MXPA02008569A

MXPA02008569A - Peptidos derivados de caseina y usos de los mismos en terapia.

Info

Publication number: MXPA02008569A
Application number: MXPA02008569A
Authority: MX
Inventors: Zvi Sidelman
Original assignee: Chay 13 Medical Res Group N V
Priority date: 2000-03-01
Filing date: 2001-03-01
Publication date: 2003-02-24
Also published as: EA007217B1; JP2003528827A; IL151351A; DE60140794D1; IL134830A0; EA005579B1; EA007814B1; ZA200206842B; US7741274B2; EP1261360A1; HUP0301003A2; CN1427725A; ATE451929T1; EA200400376A1; AU782662B2; US8735348B2; EA200200820A1; WO2001064234A1; US20020147144A1; EP1261360B1

Abstract

Peptidos biologicamente activos que se derivan de o son similares a las secuencias identicas con el termino N de la fraccion as1 de la caseina de la leche. Estos peptidos son capaces de estimular y mejorar la respuesta inmune, proteger en contra de la infeccion viral, normalizar los niveles de colesterol en cero y estimular la hematopoyesis. Los peptidos derivados de caseina no son toxicos y pueden usarse para tratar y prevenir patologias inmunes, hipercolesterolemia, trastornos hematologicos y enfermedades relacionadas a virus.

Description

PEPTIDOS DERIVADOS DE CASEÍNA. Y USOS DE LOS MISMOS EN TERAPIA DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a péptiaos biológicamente activos que se derivan a partir o son similares a las secuencias idénticas con el término N de la fracción aSl de la caseína de la leche. Estos péptidos son capaces de estimular y mejorar la respuesta inmune, proteger en contra de infección viral, normalizar los niveles de colesterol en suero, y estimular la hematopoyesis. Los péptidos derivados de caseína no son tóxicos y pueden usarse para tratar y prevenir patologías inmunes, hipercolesterolemia, trastornos hematológicos y enfermedades relacionadas a virus. Moléculas Bioactivas a partir de Nutrientes ; Además del valor nutricional de mucho alimentos, algunas fracciones y productos de rutas digestivas poseen la capacidad de influenciar los procesos fisiológicos. Algunos de éstos constituyentes "extranutricionales" están presentes en su forma activa en el nutrimento completo, tales como las inmunoglobulinas en la leche y calostros de la madre, fitoestrógenos encontrados en los alimentos basados en soya, antioxidantes polifenólicos a partir de frutas y vitaminas. Otros están encriptados dentro de las moléculas de nutriente, y se liberan en una forma activa durante la digestión o proceso del alimento, por ejemplo péptidos antihipertensivos a partir de lactoglobina [Kilts, D. D. (1999), Can. J. Physiol. Pharmacol. 72:4; 423-434]. Actividad biológica en proteínas de leche: la caseína, la proteína predominante de la leche, se ha definido tradicionalmente como un compuesto de tres fracciones, a, ß y ?, de acuerdo a su movilidad electroforética [N. J. Hipp, et al . (1952), Dairy Sci., 35:272]. El día de hoy la caseína se define de acuerdo con las secuencias de aminoácidos de cada uno de los subgrupos aSl, ß y ?[W. N. Engel et al . (1984), J. Dairy Sci. 67: 1599] . En el curso de la digestión, los productos de caseína se someten a desdoblamiento proteolitico por proteasas acidas tales como quimosina (renin) , tripsina y pepsina, produciendo péptidos más cortos y ocasionando coagulación y secuestro del calcio por los fragmentos de proteina resultante. Unos cuantos estudios con los compuestos de la leche demostraron la actividad bactericida relacionada a la caseína. La Patente Norteamericana No. 3,764,670 describe digeridos de caseína proteolíticos que poseen propiedades de antibiótico en contra de microorganismos. La Patente de Israel No. 42863 describe un péptido derivado de caseína que consiste de 23 aminoácidos del termino N de la caseína, que posee actividad anti-bacteriana. Además, otras propiedades fisiológicamente activas, tales como actividades .llAJ ha^.. .. *^~»*y '"•- . -.yi~... .. *-t~ , ., ... . ^fc.^. .„.? ^.^ ¿J . 1 t Jt^^ de opioide y similares al factor de crecimiento se han propuesto para la caseína o sus derivados [Kitts, D. D., (1999), ibid. ] . También se ha observado actividad inmuno-moduladora 5 en los péptidos de caseina. Coste et ai. (1992, Immun. Lett. 33: 41-46) observó la mejoría de la proliferación de linfocitos de rata después del tratamiento con un péptido derivado a partir del término C de la ß caseína. Sin embargo, ninguno de estos estudios ha determinado las secuencias 10 específicas en éstos péptidos de caseína que confieren sus propiedades "extranutricionales" . Hematopoyesis en terapia de cáncer: Después de quimioterapia de alta dosis, especialmente después de dosis mieloablativas de 15 quimioradioterapia soportada por la médula ósea autóloga o transplante de células del tallo sanguíneo periférico (ASCT) o transplante de médula ósea alogénico (BMT) , los pacientes están en riesgo debido a pancitopenia. La granulocitopenia puede conducir al desarrollo de complicaciones infecciosas 20 serias, ocasionalmente fatales a partir de agentes bacterianos, virales, de hongo y parásitos en el periodo inmediato pos-transplantes. Igualmente, la trombocitopenia resulta frecuentemente en la tendencia a sangrar y ocasionalmente en la dependencia de larga duración de 25 plaquetas. En cualquier momento que se desarrolle resistencia i«. attBiit? MMl ÍaMt«fcj, j. ¿_£y? f «.„, „jtta ubk<v .. _ a las plaquetas, los episodios de sangrado pueden amenazar la vida y las complicaciones hemorrágicas son frecuentemente letales. El riesgo debido a la granulocitopenia puede superarse parcialmente por medidas de apoyo y más 5 efectivamente por la administración de citocinas humanas recombinantes que pueden mejorar la reconstitución de los granulocitos, particularmente el factor de estimulación de colonias de granulocitos (G-CSF) y el factor que estimula las colonias de macrófagos de granulocitos (GM-CSF) . Estos 10 agentes son extremadamente caros (aproximadamente $200- 400/día/paciente) y ocasionalmente provocan efectos secundarios debido a reacciones de hipersensibilidad, fiebre, dolor de huesos y ocasionalmente síndromes de fuga vascular, incluyendo pericarditis y pleuritis. Algunos de los efectos 15 secundarios pueden deberse a otras citocinas que pueden liberarse intrínsecamente por estos factores de crecimiento hematopoyético. Además, el uso de estos factores de crecimiento hematopoyéticos puede ser prohibitivo en los pacientes con células tumorales que llevan receptores G-CSF o 20 GM-CSF tales como en leucemias mieloides agudas y crónicas y en síndromes mielodisplásticos . Mientras que se ha logrado un progreso principal en el tratamiento de pacientes en riesgo de pancitopenia a partir del uso de citocinas hematopoyéticas, no se ha hecho progreso en el tratamiento de 25 trombocitopenia. Después de la quimioterapia de alta dosis y especialmente después de ASCT, los pacientes están en riesgo de trombocitopenia que puede durar durante muchos meses aún hasta 3 años y algunos pacientes trombocitopénicos nunca podrán recuperarse. Muchos pacientes previamente tratados con 5 productos sanguíneos múltiples se vuelven resistentes a plaquetas y en consecuencia la trombocitopenia puede ser imposible de superar, aún temporalmente, a pesar de las transfusiones de plaquetas intensivas y frecuentes a partir de un donador individual. La resistencia a las plaquetas y la 10 trombocitopenia prolongada representa una causa común de muerte en los centros ASCT mundiales. Actualmente, se están investigando diversas nuevas citocinas recombinantes tales como interleucina-3 humana recombinante (rhIL3) e interleucina-6 humana recombinante 15 (rhILß) como agentes potenciales para mejorar la megacariocitopoyesis y reconstitución de plaquetas. Desafortunadamente, las pruebas clínicas preliminares mostraron que aunque rhIL3 y rhIL6 pueden mejorar la reconstitución de plaquetas, tales efectos no son de ningún 20 modo dramáticos y pueden tomar tiempo considerable. Evidentemente, la trombocitopenia alargada representa un problema principal en los centros de Transplante de Médula Osea clínicos el día de hoy para lo cual no se ha encontrado aún soluciones satisfactorias. 25 Existe así una necesidad ampliamente reconocida de, •^^it itm ßii?Ji? íí?.Jk AJU. y sería altamente ventajoso tener un estimulador de hematopoyesis seguro, barato rápidamente efectivo y bien definido, y específicamente megacariocitopoyesis, desprovista de las limitaciones anteriores. 5 La fracción aSl de la caseína : La fracción aSl de la caseína puede obtenerse a partir de las proteínas de la leche por diversos métodos [D. G. Schmidth and T. A. J. Paynes (1963), Biochim., Biophys. Acta, 78:492; M. P. Thompson and C. A. Kiddy (1964), J. Dairy 10 Sci., 47:626; J. C. Mercier, et ai. (1968), Bull. Soc. Chim. Biol. 50:521], y la secuencia de aminoácidos completa de la fracción aSl de la caseína se determinó por J. C. Mercier et ai. (1971) (Eur. J. Biochem. 23:41). Las secuencias de codificación y genómicas de la fracción aSl de bovino de la 15 caseína también han clonado y secuenciado empleando técnicas de ADN recombinantes [D. Koczan, et al . (1991), Nucí. Acids Res. 19(20): 5591; McKnight, R. A., et al (1989), J. Dairy Sci. 72:2464-73]. Se ha documentado el desdoblamiento proteolitico e identificación de los fragmentos N-terminales 20 de la fracción aSl de la caseína [J. C. Mercier, et al . (1970), Eur. J. Biochem. 16:439; P. L. H. McSweeney et al . (1993), J. Dairy Res., 60:401], como tiene la absorción intestinal y apariencia de este fragmento en el plasma de mamífero después de la ingestión de las proteínas de leche 25 entera [Fiat, A.M., et al . (1998) Biochimie, 80 (2) : 2155-65] .

Meisel, H. and Bockelmann, W. [(1999), Antonie Van Leeuwenhoek, 76:207-15] detectaron secuencias de aminoácidos de inmunopéptidos, casoquininas y casomorfinas en péptidos liberados por digeridos de bacterias de ácido láctico de las fracciones a y ß de la caseína. De interés particular es la actividad anti-aglomerante y trombolítica demostrada por las porciones C-terminales de las fracciones de caseína a- y K-caseína [Chabance, B. et al . (1997), Biochem. Mol. Biol. Int. 42(1) 77-84; Caen J. et ai. (1993), J. Dairy Sci. 76(1): 301-310] . Estudios previos documentaron los péptidos bioactivos potenciales encriptados en la secuencia de aminoácidos aSl N-terminal, pero no se hizo mención del uso de fragmentos de proteína, secuencias específicas o péptidos sintéticos definidos para mejorar la hematopoyesis, prevenir la infección viral o modular el desarrollo de las enfermedades autoinmunes. De acuerdo a la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar una enfermedad autoinmune, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar una enfermedad viral, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de una caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención 5 se proporciona un método para prevenir la infección viral, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. 10 Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para inducir la hematopoyesis, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína 15 aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para inducir la proliferación de células del tallo hematopoyético, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad 20 terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseina aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para inducir la proliferación y diferenciación de células del tallo hematopoyético, 25 comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad rr,nt?,r*WMto*mit • • ,_____. _„,,_„ .,,,...,,.^^.. ........^ ... , , ^ en una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para inducir la megacariocitopoyesis, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para inducir la eritropoyesis, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para inducir leucocitopoyesis, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para inducir la trombocitopoyesis, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido ? ^^,t,t ^., ,*.„, „. ,.„„.„,., —^.„_,^.,„.... _.^,.^¡Mfe.„ »Í LtJj derivado a partir de una porción del término N de la caseina aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar la trombocitopenia, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar la pancitopenia, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar la granulocitopenia, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar la hiperlipidemia, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar la colesterolemia, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar la glucosuria, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar la diabetes, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar el SIDA, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. tt_i«Lá A.jt,*rtH?É~?> - «tMrit >,.., . y.,.^^., ., r...] r^... . ... .. í r ^.^^.s.. .. . , .. ...... .M...a^ .. . .... . .. .. .... , ., « _ _J^^^ Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar la infección por VIH, comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar las condiciones asociadas con dosis mieloablativas de quimio-radioterapia soportadas por el transplante de médula ósea autólogo o células del tallo sanguíneo periférico (ASCT) o transplante de médula ósea alogénico (BMT) , comprendiendo el método administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar una enfermedad autoinmune, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar una enfermedad viral, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir la infección viral, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir la hematopoyesis, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir la proliferación de las células del tallo hematopoyético, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de la porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir la proliferación y diferenciación de las células del tallo hematopoyético, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir la megacariocitopoyesis, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir la eritropoyesis, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir la leucocitopoyesis, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir la trombocitopoyesis, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o 5 tratar trombocitopenia, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención 10 se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar la pancitopenia, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. 15 Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar la granulocitopenia, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un 20 portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar la hiperlipidemia, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado 25 a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar la colesteromia, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar la glucosuria, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar la diabetes, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar el SIDA, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. ? yy Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar la infección por VIH, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar las condiciones asociadas con mieloablativas de quimioradioterapias soportada por el transplante de médula ósea autólogo o células del tallo sanguíneo periférico, (ASCT) o el transplante de médula ósea alogénico (BMT) , comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para mejorar la colonización de células del tallo sanguíneo donadas en un recipiente mieloseparado, el método comprende tratar un donador de las células del tallo sanguíneo donadas con un péptido derivado a partir de una porción de término N de una caseína aSl antes de la donación e implante de las células del tallo sanguíneo donadas en el recipiente. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para mejorar la colonización de células del tallo sanguíneo donadas en un recipiente mieloseparado, comprendiendo el método tratar las células del tallo sanguíneo donadas con un péptido derivado a partir de 5 una porción del término N de una caseína aSl antes de implantar las células del tallo sanguíneo donadas en el recipiente. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una 10 porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar una enfermedad autoinmune. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o 15 tratar una enfermedad viral. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir la infección viral. 20 Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir la hematopoyesis . Adicionalmente de acuerdo con la presente invención 25 se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir la proliferación de las células del tallo hematopoyético. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl para inducir la proliferación y diferenciación de las células del tallo hematopoyético . Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl para inducir la megacariocitopoyesis . Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl para inducir la eritropoyesis . Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl para inducir la leucocitopoyesis . Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl para inducir la trombocitopoyesis . Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl para prevenir o tratar trombocitopenia. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una 5 porción del término N de caseína aSl para prevenir o tratar la pancitopenia. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl para prevenir o tratar 10 la granulocitopenia. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl para prevenir o tratar la hiperlipidemia. 15 Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl para prevenir o tratar la colesterolemia. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención 20 se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl para prevenir o tratar la glucosuria. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una 25 porción del término N de caseína aSl para prevenir o tratar ÉtmáßámitÉlt??yi. .A. ...- , . * ,M... . la diabetes. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de caseína aSl para prevenir o tratar 5 el SIDA. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar la infección por VIH. 10 Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar las condiciones asociadas con dosis mieloablativas de quimioradioterapia soportadas por transplante de médula ósea 15 autólogo o de células del tallo sanguíneo periférico (ASCT) o transplante de médula ósea alogénico (BMT) . De acuerdo con las características adicionales en modalidades preferidas de la invención descritas posteriormente, el péptido es un fragmento derivado por la 20 fragmentación de la caseína aSl. De acuerdo a características aún adicionales en las modalidades preferidas descritas el péptido es un péptido sintético. De acuerdo a características aún adicionales en las 25 modalidades preferidas descritas el péptido tiene una ^y^£ secuencia como se indica en una de las SEC. DE IDENT NOS. 1- 19. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un péptido purificado que tiene una secuencia de aminoácidos seleccionada a partir del grupo que consiste de las SEC. DE IDENT NOS: 1-19 Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica que comprende un péptido purificado que tiene una secuencia de aminoácidos seleccionado a partir del grupo que consiste de las SEC. DE IDENT NOS: 1-19 y un portador farmacéuticamente aceptable. La presente invención se dirige exitosamente a las deficiencias de las configuraciones actualmente conocidas al proporcionar péptidos para el tratamiento de la enfermedad humana, cuyos péptidos se derivan a partir de la porción de término N de la caseína aSl y no posee toxicidad detectable y posee alta eficiencia terapéutica. BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La invención se describe en la presente, a manera de ejemplo solamente, con referencia a los dibujos anexos. Con referencia específica ahora los dibujos en detalle, se enfatiza que los detalles mostrados son a manera de ejemplo y para propósitos de discusión ilustrativa de las modalidades preferidas de la presente invención solamente, y se presentan en razón de proporcionar lo que se cree es la más útil y fácilmente entendida descripción de los principios y aspectos conceptuales de la invención. A este respecto, no se pretende de mostrar los detalles estructurales de la invención en mayor detalle del que es necesario para un entendimiento fundamental de la invención, haciendo evidente la descripción tomada con los dibujos para aquellos con experiencia en la técnica de cómo las diversas formas de la invención pueden abarcarse en la práctica. En los dibujos: Las FIGURAS la-b representan la estimulación de la actividad celular Destructora Natural (NK) en células cultivadas de médula ósea de murino por péptidos derivados a partir de la caseína natural. La lisis de las células objetivo YAC marcadas con 35S por la células cultivadas de médula ósea de murino incubadas en la presencia (+) o ausencia (-) de 100 µg por ml de péptidos derivados a partir de la caseína natural se expresa como la fracción de radioactividad total liberada a partir de las células YAC dentro del sobrenadante de cultivo (% de Liberación de 35S) . La Figura la representa la actividad NK en una proporción de células efectoras: objetivo de 25:1. La Figura Ib representa la actividad NK de una proporción de células efectoras ¡objetivo de 50:1. La FIGURA 2 representa la estimulación de la actividad celular Destructora Natural (NK) en Células de aAmüancA..

