MXPA06009176A - Compuestos de indazol-carboxamida como antagonistas del receptor 5-hidroxitriptamina 4 (5-ht4) - Google Patents

Abstract

La invención proporciona compuestos agonistas del receptor 5-HT4 indazol-carboxamida novedosos. La invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden tales compuestos, métodos de uso de tales compuestos para el tratamiento de enfermedades asociadas con la actividad ,5-HT4 y procesos e intermediariosútiles para preparar tales compuestos.

Description

COMPUESTO DE INDAZOL-CARBOXAMIDA COMO ANTAGONISTAS DEL RECEPTOR 5-HIDROXITRIPTAMINA 4 (5-HT4) Campo de la Invención La invención se dirige a compuestos de indazol -carboxamida que son útiles como agonistas del receptor 5-HT4. La invención también se dirige a composiciones farmacéuticas que comprenden tales compuestos, métodos de usos de tales compuestos para tratar condiciones médicas mediadas pó la actividad del receptor 5-HT4, y procesos e intermediarios útiles para preparar tales compuestos.

Antecedentes de la Invención La serotonina (5-hidroxitruptamina, 5-HT) es un neurotransmisor que esta ampliamente distribuido a través del cuerpo, tanto en el sistema nervioso central como en sistemas periféricos. Al menos 7 subtipos de receptores de serotoninas se han identificado y la interacción de serotonina con estos receptores diferentes se liga a una amplia variedad de funciones fisiológicas. Sin embargo, hay un interés sustancial en desarrollar a gentes terapéuticas que se dirijan a los subtipos de receptor 5-HT. En particular, la caracterización de receptores 5-HT4 e identificación de agentes farmacéuticos que interactúan con estos ha sido foco de una actividad reciente importante. REF:174637 (ver, por ejemplo, la revisión por Langlois and Fischmeister, J. Med. Chem. 2003, 46, 319-344) . Los agonistas del receptor 5-HT son útiles para el tratamiento de trastornos de movilidad reducida del tracto gastrointestinal. Tales trastornos incluyen el síndrome de intestino irritable (IBS) , constipación crónica, dispepsia funcional, vaciado gástrico retardado, enfermedad de reflujo gastroesofagal (GERD), gastroparesis, ileus post-operativo, seudo obstrucción intestinal, y tránsito retardado inducido por fármacos. Además, se ha sugerido que algunos compuestos agonistas del receptor 5-HT pueden usarse en el tratamiento de trastornos del sistema nervioso central que incluyen trastornos cognitivos, trastornos del comportamiento, trastornos del humor, y trastornos del control de la función autonómica. A pesar de la amplia utilidad de los agentes farmacéuticos para modular la actividad del receptor 5-HT4, algunos compuestos agonistas del receptor 5-HT están en uso clínico o en la actualidad. Un agente, cisaprida, que se utiliza extensivamente para el tratamiento de trastornos de movilidad del- tracto gastrointestinal se retiró del mercado, debido a que reportaba efectos colaterales cardiacos. Los últimos ensayos de etapa clínica de otro agente, prucaloprida, se han suspendido. 'En consecuencia, hay una necesidad para agonistas del receptor 5-HT nuevos que alcancen sus efectos deseados con mínimos efectos colaterales. Los agentes preferidos pueden poseer, entre otras propiedades, una selectividad mejorada, potencia, propiedades farmacocinéticas, y/o duración de acción.

Breve Descripción de la Invención La invención proporciona compuestos novedosos que poseen actividad agonista del receptor 5-HT4. Entre otras propiedades, los compuestos de la invención se han encontrado que son agonistas del receptor 5-HT potentes y selectivos. Además, los compuestos de la invención se han encontrado que exhiben propiedades farmacocinéticas favorables que son predecibles de una buena biodisponibilidad durante la administración oral. En consecuencia, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (I) : en donde : R1 es hidrogeno, halo, hidroxi, alquilo C_ ó alcoxi C?_4 R2 es alquilo C3-4, ó cicloalquilo C3_6; y W se selecciona de: (i) un grupo de la fórmula (II) W en donde X es : NC(0)R en donde Ra es alquilo C?_3 o tetrahidrofuranilo, en donde alquilo C1-3 es opcionalmente substituido con -OH o alcoxi C?_3; S(0)2; o NS(0)2Rb, en donde Rb es metilo, opcionalmente substituido con -OH, alcoxi C?_3, cicloalquilo s-ß, o -S(Q)2-alquilo C?_3; (ii) un grupo de la fórmula (III) en donde : Ry es -OH o alcoxi C_3; P es 0 ó 1; n es 1 ó 2; y Y es : N(Rc)C(0)Rd, en donde Rc es hidrogeno ó alquilo C?_3 y Rd es alquilo C?_3 opcionalmente substituido con -OH o alcoxi C?-3, o N (Re) S (O) 2Rf, en donde Re es hidrogeno y Rf es alquilo C?_3, opcionalmente substituido con -OH, alcoxi C?_3, cicloalquilo C5_6 o - S (0) 2-alquilo C_3; y (iii) un grupo de la fórmula (IV) : (W) en donde: Rz es hidrogeno, alquilo C?_3, o alquilo C2_3 substituido con -OH ó alcoxi C?_3; m es 1 ó 2; q es 1 ó 2, con la condición de que la suma de m y q no es igual a 4; y Z es : NC(0)Rg, en donde Rg es alquilo C_3, opcionalmente substituido con -OH o alcoxi C?_3, s(0)2; ó NS(0)2Rh, en donde Rh es metilo, opcionalmente substituido con -OH, alcoxi C?_3, cicloalcoxi C5_6, o -S (0)2-alquilo C-3; o una sal o solvato o esteroisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos. La invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la invención y un portador farmacéuticamente aceptable. La invención también promociona un método para tratar una enfermedad o condición asociada con la actividad del receptor 5-HT , por ejemplo, un trastorno de movilidad reducida del tracto gastrointestinal, el método comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de la invención. Además, la invención promociona un método para tratar una enfermedad o condición asociada con la actividad del receptor 5-HT en un mamífero, el método comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición farmacéutica de la invención. Los compuestos de la invención también pueden usarse como herramientas de investigación, esto es, para estudiar sistemas biológicos o muestras, o para estudiar la actividad de otros compuestos químicos. En consecuencia, en otro de estos aspectos de método, la invención promociona un método para usar un compuesto de la fórmula (I), o una sal o solvato o estereoisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos, como una herramienta de desarrollo para estudiar el sistema biológico o muestra o para descubrir nuevos agonistas del receptor 5-HT4, el método comprende poner en contacto el sistema biológico o muestra con el compuesto de la invención y determinar los efectos causados por el compuesto en el sistema o muestra biológica. En aspectos separados y distintos, la invención también proporciona procesos sintéticos en intermediarios descritos en la presente, que son útiles para preparar compuestos de la invención. La invención también proporciona un compuesto de la invención como se describen en la presente para usarse en la terapia médica, así como el uso de un compuesto de la invención en la manufactura de una formulación de medicamento para tratar una enfermedad o condición asociada con la actividad del receptor 5-HT , por ejemplo, un trastorno de movilidad reducida de tracto-gastrointestinal, en un mamífero .

Descripción Detallada de la Invención La invención proporciona agonistas del receptor 5-HT4 de indazol-carboxamida novedosos de la fórmula (I) , o sales o solvatos o esteroisómeros farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los siguientes substituyentes y valores se pretende que proporcionen ejemplos representativos de varios aspectos de esta invención. Estos valores representativos se pretenden que definan además tales aspectos y no se pretende que excluyan otros valores o limiten el alcance de la invención. En un aspecto específico de la invención, R1 es hidrogeno, halo, alquilo C?_ , o alcoxi C?_ . En otros aspectos específicos, R1 es hidrogeno, halo, o alquilo C?_ ; o R1 es hidrogeno ó halo; o R1 es fluoro. Todavía en otro aspecto específico, Rx es hidrogeno. En un aspecto específico, R2 es alquilo C3_ ó cicloalquild' C3_6. En otros aspectos específicos, R2 es alquilo C3_4. los grupos R2 representativos incluyen .n-propilo, isopropilo, n-butilo, sec-butilo, y tert-butilo. En otros aspectos específicos, R2 es isopropilo. Todavía en otro aspecto específico, R2 es ciclobutilo ó ciclopentilo. En un aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (II) en donde todas las variables como en la fórmula (II) . En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (II), en donde Ra es alquilo C?_3 y Rb es metilo. En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (II) en donde X es NC(0)Ra en donde Ra se define como en fórmula (II) . En otros aspectos específicos, W es un grupo de la fórmula (II), en donde X es NC(0)Ra, en donde Ra es alquilo C?-3, específicamente metilo, etilo, n-propilo, o isopropilo, o tetrahidrofuran-2-ilo o tetrahidrofuran-3-ilo; o Ra es alquilo C?_3. Todavía en otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (II), en donde X es NC(0)CH3, cuyas formas W tienen el valor 4-acetil-piperazin-l-ilo. En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (II), en donde X es S(0)2. En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (II), en donde X es NS(0)2Rb, en donde Rb se define como en la fórmula (II) . En otros aspectos específicos, W es un grupo de la fórmula (II), en donde X es NS(0)2R , en donde Rb es CH3 opcionalmente substituido con cicloalquilo C5_6 o con -S(0)2- alquilo C?_3. Los valores Rb representativos dentro de este aspecto incluyen metilo, -CH2ciclopentilo, -CH2ciclohexilo, - CH2S02CH3, y -CH2S02C2H5. Todavía en otro aspecto específico, W es un- grupo de la fórmula (II) en donde X es NS(0)2CH3, el cual forma W que tiene el valor 4-metanesulfonil-piperazin-l-ilo. En otro aspecto específico, es un grupo de la fórmula (III) en donde R? es-OH. En otros aspectos específicos, W es un grupo de la fórmula (II) en donde Ry es alcoxi C?_3, por ejemplo Ry es -OCH3, -OC2H5, o -OC3H7. En otro aspecto específico W es un grupo de la fórmula (III) en donde p es 0, o en donde p es 1. En otros aspectos específicos W es un grupo de la fórmula (III) en donde n es 1, esto es W es un anillo pirrolidinilo opcionalmente substituido; o en donde n es 2, esto es W es un anillo piperidinilo opcionalmente substituido. En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (III) en donde Y es N(Rc)C(0)Rd en donde Rc y Rd se define como en fórmula (III) . En otros aspectos específicos, W es un grupo de la fórmula (III) en donde Y es N(Rc)C(0)Rd en donde Rc es hidrogeno; y en donde Rc es alquilo C?-3. En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (III) en donde Y es N(Rc)C(0)R en donde Rd es alquilo C!_3 opcionalmente substituido con -OH o alcoxi C?_3. Los valores representativos de Rd dentro de este aspecto incluyen metilo, etilo, -CH2OH, y -CH(OH)CH3. En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (III) en donde Y es NCH3C (O) CH. Todavía en otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (III) en donde Y es NHC(0)CH3. En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (III) en donde Y es N(Re)S(0)2Rf en donde Re y Rf se define como en la fórmula (III) . En otros aspectos específicos, W es un grupo de la fórmula (III) en donde Y es N(Re)S(0)2Rf en donde Rf es alquilo C?_3 opcionalmente substituido con cicloalquilo C5_6 o con -S (O) 2-alquilo C?-3. Los valores representativos de Rf dentro de este aspecto incluye metilo, CH2ciclopentilo, -CH2ciclohexilo , -CH2S02CH3, y CH S0 C2H5 - En otro aspecto específico, los compuestos de fórmula (I) son compuestos en donde W es un grupo de la fórmula (III) en donde p es 0 y n es 1. Todavía en otro aspecto específico, los compuestos de fórmula (I) son compuestos en donde W es un grupo de la fórmula (III) en donde es p es 0, n es 1, e Y es N(Rc)C(0)Rd. En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (IV), en donde Rz es hidrogeno. En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (IV), en donde Rz es alquilo C?_3, por ejemplo, metilo, etilo, y similares. En otros aspectos específicos, W es un grupo de la fórmula (IV), en donde Rz es alquilo C2_3 substituido con -OH o con alcoxi C?_3, por ejemplo, Rz es hidroxietilo, metoxietilo, y similares. En otros aspectos específicos, es un grupo de la fórmula (IV), en donde Rz es metilo. En un aspecto específico, es un grupo de la fórmula (IV) en donde m es 1. En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (IV) en donde i es 2. En un aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (IV) en donde q es 1. En otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (IV) en donde q es 2. En un aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (IV) en donde Z es NC(0)Rg en donde Rg se define como en la fórmula (IV) .-En otros aspectos específicos, W es un grupo de la fórmula (IV) en donde Z es NC(0)Rg en donde, Rg es alquilo C?_3, opcionalmente substituido con -OH; o Rg es metilo. En un aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (IV) en donde Z es S(0)2. En un aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (IV) en donde Z es NS(0)2Rh, en donde Rh se define como en fórmula (IV). En otros aspectos específicos, W es un grupo de la fórmula (IV) en donde Z es NS(0)2Rh en donde Rh es metilo opcionalmente substituido con cicloalquilo C5_6 o con -S (O) 2-alquilo C?-3. Los valores representativos de R incluyen metilo, -CH2ciclopentilo, -CH2ciclohexilo, -CH2S02CH3, y -CH2S02C2H5. Todavía en otro aspecto específico, W es un grupo de la fórmula (IV) en donde Z es NS(0)2CH3. En otro aspecto específico, los compuestos de fórmula (I) son compuestos en donde W es un grupo de la fórmula (IV) en donde m es 1 y q es 1. Todavía en otro aspecto específico, los compuestos de fórmula (I) son compuestos en donde W es un grupo de la fórmula (IV) en donde ai es 1, q es 1, y Rz es metilo . En un aspecto, la invención proporciona un compuesto de fórmula (I) en donde R1 es hidrogeno o halo; R2 es isopropilo, o cicloalquilo C-s; y es define como la fórmul'a (I) . En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (I) en donde: R1 es hidrogeno ó halo; R2 es alquilo C_ o cicloalquilo C4_5; y W se selecciona de: (i) un grupo de la fórmula (II) en donde X es NC(0)CH3, S(0)2, o NS(0)2CH3; (ii) un grupo de la fórmula (III)- en donde p es 0, n es 1, e Y es NCH3C(0)CH3; Y (iii) un grupo de la fórmula (IV) en donde Rz es metilo, m es 1, q es 1, y Z es NC(0)CH3, S(0)2, o NS(0)2CH3. En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (I) en donde R1 es hidrogeno o halo; R2 es alquilo C3- o cicloalquilo C4_s; y W es un grupo de la fórmula (II) en donde X es NC(0)CH3; S(0)2; o NS(0)2CH3. En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto de la fórmula (I) que es un compuesto de la fórmula (V) : (V) en "donde : R1, R2, y X toma cualquiera de los valores genéricos, específicos o ejemplares descritos arriba. Todavía en otro aspecto, la invención proporciona un grupo de la fórmula (VI) : (VI) en donde R1, R2, y toma los valores mostrados en la tabla I.

Tabla I Las convenciones de nombrado químico usadas en la presente se ilustran para los compuestos del Ejemplo 1: que se designa { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetil-piperazin-l- il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-illamida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico, de conformidad al software AutoNom, proporcionado por sistemas de información MDL, GmbH (Frankfurt, Alemania). La designación (1S,3R,5R) describe la orientación relativa de los enlaces asociados con el sistema de anillo bicíclico que se describe como cuñas sólidas y punteadas. El compuesto se indica alternativamente como N- [ (3-endo) -8- [2- (4-acetil-piperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il] -1- (1-metiletil) -lH-indazol-3-carboxamida. En todos los compuestos descritos en la tabla I de arriba, el indazol carboxamida es endo para el grupo azabiciclooctilo. La mención particular puede hacerse de los siguientes compuestos : { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il } amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (1, l-dioxo-l?6-tiomorfolin-4-il) etil] - 8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido 1-isopropil-lH- indazol-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2- (4-metansulfonil-piperazin-1-il) etil] - 8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il } amida del ácido 1-isopropil-lH- indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (3- (acetil-metil-amino)pirrolidin-l- il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il }amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (lS,3R,5R)-8-[2-( (R) -3- (acetil-metilamino) pirrolidin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (S) -3- (acetil-metilamíno) pirrolidin-1-il) -etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2- [ (l-acetil-pirrolidin-3-il) -metilamino] etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- [ ( (R) -l-acetil-pirrolidin-3-il) metilamino] etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- [ ( (S) -l-acetil-pirrolidin-3-il) metilamino] etil] -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ (l-metansulfonil-pirrolidin-3- il) metilamino] etil} -8-azabiciclo [3.2.1]oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ ( (R) -l-metansulfonilpirrolidin-3- il) metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ ( (S) -l-metansulfonilpirrolidin-3-il) metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2- ( (1, l-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il) metilamino) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il} amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (R) - (1, l-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il) metilamino) etil] -8-azabíciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; y { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (S) - (1, l-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen- 3-il) metilamino) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; como se ilustra arriba, los compuestos de la invención puede contener un centro quiral . En consecuencia, la invención incluye mezclas racémicas, estereoisómeros puros, y mezclas enriquecidas con estereoisómeros de tales isómeros, salvo que se indique de otra manera. Cuando un estereoisómero particular se muestra, se deberá entender por alguien de habilidad ordinaria en el arte, que cantidades menores de otros estereoisómeros pueden presentarse en las composiciones de la invención salvo que se indique de otra manera, proporcionando que la utilidad de la composición como un todo no se elimina por la presencia de tales isómeros.

Definiciones Cuando se describen los compuestos, composiciones y métodos de la invención, los siguientes términos tiene los siguientes significados, salvo que se indique de otra manera. El término "alquilo" significa grupo de hidrocarburo saturado monovalente, el cual puede ser lineal o ramificado o combinaciones de los mismos. A menos de que se defina de otra manera, tales grupo alquilo típicamente contienen desde 1 hasta 10 átomos de carbono. Los grupos alquilo representativos incluyen, a manera de ejemplo, metilo, etilo, n-propilo (n-Pr) , isopropilo (i-Pr) , n-butilo (n-Bu) , sec-butilo, isobutilo, tert-butilo, n-pentilo, n-hexilo, n-heptilo, n-octilo, n-nonilo, n-decilo y similares. El término "alcoxi" significa un grupo -O-alquilo monovalente, donde alquilo se define como arriba. Los grupos alcoxi representativos incluyen, a manera de ejemplo, metoxi, etoxi, propoxi, butoxi, y similares. El término "cicloalquilo" significa un grupo carbocíclico saturado monovalente el cual puede ser monocíclico o multicíclico. Salvo que se indique de otra manera, tales grupos cicloalquilo típicamente contiene desde 3 hasta 10 átomos de carbono. Los grupos cicloalquilo representativos incluyen, a manera de ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciciohexilo, cicioheptilo, ciclooctilo, y similares. El término "halo" significa flúor, cloro, bromo y yodo.

