MXPA01001386A - Antagonistas de recptores de vitronectina - Google Patents

Abstract

Se describen compuestos de fórmula (I) los cuales son antagonistas de receptores, y sonútiles en el tratamiento de ostereoporosis en donde:Y es CR'R'o NR'C(O);R1 es -alquilo de C0-6-Het-, alquilo de C0-6-Ar, H, -alquilo de C1-6, -CN o -S(o) k Rg,R2 es W es -(CHRg)a-U-(CHRg)b-;U estáausente o es CO, CRg2,C(=CRg2), C(0CRg2), S8o)k, O,NRg, CRgORg, CRg(ORk,c(o)CRg2, CRg2C(O),CONRI,NRiCO, OC(O);C(O)O;C(S)O;OC(S)NRg,C(S);S(O)NRg,NRgS(O)2N=N,NRgNRg, NRgCRg2, CRg2O, OCRg2,C=C,CRg0CRg;Ar o Het;G es NRe, S u O;Rg es H, alquilo de C1-6,Het-alquilo de C0-6, cicloalquilo de C3-7-alquilo de C0-6 o Ar-alquilo de C0-6Rk es Rg, O-C(O)ORf;Ri es H, alquilo de C1-6, Het-alquilo de C0-6, cicloalquilo de C3-7- alquilo de C0-6, Ar-alquilo de C0-6 o alquilo de C1-6 substituido por uno a tres grupos seleccionados de halógeno, CN, nrg2, ORg,srg.co2Rg y CON(Rg)2;Rf es H, alquilo de C1-6 o Ar-alquilo de C0-6;Re es H, alquilo de c1-6,Ar-alquilo de C0-6, Het-alquilo de C0-6, ,cicloalquilo de C3-7 alquilo de C0-6, o (CH2)kCO2Rg, Rb y Rc se seleccionan independientemente de H, alquilo de C1-6, Ar-alquilo de C0-6, Het-alquilo de C0-6, o cicloalquilo de C3-6-alquilo e C0-6, halógeno, CF3,ORf,S(O)kRf,CORf,NO2,N(Rf)2,Co(NRf)2, CH2N(Rf)2,o Rb y Rc se unen entre sípara formar un anillo carbocíclico o heterocíclico aromáticoo no aromático de 5 o 6 miembros, sustituido opcionalmente por hasta tres sustituyentes seleccionados de halógeno, CF3,alquilo ed C1-4 ORf, s (o)kRf, CORf,CO2Rf, OH, NO, N(r)2, CO(NRf)2 y CH2n(Rf)2:o metilenodioxi;Q1,Q2, Q3 y Q4 son independientemente N o C-Ry, siempre que no más de uno de Q1, Q, Q3 y Q4 sea N;R´es H, alquilo de C0-6ócicloalquilo de C3-6 alquilo de C0-6;R´´es R´, -C(O) R', 0 -C(O)OR´;Ry es H, halo,-ORg,-SRg,-CN,NRgRk,-NRgRk,-NO2,-CF3,CF3S(O) r-, -CO2Rg,-CORg o -CONRg2, o alquilo de C1-6 sustituido opcionalmente por halo, -ORg,-SRg,-CN, NRgRk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-, -COrG o - CONRg2, o alquilo de C1-6 sustituido opcionalmente por halo;-ORg, -SRg,-CN, NRgR",-NO2,-CF3,R´S (O) r-, -CO2Rg o -COnrg2;a es 0,1ó2;b es 0, 1ó2;k es 0,1ó2;r es 0, 1ó2;s es o, 1ó2;u es 0ó1;y v es 0ó1;o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

Description

ANTAGONISTAS DE RECEPTORES DE VITRONECTINA CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se refiere a compuestos farmacéuticamente activos que inhiben al receptor de vitronectina, y son útiles para el tratamiento de inflamación, cáncer y trastornos cardiovasculares tales como aterosclerosis y restenosis, y enfermedades en donde la resorción ósea es un factor, tal como en osteoporosis.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Las integrinas son una superfamilia de receptores de adhesión celular, las cuales son glucoproteínas de transmembrana expresadas en una variedad de células. Estos receptores de adhesión de superficie celular incluyen gpIIb/IIIa (el receptor de fibrinógeno) y avß3 (el receptor de vitronectina). El receptor de fibrinógeno gpIIb/IIIa es expresado sobre la superficie de las plaquetas, y media la agregación plaquetaria y la formación de un coágulo hemostático en el sitio de una herida sangrante (Philips, et al., Blood., 1988, 71 , 831 ). El receptor de vitronectina avß3 es expresado en un número de células, incluyendo células endoteliales, del músculo liso, osteoclastos y células tumorales y, de esta manera, tiene varias funciones. El receptor avß3 expresado sobre la membrana de osteoclastos media la adhesión de osteoclastos a la matriz ósea, un paso clave en el proceso de resorción ósea (Ross, et al., J. Biol. Chem., 1987, 262, 7703). Una enfermedad caracterizada por resorción ósea excesiva es la osteoporosis. El receptor avß3 expresado sobre las células del músculo liso aórtico humano media su migración en la neoíntima, un proceso que puede conducir a restenosis consecutiva a angioplastía coronaria percutánea (Brown, et al., Cardiovascular Res., 1994, 28, 1815). Además, Brooks, et al., Cell, 1994, 79, 1157, han mostrado que un antagonista de avß3 es capaz de promover la regresión tumoral mediante la inducción de apoptosis de vasos sanguíneos angiogénicos. De esta manera, agentes que bloqueen al receptor de vitronectina, serían útiles en el tratamiento de enfermedades tales como osteoporosis, restenosis y cáncer. Se sabe ahora que el receptor de vitronectina se refiere a 3 integrinas diferentes, designadas como avß?, avß3 y avßs (Horton, et al., Int. J. Exp. Pathol., 1990, 71 , 741). vß? se une a fibronectina y vitronectina. vß3 se une a una gran variedad de ligandos, incluyendo fibrina, fibrinógeno, laminina, tromboespondina, vitronectina, factor de von Willebrand, osteopontina y sialoproteína ósea I. vßs se une a vitronectina. Se ha mostrado que el receptor de vitronectina avßs interviene en la adhesión celular de una variedad de tipos celulares, incluyendo células endoteliales microvasculares (Davis, et al., J. Cell. Biol., 1993, 51 , 206), y se ha confirmado ya su función en la angiogénesis (Brooks, et al., Science, 1994, 264, 569). Esta integrina es expresada en los vasos sanguíneos en el tejido de granulación en heridas humanas, pero no en la piel normal. Se sabe que el receptor de vitronectina se une a proteínas de la matriz ósea que contienen el tri-péptido Arg-Gly-Asp (o motivo RGD). De esta manera, Horton, et al., Exp. Cell Res. 1991 , 195, 368, describen que los péptidos que contienen RGD y un anticuerpo del receptor de anti-vitronectina (23C6), inhiben la resorción de dentina y la propagación celular por osteoclastos. Además, Sato, et al., J. Cell. Biol. 1990, 111 , 1713 describen que la equistatina, un péptido del veneno de serpientes que contiene la secuencia RGD, es un inhibidor potente de la resorción ósea en cultivo de tejidos, e inhibe la fijación de osteoclastos al hueso. Se ha descubierto ahora que ciertos compuestos son inhibidores potentes de los receptores avß3 y vß5. En particular, se ha descubierto que dichos compuestos son inhibidores más potentes del receptor de vitronectina que el receptor de fibrinógeno.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Esta invención comprende compuestos de la fórmula (I) como se describe más adelante, los cuales tienen actividad farmacológica para la inhibición del receptor de vitronectina, y son útiles en el tratamiento de inflamación, cáncer y trastornos cardiovasculares tales como aterosclerosis y .» * É??**£~ ., ». - r f|1 . | - ]| . j restenosis, y enfermedades en donde la resorción ósea es un factor, tal como en osteoporosis. Esta invención es también una composición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la fórmula (I) y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Esta invención es también un método para tratar enfermedades que son mediadas por el receptor de vitronectina. En un aspecto en particular, los compuestos de esta invención son útiles para el tratamiento de aterosclerosis, restenosis, inflamación, cáncer y enfermedades en donde la resorción ósea es un factor, tal como en osteoporosis.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Esta invención comprende compuestos novedosos que son inhibidores más potentes del receptor de vitronectina que el receptor de fibrinógeno. Esta invención comprende compuestos de fórmula (I): (0 en donde: Y es CR'R' o NR'C(O); R1 es -alquilo de Co-ß-Het-, -alquilo de Co-ß-Ar, H, -alquilo de C?_6, -CN o -S(O)kR9; R¿ es W es -(CHR9)a-U-(CHR9)b-; U está ausente o es CO, CRg2, C(=CR92), S(O)k, O, NR9, CR9ORg, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONR', NR'CO, OC(O), C(O)O, C(S)0, OC(S); C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2N=N, NRgNR9, NR9CR92, CR92NRg, CR92O, OCR92, C=C, CRs=CRg; Ar o Het; G es NRe, S u O; R9 es H, alquilo de C-¡ , Het-alquilo de Co-ß, cicloalquilo de C3.7-alquilo de C0-6 o Ar-alquilo de Co-ßl Rk es R9, -C(0)R9 o -C(O)ORf; R' es H, alquilo de C?-6, Het-alquilo de Co-6, cicloalquilo de C3-7- alquilo de C0-6, Ar-alquilo de C0-6, o alquilo de C?_6 substituido por uno a tres grupos seleccionados de halógeno, CN, NR92l OR9, SR9, CO2Rg y CON(R9)2; Rf es H, alquilo de C-?-6 o Ar-alquilo de Co-6; Re es H, alquilo de C?-6, Ar-alquilo de C0-6, Het-alquilo de C0-6, cicloalquilo de C3. -alquilo de C0-6, o (CH2)kCO2R9; Rb y Rc se seleccionan independientemente de H, alquilo de C-?.6, Ar-alquilo de Co-6, Het-alquilo de C0-6, o cicloalquilo de C3-6-alquilo de Co-ß, halógeno, CF3) ORf, S(O)kRf, CORf, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, o Rb y Rc se unen entre sí para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico aromático o no aromático de 5 o 6 miembros, sustituido opcionalmente por hasta tres sustituyentes seleccionados de halógeno, CF3, alquilo de C?- , ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 y CH2N(Rf)2; o metilenodioxi; Q1, Q2, Q3 y Q4 son independientemente N o C-Ry, siempre que no más de uno de Q1, Q2, Q3 y Q4 sea N; R' es H, alquilo de C?.6) Ar-alquilo de C0-6 ó cicloalquilo de C3-ß- alquilo de Co-ß", R" es R', -C(O)R' o -C(O)OR'; Ry es H, halo, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-, - 20 CO2R9, -COR9 o -CONR92, o alquilo de C-?-6 sustituido opcionalmente por halo, -OR9, -SR9, -CN, -NR9R", -NO2, -CF3, R'S(O)r, -CO2R9, -COR9 o -CONR92; a es 0, 1 ó 2; b es 0, 1 ó 2; k es O, 1 ó 2; r es O, 1 ó 2; s es O, 1 ó 2; u es O ó 1 ; y v es O ó 1 ; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Incluidas también en esta invención son las sales de adición farmacéuticamente aceptables y los complejos de los compuestos de esta invención. En casos en donde los compuestos de esta invención pueden tener uno o más centros quirales, a menos que sea especificado, esta invención incluye cada compuesto no racémico único que puede ser sintetizado y resuelto mediante técnicas convencionales. En casos en donde los compuestos tienen dobles enlaces de carbono-carbono insaturados, los isómeros cis (Z) y trans (E) están dentro del alcance de esta invención. En casos en donde los compuestos pueden existir en formas tautómeras, tales como tautómeros ceto-enol, tales como cada forma tautómera es contemplada para ser incluida dentro de esta invención, sea que exista en equilibrio o esté bloqueada en una forma mediante sustitución apropiada con R'. Los compuestos de fórmula (I) inhiben la unión de vitronectina y otros péptidos que contienen RGD, al receptor de vitronectina. La inhibición del receptor de vitronectina en osteoclastos, inhibe la resorción ósea osteoclástica, y es útil en el tratamiento de enfermedades en donde la resorción ósea está asociada con patologías tales como osteoporosis y osteoartritis. 5 En otro aspecto, esta invención es un método para estimular la formación de hueso, el cual comprende administrar un compuesto que cause un incremento en la liberación de ostecalcina. La producción incrementada de hueso es un beneficio claro en estados de enfermedad en donde existe una deficiencia de masa ósea mineralizada o se desee reconstrucción del hueso, tal como en cicatrización de fracturas y la prevención de fracturas óseas. Enfermedades y trastornos metabólicos que den como resultado la pérdida de estructura ósea, se beneficiarían también a partir de dicho tratamiento. Por ejemplo, los trastornos de hiperparatiroidismo, enfermedad de Paget, hipercalcemia maligna, lesiones osteolíticas producidas por metástasis ósea, pérdida de hueso debida a inmovilización o deficiencia de hormona sexual, enfermedad de Behcet, osteomalacia, hiperostosis y osteopetrosis, se beneficiarían de la administración de un compuesto de esta invención. Además, puesto que los compuestos de la presente invención inhiben a los receptores de vitronectina en un número de tipos de células diferentes, dichos compuestos serían útiles en el tratamiento de trastornos inflamatorios tales como psoriasis y artritis reumatoide, y enfermedades cardiovasculares tales como aterosclerosis y restenosis. Los compuestos de fórmula (I) de la presente invención pueden ser útiles para el tratamiento o -r^ a ñfJ ^^^^^^^ prevención de otras enfermedades que incluyen, pero no están limitadas a, trastornos tromboembólicos, asma, alergias, síndrome de sufrimiento respiratorio del adulto, enfermedad de injerto contra hospedero, rechazo al transplante de órganos, choque séptico, eccema, dermatitis por contacto, enfermedad inflamatoria del intestino y otras enfermedades autoinmunes. Los compuestos de la presente invención también pueden ser útiles para la cicatrización de heridas. Los compuestos de la presente invención son también útiles para el tratamiento, incluyendo prevención, de trastornos angiogénicos. El término trastornos angiogénicos, como se usa en la presente, incluye condiciones que incluyen neovascularización anormal. En donde el desarrollo de nuevos vasos sanguíneos es la causa de, o contribuye a, la patología asociada con una enfermedad, la inhibición de la angiogénesis reducirá los efectos deletéreos de la enfermedad. Un ejemplo de dicha enfermedad objetivo es la retinopatía diabética. En donde el desarrollo de nuevos vasos sanguíneos se requiere para sustentar el crecimiento de un tejido deletéreo, la inhibición de la angiogénesis reducirá el aporte sanguíneo al tejido y contribuirá de esta manera a la reducción de la masa de tejido basada en los requerimientos de aporte sanguíneo. Ejemplos incluyen el crecimiento de tumores en donde la neovascularización es un requerimiento continuo para que el tumor crezca, y el establecimiento de metástasis de tumores sólidos. De esta manera, los compuestos de la presente invención inhiben la angiogénesis de tejidos tumorales, previniendo de esta manera la metástasis tumoral y el crecimiento tumoral. De esta manera, de conformidad con los métodos de la presente invención, la inhibición de la angiogénesis usando los compuestos de la presente invención puede mejorar los síntomas de la enfermedad y, en algunos casos, puede curar la misma. Otro objetivo terapéutico para los compuestos de la presente invención, son las enfermedades oculares caracterizadas por neovascularización. Dichas enfermedades oculares incluyen trastornos neovasculares córneos, tales como transplante de córnea, queratitis herpética, queratitis luética, pterigio y pannus neovascular asociado con el uso de lentes de contacto. Otras enfermedades oculares incluyen también degeneración macular relacionada con la edad, histoplasmosis ocular presumible, retinopatía de la premadurez, y glaucoma neovascular. Esta invención provee además un método para inhibir el crecimiento tumoral, el cual comprende administrar en forma gradual o en combinación física, un compuesto de fórmula (I) y un agente antineoplásico, tal como topotecan y cisplatina. Con respecto a la fórmula (I): Adecuadamente R2 es en donde Q1, Q2 y Q3 son cada uno CRy, Q4 es CRy o N, y u es 0, y de preferencia, cada R' es H, R" es H o alquilo de C?-6, W es -(CH2)-?-4-, Q4 es CRy y Ry es H. En forma alternativa, R2 es en donde Q1, Q2 y Q3 son cada uno CH y u es 0, y de preferencia, cada R' es 10 H, R" es H o alquilo de C1-6) W es -(CH2)?-4-, y v es 0. En forma alternativa, R2 es en donde G es NH y Rb y Rc son cada uno H, y de preferencia, W es -(CH2)?-4- En forma alternativa, R es en donde G es NH y Rb y Rc se unen entre sí para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico aromático o no aromático de 5 ó 6 miembros, sustituido opcionalmente hasta por 3 sustituyentes seleccionados de '¿ÍU&-,¿ ¿,^..j!&é é halógeno, CF3, alquilo de C1-4, ORf, S(O)kRf, CORf? CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2) CO(NRf)2 y CH2N(Rf)2; o metilenodioxi. De preferencia, Rb y Rc se unen entre sí para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico aromático de 6 miembros, y W es -(CH2)1-4-. 5 En forma alternativa, R2 es en donde cada R' es H, R" es H o alquilo de C-i-Cß, R9 es H o alquilo C1-C6, y 10 s es 0, 1 ó 2 y, de preferencia, W es -(CH2)?- -. Con respecto a la fórmula (I), adecuadamente R1 es fenilo, bencilo, piridilo, imidazolilo, oxazolilo o tiazolilo. De preferencia, R1 es fenilo. Adecuadamente, Y es NHC(O). Representativos de los compuestos novedosos de esta invención 15 son los siguientes: Acido (±)-3-fenil-4-[4-[[[3-(pir¡din-2-il)amino-1-propil]amino]- carbonil]-1 ,3-oxazol-2-il]butanoico; Acido (±)-3-fenil-4-[4-[[[2-(piridin-2-il)amino-1-etil]amino]carbonil]- 1 ,3-oxazol-2-il]butanoico; 20 Acido (±)-3-fenil-4-[4-[[[4-(piridin-2-il)amino-1-butil]amino]- carbonil]-1 ,3-oxazol-2-il]butanoico; y Acido (±)-3-fenil-4-[4-[5-(piridin-2-il)amino-1 -pentil]-1 ,3-oxazol-2- iljbutanoico; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

