MXPA06009001A

MXPA06009001A - Formulaciones liquidas de anticuerpos anti-egfr altamente concentradas

Info

Publication number: MXPA06009001A
Application number: MXPA/A/2006/009001A
Authority: MX
Inventors: Mahler Hannschristian; Matheus Susanne
Original assignee: Mahler Hannschristian; Matheus Susanne; Merck Patent Gmbh
Priority date: 2004-02-12
Filing date: 2006-08-08
Publication date: 2007-04-10

Abstract

La invención se refiere a procedimientos para preparar formulaciones líquidas altamente concentradas que contienen al menos un anticuerpo anti-EGFR y/o una de sus variantes y/o fragmentos, en especial anticuerpos monoclonales contra el receptor de EGF, con preferencia especial Mab C225 (Cetuximab) y Mab h425 (EMD 72000), por ultrafiltración. La invención se refiere también a formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR altamento concentradas, en especial de anticuerpo monoclonales contra el receptor de EGF, con preferencia especial de Mab C225 (Cetuximab) y Mab h425 (EMD 72000) y/o sus variantes y/o fragmentos, caracterizadas porque las formulaciones líquidas altamente concentradas presentan un contenido de anticuerpos anti-EGFR de 10 -250, preferentemente de 50 - 180 mg/ml, con preferencia especial de 100 - 150 mg/ml, y a su uso.

Description

FORMULACIONES LIQUIDAS DE ANTICUERPOS ANTI-EGFR ALTAMENTE CONCENTRADAS Campo de la invención La invención se refiere a procedimientos para preparar formulaciones líquidas altamente concentradas que contienen al menos un anticuerpo anti-EGFR y/o una de sus variantes y/o fragmentos, en especial anticuerpos monoclonales contra el receptor de EGF, con preferencia especial Mab C225 (Cetuximab) y Mab h425 (EMD 72000) , por ultrafiltración. La invención se refiere también a formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas, en especial de anticuerpos monoclonales contra el receptor de EGF, con preferencia especial de Mab C225 (Cetuximab) y Mab h425 (EMD 72000) y/o sus variantes y/o fragmentos, caracterizadas porque las formulaciones líquidas altamente concentradas presentan un contenido de anticuerpos anti-EGFR de 10 - 250, preferentemente de 50 - 180 mg/ml, con preferencia especial de 100 - 150 mg/ml, y a su uso. Antecedentes de la Invención Los adelantos en el área de la biotecnología en los últimos 10 años han permitido preparar una serie de proteínas para la aplicación farmacéutica mediante técnicas con ADN recombinante. Por ejemplo, se usan medicamentos proteicos, tales como anticuerpos monoclonales, por ejemplo en la terapia REF:174336 de tumores, por ejemplo para inmunoterapia específica o vacunas contra tumores . Las proteínas terapéuticas son más grandes y más complejas que los ingredientes activos orgánicos e inorgánicos convencionales, y presentan complejas estructuras tridimensionales y numerosos grupos funcionales que condicionan la actividad biológica de la proteína o, como alternativa, pueden causar efectos no deseados. Durante la preparación, el almacenamiento y el transporte, los medicamentos proteicos están expuestos a numerosas influencias exógenas que pueden tener una acción reductora de la estabilidad sobre el ingrediente activo proteico. En consecuencia, es necesario estudiar con exactitud las causas y los mecanismos de las reacciones especiales de degradación, a fin de poder estabilizar la proteína, por ejemplo mediante la adición de ciertos coadyuvantes estabilizantes (véase, por ejemplo, Manning M. C, Patel K. , & Borchardt R. T. (1989) Stability of protein pharmaceuticals. Pharm. Res. 6, 903-918).

La bibliografía describe numerosas formulaciones de proteínas terapéuticas. No obstante, los requerimientos de la composición de una preparación farmacéutica de ingredientes activos proteicos pueden ser muy diferentes y, en general, no es posible aplicar formulaciones proteicas ya establecidas a ingredientes activos proteicos nuevos, debido a las propiedades fisicoquímicas específicas y las reacciones de degradación de las distintas proteínas. En consecuencia, aún representa un desafío importante hallar formulaciones farmacéuticas adecuadas de estos novedosos ingredientes activos . En la bibliografía actual se describe la ultrafiltración como método estándar en el procesamiento corriente abajo en la purificación de proteínas recombinantes (Taylor y Francis (2000) Pharmaceutical Formulation Development of Peptides and Proteins, Londres, págs. 1-212; McPherson A. (1989) Separation Methods, Preparation and Analysis of Protein Crystals:" New York, Robert E. Krieger Publishing Co . , Inc., págs. 1-51), pero sin embargo en el procesamiento corriente abajo no se logran concentraciones venta osamente altas. Además, por medio de las siguientes etapas de purificación y cromatografía se puede producir nuevamente la dilución de las soluciones de proceso obtenidas. El documento US 6.252.055 describe la preparación de formulaciones de anticuerpos altamente concentradas por medio de ultrafiltración, sin embargo, las formulaciones de anticuerpos preparadas de esta manera presentan directamente después de la preparación un gran porcentaje de agregados solubles de > 4%. Además, las formulaciones de anticuerpos obtenidas no se caracterizan en cuanto a su estructura nativa y estabilidad, lo cual debe ser considerado, por ejemplo, como muy importante con respecto a la inmunogenicidad y eficacia de la formulación de anticuerpos.

La influencia desventajosa de agregados sobre la mayor inmunogenicidad y menor eficacia, así como la reducida biodisponibilidad de las formulaciones proteicas ya se conoce de la bibliografía (S. A. Marshall, G. A. Lazar, A. j. Chirino, y J. R. Desjaríais. Rational design and engineering of therapeutic proteins. Drug Discovery Today 8 (5): 212-221, 2003; Schellekens H. Bioequivalence and the i munogenicity of biopharmaceuticals . Nat Rev Drug Discov 1 (6): 457-462, 2002). Por las razones antes mencionadas, es obvio que la preparación de formulaciones líquidas de anticuerpos altamente concentradas que son estables durante un tiempo suficientemente prologando, es extremadamente difícil para la persona experta en el arte. Además, la preparación de una formulación líquida altamente concentrada no era atractiva para el experto en el arte, ya que la tendencia a la agregación de las proteínas fuertemente marcada y en especial de los anticuerpos ya era suficientemente conocida en rangos de concentración bajos (S. A. Marshall, G. A. Lazar, A. J. Chirino y J. R. Desjaríais. Rational design and engineering of therapeutic proteins. Drug Discovery Today 8 (5): 212-221, 2003) . De esta manera, en la bibliografía se describe la agregación de proteínas como la reacción física de inestabilidad que más a menudo se presenta (W. Wang. Instability, stabilization, and formulation of liquid protein pharmaceuticals. Int. J. Pharm. 185 (2): 129-188, 1999).