El término "cantidad terapéuticamente efectiva" significa una cantidad suficiente para efectuar un tratamiento cuando se administra a un paciente que necesita del tratamiento. El término "tratamiento" como se usa en la presente, significa el tratamiento de una enfermedad, trastorno o condición médica en un paciente, tal como un mamífero (particularmente un humano), que incluye: (a) prevenir que la enfermedad, trastorno, o condición médica se presente, esto es, tratamiento profiláctico de un paciente; (b) aliviar la enfermedad, trastorno, o condición médica, esto es, eliminar o causar una regresión de la enfermedad, trastorno, o condición médica en un paciente; (c) suprimir la enfermedad, trastorno, o condición médica, esto es, retardar o detener el desarrollo de la enfermedad, trastorno, o condición médica en un paciente; o (d) aliviar los síntomas de la enfermedad, trastorno, o condición médica en un paciente.

El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal preparada de una base o ácido que es aceptable para la administración a un paciente, tal como un mamífero. Tales sales pueden derivarse de bases inorgánicas u orgánicas farmacéuticamente aceptables y de ácidos inorgánicos u orgánicos farmacéuticamente aceptables. Típicamente, las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la presente invención se preparan de ácidos. Las sales derivadas de ácidos farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, ácido acético, adípico, bencensulfónico, benzoico, canforsulfónico, cítrico, etansulfónico, fumárico, glucónico, glutámico, bromhídrico, clorhídrico, láctico, maléíco, málico, mandélico, metansulfónico, múcico, nítrico, pantoténico, fosfórico, propiónico, salicíclico, succínico, sulfúrico, tartárico, p-toluensulfónico, xinafóico (ácido l-hidroxi-2-naftóico) , naftalen-1, 5-disulfónico y similares. El término "solvato" significa un complejo o agregado formado por una o más moléculas de un soluto, esto es, un compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y una o más moléculas de un solvente. Tales solvatos típicamente son sólidos cristalinos que tienen una relación molar substancialmente fija de soluto y solvente. Los solventes representativos incluyen, a modo de ejemplo, agua, metanol, etanol, isopropanol, ácido acético, y similares. Cuando el solvente es agua, el solvato formado es un hidrato. Se apreciará que el término "o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del estereoisómero del mismo" se pretende que incluye todas las permutaciones de sales, solvatos y estereoisómeros, tal como un solvato de una sal farmacéuticamente aceptable de un estereoisómero del compuesto de la fórmula (I) . El término "grupo amino protector" significa un grupo protector apropiado para prevenir reacciones indeseables en el nitrógeno amino. Los grupos amino protectores representativos incluyen, pero no se limitan a, formilo; grupos acilo, por ejemplo grupos alcanoilo, tales como acetilo; grupos alcoxicarbonilo, tales como tert-butoxicarbonilo (Boc) ; grupos arilmetoxicarbonilo, tales como benciloxicarbonilo (Cbz) y 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) ; grupos arilmetilo, tales como bencilo (Bn) , tritilo (Tr) , y 1, 1-di- (4' -metoxifenil) metilo; grupos sililo, tales como trimetilsililo (TMS) y tert-butildimetilsililo (TBS); y similares.

Procedimientos Sintéticos Generales Los compuestos de la invención pueden prepararse a partir de materiales de partida fácilmente disponibles usando los siguientes métodos y procedimientos generales. No obstante que un aspecto particular de la presente invención se ilustra en los esquemas de reacción de abajo, aquellos expertos en la técnica reconocerán que todos los aspectos de la presente invención pueden prepararse usando los métodos descritos en la presente o usando otros métodos, reactivos y materiales de partida conocidos por aquellos expertos en el arte. También se apreciará que donde se dan condiciones de proceso típicas o preferidas (esto es, temperaturas de reacción, tiempos, relacionados molares de reactivos, solventes, presiones, etc) , también pueden usarse otras condiciones de proceso salvo que se establezca de otra manera. Las condiciones de reacción óptimas pueden variar con los reactivos o solventes particulares usados, pero tales condiciones pueden determinarse por alguien experto en la técnica por procedimientos de optimización de rutina. Adicionalmente, como será aparente para aquellos expertos en la técnica, 'pueden ser necesarios grupos protectores convencionales para prevenir que ciertos grupos funcionales experimenten reacciones indeseadas. La elección del grupo protector apropiados para el grupo funcional particular, así como las condiciones apropiadas para la protección y desprotección, son bien conocidas en el arte. Por ejemplo, numerosos grupos protectores, y su introducción y remoción, se describen en T.W. Greene y G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Third Edition, Wiley, New York, 1999, y referencias citadas en la presente. En un método de síntesis, los compuestos de la fórmula (I) se preparan como se ilustran en el Esquema de Reacción A.

(Los substituyentes y variables mostrados en los siguientes esquemas de reacción tienen las definiciones proporcionadas arriba, salvo que se indique de otra manera) .

Esquema de reacción A donde P1 representa un grupo amino protector tal como tert- butoxicarbonil (Boc) o benciloxicarbonil (Cbz) . Como se muestra en el Esquema de Reacción A, el aminoazabiciclooctano protegido, o comúnmente, aminotropano 1 se hace reaccionar primero con el ácido iH-indazol carboxílico 2 substituido. Típicamente, esta reacción se conduce al convertir primero 2 en un cloruro ácido al poner en contacto el 2 con al menos un equivalente, - típicamente entre alrededor de 1 y alrededor de 2 equivalentes de un agente activante, tal como cloruro de tionilo o cloruro de oxalilo en un diluyente aromático, tal como tolueno, benceno, xileno, o similares. La reacción se conduce típicamente a una temperatura en el rango desde alrededor de 80 °C hasta alrededor de 120 °C durante alrededor de 15 minutos hasta alrededor de 2 horas, o hasta que la reacción está substancialmente completa. La solución de cloruro ácido se agrega típicamente a una mezcla bifásica de alrededor de 1 equivalente del aminotropano 1 para formar el intermediario protector, que se extrae por procedimientos estándar. La mezcla bifásica de 1 generalmente se prepara al disolver 1 en un diluyente aromático, tal como el que se usa arriba, y agregar una solución acuosa que contiene un exceso de base, tal como hidróxido de sodio o hidróxido de potasio, por ejemplo alrededor de 2 hasta 5 equivalentes de base.

Alternativamente, el acoplamiento amida del intermediario 1 con el ácido carboxílico 2 puede realizarse al convertir 2 a un éster activado, tal como un éster de N- hidroxi succinimida (NHS) o un éster de p-nitrofenilo, o un imidazol ácido, que se hace reaccionar entonces con aminotropano 1. Aún en otra alternativa, el ácido carboxílico 2 se hace reaccionar con el intermediario 1 en presencia de un agente de acoplamiento tal como 1,3 diciclohexilcarbodiimida (DCC), 1- (3-dimetilaminopropil) -3- etilcarbodiimida (EDC) , o hexafluorofosfato de benzotriazol- 1-iloxitripirrolidino-fosfonio (PyBop) , opcionalmente combinado con l-hidroxi-7-azabenzotriazol (HOAt) . El grupo protector P1 se remueve por procedimientos estándar para proporcionar un intermediario de la fórmula 3. Por ejemplo, el g'rupo protector Boc, se remueve típicamente por el tratamiento con un ácido, tal como ácido trifluoroacético. El grupo protector Cbz, por ejemplo, se remueve convenientemente por hidrogenólisis sobre un catalizador de metal apropiado tal como paladio en carbono. El intermediario 3 se N-alquila entonces reductivamente por reacción con dimetoxiacetaldehído para proporcionar un intermediario de la fórmula 4. Esta reacción se conduce típicamente al poner en contacto 3 con entre alrededor de 1 y alrededor de 4 equivalentes de dimetoxiacetaldehído en un diluyente inerte en presencia de entre alrededor de 1 y alrededor de 2 equivalentes de un agente reductor. La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente durante alrededor de 1 hasta alrededor de 2 horas, o hasta que la reacción está substancialmente completa. Los diluyentes inertes apropiados incluyen diclorometano, triclorometano, 1, 1, 2, 2-tetracloroetano, y similares. Los agentes reductores típicos incluyen triacetoxiborohidruro de sodio, borohidruro de sodio, y cianoborohidruro de sodio. El producto 4 se aisla por procedimientos estándar. A continuación, el intermediario dimetoxietilo 4 se hidroliza en una solución acuosa de un ácido fuerte, por ejemplo HCl 3N o 6N, para proporcionar el intermediario dihidroxietilo 5. Se entenderá que aunque el intermediario 5 se muestra en el Esquema de Reacción A en la forma de un hidrato de aldehido, el intermediario 5 puede describirse equivalentemente en la forma de un aldehido. La reacción se conduce típicamente a una temperatura en el rango de alrededor de 50 °C hasta alrededor de 100 °C durante alrededor de 15 minutos hasta alrededor de 2 horas, o hasta que la reacción está substancialmente completa. El producto 5 puede aislarse en forma de sal, por ejemplo como la sal HCl, o como especies neutrales después de la extracción alcalina. Alternativamente, el intermediario crudo 5 puede usarse en la etapa final sin manipulación adicional.

Finalmente el intermediario 5 se acopla reductivamente con la amina primaria o secundaria de la fórmula H-W, para proporcionar el producto de la fórmula (I) . Típicamente, una solución se preparó de entre alrededor de 1 y alrededor de 3 equivalentes, por ejemplo alrededor de 2 equivalentes, de la amina y un agente reductor, tal como triacetoxiborohidruro de sodio o similares, en un diluyente inerte tal como diclorometano. El intermediario 5 se agrega a la mezcla de amina. La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente durante alrededor de 15 minutos hasta alrededor de 2 horas, o hasta que la reacción está substancialmente completa. El producto crudo de la fórmula (I) se extrae por procedimientos convencionales. El producto puede purificarse en forma de sal por cristalización a partir de un diluyente inerte, por ejemplo, etanol, alcohol isopropílico, metanol, acetonitrilo, dicloroetano, o mezclas de los mismos. Alternativamente, los compuestos de la fórmula (I) pueden prepararse por un compuesto N-alquilado de la fórmula (I) en la cual R2 es hidrógeno, el cual puede prepararse de conformidad al esquema de reacción A. La reacción de N-alquilación se conduce típicamente al poner en contacto un compuesto de la fórmula (I) en la cual R2 es hidrógeno con entre alrededor de 1 y alrededor de 4 equivalentes de un compuesto de la fórmula L-R2 en el cual L es un grupo de partida tal como yodo o bromo. Esta reacción se conduce típicamente en un solvente aprótico polar tal como dimetilformamida en presencia de entre alrededor de 2 y alrededor de 4 equivalentes de una base fuerte, tal como tert-butoxido de potasio. Típicamente, la reacción se lleva a cabo a una temperatura de entre alrededor de 60 y alrededor de 100 °C de entre alrededor de 6 y alrededor de 24 horas, o hasta que la reacción está substancialmente completa. El aminotropano 1 protegido se empleó en las reacciones descritas en esta solicitud se preparó a partir de materiales de partida fácilmente disponibles. Por ejemplo, cuando el grupo protector Pl es Boc, el endo aminotropano 1' protegido se preparó por el procedimiento ilustrado en el esquema de reacción B.

Esquema de reacción B 1' Como se describe en detalle en el ejemplo la a continuación, para preparar el intermediario protector 1' , primero, 2,5-dimetoxi tetrahidrofurano 6 se pone en contacto con entre alrededor de 1 y 2 equivalentes, preferiblemente alrededor de 1.5 equivalentes de bencil amina y un exceso ligero, por ejemplo alrededor de 1.1 equivalentes, de ácido 1, 3-acetondicarboxílico 7 en una solución de ácido acuoso en presencia de un agente amortiguador tal como fosfato ácido de sodio. La mezcla de reacción se calentó entre alrededor de 60 y alrededor de 100 °C para asegurar descarboxilación de cualquiera de los intermediarios carboxilado en el producto, 8-bencil-8- azabiciclo [3.2. l]octan-3-ona 8, comúnmente N-benciltropanona. El intermediario 8 se hace reaccionar típicamente con un exceso ligero de dicarbonato de di-tert-butilo (comúnmente (Boc)20), por ejemplo, alrededor de 1.1 equivalentes, bajo una atmósfera de hidrógeno en presencia de un catalizador de metal de transición para proporcionar el intermediario protector Boc 9, éster de tert-butilo del ácido 3-oxo-8-azabiciclo [3.2.1] octano-8-carboxílico. La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente durante alrededor de 12 hasta alrededor de 72 horas. Finalmente, el intermediario 9 se pone en contacto con un exceso grande, por ejemplo al menos alrededor de 25 equivalentes, de formiato de amonio en un diluyente inerte, tal como metanol, en presencia de un catalizador de metal de transición para proporcionar el producto 1 ' en la configuración endo con alta estereospecificidad, por ejemplo relación endo hasta exo ratio de >99. La reacción se conduce típicamente a temperatura ambiente durante alrededor de 12 hasta alrededor de 72 horas o hasta que la reacción está substancialmente completa. Esto se agregó ventajosamente al reactivo de formiato de amonio en porciones. Por ejemplo, el intermediario 9 se pone en contacto con una porción inicial de formiato de amonio de alrededor de 15 hasta alrededor de equivalentes. Después de un intervalo de alrededor de 12 hasta alrededor de 36 horas, una porción adicional de alrededor de 5 hasta alrededor de 10 equivalentes de formiato de amonio se agregó. La adición subsecuente puede repetirse después de un intervalo similar. El- producto 1 ' puede purificarse por procedimientos convencionales, tales como extracción alcalina. El ácido- lH-indazol carboxílico 2 se preparó fácilmente por procedimiento conocidos en el arte, y se describe, por ejemplo, en la literatura en Harada et al. Chem. and Pharm Bull. 1995, 43, 1912-30 y en los ejemplo a continuación. Las aminas H-W son comercialmente disponibles o se preparan fácilmente por procedimientos estándar a partir de materiales de partida comunes. Con respecto a detalles adicionales las condiciones de reacción específicas y otros procedimientos para preparar compuestos representativos de la invención o intermediarios de los mismos se describe en los ejemplos a continuación. De conformidad, en un aspecto del método, la invención proporciona un proceso para preparar un compuesto de la fórmula (I) , o una sal o estereoisómero o derivado protector del mismo, los procesos que comprende hacer reaccionar un compuesto de la fórmula 5 con una amina de la fórmula H-W para proporcionar un compuesto de la fórmula (I) , o una sal o estereoisómero o derivado protegido del mismo. La invención proporciona además un compuesto de la fórmula 5, o una sal o estereoisómero o derivado protegido del mismo, en donde R1 y R2 se definen como en la fórmula (I) .

En un método alternativo de síntesis, los compuestos de la fórmula (I) se preparan por acoplar el ácido lH-indazol carboxílico 2 substituido con un intermediario de la fórmula 10 como se ilustra en el Esquema de Reacción C.

Esquema de reacción C La reacción del esquema de reacción C se conduce típicamente bajo las condiciones de acoplamiento de amida descritas arriba por la reacción del ácido carboxílico 2 con el intermediario 1. Los intermediarios de la fórmula 10 pueden prepararse or desproteger un intermediario de la fórmula 11 11 donde P1 representa un grupo amino protector. Los intermediarios de la fórmula 11 pueden prepararse a partir de materiales de partida fácilmente disponibles usando procedimientos análogos a la alquilación, aminación reductiva y otras reacciones descritas arriba y/o uso de reacciones alternativas conocidas por aquellos de habilidad en el arte. Las rutas de procesos ejemplares (i) hasta (v) para la preparación del intermediario 11 se ilustran en el esquema de Reacción D: Esquema de reacción D donde L indica un grupo de partida tal como bromo o yodo . Todavía en otro método alternativo de síntesis, los compuestos de la fórmula (I) se preparan por acoplar un intermediario de la fórmula 3, detallado en el Esquema de Reacción A, con un intermediario de la fórmula 12. Se entenderá que aunque el intermediario 12 se muestra en el esquema de Reacción D en la forma de un aldehido, el. intermediario 12 puede describirse equivalentemente en la forma de un aldehido hidrato.

Composiciones farmacéuticas Los compuesto de indazol-carboxamida de la invención se administran típicamente a un paciente en la forma de una composición farmacéutica. Tales composiciones farmacéuticas pueden administrarse al paciente por cualquier ruta aceptable de administración, incluyendo, pero no limitando a, modos oral, rectal, vaginal, nasal, inhalado, tópico (incluyendo transdérmica) y parenteral de administración. De conformidad, en uno de estos aspectos de composición, la invención se dirige a una composición farmacéutica que comprende un portador farmacéuticamente aceptable o excipiente y una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Opcionalmente, tales composiciones farmacéuticas pueden contener otros agentes terapéuticos y/o formulantes si se desea. Las composiciones farmacéuticas de la invención típicamente contienen una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Típicamente, tales composiciones farmacéuticas deberán contener alrededor de 0.1 hasta alrededor de 95% en peso del agente activo; incluyendo desde alrededor de 1 hasta alrededor de 70% en peso; tal como desde alrededor de 5 hasta alrededor de 60% en peso del agente activo. Cualquier portador convencional o excipiente puede usarse en las composiciones farmacéuticas de la invención. La elección de un portador o excipiente o combinaciones de portadores o excipientes, depende en el modo de administración uso para tratar un paciente particular o tipo de condición medica o estado de enfermedad. En este aspecto, la preparación de una composición farmacéuticamente aceptable para un modo particular de administración será dentro del alcance de aquellos de habilidad en el arte farmacéutico. Adicionalmente, los ingrediente para tales composiciones son comercialmente disponibles de, por ejemplo, Sigma, P. O. Box 14508, St . Louis, MO 63178. A manera de ilustración adicional, las técnicas de formulación convencional se describe en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Maryland (2000); and H. C. Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Maryland (1999) . Los ejemplos representativos de los materiales los cuales pueden servir como portador farmacéuticamente aceptable incluyen, pero no se limitan a, los siguientes: (1) azúcares, tales como lactosa, glucosa y sucrosa; (2) almidón, tal como almidón de maíz y almidón de papa; (3) celulosa, tal como celulosa microcristalina, y sus derivados, tales como celulosa de carboximetilo de sodio, celulosa de etilo y celulosa de acetato; (4) tragacanto en polvo; (5) malta; (6) gelatina; (7) talco; (8) excipientes, tales como manteca de cacao y cera de supositorio; (9) aceites, tales como aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodón, aceite de girasol, aceite de ajonjolí, aceite de olivo, aceite de maíz y aceite de soya; (10) glicoles, tales como propilen glicol; (11) polioles, tal como glicerina, sorbitol, manitol y polietilen glicol; (12) esteres, tales como oleato de etilo y laurato de etilo; (13) agar; (14) agente amortiguantes, tales como hidróxido de magnesio y hidróxido de aluminio; (15) ácido algínico; (16) agua libre de pirógenos; (17) solución salina isotónica; (18) solución de Ringer; (19) alcohol etílico; (20) soluciones amortiguadoras de fosfato; y (21) otras substancias no tóxicas compatibles empleando en composiciones farmacéuticas.

Las composiciones farmacéuticas de la invención se preparan típicamente por mezclar o combinar completamente o íntimamente un compuesto de la invención un portador farmacéuticamente aceptable y uno o más ingredientes opcionales. Si es necesario o deseado, la mezcla uniformemente mezclada resultante puede entonces formarse o cargarse en tabletas, cápsulas, pildoras y similares usando procedimientos y equipo convencionales . Las composiciones farmacéuticas de la invención se empacan en una forma de unidad de dosis. El término "forma de unidad de dosis" se refiere -a un unidad discreta físicamente adecuada para dosificación, esto es, cada unidad contiene una cantidad de agente activo calculada para producir el efecto terapéutica deseado ya sea solo o en combinación con una o más unidades adicionales. Por ejemplo, tales forma de unidad de dosis pueden ser cápsulas, tabletas, pildoras y similares.

