MXPA06011324A - Formas cristalinas de 5, 11-dihidro-11 -etil-5-metil-8 -{2-{(1-oxido- 4-quinolinil) oxi}etil}-6h -dipirido[3, 2-b:2'3'-e] [1, 4]diazepin -6-ona. - Google Patents

Abstract

Formas cristalinas dihidratada y anhidra de 5, 11-dihidro-11-etil -5-metil-3-{2- {-{(1-oxido-4- quinolinil)oxi}etil} -6H-dipirido [3, 2-b:2??,3??-e] [1,4] diazepin-6-ona.

Description

FORMAS CRISTALINAS DE 5, ll-DIHIDRO-ll-ETIL-5-METIL-8-{2-{ (1- ÓXIDO-4-QUINOLINIL)OXI}ETIL}-6H-DIPIRIDO[3,2-b:2' ,3' - e] [l,4]DIA2EPIN-6-ONA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN 1. CAMPO TÉCNICO La presente invención se refiere a formas cristalinas dihidratadas y anhidras de la 5, 11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona. 2. INFORMACIÓN ANTECEDENTE 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] - [1, 4] diazepin-6-ona es un inhibidor de transcriptasa inversa del HIV-1 no nucleósido. Su estructura química se representa más adelante.

La síntesis de la 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{. (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido [3, 2-b:2' ,3' -e] [1, ] diazepin-6-ona, su- uso para el tratamiento de la infección por HIV, y las composiciones farmacéuticas que comprenden esta sustancia, y adecuadas para este uso, se describen en la patente de los Estados Unidos 6,420,359 y en la correspondiente WO 0196338.

BREVE SUMARIO DE LA INVENCIÓN Los autores de la invención han descubierto que cuando la 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil)oxi}etil}-6H~dipirido[3,2~b:2' ,3'-e] [1,4]-diazepin-6-ona se elabora de la manera descrita en la patente de los Estados Unidos 6,420,359 el material resultante es uri trihidrato de escasa cristalinidad. Los autores de la invención han descubierto que el trihidrato no es la forma más deseable de usar esta sustancia fármaco en el desarrollo de un producto fármaco. Un primer aspecto de la presente invención comprende el descubrimiento de una forma cristalina dihidratada de la 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (1-óxido-4-quinolinil)oxi}etil}-6H-dipirido[3,2-b:2' ,3'-e] [1, 4] diazepin-6-ona. Esta forma cristalina dihidratada se ve favorecida termodinámica o cinéticamente a temperaturas y a la humedad que puedan encontrarse con más probabilidad en el almacenamiento de la sustancia fármaco o del .producto fármaco y, por eso, farmacéuticamente se prefieren al trihidrato que es proporcionado por la técnica anterior. La invención comprende también métodos para fabricar esta forma cristalina dihidratada. Los autores de la invención han descubierto además que bajo las condiciones apropiadas pueden formarse varios polimorfos anhidros de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil- 8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona . Uno de éstos, que puede designarse como Forma III anhidra (AF III), ha demostrado estabilidad de fase en algunas condiciones ambientales ensayadas, lo que indica que es farmacéuticamente aceptable, y las pruebas biológicas han demostrado que llevan a niveles de plasma superiores que pueden lograrse usando otras formas cristalinas del fármaco. Así, la invención incluye además la Forma III anhidra de 5,11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}-etil}-6H-dipirido[3, 2-b: 2' , 3'-e] [1, 4] diazepin-6-ona y métodos para su fabricación.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 es un modelo de XRPD (en inglés, Difracción de Polvo por Rayos X) de la de 5, 11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}-etil}-6H-dipirido[3,2-b:2' ,3'~e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada.

La Figura 2 es una Curva Térmica de DSC (en inglés, Calorimetría de Barrido Diferencial) de 5,11-dihidro-ll-etil-5-metil-8~{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}-etil}-6H-dipirido[3, 2-b: 2 ' , 3'-e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada. La Figura 3 es un Modelo de XRPD de la Forma III anhidra de 5, ll-Dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2 ' , 3' -e] [1,4]-diazepin-6-ona . La Figura 4 es una Curva Térmica de DSC de la Forma III anhidra de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (1-óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada. La Figura 5 es un Diagrama de Fase de 5,11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}-etil}-6H-dipirido[3,2-b:2' ,3'-e] [1, ] diazepin-6-ona .