En casos en donde los compuestos de esta invención pueden tener uno o más centros quirales, a menos que sea especificado, esta invención incluye cada compuesto no racémico único el cual puede ser sintetizado y resuelto mediante técnicas convencionales. De conformidad con la presente invención, se prefiere la configuración (S) de los compuestos de la fórmula (I). En casos en donde los compuestos tienen dobles enlaces de carbono-carbono insaturados, los isómeros cis (Z) y trans (E) están dentro del alcance de esta invención. El significado de cualquier sustituyente en cualquier ocurrencia es independiente de su significado o cualquier otro significado del sustituyente, en cualquier otra ocurrencia. Incluidos también en esta invención son los profármacos de los compuestos de esta invención. Se considera que los profármacos son cualquier vehículo enlazado covalentemente que libere al fármaco original activo de conformidad con la fórmula (I) in vivo. De esta manera, en otro aspecto de esta invención, se incluyen profármacos novedosos, los cuales son también intermediarios en la preparación de compuestos de la fórmula (I), de fórmula (II): (II) en donde: Y es CR'R' o NR'C(O); * ^í^A. É^ ^l^^^ R1 es -alquilo de C0-6-Het-, -alquilo de C0-6-Ar, H, -alquilo de C?-6, -CN o -S(O)kR9; R2 es W es -(CHRg)a-U-(CHR9)b-; U está ausente o es CO, CR92, C(=CR92), S(O)kl O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONR, NRCO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S); C(S)NRg, NR9C(S), S(0)2NRg, NR9S(O)2N=N, NR9NR9, NR9CRg2, CR92NR9, CR92O, OCRg2, C=C, CR9=CR9; Ar o Het; G es NRe, S u O; R9 es H, alquilo de C-?-6, Het-alquilo de Co-ß, cicloalquilo de C3-7- alquilo de Co-ß o Ar-alquilo de C0-6; Rk es R9, -C(O)R9 o -C(O)ORf; R' es H, alquilo de C?-6, Het-alquilo de C0-6, cicloalquilo de C3-7-alquilo de C0-6> Ar-alquilo de C0-6, o alquilo de C1-6 substituido por uno a tres grupos seleccionados de halógeno, CN, NR92, OR9, SR9, CO2R9 y CON(R9)2; Rf es H, alquilo de C-?-6 o Ar-alquilo de C0-6', Re es H, alquilo de C?-6, Ar-alquilo de C0-6, Het-alquilo de Co-6, cicloalquilo de C3- -alquilo de Co-6> o (CH2)kCO2R9; Rb y Rc se seleccionan independientemente de H, alquilo de C1-6, Ar-alquilo de C0-6, Het-alquilo de Co-6. o cicloalquilo de C3-6-alquilo de Coß, halógeno, CF3, ORf, S(O)kRf, CORf, N02, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, o Rb y Rc se unen entre sí para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico aromático o no aromático de 5 o 6 miembros, sustituido opcionalmente por hasta tres sustituyentes seleccionados de halógeno, CF3, alquilo de C?-4, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 y CH2N(Rf)2; o metilenodioxi; Q1, Q2, Q3 y Q4 son independientemente N o C-Ry, siempre que no más de uno de Q1, Q2, Q3 y Q4 sea N; R" es H, alquilo de C-?-6, Ar-alquilo de C0-6 ó cicloalquilo de C3-6-alquilo de Co-d; R" es R\ -C(O)R' o -C(O)OR'; Ry es H, halo, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-, -CO2R9, -COR9 o -CONR92, o alquilo de C1-6 sustituido opcionalmente por halo, -OR9, -SR9, -CN, -NR9R", -N02, -CF3, R'S(O)r> -CO2R9, -COR9 o -CONR92; a es 0, 1 ó 2; b es O, 1 ó 2; k es 0, 1 ó 2; r es O, 1 ó 2; s es O, 1 ó 2; u es O ó 1 ; y v es O ó 1 ; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Las abreviaturas y los símbolos usados comúnmente en la técnica de péptidos y compuestos químicos, se usan en la presente para describir los compuestos de esta invención. En general, las abreviaturas para los aminoácidos adoptan las reglas de la Joint Commission on Biochemical Nomenclature de la IUPAC-IUB como se describe en Eur. J. Biochem., 158, 9 (1984). Alquilo de C-?-C4, como se aplica en la presente, significa un grupo alquilo de 1 a 4 átomos de carbono sustituido opcionalmente, e incluye metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo y t-butilo. Alquilo de C C6 incluye además pentilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo y hexilo, y los isómeros alifáticos simples de los mismos. Alquilo de Co-C4 y alquilo de C0-C6 indican adicionalmente que no necesita estar presente grupo alquilo alguno (por ejemplo, que esté presente un enlace covalente). Cualquier alquilo de C?-C4 o alquilo de C Cß, alquenilo de C2-C6, alquinilo de C2-Cß u oxoalquilo de C-?-C6, puede ser sustituido opcionalmente con el grupo Rx, el cual puede estar en cualquier átomo de carbono que dé como resultado una estructura estable, y esté disponible mediante técnicas de síntesis convencionales. Grupos adecuados para Rx son alquilo de CrC4, OR\ SR', alquilsulfonilo de C C4, alquilsulfoxilo de C C4) -CN, N(R')2, CH2N(R')2, -N02, -CF3, -COsR'-CONÍR'k, -COR'.-NR'CÍOJR', F, Cl, Br, I o CF3S(O)r, en donde r es 0, 1 ó 2. Halógeno o halo significa F, Cl, Br e I. Ar, o arilo, como se aplica en la presente, significa fenilo o naftilo, o fenilo o naftilo sustituido por uno a tres sustituyentes tales como los definidos anteriormente para alquilo, especialmente alquilo de C C , alcoxi de C1-C4, alquiltio de C C4, CF3, NH2, OH, F, Cl, Br o I. Het, o heterociclo, indica un anillo monocíclico de cinco o seis miembros sustituido opcionalmente, o un anillo bicíclico de nueve o diez miembros que contiene uno a tres heteroátomos seleccionados del grupo de nitrógeno, oxígeno y azufre, los cuales sean estables y disponibles mediante técnicas de síntesis química convencionales. Heterociclos ilustrativos son benzofurilo, bencimidazol, benzopirano, benzotiofeno, furano, imidazol, indolina, morfolina, piperidina, piperazina, pirrol, pirrolidina, tetrahidropiridina, piridina, tiazol, oxazol, tiofeno, quinolina, isoquinolina y tetra- y perhidro-quinolina e isoquinolina. Cualquier combinación accesible de hasta tres sustituyentes en el anillo Het, tales como los definidos anteriormente para alquilo, que estén disponibles mediante síntesis química y sean estables, están dentro del alcance de esta invención.

Cicloalquilo de C3-C se refiere a un sistema carbocíclico sustituido opcionalmente de tres a siete átomos de carbono, el cual puede contener hasta dos enlaces de carbono-carbono insaturados. Típicos de cicloalquilo de C3-C7 son ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciciohexilo, ciciohexenilo y cicioheptilo. Cualquier combinación de hasta tres sustituyentes tales como los definidos anteriormente para alquilo en el anillo de cicloalquilo y que esté disponible mediante síntesis química convencional y sea estable, está dentro del alcance de esta invención. Cuando Rb y Rc se unen entre sí para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico aromático o no aromático de cinco o seis miembros fusionado al anillo al cual R y Rc se unen, el anillo formado será generalmente un heterociclo de cinco o seis miembros seleccionado de los incluidos anteriormente para Het, o serán un anillo de fenilo, ciciohexilo o ciclopentilo. De preferencia, R y Rc serán -D1 =D2-D3=D4, en donde D1-D4 son independientemente CH, N o C-Rx, con la condición de que no más de dos de D1-D4 sean N. Más preferiblemente, cuando Rb y Rc se unen entre sí, forman el grupo -CH=CH-CH=CH-. Ciertos grupos de radicales se abrevian en la presente. t-Bu se refiere al radical butilo terciario, Boc se refiere al radical t-butiloxicarbonilo, Fmoc se refiere al radical fluorenilmetoxicarbonilo, Ph se refiere al radical fenilo, Cbz se refiere al radical benciloxicarbonilo, Bn se refiere al radical bencilo, Me se refiere a metilo, Et se refiere a etilo, Ac se refiere a acetilo, Alk - > frf ?nÉteliWlftaíl?lÍBm?ii?T?ir~?i)?? se refiere a alquilo de C?-C4, Nph se refiere a 1- ó 2-naftilo, y cHex se refiere a ciciohexilo. Tet se refiere a 5-tetrazolilo. Ciertos reactivos se abrevian en la presente. DCC se refiere a diciclohexilcarbodiimida, DMAP se refiere a dimetilaminopiridina, DIEA se refiere a diisopropiletilamina, EDC se refiere a clorhidrato de 1-(3- dimetilaminopropil)-3-etilcarbod¡imida, HOBt se refiere a 1 -hidroxibenzotriazol, THF se refiere a tetrahidrofurano, DEAD se refiere a azodicarboxilato de dietilo, PPh3 se refiere a trifenilfosfina, DIAD se refiere a azodicarboxilato de diisopropilo, DME se refiere a dimetoxietano, DMF se refiere a dimetilformamida, NBS se refiere a N-bromosuccinimida, Pd/C se refiere a catalizador de paladio sobre carbón, PPA se refiere a ácido polifosfórico, DPPA se refiere a difenilfosforilazida, BOP se refiere hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tris(dimetilamino)fosfonio, HF se refiere a ácido fluorhídrico, TEA se refiere a trietilamina, TFA se refiere a ácido trifluoroacético y PCC se refiere a clorocromato de piridinio. Los compuestos de fórmula (I) se preparan generalmente haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (lll) con un compuesto de fórmula (IV): alquilo de C,_6 R2-NH, _ (lll) (IV) en donde R1 y R2 son como se definen en la fórmula (I), con cualquier grupo funcional reactivo protegido; y removiendo después cualquier grupo protector y formando opcionalmente una sal farmacéuticamente aceptable. Los compuestos de la fórmula (I) se preparan mediante los métodos generales descritos en los esquemas l-ll.

ESQUEMA ! ^?i?S- (a) éster metílico de serina, EDC, HOBt-H2O, Et3N, DMF; (b) reactivo de Burgess, THF; (c) CuBr2) DBU, hexametítentetramina, CH2CI2; (d) Lil, piridina; (e) CDI, CH2CI2, después diclorhidrato de 2-[(3-amino-1-propil)amino]piridina, Et3N; (f) LiOH, THF, H2O, después acidificación. El éster mono- etílico del ácido 3-fenilglutárico (1-1 ; J. Org. Chem. 1959, 24, 1290) se convierte a una forma activada del ácido usando, por ejemplo EDC and HOBt, o SOCI2, y la forma activada subsecuentemente se hace reaccionar con una 2-hidroxietilamina adecuada, por ejemplo éster metílico de serina, en un solvente adecuado, como puede ser DMF, CH2CI2, o CH3CN, para dar la hidroxietilamida I-2. Dependiendo de si se requiere o no la neutralización acida, puede usarse una base agregada, como trietilamina (Et3N), diisopropiletilamina ((i-Pr)2NEt), o piridina. Diversos métodos adicionales para convertir un ácido carboxílico a una amida ya se conocen, y pueden encontrarse en libros de referencia estándar, como es "Compendium of Organic Synthetic Methods", Vol. I-VI (publicado por Wiley-lnterscience), o Bodansky, "The Practice of Peptide Synthesis" (publicado por Springer- Verlag). El compuesto I-2 se convierte al derivado de oxazol I-4 mediante un procedimiento estándar de dos pasos. Primero, el compuestos I-2 se cicliza bajo condiciones deshidratantes, preferiblemente con el reactivo de Burgess (Org. Synth. Coll. Vol. V1 1988, 788) como los describió Meyers (J. Org. Chem. 1996, 61 , 8207), para dar el derivado de oxazolina I-3. La oxidación subsecuente de conformidad con la metodología general desarrollada por Barrish (J. Org. Chem. 1993, 58, 4494) da el derivado de oxazol I-4. Ya se conocen otros métodos para la preparación de oxazol a partir de oxazolina, varios de los cuales se describen en una revisión resiente de Meyers (Tetrahedron 1994, 50, 2297). El éster metílico de I-4 se corta al ácido carboxílico correspondiente (I-5) usando condiciones nucleófilas, como yoduro de litio en piridina sometida a reflujo. Otros métodos para el corte nucleófilo de los esteres metílicos pueden encontrarse en los volúmenes de referencia estándar como Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis" (publicado por Wiley-Interscience). Se prefieren las condiciones nucleófilas en este caso, ya que el corte concomitante del éster etílico puede esperarse bajo condiciones de saponificación estándar. El compuesto I-5 se convierte a una forma activada del ácido usando 1 ,1'-carbonil diimidazol, y la forma activada se hace reaccionar con una amina adecuada, por ejemplo diclorhidrato de 2- [(3-amino-1-propil)amino]pir¡d¡na, para dar el derivado de amina I-6. El éster etílico de I-6 se hidroliza usando una base acuosa, por ejemplo LiOH en THF acuoso o NaOH en metanol o etanol acuoso, y la sal de carboxilato intermedia se acidifica con un ácido adecuado, por ejemplo TFA o HCl, para dar el ácido carboxílico I-7. Alternativamente, la sal de carboxilato intermedia puede aislarse, si se desea, o una sal de carboxilato del ácido carboxílico libre puede prepararse por los métodos ya conocidos por los expertos en la técnica.

