MXPA99010215A

MXPA99010215A - Composiciones farmaceuticas de la tizoxanida y lanitazoxanida

Info

Publication number: MXPA99010215A
Application number: MXPA/A/1999/010215A
Authority: MX
Inventors: Francois Rossgnol Jean
Original assignee: Romark Laboratories Lc
Priority date: 1997-05-07
Filing date: 1999-11-08
Publication date: 2000-08-01

Abstract

La presente invención se refiere a una composición farmacéutica que contiene como agente activo por lo menos un compuesto seleccionado del grupo integrado la fórmula (I) y la fórmula (II). El agente activotiene preferentemente la forma de partículas con un tamaño de partícula menor que 200æm y un tamaño medio de partícula mayor que 10æm. De manera preferente, las composiciones farmacéuticas están estabilizadas con por lo menos unácido farmacéuticamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención sonútiles para el tratamiento de infecciones oportunistas en personas con el sistema inmune comprometido o suprimido, asícomo en el tratamiento de infecciones por tremátodos.

Description

COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS DE LA TIZOXANIDA Y LA NITAZOXANIDA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Campo técnico de la invención La presente invención se refiere a una composición farmacéutica que contiene como agente activo por lo menos un compuesto seleccionado del grupo caracterizado por la fórmula (I) y por la fórmula (II) De manera preferente, el agente activo se encuentra en forma de partículas con un tamaño de partícula menor que 200 µm y un tamaño medio de partícula mayor que 10 µm. La presente invención también se refiere a composiciones farmacéuticas estabilizadas con por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable. Estas composiciones farmacéuticas son especialmente útiles para el tratamiento de infecciones oportunistas en personas con el sistema inmune comprometido o suprimido, así como para el tratamiento de infecciones por tremátodos. Descripción del arte afín Existe una necesidad acuciante de desarrollar métodos para el tratamiento de una cantidad de infecciones de parásitos y bacterianas en seres humanos que tienen comprometido el sistema inmune (SIDA, pacientes cancerosos, personas ancianas, envejecimiento, pacientes con órganos trasplantados o tratados con drogas inmunosupresoras). Las infecciones por tremátodos constituyen otro campo de interés, especialmente en las zonas de clima tropical. Existe, por consiguiente, necesidad de una composición farmacéutica que pueda ser tolerada incluso por seres humanos con compromiso del sistema inmune y que sea estable en depósito incluso en ambientes tropicales. Más específicamente, el Toxoplas a gondii es un protozoario que se cuenta entre las más importantes causas de infección latente del sistema nervioso central en todo el mundo. Son muchas las personas sanas infectadas con el parásito, aunque habitualmente el sistema inmune mantiene al organismo infeccioso bajo control. T. gondii es el agente patógeno del cerebro más frecuente entre los pacientes de SIDA. En la actualidad, el problema que representa la toxoplasmosis ha aumentado en importancia, no sólo por el SIDA, sino también por el uso más difundido de drogas inmunosupresoras (por ejemplo, las que se administran a pacientes con trasplante de órganos). Habítualmente, la toxoplasmosis se trata con una combinación de pirimetamina y sulfadiazina. Si bien las drogas son efectivas, no matan los quistes del parásito, de modo que el tratamiento debe continuarse con dosis de mantenimiento. A menudo la toxicidad obliga a interrumpir la administración de la droga, especialmente en el caso de pacientes con inmunosupresión, y se producen recaídas. Las estadísticas no son confiables e indican tasas de mortalidad del 70 por ciento aproximadamente en pacientes inmunodeficientes y una mediana de supervivencia de cuatro meses. El protozoario parásito Cryptosporidium parvum provoca la criptosporidiosis. En personas con funciones inmunes normales, la diarrea provocada por C. parvum puede ser larga e intensa, pero hay autorrecuperación. En cambio, en los enfermos de SIDA, la diarrea criptosporídica significa a menudo una amenaza para la vida. Se estima que alrededor del 15-20 por ciento de los enfermos de SIDA sufre de esta infección. Hasta ahora, no existe una terapia coherentemente efectiva o aprobada contra la criptosporídiosis. El agente patógeno más frecuente entre los enfermos de SIDA es el Enterocytozoon bieneusi, un microsporidio que se puede encontrar en un cuarto de los pacientes aproximadamente. En la actualidad parece que este diminuto parásito puede ser la causa de una gran parte de los casos de absorción deficiente, diarrea y enfermedad desgastante que presentan los enfermos de HIV y que todavía no tienen explicación. No existe aún tratamiento efectivo. Hay varias otras especies de microsporidia que infectan los pacientes HIV positivos, entre ellas, Encephalitozoon hellem y cunicuü, y una nueva especie denominada Septata intestinalis. Un informe reciente indica que la diseminación de infecciones por microsporidios está creciendo en importancia. No es posible distinguir clínicamente la infección por el parásito Isospora belli de la criptosporidiosis. Parásito más frecuente en los climas tropicales, se informa que /. belli está presente en menos del 1 % de los pacientes en EE.UU., pero su actual incidencia probablemente es mayor. Por lo general las clasificaciones indican que Pneumocystis carinii es un parásito protozoapo, aunque ciertos estudios sugieren que podría tratarse de un hongo, con los cuales comparte ciertas secuencias genéticas Habitualmente, P carinu infecta los pulmones (Pneumocystis Capnii Pneumonía (PCP)) Según los informes, la terapia resulta eficaz en 40-60% aproximadamente de los pacientes, pero existen problemas entre los cuales cabe citar la toxicidad de las drogas, en particular en pacientes con compromiso inmune Ante las muchas manifestaciones graves de la infección por virus de inmunodeficiencia humana (HIV) en niños, la PCP se destaca por su alta incidencia, distribución etaria exclusiva y frecuente mortalidad La PCP es la infección oportunista grave mas frecuente entre los niños infectados por HIV y su incidencia en infantes infectados por HIV que no reciben profilaxis se estima en por lo menos el 12% durante el primer año de vida Muchos infantes mueren poco después del desarrollo de esta infección Se denomina Complejo Mycobacterium Avium (MAC) a un conjunto de infecciones producidas por organismos micobactepales similares, el Mycobacterium avium y el M intracellulare Cuando se produce una infección MAC en personas con el sistema inmune conservado, habitualmente se presente como una infección de vías respiratorias A menudo en los enfermos de SIDA, la infección está diseminada (MAC diseminado o DMAC) y puede comprometer casi cualquier órgano del sistema En un estudio reciente, se encontró la presencia de bacterias MAC en 43% de los pacientes que sobrevivieron 2 años después de un diagnóstico de SIDA No se ha establecido terapia estándar alguna para el MAC diseminado Habitualmente, se utilizan combinaciones de drogas que, si resultan eficaces, deben continuar administrándose de por vida Hay necesidad urgente de un tratamiento más eficaz Los enfermos infectados por HIV son especialmente susceptibles a la infección de Mycobacterium tuberculosis, y el desarrollo de la enfermedad es rápido. La tuberculosis extrapulmonar no es frecuente en pacientes no infectados por HIV, pero sí se presente con frecuencia en las personas HIV positivas. El CDC ha establecido normas para el tratamiento de la TBC orientadas a enfrentar el aumento de TBC resistente a multidrogas (MDR-TB). La mortalidad de los enfermos de SIDA infectados por MDR-TB es muy alta (aproximadamente el 80 %) y la evolución de la enfermedad es fulminante. Por consiguiente, hay necesidad urgente de desarrollar un método de tratamiento de estas infecciones de incidencia creciente y alta mortalidad en humanos y animales. También es necesario encontrar una droga de efecto amplio para simplificar el tratamiento de las infecciones por tremátodos. En la actualidad, se debe identificar en primer lugar el patógeno tremátodo específico y luego prescribir la droga específica para ese tremátodo. Muchos países poco desarrollados carecen de los equipos necesarios para diagnosticar el tremátodo específico que está actuando. El desarrollo de una droga de acción amplia eliminaría la necesidad del diagnóstico previo. El Schistosoma mansoni, tremátodo de la sangre, es el agente causal de la esquistosomiasis, enfermedad tropical que ocupa el segundo lugar en importancia después de la malaria entre las parasitosis humanas y el primer lugar entre las infecciones humanas por tremátodos. Otra especie importante que infecta al hombre es el Schistosoma haematobium. En el mundo hay más de 200 millones de personas que sufren de esquistosomiasis, entre ellos varios cientos de miles en los Estados Unidos.