En una modalidad preferida, las composiciones farmacéuticas de la invención son adecuadas para administración oral. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración oral pueden ser en forma de cápsulas, tabletas, pildoras, saquitos, pastillas, grageas, polvos, granulos; o como una solución o una suspensión en un líquido acuoso o no acuoso; o como una emulsión líquida de aceite en agua o agua en aceite; o como un elixir o jarabe; y similares; cada uno contiene una cantidad predeterminada de un compuesto de la presente invención como un ingrediente activo. Cuando se intenta por administración oral en una forma de dosis sólida (esto es, como cápsula, tabletas, pildoras y similares) , las composiciones farmacéuticas de la invención típicamente comprende un compuesto de la presente invención como el ingrediente activo y uno o más portadores farmacéuticamente aceptables, tales como citrato de sodio o fosfato de dicálcio. Opcionalmente o alternativamente, tales formas de dosis sólidas pueden también comprender: (1) rellenos o diluyentes, tales como almidones, celulosa microcristalina, lactosa, sucrosa, glucosa, manitol, y/o ácido silícico; (2) enlazadores, tales como carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinil pirrolidona, sucrosa y/o acacia; (3) humectantes, tales como glicerol; (4) agentes desintegrantes, tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de papa o tapioca, ácido alginico, ciertos silicatos y/o carbonato de sodio; (5) agentes que retardan la solución, tal como parafina; (6) aceleradores de absorción, tales como compuestos de amonio cuaternarios; (7) agentes humectantes, tales como alcohol cetílico y/o monoestearato de glicerol; (8) absorbentes, tales como caolín y/o arcilla de bentonita; (9) lubricantes, tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, glicoles de polietilen sólido, lauril sulfato de sodio, y/o mezclas de los mismos; (10) agentes colorantes y (11) agentes amortiguantes . Los agentes de liberación, agentes humectantes, agentes de recubrimiento, humectantes, saborizantes y agentes perfumantes, conservadores y antioxidantes pueden también presentarse en las composiciones farmacéuticas de la invención, los ejemplos de antioxidantes farmacéuticamente aceptables incluyen: (1) antioxidantes solubles en agua, tales como ácido ascórbico, clorohidrato de cisteina, bisulfato de sodio, metabisulfato de sodio, sulfito de sodio y similares; (2) antioxidantes solubles en aceite, tales como palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado (BHA) , hidroxitolueno butilado (BHT) , lecitina, galato de propilo, alfa-tocoferol, y similares; y (3) agentes quelantes de metal, tal como ácido cítrico, ácido etilendiamina tetraacético (EDTA) , sorbitol, ácido tartárico, ácido fosfórico, y similares. Los agente de recubrimiento para tabletas, cápsulas, pildoras y similares, incluyen aquellos usados por recubrimiento entérico, tal como ftalato acetato de celulosa (CAP) , ftalato de acetato de polivinilo (PVAP) , ftalato de hidroxipropil metilcelulosa, ácido metacrílico-copolímero de éster del ácido metacrílico, trimelitato de acetato de celulosa (CAT) , carboximetil etil celulosa (CMEC) , succinato de acetato de hidroxipropil metil celulosa (HPMCAS), y similares.

Si se desea, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden también formularse para proporcionar liberación baja o controlada del ingrediente activo usando, por ejemplo, hidroxipropil metil celulosa en varias proporciones; u otras matrices de polímero, liposomas y/o microesferas Además, las composiciones farmacéuticas de la presente invención puede opcionalmente contener agentes opacificantes y pueden formularse como aquellos que liberan el ingrediente activo solamente, o preferentemente, en una cierta porción del tracto gastrointestinal, opcionalmente, en una manera detallada. Los ejemplos de las composiciones incrustadas las cuales puede incluir substancias poliméricas y ceras. El ingrediente activo puede también ser en forma de icro-cápsula, si es apropiado, con uno o más de los excipiente arriba descritos. Las formas de dosi;s líquidas adecuadas para administración incluyen, a manera de ilustración, emulsiones farmacéuticamente aceptables, microemulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires. Tales forma de dosis líquidas típicamente comprenden el ingrediente activo y un diluyente inerte, tal como por ejemplo, agua u otros solventes, agente solubilizantes y emulsificantes, tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilen glicol, 1,3-butilen glicol, aceites (esp., aceites de semilla de algodón, cacahuate, maíz, germen, olivo, ricino y ajonjolí), glicerol, alcohol de tetrahidrofurilo, polietilen glicol y éster de ácido graso de sorbitan y mezclas de los mismos. Suspensiones, en adición al ingrediente activo, puede contener agente de suspensión tales como, por ejemplo, alcoholes etoxilados de isostearilo, polioxietilen sorbitol y esteres de sorbitan, celulosa microcristalina, metanhidróxido de aluminio, bentonita, agar- agar y tragacanto, y mezclas de los mismos. Alternativamente, las composiciones farmacéuticas de la. invención se formulan por administración por inhalación. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para administración por inhalación serán típicamente en la forma de un aerosol o un polvo. Tales composiciones se administran generalmente usando dispositivos de liberación bien conocidos, tales como un inhalador de dosis medidor, un inhalador de polvo seco, un nebulizador o un dispositivo de liberación similar. Cuando se administra por inhalación usando un contenido presurizado, las composiciones farmacéuticas de la invención típicamente comprende el ingrediente activo y un propelente adecuado, tal como diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otro gas adecuado.

Adicionalmente, la composición farmacéutica puede en la forma de una cápsula o cartucho (hacerse, por ejemplo, a partir de gelatina) que comprende un compuesto de la invención y un polvo adecuado para uso en un inhalador de polvo. Las bases de polvo adecuadas incluyen, a manera de ejemplo, lactosa o almidón. Los compuestos de la invención pueden también administrarse transdermalmente usando sistemas de liberación transdérmica conocidos y excipientes. Por ejemplo, un compuesto de la invención puede mezclarse con potenciadores de permeación, tales como propilen glicol, monolaurato de polietilen glicol, azacicloalcan-2-onas y similares, y se incorporan en un lote o sistema de liberación similar. Los excipiente adicionales incluyen agentes gelificantes, emulsificantes y amortiguantes, pueden usarse en tales composiciones transdérmicas si se desea. Las siguientes formulaciones ilustran composiciones farmacéuticas representativas de la presente invención: Formulación del ejemplo A Las cápsulas de gelatina dura para administración oral se preparan como sigue: Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan a fondo y luego se cargan en una cápsula de gelatina dura (260 mg de composición por cápsula) Formulación del ejemplo B Las cápsulas de gelatina dura para administración oral se preparan como sigue: Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan a fondo y luego se pasan a través de tamiz de malla E.Ü.A. No. 45 y se cargan en una cápsula de gelatina dura (200 mg de la composición por cápsula) Formulación del ej emplo C Las cápsulas para administración oral se preparan como sigue: Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan a fondo y luego se cargan en una cápsula de gelatina (310 mg de composición por cápsula) . Formulación del ejemplo D Las tabletas para administración se preparan como sigue: Procedimiento representativo: El ingrediente activo, almidón y celulosa se pasan a través de tamiz de malla de E.U.A. No. 45 y se mezclan completamente. La solución de polivinilpirrolidona se mezcló con los polvos resultantes y esta mezcla luego se pasó a través de tamiz de malla de E.Ü.A. No. 14. Los granulos producidos se secan a 50-60°C y se pasan a través de tamiz de malla de E.U.A. No. 18. El almidón de carboximetilo de sodio, estearato de magnesio y talco (previamente se pasan a través de un tamiz de malla de E.U.A. No. 60) luego se agregan a los granulos. Después de mezclarse, la mezcla se condensa en una maquina de tableta para proporcionar una tableta de 100 mg de peso.

Formulación del ejemplo E Las tabletas para administración oral se prepararon como sigue: Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan a fondo y luego se condensan para forma tabletas (440 mg de composición por tableta) .

Formulación del ejemplo F Las tabletas de marca sencilla para administración oral se prepararon como sigue: Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan a fondo y se condensan para formar una tableta de registro sencillo (215 mg de las composiciones por tableta ) .

Formulación del ejemplo G Una suspensión de administración oral se preparó como sigue : Procedimiento representativo: Los ingrediente se mezclaron para formar una suspensión que contiene 10 mg del ingrediente activo por 10 ml de suspensión.

Formulación del ejemplo H Un polvo seco para administración por inhalación se preparó como sigue: Procedimiento representativo: El ingrediente activo se icronizo y luego se mezcló con lactosa. Esta mezcla luego se cargó en un cartucho de inhalación de gelatina. El contenido del cartucho se administró usando un inhalador de polvo.

Formulación del ejemplo I Un polvo seco para administración por inhalación en un inhalador de dosis medida se preparó como sigue: Procedimiento representativo: Una suspensión que contiene 5% en peso de un compuesto de la invención y 0.1% en peso de lecitina se preparó por 10 g dispersante del compuesto activo como partículas micronizadas con medios de tamaño menor que 10 µm en una solución formada de 0.2 g de lecitina disuelta en 200 ml de agua desmineralizada. La suspensión se secó en spray -y el material resultante se micronizo para dar partículas que tiene un medio de diámetro menor que 1.5 µm. Las partícula se cargaron en cartuchos con 1, 1, 1, 2-tetrafluoroetano presurizado.

Formulación del ejemplo J Una formulación inyectable se preparó como sigue: Procedimiento representativo: Los ingredientes de arriba se mezclaron y el pH se ajustó a 4±0.5 usando 0.5 N HCl ó 0.5 N NaOH.

Formulación del ejemplo K Las cápsulas para administración oral se preparan como sigue: Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclan completamente y luego se cargan en una cápsula de gelatina (tamaño #1, White, Opaque) (264 mg de la composición por cápsula) .

Formulación del ejemplo L Las cápsulas para administración oral se prepararon como sigue: Procedimiento representativo: Los ingredientes se mezclaron completamente y luego se cargaron en una cápsula de gelatina (tamaño #1, White, Opaque) (148 mg de la composición por cápsula) Se deberá entender que cualquier forma de los compuestos de la invención (esto es, base libre, sal farmacéutica, o solvato9 que es adecuada para el modo particular de administración, puede usarse en las composiciones farmacéuticas discutidas arriba.

Utilidad Los compuestos de indazol-carboxamida de la invención son agonistas del receptor 5-HT4 y por lo tanto se espera que sean útiles para el tratamiento de condiciones médicas mediadas por los receptores 5-HT4 o asociadas con el receptor de actividad 5-HT , esto es., condiciones médicas las cuales se mejoran por el tratamiento con un agonista receptor 5-HT4. Tal condición médica incluyen, pero no se limita a, síndrome de intestino irritable (IBS) , constipación crónica, dispepsia funcional, vaciado gástrico retardado, enfermedad de reflujo gastroesofagal (GERD) , gastroparesis, gastropatía diabética e idiopática, íleo postoperativo, pseudo obstrucción intestinal, y tránsito retardado inducido por fármaco. Además, esto sugiere que algunos de los compuestos agonistas del receptor 5-HT pueden usarse en el tratamiento de trastornos del sistema nervioso central incluyendo, trastornos cognitivos, trastornos del comportamiento, trastornos del humor, y trastornos del control de la función autonómica. En particular, los compuestos de la invención incrementan la movilidad del tracto gastrointestinal (Gl) y así se espera que sean útiles para tratar trastornos del tracto Gl causado por movilidad reducida en mamíferos, incluyendo humanos. Tales trastornos de movilidad Gl incluyen, a manera de ilustración, constipación crónica, síndrome de intestino irritable con constripación predominante (C-IBS) , gastroparesis diabética e idiopática, y dispepsia funcional. En un aspecto, por lo tanto, la invención proporciona un método para incrementar la movilidad del tracto gastronintestinal en un mamífero, el método comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende un portador farmacéuticamente aceptable y un compuesto de la invención. Cuando se usa para tratar trastornos de movilidad reducida del tracto Gl u otras condiciones mediadas por receptores 5-HT4, los compuestos de la invención serán típicamente administrados oralmente en una dosis sencilla diariamente o en dosis múltiple por día, no obstante que otras formas de administración pueden usarse. La cantidad de agente activo administrada por dosis o cantidad total administrada por día será típicamente determinada por un medico, en la claridad de circunstancias relevantes, incluyendo la condición para tratar, la ruta señalada de administración, el compuesto actual administrado y esta actividad relativa, la edad, peso, y respuesta del paciente individual, la severidad de los síntomas del paciente y similares . Las dosis adecuadas para tratar trastornos de movilidad reducida del tracto Gl u otros trastornos mediados por receptores 5-HT4 se esperan en el rango desde alrededor de 0.0007 hasta alrededor de 20 mg/kg/día del agente activo, incluyendo desde alrededor de 0.0007 hasta alrededor de 1 mg/kg/día. Para un humano de 70kg en promedio, esta cantidad será desde alrededor de 0.05 hasta alrededor de 70 mg por día del agente activo. En un aspecto de la invención, los compuestos de la invención se usan para tratar constipación crónica. Cuando se usa para tratar constipación crónica, los compuestos de la invención serán típicamente administrados oralmente en una dosis sencilla diariamente o en dosis múltiple por día. La dosis para tratar constipación crónica se espera en el rango desde alrededor de 0.05 hasta alrededor de 70 mg por día. En otro aspecto de la invención, los compuestos de la invención se usan para tratar síndrome del intestino irritable. Cuando se usa para tratar síndrome del intestino irritable de constipación predominante, los compuestos de la invención típicamente se administran oralmente en una dosis diaria sencilla o en dosis múltiples por día. La dosis para el tratamiento de síndrome del intestino irritable de constipación predominante se espera a un rango desde alrededor de 0.05 hasta alrededor de 70 mg por día. En otro aspecto de la invención, los compuestos de la invención se usan para tratar gastroparesis diabética. Cuando se usa para tratar gastroparesis diabética, los compuestos de la invención típicamente se administran oralmente en una dosis diaria sencilla o en dosis múltiples por día. La dosis para el tratamiento de gastroparesis diabética se espera a un rango desde alrededor de 0.05 hasta alrededor de 70 mg por día. En todavía otro aspecto de la invención, los compuestos de la invención se usan para tratar dispepsia funcional. Cuando se usa para tratar dispepsia funcional, los compuestos de la invención típicamente se administran oralmente en una dosis diaria sencilla o en dosis múltiples por día. La dosis para el tratamiento de dispepsia funcional se espera a un rango desde alrededor de 0.05 hasta alrededor de 70 mg por día. La invención también proporciona un método para tratar un mamífero que tiene una enfermedad o condición asociada con actividad del receptor 5-HT4, el método comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención o de una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención. Como, se describió anteriormente, compuestos de la invención son agonistas del receptor 5-HT . La invención además proporciona, por lo tanto, un método para agonizar un receptor 5-HT4 en un mamífero, el método comprende administrar un compuesto de la invención al mamífero. Además, los compuestos de la invención son también útiles como herramientas de búsqueda para investigar o estudiar sistemas biológicos o muestras que tienen receptores 5-HT4, o para descubrir nuevos agonistas del receptor 5-HT . Por otro lado, ya que compuestos de la invención muestran selectividad de enlace para receptores 5-HT4 en comparación con enlace para receptores de otros subtipos 5-HT, particularmente receptores 5-HT3, tales compuestos son particularmente útiles para estudiar los efectos de agonismo selectivo de receptores 5- HT4 en un sistema o muestra biológica. Cualquier sistema o muestra biológica adecuados que tienen receptores 5-HT4 se pueden emplear en tales estudios que se pueden conducir ya sea in vitro o in vivo. Sistemas o muestras biológicas adecuadas representativos para cada estudio incluyen, pero no se limitan a, células, extractos celulares, membranas de plasma, muestras de tejido, mamíferos (tales como ratones, ratas, conejillos de indias, conejos, perros, cerdos, etc.) y similares . En este aspecto de la invención, un sistema o muestra biológica comprende un receptor 5-HT4 que se contacta con una cantidad que agoniza el receptor 5-HT4 de un compuesto de la invención. Los efectos de agonizar el receptor 5-HT se determinan entonces usando procedimientos convencionales y equipo, tal como ensayos de enlace de radioligando y ensayos funcionales. Tales ensayos funcionales incluyen cambios mediados por ligando en monofosfato de adenosina cíclica intracelular (cAMP) , cambios mediados por ligando en actividad de la enzima adenilil ciclasa (que sintetiza cAMP) , cambios mediados por ligando en incorporación de análogos de trifosfato de guanosina (GTP), tal como [35S] GTP?S (guanosina 5' -O- (?-tio) trifosfato) o GTP-Eu, en membranas aisladas por medio del intercambio catalizado del receptor de análogos GTP para análogos GDP, cambios mediados por ligando en iones de calcio intracelulares libres (medidos, por ejemplo, con un lector de placa formador de imagen ligado a la fluorescencia o FLIPR® a partir de Molecular Devices, Inc.), y medida de activación de proteína cinasa (MAPK) activada con mitógeno. Un compuesto de la invención puede agonizar o aumentar la activación de receptores 5-HT en cualquiera de los ensayos funcionales enlistados arriba, o ensayos de una naturaleza similar. Una cantidad que agoniza el receptor. 5-HT de un compuesto de la invención será típicamente en el rango desde alrededor de 1 nanomolar hasta alrededor de 500 nanomolar. Adicionalmente, los compuestos de la invención pueden usarse como herramientas de búsqueda para descubrir nuevos agonistas del receptor 5-HT4. En esta modalidad, enlaces del receptor 5-HT o datos funcionales para un compuesto de prueba o un grupo de compuestos de prueba se compara al enlace del receptor 5-HT o datos funcionales para un compuesto de la invención para identificar compuestos de prueba que tienen enlace superior o actividad funcional, en cualquiera. Este aspecto de la invención incluyen, como modalidades separadas, ambos la generación de datos de comparación (usando los análisis adecuados) y el análisis de los datos de prueba para identificar compuestos de prueba de interés . Entre otras propiedades, los compuestos de la invención se han encontrado para ser agonistas potentes del receptor 5- HT4 y para exhibir selectividad substancial para el subtipo de receptor 5-HT sobre el subtipo de receptor 5-HT3 en ensayos de enlace de radioligando. Además, compuestos de la invención han demostrado características farmacocinéticas superiores en un modelo de rata. Compuestos de la invención se esperan así para ser altamente biodisponibles sobre la administración oral. Además, estos compuestos no se han mostrado para inhibir la corriente de ion de potasio en un modelo de voltaje cerrado in vitro usando células enteras aisladas que expresan el canal de potasio cardiaco hERG. El ensayo de voltaje cerrado es un método pre-clínico aceptado de evaluar el potencial para agentes farmacéuticos para cambiar el patrón de repolarización cardiaca, específicamente para causar, prolongación denominada QT, que se ha asociado con arritmia cardiaca. (Cavero et al., Opinión on Pharmacotherapy, 2000, 1, 947-73, Fermini et al., Nature Reviews Drug Discovery, 2003,2, 439-447) En consecuencia, las composiciones farmacéuticas que comprenden compuestos de la invención se esperan para ser libres de tales efectos secundarios cardiacos. Estas características, así como la utilidad de los compuestos de la invención, se pueden demostrar usando diversos ensayos in vitro e in vivo bien conocidos por aquellos expertos en la técnica. Ensayos representativos se describen en detalle adicional en los siguientes ejemplos.