Las formulaciones que contienen Mab C225 (Cetuximab) o Mab h425 (EMD 72000) se conocen del documento WO03053465 y del documento WO03007988, pero las formulaciones conocidas del documento WO03053465 presentan una concentración de proteínas relativamente escasa y no son estables a temperatura ambiente a largo plazo. Las formulaciones conocidas del documento WO03007988 presentan, asimismo, una concentración de proteínas relativamente escasa y la preparación (liofilizado) debe ser reconstituida antes de usar. El proceso de liofilización para la estabilización de formulaciones proteicas se describe, por ejemplo, en los documentos W093/00807 y W098/22136, pero las significativas desventajas de las preparaciones liofilizadas consisten en que el usuario debe reconstituir el liofilizado antes de utilizarlo, lo cual representa una considerable fuente de error en la preparación antes del uso. Dado que se agrega otro proceso de preparación, en comparación con formulaciones líquidas, el proceso es desfavorable con respecto al gasto adicional para el desarrollo del proceso (para asegurar la estabilidad durante la liofilización) , la preparación (costos y duración de la preparación) y, por ejemplo, la validación. En el caso de las formulaciones de baja concentración proteica conocidas hasta ahora, se requieren altos volúmenes de infusión con una administración intravenosa. Por ello, es objeto de la invención la concentración de anticuerpos según la invención, de modo que, por reducción de los volúmenes a aplicar, también se puede considerar una aplicación subcutánea. Las formulaciones que se deben aplicar por vía subcutánea no deben superar un volumen de 1,0 - 1, 5 ml y, además, deben ser euhídricas (pH 7,2 o pH 4,0 - 9,0) e isotónicas (aproximadamente 290 mOsm) . Otra ventaja de las formulaciones subcutáneas radica en la posibilidad de la autoadministración por parte del paciente. Sin embargo, con la concentración no se debería perjudicar la estabilidad de la proteína, es decir, el aumento de productos de descomposición y agregación debería ser aceptable en el marco de las especificaciones. Además, estas formulaciones deberían estar libres de sustancias toxicológicamente nocivas o contenerlas únicamente en concentraciones fisiológicamente inofensivas . Dado que, por las dificultades esperables, las formulaciones proteicas ya establecidas no se pueden convertir en nuevos principios activos proteicos, era objeto de la presente invención hallar nuevas formulaciones líquidas altamente concentradas estables para proteínas terapéuticas, en especial anticuerpos monoclonales contra el receptor de EGF, por ejemplo Mab C225 (Cetuximab) y Mab h425 (EMD 72000), que presenten una mayor estabilidad frente a condiciones de estrés, tales como mayor temperatura, humedad ambiente y/o fuerzas de cizallamiento, de modo que, en caso de preparación, almacenamiento, transporte y aplicación, se conserve su eficacia y estas formulaciones no contengan coadyuvantes toxicológicamente nocivos . Descripción Detallada de la invención De manera sorprendente, se pueden obtener preparaciones farmacéuticas de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas con ayuda de procedimientos de ultrafiltración, las cuales permiten en una formulación líquida concentraciones proteicas de 10 - 250 mg/ml, con preferencia especial de 50 - 180 mg/ml, con preferencia especial de 100 - 150 mg/ml. Las formulaciones obtenidas por medio del procedimiento de ultrafiltración son estables preferentemente durante un período prolongado o se pueden mezclar en caso de necesidad con coadyuvantes estabilizantes apropiados o por posterior liofilización. Las formulaciones según la invención son fisiológicamente bien tolerables, se pueden preparar con facilidad, son dosificables de forma exacta y son estables durante el período de almacenamiento, con carga mecánica y, por ejemplo, en caso de procesos múltiples de congelamiento y descongelamiento . Sorprendentemente se halló que las formulaciones de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas preparadas de acuerdo con el procedimiento según la invención contienen una parte de monómeros de > 99 %. Las formulaciones líquidas altamente concentradas obtenidas según la invención con una concentración de 10 - 250 mg/ml, con preferencia especial de 50 - 180 mg/ml, con preferencia especial de 100 - 150 mg/ml son física y químicamente estables, es decir que no se produce ninguna modificación del contenido de monómeros con "un aumento simultáneo de agregados solubles, lo cual se vería como muy crítico en el sentido de la eficacia y los efectos colaterales inmunogénicos (Schellekens H. (2002) Bioequivalence and the immunogenicity of biopharmaceuticals : Nat . Rev. Drug Discov. , v. 1, págs. 457-462) . Además, con el procedimiento aplicado de ultrafiltración no se produce una modificación de la estructura primaria de la proteína. Por otra parte, en cuanto a la estabilidad mecánica y la estabilidad térmica, no se presentan desventajas frente a las formulaciones de proteínas de "baja concentración. En especial, los productos de agregación caracterizados también están en el rango de las especificaciones establecidas para las formulaciones de anticuerpos líquidas altamente concentradas. Esto no era de esperar, ya que, en el caso de las formulaciones proteicas altamente concentradas, la tendencia a la inestabilidad es mucho mayor que en el caso de las formulaciones proteicas diluidas (Fields, G. , Alonso, D., Stiger, D., Dill, K. (1992) "Theory for the aggregation af proteins and copolymers", J. Phys. Chem. 96, 3974-3981). En el caso de una alta concentración de proteínas, la "densidad de empaquetamiento" de las moléculas de proteínas es elevada. Conforme a ello, cabe suponer una cantidad incrementada de colisiones, y se pueden producir asociaciones de proteínas ocasionales. Este proceso se lleva a cabo, por lo general, por mecanismos de nucleación y crecimiento, en donde los núcleos críticos representan a menudo proteínas asociadas solubles, pero que se pueden convertir rápidamente en precipitados de proteínas insolubles (proteína desnaturalizada) (Reithel, J. F. (1962) "The dissociation and association of protein structures", Adv. Protein Chem. 18, 123). El tamaño de los agregados de proteínas se incrementa con una mayor concentración proteica, tal como ya se pudo mostrar para la ß- lactoglobulina (Roefs, S. P. F. M. , De Kruif, K. G. (1994) "A model for the denaturation and aggregation of ß+lactoglobulin" Eur. J. Biochem. 226, 883-889) . Las formulaciones de anticuerpos anti-EGFR según la invención descritas a continuación se caracterizan sorprendentemente por una o varias ventajas, seleccionadas de: alta concentración de proteínas, gran estabilidad, escasa tendencia a la agregación, escasa viscosidad, alta pureza, ausencia de agentes farmacéuticamente nocivos y, con ello, gran seguridad, buena tolerancia y posibilidad de aplicación directa. Los procedimientos de preparación según la invención que se describen a continuación se caracterizan sorprendentemente por una o varias ventajas, seleccionadas de: simpleza, ahorro en tiempo y costos, uso de agentes farmacéuticamente inocuos, altos rendimientos. De esta manera, los procedimientos según la invención son, con preferencia, esencialmente más sencillos en la realización, ahorran más tiempo y son más eficaces en cuanto a costos que las técnicas descritas en la bibliografía, ya que se obtienen sorprendentemente formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas estables por ultrafiltración que presentan las ventajas antes mencionadas.

Por ello, son objeto de la invención procedimientos para preparar formulaciones líquidas altamente concentradas que contienen al menos un anticuerpo anti-EGFR y/o una de sus variantes y/o fragmentos por ultrafiltración. Los procedimientos según la invención se caracterizan en especial porgue las formulaciones líquidas altamente concentradas obtenidas presentan un contenido de al menos un anticuerpo anti-EGFR de 10 - 250 mg/ml, preferentemente de 50 - 180 mg/ml, con preferencia especial de 100 - 150 mg/ml. Además, los procedimientos según la invención se caracterizan porque los anticuerpos anti-EGFR son monoclonales y tienen origen murino o humano, preferentemente origen murino, y son quiméricos o humanizados. Se prefieren en especial los anticuerpos anti-EGFR Mab C225 (Cetuximab) o Mab h425 (EMD72000) y/o sus variantes y/o fragmentos. Procedimientos de ultrafiltración según la invención son procedimientos de ultrafiltración tales como ultrafiltración bajo agitación y filtración de flujo tangencial (TFF) .

La ultrafiltración de los anticuerpos según la invención se lleva a cabo preferentemente en un sistema buffer apropiado, es decir que no es necesaria una estabilización de las soluciones de reacción tales como, por ejemplo, por detergentes . El uso de detergentes en preparaciones para la aplicación parenteral debe evitarse o minimizarse en general, ya que de ellos surge un potencial tóxico e inmunogénico considerable (Sweetana S. & Akers M. J. (1996) Solubility principies and practices for parenteral drug dosage form development. PDA J. Pharm. Sci. Technol. 50, 330-342) y pueden llevar también a la modificación de la estructura secundaria de las proteínas (Vermeer A. W. P. & Norde W. (2000) The influence of the binding of low molecular weight surfactants on the thermal stability and secondary structure of igG. Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspeets 161, 139-150) . Además, la realización del procedimiento de una ultrafiltración de formulaciones con contenido de detergentes se hace difícil, ya que, debido a una posible formación de micelas del detergente se puede producir una acumulación desventajosa y descontrolada del detergente en el producto. Respecto de los anticuerpos anti-EGFR según la invención y en el marco de la presente invención, por "biológicamente activo", "nativo" y "eficaz" se entiende que los anticuerpos anti-EGFR según la invención también pueden ejercer su acción biológica después de convertirse en formulaciones según la invención, en especial la unión con EGFR, inhibición de la unión de ligandos, en especial EGF, con EGFR, modulación, en especial inhibición de la transducción de señales mediadas por EGFR y prevención o terapia de enfermedades mediadas por EGFR. Anticuerpos anti-EGFR: Con preferencia, los anticuerpos anti-EGFR de acuerdo con la invención son monoclonales y de origen murino o humano; con particular preferencia son de origen murino y son quiméricos o humanizados. En el caso del anticuerpo dirigido contra el receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) se trata, con particular preferencia, de Mab C225 (cetuximab) o Mab h.425 (EMD 72000) y/o sus variantes o fragmentos. Otros anticuerpos dirigidos contra EGFR se. describen, por ejemplo, en el documento EP 0586002, así como en J. Nati . Cáncer Inst. 1993, 85: 27-33 (Mab 528) . Mab C225 (Cetuximab, Erbitux™) : Mab C225 (Cetuximab) es un anticuerpo clínicamente probado que se une al receptor EGF. Mab C225 (Cetuximab) es un anticuerpo quimérico cuyas regiones variables son de origen murino y cuyas regiones constantes son de origen humano. Fue descrito por primera vez por Naramura et al., Cáncer Immunol . Immunotherapy 1993, 37: 343-349, así como en el documento WO 96/40210 Al.

Mab h425 (EMD 72000) : Mab h425 (EMD 72000) es un anticuerpo humanizado de monoclonal (Mab) obtenido del anticuerpo anti-EGFR murino 425 (Mab 425) (documento EP 0531472) . El anticuerpo monoclonal murino Mab 425 se desarrolló en la línea celular de carcinoma humano A431, dado que se une aquí con un epitopo extracelular del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) . Se halló que inhibe la unión de EGF (Murthy et al., 1987) . Se observó aumento de la expresión de EGFR en tejidos malignos provenientes de diversas fuentes y, en consecuencia, Mab 425 es un posible ingrediente activo para el diagnóstico y el tratamiento terapéutico de tumores humanos. En consecuencia, se halló que Mab 425 media la citotoxicidad tumoral in vitro y suprime el crecimiento tumoral de líneas celulares de carcinomas epidermoides y colorrectales in vi tro (Rodeck .et al., 1987). Además, se demostró que Mab 425 se une a xenoinjertos de gliomas malignos humanos en ratones (Takahashi et al., 1987). Sus formas humanizadas y quiméricas se describen, por ejemplo, en el documento EP 0531472 Kettleborough et al., Protein Engineering 1991, 4: 773-783 Bier et al., Cáncer Chemother. Pharmacol. 2001, 47: 519-524 Bier et al., Cáncer Immunol. Immunother 1998, 46: 167-173. En este caso, Mab h425 (EMD 72000) es un anticuerpo humanizado (h.425) en fase clínica I/II, cuya región constante se compone de una cadena K y una cadena ?-1 humana (documento EP 0531472) .

Los anticuerpos humanos anti-EGFR se pueden preparar mediante tecnología XenoMouse, según se describe en los documentos WO 9110741, WO 9402602 y'WO 96/33735. Un anticuerpo sometido a estudios clínicos y preparado mediante esta tecnología es, por ejemplo, ABX-EGF (Abgenix. Crit. Rev. Oncol. Hematol. 2001. 38: 17-23; Cáncer Research 1999, 59: 1236-43) . Anticuerpo : Anticuerpo o inmunoglobulina se usan en el sentido más amplio, en el marco de la presente invención, y se refiere, en particular, a anticuerpos policlonales y anticuerpos multiespecífieos (por ejemplo, anticuerpos biespecíficos) y, con particular preferencia, a anticuerpos monoclonales intactos (Mab) que son biológicamente activos, y sus variantes y fragmentos . El término también abarca heteroanticuerpos que consisten en dos o más anticuerpos o sus fragmentos y/o tienen distintas especificidades de unión, y se unen entre sí. En función de la secuencia de aminoácidos de sus regiones constantes, los anticuerpos se pueden asignar a distintas clases de anticuerpo (inmunoglobulina) : IgA, IgD, IgE, IgG e IgM. Varios de ellos se pueden subdividir en subclases (isotipos), por ejemplo IgGl, IgG2, IgG3 , IgG4, IgAl e IgA2.