El tremátodo del hígado, Fasciola hepática, ataca primariamente a las ovejas, pero los seres humanos pueden ser huéspedes accidentales Este parásito logra sobrevivir en presencia de una vigorosa respuesta inmune por parte del huésped SE ha sugerido el tratamiento con bitionol, que no está aprobado en los Estados Unidos. Existe, por ende, necesidad de una composición farmacéutica estable en depósito incluso en ambientes tropicales que tenga acción amplia contra los tremátodos Resumen de la invención Se ha observado en estudios clínicos desarrollados con animales y seres humanos que la eficacia del tratamiento con compuestos de la fórmula (I) y (II) depende del tamaño de partícula de la sustancia de la droga activa y de la estabilidad de los compuestos Las composiciones farmacéuticas descpptas son convenientes para el tratamiento de infecciones por tremátodos en seres humanos y animales causadas por esquístosomas como el Schistosoma mansoni, el Schistosoma haematobium, el Schistosoma mekongí, el Schistosoma japonicum, el Schistosoma intercalatum, Por Fasciola como Fasciola hepática y Fasciola gigantica, Fasciolopsis biski, y Dicrocoelium dentnticum, Heterophyes heterophyes y Metagonimus yokogawa Estas composiciones farmacéuticas también son eficaces para el tratamiento de infecciones oportunistas de enfermos con el sistema inmune comprometido, como Cryptospondium parvum, Isospora belli, Enterocytozoon bieneusí, Encepha tozoon intestinalis, Mycobacterium tuberculosis, Mycobactepum avium intracellulare, Pneumocystis carinn y Toxoplasma gondn La composición farmacéutica puede presentarse en forma adecuada para su administración oral, en forma de dosis sólidas, como suspensión líquida o en forma de crema. BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Si se desea una comprensión cabal de la naturaleza y objetivos de la presente invención, debe hacerse referencia a la siguiente descripción detallada, que se acompaña de figuras, de las cuales: La Fig. 1 representa el porcentaje de inhibición y la viabilidad celular en el huésped de la nitazoxanida contra E. intestinalis. La Fig. 2 representa el porcentaje de inhibición y la viabilidad celular en el huésped de la nitazoxanida contra V. corneae. La Fig. 3 representa el porcentaje de inhibición y la viabilidad celular en el huésped del albendazol contra E. intestinalis. La Fig. 4 representa el porcentaje de inhibición y la viabilidad celular en el huésped del albendazol contra V. corneae. Las Figs. 5 y 6 presentan una curva de los valores de densidad óptima (OD) obtenidos para cada cavidad de cultivo de T. gondii, en función de la concentración de la droga en el cultivo. La Fig. 7 es un gráfico basado en el ensayo de efectividad de la nitazoxanida contra bacterias desarrolladas en un caldo líquido. La Fig. 8 indica el porcentaje de partículas activas que tienen un tamaño menos que 0 µm. Descripción detallada de la invención El método para el tratamiento de infecciones de la presente invención comprende la administración de una composición farmacéutica que incluye, como agente activo, por lo menos un compuesto seleccionado del grupo integrado por la desacetil-nitazoxanida de la fórmula (I)- y por la nitazoxanida de la fórmula (II) Nitazoxanida (NTZ), el compuesto de la fórmula (II), es el nombre genérico para la 2-(acetoliloxi) -N- (5-nitro 2-tiazoli) bepzamida, que fue sintetizada originalmente por Rossignol y Cavier en 1975. 2mg de pitazoxanida pueden disolverse en 1 ml de DMSO. La nitazoxanida se absorbe bien por vía oral. Hasta ahora no hubo pruebas de que los compuestos acordes con ia fórmula (I) y/o (II) fueran ampliamente efectivos contra las infecciones por tremátodos, ni de que fueran suficientemente no tóxicos como para ser tolerados por seres humanos con inmunodeficiencia La preparación y ciertos usos de la nitazoxanida se revelan en la patente de los EE.UU. N° 3.950.351 , así como en publicaciones del presente inventor. La desacetil-nitazoxanida, compuesto de la fórmula (I), recibe a veces el nombre de tizoxanida o d-NTZ y es un metabolito de nitazoxanida. En la WO 95/28393, el presente inventor reveló un método para la fabricación de la composición que contiene una mezcla de los compuestos de la fórmula (I) y de la fórmula (II). SE ha observado últimamente que las partículas sólidas del compuesto de fórmula (I), del compuesto de fórmula (II) o de mezclas de ambos que tienen un tamaño de partícula comprendido entre 170 y 520 µm (tamaño medio de partícula = 352 µm) tienen una eficacia muy limitada cuando se los administra a seres humanos y animales por vía oral. La eficacia de tales partículas es inferior a la de los productos farmacéuticos existentes y, por consiguiente, inaceptable para las normas existentes o los fines comerciales. Se ha observado también en perros que la administración oral de una única dosis de 50 miligramos por kilogramo de partículas sólidas del compuesto de la fórmula (I) y del compuesto de la fórmula (II) que tienen un tamaño de partícula menos que 5 µm provocaba serias reacciones adversas en estos animales. Se ha descubierto que, para lograr un tratamiento eficaz y seguro de las infecciones causadas por parásitos, bacterias, hongos y virus en humanos y animales, la composición farmacéutica, sea en forma de dosis sólidas o en suspensión oral, debe contener una dosis efectiva del agente activo en forma de partículas sólidas cuyo tamaño de partícula sea menos que 200 µm y que contengan el compuesto de la fórmula (I) y/o el compuesto de la fórmula (II), y que el tamaño medio de partícula de las partículas sólidas activas debe ser mayor que 10 µm. Un alto contenido de partículas del agente activo cuyo tamaño supere los 200 µm, con respecto a la cantidad de partículas que tienen un tamaño comprendido entre 5 y 200 µm, reduce significativamente la actividad quimioterapéutica de los compuestos. De manera preferente, las composiciones farmacéuticas de la presente invención no contienen más de un 5 % en peso de partículas sólidas activas con un tamaño superior a los 200 µm. De manera más preferente aún, las composiciones farmacéuticas de la presente invención no contienen sustancialmente ninguna partícula sólida con un tamaño superior a los 200 µm. Un alto contenido de partículas del agente activo cuyo tamaño sea inferior a 5 µm, con respecto a la cantidad de partículas que tienen un tamaño comprendido entre 5 y 200 µm, puede producir efectos adversos en los animales y en los seres humanos Por otra parte, se ha observado que las partículas cuyo tamaño es menor que 5 µm se absorben rápidamente del tracto gastrointestinal a la sangre y no resultan tan eficaces, en consecuencia, contra parásitos, bacterias, hongos y virus que se alojan habitualmente en el tracto gastrointestinal de los animales y los seres humanos. No eia posible paia el experto en el arte prever que el tamaño de partícula del compuesto de la fórmula (I) y del compuesto de la fórmula (II) pudiera tener un efecto tan significativo sobre su actividad antimicrobiana en animales y humanos. Por ejemplo, en estudios desarrollados por el Inventor, otros compuestos antiparasitarios como el albendazol, el mebendazol, la niclosamida, el praziquantel y el metronidazol no han mostrado una diferencia tan marcada en la actividad antiparasitaria en animales y humanos según el tamaño de partícula. Además, el experto en el arte no podía prever que el tamaño de partícula del compuesto de la fórmula (I) y del compuesto de la fórmula (II) tendría un efecto tan adverso sobre la tolerancia en animales y humanos a la administración de dicho agente activo El(los) compuesto(s) de la fórmula (I) y (II) pueden administrarse en forma de dosis sólidas o en suspensiones acuosas, y se prefiere que la composición farmacéutica contenga la dosis efectiva del agente activo en forma de partículas sólidas de la fórmula (I) y/o (II) con un tamaño de partícula inferior a los 200 µm, y tamaño medio de partículas mayor que 10 µm, en una determinación realizada con un contador Coulter® LS 100. Este equipo emplea luz láser a 750 nm para dimensionar las partículas entre 0.4 y 900 µm de diámetro por difracción de luz. La medición de las muestras se lleva a cabo en agua con una pequeña cantidad de Tritón X-100 destinada a incrementar la humectabilidad y deflocular el polvo. El tamaño medio de partícula más ventajoso de dichas partículas sólidas activas está comprendido entre 10 y 100 µm, preferentemente entre 20 y 50 µm. Los siguientes son ejemplos de las composiciones preferidas: • una composición en la cual menos del 10 % en peso de las partículas sólidas activas tiene un tamaño de partícula mayor que 100 µm. • una composición en la cual por lo menos el 50 % en peso de las partículas sólidas activas tiene un tamaño de partícula menor que 50 µm. El tamaño medio de partícula más ventajoso de dichas partículas sólidas activas está comprendido entre 10 y 100 µm, preferentemente entre 20 y 50 µm. De acuerdo con una realización preferida de la composición, menos del 10 % de dichas partículas sólidas activas tiene un tamaño menor que 5 µm. El agente o los agentes activos utilizados en la forma de dosis sólida o de suspensión es para mayor conveniencia una mezcla de partículas sólidas de compuestos de la fórmula (I) y de la fórmula (II) con un tamaño de partícula menor que 200 µm y que el contenido en peso del compuesto de la fórmula (I) esté comprendido entre el 0.5 y el 20 %, y preferentemente que esté comprendido entre el 0.5 y el 10 %, con respecto al peso total de los compuestos de la fórmula (I) y de la fórmula (II).

