MXPA06013787A - Uso de un extracto del ginko biloba para preparar una medicina para tratar la enfermedad de parkinson. - Google Patents

Abstract

La invencion relaciona el uso de extractos de Ginkgo biloba, y en particular extractos de Ginkgo biloba que contienen 20-30% de glicosidos de flavonoides, 2.5-4.5 de ginkgolidos A, B, C, y J, 2-4% de bilobalidos, menos de 10% de proantocianiodinas y menos de 10 ppm de compuestos de tipo alquifenol, para fabricar un medicamento viable para tratar la enfermedad de Parkinson. A su vez mostre que el tratamiento con este extracto de Ginkgo biloba antes mencionado actua como un agente antioxidante y/o antilipoperoxidante, regula la actividad de la MAO, incrementa la actividad de la tirosina hidroxilasa, incrementa y restaura el contenido de dopamina en el parkinsonismo inducido con MPTP.

Description

USO DE UN EXTRACTO DEL GINKGO BILOBA PARA PREPARAR UNA MEDICINA PARA TRATAR LA ENFERMEDAD DE PARKINSON Descripción de la invención Campo de la invención La presente invención esta dirigida al uso de un extracto del Ginkgo biloba, útil para fabricar un medicamento viable para tratar la enfermedad de Parkinson. Esta representa una alternativa potencial e importante para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.

Antecedentes Es conocido que los extractos de Ginkgo biloba tienen una actividad en el campo cardiovascular y en particular la reducción de la adhesión plaquetaria; en el sistema nervioso central, en particular una actividad neuroprotectora; en el sistema neurosensorial, en particular en la protección de la retina (DeFeudis et al., Ginkgo biloba Extract (EGb 761), Pharmaceutical Activities and Clinical Applications (Elsevier, Paris, 1991). Sus preparaciones han sido objeto de un cierto número de patentes, de las cuales se pueden mencionar las patentes Europeas EP 431 535 y EP 431 536, y la patente Americana U.S. Pat. No. 5, 389, 370. Ciertos productos pueden ser usados para preparar medicamentos para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson. En la actualidad el más usado es la ß-3, 4-dihydroxifenil- a-alanina conocida como L-DOPA y que así denominaré de aquí en adelante, esta pasa la barrera hematoencefálica y es convertida a dopamina en el cerebro (Quinn, N.P. 1990. Levodopa-based therapy. Pages 169-184, in Therapy of Parkinson's disease. Marcel Dekker, New York). La L-DOPA es inicialmente efectiva, pero su uso prolongado tiene graves efectos secundarios, como la producción de movimientos incontrolados y distonia (Kanazawa, I. 1986. Clinical pathophysilogy of basal ganglia diseases. Vol. 49, pages 65-92, in Vinken, P.T., Bruyn, G.W., Klawans, H.L. (eds): Handbook of Clinical Neurology. Elsevier Science Publishers, New York). Ahora el aplicante ha encontrado que el uso de un extracto del Ginkgo biloba tiene nuevas propiedades farmacológicas, retardando y atenuando el daño dopaminérgico producido en la enfermedad de Parkinson. En particular el aplicante fue capaz de notar los efectos benéficos del uso de un extracto de Ginkgo biloba en un modelo farmacológico de la enfermedad, utilizando la neurotoxina 1 -metil-4-fenil-1 ,2,3,6-tetrahidropiridina denominada de aquí en adelante como MPTP. La enfermedad de Parkinson tiene una incidencia de 168/100,000 especialmente en la población de una edad mayor de 60 años. Los síntomas de esta enfermedad incluyen los movimientos incontrolados, temblor en reposo, disturbios de la marcha, anormalidades posturales y rigidez muscular. La neuropatología primaria asociada con este desorden es la pérdida progresiva y persistente de las neuronas dopaminérgicas originadas en la sustancia nigra pars compacta que proyectan al cuerpo estriado. Esto conduce a un decremento sustancial del neurotransmisor dopamina en la vía nigroestriatal (Jenner, P. 1989. Clues to the mechanism underlying dopamine cell death in Parkinson's disease. J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. (special suppl):22-28). El subsecuente decremento en la síntesis de dopamina correlaciona con el inicio y severidad de los síntomas mencionados. Es importante enfatizar que la síntesis de dopamina esta determinada por la disposición de la actividad de la tirosina hidroxilasa para llevar a cabo la síntesis de catecolaminas incluyendo la dopamina.

Aún cuando estos cambios han sido extensamente documentados, no ha sido identificada la causa que origina el proceso de degeneración neuronal. Sin embargo, hay evidencia creciente del papel que desempeña el proceso de estrés oxidativo producido por radicales libres en esta enfermedad. Los radicales libres son moléculas altamente reactivas producidas en el cuerpo como productos normales del metabolismo y en grandes cantidades por la inflamación, alcoholismo, fumar, radiación, etc. Esas moléculas altamente reactivas pueden oxidar otras moléculas en el cuerpo, haciéndolas inestables y potencialmente muy dañinas. Los radicales libres son moléculas altamente inestables que pueden causar daño al ácido desoxiribonucléico, carbohidratos, lípidos y proteínas en el cuerpo (Halliwell, B. and Gutteridge, J.M.C. Free radicáis in biology and medicine. Oxford-Claredon, 1985). De estos efectos, uno de los más importantes es la peroxidación de lípidos, el índice más comúnmente usado para medir el efecto biológico de los radicales libres. Este daño conocido como estrés oxidativo, está implicado en la patogénesis de un gran número de enfermedades crónicas incluyendo la enfermedad de Parkinson. Los organismos han desarrollado varios mecanismos de defensa para protegerse contra el daño producido por los radicales libres. Esos mecanismos de defensa incluyen las enzimas antioxidantes, atrapadores de los radicales libres, y agentes quelantes de metales (Reiter, R.T. 1995. Oxidative processes and antioxidative defense mechanisms in the aging brain. FASEB J. 9: 526-533). Las enzimas antioxidantes son la catalasa, glutatión peroxídasa, y superóxido dismutasa. Normalmente, hay un balance entre la generación de los radicales libres y sistemas de defensa antioxidante in vivo. Cuando este balance es alterado a favor de la producción de radicales libres debido a la disminución de los sistemas antioxidantes o incremento en la generación de los radicales libres, ocurre el estrés oxidativo. El estrés oxidativo conduce al daño de los ácidos grasos poliinsaturados por peroxidación de lípidos, una reacción en cadena que resulta en numerosos productos de degradación (Niké, E., Noguchi, N. and Gotoh, N. 1993. Dynamics of lipid peroxidation and its inhibition by antioxidants. Biochem. Soc. Trans. 21 : 313-317). Los estudios postmortem en pacientes con la enfermedad de Parkinson han reportado alteraciones relacionadas al estrés oxidativo en la sustancia nigra: el nivel del fierro está elevado (Youdim, M.B.H., Schachar, D. Ben., and Riederer, P. 1989. Is Parkinson's disease a progressive siderosis of substantia nigra resulting in increased iron and melanin induced neurodegeneration? Acta Neurol.