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN 1. Identificación por los Modelos Característicos de Difracción del Polvo por Rayos X Como se ha señalado anteriormente, la invención comprende dos nuevas formas cristalinas de 5, 11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi }etil}-6H- dipirido[3, 2-b:2' , 3'-e] [1, 4] diazepin-6-ona, la Forma III dihidratada y la anhidra. Éstas pueden ser identificadas y distinguidas entre sí y de las otras formas cristalinas que no son parte de la invención por medio de sus característicos modelos de Difracción del Polvo por Rayos X (XRPD) . La forma cristalina dihidratada de la 5,11-dihidro-ll-etil-5-metil-8- {2- { (l-óxido-4-quinolinil) oxi}-etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona que está de acuerdo con la invención se caracteriza por tener un modelo de difracción de polvo por rayos X que comprende un pico a 23.4 grados 2T (± 0.2 grados 2T) , en donde dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. Preferiblemente, el dihidrato de acuerdo con la invención se caracteriza por tener un modelo de difracción de polvo por rayos X que comprende picos a 23.4 y 24.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) y en donde dicho modelo de difracción por rayos X se hace usando la radiación K^ del Cu. Más preferiblemente, el dihidrato según la invención se caracteriza por tener un modelo de difracción de polvo por rayos X que comprende picos a 23.4, 24.9 y 17.3, grados 2T (± 0.2 grados 2T) y en donde dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación K^ del Cu. Aún más preferiblemente, el dihidrato según la invención se caracteriza por tener un modelo de difracción de polvo por rayos X que comprende picos a 23.4, 24.9, 17.3, 24.3, 12.1, 18.5 y 17.6 grados 2T (± 0.2 grados 2T) y en donde dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. Más específicamente, el dihidrato según la invención se caracteriza por tener un modelo de difracción de polvo por rayos X, elaborado usando la radiación Ka del Cu, que es sustancialmente igual a la que se muestra en la Figura 1. La forma cristalina de la Forma III anhidra de la 5, ll-dihidro~ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) -oxi}etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, ] diazepin-6-ona que está de acuerdo con la invención se caracteriza por tener un modelo de difracción de polvo por rayos X que comprende un pico a 11.6 grados 2T (± 0.2 grados 2T) , en la que dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se elabora usando la radiación Ka del Cu. Preferiblemente, la forma cristalina de la Forma III anhidra según la invención se caracteriza por tener un modelo de difracción de polvo por rayos X que comprende picos a 11.6, 22.5 y 8.3 grados 2T (± 0.2 grados 2T) , en los que dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. Más preferiblemente, la . forma cristalina de la Forma III anhidra según la invención se caracteriza por tener un modelo de difracción de polvo por rayos X que comprende picos a 11.6, 22.5, 8.3, 12.0, 12.4 y 5.8 grados 2T (± 0.2 grados 2T) , en los que dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. Todavía más preferiblemente, la forma cristalina Forma III anhidra según la invención se caracteriza por tener un modelo de difracción de polvo por rayos X que comprende picos a 11.6, 22.5, 8.3, 12.0, 12.4, 5.8, y 20.8 -grados 2T (± 0.2 grados 2T) , en los que dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. Más específicamente, la forma cristalina de la Forma III anhidra según la invención se caracteriza por tener un modelo de difracción de polvo por rayos X, hecho usando la radiación Ka del Cu, que es sustancialmente igual a la que se muestra en la Figura 3. Para dejar un margen al error experimental, los valores 2T anteriormente descritos deberían ser considerados seguros para ± 0.2 grados 2T. Es decir, cuando se valora si una muestra dada de 5, 11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H- dipirido[3, 2-b:2' , 3' -e] [1, ] diazepin-6-ona es la forma cristalina dihidratada o la Forma III anhidra según la invención, un valor 2T que se observe experimentalmente para la muestra debería considerarse idéntico a un valor característico descrito anteriormente si cae dentro de ± 0.2 grados 2T del valor característico. Las formas cristalinas según la invención se emplean preferiblemente como principios activos de los fármacos en forma sustancialmente pura, es decir, esencialmente libres de otras formas cristalinas 5,11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}-etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2 ' , ' -e] [1, 4] diazepin-6-ona . Sin embargo, la invención también incluye la forma cristalina dihidratada o la forma cristalina de la Forma III anhidra en mezcla con otra forma o formas cristalinas. Si la sustancia activa del fármaco fuera una mezcla de formas cristalinas, sería preferible que la sustancia comprendiera al menos el 50% de la forma cristalina dihidratada o de la forma III anhidra descrita anteriormente. 2. Síntesis La invención proporciona además procedimientos para la síntesis del dihidrato y de la Forma III anhidra de la 5,ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4- quinolinil) oxi } etil } -6H-dipirido [3, 2-b : 2 ' , 3' -e] [1,4]- diazepin-6-ona.

