NL8004338A - Spectinomycine analoga en werkwijze voor het bereiden daarvan. - Google Patents

Description

** * t

'C

Spectinomycine analoga en werkwijze voor het bereiden daarvan.

De uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor het bereiden van tussenprodukten voor de bereiding van spectinomycine en analoga daarvan. De uitvinding heeft tevens betrekking op nieuwe tussenprodukten voor de bereiding van 5 spectinomycine en analoga daarvan.

Spectinomycine is een bekend antibioticum met de formule 19) dat tot voor kort alleen langs microbiologische weg werd verkregen {zie het Amerikaans octrooischrift 3.231*.092).

Analoga van spectinomycine zijn beschreven door 10 Rosenbrook Jr. et al. in J.Antibiotics, 28, blz. 953 en 9&0 (1975) en J.Antibiotics, 3J_ï blz. 1*51 (19TS). Daarnaast zijn door Carney et al. chloordeoxyderivaten van spectinomycine beschreven in J.Antibiotics, 30, blz. 960 (1977)· Verder is door Foley et al. in J. Org. Chem., 1*3, *22 blz. 1*355-^359 (1978) melding gemaakt 15 van 9-epi-l*(R)-dihydrospectinomycine.

.In tegenstelling tot de verbindingen volgens de uitvinding wordt voor geen enkel van de spectinomycine analoga en derivaten beschreven in bovengenoemde publikaties melding gemaakt van biologische aktiviteit.

20 Een reactie die de werkwijze volgens de uitvinding het meest nabij komt is die van 3,6-di-Q-benzoyl-1-broom-1,1*-didepxy- o^-D-glycero-hex-S-enop-yranos^-ulose en methanol onder vormig van 3,6-di-0-benzoyl-1-methoxy-1 ,l*-dideoxy-oC» -D-glycero-hex-3-enopyranos-2-ulose, beschreven in de Nederlandse octrooi-25 aanvragen 8001315 en 8001205·

De werkwijze volgens de uitvinding kan worden toegepast voor de bereiding van anomeren en asterische mengsels van v 80 0 4 3 38 Λ .

2 verbindingen met de formule 1a en 1b waarin R' ^, R'2 en R'^ die gelijk of verschillend kunnen zijn waterstof, lage alkyl, acyloxyalkyl, lage halogeenalkyl, lage aninoalkyl, lage alkenyl, lage alkynyl, -0X of -(CH2)n-0X en isomeren daarvan voorstellen 5 met dien verstande dat R^, R'2 en R'^ geen hydroxy zijn.

X is waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage alkynyl.

n is 1, 2, 3 of U.

R.j is waterstof of lage alkyl.

10 R2, Rj, Rg, R^ en R^ stellen waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage alkynyl voor.

R^, R^, Rj en Rg stellen waterstof, lage alkyl, lage alkenyl, lage alkynyl of een beschermende groep voor waarbij de beschermende groep aralkoxycarbonyl, gehalogeneerd alkoxycarbonyl 15 of alkoxycarbonyl is, met dien verstande dat R^ of R^ steeds een beschermende groep is en R^ of Rg steeds een beschermende groep is.

R'^ is aroyl, lage alkyl of acyl.

A is zuurstof of zwavel.

20 B en , die gelijk of verschillend kunnen zijn stellen waterstof, hydroxy, alkoxy, o-lage alkenyl, thio, thio-lage alkyl of thio-lage alkenyl voor.

Z is halogeen.

Wanneer uit de verbindingen met de formule 1a en 1b 25 de beschermende groepen worden verwijderd, ontstaan speetinomycine-achtige verbindingen met antibacteriële aktiviteit. Methoden om de beschermende groepen te verwijderen zijn beschreven in de Amerikaanse octrooiaanvragen 020.172 (13 maart 1979) en 020.073 (13 maart 1979). In deze Amerikaanse octrooiaanvragen worden 30 tevens toepassingsmogelijkheden aangewezen voor de verbindingen waaruit de beschermende groepen zijn verwijderd.

Voor de nieuwe werkwijze voor het bereiden van de verbindingen met de formule 1a wordt verwezen naar reactie-schema A en voor de werkwijze volgens de uitvinding voor het 35 bereiden van de verbindingen met de formule 1b naar reactie- schema B.

800 4 3 38 * *· 3

In deze reactieschema's is R'^ acyl en hebben t/m R1q, R'i t/m R'^, A, B en B1 hoger aangegeven betekenis en is Z halogeen. L is een verwijderbare groet' zoals acyloxy, halogeen, o-sulfonaat, nitro of een andere groep bij verwijdering 5 waarvan in de ring onverzadigdheid ontstaat.

De werkwijze volgens de uitvinding is een nieuwe methode voor het bereiden van spectinomycine tussenprodukten beschreven in voornoemde Nederlandse octrooiaanvragen 8001315 en 8001205· In het bijzonder wordt gebruik gemaakt van een 10 suiker met een 3',1*'-ethenisch onverzadigde binding.

-(CHgJn omvat lage alkylgroepen met rechte keten en isomeren daarvan.

Lage alkyl omvat methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl, heptyl, octyl en isomeren daarvan.

15 Lage alkenyl omvat ethylideen, propylideen, butylideen, pentylideen, hexyylideen, heptylideen,octylideen en isomeren daarvan.

Lage alkynyl omvat ethynyl, propynyl, butynyl, pentynyl, hexynyl, heptynyl, octynyl en isomeren daarvan.

20 Lage alkoxy omvat methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, pentoxy, hexoxy, heptoxy, octoxy en isomeren daarvan.

Acyl omvat formyl, acetyl, propionyl, butyryl, pentonyl.en isomeren daarvan.

Aralkyl omvat benzyl, fenethyl, fenpropyl, fenbutyl, 25 fenpentyl, difenylmethyl, difenyloctyl en isomeren daarvan en fluorenylmethyl.

Lage halogeenalkyl omvat -(CH^)^-halogeen en isomeren daarvan. De groep bevat 1'- 3 halogeensubstituenten.

Lage aminoalkyl omvat de groep met de formule 7 en 30 isomeren daarvan.

Aroyl omvat benzoyl, gesubstitueerd benzoyl, nafthoyl en gesubstitueerd nafthoyl. Het aantal substituenten draagt 1 - 3 en de substituenten kunnen zijn lage alkyl, lage alkoxy, nitro en/of halogeen.

35 Gehalogeneerd alkoxycarbonyl omvat mono-, di-, tri- halogeenmethoxycarbonyl, mono-, di-, tri-halogeenethoxycarbonyl, 8004338 k mono-, tri-halogeenpropoxycarbonyl, mono-, di- tri-halogeen-butoxycarbonyl, mono-, di-, tri-halogeenpentoxycarbonyl en isomeren daarvan.

Halogeen omvat fluor, chloor, broom en jood.

5 Aralkoxycarbonyl omvat benzyloxycarbonyl,fenetoxy- carbonyl, fenpropoxycarbonyl, fenbutoxycarbonyl, fenpentoxy-carbonyl, difenylmethoxycarbonyl, 1 difenyloctoxycarbonyl en isomeren daarvan en fluorenylmethoxycarbonyl.

Alkoxycarbonyl omvat isopropyloxycarbonyl, tert.

10 butoxycarbonyl en tert.pentyloxycarbonyl.

Voor zover in de suikerrest meer dan één hydroxy of alkoxygroep aanwezig is kunnen deze gelijk of verschillend zijn.

De uitvinding heeft voorts betrekking op een werk- 15 wijze voor het bereiden van spectinomycine-achtige verbindingen.

Het belang van de stereochemie aan de glycosidiche binding, dat wil zeggen de 1'-plaats in de verbindingen met de formule 1, wordt met de werkwij ze volgens de uitvinding tot uitdrukking gebracht.

20 Met ol - en /3 -anomeer wordt bedoeld dat de substituent l op de 1'-plaats in de verbindingen met de formule 1 zich respectievelijk achter en voor het vlak van het ringsysteem bevindt.

Met β -anomeer worden in het bijzonder anomeren bedoeld met de C—1 * configuratie overeenkomstig met spectinomycine.

25 Actinamines en actinaminederivaten omvatten amino- cyclitolen met de formule 6.

Suikers omvatten pyranen, natuurlijke en synthetische suikers, chiralen en achiralen.

Verbindingen waaruit de beschermende groepen zijn 30 verwijderd en biologische aktiviteit vertonen zijn -anomeren van verbindingen met de formule 1. Deze glycosidische configuratie is aanwezig in spectinomycine (formule 19). Om biologisch aktieve analoga van spectinomycine te verkrijgen is derhalve adekwate selectiviteit op de 1'-plaats gewenst.