Tallo Sanguíneo Periférico humano cultivadas (PBSC) por péptidos derivados a partir de la caseína natural. La lisis de las células objetivo K562 marcadas con 35S por PBSC humanas cultivadas a partir de donadores tratados con el Factor que Estimula las Colonias de Granulocitos (G-CSF) incubadas con (0 µg) o con concentraciones crecientes (25-500 µg por ml) de péptidos derivados a partir de la caseína natural se expresa como la fracción de la radioactividad total liberada a partir de las células K562 dentro del sobrenadante de cultivo (% de Liberación de 35S) . Los cuadrados representan una proporción de células efectoras: objetivo de 100:1, los triángulos representan una proporción de células efectoras : objetivo de 50:1. Las FIGURAS 3a-3b representan la estimulación de la proliferación de las células Destructoras Naturales (NK) y linfocito T (T) de Células del Tallo Sanguíneo Periférico humano (PBSC) por los péptidos derivados a partir de la caseína natural. La proliferación de células NK y T en PBSC cultivadas a partir de los donadores tratados con el Factor que Estimula las Colonias de Granulocito incubadas con o sin péptidos derivados a partir de la caseína natural se expresa como el porcentaje (%) de células que enlazan el anticuerpo UCHTi de anticélulas T fluorescentes anti-CD3/FITC, o el anticuerpo MOC-1 de anticélulas NK fluorescentes anti-CD5e/RPE (DAKO A/S Dinamarca) . Los controles son anticuerpos ^'AS^ - ** Á IgG antiratón FITC y RPE conjugados. La Figura 3a representa el porcentaje de anticuerpo fluorescente que enlaza PBSC humanas cultivadas CD56 (2 muestras independientes) después de 10 días de incubación con (CD56 + péptidos) o sin (CD56) 100 µg por ml de péptidos derivados a partir de la caseína natural. La Figura 3b representa el porcentaje de células PBSC humanas cultivadas que enlazan el anticuerpo fluorescente anti-CD3 (célula T) , anticuerpo anti-CD56 (célula NK) y las células enlazan los anticuerpo CD3 y CD56 (células similares a T y NK) después de 28 días de incubación con (+28) o sin (-28) 100 µg por ml de péptidos derivados a partir de la caseína natural. La FIGURA 4 representa la estimulación de la actividad de las células Destructoras Naturales (NK) en Células Cultivadas del Tallo Sanguíneo Periférico humanas (PBSC) por péptidos derivados de caseína sintética. La lisis de las células objetivos K562 marcadas con 35S por PBSC humanas cultivadas (a partir de un paciente con cáncer de mama) incubadas sin (0 µg) o con concentraciones crecientes (10-500 µg por ml) de péptidos sintéticos derivados a partir de la caseína se expresa como la fracción de radioactividad total liberada a partir de las células K562 dentro del sobrenadante de cultivo (% de Liberación) . Los péptidos representan secuencias de la N-terminal de los 1-8 (8), 1-12 (12), 1-22 (J), 1-24 (L) , 1-25 (M) y 1-26 (N) primeros tyjíi,yy'i¡yt ^ ^ aminoácidos de la porción del término N de la caseína aSl (véase Tabla 3 posteriormente para las secuencias de péptido sintético) . La FIGURA 5a-c representa la estimulación de la proliferación de las células humanas cultivadas de origen diverso por péptidos derivados a partir de la caseína natural. La proliferación de las células humanas cultivadas después de 14-21 días de incubación con concentraciones crecientes de los péptidos derivados a partir de la caseína natural se expresa como la cantidad de [3H] -timidina incorporada dentro de cada muestra. La Figura 5a representa la incorporación de la marca en dos muestras (PBSC 1, 15 días de incubación; y PBSC 2, 20 días de incubación) de Células del Tallo Sanguíneo Periférico humanos incubadas con o sin (ctrl) 50-600 µg por ml de péptidos derivados a partir de la caseína natural. La Figura 5b representa la incorporación de [3H] -timidina dentro de las células de médula ósea humanas después de 21 días de incubación con o sin (ctrl) 50-600 µg por ml de péptidos derivados a partir de la caseína natural. La médula ósea fue donada por pacientes de cáncer en remisión (BM Auto, BM 1 y BM 2) o voluntarios saludables (BM normal) .

La Figura 5c representa la incorporación de [3H] -timidina dentro de células Umbilicales humanas después de 14 días de incubación con o sin (ctrl) 50-1000 µg por ml de péptidos derivados a partir de caseína natural. Las células I?.Á?.jtá .? Umbilicales fueron donadas por dos donadores separados (C.B. 1, C.B. 2) . La FIGURA 6 muestra una Tabla que representa la proliferación de progenitores de células sanguíneas a partir de médula ósea humana y umbilicales en respuesta a la incubación con péptidos derivados a partir de la caseína natural. El número de células relativo x 104 por ml, que refleja la proliferación de las células cultivadas, se determinó contando las células como se describe en la sección de Ejemplos que sigue. La médula ósea de voluntarios saludables (Médula Osea) y Umbilicales de nacimientos normales (Cordón Umbilical) se incubó durante 13 (Cordón Umbilical) o 14 (Médula Osea) días en la presencia de factores de crecimiento y suero AB, con o sin concentraciones crecientes de péptidos derivados a partir de la caseína natural (25-500 µg) . La FIGURA 7 representa la estimulación de la reconstitución de células de glóbulos blancos periféricos en ratones transplantados con médula ósea mieloseparados en respuesta al tratamiento con péptidos derivados a partir de la caseína natural. Las cuentas celulares representan el número de glóbulos blancos (x 10° por ml, como se cuenta en un hemocitómetro) . Los ratones (n = 10 por grupo) recibieron irradiación letal y transplante de médula ósea singénico (106 células por ratón) el día 9.6, y la administración tí LÁ¿!.,¡i ib,* *-íit i?..^ . HilJ'lHMM-"- -.^^^.**J"-* • intravenosa de 1 mg por recipiente de péptidos derivados a partir de la caseína natural (PRUEBA: -+-) o 1 mg por recipiente humano de albúmina de suero (CONTROL: —). La FIGURA 8 representa la estimulación de la reconstitución de plaquetas en ratones transplantados con médula ósea mieloseparados en respuesta al tratamiento con péptidos derivados a partir de la caseína natural. Las cuentas de plaqueta (PLT) representan el número de trombocitos (x 103 por ml, como se cuenta en un hemocitómetro) . Los ratones (n = 60 por grupo) recibieron irradiación letal y transplante de médula ósea singénico (106 células por ratón) el día 1, y la administración intravenosa de 1 mg por recipiente de péptidos derivados a partir de la caseína natural (Péptidos: cuadrados cerrados) o 1 mg por recipiente humano de albúmina de suero (HSA: cuadrados abiertos) . Las FIGURAS 9a-f representan la penetración y captación nuclear de péptidos conjugados con FITC derivados a partir de la caseína natural en células cultivadas de linfocito T humanas, como se registra por microscopía fluorescente. Fl y F2 son fracciones idénticas de los péptidos conjugados con FITC derivados a partir de la caseína natural. Las células Sup-Ti se incubaron con 100 µg por ml de péptidos conjugados con FITC derivados a partir de la caseína natural como se describe en la sección de Ejemplos que sigue.