ESQUEMA li (a) cloroformiato de etilo, NMM, THF, después NaBH4, MeOH; (b) CBr4, PPh3, THF; (c) PPh3, CH3CN; (d) 4-[N-(ter-butoxicarbonil)-N-(piridin-2-¡l)amino] .^^^^^^?O^IU^Jt é^f 'mtf&i®¡á ^^^ÜV.^^^^^^^^ butanal, KN(TMS)2, DMF; (e) HCI/dio ano 4 N; (f) ciciohexeno, 10% Pd/C, 2-propanol; (g) LiOH, THF, H20, después acidificación. El ácido carboxílico del compuesto 11-1 se reduce selectivamente al alcohol correspondiente (II-2) en presencia del éster etílico mediante un procedimiento de dos pasos. El primer paso involucra la formación de un anhídrido mixto, usando un cloroformiato de alquilo, tal como cloroformiato de etilo, en presencia de una base de trialquilamina, generalmente N-metilmorfolina (NMM). La reacción usualmente se realiza en un solvente aprótico polar, por ejemplo THF. El anhídrido mixto generalmente no es aislado, en su lugar se hace reaccionar in situ con un agente reductor adecuado, preferiblemente borohidruro de sodio (NaBH4). Cuando se usa NaBH4 como el agente reductor, se requiere un cosolvente como MeOH o EtOH para solubilizar NaBH4. El alcohol II-2 se convierte al bromuro II-3 mediante reacción con tetrabromuro de carbono (CBr4) en presencia de trifenilfosfina (PPh3), de conformidad con el método general de Downie (Chem. Ind. 1966, 900). Varios métodos adicionales están disponibles para la conversión de un alcohol al haiogenuro correspondiente, y están publicados en volúmenes de referencia estándares, como "Compendium of Organic Synthetic Methods" (publicado por Wiley-lnterscience). El bromuro II-3 reacciona con un trialquil o triarilfosfina, por ejemplo trifenilfosfina en un solvente adecuado, como acetonitrilo, para dar la sal de Wittig II-4. En la reacción con una base adecuada y un aldehido adecuado, por ejemplo 4-[N-(ter-butoxicarbonil)-N-(piridin-2-il)amino]butanal, II-4 reacciona en una jj ?sygg ^^Btó^g^8j3fc reacción de Witting bien conocida para dar una oleofina 11-5. En el caso presente, la conversión de 11-4 a 11-5 se logra de manera óptima de conformidad con un procedimiento general descrito por Evans (J. Am. Chem. Soc. 1992, 114, 9434). El grupo protector ter-butoxicarbonilo en II-5 se elimina bajo condiciones acidas, por ejemplo HCl 4 N en 1 ,4-dioxano o TFA en CH2CI2, para dar II-6. Las condiciones para la remoción del grupo protector ter-butoxicarbonilo ya se conoce por los expertos en la técnica, y diversos métodos útiles se describen en volúmenes de referencia estándar como Greene "Protective Groups in Organic Synthesis". La porción de olefina y la porción N-óxido de II-6 se reducen de manera simultánea usando condiciones de hidrogenación en transferencia para dar II-7. Típicamente, esta reacción está mediada por un catalizador de paladio, preferiblemente metal de paladio sobre carbono activado, y ocurre en un solvente inerte, por ejemplo metanol, etanol, o 2-propanol. Ciciohexeno, 1 ,4-ciclohexadieno, ácido fórmico, y sales de ácido fórmico, como formiato de potasio o formiato de amonio, se usan comúnmente como reactivo de transferencia de hidrógeno en este tipo de reacción. El éster etílico de II-7 se hidroliza como se describió en el esquema I para dar el ácido carboxílico II-8. Los reactivos de acoplamiento de amida como se usan en la presente denotan reactivos que pueden usarse para formar enlaces péptidos. Los métodos típicos de acoplamiento emplean carbodiimidas, anhídridos activados y esteres y halogenuros de acilo. Los reactivos como EDC, DCC, DPPA, reactivo BOP, HOBt, N-hid Iro^>xl*s - uccinimida y cloruro de oxalilo son típicos. Los métodos de acoplamiento para formar enlaces péptidos generalmente ya se conocen en la técnica. Los métodos de síntesis de péptidos se establecen en general por Bodansky et al., THE PRACTICE OF PEPTIDE SYNTHESIS, Springer-Verlag, Berlín, 1984, Ali et al en J. Med. Chem., 29, 984 (1986) y J. Med. Chem., 30, 2291 (1987) son generalmente ilustrativos de la técnica y se incorporan a la presente por referencia. Típicamente, la amina o anilina se acopla mediante su grupo amino libre a un substrato adecuado de ácido carboxílico usando un agente de acoplamiento de carbodiimida adecuado, como N.N'dicicIohexil carbodiimida (DCC), opcionalmente en presencia de catalizadores como 1-hidroxibenzotriazol (HOBt) y dimetilaminopiridina (DMAP). También son adecuados otros métodos, como la formación de esteres, anhídridos o halogenuros de ácidos activados, de carboxilo libre de un substrato ácido convenientemente protegido y la reacción subsecuente con la amina libre de una amina protegida adecuadamente, opcionalmente en presencia de una base. Por ejemplo, un Boc-aminoácido un Cbz- ácido amidinobenzoico se trata en un solvente anhidro, como cloruro de metileno o tetrahidrofurano (THF), en presencia de una base, como puede ser N-metil morfolina, DMAP o una trialquilamina, con cloroformiato isobutílico para formar el "anhídrido activado", que subsecuentemente se hace reaccionar con la amina libre de un segundo aminoácido protegido o anilina.

Los intermediario útiles para preparar los compuestos de fórmula (I) en donde R2 es una bencimidazol se describen en Néstor et al, J. Med. Chem. 1984, 27, 320. Los métodos representativos para preparar los compuestos de benzimidazol útiles como intermediarios en la presente invención en la presente invención también son comunes en la técnica y pueden encontrarse, por ejemplo en el documento EP-A 0 381 033. Las sales acidas de adición de los compuestos se preparan de manera estándar en un solvente adecuado para el compuesto original y un exceso de un ácido, como ácido clorhídrico, bromhídrico, flurohídrico, sulfúrico, fosfórico, acético, trifluoroacético, maleico, succínico o metalsulfónico. Algunos compuestos forman sales internas o zwitteriones que pueden ser aceptables. Las sales catiónicas se preparan tratando el compuesto original con un exceso de un reactivo alcalino, como un hidróxido, carbonato o alcóxido, conteniendo el catión adecuado; o con una amina orgánica adecuada. Los cationes como Li+, Na+,. K+, Ca++, Mg++ y NH4+ son ejemplos específicos de cationes presentes en sales farmacéuticamente aceptables. Esta invención también provee una composición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la fórmula (I) y un vehículo farmacéuticamente aceptable. De esta manera, los compuestos de fórmula (I) pueden usarse en la elaboración de un medicamento. Las composiciones farmacéuticas de los compuestos de la fórmula (I) preparadas como se describió anteriormente se pueden formular como soluciones o polvos liofilizados para una administración parenteral. Los polvos pueden ser reconstituidos antes de su uso mediante la adición de un diluyente adecuado u otros vehículos aceptables farmacéuticamente. La formulación líquida puede ser una solución acuosa, isotónica, con regulación de pH. Los ejemplos de 5 diluyentes adecuados son solución salina ¡sotónica normal, solución estándar de dextrosa al 5% en agua o solución con regulación de pH de acetato de sodio o amonio. Tal formulación es especialmente adecuada para la administración parenteral, pero también puede usarse para la administración oral o puede ser envasada en un inhalador o nebulizador de dosis mediada para la insuflación. Puede ser conveniente añadir excipientes como polivinilpirrolidona, gelatina, hidroxicelulosa, acacia, polietilenglicol, manitol, cloruro de sodio o citrato de sodio. Alternativamente, estos compuestos pueden ser encapsulados, formarse en tabletas o prepararse en una emulsión o jarabe para la administración oral. Los vehículos sólidos o líquidos farmacéuticamente aceptables pueden añadirse para mejorar o estabilizar la composición o para facilitar la preparación de la composición. Los vehículos sólidos incluyen almidón, lactosa, sulfato de calcio dihidratado, térra alba, estearato de magnesio o ácido esteárico, talco, pectina, acacia, agar o gelatina. Los vehículos líquidos incluyen jarabe, aceite de cacahuate, aceite de oliva, solución salina y agua. El vehículo también puede incluir un material de liberación sostenida como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo, solo o con una cera. La cantidad del vehículo sólido varía pero preferiblemente se encontrará entre cerca de 20 mg acerca de 1 g por dosis unitaria. Las preparaciones farmacéuticas están elaboradas siguiendo las técnicas convencionales de la farmacia incluyendo el molido, mezclado, granulado y compresión cuando sea necesario, para formas de tableta, o molido, mezclado y llenado para formas en cápsula dura de gelatina. Cuando se usa un vehículo líquido, la preparación estará en forma de un jarabe, elíxir, emulsión o una suspensión acuosa o no acuosa. Tal formulación líquida puede administrarse directamente por vía oral o se puede surtir en una cápsula blanda de gelatina. Para la administración rectal, los compuestos de la presente invención también pueden combinarse con excipientes como manteca de cacao, glicerina, gelatina o polietilenglicoles y moldearse en forma de un supositorio. Los compuestos descritos en la presente son antagonista del receptor de vitronectina, y son útiles para tratar enfermedades en donde la patología subyacente puede atribuirse a un ligando o células que interactúan con el receptor de vitronectina. Por ejemplo, estos compuestos son útiles para el tratamiento de enfermedades en donde la pérdida de la matriz ósea crea patología. Esto es, los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento de la osteoporosis, hiperparatiroidismo, enfermedad de Paget, hipercalcemia o malignidad, lesiones osteolíticas producidas por metástasis de hueso, pérdida de hueso debido a la inmovilización o deficiencia de hormonas sexuales. También se considera que los compuestos de la presente ¡y. invención tienen una utilidad coms^agentes antitumor, antiangiogénicos, antiinflamatorios y antimetastásicos, y son útiles en el tratamiento de ateroesclerosis y restenosis. El compuesto se administra al paciente ya sea de manera oral o parenteral, de manera tal que la concentración del fármaco sea suficiente para inhibir la resorción de hueso, u otra indicación similar. La composición farmacéutica que contiene el compuesto se administra en una dosis oral de cerca de 0.1 a cerca de 50 mg/kg de manera consistente con la condición del paciente. Preferiblemente la dosis oral se encontrará entre 0.5 y 20 mg/kg. Para una terapia aguda, se prefiere la administración parenteral. Una infusión intravenosa del péptido en dextrosa al 5% en agua o solución salina normal, o una formulación similar con excipientes adecuados, es más efectiva, aunque también es útil una inyección intramuscular en bolo. Típicamente, la dosis parenteral se da entre cerca de 0.01 y cerca de 100 mg/kg; preferiblemente entre 0.1 y 20 mg/kg. Los compuestos se administran de una a cuatro veces diarias en un nivel para lograr una dosis diaria total de cerca de 0.4 a cerca de 400 mg/kg/día. Un experto en la técnica puede determinar fácilmente el nivel y los métodos precisos por los cuales los compuestos se administran al comparar el nivel sanguíneo del activo con relación a la concentración requerida para que tenga un efecto terapéutico. La presente invención además provee un método para tratar la osteoporosis o inhibir la pérdida de huesos que comprende la administración gradual o en combinación física de un compuesto de la fórmula (I) y otros inhibidores de la absorción ósea, CQITIO los bisfosfonatos (es decir alendronato), terapia de reemplazo hormonal, anti-estrógenos o calcitonina. Además, esta invención provee un método de tratamiento usando un compuesto de la presente invención y un agente anabólico, como la proteína morfogénica ósea, iproflavona, útil en la prevención de pérdida de hueso y/o para incrementar la masa ósea. Adicionalmente, esta invención provee un método para inhibir el crecimiento tumoral que comprende la administración por etapas o en combinación física de un compuesto de fórmula (I) y un agente antineoplásico. Los compuestos de la clase de análogos de camptotecina, como son topotecan, irinotecan y 9-aminocamptotecina, y complejos de coordinación de platino, como cisplatino, ormaplatino y tetraplatino, son grupos ya bien conocidos de agentes antineoplásicos. Los compuestos de la clase análoga de camptotecina se describen en las patentes de E.U.A. números 5,004,758, 4,604,463, 4,473,692, 4,545,880, 4,342,776, 4,513,138, 4,399,276, publicaciones de solicitud de patente EP números 0 418 099 y 0 088 642, Wani, et al, J. Med. Chem. 1986, 29,2358, Wani, et al, J. Med. Chem. 1980, 23,554, Wani, et al, J. Med. Chem. 1987, 30, 1774, y Nitta, et al, Pro. 14t International Congr. Chemotherapy, 1985, Anticancer Section 1, 28, la descripción completa de cada uno de estos se incorpora en la presente por referencia. El complejo de coordinación de platino, cisplatino, está disponible bajo el nombre comercial Platinol® de Bristol Myers-Squibb Corporation. Las formulaciones útiles para cisplatino se describen en las patentes de E.U.A. números 5,562,925 y 4,310,515, las descripciones completas de las cuales se incorporan en la presente por referencia. En el método para inhibir el crecimiento tumoral que comprende la administración por etapas o en combinación física de un compuesto de 5 fórmula (I) y un agente antineoplásico, el compuesto de coordinación de platino, por ejemplo cisplatino puede ser administrado usando una infusión intravenosa lenta. El vehículo que se prefiere es una solución de dextrosa/salina que contiene manitol. La programación de dosis del compuesto de coordinación de platino puede estar en la base de cerca de 1 a cerca de 500 mg por metro cuadrado (mg/m2) del área de superficie corporal por curso a tratamiento. Las infusiones del compuesto de coordinación de platino pueden darse de una a dos veces semanalmente y los tratamientos semanales pueden repetirse varias veces. Usando un compuesto de la clase de análogos a camptotecina en la administración parenteral, el curso de la terapia generalmente empleada es de cerca de 0.1 a cerca de 300.0 mg/m2 del área de superficie corporal por día durante aproximadamente cinco días consecutivos. Preferiblemente, el curso de la terapia empleada para topotecan es de cerca de 1.0 a cerca de 2.0 mg/m2 del área de superficie corporal por día durante aproximadamente cinco días consecutivos. Preferiblemente el curso de la terapia se repite por lo menos de una vez a cerca de siete días a cerca de un intervalo de veintiocho días. La composición farmacéutica puede estar formulada con el compuesto de la fórmula (I) y el agente antineoplásico en el mismo í?T?«l^^fefe^titff'?¿tT contenedor, pero la formulación en diferentes contenedores se prefiere. Cuando se provee ambos agentes en forma de solución, pueden estar contenidos en un sistema de infusión/inyección para la administración simultánea o en una disposición en tándem. 5 Para una administración conveniente del compuesto de la fórmula (I) y el agente antineoplásico al mismo tiempo o en tiempos diferentes, se prepara un equipo, que comprende, un solo contenedor como una caja, u otro contenedor, botellas individuales, bolsas, frascos u otros contenedores teniendo cada uno una cantidad efectiva del compuesto de la fórmula (I) para la administración parenteral, como se describió anteriormente, y una cantidad efectiva del agente antineoplásico para la administración parenteral, como ya se describió. Tal equipo puede comprender, por ejemplo, ambos agentes farmacéuticos en contenedores separados o en el mismo contenedor, opcionalmente como pastillas liofilizadas, y contenedores de soluciones para reconstitución. Una variación de esto es incluir la solución para reconstitución y la pastilla liofilizada en dos cámaras de un solo contenedor, que pueden mezclarse antes de su uso. Con tal disposición, el agente antineoplásico y el compuesto de la presente invención pueden empacarse de manera separada, por ejemplo en dos contenedores, o liofilizarse juntos como un polvo y proveerse en un solo contenedor. Cuando ambos agentes se proveen en forma de solución, pueden estar contenidos en un sistema de infusión/inyección para la administración simultánea o en una disposición en tándem. Por ejemplo, el ,^.., .. ^^^..^.fe«^^ compuesto de fórmula (I) puede estar en una forma inyectable i.v. o una bolsa de infusión dispuesta en serie, mediante tubería, hacia el agente antineoplásico en una segunda bolsa de infusión. Al usar tal sistema, un paciente puede recibir una inyección o. infusión inicial en bolo del compuesto de la fórmula (I) seguido por una infusión del agente antineoplásico. Para determinar la concentración de compuesto que se requiere para obtener un efecto farmacológico dado, los compuestos se pueden probar en uno de varios ensayos biológicos.