35 Hoewel in stap 1 van de werkwijze volgens de uit vinding zowel oC- als/5-anomeren kunnen ontstaan, worden de 8004338 5 β -anomeren bij voorkeur verkregen door scheiding van de ^-anomeren na elke stap. De opbrengst aan /3-anomeren kan worden verhoogd door bij de eerste koppelingsreactie een beschikbare enantiomere suiker toe te passen of door een tussennrodukt 5 of eindprodukt te epimeriseren. Verder kunnen asterische mengsels als antibacteriële middelen worden toegepast voor zover deze biologisch aktief zijn ten gevolge van de aanwezigheid van een aktief anomeer daarin.

Anomeren en asterische mengsels van een verbinding 10 omvatten analoga van spectinomycine volgens de uitvinding met antibacteriële aktiviteit. Hoewel het aktieve anomeer volgens de uitvinding de /3-configuratie bezit moet..de uitdrukking anomeren en asterische mengsels niet in beperkende zin worden verstaan omdat ook nieuwe β -anomeren aanwezig kunnen zijn zonder aan de 15 aktiviteit van een asterisch mengsel afbreuk te doen. In sommige gevallen kunnen ίΛ-anomeren worden geanomeriseerd tot de aktieve vorm van de analoga. Daarom wordt de ^-configuratie van geen enkele stap in de werkwijze volgens de uitvinding uitgesloten.

Anderzijds zijn bruikbare verbindingen volgens de 20 uitvinding die met de formule 1 die de β -configuratie vertonen omdat deze anomeren antibacteriële eigenschappen vertonen. De anomeren kunnen na elke stap van elkaar worden gescheiden. Voorkeurs p-anomeren bereid volgens de werkwijze van de uitvinding zijn verbindingen met C-2 en C-6 hydroxylgroepen met de formule 1aa 25 en 1bb waarin alle substituenten hoger aangegeven betekenis hebben.

Met de werkwijze volgens de uitvinding kunnen nieuwe spectinomycine analoga en tussenprodukten voor de bereiding daarvan worden bereid. Ook spectinomycine zelf kan met de werk-30 wijze volgens de uitvinding worden bereid. Spectinomycine is een aminocyclitol antibioticum (formule 19). Het bijzondere van de struktuur daarvan s&uilt daarin dat een enkelvoudige suiker-component is geanelleerd met een actinamine via een /S-glycosi-dische binding en een hemiketaalbinding. De werkwijze volgens de 35 uitvinding voor de bereiding van spectinomycine analoga met deze bijzondere struktuur berust op de koppeling van een suikerderivaat 800 43 38 6 en een beschermd actinamine. De suiker kan een natuurlijke of synthetische suiker zijn met een chirale of achirale struktuur.

De werkwijze volgens de uitvinding wordt in het hierna volgende toegelicht aan de hand van reactieschema C waarin 5 R een lage alkylgroep met 1 - 5 koolstofatomen is» en reactieschema's

. . , , A en. B. S

Alvorens stap 1 uit te voeren worden de twee amino- groepen in het actinaminederivaat met de formule 6 beschermd met bijvoorbeeld aralkoxycarbonyl, halogeenalkyloxycarbonyl, aryloxycarbonyl of alkoxycarbonylgroepen. Voor het invoeren en 10 verwijderen van beschermende carbobenzyloxy en carbo-tert.buty1-oxygroepen bij aminozuren wordt verwezen naar R.A.Boissonas Chapter, "Selectively Removable Amino Protective Group used in the Synthesis of Peptides., In: Advances in Organic Chemistry, 3:159-190 (1963). Voor het invoeren van de tert.butyloxycarbonyl-15 groep kan verder worden verwezen naar Aldrich Technical

Information Bulletin B0C-0H (september 1976). Voor de toepassing van trichloorethoxycarbonyl om aminen te beschermen kan worden verwezen naar Windholz et al. in Tetrahedron Letters, 2555 (1967). De actinamines kunnen op gebruikelijke wijze worden bereid 20 bijvoorbeeld zoals aangegeven door Suami et al. in Bull.Chem.Soc.

Jap. h3, 18^3 (1970).

De suikers zijn in de handel verkrijgbaar of kunnen op gebruikelijke wijze worden bereid bijvoorbeeld zoals beschreven door Mochalin et al. in Chem. Het.Comp. 699 (1977) (Engelse 25 vertaling van Khim Geterotsikl-soedin, 867 (1977))·

Bereidingsmethode A

In stap 1a wordt een koppeling uitgevoerd tussen een actinamine met de formule 6 en een suiker met de formule 5· De reactie wordt uitgevoerd in een oplosmiddel bijvoorbeeld N,N-30 dimethylformamide, diethylether, tetrahydrofuran of dimethoxy- methaan, al dan niet bij aanwezigheid van een base, onder stikstof bij omgevingstemperatuur en een druk zoals aangegeven voor een soortgelijke reactie door Lichtenthaler et al. in Carbohydrate Research blz. 363 (1977)· De reactietemperatuur 35 bedraagt in het algemeen 0 - U5°C. Een oplossing van een geakti-veerde suiker met een concentratie van 0,01 - 0,5 M wordt toege- 8004338 * \ τ voegd aan een oplossing van het actinamine met een concentratie van 0,01 - 0,5 M zodat de molverhouding suiker en actinamine in het mengsel 0, 2:1 tot h:l bedraagt. Bij voorkeur wordt de reactie uitgevoerd bij een temperatuur van 20 - 30°C met r dimethylformamide als oplosmiddel en een molverhouding suiker en J i actinamine van 3:2 tot 2:3· De reactietijd kan variëren van U uren tot 1 week maar bedraagt bij voorkeur 2b - U8 uren.

Het gevormde koppelingsprodukt met de formule V wordt gewoonlijk uit het reactiemengsel gewonnen door concentreren IQ zonder meer of concentreren onder heftig roeren met overmaat water. Het vaste residu wordt opgenomen in chloroform en de oplossing wordt dan ingedampt tot droog. - en/$ -Anomeren kunnen worden gescheiden door kolomchromatografie over silicagel onder elueren met een mengsel van methanol en chloroform met een 1 ^ volumesverhouding van 1:99 tot 2:98. In plaats daarvan kan ook worden geëxtraheerd, gekristalliseerd en/of gechromatografeerd.

In stap 2a wordt de hemiketaalbinding gevormd gevolgd door acylmigratie onder vorming van een C-3' carbonyl-verbinding met de formule 3'a. Stap 2a wordt uitgevoerd door 20 reactie van de verbinding met de formule V en silicagel in een oplosmiddel. De coneentratieverbinding met de formule V bedraagt 0,001 - 1 M en bij voorkeur 0,001 - 0,1 M. De hoeveelheid silicagel bedraagt 1 - 5 keer het gewicht aan de verbinding met de formi^e k'. De reactie wordt bij voorkeur uitgevoerd bij een 25 temperatuur van ongeveer 0 - 50°C gedurende 1 uur tot 7 dagen en bij voorkeur 1 - 3 dagen. Geschikte oplosmiddelen zijn methanol, ethanol, methyleenchloride, tolueen en 1-propanol met voorkeur voor methanol.

Onder sommige omstandigheden gaat de vorming van de 30 hemiketaalbinding gepaard met migratie van de acylgroep aan C-3' naar C-2' waarbij aan C-3' een carbonylgroep achterblijft. Deze migratie treedt op bij omzetting van de verbinding met de formule b' in de verbinding met de formule 3'a en 2'b. Wanneer deze migratie niet optreedt blijft aan C-3' een groep achter waaruit 35 een carbonylgroep kan ontstaan, met name een enolderivaat. Een voorbeeld daarvan is de verbinding met de formule 3 in reactie- 800 4338 : 3 schema A waarin R’^ methyl, alkoxycarbonyl of aminocarbonyl is.

De enoletherderivaten kunnen in de vorm verkeren van hemiketalen, open ketonische isomeren of mengsels daarvan. De verwijdering van dergelijke beschermende enolethergroepen is beschreven in de 5 Amerikaanse octrooiaanvrage 020.073 (13 maart 1979)·

Beide voornoemde mogelijkheden vormen nieuwe, bruikbare en selectieve methoden die tot spectinomycine analoga met C-3' carbonylgroepen leiden. Deze tussenprodukten met verborgen C-3' carbonylgroepen bezitten bijzondere chemische eigenschappen 10 waardoor zij zich lenen voor modificatie op bekende wijze zoals halogenering, alkylering, acylering of oxydatie. Bovendien is de beschermde of verborgen C-3' carbonylgroep bestendig tegen basen waardoor de tussenprodukten niet alleen veelzijdiger zijn maar ook gemakkelijker geïsoleerd kunnen worden.

15 De verbinding met de formule 3'a kan op gebruikelijke wijze worden geïsoleerd bijvoorbeeld door extractie, kristallisatie en/of chromatograferen.

