MXPA06014663A - Compuestos derivados de hdantoina. - Google Patents

Abstract

La invencion proporciona los compuestos de la formula (I), (ver formula (I)) en donde R1 y R2 son como se definen en la especificacion; procesos para su preparacion; composiciones farmaceuticas que los contienen; un proceso para preparar la composicion farmaceutica; y su uso en la terapia.

Description

COMPUESTOS DERIVADOS DE HIDANTOINA i r. Campo de la Invención :. . . , ? La presente invención se refiere a derivados de hidantoina novedosos, procesos para su preparación, composiciones farmacéuticas que los contienen y su uso en la terapia.

Antecedentes de la Invención 10 Las metaloproteinasas son una superfamilia de proteinasas (enzimas) cuyos números en años recientes han aumentado dramáticamente. Con base en consideraciones estructurales y funcionales estas enzimas se han clasificados dentro de familias y subfamilias como se describe en N.M.

Hooper (1994) FEBS Letters 354:1-6. Los ejemplos de metaloproteinasas incluyen la matriz de las metaloproteinasas (MMPs) tal como colagenasas (MMPl, MMP8 , MMP13), las gelatinasas (MMP2 , MMP9), las estromelisinas (MMP3, MMP10, MMP11) , matrilisina (MMP7), metaloelastasa (MMP12), enamelisina (MMP19), los MT- MPs (MMP14, MMP15, MP16, MMP17); la reprolisina o adamalisina o familia MDC que incluyen las secretasas y shedasas tal como enzimas que convierten TNF (ADAM10 y TACE) ; la familia de astacina que incluye enzimas tal como proteinasa que procesa procolágeno (PCP) ; y otras metaloproteinasas tal como agrecanasa, la REF. :178204 familia de enzima que convierte endotelina y la familia de enzima que convierte angiotensina. Las metaloproteinasas se consideran que son importantes en una plétora de procesos fisiológicos de la enfermedad que implican remodelación de tejido tal como desarrollo embrionario, formación de huesos y remodelación uterina durante la menstruación. Esto se basa en la capacidad de las metaloproteinasas para desdoblar un rango amplio de substratos de matriz tal como colágeno, proteoglican y fibronectina. Las metaloproteinasas también se consideran importantes en el proceso, o secreción, de mediadores celulares biológicos importantes, tal como factor de necrosis de tumor (TNF) ; y el proceso de proteólisis post traducción, o eliminación de núcleos, de proteínas de membrana biológicamente importantes, tal como el receptor IgE de baja afinidad CD23 (para una lista más completa ver N. M. Hooper et al., (1997) Biochem. J. 321:265-279). Las metaloproteinasas se han asociado con muchas enfermedades o condiciones. La inhibición de la actividad de una o más metaloproteinasas puede ser de beneficio en estas enfermedades o condiciones, por ejemplo: diversas enfermedades inflamatorias y alérgicas tal como, inflamación de las articulaciones (especialmente artritis reumatoide, osteoartritis y gota) , inflamación .del tracto gastro-intestinal (especialmente enfermedad inflamatoria del intestino, colitis y gastritis ulcerativa) , inflamación de la piel (especialmente psoriasis, eczema, dermatitis) ; en metástasis o invasión de tumor; en enfermedades asociadas con degradación incontrolada de la matriz extracelular tal como osteoartritis; en enfermedad resorsiva del hueso (tal como osteoporosis y enfermedad de Paget) ; en enfermedades asociadas con angiogénesis aberrante; la remodelación de colágeno aumentada asociada con diabetes, enfermedad periodontal (tal como gingivitis), ulceración de cornea, ulceración de la piel, condiciones postoperatorias (tal como anastomosis colónica) y sanado de herida dermal; enfermedades desmielinantes de los sistemas nervioso central y periférico (tal como esclerosis múltiple) ; enfermedad de Alzheimer; remodelación de matriz extracelular observada en enfermedades cardiovasculares tal como restenqsis y ateroscelerosis; asma; rinitis; y enfermedades pulmonares obstructivas crónicas (COPD) . La MMP12, también conocido como elastasa de macrófago o metaloelastasa, se clonó inicialmente en el ratón por Shapiro et al [1992, Journal of Biological Chemistry 267: 4664] y en el hombre por el mismo grupo en 1995. La MMP12 se expresa preferentemente en macrófagos activados, y se ha mostrado para ser secretado de macrófagos alveolares de fumadores [Shapiro et al, 1993, Journal of Biological Chemistry, 268: 23824] así como en células de espuma en lesiones ateroescleróticas [Matsumoto et al, 1998, Am. J. Pathol. 153: 109] . Un modelo de ratón de COPD se basa en la exposición de ratones con humo de cigarro durante seis meses, dos cigarros al día, seis días a la semana. Los ratones tipo silvestre desarrollaron enfisema pulmonar después de este tratamiento. Cuando se trataron ratones agénicos M P12 en este modelo desarrollan enfisema no importante, indicando fuertemente que MMP12 es una enzima clave en la patogénesis COPD. El papel de las M P tal como MMP12 en COPD (enfisema y bronquitis) se discute en Anderson and Shinaga a, 1999, Current Opinión in Anti-inflammatory and Immunomodulatory Investigational Drugs 1(1): 29-38. Se descubrió recientemente que fumar aumenta la infiltración del macrófago y la expresión MMP-12 derivada de macrófago en placas humanas de la arteria carótida Kangavari [Matetzky S, Fishbein MC et al., Circulation 102: (18), 36-39 Suppl. S, Oct 31, 2000] . La MMP9 (Gelatinasa B; Colagenasa tipo IV 92kDa; Gelatinasa 92kDa) es una proteína secretada la cual se purificó primero, luego se clonó y ordenó en secuencia, en 1989 [S.M. Wilhelm et al (1989) J. Biol. Chem. 264 (29): 17213-17221; errata publicada en J. Biol. Chem. (1990) 265 (36) : 22570] . Una revisión reciente de MMP9 proporciona una fuente excelente para la información detallada y referencias en esta proteasa: T.H. Vu & Z. Werb (1998) (En: Matrix Metalloproteinases, 1998, editado por W.C. Parks & R.P.

Mecham, pp. 115-148, Academic Press. ISBN 0-12-545090-7). Los siguientes puntos se redactan de tal revisión por T.H. Vu & Z. Werb (1998) . La expresión de MMP9 se restringe normalmente a algunos tipos de la célula, incluyendo trofoblastos, osteoclastos, neutrofilis y macrófagos. Sin embargo, la expresión se puede inducir en estas mismas células y en otro tipo de células por diversos mediadores, incluyendo exposición de las células a los factores de crecimiento o citoquinas. Estos son los mismos mediadores implicados frecuentemente en iniciar una respuesta inflamatoria. Como con otras MMP secretadas, MMP9 se libera como una Pro-enzima inactiva la cual se desdobla posteriormente para formar la enzima activa enzimáticamente. Las proteasas requeridas para esta activación in vivo no son conocidas. El balance de MMP9 activo contra enzima inactiva se regula además in vivo por interacción con TIMP-I (Inhibidor de Tejido de las Metaloproteinasas-1) , una proteína que se presenta naturalmente. La TIMP-I se enlaza a la región de terminal C de MMP9, conduciendo a la inhibición de el dominio catalítico de MMP9. El balance de la expresión inducida de ProMMP9, desdoblamiento de Pro- a MMP9 activo y la presencia de TIMP-1 combina para determinar la cantidad de MMP9 catalíticamente activa la cual se presenta en un sitio local. La MMP9 proteolíticamente activa ataca los substratos que incluyen gelatina, elastina, y colágenos nativos Tipo IV y Tipo V; esto no tiene ninguna actividad contra colágenos nativos Tipo I, proteoglicanos o lamininas. Ha habido un cuerpo en crecimiento de datos que implican papeles para MMP9 en diversos procesos fisiológicos y patológicos. Los papeles fisiológicos incluyen la invasión de trofoblastos embriónicos a través del epitelio uterino en las etapas tempranas de implantes embriónicos; algún papel en el crecimiento y desarrollo de huesos; y migración de células inflamatorias de la vascularidad en los tejidos. La liberación de MMP9, medida usando el inmunoensayo de enzima, se aumentó significativamente en fluidos y en sobrenadantes AM de asmáticos sin tratar en comparación con aquellos de otras poblaciones [Am. J. Resp. Cell & Mol. Biol., Nov 1997, 17 (5) : 583-591] . También, la expresión de MMP9 creciente se ha observado en ciertas otras condiciones patológicas, por ello se implica a la MMP9 en procesos de enfermedad tal como COPD, artritis, metástasis de tumor, enfermedad de Alzheimer, esclerosis múltiple, y ruptura de placa en ateroesclerosis dirigida a condiciones coronarias agudas tal como infarto al miocardio. Un número de inhibidores de metaloproteinasa son conocidos (ver por ejemplo las revisiones de inhibidores MMP por Beckett R.P. and Whittaker M., 1998, Exp. Opin. Ther. Patents, 8 (3) :259-282, y por Whittaker M. et al, 1999, Chemical Reviews 99 (9) : 2735-2776) .

