MXPA06008394A

MXPA06008394A - El uso combinado de agonistas peptido 1 similar a glucagon (glp-1) y gastrina para regular los niveles de glucosa en la sangre

Info

Publication number: MXPA06008394A
Application number: MXPA/A/2006/008394A
Authority: MX
Inventors: Cruz Antonio; Pastrak Aleksandra; Hew Yin
Original assignee: Cruz Antonio; Hew Yin; Pastrak Aleksandra; Waratah Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2004-01-30
Filing date: 2006-07-25
Publication date: 2007-04-10

Abstract

La invención se refiere a composiciones, conjugados y métodos para la prevención y/o tratamiento de una condición y/o enfermedad que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina. La combinación de un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina proporciona efectos benéficos, en particular efectos benéficos sostenidos, en la prevención y/o tratamiento de condiciones y/o enfermedades para las cuales ya sea un agonista GLP-1 o un compuesto de gastrina han demostrado tener un efecto terapéutico, incluyendo pero no limitado a diabetes, hipertensión, insuficiencia cardiaca crónica, estados de retención de fluidos, obesidad, síndrome metabólico y enfermedades y trastornos relacionados. Las combinaciones del agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina se pueden seleccionar para proporcionar efectos inesperadamente aditivos o efectos sinérgicos.

Description

ZW), Eurasian (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM), For two-letter codes and other abbreviations. referió lhe "GuidEuropean (AT, BE, BG, CH, CY, CZ, DE, DK, EE, ES, Fl, ance Notes on Codes andAbbreviations" appearing at the begin- FR, GB, GR, HU, IB, IS, IT, LT, LU, MC, NL, PL, PT, RO, ning ofeach regular issue ofthe PCT Gazette. SE, SI, SK, TR), OAPI (BF, BJ, CF, CG, Cl, CM, GA, GN, GQ, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG). Published: — without inlemational search report and lo be republislied upon receipt ofthat report EL USO COMBINADO DE AGONISTAS PEPTIDO 1 SIMILAR A GLUCAGON (GLP-1) Y GASTRINA PARA REGULAR LOS NIVELES DE GLUCOSA EN LA SANGRE Campo de la Invención La invención se refiere generalmente a composiciones, conjugados y métodos que comprenden un agonista de GLP-1 y un compuesto de gastrina y uso de los mismos . Antecedentes de la Invención El péptido 1 similar a glucágón (GLP-1) es una hormona de incretina fisiológica del tracto gastrointestinal inferior. GLP-1 tiene actividades fisiológicas importantes que incluyen la estimulación de la secreción de insulina dependiente de glucosa, la inhibición de la secreción de glucagón y el vaciado gástrico, inhibición de la ingesta alimenticia, intensificación del uso de glucosa, preservación de las células beta, inhibición de la apoptosis por células beta, e inducción de la proliferación de células beta, [ver, Nauck, M.A. Acta Diabetol, 1998, 35:117-129; Holst J.J. Diabetes Metab Res Rev 2002, 18:430-441; Reimer, R.A. et al, Endocrinology 142(10): 4522-4528; Drucker, D.J., Molecular Endocrinology, 2003, 17(2) 161-171 y http : //www . qlucagon . com para revisiones de GLP-1] . Las actividades antes establecidas de GLP-1, lo hacen un agente terapéutico altamente deseable para el tratamiento de muchas condiciones y enfermedades que REF:174657 incluyen diabetes, obesidad, úlceras gástricas, hipertensión, insuficiencia cardiaca crónica, estados de retención de fluidos, síndrome metabólico y enfermedades y trastornos relacionados . La cita de alguna referencia en la presente no es una admisión de que tal referencia esté disponible como arte previo para la invención actual .

Breve Descripción de la Invención La combinación del agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina proporciona efectos benéficos en la prevención y/o tratamiento de condiciones y/o enfermedades para las cuales ya sea un agonista de GLP-1 o un compuesto de gastrina, ha demostrado tener un efecto terapéutico, que incluye pero no se limita a diabetes, hipertensión, insuficiencia cardiaca crónica, estados de retención de fluidos, obesidad, síndrome metabólico y enfermedades y trastornos relacionados. Las combinaciones de un agonista de GLP-1 y un compuesto de gastrina se pueden seleccionar para proporcionar efectos inesperadamente aditivos o mayores que los efectos aditivos, esto es, efectos sinérgicos. Una composición, conjugado o método que comprende un agonista de GLP-1 y un compuesto de gastrina que emplea mecanismos diferentes para lograr la eficacia terapéutica máxima, puede mejorar la tolerancia a la terapia con un riesgo reducido de efectos colaterales que puedan resultar de dosis superiores o monoterapias de periodo más prolongado (esto es, terapias con cada compuesto solo) . Una composición, conjugado o método de la invención permitirá el uso de dosis inferiores de uno o ambos compuestos con efectos tóxicos adversos reducidos de cada compuesto. Una dosis subóptima puede suministrar un margen de seguridad aumentado y también puede reducir el costo de un fármaco necesario para lograr la profilaxis y la terapia. En ciertos aspectos de la invención, la conveniencia creciente de una unidad de dosificación en combinación sencilla puede resultar en un cumplimiento mejorado. Otras ventajas de una composición, conjugado o terapia de combinación pueden incluir una mayor estabilidad hacia la degradación y metabolismo, mayor duración de acción y/o mayor duración de acción o efectividad a dosis particularmente bajas. Establecida ampliamente, la invención se refiere a composiciones conjugados y métodos para la prevención y/o tratamiento de una condición y/o enfermedad que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina que proporciona efectos benéficos. Una composición, conjugado o método de la invención puede proporcionar efectos benéficos sostenidos que sigan al tratamiento o terminación del tratamiento. La eficacia prolongada puede ser evidente por una producción aumentada del péptido C, incrementos en la producción de insulina pancreática y/o alrededor de los niveles normales de glucosa en'lá sangre comparados con GLP-1 o la gastrina sola. En un aspecto, la invención contempla una composición, preferiblemente una composición farmacéutica, que comprende un agonista de GLP-1 y un compuesto de gastrina que proporciona efectos benéficos con relación a cada compuesto solo. En otro aspecto la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un agonista de GLP-1 y un compuesto de gastrina que proporciona efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos después del tratamiento. Una composición farmacéutica puede comprender opcionalmente un portador excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable. La invención ' también contempla una composición farmacéutica en recipientes por separado que se pretende para la administración simultánea o secuencial para proporcionar efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos que comprenden un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina ambos opcionalmente juntos con portadores excipientes o vehículos farmacéuticamente aceptables. La invención además contempla un conjugado que comprende un agonista de GLP-1 que interactúa con o se liga con un compuesto de gastrina para proporcionar efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos aquí discutidos.

La invención todavía contempla además métodos para la preparación de composiciones y conjugados de la invención que resultan en composiciones y conjugados con efectos benéficos preferiblemente efectos benéficos sostenidos. En un aspecto de la invención, se suministra un método para la preparación de una composición farmacéutica estable de un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina, adaptada para proporcionar efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos" sostenidos después del tratamiento, que comprende preparar una composición que comprende el agonista de GLP-1 un compuesto de gastrina y un portador, excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable efectivo para estabilizar físicamente el agonista GLP-1. En otro aspecto de la invención, se proporciona un método para la preparación de una composición farmacéutica estable de un agonista GLP-1 que comprende mezclar un agonista GLP-1, un compuesto de gastrina y un portador, excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable efectivo para estabilizar físicamente el agonista GLP-1 y adaptado para suministrar efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos. La invención se refiere a un tratamiento de combinación para prevenir y/o tratar una condición y/o enfermedad aquí discutida en un sujeto que comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina para proporcionar efectos benéficos. En un aspecto de la invención proporciona un tratamiento de combinación o intervención la cual proporciona efectos benéficos sostenidos después del tratamiento. La invención se refiere además al uso de un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina, una composición o conjugado de la invención para prevenir y/o mejorar la severidad de la enfermedad, síntomas de la enfermedad y/o periodicidad de recurrencias de una condición y/o enfermedad- aquí descrita. La invención todavía se refiere á la prevención y/o tratamiento en un sujeto de enfermedades y/o condiciones usando un agonista GLP-1 una gastrina y un compuesto de gastrina, una composición o conjugado de la invención. En un aspecto la invención proporciona un método para la prevención y/o intervención de una condición y/o enfermedad aquí discutida en un sujeto que comprende administrar al menos un agonista de GLP-1 y al menos un compuesto de gastrina o' una composición o conjugado de la invención. Un agonista de GLP-1 y un compuesto de gastrina composición o conjugado se puede administrar directamente a un sujeto o hacer contacto con las células (por ejemplo, células madre o células progenítoras) y administrarse a un sujeto. En otro aspecto, la invención proporciona un método para la prevención y/o intervención de una condición y/o enfermedad aquí discutida en un sujeto que comprende la administración de al menos un agonista de GLP-1 y al menos un compuesto de gastrina a un sujeto que necesita del mismo para suministrar efectos benéficos. En otro aspecto, la invención proporciona un método para la prevención y/o intervención de una condición y/o enfermedad aquí discutida en un sujeto, que comprende coadministrar al menos un agonista GLP-1 y al menos un compuesto de gastrina a un sujeto que necesite del mismo. En un aspecto particular, la invención se refiere a la inducción de la neogénesis de isletas en un sujeto que comprende poner en contacto las • células precursoras de isleta con un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina composición o conjugado de la invención en una cantidad suficiente para incrementar la proliferación de las células precursoras de isleta en el sujeto con lo cual se induce la neogénesis de isleta. En otro aspecto, la invención se refiere a un método para el tratamiento de la diabetes mellitus en un paciente que necesita del mismo, al administrar un compuesto de gastrina y un agonista GLP-1 o un a composición que comprende un compuesto de gastrina y un agonista GLP-len una cantidad suficiente para efectuar la diferenciación de las células precursoras de isletas pancreáticas del paciente a célula secretora de insulina madura y/o para estimular la síntesis de 'insulina en células de isleta existentes.

La invención proporciona métodos para el tratamiento de células al usar un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina de la invención, o composiciones o conjugados de la invención. En particular, la invención se refiere a un método para expandir y diferenciar células madre o células progenitoras en células secretoras de insulina, potenciar la proliferación de células secretoras de insulina y/o sostener las células de isleta o células precursoras. Las células pueden ponerse en contacto con un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina en cultivo o en un sujeto. En un aspecto, se proporciona un método para el tratamiento de una condición y/o enfermedad que comprende administrar un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina, una composición o conjugado de la invención con una pluralidad de células a un sujeto que necesita del mismo para con ello producir efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos . En una modalidad, los compuestos composiciones conjugado se administran sistémicamente. En otro aspecto, la invención proporciona un método para el tratamiento de un sujeto con una condición y/o enfermedad de aquí discutida que comprende poner en contacto ex vivo una pluralidad de células con un agonista GLP-1 de un compuesto de gastrina o una composición o conjugado de la invención, cultivar opcionalmente las células y administrar las células al sujeto que necesita del mismo.

También se proporciona en aspectos particulares de la invención, métodos y composiciones para el tratamiento de diabetes en un paciente que necesita del mismo a implantar en un paciente diabático células de isleta pancreáticas que se han expuesto en cultivo a una cantidad suficiente de un compuesto de gastrina y un agonista GLP-1 o una composición o conjugado de la invención para incrementar el número de células ß-pancreáticas en las isletas, opcionalmente la población de células ß-pancreáticas puede crecer en cultivo con un tiempo suficiente para expandir la población de células beta previas al transplante. La invención también contempla el uso de una composición que comprende una combinación de al menos un agonista GLP-1 y al menos un compuesto de gastrina para la preparación de uno o más medicamentos para la prevención y/o tratamiento de una condición o enfermedad. La invención contempla además el uso de un agonista GLP-1 en combinación con un compuesto de gastrina para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de una condición y/o enfermedad. Todavía además, la invención proporciona el uso de un agonista GLP-1 para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de una condición y/o enfermedad para usarse en combinación con un compuesto de gastrina. En un aspecto, la invención se refiere al uso de cantidades sinérgicamente efectivas de al menos un agonista GLP-1 y al menos un compuesto de gastrina para la preparación de3 un medicamento para la prevención o tratamiento de una condición y/o enfermedad. En otro aspecto, la invención se refiere al uso de un agonista de GLP-1 y un compuesto de gastrina para la preparación de un medicamento que tiene un perfil dilatado de acción con relación a GLP-1 (7-37) o •exendina. La invención proporciona adicionalmente el uso de una composición farmacéutica y un conjugado de la invención en la preparación de medicamentos para la prevención y/o tratamiento de condiciones y/o enfermedades . Los medicamentos proporcionan efectos benéficos preferiblemente efectos benéficos sostenidos después del tratamiento. Ya que la presente invención se refiere a un método para la prevención y/o tratamiento que comprende una combinación de agentes activos los cuales se pueden administrar por separado o como conjugado, la invención también proporciona un kit que comprende un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina y una composición farmacéutica o conjugado de la invención en forma de kit. Estos y otros aspectos, características y ventajas de la presente invención serán evidentes para aquellos expertos en la técnica a partir de la siguiente descripción detallada.

Breve Descripción de las Figuras La invención se entenderá mejor con referencia a las figuras, las cuales: La figura 1 es una gráfica que muestra el efecto de la terapia de neogénesis de isleta usando un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina (INT-2) en glucosa sanguínea en ayuno en ratones NOD agudafnente diabéticos . La figura ilustra que la combinación de GLP-1 (300µg/kg) el tratamiento con gastrina (3µg/kg) invierte la hiperglicemia y evita la muerte en ratones NOD . La figura 2 son gráficas que muestr.an los niveles de glucosa sanguínea en ayuno individuales en ratones NOD agudamente diabéticos tratados con la combinación de GLP-1 (300 µg/kg) y gastrina (3 µg/kg) . La figura 3 es u*?a gráfica que muestra que el tratamiento de combinación de GLP-1 y gastrina reestablece los niveles de insulina panc-seática en un modelo de ratón NOD . La figura 4 es una gráfica que muestra la correlación entre el contenido de insulina pancreática y los niveles de glucosa sanguínea en ayuno . La figura 5 muestra células teñidas con insulina en ratones NOD diabéticos de forma aguda tratados con vehículo y GLP-1 y gastrina. La figura 6 muestra la tinción de células de isleta a partir del ducto pancreático en ratones NOD tratados con vehículo y GLP-1 y gastrina.