Inhibición de la unión de vitronectina Unión de [3H]-SK&F-107260 a avß3 en fase sólida: Se diluyó avß3 de placenta humana o de plaquetas humanas (0.1-0.3 mg/ml) en un regulador de pH T (que contenía CaCI2 2 mM y 1 % de octilglucósido) con un regulador de pH T que contenía CaCI2 1 mM, MnCI2 1 mM, MgCI2 1 mM (regulador de pH A) y 0.05%> de NaN3, y después se añadió inmediatamente a placas ELISA de 96 cavidades (Corning, New York, NY) a 0.1 ml por cavidad. Se añadió por cavidad 0.1-0.2 µg de vß3. Las placas se incubaron durante la noche a 4°C. En el momento de realizar el experimento, las cavidades se lavaron una vez con un regulador de pH A y se incubaron con 0.1 ml de albúmina de suero de bovino al 3.5% en el mismo regulador de pH durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de la incubación, las cavidades se aspiraron por completo y se lavaron dos veces con 0.2 ml de un regulador de pH A.

Los compuestos se disolvieron en DMSO 100% para dar una solución base 2 mM, que se diluyó con un regulador de pH de unión (Tris-HCl 15 mM (pH 7.4), NaCMOO mM, CaCI2 1 mM, 1 mM MnCI2, MgCI2 1 mM) hasta una concentración final del compuesto de 100 µM. Esta solución se diluye a la concentración final requerida del compuesto. Varias concentraciones de los antagonistas no marcados (0.001-100 µM) se añadieron a las cavidades por triplicado, seguidos por la adición de 5.0 nM de [3H]-SK&F-107260 (65-86 Ci/mmol). Las placas se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de la incubación las cavidades se aspiraron por completo y se lavaron una vez con 0.2 ml de regulador de pH A enfriado con hielo de una manera cavidad por cavidad. Los receptores se solubilizaron con 0.1 ml de SDS 1 % y el [3H]-SK&F-107260 ligado se determinó mediante conteo de escintilación de líquidos con la adición de 3 ml de Ready Safe en un contador de escintilación de líquidos Beckman LS, con un 40% de eficiencia. La unión no específica de [3H]-SK&F-107260 se determinó en presencia de 2 µM SK&F-107260 y fue consistentemente menor del 1 % de la entrada total de radioligando. La IC50 (concentración del antagonista para inhibir al 50% de unión de [3H]-SK&F-107260) se determinó mediante una rutina de ajuste de curva no lineal de mínimos cuadrados que se modificó del programa LUNDON-2. La K¡ (constante de disociación del antagonista) se calculó de conformidad con la ecuación =\C50/(1 +UKÜ), en donde L y Kd fueron la concentración y la constante de disociación de [3H]-SK&F-107260, respectivamente. Los compuestos de la presente invención inhibieron la unión de vitronectina con SK&F-107260 en una escala de concentración de cerca de 2.0-0.2 micromolar. Los compuestos de la presente invención también se pueden probar in vitro e in vivo para determinar la resorción de hueso en pruebas estándares en la técnica para evaluar la inhibición de la formación de hueso, como la prueba de formación de hoyo descrita en el documento EP 528,587, que también puede realizarse usando osteoclastos humanos en lugar de osteoclastos de rata, y el modelo de rata ovarectomizada, descrita por Wronski et al., Cells and Materials 1991 , Sup. 1 ,69-74.

Prueba de migración de células de músculo liso vascular Se usaron células de músculo liso aórtico de rata o humano. La migración celular se monitoreó en una cámara de cultivo celular Transwell usando una membrana de policarbonato con poro de 8 um (Costar). La superficie inferior del filtro se recubrió con vitronectina. Se suspendieron células en DMEM complementado con albúmina de suero bovino al 0.2% en una concentración de 2.5-5.0 X 106 células/ml, y se les dio un tratamiento previo con el compuesto de prueba en diversas concentraciones durante 20 minutos a 20°C. Se usó como control el solvente solo. Se colocó 0.2 ml de la suspensión de células en el compartimento superior de la cámara. El á¡>isfa«^^^--» 3f ffj^ compartimento inferior contenía 0.6 ml de DMEM complementado con albúmina de suero bovino al 0.2%. Se llevó a cabo la incubación a 37°C en una atmósfera de aire 95% / CO2 5% de durante 24 horas. Después de la incubación, las células que no migraron sobre la superficie superior del filtro 5 se retiraron mediante raspado suave. El filtro entonces se fijó en metanol y se tino con tinción de Giemsa al 10%. La migración se midió ya sea por a) conteo del número de células que habían migrado a la superficie inferior del filtro o por b) extracción de las células teñidas con ácido acético al 10% seguido por la determinación de la absorbancia 600 nM. 10 Modelos de rata tiroparatiroidoctamizada Cada grupo experimental consiste en 5 ó 6 ratas macho adultas Sprague-Dawley (con un peso corporal de 250 a 400 g). Las ratas se tiroparatiroidectomizaron (por el vendedor, Taconic Farms) 7 días antes de su uso. Todas las ratas recibieron una dosis de reemplazo de tiroxina cada 3 días. Al recibir las ratas, se midieron los niveles de calcio ionizado circulante en la sangre total inmediatamente después de ser extraída mediante venopunción de la cola en tubos heparinizados. Se incluyeron las ratas que presentaron un nivel de Ca ionizado (medido con un analizador de pH de calcio modelo 634 de Ciba-Corning) <1.2 mM/L. Cada rata se acondicionó con un catéter interno venoso y arterial para el suministro del material de prueba y para tomar las muestras sanguíneas, respectivamente. Entonces las ratas se pusieron en una dieta de alimento libre de calcio y agua desionizada. Los niveles básales de Ca se midieron y a cada rata se administró un vehículo de control o péptido 1-34 de hormona- paratiroidea humana (hPTH1-34, dosis 1.25 ug/kg/h en solución salina/albúmina de suero de bovino al 0.1 %, Bachem, Ca) o una mezcla de hPTH1-34 y material de prueba, mediante una 5 infusión intravenosa continua mediante el catéter venoso, usando una bomba de jeringa externa. La respuesta calcémica de cada rata se midió en intervalos de dos horas durante el período de infusión de 6 a 8 horas.

Pruebas de resorción y adhesión de osteoclastos humanos 10 Se han desarrollado y estandarizado pruebas de resorción de hoyos y adhesión usando osteoclastos humanas normales derivados de tejido de ostoclastoma. La prueba 1 se llevó a cabo para la medición de los volúmenes de hoyos de osteoclasto mediante microscopía láser confocal. La prueba 2 se desarrolló como un tamiz de rendimiento superior, en donde los 15 fragmentos de colágeno (liberados durante la resorción) se midieron mediante ELISA competitiva.

Prueba 1 (usando microscopía de láser confocal) Alícuotas de suspensiones de células derivadas de 20 osteoclastoma humano se retiraron de almacenamiento en nitrógeno líquido, se calentaron rápidamente a 37°C y se lavaron 1x en un medio RPM 1-1640 por centrifugación (1000 rpm, 5 minutos a 4°C).

El medio se aspiró y reemplazó con anticuerpo anti-HLA-DR de murino después se diluyó 1 :3 en un medio RPMI-1640. La suspensión se incubó durante 30 minutos sobre hielo y se mezcló frecuentemente. Las células se lavaron x2 con RPMI-1640 frío seguido por centrifugación (1000 rpm, 5 minutos a 4°C) y las células entonces se transfirieron a un tubo de centrifugado estéril de 15 ml. Se contó el número de células mononucleares en una cámara de conteo Neubauer mejorada. Suficientes perlas magnéticas (5/célula mononuclear), recubiertas con anti- IgG de ratón de cabra (Dynal, Great Neck, NY) se retiraron de su recipiente de almacenamiento y se colocaron en 5 ml de medio nuevo (esto elimina el conservador tóxico de azida). El medio se retiró inmovilizando las perlas sobre un imán y se reemplazó con medio nuevo. Se mezclaron las perlas con las células y la suspensión se incuba durante 30 minutos sobre hielo. La suspensión se mezcló frecuentemente. Las células recubiertas con perlas se inmovilizan sobre un imán y las células remanentes (fracción rica en osteoclastos) se decantaron en un tubo de centrifugado estéril de 50 ml. Se añadió medio nuevo a las células recubiertas con perlas para sacar cualesquiera osteoclastos atrapados. Este procedimiento de lavado se repitió x10. Las células recubiertas con perlas se desecharon. Los osteoclastos viables se contaron en una cámara de conteo, usando diacetato de fluoresceína para marcar las células vivas. Una pipeta de Pasteur de plástico desechable de calibre grande se usó para añadir la muestra a la cámara. Los osteoclastos se formaron en pellas por centrifugación y la densidad se ajustó al valor adecuado ei? un medio EMEM (el número de 5 osteoclastos es variable de un tumor a otro), se complementó con suero de becerro fetal al 10% y 1.7 g/litro de bicarbonato de sodio. Alícuotas de 3 ml de la suspensión celular (por compuesto de tratamiento) se descantaron en tubos de centrifugado de 15 ml. Las células se formaron en pellas por centrifugación. 10 A cada tubo, se añadió 3 ml del compuesto de tratamiento apropiado (diluido a 50 uM en el medio EMEM). También se incluye controles adecuados de vehículo, un control positivo (anticuerpo monoclonal de murino anti-receptor de vitronectina [87MEM1] diluido a 100 ug/ml) y un control de isotipo (lgG2a diluido a 100 ug/ml). Las muestras se incubaron a 37°C durante 15 30 minutos. Se sembraron alícuotas de 0.5 ml de las células sobre cortes de destina estéril en una placa de 48 cavidades y se incubaron a 37°C durante 2 horas. Cada tratamiento se tamizó por cuadruplicado. Los cortes se lavaron en seis cambios de PBS caliente (10 20 ml/cavidad en una placa de seis cavidades) y posteriormente se colocaron en un medio nuevo que contenía el compuesto de tratamiento o muestras de control. Las muestras se incuban a 37°C durante 48 horas. a*«i^HS^^^E^^^^MÍ^aiM^ ^^^haati^^fca^&a^' Procedimiento de fosfatasa acida resistente a tartrato (TRAP) (tinción selectiva para células del linaje de osteoclastos) Los cortes de hueso que contienen los osteoclastos adheridos se lavan en una solución salina con regulación de pH de fosfato y se fijaron en glutaraldehído al 2% (en cacodilato de sodio 0.2 M) durante 5 minutos. Entonces se lavaron en agua y se incubaron durante 4 minutos en un regulador de pH TRAP a 37°C (0.5 mg/ml naftol fosfato AS-BI disuelto en N,N-dimetilformam¡da y se mezclaron con regulador de pH de citrato 0.25 M (pH 4.5), conteniendo 10 mM de tartrato de sodio. Después de un lavado en agua fría, los cortes se sumergieron en un regulador de pH de acetato frío (0.1 M, pH 6.2) conteniendo 1 mg/ml de granate rojo rápido y se incubaron a 4°C durante 4 minutos. Se aspiró el regulador de pH en exceso, y los cortes se secaron al aire después de un lavado en agua. Los osteoclastos positivos a TRAP (precipitado rojo ladrillo/púrpura) se contaron mediante microscopía de campo brillante y se eliminaron entonces de la superficie de la dentina por tratamiento con sonido. Los volúmenes de hoyo se determinaron usando el microscopio con focal Nikon/Lasertec 1LM21W.