Scand. 126: 47-54), hay una pérdida del glutatión (Sian, J., Dexter, D.T., Lees, A.J., Daniel, S., Agid, Y., Javoy-Agid, F., Jenner, P.P. and Marsden, C.D. 1994. Alteration in glutathione levéis in Parkinson's disease and other neurodegenerative disorders affecting the basal ganglia. Ann. Neurol. 36: 348-355), e incremento de la peroxidación de lípidos (Dexter, D.T., Cárter, C.J., Wells, F.R., Javoy-Agid, F., Agid, Y., Lees, A., Jenner, P. and Marsden, C.D.1989. Basal lipid peroxidation in substantia nigra is increased ¡n Parkinson's disease. J. Neurochem. 52: 381-389). Así, es de considerable interés la investigación de nuevas modalidades útiles para fabricar medicamentos viables para el tratamiento de esta enfermedad.

La MPTP es referido como el mejor modelo experimental de la enfermedad de Parkinson (Gerlach, M., Riederer, P., Przuntek, H., and Youdim, M.B.H. 1991.

MPTP mechanisms of neurotoxicity and their implications for Parkinson's disease. Eur. J. Pharmacol. Mol. Pharmacol. 208:273-286). Cuando la MPTP es administrada a primates que no son humanos y ratones produce hipokinesia y daño neuronal similar al observado en la enfermedad de Parkinson (Heikkila RE, Cabbat FS, Manzino L, Duvoisin RC. 1984. Effects of MPTP on nigrostriatal dopamine in mice. Neuropharmacology 23: 711-713). El ion 1 -metil-4-fenilpiridino que denominaremos de aquí en adelante como MPP+ es el mayor metabolito neurotóxico de la MPTP y es el responsable de sus efectos neurotóxicos. La biotransformación de la MPTP a su metabolito tóxico MPP+ en el cerebro es inicialmente realizada por la enzima monoamino-oxidasa tipo B que denominaremos de aquí en adelante como MAO-B y esta genera radicales libres (Zang, L.Y. and Misra, H.P. 1993. Generation of reactive oxygen species during the monoamine oxidase-catalyzed oxidation of the neurotoxicant, 1-methyl-4-phenyl-1 ,2,3,6-tetrahydropyridine. J. Biol. Chem. 268:16504-16512). La monoamino-oxidasa que denominaremos de aquí en adelante como MAO existe en 2 isoformas A y B. La MAO es la mayor enzima intracelular que metaboliza la dopamina en el sistema nervioso central. La oxidación elevada de la dopamina por I a MAO-B en la enfermedad de Parkinson puede involucrar la producción de peróxido de hidrógeno, una molécula tóxica derivada del oxígeno capaz de inducir la formación de radicales libres, la cual podría potencialmente dañar a las neuronas dopaminérgicas de la vía nigroestríatal (Cohén, G. 1986. Monoamine oxidase, hydrogen peroxide, and Parkinson's disease. Pages 119-125, in Yahr, M.D., and Bergmann, K.J., (eds.), Advances in Neurology: Parkinson's disease, vol. 45, Raven Press, New York). Los pacientes con la enfermedad de Parkinson tienen una elevada actividad de la enzima MAO-B en la sustancia nigra, e inhibidores de la MAO-B tienen efecto potencial neuroprotector en esta enfermedad (Knoll, J. 1995. Rationale for (-) deprenyl (selegiline) medication in Parkinson's disease and in prevention of age-related nigral changes. Biomed. Pharmacother. 49:187-195) y en la neurotoxicidad de la MPTP/MPP+ (Knoll, J. 1995. Rationale for (-) deprenyl (selegiline) medication in Parkinson's disease and in prevention of age-related nigral changes. Biomed. Pharmacother. 49:187-195; Wu, R. M., Mohannakumar, K.P., Murphy, D. L., and Chiueh, C. C. 1994. Antioxidant mechanism and protection of nigral neurons against MPP+ toxicity by deprenyl (selegiline). Ann. N.Y. Acad. Sci. 738:214-221). Como se mencionó, en la actualidad el uso de la L-DOPA, para tratar la enfermedad de Parkinson es lo más frecuente porque es convertida a dopamina en el cerebro. Esta es inicialmente efectiva, pero con frecuencia llega a ser menos efectiva sobre el tiempo y en muchos casos los síntomas de los pacientes llegan a empeorar. La presente invención representa una alternativa potencial y útil para fabricar un medicamento viable para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson. Esto es anticipado que el uso de un extracto del Ginkgo biloba para preparar una medicina para tratar la enfermedad de Parkinson inhibirá ó detendrá el progreso de la enfermedad por reducir la degeneración y disfunción de las neuronas dopaminérgicas de la vía nigroestriatal. Así mismo, actuar como un agente antioxidante y/o antilipoperoxidante, regular y/o inhibir la actividad de la MAO total, MAO-A y MAO-B que es generadora de radicales libres; e incrementar la actividad de la tirosina hidroxilasa, enzima requerida para la síntesis de dopamina. Por extracto de Ginkgo biloba se entiende que es al menos un extracto de los compuestos individuales que pueden ser obtenidos por extracción del árbol Ginkgo biloba y en particular un compuesto flavonoide o un terpeno como un ginkgólido o un bilobálido, o también una mezcla. Para los usos de acuerdo a la invención, un extracto de tipo EGb 761 puede por ejemplo ser escogido. El extracto del EGb 761 es una mezcla bien definida de compuestos activos extraídos de las hojas del Ginkgo biloba. Este es un extracto de las hojas de Ginkgo biloba que es sustancialmente libre de compuestos alquifenoles, tiene un alto contenido de glicósidos de flavonoides, y contiene substancialmente todos los ginkgólidos y bilobálidos originalmente presentes en las hojas. Por extracto de tipo EGb 761 se entiende a un extracto de una composición substancialmente idéntica al del extracto estandarizado EGb 761 definido en el siguiente artículo: K. Drieu, La presse medícale, 31 , Sep. 25, 1986, supplement devote to the extract of Ginkgo biloba (EGb 761), 1455-1457; o en las patentes Europeas EP 431 535 y EP 431 536; y la patente americana US Pat. 5,399,348. Por extracto de tipo EGb 761 es por lo tanto entendido en particular de extractos de Ginkgo biloba comprendiendo de 20 a 30% glicósidos de flavonas, de 2.5 a 4.5% de ginkgólidos A, B, C, y J, de 2 a 4% de bilobálidos, y menos del 10% de proantocianidinas y menos de 10 ppm, y preferiblemente menos de 5 ppm, de compuestos de tipo alquifenol, y en particular extractos de Ginkgo biloba comprendiendo aproximadamente 24% de glicósidos de flavonas, 3.1% de ginkgólidos A, B, C y J, 2.9% de bilobálidos, 6.5% de proantocianidinas y menos de 1 ppm de compuestos de tipo alquifenol. El EGb 761 ha sido usado en la clínica para el tratamiento de la insuficiencia cerebrovascular, demencia degenerativa, alteraciones vasculares periféricas y desórdenes neurosensoriales (DeFeudis, F.V.1998. Gingko biloba extract (EGb761): from Chemistry to the clinic. Pages 401. Ullstein Medical, Wiesbaden).