Glosario La mención de los intervalos numéricos por puntos finales en la presente, incluye todos los números y reacciones propuestos dentro del rango (por ejemplo, de 1 a 5 incluye 1, 1.5, 2, 2.75, 3, 3.90, 4 y 5) . También se entenderá que todos los números y fracciones del mismo se presume que se modifican por el término alrededor. Además, se entiende que "un" , "unos" y "los" incluyen referentes en plural a menos que el contenido lo dicte claramente de otra manera. Así por ejemplo, la referencia a una composición que contiene un compuesto incluye una mezcla de dos o más compuestos. El término alrededor significa más o menos 0.1 hasta 50%, ó 10-40%, preferiblemente 10-20%, más preferiblemente 10% ó 15%, del número al cual se hace referencia . Los compuestos seleccionados aquí descritos contienen uno o más centros asimétricos y puede dar lugar a enantiómeros diastereómeros y otras formas estereoisoméricas las cuales se pueden definir en términos de la estereoquímica absoluta como (R) ó (S) . Por lo tanto, la invención incluye todos los diastereómeros y enantiómeros tales posibles así como sus formas racémicas y ópticamente puras . Los isómeros ópticamente activos (R) - y (S) - se pueden preparar al usar sintones quirales o reactivos quirales o resolverse usando técnicas convencionales. Cuando los compuestos aquí descritos contienen centros de asimetría geométrica, y a menos- que se especifiquen de otra manera, se pretende que los compuestos incluyan ambos isómeros geométricos E y A. Todas las formas tautoméricas se pretende que estén incluidas dentro del alcance de la invención. Los términos "sujeto", "individuo" o "paciente" se refieren a un animal que incluye un animal de sangre caliente tal como un mamífero el cual padece o se sospecha que tiene o está predispuesto a una condición y/o enfermedad como se describe en la presente. Preferiblemente, los términos se refieren a un humano. Los términos también incluyen animales domésticos cruzados para alimento, deporte o como mascotas incluyendo; caballos, vacas, ovejas, aves de corral, peces, cerdos, gatos, perros y animales de zoológico. Los métodos en la presente para su uso en sujetos/individuos/pacientes contempla uso profiláctico así como curativo. Los sujetos típicos para tratamiento incluyen personas susceptibles a, que padecen de o que han sufrido una condición y/o enfermedad aquí discutida. El término portador, excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable, se refiere a un medio el cual no interfiere con la efectividad o actividad de un ingrediente activo y el cual no es tóxico para los hospedadores a los cuales - se le administra. Un portador, excipiente o vehículo incluye diluyentes, aglutinantes, adhesivos, lubricantes, desintegrantes, agentes de volumen, agentes emulsificantes o "humectantes, agentes amortiguadores del pH, materiales diversos tales como absorbentes que se puedan necesitar con objeto de preparar una composición en particular. El uso de tales medios y agentes para "una sustancia activa es bien conocido en el arte. En ciertos aspectos de la invención un portador excipiente o del vehículo se selecciona para estabilizar una gansita de GLP-1. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de grupos ácidos o básicos las cuales pueden estar presentes en los compuestos adecuados para su uso la presente invención. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de sodio, calcio y potasio de grupos ácidos carboxilitos y sales de clorohidratos de grupos amino. Otras sales farmacéuticamente aceptables de los grupos aminos son bromohidrato, sulfato, sulfato ácido, fosfato, fosfato ácido, fosfato diácido, acetato, succinato; citrato, tartrato, lactato, mandelato, metansulfonato, (mesilato) y sales de p-toluensulfonato (tosilato) . Los términos "prevención y/o tratamiento" , "prevención y/o tratar" o "prevención y/o intervención", se refieren a la administración a un sujeto de agentes biológicamente activos ya sea antes o después del comienzo de una condición y/o enfermedad. Un tratamiento puede llevarse a cabo en una forma aguda o crónica. En particular, la prevención incluye la administración y cuidado de un sujeto en riesgo de desarrollar una condición y/o enfermedad aquí discutida previo al comienzo clínico de la condición y/o enfermedad. El tratamiento o intervención se refiere a la administración y cuidado de un sujeto en el diagnóstico o posterior. Un objetivo de la prevención, tratamiento o intervención es combatir la condición o enfermedad e incluye la administración de los compuestos activos para prevenir o retardar el comienzo de los síntomas o complicaciones o aliviar los síntomas o complicaciones o eliminar o eliminar parcialmente la condición y/o enfermedad. Un efecto benéfico, se refiere a un efecto de una combinación de un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina o una composición no conjugado del mismo, que es mayor que el efecto de cualquiera de los compuestos solos . El efecto benéfico incluye efectos farmacológicos y/o terapéuticos favorables y propiedades farmacocinéticas mejoradas y actividad biológicas. Un efecto benéfico puede ser un efecto aditivo o un efecto sinérgico. En modalidades preferidas de la invención, los efectos benéficos incluyen pero no se limitan a lo siguiente: inflamación reducida o ausente de isletas, avance disminuido de la enfermedad, supervivencia creciente o eliminación parcial de una condición y/o enfermedad. En una modalidad particularmente preferida, el efecto benéfico es un efecto benéfico sostenido en donde el efecto benéfico se sostiene por un periodo prolongado de tiempo después de la terminación del tratamiento. En una modalidad, uno o más de los efectos antes mencionados es sostenido por un periodo prolongado de tiempo después de la terminación del tratamiento. Un efecto benéfico se puede sostener por al menos alrededor de 2, 4, 6, 8, 10, 2 a 4 semanas, de 2 a 6 semanas, 2 a 8 semanas, 2 a 12 semanas, 2 a 24 semanas, 2 semanas a 12 meses, y 2 semanas a 18 meses después del tratamiento. El periodo de tiempo que un efecto benéfico se sostiene puede correlacionarse con la duración y programación del tratamiento. Un sujeto puede tratarse continuamente por alrededor de 2 a 8 semanas, 2 a 12 semanas, 2 a 16 semanas, 2 semanas a 6 meses, 2 semanas a 12 meses, o periódicamente. Un efecto benéfico sostenido se puede manifestar como una o más producción aumentada del péptido C, producción aumentada de insulina pancreática y/o niveles de glucosa de en la sangre bajos o alrededor de el normal por un periodo prolongado después del tratamiento. El efecto benéfico puede ser un efecto estadísticamente importante en términos del análisis estadístico de un efecto de los dos compuestos contra los efectos de cada uno de los compuestos . Efectos o niveles "estadísticamente importantes" o "estadísticamente diferentes con los dos compuestos comparados con cada compuesto por sí solo, puede representar niveles que sean superiores o inferiores al estándar. En modalidades de la invención la diferencia puede ser 1.5, 2, 3 , 4 , 5 ó 6 veces mayor o menor comparada con el efecto obtenido con cada compuesto solo . Un "efecto aditivo" del agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina se refiere a un compuesto que es igual a la suma de los efectos de los dos compuestos individuales . Un "efecto sinérgico" de un agonista de GLP-1 y un compuesto de gastrina, se refiere a un efecto que es mayor que el efecto aditivo el cual resulta de la suma de los efectos de los dos compuestos individuales. "Tratamiento en combinación" , "terapia de combinación" y "administración en combinación" , se usan de manera intercambiable en la presente y significa que los ingredientes activos se administran en paralelo a un paciente que se trata. Cuando se administran en combinación cada componente se puede administrar al mismo tiempo o secuencialmente en cualquier orden en punto diferente de tiempo. Por lo tanto, cada componente se puede administrar por separado pero suficientemente cercano en tiempo para suministrar el efecto deseado, en particular, un efecto benéfico aditivo o sinérgico. El primer compuesto se puede administrar en un régimen el cual comprenda adicionalmente el tratamiento con el segundo compuesto. En ciertas modalidades, el término se refiere a la administración de un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina a un paciente dentro de un año, incluyendo la administración por separado de dos medicamentos cada uno contiene uno de los compuestos, así como la administración simultánea ya sea que los dos compuestos combinen o no en una formulación o ya sea que sean dos "formulaciones por separado. Un "medicamento" se refiere a una composición farmacéutica adecuada para administración de un compuesto f rmacéuticamente activo (por ejemplo, un agonista GLP-1 o un compuesto de gastrina) a un paciente. "Cantidad terapéuticamente efectiva"" se - refiere a la cantidad o dosis de los compuestos -activos (por ejemplo, agonista de GLP-1 y compuesto de gastrina)", composiciones o conjugados de la invención que llevarán a uno o más efectos benéficos deseados, preferiblemente uno o más efectos benéficos sostenidos. Una cantidad terapéuticamente efectiva puede proporcionar una dosis la cual sea suficiente con objeto de la prevención y/o tratamiento de un sujeto para ser efectiva en comparación con ningún tratamiento. "Cantidad sinérgicamente efectiva" se refiere a la cantidad de dosis de compuestos activos (por ejemplo, agonista GLP-1 y compuesto de gastrina) , composiciones o conjugados de la invención que proporcionará un efecto sinérgico, en particular un efecto benéfico sinérgico. "Dosis subóptima o dosificación subóptima" se refiere a una dosis o dosificación de un compuesto activo que es menos que la dosis o dosificación óptima para ese compuesto cuando se usa en la monoterapia. Los términos "asociado", "ligado", "interactuar", "interacción", o "interactúa" se refieren a cualquier asociación física "entre moléculas. Los términos preferiblemente se refieren a una asociación estable entre dos moléculas debido a, por ejemplo, interacciones electrostática, hidrofóbica, iónica, enlazadas a hidrógeno, o interacciones covalentes. Ciertas moléculas que interactúan o se asocian, interactúan solo después de que una o más de ellas se han activado. En el presente contexto, "un agonista GLP-1" se entiende para referirse a cualquier compuesto, que incluye compuestos péptidos y no péptidos, que activan completamente o parcialmente el receptor GLP-1 humano. En una modalidad preferida, el "agonista GLP-1" es cualquier molécula pequeña de péptido o no péptido que enlaza a un receptor GLP-1, preferiblemente con una constante afinidad ( D) o una potencia (EC50) debajo de 1 µM, por ejemplo, debajo de 100 nM como medida para métodos conocidos en la técnica (ver por ejemplo, WO 98/08871) y exhibe actividad insulinotrópica, donde la actividad insulinotrópica se puede medir en ensayos in vivo o in vitro conocidos por aquellos de experiencia ordinaria en la técnica. Por ejemplo, el agonista GLP-1 se puede administrar a un animal y la concentración de insulina medida durante el tiempo . En una modalidad, el agonista GLP-1 se selecciona del grupo que consiste de GLP-1 (7-36) -amida, GLP-1 (7-37), un análogo GLP-1 (7-36) -amida, un análogo GLP-1 (7-37) , o un derivado de cualquiera de estos . En la solicitud actual, la designación "un análogo" se usa para designar- un péptido en donde uno o más residuos de aminoácidos del péptido precursor se han substituido por otro residuo aminoácido y/o en donde uno o más residuos de aminoácidos del péptido precursor se han eliminado y/o en donde uno o más residuos de aminoácidos se han agregado al péptido precursor. Tal adición puede ocurrir ya sea en el extremo de terminal N o en el extremo de terminal C del péptido precursor o ambos. Típicamente "un análogo" es un péptido en donde 6 o menos aminoácidos se han substituido y/o agregado y/o eliminado del péptido precursor, más preferiblemente un péptido en donde 3 o menos aminoácidos se han substituido y/o agregado y/o eliminado del péptido precursor, y más preferiblemente, un péptido en donde un aminoácido se ha substituido y/o agregado y/o eliminado del péptido precursor . En la solicitud actual, "un derivado" se usa para designar un péptido o análogo del mismo que se modifica químicamente al introducir por ejemplo, éster, alquilo o funcionalidades lipofílicas en uno o más residuos aminoácidos del péptido o análogo del mismo. Los métodos para identificar agonistas GLP-1 se describen en WO 93/19175 (Novo Nordisk A/S) y ejemplos de análogos GLP-1 apropiados y derivados que se pueden usar de conformidad con la presente invención incluyen aquellos que se refieren en WO 99/43705 (Novo Nordisk A/S) , WÓ 99/43706 (Novo Nordisk A/S) , WO 99/43707 (Novo Nordisk A/S) , WO 98/08871 (Novo Nordisk A/S) , WO 99/43708 (Novo Nordisk A/S) , WO 99/43341 (Novo Nordisk - A/S) , WO 87/06941 (The General Hospital Corporation) , WO 90/11296 (The General Hospital Corporation), WO 91/11457 (Buckley et al.), WO 98/43658 (Eli .Lilly & Co.), EP 0708179-A2 (Eli Lilly & Co . ) , EP 0699686-A2 (Eli 'Lilly- & Co.), WO 01/98331 (Eli Lilly & Co) . En una modalidad, el agonista GLP-1 es un derivado de GLP-1 (7-36) -amida, GLP-1 (7-37), un análogo GLP-1 (7- 36)-amida o un análogo GLP-1 (7-37) , que comprende un substituyente lipofílico. En esta modalidad de la invención, el derivado GLP-1 preferiblemente tiene tres substituyentes lipofílicos, más preferiblemente dos substituyentes lipofílicos, y más preferiblemente un substituyente lipofílico enlazado al péptido precursor (esto es GLP-1 (7-36) -amida, GLP-1 (7-37), un análogo GLP-1 (7-36) -amida o un análogo GLP-1 (7-37)), donde cada substituyente lipofílíco preferiblemente tiene 4- 40 átomos de carbono, más preferiblemente 8-30 átomos de carbono, aun más preferiblemente 8-25 átomos de carbono, aun más preferiblemente 12-25 átomos de carbono, y más preferiblemente 14-18 átomos de carbono. En una modalidad, el substituyente lipofílico comprende un esqueleto de ciclopentanofenatreno parcialmente o completamente hidrogenado. En otra modalidad, el substituyente lipofílico es -un grupo alquilo de cadena recta o ramificada. En todavía otra modalidad, el substituyente lipofílico es un. grupo acilo de un ácido graso de cadena recta o ramificada. Preferiblemente, el substituyente lipofílico es un grupo acilo que tiene la fórmula CH3 (CH2) nC0- , en donde . n es un entero desde 4 hasta 38, preferiblemente un entero desde 12 hasta 38, y más preferiblemente CH3 (CH2) 12C0- , CH3(CH2)?4CO-, CH3(CH2)16C0-, CH3 (CH2) ?8CO- , CH3 (CH2) 20CO- y CH3 (CH2) 22CO- . En una modalidad más preferida, el substituyente lipofílico es tetradecanoilo . En una modalidad más preferida, el substituyente lipofílico es hexadecanoilo. En una modalidad adicional de la presente invención, el substituyente lipofílico tiene un grupo que se carga negativamente tal como un grupo de ácido carboxílico. Por ejemplo, el substituyente lipofílico puede ser un grupo acilo de un alcano a de cadena recta o ramificada, ácido w-dicarboxílico de la fórmula HOOC (CH2)mCO- , en donde m es un entero desde 4 hasta 38, preferiblemente un entero desde 12 hasta 38, y más preferiblemente es HOOC (CH2) ?4CO- , HOOC(CH2)?SCO-, HOOC(CH2)a8CO-, HOOC (CH2) 20CO- o HOOC (CH2) 22CO- .

En los derivados GLP-1 de la invención, los substituyentes lipofílicos contienen un grupo funcional ue se puede enlazar a uno de los siguientes grupos funcionales de un aminoácido del péptido GLP-1 precursor: (a) el grupo amíno enlazado al carbono alfa del aminoácido de terminal N, (b) el grupo carboxi enlazado al carbono alfa del aminoácido de terminal C, (c) -él grupo epsilon-amino de cualquier residuo Lys, (d) el grupo carboxi del grupo R de cualquier residuo Asp y Glu, (e) el grupo hidroxi del grupo R de cualquier residuo Tyr, Ser y Thr, (f) el grupo amino del grupo R de cualquier residuo Trp, Asn, Gln, Arg, y His, o (g) el grupo tiol del grupo R de cualquier residuo Cys. En una modalidad, un substituyente lipofílico se enlaza al grupo carboxi del grupo R de cualquier residuo Asp y Glu.

En otra modalidad, un substituyente lipofílico se enlaza al grupo carboxi enlazado al carbono alfa del aminoácido de terminal C.

En una modalidad más preferida, un substituyente lipofílico se enlaza al grupo epsilon-amino de cualquier residuo Lys . En una modalidad preferida de la invención, el substituyente lipofílico se enlaza al péptido GLP-1 precursor por medio de un espaciador. Un espaciador debe contener al menos dos grupos funcionales, uno para enlazar a un grupo funcional del substituyente lipofílico y el otro a un grupo funcional del péptido GLP-1 precursor. En una modalidad, el espaciador es un residuo aminoácido excepto Cys o Met, o un dipéptido tal como Gly-Lys . Para propósitos de la presente invención, la frase "un dipéptido tal como Gly-Lys" significa cualquier combinación de dos aminoácidos excepto Cys o Met, preferiblemente un dipéptido en donde el residuo aminoácido de terminal C es Lys, His o Trp, preferiblemente Lys, y el residuo aminoácido de terminal N es Ala, Arg, Asp, Asn, Gly, Glu, Gln, lie, Leu, Val, Phe, Pro, Ser, Tyr, Thr, Lys, His y Trp. Preferiblemente, un grupo amino del péptido precursor forman un enlace amida con un grupo carboxílico del residuo aminoácido o espaciador dipéptidb, y un grupo amino del residuo aminoácido o espaciador dipéptido forman un enlace amida con un grupo carboxílico del substituyente lipofílico. Espaciadores preferidos son lisilo, glutamilo, asparagilo, glicilo, beta-alanilo y gama-aminobutanoilo, cada uno de los cuales constituye una modalidad individual . Espaciadores más preferidos son glutamilo y beta-alanilo. Cuando el espaciador .es Lys, Glu o Asp, el grupo carboxilo de los mismos puede formar un enlace amida con un grupo amino del residuo aminoácido, y el grupo amino de los mismos puede formar un enlace amida con un grupo carboxílico del substituyente lipofílico. Cuando Lys se usa como el espaciador, un espaciador adicional puede ser en algunos casos insertado entre el grupo e-amino de Lys y el substituyente lipofílico. En una modalidad, tal espaciador adicional es ácido succínico que forma un enlace amida con el grupo e-amino de Lys y con un grupo amino presente en el substituyente lipofílico. En otra modalidad tal espaciador adicional es Glu o Asp que forma un enlace amida con el grupo e-amino de Lys y otro enlace amida con un grupo carboxílico presente en el substituyente lipofílico, que es, el substituyente lipofílico es un residuo de lisina Ne acilado. En otra modalidad, el espaciador es un alcano a no ramificado, grupo ácido w-dicarboxílico que tiene desde 1 hasta 7 grupos metileno, cuyo espaciador forma un puente entre un grupo amino del péptido precursor y un grupo amino del substituyente lipofílico. Preferiblemente, el espaciador es ácido succínico. En una modalidad adicional, el substituyente lipofílico con el espaciador enlazado es un grupo de la fórmula CH3 (CH2) pNH-CO (CH2) qC0- , en donde p es un entero desde 8 hasta 33, preferiblemente desde 12 hasta 28 y q es un entero desde 1 hasta 6, preferiblemente 2. En una modalidad adicional, el substituyente lipofílico con el espaciador enlazado es un grupo de la fórmula CH3(CH2)rCO -NHCH (COOH) (CH2)2CO-, en donde r es un entero desde 4 hasta 24, preferiblemente desde 10 hasta 24. En una modalidad adicional, el substituyente lipofílico con el espaciador enlazado es un grupo de la fórmula CH3(CH2)sCO-?HCH( (CH2)2COOH)CO-, en donde s es un entero desde 4 hasta 24, preferiblemente desde 10 hasta 24. En una modalidad adicional, el substituyente lipofílico es un grupo de la fórmula COOH (CH) tC0- en donde t es un entero desde 6 hasta 24. En una modalidad adicional, el substituyente lipofílico con el espaciador enlazado es un grupo de la fórmula ?HCH(COOH) (CH2)4?H-CO(CH2) ICH3, en donde u es un entero desde 8 hasta 18. En una modalidad adicional, el substituyente lipofílico con el espaciador enlazado es un grupo de la fórmula CH3 (CH2)vCO-?H- (CH2)Z-C0, en donde v es un entero desde 4 hasta 24 y z es un entero desde 1 hasta 6. En una modalidad adicional, el substituyente lipofílico con el espaciador enlazado es un grupo de la fórmula - NHCH (COOH) (CH2)4NH-COCH( (CH2) 2COOH) NH-CO (CH2) WCH3, en donde w es un entero desde 10 hasta 16. En una modalidad adicional, el substituyente lipofílico con el espaciador enlazado es un grupo de la fórmula NHCH (COOH) (CH2) 4NH-CO (CH2) 2CH (COOH) NHCO (CH2) XCH3 , en donde x es cero o un enteró desde 1 hasta 22, preferiblemente 10 hasta 16. En todavía otra modalidad el agonista GLP-1 es Arg34, Lys26 (Ne- (?-Glu(Na-hexadecanoil) ) ) -GLP-1 (7-37) . En todavía otra modalidad el agonista GLP-1 se selecciona del grupo que consiste de Gly8-GLP-1 (7-36) -amida, Gly8-GLP-1 (7-37) , Val8-GLP-1 (7-36) -amida, Val8-GLP-1 (7-37), Val8Asp22-GLP-l (7-36) -amida, Val8Asp22-GLP-l (7-37) , Val8Glu22- GLP-1 (7-36) -amida, Val8Glu22-GLP-l (7-37), Val8Lys22-GLP-l (7-36) -amida, Val8Lys22-GLP-l (7-37), Val8Arg22-GLP-l (7-36)-amida, Val8Arg22-GLP-l (7-37) , Val8His 2-GLP-l (7-36) -amida, Val8Eis22-GLP-l (7-37) , análogos de los mismos y derivados de cualquiera de estos . En todavía otra modalidad el agonista GLP-1 se selecciona del grupo que consiste de Arg2d-GLP-1 (7-37) ; Arg- GLP-1 (7-37) ; Lys36-GLP-1 (7-37) ; Arg26'34Lys36-GLP-l (7-37) ; Arg26 '34- GLP -1 (7-37) ; Arg26'34Lys40-GLP-l (7-37) ; Arg26Lys36-GLP- 1 (7-37) ; Arg34Lys36-GLP-l (7-37) ; Val8Arg22-GLP-l (7-37); M.et8Arg22-GL,P-l (7-37) ; Gly8His22-GLP-l (7-37) ; Val8His22-GLP-l (7-37) ; Met8His22-GLP-l (7-37) ; His37-GLP-1 (7-37) ; Gly8-GLP-1 (7-37) ; Val8-GLP-1 (7-37) ; Met8-GLP-1 (7-37) ; Gly8Asp22-GLP-l (7-37) ; Val8Asp22-GLP-l (7-37) ; Met8Asp22-GLP-l (7-37) ; Gly8Glu22-GLP-l (7-37) ; Val8Glu22-GLP-l (7-37) ; Met8Glu22-GLP-l (7-37) ; Gly8Lys22-GLP-l (7-37) ; Val8Lys22-GLP-l (7-37) ; Met8Lys22-GLP-l (7-37) ; Gly8Arg22-GLP-l (7-37) ; Val8Lys22His37-GLP-l (7-37) ; Gly8Glu22His37-GLP-l (7-37) Val8Glu22His37-GLP-l (7-37) ; Met8Glu22His37-GLP-l (7-37) Gly8Lys22His37-GLP-l (7-37) ; Met8Lys 2His37-GLP-l (7-37) Gly8Arg22His37-GLP-l (7-37) ; Val8Arg22His37-GLP-l (7-37) Met8Arg22His37-GLP-l (7-37) ; Gly8Hís22His37-GLP-l (7-37) Val8His22His37-GLP-l (7-37) ; . Met8His22His37-GLP-l (7-37) Gly8His37-GLP-l (7-37) ; Val HÍS37-GLP-l (7-37) ; Met8His37-GLP-l (7-37) ; Gly8Asp22 His37-GLP-1 (7-37) ; Val8Asp22His37-GLP-l (7-37) ; Met8Asp22His37-GLP-l (7-37) ; Arg26-GLP-1 (7-36) -amida; Arg34-GLP-1 (7-36) -amida; Lys36-GLP-1 (7-36) -amida; Arg26'34Lys36-GLP-l (7-36) -amida; Arg26 '34- GLP -1 (7-36) -amida; Arg26 3 Lys40-GLP-l (7-36) -amida; Arg26Lys36-GLP-l (7-36) -amida; Arg34Lys36-GLP-l (7-36) -amida; Gly8-GLP-1 (7-36) -amida; Val8-GLP-1 (7-36) -amida; Mets-GLP-1 (7-36) -amida; Gly8Asp22-GLP-l (7-36) -amida; Gly8Glu22His37-GLP-l (7-36) -amida; Val8Asp2 -GLP-l (7-36) -amida; Met8Asp22-GLP-l (7-36) -amida; Gly8Glu22-GLP-l (7-36) -amida; Val8Glu22-GLP-l (7-36) -amida; Met8Glu22-GLP-l (7-36) -amida; Gly8Lys22-GLP-l (7-36) -amida; Val8Lys22-GLP-l (7-36) -amida; Met8Lys22-GLP-l (7-36) -amida; Gly8His22His37-GLP-l (7-36) -amida; Gly8Arg22-GLP-l (7-36) -amida; Val8Arg22-GLP-l (7- 36) -amida; Met8Arg22-GLP-l (7-36) -amida; Gly8His22-GLP-l (7- 36) -amida; ' Val8His22-GLP-l (7-36) -amida; Met8His22-GLP-l (7- 36) -amida; His37-GLP-1 (7-36) -amida; Val8Arg22His37-GLP-l (7- 36) -amida; Met8Arg22His37-GLP-l (7-36) -amida; Gly8His37-GLP-l _ (7-36) -amida; Val8His37-GLP-l (7-36) -amida; Met8His37-GLP-l (7- 36) -amida; Gly8Asp 2His37-GLP-l (7-36) -amida; Val8Asp22His37- GLP-1 (7-36) -amida; Met8Asp22His37-GLP-l (7-36) -amida; Val8Glu22His37-GLP-l (7-36) -amida,- Met8Glu22His37-GLP-l (7-36)- amida; Gly8Lys22His37-GLP-l (7-36) -amida; Val8Lys22His37-GLP-l (7-36) -amida; Met8Lys22His37-GLP-l (7-36) -amida; Gly8Arg22His37- - GLP-1 (7-36) -amida; Val8His22His37-GLP-l (7-36) -amida; Met8His2His37-GLP-l (7-36) -amida; y derivados de los mismos. En todavía otra modalidad el agonista GLP-1 se selecciona del grupo que consiste de Val8Trp19Glu22-GLP-l (7- 37) , Val8Glu22Val25-GLP-l (7-37) , Val8TyrlsGlu22-GLP-l (7-37) , Val8TrplsGlu22-GLP-l (7-37) , Val8Leu16Glu22-GLP-l (7-37), Val8Tyr18Glu22-GLP-l (7-37) , Val8Glu22His37-GLP-l (7-37) , Val8Glu22Ile33-GLP-l (7-37) , Val8Trp16Glu22Val25Ile33-GLP-l (7- 37) , Val8Trpa6Glu22Ile33-GLP-l (7-37) , Val8Glu22Val25Ile33-GLP-l (7-37) , Val8Trp16Glu22Val25-GLP-l (7-37) , análogos de los mismos y derivados de cualquiera de estos . En todavía otra modalidad el agonista GLP-1 es un GLP-1 estable análogo/derivado. A través de esta aplicación un "análogo/derivado GLP-1 estable" significa un GLP-1 análogo o un . derivado de un análogo GLP-1 que exhibe vida media de una eliminación de plasma in vivo de al menos 10 horas en el hombre, como se determina por el método descrito abajo. Ejemplos de análogo/derivados de GLP-1 estable se puede encontrar en WO 98/08871 y WO 99/43706. El método para la determinación de vida media de eliminación de plasma de un compuesto en un hombre es : El compuesto se disuelve en una solución amortiguadora isotónica, pH 7.4, PBS o cualquier otras solución amortiguadora apropiada. La dosis se inyecta periféricamente, preferiblemente en el abdomen o muslo. Las muestras sanguíneas para la determinación de compuesto activo se toman en intervalos frecuentes, y por una duración suficiente para cubrir la parte de eliminación terminal (por ejemplo, Pre-dosis, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 10, 12, 24 (día 2), 36 (día 2), 48 (día 3), 60 (día 3), 72 (día 4) y 84 (día 4) horas posterior a la dosis) . La determinación de la concentración del compuesto activo se realiza como se describe en Wilken et al., Diabetologia 43 (51): A143, 2000. Los parámetros farmacocinéticos derivados se calculan de los datos del tiempo de concentración para cada sujeto individual por el uso de métodos de no compartimiento, usando el software comercialmente disponible WinNonlin Versión 2.1 (Pharsight, Cary, NC, USA) . La constante de relación de eliminación terminal se estima por regresión lineal logarítmica en la parte lineal de terminal logarítmica de la curva de tiempo de concentración, y se usa para calcular la eliminación de vida media. Análogos y derivados de GLP-1 estable se describen en WO 98/08871 (análogos con substituyente lipofílico) y en WO 02/46227 (análogos fusionados para albúmina de suero o para porción Fc de un Ig) . En otra modalidad, el agonista GLP-1 se formula para tener una vida media en un hombre, como se discute arriba, de al menos 10 horas. Este puede ser obtenido por formulaciones de liberación sostenida conocidas en la técnica. En todavía otra modalidad el agonista GLP-1 es exendina- 4 o exendina-3, un análogo de' exendina-4 o exendina-3 o un derivado de cualquiera de estos . Ejemplos de exendinas así como análogos, derivados, y fragmentos de los mismos que se incluyen dentro de la presente invención son aquellos descritos en WO 97/46584, EUA ,424,286 y WO 01/04156. La EUA 5,424,286 describe un método para estimular la liberación de insulina con un polipéptido de exendina. Los polipéptidos de exendina descritos incluyen HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGX [SEQ ID NO . 20]; en donde X = P o Y, y HX1X2GTFITSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS [SEQ ID NO. 21]; en donde X1X2 = SD (exendina-3) o GE (exendina-4) ) .

