SALES DE 5-CARBOXANILIDO-HALOALQUILTIAZOLES
La siguiente invención trata sobre las sales 5-carboxanilido-haloalquiltiazoles, que se utilizan como fungicidas, microbicidas, anticontaminantes marinos y termiticidas; las composiciones que contienen tales compuestos; así como los métodos para su aplicación. La patente No. 5,045,554 de los Estados Unidos revela un tipo de 5-carboxanilidotiazoles sustitutos útiles para el control de enfermedades micóticas en las plantas, por ejemplo Basidiomycetes, como Thizotocnia, Sclerotium y Corticium; así como Al ternaría y Spirothica, cuando se aplica a la planta en crecimiento, sobre todo en pulverizaciones foliares. Sin embargo, aún persiste la necesidad de que tales compuestos presenten una mejor actividad biológica y/o propiedades físicas/químicas para fines de formulación. Hemos descubierto que algunas sales de estos compuestos presentan de manera sorprendente una mejor actividad biológica en comparación con los compuestos descritos en la patente 5,045,554 de los Estados Unidos. Gracias a esto el agricultor goza de una importante ventaja ya que se reduce la necesidad de aplicar fungicidas a los cultivos para el control de enfermedades micóticas. Además, estas sales se pueden utilizar como microbicidas, anticontaminantes marinos y termiticidas.
Asimismo, dado que tales sales son por lo general solubles en el agua, las formulaciones comerciales son mucho más fáciles de preparar y a un menor costo que el de las 5-carboxanilidotiazoles conocidos. La presente invención provee compuestos de Fórmula I :
en donde A es un catión base, de preferencia un catión de base sólida, mejor un catión de sodio, potasio, litio, diazabiciclondecena o diazabicliclononano, mucho mejor un catión de sodio, potasio o litio; Ri es (C?-C2) haloalquilo o
(C?-C5) alquilo, de preferencia (CL-C2) alquilo, mucho mejor metilo; R2 es (C1-C5) alquilo o (C?-C ) haloalquilo, de preferencia halometilo, mejor perhalometilo, mucho mejor trifluometilo, en la inteligencia de que al menos uno de Ri y R2 es un (C?-C2) haloalquilo; cada R es por separado un halo (de preferencia cloro, bromo o yodo), halo (C1-C5) alquilo (de preferencia halo (C?-C2) alquilo, mejor perhalometilo, mucho mejor trifluometilo) , halo (C?-C2) alcoxi (de preferencia halo (C?-C2) alcoxi , mejor perhalometoxy, mucho mejor trifluometoxi) nitro, ciano, pentahalosufuro (de preferencia pentafluosulfuro) , halometiltio, haloetiltio, (Ci-C2) alquilosulfinil , halo (C?-C2) alquilosulfinil) , (Ci-C2) alquilosulfonil , o halo (C?-C2) alquilosulfonil ; y n es de uno a cinco (de preferencia de dos a cuatro, mejor de tres a cuatro, mucho mejor tres) . Es preferible que cada R sea independientemente un halo, haloalquilo o haloalkoxi . De preferencia, los grupos R se localizan en orto y paraposiciones . Preferentemente, el sustituto para, si se presenta, también posee un carácter lipofílico. El catión base es resultado de la reacción de una base con el compuesto de fórmula I en la que la base extrae al menos un protón del compuesto de la fórmula I . Es preferible que la base tenga un pKa de 10 o más; es mejor que la base tenga un pKa de 12 o más; y mucho mejor que la base sea de hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de litio o una mezcla de los mismos. El término "carboxanilido" se refiere al compuesto C6H5-NH-CO- . El término "alquilo" se entenderá como una cadena directa o ramificada de (C1-C5) alquilo, salvo que se señale lo contrario. El término "lipofílico" se refiere a tener afinidad con los solventes orgánicos más que con los solventes acuosos. El término "ingrediente activo" se entenderá como un compuesto de la Fórmula I . Para los fines de esta invención, todos los porcentajes se toman con base en el peso, salvo que se señale lo contrario, y se incluyen todos los rangos de porcentaje; todos los índices son por peso y se incluyen todos los índices. La segunda modalidad de esta invención se refiere a las composiciones de compuestos de Fórmula I que se preparan mezclando el compuesto con uno o más adyuvantes, ya sea diluyentes, cargas, portadores, surfactantes o activos de preparación, para dar como resultado composiciones en forma de sólidos particulados, soluciones, dispersiones o emulsiones. Tales composiciones incluyen, por ejemplo soluciones acuosas, polvos humectables, granulares, polvos, concentrados emulsionantes