EJEMPLOS Los siguientes ejemplos sintéticos y biológicos se ofrecen para ilustrar la invención, y no se construyen de ninguna manera como limitantes para el alcance de la invención. En los ejemplos de abajo, las abreviaturas siguientes tienen el siguiente significado a menos que se indique de otra manera. Las abreviaturas no definidas abajo-tienen sus significados generalmente aceptados. Boc = tert-butoxicarbonilo (Boc)20 = dicarbonato de di-tert-butilo DCM = diclorometano DMF = N, -dimetilformamida DMSO = sulfóxido de dimetilo EtOAc = acetato de etilo mCPBA = ácido m-clorobenzóico MeCN = acetonitrilo MTBE = éter de tert-butil metilo PyBop = hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitripirrolidino-fosfonio Fr = factor de retención TA = temperatura ambiente TFA = ácido trifluoroacético THF = tetrahidrofurano Los reactivos (que incluyen aminas secundarias) y solventes se compraron de surtidores comerciales (Aldrich, Fluka, Sigma, etc.), y se usan sin purificación adicional. Las reacciones se corrieron bajo atmósfera de nitrógeno, a menos que se indique de otra manera. El progreso de las mezclas de reacción se observó por cromatografía de capa delgada (CCD) , cromatografía líquida de alta resolución analítica (CLAR anal.), y espectrometría de masa, los detalles de los cuales se dan abajo y separadamente en ejemplos específicos de reacciones. Las mezclas de reacción se trabajan como se describe específicamente en cada reacción; se purifican comúnmente por estracción y otros métodos de purificación tal como temperatura-, y solvente-cristalización dependiente, y precipitación. Además, las mezclas de reacción se purificaron rutinariamente por CLAR preparativa: un protocolo general se describe abajo. La caracterización de los productos de reacción se llevaron a cabo rutinariamente por masa y espectrometría 1H-RMN . Para la medida RMN, las muestras se disolvieron en solvente deuterado (CD3OD, CDC13, o DMSO-d6) , y espectro XH-RMN, se adquirieron con un instrumento Varian Gemini 2000 (300 MHz) bajo condiciones de observación estándar. Identificación espectrométrica de masa de compuestos se realizó por un método de ionización de electrorocío (ESMS) con un Applied Biosystems (Foster City, CA) instrumento EX modelo API 150 o un Agilent (Palo Alto, CA) instrumento LC/MSD modelo 1100.

Protocolo General para análisis CLAR Los compuestos crudos se disolvieron en MeCN 50%/H2O (con TFA 0.1%) a concentración 0.5-1.0 mg/mL, y se analiza usando las condiciones siguientes: Columna: Zorbax Bonus-RP (3.5 µm de tamaño de partícula, 2.1 x 50 mm) Relación de flujo: 0.5 mL/min Longitud de onda del detector: 214, 254, y 280 nm.

Protocolo General para la purificación de CLAR preparativa Los compuestos crudos se disolvieron en ácido acético 50% en agua a concentración 50-100 mg/mL, se filtran, y fraccionan usando el siguiente procedimiento: Columna: YMC Pack-Pro C18 (50a x 20 mm; ID = 5 µm) Relación de flujo: 40 mL/min Fases Móviles: A = MeCN90% /H20 10%/TFA 0.1% B = H20 98%/MeCN 2%/TFA 0.1% Gradiente: A 10%/B 90% hasta A 50%/B 50% durante 30 min (lineal) Longitud de onda del detector: 214 nm.

Preparación de aminas secundarias El tiomorfolina-1, 1-dióxido se preparó desde la tiomorfolina por protección de la amina secundaria hasta tiomorfolina N-Boc ((Boc)20, MeOH), la oxidación hasta sulfona (mCPBA, CH2C12, 0°C), y desprotección del grupo N-Boc para proporcionar la amina libre (CF3C02H, CH2C12) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C4H9N02S, 136.04; encontrado, 135.9. Los derivados de N-sulfonilo de piperazina se prepararon a partir de piperazina N-Boc al reaccionar con cloruro de sulfonilo respectivo (iPr2NEt, CH2C12, 0-°C) , y desproteger 'el grupo N-Boc (CF3C02H, CH2C12) . 1-Metanosulfonil-piperazina: ^?- ' RMN (CDC13; neutral): d (ppm) 3.1 (t, 4H) , 2.9 (t, 4H) , 2.7 (s, 3H) . 1- (Metilsulfonil)metanosulfonil-piperazina: """H-RMN (CD3OD) : d (ppm) 2.90 (s, 3H) , 3.02 ( , 4H) , 3.38 (m, 4H) , 4.61 (s, 2H) . Las formas de isómero quiral racémico o sencillo de 3-acetilaminopirrolidina se prepararon al tratar N1-Boc-3-aminopirrolidina (racemato, 3R, o 3S) con cloruro de acetilo (iPr2NEt, CH2C12, 0°C) , y desproteger el grupo N-Boc (CF3C02H, CH2C12) . 3- (Acetamido) pirrolidina: ^-RMN (DMS0-d6; sal TFA): d (ppm) 4.2 (quin, 1H) , 3.3-3.1 (m, 3H) , 2.9 (m, ÍH) , 2.0 (m, 1H) , 1.8 (br s, 4H) . La 3- ( (R) -2-Hidroxipropionamido) pirrolidina se preparó después de la amidación de N1-Boc-3-aminopirrolidina (ácido L-láctico, PyBOP, DMF, TA) , y desprotección del grupo N-Boc (CF3C02H, CH2C12). (m/z): [M+H]+ calculado para C7H? N202, 159.11; encontrado, 159.0. 1H-RMN (CD3OD; sal TFA): d (ppm) 4.4 (quin, 1H) , 4.1 (q, 1H) , 3.5-3.4 (m, 2H) , 3.3-3.2 ( , 2H) , 2.3 (m, ÍH) , 2.0 (m, ÍH) , 1.3 (d, 3H) . Los derivados de N3-alcanosulfonilo de (3R)- aminopirrolidina se obtuvieron al tratar N1-Boc-(3R)- aminopirrolidina con cloruro de propionilsulfonilo o cloruro de ciclohexilmetilsulfonilo (i-Pr2NEt, CH2C12, 0°C), y desproteger el grupo N-Boc (CF3C02H, CH2C12) . La 3- (N-Acetil-N-metilamido) piperidina se preparó a partir del éster de t-butilo del ácido N3-Cbz protegido 3-amino-piperidina-1-carboxílico (De Costa, B., et al. J. Med. Chem. 1992, 35, 4334-43) después de cuatro etapas sintéticas: i) Mel, n-BuLi, THF,-78°c a TA; ii) H2 (1 atm), Pd/C 10%, EtOH; iii) AcCl, i-Pr2NEt, CH2C12; iv) CF3C02H, CH2C12. m/z: [M+H]+ calculado para C8H?6N20: 157.13; encontrado, 157.2. XH-RMN (CD30D; sal TFA): d (ppm) 4.6 (m, 1H) , 3.3 (m, ÍH) , 3.2 (m, ÍH), 3.0 (m, ÍH) , 2.9 (s, 3H) , 2.8 (m, ÍH) , 2.0 (s, 3H) , 1.9-1.7 (m, 4H) . La 3- (N-Acetil-amido) piperidina se preparó a partir de éster de tert-butilo del ácido 3-amino-piperidina-l-carboxílico después de N-acetilación y desprotección del grupo N-Boc: i) AcCl, i-Pr2NEt, CH2C12; ii) CF3C02H, CH2C12. 1H-RMN (CD3OD; sal TFA): d (ppm)' 3.9 (m, ÍH) , 3.3 (dd, ÍH) , 3.2 ( , ÍH)", 2.9 (dt, ÍH) , 2.75 (dt, 1H) , 2.0-1.9 (m, 2H) , 1.9 (s, 3H) , 1.8-1.4 (m, 2H) . Los derivados de N3-alcanosulfonilo de 3-aminopiperidina se sintetizaron al reaccionar las formas quiral o racémica de éster de tert-butilo del ácido 3-amino-piperidina-l- carboxílico con el cloruro de alcanosulfonilo respectivo (i- Pr2NEt, CH2C12) y desproteger el grupo N-Boc (CF3C02H, CH2C12) . (3S) -3- (etanosulfonilamido) piperidina: ^?-RMN (CD30D) : d (ppm) 1.29 (t, 3H, Ji = 7.4 Hz) , 1.50-1.80 ( , 2H) , 1.90-2.10 ( , -2H) , 2.89 (m, 2H) , 3.05 (q, 2H, Jx = 7.4 Hz) , 3.27 (m, 2H) , 3.40 (d de d(br), ÍH) , 3.52 (m, ÍH) . La 3S-Metilsulfonilmetanosulfonilamido-piperidina: 1H-RMN (CD3OD) : d (ppm) 2.13-2.30 (m, 2H) , 2.40-2.57 (m, 2H) , 2.98 (m, 2H) , 3.15 (s, 3H) , 3.21 (m, 2H) , 3.30 (br d, 1H) , 3.74 (m, ÍH) . La 3- (Metilamino) -1-acetilpirrolidina se preparó a partir de 3- (metilamino) -1-bencilpirrolidina (TCI America) después de cuatro etapas: i) (Boc)20, MeOH, ta; ii) H2 (1 atm), Pd/C 10%, EtOH; iii) AcCl, i-Pr2NEt, CH2C12; iv) CF3C02H, CH2C12. (m/z): [M+H]+ calculado para C7H?4N20: 143.12; encontrado, 143.0. La 3- (Metilamino) -1- (metanosulfonil) pirrolidina se preparó a partir de 3- (metilamino) -1-bencilpirrolidina después de cuatro etapas: i) (Boc)20, MeOH, ta; ii) H2 (1 atm), Pd/C 10%, EtOH; iii) CH3S02C1, i-Pr2NEt, CH2C12; iv) CF3C02H, CH2C12. (m/z) : [M+H]+ calculado para C6H?4N202S : 179.08; encontrado, 179.2. La 3R-Metilamino-l- (metanosulfonil) pirrolidina se preparó en una forma similar de la (3R) - (metilamino) -1-bencilpirrolidina. Los derivados de tetrahidro-3-tiofenamina-1, 1-dióxido se prepararon siguiendo el protocolo de Loev, B. J. Org. Chem. 1961, 26, 4394-9 al reaccionar 3-sulfoleno con un requisito de amina primaria en metanol (cat. KOH, ta) . N-Metil-3- tetrahidrotiofeneamina-l,l-dióxido (sal TFA): 1H-RMN (DMSO- de): d (ppm) 9.4 (br s, 2H) , 4.0-3.8 (quin, 1H) , 3.6-3.5 (dd, 1H) , 3.4-3.3 (m, ÍH) , 3.2-3.1 (m, 2H) , 2.5 (s, 3H) , 2.4 (m, 1H) , 2.1 ( , ÍH) . N-2-(l-hidroxi)etil-3-tetrahidrotiofeneamina-1, 1-dióxido: (m/z): [M+H]+ calculado para C6H?3N03S: 180.07; encontrado, 180.2. N-Metil-tetrahidro-2H-tiopiran-4-amina-l, 1-dióxido se preparó a partir de tetrahidro-4H-tiopiran-4-ona: i) MeNH2, NaBH4; ii) (Boc)20, MeOH; iii) mCPBA, CH2C12, 0°C; iv) CF3C02H, CH2C12. (m/z): [M+H]+ calculado para C6H?3N02S 164.07; encontrado, 164.9. 1H-RMN (CD30D; sal TFA): d (ppm) 3.4-3.1 (m, 5H) , 2.7 (s, 3H) , 2.4 (br d, 2H) , 2.1 (br m, 2H) . La l-Acetil-3- (metilamino) piperidina se preparó a partir de 3-metilamino-piperidina N3-Cbz protegida: i) AcCl, i-Pr2NEt, CH2C12; ii) H2 (1 atm), Pd/C 10%, EtOH. XH-RMN (CD30D) : d (ppm) 4.0 ( , ÍH) , 3.6 (m, 1H) , 3.4-3.2 (m, 2H) , 3.0 (m, ÍH) , 2.6 (s, 3H) , 2.1 (s, 3H) , 1.8-1.6 (m, 4H) .

La 1- (Metanosulfonil) -3- (metilamino) piperidina se preparó a partir de 3-metilamino-piperidina N3-Cbz protegida: i) CH3S02C1, i-Pr2NEt, CH2C12; ii) H2 (1 atm), Pd/C 10%, EtOH. (m/z): [M+H]+ calculado para C7H?6N202S 193.10; encontrado, 193.0. 1H-RMN (DMSO-d6; sal TFA): d (ppm) 3.4 (dd, 1H) , 3.2 (m, 2H) , 3.10 (s, 3H) , 3.0-2.9 (m, 2H) , 2.8 (s, 3H) , 1.85- 1.75 (m, 2H) , 1.6-1.4 ( , 2H) .

Ejemplo 1: Síntesis de { (1S,3R,5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l- il)etil] -8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1- isopropil-lH-indazól-3-carboxílico a. Preparación de 8-bencil-8-azabiciclo [3.2.1] octan-3-ona El ácido clorhídrico concentrado (30 mL) se agregó a una solución heterogénea de 2,5-dimetoxi tetrahidrofurano (82.2 g, 0.622 mol) en agua (170 mL) durante la agitación. En un matraz separador enfriado a 0°C (baño de hielo)," ácido clorhídrico concentrado (92 mL) se agregó lentamente a una solución de amina de bencilo (100 g, 0.933 mol) en agua (350 mL) . La solución 2, 5-dimetoxitetrahidrofurano se agitó durante aproximadamente 20 min, se diluyó con agua (250 mL) , y luego la solución de amina de bencilo se agregó, seguida por la adición de una solución de ácido 1,3-acetonadicarboxílico (100 g, 0.684 mol) en agua (400 L) y luego la adición de fosfato de hidrógeno sodio (44 g, 0.31 mol) en agua (200 mL) . El pH se ajustó desde pH 1 hasta pH ~ 4.5 usando NaOH 40%. La solución amarilla turbia y pálida resultante se agitó durante la noche. La solución se acidificó luego a un pH 3 desde pH 7.5 usando ácido clorhídrico 50%, se calentó a 85°C y se agitó durante 2 horas. La solución se enfrió a temperatura ambiente, se basificó a un pH 12 usando NaOH 40%, y se extrajo con diclorometano (3 x 500 mL) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) , filtraron y concentraron bajo presión reducida para producir el intermediario del título crudo como un aceite café viscoso (52 g) . A una solución del intermediario crudo en metanol (1000 mL) se agregó dicarbonato de di-tert-butilo (74.6 g, 0.342 mol) a 0°C. La solución se permitió para entibiar a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. El metanol se removió bajo presión reducida y el aceite resultante se disolvió en diclorometano (1000 mL) . El intermediario se extrajo en H3P04 1 M (1000 mL) y se lavó con diclorometano (3 x 250 mL) . La capa acuosa se basificó a un pH 12 usando NaOH acuoso, y se extrajo con diclorometano (3 x 500 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgS0 ) , filtraron y concentraron bajo presión reducida para producir el intermediario del título como un aceite café ligero, viscoso (54 g) . 2H-RMN (CDC13) d (ppm) 7.5-7.2 ( , 5H, C6H5) , 3.7 (s, 2H, CH2Ph) , 3.45 (amplio s, 2H, CH-NBn) , 2.7-2.6 (dd, 2H, CH2CO) , 2.2-2.1 (dd, 2H, CH2CO) , 2.1-2.0 (m, 2H, CH2CH2) , 1.6 (m, 2H, CH2CH2) . (m/z): [M+H] + calculado para C?4H?7NO 216.14; encontrado, 216.0. b. Preparación de éster de tert-butilo del ácido 3-oxo-8- azabiciclo [3.2.1] octanó-8-carboxílico A una solución de 8-bencil-8-azabiciclo [3.2.1] octan-3- ona (75 g, 0.348 mol) en EtOAc (300 mL) se agregó una solución de dicarbonato de di-tert-butilo (83.6 g, 0.383 mol, 1.1 eq) en EtOAc (300 mL) . La solución resultante y enjuagada (100 mL EtOAc) se agregó a un recipiente de hidrogenación Parr 1 L que contiene 23 g de hidróxido de paladio (20% en peso Pd, base seca, en carbono, ~50% húmedo con agua; por ejemplo, catalizador Pearlman's) bajo una corriente de nitrógeno. El recipiente de reacción se desgasificó (vacío alternativo y N2 cinco veces) y se presurizó a 60 psi (4.218 kg/cm2) de has H2. La solución de reacción se agitó durante dos días y se recargó con H2 como sea necesario para mantener la presión H2 a 60 psi (4.218 kg/cm2) hasta que la reacción se' completó como se observó por cromatografía de capa delgada de sílice. La solución negra se filtró luego a través de una almohadilla de Celite® y se concentró bajo presión reducida hasta producir el intermediario del título cuantitativamente como un aceite de amarillo a anaranjado, viscoso (51 g) . Esto se usó en la siguiente etapa sin tratamiento adicional. """H RMN (CDCI3) d (ppm) 4.5 (amplio, 2H, CH-NBoc) , 2.7 (amplio, 2H, CH2C0) , 2.4-2.3 (dd, 2H, CH2CH2) , 2.1 (amplio m, 2H, CH2CO) , 1.7-1.6 (dd, 2H, CH2CH2) , 1.5 (s, 9H, (CH3) 3COCON) ) . c. Preparación de éster de tert-butilo del ácido (1S,3R,5R)- 3-amino-8-azabiciclo [3.2.1] octano-8-carboxílico A una solución del producto de la etapa previa (75.4 g, 0.335' mol) en metanol (1 L) se agregó formato de amonio (422.5 g, 6.7 mol), agua (115 mL) y 65 g de paladio en carbono activado (10% en base seca, ~50% húmedo con agua; tipo Degussa El 01NE/W) bajo una corriente de N2 durante la agitación por medio de agitador mecánico. Después de 24 y 48 horas, porciones adicionales de formato de amonio (132g, 2.1 mol) se agregaron cada vez. Una vez que la progresión de reacción terminó, como se observó por anal. CLAR, Celite® (>500g) se agregó y la suspensión gruesa resultante se filtró y luego el sólido colectado se enjuagó con metanol (~500 mL) .