(A) Métodos generales de síntesis según la invención (i) Método general de síntesis para la producción de la forma cristalina dihidratada de la 5,11- dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4- quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' - e] [1, 4] diazepin-6-ona En la mayoría de términos generales, la forma cristalina dihidratada se prepara recristalizando en el seno de agua la 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (1-óxido-4-quinolinil) oxi} etil}-6H-dipirido [3,2-b:2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona en forma cruda, preparada por cualquier método de síntesis (incluido pero no limitado al descrito en la patente de los Estados Unidos 6,420,359 o en la correspondiente WO 0196338). Esto se realiza poniendo en suspensión la 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-.{2-{ (1-óxido-4-quinolinil) oxi} etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' ,3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona en una mezcla de agua y un solvente que sea miscible tanto en agua como en un líquido casi a temperatura ambiente. Solventes adecuados incluyen los alquilnitrilos inferiores (por ejemplo, acetonitrilo y propionitrilo), alcoholes de alquilos inferiores (C1-C7, por ejemplo, metanol, etanol e isopropanol), éteres cíclicos y acíclicos que incluyen poliéteres [por ejemplo, tetrahidrofurano, dioxano y diglyme (acrónimo de éter dimetílico de dietilenglicol)], amidas (por ejemplo dimetilformamida, N-metilpirrolidinona y dimetilacetamida), sulfóxidos (por ejemplo DMSO) , sulfonas (por ejemplo sulfolano), alquilcetonas inferiores (por ejemplo acetona) y alquilo (inferior) -nitroalcanos (por ejemplo nitrometano). La suspensión se calienta hasta que se obtiene una solución transparente que está saturada o casi saturada. La cantidad de agua debe ser al menos la cantidad requerida para formar un dihidrato estequiométrico con la 5,11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}-etil}-6H-dipirido[3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, ] diazepin-6-ona usada, y menos que aproximadamente el 90% de la mezcla solvente total. Si no se obtiene una solución, entonces se añaden volúmenes adicionales de solvente a elevada temperatura hasta que se forma una solución transparente. La solución se deja enfriar después lentamente hasta una temperatura inferior, hasta que se observa un precipitado cristalino. La suspensión se mantiene entonces a esa temperatura hasta que la precipitación ha cesado esencialmente. El precipitado se separa entonces de la solución, por ejemplo por t filtración. El sólido se seca luego hasta que todos los solventes de la superficie se han separado, proporcionando la 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (1- óxido-4-quinolinil) oxi} etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' - e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada. (ii) Método general de síntesis para la producción de la Forma III anhidra de 5, 11-dihidro-ll-etil-5-metil-8- { 2- { (l-óxido-4-quinolinil) oxi } etil } -6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona 5, ll-Dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2 ' ,3'-e] [1,4]-diazepin-6-ona dihidratada o trihidratada (producida por cualquier método) se seca para eliminar el H20. Este secado puede realizarse por cualquier medio, como el secado en un horno a 23°C u otra temperatura superior y a presión atmosférica o con la aplicación de vacío. Puede secarse mediante el paso enérgico de un gas seco e inerte sobre el sólido durante períodos prolongados, o puede secarse químicamente, por ejemplo por destilación, para separar el agua con cualquier solvente que pueda formar una mezcla azeotrópica con agua. Solventes ejemplares son alquilnitrilos inferiores (como acetonitrilo) , alcoholes de alquilo (inferior) (como etanol e isopropanol) y éteres (como dioxano y THF) . El secado se realiza hasta que el análisis muestra que queda < 1% de agua. Este sólido seco se disuelve después en un solvente anhidro que 5,11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4- quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' - e] [1, 4] diazepin-6-ona es soluble en (como, por ejemplo, etanol) , a elevada temperatura, tal que se obtiene una solución que está saturada o casi saturada en 5, 11-dihidro-ll-etil-5-ruetil-8-{2- { (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido [3, 2-b: ' , 3 ' -e] [1, 4] diazepin-6-ona. Esta solución se deja luego enfriar lentamente a una temperatura inferior, hasta que primero se observa un precipitado cristalino, u opcionalmente pueden añadirse a la solución original cristales semilleros de la Forma III anhidra (si está disponible) de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (1-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona . La suspensión se mantiene entonces a esta temperatura hasta que la precipitación es elevada, después se filtra o se enfría adicionalmente y después se filtra. El sólido se seca después hasta que todos los solventes se han separado, proporcionando la Forma III anhidra de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8- {2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil} -6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona.

(B) Ejemplos de síntesis específicas según la invención La síntesis específica de las dos formas cristalinas de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (1-óxido- 4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' - e] [1, 4] diazepin-6-ona que están de acuerdo con la invención se describen en los siguientes ejemplos.