Una acción polivalente del EGb 761 es responsable de su eficacia en tratar desórdenes clínicos de origen multifactorial. Las subfracciones de varios constituyentes químicos del EGb 761 , aunque activos en modelos farmacológicos, no generalmente reproduce las acciones del extracto total. Así los efectos aditivos, antagonistas y sinergistas de los constituyentes activos del EGb 761 probablemente ocurre con respecto a diversos sitios blanco moleculares en diferentes tejidos y órganos. Ha sido propuesto que los efectos benéficos del EGb 761 en el sistema nervioso central, son probablemente por su acción antioxidante/antilipoperoxidante, por atrapar los radicales superóxido, hidroxilo, y peroxil (Marcocci, L., Packer, L., Droy-Lefaix, M., Sekaki, A., and Gardes-Albert, M. 1994. Antioxidant action of Ginkgo biloba extract EGb 761. Methods Enzymol. 234: 462-475), interactuar con el óxido nítrico (Marcocci, L., Maguire, J.J., Droy-Lefaix, M.T., Packer, L. 1994. The nitric oxide-scavenging properties of Ginkgo biloba extract EGb 761. Biochem. Biophys. Res. Común. 201 : 748-755) inhibir y/o regular la actividad de la MAO que produce radicales libres (DeFeudis, F. V. 1998. Ginkgo biloba extract (EGb761): from Chemistry to the clinic. Pages 401. Ullstein Medical, Wiesbaden). Finalmente el objeto de esta invención es proveer fármacos que contienen este extracto de Ginkgo biloba con un alto contenido de glicósidos de flavonoides, ginkgólidos y bilobálidos originalmente presentes en las hojas y donde no hay sustancialmente peligro de reacciones alérgicas, precisamente por la remoción de los compuestos alquifenoles. Preferiblemente el extracto en la presente invención debe contener: - de 20 a 30 porcentaje en peso, en particular 22 a 26 de porcentaje en peso de glicósidos de flavonoides. -2.5 a 4.5 de porcentaje en peso de ginkgólidos A, B, C y J en total. -2.0 a 4.0 de porcentaje en peso de bilobálidos, -Menos de 10 ppm, en particular menos de 1 ppm de compuestos alquifenoles y -Menos de 10 de porcentaje en peso de proantocianidinas.

Ahora el aplicante ha encontrado que cierto extracto de Ginkgo biloba tiene un uso diferente debido a sus nuevas propiedades, como es retardar y atenuar el daño dopaminérgico producido durante la enfermedad de Parkinson. Así mismo, actuar como un agente antioxidante y/o antilipoperoxidante, regular y/o inhibir la actividad de la MAO que es generadora de radicales libres; incrementar la actividad de la tirosina hidroxilasa enzima requerida para la síntesis de dopamina.

Por lo tanto el objeto de la presente invención es el uso de un extracto de Ginkgo biloba, útil para fabricar un medicamento viable para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson. Las composiciones farmacéuticas pueden ser administradas durante varios meses y comprenden un compuesto de la invención que puede estar en forma de sólidos, por ejemplo polvos, tabletas, cápsulas, liposomas o supositorios, entre muchos otros. Los excipientes pueden ser por ejemplo fosfato de calcio, estearato de magnesio, talco, azúcares, lactosa, dextrina, gelatina, almidón, celulosa, metil celulosa, celulosa carboximetil de sodio, polivinilpirrolidina y cera, entre muchos otros. Las composiciones farmacéuticas conteniendo un compuesto de la invención puede también estar presente en la forma de un líquido, por ejemplo, soluciones, emulsiones, suspensiones o jarabe. Los excipientes apropiados para los líquidos pueden ser por ejemplo, agua, solventes orgánicos como el glicerol ó los glicoles, así como sus mezclas, en varias proporciones, entre muchos otros. La administración del medicamento de acuerdo a la invención puede ser tópico, oral, ruta parenteral, por inyección, como la administración intramuscular, subcutánea, intravenosa, entre otros. La dosis de administración diaria de los ingredientes activos que pueden ser usados de acuerdo a la invención esta comprendido entre 0.1 mg a 1 g dependiendo de la gravedad de la enfermedad de Parkinson. Preferiblemente, para los extractos de Ginkgo biloba, una dosis que comprenda entre 5 mg a 600 mg por día aproximadamente puede ser escogida. Los siguientes ejemplos son sólo ilustrativos y no pretenden limitar la invención en ninguna forma. Utilizé un modelo experimental de la enfermedad de Parkinson involucrado en la generación de los radicales libres como es la MPTP, antes mencionada (Chiueh CC, Huang SJ, and Murphy DL. 1992. Enhanced hydroxyl radical generation by 2'-methyl analog of MPTP: suppression by clorgyline and deprenyl. Synapse. 11(4):346-8). Esto fue con el propósito de evaluar el efecto protector del EGb 761 en el daño inducido por radicales libres, así como su efecto restaurador en los niveles de dopamina. La neurotoxina MPTP ha sido ampliamente usada porque produce la degeneración de las neuronas dopaminérgicas en el cerebro, siendo un buen modelo de la enfermedad de Parkinson inducida experimentalmente. Esos datos demuestran que este extracto del Ginkgo biloba desplaza alta eficacia de protección in vivo en un modelo experimental con roedores, de la enfermedad en el humano, y también indica que este extracto cruza la barrera hematoencefálica para prevenir el daño inducido por los radicales libres producidos por MPTP.