In stap 3a wordt de verbinding met de formule 3’a omgezet in de verbinding met de formule 2'a door alcoholyse met 20 silicagel als katalysator. Voor een volledige omzetting zijn ongeveer U dagen nodig.

In stap k& worden eén of meer beschermende groepen in de suikerring verwijderd. Deze beschermende groepen zijn gewoonlijk aanwezig op C-2’, C-3' of C-6'. Afhankelijk van de aard 25 van deze beschermende groepen wordt voor hun verwijdering een zuur en/of base gebruikt. Bij gebruik van een base zoals voor omzetting van de verbinding met de formule 3a in de verbinding met de formule 2a of van de verbinding met de formule 3c in de verbinding met de formule 2c wordt de hydrolyse uitgevoerd bij -10 - 50°C 30 gedurende 5 minuten tot 1*0 uren en bij voorkeur bij 20 - 30°C gedurende 1 - 20 uren.

Geschikte alcoholen die daarbij kunnen worden gebruikt zijn methanol, ethanol en isopropanol met voorkeur voor methanol. Voor de base kan elke base worden gebruikt die het 35 produkt niet aantast bijvoorbeeld natriumwaterstofcarbonaat, kaliumwaterstofcarbonaat, pyridine, dikaliummonofosfaat, triethyl- 800 4 3 38 £ 9 amine of natriumkaliumtartraat met voorkeur voor dikaliummono-waterstoffosfaat. In de eerste stap van een tvee-staps-proces om de verbinding met de formule 3'a om te zetten in de verbinding met de formule 1a wordt eerst de C-2' O-acylgroep bij de eerder 5 beschreven neutrale of basische alcoholyse selectief verwijderd en daarna de C-6' O-acylgroep door basische alcoholyse.

De beschermende groepen in de suikerring kunnen ook worden verwijderd met een zuur als katalysator. Wanneer bijvoorbeeld de C-6' acylgroep uit de verbinding met de formule 3 is 10 verwijderd met een base als katalysator zoals boven beschreven, kan daarna de beschermende groep op C-3' worden verwijderd door behandelen met een zuur onder vorming van de verbinding met de formule 1a. In plaats daarvan kan de verbinding met de formule 3 ook in een enkele stap worden omgezet in de verbinding met de 15 formule 1a door behandelen met een zuur.

De verwijdering van de beschermende groepen met een zuur als katalysator wordt gewoonlijk uitgevoerd bij 0 - 8o°C en bij voorkeur 20 - 30°C gedurende 1 uur tot 3 dagen en bij voorkeur 2 uren tot 2 dagen. Geschikte zuren zijn chloorwater-20 stofzuur, p-tolueenzuur en fosforzuren met voorkeur voor chloor- waterstofzuur. Als oplosmiddel kunnen worden gebruikt waterige tetrahydrofuran, waterige dimethoxyethaan, methanol of ethanol en bij voorkeur methanol of waterige tetrahydrofuran.

Bereidingsmethode B

25 Stap 1b wordt op dezelfde wijze uitgevoerd als stap 1a maar met als suiker L-glucose of een analogon daarvan.

In stap 2b worden een of twee substituenten in de suikerring van de verbinding met de formule U verwijderd onder vorming van een C-3' carbonylgroep. Bij de verwijdering van de 30 beschermende groep op C—61 ontstaat een C-V, C-5' ethenisch onverzadigde binding. Deze stap wordt uitgevoerd bij ongeveer 0 - 80°C gedurende ongeveer 2 uren tot 1 week bij aanwezigheid van een ba§e bijvoorbeeld kaliumcarbonaat, triethylamine, pyridine of een alkoxyde en bij voorkeur een mengsel van kalium-35 carbonaat en acetonitril. De hoeveelheid base bedraagt 1 - 20 mol equivalent en bij voorkeur 1-10 mol equivalent.

800 43 38 10

De omstandigheden waaronder stap 2b wordt uitgevoerd is mede afhankelijk van de aard van de beschermende groepen in de suikerring alsook van die van het actinaminegedeelte in het tussenprodukt met de formule U. In het algemeen zijn de be-5 schermende groepen in de suikerring minder moeilijk te verwijderen dan die in het actinaminegedeelte. Stap 2b is een milde en selectieve manier om de belangrijke C-3' carbonylgroep te vormen.

Het C—6 * derivaat is beschreven in voornoemde 10 Amerikaanse octrooiaanvrage 020.073. Met bijvoorbeeld acetaten wordt azijnzuur verwijderd, met benzoaten benzoëzuur, met benzylethers benzylalcohol en met halogeniden halogeenwaterstof.

De tussenprodukten volgens de uitvinding, in het bijzonder de produkten gevormd in stap 2b kunnen worden toegepast 15 voor de bereiding van verschillende analoga. Daartoe worden de functionele groepen in de tussenprodukten op bekende wijze gemodificeerd bijvoorbeeld door halogenering, reductie, oxydatie of ketenverlenging.

De verbinding met de formule 1b wordt op gebruikelijke 20 wijze uit het reactiemengsel gewonnen bijvoorbeeld door precipi-tatie, kristallisatie of concentreren gevolgd door chromatografie.

De verbindingen met de formule 1a en 1b kunnen in biologisch aktieve spectinomycine analoga worden omgezet door de beschermende groepen uit de actinaminegedeelten te verwijderen. 25 De wijze waarop de aminogroepen worden beschermd is afhankelijk van de keuze van de beschermende groepen R^, R^, Ry en Rg. Afhankelijk van de keuze van deze beschermende groepen en van de methode om hen te verwijderen blijft de ethenisch onverzadigde binding tussen C-U’ en C-5’ in tact of wordt deze gehydrogeneerd. 30 Wanneer de beschermende groep benzyloxycarbonyl of aralkoxy- carbonyl is, kan het verwijderen van deze groepen worden uitge-voerd met waterstof onder een druk van 70 - 1U00 kPa bij aanwezigheid van een hydrogeneringskatalysator bijvoorbeeld palladiumzwart, palladium-op-kool, palladium-op-bariumsulfaat 35 of palladium-op-bariumcarbonaat gesuspendeerd in een oplosmiddel bijvoorbeeld isopropanol, absolute ethanol, ethylacetaat, tolueen 800 4 3 38 : 11 of tetrahydrofuran.

Beschermende alkoxycarbonyl en aryloxycarbonyl-groepen kunnen worden verwijderd met een zuur in een oplosmiddel zoals nitromethaan of methyleenchloride.

5 Beschermende halogeenalkoxycarbonylgroepen worden bij voorkeur verwijderd met zink.

Elke stap in de werkwijze volgens de uitvinding kan worden uitgevoerd met asterische mengsels van verschillende anomeren of met het voorkeurs^. J-anomeer zelf verkregen door 10 splitsing of scheiding bij een willekeurige stap. De daaropvolgende stappen kunnen worden uitgevoerd met /3 -tussenprodukten onder vorming van de gewenste biologisch aktieve anomeren.

Volgens een voorkeursuitvoeringsvorm worden de /3 -anomeren afgescheiden uit het reactiemengsel van de koppe-15 lingsstap 1 en worden de daaropvolgende stappen uitgevoerd met de /9 -anomeren waarbij uitsluitend spectinomycine analoga worden verkregen die biologisch aktief zijn,

De anomeren kunnen op gebruikelijke wijze van de asterische mengsels worden afgescheiden, bijvoorbeeld de ver-20 binding met de formule b door kolomchromatografie over silicagel onder elueren met een mengsel van methanol en chloroform met een volumeverhouding van 1:99 tot 2:98. Op dezelfde wijze kunnen van een asterisch mengsel van de verbinding met de formule 5 de /J -anomeren worden afgescheiden door de β -anomeren bevattende 25 fracties zoals verkregen bij kolomchromatografie over silicagel onder elueren met een mengsel van chloroform en methanol, te verzamelen en de oplossing in vacuo droog te dampen waarbij een hemiketaal met de fl -struktuur wordt verkregen.

Voorbeeld I

30 Anomeer mengsel van N,U'-dicarbobenzyloxy-5-0-£3' ,β'-di-O-acetyl-^'-deoxy- oC -D-glycero-hex-31-enopyranos-2'-ulosylj actinamine en IT ,IT-dicarbobenzyloxy-5-0-/3', 6'-di-O-acetyl-4'-deoxy- /9 -D-glycero-hex-31-enopyranos-2 *-ulosyl7actinamine.

^ Aan een oplossing van 3,6-di-0~acetyl-1-broom-1,b- dideoxy-o4 -D-glycero-hex-3-enopyranos-2-ulose (0,6lg, 2 mmol) in 800 4 3 38 •12 10 ml dimethylformamide wordt 0,95g (2 mmol) N,N-biscarbObenzyl-oxy-actinamine toegevoegd. Het mengsel wordt 49,5 uren onder stikstof bij kamertemperatuur geroerd en daarna onder roeren uitgeschonken in ijswater. Het vaste neerslag wordt door fil-5 treren verzameld en gewassen met water. Het produkt wordt gechromatografeerd over silicagel onder elueren met een mengsel van 1 vol.dl aceton en 9 vol.dln chloroform waarbij een anomeer-mengsel zoals aangegeven in de titel wordt verkregen.