Ejemplo 1: Preparación de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil- 8-{2-{ (1-óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada . 29.1 Kg de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8- {2-{ (1-óxido- -quinolinil) oxi} etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' ,3'-e] [1, 4]diazepin-6-ona cruda en forma de torta húmeda se cargó en un reactor inerte de 400 litros. El reactor se volvió inerte de nuevo, luego se cargaron 105 Kg de MeCN y 8.3 Kg de HCl 0.002 M, y la mezcla se calentó a 70°C en la oscuridad y se mantuvo allí durante 30 minutos. La solución se recogió luego a 22 °C durante 1 hora, se mantuvo una hora, y la suspensión así obtenida se centrifugó, lavando la torta con 35 Kg de MeCN:H20 8:1. Luego se empaquetó la torta húmeda recristalizada de 5, 11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido[3,2-b:2' ,3'-e] [1, 4] díazepin-6-ona (18.55 Kg) y, de nuevo, se devolvió al reactor. El reactor era inerte, luego se cargaron 12.6 Kg de H20 y 77.7 Kg de EtOH (SDA-2B) , y la mezcla se calentó a 70°C en la oscuridad. Una vez en solución, la mezcla se transfirió caliente en un segundo reactor a través de un filtro de limpieza en línea, usando 22.1 Kg de EtOH:H20 8:1 para ayudar en la transferencia y lavado del primer reactor. Luego, se separaron aproximadamente 22 litros de solvente por destilación a presión atmosférica. A la solución resultante se añadieron, luego, 300 g de HCl 6 N para protonar la impureza (~2%) del éter 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona. La solución se enfrió después a 50°C durante más de 1 hora y se sembró con 100 g de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada. La mezcla se enfrió linealmente a 22 °C durante 8 horas. La suspensión así obtenida se centrifugó luego, lavando la torta con 15 Kg de EtOH:H20 8:1. El sólido se secó en centrífuga hasta que el análisis de agua mediante KF (reactivos de Karl-Fischer) alcanzó 7.5% para dar 14.45 Kg de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido[3,2-b:2' ,3'-e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada (rendimiento total de 67% a partir del intermediario éter 5,ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (4-quinolinil) oxi } etil} -6H-dipirido[3,2-b:2' ,3'-e] [1, 4] diazepin-6-ona en forma de un sólido incoloro con una pureza según HPLC (cromatografía líquida de alto rendimiento) del 99.1%. P.F. de 199°C; XH RMN (400 MHz, CDCl3)d: 8.69 (d, J = 7.0 Hz, ÍH, ), 8.62 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 2.4 Hz, 1H) , 8.21 (d, J = 8.4 Hz, ÍH), 8.18 (dd, J = 4.7, 1.6 Hz, 1H) , 7.8 (dd, J = 5.4, 5.4 Hz, ÍH) , 7.70 (dd, J = 7.2, 7.2 Hz, ÍH) , 7.47 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, ÍH), 7.07 (dd, J = 7.9, 4.7 Hz, 1H) , 6.78 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.42 (dd, J = 6.2, 6.2 Hz, 2H) , 4.18 (q, J = 6.9 Hz, 2H) , 3.50 (s, 3H) , 3.22 (dd, J = 6.2, 6.2 Hz, 2H) , 1.24 (t, J = 7.0 Hz, 3H) . 13C RMN (125 MHz, d6-DMSO)d: 166.25 (C6) , 157.68 (C15) , 153.95 (C12) , 151.31 (C21) , 151.13 (C9), 144.02 (C2) , 141.21 (C7), 140.47 (C30) , 135.36 (C23), 131.70 (C4), 131.11 (C13), 130.58 (C26), 128.86 (C8), 128.02 (C27),- 122.28 (C28), 122.07 (C29) , 120.24 (C3 + C14), 119.24 (C25), 101.92 (C22), 68.87 (C20) , 40.36 (C17), 36.71 (C16) , 30.59 (C19) , 13.40 (C18) . Análisis Calculado para C25H27N505: C, 62.88; H, 5.70; N, 14.67. Encontrado C, 62.86; H, 5.72; N, 14.54.

Ejemplo 2: Preparación de la Forma III anhidra de 5,11-dihidro-ll-etil-5- etil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' ,3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona. 22.5 Kg de 5, ll-dihidro~ll-etil-5-metil-8-{2- { (1-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' - e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada se secó en un horno con vacío (40°C/44 mm) hasta peso constante, necesitando aproximadamente 60 horas, y dando 2.0.4 Kg (recuperación del 98%) de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' ,3'-e] [1, 4] diazepin-6-ona anhidra. Este sólido se cargó después en un reactor inerte de 200 litros, protegido de la luz. Luego, se añadieron 82 litros de etanol anhidro, y la solución resultante se calentó a reflujo. Luego, se añadió etanol anhidro adicional (10 litros) para dar una solución transparente. Esta solución se enfrió entonces linealmente hasta 67°C durante una hora, y luego se sembró con 205 g de la Forma III anhidra de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido~4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona añadida bajo la superficie en forma de una suspensión en 2 litros de etanol absoluto. El lote se enfrió luego linealmente a 35°C durante 4 horas, después se enfrió linealmente a 30°C durante 12 horas. El lote se enfrió luego a 10°C durante una hora, dando una suspensión. Esta mezcla se destiló al vacío (30°C/400 mm) , recogiéndose 32 litros de etanol. La suspensión resultante se enfrió luego a 10°C durante una hora, después se filtró, lavando la torta con 6 litros de etanol. El sólido se secó luego (42°C/51 mm) durante 20 horas para dar 19.2 Kg (94%) de la Forma III anhidra de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2~ { (1- óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3 ' -e] [1, 4]diazepin-6-ona en forma de un sólido blancuzco.

Ejemplo 3: Fabricación de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ ( l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil}-6H-dipirido[3,2-b:2' ,3'-e] [1, 4 ] diazepin-6-ona dihidratada.