Los filtrados se combinaron y se concentraron bajo presión reducida hasta que todo el metanol se ha removido. La solución bifásica, turbia resultante se diluyó luego con ácido fosfórico ÍM a un volumen final de ~1.5 hasta 2.0 L a un pH 2 y se lavó con diclorometano (3 x 700 mL) . La capa acuosa se basificó a un pH 12 usando NaOH acuoso 40%, y se extrajo con diclorometano (3 x 700 mL) . Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04, filtraron, y concentraron por evaporación rotatoria, luego se deja a alto vacío 52 g (70%) del intermediario del título, comúnmente N-Boc-endo-3- aminotropano, como un sólido de blanco a amarillo pálido. La relación del isómero de endo a exo amina del producto fue >99 basado en análisis 1H-RMN (>96% de pureza por CLAR analítico). XH RMN (CDC13) d (ppm) 4.2-4.0 (amplio d, 2H, CHNBoc) , 3.25 (t, ÍH, CHNH2) , 2.1-2.05' ( , 4H) , 1.9 (m, 2H) , 1.4 (s, 9H, "(CH3)3OCON) , 1.2-1.1 (amplio, 2H) . (m/z): [M+H] + calculado para C?2H22N202 227.18; encontrado, 227.2. CLAR analítico (método isocrático; 2:98 (A:B) hasta 90:10 (A:B) durante 5 min): tiempo de retención = 2.14 min. d. Preparación de ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico Al ácido indazol-3-carboxílico (40 g, 247 mmol) suspendido en metanol (700 mL) se agregó H2S0 concentrado (10 mL) lentamente durante la agitación de la mezcla. La mezcla se agitó y se puso a reflujo a 80°C durante 24 h. La mezcla se enfrió, filtró, y se concentró bajo presión reducida para proporcionar un sólido amarillo pálido. El sólido se suspendió en agua (700 mL) , molido a polvo fino, se colectó por filtración, y se enjuagó con agua (~400 mL) . El producto se suspendió en tolueno, y se evaporó hasta secarse bajo presión reducida, proporcionando éster de metilo del ácido indazol-3-carboxílico como un sólido amarillo pálido (45 g, >95% puro). (m/z): [M+H] + calculado para C9H8N202 177.07; encontrado, 177.0. 2H-RMN (CD30D, 300 MHz): d (ppm) 8.0 (1H, d), 7.5 (ÍH, d) , 7.4 (ÍH, t) , 7.2 (ÍH, t) , 3.9 (3H, s) . A una solución de éster de metilo del ácido indazol-3- carboxílico (40.7 g, 231 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (700 L) enfriado en un baño de hielo se agregó lentamente tert-butóxido de potasio sólido (28.3 g, 252 mmol). La mezcla se agitó a la misma temperatura durante 1 hr posterior a la adición de 2-yododopropano (34.4 mL, 367 mmol). La mezcla final se agitó durante 12 h a temperatura ambiente, y se puso a reflujo durante 12 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla sé filtró, y el sólido colectado se enjuagó con tetrahidrofurano (100 mL) . Los filtrados se combinaron, y se concentraron hasta secarse bajo presión reducida, proporcionando éster de metilo del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico crudo (49.7 g) como un aceite amarillo pálido. El material crudo se purificó por cromatografía de gel de sílice instantánea eluyendo con hexano/acetato de etilo (9/1 hasta 3/1) hasta producir éster de metilo del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico (43 g, 197 mmol, >99% puro). ^-RMN (CD3OD, 300 MHz): d (ppm) 8.1-8.0 (ÍH, d) , 7.6 (ÍH, d) , 7.4 (1H, t) , 7.2 (1H, t) , 5.0 (ÍH, quin) , 3.9 (s, 3H) , 1.5 (6H, d) . A una solución del éster de metilo disuelto en tetrahidrofurano (400 mL) se agregó NaOH 1M (400 mL) . La mezcla se agitó durante 24 h a temperatura ambiente. La reacción se terminó al lavar con acetato de etilo (2 x 400 mL) , guardando la capa acuosa. La capa acuosa se acidificó lentamente al agregar HCl concentrado (~40 mL) en un baño de hielo, que lleva a la separación de un producto aceitoso amarillo pálido. El producto se extrajo con acetato de etilo (1000 mL) , y la capa orgánica se secó sobre MgS04 y se evaporó bajo presión reducida hasta producir el intermediario del título como un sólido de amarillo pálido a blanco (34 g, >98% puro) , que se purificó además por cristalización de acetato de etilo para proporcionar el intermediario del título como agujas incoloras, (m/z): [M+Na]+ calculado para CnH12N202 226.07; encontrado, 226.6. aH-RMN (CD3OD, 300 MHz):): d (ppm) 8.1-8.0 (1H, d) , 7.6 (ÍH, d) , 7.4 (ÍH, t) , 7.2 (ÍH, t), 5.0 (ÍH, quin) , 1.5 (6H, d) . e. Preparación de éster de tert-butilo del ácido (1S,3R, 5R) -3- [l-isopropil-lH-indazol-3-carbonil) amino] -8-azabiciclo [3.2.1] octano-8-carboxílico Una suspensión de ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico (56.35 g; 0.276 mol) en tolueno (500 mL) se agitó y se calentó durante 5 min posteriores a la adición de cloruro de tionilo (30.2 mL; 0.414 mol). Después del calentamiento a 100 °C durante 15 min, la mezcla se vuelve una solución homogénea, que continua siendo agitada a la misma temperatura durante 90 min adicionales. En un matraz de reacción separado, é'ster de tert-butilo del ácido (1S,3R, 5R) - 3-amino-8-azabiciclo [3.2.1] octano-8-carboxílico, se preparó como en la etapa c, (62.43 g; 0.276 mol) se disolvió en 250 mL de tolueno y siguió por adición de NaOH (66.3 g) se disolvió en 250 mL de agua. Esta mezcla bifásica se enfrió en un baño de hielo. La solución de cloruro ácido indazol preparada anteriormente se enfrió a temperatura ambiente, y se agregó durante 15 min a la solución bifásica, que se agitó vigorosamente en un baño de hielo. Después de agitar durante 1.5 h, la mezcla de reacción se transfirió a un embudo de separación. Primero, la capa acuosa se separó de la capa de tolueno (guardado) , y se extrajo con EtOAc (2 x 500 mL) . La capa de tolueno se concentró bajo presión reducida, y el residuo obtenido se disolvió en el extracto orgánico (1 L; EtOAc) . La solución se lavó con H3P04 1 M (400 mL) , NaHC03 saturado (400 L) , y luego solución de salmuera (400 mL) . Después de secar sobre MgS0 , la solución orgánica se evaporó hasta secarse bajo presión reducida, proporcionando 119.2 g del intermediario del título. 1H-RMN (DMSO-d6) : d (ppm) 1.41 (s, 9H) , 1.51 (d, 6H) , 1.82 ( , 2H) , 1.97 (bs, 4H) , 2.09 (m, 2H) , 4.10 ( , 3H) , 5.10 (sept, 1H) , 7.23 (t, ÍH) , 7.42 (t, 1H) , 7.79 (d, ÍH) , 7.82 (d, ÍH) , 8.18 (d, ÍH) . (m/z): [M+H] + calculado para C23H32N?3, 413.26; encontrado, 413.1. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 2-95%/H20 durante 6 min) = 4.85 min . f. Preparación de { (ÍS, 3R, 5R) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3- il lamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico El producto para la etapa previa se solubilizó en diclorometano (200 mL) , se enfrió en un baño de hielo, y luego se mezcla con 200 mL de ácido trifluoroacético. La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Esto se agregó luego gota a gota a éter de etilo (2 L) en un matraz mientras se agita, que proporciona el intermediario del título como su sal mono (ácido trifluoroacético) (102.7 g después de secar, 87% de rendimiento durante dos etapas) . ""?-RMN (DMSO-de) : d (ppm) 1.54 (d, 6H), 2.05 ( , 2H) , 2.24 (m,"6H), 4.03 (s, 2H) , 4.12 (q, ÍH) , 5.09 (sept, ÍH) , 7.28 (t, ÍH) , 7.45 (t, ÍH) , 7.81 (d, ÍH) , 8.00 (d, 1H) , 8.11 (d, ÍH) , 8.54 (bd, 2H) . (m/z): [M+H] + calculado para C?8H24N40, 313 . 20 ; encontrado , 313 . 1.

Tiempo de retención (CLAR anal . : MeCN 2-95%/H20 durante 6 min) = 2 . 65 min . g. Preparación de { (ÍS, 3R, 5R) -8- (2, 2-dimetoxietil) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico A una solución de { (ÍS, 3R, 5R) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico (52.7 g; 0.124 mol) se disolvió en 500 mL de diclorometano se agregó diisopropiletilamina (43.1 mL) y dimetoxi acetaldehído en éter de metilo de tert-butilo (45% conc; 44.5 mL, 0.173 mmol) . Después de agitar 35 min a temperatura ambiente, triacetoxiborohidrufo de sodio (36. 7 g; 0.173 mol) se agregó a esta mezcla. La reacción se apagó después de 90 min al agregar lentamente agua (50 mL) y solución NaHC03 saturada (100 mL) en un baño de hielo. La mezcla se diluyó con 500 mL de diclorometano, y se transfirió a un embudo de separación. La capa orgánica se colectó, y se lavó con NaHCÜ3 saturado (250 L) , y solución de salmuera (350 mL) . Esto se secó sobre MgS0 , y se evaporó bajo presión reducida, proporcionando el intermediario del título (58.8 g) . 1H-R N (CDC13) : d (ppm) 1.60 (d, 6H) , 1.77 (m, 2H) , 1.96-2.09 (m, 4H) , 2.29 ( , 2H) , 2.55 (m, 2H) , 3.33 (m, 2H) , 3.41 (s, 6H) , 4.33 (q, 1H) , 4.47 (m, 1H) , 4.87 (sept, 1H) , 7.26 (t, ÍH) , 7.37-7.46 ( , 2H) , 7.56 (d, ÍH) , 8.36 (d, ÍH) . (m/z): [M+H]+ calculado para C22H32N03 401.26; encontrado, 401.3. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 2-50%/H2O durante 6 min) = 4.20 min. h. Preparación de { (1S, 3R, 5R) -8- (2, 2-dihidroxietil) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico El producto de la etapa previa (55.2 g) se suspendió en 500 mL de ácido clorhídrico 6 M y se calentó a 70 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a 0°C, y se diluyó con diclorometano (500 mL) posterior a la basificación de la capa acuosa por adición lenta de NaOH 6M (800 mL) . Esto se mezcló además con 800 mL de diclorometano, y se transfirió a un embudo de separación. La capa orgánica se colectó, se lavó con salmuera, se secó sobre MgS04, y se evaporó hasta secarse proporcionando el intermediario del título (45.1 g) . (m/z): [M+H]+ calculado para C2oH28N4?3, 373.22; encontrado, 373.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 2-50%/H2O durante 6 min) = 3.77 min. i. Síntesis { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetil-piperazin-l-il) etil] - 8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico, alternativamente, N- [ (3-endo) -8- [2- (4-acetilpiperazin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il] -1- (1-metiletil ) -lH-indazol-3-carboxamida A un matraz que contiene 450 mL de diclorometano se agregó 1-acetilpiperazina (19.3 g; 0.151 mol), triacetoxiborohidruro de sodio (34.4 g) . Esto se agitó durante 5 min posterior a la adición del producto de la etapa previa (45.1 g) . La mezcla final se agitó durante 1 h, tiempo en el cual la reacción se completó basada en CLAR y análisis espectrométrico de masa. Agua (200 mL) se agregó lentamente y la mezcla se diluyó con 600 mL de diclorometano, y se agitó en un embudo antes de colectar la capa orgánica. Esto se lavó con NaOH ÍM (400 mL) y salmuera (500 L) . Secando sobre MgS04, y la evaporación proporcionó el compuesto del título como un sólido incoloro (47.6 g) . El producto crudo se purificó por cristalización de etanol como la sal HCl (>30 g; pureza >98%) . ^-RMN (DMSO-d6; base libre): d (ppm) 1.52 (d, 6H) , 1.69 (m, 2H) , 1.83 (m, 2H) , 1.97 (s, 3H) , 1.92-2.10 (m, 4H) , 2.33 (t, 2H) , 2.42 (m, 6H) , 2.50 (m, 2H) , 3.21 (bs, 2H) , 3.38 (m, 4H) , 4.09 (q, ÍH) , 5.07 (sept, ÍH) , 7.26 (t, ÍH) , 7.43 (t, 1H) , 7.79 (d, 1H) , 8.12 (d, ÍH) . (m/z): [M+H] + calculado para C26H38 602, 467.31; encontrado, 467.5. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 2-50%/H2O durante 6 min) = 3.52 min.

Ejemplo 2: Síntesis de { (1S,3R,5R) -8- [2- (4- (tetrahidrof rano-2-carbonil)piperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-11}amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico A una solución de bromohidrato N-[2-tetrahidrofuroil] piperazina (40 mg, 0.15 mmol) y N,N-diisopropiletilamina (12 µL, 0.3 mmol) en diclorometano (1.5 mL) se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (64 mg, 0.3 mmol), y luego { (1S, 3R, 5R) -8- (2, 2-dihidroxietil) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico (sal HCl) (39 mg, 0.1 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. Después de la concentración bajo presión reducida, la mezcla de reacción se disolvió en ácido acético acuoso 50%, y se purificó por CLAR preparativa para proporcionar la sal del ácido trifluoroacético del compuesto del título (97% pureza) . (m/z): [M+H]+ calculado para C29H42N603, 523.34; encontrado 523.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-65%/H20 durante 5 min) = 2.7 min.

Ejemplos 3-20 Usando procesos similares al del Ejemplo 2, excepto remplazando el bromohidrato de N-[2-tetráhidrofuroil] piperazina con la amina secuendaria apropiada, los compuestos de los Ejemplos 3-20 se prepararon.

Ejemplo 3 { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (1, l-dioxo-l?6-tiomorfolin-4-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C24H35N5?3S, 474.25; encontrado 474.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.20 min.

Ejemplo 4 { (1S, 3R, 5R) -8- [2- (4-metanosulfonilpiperazin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C25H38N603S, 503.28; encontrado 503.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-65%/H20 durante 4 min) = 2.12 min.

Ejemplo 5 { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-ciclohexilmetano sulfonilpiperazin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3- il lamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C31H48 6?3S, 585.35; encontrado 585.4. Tiempo de retención (CLAR anal. : MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.67 min.

Ejemplo 6 { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-metanosulf onil metanosulf onilpiperazin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3- il lamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C25H4oN6?5S2, 581.26; encontrado 581.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.22 min.

Ejemplo 7 { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (3- (acetil-metilamino) pirrolidin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (solamente) : [M+H]+ calculado para C27H4oN602, 481.32; encontrado 481.3. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.07 min.

Ejemplo 8 { (1S, 3R, 5R) -8- [2- (3- (acetil-amino) pirrolidin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C26H38 6?2, 467.31; encontrado 467.4. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 1.89 min.

Ejemplo 9 { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (R) -3- (acetil-amino) pirrolidin-1- il) etil] -8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C26H38N602, 467.31; encontrado 467.4. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.04 min.

Ejemplo 10 { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (S) -3- (acetil-amino) pirrolidin- 1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C26H38N602, 467.31; encontrado 467.4. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.07 min.

Ejemplo 11 ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [3- ( (S) -2-hidroxipropionilamino) pirrolidin-1-il] etil } -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C27H40N6?3, 497.32; encontrado 497.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCNO 5-65% durante 5 min) = 2.07 min.

Ejemplo 12 ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [ (3S, 4S) -3- (acetilmetilamino) -4-hidroxipirrolidin-1-il] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C27H40N6O3, 497.32; encontrado 497.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-65%/H20 durante 5 min) = 2. 15 min.

Ejemplo 13 { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (R) -3- etanosulfonilaminopirrolidin-1-il) etil] -8- azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH- indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C26H4oN6?3S, 517.30; encontrado 517.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.12 min.

Ejemplo 14 { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (R) -3-ciclohexilmetano sulfonilaminopirrolidin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3- il lamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C3iH48N6?3S, 585.36; encontrado 585.4. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.52 min.

Ejemplo 15 ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [3- (acetil-metilamino) piperidin-1-il] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C28H42N602, 495.34; encontrado 495.4. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 1.94 min.

Ejemplo 16 { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (3-acetilaminopiperidin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C27H0N6O2, 481.33; encontrado 481.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.01 min.

Ejemplo 17 { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (3-metanosulfonilaminopiperidin- 1-il) etil] -8-azabíciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H] + calculado para C26H40N6?3S, 517.30; encontrado 517.4. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 1.97 min.

Ejemplo 18 { (1S, 3R, 5R) -8- [2- ( (S) -3-metanosulfonilaminopiperidin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C26H4oN603S, 517.30; encontrado 517.4. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 1.99 min.

Ejemplo 19 { (1S, 3R, 5R) -8- [2- ( (S ) -3-etanosulf onilaminopiperidin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C27H 2N603S, 531.31; encontrado 531.4. Tiempo de retención (CLAR anal. : MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.04 min.

Ejemplo 20 { (1S, 3R, 5R) -8- [2- ( (S) -3-metanosulfonilmetano sulfonilaminopiperidin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3- iljamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C27H2N6?5S2, 595.27; encontrado 595.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.07 min.

Ejemplo 21: Síntesis de ( (1S,3R,5R) -8-{2- [ (1- acetilpirrolidin-3-il)metilamino] etil} -8-azabiciclo [3.2. l]oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3- carboxílico A una solución de 3- (metilamino) -1-acetilpirrolidina (43 mg, 0.3 mmol) y N, N-diisopropiletilamina (12 µL, 0.3 mmol) en diclorometano (1.5 mL) se le agregó triacetoxiborohidruro de sodio (128 mg, 0.6 mmol), y luego { (1S, 3R, 5R) -8- (2, 2-dihidroxietil) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico (sal HCl) (78 mg, 0.2 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. Después de la concentration bajo presión reducida, la mezcla de reacción se disolvió en ácido acético acuoso 50%, y se purificó por CLAR preparativa para proporcionar la sal del ácido trifluoroacético del compuesto del título (56 mg, 99% pureza). (m/z): [M+H]+ calculado para C27H40N6O2, 481.33; encontrado 481.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: 5-65% MeCN/H20 durante 5 min) = 2.00 min.

Ejemplos 22-30 Usando procesos similares al del Ejemplo 21, excepto remplazando la 3- (metilamino) -1-acetilpirrolidina con la amina secuendaria apropiada, los compuestos de los Ejemplos 22-30 se prepararon.

Ejemplo 22 ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [ ( (R) -l-acetilpirrolidin-3- il) metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C2H40N6O2, 481.33; encontrado 481.4. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 10-50%/H2O durante 5 min) = 2.52 min.

Ejemplo 23 (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [ ( (S) -l-acetilpirrolidin-3-il)metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C2H40N6?2, 481.33; encontrado 481.4. Tiempo de retención (CLAR anal.: 10-50% MeCN/H20 durante 5 min) = 2.52 min.

Ejemplo 24 ( (1S, 3R, 5R) -8-{2- [ (1-metanosulfonilpirrolidin-3-il) metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C26H40N6?3S, 517.30; encontrado 517.2. Tiempo de retención (CLAR anal.: MeCN 5-75%/H20 durante 5 min) = 2.04 mm, Ejemplo 25 ( (1S, 3R, 5R) -8-{2- [ ( (R) -1-metanosulfonilpirrolidin- 3-il)metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico (oral) : [M+H]+ calculado para C26H4o 6?3S, 517.30; encontrado 517.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-65% MeCN/H20 durante 5 min) = 2.20 min.

Ejemplo 26 ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [ (1, 1-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il) metilamino] etill-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C25H37N503S, 488.27; encontrado 488.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-75% MeCN/H20 durante 5 min) = 2.22 min.