La presente invención también se refiere a las composiciones farmacéuticas descriptas anteriormente que contienen para mayor conveniencia por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable. Como ejemplos de dichos ácidos se pueden citar los siguientes: ácido cítrico, ácido glutámico, ácido succínico, ácido etanosulfónico, ácido acético, ácido tartárico, ácido ascórbico, ácido metanosulfónico, ácido fumárico, ácido adípico, ácido málico y mezclas de los mismos. El ácido cítrico es sumamente adecuado. Su presencia incrementa la estabilidad del agente o de los agentes activos. La relación entre el peso del ácido farmacéuticamente aceptable/el peso de dichas partículas sólidas activas está comprendida para mayor conveniencia entre 0.01 y 0.5, preferentemente entre 0.03 y 0.2. También para mayor conveniencia, la cantidad de ácido presente es suficiente para ajustar el pH de la suspensión entre 2 y 6, preferentemente entre 3 y 5 y más preferentemente aún, entre 3.5 y 4.5. En la WO/95/28393 se revelan técnicas de preparación de las formas de dosaje líquido y sólido de la composición farmacéutica, así como ejemplos preferidos de la misma, que se incorporan en su totalidad a la presente por referencia. Las composiciones contienen para mayor conveniencia un agente humectante y posiblemente un derivado del almidón tal como el que se revela en la patente de los EE.UU. N° 5.578.621 , cuyo contenido se incorpora a la presente en su totalidad por referencia, la cual revela posibles agentes humectantes y derivados del almidón. El agente humectante descripto en la patente de los EE.UU. N° 5.578.621 cumple la función de agente dispersante. Tales composiciones farmacéuticas, sea en forma de dosaje sólido o líquido o en forma de cremas o ungüentos, pueden contener opcionalmente agentes activos adicionales como antibióticos, agentes antivirales o inhibidores de la bomba de protones. Si bien no es ventajoso, es posible que dichas formulaciones farmacéuticas contengan partículas sólidas activas del compuesto de la fórmula (I) y/o del compuesto de la fórmula (II) con un tamaño mayor que 200 µm. Las composiciones pueden contener excipientes conocidos como tales destinados a obtener formas adecuadas para la administración oral. A fin de lograr un excelente nivel de eficacia contra un amplio espectro de parásitos, bacterias, hongos y virus, el factor de distribución está comprendido para mayor conveniencia entre 0.8 y 2, preferentemente entre 1.1 y 1 9 y más preferentemente aún debe ser mayor que 1.5 Dicho factor de distribución se calcula según la fórmula siguiente: Fgo% = (090% " 010%) / ((090% + 010%) / 2) donde: • F90% es el factor al 90 %; • 09O% es el tamaño de partícula máximo de la fracción de partículas correspondiente al 90 % de dichas partículas sólidas activas y • 01O% es el tamaño de partícula máximo de la fracción de partículas correspondiente al 10 % de dichas partículas sólidas activas Según una realización específica de la presente invención, las partículas de un compuesto de la fórmula (I) y/o de la fórmula (II) se preparan de acuerdo con los métodos descriptos aquí anteriormente y luego son trituradas de modo que menos del 10 5 de dichas partículas activas sea mayor que 100 µm, menos del 50 % de dichas partículas sea mayor que 50 µm y menos del 10 % de dichas partículas activas sea menor que 5 µm en tamaño, estando el tamaño medio de partículas comprendido entre 20 y 50 µm. Se granulan después dichas partículas activas mediante una mezcla que contiene partículas sólidas activas y por lo menos un agente granulador. Como ejemplos de agentes granuladores se pueden citar los siguientes: polivinilpirrilidona, agua, alcohol, hidroxil celulosa sacarosa y mezclas de los mismos. Se agrega para mayor conveniencia por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable durante el proceso de granulación. La presente invención se refiere a formas de dosaje sólido que contienen una composición de la invención tales como tabletas, tabletas dispersables, tabletas recubiertas, matrices, etc. La forma de dosaje de la presente invención contiene, por ejemplo: • partículas sólidas activas con un tamaño de partícula menor que 200 µm, de las cuales menos del 10 % tienen un tamaño mayor que 100 µm, menos del 50 % tiene mayor que 50 µm y menos del 10 % tiene un tamaño menor que 5 µm, estando el tamaño medio de partículas comprendido entre 20 y 50 µm; • por lo menos un agente granulador; • por lo menos un agente humectante; • por lo menos un derivado del almidón y • por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable que se agrega preferentemente durante el proceso de granulación. Las formas de dosaje líquido tales como las suspensiones acuosas de la presente invención contienen, por ejemplo: • como agente activo, partículas sólidas que contienen un compuesto de la fórmula (I) y/o un compuesto de la fórmula (II), las cuales tienen un tamaño de partícula menor que 200 µm, cumpliéndose además que menos del 10 % de dichas partículas tiene un tamaño mayor que 100 µm, menos del 50 % de dichas partículas tiene un tamaño mayor que 50 µm y menos del 10 % de dichas partículas tiene un tamaño menor que 5µm; • por lo menos un agente granulador; • por lo menos un agente humectante; • por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable, estando el pH de la suspensión comprendido entre 2 y 6, preferentemente entre 3 y 5 y más preferentemente aún, entre 3.5 y 4.5; • por lo menos un espesante, por ejemplo goma de xantana, goma aguar, celulosa cristalina, goma de carruba, carboximetilcelulosa o una mezcla de los mismos. Las formas en crema o ungüento de la presente invención aptas para administración oral contienen, por ejemplo: • como agente activo, partículas sólidas que contienen un compuesto de la fórmula (I) y/o un compuesto de la fórmula (II), las cuales tienen un tamaño de partícula menor que 200 µm, cumpliéndose además que menos del 10 % de dichas partículas tiene un tamaño mayor que 100 µm, menos del 50 % de dichas partículas tiene un tamaño mayor que 50 µm y menos del 10 % de dichas partículas tiene un tamaño menor que 5µm; • por lo menos un agente humectante; • por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable, estando el pH de la suspensión comprendido entre 2 y 6, preferentemente entre 3 y 5 y más preferentemente aún, entre 3.5 y 4.5; • por lo menos un espesante, por ejemplo goma de xantana, goma aguar, celulosa cristalina, goma de carruba, carboximetilcelulosa o una mezcla de los mismos. Las formas en crema o ungüento aptas para aplicaciones tópicas o intravaginales contienen, por ejemplo: • como agente activo, partículas sólidas que contienen un compuesto de la fórmula (I) y/o un compuesto de la fórmula (II), las cuales tienen un tamaño de partícula menor que 200 µm, cumpliéndose además que menos del 10 % de dichas partículas tiene un tamaño mayor que 100 µm, menos del 50 % de dichas partículas tiene un tamaño mayor que 50 µm y menos del 10 % de dichas partículas tiene un tamaño menor que 5µ?m; • por lo menos un agente humectante; • por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable, estando el pH de la suspensión comprendido entre 2 y 6, preferentemente entre 3 y 5 y más preferentemente aún, entre 3.5 y 4.5; • alcohol cetilico y/o derivados glicéridos y/o propilénglicol; • por lo menos un espesante, por ejemplo goma de xantana, goma aguar, celulosa cristalina, goma de carruba, carboximetilcelulosa o una mezcla de los mismos. Descripción de la preparación de las composiciones farmacéuticas Se sometió a trituración el compuesto seco puro de la fórmula (I) y el compuesto seco puro de la fórmula (II) y se hizo pasar el triturado resultante por una malla. Después de la trituración, la distribución del tamaño de partículas del compuesto de fórmula (I), de fórmula (II) o de mezclas de los mismos era la que se indica en la Fig. 8. La Fig. 8 muestra el porcentaje de partículas con un tamaño menor que 0 µm. De dicha figura se puede deducir que: • menos del 10 % en peso de las partículas tenia un tamaño de partícula menor que 5 µm aproximadamente; • menos del 10 % en peso de las partículas tenía un tamaño mayor que 70 µm aproximadamente; • el tamaño medio de partículas era de aproximadamente 40 µm; • el factor de distribución de las partículas era 1.73 aproximadamente, calculándose dicho factor de distribución según la fórmula siguiente: F90% = (090% " 010%) ((090% + 010%) / 2) donde: • F90% es el factor al 90 %; • 09O% es el tamaño de partícula máximo de la fracción de partículas correspondiente al 90 % de dichas partículas sólidas activas y • 01O% es el tamaño de partícula máximo de la fracción de partículas correspondiente al 10 % de dichas partículas sólidas activas. En las tablas siguientes se presentan ejemplos específicos de tales composiciones.

Tabla 1. Ejemplo de composición de tabletas dispersables para administración oral que contienen como agentes activos un compuesto de la fórmula (I) y un compuesto de la fórmula (II).

Nitazoxanida (99%) + desacetil-nitazoxanida (1 %) 200 mg Celulosa microcristalina Avicel pH 102 comercializado por FMC-USA 1 16 mg Crospovidona 25 mg Estearato de magnesio 3 mg Dióxido de silicio coloidal 5 mg Acido cítrico 10 mg Saborizante N° 877720 comercializado por Robertet 10 mg Sacarinato de sodio 2 mg Tabla 2. Ejemplo de composición de tabletas recubiertas para administración oral que contienen como agentes activos un compuesto de la fórmula (I) y un compuesto de la fórmula (II). Nitazoxanida 500 mg Almidón de maíz 60 mg Almidón de maíz pregelatinizado 70 mg Hidroxipropil metilcelulosa 5 mg Sacarosa 20 mg Glicolato sódico de almidón 30 mg Acido cítrico 25 mg Talco 8 mg Estearato de magnesio 7 mg Coberturas: Solución de azúcar caliente o una película rociada sobre las tabletas o granulos que contienen 500 mg del agente activo. 1 Tabla 3. Ejemplo de composición de una solución acuosa para administración oral que contiene como agentes activos un compuesto de la fórmula (I) y un compuesto de la fórmula (II). El pH de la suspensión era 4.1 aproximadamente. Nitazoxanida (98 %) + desacetil-nitazoxanida (2 %) 2 g Agua destilada 100 ml Benzoato de sodio 0.2 g Sacarosa 30.5 g Goma de xantana 0.2 g Celulosa microcristalina y carboximetilcelulosa sódica Avicel RC-591 comercializado por FMC-USA 0.8 g Acido cítrico 0.2 g Citrato de sodio deshidratado 50 mg Saborizante de frutilla N° 877720 comercializado por Robertet 125 mg Tintura roja N° 33 D y C 1 mg Tabla 4. Ejemplo de crema para administración oral que contiene como agentes activos un compuesto de la fórmula (I) y un compuesto de la fórmula (II). Nitazoxanida (98 5) + desacetil nitazoxanida (2 %) 500 mg Aceite mineral 10 g Azúcar negra 1 g Celulosa microcristalina y carboximetilcelulosa sódica Avicel RC-591 comercializado por FMC-USA 0.8 g Acido cítrico 0.2 g Tabla 5. Ejemplo de crema o ungüento para aplicaciones tópicas o intravaginales que contiene como agentes activos un compuesto de la fórmula (I) y un compuesto de la fórmula (II). Nitazoxanida (98 5) + desacetil nitazoxanida (2 %) 8 g Cremaphor A6 2g Cremaphor A25 1 .5 g Aceite mineral 7g Luvitol EHO 7G Monoéster de glicerol 4 g Alcohol cetílico 3 g Simeticona 0.5 g Germaben II 1 g Propilénglicol 3.5 g Agua destilada 62.5 g Las composiciones farmacéuticas de la presente invención son composiciones con amplio espectro de acción contra parásitos, bacterias, hongos y virus, especialmente cuando la administración es oral. Las composiciones farmacéuticas reveladas más arriba en la presente invención resultaron muy eficaces y seguras en animales y seres humanos. Específicamente, en estudios clínicos realizados con seres humanos, se ha observado que la eficacia de las composiciones descriptas aquí anteriormente resultó significativamente mayor para el tratamiento de infecciones por parásitos que las mismas formulaciones del compuesto activo que tenían un tamaño de partícula comprendido entre 170 y 520 µm (tamaño medio de partícula = 352 µm), incluso cuando las partículas de tamaño mayor se administraron a los pacientes en dosis hasta tres veces superiores y durante períodos más prolongados. En la Tabla 6 se presentan ejemplos de índices de curación.