La WO 02/074767 describe derivados de hidantoina de la fórmula que son útiles como inhibidores MMP, particularmente como inhibidores MMP12 potentes. Los siguientes tres compuestos se describen específicamente en WO 02/074767 Ahora se ha descubierto un grupo de compuestos que son inhibidores de metaloproteinasas y son de interés particular para inhibir las MMP tales como MMP12 y MMP9. Los compuestos de la presente invención tienen propiedades de potencia, selectividad y/o farmacocinéticas benéficas. Los compuestos de la presente invención están dentro del alcance genérico de la WO 02/074767 pero son de un tipo no específicamente ejemplificado en la presente. De conformidad con la presente invención, se proporciona por lo tanto un compuesto de la fórmula (I) en donde R1 representa alquilo Cl hasta 2, ciclopropilo, F, CN, OCH3, SCH3 o OCF3; el grupo alquilo o ciclopropilo es además opcionalmente substituido por uno o más átomos de fluoro; y R2 representa alquilo Cl hasta 3 y sales farmacéuticamente aceptables del mismo. Los compuestos de la fórmula (I) pueden existir en formas enantioméricas. Deberá entenderse que todos los enantiómeros, diaestereómeros, racematos y mezclas de los mismos se incluyen dentro del alcance de la invención. Los compuestos de la fórmula (I) pueden también existir en diversas formas tautoméricas. Todas las formas tautoméricas posibles y mezclas de los mismos se incluyen dentro del alcance de la invención. En una modalidad, R1 representa alquilo Cl hasta 2 o ciclopropilo; el grupo alquilo o ciclopropilo es además opcionalmente substituido por uno o más átomos fluoro. En otra modalidad, R1 representa alquilo Cl hasta 2 opcionalmente además substituido por uno o más átomos fluoro.

En una modalidad, R1 representa trifluorometilo. En una modalidad, R1 representa metilo. En una modalidad, R1 representa etilo. En una modalidad, R2 representa metilo o etilo. En una modalidad, R2 representa metilo. En una modalidad, R1 representa alquilo Cl hasta 2 opcionalmente además substituido por uno o más átomos fluoro y R2 representa metilo o etilo. En una modalidad, R1 representa alquilo Cl hasta 2 opcionalmente además substituido por uno o más átomos fluoro y R2 representa metilo. En una modalidad, R1 representa CF3 y R2 representa metilo o etilo. A menos que se indique de otra manera, el término "alquilo Cl hasta 3" referido en la presente significa un grupo alquilo de cadena recta o ramificada que tiene desde 1 hasta 3 átomos de carbono. Los ejemplos de tales grupos incluyen metilo, etilo, n-propilo e i-propilo. El término "alquilo Cl hasta 2" significa metilo o etilo. Los ejemplos de un alquilo Cl hasta 2 opcionalmente además substituido por uno o más átomos fluoro incluyen CF3, CH2F, CH2CF3, CF2CH3 y CF2CF3. Los ejemplos de un anillo ciclopropilo opcionalmente además substituido por uno o más átomos fluoro incluyen 1-fluoro-1-ciclopropilo, 2, 2-difluoro-1-ciclopropilo y 2,3-difluoro-1-ciclopropilo: Los ejemplos de los compuestos de la invención incluyen: (5S)-5- ({ [4-[ (6-metoxipiridin-3-il)etinil]-3, 6-dihidropiridin-1 (2H) -il] sulfonil }metil) -5-metilimidazolidina-2,4-diona; (5S)-5-({ [4-[ (6-fluoropiridin-3-il)etinil]-3, 6-dihidropiridin-1 (2H) -il] sulfonil }metil) -5-metilimidazolidin-2, 4-diona; 5-{ [1- ( { [ (4S) -4-metil-2, 5-dioxoimidazolidin-4-il] metil} sulfonil) -1,2,3, 6-tetrahidropiridin-4-il] etinil } piridin-2-carbonitrilo; (5S)-5-({ [4-[ (6-etilpiridin-3-il) etinil] -3, 6-dihidropiridin-1 (2H) -il] sulfonil }metil) -5-metilimidazolidin-2, 4-diona; (5S) -5-metil-5- ( { [4-{ [6- (trifluorometil) piridin-3-il] etinil } -3, 6-dihidropiridin-l (2H) -il] sulfonil }metil) imidazolidin-2, 4-diona; y sales farmacéuticamente aceptables del mismo. Cada compuesto ejemplificado representa un aspecto particular e independiente de la invención. Los compuestos de la fórmula (I) pueden existir en formas enantioméricas. Por lo tanto, todos los enantiómeros, diaestereómeros, racematos y mezclas de los mismos se incluyen dentro del alcance de la invención. Los diversos isómeros ópticos se pueden aislar por separación de una mezcla racémica de los compuestos usando técnicas convencionales, por ejemplo, cristalización fraccional, o CLAR. Alternativamente los isómeros ópticos se pueden obtener por síntesis asimétrica, o por síntesis de materiales de partida ópticamente activos. En donde los isómeros ópticamente existen en los compuestos de la invención, se describen todas las formas ópticamente activas individuales y combinaciones de estas como modalidades específicas individuales de la invención, así como sus racematos correspondientes.