Breve descripción de los dibujos Para un mejor entendimiento de la invención se presenta ésta con la asistencia de 2 dibujos: Figura 1. Esta gráfica muestra que el tratamiento con un extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761 (10 mg/kg) regula la actividad de la MAO-A y MAO-B en el cuerpo estriado en el parkinsonismo inducido con el MPP+. Los resultados son expresados en µmoles de 4 HOQ//g/h. Cada barra representa el promedio +/- el error estándar de 4-6 experimentos por grupo. *Estadisticamente diferente del grupo control, representado como "salina + salina", p<0.05, prueba de Tukey. +Estadisticamente diferente del grupo de MPP+, representado como "salina + MPP+", p<0.05, prueba de Tukey. EGb 761 = extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761; MPP+ = ion 1 -metil-4-fenilpiridino; 4-HOQ = 4-hidroxiquinolina.

Figura 2. Es una gráfica que muestra la restauración que produce el extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761 en los niveles de dopamina en el cuerpo estriado en animales que fueron parkinsonizados previamente con MPTP. Donde A representa el grupo de " salina + salina ", B representa el grupo de " salina + EGb 761 a una dosis de 40 mg/kg ", C representa el grupo de " salina + EGb 761 a una dosis de 120 mg/kg ", D representa el grupo de "MPTP + salina", E representa el grupo de "MPTP + EGb 761 a una dosis de 40 mg/kg", F representa el grupo de "MPTP + EGb 761 a una dosis de 120 mg/kg". Los resultados son expresados en contenido de dopamina en µg/g de tejido. Cada barra representa el promedio ± error estándar de 6-8 experimentos por grupo. * Estadísticamente diferente del grupo tratado con MPTP representado como " salina + MPTP ", p<0.05, prueba de Tukey. **Estadísticamente diferente del grupo tratado con MPTP representado por "salina + MPTP", p<0.01 , prueba de Tukey. +Estadísticamente diferente del grupo control representado por "salina + salina", p<0.05, prueba de Tukey. EGb 761 = extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761 ; MPTP = 1-metil-4-fenil-1 , 2, 3, 6-tetrahidropiridina.

Los siguientes ejemplos son sólo ilustrativos y no para limitar la invención en ninguna fase. Los equipos utilizados no es una limitante, porque equipo equivalente, alternativo o similar se puede usar para desarrollar la presente invención. Para mostrar la importancia del uso de un extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761 útil para fabricar un medicamento viable para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson, se llevaron a cabo las siguientes pruebas: Los ejemplos del 3 al 7 fueron llevados a cabo utilizando ratones macho de la cepa C-57 black de 25-30 g de peso. Los animales fueron mantenidos en condiciones estándar con un ciclo de 12:12h luz /oscuridad, 21-22 °C, humedad relativa 40%, con alimento y agua ad libitum. El EGb 761 fue disuelto en solución salina y ajustado a un pH de 7.4.

Ejemplo 1 Solución para administración oral donde 100 ml de solución contienen: extracto de Ginkgo biloba 4.0 g Etanol 50.0 g Agua desmineralizada a 100.0 ml Ejemplo 2 Tabletas cubiertas, donde una tableta contiene extracto de Ginkgo biloba 40.00 mg Celulosa microcristalina 100.00 mg Lactosa 80.00 mg Ácido silícico coloidal 25.00 mg Talco en esencia 4.50 mg Estearato de magnesio 0.50 mg Metilcelulosa hidroxipropil 12.00 mg Pigmento de óxido férrico 0.10 mg Talco en recubrimiento 0.50 mg Peso de la tableta cubierta aproximadamente 262.60 mg Eiemplo 3 En esta parte de la investigación encontré que el pretratamiento con el extracto tipo EGb 761 actúa como un agente antioxidante/antilipoperoxidante en el parkinsonismo inducido con MPP+. Se diseñaron 4 grupos experimentales por grupo: grupo I: solución salina por vía intraperitoneal denominado de aquí en adelante como i.p + solución salina por vía intracerebroventricular denominado de aquí en adelante como icv; grupo II: EGb 761 por vía i.p + solución salina por vía icv; grupo lll: solución salina por vía ip + MPP+ por vía icv; grupo IV: EGb 761 por vía i.p + MPP+ por vía icv. Los animales de los grupos I y lll recibieron solución salina por vía i.p y los grupos II y IV recibieron extracto tipo EGb 761 a diferentes dosis que fueron 2.5, 5 o 10 mg/kg, i.p. durante 17 días. Después del tratamiento, los animales de los grupos lll y IV fueron anestesiados con éter y administrados con 3 µl de una solución conteniendo 18 µg de MPP+ que corresponde a una dosis de 0.72 mg/kg, inyectados por vía icv como se describió previamente (Haley, T.J. and McCormick, W.G. 1957. Pharmacological effects produced by intracerebroventricular injection of drugs in the conscious mouse. Br. J. Pharmacol. 12(1): 12-15). Los ratones de los grupos I y II recibieron solución salina por vía icv y fueron el grupo control. Los ratones fueron sacrificados por dislocación cervical a 2 h después de la administración del MPP+. Los cerebros fueron inmediatamente removidos, el cuerpo estriado fue disectado y se analizó la actividad antioxidante/antilipoperoxidante evaluando la peroxidación de lípidos por medir los niveles de formación de productos fluorescentes lipidíeos que denominaremos de aquí en adelante como PFL usando una técnica previamente descrita (Triggs, W.J. and Willmore, L.J. 1984. In vivo lipid peroxidation in rat brain following intracortical Fe 2+ injection. J. Neurochem. 42 (4): 976-980). Después de obtener el cuerpo estriado y pesar el tejido se homogenizó en 2.5 ml de buffer de fosfatos con un pH de 7.0. Se tomaron alícuotas de 1 ml del homogenado y se colocaron en tubos de vidrio con tapa. Posteriormente adicioné 3 ml de una mezcla de cloroformo - metanol a una dilución 2:1 volumen/ volúmen. Los tubos se taparon y la mezcla se agitó suavemente y se colocó en hielo durante 30 minutos. La fase acuosa fue descartada y 1 ml de la fase clorofórmica fue transferida en celdas de cuarzo, posteriormente se adicionaron 0.1 ml de metanol. La fluorescencia fue medida en un espectrofotómetro para luminiscencia Perkin-Elmer LS 55 con una longitud de excitación de 370 nm y 430 nm de emisión. Previo a la medición de las muestras, la sensibilidad del espectrofotómetro de fluorescencia se ajustó a 140 unidades de fluorescencia con un estándar de quinina a una concentración de 0.1 µg/ml preparado en unasolución de ácido sulfúrico a una concentración de 0.05 M. Los resultados se expresaron como unidades de fluorescencia/gramo de tejido húmedo/ml de extracto leído. Todas las muestras fueron analizadas en duplicado. En la tabla 1 se muestra que la administración de extracto tipo EGb 761 no produjo incrementos significantes en la formación de PFL a las diferentes dosis probadas que fueron 2.5, 5 y 10 mg/kg, a 2 h después de la administración de MPP+ comparado a los animales control. La peroxidación de lípidos a 2 h después de la administración de MPP+ sin pretratamiento con extracto tipo EGb 761 produjo un incremento en la peroxidación de lípidos de 72%. En contraste, como observamos en la tabla 1 el pretratamiento con extracto tipo EGb 761 a 10 mg/kg bloqueó en un 100% la peroxidación de lípidos inducida por el MPP+, es decir los niveles de la peroxidación de lípidos no son estadísticamente diferentes de los controles tratados con salina. En la tabla 1 se muestra el estudio dosis respuesta del extracto tipo EGb 761. El grado de protección incrementó con el aumento de la dosis del extracto tipo EGb 761. Por ejemplo, el grado de protección fue 65%, 93% y 100% para 2.5, 5 y 10 mg/kg del EGb 761 , respectivamente, cuando se compara con el grupo de "salina + MPP+".