Ejemplo 27 ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [ (1, 1-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il) - (2-hidroxietil) amino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C26H39N504S, 518.28; encontrado 518.2. Tiempo de retención (análisis CLAR : 5-65% MeCN/H20 durante 5 min) = 2.25 min.

Ejemplo 28 ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [ (l-acetil-piperidin-3-il) metilamino] etil } -8-azabiciclo [3.2. 1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H] + calculado para C26H38N602, 495 . 34 ; encontrado 495 . 4 . Tiempo de retención (análisis CLAR : 5-75% MeCN/H20 durante 5 min) = 1. 95 min.

Ejemplo 29 ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [ (1, 1-dioxo-hexahidro-l?6-tiopiran-4-il) metilamino] etil } 8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C26H39N5?3S, 502.29 encontrado 502.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-65% MeCN/H20 durante 5 min) = 2.12 min.

Ejemplo 30 ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [ (l-metanosulfonilpiperidin-3-il)metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C27H42N6?3S, 531.31; encontrado 531.4. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-75% MeCN/H20 durante 5 min) = 2.07 min.

Ejemplo 31: Síntesis de { (1S,3R,5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 5-fluoro-l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico a. Preparación del ácido 5-fluoro-l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico El éster de metilo del ácido 5-Fluoro-lH-indazol-3-carboxílico se preparó de conformidad al protocolo descrito en (Buu-Hoi, N. P., et al. J. Hetereocyclic Chem. 1964, 1, 239-41. aH-RMN (DMSO-d6) : d (ppm) 7.8 (dd, 2H) , 7.35 (dt, ÍH) , 3.8 (s, 3H) . El metil éster se alquilo a N1 con yoduro de isopropilo en presencia de tert-butóxido de potasio en reflujo THF. XH-RMN (CDC13) : d (ppm) 7.8 (dd, 1H) , 7.6 (dd, 1H) , 7.1 (dt, ÍH) , 4. 8 (hept, ÍH) , 1.6 (d, 6H) . El éster de metil isopropilo luego se hidrolizó (1 M NaOH/THF, TA) para proporcionar el intermediario del título. b. Preparación de { (ÍS, 3R, 5R) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il } amida del ácido 5-fluoro-l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico El intermediario del título se preparó de conformidad al procedimiento del ejemplo 1 partes e y f, usando el intermediario de la etapa previa en lugar de ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico. ''"H-RMN (DMSO-d6) : d (ppm) 7.9 (br, ÍH) , 7.7 (dd, ÍH) , 7.6 (dd, ÍH) , 7.2 (dt, ÍH) , 4.9 (m, ÍH) , 4.2 (br, 1H) , 4.0 (br, 2H) , 2.3-2. 1 (br m, 8H) , 1.5 (d, 6H) . (m/z): [M+H]+ calculado para C?8H23FN40, 331.19; encontrado, 331.4. Tiempo de retención (análisis CLAR: 10-40% MeCN/H20 durante 6 min) = 3.43 min. c. Preparación de { (ÍS, 3R, 5R) -8- (2, 2-dimetoxietil) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 5-fluoro-l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico El producto de la etapa previa se hace reaccionar con dimetoxi acetaldehído de conformidad al proceso del ejemplo 1 etapa g para proporcionar el intermediario del título, (m/z) : [M+H]+ calculado para C22H3?FN403 419.25; encontrado, 419.3. d. Preparación de { (ÍS, 3R, 5R) -8- (2, 2-dihidroxietil) -8-aza-biciclo [3.2. l]-oct-3-il lamida del ácido 5-fluoro-l-isopropil- lH-indazol-3-carboxilico El intermediario de la etapa previa (1.0 g) se suspendió en 10 mL de ácido clorhídrico 6M y se calentó a 70 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió, y se evaporó .bajo presión reducida hasta secarse para proporcionar la sal del ácido clorhídrico del intermediario del título, (m/z): [M+H] + calculado para C20H27FN4O3, 391.21; encontrado, 391.4. e_. Síntesis de { (1S, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 5-fluoro-1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico A un matraz que contiene 40 mL de diclorometano se agregó 1-acetilpiperazina (613 mg; 4.78 mmol) y triacetoxiborohidruro de sodio (1.01 g) . Esto se agitó durante 5 min previo a la adición del producto de la etapa previa (~1 g) . La mezcla final se agitó durante 1 h, tiempo al cual la reacción se completó basada en CLAR y análisis espectrométrico de masa. Se agregó agua (20 L) lentamente y la mezcla se diluyó con 300 mL de diclorometano, y se agitó en un embudo antes de colectarse la capa orgánica. Esto se lavó con NaOH 1M (100 mL) y salmuera (100 mL) . Se secó sobre MgS04, y se evaporó para proporcionar el compuesto del título el cual se purificó por CLAR preparativa para proporcionar 380 mg del producto puro con la sal TFA. 1H- RMN (DMSO-de; base libre): d (ppm) 8.0 (br, 1H) , 7.8 (dd, ÍH) , 7.6 (dd, ÍH) , 7.23 (dt, 1H) , 5.0 (hept, 1H) , 4.0-3.9 (br, 3H) , 3.5 (br, 2H) , 3.2-2.8 (br, 10H) , 2.2 (br m, 8H) , 1.9 (s, 3H) , 1.4 (d, 6H) . (m/z) : [M+H]+ calculado para C26H37FN602, 485.30; encontrado, 485.5. Tiempo de retención (análisis CLAR: 10-70% MeCN/H20 durante 6 min) = 2.28 min.

Ejemplo 32: Síntesis de { (1S,3R,5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il)etil] -8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida del ácido 1-propil-lH-indazol-3 -carboxilico a. Preparación de { (1S, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1H-indazol-3-carboxílico El intermediario del título se preparó de conformidad al procedimiento del ejemplo 1 usando ácido lH-indazol-3-carboxílico en lugar del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico en la etapa e. (m/z): [M+H]+ calculado para C23H32N602, 425.27; encontrado, 425.4.

Tiempo de retención (análisis CLAR : 10-40% MeCN/H20 durante 6 min) = 1.47 min. b. Síntesis alternativa . de { (1S, 3R, 5R) -8- [2- (4- acetilpiperazin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico A una solución de DMF anhidro (2 mL) que contiene la sal TFA del intermediario de la etapa previa (80 mg, 0.123 mmol) se agregó tert-butóxido de potasio (48 mg, 0.43 mmol) y yoduro de isopropilo. (37 µL, 0.368 mmol). La mezcla se agitó a 85 °C durante 12 h, y luego se evaporó hasta secarse, proporcionando el residuo café pálido, el cual se disolvió en 50% ácido acético acuoso y se fraccionó por CLAR preparativa para proporcionar el compuesto del título. (m/z): [M+H]+ calculado para ' C26H38N602, 467.31; obsd. 467.2 [M+H] +. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-65% MeCN/H20 durante 6 min) = 2.09 min. c. Síntesis de { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-propil-lH-indazol-3-carboxilico Se usó un proceso similar a aquel de la etapa b, excepto que se reemplazó el yoduro de isopropilo con yoduro de n-propilo, el compuesto del título se preparó. (m/z) : [M+H]+ calculado para C26H38N602, calculado 467.31; obsd. 467.4 [M+H]+. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-65% MeCN/H20 durante 6 min) = 2. 05 min.

Ejemplos 33-35 Se usó un proceso similar a aquel del ejemplo 32, excepto que se reemplazó el yoduro de isopropilo con el haluro de alquilo apropiado, los compuestos de los ejemplos 33-35 se prepararon.

Ejemplo 33 ( (ÍS, 3R, SR) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-butil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C27H40N6O2, 481.33; encontrado 481.4. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-65% MeCN/H20 durante 6 min) = 2.26 min.

Ejemplo 34 ( (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-ciclobutil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z): [M+H]+ calculado para C27H38N602, 479.31; encontrado 479.4. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-65% MeCN/H20 durante 6 min) = 2.20 min.

Ejemplo 35 ( (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-ciclopentil-lH-indazol-3-carboxílico; (m/z) : [M+H]+ calculado para C28H40N6O2, 493.33; encontrado 493.2. Tiempo de retención (análisis CLAR: 5-65% MeCN/H20 durante 6 min) = 2.34 min.

Ejemplos 36-40 Se usó un proceso similar para aquellos descritos arriba, los compuestos de los ejemplos 36-40 pueden prepararse.

Ejemplo 36 { (ÍS , 3R, 5R) -8- [2- ( (R) -3- (acetil-metilamino )pirrolidin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct- 3-il}amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3- carboxílico .

Ejemplo 37 { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (S) -3- (acetil-metilamino)pirrolidin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico.

Ejemplo 38 ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [ ( (S) -1-metanosulfonilpirrolidin-3-il)metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico .

Ejemplo 39 ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{ 2- [ (R) - (1, 1-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il) metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico .

Ejemplo 40 ( (1S, 3R, 5R) -8-{2- [ ( 6) - (1, 1-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il) metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico .

Ejemplo 41: Síntesis de clorohidrato de { (1S,3R,5R) -8- [2- (4- acetilpiperazin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2. l]oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico a. Preparación de éster de tert-butilo del ácido (1S,3R,5R)- 3- [l-isopropil-lH-indazol-3-carbonil) amino] -8- azabiciclo [3.2.1] octano-8-carboxílico Un matraz de fondo redondo de tres cuellos de 5L equipado con una barra de agitación magnética, un condensador a reflujo, un embudo de adición, una entrada de nitrógeno y un termómetro se cargó con ácido l-isopropil-lH-indazol-3- carboxílico (250 g, 1.224 mol, 1.1 eq) y 2.5 L de tolueno. La suspensión resultante se agitó y se calentó a 70-80 °C. A esta suspensión se agregó cloruro de tionilo (218.4 g, 1.836 mol, 1.65 eq) durante un periodo de 40 min. La mezcla se calentó a 90-100°C durante lh y se enfrió a 25°C. ün matraz de fondo redondo de tres cuellos de 12 L separado equipado con un agitador mecánico, un embudo de adición, una entrada de nitrógeno y un termómetro se cargó con 2.5 L de tolueno y 3 N NaOH (preparado a partir de diluir 356 g de 50% NaOH con agua hasta 1.48 L) , y éster de tert-butilo del ácido (1S, 3R, 5R) -3-amino-8-azabiciclo [3.2.1] octano-8-carboxílico (251.9 g, 1.113 mol, 1 eq) . La suspensión resultante se agitó a 23°C durante 10 minutos y se enfrió a 5°C. A esta suspensión se agregó la solución de cloruro ácido en tolueno durante un periodo de 90 minutos manteniendo la temperatura interna a ~5°C durante el periodo de adición. La mezcla se agitó durante 30 min. La reacción se calentó a 25°C; la capa acuosa se descartó (1. 58 L, pH>13) . La capa orgánica se lavó con 1 L de 20% en peso de salmuera; y la capa acuosa se descartó' (1.005 L, ~pH 8) . La capa orgánica se colectó (5.3 L) y se concentró a la mitad del volumen (-2.6 L) , y se usó en la siguiente etapa sin purificación. b. Preparación de { (1S , 3R, 5R) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct- 3-il } amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico Un matraz de fondo redondo de tres cuellos de 12L equipado con un agitador mecánico, un embudo de adición, una entrada de nitrógeno y un termómetro se cargó con el producto de la etapa previa. A esta solución se agregó ácido trifluoroacético (0.65 L) durante un periodo de 10 min. La mezcla resultante se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Se agregó agua (3.3 L) a la mezcla de reacción. La suspensión resultante se agitó a 23 °C durante 10 minutos y se permitió colocar para dar una mezcla de tres capas. Las dos capas superiores se descartaron y la capa del fondo (820 mL) se colectó, y se agregó a MTBE (6560 mL) durante un periodo de 90 min. La suspensión resultante se enfrió a 5°C y se agitó durante 1 h. La suspensión se filtró; la torta húmeda se lavó con MTBE (500 mL) , y se secó bajo presión reducida (80 mm Hg) durante 60 h para dar el intermediario del título (386 g, 81% rendimiento, 99.2 % de pureza por CLAR) como un sólido arenoso blanco opaco. c. Preparación de { (ÍS, 3R, 5R) -8- (2, 2-dimetoxietil) -8-aza-biciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH- indazol-3-carboxílico Un matraz de fondo redondo de tres cuellos de 3L equipado con un agitador magnético, una entrada de nitrógeno y un termómetro se cargó con el intermediario de la etapa previa (84 g, 0.197 mol), diclorometano (840 mL) , y triacetoxiborohidruro de sodio (62.6 g, 0.295 mol). La suspensión resultante se agitó durante 10 minutos, se enfrió a 10 °C y 60% en peso dimetoxiacetaldehído acuoso (51.3 g, 0.295 mol) se agregó. Esta solución se agitó durante 30 min, se calentó a 25°C, y se agitó durante 1 h. La mezcla se filtró a través de Celite, se lavó con diclorometano (150 mL) y luego con 5% en peso de solución de salmuera (400 g) . Las capas acuosas y orgánica se separaron y la capa orgánica se concentró hasta dar un aceite oscuro (~150 mL) , el cual se usó en la siguiente etapa sin purificación. d. Preparación de (ÍS, 3R, 5R) -8- (2, 2-dihidroxietil) -8-aza- biciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH- indazol-3-carboxílico Un matraz de fondo redondo de tres cuellos de 1L equipado con un agitador magnético, una entrada de nitrógeno y un termómetro se cargó con- el producto de la etapa previa y agua (250 mL) y se calentó a 50-55°C. A esta solución se agregó HCl 3N (82 mL, 0.985 mol) . La mezcla resultante se agitó a 75°C durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a 25°C y se neutralizo con 25% en peso de NaOH (159 g, 0.99 mol) hasta pH 3.51. Después de alrededor de 20 minutos, la capa inferior se colectó (~120 mL) para proporcionar el intermediario del título, el cual se usó en la siguiente etapa sin purificación. e. Síntesis de clorohidrato de { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il } amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico Un matraz de fondo redondo de tres cuellos de 3L equipado con un agitador magnético, una entrada de nitrógeno y un termómetro se cargó con triacetoxiborohidruro de sodio (84 g, 0.349 mol) y diclorometano (800 mL) . La mezcla resultante se agitó a 25°C y se cargó con 1-acetilpiperazina (51 g, 0.394 mol). El ensamble de adición se enjuagó con diclorometano (20 mL) . La mezcla se agitó durante 5 minutos y se cargó con el producto de la etapa previa (-120 mL) en 15 minutos manteniendo la temperatura interna a menos de 25 "C. La mezcla se agitó durante 15 minutos, se filtró a través de celite y se lavó con diclorometano (2 x 100 mL) . El filtrado se lavó con NaOH ÍN (500 mL) . Las capas se separaron y la capa orgánica inferior se colectó y se concentró a -150 L. El etanol absoluto (250 mL) se agregó y la mezcla se concentró a -200 L. A esta mezcla, etanol absoluto (800 mL) se agregó y la mezcla se calentó a 40°C. A esta mezcla, se agregó 3 N HCl (33 mL, 0.396 mol) en 3 min. La mezcla se agitó durante 10 minutos y empezó la cristalización. La suspensión resultante se agitó a 55 °C durante 2 h y se enfrió a 25°C. La mezcla se filtró a través de un papel filtro Whatman #2 y la torta húmeda se lavó con etanol absoluto (2 x 100 L) . El producto se secó bajo nitrógeno durante 30 minutos y luego bajo vacío a 40-50°C durante 24 h para proporcionar el compuesto del título (82 g) .

Ejemplo 42: Síntesis de dibromohidrato de { (1S,3R,5R) -8- [2-(4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico Un matraz de fondo redondo de tres cuellos de 500 mL equipado con un agitador magnético, una entrada de nitrógeno y un termómetro se cargó con agua (120 L) y diclorohidrato de ( 1S, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l- il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il } amida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico (12 g, 22.2 mmol). La mezcla resultante se agitó para dar una solución clara amarilla ligera. A esta solución se agregó 25% en peso de NaOH (7.83 g, 24.4 mmol) en 2 minutos para dar una suspensión lechosa blanca. El diclorometano (120 mL) se agregó y la mezcla se agitó durante 30 minutos para dar una solución de dos capas claras. Las capas se separaron para dar una capa acuosa (113 mL) y una capa orgánica (125 mL) , la cual se lavó con 10% de NaBr acuoso (120 mL) . Las capas se separaron para dar una capa orgánica (120 mL) la cual se concentró hasta alrededor de un cuarto de volumen. Se agregó etanol absoluto (250 mL) y la mezcla se destilo para dar ~200 mL del volumen total. La solución se agitó a 58°C y 48% en peso de HBr acuoso (8.2 g, 49 mmol) se agregó en 2 min. La precipitación se observó cuando más de la mitad del HBr se agregó. La mezcla se agitó a 55°C hasta 62 °C durante 1 h y luego se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El filtrado se lavó con etanol absoluto (40 mL) , se secó bajo nitrógeno durante 20 minutos y se secó a 45°C bajo vacío durante 48 horas para dar el compuesto del título (13.42 g) como un sólido blanco .

Ejemplo 43: Síntesis de la sal del ácido fumárico de la { (ÍS , 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8- azabiciclo[3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-lH- indazol-3-carboxílico A una solución de { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l- il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il lamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico (0.1 g, 0.21 mmol) en 50% de acetonitrilo/agua (1 mL) se agregó una solución de ácido fumárico ÍM entanolico (0.44 mL 0.42 mmol). La solución resultante se liofilizo durante la noche y luego se mezcló con acetato de etilo (1 mL) . Se agregó etanol caliente a esta mezcla con calentamiento hasta que una solución homogénea se obtuvo (0.4 mL) . La solución clara resultante luego se permitió cristalizar a temperatura ambiente. El sólido resultante se filtró, se lavó con etanol, y se secó bajo vacío para dar el compuesto del título como un sólido (0.13 g).

Ejemplo 44: Síntesis de la sal del ácido fosfórico de la { (1S , 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-ácido carboxílico A una solución de { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-1-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1]oct-3-illamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico (0.2 g, 0.43 mmol) en metanol (3 mL) se agregó una solución de ácido fosfórico etanólico ÍM (0.43 mL, 0.43 mmol) . La solución heterogénea resultante luego se calentó para solubilizar, se filtró, y se permitió enfriar durante la noche. El sólido resultante se filtró, se lavó con metanol y se secó bajo vacío para dar el compuesto del título como un sólido (0.08 g) .

Ejemplo 45: Síntesis de la sal del ácido p-toluen sulfónico de la { (ÍS, 3R,5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico Una solución de { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-illamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico (38.7 mg, 0.08 mmol) en isopropanol (2 mL) se calentó en un baño de agua a 75 °C y monohidrato del ácido p-toluensulfónico sólido (32.3 mg, 0.17 mmol) se agregó. La solución resultante se calentó hasta que los sólidos se disolvieron y luego se permitió enfriar a temperatura ambiente. Los cristales del compuesto del título se formaron durante la noche.

Ejemplo 46: Síntesis de las sales del ácido de la { (ÍS , 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-lH- indazol-3-carboxíliso Se usaron procedimiento similares a aquellos de los ejemplos 43-45, las siguientes sales de ácidos de (1S, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3- illamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico se prepararon en forma de sólido usando el número de equivalentes del ácido indicado en paréntesis: acetato (2); benzoato (2) ; nitrato (2); propionato (1); tartrato (2); fosfato (0.5).