Preferiblemente los compuestos de la fórmula (I) tienen (5S) -estereoquímica como se muestra abajo: Donde existen tautómeros en los compuestos de la invención, se describen todas las formas tautoméricas y combinaciones de estas como modalidades específicas individuales de la invención. La presente invención incluye compuestos de la fórmula (I) en la forma de sales. Las sales apropiadas incluyen aquellas formadas con ácidos orgánicos o inorgánicos o bases orgánicas o inorgánicas. Tales sales son normalmente sales farmacéuticamente aceptables aunque las sales farmacéuticamente no aceptables pueden ser de utilidad en la preparación y purificación de compuestos particulares. Tales sales incluyen sales de adición acida tal como sales de clorohidrato, bromohidrato, citrato, tosilato y maleato y sales formadas con ácido fosfórico o ácido sulfúrico. En otro aspecto las sales apropiadas son sales base tal como una sal de metal alcalino, por ejemplo, sodio o potasio, una sal de metal alcalinotérreo, por ejemplo, calcio o magnesio, o una sal de amina orgánica, por ejemplo, trietilamina. Las sales de los compuestos de la fórmula (I) se pueden formar al hacer reaccionar la base libre u otra sal de la misma con uno o más equivalentes de un ácido o base apropiado. Los compuestos de la fórmula (I) son útiles debido a que poseen actividad farmacológica en animales y son así potencialmente útiles como farmacéuticos. En particular, los compuestos de la invención son inhibidores de metaloproteinasa y pueden ser así usados en el tratamiento de enfermedades o condiciones mediadas por MMP12 y/o MMP9 tales como asma, rinitis, enfermedades pulmonares obstructivas crónicas (COPD) , artritis (tal como artritis reumatoide y osteoartritis), ateroesclerosis y restenosis, cáncer, invasión y metástasis, enfermedades que involucran la destrucción de tejidos, pérdida de reemplazo de las articulaciones de la cadera, enfermedad periodontal, enfermedad fibrótica, infarto y enfermedades cardiacas, fibrosis hepática y renal, endometriosis, enfermedades relacionadas con la pérdida de matriz extracelular, insuficiencia cardiaca, aneurisma aórtica, enfermedades relacionadas con el SNC tal como enfermedad de Alzheimer y Esclerosis Múltiple (MS, por sus siglas en inglés) , y trastornos hematológicos . En general, los compuestos de la presente invención son inhibidores potentes de MMP9 y MMP12. Los compuestos de la presente invención también muestran buena selectividad con respecto a una carencia relativa de inhibición de diversos otros MMP tal como MMP8, MMP14 y MMP19. Además, los compuestos de la presente invención también, en general, tienen valores log D mejorados, en particular, tienen valores log D en el rango de 0.5 < log D < 2.0. Log D es un parámetro que refleja la lipofilicidad de un compuesto a un pH fisiológico. Como una consecuencia de estos valores log D favorables, los compuestos de la presente invención poseen características de solubilidad mejoradas y reducen el enlace de proteína de plasma, lleva a propiedades farmacocinéticas y farmacodinámicas mejoradas. En consecuencia, la presente invención proporciona un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente en la presente para su uso en la terapia. En otro aspecto, la invención proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente en la presente en la manufactura de un medicamento para uso en la terapia . En otro aspecto, la invención proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente en la manufactura de un medicamento para uso en el tratamiento de enfermedades o condiciones en las cuales la inhibición de MMP12 y/o MMP9 es benéfica. En otro aspecto, la invención proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente en la manufactura de un medicamento para uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias. En otro aspecto, la invención proporciona el uso de un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente en la manufactura de un medicamento para uso en el tratamiento de una enfermedad obstructiva de las vías respiratorias tal como asma o COPD. En el contexto de la presente especificación, el término "terapia" también incluye "profilaxis" a menos que sean indicaciones específicas a las contrarias. Los términos "terapéutico" y "terapéuticamente" deberán construirse en consecuencia. La profilaxis se espera que sea particularmente relevante para el tratamiento de personas que padecen de un episodio previo de, o de otra manera se considera que tienen un riesgo incrementado de, la enfermedad o condición en cuestión. Las personas que tienen riesgo de desarrollar una enfermedad o condición particular generalmente incluyen aquellos que tienen un historial familiar de las enfermedades o condiciones, o aquellas que se identifican por pruebas genéticas o separación por exclusión para ser susceptibles particularmente para desarrollar la enfermedad o condición. La invención además proporciona un método para tratar una enfermedad o condición en la cual la inhibición de MMP12 y/o MMP9 es benéfica, el cual comprende administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se define anteriormente en la presente . La invención también proporciona un método para tratar una enfermedad de las vías respiratorias obstructiva, por ejemplo, asma o COPD, la cual comprende administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se define anteriormente en la presente . Para los usos terapéuticos arriba mencionados, la dosis administrada será, por supuesto, o varía con el compuesto empleado, el modo de administración, el tratamiento deseado y el trastorno a tratarse. La dosis diaria del compuesto/sal de la fórmula (I) (ingrediente activo) puede estar en el rango desde 0.001 mg/kg hasta 75 mg/kg, en particular desde 0.5 mg/kg hasta 30 mg/kg. Esta dosis diaria puede darse en dosis divididas como sea necesario. Típicamente, las formas de unidad de dosis contienen alrededor de 1 mg hasta 500 mg de un compuesto de esta invención. Los compuestos de la fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables del mismo pueden usarse por si mismas, pero se administrarán generalmente en la forma de una composición farmacéutica en la cual el compuesto/sal de fórmula (I) (ingrediente activo) está en asociación con un adyuvante, diluyente o portador farmacéuticamente aceptable. Dependiendo en el modo de administración, la composición farmacéutica preferiblemente comprende desde 0.05 hasta 99% en peso (por ciento en peso), más preferiblemente desde 0.10 hasta 70% en peso, del ingrediente activo, y desde 1 hasta 99.95% en peso, más preferiblemente desde 30 hasta 99.90% en peso, de un adyuvante, diluyente o portador farmacéuticamente aceptable, todos los porcentaje en peso se basan en la composición total. Los procedimientos convencionales para la selección y preparación de las formulaciones farmacéuticas adecuadas se describe en, por ejemplo, "Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs", M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988. Así, la presente invención también proporciona una composición que comprende un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se define anteriormente en la presente en asociación con un adyuvante, diluyente o portador farmacéuticamente aceptable. La invención además proporciona un proceso para la preparación de una composición farmacéutica de la invención el cual comprende mezclar un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se define anteriormente en la presente con un adyuvante, diluyente o portador farmacéuticamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden administrarse en una manera estándar para la enfermedad o condición que se desea tratar, por ejemplo, por administración oral, tópica, parenteral, bucal, nasal, vaginal o rectal o por inhalación. Para estos propósitos, los compuestos de esta invención pueden formularse por medios conocidos en el arte en la forma de, por ejemplo, tabletas, cápsulas, soluciones acuosas o aceitosas, suspensiones, emulsiones, cremas, ungüentos, geles, rocíos nasales, supositorios, polvos finamente divididos o aerosoles para inhalación y para uso parenteral (incluyendo intravenosos, intramuscular o infusión) soluciones acuosas o aceitosas estériles o suspensiones o emulsiones estériles. Además de los compuestos de la presente invención la composición farmacéutica de esta invención puede también contener, o ser co-administrada (simultáneamente o secuencialmente) con, uno o más agentes farmacológicos de valor en el tratamiento de una o más enfermedades o condiciones referidas anteriormente en la presente tal como el producto "Symbicort" (marca registrada) . La presente invención además proporciona un proceso para la preparación de un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se define arriba el cual, comprende: a) reacción de un compuesto de la fórmula (II) (ll) en donde R es como se define en la fórmula (I) y L representa un grupo de partida, con un compuesto de la fórmula (III) (o una sal del mismo) en donde R1 es como se define en la fórmula (I); o b) reacción de un compuesto de la fórmula (X) (X) en donde R2 es como se define en la fórmula (I), R3 es H o un grupo protector apropiado y X es un grupo de partida tal como haluro o triflato; con un compuesto acetilénico de la fórmula (IX) en donde R1 es como se define en la fórmula (I); o c) reacción de un compuesto de la fórmula (XI) (XI) en donde R representa H o trimetilsililo, R2 es como se define en la fórmula (I) y R3 representa H o un grupo protector apropiado; con un haluro o triflato de arilo de la fórmula (VI) (VI) en donde R1 es como se define en la fórmula (I) y X representa haluro o triflato; y opcionalmente posteriormente forma una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En los procesos anteriores, los grupos de partida apropiados L1 incluyen halo, particularmente cloro. La reacción se llevó a cabo preferiblemente en un solvente adecuado opcionalmente en la presencia de una base agregada por un periodo adecuado de tiempo, típicamente 0.5 hasta 24 h, a temperatura ambiente hasta de reflujo. Típicamente, los solventes tales como piridina, dimetilformamida, tetrahidrofurano, acetonitrilo o diclorometano se usan. Cuando se usa, la base agregada puede ser una base orgánica tal como trietilamina, diisopropiletilamina, N-metilmorfolina o piridina, o una base inorgánica tal como un carbonato de metal alcalino. La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente durante 0.5 hasta 16 h, o hasta que el final de la reacción se alcanza, como se determina por los métodos de cromatografía o espectroscopia. Las reacciones de haluros de sulfonilo con varias aminas primarias y secundarias se conocen en la literatura y las variaciones de las condiciones serán evidentes para aquellos expertos en la técnica. Los cloruros de sulfonilo de la fórmula (II) (en donde L1 representa cloruro) son convenientemente preparados por clorinación oxidativa de los compuestos de la fórmula (IV) usando métodos que son fácilmente aparentes por aquellos expertos en la técnica (Mosher, J. , J. Org. Chem. 1958. 23, 1257; Griffith, 0., J. Biol. Chem. 1983. 258, (3), 1591; WO 02/074767) . Los compuestos de la fórmula (III) pueden prepararse por diversos métodos descritos en la literatura o variaciones de estos como se apreciará por aquellos expertos en la técnica de la química orgánica sintética. Los métodos adecuados incluyen, pero no se limitan a, aquellos descritos a continuación y se muestran en el esquema de reacción 1.