En los tiempos indicados, las células se lavaron de marca libre, se fijaron en formalina y se prepararon para verse y registrarse por Microscopía Confocal de Barrido Láser. Las Figuras 9a hasta 9f son imágenes seleccionadas de células de tiempos de incubación consecutivos, que demuestran que los péptidos conjugados con FITC derivados de la caseína natural penetran la membrana de las células Sup-Ti (Figuras 9a, 9b) y se concentran en el núcleo (Figuras 9c-9f) . La FIGURA 10 muestra una Tabla que representa la estimulación de la proliferación de células linfocito Sup-Ti en respuesta a la incubación con los péptidos derivados de la caseína natural. Las células Sup-Ti (5000 por pozo) se incubaron con concentraciones crecientes (50-1000 µg por ml) de péptidos derivados de la caseína natural, contados en sus pozos en los tiempos indicados después del cultivo y pulsados con [°H] -timidina durante 18 horas. El índice de proliferación es la proporción del promedio de la incorporación de [3H] -timidina dentro de muestras por triplicado dividida por la incorporación dentro de las células cultivadas sin péptidos derivados de la caseína natural (control) . La FIGURA 11 muestra una Tabla que representa la inhibición de la infección de VIH-1 de linfocitos CEM por péptidos derivados de la caseína natural. Las células CEM se preincubaron con concentraciones crecientes (50-1000 µg por ml) de péptidos derivado de la caseína natural para el número indicado de horas (3, 24 y 48 horas) antes de poner en contacto con el virus de VIH-1, como se describe en la sección de Ejemplos que sigue. El día 15 después de la infección se contaron las células por el número de celdas y se probaron por la severidad de infección de VIH-1 por la prueba del antígeno P34, como se describe en la sección de ejemplos que sigue. Los cultivos control fueron células IF: CEM puestas en contacto con el virus VIH-1 sin pretratamiento con los péptidos derivados de la caseína natural, y las células UIF: CEM cultivadas bajo condiciones idénticas sin péptidos derivados de la caseína natural y sin poner en contacto con el virus de VIH-1. La FIGURA 12 representa la prevención por péptidos derivados de la caseína natural de Diabetes Juvenil (Tipo I, IDDDM) en ratones Diabéticos No Obesos hembras. La glucosuria se observó a intervalos durante 230 días después del tratamiento en ratones NOD hembras, recibiendo una inyección una vez o dos veces a la semana de 100 µg de péptidos derivados de la caseína natural durante 5 semanas (6 u 11 inyecciones en total) (triángulo) y controles no tratados (cuadrados) . Todos los controles desarrollaron glucosuria y se murieron subsecuentemente. La FIGURA 13 muestra una Tabla que representa la estimulación de la hematopoyesis en pacientes de cáncer en respuesta a inyecciones de péptidos derivados de la caseína natural. La sangre periférica de cinco pacientes de cáncer hembra recibiendo o habiendo recibido quimioterapia, como se describió anteriormente, se contaron por Glóbulos Blancos 5 Totales (WBC x 103) , Plaquetas (PLT, x 103) , Eritrocitos (RBC, x 103) y Hemoglobina (gm por di) antes (n) y después (n +...) de las inyecciones intramusculares con los péptidos derivados de la caseína natural, como se describió anteriormente. El paciente 1 se refiere a G.T.; el paciente 2 10 se refiere a E.C.; el paciente 3 se refiere a E.S.; el paciente 4 se refiere a J.R. y el paciente 5 se refiere a D.M. La FIGURA 14 representa la estimulación por péptidos derivados de la caseína natural de la 15 trombocitopoyesis en un paciente resistente a plaquetas con Leucemia Mieloide Aguda (M-l) . La reconstitución de trombocitos se expresó como el cambio en el contenido de plaquetas de la sangre periférica (PLA, x 10° por ml), contadas como se describió anteriormente en los intervalos 20 indicados después de la inyección intramuscular (como se describe en la sección de Ejemplos que sigue) de 100 µg de péptidos derivados de la caseína natural. La FIGURA 15 representa la estimulación por péptidos derivados de la caseína natural de trombocitopoyesis 25 en un paciente resistente a plaquetas con Leucemia Mieloide gn^m ^^ Aguda (M-2) . La reconstitución de trombocitos se expresó como el cambio en el contenido de plaquetas de la sangre periférica (PLA, x 106 por ml), contadas como se describió anteriormente en los intervalos indicados después de la inyección intramuscular (como se describe en la sección de Ejemplos que sigue) de 100 µg de péptidos derivados de la caseina natural. La presente invención es de péptidos biológicamente activos que se derivan a partir de o son similares a secuencias idénticas con el término N de la fracción aSl de la caseína de leche, composiciones que los contienen y métodos para utilizarlos en, por ejemplo, estimular y mejorar la respuesta inmune, proteger en contra de infección viral, normalizar los niveles de colesterol en suero, y estimular la hematopoyesis. Los péptidos derivados de caseína no son tóxicos y pueden usarse para tratar y prevenir, por ejemplo, patologías inmunes, hipercolesterolemia, trastornos hematológicos y enfermedades relacionadas a virus. Los principios y operación de la presente invención pueden entenderse mejor con referencia a los dibujos y descripciones anexas. Antes de explicar al menos una modalidad de la invención en detalle, debe entenderse que la invención no se limita en su aplicación a los detalles indicados en la siguiente descripción o ejemplificados por los Ejemplos. La invención es capaz de otras modalidades o de ser practicadas o llevar cabo en diversas formas. También, debe entenderse que la fraseología y terminología empleada en la presente es para el propósito de descripción y no debe considerarse como limitante. Como se usa en la presente, el término "tratar" incluye inhibir, disminuir o invertir sustancialmente la progresión de una enfermedad, mejorando sustancialmente los síntomas clínicos de una enfermedad. Como se usa en la presente, el término "prevenir" incluye prevenir sustancialmente la aparición de los síntomas clínicos de una enfermedad. Como se usa en la presente, el término "péptido" incluye péptidos nativos (productos de degradación, péptidos sintéticamente sintetizados o péptidos recombinantes) y péptido-miméticos (típicamente, péptidos sintéticamente sintetizados), tales como peptoides y semipeptoides que son análogos peptídicos, que pueden tener, por ejemplo, modificaciones que vuelven los péptidos más estables mientras están en un cuerpo. Tales modificaciones incluyen, pero no se limitan a, ciclización, modificación del término N, modificación del término C, modificación del enlace peptidico, que incluye, pero no se limita a, CH2-NH, CH2-S, CH2-S=0, 0=C-NH, CH2-0, CH2-CH2, S=C-NH, CH=CH o CF=CH, modificación de la cadena principal y modificación del .**>§?ft| residuo. Los métodos para preparar compuestos péptido miméticos son bien conocidos en la técnica y se especifican, por ejemplo en Quantitative Drug Design, C.A. Ramsden Gd., Capítulo 17.2, F. Choplin Pergamon Press (1992), que se 5 incorpora para referencia como se indica completamente en la presente. El detalle adicional a este respecto se proporciona posteriormente . Así, un péptido de acuerdo con la presente invención puede ser un péptido cíclico. La ciclización puede 10 obtenerse, por ejemplo, a través de la formación del enlace amida, por ejemplo, incorporando Glu, Asp, Lys, Orn, ácido di-amino butírico (Dab) , ácido di-aminopropiónico (DaP) en diversas posiciones en la cadena (enlaces -CO-NH o -NH-CO) . La ciclización de cadena principal a cadena principal también 15 puede obtenerse a través de la incorporación de aminoácidos modificados de las fórmulas H-N((CH2)n_ COOH) -C (R) H-COOH o H- N( (CH2)n-COOH)-C(R)H-NH2 en donde n = 1-4, y adicionalmente en donde R es cualquier cadena lateral natural o no natural de un aminoácido . 20 La ciclización por medio de la formación de enlaces S-S a través de la incorporación de dos residuos de Cys es también posible. La ciclización de la cadena lateral a cadena lateral adicional puede obtenerse por medio de la formación de un enlace de interacción de la fórmula - (-CH2-) n-S-CH2-C-, 25 en donde n = 1 ó 2 que es posible, por ejemplo, a través de la incorporación de Cys u homoCys y la reacción de su grupo SH libre con, por ejemplo, Lys, Orn, Dab o Dap bromoacetilados . Los enlaces peptídicos (-CO-NH-) dentro del péptido pueden sustituirse, por ejemplo, por enlaces N-metilados (-N(CHs)-CO-), enlaces éster (-C (R) H-C-0-O-C (R) -N-) , enlaces cetometilen (-CO-CH2-), enlaces a-aza (-NH-N (R) -C0-) , en donde R es cualquier alquilo, por ejemplo, metilo, enlaces carba (-CH2-NH-) , enlaces hidroxietileno (-CH (OH) -CH2-) , enlaces tioamida (-CS-NH-) , dobles enlaces olefínicos (-CH=CH-) , enlaces retroamida (-NH-CO-) , derivados peptídicos (-N(R) -CH2-CO-) , en donde R es la cadena lateral "normal", presentada naturalmente sobre el átomos de carbono. Estas modificaciones pueden ocurrir en cualquiera de los enlaces a lo largo de la cadena peptídica y aún a diversos (2-3) al mismo tiempo. Los aminoácidos aromáticos naturales, Trp, Tyr y Phe, pueden sustituirse por ácidos no naturales sintéticos tales como TIC, naftilelanina (Nol), derivados de Phe metilados en el anillo, derivados de Phe halogenados u o-metil-Tyr. Las Tablas 1-2 posteriores enlistan todos los aminoácidos que ocurren naturalmente (Tabla 1) y los aminoácidos no convencionales o modificados (Tabla 2) . .tie?? iu í. ., ..„... **.... - ^^ ^Jjefciaj1Aat4^?<<jß^fcaiMitM»fc-»?^. lf rtBgÉf-T-"-fl'i rmnatana ?¿é.i?í.yi.JÜM Tabla 1 _> .Í *. ,.-*i?¿*A,?k .. , yi,?rk.?i. Jim ¡ ak Un péptido de acuerdo con la presente invención puede usarse en una forma autosostenida o ser parte de porciones tales como proteínas y mostrar porciones tales como muestras de bacterias y fagos. Los péptidos de la invención también pueden modificarse químicamente para dar dímeros o multímeros activos, en una cadena polipéptidica o cadenas reticuladas covalentemente. Adicionalmente, un péptido de acuerdo con la presente invención incluye al menos cuatro, opcionalmente al menos cinco, opcionalmente al menos seis, opcionalmente al menos siete, opcionalmente al menos ocho, opcionalmente al menos nueve, opcionalmente al menos diez, opcionalmente al menos once, opcionalmente al menos doce, opcionalmente al menos trece, opcionalmente al menos catorce, opcionalmente al menos quince, opcionalmente al menos dieciséis, opcionalmente al menos diecisiete, opcionalmente al menos dieciocho, veinte, opcionalmente al menos veintiuno, opcionalmente al menos veintidós, opcionalmente al menos veintitrés, opcionalmente al menos veinticuatro, opcionalmente al menos veinticinco, opcionalmente al menos veintiséis, opcionalmente entre veintisiete y sesenta, o más residuos de aminoácidos (también referidos en la presente intercambiablemente como aminoácidos) . En consecuencia, como se usa en la presente el término "aminoácido" o "aminoácidos" se entiende que incluye los 20 aminoácidos que ocurren naturalmente. Aquellos aminoácidos frecuentemente modificados después de la traducción in vivo, incluyen, por ejemplo, hidroxiprolina, fosfoserina y fosfotreonina; y otros aminoácidos no usuales, que incluyen, pero no se limitan a, ácido 2-aminoadípico, hidroxilisina, isodesmosina, nor-valina, nor-leucina y ornitina. Además, el término "aminoácido" incluye aminoácidos D y L. Como se usa en la presente, la frase "derivado a partir de una porción de término N de la caseína aSl" se refiere a péptidos como este término se define en la presente, por ejemplo, desdoblamiento de productos de caseina aSl (referidos en la presente como péptidos derivados de la caseina natural), péptidos sintéticos químicamente sintetizados para corresponder con la secuencia de aminoácidos de una porción del término N de la caseína aSl (referidos en la presente como péptidos sintético derivados de la caseína), péptidos similares (homólogos) a una porción del término N de la caseína aSl, por ejemplo, péptidos caracterizados por una o más sustituciones de aminoácidos, 5 tales, como, pero no limitadas a sustituciones permisibles, con la condición de que se mantenga al menos 70%, preferiblemente al menos 80%, de mayor preferencia al menos 90% de similaridad, y homólogos funcionales de los mismos. Los términos "homólogos" y "homólogos funcionales" como se 10 usa en la presente significan péptidos con cualquier inserción, supresión y sustitución que no afecte la actividad biológica del péptido. Como se usa en la presente el término "caseína aSl" se refiere a la caseína aSl de un mamífero que incluye, 15 pero no se limita a, mamíferos de ganado (por ejemplo, vaca oveja, cabra, yegua, camello, venado y búfalo) seres humanos y mamíferos marinos. Lo siguiente proporciona una lista de caseínas aSl que tienen secuencias de aminoácidos conocidas, identificadas por sus Números de Acceso GenBank (NCBI) y 20 fuente: CAA26982 ( Ovis aries (oveja)), CAA51022 ( Capra hircus (cabra)), CAA42516 (Bos taurus (bovino)), CAA55185 (Homo sapies), CAA38717 ( Sus scrofa (cerdo)), P09115 (conejo) y 097943 ( Camel us dromeduri us (camell o) ) . Como se usa en la presente, el término "porción del 25 término N" se refiere a M aminoácidos de la caseína derivados ?^¡a? ÉÉamttü^.?.?My?... ^^.,í..y de los primeros 60 aminoácidos de la caseína aSl, en donde M es cualquiera de los números enteros entre 5 y 60 (incluyendo los números enteros 5 y 60) . Preferiblemente, el término se refiere a los primeros M aminoácidos de la caseína aSl. 5 Los péptidos de la invención pueden obtenerse por extracción a partir de la leche como se describió previamente, o por síntesis peptídica de fase sólida, que es un método estándar conocido por el experto en la técnica. La purificación de péptidos de la invención se realiza por 10 técnicas estándar, conocidas por el experto en la técnica, tales como cromatografía líquida de alta resolución (HPl^C) • La fragmentación de la caseína de la leche para obtener los péptidos de la invención puede efectuarse usando diversos medios enzimáticos y/o químicos. 15 Como se detalla adicional y posteriormente y se ejemplifica en la sección de ejemplos que sigue, los péptidos de la presente invención tienen una diversidad de efectos terapéuticos. En la sección de Ejemplos se proporcionan numerosas pruebas con las cuales alguien con experiencia 20 común en la técnica puede probar un péptido específico diseñado de acuerdo con las enseñanzas de la presente invención para un efecto terapéutico específico. Cualquiera de los péptidos descritos en la presente puede administrase per se o formularse dentro de una 25 composición farmacéutica que puede usarse para tratar o mMteJÜHtfaA ji A ?.A. M-tat , , prevenir una enfermedad. Tal composición incluye como un ingrediente activo cualquiera de los péptidos descritos en la presente y un portador farmacéuticamente aceptable. Como se usa en la presente una "composición farmacéutica" se refiere a una preparación de uno o más de los péptidos descritos en la presente, con otros componentes químicos tales como portadores y excipientes farmacéuticamente adecuados. El propósito de una composición farmacéutica es facilitar la administración de un compuesto a un organismo. Posteriormente, el término "portador farmacéuticamente aceptable" se refiere a un portador o un diluyente que no ocasiona irritación significativa a un organismo y no invalida la actividad biológica y propiedades del compuesto administrado. Ejemplos, sin limitaciones, de portadores son: propilenglicol, solución salina, emulsiones y mezclas de solventes orgánicos con agua. En la presente el término "excipiente" se refiere a una sustancia inerte agregada a una composición farmacéutica para facilitar adicionalmente la administración de un compuesto. Ejemplo, sin limitación, de excipientes incluyen carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos azúcares y tipos de almidón, derivados de celulosa, gelatina, aceites vegetales, y polietilenglicoles . Las técnicas para la formulación y administración de fármacos puede encontrarse en la última edición de "Remington Pharmaceutical Science," Mack Publishing Co., Easton, P. A. Las rutas adecuadas para administración, pueden por ejemplo, incluir el suministro oral, rectal, transmucosal, transdérmico, intestinal o parenteral incluyendo inyecciones intramusculares, subcutáneas e intramedulares así como inyecciones intratecales, intraventricular directa, intravenosa, intraperitoneal, intranasal o intraocular. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden fabricarse por procesos bien conocidos en la técnica, por ejemplo, por medio de los procesos convencionales de mezclar, disolver, hacer grageas, reducir a polvo, emulsificar, encapsular, atrapar o liofilizar. Las composiciones farmacéuticas para uso de acuerdo con la presente invención pueden formularse así en forma convencional usando uno o más portadores farmacéuticamente aceptables que comprenden excipientes y auxiliares, que facilitan el proceso de los péptidos activos dentro de preparaciones que, pueden usarse farmacéuticamente. La formulación apropiada es dependiente de la ruta de administración seleccionada. Para inyección los péptidos de la invención pueden formularse en soluciones acuosas, preferiblemente en reguladores fisiológicamente compatibles, tales como solución de Hank, solución de Ringer, o regulador de solución salina fisiológica con o sin solventes orgánicos tales como propilenglicol, polietilenglicol. Para la administración transmucosal, se usan penetrantes en la formulación. Tales penetrantes se conocen generalmente en la técnica. Para la administración oral, los péptidos pueden formularse fácilmente al combinar los péptidos activos con portadores farmacéuticamente aceptables bien conocidos en la técnica. Tales portadores permiten a los péptidos de la invención formularse como tabletas, pildoras, grageas, cápsulas, líquidos, geles, jarabes, pastas, suspensiones y similares para ingestión oral por un paciente. Las preparaciones farmacológicas para uso oral pueden elaborarse usando un excipiente sólido, opcionalmente moliendo la mezcla resultante, y procesando la mezcla de gr nulos, después de agregar auxiliares adecuados si se desea, para obtener tabletas o núcleos de grageas. Los excipientes adecuados son, en particular, rellenos, tales como azúcares, incluyendo lactosa, sacarosa, manitol, o sorbitol; preparaciones de celulosa tales como, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de papa, gelatina, goma tragacanto, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica; y/o polímeros fisiológicamente aceptables tales como polivinilpirrolidona (PVP) . Si se desea, pueden agregarse agentes desintegrantes, tales como .-¿»A.» Í.JL.M polivinilpirrolidona reticulada, agar, base algínico o una sal de los mismos, tal como alginato de sodio. Los núcleos de grageas se proporcionan con recubrimientos adecuados. Para este propósito, pueden usarse soluciones de azúcar concentrada que pueden contener opcionalmente goma arábica, talco, polivinilpirrolidona, gel de carbopol, polietilenglicol, dióxido de titanio y soluciones de laca y solventes orgánicos adecuados o mezclas de solventes. Pueden agregarse tintes o pigmentos a las tabletas o recubrimientos de grageas para identificación o para caracterizar diferentes combinaciones de dosis de ingrediente activo. Las combinaciones farmacéuticas, que pueden usarse oralmente, incluyen cápsulas de ajuste estrecho hechas de gelatina asi como cápsulas suaves selladas hechas de gelatina y un plastificante, tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas de ajuste estrecho pueden contener los ingredientes activos en mezcla con rellenos tales como lactosa, aglutinantes, tales como almidones, lubricantes tales como talco o estearato de magnesio y, opcionalmente estabilizadores. En las cápsulas suaves, los péptidos activos pueden disolverse o suspenderse en líquidos adecuados, tales como aceites grasos, parafina líquida o polietilenglicoles líquidos. Además, pueden agregarse estabilizadores. Todas las formulaciones para administración oral deben estar en — a^-^ É fe dosificaciones adecuadas para la ruta seleccionada de administración. Para administración bucal, las composiciones pueden tomar la forma de tabletas o pastillas formuladas en forma convencional . Para administración por inhalación, los péptidos de acuerdo con la presente invención se suministran convenientemente en la forma de una presentación de aspersión en aerosol a partir de un paquete presurizado o un nebulizador con el uso de un propelente adecuado, por ejemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano o dióxido de carbono. En el caso de un aerosol presurizado, la unidad de dosificación puede determinarse proporcionando una válvula para suministrar una cantidad medida. Las cápsulas y cartuchos de, por ejemplo, gelatina para uso en un inhalador o insuflador pueden formularse conteniendo una mezcla de polvos del compuesto y una base de polvo adecuada tal como lactosa o almidón. Los péptidos descritos en la presente pueden formularse para administración parenteral, por ejemplo, por inyección de bolo o infusión continua. Las formulaciones para inyección pueden presentarse en forma de dosificación unitaria, por ejemplo, en ámpulas o en recipientes multidosis con un conservador agregado opcionalmente. Las composiciones pueden ser suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos Ülkí??yá.it t L»M xt . . *.*. *, j?fa¡¡a .*m*.?».,.. y.f atiiiiigawfcigfolft oleosos o acuosos, y pueden contener agentes de formulación tales como agentes de suspensión, estabilización y/o dispersión. Las composiciones farmacéuticas para la 5 administración parenteral incluyen soluciones acuosas de la preparación activa en forma soluble en agua. Adicionalmente, pueden prepararse suspensiones de los péptidos activos como suspensiones para inyección oleosas apropiadas. Los solventes o vehículos lipofilicos adecuados incluyen aceites grasos 10 tales como aceite de ajonjolí, o esteres de ácidos grasos sintéticos tales como oleato de etilo, triglicéridos o liposomas. Las suspensiones para inyección acuosa pueden contener sustancias, que aumentan la viscosidad de la suspensión, tales como carboximetilcelulosa sódica, sorbitol 15 o dextrano. Opcionalmente, la suspensión también puede contener estabilizadores o agentes adecuados que aumentan la solubilidad de los péptidos para permitir la preparación de soluciones altamente concentradas. Alternativamente, el ingrediente activo puede estar 20 en forma de polvo para constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua, libre de pirógenos, estéril, antes de usarse. Los péptidos de la presente invención pueden también formularse en composiciones rectales tales como 25 supositorios o enemas de retención, usando, por ejemplo, bases de supositorios convencionales tales como manteca de cacao u otros glicéridos. Las composiciones farmacéuticas descritas en la presente también pueden comprender portadores o excipientes 5 de fase sólida de gel adecuadas. Los ejemplos de tales portadores o excipientes incluyen, pero no se limitan a, carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos azúcares, almidones, derivados de celulosa, gelatina y polímeros tales como polietilenglicoles. 10 Las personas comúnmente expertas en la técnica pueden determinar fácilmente las dosificaciones óptimas y la metodología de dosificación para cualquiera de los péptidos de la invención. Para cualquier péptido usado de acuerdo con las 15 enseñanzas de la presente invención, una cantidad terapéuticamente efectiva, también referida como una dosis terapéuticamente efectiva, que puede estimarse inicialmente a partir de pruebas de cultivo celular o pruebas de animales in vivo. Por ejemplo, una dosis puede formularse en modelos 20 animales para lograr un rango de concentración circulante que incluye la IC50 o la ICioo como se determina en el cultivo celular. Tal información puede usarse para determinar más precisamente las dosis útiles en humanos. Las dosificaciones iniciales también pueden estimarse a partir de datos in vivo . 25 Usando estas pautas iniciales alguien con experiencia común en la técnica podría determinar una dosificación efectiva en humanos . Además, la toxicidad y eficiencia terapéutica de los péptidos descritos en la presente puede determinarse por procedimientos farmacéuticos estándares en cultivos celulares o animales experimentales, por ejemplo, determinando la LD50 y la ED5o. La relación de dosis entre el efecto tóxico y terapéutico es el índice terapéutico y puede expresarse como la relación entre LD50 y ED5o- Se prefieren péptidos que presentan altos índices terapéuticos. Los datos obtenidos a partir de estas pruebas de cultivo celulares y estudios animales pueden usarse para formular un rango de dosificación que no sea tóxico para uso en humanos. La dosificación de tales péptidos radica preferiblemente dentro de un rango de concentraciones circulantes que incluyen la ED50 con poca o ninguna toxicidad. La dosificación puede variar dentro de este rango dependiendo de la forma de dosificación empleada y la ruta de administración utilizada. La formulación exacta, ruta de administración y dosificación puede seleccionarse por el médico individual en vista de la condición del paciente (véase, por ejemplo Fingí et al., 1975, In: The Pharmacological Basis of Therapeutics, capítulo 1, página 1) . La cantidad de dosificación y el intervalo pueden ajustarse individualmente para proporcionar niveles en plasma del ingrediente activo que sean suficientes para mantener el efecto terapéutico. Las dosificaciones de los pacientes normales para administración oral varían de aproximadamente 50-2000 mg/kg/administración, en forma común de aproximadamente 100-1000 mg/kg/administración, de preferencia de aproximadamente 150-700 mg/kg/administración y de mayor preferencia de aproximadamente 250-500 mg/kg/administración. En algunos casos, los niveles en suero terapéuticamente efectivos se lograrán al administrar dosis múltiples cada día. En casos de administración local o captación selectiva, la concentración local efectiva del fármaco puede no relacionarse a la concentración en plasma. Alguien con experiencia en la técnica será capaz de optimizar terapéuticamente las dosificaciones efectivas locales sin experimentación indebida. Dependiendo de la severidad y responsividad de la condición a ser tratada, la dosificación puede ser también una administración sencilla de una composición de liberación lenta, con el curso de tratamiento durando de varios días hasta varias semanas o hasta que la cura se efectúa o se logra la disminución del estado afectivo. La cantidad de una composición a ser administrada será, desde luego, dependiente del sujeto que se trata, la severidad de la aflicción, la forma de administración, el juicio del médico que prescribe, etc. Las composiciones de la presente invención pueden, si se desea, presentarse en un dispositivo de paquete o dispensador, tal como un equipo aprobado por FDA, que puede contener uno o más formas de dosificación unitaria que contienen el ingrediente activo. El paquete puede, por ejemplo, comprender hoja de metal o plástico, tal como un paquete de ampolla. El paquete o dispositivo dispensador puede acompañarse por instrucciones para la administración. El paquete o dispensador puede también acompañarse por un aviso asociado con el recipiente en una forma prescrita por una agencia gubernamental que regula la fabricación, uso o venta de farmacéuticos, cuyo aviso es reflejo de la aprobación por la agencia de la forma de las composiciones o administración para humano o veterinario. Tal aviso, por ejemplo, puede ser el etiquetado aprobado por la administración de alimentos y fármacos de los estados unidos para la prescripción de fármacos o de un inserto de producto aprobado. Las composiciones que comprenden un péptido de la invención, formuladas en un portador farmacéutico compatible pueden también prepararse, colocarse en un recipiente apropiado, y etiquetarse para el tratamiento o prevención de una condición o inducción indicada de un evento deseado. La indicación adecuada sobre la etiqueta puede incluir el tratamiento y/o prevención de una enfermedad autoinmune, una enfermedad viral, infección viral, trombocitopenia, pancitopenia, granulocitopenia, hiperlipidemia, colesteremia, glucosuria y diabetes, o til, inducción de hematopoyesis, proliferación de células del tallo hematopoyético, proliferación y diferenciación de células del tallo hematopoyético, megacariocitopoyesis, eritropoyesis, leuocitopoyesis y/o trombocitopoyesis. Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención pueden usarse para mantener y/o restablecer los constituyentes del sistema sanguíneo, equilibrando las cuentas de glóbulos rojos, para equilibrar los niveles de metabolitos en la sangre incluyendo azúcar, colesterol, calcio, ácido úrico, urea y enzimas tales como fosfatasa alcalina. Adicionalmente, las composiciones farmacéuticas de la invención pueden ser útiles para inducir la proliferación de glóbulos rojos modulando las cuentas de glóbulos blancos y/o glóbulos rojos, aumentando particularmente las cuentas de glóbulos blancos y/o glóbulos rojos, elevando el nivel en sangre de hemoglobina y para modular las cuentas de plaquetas. El término "equilibrar" como se usa en la presente con relación a los niveles de algunos parámetros fisiológicos, significa cambiar los niveles de los parámetros referidos y llevarlos más cerca de los valores normales. El término "valores normales" como se usa en la presente con relación a los parámetros fisiológicos, significa valores que están en el rango de los valores de humanos o animales saludables.