Tabla 6. Comparación de los resultados obtenidos en estudios clínicos humanos utilizando compuestos de la fórmula (I) y de la fórmula (II) con un tamaño de partículas comprendido entre 170 µm y 520 µm (media = 352 µm) con los resultados obtenidos usando la fórmula (I) y la fórmula (II) con un tamaño de partículas comprendido entre 5 µm y 200 µm (media = 34 µm). Compuesto de la fórmula (I) (98 %) + compuesto de la fórmula (II) (2 %) Tamaño de partículas 170 a 520 µm Tamaño de partículas 5 a 200 µm Dosis = 15 a 50 mg/kg/dia durante 3 Dosis = 15 a 50 mg/kg/día durante 3 a 7 días días Cant. curados/Total = índice Capt. curados/Total = índice Parásito porcentual de cura porcentual de cura Blastocystis hominis 12/27 = 44 % 10/10 = 100 % Entamoeba histolytica 29/47 = 62 % 106/133 = 80 % Giardia lamblia 1 1/37 = 30 % 50 /73 = 68 % Ascaris lumbpcoides 3/69 = 4 % 144/179 = 80 % Trichuris trichiura 7/48 = 15 % 58/79 = 73 % Para cada uno de- los parásitos que figuran en la Tabla 6, los correspondientes índices porcentuales de cura fueron significativamente mejores en el caso de pacientes tratados con partículas activas cuyo tamaño estaba comprendido entre 5 y 200 µm que en el caso de pacientes tratados con partículas cuyo tamaño estaba comprendido entre 170 µm y 520 µm. El nivel de significación estadístico en cada caso era p < 0.02 (usando el test de ?2 estándar). Este fue el resultado, aun cuando las dosis del agente activo con partículas de mayor tamaño fueron habitualmente mayores y se administraron durante un período más largo que las dosis del agente activo con tamaño de partículas menor que 200 µm. En ninguno de los dos grupos de pacientes hubo efectos adversos graves. En las pruebas realizadas con animales se obtuvieron resultados similares a los indicados en lo inmediato anterior. Además, las reacciones adversas observadas en perros después de la administración oral de una dosis única de 50 miligramos por kilogramo del compuesto de fórmula (I) y del compuesto de fórmula (II) no se observaron en estudios extensivos de animales usando el compuesto de fórmula (I) y el compuesto de fórmula (II) que tenían un tamaño de partícula comprendido entre 5 µm y 200 µm (media > 10 µm), incluso cuando se administró la misma dosis o una dosis más alta de dichos compuestos en forma diaria durante 90 días o más. Más aún, dichas composiciones resultaron estables (aun sometidas a temperaturas de 40 ° C y 65 % de humedad relativa durante seis meses o, en el caso de suspensiones líquidas, cuando permanecieron en suspensión acuosa bajo estas condiciones durante tres meses). Este resultado asegura que los ingredientes activos no se degradan y que las composiciones mantienen su eficacia durante un período de tiempo posterior a la preparación, que resulta adecuado para las aplicaciones medicinales y comerciales. A continuación, se demostrará la eficacia de las composiciones farmacéuticas. EJEMPLO I CRYPTOSPORIDIUM PARVUM En un ensayo clínico preliminar se trataron 30 pacientes afectados con SIDA que padecían diarrea criptosporídica crónica con nitazoxanida oral en dosis de 500 a 2000 mg diarios. Si la diarrea persistía, se administraba a los pacientes una dosis adicional de 2000 mg diarios durante otras cuatro semanas.

Veintiocho pacientes completaron dos semanas o más de tratamiento y 16 de ellos fueron evaluados en cuanto a su respuesta terapéutica hacia la octava semana de tratamiento. De este último grupo, 12 personas experimentaron una reducción del 50 por ciento o más en la frecuencia de deposiciones diarias, la presencia del parásito en las heces de 10 individuos se redujo notablemente o desapareció totalmente y en cuatro individuos el organismo dejó de detectarse. Seis pacientes satisficieron en forma positiva los criterios clínicos y parasitológicos Los pacientes que recibieron dosis más altas de la droga durante períodos más largos tenían mayor probabilidad de respuesta positiva. Un estudio de registro abierto de la nitazoxanida en casos de diarrea criptosporídica ligada al SIDA registró una disminución de las deposiciones en individuos que tomaban dosis de 500, 1000, 1500 y 2000 mg diarios de la droga Los participantes tenían un conteo CD4+ promedio de 42 células/mm3 (rango 0-303 células/mm3) y una media de 6.7 deposiciones diarias durante un promedio de 15 meses, se detectaba en las heces la presencia de oocistos de Cryptosporidium parvum sin otros agentes patógenos entéricos evidentes. En casi todos los pacientes, había fracasado la terapia con azitromicina o paromomicina. Después de 23 semanas de tratamiento, 9 pacientes de un grupo de 13 mostraron una respuesta clínica completa (entre una y tres deposiciones predominantemente formadas a diario) y 4 de los 13 mostraron una respuesta clínica parcial (una disminución de por lo menos el 50 por ciento en las deposiciones diarias o un cambio tal en la consistencia de las heces de modo que el 75 por ciento tenía forma) Hacia el final del estudio se observó una total erradicación del parásito en 8 pacientes sobre 1 1 , mientras que los tres restantes mostraron una reducción sustancial en el nivel de oocistos. Se observó una tendencia hacia respuestas mejores con dosis de 1000 mg diarios o superiores y una terapia más prolongada. Dos participantes del ensayo presentaron erupciones cutáneas urticantes. Más del 90 % de los individuos participó del estudio durante más de cuatro semanas EJEMPLO II CRYPTOSPORIDIUM PARVUM Información sobre dosis in vitro Se disolvió nitazoxanida en dimetilsulfóxido (DMSO) estéril y se la aplicó a cultivos monocapa de células infectadas por oocistos de C parvum intactos en concentraciones de 100 µg/ml, 10 µg/ml, 1 µg/ml y 0.1 µg/ml Se llevó a cabo un segundo ensayo con nitazoxanida a concentraciones de 20, 2 , 0 2 y 0.02 µg/ml. Estas concentraciones se alcanzaron por dilución en serie con un medio DMEM completo para obtener una concentración final de DMSO del 0 5 % El medio control también contenía DMSO 0 5 % Se utilizó en el experimento un cultivo de células MDBKF5D2 desarrolladas en cámaras de 7 mm y en cuanto al Cryptosporidium parvum se emplearon oocistos GCH1 , 5 x 104 por cavidad El experimento tenía por objeto comparar el efecto de la paromomicina (control positivo) con el de la nitazoxanida (droga experimental). El matepal utilizado comprendió Suero de Conejo anti - esporozoito de C parvum (0.1 %) anticuerpo de cabra anti-conejo conjugado con fluoresceína (1 %). Ensayo de toxicidad Se colocaron 200 µl del medio que contenía la solución de nitazoxanida en concentraciones de 100, 10, 1 y 0 1 µg/ml y los controles correspondientes en dos placas de 96 cavidades que contenían monocapas de células MDBKF5D2 confluentes y en dos cavidades sin monocapas. Se incubó la droga sobre las monocapas a 37° C y CO28 %. A las 24 horas (ensayo 1) y a las 48 horas (ensayo 2) se agregaron a cada cavidad MTS (solución de Owen) y PMS en concentraciones de 333 µg/ml y 25 µM respectivamente. Se colocó nuevamente la placa en el incubador a oscuras para que desarrollara durante dos horas. A las dos horas, se transfirieron 100 µl de cada sobrenadante a una nueva placa para microtitulación y se midieron los valores con un equipo ELISA a 490 nm. Se registraron los resultaron, los cuales fueron analizados. La toxicidad porcentual se calculó restando la densidad óptica media (OD) de los sobrenadantes de droga de la densidad óptica media (OD) de los sobrenadantes del medio control (sin droga), dividiendo el valor obtenido por la densidad óptica del medio control y multiplicando luego por 100, como se indica a continuación: OD del medio - OD de la droga x 100 OD del medio Evaluación de oocistos de C. parvum intactos: Se incubaron en nitazoxanida (100, 20, 10, 2, 1 , 0.2, 0.1 y 0.02 µg/ml) 5 x 104 óocistos de C. parvum por cavidad a 37° C (C02 8 %) sobre monocapas de células MDBKF5D2 confluentes. El nivel de infección de cada cavidad se determinó y analizó por inmunofluorescencia a las 24 y las 48 horas. El porcentaje de inhibición se calculó restando la media del conteo de parásitos/10 campos de las cavidades con la droga experimental de la media del conteo de parásitos /10 campos en el medio control (sin droga), dividiendo el resultado por el conteo del medio control y multiplicando después por 100, según se indica a continuación: Conteo del medio control - conteo droga experimental x 100 Conteo del medio control Resultados: Ensayo 1 : 24 horas Conteo de parásitos/10 campos No disponible debido a la toxicidad Ensayo 2: 48 horas * Conteo de parásitos/10 campos Impacto de la nitazoxanida sobre los oocistos de C. parvum intactos. En el ensayo 1 , concentraciones de nitazoxanida de 10, 1 y 0.1 dieron como resultado niveles de inhibición de 94.4, 77.2 y 51.8 % respectivamente, y niveles de toxicidad de 65.1 , 8.3 y 19.3 respectivamente. Si bien se produjo una inhibición casi completa de la infección por parásitos con un valor de 10 µg/ml, resulta evidente una alta toxicidad. Con un valor de 1 µg/ml de nitazoxanída, la comparación entre la inhibición de los parásitos y la toxicidad celular con los valores respectivos para la paromomicina resultó favorable a una concentración de 2 mg/ml (77.2 % de inhibición y 8.3 % de toxicidad para la nitazoxanida con una concentración de 1 µg/ml y 51 % de inhibición y 23 8 % de toxicidad para la paromomicina con una concentración de 2 mg/ml). En el ensayo 2, se modificó la droga para obtener una mejor distribución de la misma con toxicidad mínima. Por consiguiente, los cultivos continuaron viables durante 48 horas en lugar de las 24 horas del ensayo 1. La incubación durante 48 horas mostró claramente una mayor toxicidad celular relativa que la que resultaba evidente para la paromomicina en ambos ensayos. La concentración de 20 µg/ml de nitazoxanida continuaba siendo demasiado tóxica a las 48 horas de incubación, pese a que la monocapa de células parecía todavía intacta. Es posible que la alta toxicidad que debe afectar las funciones celulares también afecte el desarrollo de la infección de parásitos Con una concentración de 2 µg/ml de nitazoxanida, se observó una inhibición considerable de la infección de parásitos con una toxicidad celular relativamente baja Las diluciones mayores también tuvieron como resultado una inhibición significativa con toxicidad baja. A una concentración de la droga de 2 µg/ml, la moderada toxicidad celular y una actividad inhibidora del 94.90 % indican que la nitazoxanida 2 µg/ml resulta supepor a la paromomicina 2 mg/ml para la infección in vitro de C parvum (por ejemplo, una concentración 1000 veces más alta). EJEMPLO lll CRYPTOSPORIDIUM PARVUM Dosis in vitro e información de almacenamiento: Se ensayó el efecto de la nitazoxanida y la desacetil-nitazoxanida (NTZ y NTZidos) sobre oocistos de C. parvum intactos y monocapas de células infectadas por esporozoitos que ya habían pasado por la etapa de quiste a concentraciones de °0, 1 , 0.1 y 0.01 µg/ml. Cada compuesto se disolvió en dimetilsulfóxido (DMSO) al 100 % y luego se diluyó hasta alcanzar la concentración deseada con DMEM estéril. Cada concentración de nitazoxapida y de los medios control contenía 0.025 % de DMSO como constante. Se utilizó en el experimento un cultivo de células MDBKF5D2 desarrolladas en cámaras de 7 mm y en cuanto al Cryptosporídium parvum se emplearon oocistos GCH1 , 5 x 104 por cavidad. El experimento tenía por objeto comparar el efecto de la paromomicina (control positivo) con el de la nitazoxanida (droga experimental). El material utilizado comprendió Suero de Conejo anti - esporozoito de C. parvum (0.1 %) anticuerpo de cabra anti-conejo conjugado con fluoresceína (1 %). Ensayo de toxicidad: Se colocaron 200 µl del medio que contenía la solución de nitazoxanida en las concentraciones antes mencionadas y los controles correspondientes en dos placas de 96 cavidades que contenían monocapas de células MDBKF5D2 confluentes y en dos cavidades sin monocapas. Se incubó la droga sobre las monocapas a 37° C y C02 8 %. A las 48 horas se agregaron a cada cavidad MTS (solución de Owen) y PMS en concentraciones de 333 µg/ml y 25 µM respectivamente. Se colocó nuevamente la placa en el incubador a oscuras para que desarrollara durante dos horas. A las dos horas, se transfirieron 100 µl de cada sobrenadante a una nueva placa para microtitulación y se midieron los valores con un equipo ELISA a 490 nm. Se registraron los resultaron, los cuales fueron analizados. La toxicidad porcentual se calculó restando la densidad óptica media (OD) de los sobrenadantes de droga de la densidad óptica media (OD) de los sobrenadantes del medio control (sin droga), dividiendo el valor obtenido por la densidad óptica del medio control y multiplicando luego por 100, como se indica a continuación: OD del medio - QD de la droga x 100 OD del medio Los puntajes de cítotoxicidad se asignaron del siguiente modo: 0.5 % toxicidad = 0, 6-25 % de toxicidad = 1 , 26-50 % de toxicidad = 2, 51-75 de toxicidad = 3 y 76-100 % de toxicidad = 4 Como estándar, los valores de citotoxicidad 0 y 1 deben considerarse aceptables. Los valores 2, 3 y 4 se consideran muy altos para la monocapa de células. Evaluación de oocistos de C parvum intactos: Se incubaron en nitazoxanida en las concentraciones antes mencionadas 5 x 104 oocistos de C. parvum por cavidad a 37° C (C02 8 %) sobre monocapas de células MDBKF5D2 confluentes. El nivel de infección de cada cavidad se determinó y analizó en computadora mediante por inmunofluorescencia a las 48 horas. El porcentaje de inhibición se calculó tomando el conteo medio de parásitos/10 campos en las cavidades con la droga experimental y restándolo del conteo medio de parásitos /10 campos en el medio control (sin droga), dividiendo el resultado por el conteo del medio control y multiplicando después por 100, según se indica a continuación.