y fluidos. Los compuestos de Fórmula I pueden aplicarse en varios lugares como el suelo, cultivos agrícolas en crecimiento, cultivos ornamentales, césped, estructuras y plantas industriales. Cuando se utilizan como fungicidas, los compuestos de Fórmula I pueden usarse para inhibir el crecimiento del hongo aplicando una cantidad efectiva en cuanto a su carácter fungicida del compuesto en un lugar donde el hongo crece incluyendo de manera enunciativa, más no limitativa el suelo, los cultivos agrícolas en crecimiento, los cultivos ornamentales y el césped. En el caso de que se utilicen como microbicidas, la función de los compuestos de Fórmula I será inhibir el crecimiento de microorganismos aplicando una cantidad efectiva en cuanto a su carácter microbicida de uno o más de los activos en un lugar atacado por microbios. Entre los lugares apropiados se encuentran: torres enfriadoras; depuradores del aire; calderas; compuestos acuosos de minerales; tratamiento de aguas residuales; fuentes ornamentales; filtros para osmosis inversa; ultrafiltros; agua de lastre; condensadores de evaporación; intercambiadores de calor; fluidos para el procesamiento de pulpa y papel; plásticos; emulsiones y dispersiones; pinturas; látex; recubrimientos, como barnices; productos para la construcción, como mastique, enmansillado y selladores; adhesivos para la construcción, como adhesivos para pegar alfombras y adhesivos para pisos; adhesivos industriales o de consumo; químicos fotográficos; fluidos para impresión; productos para el hogar, como desinfectantes para baños; cosméticos y artículos de tocador; champúes; jabones; detergentes; desinfectantes industriales, como desinfectantes en frío y de superficie dura; pulidores de pisos; agua para enjuague de lavaderos; fluidos para la elaboración de metales; lubricantes para conductores; fluidos hidráulicos; piel y productos de piel; textiles; productos textiles; madera y productos de madera, como madera contrachapada, madera aglomerada, tablero de partículas, viga laminada, oriented strandboard, cartón madera y tablero prensado; fluidos para el procesamiento de petróleo; combustible; fluidos para yacimientos petrolíferos, como agua de inyección, fluidos de fractura y lodo de perforación; conservación de los adyuvantes agrícolas; conservación de surfactantes; dispositivos médicos; conservación de reactivos de diagnóstico; conservación de alimentos, como empaques de plástico o papel para productos alimenticios; billares; y spas . Los lugares preferibles son la madera y productos de madera, torres enfriadoras; depuradores del aire; calderas; compuestos acuosos de minerales; tratamiento de aguas residuales; fuentes ornamentales; filtración por osmosis inversa; ultrafiltración; agua de lastre; condensadores de evaporación; intercambiadores de calor; fluidos para el procesamiento de pulpa y papel; plásticos; emulsiones y dispersiones; pinturas; látex y recubrimientos. Dependiendo del lugar, los compuestos de la presente invención pueden directamente incorporarse al lugar, aplicarse en forma directa al lugar, o incorporarse a un recubrimiento que más tarde se aplicará al lugar.
Cuando se utiliza como agentes anticontaminantes marinos, la función de los compuestos de esta invención será controlar o inhibir el crecimiento de organismos marinos aplicando una cantidad efectiva en cuanto a su carácter anticontaminante marino de sus composiciones a la estructura marina o dentro de la misma. Dependiendo de la estructura marina que se va a proteger, las composiciones de esta invención pueden incorporase en forma directa a la estructura marina, aplicarse directamente a la misma o incorporarse a un recubrimiento que más tarde se le aplicará. Entre las estructuras marinas pertinentes se encuentran, de manera enunciativa más no limitativa: botes, barcos, plataformas petroleras, espigones, estacadas, muelles, cauchos elastoméricos, redes de pesca y sedales. Por lo general, las composiciones de esta invención se incorporarán en forma directa a las estructuras tales como el caucho elastomérico o las fibras de la red de pesca durante su elaboración. Es costumbre que las composiciones de esta invención se aplican en forma directa a estructuras como las redes de pesca o las estacadas de madera, sin embargo también pueden incorporarse a un recubrimiento marino, como pinturas o barnices marinos.