La WO - 97/46584 describe versiones truncadas de péptidos de exendina. Los péptidos descritos incrementan la secreción y biosíntesis de insulina, pero reduce aquellos de glucagón. La WO 01/04156 describe análogos y derivados de exendina-4 así como la preparación de estas moléculas. Los análogos de exendina-4 estabilizados por fusión para albúmina de suero o porción Fc de un Ig se. describen en WO 02/46227. En una modalidad, el análogo de exendina-4 es HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPSKKKKKK [SEQ ID ?O . 22] . En todavía otra modalidad el agonista GLP-1 es un análogo/derivado de exendina-4 estable. El _. término "análogo/derivado de exendina-4 estable", como se usa en la presente se refiere a un análogo de exendina-4 (1-39) o un derivado de un análogo de exendina-4 (1-39) que exhibe una vida media de eliminación de plasma in vivo de al menos 10 horas en un hombre, como se determina por el método descrito anteriormente por un "análogo/derivado de GLP-1 estable ". En todavía otra modalidad, el agonista GLP-1 es Aib8'35 GLP-1 (7-36) amida (Aib= ácido isobutírico a-amino) . En todavía otra modalidad, el agonista GLP-1 es Ser38, Lys39'40'41'42'43'44-Exendina-4 (1-39) amida. En todavía otra modalidad el agonista GLP-1 se selecciona de los agonistas GLP-1 de molécula pequeña de no péptido descritos en WO 00/42026. Una porción de aminoácido de un agonista GLP-1 se puede preparar por una variedad de métodos conocidos en la técnica tal como síntesis de fase sólida, purificación de agonistas GLP-1 de fuentes naturales, tecnología recombinante, o una combinación de estos métodos. Ver por ejemplo, Patentes de Estados Unidos Nos. 5,188,666, 5,120,712, 5,523,549, 5,512,549, 5,977,071, 6,191,102, Dugas and Penney 1981, Merrifield, 1962, Stewart and Young 1969, y las referencias citadas en la presente. Los derivados de agonista GLP-1 se pueden producir por derivación apropiada de una columna apropiada producida, por ejemplo, por tecnología de ADN recornbinante o síntesis de péptido (por ejemplo, síntesis de -fase sólida tipo Merrifield) usando métodos conocidos en la técnica de síntesis de péptidos y química de péptidos. Un "compuesto de gastrina" se entiende para referirse a cualquier compuesto, incluyendo péptidos y compuestos no péptido, que se asocian completamente o parcialmente con y/o activan el receptor de gastrina/CCKB. En aspectos de la invención, un compuesto de gastrina se selecciona de manera que tenga un IC50 apropiado, por ejemplo un IC50 de alrededor de ~ 0.7 nM a un receptor de gastrina/CCKB, como medida para métodos conocidos en la técnica (ver Singh et al (1995) J. Biol. Chem. 270: 8429-8438, y Kopin et al (1995) J. Biol. Chem. 270: 5019-5023 que describen ensayos de crecimiento de células in vitro, y ensayos de enlace de receptor como se describe en Singh et al (1995) J. Biol. Chem. 270: 8429-8438, y Kopinetal (1995) J. Biol. Chem. 270: 5019-5023). Un compuesto de gastrina se puede también seleccionar basado en otro criterio tal como actividad, vida media etc. como se discute en la presente. Un "compuesto de gastrina" incluye, sin limitación, las diversas formas de gastrina, tal como gastrina 71, gastrina 52, gastrina 34 (gastrina grande), gastrin 17 (gastrina pequeña), gastrina 14, y gastrina 8 (mini gastrina), pentagastrina, tetragastrina, y fragmentos, análogos, y derivados de los mismos . Las secuencias para gastrinas que incluyen gastrina-34 grande (Bonato et al, 1986, Life Science 39: 959) y gastrina-17 pequeña (Bentley et al (1966) Nature 209: 583) son conocidas en la técnica, y algunas se muestran en SEQ ID NOs . 11 hasta 18. En particular, las secuencias para gastrinas incluyen gastrina 71 de SEQ ID NO . 15, gastrina 52 de SEQ ID NO . 16, gastrina 34 (gastrina grande) de SEQ ID NO . 11 o 12, gastrina 17 (gastrina pequeña) de SEQ ID NO . 13 o 14, gastrina 14 de SEQ ID NO . 17, y gastrina 6 de SEQ ID ?O. 18 o 19. Gastrina-34 es esencialmente una extensión de una secuencia de aminoácido en el extremo de terminal ? de gastrina-17. La gastrina grande se desdobla in vivo para realizar gastrina-17. Glp en el extremo de terminal ? de una gastrina es piroglutamato, que es un ciclizado naturalmente del glutamato. En diversas modalidades, donde la cisteína o lisina se agrega a un termino de gastrina que tiene un piroglutamato, el piroglutamato se remplaza con un glutamato, o el piroglutamato se elimina. Una gastrina 34 o gastrina-17 se puede usar en la invención donde ahí es una metionina o una leucina en la posición 15, como se muestra en SEQ ID NOs : 6-9 en la presente. Los ejemplos de compuestos de gastrina que se pueden usar en la presente invención incluyen los compuestos descritos en Patente de E.U.A ?o. 6,288,301. En algunas aplicaciones de la invención, un compuesto de gastrina se puede seleccionar que es un agonista péptido o no péptido o agonista parcial del receptor de gastrina tal como A71378 (Lin et al., Am. J. Physiol. 258 (4 Pt 1): G648, 1990). En algunas aplicaciones de la invención, un compuesto de gastrina se puede seleccionar que es un ligando receptor de gastrina/CCKB que incluye pero no se limita a colecistocinina (CCK} tal como CCK 58, CCK 33, CCK 22, CCK 12 y CCK 8; y similares. En ciertos aspectos, un compuesto de gastrina puede ser un análogo activo, fragmento u otra modificación que, por ejemplo, porta la secuencia de aminoácido con una gastrina de mamífero endógena, por ejemplo, porta 60% de identidad de secuencia, o 70% de identidad, u 80% de identidad. Tales compuestos también incluyen substancias que incrementan la secreción de gastrinas endógenas, colecistolcininas o péptidos similarmente activos de sitios de almacenamiento de tejido. Los ejemplos de estos son el péptido de liberación gástrica, omeprazol que inhibe la secreción de ácido gástrico, y el inhibidor de tripsina de frijol de soya que incrementa la estimulación CCK. El "compuesto de gastrina" incluye una forma modificada de. gastrina, que incluye pero no se limita a, forma modificada de gastrina 71 [SEQ ID NO. 15] , gastrina 52 [SEQ ID NO. 16] , gastrina 34 (gastrina grande) [SEQ ID NO. 11 ó 12], gastrina 17 (gastrina pequeña) [SEQ ID NO. 13 ó 14], gastrina 14 [SEQ ID NO. 17] , gastrina 8, gastrina 6 [SEQ ID NO. 18], pentagastrina, y tetragastrina. La gastrina modificada preferiblemente comprende TrpMetAspPhe-NH2 [SEQ ID NO. 26] o TrpLeuAspPhe-NH2 [SEQ ID NO. 27] . En aspectos de la invención la gastrina modificada comprende al menos 1-34, 18-34 ó 29-34 aminoácidos de la SEQ ID NO. 11 ó 12, o 1-17, 2-17,12-17, ó 14-17 aminoácidos de la SEQ ID NO. 13 ó 14. Los compuestos de gastrina modificados para usarse en la presente invención comprende los compuestos de gastrina modificados descritos en la PCT/CA03/01778, E.U.A No. de serie 10/719,450 y solicitud de patente E.U.A. No. 60/519,933 incorporado en su totalidad por referencia. En particular, la gastrina modificada puede ser un derivado de gastrina o un análogo que comprende una secuencia mínima de 6 aminoácidos (desde el extremo de terminal C) de la gastrina, en particular 1 hasta 34, 18 hasta 34 ó 29-34 residuos de aminoácidos de la SEQ ID NO: 11 ó 12, ó 1-17,2- 17, 12-17, ó 14-17 residuos aminoácidos de la SEQ ID NO. 13 ó 14, y comprende un grupo reactivo capaz de experimentar una reacción de adición. Los ejemplos de grupos reactivos incluyen sin limitación tioles, grupos amino alfa, grupos amino epsilon, grupos carboxilo o anillos aromáticos. El grupo reactivo generalmente es capaz de ligar una secuencia de gastrina, directamente o indirectamente por medio de un agente reficulante y/o región espadadora, al portador. El grupo reactivo puede introducirse al agregar - o' sustituir un aminoácido que comprende el grupo . reactivo, por ejemplo al agregar cisteína o lisina. Por lo tanto, la gastrina modificada puede comprender una secuencia de gastrina (por ejemplo, gastrina-34 ó gastrina 17) en donde al menos un aminoácido reactivo (por ejemplo, cisteína o lisina) se agrega o substituye. La adición del aminoácido reactivo puede ser en una región terminal, en particular una región N-terminal . La gastrina modificada puede también comprender opcionalmente un espaciador. El espaciador puede interactuar con el grupo reactivo, por ejemplo, un aminoácido que comprende el grupo reactivo. El espaciador puede ser uno o más aminoácidos, péptidos, peptidomiméticos, o moléculas orgánicas pequeñas . El espaciador puede comprender al menos un aminoácido, preferiblemente al menos dos, tres, cuatro o cinco aminoácidos y en ciertas modalidades es una secuencia de varios aminoácidos, incluyendo sin limitación alanina o glicina. El espaciador puede comprende aminoácidos alternativos (por ejemplo, glicina y/o alanina), aminoácidos no alternados, una secuencia aleatoria o una secuencia particular. A modo de ejemplo, el espaciador puede sintetizarse como parte de, o puede enlazarse químicamente a un aminoácido de la secuencia de gastrina. La gastrina modificada puede comprender opcionalmente un agente reticulante. El agente reticulante puede comprende una porción homobifuncional o heterobifuncional para interacción directamente o indirectamente con gastrina, grupo espaciador y/o reactivo. El agente reticulante puede interactuar con la secuencia de gastrina o el espaciador, o puede agregarse al grupo reactivo al final (en particular terminal N) de la gastrina modificada. El agente reticulante puede ser cualquier agente que puede ligar la secuencia de gastrina y el portador directamente o por medio de un espaciador. Los ejemplos de agentes reticulante homobifuncionales incluyen sin limitación grupo amino que dirige los reactivos reticuíantes homobifuncionales tales como bisimidatos (por ejemplo, acetimidato de metilo-HCl) , haluros de arilo bifuncionales (por ejemplo, 1 , 5-dicloro-2 , 4-dinitrobenceno) , agentes acilantes bifuncionales (por ejemplo, diisocianatos), haluros de sulfonilo bifuncionales (por ejemplo, fenol-2, - disulfonil -cloruro) , acilazidas - bifuncionales (por ejemplo, tartril diazida) , dialdehídos (por ejemplo, glutaraldehído), y dicetonas (por ejemplo, 2 , 5-hexandiona) . Los ejemplos de reticulantes heterobifuncionales incluyen grupo amino y sulfhidrilo que dirigen reactivos bifuncionales (por ejemplo, propionato de N-succinimidil-3- (2-piridilditio, carboxilo y cualquier grupo sulfhidrilo o amino que dirige reactivos bifuncionales (por ejemplo, diazoacetato de p-nitrofenilo) , y grupo carbonilo y sulfhidrilo que dirige reactivos bifuncionales (por ejemplo, 1- (aminooxi) -4- [3-nitro-2-piridil) ditio) ] butano) . La gastrina modificada puede comprender opcionalmente un portador que puede ser un polímero . Un portador puede ser un polímero o aminoácidos (proteínas) , azúcares (polisacáridos) , nucleósidos, polímeros sintéticos y mezclas de los mismos. El portador de proteína puede ser una proteína encontrada en el sistema circulatorio. Los ejemplos de portadores de proteína encontrados en el sistema circulatorio, en particular en el sistema circulatorio humano, incluyen sin limitación componentes del plasma tales como suero, proteínas de suero purificadas tales como albúmina (en particular albúmina de suero humano) , transferrina, o una inmunoglobulina, proteínas de células de glóbulos rojos tales como glicoforina A y AE-1, proteínas de enlace de azúcar tales como lectina, enzimas inactivadas, proteínas enlazadas a fosfato y sulfato, y proteínas enlazadas a lípido. Los ejemplos de otros portadores poliméricos apropiados incluyen sin limitación celulosa y derivados del mismo, almidón y derivados del mismo, heparina y derivados del mismo, y polímeros sintéticos tales como polietilen glicol (PEG) y dextrano, y derivados de los mismos. Los portadores puede enlazarse a la gastrina o el espaciador a modo de grupos reactivos en, o introducirse en, el portador, gastrina, y/o espaciador. Por ejemplo, los portadores pueden enlazarse covalentemente a grupos reactivos (tal como grupos tiol, grupos alfa y epsilon amino, grupos carboxilo o grupos aromáticos) en la gastrina o espaciador que puede presentarse o agregarse por modificación química de la gastrina o espaciador. En ciertos aspectos de la invención, la gastrina modificada puede comprender la gastrina de las SEQ ID NOS 11, 12, 13, 14, 17, ó 18 y un portador. El grupo de compuestos de gastrina modificados incluyen compuestos que tienen una secuencia de aminoácido que comprende desde la terminal amino Z-Ym-Xn-AA?-AA2-AA3-AA-AA5-AA6, en donde AAX es Tyr o Phe, AA2 es Gly, Ala, o Ser, AA3 es Trp, Val, o lie, AA4 es Met o Leu, AA5 es Asp o Glu, y AA6 es Phe o Tyr y en donde AA6 se amida opcionalmente; Z es un portador, en particular un polímero y cuando el polímero es una proteína, Z es una secuencia de aminoácido; Ym es una región espaciadora opcional que comprende m' residuos de aminoácidos del aminoácido neutral pequeño, que incluye, pero no se limita a serina y alanina, y X es cualquier porción consecutiva de residuos 1-28 (=n) de SEQ ID NO: 11 ó 12 ó 1- 11 de SEQ ID. NO. 13 ó 14, con la condición de que el compuesto de gastrina enlaza la gastrina/receptor CCKB. Generalmente, m es 0 hasta alrededor de 20 residuos. En un aspecto, Z es una proteína, en particular una proteína del sistema circulatorio, más particularmente una proteína de suero, todavía más particularmente albúmina, aún más particularmente albúmina de suero humano. En modalidades, X es uno o más residuos de aminoácido desde la posición 18 hasta la posición 20 de la SEQ ID NO : 11. Por lo tanto, los compuestos de gastrina en virtud de la presencia de X, pueden tener cualesquiera de las secuencias de gastrina desde las posiciones 18-28, 19-28, 20-28, 21-28, etc . El compuesto de gastrina contiene opcionalmente un espaciador de aminoácido (Y) de longitud m, y m es 0 hasta alrededor de 20 residuos. En modalidades, X es uno o más residuos de aminoácido desde la posición 1 hasta 11 ó 2 hasta 11 de la SEQ ID NO: 13 ó 14-. Por lo tanto, los compuestos de gastrina en virtud de la presencia de X, puede tener cualesquiera de las secuencias de gastrina desde las posiciones 2 hasta 11, 3 hasta 11, 4 hasta 11, 5 hasta 11, etc. El compuesto de gastrina contiene opcionalmente un espaciador de aminoácido (Y) de longitud m, y m es O hasta alrededor de 20 residuo. Un compuesto de gastrina incluye un compuesto de gastrina modificado de la fórmula Xn-AA?-AA2-AA3-AA4-AA5~AA6 donde no hay un espaciador (Y) y m es 0, el cual puede además comprende un agente reticulante bifuncional para la interacción o ligado a un portador Z, donde Z' comprende además un polímero no proteinaceo tal como dextrano o PEG. Un compuesto de gastrina modificado particularmente descrito en la presente puede además comprende una cisteína de terminal amino o residuo de lisina. En algunas modalidades de los compuestos de gastrina modificados descritos en la presente, el componente de gastrina contiene al menos un residuo de aminoácido 29-34 de la SEQ ID NO: 11 ó 12, y esto se asocia con un polímero, un lípido o un carbohidrato. El polímero puede ser un polímero sintético o que se presenta naturalmente. El término polímero incluye una proteína de polímero de aminoácidos, y no se limita a un polímero sintético. El polímero puede ser un polietilen glicol (PEG) o un dextrano. Un compuesto de gastrina modificado puede basarse en SBQ ID NO: 11 ó 12 o gastrina-34 "grande" y tiene un residuo en la posición 32 la cual es una metionina o una leucina, respectivamente. Otro compuesto" de gastrina modificado preferido comprende una estructura C-Ym-X, en donde C es Cys o Lys, Ym es una región espacial opcional que comprende residuos de aminoácidos m de un aminoácido neutral pequeño; y X es al menos seis residuos de aminoácidos que comprende al menos las posiciones 12-17 de gastrina-17 (SEQ ID NO: 13 ó 14) o al menos las posiciones 29-34 de gastrina-34 (SEQ ID NO: 11 ó 12) . Este compuesto de gastrina modificado puede además comprender un agente reticulante bifuncional en donde una porción reactiva del agente reticulante se liga covalentemente a C, y la otra porción reactiva se liga covalentemente a un polímero o proteína. En un aspecto particular de la invención AA?-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6 en un compuesto de gastrina modificado es Tyr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe [SEQ ID NO. 23] ó Tyr-Gly-Trp-Leu-Asp-Phe [SEQ ID NO. 24] . Los compuestos de gastrina pueden sintetizarse por síntesis química usando técnicas conocidas en la química de proteínas tales como síntesis de fase sólida (Merrifield, 1964, J. Am. Chem. Assoc. 85:2149-2154) o síntesis en solución homogénea (Houbenweyl, 1987, Methods of Organic Chemistry, ed. E. Wansch, Vol. 15 I and II, Thieme, Stuttgart) . La síntesis puede llevarse a cabo usando procedimientos manuales o por automatización. La síntesis automatizada puede llevarse a cabo, por ejemplo, usando un sintetizador de péptido Applied Biosystems 431A (Perkin Elmer) . Los compuestos de gastrina también pueden obtenerse de fuentes comerciales. Por ejemplo, la gastrina humana sintéticas 17 con metionina o leucina en la posición 15 son disponibles de Bachem AG, Bubendorf , (Suiza) , y de Research Plus hie (New Jersey, Estados Unidos de América) . Un "receptor de gastrina/CCK" se refiere a un número de familias del receptor de acoplamiento de proteína G que exhiben una característica que enlaza la afinidad para una colecistocinina (CCK) incluyendo sin limitación CCK- 8, CCK-8, CCK-33, CCK-4 desulfatado, o gastrinas que incluyen sin limitación desulfatada o gastrina-17 sulfatada, o pentagastrina, u otro CCK o análogo de gastrina o miembros de la familia. Los ejemplos de proteínas del receptor de gastrina/CCK son CCKA y receptores de gastrina/CCKB, en particular un receptor de gastrina/CCK. Las condiciones y/o enfermedades se refieren a uno o más síntomas patológicos o síndromes para los cuales ya sea solos o ambos, un agonista GLP-1 o un compuestos de gastrina proporciona un efecto benéfico o terapéutico. La condición y/o enfermedad puede requerir la reducción de niveles de glucosa en la sangre, inhibición de secreción de ácido gástrico, inhibición de apoptosis de células ß, estimulación de proliferación o diferenciación de células ß, y reducción de peso en el cuerpo. Los ejemplos de condiciones y/o enfermedades incluyen pero no se limitan a dislipidemia, hiperglicemia, episodios hipoglicémicos severos, apoplejía, hipertrofia ventricular izquierda, arritmia, bacteremia, septicemia, síndrome de intestino irritable, síndrome de distensión respiratoria, dispepsia funcional, diabetes, cambios catabólicos después de la cirugía, hiperglicemia inducida por tensión, úlceras gástricas, infarto al miocardio, tolerancia debilitada a la glucosa, hipertensión, insuficiencia cardiaca crónica, estados de retención de fluidos, síndrome metabólico y enfermedades y trastornos relacionados, obesidad, complicaciones diabéticas así como síntomas de otras enfermedades en las cuales el tejido se daña debido a los niveles de glucosa elevados que incluyen la enfermedad de Alzheimer, enfermedad de parkinson y otras enfermedades degenerativas del tejido, relacionadas con la edad, así como los efectos arterogénicos de leptina elevada, por ejemplo en paciente con tolerancia disminuida a la glucosa y paciente no diabéticos obesos . El término "diabetes" como se usa en la presente significa cualquier síntoma manifestado de diabetes en cualquier mamífero incluyendo modelos animales experimentales, e incluyendo formas humanas tales como diabetes de tipo I y tipo II, diabetes de etapa temprana y una condición pre-diabética caracterizada por disminuir suavemente la insulina o elevar suavemente los niveles de glucosa en la sangre. Una "condición pre-diabética" describe a un sujeto que demuestra un síntoma en términos de niveles de - insulina o glucosa y/o demuestra una susceptibilidad a diabetes o una condición relacionada a la historia de la familia, predisposición genética, u obesidad en el caso de diabetes de tipo II, e incluye un sujeto que previamente tiene diabetes o una condición relacionada y en sujeto a riesgo de que se presente. La "actividad insulinotrópica" se refiere a una habilidad de una substancia para estimular la secreción de insulina en respuesta a los niveles de glucosa elevados para producir o incrementar el desdoblamiento de glucosa por células y disminuir los niveles de glucosa en el suero y glucosa en la sangre. Los métodos conocidos en el arte, pueden emplearse 'para ensayar la actividad insulinotrópica. Por ejemplo, los métodos in vitro e in vivo pueden usarse para medir la actividad enlazada al receptor GLP-1 o actividad enlazada al receptor de gastrina, activación del receptor (Ver los métodos descritos en BP 619,322 para Gelfand et al y patente de E.U.A. No . 5,120,712), y/o niveles de insulina o péptido C. Los compuestos, composiciones o conjugados descritos en la presente tienen actividad insulinotrópica si las células de isleta secretan insulina en la presencia de los compuestos, composiciones o conjugados de arriba en niveles agrupados o niveles en la ausencia de los - compuestos, composiciones o conjugados. Un compuesto puede administrase a un animal y la concentración de insulina puede monitorearse durante un tiempo. La "neogénesis de isleta" significa formación de nuevas células beta por diferenciación, la cual puede o no puede tener características de células madre las cuales tienen la habilidad para reproducirse en una manera ilimitada.