Voorbeeld II

10 Anomeer mengsel van N,N'-dicarbobenzyloxy-5-0-/3',6'-di-0-acetyl-4 ’ -deoxy-oC -L-glycero-hex-31 -enopyranos-2' -ulosyljactinamine en N ,II-dicarbobenzyloxy-5-0-/3' ,6' -di-0-acetyl-4' -deoxy- -L- glycero-hex-31-enopyranos-21-ulosvl7-actinamine.

Een oplossing van 3,6-di-0-acetyl-1-broom-1,4-dideoxy-/5 -L-glycero-hex-3-enopyranos-2-ulose (Q,o1g, 2 mmol) in 10 ml dimethylformamide wordt toegevoegd aan 0,95g (2 mmol) Ν,Ν-biscarbobenzyloxyactinamine. Het mengsel wordt 49,5 uren onder stikstof bij kamertemperatuur geroerd en daarna onder 20 roeren uitgeschonken in water. Het vaste neerslag wordt door filtreren verzameld en gewassen met water. Het produkt wordt gechromatografeerd over silicagel onder elueren met een mengsel van 1 vol.dl aceton en 9 vol.dln chloroform waarbij een anomeer-mengsel zoals aangegeven in de titel wordt verkregen.

25 Voorbeeld III

Anomeer mengsel van NjN'-dicarbobenzyloxy^-O-Zs' ,6’-di-0-benzoyl-4'-deoxy- -L-glycero-hex-3'-enopyranos-2'-ulosy£7 actinamine en N,N'-dicarbobenzyloxy-5-0-Z3' ,6'-di-0-benzoyl-4'-deoxy-β -L-glycero-hex-3’-enopyranos-2'-ulosy£7actinamine.

30 -;-;-

Een oplossing van 3,6-di-0-benzoyl-1-broom-1,4- dideoxy--L-glycero-hex-3-enopyranos-2-ulose (0,86g, 2 mmol) en Ιϊ,Ν-biscarbobenzyloxyactinamine (0,95g, 2 mmol) in dimethylformamide (10,0 ml) wordt 49,5 uren bij kamertemperatuur geroerd 35 en daarna onder roeren uitgeschonken in ijswater (50 ml). Het vaste neerslag wordt door filtreren verzameld en gewassen met water. Het produkt wordt gechromatografeerd over silicagel 800 4 3 38 13 (100 ml) met eën mengsel van 1 vol.dl aceton en 9 vol.dln chloroform als eluent onder opvangen van fracties van 30 ml.

De fracties worden onderworpen aan dunnelaag chromatografie met als loopmiddel een mengsel van 1 vol.dl aceton en 9 vol.dln 5 chloroform. De fracties met een Rf van 0,25 worden verzameld en verenigd.^Na verwijderen van oplosmiddel wordt 38g (23$) homogeen anomeermengsel zoals aangegeven in de titel verkregen.

—EtOH 230 =27,350); MS(trisilyl): 10^0 (M+), 1025 (M-15), 905 (M-COgCHgCgH^ 10 CMR (CD^CQCD^)! Karakteristieke pieken bij 57,5 en 60.5 (C-1 en£-3), 7^,5 (br.doublet C-2), 88,5 en 89,8 (singlet-ten, C-2’ van twee gesloten vormen), 99,5 (doubletten), 119 (doubletten, C-V van open vormen), 128-138 (aromatische koolstof-atomen), 1U2,2 en 1^3,7 (singletten, C-3'), 137,3 (singlet, 15 urethaancarbonylgroepen), 166,7 (benzoaatcarbenzylgroepen), 183.5 (singlet, C-2' open vorm). Het CRM is consistent met een anomeermengsel dat open en verschillende gesloten vormen bevat bij vergelijking met een referentie. PMR vertoont de verwachte signalen voor alle beschermende groepen.

20 Voorbeeld IV

Anomeer mengsel van N,N'-dicarbobenzyloxy-5-0-Z3',6'-di-0-benzoyl-4 *-deoxy- c»C -D-glycero-hex-3' -enopyranos-2' -ulosyl/ actinamine en N,N'-dicarbobenzyloxy-5-0-/3' ,6'-di-0-benzoyl-^'-deoxy-/3 -L-glycero-hex-3'-enopyranos-2'-ulosyl7actinamine.

25 ---

Een mengsel van 3,6-di-0-benzoyl-1-broom-1,U- dideoxy- οί. -D-glycero-hex-3-enopyranos-2-ulose (0,86g, 2 mmol) en H,ίΐ-biscarbobenzyloxyactinamine (0,95g, 2 mmol) in dimethyl- formamide (10,0 ml) wordt 1*9,5 uren bij kamertemperatuur geroerd 30 en daarna onder roeren uitgeschonken in ijswater (50 ml). Het vaste neerslag wordt door filtreren verzameld en gewassen met water. Het produkt wordt opgenomen in een mengsel van 1 vol.dl aceton en 9 vol.dln chloroform en gechromatografeerd over silica-gel (100 ml) waarbij fracties van 30 ml worden opgevangen. De 35 fracties worden op de aanwezigheid van anomeer mengsel onder zocht door dunnelaag chromatografie met als loopmiddel een mengsel 8004338 1)+ van 1 vol.dl aceton en 9 vol.din chloroform. De fracties met een Rf van 0,25 worden verzameld. Aldus wordt 0,38g (23# opbrengst) homogeen anomeer mengsel zoals aangegeven in de titel verkregen.

—EtOH 230 ( ε = 27,350); MS(trisilyl): 10U0 (M+), 5 1025 (M-15), 905 "(M-CO^CgH^ CMR (CD^COCD^): Karakteristieke pieken bi.j 57,5 en 60,5 (C-1 en C-3), 7^,5 (br.doublet C-2), 88,5 en 89,8 (singletten, C-2’ van twee gesloten vormen), 99,5 (doubletten), 119 (doubletten, C-k' van open vorm), 128-139 (aromatische 10 koolstof atomen), 1i+2,2 en 1^3,7 (singletten, C-3'), 137,3 (singlet, urethaancarbonylgroepen), 166,7 (benzoaatcarbonyl-groepen), 183,5 (singlet, C-2’ open vorm). Het CRM is consistent met een anomeer mengsel dat open en verschillende gesloten vormen bevat vergeleken met een referentie. PRM vertoont de verwachte 15 signalen voor alle beschermende groepen.

Tewerkgaande volgens de voorbeelden I - IV onder toepassing van passend gekozen suikers worden de in onderstaande tabellen A en B aangegeven verbindingen bereid.

800 43 38 -15-

Tabel A

8 , CH -R'2 . o^f^R'3 1 X 'oh OR'» NCH3 j CBz : ^ L· ill Rii Rla. £V« . OH OH H CH20C0CHs H CH3 OH OH H CH20C0C6H5 H C0C6Hs OH OH H CH20C0CH3 H C2H5 ' OH OH CH3 CH3 H CH3 OH OH H CH3 H CH3 j OH OH H C2H5 H CH3 OH OH C2Hs C2H5 H CH3 ΌΗ OH CH3 CH3 H COC2H5 OH OH H CH3 H COCaHs OH OH H C2Hs , H COCaHs OH OH C2Hs C2Hs H COCaHs 5H 5H H C2OCOCH3 H CH3 5H · OH H CH2OCOCH3 CH3 CH3 8004338 -16~

Tabel B

! 8ινγ\ο * Δ SH 0R11 ! NCH3

I I

CBz I .

B Bi R_[_2. ils. Rlü.

% OH OH H CH2OCOCH5 H CH3 OH OH H CH2OCOC6H5 H COC6H5 ! OH OH H CH2OCOCH3 H C2Hs , OH OH CH3* CH3 H CH3 OH OH H CH3 H CH3 OH OH H C2HS H CH3 OH OH C2H5 C2Hs H CH3 4 OH OH CH3 CH3 H COC2Hs OH OH H CH3 H COCaHs OH OH H C2Hs H COCaH5 OH OH C2Hs C2Hs H COCaHs 5H · 5H H C2OCOCH3 H CH3 5H OH H CH2OCOCH3 CH3 CH3 800 4 3 38 17

Voorbeeld V

Reactie van het anomeer mengsel bereid volgens voorbeeld I,

Een anomeer mengsel van N,N'-dicarbobenzyloxy-5-0-5 /3',6'-di-0-acetyi-41-deoxy- oC -D-glycero-hex-3'-enopyranos-2 *- ulosyl7actinamine en N,N,-dicarbobenzyloxy-5-0-/3l,δ'-di-O-acetyl-h' -deoxy4^? -D-glycero-hex-3' -enopyranos-2' -ulosyl7actinamine (8,58g) wordt opgelost in léo ml methanol en 2 dagen geroerd met 50g silicagel. Na afloop wordt onder roeren Celite (200 ml) 10 toegevoegd waarna de suspensie wordt gefiltreerd en gewassen met methanol (U x 100 ml). Het filtraat wordt geconcentreerd waarna het residu wordt opgenomen in k% aceton bevattende chloroform.