Un reactor inerte de 400 litros se cargó con 11.2 Kg de clorhidrato de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (4-quinolinil) oxi} etil}-6H-dipirido [3, 2-b: ' , 3 ' -e] [l,4]diazepin-6-ona (24.0 mol, 1 eq. ) y 9.9 Kg de Na3P04 (60.0 mol, 2.5 eq. ) , y el reactor volvió a ser inerte. Luego, se cambiaron 3.75 Kg de MeOH y 53.7 Kg de CH2C12, seguido de 125 Kg de H20. La mezcla se agitó a 100 rpm durante 15 minutos a 22°C, luego se cargaron 34.5 Kg de ácido peracético al 32%/HOAc (146 mol, 6.1 eq.) durante 10 minutos. La mezcla resultante se agitó bien en la oscuridad durante 2.5 horas a 22°C, después se enfrió a 5°C. A esta mezcla fría se añadieron lentamente 91.9 Kg de Na2S203 2 M durante 45 minutos, manteniendo la temperatura interna por debajo de 15°C. La mezcla se agitó luego a 22°C durante 1 hora, después los solventes orgánicos se separaron por destilación a 45°C/50 mm, recogiendo 31 litros de destilado. Los contenidos se agitaron luego 4 horas a 22°C y la suspensión resultante centrifugada y la torta se lavaron con 75 Kg de H20. La torta húmeda resultante (15.5 Kg) se empaquetó luego y se devolvió al reactor. Luego, se cargaron 13.6.Kg adicionales de torta húmeda de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi }etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' - e] [1, 4] diazepin-6-ona a partir de un lote diferente, para un total de 29.1 Kg de torta húmeda. El reactor era inerte, entonces se cargaron 105 Kg de MeCN y 8.3 Kg de HCl 0.002 M, y la mezcla se calentó a 70°C en la oscuridad y se mantuvo allí durante 30 minutos. La solución se recogió luego a 22 °C durante 1 hora, se mantuvo una hora, y la suspensión así obtenida se centrifugó, lavando la torta' con 35 Kg de MeCN:H20 8:1. Luego se empaquetó la torta húmeda recristalizada de 5,11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4]diazepin-6-ona (18.55 Kg) y, de nuevo, se devolvió al reactor. El reactor era inerte, luego se cargaron 12.6 Kg de H20 y 77.7 Kg de EtOH (SDA-2B) , y la mezcla se calentó a 70°C en la oscuridad. Una vez en solución, la mezcla se transfirió caliente en un segundo reactor a través de un filtro de limpieza en línea, usando 22.1 Kg de EtOH:H20 8:1 para ayudar en la transferencia y lavado del primer reactor. Luego, se separaron aproximadamente 22 litros de solvente por destilación a presión atmosférica.

A la solución resultante se añadieron, luego, 300 g de HCl 6 N para protonar la impureza (-2%) del éter 5, 11-dihidro- ll-etil-5-metil-8-{2-{ (4-quinolinil) oxi}etil}-6H- dipirido[3, 2-b:2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona. La solución se recogió luego a 50°C durante 1 hora y se sembró con 100 g de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3,2-b:2',3'-e] [1, ] diazepin-6-ona»2 H20. La mezcla se enfrió linealmente a 22 °C durante 8 horas. La suspensión así obtenida se centrifugó luego, lavando la torta con 15 Kg de Et0H:H20 8:1. El sólido se secó en la centrífuga hasta que un análisis de agua mediante KF alcanzó 7.5% para dar 14.45 Kg de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3,2-b:2',3'~ e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada (rendimiento total de 67% a partir de cloruro de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (4-quinolinil) oxi} etil}-6H-dipirido [3,2-b:2',3'-e] [1, ] diazepin-6-ona) en forma de un sólido incoloro con pureza de 99.1% mediante HPLC. P.F. de 199°C; XH RMN (400 MHz, CDC13)d: 8.69 (d, J = 7.0 Hz, ÍH) , 8.62 ' (d, J = 8.7 Hz, ÍH) , 8.39 (d, J = 2.4 Hz, ÍH) , 8.21 (d, J = 8.4 Hz, ÍH) , 8.18 (dd, J = 4.7, 1.6 Hz, ÍH) , 7.8 (dd, J = 5.4, 5.4 Hz, ÍH) , 7.70 (dd, J = 7.2, 7.2 Hz, ÍH) , 7.47 (dd, J = 8.0, 1.6,Hz, ÍH) , 7.07 (dd, J = 7.9, 4.7 Hz, ÍH) , 6.78 (d, J = 7.0 Hz, ÍH) , 4-42 (dd, J = 6.2, 6.2 Hz, 2H) , 4.18 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.50 (s, 3H) , 3.22 (dd, J = 6.2, 6.2 Hz, 2H) , 1.24 (t, J = 7.0 Hz, 3H) . 13C RMN (125 MHz, d6-DMSO)d: 166.25 (C6), 157.68 (C15), 153.95 (C12), 151.31 (C21) , 151.13 (C9) , 144.02 (C2), 141.21 (C7), 140.47 (C30) , 135.36 (C23), 131.70 (C4), 131.11 (C13) , 130.58 (C26) , 128.86 (C8), 128.02 (C27), 122.28 (C28), 122.07 (C29) , 120.24 (C3 + C14), 119.24 (C25), 101.92 (C22), 68.87 (C20) , 40.36 (C17), 36.71 (C16), 30.59 (C19) , 13.40 (C18) . Análisis Calculado para C25H27N505: C, 62.88; H, 5.70; N, 14.67. Encontrado C, 62.86; H, 5.72; N, 14.54.