Por lo general, los anticuerpos tienen un peso molecular de aproximadamente 150 kDa y constan de dos cadenas livianas idénticas (L) y dos cadenas pesadas idénticas (H) . Los anticuerpos monoclonales se obtienen de una población de células homogéneas. Son muy específicas y están dirigidas contra un único epitopo, mientras que los anticuerpos policlonales cubren distintos "anticuerpos, dirigidos contra diversos epitopos. Los procedimientos para la preparación de anticuerpos monoclonales incluyen, por ejemplo, el método del hibridoma descrito por Kohier y Milstein (Nature 256, 495 (1975)) y en Burdon et al., (1985) "Monoclonal Antibody Technology, The Production and Characterization of Rodent and Human Hybridomas", eds., Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology, Volume 13, Elsevier Science Publishers, Amsterdam. Se pueden preparar, en particular, mediante técnicas conocidas de ADN recombinante (véase, por ejemplo, el documento US 4816567) . Los anticuerpos monoclonales también se pueden aislar de bibliotecas de fagos de anticuerpos, por ejemplo con la ayuda de las técnicas descritas en Clackson et al. (Nature , 352: 624-628 (1991)) y Marks et al. (J. Mol. Biol, 222: 58, 1-597(1991)). Variantes y fragmentos : En el caso de las variantes (muteínas) de los anticuerpos se trata de proteínas estructuralmente relacionadas, por ejemplo, aquellas que se pueden obtener por modificación de la secuencia primaria (secuencia de aminoácidos) , por glucoingeniería (variantes de los sitios o estructuras de glucosilación, también proteínas desglucosiladas) , por PEGilación, por preparación en células huésped modificadas o por otras técnicas . Las variantes de acuerdo con la invención no se restringen en este caso a los ejemplos anteriores, sino que, en cambio, incluyen todas las variantes de los anticuerpos de acuerdo con la invención que son conocidos por el experto en el arte. En el caso de los fragmentos (segmentos parciales) de anticuerpos se trata de productos de escisión de los anticuerpos obtenidos, por ejemplo, por digestión enzimática limitada con la ayuda de papaína, pepsina y plasmina o por preparación de los segmentos parciales mediante ingeniería genética. Son segmentos parciales típicos, por ejemplo, el fragmento bivalente F(ab')2/ el fragmento monovalente Fab y el fragmento Fc (Lottspeich F., H. Zorbas (ed.). Bioanalytik, Heidelberg; Berlín: Spektrum Akademischer Verlag GmbH, (1998) pág. 1035) . Los fragmentos de acuerdo con la invención no se restringen a los ejemplos anteriores, sino que, en cambio, incluyen todos los fragmentos de anticuerpos de acuerdo con la invención, conocidos por el experto en el arte. Preparación farmacéutica: Los términos formulación farmacéutica y preparación farmacéutica se usan como sinónimos en el marco de la presente invención. Tal como se usa en la presente, "farmacéuticamente tolerable" se refiere a medicamentos, excipientes, coadyuvantes, estabilizantes, solventes y otros agentes que facilitan la administración de las preparaciones farmacéuticas así obtenidas a un mamífero, sin efectos secundarios fisiológicos indeseados, tales como náuseas, mareos, problemas digestivos o similares . En las preparaciones farmacéuticas para la administración parenteral, se requiere isotonicidad, euhidria, así como tolerabilidad y seguridad de la formulación (baja toxicidad) , de los coadyuvantes empleados y del envase primario. Sorprendentemente, las formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR de acuerdo con la invención tienen preferentemente . la ventaja de que el uso directo es posible, dado que se utilizan agentes fisiológicamente aceptables. De esta manera, la preparación de formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas según la invención preferentemente con un elevado rendimiento simultáneo de proteína de alta pureza nativa y farmacéuticamente inocua es, con preferencia, simple, ahorra tiempo y de bajo costo. En el caso de la ultrafiltración se trata de un procedimiento semipermeable de membrana operado a presión para separar materiales disueltos y suspendidos. El principio de separación se basa en el tamaño y la dimensión de la molécula, es decir, sustancias que son más pequeñas que el tamaño de los poros llegan al filtrado (permeado) , mientras que las sustancias que son más grandes que el tamaño del poro quedan en el retentado (concentrado) . La fuerza necesaria para efectuar la separación se puede aplicar, por ejemplo, por fuerzas centrífugas, una fuente de presión de gas (por ejemplo, nitrógeno) o una bomba de membrana. Con preferencia, se pueden preparar formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas según la invención concentrando una solución que contiene anticuerpos anti-EGFR por medio de un procedimiento de ultrafiltración. Para ello, se vierte convenientemente una solución con una concentración definida de anticuerpos anti- EGFR según la invención (por ejemplo para C225: 0,01 a 150 mg/ml, con preferencia 2 a 100 mg/ml, con preferencia especial aproximadamente 20 mg/ml, para EMD 72000: 0,01 a 150 mg/ml, con preferencia 5 a 100 mg/ml, con preferencia especial aproximadamente 20 mg/ml) , tal como se obtiene en su preparación, en una unidad de ultrafiltración y se somete, bajo condiciones de presión controladas y definidas, a un procedimiento de concentración. Si el anticuerpo está presente como sustancia sólida, por ejemplo como liofilizado, la formulación líquida altamente concentrada según la . invención se puede preparar disolviendo primero anticuerpos anti-EGFR según la invención en agua o una solución acuosa que contiene uno o varios otros coadyuvantes y luego exponiéndola a un procedimiento de ultrafiltración. El producto obtenido por medio del proceso de ultrafiltración se puede estabilizar luego agregando los coadyuvantes detallados más abajo. La solución así obtenida que contiene el correspondiente anticuerpo se ajusta a un valor pH de 4 a 10, preferentemente un valor pH de 5 a 9 , se filtra bajo esterilidad y eventualmente según necesidad se convierte en una forma sólida a través de una etapa de liofilización posterior para su estabilización. El orden de la adición de los diferentes coadyuvantes o el anticuerpo según la invención es ampliamente independiente del procedimiento de preparación y queda a discreción del experto . Los' anticuerpos anti-EGFR están presentes en las formulaciones líquidas altamente concentradas según la invención con preferencia de forma biológicamente activa y, en los procedimientos según la invención, con preferencia no se produce una desnaturalización de los anticuerpos. De esta manera, se conserva preferentemente la eficacia biológica de la proteína. En los compuestos según la invención se pueden utilizar, por ejemplo, polietersulfona (PES) o celulosa regenerada como membranas de ultrafiltración: el corte teóricamente imaginable está en el intervalo de 5 a 500 kDa, con preferencia de 10 a 100 kDa, con preferencia especial de 30 a 50 kDa. Las fuerzas centrífugas aplicadas en los tubitos de centrífuga Ultrafree (Millipore) varían en el intervalo de 1 - 20000*g, con preferencia en el intervalo de 1000 - 12000*g, con preferencia especial en 2000*g. La presión del gas aplicada en el caso de la celda de agitación Amicon (Millipore) varía en el intervalo de 0,1 a 5 psi, preferentemente es de 4 psi . La presión inicial aplicada en la instalación Labscale-TFF (Millipore) varía en el intervalo de 0,1 a 85 psi, preferentemente en el intervalo de 10 a 30 psi, con preferencia especial es de 20 psi. La presión final aplicada en la instalación Labscale-TFF (Millipore) oscila en el intervalo de 0,1 a 85 psi, preferentemente en el intervalo de 5 a 20 psi, con preferencia especial es de 10 psi. En el procedimiento según la invención, se pueden utilizar por ejemplo los siguientes buffers: buffer de fosfato: fosfato de Na (o K) ; posible pH aproximadamente de 6,0 - 8,2; buffer de citrato: citrato de Na o ácido cítrico, posible pH aproximadamente de 2,2 - 6,5, buffer de succinato, pH aproximadamente de 4,8 - 6,3, buffer de acetato, por ejemplo acetato de sodio, pH aproximadamente de 2,5 - 6,0; buffer de histidina, pH aproximadamente de 6,0 - 7,8; ácido glutámico pH 8,0 a 10,2; glicina (N,N-bis (2-hidroxietil) glicina) , pH aproximadamente de 8,6 a 10,6; buffer de glicinato, pH aproximadamente de 6,5 - 7,5; imidazol, pH de 6,2 a 7,8; cloruro de potasio, pH aproximadamente de 1,0 a 2,2; buffer de lactato, pH aproximadamente de 3,0 - 6,0; buffer de maleato, pH aproximadamente de 2,5 - 5,0; buffer de tartrato, pH aproximadamente de 3,0 - 5,0; Tris: pH aproximadamente de 6,8 - 7,7; buffer de fosfato-citrato. También se puede pensar en la adición de agentes isotónicos para la isotonización (por ejemplo, Cl de Na (o K) o también otras sales) . En los procedimientos según la invención se pueden utilizar los buffers mencionados por ejemplo en las siguientes concentraciones: 1 mM a 200 mM, con preferencia 2 - 20 mM, con preferencia especial aproximadamente 10 mM. Con preferencia se pueden utilizar los siguientes intervalos de pH: pH 4 - 10, se prefiere pH = IEP +/- 2 unidades de pH (2 unidades de pH cercanas al punto isoeléctrico de la proteína) . Con preferencia se pueden utilizar los siguientes agentes isotónicos (concentraciones usuales) : cloruro de sodio aproximadamente 5 mM - 305 mM; cloruro de potasio; glucosa; glicerina; dextrosa 4-5,5 mM; sulfato de sodio 1 - 1,6 mM. Con preferencia, se pueden utilizar las siguientes sustancias para reducir la viscosidad: cloruro de sodio, clorhidrato de arginina, tiocianato de sodio, tiocianato de amonio, sulfato de amonio, cloruro de amonio, cloruro de calcio, cloruro de cinc, acetato de sodio. Preferentemente se pueden utilizar los siguientes estabilizantes : 1) aminoácidos (aproximadamente 1 - 100 mg/ml, con preferencia especial 3 - 10 mg/ml, como clorhidrato) arginina, ornitina, lisina, histidina, ácido glutámico, ácido aspártico, isoleucina, leucina, alanina, fenilalanina, tirosina, triptófano, metionina, serina, prolina. 2) Azúcar y alcoholes de azúcar (aproximadamente 1 - 200 mg/ml, con preferencia especial 30 - 65 mg/ml) sacarosa, lactosa, glucosa, mañosa, maltosa, galactosa, fructosa, sorbosa, rafinosa, trehalosa, glucosamina, N-metilglucosamina, galactosamina, ácido neurámico. 3 ) Antioxidantes bisulfito de acetona sódico 0,2 %, ácido ascórbico 0,01 %, éster de ácido ascórbico 0,015 %, butilhidroxianisol (BHA) 0,02 %, butilhidroxitolueno (BHT) 0,02 %, cisteína 0,5 %, ácido nordihidroguayarético (NDGA) 0,01 %, monotioglicerol 0,5 %, bisulfito de sodio 0,15 %, metabisulfito de sodio 0,2 %, tocoferol 0,5 %, glutatión 0,1 %. 4) Conservantes m-cresol aproximadamente 0,1 - 0,3 %, clorocresol aproximadamente 0,1 - 0,3 %, fenol aproximadamente 0,5 %, alcohol bencílico aproximadamente 1,0 - 2,0 %, metilparabeno aproximadamente 0,2 %, propilparabeno aproximadamente 0,02 %, butilparabeno aproximadamente 0,015 %, clorobutanol aproximadamente 0,25 - 0,5 %, mercurinitrato de fenilo aproximadamente 0,002 %, mercuriacetato de fenilo aproximadamente 0,002 %, timersal aproximadamente 0,01 - 0,02 %, cloruro de benzalconio aproximadamente 0,01 %, cloruro de bencetonio aproximadamente 0,01 %. 5) Ciclodextrinas por ej emplo, hidroxipropil-ß-ciclodextrina, sulfobutiletil-ß- ciclodextrina, ?-ciclodextrina . 6 ) Albúminas albúmina de suero humano (HSA) , albúmina de suero bovino (BSA) : " 7) Alcoholes polihídricos glicerol, etanol, manitol. 