También es posible que algunos de los compuestos de Fórmula I, en especial aquellos en que Rx y R2 son grupos trifluome ilos, para combatir las termitas que se encuentran en la tierra, cultivos, pastizales, bosques y otros materiales derivados de celulosas. Para estos fines, puede hacerse uso de estos compuestos en forma técnica o pura según las composiciones se preparen o se formulen. Entre las composiciones sólidas se encuentran: polvos humectables que por lo general contienen, por ejemplo, de 10 a 90%, de preferencia de 50 a 90% de ingrediente activo, de 2 a 10% de activos de dispersión, opcionalmente hasta por 10% de estabilizadores y/u otros aditivos (penetrantes, aditivos y surfactantes) y un fuerte portador inerte (arcilla, sílice o un portador sintético o natural) ; polvos que comúnmente se formulan como un concentrado que tiene una composición semejante a la de un polvo humedecible, pero sin dispersante y que con frecuencia están compuestos de entre 0.5 a 10% de ingrediente activo; granulos que contienen, por ejemplo, de 0.01 a 80% de ingrediente activo y opcionalmente hasta por 10% de aditivos (estabilizadores, surfactantes, modificadores de reposición lenta, y material aglutinante que se preparan, por ejemplo, mediante técnicas de aglomeración o impregnación y presentan un tamaño mayor al de los polvos humectables, hasta por 1-2 milímetros; y cabos venenosos que contiene, por ejemplo, de 0.01 a 25% de ingrediente activo preparado mediante la combinación del ingrediente activo con un material a base de celulosa y otros aditivos. Entre las composiciones líquidas están las soluciones acuosas o con disolvente, concentrados emulsionante, emulsiones, concentrados de suspensión y fluidos que normalmente contienen de 0.01 a 99.9% por peso del ingrediente activo, un portador aceptable y uno o más adyuvantes. Con mucho más frecuencia, las composiciones líquidas contendrán de 1.0 a 85% del ingrediente activo. Por lo general, es muy recomendable, sobre todo en el caso de formulaciones aplicables con aerosol, incluir uno o más adyuvantes, como agentes humectantes, agentes difusores, agentes dispersantes, adhesivos, agentes emulsionantes y similares de acuerdo con las prácticas agrícolas. Estos adyuvantes que normalmente se utilizan pueden encontrarse en McCuthcheon ' s Emulsifiers and Detergents, McCuthcheon ' s Emulsifiers and Detergents y McCutcheon ' s Functional Materials, todos publicados cada año por McCutcheon División de MC Publishing Company (Nueva Jersey) , y Farm Chemicals HandbookK, publicado anualmente por Meister Publishing Company (Ohio) . La cantidad efectiva de un compuesto necesaria para alcanzar el nivel requerido de control de enfermedades micóticas, microbios, organismos contaminantes marinos o termitas variará dependiendo de uno o más de los siguientes factores : el crecimiento o las condiciones ambientales, la susceptibilidad de las plantas a enfermedades micóticas que se van a controlar, el ambiente en que se encuentra el microbio u organismo contaminante marino que se va a controlar y el compuesto específico o composición empleada. En condiciones normales, las enfermedades micóticas se controlan a índices de aplicación de 30 a 500 gr. por hectárea; los microbios, a índices de aplicación que abastecen de 0.5 a 2500 ppm del compuesto en el lugar que se va a proteger; los organismos contaminantes marinos, a índices de 0.1 a 30%, de acuerdo al peso de la estructura que se va a proteger o al peso del compuesto incorporado a un recubrimiento que se va aplicar a la estructura marina; y las termitas, a índices de 0.0001 a 2.0% con base en el peso total de una composición aplicada al lugar de termitas. Alguien capacitado en el área puede determinar con facilidad la cantidad adecuada del compuesto o composición necesaria a partir de los factores arriba mencionados. Los compuestos y composiciones de esta invención pueden diluirse o aplicarse al follaje de las plantas y/o suelo como aerosoles acuosos por los métodos normalmente