En modalidades específicamente preferidas, los péptidos de la invención equilibran las cuentas de glóbulos rojos, glóbulos blancos, plaquetas y nivel de hemoglobina. Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden usarse para activar la proliferación de glóbulos rojos. Además, las composiciones farmacéuticas pueden usarse para el tratamiento y/o prevención de trastornos de las células del tallo hemopoyético que incluyen trastornos de plaquetas, linfocitos, células de plasma y nutrofilos, así como la deficiencia y disfunción en condiciones pre- leucémicas y leucémicas y trombocitopenia. Adicionalmente, las composiciones farmacéuticas pueden usarse para el tratamiento y/o prevención de enfermedades proliferativas celulares. Con respecto a esto, vale la pena notar que las composiciones farmacéuticas de la invención son ventajosas y la estimulación de la respuesta inmune durante tratamientos de quimioterapia o radiación, para aliviar los efectos negativos, reducir el vómito inducido por quimioterapia e irradiación y promover una recuperación más rápida. Aún adicionalmente, las composiciones farmacéuticas de la invención pueden usarse para la estimulación de la respuesta inmune humana durante el tratamiento de enfermedades asociadas con la deficiencia inmune, por ejemplo VIH y enfermedades autoinmunes.

Las composiciones de la invención pueden pretenderse también para uso veterinario. Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden usarse en el tratamiento y/o prevención de, por ejemplo, trastornos que involucran niveles anormales de glóbulos rojos, trastornos que involucran la producción y diferenciación de células del tallo hemopoyético, tratamiento de plaquetas, trastornos de linfocitos y/o neutrófilos, para el tratamiento de condiciones preleucémicas y leucémicas y para el tratamiento de trombocitopenia. Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden usarse también en el tratamiento de trastornos de células proliferativas y enfermedades que involucran la deficiencia inmune tales como VIH, y de enfermedades autoimmunes. Adicionalmente; las composiciones farmacéuticas de la invención pueden usarse para estimular la respuesta inmune durante tratamientos de quimioterapia o radiación, reduciendo por ejemplo el vómito asociado con la quimioterapia. La invención se refiere adicionalmente a composiciones farmacéuticas anti-bacterianas que comprenden un ingrediente activo al menos un péptido de la invención y para el uso de los péptidos de la invención como agentes anti-bacterianos . Así, de acuerdo con la presente invención, se proporciona un método para prevenir o tratar una enfermedad autoimmune, el método se efectúa al administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar una enfermedad viral, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir la infección viral, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para inducir hematopoyesis, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para inducir la proliferación de células del tallo hematopoyético, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de lííat.¡?r¿, t?Á* b??hj,í j_. una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para inducir la proliferación y diferenciación de células del tallo hematopoyético, el método 5 se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para inducir megacariocitopoyesis, 10 el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención 15 se proporciona un método para inducir eritropoyesis, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención 20 se proporciona un método para inducir leucocitopoyesis, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención 25 se proporciona un método para inducir trombocitopoyesis, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseina aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención 5 se proporciona un método para prevenir o tratar trombocitopenia, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. 10 Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar pancitopenia, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína 15 aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar granulocitopenia, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva 20 de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar hiperlipidemia, el método se efectúa administrando a un 25 sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar colesteremia, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar glucosuria, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar diabetes, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar SIDA, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención i.li i?A-*at-* -ci ? ±M**ék. uÉk& , jtyM¿ téiS&¿?smáñk i a^ta d se proporciona un método para prevenir o tratar la infección por VIH, el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se proporciona un método para prevenir o tratar las condiciones asociadas con dosis mieloablativas de quimioradioterapia soportado por trasplante de médula ósea autólogo o células del tallo sanguíneo periférico (ASCT) o trasplante de médula ósea alogénico (BMT) , el método se efectúa administrando a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar una enfermedad autoinmune, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar una enfermedad viral, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseina aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar una infección viral, comprendiendo la 5 composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseina aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para 10 inducir hematopoyesis, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente 15 invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir la proliferación de células del tallo hematopoyético, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador 20 farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir la proliferación y diferenciación de células del tallo hematopoyético, comprendiendo la composición 25 farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para 5 inducir megacariocitopoyesis, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente 10 invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir eritropoyesis, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. 15 Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir leucocitopoyesis, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseina aSl y un 20 portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para inducir trombocitopoyesis, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado 25 a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar trombocitopenia, comprendiendo la 5 composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para 10 prevenir o tratar pancitopenia, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente 15 invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar granulocitopenia, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. 20 Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar hiperlipidemia, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la 25 caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar colesteremia, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar glucosuria, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar diabetes, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar SIDA, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar la infección por VIH, comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se proporciona una composición farmacéutica para prevenir o tratar las condiciones asociadas con dosis mieloablativas de quimioradioterapia soportada por trasplante de médula ósea a autólogo o células del tallo sanguíneo periférico (ASCT) o trasplante de médula ósea alogénico (BMT) , comprendiendo la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar una enfermedad autoinmune . Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar una enfermedad viral. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir fr ririS-j de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir la infección viral. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir hematopoyesis . Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir la proliferación de células del tallo hematopoyético. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseina aSl para inducir la proliferación y diferenciación de células del tallo hematopoyético. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir megacariocitopoyesis . Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir eritropoyesis . Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir A-fc "* -1 • ' - ilfiÉMI inafit "•É* ., de una porción del término N de la caseína aSl para inducir leucocitopoyesis . Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir 5 de una porción del término N de la caseína aSl para inducir trombocitopoyesis . Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir 10 o tratar trombocitopenia. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar pancitopenia. 15 Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar granulocitopenia. Adicionalmente, de acuerdo con la presente 20 invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseina aSl para prevenir o tratar hiperlipidemia. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir 25 de una porción del término N de la caseina aSl para prevenir o tratar colesteremia. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir 5 o tratar glucosuria. Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar diabetes. 10 Adicionalmente, de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar SIDA. Adicionalmente, de acuerdo con la presente 15 invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar la infección por VIH. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención se describe el uso de un péptido derivado a partir de una 20 porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar las condiciones asociadas con dosis mieloablativas de quimioradioterapia soportada por el trasplante de médula ósea autólogo o de células del tallo sanguíneo periférico (ASCT) o trasplante de médula ósea alogénico (BMT) . 25 Adicionalmente de acuerdo con la presente invención U^^^Ujg se proporciona un péptido purificado que tiene una secuencia de aminoácido seleccionada a partir del grupo que consiste de las SEC. DE IDENT. NOS: 1-19. Adicionalmente de acuerdo con la presente invención 5 se proporciona una composición farmacéutica que comprende un péptido purificado que tiene una secuencia de aminoácido seleccionada a partir del grupo que consiste de las SEC. DE IDENT. NOS: 1-19 y un portador farmacéuticamente aceptable. La presente invención se dirige exitosamente a las 10 deficiencias de las configuraciones actualmente conocidas proporcionando péptidos para el tratamiento de la enfermedad humana, cuyos péptidos se derivan a partir de la porción del término N de la caseína aSl y no posee toxicidad detectable y posee alta eficiencia terapéutica. 15 Los objetos adicionales, ventajas, y características novedosas de la presente invención se volverán aparentes para alguien con experiencia común en la técnica durante el examen de los siguientes ejemplos, que no pretenden ser limitantes. Adicionalmente, cada una de las 20 diversas modalidades y aspectos de la presente invención como se delinearon anteriormente y como se reclaman en la sección de reivindicaciones posterior encuentra soporte experimental en los siguientes ejemplos. EJEMPLOS 25 Se hace ahora referencia a los siguientes ejemplos, ""'- "*" ———-»-—- • ???^^.. . ? t aáii, que junto con las descripciones anteriores, ilustran la invención en una forma no limitante. Materiales y Métodos Experimentales Preparación de péptidos derivados a partir de caseína natural: Se aisló la fracción de caseína de leche de vaca como se describe por Hipp et al. (1952), ibid, y se sometió a digestión proteolítica exhaustiva con quimocina (también conocida como renin) (20 mg por ml) a 30°C. Al término de la reacción, la solución se calentó para inactivar la enzima, y el diferido se precipitó como paracaseinato por acidificación con un ácido orgánico, ácido acético o tricioracético. El paracaseinato se separó por centrifugación, y la fracción sobrenadante, que contiene los fragmentos peptidicos de interés, se dializó y reprecipitó como caseicidina por concentraciones mayores de ácido. La caseicidina resultante, después de la re-suspensión, diálisis y neutralización se liofilizó. La preparación en polvo resultante se probó por actividad biológica como se describe posteriormente, y se separó por HPLC para análisis peptídico. Análisis HPLC de los péptidos derivados a partir de la caseína natural: Los péptidos derivados a partir de la caseína natural como se describió anteriormente se analizaron por HPLC en dos etapas. Inicialmente, los digeridos de caseína liofilizada se separaron usando un C18 de fase inversa con un gradiente de 0.1% de ácido trifluoroacético en agua (p/p) -acetonitrilo. La detección fue de acuerdo con la absorción UV a 214 nm. Después de esto, las muestras se analizaron por HPLC-Espectroscopía de Masas (MS) equipado con una fuente de electroaspersión. Los cálculos de masa representan la masa de las muestras peptídicas ionizadas, como se derivan a partir de los tiempos de retención. Después de la separación, la composición de aminoácidos de los péptidos se determinó con un microsecuenciador en fase de gas (Applied Biosystems 470A) . Los siguientes datos son representativos: se observaron típicamente ocho picos peptídicos de los cuales 3 fueron picos principales que tienen valores Rt de 17.79, 19.7, 23.02 y 5 fueron picos menores que tienen valores Rt de 12.68, 14.96, 16.50, 21.9 y 25.1, cuyos valores Rt representan la masa molecular de 2764, 1697, 1880, 2616, 3217, 2333, 1677 y 1669 Da, respectivamente. Al Rt de 17.79 (que corresponde a 2,764 Da) un pico principal de un péptido de 23 aminoácidos que representa los aminoácidos 1-23 de la caseína aSl, que tiene la secuencia RPKHPIKHQGLPQEVLNENLLRF (SEC. DE IDENT. NO: 16, véase McS eeny et al., 1993, ibid. , para la secuencia completa de la caseína aSl) . Otros péptidos eran de las posiciones 208-224 de la caseína ß, las posiciones 16-37 de la caseína aSl y las posiciones 197-222 de un precursor de caseína similar a aS2. También estuvieron presentes otros péptidos.