Conteo del medio control - conteo droga experimental x 100 Conteo del medio control Resultados: Evaluación de oocistos de C. parvum (48 horas) Conc. - µg/ml; Parásito - Conteo medio de parásitos/campo (12 campos analizados); % Inhib. - Inhibición porcentual de la infección por parásitos; % Tox. - Toxicidad porcentual de la droga para las células Puede verse en los datos anteriores que la actividad inhibitoria de los NTZidos es la misma que la de la NTZ del Ejemplo II. Tanto la nitazoxanida como, la desacetil-nitazoxanida resultaron igualmente efectivas ¡n vitro contra Cryptospohdium parvum cuando se hicieron ensayos en paralelo, obteniéndose un 98 y un 94 % de inhibición con 10 µg/ml y 1 µg/ml de cada compuesto respectivamente. En el caso de la nitazoxanida la menor concentración que brindó más del 90 % de inhibición fue de 1 µg/ml, mientras que se pudo obtener una inhibición del 50 % con concentraciones más bajas de nitazoxanida, por ejemplo, 0.2, 0.1 y 0.02 µg/ml. En las mismas condiciones experimentales, la paromomicina utilizada como control resultó 2.000 veces menos efectiva, con porcentajes de inhibición comprendidos entre el 51 y el 83 % para una concentración de 2 000 µg/ml.

EJEMPLO IV E. INTESTINALIS Y V. CORNEA Se agregaron células 2RK-13 (línea de células renales de conejo) a placas de cultivo de 24 cavidades, con una concentración de 2.6 x 105 células por cavidad (1.02 ml de medio; RPMI 1640 con 2 mM de L-glutamina y suero bovino fetal inactivado por calor al 5%). Se incubó a 37° C en una incubadora de CO2 durante la noche, momento en el cual las células eran confluentes (con una duplicación, se podría estimar la cantidad de células en 5 x 105 por cavidad). Se agregaron a las células huésped organismos de Septata intestinalis (desarrollados por cultivo de tejidos) en proporción 3:1 con respecto a las células huésped estimadas, es decir, a razón de 15 x 106 organismos por cavidad. Esta proporción tuvo como consecuencia que el 50 % aproximadamente de las células resultara infectada. Las drogas se disolvieron en DMSO, agua o metanol (según la solubilidad) para generar reservas con concentraciones de 1 .0 µg/ml que se almacenaron a -70° C. Las diluciones utilizadas en los experimentos se realizaron en un medio de cultivo de tejido completo. Se ensayaron todas las diluciones en cavidades por triplicado. El medio se reemplazó cada tres o cuatro días (con drogas recién diluidas).