Descripción Detallada de la Invención La invención se refiere a composiciones, conjugados y métodos que utilizan un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina para proporcionar efectos benéficos. En particular, la invención se refiere a composiciones, conjugados y métodos para la prevención, intervención y/o tratamientos de una condición y/o enfermedad discutida en la presente que comprende un agonista GLP-1 y un compuestos de gastrina. En aspectos de la invención, las composiciones, conjugados y métodos de la invención proporcionan efectos benéficos elevados, en particular efectos benéficos sostenidos relativos a un agonista GLP-1 y/o un compuestos de gastrina solo. Los efectos benéficos puede ser aditivos o efectos sinérgicos. En aspectos de la invención, donde la condición y/o enfermedad es diabetes, efectos benéficos en particular efectos benéficos sostenidos de una composición, tratamiento de combinación, o conjugado de la invención pueden manifestarse como uno o más de los siguientes : a) Un incremento en los niveles de insulina pancreática relativos a los niveles medidos en la ausencia de los compuestos activos o para cada compuesto solo después de la administración a un sujeto con síntomas de diabetes. Preferiblemente, los compuestos juntos incluyen al menos alrededor de 0.05%, 0.1%, 0.5%, 1%, 2%, 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 33%, 35%, 40%, 45%, ó 50% de incremento en niveles de insulina pancreática en un sujeto. b) Una reducción de una ausencia de síntomas de inflamación de "isletas después de la administración a un sujeto con síntomas de diabetes. c) Una disminución en los niveles de glucosa en la sangre relativo a los niveles medidos en la ausencia de los compuestos o para cada compuesto solo en sujetos con síntomas de diabetes. Preferiblemente, los compuestos incluyen al menos alrededor de 1%, 2%, 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, ó 90% de disminución en los niveles de glucosa en la sangre. Más preferiblemente, los compuestos producen niveles de glucosa en la sangre de alrededor de o cercanos a los niveles comunes en un sujeto normal. d) Un incremento en niveles de péptido C relativo a los niveles medidos en la ausencia de los compuestos o para cada compuestos solo en sujetos con síntomas de diabetes. Preferiblemente, los compuestos juntos inducen al menos alrededor de 0.05%, 0.1%, 0.5%, 1%, 2%, 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 33%, 35%, 40%, 45%, ó 50% de incremento en niveles del péptido C. e) El mantenimiento de los niveles de glucosa en la sangre a alrededor de normal durante un periodo prolongado de tiempo. f) El mantenimiento de hemoglobina Ale o hemoglobina glicada de alrededor de niveles normales durante un periodo prolongado de tiempo, en particular manteniendo un % de hemoglobina Ale a entre 6-8%, más particularmente a alrededor de 7%. g) Una reducción en destrucción de células beta. Preferiblemente los compuestos inducen al menos alrededor de 1%, 2%, 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, ó 90% de reducción. h) Un incremento en la función de células beta.

Preferiblemente los compuestos inducen al menos alrededor de 1%, 2%, 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, ó 90% de incremento en función de célula beta. i) Una reducción, prevención o pérdida de la relación de la progresión de la enfermedad en un sujeto con diabetes. j) Una reducción o prevención del desarrollo de hiperglicernía severa y cetoacidosis con síntomas de diabetes . k) Un incremento en supervivencia en un sujeto con síntomas de diabetes . En modalidades de la invención, los efectos benéficos o " efectos benéficos sostenidos comprenden o consisten esencialmente de dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve,- diez u once, de a) hasta k) . En modalidades particulares, los efectos benéficos o efectos benéficos sostenidos comprenden o consisten esencialmente de a) , b) , y c) ; a), b) , c) , y d) ; a), b) , c) , d) , y e) ; a), b) , c) , d) , e) , y f) ; a) , b) , c) , d) , e) , f) , y g) ; a) , b) , c) , d) , e) , f) , g) , y h) ; a) , b) , c) , d) , e) , f) , g) , h) , y i) ; a) , b) , c) , d) , e) , f) , g) , h) , i) y j ) ; a), d) , y e); a), d) , e) , y h) ; a), d) , e) , h) , y i) ; a), d) , e) , h) , i), y j); a), b) , c) , d) , e) , h) , i), y j); a), b) , c) , d) , e) , h) , i),j), y k) ; b) , c) , d) , y ); b) , c) , d) , e) , h) , i), y j); y, b) , h) , i) y j) . Uno o más de estos efectos benéficos o efectos benéficos sostenidos pueden demostrarse en un sujeto diabético o modelo de enfermedad, por ejemplo, un ratón (NOD) no obeso con síntomas de diabetes, usando métodos estándar conocidos por aquellos de habilidad en el arte. Por ejemplo, métodos comercialmente disponibles y kits pueden usarse para ensayar niveles de insulina pancreática, niveles de glucosa, niveles en el péptido C y hemoglobina Ale Un compuestos de gastrina puede seleccionarse por modalidades particulares en la presente invención y para proporcionar un efecto benéfico específico basado en características incluyendo esta actividad insulinotrópica, la habilidad para aumentar la actividad de un agonista GLP-1 (en particular para elevar los efectos insulinotrópicos de un agonista GLP-1) , y/o incrementar la estabilidad física o química de un agonista GLP-1. Un compuesto de gastrina puede también seleccionarse basado en esta habilidad para estimular la proliferación/diferenciación de células beta y vida media in vivo. En una aspecto de la invención, un compuesto de gastrina que se usa en los métodos, composiciones y conjugados de la invención es grastina 17 y análogos y derivados de los mismos, asociados con un polímero. En un aspecto particular, el compuesto de gastrina es gastrina humana sintética I que tiene 17 residuos de aminoácidos con un residuo Leu en un aminoácido en la posición 15 [SEQ ID NO. 14] . En otro aspecto de la invención, un compuesto de gastrina que se usa en los métodos, composiciones y conjugados de la invención es gastrina 34 y análogos y derivados de los mismos. En un aspecto particular, el compuesto de gastrina es una gastrina humana sintética 34 con metionina o leucina en la posición 32 [SEQ ID NO. 11 ó 12] . En un aspecto adicional de la invención, un compuesto de gastrina que se usa en los métodos, composiciones y conjugados de la invención es gastrina 34 o gastrina 17 o porciones de las mismas, directamente o indirectamente interactuando o asociadas con una proteína de suero, en particular albúmina o una inmunoglobulina. Más particularmente albúmina de suero humano. En aspectos particulares de la invención, un compuesto de gastrina comprende una gastrina humana sintética 34 que tiene 2-34 residuos de aminoácidos de SEQ ID NO. 11 ó 12, y opcionalmente una cisteína en la terminal N y/o un portador; la gastrina humana sintética tiene 1-17 residuos de aminoácido con un residuo Leu en la posición de aminoácido 15 [SEQ ID NO. 14] -y opcionalmente un residuo de cisteína en la terminal N; y una gastrina humana sintética que tiene residuos de aminoácidos 2 hasta 17 ó 5-17 de SEQ ID NO. 13 ó 14, opcionalmente con un residuo de cisteína en la terminal N y/o un portador (por ejemplo, PEG o albúmina de suero humano) ligado por medio de un espaciador [por ejemplo, Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ala, esto es, (GA)5] [SEQ ID NO. 25], en particular, una gastrina humana sintética que tiene residuos de aminoácidos 2 hasta 17 ó 5-17 de SEQ ID NO. 13 ó 14, con un polímero de albúmina de suero humano (HSA) ligado por medio de un espaciador Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ala [esto es, (GA)5], y opcionalmente un residuo de cisteína en la terminal N. Un agonista GLP-1 puede seleccionarse para aplicaciones particulares en la presente invención basados en una o más de las siguientes características: habilidad para enlazar al receptor GLP-1, preferiblemente con una afinidad constante Kd de menos de alrededor de 1 µM, más preferiblemente al menos alrededor de lOOnM; habilidad para iniciar una trayectoria de transducción de señal resultando en actividad insulinotrópica; actividad insulinotrópica; estimulación de proliferación/diferenciación de células beta; resistencia para el desdoblamiento DPIV, y una vida media in vivo de al menos alrededor de 15 minutos hasta 24 horas, preferiblemente 2 hasta 10 horas o 2 hasta 8 horas en humanos usando métodos convencionales .(ver por ejemplo, el método descrito en la patente de EUA 2003/0144206) . En aspectos de la invención el agonista GLP-1 es un polipéptido GLP-1 truncado naturalmente (GLP-l(7-36) o ( (GLP-1(7-37)), o un análogo o derivado del mismo. Las secuencias de que estos agonistas GLP-1 truncados se presentan naturalmente se representan en las SEQ ID NOs. 4, 5, y 6. En ciertos aspectos de la invención, un agonista GLP-1 puede tener la secuencia aminoácido de las SEQ ID NOs. 1, 2 , ó 3 modificadas de manera que los residuos de aminoácidos en las posiciones 1-20, preferiblemente 1-15, más preferiblemente 1-10, más preferiblemente 1-5 difieren de las secuencias de las SEQ ID NOs. 1, 2 ó 3. En una modalidad de la invención, el agonista GLP-1 es un análogo de GLP-1 (7-37) ó GLP-1 (7-36) el cual tiene al menos 10 residuos de aminoácidos que son diferentes de aquellos en GLP-l(7-37) ó GLP-l(7-36), menos de 5 residuos de aminoácidos que son diferentes de aquellos en GLP-l(7-37) ó GLP-l(7-36), menos de 3 residuos de aminoácidos que son diferentes de aquellos en GLP-1 (7-37) ó GLP-l(7-36), preferiblemente solamente un residuo de aminoácido que es diferente de la secuencia de GLP-1 (7-37) ó GLP-1 (7-36). El agonista GLP-1 que puede tener utilidad específica en la presente invención incluye polipéptidos donde uno o más aminoácidos se han agregado a la terminal N y/o terminal C de GLP-l(7-37) ó GLP-l(7-36). Preferiblemente, alrededor de uno hasta seis aminoácidos pueden agregarse a la terminal N y/o de alrededor de uno hasta ocho aminoácidos pueden agregarse a la terminal C. En ciertas aplicaciones los agonistas GLP-1 se seleccionan para tener hasta 39 aminoácidos. Los aminoácidos en las posiciones 1-6 de un agonista GLP-1 extendido puede seleccionarse de manera que sean en el mismo o se conserven substituciones del aminoácido en las posiciones correspondiente del GLP-l(7-37) ó GLP-l(7-36) precursor. Los aminoácidos en las posiciones 38-45 de un agonista GLP-1 extendido pueden seleccionarse de manera que sean el mismo o se conserven substituciones de aminoácidos en las posiciones correspondiente de exendina-3 ó exendina-4 (SEQ ID NO. 7 y 8 respectivamente) . En aspecto de la invención un agonista GLP-1 se utiliza para comprender un análogo en la posición 8 en donde la columna para tales análogos o fragmentos de los mismos contiene un aminoácido diferente a alanina . El aminoácido en la posición 8 puede seleccionarse de" glicina, valina, leucina, isoleucina, serina, treonina o metionina. En una modalidad un agonista GLP-1 es un análogo insulinotrópico de GLP-l(l-37), por ejemplo, Met8-GLP-1 (7- 37), en donde la alanina en la posición 8 se reemplaza por metionina y los residuos de aminoácido en la posición 1 hasta 6 han sido borrados y Arg34-GLP-1 (7-37) en donde la valina en la posición 34 se reemplaza con arginina y los residuos de aminoácido en la posición 1 hasta 6 tienen que ser borrados .

En otra modalidad, los agonistas GLP-1 se seleccionan de aquellos que tienen la secuencias de amida GLP-1 (7-37) OH y GLP-1 (7-36) , y los análogos en la posición 8 correspondiente en donde la columna para tales análogos contiene un aminoácido diferente a alanina. El aminoácido en la posición 8 puede seleccionarse de glicina, valina, leucina, isoleucina, serina, treonina o metionina, preferiblemente valina o glicina. Los análogos puede contener adicionalmente (a) un aminoácido en la posición 22 seleccionado de ácido glutámico, lisina, ácido aspártico, arginina, y preferiblemente ácido glutámico o lisina; (b) un aminoácido en la posición 30 se selecciona de ácido glutámico, ácido aspártico, serina o histidina; (c) un aminoácido en- la posición 37 se selecciona de lisina, arginina, treonina, ácido glutámico, ácido aspártico, serina, triptofano, tirosina, fenilanalina, o histidina; y/o (d) aminoácido en la posición 27 se selecciona de alanina, lisina, arginina, triptofano, tirosina, fenilalanina, o histidina. Un grupo de análogos GLP-1 y derivados para uso en la presente invención comprende el agonista GLP-1 descrito en la patente de E.U.A. No. 5,545,618 y Solicitud de patente de E.U.A. No. de serie 20040018975. Los análogos incluyen péptidos GLP-1 activados, 7-34, 7-35, 7-36 y 7-37 que tienen substituciones de aminoácidos en las posiciones 7-10 y/o son truncamientos en la terminal C y/o contienen diversas otras substituciones de aminoácidos en el péptido básico. Los análogos preferidos incluyen aquellos con substituciones de aminoácidos D en las posiciones 7 y 8 y/o aminoácidos N-alquilados o N-acilados en la posición 7 desde aquellos que son particularmente resistentes a la degradación in vivo. En aspectos de la invención, un agonista GLP-1 comprende un péptido que comprende o se selecciona del grupo que consiste de GLP-1 (1-38); GLP-1 (1-39), GLP-1 (1-40), GLP-1 (1-41), GLP-1 (7-38), GLP-1 (7-39), GLP-1 (7-40) , ' y GLP-1 (7-41) . En otro aspecto de la invención al menos un aminoácido de un agonista GLP-1 que tiene al menos un substituyente enlazado directamente o indirectamente (por ejemplo, por medio de un espaciador tal como ?-Glu o ß-Ala) . Un substituyente se selecciona generalmente para hacer el perfil de acción del agonista GLP-1 precursor más prolongado, hacer el agonista GLP-1 más metabólicamente y establecer físicamente y/o incrementar la solubilidad del agonista GLP- 1..Un ejemplo de un substituyente particular es una amida, un carbohidrato, y un substituyentes lipofílico. Un substituyente lipofílico incluye pero no se limita a un grupo alquilo, un grupo el cual tiene un grupo de ácido ?- carboxílico, un grupo acilo de una cadena recta o ramificada, ácido graso o alcano tal como tetradecanoilo, hexadecanoilo. Las composiciones particulares, conjugados y tratamientos de la invención usando agonistas GLP-1 con substituyentes lipofílicos tales como aquellos descritos en WO 99/43341 (Novo Nordisk) y US 2003/0119734A1 (Novo Nordisk) . En aspectos particulares de la invención un agonista " GLP-1 es una GLP-1 (7-36) -amida o Tyr31-exendin-4 (1-31) -amida.