Péptidos derivados de caseína sintética : Se sintetizaron péptidos de crecientes longitudes que corresponden a los 8-26 aminoácidos N-terminal de la caseína aSl por NoVetide Ltd., Haifa, Israel, con pureza de >95% (HPLC) . El control de calidad incluyó: HPLC, Espectrometría de Masas (El), análisis de aminoácidos y Contenido Peptídico. La Tabla 3 posterior proporciona la secuencia de estos péptidos : TABLA 3 Identificación Secuencia (término N - término C) N Noo.. de aminoácidos SEC. DE IDENT. NO: X RPKHPKH 8 1 Y RPKHPKHQ 9 2 ÍA RPKHPDCHQG 10 3 2A RPKHPKHQGL 11 4 3A RPKHPKHQGLP 12 5 A RPKHPKHQGLPQ 13 6 B RPKHPIKHQGLPQE 14 7 C RPKHPKHQGLPQEV 15 8 D RPKHPIKHOGLPQEVL 16 9 E RPKHPIKHQGLPQEVLN 17 10 F RPÍDHPIKHQGLPQEVLNE 18 11 G RPKHPU HOGLPQEVLNEN 19 12 H RPICHPIKHQGLPQEVLNENL 20 13 I RPKHPIKHQGLPQEVLNENLL 21 14 J RPKHPKHQGLPQEVLNENLLR 22 15 K RPKHPKHQGLPQEVLNENLLRF 23 16 L RPKHPKHQGLPQEVLNENLLRFF 24 17 M RPKHPKHOGIJ^EVLNENLLRFFV 25 18 N RPIOfflKHí^IJPQEVLNENLLRFFVA 26 19 Diabetes Juvenil (Tipo I, IDDM) en Ratones Diabéticos No Obesos (NOD) : los ratones NOD son un modelo comúnmente usado para la investigación de la enfermedad autoinmune y la Diabetes Juvenil humana. Ratones NOD hembras de seis semanas recibieron una o dos inyecciones por semana de 100 µg de péptidos derivados de la caseína natural, para un total de 5 u 11 tratamientos. Los ratones control no recibieron tratamiento. La severidad de la enfermedad se determinó de acuerdo a la glucosuria, la cual se midió usando palillos de prueba Combi [Gross, D.J. et al. (1994), Diabetology, 37:1195]. Los resultados se expresaron como el porcentaje de ratones libres de glucosuria en cada muestra durante un período de 230 días. Estimulación de la proliferación de células destructuras naturales (NK) : A partir de Células del Talólo Sanguíneo Periférico Humano (PBSC) : Los sujetos tratados de PBSC de G-CSF se separaron en un gradiente FICOLL, se lavaron dos veces con un medio RPMI-1640 y se sembraron en pozos de 1.5 ml con o sin péptidos derivado de la caseína natural o la caseína sintética, como se indica, (0-500 µg por ml) . Después de dos días de incubación, las células se probaron por actividad destructora natural midiendo la radioactividad liberada a partir de las células objetivo K562 marcadas con 35S (NEG- 709A, 185.00 MBq, 2.00 mCi EASYTAGth Methionina, L-[35S] 43.48 TBq por mmol, 1175.0 Ci por mmol, 0.488 ml, Boston USA). Se incubaron dos concentraciones de células efectoras (2.5 x 104 y 5 x 104 células por pozo) con 5 x 103 células objetivo por pozo (proporciones de células efectoras : objetivo de 50:1 y 100:1, respectivamente) en placas de cultivo de tejido de 96 pozos con fondo en U. Las células se incubaron durante 5 horas a 37 °C en 5% de C02, 95% de aire y se precipitó por 5 minutos de centrifugación a 1000 rpm. La liberación de 35S se midió en muestras de 50 µl de líquido sobrenadante. Células de Médula Ósea (EM) a partir de ratones: Se recolectó médula ósea a partir de ratones no tratados BALB/c y C57B1/6. La médula ósea se cosechó a partir de los huesos largos de los miembros frontales y traseros de los ratones por inyección de un medio usando una aguja calibre 25. Las células aspiradas se lavaron con RPMI 1640, se contaron en un hemocitómetro y se tiñeron con vital (20 µl de células en 380 µl de ácido acético-azul tripano) , después se sembraron en botellas de cultivo a 2-5 x 106 células por ml en RPMI- 1640 que contiene 10% de Suero de Ternera Fetal, antibióticos y glutamina con o sin 100 µg por ml de péptidos derivados de la caseína natural. Los cultivos celulares se incubaron en 5% de C02, 95% de aire durante 12-15 días a 37°C, se cosecharon durante 10 minutos de centrifugación a 1500 rpm, se contaron y sembraron en pozos de fondo en U con 51Cr (Cromo-51, 740 MBq, 2.00 mCi, de actividad) o 3S (NEG-709A, 185.00 MBq, 2.00 mCi EASYTAGth Metionina, L-[35S] 43.48 TBq por mmol, 1175.0 Ci por mmol, 0.488 ml, Boston USA) células de linfoma de murino marcadas (YAC) en una proporción de células efectoras ¡objetivo de 25:1 o 50:1. La actividad NK se expresa como el porcentaje de radioactividad en los sobrenadantes 5 libres de células. Proliferación de células humanas en cultivo: Se recolectó sangre periférica (PB) de pacientes saludables o afectados. Los pacientes afectados no recibieron otro tratamiento que la suplementación de G-CSF antes de la 10 plasmaféresis. Se recolectaron células de médula ósea (BM) de pacientes saludables que consintieron o a pacientes afectados en remisión después de quimioterapia por inyección media dentro del espacio medular y aspiración. Se recolectó sangre del cordón umbilical durante nacimientos normales. Las 15 células humanas de los diversos orígenes se separaron en un gradiente FICOLL, se lavaron dos veces con un medio RPMI- 1640, y se sembraron dentro de pozos de cultivo de tejido de fondo plano de 0.2 ml a las concentraciones indicadas con o sin péptidos derivados de caseína natural o con o sin 20 péptidos derivados de caseína sintética, como se indicó. Todos los tratamientos, incluyendo los controles, se repitieron por triplicado. Se midió la proliferación celular por la adición de timidina radioactiva [timidina (metil- [3H) ] de Actividad específica de 6.7 Ci por ml 37 MBq por ml, ICN 25 Corp.] después de la incubación por el número indicado de días. Las células se incubaron después 16-20 horas con la marca, se cosecharon y se lavaron dos veces con el medio. La radioactividad incorporada se midió en un contador de centelleo ß. Proliferación de líneas de células de cáncer de colon y leucemia K562: Colon y K526 son líneas establecidas de células de cáncer cultivadas en cultivo. Las líneas de célula se cultivaron en botellas de cultivo en 5% de C02, 95% de aire a 37 °C, se cosecharon y se lavaron con un medio antes de sembrarse en pozos de cultivo de tejido a 4 x 105 células (K562) o 3 x 103 células (Colon) por pozo. Los péptidos derivados de caseína natural se agregaron a los pozos, a las concentraciones indicadas, y después de 9 días (K562) o 3 (Colon) de incubación se agregó timidina marcada como se describió anteriormente. La cosecha y medición de la captación radioactiva fue como se describió anteriormente. Detección de anticuerpos fluorescentes de NK y proliferación de Células T en Células del tallo Sanguíneo Periférico Humano (PBSC) : Las células del tallo sanguíneo periférico (PBSC) de sujetos humanos que reciben tratamiento de G-CSF se recolectó por plasmaféresis, se separó sobre un gradiente FICOLL, se lavó dos veces con un medio RPMI-1640 conteniendo 10% de Suero de Ternera Fetal y se incubó en botellas de cultivo a 37°C en 5% de C02, 95% de aire con o sin péptidos aÜii. derivados de caseína natural a las concentraciones indicadas. Después de 10, 14 ó 28 días de incubación con los péptidos derivados de caseína natural, se detectó la presencia de células T (antígeno de superficie CD3) y células NK (antígeno de superficie CD56) por inmunofluorescencia directa usando anticuerpo fluorescente anti-CD3 (clon de CD3/FITC UHCTi) , anticuerpo fluorescente anti-CD56 (clon de CD56/RPE MOC-1) (DAKO A/S, Denmark) y anticuerpos IgGl/RPE e IgGl/FITC de ratón como un control. La detección de las células etiquetadas fluorescentemente se realizó usando distribución de células activadas por fluorescencia (FACS) y microscopía fluorescente. Estimulación de hematopoyesis a partir de Células de Médula Osea (BM) en cultivo: Proliferación de megacariocitos en colonias multipotenciales (CFÜ-GEMM) a partir de células de Médula Ósea de murino: Células de médula ósea primarias (1 x 105 por ml) de ratones C3H/HeJ de 8-12 semanas de edad se cultivaron en un medio de metilcelulosa-IMDM libre de suero durante 8-9 días a 5% de C02, 95% de aire, a 37°C. El medio, apropiado para el cultivo de colonias multipotenciales (CFU-GEMM) , contuvo 1% de BSA (Sigma), 10"4 M tioglicerol (Sigma), 2.8 x 10~4 M de transferrina humana (TF, Biological industries, Israel) , 10% de EHI-CM como una fuente de IL-3 y 2 unidades por ml de eritropoyetina (rhEPO, R & D Systems, Minneapolis) .

Las colonias se contaron después de 8-9 días usando un microscopio de campo oscuro Olympus. Se tomaron con una micropipeta, se citocentrifugaron y se tiñeron con May- Grun aId-Giemsa para cuentas diferenciales. Se contaron al menos 700 células por cada preparación. Proliferación de células que forman megacariocito y eritroide a partir de médula ósea humana y células de cordón umbilical: Una muestra de médula ósea de un ser humano aparentemente saludable se procesó por separación de gradiente de densidad usando Histopaque-107 (Sigma Diagnostics) para obtener una población purificada de células mononucleares (MNC) . Las pruebas de colonia se realizaron en un medio de siembra que contiene concentraciones finales de 0.92% de metilcelulosa (polvo de 4000 centripasa, Sigma Diagnostics) , rehidratada en un medio de Iscoves modificado por Dulbecco que contiene 36 mm de bicarbonato de sodio (Gibco) , 30% de suero de bovino fetal (FBS) (Hyclone) , 0.292 mg/ml de glutamina, 100 unidades por ml de penicilina y 0.01 mg por ml de estreptomicina (Biological Industries, Beit Haemek) . Se recolectó cordón umbilical de nacimientos normales y se preparó como se mencionó anteriormente. El medio de prueba de colonias que contiene 10° MNC por ml se sembró en pozos por triplicado dentro de una placa de cultivo de tejidos de 24 pozos (Greiner) , 0.33 ml por pozo. Los cultivos se incubaron a 37°C en 5% de C02, 95% de ü.tj,.tJ^.Jü.n,.¡ aire y 55% de humedad relativa con o sin péptidos derivados a partir de la caseína natural o péptidos derivados de caseína sintética, a las concentraciones indicadas. Las placas se contaron después de 14 días por colonias que contienen más de 50 células. Se identificaron megacariocitos por inmunofluorescencia indirecta usando un anticuerpo de conejo altamente específico que reconoce glicoproteínas de plaqueta humana y una IgG anti-conejo de cabra conjugada con FITC. Los factores de crecimiento agregados incluyeron 15 ng por ml de leucomax (GM-CSF) (Sandoz Pharma), y 5% volumen a volumen de medio acondicionado (Difco Lab) (CM) inducido con fitohemaglutinina-m (CFU-GM) humana para inducir el desarrollo de colonias de granulocito-monocito (CFU-GM) . Se uso eritropoyetina (EPO) 2 unidades/ml para inducir la formación de colonias eritroides. Alternativamente, se precultivaron células de médula ósea humana a partir de donadores voluntarios que consintieron o pacientes que sufren trasplante de médula ósea autólogo en un medio que contiene 10-1000 µg por ml de péptidos derivados de caseína natural, se cultivaron en agar semisólido, y se contaron por colonias hematopoyéticas de granulocito-macrófago (GM-CFU) a 7 ó 14 días después del tratamiento. Se midió la megacariocitopoyesis en células de médula ósea normales a partir de donadores humanos saludables que consienten contando el número de megacariocitos en muestras de cultivo líquido (RPMI-1640 más 10% de suero AB humano, glutamina y antibióticos) con o sin 100 µg por ml de péptidos derivados de caseína natural, o en una prueba de 5 metil celulosa para valorar la formación de colonias. Se sembraron 2 x 10° células de médula ósea en la presencia de una combinación de factor de crecimiento estándar con o sin péptidos derivados de caseína natural. En la prueba de metil celulosa se contaron los megacariocitos con un microscopio 10 invertido los días 12-14 después de sembrar. Pruebas clínicas usando péptidos derivados de caseína natural: En una serie de pruebas, una dosis sencilla que contiene 50 mg de péptidos derivados de caseína natural se administró intramuscularmente a sujetos humanos en 3 15 depósitos, durante un período de 2 horas. Se observaron los parámetros clínicos en los intervalos indicados. En otras pruebas, pacientes en diversas etapas de tratamiento para y/o remisión de enfermedad de cáncer y metastásica recibieron péptidos derivados de la caseína natural, una vez o dos 20 veces, y se observaron por cambios en la cuenta de células de la sangre periférica. Inhibición de la Infección VIH in vitro de células de linfocito humanas: Péptidos: Los péptidos (péptidos derivados de 25 caseína natural o péptidos sintéticos (8-26 aminoácidos de rp iflllllMÉWrtÉMt i f i I i - I "- -**-°"?I.MM?t«lll* "~' '-~- l II ir ? J.« M-..-.c.^..ái? longitud, véase tabla 3, derivados de caseína) suministrados como polvo liofilizado se resuspendieron en un medio completo RPMI y se agregaron a cultivos celulares a concentraciones finales de 50 a 1000 µg por ml . Células: Se conoce que diversos tipos de células humanas recientemente aisladas (células primarias) y lineas de células son susceptibles a la infección de VIH-1 in vi tro, aunque esencialmente cualquier célula que muestra aún bajos niveles de superficie de la molécula CD pueden considerarse como un objetivo potencial para infección por VIH-1. Dos líneas de células humanas comúnmente usadas que son altamente sensibles para la infección por VIH-1 se seleccionaron, CEM y Sup-Tl. CEM es una línea de células de linfoblastoide T4- humanas derivadas inicialmente por G. E. Foley et ai. [(1965), Cáncer 18:522] la capa de leucocitos de sangre periférica de una hembra caucásica de 4 años de edad con leucemia linfoblástica aguda. Estas células se mantuvieron continuamente en suspensión en el medio, y se han usado ampliamente para análisis de infectividad, agentes antivirales y anticuerpos neutralizantes. Sup-Tl es una línea de células de linfoblastoide T- humanos aislados a partir de una infusión plural de un macho de 8 años de edad sin linfoma de células T de Hodgkin [Smith, S. D. et al . [(1984) Cáncer Research 44:5657]. Esta célula expresa altos niveles de CD4 de superficie y es útil en estudios de fusión de células, efecto citopático, e infectividad de VIH-1. Las células Sup-Tl se cultivan en suspensión en un medio enriquecido. Medio: Las células se cultivaron en un medio completo RPMI-1640 enriquecido con 10% de Suero de bovino fetal, 2 mm de glutamina y 2 mm de penicilina estreptomicina (GIBCO) . Virus: La cepa de virus VIH empleada fue VIH-1IIIB, originalmente designada HTLV-IIIB. Se usaron fluidos de cultivo concentrado de sangre periférica de diversos pacientes con SIDA o enfermedades relacionadas para establecer una infección productiva permanente en las células H-9. Este subtipo de virus B tiene alta capacidad para replicarse en lineas de células T-humanas. El título viral fue 5.38 ng por ml en la solución patrón. Péptidos marcados con FITC: FITC F-1300 (isotiocianato de fluoresceína, isómero I, Sigma (F25o-2) St. Louis, MI, USA) que tiene la excitación/emisión máxima alrededor de 494/520 nm, respectivamente, se empleó. El derivado de fluoresceína reactivo con amina es probablemente el reactivo de derivación fluorescente más común para marcar covalentemente las proteínas. Los péptidos conjugados con FITC derivados de caseína natural se prepararon por enlace covalente de FITC con los grupos amino de lisina.