De oplossing wordt gechromatografeerd over 1 liter vochtig gepakte silicagel. Na verbruik van 2 liter wordt het oplosmiddel ver-15 vangen door 6% aceton bevattende chloroform (2 liter) en daarna door 10$ aceton bevattende chloroform. Fracties van 50 ml worden opgevangen. Na vereniging van fracties met deselfde Rf worden de volgende drie produkten verkregen: a) N,N'-dicarbobenzyloxy-2'-O-acetyl-6’-acetoxy 20 1 '-epi^'-epi-spectinomycine, b) N,N'-dicarbobenzyloxy-2'-O-acetyl-6'-acetoxy-spectinomycine, en c) N1,N1-dicarbobenzyloxy-6’-acetoxyspectinomycine.

Bij staan van verbinding b in methanol plus silicagel 25 treedt omzetting op tot verbinding c.

Op dezelfde wijze worden met andere anomere mengsels van koppelingsprodukten de in onderstaande tabellen C en D aangegeven verbindingen verkregen.

800 4 3 38 -18-

Tabel C

} B 8 • CBz [ n f n /'1 CBz ' w R'1 ] _R<2 CM^J^^kT^O 's/.r^

NCBZ Lz ™ I

i CH3 ch3 l I JLl ill ili R‘3 R'g OH OH GH3 CH2OCH3 h ΟΟΟδΗ.

0H 0H ch3 gh3 h coch3 OH OH Η CH3 Η C0CH3 OH OH C2H5 C2Hs H COCH3 0H 0H H c2hs h coch3 OH OH Η CH2OH Η COCH3 OH OH CH2NH2 CH2NH2 H COCH3 OH OH CH2OH CH2OH H COCH3

A

OH OH CH2Cl CH2C1 h COCH3 I OH OH CH3 CH2OCOCH3 h CH3 5H OH CH3 CH3 H COCH3 5H 5H H CH2OH h COCH3 800 4338 -19-

Tabel D

B 8 ; rR, l H r· | H R' i .?yr'

NCBz 0R4 L 0H

CH3 ·ch3 I JLl " L± Lz r'3 r\ I OH OH CH3 CH2OCH3 h C0C6H5 ! Λ 0K 0H ch3 ch3 h coch3 1 OH OH H . CH3 Η COCH3 i ^ OH OH C2HS C2Hs H COCH3 0H 0H H c2h5 h coch3 OH OH H CH2OH H COCH3 OH OH CH2NH2 CH2NH2 H COCH3 ηΟΗ OH CH2OH CH2OH h coch3 4 •Ψ- * OH OH CH2C1 CH2C1 H COCH3 OH OH CH3 CH2OCOCB3 h ch3 5H OH * CH3 CH3 h " COCH3 SH 5H H CH2OH h COCH3 800 4 3 38 20

Voorbeeld VI

N ,N'-dicarbobenzyloxy-6'-hydroxyspectinomycine.

Aan een suspensie van dikaliummonowaterstoffosfaat 5 (0,ii0g) in watervrije methanol (20 ml) wordt N,N-dicarbobenzyl- oxy-6ac et oxy speet inomycine (Q,l+g) toegevoegd. Na 1,5 uren roeren bij kamertemperatuur wordt het oplosmiddel onder verminderde druk verwijderd. Het residu wordt opgelost in 1,5^ methanol bevattende chloroform en gechromatografeerd over silicagel 10 (225g) met 1,5# methanol bevattende chloroform als eluent. De fracties worden onderzocht met dunnelaag chromatografie en de produkt bevattende fracties worden verzameld, verenigd en geconcentreerd waarbij de titelverbinding wordt verkregen.

Op dezelfde wijze worden de in onderstaande tabellen 15 E en F aangegeven verbindingen bereid.

800 4 3 38 -21-

Tabel E

? H nl ^,CBz I T Iji r i H,eaT^ R! I i oH °

✓ V

CBz CH3 B R* 1 RVa R*3

HO- HO- H- HOCHa- H

GH30- ho- C2Hs0- ho- . HS- ho- ’ " CHaS- HO- ’ C2H5S- HO- H- HO- HO- H- HO— CH30- HO- C3H5- HO- HS- HO- CH3S- * ' ho-* C2H5S- ho- “ hoch2- ch2och2 ho- ’ " C2Hs 800 4 3 38

-22-Tabel F

1 ' i *·, »'^1 'slY^8'3 I % OH 0 I x \ ' j CBZ CH, i

, HO- HO- H- HOCHa- H

CH30- ho- " .

C2H5O- HO- I HS- H0- CH3S- ho- ~ C2H5S- HO- H- HO- HO- 4 H- HO- CH30- ; ho- c2h5- - HO- HS- 1 HO- CH3S- 1 HO-.· C2HsS- --- 1 HO- HOCH2- CH2OCH2 1 HO- ’ C2H5 i i i » 8004338 > 23

Voorbeeld VII

Ιϊ,Ν'-bisearbobenzyloxy-2'-0-benzoyl-l+' ,5 didehydrospectinomycine.

5 Aan een oplossing van een gechromatografeerd mengsel van anomeren bereid volgens voorbeeld III (0,51g) in acetonitril (6,0 ml) wordt kaliumcarbonaat (0,35g) toegevoegd. Het mengsel wordt· 1+6 uren geroerd waarbij vochtige lucht wordt buitengesloten, fta afloop wordt vast materiaal door filtreren verwijderd waarna 10 het filtraat wordt gewassen met acetonitril en geconcentreerd.

Het residu wordt gechromatografeerd over 75 ml silicagel vochtig gepakt met een mengsel van 1 vol.dl aceton en 9 vol.dln chloroform. Fracties van 20 ml worden opgevangen, fta opvangen van de negentiende fractie wordt het hoofdprodukt (Rf 0,23 in een 15 mengsel van 1 vol.dl aceton en 9 vol.dln chloroform) geëlueerd.

De produkt bevattende fracties worden verenigd en geconcentreerd waarbij 0,15g titelverbinding wordt verkregen.

MS(disilyl): 31+6 (M+), 331 (M -15)* 72l+, 630, 539.

Hoge resolutie: 81+6,3233 (gevonden) 20 Vereist voor C^H^NgO^S^ 81+0,3215· CD (CH30H): C 9 7^ = -20,000 + 1 ,200; = MO + 1 ,200.

UV in CH_Cft: ^ 267 (€= 12,600), 232 λγ j * \ m&x (£« 17,100).

PMR (CDCL3): 2,10 (S, 3H), 2,30 (S, 3H), 2,88 (S, 3H), 5,18 (S, iiH), 5,50 (S, 1H), 6,25 (3, 1H), 7,15-7,70 (Μ, 13H), 30 7,90-3,10 i (Μ, 211).

CMR in CD3C0CD3: 20,1, 31,7, 57,2, 57,3, 6o,1, - 60,7, 66,1, 67,1+, 63,0, 7^,6, 7M, 75,6, 80,5, 91+,6, 96,3, 103,1+, 128,3, 129,2, 129,6, 35 130,1, 130,U, 130,6, 13U,7, 139,5, 153,1+, 168,0, 173,8, 181+,1+ ppm.

ann 4 3 38 2h

Voorbeeld VIII

N,21’-biscarbobenzyloxy-2-0-acetyl-U' ,5 didehydrospectinomycine.

5 Aan een oplossing van een gechromatografeerd mengsel van anomeren bereid volgens voorbeeld II in acetonitril (6,0 ml) wordt kaliumcarbonaat (0,35g) toegevoegd. Het mengsel wordt i+6 uren geroerd waarbij vochtige lucht wordt buitengesloten. Na afloop wordt vast materiaal door filtreren verwijderd waarna 10 het filtraat wordt gewassen met acetonitril en geconcentreerd.

Het residu wordt gechromatografeerd over 75 ml silicagel vochtig gepakt in een mengsel van 1 vol.dl aceton en 9 vol.dln chloroform. Fracties van 20 ml worden verzameld waarna het hoofdprodukt wordt geëlueerd. De produkt bevattende fracties worden verenigd en 15 geconcentreerd waarbij de titelverbinding wordt verkregen.

Tewerkgaande volgens voorbeeld VII en VIII worden de in onderstaande tabellen G en H aangegeven beschermde didehydrospectinomycine analoga bereid uit overeenkomstig gesubstitueerde mengsels van anomeren.