Ciertos aspectos de la invención producen un agonista GLP-1 que es un derivado de GLP-1 (7-36) ó GLP-1 (7-37) que ' comprende un substituyente lipofílico. En una modalidad, el agonista GLP-1 es Arg34Lys2S (Ne (?-Glu (Na-hexadecanoil) )) -GLP- 1(7-37) . En modalidades de la invención, el agonista GLP-1 comprende o se selecciona del grupo que consiste de: Gly8- GLP-1 (7-36) -amida, Gly8-GLP-1 (7-37) , Val8-GLP-1 (7-36) -amida, Val8-GLP-l(7-37) , Val8Asp22-GLP-l (7-36) -amida, Val 8 Asp22 -GL - 1(7-37) , Val8Glu22-GLP-l (7-36) -amida, Val8Glu22-GLP-l (7-37) , Val8Lys22-GLP-l (7-36) -amida, Val8Lys22-GLP-l (7-37) -Val8Arg22- GLP-1 (7-36) -amida, Val 8Arg22-GLP-l (7-37) , Val8His22-GLP-l (7- 36) -amida, -Val8His22-GLP-l (7-37) , Arg26-GLP-1 (7-37) ; Arg34-"GLP-1 (7-37) ; Lys36-GLP-1 (7-37) ; Arg26,3 Lys3S-GLP-l (7-37) ; Arg26 '34- GLP -1 (7-37) ; ' Arg26'34Lys40-GLP-l (7-37) ; Arg26Lys36-GLP-1(7-37) ; Arg34Lys36-GLP-l(7-37) ; Val8Arg22-GLP-l (7-37) ; Met8Arg22-GLP-l (7-37) ; Gly8His22-GLP-l (7-37) ; Val8His22-GLP~l (7-37) ; Met8His22-GLP-l (7-37) ; His37-GLP-1 (7-37) ; Gly8-GLP-1 (7-37) ; Val8-GLP-1 (7-37) ; Met8-GLP-1 (7-37) ; Gly8Asp22-GLP-l (7-37) ; Val 8Asp22-GLP-l (7-37) ; Met8Asp22-GLP-l (7-37) ; Gly8Glu22-GLP-l (7-37) ; Val8-GLP-1 (7-37) ,- Gly8Lys22-GLP-l (7-37) ; Val8Lys22-GLP-1 (7-37) ; Glu22Met8Glu22-GLP-l (7-37) ; Gly8Lys22-GLP-l (7-37) ; Val 8Lys22- GLP- 1(7-37) ; Met6Lys22-GLP-l (7-37) ; Gly8Arg22-GLP-l (7-37) ; Val8Lys22His37-GLP-l(7-37) ; Gly8Glu22His37-GLP-l (7-37) Val8Glu22His37- GLP- 1(7-37) ; Met8Glu22His37-GLP-l (7-37) Gly8Lys22His37-GLP-l(7-37) ; Met8Lys22His37-GLP-l (7-3.7) Gly8Arg22His37-GLP-l(7-37) ; Val8Arg22His37-GLP-l (7-37) Met8Arg22His37-GLP-l (7-37) ; Gly8His22His37-GLP-l (7-37) Val8His22His37-GLP-l(7-37) ; Met8His22His37-GLP-l (7-37) Gly8His37-GLP-l (7-37) ; Val8His37-GLP-l (7-37) ; Met8His37-GLP-l (7-37) ; Gly8Asp22His37-GLP-l (7-37) ; Val8Asp 2His37-GLP-l (7-37) ; Met8Asp22His37-GLP-l(7-37) ; Arg26-GLP- (7-36) -amida; Arg34-GLP-1 (7-36) -amida; Lys36-GLP-1 (7-36) -amida; Arg26'34Lys36-GLP-l- (7- 36) -amida; Arg26 '34- GLP -1 (7-36) -amida; Arg26'3 Lys40-GLP-l (7-36) - amida; Arg26Lys36-GLP-l (7-36) -amida; Arg34Lys36-GLP-l (7-36) - amida; Gly8-GLP-1 (7-36) -amida; Val8-GLP-1 (7-36) -amida,- Met8- GLP-1 (7-36) -amida; Gly8Asp22-GLP-l (7-36) -amida; Gly8Glu22His37- GLP-1- (7-36) -amida; Val 8Asp2 -GLP-l (7-36) -amida; Met8Asp2 -GLP- 1 (7-36) -amida; Gly8Glu22-GLP-l (7-36) -amida; Val8Glu2 -GLP-l (7-36) -amida; Met8Glu22-GLP-l (7-36) -amida; Gly8Lys22-GLP-l (7-36) -amida; Val8Lys22-GLP-l (7-36) -amida; Met8Lys 2-GLP-l (7-36) -amida; Gly8His22His37-GLP-l (7-36) -amida; Gly8Arg2 -GLP-l (7-36) -amida; Val8Arg 2-GLP-l (7-36) -amida; Met8Arg2 -GLP-l (7-36) -amida; Met8Arg22His37-GLP-l (7-36) -amida; Gly8His22-GLP-l (7-36) -amida; Val8His22-GLP-l (7-36) -amida; Met8His22-GLP-l (7-36-amida His37-GLP-1 (7-36) -amida; Val8Arg22His37-GLP-l (7-36) -amida Met8Arg22His37-GLP-l (7-36) -amida; Gly8His37-GLP-l (7-36) -amida Val 8His37-GLP-l (7-36) -amida; Met8His37-GLP-l (7-36) -amida Gly8Asp22His37-GLP-l (7-36) -amida; Val8Asp22His37-GLP-l (7-36) -amida; Met8Asp22His37-GLP-l (7-36) -amida; Val8Glu22His37-GLP-l (7- 36) -amida; Met8Glu22His37-GLP-l (7-36) -amida; Gly8Lys22His37-GLP-1 (7-36) -amida; Val8Lys22His37-GLP-l (7-36) -amida; Met8Lys22His37-GLP-1 (7-36) -amida; Gly8Arg22His37-GLP-l (7-36) -amida; Val8His22His37-GLP-l (7-36) -amida; Met8His22His37-GLP-l (7-36) -amida; Val8-GLP-1 (7-37) OH, Gly8-GLP-1 (7-37) OH, Glu22-GLP-1 (7- 37) OH, Arg22-GLP-l(7-37)OH, Arg22-GLP-1 (7-37) OH, Lys22-GLP-1 (7-37)OH, Cys22-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Glu22-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Asp22-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Arg22-GLP-1 (7-37) OH, Val8Lys 2-GLP- 1(7-37) OH, Val8-Cys22-GLP-l(7-37)OH, Gly8 -Glu22- GLP -1 (7-37) OH, Gly8-Asp 2-GLP-l(7-37)OH, Gly8 -Arg22- GLP -1 (7-37) OH, Gly8-Lys22- GLP-l(7-37)OH, Gly8-Cya22-GLP-1 (7-37) OH, Glu2 -GLP-1 (7-36) , NH2, ASP22-GLP-1(7-36)NH2, Arg22-GLP-1 (7-36) ?H2, Lys22-GLP-1 (7- 36)?H2, Cys22-GLP-1 (7-36)NH2, Val 8 -Glu22- GLP -1 (7-36)?H2, Val8-Asp22-GLP-1 (7-36)?H2, Val 8 -Arg22- GLP -1 (7-36)?H2, Val8-Lys22-GLP- 1(7-36)?H2, Val8-Cys22-GLP-1(7-36)?H2, Gly8-Glu22-GLP-1 (7- 36)?H2, Gly8Asp22-GLP-l(7-36)?H2, Gly8 -Arg22- GLP -1 (7-36)?H2, Gly8-Lys 2-GLP-1 (7-36)?H2, Gly8 -Cys22- GLP -1 (7-36) ?H2, Lys23-GLP-1(7-37) OH, Val8-Lys23-GLP-l(7-37)OH, Gly8-Lys23-GLP-1 (1-31) OH, His24-GLP-1 (7-37) OH, Val8-His24-GLP-1 (7-37) OH, Gly8-His24-GLP-1(7-37) OH, Lys24-GLP-l(7-37)OH, Val8-Lys2 -GLP-1 (7-37) OH, Gly8-Lys23-GLP-1 (7-37) OH, Glu30-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Glu30-GLP-1 (7-37) OH, Gly8-Glu30-GLP-1 (7-37) OH, Asp30-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Asp30-GLP-1(7-37)OH, Gly8-Asp30-GLP-1 (7-37) OH, Gln30-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Gln30-GLP-1(7-37)OH, Gly8-Gln30GLP-l (7-37) OH, Tyr30-GLP-l(7-37)OH, Val8~Tyr30-GLP-l (7-37) OH, Gly8 -Tyr30- GLP -1 (7-37) OH, Ser30-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Ser30-GLP-1 (7-37) OH, Gly8-Ser30-GLP-1 (7-37) OH, His30-GLP-1 (7-37) OH, Val8His30-GLP-l (7-37) OH, Gly8-His30-GLP-1(7-37)OH, Glu34-GLP-1 (7-37) OH, Val8Glu34-GLP-l(7-37)OH, Gly8 -Glu34- GLP -1 (7-37) OH, Ala34-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Ala34-GLP-l(7-37)OH, Gly8 -Al a34- GLP- 1 (7-37) OH, Gly3 -GLP-1(7-37) OH, Val8-Gly34-GLP-l(7-37)OH, Gly8-Gly34-OLP-l (7-37) OH, Ala35-GLP-l(7-37)OH, Val8-Ala35-GLP-1 (7-37) OH, Gly 8- Al a35- GLP -1(7-37) OH, Lys35-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Lys35-GLP-1 (7-37) OH, Gly8- Lys35-GLP-1 (7-37) OH, His35-GLP-1 (7-37) OHVal8-His35-GLP-l (7- 37) OH, Gly8-His35-GLP-l(7-37)OH, Pro35-GLP-l (7-37) OH, Val8-Pro35-GLP-1(7-37)OH, Gly8-Pro35-GLP-l (7-37) OH, Glu35-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Glu35-GLP~l(7-37)OH, Gly8 -Glu35- GLP -1 (7-37) OH, Val8-Ala27-GLP-1 (7-37) OH, Val8-His37-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Glu22-Lys23-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Glu22-Glu23-GLP-1 (7-37) OH, Val8-Glu22-Ala27-GLP-1(7-37)0H, Val8-Gly3 -Lys3s-GLP-1 (7-37) OH, Val8-His37-GLP-l(7-37)OH, y Gly8-His37-GLP-1 (7-37) OH, y derivados de los mismos . En una modalidad particular un agonista GLP-1 comprende o se selecciona del grupo que consiste de Val8-GLP-1 (7-37) OH, Gly8-GLP-1 (7-37) OH, Glu22-GLP-1 (7-37) OH, Lys22-GLP-1 (7-37) OH, Val 8- Glu22- GLP -1 (7-37) OH, Val 8 -Lys22- GLP -1 (7-37) OH, Gly8-Glu22-GLP-1 (7-37) OH, Gly8-Lys22-GLP-1 (7-37) OH, Glu22-GLP-1 (7-36)NH2, Lys22-GLP-1(7-36)NH2, Val 8- Glu22- GLP -1 (7-36) NH2/ Val8-Lys22-GLP-1(7-36)NH2, Gly8-Glu22-GLP-1(7-36)?H2, Gly8-Lys22-GLP-1 (7- 36)NH2, Val8-His37-GLP-l(7-37)OH, Gly8-His37-GLP-1 (7-37) OH, Arg3 -GLP-1(7-36)?H2, y Arg34-GLP-1 (7-37) OH. En otra- modalidad particular, el agonista GLP-1 comprende o se selecciona del grupo que consiste de Gly8-GLP-1(7-37) , Val8GLP-l (7-37) , Val8Asp22GLP-l (7-37) , Val8Glu22GLP-1(7-37) , Val8Lys22GLP-l(7-37) , y Val8His22GLP-l (7-37) , y análogos y derivados de los mismos. En una modalidad particular adicional, el agonista GLP-1 comprende o se selecciona del grupo que consiste de Gly8- GLP1 (7-36) amida, Val8 GLP1 (7-36) amida, Val8Asp22GLPl (7- 36) amida, Val8Glu22GLPl (7-36) amida, Val8Lys22GLPl (7-36) amida, y Val8His22GLPl (7-36) amida, y análogos y derivados de los mismos . ~5 Todavía en modalidades adicionales de la invención, el agonista GLP-1 (por ejemplo, exedina 3 y exedina 4) o un análogo, derivado, o fragmento del mismo. Los ejemplos de exendinas que pueden utilizarse en la presente invención incluyen sin limitación aquellas descritas en WO 9746584, 0 Patente E.U.A. No. 5,424,286 y WO 01/04156. La Patente E.U.A. No.- 5,424,286 describe el uso de un polipéptido de exedina para estimular la liberación de insulina. Los polipéptidos de exendina descritos en la Patente de E.U.A. incluyen HGEGTFTSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGX en donde X=P o Y, y 5 HX1X2GTFITSDLSKQMEEEAVRLFIEWLKNGGPSSGAPPPS; en donde X1X2=SD (exendina-3) o GE (exendina-4) . La WO 9746584 describe péptidos de exendina truncados que incrementan la secreción y biosíntesis de insulina, pero reducen los glucagones. La WO 01/04156 describe análogos y derivados de exendina-4 y su 0 preparación. En otra modalidad, el agonista GLP-1 es un análogo insulinotrópico de exendina-4 (1-39) , en particular Ser2Asp3-exendina-4 (1-39) en donde los residuos de aminoácidos en la posición 2 y 3 se han reemplazado con 5 serina y ácido aspártico, respectivamente (este análogo particular también se conoce en el arte como exendina-3, SEQ ID NO : 7) . En ciertos aspectos de la invención, el agonista GLP-1 es un agonista GLPXL estable en particular un análogo GLP-1 o derivado, o un análogo de exendina-4 o exendina-3 estable o derivado . Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden seleccionarse de manera que proporcionen efectos benéficos, en particular efectos benéficos estadísticamente importantes o efectos benéficos" sostenidos, en comparación con un agonista GLP-1 o un compuesto de gastrina solo. Los efectos benéficos con respecto a la condición diabética pueden evidenciarse por uno o más de los efectos benéficos descritos en la presente, en particular uno, dos, tres, cuatro, cinco, seis, siete, ocho, nueve o diez de los efectos benéficos descritos arriba en a) hasta j) . La composición farmacéutica con efectos benéficos, en particular efectos benéficos estadísticamente importantes particular o efectos benéficos sostenidos, se proporciona que comprende un agonista GLP-1 seleccionado del grupo que consiste de Gly8-GLP-1 (7-37) , Val8GLP-l (7-37) , Val8Asp22GLP-1(7-37), Val8Glu22GLP-l(7-37) , Val8Lys22GLP-l (7-37) , Val8His22GLP-l (7-37) , Arg34Lys26 (?e (?-Glu (?a-hexadecanoil) ) ) -GLP-K7-37), Gly8-GLP-1 (7-36) amida, Val8GLP-l (7-36) , Val8Asp22GLP-l (7-36) amida, Val8Glu22GLP-l (7-36) amida, Val8Lys22GLP-l (7-36) amida, y Val8His22GLP-l (7-36) amida, y un compuesto de gastrina (por ejemplo, SEQ ID NO, 11, 12, 13 ó 14), asociado opcionalmente con una proteína de suero. En un aspecto, la composición farmacéutica con efectos benéficos estadísticamente importantes o efectos benéficos sostenidos se proporciona que comprende GLP-l(7-36) [SEQ ID N0:5) y gastrina-17 (leu) [SEQ ID N0:14] . En un aspecto, la composición farmacéutica con efectos benéficos estadísticamente importantes o efectos benéficos sostenidos se proporciona que comprende Arg34Lys26 (Ne (?-Glu (N01-hexadecanoil) -GLP-K7-37) , y gastrinal7 (leu) [SEQ ID NO: 14], En otro aspecto, la composición farmacéutica con efectos benéficos estadísticamente importantes o efectos benéficos sostenidos se proporciona que comprende Aib8,35GLP-l (7-36) amida o Ser38, Lys39'40'41' 2' 3'4 -Exendina-4 (1-39) amida y gastrina-17 (leu) [SEQ ID NO: 14]. La composición farmacéutica con efectos benéficos, en particular efectos benéficos estadísticamente importantes o efectos benéficos sostenidos, se proporciona que comprende un agonista GLP-1 seleccionado del grupo que consiste de Gly8-GLP-K7-37), Val8GLP-l(7-37) , Val8Asp22GLP-l (7-37) , Val8Glu22GLP-l (7-37) , Val8Lys22GLP-l (7-37) , Val8His22GLP-l (7-37), Arg34Lys26 (Ne (?-Glu (Na-hexadecanoil) )) -GLP-1(7-37) , Gly8-GLP-1 (7-36) amida, Val8GLP-l (7-36) amida, Val8Asp22GLP-l (7-36) amida, Val8Glu22GLP-l (7-36) amida, Val8Lys22GLP-l (7-36) amida, y Val8His22GLP-l (7-36) amida, y un compuesto de gastrina que tiene una secuencia de aminoácido que comprende, desde la terminal amino, Z-Ym-Ym-AA?-AA2-AA3-AA-AAs-AAs, en donde AAX es Tyr o Phe, AA2 es Gly, Ala, o Ser, AA3 es Trp, Val, o lie, AA4 es Met o Leu, AA5 es Asp o Glu, y AA6 es Phe o Tyr; Z es un polímero y cuando el polímero es una proteína Z es una secuencia de aminoácido; Ym es una región espaciadora opcional que comprende residuos de aminoácido m del aminoácido neutral pequeño que incluye pero no se limita a serina y alanina, y X es cualquier porción consecutiva de residuos 1-28 de SEQ ID NO: 11 -ó 12, o residuos 1-11 de SEQ ID NO: 13 ó 14, preferiblemente AA-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6 es Tyr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe o Tyr-Gly-Trp-Leu-Asp-Phe. En una modalidad particular, Z es una proteína de suero, en particular albúmina de suero humano. En ciertos aspectos de la invención, las sales farmacéuticamente aceptables del agonista GLP-1 y/o sales farmacéuticamente aceptables del compuesto de gastrina se utilizan. La invención en aspectos particulares proporciona una composición farmacéutica que se ha adaptado para administración a un sujeto para proporcionar efectos benéficos sostenidos para tratar una condición y/o enfermedad, preferiblemente diabetes. En una modalidad para la prevención y/o tratamiento de la diabetes, la composición está en una forma tal que la administración a un sujeto resulta en niveles de glucosa en la sangre que son alrededor de normal que persisten en el sujeto durante un periodo prolongado de tiempo después del cese del tratamiento. Esta invención proporciona un conjugado que comprende un agonista GLP-1 ligado a o que interactúa con el compuesto de gastrina en donde la interacción es, por ejemplo, por medio de un grupo amino o carboxilo. La invención también se refiere a conjugados covalentes aislados de la invención, y composiciones que comprenden conjugados covalentes de la invención. El agonista GLP-1 puede conjugarse a especies por medio de un enlace éster entre un OH y un COOH del compuesto de gastrina. Los conjugados del agonista GLP-1 y el compuesto de gastrina puede conjugarse con un espaciador o ligador intermediario. Un espaciador o ligador apropiado puede ser un mono o disacáridos, un aminoácido, un sulfato, un succinato, un acetato, o un espaciador o ligador polimérico oligomérico que comprende una o más de tales porciones. La invención también proporciona métodos para preparar conjugados que resulta en conjugados con propiedades farmacocinéticas mejoradas, actividad biológica, y efectos benéficos. Los métodos comprende incubar el agonista GLP-1 con un compuesto de gastrina bajo condiciones que permiten la formación de una ligadura covalente entre los dos compuestos. La invención por lo tanto contempla un proceso para preparar un conjugado covalente que comprende un agonista GLP-1 enlazado o ligado covalente al compuesto de gastrina, el proceso comprende: incubar el agonista GLP-1 con el compuesto de gastrina bajo condiciones y a un pH y durante un tiempo suficiente para la formación de un enlace o ligadura covalente entre el agonista GLP-1 y compuesto de gastrina; y aislar el conjugado covalente. El proceso anterior para preparar el conjugado comprende el agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina que proporciona un conjugado con una cantidad substancial del agonista GLP-1 ligado covalentemente al agonista GLP-1. Las proteínas de fusión de terminal N o terminal C o proteínas quiméricas, que comprenden un agonista GLP-1 conjugado con el compuesto de gastrina, opcionalmente con un espaciador o ligador, también puede prepararse al fusionar, a través de técnicas recombinantes, la secuencia de terminal N o terminal C del agonista GLP-1 y la secuencia del compuesto de gastrina. La invención se refiere a un conjugado preparado por el proceso descrito en la presente . La invención también se refiere a la formulación farmacéutica o composición que comprende conjugados de la invención y un portador, excipiente, o vehículo farmacéuticamente aceptable . La invención se refiere además a una formulación o composición farmacéutica de conjugados covalentes substancialmente puros que comprende el agonista GLP-1 ligado covalentemente al compuesto de gastrina que proporciona efectos benéficos preferiblemente efectos benéficos sostenidos en comparación con el agonista GLP-1 solo. En una modalidad, la formulación farmacéutica se proporciona que consiste esencialmente de conjugados covalentes que comprende el agonista GLP-1 ligado covalentemente sin un espaciador o ligador intermediario al compuesto de gastrina. En otra modalidad, la formulación farmacéutica se proporciona que consiste esencialmente de conjugados covalentes que comprende el agonista GLP-1 ligado covalentemente con un espaciador o ligador intermediario al compuesto de gastrina. En aspectos de la invención, la composición o conjugado que comprende el agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina tiene una actividad insulinotrópica sostenida después del tratamiento en comparación con la actividad del agonista GLP-1 o compuesto de gastrina solo o la actividad del GLP-1 (7-37) OH. La invención proporciona métodos para la preparación, tratamiento y/o intervención de una condición y/o enfermedad en un sujeto, que comprende administrar el compuesto de gastrina y el agonista GLP-1 o una composición farmacéutica de la invención para proporcionar el efecto benéfico, en particular el efecto benéfico sostenido. En métodos de la invención que proporcionan efectos benéficos, en particular efectos benéficos estadísticamente importantes o efectos benéficos sostenidos, el agonista GLP-1 puede seleccionarse del grupo que consiste de Gly8-GLP-1 (7-37), Val8GLP-1 (7-37) , Val8Asp22GLP-l (7-37) , Val8Glu22GLP-l (7-37), Val8Lys22GLP-l(7-37) , Val8His22GLP-l (7-37) , Arg34Lys2S (N8 (?-Glu(Na-hexadecanoil) ) -GLP-1 (7-37) , Gly8-GLP-1 (7-36) amida, Val8GLP-1 (7-36) amida, Val8Asp22GLP-l (7-36) amida, Val8Glu22GLP-1(7-36) amida, Val8Lys22GLP-l (7-36) amida, y Val8His22GLP-l (7-36) amida, y el compuesto de gastrina puede comprender la SEQ ID NO: 11, 12, 13 ó 14, opcionalmente asociada con la proteína de suero . En ciertos métodos de la invención, GLP-l(7-36) [SEQ ID NO: 5] y gastrina-17 (leu) [SEQ ID NO: 14] se administran. En ciertos otros métodos de la invención, Arg34Lys26 (Ne (?-Glú(Na-hexadecanoil) -GLP-1 (7-37) , y gastrina-17 (leu) [SEQ ID NO: 14] se administran. En ciertos otros métodos de la invención, Aib8,35GLP-l (7-36) amida o Ser38, Lys39'40'41'42'43' -Exendina-4 (1-39) amida y gastrina-17 (leu) [SEQ ID N0:14] se administran. En ciertos métodos adicionales de la invención, en que se proporcionan efectos benéficos, en particular efectos benéficos estadísticamente importantes o efectos benéficos sostenidos, el agonista GLP-1 se selecciona del grupo que consiste de Gly8-GLP-1 (7-37) , Val8GLP-l (7-37) , Val8Asp22GLP-1(7-37), Val8Glu22GLP-1(7-37) , Val8Lys22GLP-l (7-37) , Val8His22GLP-l (7-37) , Arg34Lys2ß (Ne (?-Glu (Na-hexadecanoil) ) ) -GLP-K7-37), Gly8-GLP-1 (7-36) amida, Val8GLP-l (7-36) amida, Val8Asp22GLP-l (7-36) amida, Val8Glu2GLP-l (7-36) amida, Val8Lys22GLP-l (7-36) amida, y Val8His22 GLP-1 (7-36) amida, y el compuesto de gastrina comprende una secuencia de aminoácido que comprende, desde las terminaciones amino, Z-Ym-Xm-AA?-AA2-AA3-AA4-AAs-AAs, en donde AAi es Tyr o Phe, AA2 es Gly, Ala, o Ser, AA3 es Trp, Val, o lie, AA4 es Met ? Leu, AA5 es Asp o Glu, y AA6 es Phe o Tyr; Z es un polímero y cuando el polímero es una proteína Z es una secuencia de aminoácido; Ym es una región espaciadora opcional que comprende m residuos de aminoácido del aminoácido neutral pequeño que incluye pero no se limita a serina y alanina, y X es una porción consecutiva de residuos 1-28 de SEQ ID NO: 11 o 12, o residuos 1-17 de la SEQ ID NO: 13 ó 14, preferiblemente AA?-AA2-AA3-AA4-AA5-AAS es Tyr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe o Tyr-Gly-Trp-Leu-Asp-Phe. En una modalidad particular, Z es una proteína de suero, en particular albúmina de suero humano . En un aspecto, la invención proporciona un método para la prevención y/o intervención de una condición y/o enfermedad discutida en la presente en un sujeto, que comprende la administración de al menos un agonista GLP-1 y al menos un compuesto gástrico. El agonista GLP-1 y el compuesto de gastrina puede administrarse directamente a un sujeto o ponerse en contacto con células (por ejemplo, células madre o células progenitoras) y administrarse al sujeto. La invención también proporciona un tratamiento de combinación para prevenir y/o tratar la condición y/o enfermedad discutida en la presente en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un agonista GLP-1 y un compuesto de gastrina para proporcionar efectos benéficos. En un aspecto, la invención proporciona un tratamiento de combinación o intervención que proporciona efectos benéficos sostenidos después del tratamiento. .. En particular, la invención proporciona un tratamiento de combinación para tratar o prevenir una condición y/o enfermedad en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un agonista GLP-1 y al menos un compuesto de gastrina para producir efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos . La invención también se refiere a un método de tratamiento que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un agonista GLP-1 en combinación con la administración de al menos un compuesto de gastrina que durante la administración al sujeto con síntomas de' diabetes produce efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos, manifestados como niveles de glucosa en la sangre reducidos o insulina pancreática aumentada . s En un aspecto de la invención, las cantidades terapéuticamente efectivas del agonista GLP-1 y compuesto de gastrina se combinan antes de la administración al sujeto. En una modalidad, las cantidades terapéuticamente efectivas del agonista GLP-1 y el compuesto de gastrina se mezclan a un pH fisiológicamente aceptable. En una modalidad, la invención proporciona un método para estimular la proliferación de células beta en un sujeto, que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición o conjugado de la invención, o administrar en combinación un agonista GLP y un compuesto de gastrina. En otra modalidad, la invención proporciona un método para- incrementar el número y/o tamaño de las células beta en un sujeto, que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición o conjugado de la invención o administrar en combinación un agonista GLP-1 y el compuesto de gastrina. En una modalidad adicional, la invención proporciona un método para prevenir o tratar la diabetes de Tipo I o Tipo II, que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición o conjugado de la invención, o administrar en combinación un agonista GLP-1 y el compuesto de gastrina. Todavía en una modalidad adicional, la invención proporciona un método para aligerar el avance de la enfermedad u obtener una etapa menos severa de la enfermedad en una persona que padece de- diabetes de Tipo II, que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición o conjugado de la invención, o administrar en combinación un agonista GLP-l y el compuesto de gastrina. La invención se refiere a un método para retardar el avance de la tolerancia disminuida a la glucosa o diabetes de Tipo II que no requiere insulina a diabetes de Tipo II que requiere insulina, que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición o conjugado de la invención, o administrar en combinación un agonista GLP-l y el. compuesto de gastrina. La invención también se refiere a un método para incrementar la capacidad de síntesis de la insulina de un sujeto, que comprende administrar una cantidad terapéuticamente efectiva de la composición o conjugado de la invención, o administrar en combinación un agonista GLP-l y el compuesto de gastrina. La invención se refiere además a introducir neogénesis de isletas en un sujeto, que comprende poner en contacto células precursoras de isletas con el agonista GLP-l y el compuesto de gastrina, composición, o conjugado de la invención en una cantidad suficiente para incrementar la proliferación de células precursoras de células precursoras de isleta en un sujeto por ello induciendo la neogénesis de isleta. La invención contempla un método para expandir la masa celular beta funcional de transplantes de isleta pancreáticos en un paciente diabético, el método comprende administrar al paciente una cantidad terapéuticamente efectiva del agonista GLP-l y el compuesto gástrico, o una composición o conjugado de la invención. En un aspecto, la invención proporciona métodos para tratar la diabetes mellitus en un paciente que necesite del mismo al administrar una composición que comprende el compuesto gástrico y el agonista GLP-l en una cantidad suficiente para efectuar la diferenciación de las células precursoras de isleta pancreáticas del paciente a células que secretan insulina maduras y/o a síntesis de insulina estimulada en células de isleta existentes . La composición puede administrarse sistémicamente o expresarse in situ por células hospedadoras que contienen uno o más constructos de ácido nucleico en un vector de expresión en donde el constructo de ácido nucleico comprende la secuencia de codificación para el compuesto de gastrina o una secuencia codificada para el agonista GLP-l o para ambos compuestos, junto con las regiones reguladoras de transcripción y traducción funcionales en células precursoras de isleta pancreáticas . La invención proporciona métodos para tratar células, preferiblemente células en cultivo usando un agonista GLP-l y compuesto de gastrina de la invención, o composiciones, o conjugados de la invención. La invención también proporciona métodos de tratamiento basados en células que usan el agonista GLP-l y un compuesto de gastrina de la invención, o composiciones o conjugados de la invención. Ver PCT/CA03/33595 para una descripción de la cultura general y métodos de tratamiento basados en células. En un aspecto, la invención -se- refiere a un método para expandir y diferenciar células madre o células progenitoras en células que secretan insulina que comprende poner en contacto las células madre o células progenitoras con el agonista GLP-l y el compuesto de gastrina o una composición o conjugado de la invención en cantidades suficientes para expandir y diferenciar células madre o células progenitoras . La cantidad de expansión y diferenciación puede ser significativamente diferente en comparación con la que se alcanza en ausencia de los compuestos, composición o conjugado, en particular la cantidad puede ser significativamente mayor en comparación con una cantidad alcanzada con un agonista GLP-l o un compuesto de gastrina solo. En una modalidad, las células madre o células progenitoras se ponen en contacto con los compuestos, composición, o conjugado en cultivo. En otra modalidad, las células madre o células progenitoras se ponen en contacto con los compuestos, composiciones, o conjugado en el sujeto. Los compuestos, composiciones o conjugados pueden administrarse al sujeto antes, durante, o después del implante de células madre en el sujeto para expandir y diferenciar las células en el sujeto. Las células pueden obtenerse de isletas pancreáticas, cordones umbilicales, embriones, o líneas de células madre. El método puede comprender adicionalmente administrar un agente inmunodepresor . La invención también se refiere a un método para aumentar la proliferación de células que secretan insulina en cultivo, que comprende poner en contacto las células con el agonista GLP-l y el compuesto de gastrina, composición o conjugado de la invención en cantidades suficientes para aumentar la proliferación de las células . La cantidad de proliferación puede ser significativamente diferente en comparación con la que se alcanza en ausencia de los compuestos, composición o conjugado. En una modalidad, la cantidad de proliferación es significativamente mayor en comparación con el agonista GLP-l o el compuesto de gastrina solo. La invención se refiere además a un método para sostener células de isleta o células precursoras en cultivo, que comprende cultivar las células en presencia de un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina, composición, o conjugado de la invención en una cantidad suficiente para sostener las células en cultivo. Las células pueden sostenerse en cultivo durante un periodo de tiempo significativamente más largo en comparación con las células cultivadas en ausencia de los compuestos, composición o conjugado, o en presencia del agonista GLP o el compuesto de gastrina solo. Las células cultivadas en presencia del agonista GLP-l y el compuesto de gastrina o la composición o conjugado de la invención serán particularmente útiles para preparar y mantener células que se pretenden transplantar . En un aspecto, la invención proporciona un método para tratar una condición y/o enfermedad, que comprende administrar el agonista GLP-l y el compuesto de gastrina, la composición o conjugado de la invención con una pluralidad de células al sujeto que necesita del mismo, para por ello producir un efecto benéfico, preferiblemente un efecto benéfico sostenido. El método para tratar el sujeto con una condición y/o enfermedad descrita en la presente comprende poner en contacto ex vivo una pluralidad de células con el agonista GLP-l y el compuesto de gastrina, o una composición o conjugado de la invención, opcionalmente cultivando las células, y administrar las células al sujeto que necesita del mismo. En modalidades de los métodos terapéuticos basados en células anteriormente mencionados las células son células ductales pancreáticas y la cantidad de compuestos/composición/conjugado usado en el método es generalmente efectivo para incrementar la cantidad de células que secretan la insulina en el sujeto. Las células pueden ser autólogas (esto es, del mismo sujeto), o puede ser de otro individuo de la misma especie, o de una especie diferente. La invención también contempla un método para tratar la diabetes en un sujeto que comprende transplantar la preparación de isleta pancreática en el sujeto y administrar una cantidad terapéuticamente efectiva del agonista GLP-l y el compuesto de gastrina, o la composición o conjugado de la invención. En los métodos basados en células de la invención, el número de células administradas á un individuo afectado con una condición y/o enfermedad variará de conformidad con la severidad de la condición y/o enfermedad, el modo de administración, y/o el sitio de administración. Generalmente la cantidad terapéuticamente efectiva de las células es una cantidad segura y efectiva, y en particular una cantidad necesaria para proporcionar uno o más efectos benéficos, en particular un efecto benéfico sostenido, o un efecto sinérgico.