PrueJa de captura de antígeno VIH-I P24 : Se empleó un equipo de prueba de captura de antígeno de VIH-1 P24 diseñado para cuantificar el antígeno de núcleo VIH-1 P24, que se relaciona proporcionalmente al grado de producción viral en células. Este equipo se adquirió a partir de Programa de vacuna de SIDA del SAIC-NCI-Frederick Cáncer Research Institute, P. 0. Box B, Frederick, M.D 21702, USA e incluyó placas de 96 pozos recubiertas con anticuerpo monoclonal para VIH-1 P24, suero de conejo anti-VIH-anticuerpo primario, anticuerpo conjugado con IgG (H+L) peroxidasa anti-conejo de cabra-anticuerpo secundario, sistema de sustrato TMB peroxidasa y estándar VIH-1 P24 lisado. La prueba de captura de antígeno de VIH-1 P24 se analizó por el lector Organon-Technica ELISA a 450 nm con referencia a 650 nm. Captura de antígeno VIH-1 P24 por ELISA: Se midió la infección de VIH-1 P24 con un inmunoensayo enzimático indirecto que detecta antígenos de núcleo de VIH-1 P24 en un medio de cultivo de tejido. El sobrenadante del cultivo de tejido se hizo reaccionar con antígeno anti-VIH-1 P24 de conejo primario y se visualizó por IgG anticonejo de cabra conjugada con peroxidasa. La reacción se terminó agregando H2S0 4N, en donde la intensidad del color desarrollado es proporcional a la cantidad de antígeno VIH-1 presente en el sobrenadante del cultivo de tejidos. ?.?á.A Ay?.toA** . . -i"^«-- ....**».—«... ..... . ?j?*M?i?^^^-»^™.-*-J'^ t£^UB^&?B-?'timtito£? ?*i?,l anticuerpo primario, anticuerpo conjugado con IgG (H+L) peroxidasa anti-conejo de cabra-anticuerpo secundario, sistema de sustrato TMB peroxidasa y estándar VIH-1 P24 lisado. La prueba de captura de antígeno de VIH-1 P24 se analizó por el lector Organon-Technica ELISA a 450 nm con referencia a 650 nm. Captura de antígeno VIH-1 P24 por ELISA: Se midió la infección de VIH-1 P24 con un inmunoensayo enzimático indirecto que detecta antígenos de núcleo de VIH-1 P24 en un medio de cultivo de tejido. El sobrenadante del cultivo de tejido se hizo reaccionar con antígeno anti-VIH-1 P24 de conejo primario y se visualizó por IgG anticonejo de cabra conjugada con peroxidasa. La reacción se terminó agregando H2S04 4N, en donde la intensidad del color desarrollado es proporcional a la cantidad de antígeno VIH-1 presente en el sobrenadante del cultivo de tejidos. Laboratorio de nivel de peligro biológico (BL-3) : Toda la producción, aislamiento e infección de virus, cultivo de tejidos de células infectadas con VIH-1, cosechan el sobrenadante que contiene el antígeno P24 y la captura del antígeno P24 ELISA, se realizó en la instalación BL-3 de la Universidad hebrea, Escuela Médica Hadassah y estuvieron de acuerdo con las prácticas de bioseguridad indicadas por la NIH y CDC (USA) . Citometría de flujo: Se usó un distribuidor de células FACSort (Becton & Dickinson, San, José, CA. USA) para (i) determinar el porcentaje de lotes de células CEM y Sup-Tl CD4 positivas antes de la infección con VIH-1 para asegurar el mismo grado de infección en cada experimento; y (ii) detectar células T que albergan péptidos conjugados con FITC derivados de caseína natural en su citoplasma y núcleos. Incubador de CO?: Para la producción de cultivo viral, las células con VIH-1, células y virus pretratados con péptidos derivados de caseína natural y células que se incubaron adicionalmente con VIH-1, se mantuvieron en un incubador de C02 de humidificación durante la duración del experimento. Infección VIH de células CD4+ cultivadas humanas: Las células (CEM, Sup-Tl) se preincubaron con diversas concentraciones crecientes de péptidos derivados de caseína natural (50-1000 µg por mol) o péptidos sintéticos derivados de caseína (10- 500 µg o ml) durante 3, 24 (para péptidos sintéticos y naturales) y 48 (solamente para péptidos naturales) horas y VIH-1IIIB (45 pg por ml de concentración final) se agregaron cada pozo posteriormente. VIH-1IIIB se preincubó con los péptidos durante 3 horas y después se agregó a las células (5000 células/pozo) en placas de cultivo de tejido. Los controles fueron IS (Infectados, células cultivadas con VIH-1 y sin péptidos), UIF (No infectadas, células cultivadas sin VIH-1 y sin péptidos) y UIF + Ch (No infectados + péptidos derivados de caseína natural, células cultivadas en la presencia de péptidos derivados de caseína natural {50-1000 µg por ml}) para probar el efecto de los péptidos derivados de caseína natural y los péptidos sintéticos derivados de caseína sobre la viabilidad y crecimiento de la célula. Las células se contaron por proporción de viabilidad y proliferación el día 7, 10 y día 14 después de la infección (el dia de cosecha del sobrenadante del cultivo de antígeno P24) . Se cosecharon las células y los sobrenadantes del cultivo de tejido (medio) y se alisaron inmediatamente en 1/10 volumen de 10% de Tritón X-100. Estas muestras se incubaron adicionalmente a 37°C durante 1 hora y se mantuvieron a -80 °C hasta que se probaron por el antígeno p24. Microscopía confocal: un sistema de barrido láser confocal Zeiss LSM 410 unido a un microscopio invertido TW Zeiss Axiovert 135M, que emplea la técnica de microscopía confocal de barrido láser, se usó para detectar la penetración de los péptidos conjugados con FITC dentro de las células. Las células T se incubaron con péptidos conjugados con FITC derivados de caseína natural en un incubador a 5% de C0, en 95% de aire, 37°C, después de lo cual las células se lavaron 3 veces con solución salina regulada con fosfato (PBS) para eliminar los péptidos FITC no enlazados. Las células se fijaron con 3.8% de formalina durante 10 minutos, ?¿O?U?iJ&?¿?í¡jffl&**»?«»^*m~~~r- *»* .y* ?*hy.? . se lavaron dos veces con PBS y resuspendieron en 50-100 µl de PBS antes de ver las células bajo el microscopio. Se almacenaron imágenes seleccionadas de células de diferentes puntos de tiempo de incubación (15 minutos, 30 minutos, 1 hora, 1.5 horas y 3 horas) que muestran diversas cantidades de péptidos FITC derivados de caseína natural en sus citoplasmas y núcleos 3.5" Zip derive (230 MB) y procesados para fotos usando software Photoshop. Prueba de incorporación [3H] -timidina : Para probar el efecto de los péptidos derivados de la caseína natural uso de la proliferación de células T, se agregaron diversas concentraciones de péptidos derivados de caseína natural (1 µg/ml patrón en RPMI) a cultivos de células Sup-Tl en placas de 96 micropozos de fondo plano (5000 células/pozo) , como se describe para la infección por VIH-1 en las células Sup-Tl. Las células se contaron y su viabilidad se determinó por exclusión de tinte azul de trypan. Se pulsaron con [3H]- timidina, en cada punto de tiempo (3, 7, 10, y 14 días) durante 18 horas (durante la noche) se cosecharon en filtro de fibra de vidrio para lectura de radioactividad (la incorporación de [3H] -timidina dentro de ADN celular es proporcionar el grado de proliferación celular) . Toxicidad de los péptidos derivados de caseína natural en ratones y caballos normales, mieloseparados y recipientes de trasplante: Se administraron inyecciones intramusculares o intravenosas de hasta 5, 000 mg de péptidos derivados de caseína natural por kg de animal en una dosis sencilla, o en tres dosis para normal. Se empleó una diversidad de cepas, incluyendo ratones BALB/c, C3H/HeJ y Diabéticos No Obesos (NOD) . Los ratones se observaron de 10 meses antes del sacrificio y examen pos-mortem (prueba de toxicidad) o se observaron durante 200 días (proporción de supervivencia) . Los cobayos recibieron una inyección intramuscular sencilla de 20 mg de péptidos derivados de cafeína natural por animal. Quince días después se sacrificaron y se examinaron por patología. Reconstitución de glóbulos blancos y plaguetas en ratones recipientes de trasplante de médula ósea: los ratones BALB/c se irradiaron letalmente en una fuente a distancia de 70 cm, de la piel, dosificación de 50 cGy por minuto, para un total de 600 cGy. Los ratones irradiados se reconstituyeron con médula ósea singénica como se describió anteriormente y se inyectó intravenosamente 24 horas después con 1 mg por animal de péptidos derivados de caseina natural, péptidos sintéticos derivados de caseína (13-26 aminoácidos, véase Tabla 3 anterior) , o albúmina de suero humano (controles) , después de un protocolo doble ciego. La reconstitución de leucocito se determinó a la cuenta celular en sangre periférica recolectado en los intervalos indicados de 6 a 12 días después del tratamiento. La reconstitución de plaquetas se determinó por cuenta celular en sangre recolectada a partir del plexo retro orbital, en capilares heparinizados, a los intervalos indicados desde el día 6 hasta el 15 después del tratamiento. En una serie adicional de experimentos, los ratones CBA se irradiaron letalmente (900 cGy) , se reconstituyeron y trataron con péptidos derivados de caseína natural o albúmina de suero humana como describió anteriormente. La reconstitución de plaquetas se probó como mencionó anteriormente. Reconstitución de ratones recipientes de trasplante de médula ósea : se irradiaron letalmente ratones C57/Black/6 a una distancia de la fuente a la piel de 70 cm, dosificación de 50 cGy por minuto, para un total de 600 cGy. Los ratones irradiados se reconstituyeron con médula ósea singénica los ratones que se trataron un día antes de la aspiración de la médula ósea con 1 mg por animal de péptidos derivados de caseina natural o no tratados, siguiendo un protocolo doble ciego. En un experimento la supervivencia de los ratones se observó durante 18 días. En otro experimento los ratones se sacrificaron después de 10 días y se observó la colonización del vaso. Resultados Experimentales Péptidos derivados de caseína natural : Originándose de la observación de que la leche cuajada falla ocasionalmente el soportar el crecimiento bacteriano, se aisló un fragmento de caseína que posee propiedades bactericidas a partir de las proteinas de la leche (Patente Norteamericana No. 3,764,670 para Katzirkatchalsky, et ai). Los péptidos sin refinar derivados de la proteólisis de la caseína natural se prepararon por precipitación acida de la fracción soluble del digerido proteolitico de caseína, diálisis y liofilización. Cuando se probó por actividad biológica después de almacenamiento prolongado, se notó que esta preparación sin refinar, cuando se liofiliza y almacena a 4 °C, permanece activa (in vi tro e in vivo) durante al menos 12 meses. Para identificar los péptidos activos contenidos en los péptidos derivados de la caseína natural la preparación sin refinar liofilizada se fraccionó usando cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC) , como se describió anteriormente. Todas las muestras liofilizadas analizadas demostraron perfiles de tiempo de retención similares, con los contenidos como se describió anteriormente. Así, un componente principal de los péptidos sin refinar derivados de la preparación de caseína natural es el fragmento Término N de la caseína aSl. Los péptidos derivados de la caseína natural no son tóxicos en roedores y humanos: La investigación extensa de los efectos a corto y largo plazo de altas dosis de péptidos *?t?ltát?k*jli>* IÉjl»lláÍtluMjk» yy*?,. ¿. -....¿U* iy£M- derivados de caseína natural en ratones, cobayos y voluntarios humanos, confirmó la ausencia de toxicidad, teratogenicidad o efectos secundarios adversos de la preparación. En una serie de pruebas, dosis sencillas que representan 1,750 y 12,500 veces la dosis efectiva estimada de péptidos derivados de caseína natural se administraron intramuscularmente en ratones letalmente irradiados que reciben trasplantes de médula ósea singénico. El examen de patología pos-mortem estándar de los ratones a los 8 meses después del tratamiento no reveló efectos tóxicos en órganos internos u otras anormalidades. Pruebas de toxicidad similares en cobayos revelaron anormalidades dos semanas después de dosis intramusculares sencillas de 20 mg de péptidos derivados de caseína natural. En otras series de experimentos, altas dosis de péptidos derivados de caseína natural administradas a ratones saludables no tuvieron efecto en diversos parámetros hematológicos medidos dos semanas después, incluyendo glóbulos blancos (WBC), glóbulos rojos (RBC), hemoglobina (HGB), electrólitos, glucosa y otros. Una tercera serie de experimentos probados repitieron altas dosis de 100 mg por kg de peso corporal en ratones y ratas durante dos semanas, no revelaron efectos alérgicos, cutáneos retrasados o respuestas anafilácticas y sin efectos patológicos durante el examen pos-mortem. Cuando los péptidos derivados de caseína natural se probaron por su efecto sobre la supervivencia a largo plazo de ratones BALB/c y C3H/HeJ, reconstituidos de médula ósea, irradiados, la supervivencia de los ratones tratados (18 de 27 BALB/c y C3H/HeJ; 66%) excedió evidentemente las proporciones de supervivencia de los controles tratados con albúmina (4 de 26 BALB/c y C3H/HeJ; 15%) . Las pruebas de teratogenicidad estándar [para detalles véase, por ejemplo, Drug Safety in Pregnancy, Folb and Dakes, p. 336, Elsevier; Amsterdam, NewYork, Oxford (1990) ] en ratones tratados con péptidos derivados de caseína natural no reveló efecto de los péptidos sobre ningún parámetro de desarrollo. Semejante a su carencia de toxicidad o efectos secundarios cuando se probó en roedores, los péptidos derivados de caseína natural forman seguros cuando se administraron a humanos también. La comparación de muestras de sangre y orina de siete voluntarios humanos saludables antes, durante y 7 días después de la inyección intramuscular de péptidos derivados de caseína natural no revelaron cambios en ninguno de los parámetros clínicos. No se observaron otros efectos negativos. Así, la alta dosis y el tratamiento prolongado de los roedores con péptidos derivados de caseína natural no reveló efectos aparentes, patológicos, hipersensibilidad, teratogénicos, serológicos o cualquier otro efecto negativo. Además, los péptidos derivados de la administración de caseína natural en ratones irradiados, el riesgo de complicaciones a corto y largo plazo, confirieron una ventaja de supervivencia significativa durante 200-300 días. Estos, y la ausencia de cualquier efecto indeseable en voluntarios humanos saludables que reciben péptidos derivados de la caseína natural por medio de inyecciones demuestra evidentemente la seguridad de los péptidos en la administración parenteral Reconstitución de ratones recipientes de trasplante de médula ósea : Cuando ratones C57/Black/6 se irradiaron letalmente y reconstituyeron con médula ósea singénica de ratones que se trataron un día antes de la aspiración de médula ósea con 1 mg por animal de péptido derivados de la caseína natural o no tratados así, la supervivencia de los ratones irradiados que recibieron médula ósea de ratones tratados excedió mucho la de los ratones irradiados que recibieron médula ósea de ratones no tratados (la supervivencia de los ratones irradiados que recibieron médula ósea de los ratones tratados fue 15 de 18, 10 días después de la irradiación; mientras que la supervivencia de los ratones irradiados que recibieron médula ósea de ratones no tratados fue 4 de 17, 10 días después de la irradiación) . Los vasos derivaron de ratones irradiados que recibieron médula ósea de ratones tratados incluyeron aproximadamente de dos a tres veces tantas colonias por vaso, en comparación de los vasos i**~*nuíauui*^t»... de los ratones irradiados que recibieron médula ósea de los ratones no tratados (1-5 colonias en comparación a 0-3 colonias) . Los péptidos derivados de la caseína natural estimulan la proliferación de linfocitos: Las células T citotóxicas y destructoras naturales (NK) son cruciales a la habilidad del sistema inmune para proteger en contra de la invención por patógenos infecciosos y células de cáncer, por citotoxicidad activa y la secreción de linfocinas inmunoreguladoras . El compromiso inmune, tal como el SIDA o después de la quimioterapia, resulta en la actividad de células T o NK debilitada, anormal. Cuando las células de médula ósea de murino normales de ratones BALB/c y C57B1/6, se cultivaron en la presencia de 100 µg por ml de péptidos derivados de la caseína natural, un aumento mayor de dos veces en la lisis de células objetivo se observó consistentemente (Figura 1) . Experimentos similares usando células del tallo sanguíneo periférico humano de donadores tratados con factor que estimula colonias de granulocitos demostró una estimulación dependiente de la concentración aún más significativa de la lisis de las células objetivo con tan poco como 10 µg por ml de péptidos derivados de la caseína natural (Figura 2) . En otra serie de experimentos con las PBSC recolectadas de donadores humanos saludables, los péptidos derivados de la caseína natural estimularon un aumento en la proporción de células NK y T en desarrollo después de 10 (Figura 3a) y 14 (Figura 3b) días en cultivo, alcanzando tres veces y más a los 28 días. Un efecto inmunoestimulador de los péptidos derivados de la caseína natural sobre las células PBSC fue más significativo en los donadores con un nivel inicialmente bajo de células T y NK (Figura 3a-b) . Así, los péptidos derivados de la caseína natural estimulan la proliferación de las células linfocito T y destructoras naturales a partir de progenitores de glóbulos rojos de murino y humano . Los péptidos derivados de caseína sintética estimulan la proliferación de linfocitos humanos in vitro: Cuando los péptidos derivados de caseína sintética que representan los primeros 1 a 16 residuos de la caseina aSl se incubaron con células PBSC humanas de pacientes saludable y con cáncer (véase posteriormente) , un aumento significativo en la actividad de células NK se observó. La lisis de las células objetivo fue mayor (de 3 a más de 5 veces la des los controles) en cultivos de Hodgkin de pacientes con Cáncer de Mama y Linfoma de no PBSC después de dos días de incubación con tampoco como 10 µg por ml de péptidos que contienen los primeros 10 o más residuos de la caseína aSl (Figura 4) . Bajo condiciones idénticas, ninguno de los péptidos probados tubo un efecto significativo sobre la actividad NK en cultivos PBSC de donadores humanos saludables. Así, concentraciones aún bajas de péptidos que contienen al menos los primeros 10 residuos de la secuencia Término N de la caseína aSl son capaces de estimular selectivamente in vi tro la proliferación de linfocitos en las células de pacientes con cáncer. Estimulación de la hematopoyesis en progenitores de células sanguíneas humanas: Los progenitores de las células sanguíneas se diferencian en una diversidad de células sanguíneas: macrófagos, monocitos, granulocitos, linfocitos, eritrocitos y megacariocitos. Las células progenitoras son abundantes en la médula ósea, pero se encuentra también en la sangre periférica después del tratamiento con Factor que Estimula Colonias de Granulocitos (células PBSC) , en Cordón Umbilical. Cuando se agregaron concentraciones crecientes (50-600 µg o ml) de péptidos derivados de caseína natural a cultivos de Médula Osea humana, PBSC y Cordón Umbilical, un aumento en proliferación celular, como se mide por la incorporación de [3H] -timidina se notó (Figura 5a-6c) . La proliferación PBSC humana se efectuó mayormente por 300 µg por ml (Figura 5a) después de 15 días en cultivo. Se notó un efecto aún mayor para células de Cordón Umbilical en cultivo (3 a 4 veces de aumento de incorporación de [3H] -timidina) después de 14 días de incubación (pero no después de 7 días) con péptidos derivados de la caseína natural (600 µg por ml, Figura 5b) . Las células de médula ósea humanas cultivadas de tres de cuatro donadores también reaccionaron fuertemente (3 a 5 veces de aumento en incorporación) con los péptidos derivados de la caseína natural (300 µg por ml) después de 21 días de incubación (Figura 5c) . Así, los péptidos 5 derivados de la caseína natural estimulan la proliferación de los progenitores de células sanguíneas humanas de médula ósea así como otras fuentes. Interesantemente, la incubación de las líneas de células de Colon (cáncer de Colon) y K562 (Leucemia Mieloide Crónica) humanas, con altas 10 concentraciones (hasta 500 µg por ml) de péptidos derivados de la caseína natural bajo condiciones similares no tuvo efecto en la incorporación de [°H] -timidina. Así, los péptidos derivados de caseína natural estimulan la proliferación de los progenitores de células sanguíneas pero 15 no el crecimiento de células cancerosas. Estimulación de megacaariocitopoyesis por péptidos derivados de caseína : Los péptidos derivados de la caseína natural estimulan la proliferación de progenitores de megacariocitos 20 en células de médula ósea de murino cultivadas : Los megacariocitos multinucleados se desarrollane n la médula ósea a partir de células del tallo primitivo, maduran en células gigantes y dan origen a miles de trombocitos por megacariocitos. Los trombocitos son cruciales para la 25 formación de coágulo y la trombocitopenia es una preocupación MJh^*^^^-» -» ** - -^-^^Itfljrfffi principal en las condiciones mieloablaticas (después de la quimioterapia o radioterapia) . Los cultivos de células de médula ósea primarias pueden inducirse para formar colonias de CFU-GM (Granulocito y megacariocito) , dando origen a megacariocitos, y colonias de CFU-GEMM (Granulocito, Eritroide, Macrófago y Megacariocito) , que contienen tipos de células sanguíneas adicionales. Las cuentas de colonias reflejan la expansión de los progenitores específicos, los números de células reflejan las proporciones de proliferación y cuentas de células diferenciales reflejan que linajes de células específicos se han desarrollado [Patenkin, D., et ai. (1990), Mol. Cel. Bio. 10, 6046-50] . En células de médulas ósea de murino cultivada incubadas con eritropoietins y IL-3, la adición de 25 µg por ml de péptidos derivado de la caseína natural durante 8 días aumentó el número de CFU-GEMM dos y media veces sobre los controles, estimulando un aumento de tres veces en los números de células relativos por colonia en la CFU-GEMM. En un serie similar de experimentos, la adición de péptidos derivados de la caseína natural a la células de médula ósea incubadas con eritropoyetina el medio condicionado (véase Materiales y Métodos Experimentales) estimuló un aumento dependiente de la concentración de megacariocitos tempranos y tardíos (15% de megacariocitos sin péptidos, has 50% con 500 µg por ml de péptidos derivados de la caseina natural) . *--*- <**-*&.** *&*&*& [ o i i «a Asi, el tratamiento de 8 días con péptidos derivados de caseína natural estimular un aumento significativo en la formación del megacariocitos y el desarrollo en cultivos de médula ósea del murino primario. Péptidos sintéticos derivados de la caseína estimulan la proliferación de progenitores de megacariocitos en células de médula ósea de murino cultivado; Similar a lo anterior y bajo condiciones experimentales similares, los péptido derivados de caseína sintética que representa los primeros 10 y 11 aminoácidos de la caseina aSl tuvieron un fuerte efecto estimulador (mayor que 10 veces) sobre la proliferación CFU-GEMM de células de médula ósea de murino después de 8 días de incubación días. Se observó una estimulación algo más moderada, aún apreciable con péptidos derivados de caseína sintética que representan los primeros 12 a 26 aminoácidos de aSl. Los péptidos derivados de la caseína ?aturafi. estimulan la megacariocitopoyesis en células de Médula ósea* humanas cultivadas: Cuando se agregó 100 µg por mi de péptidos derivados de la caseína natural bajo condiciones similares a cultivos de células de médula ósea humana de donadores saludables, se aumentó la formación de colonias CFU-GM con o sin factores estimulantes adicionales (GM-CSF, CM) . Los péptidos derivados de la caseína natural también estimularon colonias que forman células eritroides en la presencia de eritropoyetina. El tratamiento de las células de médula ósea humana con trombopoyetina (TPO) estimula al formación de colonias de megacariocitos (MK) la adición de 300 µg por ml de péptidos derivados de la caseína natural para las células tratadas con TP estimula un aumento de más dos veces (16 colonias por 2 x 105 células sin péptidos, 35 colonias por 2 x 105 con péptidos derivados de caseína natural) en la proliferación de colonias MK. En la presencia de factores hematopoyéticos adicionales, tales como eritropoyetina, IL-3 humana, hSCF y suero AB, la incubación de 14 días con péptidos derivados de la caseína natural estimularon un aumento de casi tres veces en las colonias CFU-GEMM a partir de células de médula ósea humana (158 colonias con 500 µg por ml de péptidos derivados de caseína natural como 68 colonias con los factores solos) , pero tuvieron un efecto más pequeño (una y media veces) sobre la formación CPU-GEMM de cordón umbilical cultivado. Las cuentas de números de células relativas en la médula ósea cultivada y las colonias de cordón umbilical reflejan la proliferación de las células de megacariocitos en respuesta a la adición de 25 µg por ml de péptidos derivados de la caseína natural (véase Tabla mostrada en la Figura 6) . Así, la incubación de la médula ósea primero humana cultivada y las células de cordón umbilical con péptidos derivados de la caseína natural estimula el desarrollo y proliferación de las colonias de células de megacariocitos y eritroides comprometidas . Los péptidos derivados de la caseína natural estimulan la hematopoyesis in vivo después de la irradiación y el trasplante de médula ósea : La terapia mieloablativa puede conducir a una reducción en trombocitos y glóbulos blancos que amenaza la vida, que puede persistir a pesar de la administración de células sanguíneas y factores de crecimiento. Lo siguiente demuestra el efecto de los péptidos derivados de la caseína natural después de la irradiación y el transplante de médula ósea. Los péptidos de la caseína natural mejoran la reconstitución de glóbulos blancos y plaguetas después del trasplante de médula ósea singénico en ratones: Cuando ratones (600 cGy) , mínimamente reconstituidos de médula ósea letalmente irradiados BAtB/c (n = 60) recibieron 1 mg por ratón de péptidos derivados de la caseína natural por medio de inyección intravenosa junto con las células de médula ósea, se notaron aumentos significativos en las cuentas de células sanguíneas blancas periféricas durante un periodo de 7 a 14 días, en comparación a los controles que reciben albúmina de suero humana (Figura 7) . Las cuentas de plaquetas en la sangre periférica de los ratones trasplantados con médula ósea irradiados tratados y control se abatieron igualmente hasta 8 días después del tratamiento. Sin embargo, al noveno día se notó una clara ventaja para los ratones tratados con los péptidos derivados de la caseína natural, demostrando un aumento de dos veces sobre los controles tratados con albúmina de suero humana el día 13 (Figura 8) . Así, los péptidos derivados de la caseína natural mejoran la reconstitución de plaquetas y glóbulos blancos después del trasplante con números limitados de células de médula ósea. Se espera que este efecto se aumentará adicionalmente en la reconstitución con números óptimos, más que limitantes de células de médula ósea. Los péptidos sintéticos derivados de la cas ína mejoran la reconstitución de glóbulos blancos después del trasplante de médula ósea singénico en ratones: Cuando ratones (600 cGy) mínimamente reconstruidos de médula ósea letalmente irradiados BALB/c (n = 5 por péptido sintético, n = 10 en el grupo control) recibieron 1 mg por ratón de péptidos sintético (13-26 aminoácidos de longitud, véase Tabla 3) derivados de la caseína por medio de una inyección intraperitoneal junto con las células de médula ósea, se notaron aumentos significativos en las cuentas de células sanguíneas blancas periféricas durante un periodo de 10 a 14 días con los péptidos que tiene 13 (día 10: 17.2 x 10° células por di; día 12: 65.4 x 106 células por di) y 17 (dia 10: 27.4 células x 106 por di; día 12: 52.0 x 106 células por di) aminoácidos (véase Tabla 3) , en comparación a los *í*?.?..???¿l?*f~.t JriÉ¡B¡«. ^L^v~.....JLfa_.....A,a,J.,a^..*^^ AA controles que reciben albúmina de suero humano (día 10: 16.7 x 10fo células por di; día 12: 46.4 x 106 células por di). Así, los péptidos sintéticos derivados de la caseína mejoran la reconstitución de glóbulos blancos después del trasplante con números limitantes de células médula ósea. Los péptidos derivados de la caseína natural inhiben la infección in vitro de líneas de células T-limfocíticas por virus de VIH-1 : Para investigar el mecanismo de los efectos inmunoestimuladores y antivirales de los péptidos derivados de la caseína natural, se trataron células T humanas cultivadas CEM y Sup-Tl susceptibles tratadas con péptidos derivados de la caseína natural antes de la infección in vitro con virus de VIH-1. La microscopía fluorescente reveló que los péptidos conjugados con FITC derivados de la caseína natural (100 µg por ml) penetraron las células Sup-Tl cuando se incubaron con eso como describió anteriormente (Figura 9a-f) . Una pequeña cantidad de marca se observó en el citoplasma de las células después de 15 minutos (Figura 9a-b) . A los 30 minutos (Figura 9c-d) se observó más marca en el citoplasma, con captación nuclear limitada. A partir de 1 hora de incubación en adelante (Figura 9e-f) , se observaron en el citoplasma péptidos marcados FITC derivados de la caseína natural, pero principalmente estaban concentrados en el núcleo de la célula. El análisis de la Sup-Tl por citometría de flujo confirmó la captación t^É^üsi^^tt^^ &^^Mi^ Lj aumentada de los péptidos marcados derivados, derivados de la caseina natural a partir de 5 minutos después de la incubación. Los péptidos derivados de la caseína natural mejoran la proliferación de linfocitos humanos : la presencia de los péptidos derivados de la caseína natural en el medio de cultivo resultaron en cuentas de células Sup-Tl aumentadas durante un periodo de 14 días. Los aumentos mayores en el número de células a los 7 días se observaron para 50 µg por ml de péptidos derivados de la caseína natural (42%) , para 1000 µg a los 10 días (30%) y para 600 µg (32%) a los 14 días de incubación. La medición de la incorporación de [°H]- timidina por las células cultivadas, provisto un índice de proliferación, reflejó el aumento en el número de células, con el efecto más significativo notado para 100 µg por ml de péptidos derivados de la caseína natural el día 10 (Figura 10) . Los índices de proliferación reducidos a los 14 días reflejan probablemente el sobrecrecimiento celular y el agotamiento de nutrientes. Los péptidos sintéticos derivados de la caseína mejoran la proliferación de linfocitos humanos: La presencia de péptidos sintéticos derivados de la caseína natural (todos los péptidos listados en la Tabla 3) en el medio de cultivo resultó en cuentas de células Sup-Tl aumentadas durante un periodo de 10 días. El aumento fue similar para todos los péptidos sintéticos. El mayor aumento en el número de células en las células infectadas se observó para 250 µg por ml de péptidos (8 aminoácidos -80%) . A 500 µg por ml de péptidos (8 aminoácidos -33%) . Los péptidos derivados de la caseína natural inhiben la infección por VTH-1 en células de linfocitos humanos : Las células de linfocitos CEM susceptibles pretratdas con péptidos derivados de la caseína natural (50-1000 µg por ml) 3, 24 ó 48 horas, antes de la incubación con VIH-1 presentaron proliferación celular aumentada y niveles reducidos de infección viral en comparación a los controles no tratados. Las cuentas celulares y la prueba de antígeno de VIH -1 P24 a los 15 días después de la infección reveló 100% de inhibición de infección viral después de 3 horas de incubación con 600-1000 µg por ml de péptidos derivados de la caseína natural y 98% y 99% de inhibición después de 24 horas de incubación con 50 y 600 µg por ml de péptidos respectivamente. Los tiempos de incubación más largo no fueron más efectivos (Figura 11) . Aunque concentraciones crecientes de los péptidos derivados de la caseína natural mejoraron la proliferación celular a 3 y 24 horas después de la infección, la infección viral se inhibió más significativamente en éstos cultivos de crecimiento más rápidos. Una mejoría aún más dramática de la proliferación celular e inhibición de la infección de VIH-1 se observó en ftL^g^jg ^fe las células Sup-Tl pretratadas con los péptidos derivados de la caseína natural antes de VIH-1 (inhibición promedio de la infección viral de 96.7%, 88.7% y 95.7% durante 3 horas, 24 horas y 48 horas de pretratamiento, respectivamente) . Así, los péptidos derivados de la caseína natural penetran las células de linfocito cultivadas humanas y sus núcleos, mejoran el crecimiento a las células, y reduce significativamente la susceptibilidad de las células CD4+ a la infección por VIH-1. Como tales, los péptidos derivados de la caseína natural se espera que sean útiles para prevenir la infección por VIH y para el tratamiento pos-infección de pacientes infectados con VIH y SIDA. Los péptidos derivados de la caseína natural previenen el desarrollo de glucosuria en ratones Diabético No oJesos (NOD) : Los ratones Diabéticos No obesos no obsesos (NOD) desarrollan espontáneamente diabetes Juvenil (Tipo I, IDDM) , una condición autoinmune que causa la inflamación de las células ß pancreáticas y termina en enfermedad y muerte.