En el sexto día (después de agregar los parásitos y las drogas), las células se analizaron para medir la toxicidad. Se estudiaron las células de control que habían recibido drogas pero no estaban infectadas con parásitos para verificar su confluencia, morfología y también para observar la presencia de células muertas o flotantes. Las células incubadas con parásitos sólo se observaron para confirmar que los parásitos eran infecciosos (es decir, para verificar la presencia de vacuolas parasitóforas). Se evaluaron las células incubadas con parásitos y drogas a fin de verificar la toxicidad y la cantidad relativa de vacuolas parasitóforas (es decir, cantidad alta, mediana o baja). Al décimo día se agregaron a las cavidades de cultivo 100 µl de SDS 10 % (concentración final 0.5 %) a fin de romper las membranas de las células huésped y provocar la liberación de microsporidios. La cantidad total de parásitos presentes en cada cavidad se determinó por conteo de una alícuota en un hematocitómetro. Los resultados se expresaron como porcentajes de inhibición (relativos a las células infectadas que no recibieron droga). Los resultados se presentan en las Figs. 1 -4. EJEMPLO V TOXOPLASMA GONDII Se verificaron los efectos de la nitazoxanida y la desacetil-nitazoxanida contra los parásitos, más específicamente, contra la cepa RH de Toxoplasma gondii, conservada por pasajes sucesivos en ratones. Se inoculó T. gondii a cultivos celulares de fibroblastos MRC5 (Bio-Merieux, Francia) desarrollados en microplacas de 96 cavidades. Se agregaron 200 taquizoitos recién recogidos a cada cavidad de cultivo, excepto en las 8 cavidades de control (controles negativos). Después de 4 horas de incubación, se agregaron diluciones de la droga a los cultivos. Se ensayaron la nitazoxanida y la desacetil-nitazoxanida (dNTZ) a distintas concentraciones, desde 8.10-4 y 40 mg/l. Las drogas se diluyeron inicialmente en DMSO a una concentración de 2 mg/ml y luego se prepararon diluciones en serie en el medio de cultivo. No se observaron precipitados. Las diluciones de la droga se agregaron a los cultivos (8 cavidades para cada dilución) y luego se incubaron las placas durante 72 horas. Los cultivos se fijaron posteriormente con metanol frío. La evaluación del desarrollo de T. gondii se efectuó con ELISA utilizando un anticuerpo anti T. gondii de conejo marcado con peroxidasa. Se registraron los valores de densidad óptica para cada cavidad. Los resultados se indican en un gráfico que representa los valores de OD obtenidos para cada cavidad de cultivo en función de la concentración de la droga en el cultivo. El análisis estadístico comprendió un análisis de regresión con intervalo de confianza del 95 % y la determinación de las curvas de respuesta a la droga a partir de los valores de OD generados para cada droga. Se tiñó una placa con Giemsa para estudiar el efecto citopático en los cultivos. Se realizaron tres experimentos separados. En cada uno de ellos, se utilizaron dos placas de cultivo para cada compuesto y en cada placa se emplearon 8 cavidades idénticas para cada concentración de droga. Resultados: Se obtuvieron resultados similares para los tres grupos de experimentos. En las Figuras 5 a, b, c y 6 a, b, c se representaron gráficamente los resultados de un experimento representativo para cada droga. Nitazoxanida (Fiqs. 5 a, b, c): No se observó efecto inhibitorio alguno para concentraciones comprendidas entre 10"4 mg/l y 0.3 mg/l. Se observó un efecto significativo para concentraciones > 0.6 mg/l y una total inhibición del desarrollo del Toxoplasma para concentraciones > 2.5 mg/l. Sin embargo, para esta última concentración, se advirtió también una marcada toxicidad en la monocapa de células. Al examen microscópico, la monocapa mostró que la NTZ a concentraciones de 1.25 mg/l inducía un efecto citopático en las células parasitadas, con aumento de la vacuola parasitófora y reducción del número de parásitos intracelulares. El análisis de regresión indicó que la concentración que inhibía el 50 % podía estimarse en 1.2 mg/l. Desacetil nitazoxanida (Figs. 6 a, b, c): Se obtuvieron resultados similares de los ensayos con desacetil nitazoxanida: no hubo efecto alguno para concentraciones comprendidas entre 10"4 mg/l y 0.3 mg/l, inhibición para concentraciones > 0.6 mg/l y marcada toxicidad para concentraciones > 2.5 mg/l. La concentración inhibitoria 50 % podría estimarse en 1.2 mg/l. Los resultados obtenidos fueron reproducidos en tres experimentos separados, con evaluación del efecto inhibitorio de la droga en cultivos repetidos para cada concentración de la misma. Tanto para la NTZ como para la desacetil NTZ, se pudo detectar una marcada inhibición del desarrollo de Toxoplasma a concentraciones de 1.2 mg/l aproximadamente, observándose alteraciones de la vacuola parasitófora aunque no hubo alteraciones en el parásito mismo. Estos resultados indican que las drogas experimentales tienen una conveniente actividad contra T. gondii y que se puede esperar un efecto inhibitorio in vivo si se logra una concentración de 1 mg/l aproximadamente en suero o en los tejidos. EJEMPLO VI MYCOBACTERIA Se descubrió que la nitazoxanida presenta actividad antimicrobiana contra organismos de la TBC. La tabla que se presenta a continuación muestra los resultados de un ensayo de nitazoxanida y desacetil nitazoxanida para determinar su concentración inhibitoria media (MIC) en el caso de Mycobacterium intracellular, llevado a cabo mediante la técnica de dilución de agar. Estos resultados se originan en varios experimentos, cada uno de los cuales insumió alrededor de 3 semanas de aplicación del método de dilución al aguar Middlebrook. Los datos indicados indican que, el caso de Mycobacteria, la nitazoxanida tiene una MIC de 4 µg/ml cuando se utiliza una cepa estándar de Mycobactehum intracellular proveniente de ATCC y se lleva a cabo un ensayo de dilución de agar. Concentraciones inhibitorias medias (MIC) de la nitazoxanida y la tizoxanida para Mycobacterium intracellulare MIC Nitazoxanida 2 µg/ml Tizoxanida 4 µg/ml * Las MIC se determinaron por el método estándar de dilución de agar utilizando agar Middlebrook 7H1 1 durante 3 semanas. Para este experimento se utilizó la cepa estándar M. intracellulare ATCC 13950. La Fig. 7 es un gráfico que representa el ensayo de efectividad de la nitazoxanida contra micobacterias desarrolladas en caldo líquido. Se aplicó un ensayo colorimétrico MTS que permite determinar el desarrollo en el curso de 4 horas en lugar de las 3 semanas requeridas por el método de conteo en agar. Como se puede observar en los datos de la Fig. 7, cuando se agregó la incorporación de nitazoxanida a las 72 horas de iniciado el cultivo, se produjo un efecto inmediato en el desarrollo si se lo comparaba con el desarrollo del medio de control. Una dosis de 3 µg/ml de nitazoxanida detiene el desarrollo durante las 24 horas siguientes, después, se produce un desarrollo lento durante los dos días siguientes. La dosis de 50 µg/ml resultó totalmente bacteriostática durante las 144 horas del cultivo. EJEMPLO Vil CYPTOSPORIDIUM PARVUM Se estudió el efecto de la nitazoxanida contra Cryptosporídium parvum en ratones infectados experimentalmente. La nitazoxanida provenía de Romark Laboratories, L.C. de Tampa, estado de Florida, EE.UU. Se modificó ia dosis humana total (1 g/día durante 7 días, es decir, 7 g) a fin de aplicarla a ratones según lo indicado por Paget y Barnes. Para el caso de los ratones (que pesan 20 gramos aproximadamente), la dosis humana se multiplicó por un factor 0.0026 a fin de obtener la cantidad total de droga necesaria para cada huésped a la mañana y a la noche durante 7 días consecutivos. Cada ratón recibió una dosis de 2.6 mg/día (7000 mg x 0.0026/7). Las dosis se administraron por boca a través de una jeringa de material plástico equipada con una aguja ad-hoc. Se infectaron veinte (20) ratones lactantes de 2 días de edad mediante administración oral de 100.000 oocistos de Cryptospohdium parvum obtenidos de terneros infectados. Antes de la administración a los ratones, se concentraron los oocistos utilizando una solución de azúcar, según la técnica descripta por Fayer y Ellis. Diariamente, se impregnaron torundas con material rectal de cada ratón utilizando la técnica de tinción de Niehl-Nielsen descripta por Graczyk et al. Los oocistos aparecieron en las heces 2 dias después de la infección oral de los animales. Al tercer día posterior a la infección, 10 ratones recibieron 1.3 mg de nitazoxanída a la mañana y a la noche, durante 7 días consecutivos, mientras que los 10 ratones restantes se mantuvieron como controles no tratados. Se obtuvo material de torundas rectales obtenidas diariamente en el curso de los 7 días de tratamiento y durante los 7 días posteriores a la finalización del mismo. Los oocistos estaban suspendidos en aceite y se realizó una cuenta de 100 campos en microscopio. Resultados: Los resultados que se muestran en la Tabla siguiente indican claramente que la nitazoxanida administrada en dosis diarias de 2.6 mg/día durante 7 días consecutivos resultó efectiva contra Cryptospo?dium parvum, produciendo una reducción de la cantidad de oocistos en las heces de los ratones infectados cuando se compararon los resultados con los animales de control. Al final del tercer día de tratamiento, la cantidad de oocistos presentes en las heces disminuyó en 6 de los 10 animales tratados. Al finalizar el tratamiento en el Día 7, la reducción de la cantidad de oocistos era total y los animales tratados resultaron negativos al análisis fecal en comparación con los controles no tratados. El efecto se mantuvo durante otros 7 días posteriores a la finalización del tratamiento, tal como indican los exámenes negativos efectuados en los días tercero y séptimo posteriores a la terminación del tratamiento: EJEMPLO VIII MYCOBACTERIUM Se comparó el efecto de la nitazoxanida con el del antibiótico izoniacida. Se utilizó en el protocolo como cepa de micobacterias el BCG (bacilo de Calmette- Guérin). La sensibilidad de esta cepa fue la misma que la del Mycobacterium tuberculosis, aunque esta cepa es menos dañina y no exige por consiguiente precauciones extremas para contener el agente tuberculoso. Se administraron a los ratones dosis diarias de 4 mg/ratón en 0.2 ml de aceite de girasol. Los resultados de los ratones tratados con nitazoxanida eran comparables con los obtenidos del grupo que recibió izoniacida EJEMPLO IX F ASCI OLA HEPÁTICA Se hicieron ensayos para comprobar la eficacia in vitro de la nítazoxanida y la desacetil-nitazoxanida contra Fasciola hepática. Se eligieron tres hígados de ternero bovino atacados de fasciolosis provenientes del Laboratorio de Diagnóstico de Medicina Veterinaria de Lousiana de Hardy's Meat Packers, Bunkie, estado de Lousiana. Se extrajo F. hepática de los conductos biliares correspondientes. Los parásitos se lavaron en solución salina estéril durante 1 hora y se transfirieron luego a una solución salina estéril o RPMI (pH 7.4) durante otras tres horas. Los tremátodos se mantuvieron después en suero de conejo RPMI estéril (50:50 v/v) o RPMI estéril (pH 7.4) durante la noche a 37 ° C con CO25%. El cultivo in vitro (37 ° C, C025%) se llevó a cabo según una modificación al método de Ibarra y Jenkins (Z. Parasitenkd. 70:655-661 , 1984). Aplicando una técnica estéril, los parásitos se lavaron dos veces durante 2-3 minutos en una solución salina balanceada de Hank (pH 7.2) y se colocaron individualmente en cavidades de placas de cultivo Linbro de seis cavidades cada una que contenían alícuotas de 10 ml de las soluciones designadas de la droga en el medio de cultivo. Este último era una combinación de suero de conejo RPMI 50:50 v/v con sangre de conejo 2 % más 100 ppm de penicilina y 100 ppm de estreptomicina. Sólo se utilizaron parásitos con actividad y morfología normal. Se utilizaron soluciones de depósito de NTZ y de su metabolito D-NTZ provenientes de Romark, las cuales se disolvieron en DMSO (2000 µg/ml) y se diluyeron en el medio de cultivo usando frascos volumétricos de 100 ml para obtener las concentraciones especificadas de la droga (100, 50, 25, 10, 5, 3, 1 µg/ml). En cada réplica se incorporaron dos parásitos de control, uno en un medio de cultivo sin medicación sin RBC y otro en el medio de cultivo sin medicación con RBC. Se estudiaron los parásitos en cuanto a los efectos del tratamiento con las drogas, fueran estos la muerte, perturbaciones de la motilidad o cambios morfológicos,* que se comparaban con las características de los parásitos de control utilizando un panel de luz negra y una lente de aumento 3x. Resultados: Experimento 1 : En el caso de D-NTZ, con las dosis de 50 y 100 µg, los parásitos estaban muertos o moribundos al cabo de una hora. En la primera hora de tratamiento con 25 µg, cuatro de los 7 parásitos estaban moribundos, dos se mantenían activos y uno de ellos estaba aletargado. Al cabo de tres horas todos los parásitos estaban muertos excepto dos tremátodos aletargados. Uno solo de los tremátodos aletargados sobrevivió durante cuatro horas. Con la dosis de 10 µg, se observó una actividad reducida en los parásitos al cabo de 1 , 3 y 4 horas y todos ellos estaban moribundos o habían muerto al cabo de 7 horas En los grupos tratados con dosis de 5 µg y 3 µg, se observó una actividad reducida en algunos individuos durante 24 horas, con un efecto algo menor en el caso de la dosis de 3 µg, pero todos los parásitos tratados con estas dosis murieron al cabo de 50 horas, a excepción de un parásito aletargado en cada grupo En el grupo tratado con dosis de 1 µg, se observó una mayor lentitud en la actividad en el curso de 42-74 horas, pero al cabo de 91 horas sólo 3 parásitos continuaban activos y uno estaba moribundo Con esta última dosis, al cabo de 115 horas sólo sobrevivía un parásito aletargado En el grupo de control con RBC se observó mortalidad a las 66 horas (un parásito), a las 91 horas (un parásito) y a las 115 horas (cuatro parásitos) En el grupo de control sin RBC, todos los parásitos estaban vivos al cabo de 91 horas y sólo uno de ellos había muerto al cabo de 115 horas Experimento 2 Se observó una actividad ligeramente mayor en el caso de NTZ que en el de D-NTZ, manifestada por efectos más tempranos sobre la motilidad y la mortalidad en las 8 réplicas En los grupos tratados con dosis de 100, 50 y 25 µg, todos los parásitos resultaron muertos o estaban moribundos al cabo de una hora, excepto uno correspondiente al grupo que recibía 25 µg, el cual murió después de 3 horas Al comienzo de la hora 1 se comprobó ya reducción de la motilidad relacionada con la droga en cada uno de los restantes grupos medicados con la dosis de 10 µg al cabo de 16 horas, sobrevivió un único parásito A las 23 horas, sólo quedaban 2 parásitos aletargados en el grupo que había recibido 3 µg, los cuales murieron hacia la hora 41 En el grupo que recibió 1 µg, un parásito murió en la hora 16, tres murieron en la hora 41 y cinco murieron en la hora 74; en la hora 91 aún había 3 parásitos activos y uno solo continuaba activo en la hora 1 15. En el grupo de control con RBC, 7 de los 8 parásitos estaban vivos en la hora 74, 3 continuaban vivos en la hora 91 y 2 sobrevivían aún en la hora 1 15. En el grupo de control sin RBC, 6 de los 8 parásitos tenían actividad en la hora 74, 4 de ellos estaban activos en la hora 91 y dos continuaron activos hasta la hora 1 15. La muerte de los tremátodos en los grupos que recibieron dosis altas (25, 50, 100 µg), fue rápida y estuvo asociada con contracciones y 'curvamiento' ventral. Con niveles de medicación más bajos, la mayor parte de los parásitos tuvo actividad más lenta durante un período y mostraron mayor relajamiento y 'aplanamiento' cuando estaban moribundos o muertos. La contaminación fue un factor limitante de los resultados experimentales de algunas réplicas a partir de la hora 91 . En el caso del experimento con D-NTZ, a las 1 15 horas se observó un importante desarrollo de bacterias u hongos relacionado con la mortalidad. En el caso del experimento con NTZ, el crecimiento excesivo y la mortalidad de los parásitos en placas de réplicas enteras se produjo en la hora 91 (dos réplicas) y en la hora 1 15 (5 réplicas). Las observaciones realizadas en la hora 139 no se consideran válidas en razón de contaminación general de la mayoría de las placas. Conclusiones: Los experimentos sugieren una intensa acción parasiticida de la nitazoxanida en ambos grupos de drogas ensayadas. En el caso de F. hepática, la nitazoxanida mostró una actividad parasiticida algo superior a la de la desacetil-nitazoxanida, su metabolito principal al cual se atribuía acción a nivel hepático. Se produce una muerte rápida de los parásitos dentro de la primera hora con dosis in vitro de D-NTZ > 50 µg, dentro de las cuatros con dosis de 25 µg y dentro de las 6-7 horas con dosis de 10 µg. Es posible que la dosis de 10 µg constituya un valor conveniente para dosis únicas si los datos fármacocinéticos indican que los niveles de tejidos se mantienen durante períodos > 6-8 horas después del tratamiento único. En tratamientos que se prolongaron 74 horas (3 días), se observó una intensa actividad parasiticida en ambos compuestos administrados en dosis de 3 y de 5 µg. Con la dosis de 1 µg se observó supervivencia prolongada próxima a la de los parásitos no medicados, aunque no igual a ella. En consecuencia, la administración de este nivel de droga para parásitos del tejido hepático durante 3 ó 4 días puede resultar inadecuada para el efecto terapéutico. EJEMPLO X FASCIOLA GIGANTICA Se ensayó el efecto de la nitazoxanida sobre individuos maduros e inmaduros de Fasciola gigantica en conejos infectados experimentalmente. Se recogieron en hojas de papel celofán metacercarias enquistadas (EMC) de Fasciola gigantica después de 28-35 días de infección de los miracidios correspondientes en caracoles L. calludi. Se utilizó la técnica descripta por Abdel-Ghany, en la cual se exponen diariamente los caracoles a luz artificial durante 30 minutos en agua corriente limpia desclorada. Las metacercarias enquistadas (EMC) resultantes se mantuvieron a 4° C en refrigerador durante 5 a 8 días bajo una superficie de agua hasta que se las utilizó para infectar animales experimentales. Se incluyeron en el estudio cuarenta (40) conejos Boscat que pesaban entre 1.5 y 2 kg cada uno, y se los dividió en dos grupos de tratamiento de 20 animales cada uno Los animales del Grupo 1 se infectaron por vía oral con 35-40 metacercarias enquistadas envueltas en hojas de lechuga que se colocaron en la base de la lengua Con la mano, se mantuvieron cerradas las bocas de los animales hasta que tragaron las metacercarias. Este Grupo 1 se utilizó para ensayar la eficacia de la nitazoxanida contra etapas no maduras (4-5 días de edad) de Fasciola gigantica. Los animales del Grupo 1 se infectaron por vía oral tal como se indicó en el párrafo anterior con 10-15 metacercarias enquistadas. Estos animales se usaron para ensayar la eficacia de la nitazoxanida contra tremátodos jóvenes maduros ( > 10 semanas de edad). Cuatro semanas después de la infección con etapas inmaduras del parásito, diez animales del Grupo 1 recibieron dosis de 35 mg de nitazoxanida a la mañana y a la noche durante 7 días consecutivos. Los diez animales restantes del Grupo 1 se mantuvieron sin tratamiento, como controles Diez semanas después de la infección con etapas maduras del parásito, diez animales del Grupo 2 recibieron dosis de 35 mg de nitazoxanida a la mañana y a la noche durante 7 días consecutivos. Los diez animales restantes del Grupo 2 se mantuvieron sin tratamiento, como controles. La alimentación de todos los animales fueron raciones secas hasta el final del experimento. Siete días después de haber administrado la última dosis de nitazoxanida, se sacrificaron los animales de todos los grupos Se examinó la superficie del hígado de los animales para determinar la presencia de surcos necróticos migratorios , especialmente en el caso de la etapa inmadura del ciclo parasitario.