Las células pueden administrarse a sujetos usando una variedad de- medios aparentes para aquellos expertos en el arte. Los métodos apropiados incluyen inyección de las células en un sitio objetivo en un sujeto. Las células pueden insertarse en el dispositivo de administración para facilitar la inyección o implante en los sujetos. Los ejemplos de dispositivos de administración incluyen tubos, por ejemplo, catéteres, para inyectar células y fluidos en el cuerpo de un sujeto. Las células pueden prepararse para administración en una variedad de formas diferentes. Por ejemplo, las células pueden suspenderse en una solución o gel, o mezclarse con el portador, excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptables en el cual las células se mantienen viables. Los portadores, excipientes , y diluyentes farmacéuticamente aceptables incluyen solución salina, soluciones amortiguadoras acuosas, solventes y/o medios de dispersión. El uso de tales portadores y diluyentes es bien conocido en el arte. La solución generalmente es estéril, y frecuentemente será isotónica. La solución de las células se selecciona preferiblemente de manera que sea estable bajo condiciones de fabricación y almacenamiento y se conserva contra la acción contaminante de microorganismos a través del uso de, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, timerosal, y los similares. Los modos de administración de las células se incluyen sin limitación intracardiaca, sistémica, intracoronaria, intravenosa, intradermal, o inyección intra-arterial e inyección directamente en los tejidos u órganos en el sitio propuesto de actividad, o en proximidad a el sitio de actividad. Una preparación celular puede administrarse por cualquier vía conveniente, por ejemplo por infusión o inyección de bolo y puede administrarse junto con otros agentes activos biológicos. La administración en algunos aspectos es preferiblemente sistémica. Una preparación celular puede administrarse por cualquier vía conveniente, por ejemplo por infusión o inyección de bolo y puede administrarse junto con .otro agentes activos biológicamente. Los métodos de la invención pueden además comprender medir o monitorear uno o más de los siguientes marcadores: glucosa en la sangre, glucosa en el suero, hemoglobina glicosilada en la sangre, masa celular beta pancrática, insulina en el suero, niveles de insulina pancreática, masa celular beta determinada morfométricamente, cantidad de células secretoras de insulina y sensibilidad a la glucosa de células secretoras de insulina. La invención también contempla el uso de una composición que comprende una combinación de al menos un agonista GLP-l y al menos un compuesto de gastrina para la preparación de un medicamento que proporciona efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos en tratar una condición y/o enfermedad. En un aspecto, la invención se refiere a el uso de una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un agonista GLP-l y al menos un compuesto de gastrina para la preparación de un medicamento para proporcionar efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos, en tratar una condición y/o enfermedad. En una modalidad la invención proporciona el uso de un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina para la preparación de un medicamento para incrementar (preferiblemente incremento sostenido) el número y/o tamaño de células beta en un sujeto después del tratamiento. En otra modalidad la invención proporciona el uso del agonista GLP-l y un compuesto de gastrina para la preparación de un medicamento para estimulación (preferiblemente estimulación sostenida) de proliferación de células beta después del tratamiento. Todavía en una modalidad adicional la invención proporciona el uso de GLP-l y gastrina para la preparación de un medicamento para el tratamiento de diabetes de tipo I ó tipo II. La invención adicionalmente proporciona el uso de una composición farmacéutica y un conjugado de la invención en la preparación de medicamento para efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos, en el tratamiento de condiciones y/o enfermedades. La eficacia terapéutica y toxicidad de los compuestos, composiciones y conjugados de la invención pueden determinarse por procedimientos farmacéuticos estándar en cultivos celulares o con animales experimentales tales como por calcular un parámetro estadístico tal como las estadísticas ED50 (la dosis que es terapéuticamente efectiva en 50% de la población) o LD50 (la dosis letal a 50% de la población) . El índice terapéutico es la relación de dosis de terapéutico a efectos tóxicos y esto puede expresarse como la relación ED5o/LD5o. Las composiciones farmacéutica las cuales exhiben los índices terapéuticos largos se prefieren. Los compuestos, composiciones, medicamentos y conjugados de la presente invención pueden administrarse por cualquier medio que produce poner en contacto el agente activo con los~ sitios de agente de acción en el cuerpo de un sujeto o paciente. Los ingrediente activos puede administrarse simultáneamente o secuencialmente, y en cualquier orden a diferentes puntos en tiempo, para proporcionar los efectos benéficos deseados. Los compuestos, conjugados y composiciones pueden formularse por liberación sostenida, para liberal localmente o sistémicamente. Estos se encuentran dentro de la capacidad de alguien de habilidad médica o veterinaria para seleccionar una forma y vía de administración que optimiza los efectos de las composiciones, conjugados y tratamientos de la presente invención. Las composiciones pueden administrarse en formas de dosis orales tales como tabletas, cápsulas (cada uno de los incluye liberación sostenida o formulaciones de liberación de duración determinada) , pildoras, polvos, granulos, elíxires, colorantes, suspensiones, jarabes y emulsiones. Estos pueden también administrarse en intravenosas (bolo o infusión) , intraperitoneal, subcutánea o formas instramusculares, todas las formas de dosis utilizadas se conocen por aquellos de habilidad ordinaria en el arte farmacéutico. Las composiciones de la invención pueden administrase por vía intranasal por medio del uso tópico de vehículos intranasales adecuados, o por medio de una vía transdermal, por ejemplo usando parches en la piel transdermales convencionales. Un protocolo de dosis para administración usando un sistema de liberación transdermal puede ser continuo más que el intermitente a través del régimen de dosis . Una vía particular de administración es administración parenteral, preferiblemente administración parenteral periférica. La administración parenteral se sobreentiende generalmente para referirse a la inyección de una forma de dosis en el cuerpo por una jeringa estéril o dispositivo mecánico tal como una bomba de infusión. Para el propósito de la presente invención las vías parenterales incluyen vías de administración intravenosas, intramuscular, subcutánea y intraperitoneal. Para la administración parenteral, los compuestos o conjugados descritos en la presente pueden combinarse con agua destilada a un pH apropiado . La presente invención incluye tratamientos de combinación que proporcionan aditivos o actividad sinérgica, liberan un aditivo o cantidad sinérgicamente efectiva o una cantidad para ' proporcionar una cantidad terapéuticamente efectiva de un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina, o un -conjugado o composición de la invención. Por lo tanto, las composiciones farmacéuticas adecuadas para uso en la presente invención incluyen composiciones en donde los ingredientes activos se contienen en una cantidad sinérgicamente efectiva o una cantidad terapéuticamente efectiva. El régimen de dosis de la invención variará dependiendo de los factores conocidos tales como las características farmacodinámicas de los agentes y su modo y vía de administración; la especie, edad, sexo, salud, condición medica, y peso del paciente, la naturaleza y extensión de los síntomas, el tipo de tratamiento concurrente, la frecuencia del tratamiento, la vía de administración, la función renal y hepática del paciente, y el efecto deseado. La cantidad efectiva de un fármaco requerida para prevenir, contrarrestar, o detener el avance de la condición puede determinarse fácilmente por un médico o veterinario ordinariamente habilidoso. La composición, medicamento, o tratamiento de la invención puede comprender una dosis unitaria de al menos un agonista GLP-l y una dosis unitaria de al menos un compuesto gástrico. La "dosis unitaria" se refiere a una dosis unitaria, esto es, una dosis sencilla que es capaz de administrarse a un paciente, y que puede manejarse y empacarse fácilmente , manteniendo como una dosis unitaria físicamente y químicamente estable que comprende cualesquiera de los agentes activos como tales o una mezcla con uno o más excipiente, portadores, o vehículos sólidos o líquidos. En un aspecto, una composición farmacéutica que se proporciona comprende una dosis subóptima terapéuticamente efectiva de un agonista GLP-l y un compuestos de gastrina que es más efectivo a niveles de glucosa disminuidos y reducidos para un periodo sostenido seguido por tratamiento comparado con una dosis de ya sea un compuesto de gastrina o solo agonistas GLP-l. En otro aspecto, una composición farmacéutica mejorada que se proporciona comprende cantidades subóptimas terapéuticamente efectivas de un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina en una forma para terapia crónica o aguda de una condición y/o enfermedad, en particular diabetes . En una modalidad, la composición comprende un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina en dosis que son igual a o al menos 1.1, 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, ó 10 veces inferior que las dosis de cada uno de los compuestos requeridos para proporcionar efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos, para tratar una condición y/o enfermedad. En un aspecto la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende entre 0.5 hasta 6000, 100-1500, 100-6000, 1000-6000, 2000-6000 - y 3000-6000 microgramos del agonista GLP-l por unidad sencilla y 0.5 hasta 6000, 100- 3000, 100-6000, 1000-6000, 2000-6000 y 3000-6000 microgramos del compuesto de gastrina por unidad sencilla. En otro aspecto de la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende entre 0.1 hasta 20, 0.1 hasta 30,- 0.1 hasta 40, 0.1. hasta 50 y 0.1 hasta 60 microgramos/kg/día de GLP-l y 0.1 hasta 20, 0.1 hasta 30, 0.1 hasta 40, 0.1 hasta 50 y 0.1 hasta 60 microgramos/kg/día del compuesto de gastrina . Una composición de la formulación de la invención puede administrarse a un sujeto continuamente durante 2 semanas hasta 12 meses, 2 semanas hasta 6 meses, 2-16 semanas, 2 semanas hasta 12 semanas, y/o 2-8 semanas, o periódicamente.