(V) Esquema de Reacción 1 En el Esquema de reacción 1, PG representa un grupo protector adecuado tal como t-Boc; X representa un grupo de partida tal como un haluro o un triflato; R representa hidrógeno o trimetilsililo; tms representa trimetilsililo; Ar representa un anillo de 5-piridinilo substituido en la posición 2 por R1; y R1 es como se define en la fórmula (I). La reacción entre el derivado de arilo o vinilo [ (V) o (VI)] y un acetileno [(VII), (VIII) o (IX)] puede llevarse a cabo, opcionalmente en un solvente adecuado, usando un catalizador tal como una sal de paladio adecuada, por ejemplo, PdCl (PPh3) 2, con/o sin una sal de cobre agregada y con una base amina tal como piperidina, trietilamina, diisopropilamina o diisopropiletilamina. Cuando se usa, el solvente agregado puede ser, por ejemplo, tetrahidrofurano, acetonitrilo o N, N-dimetilformamida . La reacción se conduce a temperatura ambiente hasta temperatura de reflujo durante 20 minutos hasta varias horas, por método espectroscópico o cromatográfico que indica el final de la reacción. Las reacciones catalizadas de paladio involucran compuestos acetilénicos que son bien conocidos en la literatura y variaciones de las condiciones serán evidentes para aquellos expertos en la técnica. La metodología general de este tipo se describe en, por ejemplo, Brandsma, L., Synthesis of Acetylenes, Alienes and Cumulenes: Methods and Techniques, 2004, Elsiever Academic Press, chapter 16, paginas 293-317; Transition Metals-Catalysed Couplings of Acetylenes with sp2 -halides, Sonogashira, K. , J. Organomet. Chem., 2002, 653, 46-49; Tykwinski, R. R. , Angew. Chem. Int.Ed., 2003, 42, 1566-1568. El triflato de vinilo (V) en donde X es O-triflato y PG es t-Boc, puede prepararse como se describe en la literatura (Wustrow, D. J. , Synthesis, 1991, 993-995). El compuesto acetilénico (VIII) puede prepararse a partir del triflato (V) por medio de una reacción de acoplamiento de paladio catalizado con trimetilsililacetileno seguido por, si es necesario, la desprotección del grupo de trimetilsililo usando, por ejemplo, fluoruro de potasio en un solvente adecuado. Alternativamente, la preparación del compuesto (VIII) en donde R es H y PG es t-Boc, puede completarse al deshidratar un compuesto de la fórmula (VII), por ejemplo, por mesilación seguido por el tratamiento con una base adecuada, por ejemplo, diisopropiletilamina. Los compuestos de heteroarilo acetilénico de la fórmula (IX) pueden prepararse por diversos métodos descritos en la literatura . En el proceso (b) , las reacciones se llevaron a cabo usando métodos similares a aquellos descritos arriba para la preparación de los compuestos de la fórmula (VIII). Si es necesario, un nitrógeno en el anillo de hidantoina de los compuestos de la fórmula (X) pueden protegerse usando SEMCl (R3 = SEM) antes de que la reacción catalizada de paladio se realice. Los compuestos de la fórmula (X) pueden prepararse por la desprotección del ácido catalizado de los compuestos de la fórmula (V) (PG = t-Boc), seguido por la reacción con un compuesto de la fórmula (II), en la misma manera como se describe arriba para la preparación de los compuestos de la fórmula (I) . En el proceso (c) , las reacciones se llevaron a cabo en una manera similar a aquellas descritas arriba para la preparación de los compuestos de la fórmula (VIII). Si es necesario, un nitrógeno del anillo de hidantoina de los compuestos de la fórmula (XI) puede protegerse usando SEMCl (R3 = SEM) antes de que la reacción de paladio catalizado se realice. El compuesto (XI) se preparó convenientemente a partir del compuesto (VIII) en donde R es trimetilsililo y PG es t-Boc al remover el ácido catalizado del grupo t-Boc (por ejemplo, usando un cloruro de acetilo en metanol), seguido por la reacción con un compuesto de la fórmula (II), como se describe arriba para la reacción entre los compuestos de las fórmulas (II) y (III) . Se apreciará por aquellos expertos en la técnica que en los procesos de la presente invención ciertos grupos funcionales potencialmente reactivos tal como grupos hidroxilo o amino en los reactivos de partida o compuestos intermediarios pueden ser necesarios para protegerse por grupos protectores adecuados. Así, la preparación de los compuestos de la invención pueden involucrar, a diversas etapas, la adición y remoción de uno o más grupos protectores . Los grupos protectores adecuados y detalles de los procesos para agregar y remover tales grupos se describen en 'Protective Groups in Organic Chemistry', editado por J.W.F. McOmie, Plenum Press (1973) and 'Protective Groups in Organic Synthesis', 3ra edición, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1999). Los compuestos de la invención e intermediarios de los estos pueden aislarse a partir de sus mezclas de reacción y, si es necesario se purificó además, usando técnicas estándar. La presente invención se explicará además ahora con referencia a los siguientes ejemplos ilustrativos.

Métodos generales Los espectros 1H RMN y 13C RMN se registraron en un instrumento Varian Inova 400 MHz o un instrumento Varian Mercury-VX 300 MHz. Los picos centrales de cloroformo-d (dH 7.27 ppm), dimetilsulfóxido-dd (dH 2.50 ppm), acetonitrilo-d3 (dH 1.95 ppm) o metanol-d4 (dH 3.31 ppm) se usaron como referencias internas. La cromatografía de columna se llevó a cabo usando gel de sílice (0.040-0.063 mm, Merck). Una columna Kromasil KR-100-5-C?8 (250 x 20 mm, Akzo Nobel) y mezclas de acetonitrilo/agua con TFA 0.1% a una relación de flujo de 10 mL/min se usaron por CLAR preparativa. A menos que se indique de otra manera, los materiales de partida están comercialmente disponibles. Todos los solventes y reactivos comerciales fueron de grado laboratorio y se usaron como se reciben. El siguiente método se usó para el análisis CL/EM: Instrumento Agilent 1100; Columna Waters Symmetry 2.1 x 30 mm; Masa APCl; Relación de flujo 0.7 mL/min; Longitud de onda 254 ó 220 nm; Solvente A: agua + TFA 0.1%; Solvente B: acetonitrilo + TFA 0.1%; Gradiente 15-95%/B 2.7 min, 95% B 0.3 min.

El siguiente método se usó por el análisis CL: Método A. Instrumento Agilent 1100; Columna: Kromasil C18 100 x 3 mm, 5µ tamaño de partícula, Solvente A: TFA 0.1%/agua, Solvente B: TFA 0.08%/acetonitrilo, Relación de flujo 1 mL/min, Gradiente 10-100%/B 20 min, 100% B 1 min. La absorción se midió a 220, 254 y 280 nm. Método B. Instrumento Agilent 1100; Columna: XTerra C 8, 100 x 3 mm, 5µ tamaño de partícula, Solvente A: 15mM NH3/agua, Solvente B: acetonitrilo, Relación de flujo 1 mL/min, Gradiente 10-100%/B 20 min, 100% B 1 min. La absorción se midió a 220, 254 y 280 nm.