Los ratones NOD hembras son extremadamente susceptibles, demostrando la evidencia de la invasión macrófagos de la matriz intersticial de la isleta pancreática tan pronto como las 5 semanas de edad. La inyección de una vez o dos veces por semana de 100 µg de péptidos derivados de la caseína natural para 5 semanas (6 u 11 inyecciones en total) fueron completamente efectivas para prevenir la glucosuria asociada con el surgimiento y curso de la enfermedad. A los 200 días 100% de los ratones control no tratados (n = 5) se habían vuelto diabéticos, y murieron subsecuentemente, mientras que los ratones tratados (n = 5) permanecieron 100% de euglicémicos, sobreviviendo todos aún a los 230 días (Figura 12) . Así, los péptidos derivados de la caseína natural protegen efectivamente los ratones genéticamente susceptibles en contra del surgiemiento de esta condición inflamatoria autoinmune. Pruebas clínicas con péptidos derivados de la caseína natural : Los pacientes recibieron inyecciones intramusculares de 50 µg de péptidos derivados de la caseína natural, en un o tres depósitos, como se indica. Los péptidos derivados de la caseína natural estimulan la hematopoyesis en paciente con cáncer: Los perfiles de hematología de seis pacientes con cáncer que habían recibido o estaban recibiendo quimioterapia se examinaron antes y después de la administración de los péptidos derivados de la caseína natural, como se indica. Se puso atención especial a los cambios en los valores de plaquetas (PLT) , Glóbulos blancos (WBC) , Eritrocitos (RBC) y Hemoglobina (HGB) representando trombocitopoyesis, leucocitopoyesis, y eritrocitopoyesis, respectivamente. G. T. , (Paciente Hembra) : Paciente que tenía cáncer de ovario, sufrió una histerectomía seguido por quimioterapia. Recibió dos inyecciones intramusculares de péptidos derivadas de caseína natural a los dos y después a los dos y medio meses después de la operación. No se administró quimioterapia entre la primera y segunda administración de péptidos derivados de la caseína natural. Las pruebas sanguíneas después de 6 días después de la primera inyección, 7 y 13 días después de la segunda inyección reflejan un aumento considerable en los componentes de plaquetas WBC así como RBC aumentada (Figura 13) . E. C. , (Paciente Hembra) : El paciente sufrió una mastectomía radical por lobular en 1983, y seis años después de metástasis gástrica. Tres días después el comienzo de la quimioterapia, recibió una intramuscular de péptidos derivados de la caseína natural por inyección, y una segunda 10 días después de la quimioterapia. Aunque las cuentas sanguíneas a partir de 10 y 16 días después de la quimioterapia indicaron una atenuación del perfil hamatológico abatido normalmente encontrado después de la quimioterapia, los efectos más significativos de los péptidos derivados de la caseina natural se notaron 3 dias después de la primera inyección, antes de la quimioterapia, (Figura 13) . E. S. r (Paciente Hembra) : La paciente estaba sufriendo de diseminación metastásica ampliamente diseminada de un carcinoma de mama descubierto primero en 1987. Dos años después, recibió una primera inyección intramuscular de péptidos derivados de caseína natural, y una segunda 23 días después. No se administró terapia adicional durante este periodo. Las pruebas sanguíneas indican una fuerte mejoría de PLT siete días después del primer tratamiento, y un aumento significativo en RBC y WBC siete días después del segundo tratamiento (Figura 13) . J. R, (Paciente Hembra) : El diagnóstico de paciente es cáncer de mama con metástasis al hueso. Recibió una inyección intramuscular de péptidos derivados de la caseína natural 8 días antes de comenzar la quimioterapia, y otra, 14 dias después. El efecto más significativo se ve claramente en el rápido regreso de los niveles de WBC después de la depresión inducida por quimioterapia (Figura 13) . D.M. , (Paciente Hembra) : Paciente que sufre de cáncer hepático con diseminación metastásica ampliamente diseminada. Recibió tres inyecciones intramusculares de péptidos derivados de la caseína natural a los 10, 8 y 6 días después de recibir quimioterapia. Se inició una segunda serie de inyecciones los días 10, 12 y 14 después del tratamiento de quimioterapia. Aunque se nota un efecto significativo en el perfil hematológico después de la primera serie de inyecciones y antes de la quimioterapia, las mejoras más dramáticas se ven en el regreso rápido de los valores pos- quimioterapia abatidos a las cuentas de células normalizadas después de la segunda serie de inyecciones de péptidos derivados de la caseína natural (Figura 13) . Así, la administración de los péptidos derivados de la caseína natural a los pacientes con cáncer resulta en perfiles hematológicos mejorados, especialmente eritropoyesis, leucocitopoyesis y trombocitopoyesis mejorada, y es capaz de moderar y acortar la duración de la depresión inducida por quimioterapia de los componentes sanguíneos. Los péptidos derivados de la caseína natural estimulan la trombocitopoyesis en recipientes de transplante con trombocitopenia resistente: La trombocitopenia prolongada resistente a la transfusión con episodios de sangrado severo, puede ser una complicación que enlaza la vida de la transfusión de médula ósea, especialmente en donde las terapias tradicionales no son efectivas. Se trataron dos pacientes con trombocitopenia resistente severa con los péptidos derivados de la caseína natural. M-l (Paciente Hembra) : Paciente de 32 años de edad que sufre de Leucemia de Mieloide Aguda en completa remisión, después de la transfusión de células del tallo autólogo. Había experimentado dos episodios de sangrado que amenazan la vida, involucrando hemorragia pulmonar y una hematoma obstructivo grande en el paladar suave. A más de 114 días después de la transfusión, las cuentas de plaquetas fueron refractarias a rhIL-3, rhIL-6, gama globulina intravenosa, y eritropoyetina recombinante. Después de un tratamiento intramuscular sencillo con 50 µg de péptidos derivados de la caseína natural, divididos en tres depósitos, su condición mejoró inmediatamente. Junto con el rápido regreso de las cuentas de plaquetas normales (Figura 14), el sangrado de su extremidad distal con esfuerzo y patequia disminuyó, fue capaz de volver a caminar, y regresó as u casa en el extranjero sin complicaciones o efectos secundarios. M-2 (Paciente Macho) : Paciente de 30 años deedad que sufre de Leucemia de Mieloide Aguda en una segunda remisión completa después de la transfusión de células del tallo autólogo, presentando cuentas de plaquetas totalmente resistentes y episodios de sangrado gastrointestinal masivos. Requería transfusiones de áreas de células empacas, habia desarrollado hipoalbuminia, y fallaban en responder a la terapia extensa con rhIL-3, rhIL-6 y gama globulina. Después de una administración intramuscular de 50 µg de péptidos derivados de la caseína natural en tres depósitos 86 días después de la transfusión, se observó la reconstitución de plaquetas rápida (Figura 15) y la descontinuación gradual del sangrado no se requirió tratamiento adicional, y el paciente está actualmente completamente asintomático con cuenta de plaquetas normales. Así, un curso de administración intramuscular de péptidos derivados de la caseína natural a 1 mg por kg de í liAiti ráftfr, j iba fajAfBiin j l?i^ ^g^a|fefcifigatffe^.^^ai^^fe¿|g¡ jg^ H|^?jfi^a^fl^jt|l^g^ peso corporal dividido en tres depósitos fue efectivo para reconstituir rápidamente las cuenteas de plaquetas y disminuir los síntomas clínicos asociados en los pacientes que sufren de trombocitopenia resistente a la transfusión con prolongada con episodios de sangrado que amenazan la vida. Los péptidos derivados de la caseína natural disminuyen los triglicéridos y el LDL-colesterol en la hiperlipidemia doméstica : M. S. (Paciente Hembra) : El paciente es una hembra de 38 años de edad con historia familiar de hiperlipidemia. Antes del tratamiento con los péptidos derivados de la caseína natural, el perfil de química sanguínea reveló colesterol (321 mg o di), triglicéridos (213 mg o di; rango normal 45-185 mg por di) elevados y colesterol LDL elevado (236.4 mg por di; rango normal 75-174 mg por di) . Un mes después de la administración de 50 µg de los péptidos derivados de la caseína natural en tres depósitos intramusculares la hiperlipidemia se estabilizó: el colesterol total se redujo a 270 mg por di, los triglicéridos fueron 165 mg por di y el colesterol LDL fue 201 mg por un di, aún más alto que el rango normal pero reducido significativamente del valor de pretratamiento. No se administró al tratamiento adicional. Así, el tratamiento con los péptidos derivados de la caseína natural es efectivo para efectuar rápidamente una reducción significativa en la í tH. ».J-Lt^fe^^ajgllitg hiperlipidemia no tratada de otra forma en humanos. Los péptidos derivados de la caseína natural estimulan la normoglóbinemia en un caso de sangrado oculto: D. G. (Paciente Macho) : El paciente es un macho de 75 años de edad que sufre de anemia e hipoglobinemia (RBC, HGB, HCT, MCH y MCHC abatida) asociadas con sangrado oculto extensivo. Un mes después de recibir una inyección intramuscular 50 µg de péptidos derivados de la caseína natural en tres depósitos, se observó una reducción significativa de la anemia. Después de dos meses, RBC se aproximó a los valores normales (4.32 en lugar de 3.44 M por µl), HGB aumentada (11.3 en lugar de 8.9 g por di) y HCT, MCH MCHC mejoraron todos a valores casi normales, a pesar de la persistencia del sangrado oculto. Así, una inyección de péptidos derivados de la caseína natural pareció capaz de estimular la eritropoyesis y reducir la anemia asociada con la pérdida de sangre en humanos . Se aprecia que algunas caracteristicas de la invención, que se describen, para claridad, en el contexto de modalidades separadas, también pueden proporcionarse en combinación en una modalidad sencilla. Inversamente, diversas características de la invención, que se describen, por brevedad, en el contexto de una modalidad sencilla pueden también proporcionarse separadamente o en cualquier subcombinación adecuada.