En una modalidad, la relación del agonista GLP-l para el compuesto de gastrina en una composición de la invención se selecciona para aumentar la actividad del agonista GLP-l y/o el compuesto de gastrina y para proporciona efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos. Un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina puede ser en una relación seleccionada para aumentar la actividad de uno o ambos compuestos para producir efectos benéficos, en particular un efecto benéfico sostenido, y/o para producir un efecto aditivo o sinérgico. En modalidades, la relación de un agonista GLP-l para un compuesto de gastrina pueden ser de 1:1 hasta 1-.11 , 1:1 hasta 1:100, 1:1 hasta 1:75, 1:1 a 1:50, 1:1 hasta 1:25, 1:1 hasta 1:10, 1:1 hasta 1:5, y 1:1. En otras modalidades particulares, la relación de un compuesto de gastrina para un agonista GLP-l puede ser desde 1:1 hasta 1:110, 1:1 hasta 1:100, 1:1 hasta 1:75, 1:1 hasta 1:50, 1:1 hasta 1:25, 1:1 hasta 1:10 y 1:1 hasta 1:5. Un agonista GLP-l puede usarse en combinación con un compuesto de gastrina a relaciones de peso terapéuticamente efectivos de entre alrededor de 1:1 hasta 1:150, en particular 1:1 hasta 1:50. En otra modalidad, un compuesto de gastrina puede usarse en combinación con un agonista GLP-l a relaciones de peso terapéuticamente efectivo de entre alrededor de 1:1 hasta 1:150, en particular 1:1 hasta 1:50. Las composiciones de la presente invención o fracciones de la misma comprenden diluyentes, excipientes, vehículos o portadores farmacéuticamente aceptables seleccionados con base en la forma pretendida de administración, y consistentes con practicas convencionales farmacéuticas. Los portadores, vehículos, etc. pueden adaptarse para proporcionar un aditivo, cantidad sinérgicamente efectiva o terapéuticamente efectiva del compuesto activo. Los diluyentes, excipientes, vehículos, y portadores farmacéuticamente adecuados se describen en el texto estándar, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mark Publishing Company. A modo de ejemplo, para administración oral en la forma de una cápsula o tableta, los componentes activos pueden combinarse con un portador inerte oral, no tóxico farmacéuticamente aceptable tales como lactosa, almidón, sacarosa, metil celulosa, estearato de magnesio, glucosa, calcio, sulfato, fosfato dicalcio, manitol, sorbital, y similares. Para administración oral en una forma líquida, los componentes de fármacos pueden combinarse con un portador inerte oral, no tóxico farmacéuticamente aceptable tal como etanol, glicerol, agua, y similares. Los aglutinantes adecuados (por ejemplo, gelatina, almidón, edulcorantes de maíz, azúcares naturales incluyendo glucosa; gomas sintéticas y naturales, y ceras) , lubricantes (por ejemplo oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio y cloruro de sodio) , agentes desintegrantes (por ejemplo almidón, metil celulosa, agar, bentonita, y goma xantana), agentes saborizantes, y agentes colorantes también pueden combinarse en las composiciones o componentes de los mismos. En un aspecto de la invención una composición farmacéutica tiene un pH desde alrededor de 7 hasta 10. Las formulaciones para administración parenteral de una composición de la invención puede incluir soluciones acuosas, jarabes, suspensiones y emulsiones acuosas o aceitosas con aceite comestible tal como aceite de semilla de algodón, aceite de coco o aceite de cacahuate. Los agentes de dispersión o suspensión que pueden usarse para suspensiones acuosas incluyen gomas naturales o sintéticas, tales como tragacanto, alginato, acacia, dextrano, carboximetilcelulosa de sodio, gelatina, metilcelulosa y polivinilpirrolidona. Las composiciones para administración parenteral puede incluir solventes estériles acuosos o no acuosos, tales como agua, solución salina isotónica, solución de glucosa isotónica, solución amortiguadora, u otros solventes convenientemente usados para administración parenteral de agentes terapéuticamente activos. Una composición se pretende para administración parenteral también puede incluir aditivos convencionales tales como estabilizadores, amortiguadores, o conservadores, por ejemplo antioxidantes tales como metilhidroxibenzoato o aditivos similares . En una modalidad, una composición farmacéutica de forma sólida se proporciona (por ejemplo, tabletas, cápsulas, polvo o forma pulverizada) que comprende un agonista GLP-l cristalino o amorfo y un compuesto de gastrina cristalino o amorfo . En otra modalidad, la invención se refiere a una formulación de fármaco líquida que comprende sales farmacéuticamente aceptables de un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina, y a fármacos liofilizado que pueden reconstituirse para proporcionar suspensiones que son estables y adecuados para administración parenteral . En una modalidad particular, la invención se refiere a una composición acuosa que comprende sales farmacéuticamente aceptables de un agonista GLP-l y un compuesto gastrina, y un sistema de solvente que tiene efectos de solubilización. La invención también proporciona un fármaco que comprende una formulación acuosa de sales farmacéuticamente aceptables de un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina con al menos un solubilizador . Una composición de la invención también puede ser esterilizado por, por ejemplo, filtración a través de un filtro que mantiene la bacteria, además de agentes esterilizantes a la composición, irradiación de la composición, o calor a la composición. Alternativamente, los compuestos, conjugados, y composiciones de la presente invención pueden proporcionarse como preparaciones sólidas estériles, por ejemplo polvo liofilizado, que son disueltos fácilmente en un solvente estéril inmediatamente previo al uso. Además de las formulaciones descritas en la presente, las composiciones también pueden formularse como una preparación almacenada. Tales formulaciones de acción prolongada pueden administrarse por implantación (por ejemplo, subcutáneamente o intramuscularmente) o por inyección intramuscular. Así, por ejemplo, las fracciones pueden formularse con materiales hidrofóbicos o poliméricos adecuados (por ejemplo, como una emulsión en un aceite aceptable) , o resinas de intercambio de ion, o como derivados solubles escasos, por ejemplo, como una sal escasamente soluble. Las composiciones de la invención y componentes de los mismos pueden comprender polímeros solubles como portadores de fármaco objetivo. Después de que las composiciones farmacéuticas se han preparado, pueden colocarse en un recipiente apropiado y etiquetado para tratamiento de una condición indicada. Para administración de una composición de la invención, tales etiquetados incluyen cantidad, frecuencia y método de administración. La presente invención también incluye métodos para usar las composiciones de la invención en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales que incluyen sin limitación agentes inmunosupresivos, agentes antiobesidad, agentes antidiabéticos, fármacos reguladores del apetito, agentes antihipertensivos, agentes para el tratamiento y/o prevención de complicaciones que resultan de o asociados con una condición y/o enfermedad, en particular diabetes y obesidad, anti-náusea, medicaciones anti-dolor de cabeza, y medicaciones generales para tratar o prevenir efectos colaterales . Ya que la presente invención se refiere a un método de tratamiento qué comprende una combinación de agentes activos que pueden administrarse separadamente o como conjugados, la invención también proporciona un kit que comprende un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina, una composición farmacéutica o conjugado en forma de kit. La invención también se refiere a un kit farmacéutico que comprende un frasco con un agonista GLP-l y otro frasco con un frasco de gastrina en una caja. Un kit puede comprender un empaque que son casas, un contenedor que contiene un conjugado o composición de la invención y también tiene instrucciones de casa para administrar el conjugado o composición a un suj eto . La invención será descrita en mayor detalle a modo de ejemplos específicos. Los siguientes ejemplos son completamente para propósitos ilustrativos, y no se pretenden que limiten la invención de ninguna manera. Aquellos de experiencia ordinaria en el arte reconocerán fácilmente una variedad de parámetros no críticos que pueden cambiarse o modificarse para proporcionar esencialmente el mismo resultado.

Ejemplo 1 Efectos de gastrina en combinación con GLP-l (Bache GLP-l (7-36) Amida, Humano) en ratones NOD con agudeza diabética. Este ejemplo muestra métodos y composiciones para invertir la diabetes en ratones NOD diabéticos al estimular la ' neogénesis de células ß in vivo depués de tratamiento sistémico con GLP-l y gastrina. Los_ ratones NOD hembras de edades de 12-16 semanas se tratan durante 18 días solamente con vehículo (PBS) , GLP-l (300 µg/kg/día) , o GLP-l (3007g/kg/día) + gastrina (3 µg/kg/día) , por inyección intraperitonealmente 2 veces diarias dentro de 2 días después del comienzo de la diabetes. El comienzo de la diabetes se determina por niveles de glucosa sanguínea en ayuno (FBG) (9-15 mM comparado con FBG normal <6.0 mM) . Los ratones se monitorearon diariamente por urina glucosa y semanalmente por niveles de FBG. Al comienzo del tratamiento, los niveles de glucosa sanguínea en ayuno están en el rango entre 11-14 mM. Después de 18 días de tratamiento, FBG fue 24 + 1 mM en ratones tratados con vehículo, 13 + 2 mM en ratones tratados con GLP-1 solo, y 6 ± 1 M en ratones tratados con la combinación de GLP-l y gastrina (significa ± SE, n = 4 ratones en grupos tratados; n = 6 ratones en el grupo de control) . Después de 18 días la terapia de tratamiento se detuvo y FBG se monitoreó semanalmente por 6 semanas adicionales . Una semana después de completar el tratamiento, los niveles FBG regresaron a su normalidad en ratones inyectados con la combinación de terapia, y el restante de tales niveles a lo largo del final en el estudio a 6 semanas posteriores de tratamiento. Comparativamente, el grupo no tratado de animales se ha sacrificado debido a la severidad de la enfermedad después de 5 semanas . Los ratones tratados solo con GLP-l muestran mejora transitoria en niveles FBG hasta 2 semanas después de que el tratamiento se detuvo, después que los niveles de glucosa sanguínea en ayuno progresivamente incrementaron y son similares a los niveles observados en el grupo de vehículo no tratado por el fin del estudio. Los resultados del estudio se ilustran en la figura 1. Estos resultados mostraron que un curso corto de un tratamiento combinado de gastrina y GLP-l para ratones NOD • diabéticos normaliza la hiperglicemia para tratar efectivamente la diabetes, y tiene un efecto prolongado en niveles de glucosa sanguínea en ayuno que indica una estimulación de neogénesis de células beta y producción de insulina.

Ejemplo 2 Efectos de gastrina (Gl) en combinación con GLP-l en ratones NOD con agudeza diabética. Objetivo: Los ratones NOD espontáneamente desarrollan diabetes dependiente de insulina como un resultado de destrucción autoinmune de células ß de isleta pancreática. Este estudio se dirige para corregir diabetes en ratones NOD al regenerar células ß de isleta usando GLP-l y gastrina (Gl) .

Método : Los ratones NOD hembras de edades de 12-16 semanas se trataron durante 18 días solamente, con vehículo (PBS) o con 300 µg/kg/día de GLP-l en combinación con 3 µg/kg/día de gastrina (Gl) por inyección intraperitoneal (i.p.). Los animales se inyectaron durante 18 días, 2 veces diariamente, dentro de 2 hasta 5 días después del comienzo de la diabetes. Los niveles de glucosa sanguínea en ayuno (FBG) son de 9-15 mM al comienzo de la diabetes (FBG normal <6.0 mM) . Los ratones se monitorearon diariamente por niveles de glucosa en la orina y semanalmente por niveles FBG durante el tratamiento, y durante unas 6 semanas adicionales después de que el tratamiento se detuvo. Los niveles de insulina pancreáticos se determinan en cada grupo así como análisis histológico del tejido pancreático se llevaron a cabo. Los tejidos pancreáticos se fijaron y tiñeron para células que producen insulina. La masa de célula beta se determina por análisis morfométrico .

Resultados: Después de 18 días de tratamiento diario, en animales tratados con la combinación de 30 µg/kg/día de GLP-l y 3 µg/kg/día de Gl, la glucosa sanguínea en ayuno fue 6.1 ± 0.7 mM, mientras que la glucosa sanguínea en ayuno fue 24.4 ± 1.5 mM en el grupo tratado con vehículo. En comparación, los animales tratados con GLP-l solo tienen niveles de glucosa sanguínea en ayuno de 12.5 ± 2.2 mM. Estos datos indican que el tratamiento en combinación de GLP-l y gastrina son más efectivos que el GLP-l solo en niveles de glucosa controlados en ratones NOD. Todos los tratamientos se detuvieron después de 18 días y FBG se monitoreó semanalmente durante unas 6 semanas adicionales. Una semana después de completar el tratamiento, los niveles de FBG se normalizan (bajo 6 mM) en ratones inyectados con la terapia en combinación y el resto de tales niveles a lo largo del final del estudio con FBG de 4.3 ± 0.2 mM a 6 semanas posteriores de tratamiento. Comparativamente, los animales tratados con GLP-l alcanzaron niveles de glucosa sanguínea máximos (sobre 30 mM) y padecen de complicaciones diabéticas. El grupo no tratado de animales se tuvo que sacrificar debido a la severidad de la enfermedad después de 5 semanas posteriores al tratamiento (figura 1 y figura 2) . Estos datos indican que la combinación de GLP-l y gastrina son efectivos en restaurar niveles de glucosa sanguínea normales aún después de 6 semanas posteriores al tratamiento, mientras que los animales tratados con GLP-l desarrollan hiperglicemia severa. La figura 3 demuestra que los animales no diabéticos tienen aproximadamente 10 µg de insulina por páncreas, mientras que los animales diabéticos con niveles de glucosa elevados tienen 0.5 hasta 1.0 µg de insulina pancreática. Estos datos muestran que los ratones NOD requieren menos de 10% de su insulina pancreática para regular los niveles de glucosa. 5 semanas después del comienzo de la diabetes los animales no tratados tienen niveles mínimos de insulina pancreática, y en esta etapa el animal tiene niveles de glucosa de 30-32 mM y padece de complicaciones diabéticas. El grupo tratado con GLP-l tiene niveles de insulina pancreática de 1.0 hasta 1.5 µg, que son altos más que en los animales no tratados sugiere- que GLP-l estimula algo de célula de isleta en el modelo de ratones NOD. Sorprendentemente, los animales tratados con GLP-l y gastrina tuvieron sobre 8 µg por páncreas que no es solamente significativamente mayor que GLP-l sino sobre 80% de niveles de insulina pancreáticos no diabéticos normales. Estos estudios muestran que un tratamiento en combinación con GLP-l y gastrina es muy robusto en estimular la regeneración de célula de isleta que es capaz de invertir la enfermedad por periodos largos de tiempo posteriores al tratamiento. GLP-l y gastrina son capaces para reparar el contenido de insulina pancreático de los niveles inferiores medidos después del comienzo de la diabetes y posteriores al tratamiento para un nivel similar para que se midan en ratones normoglicémicos . La corrección de hiperglicemia en ratones NOD fue significativamente correlacionada con el incremento en el contenido de insulina pancreática (r = 0.90), como se presenta en la figura 4. La figura 5 muestra que las células teñidas con insulina (en café oscuro) , son pocas en ratones ?OD con agudeza diabética antes del tratamiento. El número de estas células de isletas disminuye además en el grupo no tratado durante un tiempo. El examen histológico reveló isletas teñidas con insulina intensamente, grandes adyacentes a los ductos pancreáticos y que se rodean pero no se invaden por leucocitos mononucleares en ratones tratados con GLP-l y gastrina . La masa de células beta disminuye desde 0.41 mg hasta 0.01 mg durante el curso del experimento (8 semanas) , mientras que la masa de células beta incrementa hasta 1.05 mg en el grupo de animales tratados con GLP-l y gastrina. La masa de células beta en animales no diabéticos se han reportado para estar en el rango de 1.0-1.5 mg. El tratamiento con GLP-l y gastrina significativamente incrementa la masa de célula beta en ratones NOD para casi niveles normales, aún cuando se examinan 6 semanas posteriores al tratamiento. La figura 6 demuestra el teñido de las células de isleta desde el ducto pancreático en ratones NOD tratados con vehículo y GLP-l y gastrina. Los datos demuestran que la masa de célula beta del grupo de célula de isleta en los ductos pancreáticos disminuyeron desde 0.06 hasta 0.01 durante el curso del experimento (8 semanas) , mientras que estos grupos de masa de células beta se incrementan hasta 0.17 mg en ratones NOD tratados con GLP-l y gastrina. Estos datos indican que el tratamiento con GLP-l y gastrina induce la neogénesis de isleta en ratones ?OD involucrados en los precursores de células de isleta en el ducto pancreático. En resumen, estos estudios muestran que el tratamiento ' con GLP-l y gastrina induce la regeneración de células de isleta en el modelo de ratones ?OD suficientemente para desbalancear la destrucción que puede seguirse en estos modelos de enfermedades, que resultan en acumulación neta de células de isleta en el páncreas.

Conclusión: Un curso corto de tratamiento con GLP-l y gastrina en ratones ?OD diabéticos normaliza la híperglicemia y tiene un 0 efecto prolongado en niveles de glucosa sanguínea en ayuno por periodos de al menos 6 semanas posteriores al tratamiento. Además, los datos muestran que GLP-l y gastrina es capaz de estimular los niveles de insulina pancreática de aproximadamente 80-90% de niveles normales, mientras que GLP- 1 solo tiene un efecto modesto solamente. Adicionalmente, el análisis histológico del páncreas muestra que las células de isleta aparecen normales y con números grandes de células productoras de insulina, a pesar de estar rodeadas por células inflamatorias. El análisis morfométrico del páncreas muestra que el tratamiento con GLP-1 y gastrina incrementa la masa de las células beta en el páncreas, y muestra signos de inducir la neogénesis al incrementar la masa de las células beta en los ductos pancreáticos. El tratamiento con GLP-l y gastrina es un inductor potente de la regeneración de células de isleta que pueden reestablecer los niveles normales de glucosa e insulina pancreática en el modelo de ratón NOD.

Ejemplo 3 Compuestos/conjugados modificados de gastrina de PCT/CA03/01778 en combinación con GLP-l en la prevención del avance de la diabetes en ratones NOD con comienzo reciente de diabetes . El efecto del tratamiento por una combinación de GLP-l y gastrina sin modificar y compuestos/conjugados de gastrina modificada y GLP-l se examinarán en ratones NOD con comienzo reciente de diabetes, para determinar si la administración de tanto GLP-l como gastrina evita la hiperglicemia severa así como un incremento en el contenido de insulina pancreática en ratones NOD con diabetes de comienzo reciente. La GLP-l para usarse en el fragmento biológicamente activo de GLP-l de GLP-1 de humano/ratón (que tiene residuos en las posiciones 7-36 comparado con el precursor a partir del cual se procesa el fragmento, obtenido de Bachem H6795) . Los compuestos/conjugados de gastrina a usarse son como siguen: Compuesto B - gastrina como gastrina I sintética humana que tiene 17 residuos de aminoácidos con un residuo Leu en la posición de aminoácidos 15, Compuesto E - gastrina como gastrina I sintética humana que tiene 2-17 residuos de aminoácidos. Compuesto Q, gastrina como gastrina I sintética humana que tiene 2-17 residuos de aminoácidos con un polímero HSA ligado por medio de (GA) 5 (esto es, Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ala-Gly-Ala) . Se observarán ratones hembras diabéticos no obesos (NOD) , edades de 12-14 semanas, para el desarrollo de comienzo de diabetes (glucosa sanguínea en ayuno > 8.0 a 15 tpmol/1) , y dentro de 48 horas después del comienzo de los síntomas, se tratarán cuatro grupos de ratones cada uno como sigue: un grupo se tratará solamente con vehículo; y el otro grupo se le administrarán 100 µg/kg/día de GLP-l, y los grupos restantes se tratarán con una combinación de GLP-l (100 µg/kg/día) y compuesto de gastrina (3 µg/kg/día equivalente) , cada tratamiento administrado por medio de vía intraperitoneal diariamente. La terapia se administrará por 14 días hasta 18 días. Se observarán semanalmente los animales para los niveles de glucosa en ayuno (FBG) . Los niveles de FBG se medirán a alrededor de 12 horas después de que se haya retirado el alimento, y 24 horas después de la última inyección de péptido o de vehículo. Con la suspensión de la terapia, se observarán todos los ratones para los niveles de FBG durante las próximas 4 semanas (semanas 2-6) de manera de determinar si la prevención de la hiperglicemia persistió después de la finalización del tratamiento terapéutico. Se detendrá el tratamiento a los 14 días hasta los 18 días. El protocolo incluye el muestreo de estos ratones para datos de nuevo a las 6 semanas, y la sangre que recolecta la sangre para el ensayo de FBG y péptido C en plasma, y sacrificar los ratones para las determinaciones de insulina pancreática y registro de la inflamación de isletas (insulitis) . A partir del comienzo del tratamiento los ratones no recibirán tratamiento con reemplazo de insulina ni inmunosupresión. Los siguientes parámetros se evaluarán: tasas de supervivencia, niveles de insulina pancreática, presencia de la inflamación de isletas y niveles de glucosa sanguínea en ayuno.