Ejemplo 4 En esta invención encontré gue el tratamiento con el extracto tipo EGb 761 regula la actividad de la enzima MAO en el parkinsonismo inducido con el MPP+. Se diseñaron 4 grupos experimentales y fueron tratados experimentalmente como se describió en el ejemplo 3. Posteriormente se analizó la actividad de la MAO. Después de la manipulación experimental los animales fueron sacrificados por dislocación cervical a 2, 6, 12 y 24 h después de la administración con MPP+. Los cerebros fueron removidos inmediatamente y el cuerpo estriado fue disectado y procesado para analizar la actividad de la enzima MAO total, MAO-A y MAO-B. La actividad de la MAO se evaluó en el cuerpo estriado usando un método previamente descrito (Morinan, A. and Garrat, H. M. 1985. An improved fluorometric assay for brain monoamine oxidase. J. Pharmacol. Methods.13 (3):213-223). El tejido cerebral fue homogenizado en 2.5 ml de agua desionizada a 4°C. Se tomaron alícuotas de 1 ml del homogenado diluido en una relación 1 :10 y se les adicionó 0.5 ml de bufer de fosfatos a 0.5 M y un pH de 7.4 conteniendo 100 µg dihidrobromuro de kynuramina como sustrato. Las muestras fueron incubadas a 37°C durante 30 minutos y la reacción fue parada por la adición de 2 ml de 10% peso/volumen de tricloroacético. Después del enfriamiento y centrifugación a 3,000 x g durante 15 min, se adicionó una alícuota de 1 ml del sobrenadante a 2 ml de una solución de NaOH a una concentración de 1 N. La fluorescencia fue posteriormente medida a 315 nm de excitación y 380 nm de emisión usando un espectrofotómetro para luminiscencia Perkin-Elmer LS 55. En cada experimento, las curvas de calibración fueron construidas, midiendo la intensidad de la fluorescencia de estándares de la 4-hidroxiquinolina, que de aquí en adelante denominaremos como 4-HOQ. 4-HOQ es el producto de la actividad de la MAO en la kynuramina. La actividad de la MAO fue expresada como µmol de 4-HOQ formada/1 h incubación/g de tejido húmedo. Inhibidores específicos de la MAO fueron usados, deprenil para la MAO-B y clorgilina para la MAO-A, a una concentración de 500 nM en el volumen final y preincubado durante 10 min. Estos fueron utilizados para medir esas isoformas TABLA 1. Peroxidación de lípidos en el cuerpo estriado con pretratamiento de EGb761 Grupo experimental Peroxidación de lípidos Salina + Salina 134.07 ± 5.873 EGb 761 dosis 2.5 mg/kg + Salina 153.85 ± 11.620 EGb 761 dosis 5.0 mg/kg + Salina 151.17 ± 5.462 EGb 761 dosis 10 mg/kg + Salina 115.93 ± 5.682 Salina + MPP+ 231.16 ± 9.304 ** EGb 761 dosis 2.5 mg/kg + MPP+ 181.11 ± 7.837 + EGb 761 dosis 5.0 mg/kg + MPP+ 143.72 ± 12.700 ++ EGb 761 dosis 10 mg/kg + MPP+ 129.84 ± 14.920 ++ Esta tabla muestra el efecto benéfico en la acción antioxidante y/o antilipoperoxidante en el cuerpo estriado por la administración previa de diferentes dosis de extracto tipo EGb 761 en el parkinsonismo inducido experimentalmente con MPP+. Los resultados son expresados en unidades de fluorescencia/g de tejido húmedo/ml de extracto. Cada grupo representa el promedio ± error estándar de n=6-8 experimentos por grupo. ** Estadísticamente diferente del grupo control que es " salina + salina ", p<0.01 , prueba de Tukey. + Estadísticamente diferente del grupo tratado con MPP+ representado por el grupo " salina + MPP+ ", p<0.05, prueba de Tukey. ++ Estadísticamente diferente del grupo tratado con MPP+ representado por el grupo de "salina + MPP+", p<0.01 , prueba de Tukey. EGb 761 = extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761; MPP+ = ion 1-metil-4-fenilpiridino. de la MAO solo en el grupo de 6h. Como se muestra en la tabla 2, la administración del extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761 (10 mg/kg) a los ratones no produjo incrementos significantes en la actividad de la MAO total, a diferentes tiempos probados de 2, 6, 12 y 24 h, cuando se compara con el grupo tratado con solución salina. En el grupo de ratones que recibieron solo MPP+, la actividad de la MAO total fue elevada significativamente a 2 y 6 h después de su administración esto es 29% y 30% respectivamente comparado con el grupo control, p<0.05, sin pretratamiento con extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761. Sin embargo, no se observaron cambios en la actividad de la MAO total a 12 y 24 h después de la administración de MPP+ comparado al grupo tratado con solución salina. En contraste, el pretratamiento con extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761 en el grupo con MPP+ previno el incremento de la actividad de la MAO total en el grupo de MPP+ a 6 h, observado sin el pretratamiento. Esto significa que los niveles de la actividad de la MAO total no fueron estadísticamente diferentes de esos de los controles tratados con solución salina. Aunque el pretratamiento con el extracto tipo EGb 761 pareció prevenir el incremento de la actividad de la MAO total producida por el MPP+ a 2 h, pero no fue estadísticamente significativo. Como la actividad de la MAO total fue más alta 6 h después de la administración de MPP+, nosotros escogimos este punto para el análisis de la actividad de la MAO-A y MAO-B. Como se observa en la figura 1, el extracto tipo EGb 761 no tuvo efectos estadísticamente significativos en la actividad de la MAO-B comparado al grupo tratado con salina. El MPP+ incremento la actividad de la MAO-B por 70% sobre el grupo de salina tratado con MPP+, p<0.05. El pretratamiento con extracto tipo EGb 761 produjo significante protección contra la neurotoxicidad con MPP+, por reducir parcialmente el incremento en la actividad de la MAO-B a casi los niveles normales cuando se compara al grupo tratado con solución salina. En la figura 1 se puede observar que el análisis de la MAO-A en -grupos adicionales no mostró cambios en su actividad para todos los grupos tratados.