Ejemplo 47: Ensayo de Enlace de Radioligando en Receptores Humanos 5-HT4(c) a. Preparación de Membrana 5-HT (C) Células HEK-293 (riñon embriónico humano) establemente transfectadas con ADNc de receptor 5-HT4(C) humano (Bmax = ~ 6.0 pmol/mg de proteína, como se determina usando el ensayo de enlace de radioligando de membrana [3H] -GR113808) se hacen crecer en matraces T-225 en medio Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) que contiene 4,500 mg/L de D-glucosa y clorohidrato de piridoxina (GIBCO-Invitrogen Corp., Carlsbad CA: Cat #11965) complementado con suero de bovino fetal al 10% (FBS) (GIBCO-Invitrogen Corp.: Cat #10437), 2 mM de L-glutamina y (100 unidades) penicilina- (100 µg) estreptomicina/ml (GIBCO-Invitrogen Corp. : Cat #15140) en un incubador humidificador de C02 al 5% a 37 °C. Las células se hacen crecer bajo presión de selección continua por la adición de 800 µg/mL de geneticina (GIBCO-Invitrogen Corp.: Cat #10131) al medio. Las células se hacen crecer hasta aproximadamente 60-80% de confluencia (< 35 conductos de subcultivo) . A 20-22 horas antes de cosechar, las células se lavan dos veces y se alimentan con DMEM libre de suero. Todas las etapas de la preparación de membrana se realizan en hielo. La monocapa celular se levanta por agitación mecánica suave y trituración con una pipeta de 25 mL. Las células se colectan por centrifugación a 1000 rpm (5 min) . Para la preparación de membrana, los peletizados celulares se vuelven a suspender en ácido 4- (2-hidroxietil) - 1-piperazinetanosulfónico 50 mM enfriado en hielo (HEPES) , pH 7.4 (solución amortiguadora de preparación de membrana) (40 mL/total rendimiento celular de 30-40 matraces T225) y se homogeniza usando un disruptor de politron (establecido 19, 2 x 10 s) en hielo. Los homógeneizados resultantes se centrifugan a 1200 g durante 5 min a 4°C. El peletizado se descarta y el sobrenadante se centrifuga a 40,000 g (20 min). El peletizado se lava una vez por resuspensión con solución amortiguadora de preparación de membrana y centrifugación a 40,000 g (20 min). El peletizado final se volvió a suspender en HEPES 50 mM, pH 7.4 (solución amortiguadora de ensayo) (equivalente 1 matraz T225/1 mL) . La concentración de proteína de la suspensión de membrana se determina por el método de Bradford (Bradford, 1976) . Las membranas se almacenan congeladas en alícuotas a - 80 °C. b. Ensayos de Enlace de Radioligando Los ensayos de enlace de radioligando se realizan en placas de ensayo de polipropileno de 96 pozos profundos de 1.1 mL (Axygen) en un volumen de ensayo total de 400 µL que contiene 2 µg de proteína de membrana en HEPES 50 mM pH 7.4, que contiene albúmina de suero de bovino al 0.025% (BSA). Los estudios de enlace de saturación para determinación de los valores Kd del radioligando se realizaron usando [3H] -GR113808 (Amersham Inc., Bucks, RU: Cat #TRK944; actividad específica ~82 Ci/mmol) a 8-12 concentraciones diferentes en el rango desde 0.001 nM-5.0 nM. Los ensayos de desplazamiento para determinación de valores pK¡. de compuestos se realizaron con [3H] -GR113808 a 0.15 nM y once concentraciones diferentes del compuesto en el rango desde 10 pM-lOOµM. Los compuestos de prueba se reciben como soluciones de reserva 10 mM en DMSO y se diluye hasta 400 µM en HEPES 50 mM pH 7.4 a 25 °C, que contiene BSA al 0.1%, y se hacen diluciones en serie (1:5) en la misma solución amortiguadora. Se determina el enlace no específico en presencia de 1 µM de GR113808 no etiquetado. Los ensayos se incuban durante 60 min a temperatura ambiente, y luego las reacciones de enlace se terminan por filtración rápida sobre placas filtro de fibra de vidio GF/B de 96 pozos (Packard BioScience Co., Meriden, CT) previamente mojadas en polietilenimina al 0.3%. Las placas filtro se lavan tres veces con solución amortiguadora de filtración (HEPES 50mM enfriado en hielo, pH7.4) para remover la radioactividad no enlazada. Las placas se secan, se agregan 35 µL de fluido de escintilación líquida Microscint-20 (Packard BioScience Co., Meriden, CT) a cada pozo y las placas se cuentan en un contador de escintilación líquida Packard Topcount (Packard BioScience Co., Meriden, CT) . Los datos de enlace se analizan por análisis de regresión no lineal con el paquete GraphPad Prism Software (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA) usando el modelo de parámetro 3 para competencia de un sitio. El FONDO (curva mínima) se fija al valor para enlace no específico, como se determina en presencia de 1 µM GR113808. Los valores K¡. para compuestos de prueba se calculan, en Prisma, de los valores IC50 mejor colocados, y el valor Kd del radioligando, usando la ecuación Cheng-Prusoff (Cheng and Prusoff, Biochemical Pharmacology, 1973, 22, 3099-108): K = IC50/(1 + [L] /Kd) donde [L] = concentración [3H] -GR113808. Los resultados se expresan como el logaritmo decádico negativo de los valores K±, pK¡.. Los compuestos de prueba que tienen un valor pKi más alto en este ensayo tienen una afinidad de enlace más alta para el receptor 5-HT . Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo tienen un valor pK en el rango desde alrededor de 6.3 hasta alrededor de 9.0, típicamente en el rango desde alrededor de 7.0 hasta alrededor de 8.6.

Ejemplo 48 : Ensayo de Enlace de Radioligando en Receptores Humanos 5-HT3A: Determinación de la Selectividad del Subtipo de Receptor a. Preparación de Membrana 5-HT3A Células HEK-293 (riñon embriónico humano) establemente transfectadas con ADNc del receptor 5-HT3A humano se obtienen del Dr. Michael Bruess (University of Bonn, ALE) (Bmax = ~9.0 pmol/mg proteína, como se determina usando ensayo de enlace de radioligando de membrana [3H] -GR65630) . Las células se hacen crecer en matraces T-225 o fábricas celulares en Medio Eagles Modificado de Dulbecco al 50% (DMEM) (GIBCO-Invitrogen Corp., Carlsbad, CA: Cat #11965) y F12 de Ham al 50% (GIBCO-Invitrogen Corp. : Cat #11765) complementado con suero de bovino fetal inactivado por calor al 10% (FBS) (Hyclone, Logan, UT: Cat #SH30070.03) y (50 unidades) penicilina- (50 µg) estreptomicina/ml (GIBCO-Invitrogen Corp. : Cat #15140) en un incubador humidificado con C0 al 5% a 37 °C. Las células se hacen crecer hasta aproximadamente 70-80% de confluencia (< 35 pasajes de subcultivo) . Todas las etapas de la preparación de membrana se realizan en hielo. Para cosechar las células, el medio se aspira y las células se enjuagan con Ca2+, solución salina amortiguada en fosfato de Dulbecco libre de Mg2+ (dPBS) . La monocapa celular se levanta por agitación mecánica suave. Las células se colectan por centrifugación a 1000 rpm (5 min) . Las etapas posteriores de la preparación de membrana siguen el protocolo descrito arriba para las membranas que expresan los receptores 5-HT4(C) . b. Ensayo de Enlace de Radioligandos Los ensayos de enlace de radioligando se realizan en placas de ensayo de polipropileno de 96 pozos en un volumen de ensayo total de 200 µL que contiene 1.5-2 µg de proteína de membrana en HEPES 50 mM pH 7.4, que contiene solución amortiguadora de ensayo BSA al 0.025%. Los estudios de enlace de saturación para determinación de los valores Kd del radioligando se realizaron usando [3H]-GR65630 (PerkinElmer Life Sciences Inc., Boston, MA: Cat #NET1011, actividad específica ~85 •Ci/mmol) a doce concentraciones diferentes en el rango desde 0.005 nM to 20 nM. Los ensayos de desplazamiento para determinación de valores pK¡. de compuestos se realizaron con [3H]-GR65630 a 0.50 nM y once concentraciones diferentes del compuesto en el rango desde 10 pM hasta 100 µM. Los compuestos se reciben como soluciones de reserva 10 mM en DMSO (ver sección 3.1), se diluyen hasta 400 µM en ' HEPES 50 mM pH 7.4 a 25 °C, que contiene BSA al 0.1 %, y luego se hacen diluciones en serie (1:5) en la misma solución amortiguadora. Se determina el enlace no específico en presencia de 10 µM de MDL72222 no etiquetado. Los ensayos se incuban durante 60 min a temperatura ambiente, luego las reacciones de enlace se terminan por filtración rápida sobre placas filtro de fibra de vidrio GF/B de 96 pozos (Packard BioScience Co., Meriden, CT) previamente mojadas en polietilenimina al 0.3%. Las placas filtro se lavan tres veces con solución amortiguadora de filtración (HEPES 50mM enfriado en hielo, pH7.4) para remover la radioactividad no enlazada. Las placas se secan, se agrega 35 µL de fluido de escintilación líquida Microscint-20 (Packard BioScience Co., Meriden, CT) a cada pozo y las placas se cuentan en un contador de escintilación líquida Packard Topcount (Packard BioScience Co., Meriden, CT) . Los datos de enlace se analizan usando el procedimiento de regresión no lineal descrito arriba para determinar los valores K¿. El FONDO (curva mínima) se fija al valor para enlace no específico, como se determina en presencia de MDL72222 10 µM. La cantidad [L] en la ecuación Cheng-Prusoff se define como la concentración [3H] -GR65630. La selectividad para el subtipo del receptor 5-HT4 con respecto al substipo del receptor 5-HT3 se calcula como la relación K¿ (5-HT3A) /K¿ (5-HT4(C) ) . Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo tienen una selectividad al subtipo del receptor 5-HT4/5-HT3 en el rango desde alrededor de 25 hasta alrededor de 4000, típicamente en el rango desde alrededor de 100 hasta alrededor de 4000.

Ejemplo 49: Ensayo de Placa Instantánea de Acumulación de cAMP de Célula Completa con Células HEK-293 que expresan Receptores 5-HT4(C) Humanos En este ensayo, la potencia funcional del compuesto de prueba se determina al medir la cantidad de AMP cíclico producido cuando las células HEK-293 que expresan los receptores 5-HT4 se ponen en contacto con concentraciones diferentes del compuesto de prueba. a. Cultivo Celular Células HEK-293 (riñon embriónico humano) establemente transfectadas con ADNc del receptor 5-HT4(c) humano clonado se prepararon de manera que expresan el receptor en dos diferentes densidades: (1) a una densidad de alrededor de 0.5-0.6 pmol/mg proteína, como se determina usando un ensayo de enlace de radioligando de membrana [3H] -GR113808, y (2) a una densidad de alrededor de 6.0 pmol/mg proteína. Las células se hacen crecer en matraces T-225 en medio Eagles Modificado de Dulbecco (DMEM) que contiene 4,500 mg/L de D-glucosa (GIBCO-Invitrogen Corp. : Cat #11965) complementado con suero de bovino fetal al 10% (FBS) (GIBCO-Invitrogen Corp.: Cat #10437) y (100 unidades) penicilina- (100 µg) estreptomicina/ml (GIBCO-Invitrogen Corp. : Cat #15140) en un incubador humidificador de C02 al 5% a 37 °C. Las células se hacen ' crecer bajo presión de selección continua por la adición de geneticina (800 µg/mL: GEBCO-Invitrogen Corp. : Cat #10131) al medio. b. Preparación Celular Las células se hacen crecer hasta aproximadamente 60-80% de confluencia. Veinte hasta veintidós horas antes del ensayo, las células se lavan dos veces, y se alimentan, con DMEM libre de suero que contiene 4,500 mg/L de D-glucosa (GIBCO-Invitrogen Corp. : Cat #11965) . Para cosechar las células, el medio se aspira y 10 mL deVersene (GIBCO- Invitrogen Corp.: Cat #15040) se agregó a cada matraz T-225. Las células se incubaron durante 5 min a temperatura ambiente y luego se descargan del matraz por agitación mecánica. La suspensión celular se transfiere a un tubo centrífugo que contiene un volumen igual de dPBS previamente calentado (37 °C) y se centrifuga durante 5 min a 1000 rpm. El sobrenadante se descarta y el peletizado se vuelve a suspender en solución amortiguadora de estimulación previamente calentada (37 °C) (10 mL equivalente por 2-3 matraces T-225) . Este tiempo se anota y se marca como tiempo cero. Las células se cuentan con un contador Coulter (cuenta arriba de 8 µm, el rendimiento del matraz fue de 1-2 x 107 células/matraz) . Las células se vuelven a suspender a una concentración de 5 x 105 células/ml en solución amortiguadora de estimulación previamente calentada (37 °C) (como se proporciona en el kit de placa instantánea) y se incuba previamente a 37 °C durante 10 min. Los ensayos cAMP se realizan en un formato de radioinmunoensayo usando el sistema de ensayo de activación de adenilil ciclasa de placa instantánea con 125I-cAMP (SMP004B, PerkinElmer Life Sciences Inc., Boston, MA) , de conformidad con las instrucciones del fabricante. Las células se hacen crecer y se preparan como se describe arriba. Las concentraciones celulares finales en el ensayo fueron 25 x 103 células/pozo y el volumen de ensayo final fue 100 µL. Los compuestos de prueba se reciben como soluciones de reserva 10 mM en DMSO, se diluyen hasta 400 µM en HEPES 50 mM pH 7.4 a 25 °C, que contiene BSA al 0.1%, y luego se hacen diluciones serie (1:5) en la misma solución amortiguadora. Los ensayos de acumulación AMP cíclicos se realizaron con 11 concentraciones diferentes del compuesto en el rango desde 10 pM hasta 100 µM (concentraciones del ensayo final) . La curva de respuesta a la concentración 5-HT (10 pM hasta 100 µM) se incluye en cada placa. Las células se incuban, con agitación, a 37 CC durante 15 min y la reacción se termina por la adición de 100 µl de solución de detección enfriada en hielo (como se proporciona en el kit de placa instantánea) a cada pozo. Las placas se sellan y se incuban a 4°C durante la noche. La radioactividad enlazada se ' cuantificó por espectroscopia de proximidad de escintilación usando el Topcount (Packard BioScience Co . , Meriden, CT) . La cantidad de cAMP producido por mL de reacción se extrapola de la curva estándar cAMP, de conformidad con las instrucciones proporcionadas en el manual del usuario del fabricante. Los datos se analizan por análisis de regresión no lineal con el paquete GraphPad Prism Software usando el modelo de respuesta a la dosis sigmoidal de 3 parámetros (pendiente contraida para unidad) . Los datos de potencia se reportan como valores pEC50, el logaritmo decádico negativo del valor EC5o, donde EC5o es la concentración efectiva para un 50% de respuesta máxima. Los compuestos de prueba que exhiben un valor pECso mayor en este ensayo tienen una potencia mayor para agonizar el receptor 5-HT4. Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo, por ejemplo, en la línea celular (1) que tienen una densidad de alrededor de 0.5-0.6 pmol/mg proteína, tienen un valor pECso en el rango desde alrededor de 6.3 hasta alrededor de 9.0, típicamente en el rango desde alrededor de 7.5 hasta alrededor de 8.5.

Ejemplo 50: Ensayo de Pinza de Voltaje In vitro de la Inhibición de Corriente de Ion de Potasio en Células Completas que Expresan el Canal de Potasio Cardiaco hERG Se obtienen células CHO-Kl establemente transfectadas con ADNc hERG de Gail Robertson en la University of Wisconsin. Las células se mantienen en almacenado criogénico hasta que es necesario. Las células se expanden y se pasan en medio Eagles Modificado de Dulbecco/F12 complementado con suero de bovino fetal al 10% y 200 µg/mL de geneticina. Las células se siembran en portaobjetos de vidrio recubiertos con poli-D-lisina (100 µg/mL) , en platos de 35 mm2 (que contienen 2 mL de medio) a una densidad que permite que las células aisladas se seleccionen para estudios de voltaje cerrado de célula completa. Los platos se mantienen en un ambiente de C02 al 5%, humidificado a 37 °C. La solución extracelular se prepara al menos cada 7 días y se almacena a 4°C cuando no se usa. La solución extracelular contiene (mM) : NaCl (137), KCl (4), CaCl2 (1.8), MgCl2 (1), Glucosa (10), ácido 4- (2-hidroxietil) -1-piperazinetanosulfónico (HEPES) (10), pH 7.4 con NaOH. La solución extracelular, en ausencia o presencia del compuesto de prueba, se guarda en reservorios, de los cuales se hace fluir en la cámara de registro a aproximadamente 0.5 mL/min. La solución intracelular se prepara, se forma en alícuotas y se almacena a -20 °C hasta el día de uso. La solución intracelular contiene (mM) : KCl (130), MgCl2 (1), sal del ácido etilen glicol-bis (beta-aminoetil éter) N, N,N' , N' -tetra acético (EGTA) (5), MgATP (5), ácido 4- (2-hidroxietil) -1-piperazinetanosulfónico (HEPES) (10), pH 7.2 con KOH. Todos los experimentos se realizaron a temperatura ambiente (20-22°C).

Los portaobjetos en los cuales las células se siembran se transfieren a una cámara de registro y se refusionan continuamente. Los sellos Gigaohm se forman entre la célula y el electrodo de parche. Una vez que se alcanza un parche estable, comienza el registro en el modo de voltaje cerrado, con un potencial de espera inicial a -80 mV. Después de que se alcanza la corriente de célula completa estable, las células se exponen al compuesto de prueba. El protocolo de voltaje estándar fue: etapa del potencial de espera de -80 mV hasta +20 mV durante 4.8 seg, repolarización hasta -50 mV durante 5 seg y luego regreso al potencial de espera original (-80 mV) . Este protocolo de voltaje se corre una vez cada 15 seg (0.067 Hz) . Las amplitudes de corriente pico durante la fase de repolarización se determinan usando el software pClamp. Los compuestos de prueba a una concentración de 3 µM se perfusan sobre las células durante 5 minutos, seguido por un periodo de lavado de 5 minutos en ausencia del compuesto. Finalmente, el control positivo (cisaprida, 20 nM) se agregó al producto de perfusión para probar la función de la célula. La etapa desde -80 mV hasta +20 mV activa el canal hERG, lo que resulta en una corriente hacia afuera. La etapa regresa a -50 mV lo que resulta en una corriente de cola hacia fuera, como el canal se recupera de la inactivación y se desactiva. Las amplitudes de corriente pico durante la fase de repolarización se determinan usando el software pCLAMP. Los datos de control y artículo de prueba se exportan al Origin® (OriginLab Corp., Northampton MA) donde las amplitudes de corriente individuales se normalizan a la amplitud de corriente inicial en ausencia del compuesto. Las medias de corriente normalizadas y errores estándar para cada condición se calculan y agrupan contra el curso de tiempo del experimento. Se hacen comparasiones entre las inhibiciones de corriente K+ observadas después de la exposición de cinco minutos a ya sea el artículo de prueba o control vehículo (usualmente 0.3% de DMSO). Las comparaciones estadísticas entre los grupos experimentales se realizan usando una prueba t independiente, de dos poblaciones (Microcal Origin v. 6.0).