Ejemplo 4: Síntesis de laboratorio de la Forma III anhidra de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi } etil }-6H-dipirido [3,2-b:2f ,3f-e] [1, ]diazepin-6-ona.

En una estufa con vacío se secaron a 85°C hasta peso constante 2.05 g de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4]diazepin-6-ona dihidratada. El sólido resultante se recristalizó luego en el seno de 8 ml de etanol absoluto a 70°C, y se dejó enfriar lentamente a temperatura ambiente durante 18 horas. La suspensión resultante se filtró luego y se lavó con una pequeña cantidad de etanol absoluto, se secó al aire brevemente y luego se secó bajo un barrido de nitrógeno hasta peso constante, 1.67 g (88%). El XRPD mostró que la muestra era la Forma III anhidra de 5,11- dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3 ' -e] [1, 4] diazepin-6-ona.

Ejemplo 5: Fabricación de la Forma III anhidra de 5,ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil }-6H-dipirido [3,2-b:2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona.

En un secador de bandeja se colocaron 22 Kg de 5,ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4]diazepin-6-ona dihidratada (46.1 mol, 1 eq.) y se secaron a 40 mm en vacío y 60°C hasta que el análisis de agua por KF mostró un contenido de agua < 0.2% (48 horas). El sólido (19.5 Kg) se cargó en un reactor inerte de 200 litros, que se volvió a dejar inerte. Luego, se cargaron 80 litros de etanol absoluto (SDA-2B) , y la mezcla se agitó a 100 rpm a medida que la temperatura se elevaba hasta 82 °C. La retirada de una alícuota del reactor mostró una solución transparente. La mezcla se enfrió luego a 72°C y se sembró bajo la superficie con 200 g de la Forma III anhidra de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8- (2- { (l-óxido-4- quinolinil) oxi} etil} -6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3 ' - e] [1, 4]diazepin-6-ona en forma de una suspensión de etanol. Los contenidos del reactor se enfriaron luego linealmente a temperatura ambiente durante 18 horas, después se enfriaron adicionalmente a 14 °C y se mantuvieron a esta temperatura durante una hora, luego se filtraron. La torta resultante se secó luego hasta peso constante en una estufa de vacío a 60°C durante 24 horas para dar 19.2 Kg de Forma III anhidra de 5,ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi } etil } -6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, ]diazepin-6-ona (95%) en forma de un sólido blancuzco. El análisis del material por XRPD y comparación con un patrón auténtico mostró que era' el polimorfo de la Forma III anhidra de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (1-óxido-4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4]diazepin-6-ona. Por HPLC se encontró que la pureza era del 99.2%. P.F. 198.2°C; XH RMN (400 MHz, CDC13)d: 8.69 (d, J = 7.0 Hz, ÍH, ), 8.62 (d, J = 8.7 Hz, 1H) , 8.39 (d, J = 2.4 Hz, ÍH), 8.21 (d, J = 8.4 Hz, ÍH) , 8.18 (dd, J = 4.7, 1.6 Hz, ÍH) , 7.8 (dd, J = 5.4, 5.4 Hz, 1H) , 7.70 (dd, J = 7.2, 7.2 Hz, 1H) , 7.47 (dd, J = 8.0, 1.6 Hz, ÍH) , 7.07 (dd, J = 7.9, 4.7 Hz, ÍH) , 6.78 (d, J = 7.0 Hz, 1H) , 4.42 (dd, J = 6.2, 6.2 Hz, 2H) , 4.18 (q, J = 6.9 Hz, 2H) , 3.50 (s, 3H) , 3.22 (dd, J = 6.2, 6.2 Hz, 2H) , 1.24 (t, J = 7 . 0 Hz , 3H) . 13C RMN ( 125 MHz , d6-DMSO) d : 166 . 25 (C6) , 157.68 (C15), 153.95 (C12), 151.31 (C21), 151.13 (C9) , 144.02 (C2), 141.21 (C7), 140.47 (C30), 135.36 (C23), 131.70 (C4), 131.11 (C13), 130.58 (C26) , 128.86 (C8), 128.02 (C27), 122.28 (C28) , 122.07 (C29) , 120.24 (C3 + C14), 119.24 (C25), 101.92 (C22), 68.87 (C20) , 40.36 (C17), 36.71 (C16), 30.59 (C19) , 13.40 (C18). Análisis Calculado para C25H23N503 : C, 62.92; H, 5.30; N, 15.77. Encontrado C, 62.76; H, 4.97; N, 15.72. 3. Metodología de la Difracción del Polvo por rayos X Cualquier difractómetro de polvo por rayos X de alta calidad puede emplearse con el propósito de diferenciar entre varias formas cristalinas de 5,11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi} etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4]diazepin-6-ona. Patrones ejemplares de XRPD de las formas cristalinas dihidratada y la Forma III anhidra de acuerdo con la invención se produjeron usando un Difractómetro de Polvo por Rayos X Bruker AXS, Modelo D8 Advance . El instrumento está equipado con un tubo largo de rayos X de foco fino. La potencia del tubo se estableció en 40 kV y 40 mA. El instrumento se hizo funcionar en modo parafocalización usando una ranura divergente de 1.0 mm, una ranura antidispersión de 1.0 mm, una ranura detectora de 0.2 mm, una ranura onocromedidora de 0.6 mm, monocromador de grafito y un detector de escintilación de Nal. Las exploraciones de las operaciones se ejecutaron desde 2 hasta 35° 20, a 0.05° por operación, 4 segundos por operación. Para comprobar la alineación del instrumento se usó un patrón de referencia de cuarzo. Las muestras se prepararon para análisis rellenando un soporte de silicio de fondo cero. Los patrones de XRPD se reproducen en las Figuras 1 y 3. 