Las zonas necróticas se estudiaron por medio de dos agujas quirúrgicas que se usaron para extraer los parásitos juveniles migratorios, según la técnica descripta por El-Bahy. Se cortaron pequeñas rodajas de hígado, especialmente en la zona próxima a los surcos migratorios y se maceraron los fragmentos bajo microscopio a fin de extraer los parásitos existentes. Se lavó la cavidad abdominal y las superficies de las visceras con agua caliente. Posteriormente, se recogió el agua de lavado, se la hizo pasar por un cedazo y se la estudió para aislar los parásitos jóvenes. Se contaron todos los parásitos presentes, así como los fragmentos de ellos existentes, tanto en los animales tratados como en los no tratados de los Grupos 1 y 2. Los parásitos vivos tenían color limpio, eran translúcidos, mostraban tegumentos intactos y resultaban fáciles de extraer del tejido hepático con agua caliente. Los tremátodos muertos tenían color grisáceo y mostraban una superficie necrótica agrietada. La eficacia de la nitazoxanida se calculó mediante la siguiente fórmula: % eficacia = a - b x 100 a donde: a = cantidad de parásitos recuperados de las heces en los animales de control b = cantidad de parásitos recuperados de las heces en los animales tratados.

Resultados Los resultados de este estudio que se resumen en la Tabla 7 indican una notable disminución de la cantidad de parásitos inmaduros recuperados del hígado de conejos pertenecientes al grupo tratado, en comparación con los recuperados del grupo de control. El porcentaje medio de reducción se calculó en 46.77 % (rango: 40-60 %).

Tabla 7. Eficacia de la nitazoxanida contra F. gigantica no madura (4 semanas de edad) en conejos infectados experimentalmente.

En la etapa madura temprana de la infección, la nitazoxanida mostró un efecto total (reducción del 100 %) y el hígado de los conejos tratados no presentó parásitos al examen, mientras que el hígado de los ejemplares no tratados sí, tal como se indica en la Tabla 8.

Tabla 8 Eficacia de la nitazoxanida contra F. gigantica madura en su etapa juvenil (10 semanas de edad) en conejos infectados experimentalmente.

La nitazoxanida administrada en dosis de 70 mg/día durante 7 días consecutivos resulta moderadamente eficaz contra la etapa inmadura de Fasciola gigantica y resulta totalmente eficaz contra la etapa madura temprana del parásito. EJEMPLO XI SCHISTOSOMA Se ensayó el efecto de la nitazoxanida contra Schistosoma mansoni y Schistosoma haematobium in ratas infectadas experimentalmente. Se utilizaron cuarenta (40) ratones blancos que pesaban entre 30 y 50 gramos, divididos en dos grupos de tratamiento de 20 animales cada uno. El primer grupo se infectó con 300-500 cercanas activas libres de Schistosoma mansoni suspendidas en 0.25 ml de agua destilada, inoculadas por inyección intraperitoneal. El segundo grupo de animales se infectó de la misma manera con cercanas de Schistosoma haematobium. Ambos grupos se mantuvieron a lo largo de 70 días en el laboratorio. Setenta días después de la infección, diez animales de cada grupo fueron tratados con nitazoxanida en dosis orales de 1.3 mg administradas por la mañana y por la noche durante 7 días consecutivos. Siete días después de finalizado el tratamiento, se sacrificaron todos los ratones y se extrajeron los parásitos del hígado de cada animal por perfusión con agua tibia (37 ° C). Se contaron los esquistosomas extraídos de todos los animales, tanto los tratados como los de control. La eficacia de la nitazoxanida se calculó de acuerdo con la siguiente fórmula: % eficacia = a - b x 100 a donde: a = cantidad de esquistosomas recuperados de las heces en los animales de control b = cantidad de esquistosomas recuperados de las heces en los animales tratados. Resultados Los resultados que se resumen en las Tablas 9 y 10 indican claramente que la nitazoxanida administrada en dosis diarias de 2.6 mg/día durante 7 dias consecutivos resultó más eficaz contra el Schistosoma haematobium, para el cual se registró una reducción del 82.85 % con respecto a los anímales de control. En el caso del Schistosoma mansoni, la reducción de parásitos sólo alcanzó el 59.91 % con respecto a los ratones de control. Estos resultados confirman los registrados por Abaza et al. en pacientes humanos, para los cuales la nitazoxanida no resultó eficaz contra el S. mansoni, según lo demostrado por el conteo de positivo de huevos posterior al tratamiento.

Tabla 9. Eficacia de la nitazoxanida contra parásitos maduros (13 semanas de edad) de Schistosoma mansoni en ratones.

Tabla 10. Eficacia de la nitazoxanida contra parásitos maduros (13 semanas de edad) de Schistosoma haematobium en ratones.