Prueba 2 (usando lectura de ELISA) Los osteoclastos humanos se enriquecieron y prepararon para una clasificación de compuestos como se describió en los 9 pasos iniciales yg ui& xM para la prueba 1. Por razones de claridad, estos pasos se repiten a continuación. r <> Alícuotas de suspensiones de células derivadas de osteoclastoma humano se retiraron de almacenamiento en nitrógeno líquido, 5 se calentaron rápidamente a 37°C y se lavaron 1x en un medio RPM 1-1640 por centrifugación (1000 rpm, 5 minutos a 4°C). El medio se aspiró y reemplazó con anticuerpo anti-HLA-DR de murino después se diluyó 1 :3 en un medio RPMI-1640. La suspensión se incubó durante 30 minutos sobre hielo y se mezcló frecuentemente. 10 Las células se lavaron x2 con RPMI-1640 frío seguido por centrifugación (1000 rpm, 5 minutos a 4°C) y las células entonces se transfirieron a un tubo de centrifugado estéril de 15 ml. Se contó el número de células mononucleares en una cámara de conteo Neubauer mejorada. Suficientes perlas magnéticas (5/célula mononuclear), recubiertas con anti- IgG de ratón de cabra (Dynal, Great Neck, NY) se retiraron de su recipiente de almacenamiento y se colocaron en 5 ml de medio nuevo (esto elimina el conservador tóxico de azida). El medio se retiró inmovilizando las perlas sobre un imán y se reemplazó con medio nuevo. Se mezclaron las perlas con las células y la suspensión se 20 incuba durante 30 minutos sobre hielo. La suspensión se mezcló frecuentemente. ^.a^.^iA^^^E^Ag.^^A ^ Se añadió medio nuevo a las células recubiertas con perlas para 5 sacar cualesquiera osteoclastos atrapados. Este procedimiento de lavado se repitió x10. Las células recubiertas con perlas se desecharon. Los osteoclastos viables se contaron en una cámara de conteo, usando diacetato de fluoresceína para marcar las células vivas. Una pipeta de Pasteur de plástico desechable de calibre grande se usó para añadir la 0 muestra a la cámara. Los osteoclastos se formaron en pellas por centrifugación y la densidad se ajustó al valor adecuado en un medio EMEM (el número de osteoclastos es variable de un tumor a otro), se complementó con suero de becerro fetal al 10% y 1.7 g/litro de bicarbonato de sodio. 5 S diferencia del método descrito anteriormente en la prueba 1 , los compuestos se tamizan en 4 dosis para obtener un IC50, como se señala a continuación: Las preparaciones de osteoclastos se incuban previamente durante 30 minutos a 37°C con los compuestos de prueba (4 dosis) o con 0 controles. Posteriormente se sembraron sobre cortes de hueso cortical de bovino en cavidades de una placa de cultivo de tejidos de 48 cavidades y se incubaron durante 2 horas más a 37°C. h"tr?t -M»?MU*l—A*' -ÍÍÉ¿¿-i ¡ ^aaafe.»-^,-.

Los cortes de hueso sé layaron en seis cambios de solución salina con regulación de pH de fosfato (PBS) caliente, para retirar las células no adherentes, y entonces se regresaron a cavidades de una placa de 48 cavidades que contenía compuestos o controles nuevos. 5 La placa de cultivo de tejido entonces se incubó durante 48 horas a 37°C. Los sobrenadantes de cada cavidad se aspiraron en tubos individuales y se clasifican en una prueba ELISA competitiva que detecta el c- telopéptido de colágeno de tipo I que se libera durante el proceso de resorción. Esto es una prueba ELISA disponible comercialmente (Osteometer, Dinamarca) que contienen un anticuerpo de conejo que reacciona específicamente con una secuencia de 8 aminoácidos (Glu-Lys-Ala-His-Asp- Gly-Gly-Arg) que está presente en el telopéptido carboxiterminal de la cadena a1 del colágeno tipo I. Los resultados se expresan como % de inhibición de la resorción comparada con un control de vehículo.

Prueba de adhesión de osteoclastos humanos Los osteoclastos humanos se enriquecieron y prepararon para tamizado de compuestos como se describió anteriormente en los 9 pasos 20 iniciales de la prueba 1. Por razones de claridad, estos pasos se repiten a continuación. Alícuotas de suspensiones de células derivadas de osteoclastoma humano se retiraron de almacenamiento en nitrógeno líquido, ^Mfea flÉÉ^^^^ se calentaron rápidamente a 37°C y se lavaron 1x en un medio RPM 1-1640 por centrifugación (1000 rpm, 5 minutosja 4°C). El medio se aspiró y reemplazó con anticuerpo anti-HLA-DR de murino después se diluyó 1 :3 en un medio RPMI-1640. La suspensión se incubó durante 30 minutos sobre hielo y se mezcló frecuentemente. Las células se lavaron x2 con RPMI-1640 frío seguido por centrifugación (1000 rpm, 5 minutos a 4°C) y las células entonces se transfirieron a un tubo de centrifugado estéril de 15 ml. Se contó el número de células mononucleares en una cámara de conteo Neubauer mejorada. Suficientes perlas magnéticas (5/célula mononuclear), recubiertas con anti- IgG de ratón de cabra (Dynal, Great Neck, NY) se retiraron de su recipiente de almacenamiento y se colocaron en 5 ml de medio nuevo (esto elimina el conservador tóxico de azida). El medio se retiró inmovilizando las perlas sobre un imán y se reemplazó con medio nuevo. Se mezclaron las perlas con las células y la suspensión se incuba durante 30 minutos sobre hielo. La suspensión se mezcló frecuentemente. Las células recubiertas con perlas se inmovilizan sobre un imán y las células remanentes (fracción rica en osteoclastos) se decantaron en un tubo de centrifugado estéril de 50 ml. Se añadió medio nuevo a las células recubiertas con perlas para sacar cualesquiera osteoclastos atrapados. Este procedimiento de lavado se repitió x10. Las células recubiertas con perlas se desecharon.

Los osteoclastos viables se contaron en una cámara de conteo, usando diacetato de fluoresceína para marcar las células vivas. Una pipeta de Pasteur de plástico desechable de calibre grande se usó para añadir la muestra a la cámara. Los osteoclastos se formaron en pellas por centrifugación y la densidad se ajustó al valor adecuado en un medio EMEM (el número de osteoclastos es variable de un tumor a otro), se complementó con suero de becerro fetal al 10% y 1.7 g/litro de bicarbonato de sodio. Los osteoclastos derivados de osteoclastoma se incubaron previamente con compuesto (4 dosis) o controles a 37°C durante 30 minutos. Las células entonces se sembraron sobre portaobjetos recubiertos con osteopontina (osteopontina humana o de rata, 2.5 ug/ml) y se incubaron durante 2 horas a 37°C. Las células no adherentes se eliminaron lavando los portaobjetos vigorosamente en una solución salina con regulación de pH de fosfato y las células remanentes en los portaobjetos se fijaron en acetona. Los osteoclastos se tiñeron para fosfatasa acida resistente a tartrato (TRAP), un marcador selectivo para células de este fenotipo (véase los pasos del 15 al 17), y se contaron por microscopía óptica. Los resultados se expresaron como % de inhibición de la adhesión en comparación con el control de vehículo.

Prueba de adhesión celular Células y cultivo celular Se obtuvieron células de riñon embriónico de humano (células HEK293) de ATCC (catálogo N° CRL 1573). Las células se cultivaron en un 5 medio esencial mínimo de Earl (EMEM) que contenía sales de Earl, 10% de suero de bovino fetal, 1% de glutamina y 1% de penicilinsteptomicina.

Construcciones y transfecciones Un fragmento de EcoRI-Knpl de 3.2 kb de la subunidad av y un fragmento de Xbal-Xhol de 2.4 kb de la subunidad ß3 se insertaron en los puntos de clonación EcoRI - EcoRV del vector pCDN (Aiyar y otros, 1994) que contenía un promotor CMV y un marcador G418 a elegir, por unión de extremos rasurados. Para una expresión estable, se electrotransformaron células 80 x 106 HEK 293 con construcciones av+ß3 (20 µg de ADN de cada subunidad) utilizando un Pulsor de Genes (Hensley y otros, 1994) y se colocaron en placas de 100 mm (5x105 células/placa). Después de 48 horas, se complementó el medio de cultivo con 450 µg/ml de geneticina (sulfato de G418, GIBCO-BRL, Bethesda. MD). Las células se mantuvieron en el medio de selección hasta que las colonias fueron lo suficientemente grandes para probarse. -uAJaá?i^^^ssaíi^^ Análisis inmunocitoquímico de células transfectadas Para determinar si los transfectantes HEK 293 expresaron el receptor de vitronectina, las células se inmovilizaron en portaobjetos de vidrio de microscopio por centrifugación, se colocaron en acetona por dos minutos a temperatura ambiente y se secaron con aire. Se demostró reactividad específica con 23C6, un anticuerpo monoclonal específico para el complejo avß3 utilizando un método de inmunofluorescencia indirecto estándar.

Estudios de adhesión celular Se prerrecubrieron placas ELISA de 96 cavidades Corning durante la noche a 4°C con 0.1 ml de vitronectina humana (0.2 µg/ml en un medio de RPMI). Al momento del experimento, las placas se lavaron una vez con un medio de RPMI y se bloquearon con 3.5% de BSA en un medio de RPMI durante 1 hora a temperatura ambiente. Las 293 células transfectadas se resuspendieron en un medio de RPMI, complementado con 20 mM de Hepes, pH 7.4 y 0.1 % de BSA a una densidad de 0.5 x 106 células/ml. 0.1 ml de suspensión celular se agregó a cada cavidad y se incubó durante 1 hora a 37°C. en presencia o ausencia de varios antagonistas de avß3. Después de la incubación, se agregaron 0.025 ml de una solución de formaldehído al 10%, pH 7.4 y las células se colocaron a temperatura ambiente durante 10 minutos. Las placas se lavaron 3 veces con 0.2 ml de un medio de RPMI y las células adherentes se tiñeron con 0.1 ml de azul de toluidina al 0.5% durante 20 minutos a temperatura ambiente. Se eliminó el exceso de pintura lavando rniT MÜÜñr- - i Tptf ^-— *— - — - ^ -**-^^^ abundantemente con agua deionizada. El azul de toluidina incorporado a las células se eluyó por la adición de 0.1 ml de etanol al 50% que contenía 50 mM de HCl. La adición celular se cuantificó a una densidad óptica de 600 nm en un lector de placas de microtitulación (Titerek Multiskan MC, Sterling, VA).

El receptor avßs de vitronectina se purificó de placenta humana. La preparación de receptor se diluyó con 50 mM de Tris-HCl, pH 7.5, 100 mM de NaCI, 1 mM de Cacl2, 1 mM de MnCI , 1 mM de MgCI2 (regulador de pH A) y se agregó inmediatamente a las placas ELISA de 96 cavidades a 0.1 ml por cavidad. Se agregaron de 0.1 a 0.2 µg de avß3 por cavidad. Las placas se incubaron toda la noche a 4°C. En el momento del experimento, las cavidades se lavaron una vez con regulador de pH A y se incubaron con 0.1 ml de albúmina de suero de bovino a 3.5% en el mismo regulador de pH durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de la incubación las cavidades se aspiraron completamente y se lavaron 2 veces con 0.2 ml de regulador de pH A. En una prueba de competencia [3H]-SK&F-107260, se agregaron varias concentraciones de antagonistas no marcados (de 0.001 a 100 µM) a las cavidades, seguido por la adición de 5.0 nM de [3H]-SK&F-107260. Las placas se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de la incubación las cavidades se aspiraron completamente y se lavaron una vez con 0.2 ml de regulador de pH A helado, cavidad a cavidad. Los receptores se ^|¡?^ solubilizaron con 0.1 ml de SDS al 1% y el [3H]-SK&F-107260 enlazado se determinó por escintilación líquida contando la adición de 3 ml de Ready Safe en un contador de escintilación líquida Beckman LS 6800, con 40% de eficacia. La unión no específica de [3H]-SK&F-107260 se deteminó en presencia de 2 µM de SK&F-107260 y fue determinantemente menor que 1 % de la entrada total de radioligando. El IC5o (concentración del antagonista para inhibir el 50% de la unión de [3H]-SK&F-107260) se determinó por una rutina de ajuste de curva por mínimos cuadrados no lineal, que se modificó del programa LUNDON-2. La K, (constante de disociación del antagonista) se calculó de conformidad con la ecuación de Cheng y Prusoff: K, = ICso/(1 + L/Kd), en la cual L y Kd son las constantes de concentración y disociación de [3H]-SK&F-107260, respectivamente.

Inhibición de la unión de GPIIb-llla mediada por RGD Purificación de GPIIb-llla 10 unidades de plaquetas humanas lavadas caducas (obtenidas de la cruz roja) se usaron agitando suavemente en octilglucósido al 3%, 20mM de Tris-HCl, pH 7.4, 140 mM de NaCI, 2 mM de CaCI2 a 4°C durante 2 horas. El lisato se centrifugó a 100,000 g durante 1 hora. El sobrenadante obtenido se aplicó a 5 ml de columna de sefarosa de lentilectina 4B (Labs. E.Y) preequilibrada con 20 mM de Tris-HCl, pH 7.4, 100 mM de NaCI, 2 mM de CaCI2, octilglucósido al 1 % (regulador de pH A). Después de 2 horas de incubación, la columna se lavó con 50 ml de regulador de pH A frío. El GPIIb- Illa retenido por lectina se eluyó con regulador de pH A que contenía dextrosa al 10%. Todos los procedimientos se realizaron a 4°C. El GPIIb-llla obtenido fue >95% puro como lo muestra la electrofóresis de gel de poliacrilamida de SDS.

Incorporación de GPIIb-llla en liposomas Una mezcla de fosfatidilserina (70%) y fosfatidilcolina (30%) (AvantiPolar Lipids) se secó en las paredes de un tubo de vidrio bajo una corriente de nitrógeno. El GPIIb-llla purificado se diluyó a una concentración final de 0.5 mg/ml y se mezcló con los fosfolípidos en una proteína: relación de fosfolípidos de 1 :3 (p:p). La mezcla fue resuspendida y sonicada en un sonicador durante 5 minutos. Después la mezcla se sometió a diálisis durante la noche utilizando un entubado de diálisis de corte de peso molecular de 12,000 a 14,000 contra un exceso de 1000 veces de 50 mM de Tris-HCl, pH 7.4, 100 mM de NaCI, 2 mM de CaCI2 (con 2 cambios). Los liposomas que contenían GPIIb-llla se centrifugaron a 12,000 g durante 15 minutos y se resuspendieron en el regulador de pH de diálisis a una concentración proteínica final de aproximadamente 1 mg/ml. Los liposomas se almacenaron a -70C lo necesario.