4. Métodos adicionales de caracterización Las formas cristalinas de acuerdo con la invención pueden caracterizarse, opcionalmente, por calorimetría de barrido diferencial (DSC) . Las curvas térmicas DSC para las formas cristalinas dihidratada y la Forma III anhidra de acuerdo con la invención se muestran en las Figuras 2 y 4, respectivamente . Un medio adicional de caracterización es la termomicroscopía. El dihidrato exhibe las siguientes consecuencias térmicas cuando se observa por termomicroscopía (velocidad de calentamiento = 10°C/min) usando un microscopio de luz polarizada: 1. Cristal nebuloso y desprendimiento de sustancias volátiles indicativo de deshidratación en el intervalo de ~75-112°C, dando como resultado una fase deshidratada. 2. Fusión de la fase deshidratada en el intervalo de ~155-162°C. 3. Recristalización en el intervalo de -162-188°C. 4. Fusión final en el intervalo de ~195-203°C. Además, puede confirmarse que el dihidrato es un dihidrato estequiométrico mediante termogravimetría/análisis espectrográfico con infrarrojos por transformación de Fourier (TGA/FTIR) o técnicas similares . 5. Preferencias termodinámicas para el dihidrato y la Forma III anhidra Se usaron experimentos de solubilidad para determinar el diagrama de fase única mostrado en la Figura 5 para las diversas formas de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ ( l~óxido-4-quinolinil) oxi} etil} -6H-dipirido [3,2-b:2' , 3'-e] [1, 4] diazepin-6-ona . El diagrama de fases indica que, termodinámicamente, se prefiere la Forma III anhidra frente a la Forma I anhidra a 25 °C. Además, la Forma III anhidra se ve favorecida termodinámicamente frente al 'dihidrato y a la Forma I anhidra a 25 °C cuando se ponen en contacto con soluciones de etanol. que contienen < ~2.7 ± 0.5 % en peso de agua. A la inversa, el dihidrato se prefiere termodinámicamente frente a la Forma I y la Forma III anhidra cuando se ponen en contacto con soluciones de etanol que contienen > ~2.7 % en peso de agua y están saturadas con 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (1-óxido-4-quinolinil) oxi}etil }-6H-dipirido [3,2-b:2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona. 6. Utilidad El dihidrato y la Forma III anhidra de 5,11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2 ' , 3 ' -e] [1, 4] diazepin-6-ona que están de acuerdo con la invención pueden ser usadas para tratar la infección de HIV en seres humanos, de la manera descrita en la patente de los Estados Unidos 6,420,359. El compuesto, en cualquiera de estas formas cristalinas, puede ser incorporado en formulaciones farmacéuticas y administrarse de acuerdo con los regímenes de dosificación descritos en la patente de los Estados Unidos '6,420,359.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1. Forma cristalina de. 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quínolinil) oxi}etil}-6H- dipirido [3, 2-b : 2 ' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada que tiene un modelo de difracción de polvo por rayos X que comprende un pico a 23.4 grados 2T (± 0.2 grados 2T) , en donde dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. 2. Sustancia cristalina según la reivindicación 1, en la que el modelo de difracción de polvo por rayos X de dicha sustancia comprende además un pico a 24.9 grados 2T (± 0.2 grados 2T) y en donde dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. 3. Sustancia cristalina según la reivindicación 1, ó 2, en la que el modelo de difracción de polvo por rayos X de dicha sustancia comprende un pico a 17.3. grados 2T (± 0.2 grados 2T) y en la que dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. 4. Sustancia cristalina según las reivindicaciones 1, 2 ó 3, en las que el modelo de difracción de polvo por rayos X de dicha sustancia comprende picos a 24.3, 12.1, 18.5 y 17.6 grados 2T (± 0.2 grados 2T) y en las que dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. 5. Forma cristalina de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido [3, 2-b: 2 ' , 3 ' -e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada que tiene un modelo de difracción de polvo por rayos X, hecho usando la radiación Ka del Cu, que es sustancialmente igual al que se muestra en la Figura 1. 