Abreviaciones : Ac acetilo DMF N, N-dimetilformamida DMSO dimetil sulfóxido eq. Equivalente Et etilo LDA diisopropil amida de litio Me metilo EM espectroscopia de masa tert terciario THF tetrahidrofurano TFA ácido trifluoroacético Ejemplo 1 trifluoroacetato de (5S) -5- ( { [4-[ ( 6-Metoxipiridin-3-il) etinil] -3, 6-dihidropiridin-l (2H) -il] sulfonil }metil) -5-metilimidazolidin-2, 4-diona El 4- [ (6-metoxipiridin-3-il) etinil] -3, 6-dihidropiridin-1 (2H) -carboxilato de tert-Butilo (85 mg, 0.27 mmol) se disolvió en THF (4 mL) y HCl (4 mL) y se agita a temperatura ambiente durante 1 hora. El clorohidrato de 2-metoxi-5-( 1, 2, 3, 6-tetrahidropiridin-4-iletinil) piridina resultante se disolvió en EtOH/tolueno y se concentró (tres veces) y luego se secó bajo vacío. El producto se disolvió en THF (3 mL) y DMSO (1 mL) y diisopropiletilamina (106 µL, 0.62 mmol) se agregó bajo argón. La mezcla se enfrió a 0°C y una solución de cloruro de [ (4S) -4-metil-2, 5-dioxoimidazolidin-4-il] metansulfonilo (73 mg, 0.32 mmol) en THF (1 mL) se agregó. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3.5 horas, se concentró y purificó en CLAR preparativa para dar el producto como un sólido (4 mg) . XH-RMN (CD3CN) : d 8.48 (ÍH, s); 8.26 (1H, m) ; 7.68 (ÍH, dd) ; 6.77 (ÍH, d) ; 6.29 (ÍH, s); 6.14 (ÍH, m) ; 3.91 (3H, s); 3.86 (2H, m) ; 3.41 (2H, q) ; 3.39 (2H, m) ; 2.41 (2H, m) ; 1.47 (3H, s) . APCI-EM m/z: 405 [MH+ - CF3COOH] . a) 4- [ ( 6-metoxipiridin-3-il) etinil] -3, 6-dihidropiridin-l (2H) -carboxilato de tert-Butilo A una solución de 4-hidroxi-4- [ (6-metoxipiridin-3-il) etinil] piperidin-1-carboxilato de tert-butilo (285 mg, 0.86 mmol) en diclorometano (2.5 mL) y piridina (2.5 mL) a 0°C se le agregó tribromuro de fósforo (85 µL, 0.90 mmol). Después de 2.5 horas, se agregó más tribromuro de fósforo (30 µL) y la reacción se agitó durante otras 2 horas. La mezcla se vació en agua y el pH se neutralizó a 7 con ácido cítrico (10%). La capa acuosa se extrajo cuatro veces con diclorometano y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua, se secaron y se concentraron hasta un aceite amarillo (185 mg) . El producto crudo se purificó por cromatografía instantánea usando un gradiente de 0 hasta 100% EtOAc en heptano que dio el compuesto del subtítulo como un aceite (85 mg) . ^-RMN (CDC13) : d 8.25 (ÍH, m) ; 7.60 (ÍH, m) ; 6.71 (ÍH, d) ; 6.11 (ÍH, m) ; 4.03 (2H, m) ; 3.95 (3H, s); 3.55 (2H, m) ; 2.34 (2H, m) ; 1.51 (3H, s); 1.49 (9H, s) . APCI -EM m/ z : 315 [MH+ ] . b ) 4-hidroxi-4- [ ( 6-metoxipiridin-3-il) etinil] piperidin-1-carboxilato de tert-Butilo El compuesto del subtítulo se preparó siguiendo un método por Yamanaka, , et al, Synth. Commun., 1983, 312-314. A una solución de 5-bromo-2-metoxipiridina (188 mg, 0.99 mmol) y 4-etinil-4-hidroxipiperidin-l-carboxilato de tert-butilo (250 mg, 1.11 mmol) en Et3N (1.5 mL) se agregó Cul (5% mol) y PdCl2(PPh3)2 (3% mol) y la mezcla se calentó a 80°C durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró y purificó por cromatografía instantánea usando un gradiente de 10 hasta 100% EtOAc en heptano que dio el compuesto del subtítulo como un sólido (285 mg) . ^-RMN (DMSO-d6): d 8.26 (ÍH, m) ; 7.75 (ÍH, dd) ; 6.83 (1H, d) ; 5.75 (ÍH, s); 3.86 (3H, s); 3.59 (2H, m) ; 3.24 (2H, m) ; 1.81 (2H, m) ; 1.61 (2H, m) ; 1.40 (9H, s) . APCI-EM m/z: 277 [MH+-56] . c) 4-etinil-4-hidroxipiperidin-l-carboxilato de tert-Butilo Se preparó a partir de 4-oxopiperidin-l-carboxilato de tert-butilo como en la WO 00/35908. ?H RMN (300 MHz, CDC13) : d 3.77 (dd, 2H) , 3.26 (ddd, 2H) , 2.52 (s, ÍH), 2.03 (s, ÍH), 1.89 (tdd, 2H) , 1.70 (ddd, 2H) , 1.44 (d, 9H) . CGEM-EM m/z: 225 [M+] . d) cloruro de [ (4S) -4-Metil-2, 5-dioxoimidazolidin-4-il] metansulfonilo Se preparó de conformidad con los métodos descritos en las siguientes publicaciones: Mosher, J. , J. Org. Chem., 1958, 23, 1257; Griffith, O., J. Biol. Chem., 1983, 258, (3), Ejemplo 2 Trifluoroacetato de (5S) -5- ( { [4- [ ( 6-Fluoropiridin-3-il) etinil] -3, 6-dihidropiridin-l (2H) -il] sulfonil }metil) -5-metilimidazolidin-2, 4-diona El compuesto del título se obtuvo a partir de 5-bromo-2-fluoropiridina por el mismo método como se describe por el Ejemplo 1. XH-R N (DMSO-d6) : d 10.77 (ÍH, bs); 8.38 (ÍH, d) ; 8.06 (2H, m) ; 7.27 (ÍH, m) ; 6.29 (ÍH, m) ; 3.81 (3H, s); 3.75 (2H, m) ; 3.48 (2H, m) ; 3.30 (2H, m) ; 2.33 (2H, m) ; 1.34 (3H, S). APCI-EM m/z: 393 [MH+ - CF3COOH] .

Ejemplo 3 Trifluoroacetato de 5-{[l-({[(4S) -4-Meti1-2, 5-dioxoimidazolidin-4-il] metil } sulfonil) -1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il] etinil } piridin-2-carbonitrilo El compuesto del título se obtuvo a partir de 5-bromopiridin-2-carbonitrilo por el mismo método como se describe por el Ejemplo 1. XH-RMN (CD3CN) : d 8.71 (ÍH, s); 8.48 (ÍH, bs); 7.94 (ÍH, dd) ; 7.80 (ÍH, d) ; 6.29 (2H, m) ; 3.89 (2H, q) ; 3.41 (2H, q) ; 3.39 ( 2H , 1 ) ; 2 . 44 ( 2H , m) ; 1 . 4 6 ( 3H , s ) . APCI -EM m/ z : 400 [MH+ - CF3COOH ] .