8) Sales sales de acetato (por ejemplo, acetato de sodio) , cloruro de magnesio, cloruro de calcio, trometamina, EDTA (por ejemplo, EDTA sódico) . La invención también comprende todos los hidratos, sales y derivados de los agentes antes mencionados, que con conocidos e imaginables por el experto en el arte. Otro objeto de la invención son formulaciones líquidas altamente concentradas que contienen al menos un anticuerpo anti-EGFR y/o una de sus variantes y/o fragmentos. Estas formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas pueden ser preparadas por medio de los procedimientos de ultrafiltración descritos con anterioridad. Otros procedimientos concebibles para la concentración son procedimientos cromatográficos tales como, por ejemplo, cromatografía por exclusión de tamaño (por ejemplo, filtración por gel) , cromatografía por afinidad (por ejemplo, cromatografía en proteína A) o cromatografía por intercambio iónico, procedimiento de separación en membrana tales como, por ejemplo, diálisis, electrodiálisis, microfiltración, osmosis inversa, procedimientos electroforéticos o procedimientos de secado tales como, por ejemplo, secado con gas nitrógeno, secado en horno de vacío, liofilización, lavado en solventes orgánicos y posterior secado al aire, secado en lecho líquido, secado en lecho fluido, secado por rocío, secado por rodillo, secado en capas, secado al aire a temperatura ambiente y posterior reconstitución en un escaso volumen de solventes . Las formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas se caracterizan en especial porque presentan un contenido de al menos un anticuerpo anti-EGFR de 10 - 250 mg/ml, preferentemente de 50 - 180 mg/ml, con preferencia especial de 100 - 150 mg/ml. Las formulaciones líquidas altamente concentradas según la invención se caracterizan porque los anticuerpos anti-EGFR son monoclonales y tienen origen murino o humano, con preferencia origen murino, y son quiméricos o humanizados. Se prefieren especialmente los anticuerpos anti-EGFR Mab C225 (Cetuximab) o Mab h425 (EMD72000) y/o sus variantes y/o fragmentos . Otro objeto de la invención son formulaciones líquidas altamente concentradas que contienen al menos un anticuerpo anti-EGFR y/o una de sus variantes y/o fragmentos que se pueden obtener por medio de procedimientos conformes a la invención, es decir mediante los procedimientos de ultrafiltración descritos con anterioridad. Además, son objeto de la invención las formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas según la invención como medicamentos estables en almacenamiento. Las formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas según la invención pueden contener, además de los anticuerpos según la invención, eventualmente excipientes y/o coadyuvantes y/o otros principios activos farmacéuticos . Con preferencia, los procedimientos según la invención permiten preparar formulaciones altamente concentradas, sin que se produzcan agregaciones de los anticuerpos no deseados y desfavorables según la invención. De esta manera, se pueden preparar soluciones listas para aplicar por medio de los procedimientos conformes a la invención con un gran contenido de principios activos. Las formulaciones altamente concentradas de ingredientes activos de proteínas han tenido recientemente un gran- aumento . La mayoría de los anticuerpos empleados para la terapia se usan en dosis en la región de mg/kg. Una dosis elevada y los pequeños volúmenes que se deben administrar (por ejemplo de aproximadamente 1 a 1,5 ml para la administración por vía subcutánea) demuestran la demanda de preparaciones proteicas altamente concentradas, con concentraciones superiores a 100 mg/ml. Además, las formulaciones proteicas altamente concentradas tienen considerables ventajas en los ensayos preclínicos para la investigación de la aceptabilidad y la eficacia in vi tro e in vivo (en un modelo animal) , en ensayos clínicos para la investigación de la aceptabilidad y la eficacia en humanos y en el uso clínico del producto (en particular para la administración por vía subcutánea) . Sus ventajas consisten, en particular, en que se usa un volumen pequeño de la preparación. En contraste con la infusión o la inyección de medicamentos proteicos con una concentración relativamente baja, esto permite, por ejemplo, la administración por vía subcutánea de medicamentos proteicos para el paciente. La administración por vía subcutánea de medicamentos proteicos puede deberse a diversas causas. Por ejemplo, se puede desear la dirección a un blanco específico en conexión con una "ventana terapéutica". Además, la administración por vía subcutánea tiene la ventaja de que el paciente puede hacerse cargo de la administración por sí mismo, sin depender de personal médico. El ejemplo de la insulina muestra con claridad estas ventajas. Sin embargo, dado que las inyecciones para la administración por vía subcutánea tienen un máximo de 1-1,5 ml, a menudo se necesitan formulaciones proteicas altamente concentradas, que contienen más de 100 mg/ml. Sorprendentemente, se pueden obtener formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas con la ayuda de procedimientos según la invención, que no presentan las desventajas antes mencionadas con concentraciones proteicas de 10 - 250 mg/ml, preferentemente de 50 - 180 mg/ml, con preferencia especial de 100 - 150 mg/ml . El límite de las formulaciones altamente concentradas de inmunoglobulinas es normalmente de 2-50 mg/ml (Humira®) en formulaciones líquidas de anticuerpos listas para usar. Con los procedimientos de acuerdo con la invención, sin embargo, se pueden preparar formulaciones claramente más concentradas y aún estables, lo cual era inesperado. En consecuencia, por medio de los procedimientos según la invención se pueden obtener formulaciones de anticuerpos estables altamente concentradas que tienen menor viscosidad y tendencia a la agregación en comparación con las formulaciones de anticuerpos líquidas altamente concentradas conocidas, lo que simplifica así el manejo en el caso de la administración por vía parenteral . De modo ventajoso, a partir de las formulaciones según la invención se pueden preparar soluciones con contenido de anticuerpos con un valor de pH de 4 a 10, con preferencia con un valor de pH de 5 a 9, y una osmolalidad de 250 a 350 mOsmol/kg. Las formulaciones según la invención se pueden administrar entonces de forma directa, sustancialmente sin dolor, por vía intravenosa, intraarterial y también subcutánea. Además, la preparación también se puede agregar a soluciones para infusión, tales como, por ejemplo, solución de glucosa, solución fisiológica isotónica o solución de Ringer, que también puede contener otros ingredientes activos, lo que permite la administración de mayores cantidades de ingredientes activos . Las formulaciones de acuerdo con la invención son fisiológicamente bien toleradas, fáciles de preparar, se pueden administrar con precisión y son preferentemente estables con respecto al contenido, productos de descomposición y agregados durante el almacenamiento y transporte y durante múltiples procesos de congelación y descongelación. Con preferencia, se pueden almacenar de forma estable durante un período prolongado a temperatura de refrigerador (2-8°C) y a temperatura ambiente (23-27°C) y 60% de humedad relativa ambiente (HR) . Con preferencia, las formulaciones de acuerdo con la invención son comparativamente estables con temperaturas y humedades ambiente elevadas . El término "cantidad efectiva" denota la cantidad de un medicamento o de un ingrediente farmacéutico activo que causa una respuesta biológica o médica en un tejido, sistema, animal o humano que busca o es de interés, por ejemplo, para un investigador o médico. Además, el término "cantidad terapéuticamente efectiva" denota una cantidad que, " comparada con un sujeto correspondiente que no recibió dicha cantidad, tiene las siguientes consecuencias: mejor tratamiento, curación, prevención o eliminación de una enfermedad, síndrome, estado patológico, molestia, trastorno o prevención de efectos secundarios o también la reducción del progreso de una enfermedad, molestia o trastorno. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" también abarca las cantidades que son efectivas para aumentar la función fisiológica normal. Los medicamentos se pueden administrar en forma de dosis unitarias que comprenden una cantidad predeterminada de ingrediente activo por unidad de dosis. Una unidad de este tipo puede comprender, por ejemplo, de 0,5 mg a 1 g, preferentemente de 1 mg a 800 mg, de un ingrediente activo de acuerdo con la invención, según el estado patológico tratado, la vía de administración y la edad, el peso y la salud del paciente. Las formulaciones unitarias de preferencia son las que comprenden una dosis diaria o subdosis, según se indicó antes, o una de sus fracciones de un ingrediente activo. Además, este tipo de medicamentos se puede preparar por medio de uno de los procesos generalmente conocidos en el sector farmacéutico . Los medicamentos se pueden adaptar para la administración por cualquier vía apropiada, por ejemplo por vía oral (incluyendo bucal o sublingual) , rectal, pulmonar, nasal, tópica (incluyendo bucal, sublingual o transdérmica), vaginal o parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa o intradérmica) . Los medicamentos de este tipo se pueden preparar mediante todos los procesos conocidos en el sector farmacéutico, por ejemplo, por combinación del ingrediente activo con el o los excipientes o coadyuvantes . La administración parenteral es preferentemente adecuada para la administración de los medicamentos de acuerdo con la invención. En el caso de la administración parenteral, se prefieren particularmente las administraciones intravenosa, subcutánea o intradérmica. En el caso de la administración intravenosa, la inyección se puede aplicar directamente o también como adición a soluciones por infusión. Los medicamentos según la invención para la administración por vía subcutánea o intradérmica son particularmente adecuados, dado que, con la ayuda de formulaciones líquidas altamente concentradas de acuerdo con la invención, se pueden obtener pequeños volúmenes que se pueden administrar, requeridos para la administración subcutánea. La administración por vía subcutánea tiene la ventaja de que el paciente se puede administrar a sí mismo el medicamento, sin necesidad de ayuda médica experta. Las formas sólidas de los anticuerpos anti-EGFR de acuerdo con la invención también son adecuados para la preparación de medicamentos para administrar por vía parenteral con liberación controlada, sostenida y/o retardada del ingrediente activo, por ejemplo también para la preparación de formulaciones de liberación retardada que son ventajosas para el paciente, ya que es necesaria una aplicación sólo en grandes intervalos . Las preparaciones farmacéuticas de acuerdo con la invención también se pueden inyectar directamente en el tumor y, así, desarrollar su efecto directamente en el sitio de acción según se pretende. Los medicamentos adaptados para la administración parenteral incluyen soluciones para inyección acuosas y no acuosas estériles que comprenden antioxidantes, buffers, bacteriostáticos y solutos, a través de los cuales la formulación es isotónica con la sangre del receptor que debe ser tratado; así como suspensiones estériles acuosas y no acuosas, que pueden comprender medios de suspensión y espesantes. Las formulaciones se pueden administrar en contenedores de dosis única o múltiple, por ejemplo ampollas selladas y viales, y almacenar en estado liofilizado, por lo que sólo es necesario agregar el portador líquido estéril, por ejemplo agua para inyecciones, inmediatamente antes de usar. Las soluciones y suspensiones para inyección preparadas de acuerdo con la formulación se pueden producir a partir de polvos estériles, granulados y comprimidos. Las formulaciones de anticuerpos anti-EGFR de acuerdo con la invención también se pueden administrar en forma de sistemas de suministro de liposomas, tales como, por ejemplo, pequeñas vesículas unilaminares, grandes vesículas unilaminares y vesículas multilaminares . Los liposomas se pueden formar a partir de diversos fosfolípidos tales como, por ejemplo, colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas . Los medicamentos adaptados para la administración tópica se pueden formular como ungüentos, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, rocíos, aerosoles o aceites, y se incorporan en las formulaciones de acuerdo con la invención. Para el tratamiento del ojo o de otros tejidos externos, por ejemplo la boca y la piel, las formulaciones se aplican preferentemente como ungüento tópico o crema. En el caso de la formulación como ungüento, las formulaciones según la invención se pueden incorporar en una base de crema con parafina o miscible con agua. De modo alternativo, una formulación según la invención se puede formular para dar una crema con una base de crema de aceite en agua o una base de agua en aceite. Los medicamentos adaptados para la administración tópica del ojo incluyen gotas oftálmicas. Los medicamentos adaptados para la administración rectal se pueden suministrar en forma de supositorios o enemas. Los medicamentos adaptados para la administración por inhalación abarcan polvos' o nieblas finamente particulados que pueden ser producidos mediante diversos tipos de dispensadores a presión con aerosoles, atomizadores o insufladores . Los medicamentos adaptados a la administración vaginal se pueden suministrar como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones en aerosol. Es obvio que, además de los constituyentes particularmente mencionados con anterioridad, los medicamentos de acuerdo con la invención también pueden comprender otros agentes habituales en el sector especializado con relación al tipo particular de formulación farmacéutica. Otro objeto de la invención son kits compuestos por paquetes separados de a) una formulación según la invención que contiene una cantidad efectiva de un anticuerpo anti-EGFR, con preferencia un anticuerpo anti-EGFR monoclonal, con particular preferencia de Mab C225 (Cetuximab) o Mab h425 (EMD 72000) y/o de sus variantes o fragmentos y b) una formulación que contiene una cantidad efectiva de otro ingrediente activo medicamentoso . El kit contiene recipientes adecuados, tales como cajas o cartones, frascos, bolsas o ampollas individuales. El kit puede contener, por ejemplo, ampollas separadas, donde hay una formulación efectiva de un anticuerpo anti-EGFR según la invención y una formulación de otro ingrediente activo medicamentoso en forma disuelta o liofilizada. Una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-EGFR de acuerdo con la invención depende de varios factores, tales como^ por ejemplo, la edad y el peso del paciente, el estado patológico preciso que requiere tratamiento y su gravedad, la naturaleza de la formulación y la vía de administración, y en última instancia es determinada por el médico o veterinario tratante. No obstante, una cantidad efectiva de un anticuerpo anti-EGFR de acuerdo con la invención para el tratamiento de un crecimiento neoplásico, por ejemplo cáncer intestinal o de mama, oscila generalmente en el