127-01), 2 g casitone (Difco 0259-02), 1 g beefextract (Difco 0126-01), 1,5 g DL-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide, 1 g van een oppervlakte 15 actieve verbinding in de handel verkrijgbaar onder de naam Tween 80 en 5 g K2HPO4 gebracht en werd het geheel op pH 7,2 gebracht. Na steriliseren gedurende 40 minuten bij 110°C en na afkoelen tot 30-40°C werd de fermentor geënt met 500 ml voorkweek van Mycobacterium neoaurum ATCC 25795 (zelfde medium) en werd gedurende 80 uur geroerd bij 20 30-40°C. De pH werd hierbij constant gehouden op 7,2 met 1 N NaOH of met 1 N H2SO4, afhankelijk van de richting van de pH verandering.
Na deze kweekperiode werden de verkregen cellen gecentrifugeerd en 2x gewassen met gedestilleerd water. Vervolgens werden de cellen binnen 1 uur bij -80°C ingevroren en gevriesdroogd. De 25 opbrengst aan gevriesdroogde cellen bedroeg 3 gram/liter.
Voorbeeld I
Aan een oplossing van 200,0 g DL-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide (1,54 mol) in 1800 ml gedestilleerd water (pH is 10,7) werd 30,0 g Mycobacterium neoaurum ATCC 25795 als boven verkregen in 30 de vorm van gevriesdroogde cellen toegevoegd. Vervolgens werd gedurende 72 uur geroerd bij 37°C. Het aldus verkregen hydrolyse-mengsel werd gecentrifugeerd teneinde het aanwezige celmateriaal te verwijderen. Het verkregen heldere waterige supernatans werd na decan- 8400312 « -5- teren ingedampt bij 50°C en 16 mbar. Het aldus verkregen indampresidu (192,1 g) werd gedurende 90 minuten geroerd met 600 ml dichloor-methaan. Daarbij loste D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide wel in dichloormethaan op en L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur niet. De 5 gevormde suspensie werd gefiltreerd over een glasfilter en op het filter met 4 x 100 ml dichloormethaan gewassen. Vervolgens werd het filtraat ingedampt bij 40°G en 16 mbar. De opbrengst aan' D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur-amide bedroeg 92,3 g (0,71 mol). Het rendement aan, via dunnelaagchromatografie (TLC) bepaalde, zuiver 10 D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide was 92,3 %. De specifieke rota tie van het D-2-amino-2,3-dimethylboterzuuramide bedroeg: 20 [a]D * + 26,5° (C* 2,0; water)
Om de optische zuiverheid en de configuratie te bepalen werd 15 6,5 g D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide (0,05 mol) in 260 ml 6 N
zoutzuur gedurende 64 uur bij 90°C gehydrolyseerd. Het zure hydroly-saat werd vervolgens bij 50°C en 16 mbar ingedampt, waarna het residu werd opgelost in 200 ml water. De aldus verkregen oplossing werd over een sterk basische ionenwisselaar van 200 ml (in de handel verkrijg-20 baar onder de naam Dowex 1) geleid. De ionenwisselaar werd gewassen met 650 ml gedestilleerd water en het door hydrolyse gevormde D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur werd geëlueerd met 250 ml 6 N azijnzuur. De ionenwisselaar werd nog nagewassen met 400 ml gedestilleerd water. Indampen van het azijnzure eluaat bij 40°C en 16 mbar leverde 25 6,6 g indampresidu op. Dit residu werd opgeroerd met 100 ml aceton en werd vervolgens gefiltreerd over een glasfilter. Het residu werd op het filter nog gewassen met 4 x 25 ml aceton. Na drogen bij 50°C en 16 mbar werd 6,4 g D-2-amino-2,3-dimethyl-bo ter zuur gevonden (rendement 97,7 %).