800 4 3 38 -25-

gabel G

B u ρ,ζ « "

HaC^ 1

»N

H3C CBZ

_ B, ώ R'3 ' _*22_ ! I — o ! ,, n ho H H ch3c-

HO- H0” π Q

„ HO Η H CHaC- ch3o- no- 0 - HO Η H CHafc- C3H3O- HO- 3p un Η H ch3c- HS- HO- η HO Η H CH3C- CHaS- HO" 0 i HO H H ®3£-

CaHsS- -HO” 0 HO H H CH^- H- HO- „ 0* ~ Η H ch3c- T CHaO- H H <%?- H " S Η H CUJ.

η h :i 1 i. H H «J-, •H0 « CaH5S- " " CHaCHat

H H ,H c J

K0- HO- ®s&,aC 0 HQ. HO- CHjO-CH(CHa)- H CH3{CH3}3£

hQ_ HO- CH30CHa- H WafCHaJaC

ho- «ο- H CH’(a<^0 K0. HO- CH3- H CH3(©3)3-£ hQ. HO- CH3- H isepropionyl „0. HO- C3H, H Sêc-tetyrjrl h0. HO- C3Kf ^ l-fcuiyryl A A A L 7 7ft -26-

Tabel Η B. u i CBz I * ! || j i i 0R«°

H

i /N

j H3C CBz i B B, ii. * Jill ^ u ! U h ch3c- uft HO- Η n 0 * M H ^ 1 «- - . H ! aj- £Λ°- Η H <*£- » . H oj. ,

' W - Η «I

w- t » 4 u HO- n 0 Η H ch3c- ho- H‘ 0 H H ch3C- HG- ® H0 * Η H CH3e- HO- CSH,- Π 0 H0 Η H ch3£- HO- 3 Li H 9 CH3S- H H ch3c- .H0' CaHsS- H H " H°" JIO * Η H CH-CHa? H0 uft CH3C-CT(CH3)- H CH3(CHa)j! ho- H0” 9 __ CH30CH3- H Crf3(CH3)3t· HO- 9 ttft CaHs- H CHaiWaJat HO- ,β· 0 CH3- H CH,(CHaJa-t HO- h5 α3 H »ifi?r:pionyl C-“- H tec-batyryl HO- H0* . HO- CSH, H '.-bu^rjrl hO- 800 4 3 38 27

Voorbeeld IX

Ν,Ν'-biscarbobenzyloxy-U' ,5'-didehydrospectinomycine (reactieschema D).

5 Aan een suspensie van dikaliummonowaterstoffosfaat (0,40g) in watervrije methanol (20 ml) wordt N,N'-biscarbobenzyl-oxy-21-0-acetyl-4,5'-didehydrospectinomycine (l,0g) toegevoegd. Het mengsel wordt 1,5 uren bij kamertemperatuur geroerd, Na afloop wordt het oplosmiddel onder verminderde druk verwijderd.

10 Het residu wordt opgelost iri 1,5$ methanol bevattende chloroform en gechromatografeerd over silicagel (225g) met 1,5$ methanol bevattende chloroform. De produkt bevattende fracties worden verenigd en geconcentreerd waarbij 0,51g (55$ opbrengst) titelverbinding wordt verkregen.

15 . CD (CH^OH): f Θ -8,300 + 2,100, £9^*66 +10,500 2,100 - 56° (C 1,0, CH30H) CMR (CD3C0CD3): 187,6, 175,8, 157,2, 138,1, 20 128,^, 101,7, 99,3 87,7, 76.3, 6H,6, 63,3, 67,3, 66,7, 66.3, 65,3, 60,8, 60,0, 31,5, & 21,3 ppm.

Massaspectrum: m/e (triTMS): 81U (M+), 799 25 (M-15).

Voorbeeld X

Ν,Ν'-biscarbobenzyloxy-V ,5'-didehydrospectinomycine .

§. - 30 _ Aan een oplossing van N,H,-biscarbobenzyloxy-2*-0- benzoyl-i*,5'-didehydrospectinomycine (0,13g) in methanol wordt kaliumnatriumtartraattetrahydraat (120 mg) toegevoegd. Het mengsel wordt ongeveer 5 dagen geroerd bij kamertemperatuur en daarna 8 uren bij 50°C. Na afloop wordt vast materiaal door 35 filtreren verwijderd waarna het filtraat wordt geconcentreerd.

Het residu wordt opgenomen in 2$ methanol bevattende chloroform 8004338 28 en gechromatografeerd over silicagel (50 ml). De produkt "bevattende fracties worden verenigd en geconcentreerd waarbij 19 mg titelverbinding wordt verkregen. Uit de daarvoor in aanmerking komende andere fracties wordt 3^ mg uitgangsverbinding 5 verkregen. Het enonprodukt is blijkens CMR identiek met een referentieprodukt (beschreven in voornoemde Amerikaanse octrooiaanvrage Ο2Ο.Ο73).

Tewerkgaande volgens voorbeeld IX en X worden de in onderstaande tabellen I en J aangegeven beschermde 10 didehydrospectinomycine analoga bereid uit overeenkomstig gesubstitueerde didehydrospectinomycinederivaten.

8004338

-29-Taoel I

P2 f

HsC I 11 R‘1 s /\ I CBz CH3 I 8 Si ' 5-3

| HO- HO- H

ch3o- h0* H

C,HsO- “°T H

HS- ™- H

CH,S- H0- H

C3HsS- ™- · H

H- no- H

HO- H~ ’ H

ho- ch3o- H

HO- caHa“ ^ HO- Ha" ^

HO- * ' CH=»S- H

HO- CaHsS- H

j HO- HO- * H

HO- H°- H

; HO- HO* CH3OCH2- HO- «O- ^ HO- «Ο* WO- ®3- ho- K0 HO- 80 0 43 38 -30-

Tabel J

CBz

I I ! H

N i Js. ^ j h3c*" || R<1 I ^V'Hhr | c£z \η3 i S ill

! HO- «Ο- H

ch3o- ho- H

CaHsO- HO- H

HS- HO- H

CH3S- HO- H

CaH,S- HO- H

H- HO- H

' HO- Η- H

HO- CHaO- H

HO- Caffa- H

HO- Ha- H

HO- % CHaS- H

HO- CaH,S- H

| HO- HO- H

‘ HO- HO- H

: «0. «o- “sOCHi- HJ- HO- · HO- ' ! HO- HO- 0Ha HO- HO- CaHa i | i i 8004338

Claims (14)

1. Werkwijze voor het bereiden van een speetinomycine analogon, met het kenmerk, dat een verbinding wordt bereid met de formule S of 1a door 5 (a) omzetting van een verbinding met de formule 9 in een verbinding met de formule 10, (b) ringsluiting van de in stap(a) gevormde verbinding met de formule 10 tot een verbinding met de formule 2, en " (c) omzetting van de in stap (b) gevormde verbinding 10 met de formule 2 in een verbinding met de formule 8 of 1a waarin en R'g die gelijk of verschillend kunnen zijn elk waterstof, lage alkyl, acyloxyalkyl, lage halogeenalkyl, lage aminoalkyl, lage alkenyl, lage alkynyl, -0X, -(CH0) -0X of isomeren daarvan voorstellen met dien verstande, dat R'^ en R'g 15 geen hydroxy zijn, X waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage alkynyl voorstelt, n 1, 2, 3 of h is, R.j waterstof of lage alkyl voorstelt,

20 Hg, R^, Rg, Ry en Rg waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage alkynyl voorstellen, Rg, R^, Rj en Rg lage alkyl, lage alkenyl, lage alkynyl, beschermend aralkoxycarbonyl, beschermend gehalogeneerd alkoxycarbonyl of beschermend alkoxycarbonyl voorstellen met 25 dien verstande dat Rg of R^ en Ηγ of Rg steeds een beschermende groep zijn, R'^ aroyl, lage alkyl of acyl voorstelt, A zuurstof of zwavel voorstelt, B en B1 die gelijk of verschillend kunnen zijn elk 30 waterstof, hydroxy, alkoxy, o-lage alkenyl, thio, thio-lage alkyl of thio-lage alkenyl voorstellen, Z halogeen voorstelt, en L een verwijderbare rest voorstelt zoals acyloxy, halogeen, o-sulfonaat, nitro of een andere groep bij verwijdering 35 waarvan een onverzadigde ring ontstaat. 800 43 38

2. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat een verbinding wordt bereid met de formule 11 waarin A, B, B^, R' 1, R'g, Rg, Rg, Ry en Rg de in conclusie 1 aangegeven betekenis hebben.