rango de 0,1 a 100 mg/kg de peso corporal del receptor (mamífero) por día y, en particular, típicamente en el rango del 1 a 10 mg/kg de peso corporal por día. Por lo tanto, la cantidad real por día para un mamífero adulto que pesa 70 kg sería usualmente de entre 70 y 700 mg, donde esta cantidad se puede dar como dosis única por día o usualmente en una serie de subdosis (tales como, por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco o seis) por día, de modo que la dosis diaria total sea la misma. El título de anticuerpo adecuado se determina mediante métodos conocidos por el especialista en el arte. La dosis prevista para la administración suele ser suficiente para lograr la acción inhibidora del tumor buscada. No obstante, también se debe elegir la dosis más baja posible para no • tener efectos secundarios, tales como reacciones cruzadas, reacciones anafilácticas no deseadas, o similares. Los medicamentos de acuerdo con la invención se pueden usar, en particular, para la prevención y/o el tratamiento de enfermedades y estados patológicos . Otro objeto de la invención consiste, por ello, en el uso de formulaciones líquidas de anticuerpos anti-EGFR altamente concentradas según la invención para preparar un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de tumores y/o metástasis tumorales, en donde el tumor está seleccionado del grupo compuesto por tumor cerebral, tumor del tracto urogenital, tumor del sistema linfático, tumor de estómago, tumor de laringe, leucemia monocítica, adenocarcinoma de pulmón, carcinoma de pulmón de células pequeñas, cáncer de páncreas, glioblastoma y carcinoma de mama. Se pudo demostrar en diversos estudios in vi tro e in vivo que el bloqueo de EGFR por anticuerpos actúa contra los tumores en diversos niveles, por ejemplo por inhibición de la proliferación de células cancerosas, reducción de angiogénesis mediada por un tumor, inducción de apoptosis de células cancerosas y aumento de los efectos tóxicos de la radioterapia y la quimioterapia convencional. Los medicamentos que comprenden formulaciones de acuerdo con la invención son capaces de regular, modular o inhibir efectivamente EGFR y, por ello, se pueden emplear para la prevención y/o el tratamiento de enfermedades conectadas con la actividad de EGFR no regulada o alterada. En particular, las formulaciones de anticuerpos anti-EGFR de acuerdo con la invención pueden emplearse, en consecuencia, en el tratamiento de ciertas formas de cáncer y en enfermedades causadas por angiogénesis patológica, tales como retinopatía diabética o inflamaciones . En consecuencia, la invención también se refiere al uso de formulaciones de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades causadas, mediadas y/o propagadas por EGFR y/o por la transducción de señales mediadas por EGFR. Los medicamentos de acuerdo con la invención son particularmente adecuados para el tratamiento y/o la prevención del cáncer, incluyendo carcinomas sólidos tales como por ejemplo, carcinomas (por ejemplo de pulmón, páncreas, tiroides, vejiga o colon) , enfermedades mieloides (por ejemplo leucemia mieloide) o adenomas (por ejemplo adenoma colónico velludo) , angiogénesis patológica y migración de células metastáticas . Los medicamentos también son útiles para el tratamiento de inflamación crónica dependiente de la activación del complemento (Niculescu et al. (2002) Immunol Res., 24: 191-199) e inmunodeficiencia inducida por VIH-1 (virus de inmunodeficiencia humana tipo 1) (Popik et al. (1998) J Virol, 72: 6406-6413). Además, los presentes medicamentos son adecuados como ingredientes activos farmacéuticos para mamíferos, en particular los seres humanos, para el tratamiento de enfermedades inducidas por EGFR. El término "enfermedades inducidas por EGFR" se refiere a estados patológicos dependientes de la actividad de EGFR. EGFR interviene directa o indirectamente en las vías de transducción de señales de diversas actividades celulares, por ejemplo proliferación, adhesión y migración, así como diferenciación. Las enfermedades asociadas con la actividad de EGFR incluyen la proliferación de células tumorales, la neovascularización patológica que favorece el crecimiento de tumores sólidos, la neovascularización en el ojo (retinopatía diabética, degeneración macular asociada con la edad y similares) e inflamación (psoriasis, artritis reumatoidea y similares) . Las enfermedades analizadas aquí se suelen dividir en dos grupos : enfermedades hiperproliferativas y no hiperproliferativas. En este contexto, se consideran enfermedades no cancerosas: psoriasis, artritis, inflamaciones, endometriosis, cicatrización, hiperplasia benigna de próstata, enfermedades inmunológicas, enfermedades autoinmunes y enfermedades de inmunodeficiencia, de las cuales artritis, inflamación, enfermedades inmunológicas, enfermedades autoinmunes y enfermedades de inmunodeficiencia se suelen considerar enfermedades no hiperproliferativas. En este contexto, se consideran enfermedades cancerosas el cáncer de cerebro, cáncer de pulmón, cáncer del epitelio escamoso, cáncer de vejiga, cáncer de estómago, cáncer de páncreas, cáncer de hígado, cáncer de riñon, cáncer colorrectal, cáncer de mama, cáncer de cabeza, cáncer de cuello, cáncer de esófago, cáncer ginecológico, cáncer de tiroides, linfoma, leucemia crónica y leucemia aguda, y todos se suelen incluir en el grupo de enfermedades hiperproliferativas. En particular, el crecimiento de las células cancerosas y en particular el crecimiento de células cancerosas mediado directa o indirectamente por EGFR es una enfermedad que representa un objeto de la presente invención. Se puede demostrar que los medicamentos de acuerdo con la invención tienen acción antiproliferativa in vivo en un modelo de tumor de xenotrasplante. Los medicamentos de acuerdo con la invención se administran a un paciente con una enfermedad hiperproliferativa, por ejemplo para inhibir el desarrollo del tumor, para reducir la inflamación asociada a una enfermedad linfoproliferativa, para inhibir el rechazo a un trasplante o .el daño neurológico debido a la reparación tisular, etc. Los presentes medicamentos son útiles para fines preventivos o terapéuticos. Tal como se usa en la presente, el término "tratar" se usa como referencia tanto a la prevención de enfermedades como al tratamiento de las molestias existentes . La prevención de la proliferación se logra por la administración de los medicamentos de acuerdo con la invención antes del desarrollo de la enfermedad evidente, por ejemplo, para evitar el crecimiento del tumor, prevenir el crecimiento metastático, reducción de restenosis asociadas con la cirugía cardiovascular, etc. De modo alternativo, los medicamentos se usan para el tratamiento de enfermedades continuas al estabilizar o mejorar los síntomas clínicos del paciente. El huésped o paciente puede pertenecer a cualquier especie de mamífero, por ejemplo, una especie de primate, y en particular humanos; roedores, por ejemplo ratones, ratas y hámsteres; conejos; caballos, vacas, perros, gatos, etc. Los modelos animales son de interés para estudios de experimentación, pues proveen un modelo para el tratamiento de la enfermedad humana. La receptividad de cierta célula al tratamiento con los medicamentos de acuerdo con la invención se puede determinar mediante pruebas in vi tro . Típicamente, un cultivo de la célula se incuba con un medicamento de acuerdo con la invención con diferentes concentraciones durante un período suficiente para permitir que los ingredientes activos induzcan la muerte celular o inhiban la migración, por lo general entre aproximadamente una hora y una semana. Las pruebas in vi tro se -pueden llevar a cabo mediante células cultivadas provenientes de una muestra de biopsia. Luego se cuentan las células vitales remanentes después del tratamiento . La dosis varía según los medicamentos específicos utilizados, la enfermedad específica, el estado del paciente, etc. Típicamente, una dosis terapéutica es suficiente para reducir considerablemente la población celular indeseada en el tejido blanco, mientras se mantiene la vitalidad del paciente. Generalmente se continúa el tratamiento hasta obtener una reducción considerable, por ejemplo una reducción de al menos aproximadamente el 50 % del recuento celular específico, y se puede continuar hasta que esencialmente no se detecten células no deseadas en el organismo. Existen diversos sistemas de ensayo para la identificación de inhibidores de EGFR. En el ensayo de centelleo por proximidad (Sorg et al., J. of Biomolecular Screening, 2002, 7, 11-19) y el ensayo con placa flash se mide la fosforilación radiactiva de una proteína o péptido como sustrato, mediante ?ATP. En presencia de un compuesto inhibidor se puede detectar una señal radiactiva reducida o nula. Además, las tecnologías de transferencia de energía de resonancia fluorescente homogénea por resolución en el tiempo (HTR-FRET) y polarización de fluorescencia (FP) son útiles como métodos de ensayo (Sills et al., J. of Biomolecular Screening, 2002, 191- 214) . Otros métodos de ensayo no radiactivos por ELISA utilizan fosfo-anticuerpos específicos (fosfo-AC) . El fosfo-AC sólo se une al sustrato fosforilado. Esta unión se puede detectar mediante un segundo anticuerpo antioveja conjugado a peroxidasa por quimioluminiscencia (Ross et al., 2002, Biochem. J. , en imprenta, manuscrito BJ20020786) . Existen muchas enfermedades y estados patológicos asociados con la desregulación de la proliferación celular y la muerte celular (apoptosis) . Las enfermedades y los estados patológicos que se pueden tratar, prevenir o aliviar mediante medicamentos de acuerdo con la invención incluyen las enfermedades y los estados patológicos enumerados más adelante, pero sin limitaciones. Los medicamentos de acuerdo con la invención son útiles para el tratamiento y/o la prevención de varias enfermedades y estados patológicos diversos, que afectan la proliferación y/o la migración de células de la musculatura lisa y/o células inflamatorias en la capa íntima de un vaso, lo que da por resultado una restricción del flujo sanguíneo a través de dicho vaso, por ejemplo en lesiones oclusivas de la neoíntima. Entre las enfermedades oclusivas de vasos por trasplante se incluyen aterosclerosis, enfermedad vascular coronaria tras trasplante, estenosis de vena trasplantada, restenosis de prótesis perianastomótica, restenosis posterior a angioplastia o colocación de stents y similares . La presente invención se refiere al uso de medicamentos de acuerdo con la invención para el tratamiento o la prevención de cáncer. En consecuencia, la invención se refiere con particular preferencia al uso de formas sólidas de anticuerpos anti-EGFR de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento para el . tratamiento y/o la prevención de tumores y/o metástasis de tumores, donde el tumor se selecciona con particular preferencia del grupo formado por tumor de cerebro, tumor del tracto urogenital, tumor del sistema linfático, tumor de estómago, tumor de laringe, leucemia monocítica, adenocarcinoma de pulmón, carcinoma de pulmón de células pequeñas, cáncer de páncreas, glioblastoma y carcinoma de mama, sin restricciones. La invención también se refiere al uso de medicamentos de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades seleccionadas del grupo formado por enfermedades cancerosas que consiste en cáncer del epitelio escamoso, cáncer de vejiga, cáncer de estómago, cáncer de hígado, cáncer de riñon, cáncer colorrectal, cáncer de mama, cáncer de cabeza, cáncer de cuello, cáncer de esófago, cáncer ginecológico, cáncer de páncreas, linfoma, leucemia crónica y leucemia aguda. Los medicamentos de acuerdo con la invención se pueden administrar a pacientes para el tratamiento de cáncer. Los presentes medicamentos inhiben la angiogénesis tumoral y, así, influyen- sobre el desarrollo de los tumores (J. Rak et al., Cáncer Research, 55: 4575-4580, 1995) . Las propiedades inhibidoras de la angiogénesis de los medicamentos de acuerdo con la invención también son adecuados para el tratamiento de ciertas formas de ceguera asociada a la neovascularización de la retina. En consecuencia, la invención también se refiere al uso de formulaciones de anticuerpos anti-EGFR de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades causadas, mediadas y/o propagadas por angiogénesis . Una enfermedad de este tipo que incluye angiogénesis es una enfermedad ocular, tales como vascularización retiniana, retinopatía diabética, degeneración macular asociada con la edad y similares. En consecuencia, la invención también se refiere al uso de formulaciones de anticuerpos anti-EGFR de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades seleccionadas del grupo formado por vascularización retiniana, retinopatía diabética, degeneración macular asociada con la edad y/o enfermedades inflamatorias . La invención se refiere, además, al uso de formulaciones de anticuerpos anti-EGFR de acuerdo con la invención para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades seleccionadas del grupo formado por psoriasis, artritis reumatoidea, dermatitis de contacto, reacción de hipersensibilidad de tipo tardío, inflamaciones, endometriosis, cicatrización, hiperplasia benigna de próstata, enfermedades inmunológicas, enfermedades autoinmunes y enfermedades de inmunodeficiencia.