30 De specifieke rotatie van dit, volgens TLC-zuivere D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur bedroeg: 25 [a]D * + 4,0° (C= 1,31; water)
In J. Org. Chem. vol. 40, No. 7, pag. 954 (1975) staat een 35 specifieke rotatie 25 [a]p + 3,9° (C= 1,31; water) vermeld.
8400312 -6- 1 ' Λ, V*· ν %
De optische zuiverheid van het D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur is derhalve hoger dan tot nu toe in de literatuur vermeld.
Vergelijkend voorbeeld I
Voorbeeld I wérd herhaald met 30,0 g gevriesdroogd 5 Pseudomonas putida ATCC 12633 als enzymbron. De pH werd ingesteld op 9,0 en vervolgens werd gedurende 72 uur geroerd bij 40°C. Middels TLC en HPLC kon geen L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur worden aangetoond.
Voorbeeld II
Een oplossing van 20,8 g DL-2-amino-2,3-dimethyΙ-ΙΟ boterzuuramide (0,16 mol) in 350 ml gedestilleerd water (pH is 10,7) werd met 1,8 ml zwavelzuur (96 gew.Z) ingesteld op pH 8,5. Aan deze oplossing werd 2,0 g Mycobacterium neoaurum ATCC 25795 in de vorm van gevriesdroogde cellen toegevoegd, waarna gedurende 65 uur bij 40°C werd geroerd. Vervolgens werd het verkregen hydrolysemengsel 15 gefiltreerd over een glasfilter om de celresten te verwijderen. Het filtraat werd over een sterk basische ionenwisselaar van 200 ml (in de handel verkrijgbaar onder de naam Dowex 1) geleid en er werd met 300 ml gedestilleerd water geëlueerd. Indamping van het eluaat bij 50°C en 16 mbar leverde 10,2 g (0,078 mol) D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur-20 amide op. Dit produkt bleek volgens TLC analyse zuiver te zijn. Het rendement bedroeg 98,1 %.
De specifieke rotatie van het gevormde D-2-amino-2,3-dimethy1-boterzuuramide was: 20 25 [cc]d = + 26,4° (C= 2,0; water) 20
Gegeven de maximale [a]D uit voorbeeld 1 laat zich op eenvoudige wijze de selectiviteit berekenen:
Selectiviteit als % D-amide= 30 20 [oc]d · 50% 50 % + - = 50 % + 26,4 . 50% = 99,8 %.
20 - L<*]d max 26,5 8400312 -7- * · ?! _ -+ t
Het door de hydrolyse gevormde L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur werd van de sterk basische ionenwisselaar geëlueerd met 250 ml 4 N azijnzuur. Na wassen van de ionenwisselaar met 250 ml gedestilleerd water werd het zure eluaat ingedampt bij 40°C en 16 5 mbar. Het indampresidu (10,4 g) werd geroerd met 100 ml aceton en gefiltreerd over een glasfilter. De opbrengst aan L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur bedroeg 10,3 g. (TLC-zuiver, rendement 99,0 %).
De specifieke rotatie van het gevormde L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur was: 10 20 [a]D * “ 3,4° (C* 1,31; water).
Selectiviteit als L-zuur: 93,6 %· Deze is berekend op de wijze als boven beschreven voor het D-amide. Als 20 15 [a] voor het D-zuur werd van de uit de literatuur bekende -3,9°
Dmax voor het L-zuur uitgegaan.
De meting dat het L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur niet volledig optisch 'zuiver is, wordt vermoedelijk veroorzaakt door de lange reactieduur in dit voorbeeld. Hierdoor wordt toch enig D-amide 20 enzymatisch gehydrolyseerd tot het D-zuur. Dit D-zuur komt in de opwerking terecht in de fractie waarin zich ook het L-zuur bevindt.
8400312
Claims (8)
1. D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide.
2. Werkwijze voor de bereiding van D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur-amide en/of van L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur, met het kenmerk, dat men een waterige oplossing van DL-2-amino-2,3-dimethyl- 5 boterzuuramide in aanraking brengt met een aminoacylamidase bevat tend preparaat verkregen uit een cultuur van Mycobacterium neoaurum en vervolgens uit het verkregen hydrolysemengsel D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide en/of L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur wint.