3. Werkwijze volgens conclusie 2, met het kenmerk, dat NjN'-biscarbobenzyloxjr-V ,5•-didehydrospectinomycine wordt bereid. h. Anomeren en asterische mengsels van een verbinding gekenmerkt door de formule 12 waarin R'^, R'g en R'g die gelijk of verschillend kunnen 10 zijn waterstof, lage alkyl, lage halogeenalkyl, acyloxyalkyl, lage aminoalkyl, lage alkenyl, lage alkynyl, -0X, -(CH^^-OX of isomeren daarvan voorstellen met dien verstande, dat R'^, R'2 en R'g geen hydroxy zijn, X waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage 15 alkynyl voorstelt, n 1, 2, 3 of 1+ is, R2, R5, Rg, Rp en R1Q waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage alkynyl voorstellen, Rg, R^, Ry en Rg waterstof, alkyl, lage alkenyl, lage 20 alkynyl, beschermend aralkoxycarbonyl, beschermend gehalogeneerd alkoxycarbonyl of beschermend alkoxycarbonyl voorstellen met dien verstande dat Rg of R^ en Ry of Rg steeds een beschermende groep zijn, R'^ aroyl, lage alkyl of acyl voorstelt, 25. zuurstof of zwavel voorstelt, en B en B1 die gelijk of verschillend kunnen zijn waterstof, hydroxy, alkoxy, o-lage alkenyl, thio, thio-lage alkyl of thio-lage alkenyl voorstellen.

5. Verbinding volgens conclusie k, met het kenmerk,dat 30 de verbinding de formule 13 heeft waarin B, B^, Rg, R^, R^ en Rg de in conclusie ^ aangegeven betekenis hebben en R een lage alkyl-groep met 1 - 5 koolstofatomen voorstelt.

6. Verbinding volgens conclusie 5> met het kenmerk, dat de verbinding de formule lU heeft waarin CBz carbobenzyloxy 35 voorstelt en R de in conclusie 5 aangegeven betekenis heeft.

7. Verbinding volgens conclusie 6, met het kenmerk, dat 800 4 3 38 ' ...........v de verbinding N ,11' -dicarbobenzyloxy-2 '-O-acetyl-6 '-acetoxy-spectinomycine is, een verbinding met de formule 1U waarin R methyl voorstelt.

8. Werkwijze voor het bereiden van anomeren en 5 asterische mengsels van spectinomycine analoga, met het kenmerk, dat, anomeren en asterische mengsels worden bereid van een verbinding met de formule 15 door (a) omzetting van een verbinding met de formule 16 in een verbinding met de formule 17, 10 (b) ringsluiting van de in stap 1(a) gevormde ver binding met de formule 17 tot een verbinding met de formule 18, en (c) omzetting van de in stap 1(b) gevormde verbinding met de formule 18 in een verbinding met de formule 15 waarin 15 R',p R'2,en R'^ die gelijk of verschillend kunnen zijn waterstof, lage alkyl, acyloxyalkyl, lage halogeenalkyl, lage aminoalkyl, lage alkenyl, lage alkynyl,-0X, -(CH^j^-OX of isomeren daarvan voorstellen met dien verstande, dat R' ^0 en R'^ geen hydroxy zijn, 20. waterstof, lage alkyl, lage alkenyl of lage alkynyl voorstelt, n 1, 2, 3 of U is, Rj. waterstof of lage alkyl voorstelt, R2, R^, Rg, R^ en R10 waterstof, lage alkyl, lage 25 alkenyl of lage alkynyl voorstellen, R^, R^, Ηγ en Rg waterstof, lage alkyl, lage alkenyl, lage alkynyl, beschermend aralkoxycarbonyl, beschermend gehaloge-neerd alkoxycarbonyl of beschermend alkoxycarbonyl voorstellen met dien verstande, dat R^ of R^ en Ργ of Rg steeds een beschermende 30 groep zijn, R’^ aroyl, lage alkyl of acyl voorstelt, A zuurstof of zwavel voorstelt, B en B1 die gelijk of verschillend kunnen zijn waterstof, hydroxy, alkoxy, o-lage alkenyl, thio, thio-lage alkyl 35 of thio-lage alkenyl voorstellen, en Z halogeen voorstelt. 800 43 38 3¾

9. Farmaceutisch preparaat met als werkzaam bestanddeel een spectinomycine analogonj met het kenmerk, dat, het werkzame bestanddeel het ,^-anomeer is van een verbinding met de formule 8 resp. 1a en 1b waarin de symbolen de hoger aan-5 gegeven betekenis hebben.

10. Verbindingen en werkwijzen zoals beschreven in de beschrijving en voorbeelden. 800 4 338 R - - c * êöKT1980 js . ____ i Verbetering van errata in de beschrijving behorende bij de octrooiaan- , n - 0 3 üfti. Wou vrage no. 80.0^330 Ned^ voorgesteld door_aanvragerd.d.______________ hlz. 8 na regel ih inlassen: Verwijdering van de beschermende groepen op C-2' onder vorming van de verbindingen met de formule 1'a kan worden uitgevoerd door milde zure of basische hydrolyse bij -10 tot 50° C gedurende 5 min. tot UO uren en bij voorkeur bij 20-30° C gedurende 1-20 uren. Geschikte alcoholen die daarbij kunnen worden gebruikt zijn methanol, ethanol en isopropanol, en bij-voorkeur methanol. Als base kan elke base worden gebruikt die het produkt niet aantast, bijvoorbeeld natrium- en kaliumvatersstofcarbonaat, pyridine, triethylamine, kaliumwaterstoffosfaat,natriumkaliumtartraat en, bij-voorkeur, dikalium-monowaterstoffosfaat. Het verwijderen van de beschermende groepen door zure hydrolyse wordt bij-voorkeur uitgevoerd in een mengsel van verdund zoutzuur en tetrahydrofuran bij 20-30° C gedurende 18 uren. Andere geschikte zure media zijn met water of alcohol verdund waterstofchloride, waterstofbromide en zwavelzuur. Conclusies 1 en 8: omwisselen (conclusie 8 wordt conclusie 1 en conclusie 1 wordt conclusie 8) Blz. 31 regels 3-10 wijzigen in: de formule 8 door (a) reactie van een verbinding met de formule 9 en een verbinding met de formule 6 tot een verbinding met de formule 10, (b) ringsluiting van de in stap (a) gevormde verbinding met de formule 10 tot een verbinding met de formule 2 bij aanwezigheid van een base, en (c) omzetting van de in stap (b) gevormde verbinding met de formule 2 met methanolische Kg Hpo^ in een verbinding met de formule 8 8 0 04 33 8 Biz. 33 regel 11 wijzigen in: Binding met de formule 17 met silicagel tot een verbinding met de formule 18. Biz. 27 regel 3: reactieschema D wijzigen in reactieschema C. DV/vdT 8 0 04 33 8 R\ BV , R* R, B< R» R, R; “'Α°1Γϋ“: ΐΟΤΪ· AAAR-* 'R· ,b R> 9H Η \ ?H H R- B>v>v0Vv^o' „✓"v'V'M'0 V p- R' I I T 1 R’ R’ L Rl Λν/··ο4-τΛ< B/v"° Ar" R> Βι ϊ «ο ’ A 0H° R? Ri laa 11 ’* Ibb R\ B R! Rl <νΥ+ΑΓ^ ,iage alkyl t°fH) B A N \ R4f[VR'R ORio 5 lage alkyl (ofH) Λ ’ ’· 7 v«. 2 n R, L *'\Αγ°Ψ°γ~^ί ^ r^R. RfT |T o — r3 »Nr'Ri ‘ ' W\.0HT J °Ri| 9 *i R‘ 8 r, Rt ? H \ ΒνΛ ( 1 ^Ni^Ayoiov-NR1 Ri v^s^° vv°'y^j\r'i r* ’ BiV^--A°AyJ r3 βΛτ''ο(^Ν R4nXrS °r‘ λ Rr'R, R,. „ R7 r« .. 800 4 3 38 * 10 II i .U λ TTv<*4aI«m V»»1 ·*» m ^ μ λλ \X *i T 7 λ v· CM· tt T\mAn^^ l^a CBZ ?H H 'j82 OH H 4-θγ^ CH>0H ^yly io^S) r Sillca HO^Sr^'-ol^r'’ * ° nch5 °>o s,ap2a J,CH V . CBz 4' R cbz / 3a stap 3a OH μ ψΖ OH ' R CHiN*>'^vv>* "V Ύ ^ΟΗ * I I* fN/^O TV methanol H0 l^n NCH, ° 0 kamef ttmp· NCH, OH 0 cbz j’a stap 4a cbz 2a proces B ψζ OH R MtNV^Y°H γ0·νΑ.0Λ0 ΗοΧγ^-ΟΗ + O^VsraXnMF NMe °y0,b \ 6a CSz R5'b CBz OH H c^yv0 cbz oh H »°*^υοη^γ CH^vV° W ·&* -CHi Vo f0H η ΗθΧγΐ-0^ *4 ^ -2'b°r *0r i If Jollumnatriumtar traan N/Me .l0H st^p3b CBz 1 D_:______ CBz OH q CBz OH H -U_ ΟΗ^γΙ 0X0 MeOH Γ ^γλ^,Ι Ογ hoV^'oW K^P0‘ HoV^otV 800 4 3 38 ro? °9CH* ha* A. R, B R, L R B R, R L R4yV" zt°Y^»; β’~ΚΛαη + °^Ar; ~ïï*~ B,pSrvH>;v'R' Rm U or* r‘n RR 0Ri, 5 ' d^'d’ R,i r" 'r R7 R. f * 2a R, B Rt Rt \ R-"N'i 0 I1 0 A „ aY; A ^TyiAiy^R' " 1R^K^RA*nNR> R·* Z'· Ri, 0H o 1 r‘n V" °R.° R? r8 la R? Rs 3-r r p R< R\ 6 Rx R, r' **0>o>H + Y°Y”R‘ /VY°ffR; BY>A°H + oYYr; ,b %7Vvah°YYr; %Ύ R,“ O-R* N R R„ 0R* r, vr, r; \ 3 2b R»x 8 Rj R, „ ^'N Bv.R‘ ?' r' ΛΧ)0Ψ0ν ’ %γνΗ°ν η- vor I rR,> - 3±- ic Y 1 b, A -KA r’ ITV^·A 'S1fA r! R, a\ HO J, R 4 .h\ ORq 4m R« « 0 N R >· *u RT \ R? R. 2a nu Proces A CBz ; R Μ<<ν>γ0Η + ΒΓγ°γ^0Α.0 OMF ΗΟ^γ^'ΌΗ srapU NMe 0\ q «* rA 8004338 6a S _ .. · 1 .·____ TT—u —— nWlAtA1! Va \ Β,Λ R, R. R> f „ Η o R'Rj Ύ*· R’i R> -j^Y "Y 0 'Υ'"Ντ-r ^K<YA^Y Rj Β,ν^'Ό "ΪΥ R »V» OR‘o Λ ? 0 R? r« ,, R7 R. 9-R 12 13 0 CBz 9H μ 0 B R, R, εΗϊΝ<γ^γ-ΟνΛ/0 ^R'V^Y0 s^0Y'.r1' HO <γ- ο Ίν Bl 'OiSA irr' R>' L, ? ° *'\V*n * fcez 9-R *> R* 16 o 15 U V0^R’ *v£olovR·, Z'VY.R' V T -< oMr; W^Ri o.r; ,n r,rl or*