Claims

REIVINDICACIONES 1 Una composición farmacéutica para administración caracterizada porque comprende como agente activo por lo menos un compuesto seleccionado del grupo integrado por el compuesto de fórmula (I)

y el compuesto de la formula (II)
2 Una composición acorde con la reivindicación 1 , caracterizada porque dicho compuesto activo tiene la forma de partículas activas con un tamaño de partícula menor que 200 µm y un tamaño medio de partículas mayor que 10 µm
3 Una composición acorde con la reivindicación 2, caracterizada porque el tamaño medio de partícula de dichas partículas activas está comprendido entre 10 y 100 µm
4 Una composición acorde con la reivindicación 2, caracterizada porque el tamaño medio de partícula de dichas partículas activas esta comprendido entre 20 y 50 µm
5. Una composición acorde con la reivindicación 2, caracterizada porque menos del 10 % en peso de dichas partículas activas tiene un tamaño de partícula mayor que 100 µm.
6. Una composición acorde con la reivindicación 2, caracterizada porque por lo menos el 50 % en peso de dichas partículas activas tiene un tamaño de partícula menor que 50 µm.
7. Una composición acorde con la reivindicación 2, caracterizada porque menos del 10 % de dichas partículas activas tiene un tamaño de partícula menor que 5 µm.
8. Una composición acorde con la reivindicación 2, caracterizada porque comprende una mezcla de partículas activas de compuestos de la fórmula (I) y de la fórmula (II), siendo la proporción entre el contenido en peso del compuesto de la fórmula (I) y el contenido total en peso de los compuestos de fórmula (I) y de fórmula (II) un valor comprendido entre el 0.5 y el 20 %.
9. Una composición acorde con la reivindicación 1 , caracterizada porque dicha composición además contiene por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable.
10. Una composición acorde con la reivindicación 9, caracterizada porque dicho ácido farmacéuticamente aceptable está seleccionado del grupo integrado por el ácido cítrico, ácido glutámico, ácido succinico, ácido etanosulfónico, ácido acético, ácido tartárico, ácido ascórbico, ácido metanosulfónico, ácido fumárico, ácido adípico, ácido málico y mezclas de los mismos.
1 1 . Una composición acorde con la reivindicación 9, caracterizada porque: dicho agente activo tiene la forma de partículas sólidas con un tamaño de partícula menor que 200 µm y un tamaño medio de partículas mayor que 10 µm y la relación "peso del ácido farmacéuticamente aceptable/peso de dichas partículas sólidas" está comprendida entre 0 01 y 0 05
12. Una composición acorde con la reivindicación 1 1 , caracterizada porque la relación en peso del ácido farmacéuticamente aceptable/peso de dichas partículas sólidas está comprendida entre 0 03 y 0 2
13 Un método para el tratamiento en mamíferos no inmunodeficientes de infecciones provocadas por microorganismos seleccionados del grupo integrado por Cryptospopdium parvum, Isospora belli, Enterocytozoon bieneusí, Encephalistozoon intestmalis, Mycobacterium tuberculosis, Mycobactenum avium intracellulare, Pneumocystis cannn y Toxoplasma gondn, comprendiendo dicho método la administración de una composición farmacéutica que contiene como agente activo por lo menos uno de los compuestos seleccionados del grupo integrado por un compuesto de la fórmula (I)

y un compuesto de la fórmula (II)
14 Un método acorde con la reivindicación 13, caracterizado porque dicho agente activo tiene la forma de partículas con un tamaño medio de partícula comprendido entre 10 y 200 µm
15 Un método acorde con la reivindicación 13, caracterizado porque dicho agente activo tiene la forma de partículas con un tamaño medio de partícula comprendido entre 20 y 50 µm
16 Un método acorde con la reivindicación 13, caracterizado porque dicha composición farmacéutica contiene por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable
17 Un método acorde con la reivindicación 16, caracterizado porque dicho ácido farmacéuticamente aceptable está seleccionado de un grupo compuesto por el ácido cítrico, ácido glutámico, ácido succínico, ácido etanosulfónico, ácido acético, ácido tartárico, ácido ascórbico, ácido metanosulfónico, ácido fumárico, ácido adipico, ácido málico y mezclas de los mismos
18 Un método acorde con la reivindicación 13, caracterizado porque dicho agente activo es un compuesto de la fórmula (I)
19 Un método acorde con la reivindicación 13, caracterizado porque dicho agente activo es un compuesto de la fórmula (II)
20 Un método acorde con la reivindicación 13, caracterizado porque dicho mamífero es humano y porque dicho agente activo se administra diariamente en cantidades comprendidas entre 500-2000 mg
21 Un método acorde con la reivindicación 20, caracterizado porque dicho agente activo se administra diariamente en cantidades comprendidas entre 1000-1500 mg
22 Un método para tratar infecciones parasitarias de tremátodos seleccionados del grupo integrado por Schistosoma Fasciola Fasciolopsis, Dicrocoelium, Heterophyes y Metagonimus, comprendiendo dicho método la administración de una composición farmacéutica que contiene como agente activo por lo menos un compuesto seleccionado del grupo integrado por un compuesto de la fórmula (I)

y un compuesto de la formula (II)
23 Un método para el tratamiento de infecciones parasitapas por tremátodos seleccionados del grupo compuesto por el Schistosoma mansom, el Schistosoma haematobium, el Schistosoma mekongí, el Schistosoma japomcum, el Schistosoma mtercalatum, Fasciola hepática, Fasciola gigantica, Fasciolopsis biski, Dicrocoelium denthticum, Heterophyes heterophyes y Metagonimus yokogawa, comprendiendo dicho método la administración de una composición farmacéutica que contiene como agente activo por lo menos un compuesto seleccionado del grupo integrado por un compuesto de la fórmula (I)

y un compuesto de la fórmula (II)
24. Un método acorde con la reivindicación 23, caracterizado porque dicho agente activo tiene la forma de partículas con un tamaño medio de partícula comprendido entre 10 y 200 µm
25 Un método acorde con la reivindicación 24, caracterizado porque dicho agente activo tiene la forma de partículas con un tamaño medio de partícula comprendido entre 20 y 50 µm
26. Un método acorde con la reivindicación 23, caracterizado porque dicha composición farmacéutica contiene por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable
27 Un método acorde con la reivindicación 26, caracterizado porque dicho ácido farmacéuticamente aceptable está seleccionado de un grupo compuesto por el ácido cítrico, ácido glutámico ácido succínico, ácido etanosulfónico, ácido acético, ácido tartárico, ácido ascórbico, ácido metanosulfónico, ácido fumárico, ácido adípico, ácido málico y mezclas de los mismos
28 Un método acorde con la reivindicación 26, caracterizado porque la relación peso del ácido farmacéuticamente aceptable/peso de dichas partículas activas está comprendida entre 0 01 y 0 5
29 Un método acorde con la reivindicación 23, caracterizado porque dicho agente activo es un compuesto de la fórmula (I)
30 Un método acorde con la reivindicación 23, caracterizado porque dicho agente activo es un compuesto de la fórmula (II)
31 Una crema farmacéutica para administración tópica caracterizada porque comprende como agente activo, partículas sólidas de por lo menos un compuesto seleccionado del grupo integrado por un compuesto de la fórmula (I)

y un compuesto de la fórmula (II)

( II ) teniendo además dichas partículas un tamaño de partícula menor que 200 µm y un tamaño medio de partícula mayor que 10 µm; por lo menos un espesante; por lo menos un agente humectante y por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable, estando el pH de la crema comprendido entre 2 y 6.
32. Una crema farmacéutica acorde con la reivindicación 31 , caracterizada porque además comprende por lo menos un aditivo seleccionado del grupo integrado por el alcohol cetílico, derivados glicéridos, propilénglicol o mezclas de los mismos.
33. Una composición farmacéutica para administración oral que contiene el agente activo en forma granulada en presencia de un agente granulante, caracterizada porque: • dicho agente activo tiene la forma de partículas sólidas activas de por lo menos un compuesto seleccionado del grupo integrado por: un compuesto de la fórmula (I):

y un compuesto de la fórmula (II):

( II ) • dichas partículas activas tienen un tamaño de partícula menor que 200 µm y un tamaño medio de partícula mayor que 10 µm
34 Una composición acorde con la reivindicación 33, caracterizada porque dicho agente granulador se selecciona del grupo integrado por la polivinilpirplidona, agua, alcohol, hidroxil celulosa sacarosa y mezclas de los mismos
35 Una composición acorde con la reivindicación 33, caracterizada porque dichas partículas sólidas activas del granulado contienen por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable
36 Una composición acorde con la reivindicación 35, caracterizada porque dicho ácido farmacéuticamente aceptable está seleccionado de un grupo compuesto por el ácido cítrico, ácido glutámico, ácido succínico, ácido etanosulfónico, ácido acético, ácido tartárico, ácido ascórbico, ácido metanosulfónico, ácido fumárico, ácido adípico, ácido málico y mezclas de los mismos
37 Una composición acorde con la reivindicación 35, caracterizada porque la relación peso del ácido farmacéuticamente aceptable/peso de dicho agente activo está comprendida entre 0 01 y 0 5
38 Una composición farmacéutica para administración oral que contiene el agente activo, un agente humectante y un derivado del almidón, caracterizada porque • dicho agente activo tiene la forma de partículas sólidas activas de un compuesto por lo menos seleccionado del grupo integrado por el compuesto de la fórmula (I)

el compuesto de la fórmula (II)

• dichas partículas activas tienen un tamaño de partícula menor que 200 µm y un tamaño medio de partícula mayor que 10 µm.
39. Una composición farmacéutica acorde con la reivindicación 38, caracterizada porque además comprende un ácido farmacéuticamente aceptable.
40. Una composición farmacéutica acorde con la reivindicación 38, caracterizada porque las partículas activas son granuladas en presencia de un agente granulador para formar un agente activo granulado que contiene entre 2 y 99 % en peso de dicho compuesto activo y entre 0.03 y 10 % en peso del agente granulador.
41. Una composición farmacéutica acorde con la reivindicación 40, caracterizada porque dicho agente granulador está seleccionado del grupo integrado por la polivinilpirplidona, agua, alcohol, hidroxil celulosa sacarosa y mezclas de los mismos.
42 Una suspensión líquida del agente activo para administración oral, caracterizada porque contiene • como agente activo, partículas sólidas de un compuesto por lo menos seleccionado del grupo integrado por el compuesto de la fórmula (I)

y el compuesto de fórmula (II)

teniendo dichas partículas un tamaño de partícula menor que 200 µm y un tamaño medio de partícula mayor que 10 µm, y porque • por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable, con el pH de la suspensión comprendido entre 2 y 6 43 Una suspensión acorde con la reivindicación 42, caracterizada porque su pH está comprendido entre 3 y 5 44 Una suspensión acorde con la reivindicación 42, caracterizada porque además comprende un agente granulador COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS DE LA TIZOXANIDA Y LA N1TAZOXANIDA Resumen de la invención La presente invención se refiere a una composición farmacéutica que contiene como agente activo por lo menos un compuesto seleccionado del grupo integrado la fórmula (I)

y la fórmula (II)

El agente activo tiene preferentemente la forma de partículas con un tamaño de partícula menor que 200 µm y un tamaño medio de partícula mayor que 10 µm De manera preferente, las composiciones farmacéuticas están estabilizadas con por lo menos un ácido farmacéuticamente aceptable Las composiciones farmacéuticas de la presente invención son útiles para el tratamiento de infecciones oportunistas en personas con el sistema inmune comprometido o suprimido, así como en el tratamiento de infecciones por tremátodos