3. Werkwijze volgens conclusie 2, met het kenmerk, dat men de hydro lyse uitvoert bij een pH van 8 - 11,5 en bij een temperatuur van 20-45°C.
4. Werkwijze volgens een der conclusies 2-3, met het. kenmerk, dat men Mycobacterium neoaurum toepast in de vorm van gevriesdroogde 15 cellen.
5. Werkwijze volgens een der conclusies 2-4, met het kenmerk, dat men Mycobacterium neoaurum ATCC 25795 toepast.
6. Werkwijze zoals in hóofdzaak is beschreven en/of in de voorbeelden nader is toegelicht. 20
7. D-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuuramide verkregen onder toepassing van de werkwijze zoals beschreven in ëên der conclusies 2-6.
8. L-2-amino-2,3-dimethyl-boterzuur verkregen onder toepassing van de werkwijze zoals beschreven in êên der conclusies 2-6. §400312
Priority Applications (11)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL8400312A NL8400312A (nl) | 1984-02-02 | 1984-02-02 | Optisch aktief gesubstitueerd boterzuuramide alsmede werkwijze voor de optische scheiding van gesubstitueerd boterzuuramide. |
| US06/693,352 US4812403A (en) | 1984-02-02 | 1985-01-22 | Optically active substituted butyramide, and process for the optical separation of substituted butyramide |
| EP85100985A EP0150854B1 (en) | 1984-02-02 | 1985-01-31 | Process for the optical separation of substitute butyramide |
| CA000473265A CA1239609A (en) | 1984-02-02 | 1985-01-31 | Optically active substituted butyramide, and process for the optical separation of substituted butyramide |
| DE8585100985T DE3563046D1 (en) | 1984-02-02 | 1985-01-31 | Process for the optical separation of substitute butyramide |
| JP60016731A JPS60188355A (ja) | 1984-02-02 | 1985-02-01 | Ｄ−２−アミノ−２，３−ジメチルブチルアミドおよびｄ−２−アミノ−２，３−ジメチルブチルアミドおよび／またはｌ−２−アミノ−２，３−ジメチル酪酸の製法 |
| MX8511445U MX7274E (es) | 1984-02-02 | 1985-02-01 | Procedimiento para la hidrolisis enzimatica de amidas del acido dl-amino |
| ES540084A ES8602565A1 (es) | 1984-02-02 | 1985-02-01 | Procedimiento de preparar d-2-amino-2,3-dimetilbutiramida y-o acido l-2-amino-2,3-dimetilbutirico |
| DK46685A DK46685A (da) | 1984-02-02 | 1985-02-01 | Optisk aktiv substitueret butyramid, og fremgangsmaade til den optiske adskillelse af substitueret butyramid |
| HU85404A HUT37462A (en) | 1984-02-02 | 1985-02-01 | Process for preparing optically active butyramide derivatives |
| BR8500475A BR8500475A (pt) | 1984-02-02 | 1985-02-01 | Composto e processo para a preparacao de d-2-amino-2,3-dimetil-butiramida e/ou acido l-2-amino-2,3-dimetilbutirico |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL8400312 | 1984-02-02 | ||
| NL8400312A NL8400312A (nl) | 1984-02-02 | 1984-02-02 | Optisch aktief gesubstitueerd boterzuuramide alsmede werkwijze voor de optische scheiding van gesubstitueerd boterzuuramide. |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NL8400312A true NL8400312A (nl) | 1985-09-02 |
Family
ID=19843414
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL8400312A NL8400312A (nl) | 1984-02-02 | 1984-02-02 | Optisch aktief gesubstitueerd boterzuuramide alsmede werkwijze voor de optische scheiding van gesubstitueerd boterzuuramide. |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4812403A (nl) |