16 R? Vr« 17 F"*3 OH Η ï h V1 ’n R’ Η^νΚ/°Φ°γεΗ! rNv/vOsYOy . H y‘V Ύ «Ί 4RfT T 1 JCliJ byy/'.a^vAp' rVXS oiX ’ Λ °h o N R9 R1e O H ' CH. R? R* 18 ^ 8004338 The Upjohn Conpanfr, te Kalamazoo# Michigan# Ver. St .v.Amerika ™ A _ o.A. 80.01(338 8 Λ- , R' Χγγ™ , YY-; β-^Λλπ (ΑΛκ. >\V“ OR1* \ ^ R? R« R \ r-*1 R» D n n R* rR, R( r; V. \ .-1¾ R1 R -,^N q-XonV p' /Χ'Χγ,ί ** ^τγ t 'f-* J I Silica gel B, /N^Ts· , BjR3 oplosmiddel r4 J\T r AH j Rj XV’‘ °R*° r7/NW °* R? Re \ 2a 3 \alcoholyse V 8 (-¾ R1 P* 4-·< Bi -φτ' Ri ^n\R* HO 0 / \ R’ R, R4 hydrolyse Rs ' , V % Λ Ri Rt R^_rrV'° v -^°'y^— Ri R* r· Bl 3 V*?" " 0 R? \ 8 0 04 3 3 8 1116 u^oim ComPany A /tfr fr f fT —* f * R, Bi Rj, Rl Rj r> B. Ri R, °·α· 80 ·01,338 ·» £τΛ»'. B’ÏT'ïè'> 1»τ R4 ft, Rw 0H 0 R‘ ζ vR 0H 0 -Λ ’ V 'R. ' R? Re la 1b r7 °H η r’, R\ η 1 ^ 'NiA/OVv' p* R/Nt/v^^yX,,' Rj- y y ^ y—Rz R·* ji Ri . b/V'-o^V"^ b/y''° ty''R'3 \ OH « N 0H 0 N o' ^ p r; sr« iaa ? Ri ibb \ BVR* R1 Jage alkyl (of h) M 1a/v JL , (ch\-n B TV \ A V *'* \ · R&N^VR **0 1 la9« alkyl (ofH) R? R, 2 R1 L \ B Λ R> , z-4/0^kR' r^VV^Y^ L ’ R Rn iT —rj R oh»* 1 OR* 6nr*R„ oho 9 *i'*t 8 R B H \ b ra * ^ Β>ν^0Ψ°ν^κ'. R«r y^r; r> T X Rjfl I 1_D' o/\/ \0/\XVsRi R’ 1 * ohö 1 RtK( R\ 0R|. _✓ ' VD ^ P R7 R. R? R· R>* 10 n Q Λ Π / 7 7 O ^ Upjcfcn Company ““ B O.A. 80.0^338 Rj L V, B rRi , oh ^ . B<TV^PAH °*j^r'3 R4 k( R. R,° 0¾ /NN R? R^ g oplosmiddel ” Rj \ B Ri R L AX >° J,ox A. ^fcfT I X*> B,XV °Xr,‘ N R 0R4 R* Sr« base R* Y \g Va Rt Rs^Yjf^ r y^Ri ill' Rj H R,* 0R<0 / \ 9 R? R« hydrolyse NN *\ _,Rj R1 R^ lX/° sA/srf rip if II Rl Rr J*. J 2' jl Bl ρχ,///Α /Τγτ3 VSR,o OHo R* 8 0 04 33 8 R’ Re The Upjohn Company Bereidingsmethode A 0-Α· 80·01,338 CBz ?Η . R ^Γ»^-0. ,/^5s, I I j 0x DMF H0^\j/‘-0H stapla NMe 0V » >0 CBz R/= 6a 5 CSZ ?H H C& oh c^Y^olo..^ CH)0H HO^YöH°"V r> Si,ICa> HO^-.oi^' R>0 VCHj °>0 stap 2a I 0 0 CBz ., R I 1 /=° ,

4 CBz p 3a stap 3a OH h raz OH * n CH^^o ^0H o lo ^ 1 \ , J . KiHPOa 1) J H0^1/'0OH1' methanol HOAj/-.0/|y^ kjqh^ C kamer temp. NCH3 OK Ö CBz sraP CBz 2a The Upjohn Company 8 0 04 33 8 • , η Ο.Α. 80.0^338 R\ Β R, d R, Rj : „ Η O γ.. r; r>tVΠ^·« ΥυΑΛα· r; *ay''° &V r‘Ar,.°< λ 0 r' 'r R, R. c.r ? 8 12 7 ,3 b CBz ?H H o · \ B R> Ri ' ch}nyA0vV'0y'v'0^r R;Yy0s'/0Y-R' HOfY °Ty RiAS qhI Rj • O 0 .N R D 0 NCH. V R NR ’ R" 'o C-R t « CBz o 15 U R\ B R, R R’ R „X X 0 1 n R< zVYr’ Mit Ta oV r; *

0-Ri Λ R,Ri. 0R*

16 R; R» 17 \χ.ΧΒ'·. AvtY"' ϋίηΥΎ Γ'Κ* Λ l,ji B£I .. A · ΗΟ^Υ^'-οΤτ “ /\ /*·Α·^\,/ R_ 4 nu * RtX_S ohY X Λ °H0 N R, Rle 0 H ' x CHj <'R» 18 i9 The Upjohn Company 8 0 04 33 8 O.A. 80.04338 Bereidingsmethode B CBz OH p . . θγ0γ^0Λ-0 H0*jf ‘0H 0 stap\DMF NMe °V0lb X 6a CBz R t'h CBz OH ^ u i H 0Η*ΝΚγ'Λνγ*° vi^O-Y^so CBz 9H H ho/vJo°^T * ° CH,Ny\/Of\ .t™» WH, o CBz Η -^κτη 002 D' , OH η Ηθλγλ.0R 4 Μ^ν^Ν^0^0 V^CH» ^CHj °v° n T l CSzj, Jv^'O'y 2b r MOr jf I kaliumnatnumtar traat\ cbz I b — C- CBz μ iBz I OH " I OH CHjN I § CH3N ;H H .AW NCHj | O N-CH, O I OCCH. 3 OH C8z CBz The Upjohn Company 8 0 04 33 8