Ejemplo 4 (5S)-5-({ [4-[ (6-Etilpiridin-3-il) etinil] -3, 6-dihidropiridin-1 (2H) -il] sulfonil }metil) -5-metilimidazolidin-2, 4-diona El compuesto del título se preparó por un método descrito por Nishihara, et al. J. Org. Chem., 2000, 65, 1780-1787. A una solución de 2-etil-5-[ (trimetilsilil) etinil] piridina (0.22 g, 1.1 mmol) y trifluorometansulfonato de 1- ( { [ (4S) -4-metil-2, 5-dioxoimidazolidin-4-il]metil } sulfonil) -1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il (0.42 g, 1 mmol) se le agregó CuCl (10% mol) y PdCl2(PPh3)2 (5% mol) y la mezcla se calentó a 85°C durante 6 horas. La mezcla se dividió entre EtOAc (20 mL) y agua (10 mL) , y la capa acuosa se extrajo tres veces con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, agua y se concentraron hasta un aceite café. La purificación en CLAR preparativa dio el compuesto del título como un sólido (20 mg) . 1ti RMN (DMSO-de): d 10.75 (ÍH, s) ; 8.56 (ÍH, d, J= 1.8 Hz) ; 8.02 (ÍH, s); 7.80 (ÍH, m) ; 7.32 (ÍH, d, J= 8.1 Hz); 6.24 (ÍH, s) ; 3.81 (2H, d, J= 3.2 Hz) ; 3.45 (2H, q, J= 26.9 Hz) ; 3.34 - 3.21 (2H, m) ; 2.75 (2H, q, J= 20.8 Hz) ; 2.34 (2H, m) ; 1.29 (3H, s); 1.19 (3H, t, J= 7.6 Hz) . APCI-EM m/z: 403 [MH+] . a) 2-Etil-5- [trimetilsilil) etinil] piridina La 5-Bromo-2-etil-piridina (0.707 g, 3.8 mmol) (preparada de conformidad con J. Org. Chem., 1988, 53(2), 386-390), etinil (trimetil) silano (1.6 mL, 11.4 mmol), Cul (0.072 g, 0.38 mmol) y PdCl2(PPh3)2 (0.267 g, 0.38 mmol) en Et3N (5 mL) se agitaron a 80°C durante 4 h. Después de enfriar el solvente se removió bajo vacío y el residuo se procesó por cromatografía para dar 0.25 g (32%) del compuesto del subtítulo. APCI-EM m/z: 204 [MH+] . b) Trifluorometansulfonato de 1- ( { [ (4S) -4-Metil-2, 5-dioxoimidazolidin-4-il]metil } sulfonil) -1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il El clorohidrato de trifluorometansulfonato de 1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il se hizo reaccionar con cloruro de [ (4S) -4-metil-2, 5-dioxoimidazolidin-4-il]metansulfonilo (Ejemplo ld) de la misma manera como para la preparación del Ejemplo 1. XH RMN (DMSO-de): d 10.77 (ÍH, s), 8.04 (ÍH, d) , 6.10 (ÍH, t) , 3.88 (2H, q) , 3.36-3.58 (4H, m) , 2.50-2.56 (2H, m) , 1.32 (3H, s) . APCI-EM m/z: 422 [MH+] . c) cloruro de 4- {[ (trifluorometil) sulfonil] oxi) -1, 2 , 3, 6-tetrahidropiridinio El 4-{ [ (trifluorometil) sulfonil] oxi} -3, 6-dihidropiridin-1 (2H) -carboxilato de tert-Butilo (3.77 g, 11.4 mmol) se disolvió en THF (15 mL) y se concentró, el ácido clorhídrico (15 mL) se agregó. Después de 1 hora, el solvente se evaporó y el producto se secó por evaporación azeotrópica con tolueno y metanol para dar un sólido beige (88%) que se usó sin purificación adicional. 1H RMN (CDC13) : d 9.72 (2H, s), 6.22 (ÍH, s) , 3.75 (2H, q) , 3.30 (2H, t) , 2.65 (2H, td) . APCI-EM m/z: 232 [MH+] . d) 4-{ [ (trifluorometil) sulfonil] oxi }-3, 6-dihidropiridin-1 (2H) -carboxilato de tert-Butilo Una solución de N-boc-piperidin-4-ona (10.14 g, 50 mmol) en THF (80 mL) se le agregó gota a gota a una solución fría (-78°C) de LDA 2M en THF (30 mL, 60 mmol, 1.2 eq. ) y THF (80 mL) durante aproximadamente 30 minutos. Después de agitar 10 minutos adicionales, una solución de 1, 1, 1-trifluoro-N-fenil-N- [ (trifluorometil) sulfoniljmetansulfonamida (20 g, 56 mmol, 1.1 eq. ) en THF (80 mL) se agregó y la mezcla se permitió entibiar a temperatura ambiente. La solución se lavó con agua, la capa acuosa se lavó con EtOAc (x 2), y las fases orgánicas se combinaron y lavaron con solución de cloruro de amonio saturado, salmuera, se secaron (sulfato de sodio) y evaporaron. El residuo se filtró a través de alúmina neutral (200 g) eluyendo con n-heptano seguido por n-heptano/EtOAc 9:1. Después de la evaporación, el espectro H-RMN muestra todavía algún agente triflante presente pero el producto se usó sin purificación adicional. Rendimiento 13.17 g (79.5%).

(Wustrow, D: J. , Synthesis, 1991, 993-995). H RMN (CDC13) : d 5.77 (ÍH, s) , 4.05 (2H, q) , 3.64 (2H, t), 2.45 (2H, quinteto), 1.48 (9H, s) . CGEM-EM m/z: 274 [M-57].

Ejemplo 5 (5S)-5-Metil-5-({ [4-{ [6- (trifluorometil) piridin-3-il] etinil } -3, 6-dihidropiridin-l (2H) -il] sulfonil }metil) imidazolidin-2, 4-diona El compuesto del título se sintetizó en el mismo camino como en el Ejemplo 4 pero iniciando a partir de 2-trifiuorometil-5- (trimetilsilaniletinil) piridina y trifluorometansulfonato de 1- ( { [ (4S) -4-metil-2, 5-dioxoimidazoiidin-4-il] metil} sulfonil) -1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il (Ejemplo 4b) . XH RMN (DMSO-de): d 10.75 (ÍH, s) ; 8.81 (ÍH, s); 8.14 (ÍH, d, J= 8.4 Hz); 8.02 (ÍH, s) ; 7.80 (ÍH, m) ; 7.19 (ÍH, d, J= 8.4 Hz); 7.32 (ÍH, d, J= 8.1 Hz) ; 6.24 (ÍH, s); 3.81 (2H, d, J= 3.2 Hz); 3.34 - 3.21 (2H, m) ; 3.30 (3H, s); 2.75 (2H, q, J= 20.8 Hz); 2.34 (2H, m) ; 1.19 (3H, t, J= 7.6 Hz) . APCI-EM m/z: 443 [MH+] . a) 2-Trifluorometil-5- (trimetilsilaniletinil) piridina El compuesto del título se preparó a partir de 5-yodo-2- (trifluorometil) piridina en 98% de rendimiento en el mismo camino como en el Ejemplo 4a. APCI-EM m/z: 244 [MH+] . b) 5-Yodo-2- (trifluorometil) piridina Una solución de 6- (trifluorometil) piridin-3-amina (1.9 g, 12 mmol) en ácido tetrafluoroborónico (50%, 23 mL) se enfrió en un baño de hielo. A la solución espesa resultante, NaN02 (l.O g, 16 o mmol) se le agregó en pequeñas porciones bajo agitación. Después de 15 minutos, una solución de Kl (2.4 g, 14 mmol) en agua (25 mL) se agregó en pequeñas porciones. La mezcla se permitió para alcanzar temperatura ambiente y luego se agitó durante 40 minutos adicionales. La solución se decoloró con Na2S203 (10% ac.) y se neutralizó cuidadosamente con NaHC0 acuoso saturado. La solución acuosa se extrajo con EtOAc/éter de dietilo (2 x 50 mL) . Las capas orgánicas se secaron y purificaron en cromatografía de columna con EtOAc/heptano (1:2) para dar el compuesto del título (1.2 g) . APCI-EM m/z: 274 [MH+] .