Ejemplo 5 Esta invención muestra claramente gue el tratamiento con un extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761 incrementa la actividad de la tirosina hidroxilasa, enzima determinante en la síntesis de dopamina como respuesta protectora en el parkinsonismo inducido con MPP+. Se diseñaron 4 grupos experimentales y fueron tratados experimentalmente como se describió en el ejemplo 3. Posteriormente analizé la actividad de la tirosina hidroxilasa. Después de la manipulación experimental, los ratones fueron sacrificados por dislocación cervical a 2, 6, 12 y 24 h después de la administración de MPP+. Los cerebros de los ratones fueron inmediatamente removidos y los cuerpos estriados se disectaron. Una alícuota de 500 µl de solución de perclórico-metabisulfito de sodio a 0.1% peso/volumen fue adicionada al peso del tejido y sonicada con un sistema labsonic modelo Lab-line instruments, Melrose Park.IL. Posteriormente las muestras fueron centrifugadas a 4, 000 g durante 10 min y los sobrenadantes fueron mantenidos a -70 °C hasta su análisis. La actividad de la tirosina hidroxilasa fue ensayada en el cuerpo estriado usando un sistema de cromatografía de líquidos de alta resolución modelo series 200 LC de Perkin-Elmer, conectado a un detector electroquímico (Methrom 656). El potencial del detector fue ajustado a 0.8 V vs. un electrodo de referencia Ag/AgCI (Larsson L-G, Rényi L, Ross SB, Svensson B, and Ángeby-Móller K.1990. Different effects on the responses of functional pre- and postsynaptic 5-HTIA receptors by repeated treatment of rats with the 5-HT1A receptor agonist 8-OH-DPAT. Neuropharmacology. 29: 85-91). Para medir esta actividad medí la acumulación de la L-DOPA 30 minutos después de la administración de un inhibidor de la L-DOPA descarboxilasa que actúa centralmente. El inhibidor usado fue el NSD 1015 a una dosis de 100 mg/kg (Kehr, W., Carlsson, A., Lindquist, M., Magnusson, T., and Atack, C. 1972. Evidence for a receptor mediated feedback control of striatal tyrosine hydroxylase activity. J. Pharm. Pharmacol. 24: 744-747). Las curvas de calibración fueron construidas para la dopamina, L-DOPA y la concentración fue obtenida por interpolación de la respectiva curva estándar. Se empleó una columna TABLA 2. Actividad de la MAO total en el cuerpo estriado Grupo experimental Actividad de la MAO total 2 horas Salina + Salina 3.602 ± 0.202 EGb761 + Salina 3.635 ± 0.333 Salina + MPP+ 4.627 ± 0.112 * EGb761 + MPP+ 4.001 ± 0.325 6 horas Salina + Salina 4.247 ± 0.147 EGb761+Salina 4.339 ± 0.097 Salina + MPP+ 5.490 ± 0.418 * EGb761 + MPP+ 4.179 ± 0.406 + 12 horas Salina+Salina 3.627 ± 0.371 EGb761+Salina 3.775 ± 0.246 Salina + MPP+ 3.467 ± 0.214 EGb761 + MPP+ 3.415 ± 0.487 24 horas Salina + Salina 3.972 ± 0.155 EGb761 + Salina 4.197 + 0.190 Salina + MPP+ 4.171 ± 0.187 EGb761 + MPP+ 4.052 ± 0.165 Esta tabla muestra los efectos benéficos de la regulación y/o inhibición de la actividad enzimática de la MAO total en el cuerpo estriado por pretratamiento con extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761 (10 mg/kg) en el parkinsonismo inducido con MPP+. Los resultados son expresados en actividad de la MAO total en µmoles 4-OHQ/g/h. Cada grupo representa el promedio +/- error estándar de la media de 6-8 experimentos por grupo. * Estadísticamente diferente del grupo control representado por el grupo de "salina + salina", prueba de Tukey.+Estadísticamente diferente del grupo tratado con MPP+ representado por el grupo de "salina + MPP+", p<0.05, prueba de Tukey. analítica de catecolaminas de 100 x 4.8 mm con un tamaño de partícula de 3 µm marca Alltech Associates, Inc. La fase móvil consisitió de un bufer de fosfatos acuoso a un pH de 3.1 , el cual contenía octil sufato de sodio a 0.2 mM, EDTA a 0.1 mM, metanol 15% volúmen/volúmen, a un pH de 2.6. Como se muestra en la tabla 3, el extracto tipo EGb 761 (10 mg/kg) sólo no influye en la actividad de la tirosina hidroxilasa a todos los tiempos probados cuando sólo se compara con el grupo de " salina + salina ". La administración de MPP+ a 12 y 24 h mostró una pérdida de actividad de la tirosina hidroxilasa en el estriado de 34% y 33% respectivamente, versus el grupo de "salina + salina", pero este extracto bloqueó (100%) esta pérdida en el grupo de "EGb 761 + MPP+ ".