utilizados, tales como aerosoles hidráulicos de alta concentración, aerosoles de baja concentración, chorro de arena y rociamiento aéreo. La dilución e índice de aplicación dependerá del equipo empleado, el método y frecuencia de la aplicación deseada, la tasa de aplicación y la enfermedad micótica, el microbio o termitas que se van a controlar. Las composiciones pueden mezclarse con fertilizantes o materiales fertilizantes antes de su aplicación. También pueden utilizarse como el único agente pesticida o en conjunción con otros agentes pesticidas tales como microbicidas, anticontaminantes marinos, fungicidas, herbicidas, insecticidas y acaricidas. La aplicación en la madera se puede llevar a cabo utilizando las técnicas acostumbradas como inmersión de la madera en una composición líquida, aplicación de pintura con aerosol o brocha, tratamiento por inmersión, inyección o impregnación de la composición en la madera. Para estas aplicaciones, la concentración del compuesto de Fórmula I en la composición debería ser suficiente para abastecer una cantidad efectiva del compuesto en la madera. En esta invención, los compuestos de Fórmula I se sintetizan por lo general mediante la reacción de un tiazol sustituido apropiadamente teniendo un sustituto de 5-cloruro de carbonilo con una anilina sustituida apropiadamente en solventes adecuados a una elevada temperatura de acuerdo con los procedimientos descritos en la Patente 5,045,554 de Estados Unidos, incorporada en el presente por referencia, y en consecuencia convirtiendo el producto de esta reacción en una sal por reacción con una base sólida. Entre los solventes apropiados para la primera reacción se encuentra el xileno, el tetrahidrofurano, tolueno, clorobenceno, colidina y 2.6- di-t-butil-4 -metil-piridina. Los 2 , 4-bis-trifluometiltiazol-5-carboxanilidos se preparan utilizando los procedimientos análogos a los siguientes : Preparación de cloruro de 2 , 4-bis-trifluometiltiazol-5-ácido carboxílico Paso 1 - Preparación de trifluotioacetamida : En un matraz de base redonda (RBF, por sus siglas en inglés) con cuatro cuellos y capacidad de un litro, equipado con un agitador mecánico, toma de nitrógeno, embudo adicional y termómetro, se puso trifluoacetamida (56.0 grs . , 1.0 equivalente 0.495 mol) y 100 gr. de reactivo de Lawesson más 500 ml . de tetrahidrofurano. La mezcla de la reacción se puso al fuego durante dos horas y después se destiló por el método de Kugeirohr (<lmm Hg) a fin de obtener 54 gr. de trifluotioacetamida líquido, ligero y de color amarillo (84% de rendimiento) . Paso 2. Preparación de clorotifluoacetoacetato de etilo: Se puso 200 gr. de trifluoacetoacetato de etilo En un RBF de tres cuellos y 500 ml . , equipado con un batidor magnético, toma de nitrógeno y surtidor de gas. Mediante un baño de acetona/hielo, el recipiente de la reacción se puso a enfriar a una temperatura de 0 a 10°C. Se le añadió gas de cloro hasta que la mezcla de la reacción obtuvo un color amarillo. Se dejó que la solución de la reacción alcanzara la temperatura ambiente y, posteriormente, se calentó a 30°C a fin de que el gas se emitiera. Una vez que terminó la emisión de gas, la mezcla resultante fue de 226 gr. de producto (95% de rendimiento) . Paso 3 - Preparación de 2 , 4-bis-trifluometil-5-carboxilato de tiazol de etilo: En un RBF de 4 cuellos y 4 litros, equipado con un agitador mecánico, un refrigerante de reflujo, un termómetro, un tubo de adición, se vació 358 gr. de clorotrifluoacetoacetato de etilo (1.64 moles), 2,2,2-trifluotioacetamida y 1000 ml de acetonitrilo. A esta mezcla se agregó 331.9 gr. de trietilamina (2.0 eq, 3.28 moles) gota a gota durante dos horas y media. Durante la adición, la reacción se mantuvo a una temperatura de 30 a 38°C; después de la adición, se calentó por reflujo durante dos horas; y se agitó toda la noche a temperatura ambiente. La mezcla de la reacción se filtró y el filtrado resultante se concentró mediante vaporización por rotación con el fin de obtener