6. 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (1-óxido-4-quinolinil) oxi }etil}-6H-dipirido [3,2-b:2',3'-e] [1, 4] diazepin-6-ona en donde al menos 50% de dicha sustancia está presente en forma del dihidrato cristalino según las reivindicaciones 1, 2, 3, 4, ó 5. 7. Formulación farmacéutica que comprende la sustancia cristalina según las reivindicaciones 1, 2, 3, 4 ó 5, y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. 8. Forma III cristalina de la 5, 11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ ( l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido[3,2-b:2' ,3'-e] [1, 4] diazepin-6-ona anhidra que tiene- un modelo de difracción de polvo por rayos X que comprende un pico a 11.6 grados 2T (± 0.2 grados 2T ), en donde dicho modelo de difracción por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. 9. Sustancia cristalina según la reivindicación 8, en la que el modelo de difracción de polvo por rayos X de dicha sustancia comprende además picos a 22.5 y 8.3 grados 2T (± 0.2 grados 2T) y dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. 10. Sustancia cristalina según las reivindicaciones 8 ó 9, en las que el modelo de difracción de polvo por rayos X de dicha sustancia comprende además picos a 12.0, 12.4 y 5.8 grados 2T (± 0.2 grados 2T) y en las que dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación Ka del Cu. 11. Sustancia según las reivindicaciones 8, 9 ó 10, en las que el modelo de difracción de polvo por rayos X de dicha sustancia comprende un pico a 20.8 grados 2T (± 0.2 grados 2T) y en las que dicho modelo de difracción de polvo por rayos X se hace usando la radiación K^ del Cu. 12. Forma III cristalina de 5, 11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido~4-quinolinil) oxi}etil}-6H- dipirido [3, 2-b:2' ,3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona anhidra que tiene un modelo de difracción de polvo por rayos X, hecho usando la radiación Ka del Cu, que es sustancialmente igual a la que se muestra en la Figura 3. 13. 5,ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (1-óxido- 4-quinolinil) oxi} etil }-6H-dipirido [3,2-b:2',3'-e] [1, 4] diazepin-6-ona en la que al menos el 50% de dicha sustancia está presente como la Forma .III cristalina anhidra según las reivindicaciones 8, 9, 10, 11 ó 12. 14. Formulación farmacéutica que comprende la sustancia cristalina según las reivindicaciones 8, 9, 10," 11 ó 12, y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable. 16. Método para fabricar la forma cristalina de 5,ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3 ' -e] [1, ] diazepin-6-ona dihidratada según las reivindicaciones 1, 2, 3, 4, 5 ó 6, comprendiendo dicho método las siguientes etapas: (a) disolver 5, 11-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}etil}-6H-dipirido[3,2-b:2' ,3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona en una mezcla de H20 y de un solvente miscible en agua, para formar una solución saturada o casi saturada, con la condición de que la. cantidad de H20 debe ser al menos la cantidad requerida para formar un dihidrato estequiométrico; (b) enfriar la solución para precipitar la 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8- { 2- { (1-óxido-4-quinolinil) oxi } etil } -6H-dipirido [3 , 2-b:2' , 3' -e] [1, ] diazepin-6-ona dihidratada fuera de la solución; (c) separar el precipitado de la solución; y (d) secar el sólido hasta que todos los solventes de la superficie han sido eliminados. 17. Método para fabricar la forma cristalina de la Forma III anhidra de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (l-óxido-4-quinolinil) oxi}eti'l}-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona según las reivindicaciones 8, 9, 10, 11 ó 12, cuyo método comprende las siguientes etapas: (a) secar 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2- { (l-óxido-4-quinolinil) oxi } etil }-6H-dipirido [3, 2-b: 2' , 3' -e] [1, 4] diazepin-6-ona dihidratada o trihidratada para separar el agua y producir un material anhidro; (b) disolver el sólido anhidro en un solvente anhidro, para producir una solución saturada o casi saturada; (c) enfriar la solución para precipitar la forma cristalina de la Forma III anhidra de 5, ll-dihidro-ll-etil-5-metil-8-{2-{ (1-óxido-4-quinolinil)oxi}etil}-6H-dipirido[3,2-b:2' , 3'-e] [1, 4]diazepin-6-ona; (d) separar el precipitado de la solución; y (e) secar el sólido hasta que todos los solventes de la superficie han sido eliminados.