Unión competitiva a GPIIb-llla La unión al receptor fibrógeno (GPIIb-llla) se probó por medio de un método de unión competitiva indirecta utilizando [3H]-SK&F-107260 como un ligante tipo RGD. La prueba de uniórµßlr realizó en un conjunto de placas de filtración de 96 cavidades (Millipore Corporation, Bedford, MA) utilizando membranas hidrofílicas de duraporo de 0.22 um. Las cavidades se prerrecubrieron con 0.2 ml de 10 µg/ml de polilisina (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO.) a temperatura ambiente durante 1 hora para bloquear la unión no específica. Varias concentraciones de benzazepina no marcadas se agregaron a las cavidades por cuadruplicado. Se aplicó [3H]-SK&F-107260 a cada cavidad a una concentración final de 4.5 nM, seguido por la adición de 1 µg de los liposomas que contenían GPIIb-llla purificados de plaqueta. Las mezclas se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente. El [3H]-SK&F-107260 enlazado a GPIIb-llla se separó de los no enlazados por medio de filtración utilizando un colector de filtración Millipore, seguido de un lavado con regulador de pH helado (dos veces, cada 0.2 ml). La radioactividad ligada restante en los filtros se contó en 1.5 ml de Ready Solve (Beckman Instruments, Fullerton, CA) en un Contador de Escintilación Líquida Beckman (Modelo LS6800), con 40% de eficacia. La unión no específica se determinó en presencia de 2 µM de SK&F-107260 no marcado y fue determinantemente menor que 0-14% de la radioactividad total agregada a las muestras. Todos los puntos de los datos son el promedio de las determinaciones por cuadruplicado. Los datos de unión de competencia se analizaron por medio de un procedimiento de ajuste de curva por mínimos cuadrados no lineal. Este método provee el IC50 de los antagonistas (concentración del antagonista que inhibe la unión específica de [3H]-SK&F- 07260 en un 50% a equilibro). El IC50 está relacionado con la constante de disociación de equilibrio (Ki) del antagonista basada en la ecuación de Cheng y Prusoff: Ki=IC50/(1+L/Kd), en la cual L es la concentración de [3H]-SK&F-107260 utilizada en la prueba de 5 unión competitiva (4.5 nM), y K es la constante de disociación de [3H]-SK&F- 107260 que es 4.5 nM como se determina por el análisis Scarchard. Los compuestos preferidos de esta invención tienen una afinidad al receptor de vitronectina en relación con el receptor de fibrinógeno mayor que 10:1. Los compuestos más preferidos tienen una relación de actividad 10 mayor que 100:1. La eficacia de los compuestos de la fórmula (I) por sí solos o en combinación con un agente antineoplástico puede determinarse utilizando varios modelos de tumores en ratones transplantables. Véase patente de E.U.A. Nos. 5,004,758 y 5,633,016 para más 15 detalles de estos modelos. Los siguientes ejemplos no pretenden limitar el campo de esta invención, sino que se proveen para ilustrar cómo se hacen y utilizan los compuestos de esta invención. Muchas otras modalidades serán fácilmente evidentes para los expertos en la técnica. 20 Generalidades Se registraron espectros (1H NMR) de resonancia magnética nuclear protónica a 300 MHz, y se reportaron cambios químicos en partes por millón (d) campo abajo del tetrametilsilano estándar interno (TMS). Las abreviaturas para los datos de NMR son como se muestra a continuación: S=singulete, d=doblete, t=triplete, q=cuadriplete, m=multiplete, dd=doblete de dobletes, dt=doblete de tripletes, app=aparente, br=ancha. J indica la constante de acoplamiento de NMR medida en Hertz. CDCI3 es deuteriocloroformo, DMSO-dß es hexadeuteriodimetilsulfóxido, y CD3OD es tetradeuteriometanol. Los espectros de masa se obtuvieron utilizando técnicas de ionización de electroaspersión (ES). Quantitative Technologies Inc., Whitehouse, NJ. realizó análisis elementales Se obtuvieron puntos de fusión en un aparato de punto de fusión de Thomas-Hoover y no están corregidos. Todas las temperaturas se reportan en grados Celsius. Se utilizaron placas de capa delgada de Gel de Sílice Analtech GF y Gel de Sílice E. Merck 60 F-254 para cromatografía de capa delgada. Se realizó cromatografía instantánea en gel de sílice E. Merck Kieselgel 60 (trama de 230-400). Se realizaron análisis CLAR analíticos y de preparación en cromatógrafos Beckman. ODS se refiere a un soporte cromatográf ico de gel de sílice derivado de octadecilsilil. YMC ODS-AQ® es un soporte cromatográfico ODS y es una marca registrada de YMC Co. Ltd., Kyoto, Japón. PRP-1® es un soporte cromatográfico polimérico (estirendivilbenceno), y es una marca registrada de Hamilton Co., Reno, Nevada. C-18 Mega Bond Elut® es una columna de extracción de fase sólida que contiene un sorbente de sílice ligado a octadecilo y es una marca registrada de Varian Associates, Sunnyvale, California. Celite® es un auxiliar de filtro compuesto de sílice diatomacio lavado con ácido, y es una marca registrada de Manville Corp., Denver, Colorado.

PREPARACIÓN 1 Preparación de diclorhidrato de 2-r(2-amino-1-etil)amino1piridina a) 2-r[2-(Ter-butoxicarbonil)amino-1 -etiHaminol-l -oxopiridina Una mezcla de N-boc-etilendiamina (5.83 g, 36.39 mmoles), clorhidrato de N-óxido de 2,cloropiridina-N-oxido (7.25 g, g, 43.67 mmoles), NaHCO3 (15.29 g, 182 mmoles), y alcohol ter-amílico (36 ml) se calentó a reflujo. Después de 47 horas, la mezcla café oscuro se enfrió, se diluyó con CH2CI2(100 ml), y se filtró a succión. El filtrato se concentró y el residuo se reconcentró de tolueno. La cromatografía de gel de sílice (10% de MeOH/CH2CI2) dio el compuesto del título (8.23 g, 89%) como un sólido amarillo: 1H NMR (250 MHz, CDCI3) d 8.16 (dd, J=6.5, 1.3Hz) 1 H), 7.05-7.30 (m, 2H), 6.68 (br, d, J=8.6 Hz, 1 H), 6.50-6.65 (m, 1 H), 5.70-5.59 (m, 1 H), 3.25-3.60 (m, 4H), 1.44 (s, 9H); MS (ES) m/e 254 (M + H)+. b) 2-[[2-(Ter-butoxicarbonil)amino-1 -etipaminolpiridina. Una mezcla de 2-[[2-(ter-butoxicarbon¡l)amino-1-etil]amino]-1-oxopiridina (7.00 g, 27.64 mmoles), 10% Pd/C (5.88 g, 5.53 mmoles), ciciohexeno (28 ml), 276.4 mmoles) e ¡sopropanol (110 ml) se calentó a reflujo. Después de 17 horas, la reacción se filtró con celite®, y el filtrato se S^s^^^^ ^ ^^^i ?^^^, concentró. El residuo amarillo se reconcentró de tolueno, después se cromatografió en gel de sílice (5% derMeOH/CHCI3). El compuesto del título (5.09 g, 78%) se obtuvo como un aceite amarillo: 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 8.05-8.12 (m, 1 H), 7.37-7.46 (m, 1 H), 6.53-6.61 (m, 1 H), 6.41 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 5.12 (br, s, 1 H), 4.86 (br, s, 1 H), 3.26-3.51 (m, 4H), 1.44 (s, 9H9; MS (ES) m/e 238 (M + H)+. c) Diclorhidrato de 2-f(2-Am¡no-1-etil)amino1piridina Se agregaron 4N de HCI/dioxano (54 ml) en una corriente a una solución de 2-[[2-(ter-butoxicarbonil)amino-1-etil]am¡no]piridina (5.09 g, 21.45 mmoles) en CH2CL2 anhidro (54 ml) a 0°C bajo argón, después la mezcla se calentó a temperatura ambiente. La mezcla se enfrió a 0°C y se filtró por succión. El sólido se lavó abundantemente con Et2O anhidro y se secó a alto vacío a 40°C para proveer el compuesto del título (4.27 g, 95%) como un sólido color marfil, en cierto modo higroscópico: 1H NMR (400 MHz, CD3OD) d 7.99-8.07 (m, 1 H), 7.92-7.98 (m, 1 H), 7.19 (d, J=9.1 Hz, 1 H), 6.98-7.04 (m, 1 H), 3.76 (t, J= 6.2, 2H), 3.27 (t, J=6.2 Hz, 2H, parcialmente MS (ES) m/e 138 (M + H)+. ^fig^M ^ftft^^ ^^^^^^^^^^H PREPARACIÓN 2 Preparación de clorhidrato de 2-Tí3-amino-1-propN)amino1piridina a) 2íf3-(Ter-butox¡carbonil)am?no-1 -propillaminol-l -oxopiridina 5 De conformidad con el procedimiento de la preparación 1 (a), excepto porque se sustituyó N-Boc-propilendiamina (3.33 g, 20 mmoles) con N-Boc-et?lend¡amina, se preparó el compuesto del título (4.90 g, 92%): MS (ES) m/e 268 (M + H)+. b) 2-ff3-(Ter-butox¡carbonil)amino-1 -propillaminolpiridina De conformidad con el procedimiento de la preparación 1 (b), excepto porque se sustituyó 2-[[3-(ter-butoxicarbonil)amino-1-propil]amino]-1- oxopiridina (4.90 g, 18.3 mmoles) con 2-[[2-(ter-butoxicarbon?l)amino-1- etil]amino]-1 -oxopiridina, se preparó el compuesto del título (3.46 g, 75%): MS (ES) m/e 252 (M + H)+. c) Diclorhidrato de 2-[(3-Amino-1-propil)aminolp?rid?na De conformidad con el procedimiento de la preparación 1 (c), excepto porque se sustituyó 2-[[3-(ter-butoxicarbon?l)amino-1- 20 prop?l]amino]piridina (3.46 g, 13.8 mmoles) con 2-[[-(ter-butoxicarbonil)amino- 1-etil]amino]pirid?na, se preparó el compuesto del título (2.88 g, 93%): MS (ES) m/e 152 (M + H)+. a) 2-rí4-(Ter-butoxicarbonil)amino-1 -butillaminol-1 -oxopiridina 5 De conformidad con el procedimiento de la preparación 1 (a), excepto porque se sustituyó N-Boc-butilendiamina (0.57 ml, 2.98 mmoles) con N-Boc-etilendiamina, se preparó el compuesto del título (0.42 g, 50%): MS (ES) m/e 282 (M + H)+. b) 2-ff4-(ter-butox¡carbonil)amino-1 -butillaminolpiridina De conformidad con el procedimiento de la preparación 1 (b), excepto porque se sustituyó 2-[[4-(ter-butoxicarbonil)amino-1-etil]amino]-1- oxopiridina, (0.88 g, 3.13 mmoles) con 2-[[2-(ter-butoxicarbonil)amino-1- etil]amino]-1 -oxopiridina, se preparó el compuesto del título crudo. Este material se utilizó sin purificación. c) 2-IY4-Amino-1 -butiPaminolpiridina Se trató 2-[[4-(ter-butoxicarbon¡l)amino-1-butil]amino]pir¡d¡na crudo (3.13 mmoles) con TFA (10 ml) en CH2CI2 (10 ml). Después de 2 horas la mezcla se concentró bajo presión reducida. El residuo se tomó en 1.0 N de NaOH (20 ml) y se extrajo con CHCI3 (4 x 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO , se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida para dar el compuesto del título (122 mg, 24%) como un aceite amarillo: MS (ES) m/e 166 (M+H)+.

PREPARACIÓN 4 Preparación de 4-rN-(ter-butoxicarbonil)-N-(piridína-2-il)am¡no1butanal a) N-óxido de 2-[(3-Hídroxi-1-butil)aminolpiridina A una mezcla de 4-amino-1-mino1 -butanol (2.0 ml, 21.7 mmoles), clorhidrato de N-óxido de 2-cloropiridina (3.00 g, g, 18.0 mmoles), NaHCO3 (7.56 g, 90.0 mmoles) y alcohol ter-amílico (22 ml) se calentó a reflujo. Después de 24 horas, la mezcla se enfrió y se filtró, después el filtrato se concentró bajo presión reducida. La cromatografía del gel de sílice (10% de MeOH/CHCI3) dio el compuesto del título (2.08 g, 63%) como un sólido amarillo: MS (ES) m/e 183 (M+H)+. b) N-óxido de 2-[N-(3-h¡droxi-1-butil)-N-(ter-butoxicarboniD-aminolpiridina A una suspensión de N-óxido de 2-[(3-hidroxi-1-butil)amino]piridina (895 mg, 4.91 mmoles) en ter-butanol (5 ml) se agregó dicarbonato de di-ter-butilo (1.18 g, 5.40 mmoles). Después de 30 horas la mezcla se concentró bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (10% de MeOH/CHCI3) para dar el compuesto del título (1.34 g, 97%) como un sólido amarillo: MS (ES) m/e 283 (M+H)+. c) 4-rN-(ter-Butox¡carbon¡l)-N-(pirid¡n-2il)amino1butanal A una solución de DMSO (0.31 ml, 3.54 mmoles) en CH2CI2 (5 ml) a -78°C se agregó cloruro de oxalilo (0.13 ml, 1.77 mmoles) gota a gota. Después de 10 minutos una solución de N-óxido de 2-[N-(3-hidroxi-1-butil)-N- 5 (ter-butoxicarbonil)amino]pir¡dina (500 mg, 1.77 mmoles) en CH2CI2 (5 ml) se agregó gota a gota. Después de 30 minutos, se agregó Et3N (0.81 ml, 5.84 mmoles), y la mezcla se calentó gradualmente a temperatura ambiente. Después de 20 minutos, la mezcla se diluyó con CH2CI2 (20 ml) y se lavó secuencialmente con 10 ml cada H2O, 10% de HCl, H2O, y solución salina. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró bajo presión reducida para dar el compuesto del título (455 mg, 92%) como un aceite incoloro. Esto se utilizó sin purificación: MS (ES) m/e 281 (M+H)+.

PREPARACIÓN 5 15 Preparación de (+)-4-(4-carboxi-1,3-oxazol-2-¡l)-3-fenilbutanoato de etilo a) Ester metílico de serina de (±)-N-(4-Etoxicarbonil-3- fenilbutanoiO A una mezcla de (±) 4-carboxi-3-fenilbutanoato de etilo (1 .00 g, 4.23 mmoles), en DMF seco (20 ml) se agregó HOBt (686 mg, 5.08 mmoles), Et3N (1.77 ml. 12.69 mmoles), y EDC (974 mg, 5.08 mmoles). Después de 30 minutos se agregó el clorhidrato de éster metpilico de L-serína (790 mg, 5.08 mmoles). Después de 48 hr, la mezcla se concentró bajo presión reducida. El * $*&& residuo se tomó en CH2CI2 (50 ml) y se lavó secuencialmente con'iQMnl cada H20, NaHCO3, y H2O saturado. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (EtOAc) para dar el compuesto del título (961 ml, 67%) como un aceite amarillo: MS (ES) m/e 338 (M+H)+. b) (±)-4-(4-metoxicarbonil-1 ,3-oxazolin-2-¡l)-3-fenilbutanoato de etilo Una solución de éster metílico de serina de (±)-N-(4-etoxicarbonil-3-fenilbutanoil) (723 mg, 2.14 mmoles) y reagente Burgess (613 mg, 2.57 mmoles) en THF seco (10 ml) se calentó a reflujo bajo N2. Después de 2 horas la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (50% EtOAc/hexanos) para dar el compuesto del título (420 mg, 61 %) como un aceite incoloro: MS (ES) m/e 320 (M+H)+. c) (±)-4-(4-metoxicarbonil-1 ,3-oxazol-2-il)-3-fenilbutanoato de etilo A una suspensión de CuBr2 (1.17 g, 5.26 mmoles) en (3 x vacío/N2) CH2CI2 (6 ml) degasificado se agregó hexametilenetetramina (737 mg, 5.26 mmoles) después DBU (0.78ml, 5.26 mmoles). Después de 5 minutos, se agregó una solución de (±)-4-(4-metoxicarbonil-1 ,3-oxazolin-2-il)- 3-fenilbutanoato de etilo (420 mg, 1.32 mmoles) en CH2CI2 (2 ml) gota a gota. ^ !^^¡g íg^^j^j^ . t_íllfcií5s?lÉ!i_ái?» -íÉ Después de 6 horas, la mezcla se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice (EtOAc) y el filtrato se concentp iajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (50% EtOAc/hexanos) para dar el compuesto del título (267 mg, 64%) como un sólido blanco: MS (ES) m/e 318 (M+H)+. 5 d) (±)-4-(4-carbox¡-1 ,3-oxazol-2-¡l)-3-fenilbutanoato de etilo Una solución de (±)-4-(4-metoxicarbonil-1 ,3-oxazol-2-il)-3- fenilbutanoato de etilo (267 ml, 0.84 mmoles) y Lil (338 mg, 2.52 mmoles) en piridina (5 ml) se calentó a reflujo. Después de 18 horas la mezcla se enfrió a 10 temperatura ambiente, se vació en 10% de HCl (150 ml), después se extrajo con CH2CI2 (3 x 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO se filtraron y se concentraron para dar el compuesto del título (205 mg, 80%) como un sólido blanco: MS (ES) m/e 304 (M+H)+.