un oleoso que se disolvió en 1500 ml de acetato de etilo. Lo anterior se lavó con 2 x 500 ml . de agua y 1 x 500 ml . de salmuera, luego se concentró mediante vaporización por rotación para producir 356.6 gr. de 2 , 4-bis-trifluometil-5-carboxilato de etilo que fue purificado por destilación. Paso 4 - Preparación de 2 , 4-bis-trifluometiltiazol-5-ácido carboxílico: En un RBF de cuatro cuellos y un litro se vació 2, 4-bis-trifluometil-5-carboxilato de tiazol de etilo (23.8gr, 1.0 equivalente, 81.2 milimoles) en 100 ml . de THF y 50 ml . de agua. La mezcla de la reacción se enfrió a 20°C y se le agregó 10% de solución de NaOH (32.5, 1.0 equivalente, 81.2 milimoles) . La mezcla se retiró del baño de hielo después de 5 minutos y se agitó durante cuatro horas. Después de que se concluyó la reacción, según se determinó gracias a una cromatrografía de película delgada, se añadieron 100 ml . de éter y 100 ml . de agua. La fase acuosa se separó y acidificó con HCl concentrado, extraído con éter, y se eliminó el éter mediante vaporización por rotación obteniendo un sólido que después se lavó con agua y se vacuofiltró. El sólido se secó en un vacuohorno dando como resultado 16.5 gr. (76.7% de rendimiento) de un sólido color café, punto de fusión = 98-101°C. Paso 5 - Preparación de cloruro de 2, 4-bis-trifluometiltiazol-5-ácido carboxílico :
En un RBF de un cuello y 500 ml . bajo N2 se puso 2,4-bus-trifluometil-tiazol-5-ácido carboxílico (31.5 gr, 1.0 equivalente, 0.119 moles), 25 ml . de cloroformo y 1 ml . de dimetilformamida (DMF) . A esta solución se le agregó cloruro de tinilo (28.3 gr. , 2.0 equiv., 0.24 moles). Después, la reacción se calentó por reflujo durante seis horas. Se dejó enfriar la reacción a temperatura ambiente y se concentró mediante vaporización por rotación a 30°C para eliminar el solvente. Se añadió cloroformo en porciones de 3 x 35 ml . concentrándose mediante vaporización por rotación en cada ocasión, para producir 29.8 gr. (88.4% de rendimiento) de aceite color café. Reacciones de acoplamiento de anilina Preparación de 135,660 N- (2 , 4 , 6-triclofoferilo) -2 , 4-bis-trifluometiltiazol-5 carboxanilida : En un RBF de un cuello y 250 ml . bajo nitrógeno se añadió cloruro de 2 , 4-bis-trifluometil-tiazol-5-ácido de carboxílico (25.8 gr., 1.0 equivalente, 91.0 milimoles), 30 ml . De tolueno y luego 2 , 4 , 5-tricloroanilina (17.9 gr. 1.0 equivalente, 91.0 milimoles) . La mezcla se calienta por reflujo durante seis horas controlándose por cromatrografía de gas-líquido (GLC, por sus siglas en inglés) . Una vez concluida esta fase, se dejó enfriar la reacción a temperatura ambiente. Después de que se evaporó el tolueno, se formó un sólido de color oscuro. El sólido de color oscuro se lavó con cloruro de metileno, se vacuofiltró y posteriormente se lavó con hexanos para dar como resultado 33.2 gr. (82% de rendimiento) de sólido de color blanco mate, punto de fusión = 180-182°C. Preparación de sal de sodio tifluzamida Se añadió hidróxido de sodio acuoso a una mezcla de 2.55 gr. (4.8 milimoles) de tifluzamida (r- (2 , 6-dibromo-4-trifluometoxicarboxanilido) -2-metilo-4-trifluometil-1, 3-tiazol) y 10 ml . de agua. La solución resultante se agitó durante una hora a temperatura ambiente y luego se filtró por gravedad. Se eliminó el agua del filtrado mediante la vaporización por rotación al vacío quedando 2.5 gr. de sal de sodio en forma de sólido color café claro (^?