Ejemplo Farmacológico Ensayos de Enzimas Aisladas MMP12 El dominio catalítico de MMP12 humano recombinante puede expresarse y purificarse como se describe por Parkar A. A. et al, (2000), Protein Expression and Purification, 20, 152. La enzima purificada puede usarse para monitorear los inhibidores de la actividad como sigue: MMP12 (50 ng/ml concentración final) se incuba durante 60 minutos a temperatura ambiente con el substrato sintético Mca-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH2 (10 µM) en solución amortiguadora de ensayo (0.1M solución amortiguadora "Tris-HCl" (Marca registrada), pH 7.3 que contiene NaCl 0.1M, 20 mM CaCl2, 0.020 mM ZnCl y 0.05% (p/v) de detergente "Brij 35" (Marca registrada)) en la presencia (10 concentraciones) o ausencia de inhibidores. La actividad se determina al medir la fluorescencia a ?ex 320 nm y ?em 405 nm. El porcentaje de inhibición se calcula como sigue: El % de inhibición es igual a la [Fluorescencia m¿s ?nh?b?dor-Fluorescenciarespa?do] dividido por la [Fluorescenciamenos inhibidor-FluorescenciareSpaido] • MMP8 La purificación pro-MMP8 se obtiene a partir de Calbiochem. La enzima (a 10 µg/ml) se activa por acetato de p-amino-fenil-mercúrico (APMA) a 1 mM durante 2.5 h, 35°C. La enzima activada puede usarse para monitorear inhibidores de la actividad como sigue: MMP8 (200 ng/ml concentración final) se incuba durante 90 minutos a 35°C (80% H20) con el substrato sintético Mca-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH2 (12.5 µM) en una solución amortiguadora de ensayo (0.1M solución amortiguadora "Tris-HCl" (Marca registrada), pH 7.5 que contiene NaCl 0.1M, 30mM CaCl2, 0.040 mM ZnCl y 0.05% (p/v) de detergente "Brij 35" (Marca registrada) ) en la presencia (10 concentraciones) o ausencia de inhibidores. La actividad se determina al medir la fluorescencia a ?ex 320 nm y ?em 405 nm. El porcentaje de inhibición se calcula como sigue: El % de inhibición es igual a la [Fluorescencia más inhibidor_Fluorescenciarespaido] dividido por la [Fluorescenciamenos in ibidor-FluoreSCenCÍarespaldo] • MMP9 El dominio catalítico MMP9 humano recombinante se expresó y luego se purificó por cromatografía de columna quelada Zn seguido por cromatografía de columna de afinidad por hidroxamato. La enzima puede usarse para monitorear inhibidores de la actividad como sigue: El MMP9 (5 ng/ml concentración final) se incubo durante 30 minutos a temperatura ambiente con el substrato sintético Mca-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH2 (5 µM) en una solución amortiguadora de ensayo (0.1M solución amortiguadora "Tris-HCl" (Marca registrada), pH 7.3 que contiene NaCl 0.1M, 20mM CaCl2, 0.020 mM ZnCl y 0.05% (p/v) de detergente "Brij 35" (Marca registrada)) en la presencia (10 concentraciones) o ausencia de inhibidores. La actividad se determina al medir la fluorescencia a ?ex 320 nm y ?em 405 nm. El porcentaje de inhibición se calcula como sigue: El % de inhibición es igual a la [Fluorescencia máS ?nh?b?dor-FluorescenciareSpaido] dividido por la [Fluorescenciamen?s ?nh?b?dor-Fluorescenciarespaido] • MMP14 El dominio catalítico MMP14 humano recombinante puede expresarse y purificarse como se describe por Parkar A. A. et al, (2000), Protein Expression and Purification, 20, 152. La enzima purificada puede usarse para monitorear los inhibidores de la actividad como sigue: El MMP14 (10 ng/ml concentración final) se incuba durante 60 minutos a temperatura ambiente con el substrato sintético Mca-Pro-Cha-Gly-Nva-His-Ala-Dpa-NH2 (10 µM) en una solución amortiguadora de ensayo (0.1M solución amortiguadora "Tris-HCl" (Marca registrada), pH 7.5 que contiene 0. ÍM NaCl, 20mM CaCl2, 0.020 mM ZnCl y 0.05% (p/v) de detergente "Brij 35" (Marca registrada) ) en la presencia (5 concentraciones) o ausencia de inhibidores. La actividad se determina al medir la fluorescencia a ?ex 320 nm y ?em 405 nm. El porcentaje de inhibición se calcula como sigue: El % de inhibición es igual a la [Fluorescencia máS inhibidor- FluorescenciareSpaido] dividido por la [Fluorescenciamenos inhibidor- Fluorescenciarespaido] • Un protocolo para probar contra otras metaloproteinasas de matriz, incluyendo MMP9, usando pro MMP expresado y purificado se describe por ejemplo, por C. Graham Knight et al, (1992) FEBS Lett, 296(3), 263-266.

MMP19 El dominio catalítico MMP19 humano recombinante puede expresarse y purificarse como se describe por Parkar A. A. et al, (2000), Protein Expression and Purification, 20: 152. La enzima purificada puede usarse para monitorear los inhibidores de la actividad como sigue: El MMP19 (40 ng/ml concentración final) se incuba durante 120 minutos a 35°C con el substrato sintético Mca-Pro-Leu-Ala-Nva-Dpa-Ala-Arg-NH2 (5 µM) en una solución amortiguadora de ensayo (0.1M solución amortiguadora "Tris-HCl" (Marca registrada), pH 7.3 que contiene NaCl 0.1M, 20mM CaCl2, 0.020 mM ZnCl y 0.05% (p/v) de detergente "Brij 35" (Marca registrada) ) en la presencia (5 concentraciones) o ausencia de inhibidores. La actividad se determina al medir la fluorescencia a ?ex 320 nm y ?em 405 nm. El porcentaje de inhibición se calcula como sigue: El % de inhibición es igual a la [Fluorescencia máS mibidor- FluorescenciareSpaido] dividido por la [Fluorescenciamenos ínmbidor- FluorescenciareSpaido] • Enlace de Proteina El enlace de proteína de plasma se determinó por ultrafiltración en un ensayo de formato de 96 pozos automatizado. En cada ocasión de prueba el enlace de proteína de plasma de un compuesto de referencia (budesonida) se monitoreo en paralelo. Los compuestos probados (10 mM se disolvió en DMSO) se agregaron al plasma a una concentración final de 10 µM y se equilibraron a temperatura ambiente durante 10 minutos. 350 µL del plasma se transfirieron a una placa de ultrafiltración, Microcon-96 (lOkDa cutoff, Millipore) . La placa de ultrafiltración se centrífugo a 3000G durante 70 minutos a temperatura ambiente. Después de la centrifugación, la concentración de los compuestos en el agua del plasma obtenido (la fracción no enlazada) se determinó por CL-EM/EM usando una curva de calibración de 3 puntos y se comparó a la concentración en el plasma con picos original. Los análisis se llevaron a cabo usando un sistema cromatográfico de gradiente con ácido acético/acetonitrilo como fases móviles. La detección se hizo usando un espectrómetro de masa de cuatro polos triple, API3000 ó API4000, de Applied Biosystems, con una interfaz o electrorocío.