PREPARACIÓN 6 Preparación de bromuro de f2-(3-etoxicarbonil-2-fenilpropii)-1,3-oxazol-4- ¡nmetiltrifenilfosfonio a) (±)-4-(4-hidroximetil-1 ,3-oxazol-2-il)-3-fenilbutanoato de etilo 20 A una solución de (±)-4-(4-carboxi-1 ,3-oxazol-2-il)-3- fenilbutanoato de etilo (500 mg, 1.65 mmoles) en THF seco (8 ml) se agregó 4-metilmorfolina (0.22 ml, 1.99 mmoles) después cloroformato de etilo (0.19 ml, 1.99 mmoles) a 0°C. Después de 10 minutos se agregó NaBH (249 mg, ^fffll^ 6.59 mmoles) de una sola vez, después se agregó MeOH (8 ml) gota a gota. Después de 30 minutos, la mezcla se efifrió con H2O (20 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se 5 cromatografió en gel de sílice (80% EfOAc/hexanos) para dar el compuesto del título (371 mg, 78%) como un aceite amarillo: MS (ES) m/e 290 (M + H)+. b) (±)-4-(4-bromometil-1 ,3-oxazol-2-il)-3-fenilbutanoato de etilo A una solución de (±)-4-(4-hidroximetil-1 ,3-oxazol-2-il)-3- 10 fenilbutanoato de etilo (1.3 g, 4.49 mmoles) en THF seco (20 ml) se agregó PPh3 (1.41 g, 5.39 mmoles) después CBr4 (1.79 g, 5.39 mmoles) a 0°C. Después de 20 minutos, la mezcla se calentó a temperatura ambiente. Después de 2 horas, la mezcla se concentró bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (20% EtOAc/hexanos) para dar el compuesto 15 del título (1.38 g, 87%) como un aceite incoloro: MS (ES) m/e (M + H)+. c) bromuro de [2-(3-etoxicarbonil-2-fen¡lprop¡l)-1 ,3-oxazol-4- ¡rimetiltrifenilfosfonio Una solución de (±)-4-(4-bromometil-1 ,3-oxazol-2-il)-3- 20 fenilbutanoato de etilo (1.0 g, 2.84 mmoles) y PPh3 (745 mg, 2.84 mmoles) en CH3CN (10 ml) seco se calentó a reflujo bajo N2. Después de 3 horas, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. El residuo se trituró con Et2O (10 mL) para dar el compuesto del t" título (1.66 g, 95%) como un polvo ba? fMS(ES) m/e 535 (M+H)+.

EJEMPLO 1 5 Preparación de ácido (±)-3-fenil-4-r4-rfr3-(piridin-2-il)amino-1- propillaminolcarbonip-1.3-oxazol-2-ill butanoico a) (±)-3-fen¡l-4-[4-rrf3-(p¡ridin-2-il)amino-1-propinamino1carbonip- 1 ,3-oxazol-2-¡n butanoato de etilo 10 A una solución de (±)-4-(4-carboxi-1 ,3-oxazol-2-il)-3- fenilbutanoato de etilo (100 mg, 0.33 mmoles) en CH2CI2 (2 mL) se agregó 1 ,1 '-carbonildiimidazol (80 mg, 0.49 mmoles). Después de 2 horas se agregaron Et3N (0.14 mL, 0.98 mmoles) y diclorhidrato de 2-[(3-amino-1- propil)amino]pir¡dina (110 mg, 0.49 mmoles). Después de 4 horas, la mezcla se concentró bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (75% EtOAc/hexano) para dar el compuestos título (131 mg, 91 % mmoles) como un aceite amarillo: MS (ES) m/e 437 (M+H)+. b) Acido (±)-3-fen¡l-4-[4-[rí3-(pirid¡n-2-¡l)amino-1 -propiHaminol- 20 carbonill-1 ,3-oxazol-2-ip butanoico A una solución de (±)-3-fenil-4-[4-[[[3-(pirid¡n-2-íl)amino-1- propil]amino]carbonil]-1 ,3-oxazol-2-il]butanoato de etilo (131 mg, 0.30 mmoles) en 1:1 THF/H2O (10 mL) se agregó 1 N LiOH (0.36 mL, 0.36 mmoles).

Después de 18 horas la mezcla se concenjtr bajo presión reducida. El residuo se disolvió en 20 mL de a un pH 6 utilizando HCl al 10%. La solución turbia se extrajo con CH2CI2 (3 x 75 mL). Los extractos orgánicos se secaron sobre MgSO4, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se trituró con Et20 5ara dar el compuesto del título como un sólido blanco (63 mg, 51%) que se reunió por filtración. MS (ES) m/e 409 (M+H)+. Anal. Caled for C22F24N4O4- 0.75 H2O, 1.5 HCl: C, 55.44, H, 5.71 ; N, 11.75. Encontrado: C, 55.49; H, 5.54; N, 11.63.

EJEMPLO 2 Preparación de ácido (±)-3-fenil-4-r4-rrf3-(piridin-2-il)amino-1- prop¡namino1carbon¡n-1 ,3-oxazol-2-il1 butanoico a) (±)-3-fenil-4-r4-ff[3-(piridin-2-il)amino-1-prop¡namino1carbon¡n-1 ,3-oxazol-2-ill butanoato de etilo De conformidad con le procedimiento del ejemplo 1 (a), excepto porque se sustituyó el diclorhidrato de 2-[(2-am¡no-1-etil)amino]piridina (129 mg, 0.74 mmoles) con diclorhidrato de 2-[(3-amino-1-propil)amino]piridina, se preparó el compuesto del título (157 mg, 76%): MS (ES) m/e 423 (M+H)+. **e ! <Z&mJ&í* yy£.4¿XáS,r^ A una solución de (±)-3-fenil-4-[4-[[[2-(piridin-2-il)amino-1etil]amino]carbonil]-1 ,3-oxazol-2-il]butanoato de etilo (157 mg, 0.37 mmoles) en 1 :1 THF/H2O (4 mL) se agregó 1.§4) de LiOH (0.56 mL, 0.56 mmoles). Después de 24 horas, la mezcla se lavó con Et2O (2 x 2 mL), y el pH de la capa acuosa se ajustó a 6 utilizando HCl al 10%. La solución se cromatografió en una columna de C-18 Mega Bond Elut® (50 mL de H2O después 50mL de CH3CN/H2O al 10%). Las fracciones que contenían el producto se reunieron y liofilizaron para dar el compuesto del título (48 mg, 33%) como un polvo blanco: MS (ES) m/e 395 (M+H)+. Anal. Caled for C2?H22N4O4-0.75 HCl: C, 59.80; H, 5.44; N, 13.28. Encontrado: C, 59.89; H, 5.50; N, 12.98.

EJEMPLO 3 Preparación de ácido (+)-3-fenil-4-r4-rfr4-(piridin-2-il)amino-1- butipaminolcarbonip-1 ,3-oxazol-2-ill butanoico a) (+)-3-fenil-4-|"4-[í[4-(p¡ridin-2-il)amino-1-butillamino1carbonil1-1 ,3-oxazol-2-in butanoato de etilo De conformidad con el procedimiento del ejemplo 1 (a), excepto porque se sustituyó 2-[(4-amino-1-butil)amino]piridina (122 mg, 0.74 mmoles) con diclorhidrato de 2-[(3-amino-1-propil)amino]piridina, se preparó el compuesto del título (197 mg, 89%): MS (ES) m/e 451 (M+H)+. b) Acido (±)-3-fenil-4-í4-^rJÍ4-(pir¡d¡n-2-il)amino-1 -butillaminol- carbon¡p-1 ,3-oxazol-2-ill butanoico A una solución de (±)-3-fenil-4-[4-[[[4-(piridin-2-il)amino-1- butil]amino]carbonil]-1 ,3-oxazol-2-il] butanoato de etilo (197 mg, 0.44 mmoles) 5 en 1:1 THF/H2O (4 mL) se agregó 1.0 N LiOH (0.66 mL, 0.66 mmoles). Después de 24 horas la mezcla se lavó con Et2O (2 x 2 mL), y el pH de la capa acuosa se ajustó a 6 utilizando HCl al 10%. La solución se cromatografió en una columna de C-18 Mega Bond Elut® (50 mL de H2O después 50 mL de CH3CN/H2O al 20%). Las fracciones que contenían el producto se reunieron y 10 liofilizaron para dar el compuesto del título (154 mg, 83%) como un polvo blanco: MS (ES) m/e 423 (M+H)+. Anal. Caled for C23H26N4O4-0.75 H20: c, 63.36; H, 6.36; N, 12.85. encontrado: C, 63.55; H, 6.27; N, 12.50.

EJEMPLO 4 15 Preparación de ácido (±)-3-fenil- -f4-rfr5-(piridin-2-il)amino-1-pent¡n-1 ,3- oxazol-2-in butanoico a) (±)-3-fenil-4-í4-[5-fN-(1-oxopiridin-2-il)N-(ter-butoxicarbonil)- amino1-1-pent¡n-1 ,3-oxazol-2-¡n butanoato de etilo 20 A una solución de 4-[N-(ter-butoxicarbon¡l)-N-(piridin-2- il)amino}butanal (140 mg, 0.5 mmoles) en DMF (5 mL) seco se agregó bromuro de [2-(3-etoxicarbonil-2-fen?lpropil)-1 ,3-oxazol-4-il]met¡ltrifenilfosfonio (369 mg, 0.6 mmoles) después KHMDS (1.2 mL, 0.6 mmoles) gota a gota a ^^^.^£^^.^^^^.. ^..¿ 1^^ ^Ü^ ¿^^ 0°C. Después de 3.5 horas la mezcla se diluyó con H2O y se extrajo con CH2CI2 (3 x 20 mL). Los extractos org nicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de silice (3% de MeOH en 1 :1 EtOAc/CHCI3) para dar el compuesto del título (167 mg, 62%, mezcla de isómeros E/Z) como un aceite amarillo: MS (ES) m/e 536 (M+H)+. b) (±)-3-fenil-4-r4-rrf5-(piridin-2-¡l)am¡no-1 -pentill-1 ,3-oxazol-2-¡n butanoato de etilo (±)-3-fenil-4-[4-[5-[N-(1 -oxopiridin-2-il)N-(ter-butoxicarbonil)amino]-1-pentil]-1 ,3-oxazol-2-il] butanoato de etilo (167 mg, 0.31 mmoles) se disolvió en 4 N de HCl en dioxano (3 mL). Después de 1.5 horas, la mezcla se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en NaHCO3 (20 mL) y se extrajo con CH2CI2 (2 x 20 mL). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y concentraron. El residuo anterior se combinó con Pd/C (33 mg) al 10% y ciciohexeno (0.63 mL, 6.2 mmoles) en isopropanol (5 mL), y la mezcla se calentó a reflujo bajo N2. Después de 18 horas la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de una almohadilla de celite®, después el citrato se concentró bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (5% de MeOH en 1 :1 EtOAc/CHCI3) para dar el compuesto del título (75 mg, 57% de a) como un sólido blanco: MS (ES) m/e 422 (M + H)+. .^^^.•.fe^^^^..^..^^ ^ .. ^^^^^^^¿^^ ^^j^^-J^^i^ ^ ^ ^ c) ácido (±)-3-fenil-4-f4-r5-(piridin-2-¡l)amino-1-pentin-1 ,3-oxazol- 2-¡n butanoico A una solución de (±)-3-fenil-4-[4-[5-(piridin-2-il)am¡no-1-pentil]- 1 ,3-oxazol-2-il]butanoato de etilo (75 mg, 0.18 mmoles) en 1 :1 THF/H2O (2 ml) 5 se agregó 1.0 N de LiOH (0.27 mmoles). Después de 18 horas, el pH se ajustó a 6 utilizando HCl al 10%, después la solución se concentró bajo presión reducida para retirar el THF. La solución se cromatografió en una columna de C-18 Mega Bond Elut® (50 ml de H2O después 200 ml de CH3CN/H2O al 20% que contenía 0.1% de TFA). Las fracciones que contenían 10 el producto se reunieron y liofilizaron para dar el compuesto del título (43 mg, 61 %) como una goma amarilla: MS (ES) m/e 394 (M + H)+. Anal. Caled for C23H27N3O3 0.098 CF3CO2H: C, 68.85; H, 6.75; N, 10.38. Encontrado: C, 69.23; H, 7.00; N, 9.98.

EJEMPLO S Composición unitaria de dosis parenteral Una preparación que contiene 20 mg del compuesto del ejemplo 1 como un polvo seco estéril se prepara como se muestra a continuación: 20 20 mg del compuesto se disuelven en 15 ml de agua destilada. La solución se filtra bajo condiciones estériles en una ampolleta de dosis múltiples de 25 ml y se liofiliza. El polvo se reconstituye por adición de 20 ml de dextrosa al 5% en agua (D5W) para inyección intravenosa o intramuscular. La dosificación, así ai *-^^ .a^ÉaalÉi * pues se determina por el volumen de inyección. La dilución subsecuente puede hacerse por adición de un vótumen medido de esta unidad de dosificación a otro volumen de D5W para la inyección, o una dosis medida puede agregarse a otro mecanismo para administrar el fármaco, como en una botella o bolsa para infusión de vapor IV u otro sistema de inyección-infusión.

EJEMPLO 6 Composición unitaria de dosis oral Una cápsula para administración oral se prepara mezclando y moliendo 50 mg del compuesto del ejemplo 1 con 75 mg de lactosa y 5 mg de estearato de magnesio. El polvo resultante se tamiza y llena en una cápsula de gelatina dura.