La invención también se refiere al uso de formulaciones de anticuerpos anti-EGFR de acuerdo con la invención para el tratamiento y/o la prevención de osteopatías seleccionadas del grupo formado por osteosarcoma, osteoartritis y raquitismo. Los medicamentos de acuerdo con la invención también se pueden usar para proporcionar efectos aditivos o sinérgicos en ciertas quimioterapias e irradiaciones existentes contra el cáncer, y/o se pueden usar para restablecer la eficacia de ciertas quimioterapias e irradiaciones existentes contra el cáncer. En consecuencia, la invención también se refiere al uso de formulaciones de anticuerpos anti-EGFR de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades en donde se administra una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-EGFR de acuerdo con la invención en combinación con un compuesto del grupo formado por 1) modulador de receptor de estrógeno, 2) modulador de receptor de andrógeno, 3) modulador de receptor de retinoide, 4) agente citotóxico, 5) agente antiproliferativo, 6) inhibidores de prenil proteína transferasa, 7) inhibidores de HMG-CoA reductasa, 8) inhibidores de proteasa de VIH, 9) inhibidores de la transcriptasa inversa, 10) inhibidores de receptor de factor de crecimiento y 11) inhibidores de angiogénesis. En consecuencia, la invención también se refiere al uso de formulaciones de anticuerpos anti-EGFR.. de acuerdo con la invención para la preparación de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de .enfermedades en donde se administra una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-EGFR de acuerdo con la invención en combinación con radioterapia y un compuesto del grupo formado por 1) modulador de receptor de estrógeno, 2) modulador de receptor de andrógeno, 3) modulador de receptor de retinoide 4) agente citotóxico, 5) agente antiproliferativo, 6) inhibidores de prenil proteína transferasa, 7) inhibidores de HMG-CoA reductasa, 8) inhibidores de proteasa de VIH, 9) inhibidores de transcriptasa inversa, 10) inhibidores de receptor de factor de crecimiento y 11) inhibidores de angiogénesis . En consecuencia, los medicamentos de acuerdo con la invención también se pueden administrar junto con otros agentes terapéuticos bien conocidos que se seleccionan por su particular utilidad contra la condición que se trata. Por ejemplo, en el caso de osteopatías, entre las combinaciones que serían favorables se incluyen las que contienen bisfosfonatos antirresortivos, tales como alendronato y risedronato, bloqueadores de integrina (como se definen más adelante) , tales como antagonistas vß3 , estrógenos conjugados utilizados en terapia de reemplazo hormonal, tales como Prempro®, Premarin® y Endometrion®; moduladores selectivos de receptor de estrógenos (SERM) , tales como raloxifeno, droloxifeno, CP-336,156 (Pfizer) y lasofoxifeno, inhibidores de catepsina K e inhibidores de bomba de protones ATP. Los presentes medicamentos también son adecuados para la combinación con agentes anticancerosos conocidos. Estos agentes anticancerosos conocidos incluyen los siguientes : moduladores de receptor de estrógeno, moduladores de receptor de andrógenos, moduladores de receptor de retinoide, agentes citotóxicos, agentes antiproliferativos, inhibidores de prenil proteína transferasa, inhibidores de HMG-CoA reductasa, inhibidores de proteasa de VIH, inhibidores de transcriptasa inversa, inhibidores de factor de crecimiento e inhibidores de angiogénesis . Los presentes compuestos son particularmente adecuados para administrar al mismo tiempo que la radioterapia.