Ejemplo 6 En esta invención se observa gue el tratamiento con extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761 incrementa el contenido de dopamina en el cuerpo estriado como respuesta protectora en el parkinsonismo inducido con MPP*. Analizé el contenido de dopamina sólo en los grupos de ratones tratados con EGb 761 a una dosis de 10 mg/kg, vía i.p. durante 17 días y a una dosis de MPP+ de 0.72 mg/kg, con los respectivos grupo control. Los ratones fueron sacrificados por dislocación cervical a 2, 6, 12 y 24 h después de la administración de MPP+ como se mencionó en el ejemplo 3. Los cerebros de los ratones fueron inmediatamente removidos y los cuerpos estpados se disectaron. Las concentraciones de la dopamina fueron analizadas de acuerdo al método previamente descrito (Larsson L-G, Rényi L, Ross SB, Svensson B, and Angeby-Móller K.1990. Different effects on the responses of functional pre- and postsynaptic 5-HTIA receptors by repeated treatment of rats with the 5-HT?A receptor agonist 8-OH-DPAT. Neuropharmacology. 29: 85-91). Se adicionó una alícuota de 500 µl de solución de perclórico-metabisulfito de sodio a 0.1% peso/ volumen al peso del tejido y sonicada con un sistema labsonic marca Lab-line Instruments, Melrose Park.IL. Posteriormente las muestras fueron centrifugadas a 4, 000 g durante 10 min y los sobrenadantes fueron mantenidos a -70 °C hasta su análisis. El contenido de la dopamina en el cuerpo estriado fue analizado usando un sistema de cromatografía de alta resolución con modelo series LC 200 de Perkin-Elmer, conectado a un detector electroquímico (Methrom 656). El potencial del detector fue ajustado a 0.8 V vs. un electrodo de referencia Ag/AgCI como se describió en el ejemplo 5. El contenido de dopamina en el cuerpo estriado después de la administración de MPP+ se muestra en tabla 4. La administración de extracto de Ginkgo biloba tipo EGb 761 a los ratones no produjo alteración significativa en el contenido de dopamina a todos los tiempos probados cuando son comparados a los animales control representados por el grupo " salina + salina ". Los ratones en el grupo de " salina + MPP+ " a 12 y 24 h presentaron una reducción de la dopamina de 30% y 36%, respectivamente como resultado de la acción tóxica del MPP+. No se encontraron alteraciones a 2 h después de la administración de MPP+. Pero una tendencia a la reducción es clara en el grupo de MPP+ a las 6 h después de su administración pero no estadísticamente significativa. Esos decrementos significantes en la concentración de dopamina a 12 h y 24 h pero no a 2 h y 6 h, sugiere que el incremento de la actividad de la MAO precede al efecto disminuidor de la dopamina producida por el MPP+. El pretratamiento con extracto tipo EGb 761 seguido por la administración del MPP+ parcialmente previno la disminución de la dopamina producido por el MPP+ a 12 h en 31% y a 24 h con 32% de protección comparado al grupo del MPP+.

Ejemplo 7 En esta invención encontré gue el extacto de Ginkgo biloba tipo EGb 761 restaura a las neuronas dopaminérgicas del cuerpo estriado de la disminución de dopamina después de gue se induce el parkinsonismo con MPTP.

TABLA 3. Actividad de la tirosina hidroxilasa en el cuerpo estriado Grupo experimental Actividad de la tirosina hidroxilasa 2 horas Salina+Salina 0.787 ± 0.043 EGb761 + Salina 0.864 ± 0.027 Salina + MPP+ 0.882 ± 0.073 EGb761 + MPP+ 0.924 ± 0.071 6 horas Salina + Salina 0.731 ± 0.050 EGb761+Salina 0.739 ± 0.131 Salina + MPP+ 0.635 ± 0.076 EGb761 + MPP+ 0.642 ± 0.020 12 horas Salina+Salina 0.658 ± 0.041 EGb761+Salina 0.650 ± 0.057 Salina + MPP+ 0.432 ± 0.065 * EGb761 + MPP+ 0.717 ± 0.064 + 24 horas Salina + Salina 0.756 .± 0.065 EGb761 + Salina 0.729 ± 0.042 Salina + MPP+ 0.509 ± 0.051 * EGb761 + MPP+ 0.951 + 0.123 + Esta tabla muestra el incremento de la actividad de la tirosina hidroxilasa en el cuerpo estriado por el pretratamiento con extracto tipo EGb 761 (10 mg/kg) como respuesta protectora en el parkinsonismo inducido experimentalmente con MPP+. Los resultados son expresados como actividad de la tirosina hidroxilasa en µg/g de tejido. Cada grupo representa el promedio +/- error estándar de la media de 6-8 experimentos por grupo. * Estadísticamente diferente del grupo control representado como " salina + salina ", p<0.05, prueba de Tukey. +Estadísticamente diferente del grupo tratado con MPP+ representado como " salina + MPP+ ", p<0.05, prueba de Tukey.