EJEMPLO 7 Composición unitaria de dosis oral Una tableta para administración oral se prepara mezclando y granulando 20 mg de sacarosa, 150 mg de dihidrato de sulfato de calcio y 50 mg del compuesto del ejemplo 1 con una solución de gelatina al 10%. Los granulos húmedos se tamizan, se secan, mezclan con 10 mg de almidón, 5 mg de talco y 3 mg de ácido esteárico; y se comprimen en una tableta.

La descripción anterior muestra completamente cómo hacer y utilizar la presente invención. Sin embafgo, la presente invención no se limita a las modalidades particulares descritas en la presente, sino que incluye todas las modificaciones de las mismas dentro del campo de la siguientes reivindicaciones. Las diferentes referencias a diarios, patentes y otras publicaciones que se citan en la presente comprenden el estado de la técnica y se incorporan en la presente a manera de referencia en su totalidad.

Claims (37)

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto de conformidad con la fórmula (I): ( en donde: Y es CR'R' o NR'C(O); R1 es -alquilo de C0-6-Het-, -alquilo de C0-6-Ar, H, -alquilo de d-6, -CN o -S(O)kR9; R2 es - ^^aa&-AA— *.*«** W es -(CHR9)a-U-(CHR9)b-; U está ausente o es CO, CR92, C(=CR92), S(O)k, O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONR*, NR'CO, OC(O), C(O)O, C(S)0, OC(S); C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2N=N, NR9NR9, NR9CR92, CR92NR9, CR92O, OCR92, C=C, CR9=CR9; Ar o Het; G es NRe, S u O; R9 es H, alquilo de C1-6, Het-alquilo de C0-6, cicloalquilo de C3-7-alquilo de Co-6 o Ar-alquilo de Co-ß; Rk es R9, -C(O)R9 o - C(O)ORf; R' es H, alquilo de C -6, Het-alquilo de Co-6, cicloalquilo de C3-7- alquilo de Co-6> Ar-alquilo de C0-6, o alquilo de C1-6 substituido por uno a tres grupos seleccionados de halógeno, CN, NR92, OR9, SR9, CO2R9 y CON(R9)2; Rf es H, alquilo de C-?-6 o Ar-alquilo de Co-ß; Re es H, alquilo de C-?.6, Ar-alquilo de Co-6, Het-alquilo de Co-6. cícloalquilo de C3-7-alquilo de Co-ß, o (CH2)kC?2R9; R y Rc se seleccionan independientemente de H, alquilo de C-?-6, Ar-alquilo de Co-6, Het-alquilo de C0-6, o cicloalquilo de C3-6-alquilo de C0-6, halógeno, CF3, ORf, S(O)kRf, CORf, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, o R y Rc se unen entre sí para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico aromático o no aromático de 5 o 6 miembros, sustituido opcionalmente por hasta tres sustituyentes seleccionados de halógeno, CF3, alquilo de C1-4, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 y CH2N(Rf)2; o metilenodioxi; Q1, Q2, Q3 y Q4 son independientemente N o C-Ry, siempre que no más de uno de Q1, Q2, Q3 y Q4 sea N; R' es H, alquilo de C?-6, Ar-alquilo de C0-6 ó cicloalquilo de C3.6-alquilo de C0-6; R" es R', -C(O)R' o -C(O)OR'; Ry es H, halo, -OR9, -SR9, - CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-, -CO2R9, -COR9 o -CONR92, o alquilo de C1-6 sustituido opcionalmente por halo, -OR9, -SR9, -CN, -NRSR", -NO2) -CF3)

R'S(O)r, -CO2R9, -COR9 o -CONR92; a es 0, 1 ó 2; b es 0, 1 ó 2; k es 0, 1 ó 2; r es 0, 1 ó 2; s es 0, 1 ó 2; u es 0 ó 1 ; y v es 0 ó 1 ; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. 2.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , 5 caracterizado además porque R2 es 10 en donde Q1, Q2 y Q3 son cada uno CRy, Q4 es CRy o N, y u es 0.

3.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque cada R' es H, R" es H o alquilo de C-?-6, W es - (CH2)?-4-, Q4 es CRy y Ry es H.

4.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , 15 caracterizado además porque R2 es 20 en donde Q1, Q2 y Q3 son cada uno CH, y u es 0.

5.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado además porque cada R' es H, R" es H o alquilo de C-?-6, v es 0 y W es -(CH2)1-4-.

6.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R2 es ,# en donde G es NH y Rb y Rc son cada uno H.

7.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado además porque W es -(CH2)?-4-.

8.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R2 es en donde G es NH y Rb y Rc se unen entre sí para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico aromático o no aromático de 5 ó 6 miembros, sustituido opcionalmente hasta por 3 sustituyentes seleccionados de halógeno, CF3, alquilo de C1-4, ORf, S(O)kRf, CORf' CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2) CO(NRf)2 y CH2N(Rf)2; o metilenodioxi.

9.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado además porque Rb y Rc se unen entre sí para formar un anillo carbocíclico aromático de 6 miembros.

10.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado además porque W es -(CH2)?-4-. £S¿^ttyy&¡í?¡&^yyii

11.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado además porque Rb y Rc se unen entre sí para formar un anillo heterocíclico aromático de 6 miembros.

12.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 11 , caracterizado además porque W es -(CH2)1-4-.

13.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R2 es en donde cada R' es H, R" es H o alquilo de C1-6, R9 es H o alquilo de C?-6, y s es 0, 1 o 2.

14.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado además porque W es -(CH2)1-4-.

15.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R1 es fenilo, bencilo, piridilo, imidazolilo, oxazolilo o tiazolilo.

16.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado además porque R1 es fenilo.

17.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque Y es NHC(O).

18.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque es: ácido (±)-3-fenil-4-[4-[[[3-(piridin-2-il)amino- ?¿SB ¿^^^^j^^^^^¿^^^^¿ fen¡l-4-[4-[[[4-(piridin-2-il)am¡no-1-but¡l]amino]-carboníl]-1 ,3-oxazol-2-iljbutanoico; y ácido (±)-3-fenil-4-[4-[5-(p¡ridin-2-il)amino-1-pent¡l]-1 ,3-oxazol-2-iljbutanoico; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

19.- Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

20.- Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , un agente antineoplásico y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

21.- La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 20, caracterizada además porque el agente antineoplásico es topotecan.

22.- La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 20, caracterizada además porque el agente antineoplásico es cisplatina.

23.- Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , un inhibidor de resorción ósea y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

24.- Un compuesto de conformidad con la fórmula (II): "*at*JhMtÉt^Mt- • <* * * (II) en donde: Y es CR'R' o NR'C(O); R1 es -alquilo de C0-6-Het-, -alquilo de C0-6- Ar, H, -alquilo de C1-6, -CN o -S(O)kR9; R2 es W es -(CHR9)a-U-(CHR9)b-; U está ausente o es CO, CR92, C(=CR92), S(O)k, O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONR', NR'CO, OC(O), C(O)O, C(S)0, OC(S); C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2N=N, NRgNR9, NR9CR92, CR92NR9, CRg2O, OCR92, C=C, CRg=CR9; Ar o Het; G es NRe, S u O; R9 es H, alquilo de C1-6, Het-alquilo de C0-6, cicloalquilo de C3-7-alquilo de C0-6 o Ar-alquilo de C0-6; Rk es R9, -C(O)R9 o -C(O)ORf; R1 es H, alquilo de C?-6, Het-alquilo de C0-6, cicloalquilo de C3-7-alquilo de Co-6, Ar-alquilo de Co-6, o alquilo de C-?_6 substituido por uno a tres grupos seleccionados de halógeno, CN, NR92, OR9, SR9, CO2R9 y CON(R9)2; Rf es H, alquilo de C1-6 o Ar-alquilo de C0-6; Re es H, alquilo de C1-6, Ar-alquilo de C0-6, Het-alquilo de C0-6, cicloalquilo de C3-7-alquilo de Co-ß, o (CH2)kC02R9; Rb y Rc se seleccionan independientemente de H, alquilo de C-?-6, Ar-alquilo de Co-6. Het-alquilo de Co-6, o cicloalquilo de C3-6-alquilo de Co-ß, halógeno, CF3) ORf, S(O)kRf, CORf, N02, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, o Rb y Rc se unen entre sí para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico aromático o no aromático de 5 o 6 miembros, sustituido opcionalmente por hasta tres sustituyentes seleccionados de halógeno, CF3, alquilo de C- , ORf, S(O) R , CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 y CH2N(Rf)2; o metilenodioxi; Q1, Q2, Q3 y Q4 son independientemente N o C-Ry, siempre que no más de uno de Q1, Q2, Q3 y Q4 sea N; R' es H, alquilo de C?-6, Ar-alquilo de C0-6 ó cicloalquilo de C3-6-alquilo de C0-6; R" es R', -C(O)R' o -C(O)OR'; Ry es H, halo, -OR9, -SR9, -CN, -NR9Rk, -NO2) -CF3, CF3S(O)r-, -CO2R9, -COR9 o -CONR92, o alquilo de C?-6 sustituido opcionalmente por halo, -OR9, -SR9, -CN, -NRgR", -NO2, -CF3, R'S(O)r-, -CO2R9, -COR9 o -CONR92; a es 0, 1 ó 2; b es 0, 1 ó 2; k es 0, 1 ó 2; r es 0, 1 ó 2; s es 0, 1 ó 2; u es 0 ó 1 ; y v es 0 ó 1 ; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

25.- Un procedimiento para preparar un compuesto de la fórmula (I) como se define en la reivindicación 1 , caracterizado porque comprende .^^^^^^^=^^^ ^^^, miá* É1É hacer reaccionar un compuesto de fórmula (lll) con un compuesto de fórmula (IV): 0 R2-NH m (V) en donde R1 y R2 son como se definen en la fórmula (I), con cualquier grupo funcional reactivo protegido; y removiendo después cualquier grupo protector y formando opcionalmente una sal farmacéuticamente aceptable. 10

26.- El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, para usarse como un medicamento.

27.- El uso de un compuesto de la fórmula (I) como se reclama en la reivindicación 1 , en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades en las cuales se indica el antagonismo del receptor avß3. 15

28.- El uso de un compuesto de la fórmula (I) como se reclama en la reivindicación 1 , en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de enfermedades en las cuales se indica el antagonismo del receptor avßs.

29.- El uso de un compuesto de la fórmula (I) como se reclama en la reivindicación 1 , en la fabricación de un medicamento para el tratamiento 20 de osteoporosis.

30.- El uso de un compuesto de la fórmula (I) como se reclama en la reivindicación 1 , en la fabricación de un medicamento para la inhibición de angiogénesis.

31.- El uso de un compuesto de la fórmula (I) como se reclama en la reivindicación 1 , en la fabricación de un medicamento para la inhibición del crecimiento tumoral o metástasis tumoral.

32.- El uso de un compuesto de la fórmula (I) como se reclama 5 en la reivindicación 1 , en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de aterosclerosis o restenosis.

33.- El uso de un compuesto de la fórmula (I) como se reclama en la reivindicación 1 , en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de inflamación. 10

34.- El uso de un compuesto de la fórmula (I) como se reclama en la reivindicación 1 , y un agente antineoplásico, en la fabricación de un medicamento para la inhibición del crecimiento tumoral en combinación física o para administración paso a paso.

35.- El uso como se reclama en la reivindicación 34, en donde el 15 agente antineoplásico es topotecan.

36.- El uso como se reclama en la reivindicación 34, en donde el agente antineoplásico es cisplatina.

37.- El uso de un compuesto de la fórmula (I) como se reclama en la reivindicación 1 , y un inhibidor de resorción ósea, en la fabricación de un 20 medicamento para el tratamiento de osteoporosis en combinación física o para administración paso a paso. RESUMEN DE LA INVENCIÓN Se describen compuestos de fórmula (I) los cuales son antagonistas de receptores de vitronectina, y son útiles en el tratamiento de osteoporosis, en donde: Y es CR'R' o NR'C(O); R1 es -alquilo de Co-e-Het-, -alquilo de Co-ß-Ar, H, -alquilo de d-e, -CN o -S(O)kR9; R2 es 10 20 W es -(CHR9)a-U-(CHR9)b-; U está ausente o es CO, CR92, C(=CR92), S(0)k, O, NR9, CR9OR9, CR9(ORk)CR92, CR92CR9(ORk), C(O)CR92, CR92C(O), CONR', NR'CO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S); C(S)NR9, NR9C(S), S(O)2NR9, NR9S(O)2N=N, NR9NR9, NR9CR92, CR92NR9, CR92O, OCR92, C=C, CR9=CR9; M^?im***^. ^ .^¿^ÉSaaa^ ^..^ Ar o Het; G es NRe, S u O; R9 es H, ajpuilo de C?-6, Het-alquilo de C0-6, cicloalquilo de C3-7-alquilo de C0-6 o AfiJIüilo de C0.6; Rk es R9, -C(O)Rg o - C(O)ORf; R' es H, alquilo de C?-6, Het-alquilo de C0-6, cicloalquilo de C3-7- alquilo de C0-6, Ar-alquilo de C0-6, o alquilo de C?-6 substituido por uno a tres 5 grupos seleccionados de halógeno, CN, NR92) OR9, SR9, CO2R9 y CON(R9)2; Rf es H, alquilo de C?-6 o Ar-alquilo de Co-e; Re es H, alquilo de C?-6, Ar-alquilo de C0-6, Het-alquilo de C0-6, cicloalquilo de C3-7-alquilo de Co-6, o (CH2)kC?2R9; Rb y Rc se seleccionan independientemente de H, alquilo de C-?-6, Ar-alquilo de Co-6, Het-alquilo de Co-ß. o cicloalquilo de C3-6-alquilo de C0-6, halógeno, CF3, 10 ORf, S(O)kRf, CORf, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2, CH2N(Rf)2, o Rb y Rc se unen entre sí para formar un anillo carbocíclico o heterocíclico aromático o no aromático de 5 o 6 miembros, sustituido opcionalmente por hasta tres sustituyentes seleccionados de halógeno, CF3, alquilo de C-?-4, ORf, S(O)kRf, CORf, CO2Rf, OH, NO2, N(Rf)2, CO(NRf)2 y CH2N(Rf)2; o metilenodioxi; Q1, Q2, 15 Q3 y Q4 son independientemente N o C-Ry, siempre que no más de uno de Q1, Q2, Q3 y Q4 sea N; R' es H, alquilo de C?-6, Ar-alquilo de C0-6 ó cicloalquilo de C3-6-alquilo de C0-6; R" es R', -C(O)R' o -C(O)OR'; Ry es H, halo, -OR9, -SR9, - CN, -NR9Rk, -NO2, -CF3, CF3S(O)r-, -CO2R9, -COR9 o -CONR92, o alquilo de C1-6 sustituido opcionalmente por halo, -OR9, -SR9, -CN, -NRgR", -NO2, -CF3, 20 R'S(O)r-, -CO2R9, -COR9 o -CONR92; a es 0, 1 ó 2; b es 0, 1 ó 2; k es 0, 1 ó 2; r es 0, 1 ó 2; s es 0, 1 ó 2; u es 0 ó 1 ; y v es 0 ó 1 ; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. MG/HL/EV/tpr*cgm*sff*igp*eos*kra*osu*yac*jtr P01/64F K^i