Las diferencias se consiedran importantes a p < 0.05. Entre más pequeño el porcentaje de inhibición para la corriente de ion de potasio en este ensayo, más pequeño el potencial para compuestos de prueba de cambiar el patrón de repolarización cardiaca cuando se usan como agentes terapéuticos. Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo a una concentración de 3 µM exhiben una inhibición de la corriente de ion de potasio de menos de alrededor de 20%, típicamente, menos de alrededor de 15%.

Ejemplo 51: Modelo In vitro de Biodisponibilidad Oral: Ensayo de Permeación Caco-2 El ensayo de permeación Caco-2 se realizó para el modelo de capacidad de los compuestos de prueba para pasar a través del intestino y quedarse en el torrente sanguíneo después de la administración oral. Se determina la relación a la cual los compuestos de prueba en la solución permea la monocapa celular diseñada para imitar la unión estrecha de las monocapas del intestino delgado humano. Se obtienen células Caco-2 (colon, adenocarcinoma; humanas) del ATCC (American Type Culture Collection; Rockville, MD) . Para el estudio de permeación, las células se siembran a una densidad de 63,000 células/cm2 en filtros de polícarbonato de pozos transversales previamente humedecidos (Costar; Cambridge, MA) . La monocapa celular se forma después de 21 días en cultivo. Después del cultivo celular en la placa de pozos transversales, la membrana que contiene la monocapa celular se retira de la placa de pozo transversal y se inserta en la cámara de difusión (Costar; Cambridge, MA) .

La cámara de difusión se inserta en el bloque de calentamiento que se equipa con agua de circulación externa, termostáticamente regulada a 37 °C para control de temperatura 95% 02/5% C02 a cada mitad de la cámara de difusión y se crea un patrón de flujo laminal a través de la monocapa celular, que es efectiva apra reducir la capa de límite sin agitar. El estudio de permeación se realizó con concentraciones de compuesto de prueba a 100 µM y con 14C-manitol para monitorear la integridad de la monocapa. Todos los experimentos se conducen a 37 °C durante 60 min. Las muestras se toman a 0, 30 y 60 min desde los lados tanto donador como receptor de la cámara. Las muestras se analizan por CLAR o conteo de escintilación líquida para el compuesto de prueba y concentraciones de manitol. El coeficiente de permeación (Kp) en cm/seg se calculó. En este ensayo, el valor Kp mayor a alrededor de 10 x 10" 6 cm/seg se considera que indica una biodisponibilidad favorable. Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo exhiben valores Kp de entre alrededor de 15 x 10"6 cm/seg y alrededor de 50 x 10"6 cm/seg, típicamente entre alrededor de 20 x 10~6 cm/seg y alrededor de 40 x 10~6 cm/seg.

Ejemplo 52 : Estudio Farmacocinético en la Rata Formulaciones de solución acuosa de los compuestos de prueba se preparan en ácido láctico al 0.1 % a un pH de entre alrededor de 5 y alrededor de 6. Se dosifican ratas Sprague-Dawley machos (cepa CD, Charles River Laboratories, Wilmington, MA) con compuestos de prueba por medio de administración intravenosa (IV) a una dosis de 2.5 mg/kg o por cebadura oral (PO) a una dosis de 5 mg/kg. El volumen de dosificación fue 1 mL/kg para IV y 2 mL/kg para administración PO. Se colectan muestras sanguíneas en serie de animales previamente dosificados, y a 2 (sólo IV) , 5, 15, y 30 min, y a 1, 2, 4, 8, y 24 horas después de la dosis. Las concentraciones de los compuestos de prueba en el plasma sanguíneo se determinaron por análisis de espectrometría de masa-cromatografía líquida (CL-EM/EM) (MDS SCIEX, API 4000, Applied Biosystems, Foster City, CA) con un límite más bajo de cuantificación de 1 ng/mL. Los parámetros farmacocinéticos estándar se evalúan por análisis no computacional (Modelo 201 para IV y Modelo 200 para PO) usando WinNonlin (Versión 4.0.1, Pharsight, Mountain View, CA) . El máximo en la curva de la concentración del compuesto de prueba en el plasma sanguíneo vs. tiempo se denota Cmax. El área bajo la curva concentración vs . tiempo desde el tiempo de dosificación para la última concentración medible (AUC (0-t)) se calcula por la regla trapezoidal lineal. La biodisponibilidad oral (F(%)), esto es, la relación normalizada de dosis de AUC (0-t) por administración PO para AUC (0-t) por administración IV, se calcula como: F(%) = AUCPo/AUCIV x DosisIV/DosiSp0 x 100% Los compuestos de prueba que exhiben valores más grandes de los parámetros Cm?, AUC (0-t), y F(%) en este ensayo se espera que tendan una biodisponibilidad mayor cuando se administran oralmente. Los compuestos de la invención que se prueban en este ensayo tienen valores Cmax en el rango desde alrededor de 0.05 hasta alrededor de 0.35 µg/mL, típicamente en el rango desde alrededor de 0.1 hasta alrededor de 0.35 µg/mL y los valores AUC (0-t) en el rango desde alrededor de 0.15 hasta alrededor de 0.8 µg-hr/mL, típicamente en el rango desde alrededor de 0.25 hasta alrededor de 0.8 µg-hr/mL. A modo de ejemplo, el compuesto del Ejemplo 1 tiene un valor Cmax de 0.25 µg/mL, un valor AUC (0-t) de 0.73 µg-hr/mL y biodisponibilidad oral (F(%)) en el modelo de rata de alrededor de 100 %. Aunque la presente invención se ha descrito con referencia a modalidades específicas de la misma, se entenderá por aquellos expertos en el arte que pueden hacerse varios cambios y equivalentes pueden susbtituirse sin salirse del espíritu real y alcance de la invención. Además, muchas modificaicones pueden hacerse para adaptar una situación, material, composición de materia, proceso, etapa o etapas de proceso particular, al objetivo, espíritu y alcance de la presente invención. Todas las modificaciones se pretende que estén dentro del alcance de las reivindicaicones adjuntas a esto. Adicionalmente, todas las publicaicones, patentes, y documentos de patente citados anteriormente se incorporan por referencia en la presente por completo, como si se incorporarán individualmente por referencia. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (26)

1. REIVINDICACIONES
2. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones . 1. Un compuesto de la fórmula (I) : caracterizado porque: R1 es hidrogeno, halo, hidroxi, alquilo C?_4 ó alcoxi C?~4 R2 es alquilo C3_ , ó cicloalquilo C3-e; y W se selecciona de: (i) un grupo de la fórmula (II) : en donde X es : NC(0)R en donde R es alquilo C?_3 o tetrahidrofuranilo, en donde alquilo C?_3 es opcionalmente substituido con -OH o alcoxi C?_3; S(0)2; o NS(0)2Rb, en donde Rb es metilo, opcionalmente substituido con -OH, alcoxi C?_3, cicloalquilo C5-6, o -S (O) 2-alquilo C?_3; (ii) un grupo de la fórmula (III) : en donde: (JLll R? es -OH o alcoxi C?_3; P es 0 ó 1; n es 1 ó 2; y Y es: RcC(0)Rd, en donde Rc es hidrogeno ó alquilo C?_3 y Rd es alquilo C?_3 opcionalmente substituido con -OH o alcoxi C?_3, o
3. NReS(0)2Rf, en donde R8 es hidrogeno y Rf es alquilo C1-3, opcionalmente substituido con -OH, alcoxi C1-3, cicloalquilo C5-6 o -S(0)2-alquilo C?_3; Y (iii) un grupo de la fórmula (IV) : en donde : (IV)
4. Rz es hidrogeno, alquilo C?_3, o alquilo C2-3 substituido con -OH ó alcoxi C1-3; ni es 1 ó 2; q es 1 ó 2 , con la condición de que la suma de m y q no es igual a 4; y Z es : NC(0)Rg, en donde Rg es alquilo C?_3, opcionalmente substituido con -OH o alcoxi C?_3, S(0)2; ó NS(0)2Rh, en donde Rh es metilo, opcionalmente substituido con -OH, alcoxi C?-3, cicloalcoxi C5-6, o -S (O) 2-alquilo C?_3; o una sal o solvato o esteroisómero farmacéuticamente aceptable de los mismos. 2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R1 es hidrógeno o halo. 3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque R2 es isopropilo o cicloalquilo C4_5. 4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque W es un grupo de la fórmula (II) .
5. 5. El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque Ra es alquilo C?_3 y Rb es metilo.
6. 6. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque W es un grupo de la fórmula (III) .
7. 7. El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque p es 0.
8. 8. El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque n es 1.
9. 9 . - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es un grupo de la fórmula (IV) .
10. 10. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque m es 1 y q es 1.
11. 11. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque: R1 es hidrogeno ó halo; R2 es alquilo C3_ o cicloalquilo C_5; y W se selecciona del grupo que consiste de: (i) un grupo de la fórmula (II) en donde X es NC(0)CH3, S(0)2, o NS(0)2CH3; (ii) un grupo de la fórmula (III) en donde p es 0, n es 1, e Y es NCH3C(0)CH3; Y (iii) un grupo de la fórmula (IV) en donde Rz es metilo, m es 1, q es 1, y Z es NC(0)CH3, S(0)2, o NS(0)2CH3.
12. 12. El compuesto de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque W es un grupo de la fórmula (II) en donde X es NC(0)CH3, S(0)2 o NS(0)2CH3.
13. 13. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto se selecciona de: { (lS,3R,5R)-8-[2- (4-acetilpiperazin-l-il) -etil] 8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-illamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (lS,3R,5R)-8-[2-(4-(tetrahidrofuran-2-carbonil)piperazin-1-il) etil]-8-azabiciclo[3.2. l]oct-3-illamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (1, 1-dioxo-l?6-tiomorfolin-4-il") etil] -8- azabiciclo[3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-lH- indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-metansulfonil-piperazin-l-il) etil] -8- azabiciclo [3.2.1] oct-3-illamida del ácido 1-isopropil-1H- indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, SR) -8- [2- (4-ciclohexilmetansulfonilpiperazin-l- il) etil] -8-azabiciclo [3.2.-l]oct-3-illamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2- (4-metansulfonilmetansulfonilpiperazin-1-il) etil]-8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il)amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (1S,3R, 5R)-8- [2- (3- (acetil-metilamino)pirrolidin-l-il) etil] -8-azabiciclo[3.2. l]oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (3- (acetil-amino)pirrolidin-l-il) etil] -8-azabiciclo [3.2. l]oct-3-illamida del ácido 1-isopropil-1H-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (R) -3- (acetil-amino)pirrolidin-1-il) etil]-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2- ( (S) -3- (acetil-amino)pirrolidin-l-il) etil] -8-azabiciclo[3.2.l]oct-3-illamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[3-( (S)-2- hidroxipropionilamino)pirrolidin~l-il]etil}-8- azabiciclo[3.2.1] oct-3-il) amida del ácido 1-isopropil-1H- indazol-3-carboxílico; ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [ (3S, 4S) -3- (acetilmetilamino) -4- 5 hidroxipirrolidin-1-il] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2- ( (R) -3-etansulfonilaminopirrolidin-l- il)etil]-8-azabiciclo[3.2. l]oct-3-il}amida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; 1.0 {(lS,3R,5R)-8-[2-((R)-3- ciclohexilmetansulfonilaminopirrolidin-1-il) etil] -8- azabiciclo[3.2.1] oct-3-illamida del ácido 1-isopro?il-lH- indazol-3-carboxílico; • ( (1S,3R,5R) -8- {2- [3- (acetil-metilamino)piperidin-l- 5 il] etil}-8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il) amida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2- (3-acetilaminopiperidin-l-il) etil] -8- azabiciclo[3.2.1] oct-3-illamida del ácido 1-isopropil-lH- indazol-3-carboxílico; 0 { (1S,3R, 5R) -8- [2- (3-metansulfonilaminopiperidin-1- il) etil] -8-azabiciclo [3.2.l]oct-3-il}amida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2- ( (S) -3-metansulfonilaminopiperidin-l- il) etil]-8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-illamida del ácido 1- 5 isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (S) -3-etansulfonilaminopiperidin-l- il) etil]-8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; {(lS,3R,5R)-8-[2-((S)-3- metansulfonilmetansulfonilaminopiperidin-1-il) etil] -8- azabiciclo[3.2.1] oct-3-il]amida del ácido 1-isopropil-1H- indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ (l-acetilpirrolidin-3- il) etilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.l]oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ ( (R) -l-acetilpirrolidin-3- il) etilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2. l]oct-3-il) amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ ( (S) -l-acetilpirrolidin-3-il) etilamino] etil}-8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ (1-metansulfonilpirrolidin-3-il)metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.l]oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ ( (R) -1-metansulfonilpirrolidin-3-il)metilamino] etil}-8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il) amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (ÍS, 3R, 5R) -8-{2- [ (1, l-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il)metilamino]etill-8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ (1, 1-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il) - (2-hidroxietil) amino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ (l-acetilpiperidin-3- il)metilamino]etil)-8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ (1, l-dioxo-hexahidro-l?6-tiopiran-4-il)metilamino] etil)-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ (1-metansulfonilpiperidin-3-il)metilamino]etil}-8-azabiciclo[3.2.l]oct-3-il) amida --- del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 5-fluoro-l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (lS,3R,5R)-8-[2-(4-acetilpiperazin-l-il)etil]-8-azabiciclo[3.2.l]oct-3-il}amida del ácido 1-propil-ÍH-indazol-3-carboxílico; ( (1S, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-butil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-ciclobutil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8- azabiciclo[3.2.l]oct-3-il)amida del ácido 1-ciclopentil-lH- indazol-3-carboxílico; ( (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (R) -3- (acetil-metilamino)pirrolidin-l- il) etil] -8-azabiciclo[3.2.l]oct-3-il}amida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2- ( (S) -3- (acetil-metilamino)pirrolidin-l- il) etil] -8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il)amida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; - ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ ( (S) -1-metansulfonilpirrolidin-3-il)metilamino]etil)-8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ (R) - (1, l-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il)metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico ( (ÍS, 3R, 5R) -8- {2- [ (S) - (1, l-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il)metila?nino] etil}-8-azabiciclo [3.2.l]oct-3-il) amida; y sales farmacéuticamente aceptables y solvatos y estereoisómeros del mismo .
14. 14. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto se selecciona de: { (1S, 3R, 5R) -8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) -etil] -8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il)amida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2- (1, 1-dioxo-l?6-tiomorfolin-4-il) etil] -8- azabiciclo[3.2.1] oct-3-il)amida del ácido l-isopropil-1H- indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (4-metansulfonil-piperazin-l-il) -etil] - 8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il}amida del ácido 1-isopropil-lH- indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- (3- (acetilmetil-amino)pirrolidin-l- il) etil]-8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-illamida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (R) -3- (acetil-metil-amino)pirrolidin-l- il) etil] -8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il)amida del ácido 1- isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- ( (S) -3- (acetil-metilamino)pirrolidin-l-il) etil]-8-azabiciclo[3.2.l]oct-3-illamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- [ (l-acetilpirrolidin-3-il)metilamino] etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-illamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (ÍS, 3R, 5R) -8- [2- [ ( (R) -l-acétil-pirrolidin-3-il) etilamino] etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; { (1S, 3R, 5R) -8- [2- [ ( (S) -l-acetil-pirrolidin-3-il) etilamino] etil] -8-azabiciclo[3.2. l]oct-3-illamida del ácido 1-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (1S, 3R, 5R) -8-Í2- [ (l-metansulfonil-pirrolidin-3-il)metilamino] etil}-8-azabiciclo[3.2.l]oct-3-il) amida del ácido l-isopropiI-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ ( (R) -l-metansulfonil-pirrolidin-3- il)metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-{2-[ ( (S) -1-metansulfonil-pirrolidin-3- il)metilamino] etil}-8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il) amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (lS,3R,5R)-8-[2-( (1, l-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3- il)metilamino) etil] -8-azabiciclo[3.2.1] oct-3-il}-amida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; ( (1S, 3R, 5R) -8- [2- ( (R) - (1, l-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il)metilamino) etil] -8-azabiciclo [3.2.1] oct-3-il amida del ácido 1-isopropi1-1H-indazol-3-carboxílico; { (lS,3R,5R)-8-[2- ( (S) - (1, l-dioxo-tetrahidro-l?6-tiofen-3-il)metilamino) etil]-8-azabiciclo [3.2. l]oct-3-illamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; y sales farmacéuticamente aceptables y solvatos y estereoisómeros de los mismos .
15. 15. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque que tiene el nombre químico ((1S,3R,5R)- 8- [2- (4-acetilpiperazin-l-il) etil] -8-aza-biciclo[3.2. l]oct-3-illamida del ácido l-isopropil-lH-indazol-3-carboxílico; o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo .
16. 16. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 15 y un portador farmacéuticamente aceptable.
17. 17. Un compuesto de conformidad con las reivindicaciones 1 a 15, caracterizado porque es para uso en terapia.
18. 18. El uso de un compuesto de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 15 para la manufactura de un medicamento.
19. 19. El uso de conformidad con la reivindicación 18, en donde el medicamento es para el tratamiento de una condición médica en un mamífero asociado con actividad del receptor 5-HT4.
20. 20. El uso de conformidad .con la reivindicación 19, en donde la enfermedad o condición es una enfermedad de movilidad reducida del tracto gastrointestinal.
21. 21. Un proceso para preparar un compuesto de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 15, caracterizado porque comprende hacer reaccionar un compuesto de la fórmula O una sal o estereoisómero o derivado protector del mismo con una amina de la fórmula H-W en la presencia de un agente reductor para proporcionar un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato o estereoisómero del mismo.
22. 22. El producto caracterizado porque es preparado por los procesos de conformidad con la reivindicación 21.
23. 23. Un compuesto de la fórmula 5: caracterizado porque R1 es hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo C?_ , o alcoxi C?_ , y R2 es alquilo C3-4, o cicloalquilo C3_6,- o una sal o estereoisómero o, derivado protegido del mismo .
24. 24. Un proceso para preparar un compuesto de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones 1 a 15, caracterizado porque comprende hacer reaccionar un compuesto de la fórmula 2 Con un compuesto de la fórmula 10 10 bajo condiciones de acoplamiento de amida para proporcionar un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato o estereoisómero del mismo .
25. 25. Un proceso para preparar éster de tert-butilo del ácido (1S,3R, 5R) -3-amino-8-azabiciclo [3.2. l]octano-8-carboxílico, caracterizado porque comprende hacer reaccionar éster de tert-butilo del ácido 3-oxo-8-azabiciclo[3.2.1] octano-8-carboxílico con al menos 25 equivalentes de formiato de amino en la presencia de un catalizador de metal de transición para proporcionar éster de tert-butilo del ácido (ÍS, 3R, 5R) -3-amino-8-azabiciclo[3.2.1] octano-8-carboxílico.
26. 26. Un método para el estudio de sistema biológico o muestra, caracterizado porque comprende un receptor 5~HT4, comprende : (a) poner en contacto el sistema biológico o muestra con un compuesto de cualesquiera de las reivindicaciones 1 hasta 15; y (b) determinar el efecto causado por el compuesto en el sistema biológico o muestra.