"Moduladores de receptor de estrógenos" se refieren a compuestos que interfieren con o inhiben la unión del estrógeno al receptor, sin importar el mecanismo. Entre los ejemplos de moduladores de receptor de estrógenos se incluyen, sin limitaciones, tamoxifeno, raloxifeno, idoxifeno, LY353381, LY 117081, toremifeno, fulvestrant, 2 , 2-dimetilpropanoato de 4- [7- (2 , 2-dimetil-l-oxopropoxi-4-metil-2- [4- [2- (1- piperidinil) etoxi] fenil] -2H-l-benzopiran-3-il] fenilo, 4,4'- dihidroxibenzofenon-2 , 4-dinitrofenilhidrazona y SH646. "Moduladores de receptor de andrógeno" se refieren a compuestos que interfieren con o inhiben la unión de los andrógenos con el receptor, sin importar el mecanismo. Ejemplos de moduladores de receptor de andrógenos incluyen finasterida y otros inhibidores de 5a-reductasa, nilutamida, flutamida, bicalutamida, liarozol y acetato de abiraterona. "Moduladores de receptor de retinoide" se refieren a compuestos que interfieren con o inhiben la unión de los retinoides con el receptor, sin importar el mecanismo. Ejemplos de moduladores de receptor de retinoides incluyen bexaroteno, tretinoína, ácido 13-cis-retinoico, ácido 9-cis-retinoico, a-difluorometilornitina, ILX23-7553, trans-N-(4'-hidroxifenil) retinamida y N-4-carboxifenilretinamida . "Agentes citotóxicos" se refiere a compuestos que dan por resultado la muerte celular, principalmente por acción directa sobre la función celular, o inhiben o interfieren con la miosis celular, e incluyen agentes alquilantes, factores de necrosis tumoral, intercaladores, inhibidores de microtubulina e inhibidores de topoisomerasa. Ejemplos de agentes citotóxicos incluyen, sin limitacio- nes, tirapazimina, sertenef, caquectina, ifosfamida, tasonermina, lonidamina, carboplatino, altretamina, prednimustina, dibromodulcitol, ranimustina, fotemustina, nedaplatino, oxaliplatino, temozolomida, heptaplatino, estramustina, tosilato de improsulfano, trofosfamida, nimustina, cloruro de dibrospidio, pumitepa, lobaplatino, satraplatino, profiromiciña, cisplatino, irofulveno, dexifosfamida, cis-aminodicloro (2-metilpiridina)platino, bencilguanina, glufosfamida, GPXIOO, tetracloruro de (trans, trans, trans) -bis-mu- (hexan-1, 6-diamin) -mu- [diamin-platino (II) ]bis [diamin(cloro)platino (II)], diarizidinil- espermina, trióxido de arsénico, 1- (11-dodecilamino-lO-hidroxiundecil) -3 , 7-dimetilxantina, zorrubicina, idarrubicina, daunorrubicina, bisantreno, mitoxantrona, pirarrubicina, pinafida, ' valrubicina, amrubicina, antineoplastona, 3'-de-samino-3 '-morfolino-13-desoxo-lO-hidroxicarminomicina, anamicina, gal rrubíciña, elinafida, MEN10755 y 4-desmetoxi-3-desamino-3-azindinil-4-metilsulfonildaunorrubicina (véase el documento WO 00/50032). Ejemplos de inhibidores de microtubulina incluyen paclitaxel, sulfato de vindesina, 3 ' , 4 ' -dideshidro-4 ' -desoxi- 8 '-norvincaleucoblastina, docetaxol, rizoxina, dolastatina, isetionato de mivobulina, auristatina, cemadotina, RPR109881, BMS184476, vinflunina, criptoficina, 2, 3, 4, 5, 6-pentaf luoro-N- (3-fluoro-4-metoxifenil)bencensulfonamida, anhidrovinblastina, N,N-dimetil-L-valil-L-valil-N-metil-L-valil-L-prolil-L-prolin- t-butilamida, ' TDX258 y BMS188797. Algunos ejemplos de inhibidores de topoisomerasa son topotecano, hicaptamina, irinotecano, rubitecano, 6- etoxipropionil-3 ' , 4 ' -O-exobencilidencartreusina, 9-metoxi-N, N- dimetil-5-nitropirazolo[3 , 4,5-kl]acridin-2- (6H) -propanamina, l-amino-9-etil-5-fluoro-2 , 3-dihidro-9-hidroxi-4-metil-lH, 12H-benzo[de]-piran[3 ' , 4' :b, 7]-indolizino [1, 2b] -quinolin-10, 13- (9H, 15H) diona, lurtotecano, 7- [2- (N-isopropilamino) etil]- (2OS) camptotecina, B?P1350, B?PI1100, BN80915 , BN80942 , fosfato de etopósido, tenipósido, sobuzoxano, 2 '-dimetilamino-2 '-desoxietopósido, GL331, N- [2- (dimetilamino) etil] -9-hidroxi-5, 6-dimetil-6H-pirido (4, 3-b]carbazol-l-carboxamida, asulacrina, (5a, 5aB, 8aa, 9b) -9- [2- [N- [2- (dimetilamino) etil] -N-metilamino] etil] -5- [4-hidroxi-3 , 5-dimetoxifenil] -5,5a,6,8,8a,9-hexohidrofuro(3' ,4' : 6, 7) -nafto- (2 , 3-d) -1, 3-dioxol-6-ona, 2 , 3- (metilendioxi) -5-metil-7-hidroxi-8-metoxibenzo [c] fenantridinio, 6, 9-bis [ (2-aminoetil) amino]benzo [g] isoquinolin-5, 10-diona, 5- (3-aminopropilamino) -7 , 10-dihidroxi-2- (2-hidroxietilaminometil) -6H-pirazolo[4, 5, l-de]acridin-6-ona, N- [l- [2- (dietil- amino) etilamino] -7-metoxi-9-oxo-9H-tioxanten-4-ilmetil] formamida, N- (2- (dimetilamino) etil) acridin-4-carboxamida, 6— [ [2— (dimetilamino) etil] amino] -3-hidroxi-7HT-indeno [2 , l-c] quinolin- 7-ona y dimesna. "Agentes antiproliferativos" incluyen oligonucleótidos de ARN y ADN antisentido, tales como G3139, ODN698 , RVASKRAS, GEM231 e INX3001 , y antimetabolitos tales como enocitabina, carmofur, tegafur, pentostatina, doxifluridina, trimetrexato, fludarabina, capecitabina, galocitabina, ocfosfato de citarabina, hidrato de fosteabina de sodio, raltitrexed, paltitrexid, emitefur, tiazofurina, decitabina, nolatrexed, pemetrexed, nelzarabina, 2 '-desoxi-2 ' -metilidencitidina, 2'-fluorometilen-2 '-desoxicitidina, N- [5- (2 , 3-dihidrobenzofuril) sulfonil] -N' - (3 , 4-diclorofenil)urea, N6- (4-desoxi-4- [N2- [2 (E) , 4 (E) -tetradecadienoil] glicilamino] -L-glicero-B-L-manoheptopiranosil] adenina, aplidina, ecteinascidina, troxacitabina, ácido 4- [2-amino-4-oxo-4, 6, 7, 8-tetrahidro-3H-pirimidino [5 , 4-b] -1 , 4-tiazin-6-il- (S) -etil] -2 , 5-tienoil-L-glutámico, aminopterina, 5-fluorouracilo, alanosina, éster del ácido ll-acetil-8- (carbamoiloximetil) -4-formil-6-metoxi-14-oxa-l, 11-diazatetra-ciclo (7.4.1.0.0) tetradeca-2 ,4,6-trien-9-il-acético, swainsonina, lometrexol, dexrazoxano, metioninasa, 2 ' -ciano-2 ' -desoxi-N4-palmitoil-1-B-D-arabinofuranosil-citosina y tiosemicarbazona de 3-aminopiridin-2-carboxaldehído. "Agentes antiproliferativos" también incluyen anticuerpos monoclonales contra factores de crecimiento distintos de los enumerados antes bajo "inhibidores de angiogénesis", tales como trastuzumab, y genes supresores de tumores, tales como p53 que se pueden proveer a través de una transferencia génica mediada por virus recombinante (véase, por ejemplo, el documento US Na 6.069.134). Los medicamentos de acuerdo con la invención también se pueden administrar en combinación con todos los demás anticuerpos terapéuticos conocidos por los expertos en el arte o los ingredientes farmacéuticos activos que son adecuados en conexión con las enfermedades antes mencionadas .