Protocolo para la Determinación de la Solubilidad La solubilidad de los compuestos de prueba en solución amortiguadora de fosfato 0.1M, pH 7.4, se determinó como sigue: El compuesto de prueba (1 mg) se pesó en un vial de vidrio de 2 mL con una tapa de rosca y solución amortiguadora de fosfato 0. ÍM a un pH 7.4. (1.00 mL) se agregó. El vial de muestra luego se sónico durante alrededor de 10 minutos y luego se colocó en una tabla de agitación durante la noche a 20°C. Los contenidos del vial de muestra luego se filtraron a través de un filtró Millipore Millex-LH 0.45 µm en un nuevo vial de vidrio de 2 mL para dar una solución clara. La solución clara (40 µL) se transfirió a un nuevo vial de vidrio 2 mL y se diluyó con una solución amortiguadora de fosfato 0.1M, pH 7.4 (960 µL) . Una curva de calibración estándar para cada compuesto de prueba particular se estableció usando soluciones de concentración conocidas. Estas soluciones de concentración conocidas se eligen normalmente a concentraciones que tienen desde ~10 µg/mL y ~50 µg/mL. Estas se prepararon al disolver un peso conocido del compuesto en 99.5% de etanol (500 µL) y luego se sónico durante un minuto si es necesario. Si el compuesto todavía no se disolvió completamente, DMSO (500 µL) se agregó y la mezcla se sónico durante un minuto adicional. La solución resultante luego se diluyó al volumen apropiado con una mezcla de acetonitrilo/acetato de amonio lOOmM, a un pH 5.5 20-50/80-50. Si es necesario, una solución estándar más diluida adicional se preparó por dilución. Las soluciones del compuesto de prueba y soluciones estándar luego se analizaron por CLAR con detección UV usando los siguientes parámetros y la solubilidad del compuesto de prueba en solución amortiguadora de fosfato 0. ÍM se determinó por ello: CLAR-equipo: HP1100/HP1050 Columna: HyPURITY Advanced, 5 µm, 125 x 3mm Temperatura de columna: TA Relación de flujo: 1 mL/min Fase móvil: A = acetonitrilo B = 100 mM acetato de amonio pH 5.5 Relación isocrática: A/B 20-50/80-50 Detector UV: 254 nm (220-280 nm) Volumen de inyección: 20 µL Sistema de manejo de datos cromatográfico: ATLAS/Xchrome Protocolo para la Determinación de Log D Los valores Log D a un pH 7.4 se determinaron usando un método de matraz agitado. Una cantidad pequeña apropiada del compuesto de prueba se colocó en un vial de vidrio de 2 mL con una tapa de rosca a temperatura ambiente y 600 µL de 1-octanol (saturado con una solución amortiguadora de fosfato 10 mM a un pH 7.4) se agregó. El vial luego se sónico durante un minuto hasta disolver el compuesto completamente. Luego 600 µL de la solución amortiguadora de fosfato 10 mM a un pH 7.4 (saturado con 1-octanol) se agregó y el vial se agitó durante 4 minutos hasta mezclar las dos fases. Las dos fases luego se separaron por centrifugación de la muestra a lOOOg durante 10 minutos a temperatura ambiente. Finalmente, las fases orgánicas y acuosas separadas se analizaron en duplicado por CLAR usando las siguientes condiciones: Inyector: Spark Holland, Endurance Bomba: HP1050 Detector: Kratos, Spectroflow 783 Columna: YMC Pro C18, 5 µm, 50x4mm, Parte no. AS12S050504QT Temperatura de columna: TA Relación de flujo: 1 mL/min Fase móvil: A = acetonitrilo B = 25 mM ácido fórmico C = 100 mM acetato de amonio pH 5.5 D = 0.05% acetato de amonio Gradiente: 0.00 min A/B o A/C o A/D 5/95 5.00 min A/B o A/C o A/D 100/0 7.00 min A/B o A/C o A/D 100/0 7.02 min A/B o A/C o A/D 5/95 Detector UV: 254 nm Volumen de inyección: 50 µL fase acuosa no diluida y 5 µL de 10 veces diluida (con metanol) fase orgánica Tiempo de ciclo de inyección: 11 minutos Centrifuga: Hettich, Universal 30RF Vórtice: Scientific Industries, Vortex-2 genie Sistema de manejo de datos cromatográfico: ATLAS/Xchrome Los valores log D PH7. se calcularon automáticamente (Ver ecuación de abajo) por una hoja Excel después de la escritura manual de las respuestas del área del pico del compuesto que se reportaron a partir del sistema de manejo de datos cromatográfico ATLAS. Cálculo de log DpH 7. por la ecuación: La siguiente tabla muestra datos para una selección representativa de los compuestos de la presente invención y para compuestos seleccionados de WO 02/074767.

Tabla Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (15)

1. Reivindicaciones Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones . 1. Un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo caracterizado porque R1 representa alquilo Cl hasta 2, ciclopropilo, F, CN, OCH3, SCH3 o OCF3; el grupo alquilo o ciclopropilo es además opcionalmente substituido por uno o más átomos fluoro; y R2 representa alquilo Ci hasta 3.
2. 2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R1 representa alquilo Cl hasta 2 opcionalmente además substituido por uno o más átomos fluoro.
3. 3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R1 representa CF3.
4. 4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R1 representa etilo.
5. 5. El compuesto de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizado porque R2 representa metilo o etilo.
6. 6. El compuesto de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque R2 representa metilo.
7. 7. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque se selecciona del grupo que consiste de: (5S)-5- ({ [4-[ (6-metoxipiridin-3-il) etinil] -3, 6-dihidropiridin-1 (2H) -il] sulfonil }metil) -5-metilimidazolidin-2,4-díona; (5S)-5-({ [4-[ (6-fluoropiridin-3-il) etinil] -3,6-dihidropiridin-1 (2H) -il] sulfonil}metil) -5-metilimidazolidin-2, 4-diona; 5-{ [1- ( { [ (4S) -4-metil-2, 5-dioxoimidazolidin-4-il] metil } sulfonil) -1,2,3, 6-tetrahidropiridin-4-il] etinil }piridin-2-carbonitrilo; (5S)-5-({ [4-[ (6-etilpiridin-3-il)etinil]-3,6-dihidropiridin-1 (2H) -il] sulfonil }metil) -5-metilimidazolidin-2, 4-diona; (5S)-5-metil-5-({ [4-{ [ 6- (trifluorometil) piridin-3-il] etinil} -3, 6-dihidropiridin-l (2H) -il] sulfonil}metil) imidazolidin-2, 4-diona; y sales farmacéuticamente aceptables del mismo.
8. 8. Un proceso para la preparación de un compuesto de la fórmula (I) como se define de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo caracterizado porque comprende: a) la reacción de un compuesto de la fórmula (II) (ID en donde R2 es como se define en la fórmula (I) y L1 representa un grupo de partida, con un compuesto de la fórmula (III) (o una sal del mismo) en donde R1 es como se define en la fórmula (I); o b) la reacción de un compuesto de la fórmula (X) (X) en donde R es como se define en la fórmula (I), R es H o un grupo protector apropiado y X es un grupo de partida tal como haluro o triflato; con un compuesto acetilénico de la fórmula (IX) en donde R1 es como se define en la fórmula (I); o c) la reacción de un compuesto de la fórmula (XI) (XI) en donde R representa H o trimetilsililo, R2 es como se define en la fórmula (I) y R3 representa H o un grupo protector apropiado; con un haluro o triflato de arilo de la fórmula (VI) (VI) en donde R1 es como se define en la fórmula (I) y X representa haluro o triflato; y forma posteriormente opcionalmente una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
9. 9. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 7 en asociación con un adyuvante, diluyente o portador farmacéuticamente aceptable.
10. 10. Un proceso para la preparación de una composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque comprende mezclar un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como se define en cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 6 con un adyuvante, diluyente o portador farmacéuticamente aceptable.
11. 11. Un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 7, caracterizado porque es para su uso en la terapia.
12. 12. El uso de un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 7 en la fabricación de un medicamento para el uso en el tratamiento de una enfermedad obstructiva de las vías respiratorias.
13. 13. El uso de conformidad con la reivindicación 12, en donde la enfermedad obstructiva de las vías respiratorias es asma o enfermedad pulmonar obstructiva crónica.
14. 14. Un método para tratar una enfermedad o condición mediada por MMP12 y/o MMP9 , caracterizado porque comprende administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 7.
15. 15. Un método para tratar una enfermedad obstructiva de las vías respiratorias, caracterizado porque comprende administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 7.