GLP-l en combinación con compuestos/conjugados modificados de gastrina (Compuesto E o Q) con vidas medias más extendidas puede suministrar la reducción mejorada de los niveles de glucosa en la sangre en animales diabéticos.

Ejemplo 4 - Al usar la síntesis estándar de Fmoc, se producirán dos diferentes compuestos de gastrina "reactivos" : el compuesto A es un péptido de gastrina 17 modificado que tiene una cisteína adicional en el extremo de la terminal N; el compuesto B es un péptido de gastrina 17 modificado que tiene 10 aminoácidos adicionales de glicina y alanina alternantes ( 5 aminoácidos de cada uno) como una región espaciadora con una cisteína adicional en el extremo de la terminal N. Se observarán ratones hembras diabéticos no obesos (NOD) para el desarrollo de diabetes (determinado por ser glucosa sanguínea en ayuno, nivel FBG mayor de 6.6 mmol/1) y con el comienzo de la diabetes, se dividirán en cuatro grupos. Se tratarán los ratones ya sea con vehículo como control; o con gastrina 17, con el compuesto A o con el compuesto B (misma concentración molar de ingrediente activo, esto es, gastrina, se va a usar para todos los tres grupos tratados con gastrina), administrada por inyección intraperitoneal (i.p.) una vez al día durante 14 días.

Se medirán y determinarán los niveles de glucosa sanguínea en ayuno (FBG) y de insulina pancreática. Además, la vida media en suero de la gastrina se medirá así como los niveles de suero en circulación de gastrina. Se anticipa que de los tres grupos tratados con gastrina, ambos grupos de ratones NOD que se traten ya sea con el compuesto A o el compuesto B mantendrán niveles en circulación más elevados de gastrina en suero. Además la vida media de la gastrina medida será mayor en los ratones tratados con ya sea el compuesto A o compuesto B en comparación con la gastrina no modificada. Además, también se anticipa que cuando se compara al grupo de control tratado con vehículo el cual registra niveles crecientemente elevados de FBG, todos los tres grupos de animales tratados tendrán niveles disminuidos de FBG. Los animales tratados ya sea con Compuesto A o Compuesto B pueden tener niveles incluso menores de FBG así como niveles incrementados de insulina pancreática en comparación con los animales tratados con gastrina no modificada. La presente invención no se va a limitar en alcance por las modalidades específicas aquí descritas, ya que se pretende que tales modalidades sean sino ilustraciones simples de un aspecto de la invención, y cualesquiera modalidades funcionalmente equivalentes están dentro del alcance de la invención. De hecho, serán evidentes diversas modificaciones de la invención además de aquellas mostradas y descritas en la presente para aquellos expertos en la técnica a partir de la descripción anterior y dibujos anexos. Se pretende que tales modificaciones caigan dentro del alcance de las reivindicaciones anexas . Todas las publicaciones, patentes y solicitudes de patente referidas en la presente se incorporan como referencia en su totalidad al mismo grado como si cada publicación, patente o solicitud de patente en lo individual se indique especifica e individualmente para incorporarse como referencia en su totalidad. La cita de cualquier referencia en la presente no es una admisión de que tal referencia esté disponible como arte previo de la invención actual .

Tabla 1 Agonista GLP-l Fuente Derivados de análogos de GLP-l Novo Nordisk con un substituyente WO 98/08871 lipofílico (perfil protraido de acción) Fragmento de GLP-l como The General Hospital hormona insulinotrópica Corporation WO 87/06941 Derivados de GLP-l con The General Hospital actividad insulinotrópica Corporation WO 90/11296 Análogos de GLP-l que muestran Buckley et al. una estabilidad mejorada o una WO 91/11457 capacidad mejorada para estimular la producción de insulina Análogos y derivados de GLP-l Eli Lilly & Co. (estimulan la secreción o EP 0708179-A2 biosíntesis de insulina en células beta que funcionan pobremente) Agonista GLP-l Fuente Moléculas de GLP-l asociadas Eli Lilly and Company con un catión de metal 6,133,235 divalente 5,977,071 Sistemas de suministro bucal Theratech, Inc. con GLP-l 5,863,555 Análogos de GLP-l Eli Lilly and Company 5,981,488 Imitaciones de GLP-l Bristol-Myers Squibb Company WO 03/033671 GLP-l de larga duración Conj uchem, Inc. US 6,593,295 US 6,514,500 US 6,329,336 GLP-l precursor Genzyme Corporation WO 03/014318 Complejos de GLP-l Eli Lilly and Company 6,358,924 Péptidos modificados Theratechnologies Inc. WO 02/10195 GLP-l y moléculas relacionadas Zealand Pharma A/S WO 2004/005342 Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

Reivindicaciones Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones 1. .Una composición farmacéutica caracterizada porqué- comprende un agonista de GLP-l y un compuesto de gastrina que proporciona efectos benéficos con relación a cada compuesto solo, y opcionalmente un portador, excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable.
2. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque está en una forma que proporciona niveles normales de glucosa en la sangre en un sujeto que persisten por un periodo prolongado de tiempo después de la administración.
3. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque comprende cantidades terapéuticamente efectivas de un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina en una forma para terapia crónica o aguda de un sujeto que necesita del mismo.
4. La composición f rmacéutica de conformidad con la reivindicación 3, caracterizada porque las cantidades terapéuticamente efectivas son subóptimas con relación a la cantidad de cada compuesto administrada sola para el tratamiento de diabetes .
5. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque la relación del agonista GLP-l al compuesto de gastrina se selecciona para aumentar la actividad del agonista GLP-l o compuesto de gastrina.
6. La composición - farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la relación del agonista GLP-l al compuesto de gastrina es desde alrededor de 1:1 a 1:110, 1:1 a 1:100, 1:1 a 1:75, 1:1 a 1:50, 1:1 a 1:25, 1:1 a 1:10, 1:1 a 1:5, y 1:1.
7. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la relación de un compuesto de gastrina al agonista de GLP-l es desde alrededor de 1:1 a 1:110, 1:1 a 1:100, 1:1 a 1:75, 1:1 a 1:50, 1:1 a 1:25, 1:1 a 1:10, y 1:1 a 1:5.
8. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el agonista GLP-l se usa en combinación con el compuesto de gastrina a relaciones en peso terapéuticamente efectivas de entre alrededor de 1:1.5 a 1:150, preferiblemente 1:2 a 1:50.
9. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores caracterizada porque el agonista GLP-l y el compuesto de gastrina están presentes en dosis que son al menos alrededor de 1.1 a 1.4, 1.5, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, o 10 veces menores que las dosis de cada compuesto solo requerida para tratar una condición y/o enfermedad.
10. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque comprende una cantidad de aditivo del agonista GLP-l y el compuesto de gastrina en un excipiente, portador o vehículo farmacéuticamente aceptable .
11. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque comprende una cantidad sinérgicamente efectiva del agonista GLP-l y el compuesto de gastrina en un excipiente, portador o vehículo farmacéuticamente aceptable.
12. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque comprende entre 0.1 a 20, 0.1 a 30, 0.1 a 40, 0.1 a 50, y 0.1 a 60 microgramos/kg/día de agonista GLP-l y 0.1 a 20, 0.1 a 30, 0.1 a 40, 0.1 a 50, y 0.1 a 60 microgramos/kg/día de compuesto de gastrina.
13. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque los efectos benéficos son uno o más de los siguientes : inflamación reducida o ausente de isletas, avance disminuido de la enfermedad, supervivencia aumentada, o síntomas disminuidos de una enfermedad o condición.
14. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque los efectos benéficos son efectos benéficos sostenidos que persisten por un periodo prolongado de tiempo después de la terminación del tratamiento.
15. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque los efectos benéficos se sostienen por al menos alrededor de 2, 4, 5, 6, o 10 semanas, 2 a 4 semanas, 2 a 8 semanas, 2 a 12 semanas, 2 a 24 semanas, 2 semanas a 12 meses, y 2 semanas a 18 meses después del tratamiento.
16. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada porque los efectos benéficos sostenidos se puede manifestar como una producción aumentada del péptido C, producción aumentada de insulina pancreática, y niveles de glucosa en la sangre bajos o alrededor del normal por un periodo prolongado después del tratamiento .
17. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el efecto benéfico es al menos alrededor de a 0.5%, 1%, 2%, 5%, 10%, 15%, 20%," 30%, 33%, 35%, 40%, 45%,. o 50% de ' incremento en los niveles de insulina pancreática.
18. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el efecto benéfico es al menos alrededor de a 2%, 5%, 10%, 15%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, o 90% de disminución en los niveles de glucosa en la sangre.
19. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el efecto benéfico es una disminución en los niveles de glucosa en la sangre por un periodo de al menos 2, 4, 6, 8, o 10 semanas, 2 a 4 semanas, 2 a 6 semanas, 2 a 8 semanas, 2 a 12 semanas, 2 a 24 semanas, 2 semanas a 12 meses, y 2 semanas a 18 meses después del tratamiento.
20. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el agonista GLP-l es un GLP-l (1-37) , GLP-l (7-36) amida, fragmentos, análogos, y derivados de los mismos, y metabolitos activos y profármacos de GLP-l.
21. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el GLP-l es GLP-l (7-36) de SEQ ID NO.5 o gastrina 17 (leu) de SEQ ID NO. 14.
22. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el agonista GLP-l comprende un polipéptido precursor de la fórmula GLP-l (7-R) en donde R es 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, y 45, y en donde opcionalmente hasta 5, 10, o 15 residuos de aminoácidos se reemplazan con cualquier residuo de a-aminoácidos .
23. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el agonista GLP-l es un análogo o derivado de GLP-l listado en la Tabla 1.
24. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el compuesto de gastrina es gastrina 71 [SEQ ID NO. 15] , gastrina 52 [SEQ ID NO. 16] , gastrina 34 (gastrina grande) [SEQ ID NO. 11 o 12] , gastrina 17 (pequeña gastrina) [SEQ ID NO . 13 o 14] , gastrina 14 [SEQ ID ?O. 17] , gastrina 8, gastrina 6 [SEQ ID ?O. 18 o 19] , pentagastrina, y tetragastrina .
25. La composición farmacéutica de conformidad con cualesquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizada porque el compuesto de gastrina es un compuesto de la fórmula Z-Ym-Xn-AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6, en donde AA1 es Tyr o Phe, AA2 es Gly, Ala, o Ser, AA3 es Trp, Val, o lie, AA4 es Met o Leu, AA5 es Asp o Glu, y AA6 es Phe o Tyr el cual está opcionalmente amidado; Z es un portador, preferiblemente un polímero, más preferiblemente una proteína; Ym es una región espaciadora opcional que comprende m residuos de aminoácidos de un aminoácido pequeño neutro que incluye pero no se limita a serina y alanina, y X es cualquier poricón consecutiva de los residuos 1-28 de SEQ ID NO : 11 o 12, o residuos 1-11 de SEQ ID ?O. 13 o 14, preferiblemente AA1-AA2-AA3-AA4-AA5-AA6 es Tyr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe o Tyr-Gly-Trp-Leu-Asp-Phe.
26. Una composición farmacéutica de conformidad con cualquier reivindicación precedente caracterizada porque el agonista GLP-l se selecciona del grupo que consiste de Gly8-GLP-1 (7-37) ,- Val8GLP-l(7-37) , Val8Asp22GLP-l (7-37) , Val8Glu22GLP-l (7-37), Val8Lys22GLP-l (7-37) , Val8His22GLP-l (7-37) , Arg34Lys26 (Ne (g-Glu (Na-hexadecanoil) ) ) -GLP-l (7-37) , Gly8-GLP-1 (7-36) mida, Val8GLP-l (7-36) amida, Val8Asp22GLP-l (7-36) amida, Val8Glu22GLP-l (7-36) mida, Val8Lys22GLP-l (7-36) amida, y Val8His22GLP-l (7-36) amida, y el compuesto de gastrina es gastrina que comprende SEQ ID NO. 11, 12, 13, 14, 17, o 18.
27. La composición farmacéutica de conformidad con cualquier reivindicación precedente caracterizada porque el agonista GLP-l es Arg34Lys26 (Ne (g-Glu (Na-hexadecanoil) )) -GLP-l (7-37) y el compuesto de gastrina es 15Leu gastrina 17 [SEQ ID NO. 14] .
28. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 27 caracterizada porque el compuesto de gastrina se asocia con una proteína de suero, preferiblemente albúmina de suero humana.
29. Un método para la preparación de una composición farmacéutica estable de un agonista GLP-l, caracterizado porque comprende mezclar un agonista de GLP-l, un compuesto de gastrina, y un portador, excipiente ' o vehículo farmacéuticamente aceptable efectivo para estabilizar físicamente al agonista GLP-l y adaptado para proporcionar efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos .
30. Un conjugado, caracterizado porque comprende un agonista GLP-l ligado a un compuesto de gastrina para proporcionar efectos benéficos, en particular efectos benéficos sostenidos.
31. El conjugado de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque el agonista GLP-l se selecciona del grupo que consiste de Gly8-GLP-1 (7-37) , Val8GLP-l (7-37) , Val8Asp22GLP-l (7-37) , Val8Glu22GLP-l (7-37) , Val8Lys22GLP-l (7-37) , Val8His22GLP-l (7-37) , Arg34Lys26 (Ne (g-Glu (?a-hexadecanoil) )) -GLP-l (7-37) , Gly8-GLP-1 (7-36) amida, Val8GLP-l (7-36) amida, Val8Asp22GLP-l (7-36) amida, Val8Glu22GLP-l (7-36) amida, Val8Lys22GLP-l (7-36) amida, y Val8His22GLP-l (7-36) amida, y el compuesto de gastrina es gastrina que comprende SEQ ID NO . 11, 12, 13, 14, 17, o 18 opcionalmente asociado con una proteína de suero.
32. Un método para el tratamiento o prevención de una condición y/o enfermedad en un sujeto,' caracterizado porgue comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina, o una composición o conjugado de conformidad con cualquier reivindicación precedente, para producir un efecto benéfico sostenido.
33. El método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque el efecto benéfico sostenido es una disminución en los niveles de glucosa en la sangre por un periodo de al menos 2, 4, 6, 8, o 10 semanas, 2 a 4 semanas, 2 a 6 semanas, 2 a 8 semanas, 2 a 12 semanas, 2 a 24 semanas, 2 semanas a 12 meses, y 2 semanas a 18 meses después del tratamiento.
34. Un método de tratamiento, caracterizado porque comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos un agonista GLP-l en combinación con la administración de al menos un compuesto de gastrina el cual con la administración a un sujeto con síntomas de diabetes proporciona efectos benéficos sostenidos.
35. El método de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado porque la administración con al menos un agonista GLP-l en combinación con la administración de al menos un compuesto de gastrina proporciona efectos benéficos sostenidos de al menos un síntoma de diabetes .
36. El método de conformidad con la reivindicación 34 o 35, caracterizado porque cantidades terapéuticamente efectivas del agonista GLP-l y el compuesto de gastrina se combinan previo a la administración al sujeto.
37. El método de conformidad con la reivindicación 34 o 35, caracterizado porque cantidades terapéuticamente efectivas del agonista GLP-l y el compuesto de gastrina se administran secuencialmente al sujeto.
38. El método de conformidad con cualquier reivindicación precedente caracterizado porque las cantidades terapéuticamente efectivas de un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina son cantidades sinérgicamente efectivas.
39. Un método de preparación de una composición farmacéutica estable de un agonista GLP-l, caracterizado porque comprende mezclar un agonista GLP-l, un compuesto de gastrina, y un portador, excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable efectivo para estabilizar físicamente al agonista GLP-l y adaptado para proporcionar efectos benéficos preferiblemente efectos benéficos sostenidos .
40. Un método para el tratamiento de una condición y/o enfermedad, caracterizado porque comprende administrar un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina, o una composición o conjugado de conformidad con cualquier reivindicación precedente con una pluralidad de células a un sujeto que necesita del mismo para con ello producir efectos benéficos, preferiblemente efectos benéficos sostenidos .
41. El método de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque la condición y/o enfermedad es dislipidemia, hiperglicemia, episodios hipoglicémicos severos, apoplejía, hipertrofia ventricular izquierda, arritmia, bacteremia, septicemia, síndrome de intestino irritable, síndrome de distensión respiratoria, dispepsia funcional, diabetes, cambios catabólicos después de la cirugía, hiperglicemia inducida por tensión, úlceras gástricas, infarto al miocardio, tolerancia debilitada a la glucosa, hipertensión, enfermedad de Alzheimer y otras condiciones neurodegenerativas centrales y periféricas, insuficiencia cardiaca crónica, estados de retención de fluidos, síndrome metabólico y enfermedades y trastornos relacionados, y obesidad.
42. El método de conformidad con la reivindicación 40 o 41 caracterizado porque la condición y/o enfermedad es diabetes .
43. Un método para inducir la neogénesis de isletas en un sujeto, caracterizado porque comprende poner en contacto a las células precursoras de isletas con un agonista GLP-l' y un compuesto de gastrina, o una composición, o conjugado de conformidad con cualquier reivindicación precedente en una cantidad suficiente para incrementar la proliferación de las células precursoras de isleta en el sujeto, con lo cual se induce la neogénesis de isleta.
44. Un método para expandir y diferenciar células madre en células secretoras de insulina, caracterizado porque comprende poner en contacto las células madre con una cantidad efectiva de un agonista GLP-l y un compuesto de gastrina o una composición o conjugado de conformidad con cualquier reivindicación precedente.
45. El método de conformidad con cualquier reivindicación precedente caracterizado porque el agonista GLP-l se selecciona del grupo que consiste de Gly8-GLP-1 (7- 37), Val8GLP-l(7-37) , Val8Asp22GLP-l (7-37) , Val8Glu22GLP-l (7-37), Val8Lys22GLP-l(7-37) , Val8His22GLP-l (7-37) , Arg34Lys26 (Ne (g-Glu (Na-hexadecanoil) ) ) -GLP-l (7-37) , Gly8-GLP- 1(7-36) amida, Val8GLP-l (7-36) amida, Val8Asp22GLP-l (7-36) amida, Val8Glu22GLP-l (7-36) amida, Val8Lys22GLP-l (7-36) amida, y Val8His22 GLP-l (7-36) amida, y el compuesto de gastrina es gastrina que comprende SEQ ID NO. 11, 12, 13, 14, 17, o 18 asociado con una proteína de suero.
46. El método de conformidad con cualquier reivindicación precedente, caracterizado porque el agonista GLP-l es Arg34Lys26 (Ne (g-Glu (Na-hexadecanoil) )) -GLP-l (7-37) y el compuesto de gastrina es 15Leu gastrina 17 [SEQ ID NO. 14] .
47. El uso de una composición que comprende una combinación de al menos un agonista GLP-l y al menos un compuesto de gastrina para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una condición y/o enfermedad.
48. El uso de un agonista GLP-l para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de una condición y/o enfermedad a usarse en combinación con un compuesto de gastrina.
49. El uso de conformidad con la reivindicación 45 o 46 en donde el agonista GLP-l se" selecciona del grupo que consiste de Gly8-GLP-1 (7-37) , Val8GLP-l (7-37) , Val8Asp22GLP-l (7-37), Val8Glu22GLP-l(7-37) , Val8Lys22GLP-l (7-37) , Val8His22 GLP-l (7-37) , Arg34Lys26 (Ne (g-Glu (Na-hexadecanoil) ) ) -GLP-l (7-37), Gly8-GLP-1 (7-36) amida, Val8GLP-l (7-36) amida, Val8Asp22GLP-l (7-36) amida, Val8Glu22GLP-l (7-36) amida, Val8Lys22GLP-l (7-36) amida, y Val8His22 GLP-l (7-36) amida, y el compuesto de gastrina es gastrina que comprende SEQ ID NO. 11, 12, 13, 14, 17, o 18.
50. El uso de conformidad con cualquier reivindicación precedente en donde el agonista GLP-l es Arg34Lys26 (Ne(g-Glu (Na-hexadecanoil) )) -GLP-l (7-37) y el compuesto de gastrina es 15Leu gastrina 17 [SEQ ID NO. 14] .
51. El uso de conformidad con cualquier reivindicación en donde la condición y/o enfermedad es dislipidemia, hiperglicemia, episodios hipoglicémicos severos, apoplejía, hipertrofia ventricular izquierda, arritmia, bacteremia, septicemia, síndrome de intestino irritable, dispepsia funcional, síndrome de distensión respiratoria, diabetes, cambios catabólicos después de la cirugía, hiperglicemia inducida por tensión, úlceras gástricas, infarto al miocardio, tolerancia ^debilitada a la glucosa, hipertensión, enfermedad de Alzheimer y otras condiciones neurodegenerativas centrales y periféricas insuficiencia cardiaca crónica, estados de retención de fluidos, síndrome metabólico y enfermedades y trastornos relacionados, y obesidad.
52. Una forma de kit caracterizada porque proviene de una composición o conjugado de conformidad con cualquier reivindicación precedente .