Además, las formulaciones de anticuerpos anti-EGFR según la invención se pueden usar para el aislamiento y la investigación de la actividad o la expresión de EGFR. Además, son particularmente adecuadas para ser usadas en métodos de diagnóstico de enfermedades relacionadas con la actividad no regulada o alterada de EGFR. Con fines diagnósticos, los anticuerpos de acuerdo con la invención pueden recibir, por ejemplo, una marca radiactiva. Un método de rotulado preferido es el método de yodogénico (Fraker et al., 1978). Con fines diagnósticos, el anticuerpo usado con particular preferencia es el fragmento F(ab')2. Así se obtienen excelentes resultados, lo cual significa que no es necesario sustraer el fondo . Los fragmentos de este tipo se pueden preparar mediante métodos conocidos (por ejemplo, Herlyn et al., 1983). En general se realiza la digestión con pepsina en pH ácido, y los fragmentos se separan de la IgG no digerida y de los fragmentos de cadenas pesadas mediante cromatografía de proteína A en Sepharose™. Los anticuerpos anti-EGFR preferentemente exhiben en las formulaciones según la invención una actividad biológica ventajosa, que se detecta con facilidad en los ensayos de enzima, como se describe en los ejemplos. En los ensayos basados en enzimas de este tipo, los anticuerpos de acuerdo con la invención exhiben y causan preferentemente un efecto inhibitorio, que se suele documentar mediante valores de IC50 en un rango adecuado, preferentemente en el rango micromolar, y más preferentemente en el rango nanomolar . La determinación del tamaño de la proteína, la integridad estructural, la pureza o el patrón de glucosilación de los anticuerpos de acuerdo con la invención en formulaciones de acuerdo con la invención abarcan, sin restricciones, SE-HPLC, mapeo peptídico (digestión) , secuencia de N-terminal , SDS-PAGE, gel de gradiente TRIS/glicina (no reductor) , el método FTIR (espectro infrarrojo de transformación de Fourier) , CD (dicroísmo circular) , espectroscopia RAMAN, tinción de hidratos de carbono (método PAS) , perfil de oligosacáridos, determinación de la composición de monosacáridos o enfoque isoeléctrico. La estabilidad de las formulaciones de acuerdo con la invención se puede determinar, por ejemplo, sin restricciones, con la ayuda de programas de estabilización, por ejemplo almacenamiento a 25°C y 60 % de humedad relativa ambiente y a 40°C y 70 % de humedad relativa ambiente durante un período extenso y determinación de la estabilidad o la integridad estructural de la proteína a intervalos regulares, por ejemplo mediante los métodos de determinación antes mencionados (SE- HPLC, FT-IR, SDS-PAGE (reductor o no reductor)). Los métodos para la determinación de la actividad biológica o la eficacia de los anticuerpos de acuerdo con la invención en formulaciones de acuerdo con la invención, por ejemplo, sin limitaciones, ELISA, ensayos biológicos celulares, FTIR o CD. La determinación de la reducción de la tendencia a la agregación de las formulaciones altamente concentradas de acuerdo con la invención abarcan, por ejemplo, sin limitaciones, la inspección visual, el análisis de partículas sub-visibles, nefelometría o turbidimetría o caracterización dinámica de la dispersión de la luz . Ejemplo 1: Preparación de una formulación líquida de anticuerpos anti-EGFR altamente concentrada por filtración de flujo tangencial (TFF) Se concentran 380 ml de proteína (17 mg/ml en 10 mM de fosfato + 145 mM NaCl , pH 7,2) mediante una instalación Labscale-TFF (Millipore) con una membrana de ultrafiltración de polietersúlfona incorporada con un corte de 30 kDa durante 226 min con una presión inicial de 20 psi y una presión final de 10 psi. El retentado obtenido presenta una concentración de proteínas de aproximadamente 132 mg/ml. El rendimiento es de 85 %. O bien se concentran 470 ml de proteína (17 mg/ml en lOmM de citrato) por medio de una instalación Labscale TFF (Millipore) con una membrana de ultrafiltración de polietersulfona incorporada con un corte de 30 kDa durante 226 min con una presión inicial de 20 psi y una presión final de 10 psi. El retentado obtenido presenta una concentración de proteínas de aproximadamente 123 mg/ml. El rendimiento es de 95 %. Ejemplo 2: Preparación de una formulación líquida de anticuerpos anti-EGFR altamente concentrada por ultrafiltración bajo agitación Se concentran 25 ml de proteína (10 mg/ml en 10 mM de fosfato + 145 mM de NaCl , pH 7,2) por medio de una célula de agitación Amicon con una membrana de ultrafiltración de polietersulfona incorporada con un corte de 30 kDa durante 144 min con una presión de gas nitrógeno de 4 bar. El retentado obtenido presenta una concentración de proteínas de aproximadamente 92 mg/ml. El rendimiento es de 95 %. O bien se concentran 25 ml de proteína (10 mg/ml en 10 mM de citrato, pH 5,5) por medio de una célula de agitación Amicon con una membrana de ultrafiltración de polietersulfona incorporada con un corte de 30 kDa durante 168 min con una presión de gas nitrógeno de 4 bar. El retentado obtenido presenta una concentración de proteínas de aproximadamente 82"" mg/ml. El rendimiento es de 95 %. Ejemplo 3 : Preparación de una formulación líquida de anticuerpos anti-EGFR altamente concentrada por ultrafiltración bajo la" acción de fuerzas centrífugas Se centrifugan 15 ml de proteína (2 mg/ml en 10 mM de fosfato + 145 mM de NaCl , pH 7,2) en un tubito de centrífuga Ultrafree (Millipore) con una membrana de ultrafiltración de polietersulfona incorporada con un corte de 30 kDa a 2000*g durante 90 min. El retentado obtenido presenta una concen-tración de proteínas de aproximadamente 116 mg/ml. El rendimiento es de 95 %. Ejemplo 4: Investigación de agregados solubles de la formulación líquida de ' anticuerpos anti-EGFR altamente concentrada Los retentados obtenidos en los Ejemplos 1 a 3 se ensayaron por medio de SE-HPLC en cuanto al contenido de agregados solubles. En este caso, el contenido de monómeros después de la concentración era de >99 %. Ejemplo 5: Ensayo de la natividad de la formulación líquida de anticuerpos anti-EGFR altamente concentrada Los retentados obtenidos en el Ejemplo 1 se ensayaron por espectrofotometría FT-IR. En este caso, eran congruentes los espectros de la 2 - derivación de la amida I del material de partida antes de a concentración por medio de filtración de flujo tangencial y del retentado obtenido. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES
Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones: 1. Procedimiento para preparar una formulación líquida altamente concentrada caracterizado porque contiene al menos un anticuerpo anti-EGFR y/o una de sus variantes y/o fragmentos por ultrafiltración. 2. Procedimiento de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la formulación líquida altamente concentrada obtenida presenta un contenido de un anticuerpo anti-EGFR de 10 - 250 mg/ml.
3. Procedimiento de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la formulación líquida altamente concentrada obtenida presenta un contenido de un anticuerpo anti-EGFR de 50 - 180 mg/ml.
4. Procedimiento de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la formulación líquida altamente concentrada obtenida presenta un contenido de un anticuerpo anti-EGFR de 100 - 150 mg/ml.
5. Procedimiento de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque el anticuerpo anti-EGFR es monoclonal y tiene origen murino o humano .
6. Procedimiento de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque el anticuerpo anti-EGFR tiene origen murino y es quimérico o humanizado.
7. Procedimiento de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque el anticuerpo anti-EGFR es Mab C225 (Cetuximab) o Mab h425 (EMD72000) .
8. Formulación líquida altamente concentrada caracterizada porque contiene al menos un anticuerpo anti-EGFR y/o una de sus variantes y/o fragmentos.
9. Formulación líquida altamente concentrada de acuerdo con la reivindicación 8, caracterizada porque la formulación líquida altamente concentrada presenta un contenido de un anticuerpo anti-EGFR de 10 - 250 mg/ml.
10. Formulación líquida altamente concentrada de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque la formulación líquida altamente concentrada presenta un contenido de un anticuerpo anti-EGFR de 50 - 180 mg/ml.
11. Formulación líquida altamente concentrada de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque la formulación líquida altamente concentrada presenta un contenido de un anticuerpo anti-EGFR de 100 - 150 mg/ml.
12. Formulación líquida altamente concentrada de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 8 a 11, caracterizada porque el anticuerpo anti-EGFR es monoclonal y tiene origen murino o humano.
13. Formulación líquida altamente concentrada de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 8 a 12 , caracterizada porque el anticuerpo anti-EGFR tiene origen murino y es quimérico o humanizado.
14. Formulación líquida altamente concentrada de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 8 a 13 , caracterizada porque el anticuerpo anti-EGFR es Mab C225 - (Cetuximab) o Mab h425 (EMD72000) .
15. Formulación líquida altamente concentrada caracterizada porque contiene al menos un anticuerpo anti-EGFR y/o una de sus variantes y/o fragmentos que se puede obtener por medio de un procedimiento de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 1 a 7.
16. Formulación líquida altamente concentrada de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 8 a 15 como medicamento estable en almacenamiento.
17. Formulación líquida altamente concentrada de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 8 a 16, caracterizada porque contiene eventualmente excipientes y/o coadyuvantes y/u otros principios activos farmacéuticos .
18. Uso de una formulación líquida altamente concentrada de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 8 a 17 para preparar un medicamento.
19. Uso de una formulación líquida altamente concentrada de conformidad con una o varias de las reivindicaciones 8 a 17 para preparar un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de tumores y/o metástasis tumorales .
20. Uso de conformidad con la reivindicación 19, en donde el tumor está seleccionado del grupo compuesto por tumor cerebral, tumor del tracto urogenital, tumor del sistema linfático, tumor de estómago, tumor de laringe, leucemia monocítica, adenocarcinoma de pulmón, carcinoma de pulmón de células pequeñas, cáncer de páncreas, glioblastoma y carcinoma de mama.