Aunque la invención se ha descrito en conjunción con modalidades específicas de la misma, es evidente que muchas alternativas, modificaciones y variaciones serán aparentes aquellos de experiencia en la técnica. En consecuencia, se pretende abarcar todas las dichas alternativas, modificaciones y variaciones que caen dentro del espíritu y amplio alcance de las reivindicaciones anexas. Todas las publicaciones, patentes, solicitudes de patentes y secuencias identificadas por un número de acceso, mencionadas en esta explicación se incorporan en la presente en su totalidad para referencia dentro de la especificación, al mismo grado como si cada publicación patente o solicitud de patente o secuencia individual fuera específicamente e individualmente indicada para ser incorporada en la presente para referencia. Además, la cita o identificación de cualquier referencia en esta solicitud no debe interpretarse como una admisión de que dichas referencias están disponible como técnica anterior a la presente invención. 1 LISTA DE SECUENCIA <110> Sidelmap, Zvi <120> PEPTIDOS DERIVADOS DE CASEÍNA Y USOS DE LOS MISMOS EN TERAPIA <130> 01/21676 <150> IL 134, 830 <151> 2000-03-01 <160> 19 <170> Patentln versión 3.0 <210> 1 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 1 Arg Pro Lys His Pro lie Lys His 1 5 <210> 2 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 2 Arg Pro Lys His Pro lie Lys His Gln 1 5 <210> 3 <211> 10 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide < 00> 3 Arg Pro Lys His Pro lie Lys His Gln Gly 1 5 10 <210> i <211> 11 <212> PRT ..4.»...-¿.«> Í*,. ,^*¿.^ Jh? .^.. y^th?^?l?t^, <213> Artificial <220>* <223> synthetic peptide <400> 4 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu 1 5 10 <210> 5 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 5 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro 1 5 10 <210> 6 <211> 13 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 6 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln 1 5 10 <210> 7 <211> 14 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 7 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu 1 5 10 <210> 8 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 8 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val 1 5 10 15 <210> 9 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 9 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val Leu 1 5 10 15 <210> 10 <211> 17 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide < 00> 10 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val Leu 1 5 10 15 Asn <210> 11 <211> 18 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 11 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val Leu 1 5 10 15 Asn Glu <210> 12 211> 19 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 12 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val Leu 1 5 10 15 Asn Glu Asn <210> 13 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 13 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val Leu 1 5 10 15 Asn Glu Asn Leu 20 <210> 14 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 14 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val Leu 1 . 5 10 15 Asn Glu Asn Leu Leu 20 <210> 15 <211> 22 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 15 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val Leu 1 5 10 15 Asn Glu Asn Leu Leu Arg 20 <210> 16 <211> 23 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 16 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val Leu 1 5 10 15 Asn Glu Asn Leu Leu Arg Phe 20 <210> 17 <211> 24 <212> PRT <213> Artifica <220> <223> synthetic peptide <400> 17 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val Leu 1 5 10 15 Asn Glu Asn Leu Leu Arg Phe Phe 20 <210> 18 <211> 25 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <«00> 18 Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val Leu 1 5 10 15 Asn Glu Asn Leu Leu Arg Phe Phe Val 20 25 <210> 19 <211> 26 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> synthetic peptide <400> 19 ¡^u*i?*k .itÉit*?>. ~....>r r~»~^..~+. ..^t. .,,^^....,.. *->¡¿>*- «"-- .^.^.^ .í ^át i Arg Pro Lys His Pro He Lys His Gln Gly Leu Pro Gln Glu Val Leu 1 5 10 15 Asn Glu Asn Leu Leu Arg Phe Phe Val Ala 20 25 ^^^^^4&^^^

Claims

116

REIVINDICACIONES 1. Un método para prevenir o tratar una enfermedad autoinmune, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. 2. Un método para prevenir o tratar una enfermedad viral, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl.

3. Un método para prevenir una infección viral, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl.

4. Un método para inducir hematopoyesis, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl.

5. Un método para inducir la proliferación de células del tallo hematopoyético, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado 117 a partir de una porción del término N de la caseína aSl.

6. Un método para inducir la proliferación y diferenciación de células del tallo hemapoyético, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl.

7. Un método para inducir la proliferación y diferenciación de células del tallo megacariocitopoyesis, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl.

8. Un método para inducir la proliferación y diferenciación de células del tallo eritopoyesis, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl.

9. Un método para inducir la proliferación y diferenciación de células del tallo leucocitopoyesis, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl. lA.a ?y...?l¡**í.y **í-^, . ., ..^^^^^y..^ ^.^Í?.?iaa¡^.^l ^ _ ^ , ^^^«^nt , 118

10. Un método para inducir la proliferación y diferenciación de células del tallo trombocitopoyesis, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl.

11. Un método para prevenir o tratar trombocitopenia, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéutica efectiva de un péptido derivado a partir de una porción de término N de la caseína aSl.

12. Un método para prevenir o tratar pancitopenia, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéutica efectiva de un péptido derivado a partir de una porción de término N de la caseína aSl

13. Un método para prevenir o tratar granulocitopenia, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéutica efectiva de un péptido derivado a partir de una porción de término N de la caseína aSl

14. Un método para prevenir o tratar hiperlipidemia, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéutica efectiva de un péptido derivado a partir de una |¡^jjg^ j|Í£ Sl^ ^ 119 porción de término N de la caseína aSl

15. Un método para prevenir o tratar colesteremia, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéutica efectiva de un péptido derivado a partir de una porción de término N de la caseína aSl

16. Un método para prevenir o tratar glucosuria, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéutica efectiva de un péptido derivado a partir de una porción de término N de la caseína aSl

17. Un método para prevenir o tratar diabetes, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéutica efectiva de un péptido derivado a partir de una porción de término N de la caseína aSl

18. Un método para prevenir o tratar SIDA, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéutica efectiva de un péptido derivado a partir de una porción de término N de la caseína aSl

19. Un método para prevenir o tratar infección por VIH, caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad de una cantidad terapéutica efectiva de un péptido derivado a partir de una porción de término N LU, ?^ á á ^ ^ ^ yy?.^? ^ ? 120 de la caseína aSl

20. Un método para prevenir o tratar condiciones asociadas con dosis mieloablativas de quimioradioterapia soportada por trasplante de células de médula ósea autólogo o del tallo sanguíneo periférico (ASCT) o trasplante de médula ósea alogenéico (BMT) , caracterizado porque comprende el método de administrar a un sujeto en necesidad una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl.

21. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-20, caracterizado porque el péptido es un fomento derivado por fragmentación de la caseína aSl.

22. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-20, caracterizado porque el péptido es un péptido sintético.

23. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-20, caracterizado porque el péptido tiene una secuencia como se indica en una de las SEC. DE IDENT NOS: 1-19

24. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar una enfermedad autoinmune, caracterizado porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción de término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable. Mt *tJm ¿ltí?» ?¿a*??.¡ jiM*yA.. . ..„tM||¡ 121

25. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar una enfermedad viral, caracterizado porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción de término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

26. Una composición farmacéutica para prevenir la infección viral, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un derivado peptídico a partir de una porción de término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

27. Una composición farmacéutica para inducir hematopoyesis, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

28. Una composición farmacéutica para inducir la proliferación de células del tallo hematopoyético, caracterizado porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

29. Una composición farmacéutica para inducir proliferación y diferenciación de las células del tallo hematopoyético, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, como un péptido 122 derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

30. Una composición farmacéutica para inducir megacariocitopoyesis, caracterizado porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

31. Una composición farmacéutica para inducir eritopoyesis, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

32. Una composición farmacéutica para inducir leucocitopoyesis, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

33. Una composición farmacéutica para inducir trombocitopoyesis, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseina aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

34. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar trombocitopenia, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un »>.iÉ^..,„^L<Adi.a» 123 péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

35. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar pancitopenia, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

36. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar granulocitopenia, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

37. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar hiperlipidemia, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

38. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar colesteremia, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

39. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar glucosuria, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un lAei ?tl.?.éiMtá?iák». . ^ „... 124 péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

40. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar diabetes, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

41. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar SIDA, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

42. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar infección por VIH, caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador farmacéuticamente aceptable.

43. Una composición farmacéutica para prevenir o tratar las condiciones asociadas con dosis mieloablativas de quimioradioterapia soportador por el trasplante de células de la médula ósea autológo o del tallo sanguíneo periférico (ASCT) o trasplante de médula ósea alogénico (BMT) , caracterizada porque comprende la composición farmacéutica, como un ingrediente activo, un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl y un portador 125 farmacéuticamente aceptable.

44. La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 24-43, caracterizada porque el péptido es un fragmento derivado por fragmentación de la caseína aSl.

45. La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 24-43, caracterizada porque el péptido es un péptido sintético.

46. La composición farmacéutica de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 24-43, caracterizada porque el péptido tiene una secuencia como se indica en una de las SEC. DE INDET. NOS: 1-19.

47. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar una enfermedad autoinmune.

48. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar una enfermedad viral.

49. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir la infección viral.

50. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir hematopoyesis .

51. El uso de un péptido derivado a partir de una 126 porción del término N de la caseína aSl para inducir la proliferación de células del tallo hematopoyético.

52. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir la proliferación y diferenciación de las células de tallo hematopoyético .

53. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir megacariocitopoyesis .

54. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir eritopoyesis.

55. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir leucocitopoyesis.

56. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para inducir trombocitopoyesis .

57. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar trombocitopenia.

58. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar pancitopenia.

59. El uso de un péptido derivado a partir de una t—»..«.»- --', ^Mum¡?t?í^^.., ?Mlí.?y^iá.MM,.,. , ?M.. .^A jUL.j ttA.j 127 porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar granulocitopenia.

60. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar hiperlipidemia.

61. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar colesteremia.

62. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar glucosuria.

63. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar diabetes.

64. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar SIDA.

65. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar infección por VIH.

66. El uso de un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl para prevenir o tratar condiciones asociadas con dosis mieloablativas de quimioradioterapia soportada por trasplantes de células de médula ósea autóloga o del tallo sanguíneo periférico (ASCT) 128 o transplante de médula ósea alogénico.

67. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 47-68, en donde el péptido es un fragmento derivado por fragmentación de la caseína aSl.

68. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 47-68, en donde el péptido es un péptido sintético.

69. El uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 47-68, en donde el péptido tiene una secuencia como se indica en una de las SEC. DE IDENT. NOS. 1-19.

70. Un péptido purificado que tiene una secuencia de aminoácidos seleccionado a partir del grupo que consiste de las SEC. DE IDENT NOS: 1-19.

71. Una composición farmacéutica que comprende un péptido purificado que tiene una secuencia de aminoácidos seleccionado a partir del grupo que consiste de las SEC DE IDENT NOS: 1-19 y portador farmacéuticamente aceptable.

72. Un método para mejorar la colonización de células del tallo sanguíneo donadas en un recipiente mieloseparado, caracterizado porque comprende el método tratar un donador de las células del tallo sanguíneo donadas con un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl antes de la donación e implantar las células del tallo sanguíneo donadas en el recipiente. "tjJM*tL^-,*,'t¿A-'" .—J^-ftM.^. =. -.***^^** ?*. . t Eiá¿ 129

73. Un método para mejorar la colonización de células del tallo sanguíneo donadas en un recipiente mieloseparado, caracterizado porque comprende el método de tratar las células del tallo sanguíneo donadas con un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl antes de implantar las células del tallo sanguíneo donadas en el recipiente.

74. Un método para mejorar la colonización de las células del tallo sanguíneo en un recipiente mieloseparado, caracterizado porque comprende tratar las células del tallo sanguíneo como un péptido derivado a partir de una porción del término N de la caseína aSl antes de implantar las células de tallo sanguíneo en el recipiente.