Se diseñaron 4 grupos experimentales: grupo I: solución salina por vía i.p + solución salina por vía i.p; grupo II: solución salina por vía i.p + EGb 761 por vía i.p; grupo lll: MPTP por vía ip + solución salina por vía i.p.; grupo IV: MPTP por vía i.p. + EGb 761 por vía i.p. Los animales de los grupos I y II recibieron solución salina por vía i.p y los grupos lll y IV recibieron MPTP a una dosis de 30 mg/kg, por vía i.p. diariamente durante 5 días. Después del parkinsonismo inducido por la MPTP los animales de los grupos II y IV fueron administrados con extracto tipo EGb 761 a una dosis de 40 ó 120 mg/kg durante 18 días ó se administró solución salina en los grupos I y lll utilizándolos como grupo control. Posteriormente los animales fueron sacrificados por dislocación cervical después de la última administración de extracto tipo. EGb 761. Los cerebros fueron inmediatamente removidos y el cuerpo estriado fue disectado y se analizó el contenido de dopamina en el cuerpo estriado por cromatografía de líquidos de alta resolución como se describió en el ejemplo 6. El contenido de dopamina en el cuerpo estriado después de la administración de extracto tipo EGb 761 en animales con parkinsonismo inducido con MPTP se muestran en la figura 2. Como se muestra en la figura 2 la administración del extracto tipo EGb 761 a dosis de 40 ó 120 mg/kg a los ratones, no produjo alteración significante en el contenido de dopamina cuando son comparados a los animales control denominado como "salina + salina". Los ratones en el grupo de "salina + MPTP" presentaron una reducción de la dopamina de 48% como resultado de la acción tóxica de la MPTP, ver la figura 2. El efecto neurorestaurador del extracto tipo EGb 761 en animales con parkinsonismo inducido por MPTP previno parcialmente el efecto disminuidor de la dopamina producido por la MPTP, 70% y 40% a una dosis del extracto tipo EGb 761 de 40 y TABLA 4. Contenido de dopamina en el cuerpo estriado Grupo experimental Contenido de dopamina 2 horas Salina+Salina 10.77 ± 0.436 EGb761 + Salina 11.00 ± 0.666 Salina + MPP+ 11.97 ± 0.389 EGb761 + MPP+ 10.60 ± 0.468 6 horas Salina + Salina 9.537 ± 0.802 EGb761+Salina 9.655 ± 1.035 Salina + MPP+ 7.640 ± 0.254 EGb761 + MPP+ 10.40 ± 1.208 12 horas Salina+Salina 9.732 ± 0.543 EGb761+Salina 9.961 ± 1.070 Salina + MPP+ 6.778 ± 0.497 * EGb761 + MPP+ 8.885 ± 0.675 + 24 horas Salina + Salina 10.44 ± 0.330 EGb761 + Salina 11.05 ± 0.156 Salina + MPP+ 6.68 ± 0.429 ** EGb761 + MPP+ 8.81 ± 0.639 + Esta tabla muestra la protección que produce el pretratamiento con extracto tipo EGb 761 en los niveles de dopamina en el cuerpo estriado en el parkinsonismo inducido experimentalmente con MPP+. Los resultados son expresados en contenido de dopamina en µg/g de tejido. Cada grupo representa el promedio de +/- error estándar de la media de 6-8 experimentos por grupo. * Estadísticamente diferente del grupo control representado como " salina + salina ", p<0.05, prueba de Tukey. ** Estadísticamente diferente de control representado como "salina + salina", p<0.01 , prueba de Tukey. + Estadísticamente diferente del grupo tratado con MPP+ representado como " salina + MPP+ ", p<0.05, prueba de Tukey. MPP+=1 -metil-4-fenilpiridino. 120 mg/kg respectivamente. Por lo dicho anteriormente, se puede afirmar que estas características del extracto de Ginkgo biloba descrito no han sido logradas por ningún otro fármaco y reúne en si las características de prevenir y de revertir el daño celular producido durante la enfermedad de Parkinson.

Claims (16)

Reivindicaciones Habiendo descrito suficientemente mi invención considero como una novedad y por lo tanto reclamo como de mi exclusiva propiedad, lo contenido en las siguientes cláusulas:

1. El uso de un extracto de Ginkgo biloba que comprende 20 a 30% de glicósidos de flavonoides, 2.5 a 4.5% de ginkgólidos A, B, C y J o mezcla de ellos, de 2.0 a 4.0% de bilobálidos, caracterizado porque contiene menos de 10% de proantocianidinas y menos de 10 ppm de compuestos de tipo alquifenol, donde todos los porcentajes son por peso, útil para fabricar un medicamento viable para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.

2. El uso de acuerdo a la reivindicación 1 donde el extracto contiene menos de 1 ppm de compuestos alquifenoles.

3. El uso de acuerdo a la reivindicación 1 y 2 donde el extracto de Ginkgo biloba contiene un acarreador apropiado donde la concentración del extracto es suficiente para aliviar la enfermedad de Parkinson.

4. El uso de acuerdo a las reivindicaciones anteriores donde el extracto de Ginkgo biloba es viable para ser administrado en una cantidad de 0.1 mg a 1 g por día dependiendo de la gravedad de la enfermedad.

5. El uso de acuerdo a la reivindicación 4 donde el extracto de Ginkgo biloba es viable para ser administrado en una cantidad de 5 mg a 600 mg por día.

6. El uso de acuerdo a la reivindicación 4 donde el extracto de Ginkgo biloba es viable para ser administrado en una cantidad de 10 mg a 100 mg por día.

7. El uso de acuerdo a la reivindicación 4 donde el extracto de Ginkgo biloba es viable para ser administrado en una cantidad de 10 mg a 300 mg por día.

8. El uso de acuerdo a las reivindicaciones 1 a 7 donde la donde la preparación farmacéutica es viable para ser administrada por vía tópica, oral, ruta parenteral, por inyección como intramuscular, subcutánea, intravenosa, etc.

9. El uso de una composición farmacéutica de la reivindicación 8 donde la donde la preparación farmacéutica puede estar en forma de sólidos, por ejemplo polvos, tabletas, cápsulas, liposomas o supositorios, etc.

10. El uso de una composición farmacéutica de la reivindicación 8 donde la preparación farmacéutica puede estar en forma de un líquido, por ejemplo, soluciones, emulsiones, suspensiones o jarabe, etc.

11. El uso de la composición farmacéutica de las reivindicaciones 1 a la 10 donde esta es capaz de incrementar la actividad de la tirosina hidroxilasa en el cerebro.

12. El uso de la composición farmacéutica de la reivindicación 11 donde esta es capaz de actuar como agente antilipoperoxidante y/o antioxidante en el cerebro.

13. El uso de acuerdo a las reivindicaciones 11 y 12 donde la composición farmacéutica incrementa los niveles de dopamina en el cerebro.

14 El uso de acuerdo a las reivindicaciones 11 a 13 donde la composición farmacéutica actúa como un inhibidor y/o regulador de la enzima monoamino oxidasa tipo A y B.

15. El uso de acuerdo a la reivindicación 14 donde la composición farmacéutica actúa como un inhibidor y/o regulador de la enzima monoamino oxidasa total.

16. El uso de la reivindicación 15 donde la composición farmacéutica actúa como restaurador de las neuronas dopaminérgicas.