-NMR (D20) d 2.73 (3H,s), 7.65 (2H,s) . Se secó el sólido en un vacuohorno, precalentado a temperatura baja. Ejemplo 1 - Difusión El propósito de esta prueba fue revisar las diferencias en el índice de difusión en agar entre tifluzamida y su sal de sodio utilizando el hongo, Sclerotium rolfsii . Se prepararon capas de agar dextroso de papa (ADP) de acuerdo con el siguiente procedimiento de dos etapas: Cuatro montones de ADP se prepararon y ajustaron a pH 5.0 con HCl diluido, a pH 7.0 y 9.0 con NaOH diluido. Luego se sometieron a una curación con vapor de agua a alta presión y vaciado. Las cápsulas de Petri se llenaron a un 30% aproximadamente de su capacidad con agar fundido y se dejaron enfriar. Después de que se solidificó el agar, se colocó en el centro de las capas un cubreobjetos de plástico. Varias horas después, las cápsulas de Petri se llenaron al 70% de su capacidad, quedando el cubreobjetos en medio de la capa del agar. Un día después, se colocaron seis esclerocios del hongo Scerotium rolfsii a un centímetro del borde la cápsula de Petri en un patrón equidistante a partir del centro. Después de tres días, el esclerocio empezó a producir micelio en la superficie del agar. Se utilizó un taladracorchos para quitar del centro de la capa una muestra de agar de 0.8 centímetros de diámetro. El cubreobjetos impidió que el taladracorchos penetrara más allá de la mitad del agar. Se prepararon concentraciones de 10,000 y 1,000 ppm de soluciones de sal de sodio tifluzamido y tifluzamido, formuladas como concentrado de solución en agua destilada y purificada. Aproximadamente 0.7 ml . de cada solución y suspensión se pipeteó en el orificio centra de cada capa de PDA. Se utilizaron dos replicaciones para cada tratamiento. Después de una y dos semanas de la fecha en que se colocó el esclerocio en la superficie PDA, se registraron las medidas del diámetro de la zona de inhibición. Se tomaron tres medidas, cada uno representando la distancia entre el borde del crecimiento micelial del esclerocio opuesto entre ellos a través del centro del orificio. También se determinó el área en milímetros cuadrados (mm2) de la zona de inhibición. Una semana después de que los esclerocios se colocaron en las capas, el diámetro promedio de la zona de inhibición alrededor del orificio central era de aproximadamente 33% de largo en el caso de las placas llenadas con sal de sodio, en comparación con la formulación de concentrado de solución, en ambos casos se manejaron índices de 10,000 y 1,000 ppm. Las placas de 1,000 ppm que contenían la sal de sodio produjeron una zona de inhibición de tamaño similar a la de las placas de 10,000 ppm que contenían el concentrado de solución tifluzamido. En consecuencia, parece ser que la sal de sodio es 10 veces más activa en el ensayo de difusión de agar que el concentrado de suspensión tifluzamido. Después de dos semanas en el índice de 10,000 ppm, las zonas de inhibición producidas por la sal de sodio eran aproximadamente 113,99, y 36% más grandes al pH 9,7 y 5, respectivamente, que las zonas producidas por el concentrado de suspensión tifluzamido.
La prueba de difusión de agar mostró que la sal de sodio de tifluzamida posee propiedades diferentes a las de la tifluzamida misma. En una prueba de difusión de agar, la sal de sodio produjo una amplia zona de inhibición evitando el crecimiento excesivo de colonias de S . Rolfsii en el área. Tomando en cuenta la similitud en tamaño de las zonas de inhibición, la sal de sodio de tifluzamida a 1,000 ppm se difundió en una área equivalente a la zona producida por la tifluzamida a 10,000 ppm. De ahí que la sal de sodio parece ser aproximadamente 10 veces más activa. Ejemplo 2 - Evaluación biológica En los siguiente ejemplos se evaluará la actividad biológica de cuatro diferentes compuestos, tifluzamida
(Compuesto 1) y su sales de sodio, potasio y litio (Compuestos 2, 3 y 4) . Los químicos para prueba fueron materiales técnicos, >95% de ingrediente activo. Cada compuesto se diluyó con una mezcla 2:1:1 (v/v) de agua, acetona y metanol para lograr las concentraciones adecuadas, desde 300 gr./h. Las plantas sometidas a la prueba crecieron en condiciones de invernadero en una mezcla de musgo de turba y tierra vermiculita, en menor cantidad, con excepción de las plantas de arroz que crecieron en una mezcla de 50% y 50% de tierra esterilizada (v/v) . Todas se plantaron en recipientes de plásticos de 2% x 2 . Se aplicó la solución con aerosol a las plantas y se dejó secar durante dos horas. Luego, las plantas se inacularon con esporas fungosas. Cada