| EP (1) | EP0150854B1 (nl) |
| JP (1) | JPS60188355A (nl) |
| BR (1) | BR8500475A (nl) |
| CA (1) | CA1239609A (nl) |
| DE (1) | DE3563046D1 (nl) |
| DK (1) | DK46685A (nl) |
| ES (1) | ES8602565A1 (nl) |
| HU (1) | HUT37462A (nl) |
| MX (1) | MX7274E (nl) |
| NL (1) | NL8400312A (nl) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL8403093A (nl) * | 1984-10-11 | 1986-05-01 | Stamicarbon | Werkwijze voor de enzymatische hydrolyse van d-alfa-aminozuuramiden. |
| FR2626288B1 (nl) * | 1988-01-27 | 1990-05-18 | Rhone Poulenc Sante | |
| FR2626289B1 (fr) * | 1988-01-27 | 1990-06-08 | Rhone Poulenc Sante | Procede de preparation d'acides aryl-2 alkanoiques optiquement actifs |
| DE3816063A1 (de) * | 1988-05-06 | 1989-11-23 | Schering Ag | Verfahren zur herstellung von l-aminosaeuren und aminosaeure-amiden |
| US5283193A (en) * | 1988-06-27 | 1994-02-01 | Asahi Kasei Kogyo K.K. | Process for producing optically active α-substituted organic acid and microorganism and enzyme used therefor |
| FR2655660B1 (fr) * | 1989-12-11 | 1992-03-20 | Rhone Poulenc Sante | Nouveaux polypeptides, sequences d'adn permettant leur expression, procede de preparation et leur utilisation. |
| RU2231553C2 (ru) * | 2001-12-11 | 2004-06-27 | Андрюшина Валентина Александровна | Штамм бактерий mycobacterium neoaurum и способ его использования для получения андрост-4-ен-3,17-диона из стеринов растительного и животного происхождения |
| CN102776252B (zh) * | 2010-06-21 | 2014-07-02 | 浙江工业大学 | 微生物催化制备2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺的方法及菌株 |
| CN102776253B (zh) * | 2010-06-21 | 2014-08-06 | 浙江工业大学 | 微生物催化法制备2-氨基-2,3-二甲基丁酰胺的方法及菌株 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL181508C (nl) * | 1974-06-14 | 1987-09-01 | Stamicarbon | Werkwijze voor de bereiding van een d-aminozuuramide en een l-aminozuur en werkwijze voor de bereiding van d-fenylglycine. |
| US4017510A (en) * | 1975-11-12 | 1977-04-12 | American Cyanamid Company | Imidazoisoindolediones and the use thereof as herbicidal agents |
| LU74142A1 (nl) * | 1976-01-08 | 1977-07-22 | ||
| FR2447359A1 (fr) * | 1979-01-24 | 1980-08-22 | Anvar | Procede de preparation d'acides a-amines optiquement actifs par hydrolyse biologique de nitriles ou d'amides a-amines |
| JPS5713000A (en) * | 1980-06-24 | 1982-01-22 | Ube Ind Ltd | Preparation of optical active tryptophane |
| JPS57186495A (en) * | 1981-05-14 | 1982-11-16 | Ube Ind Ltd | Preparation of l-alpha-methylphenylalanine |
| JPS5956371A (ja) * | 1982-09-25 | 1984-03-31 | Japan Storage Battery Co Ltd | 密閉式ニツケルカドミウム電池 |
-
1984
- 1984-02-02 NL NL8400312A patent/NL8400312A/nl not_active Application Discontinuation
-
1985
- 1985-01-22 US US06/693,352 patent/US4812403A/en not_active Expired - Fee Related
- 1985-01-31 DE DE8585100985T patent/DE3563046D1/de not_active Expired
- 1985-01-31 CA CA000473265A patent/CA1239609A/en not_active Expired
- 1985-01-31 EP EP85100985A patent/EP0150854B1/en not_active Expired
- 1985-02-01 BR BR8500475A patent/BR8500475A/pt unknown
- 1985-02-01 MX MX8511445U patent/MX7274E/es unknown
- 1985-02-01 HU HU85404A patent/HUT37462A/hu unknown
- 1985-02-01 DK DK46685A patent/DK46685A/da not_active Application Discontinuation
- 1985-02-01 JP JP60016731A patent/JPS60188355A/ja active Pending
- 1985-02-01 ES ES540084A patent/ES8602565A1/es not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES540084A0 (es) | 1985-12-01 |
| EP0150854B1 (en) | 1988-06-01 |
| JPS60188355A (ja) | 1985-09-25 |
| DK46685A (da) | 1985-08-03 |
| US4812403A (en) | 1989-03-14 |
| BR8500475A (pt) | 1985-09-17 |
| CA1239609A (en) | 1988-07-26 |
| EP0150854A2 (en) | 1985-08-07 |
| ES8602565A1 (es) | 1985-12-01 |
| HUT37462A (en) | 1985-12-28 |
| EP0150854A3 (en) | 1985-08-14 |
| DK46685D0 (da) | 1985-02-01 |
| MX7274E (es) | 1988-03-25 |
| DE3563046D1 (en) | 1988-07-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4080259A (en) | Process of preparing L and D α-amino acids by enzyme treatment of DL-α-amino acid amide | |
| JP3018261B2 (ja) | 共役酵素反応によるｌ−ホスフィノトリシンの製造方法 | |
| EP0249188A2 (en) | Process for the production of L-2-amino-4-(hydroxymethyl-phosphinyl)-butyric acid | |
| Sano et al. | Enzymatic Production of l-Tryptophan from l-and dl-5-Indolyl-methylhydantoin by Newly Isolated Bacterium | |
| NL8400312A (nl) | Optisch aktief gesubstitueerd boterzuuramide alsmede werkwijze voor de optische scheiding van gesubstitueerd boterzuuramide. | |
| US4668625A (en) | Process for preparing peptides | |
| JPS592694A (ja) | 遊離Ｌα−アミノ酸の製造法 | |
| US5219731A (en) | Method for preparing optically-active amino acid derivatives | |
| US5756346A (en) | Process for the enzymatic resolution of 2-amino-4-methyl-phosphinobutyric acid derivatives | |
| US4237227A (en) | Process for preparing D-N-carbamoyl-α-amino acids | |
| GB2042531A (en) | Process for preparing D-???-amino acids | |
| JPS61119198A (ja) | 複合酵素系を使用するｎ‐アシルアミノ酸エステルのエナンチオ選択性加水分解 | |
| GB2092161A (en) | Preparation of Amino Protected-L-aspartyl-L-phenylalanine Alkyl Ester | |
| EP0154472B1 (en) | Process for the production of l-aspartyl-l-phenylalanine ester | |
| JP3160879B2 (ja) | 光学活性アミノ酸誘導体の製法 | |
| US20030219879A1 (en) | Method for producing D-allo -isoleucine | |
| CA1339674C (en) | Enzymatic l-aspartyl-l-phenylalanine alkyl ester production | |
| JPH01320991A (ja) | Ｄ−ホモフエニルアラニン類の製造方法 | |
| JP3155448B2 (ja) | Ｌ−アミノ酸またはその塩の製造方法 | |
| JP2674078B2 (ja) | Ｄ−α−アミノ酸の製造法 | |
| JPS61274690A (ja) | Ｄ−α−アミノ酸の製造方法 | |
| JP2728465B2 (ja) | Ｌ−ホモフエニルアラニンの製造法 | |
| JPS60184392A (ja) | Ｄ−α−アミノ酸の製造方法 | |
| US6780633B2 (en) | Methods for producing optically active amino acids | |
| JP2674076B2 (ja) | Ｄ−α−アミノ酸の製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A1B | A search report has been drawn up | ||
| DNT | Communications of changes of names of applicants whose applications have been laid open to public inspection |
Free format text: STAMICARBON B.V. TE GELEEN |
|
| BV | The patent application has lapsed |