prueba utilizó plantas control las cuales se rociaron con una mezcla de solventes y se inocularon. Para estas pruebas de protección, las plantas inoculadas con dos mohos pulverulentos se inocularon el mismo día con aerosol. El resto de las inoculaciones se realizaron unos días después de que se rociaron las plantas con el compuesto. Posterior a la aplicación del compuesto, se colocaron las plantas en una habitación a temperatura ambiente y una luz tenue hasta la inoculación. Se encuentran más adelante los pasos de la técnica para cada prueba junto con los resultados de varios compuestos descritos en este documento. Los resultados del control porcentual de enfermedades se comparan con las pruebas no tratadas, en el que 100 representa el control completo de la enfermedad y cero, el control nulo de la enfermedad. La aplicación de las esporas fúngales a las plantas sometidas a la prueba con el fin de inducir las siguientes enfermedades en las plantas se llevó a cabo de la siguiente manera: 1. Antracnosa de pepino (AP) El patógeno fungal Colletotrichum lagenarium se cultivó en un agar dextroso de papa (ADP) en la oscuridad a una temperatura de 22 °C por un periodo de 8 a 14 días. Las esporas de C. lagenarium se eliminaron de la placa de ADP inundando la superficie de la placa con agua destilada y se le añadió 0.5% v/w de extracto de levadura. La superficie superior de la colonia de hongos se raspó con un instrumento desdentado hasta que la mayor parte de las esporas se desprendieron quedando en un ambiente acuoso. La suspensión de esporas se filtró utilizando una gasa y el recuento de esporas se ajustó a 3.0 x 106 esporas por ml . Las plantas de pepino, cultivador Bush Champion, tratadas químicamente, tenían un periodo de vida de 15 días. La superficie superior de la hoja de las plantas se roció con la suspensión de esporas justo antes del escurrimiento, utilizando una botella de aerosol con bomba manual. Las plantas se colocaron en una cámara de neblina con luz fluorescente (12 horas de luz, 12 horas de oscuridad) durante un periodo de 48 horas. Después del periodo de infección, las plantas se pusieron en una cámara de crecimiento durante más de tres días a 25°C y 90% de humedad. Posteriormente, las plantas tratadas se evaluaron para el control de enfermedad. 2. Mohos Pulverulentos de Pepino (MPP) Para un cultivo de mohos pulverulentos de Sphaerotheca fulginea se utilizaron grandes plantas de pepino, cultivador Bush Champion, y se llevó a cabo en el invernadero. Se preparó el inoculo colocando de 5 a diez hojas con mucho moho en una jarra de vidrio con 500 ml . de agua y cinco gotas de surfectante Tween-80. Después de agitar el líquido y las hojas para que se desprendieran las esporas, la suspensión se filtró utilizando una gasa, y el recuento de esporas se ajustó a 100,000 esporas por ml . La superficie superior de la hoja de las plantas se roció con la suspensión de esporas justo antes del escurrimiento, utilizando una botella de aerosol con bomba manual . Las plantas se guardaron en el invernadero para fomentar la aparición de infecciones y enfermedades. Siete días después de la inoculación, se evaluaron las plantas para el control porcentual de enfermedades. 3. Tizón de arroz (TA) Los cultivos de Pyricularia oryzae se hicieron en agar dextroso de papa (ADP) durante tres semanas. Las esporas de P. Oryzae se eliminaron de las capas de ADP cubriendo la superficie de la capa con agua destilada con Tween-80, a razón de una gota por 100 ml . de agua destilada. La superficie superior de la colonia de hongos se raspó con un instrumento desdentado hasta que la mayor parte de las esporas se desprendieron quedando en un ambiente acuoso. Después de filtrar la suspensión de esporas utilizando dos capas de gasa, el recuento de esporas se ajustó a 5 x 105 esporas por ml . Las plantas de arroz con un periodo de vida 12 días, cultivador M-201, se rociaron con la suspensión de esporas utilizando el atomizador DeVilbiss. En cada recipiente, con 20 o 30 plantas de arroz, se puso aproximadamente 1 ml . de inoculo. Las plantas inoculadas se colocaron en una armario humectador oscuro a 20°C durante 36 horas para propiciar una infección. Después del periodo de infección, se colocaron en el invernadero. Luego de seis días, se evaluaron las plantas para el control porcentual de enfermedades . 4. Mohos de la Hoja de Trigo (MHT) El patógeno fungal Puccinia recóndi ta f. sp. tri tici se mantuvo por inaculación en plantas de trigo con un periodo de vida de 7 días, cultivador Fielder. Aproximadamente dos semanas después, se recolectaron las esporas de las hojas rascando las plantas sobre un papel de aluminio. Las esporas se limpiaron utilizando un tamiz con una pantalla del tamaño de 250 micrones. Las esporas secas se utilizaron al mes. Se preparó una suspensión de esporas a partir de las esporas uredias secas añadiendo 20 mgr. (9.5 millones de esporas) por ml . de aceite Soltrol. La suspensión se repartió en cápsulas de gelatina (capacidad de 0.7 ml . ) las cuales se incorporaron a atomizadores de aceite. Una cápsula se utilizó para 20 recipientes de trigo, cada uno con 20 o 30 plantas del cultivador Fielder con un periodo de vida de 7 días. Después de un espera de 15 minutos, como mínimo, para que el aceite se evaporara, las plantas se colocaron en una cámara oscura de neblina a 20°C durante 24 horas. Luego se colocaron en el invernadero y se evaluaron después de 12 días para el control porcentual de enfermedades . 5. Mohos Pulverulentos de Trigo (MPT) El patógeno fungoso Erysiphe graminis f. sp. Tri tici se cultivó en plántulas de trigo, cultivador Fielder, mediante la inoculación de plantas con un periodo de vida de siete días. Después de un plazo de ocho días en una habitación con temperatura controlada a 18°C, las esporas de hongos pulverulentos de trigo se desprendieron directamente de las plantas del cultivo a las plántulas de trigo con un periodo de vida de siete días, las cuales recibieron un tratamiento previo con compuestos experimentales. Las plántulas inoculadas se colocaron en una habitación con temperatura controlada a 18 °C y 80% de humedad con el fin de fomentar el desarrollo de una enfermedad. El control porcentual de enfermedades se realizó siete días posteriores a la inoculación.
6. Hongo Pubescente de Uva (HPU)
El patógeno fungoso Plasmopara vi ticola se cultivó en pequeñas vides derivadas del cultivo de tejido de plantas del cultivador en Delaware. Las hojas infectadas que produjeron esporas se recolectaron y congelaron, hasta el momento en que fueron necesarias. A las plantas tratadas se les roció suspensión de esporas en agua, la cual contenía 200,000 esporas por ml . Las plantas se colocaron en un armario humectador no iluminado a 20°C durante 24 horas. Después del periodo de infección, se trasladaron a una cámara de crecimiento a 18 °C y 90% de humedad para propiciar el desarrollo de enfermedades. El control porcentual de enfermedades se evalúo siete días después de la inoculación. La actividad fungicida contra el hongo fitopatogénico arriba mencionado se describe en la siguiente tabla en forma de control porcentual de enfermedades . Compuesto índice AP MPP TA MHT MPT HPU 1 300 0 0 0 100 85 100 75 0 0 0 99 80 99 19 0 0 0 95 50 75 2 300 0 0 0 100 85 100 75 0 0 0 99 75 99 19 0 0 0 95 50 75 3 300 0 0 0 100 85 100 75 0 0 0 99 85 95 19 0 0 0 95 50 80 4 300 0 0 0 100 85 100 75 0 0 0 99 85 99 19 0 0 0 95 0 80 *E1 índice de aplicación se expresa en partes por millón (ppm) Los datos anteriores indican que en los índices bajos, la forma salina del compuesto es de manera sorprendente tan eficaz como el compuesto mismo para el control de diversos organismos examinados. Aunado al hecho de que las sales son solubles en agua sin que por ello tengan que serlo los mismos compuestos, las sales representan ventajas ya que pueden formularse como formulaciones acuosas. Además, ofrecen ventajas en su manejo durante el proceso de elaboración debido a su cristalinidad y altos puntos de fusión.