MXPA99005163A

MXPA99005163A - Factores de crecimiento de queratinocitos y su uso en combinacion con derivados de peptidos semejantes al glucagon

Info

Publication number: MXPA99005163A
Application number: MXPA/A/1999/005163A
Authority: MX
Inventors: L Farrell Catherine; Li Yuesheng
Original assignee: Amgen Inc; L Farrell Catherine; Li Yuesheng
Priority date: 1996-12-06
Filing date: 1999-06-03
Publication date: 2000-04-24

Abstract

La presente invención se refiere al uso de derivados del factor de crecimiento de queratinocitos en combinación con los derivados de péptidos semejantes al glucagon en la terapia de las enfermedades que afectan las células epiteliales en el tracto gastrointestinal.

Description

FACTORES DE CRECIMIENTO DE QÜERATINOCITOS Y SU USO EN COMBINACIÓN CON DERIVADOS DE PEPTIDOS SEMEJANTES AL GLUCAGON CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a los factores de crecimiento de queratinocitos y a los usos de los mismos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El proceso complejo de la generación y regeneración de los tejidos está mediada por varios factores de proteina referidos algunas veces como factores de crecimiento del tejido blando. Estas moléculas son liberadas generalmente por un tipo de células y actúan para influir en la proliferación de otros tipos de células (Rubin et al. (1989). Proc. Nat'l Acad. Sci. USA, 86:802-806). También existen algunos factores de crecimiento liberados de las células que tienen por si mismas la capacidad de responder a tales factores de crecimiento. Algunas factores de crecimiento suaves o blandos son secretados por tipos de células Ref.30425 particulares y tienen influencia en la proliferación, diferenciación, y/o maduración de las células responsables en el desarrollo de organismos multicelulares (Finch et al. '(1989), Science, 245:752-755) . Además de sus papeles en el desarrollo de organismos, algunos factores de crecimiento de tejidos blandos o suaves son significativos en la salud y mantenimiento continuo de más sistemas maduros. Por ejemplo, en los mamíferos existen muchos sistemas en donde ocurre el cambio de las células rápidas. Tales sistemas incluyen la piel y el tracto gastrointestinal, ambos de los cuales están comprendidos de células epiteliales. Incluida dentro de este grupo de factores de crecimiento del tejido blandos está una familia de proteínas de factores de crecimiento de fibroblastos (FGFs) . La familia de factores de crecimiento de fibroblastos (FGF) se sabe ahora que consiste de al menos catorce miembros, especialmente FGF-1 a FGF-10 y los factores homólogos FHF-1 a FHF-4, los cuales comparten una conexidad entre las estructuras primarias: factor de crecimiento de fibroblastos básico, bFGF (Abraham et al. (1986), EMBO J., 5:2523-2528); el factor de crecimiento de fibroblastos ácidos, aFGF (Jaye et al. (1986), Science, 233:541-545); el producto del gen int-2, el int-2 (Dickson & Peters (1897), Nature, 326:833); hst/kFGF (Delli-Bovi et al. (1987), Cell, 50:729-737 y Yoshida et al. (1987), Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 84:7305-7309); FGF-5 (Zhan et al. (1988), Mol. Cell. Biol., 8:3487-3495); FGF-6 (Marics et al. (1989), Oncogene, 4:335-340); factor de crecimiento de queratinocitos, KGF (Finch et al. (1989), Science, 24:752-755); hisactofilina (Habazzettl et al. (1992), Nature, 359:855-858); FGF-9 (Miyamoto et al. (1993), Mol. Cell. Biol., 13(7) :4251-4259); y factor-10 de crecimiento de fibroblastos, también conocido como factor-2 de crecimiento de queratinocitos, KGF-2 (WO 96/25422). Más recientemente, cuatro factores homólogos (o "FHFs") fueron identificados a partir de la retina humana por una combinación de secuenciamiento del ADNc al azar, búsquedas de bases de datos de secuencias existentes y reacciones en cadena de la polimerasa a base de homologías (Smalwood et al. (1966), Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 93:9850-9857). Se ha propuesto que FHF-1, FHF-2, FHF-3 y FHF-4 deben ser designados como FGF-11, FGE-12, FGF-13 y FGF-14, respectivamente, de acuerdo con la recomendación del Nomenclature Committee (Coulier et al. (1997), Journal of Molecular Evolution, 44:43-56).

Es un objeto de la presente invención proporcionar factores de crecimiento de queratinocitos y usos de los mismos.

Breve Descripción de la Invención La presente invención está dirigida a producto (s) de proteínas de KGF. Esto(s) producto (s) de proteínas de KGF tiene (n) aplicabilidad general y pueden retener algo o la totalidad de la actividad biológica de KGF. Todavía otro aspecto está relacionado con los métodos de modulación del crecimiento y diferenciación de las células epiteliales. Específicamente, un paciente que tenga la necesidad de estimulación (incluyendo la citoprotección, la proliferación y/o la diferenciación) de las células epiteliales, será suministrado o administrado con cantidades efectivas terapéuticamente o efectivas profilácticamente de un (os) producto (s) de proteina de KGF. Los aspectos y ventajas adicionales de la invención serán evidentes para aquellos expertos en la técnica durante la consideración de la siguiente descripción, la cual detalla la práctica de la presente invención.

Breve Descripción de las Figuras Numerosos aspectos y ventajas de la presente invención llegarán a ser evidentes durante la revisión de las Figuras, en donde: la Figura 1 muestra las secuencias de nucleótidos (SEC ID N0:1) y aminoácidos (SEC ID NO: 2) de KGF (los nucleótidos que codifican la forma madura de la KGF madura es mostrada por las bases 96 a 582 de SEC ID NO: 1 y la forma madura de KGF es mostrada por los residuos de aminoácidos 32 a 194 de SEQ ID NO:2), con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 2 muestra las secuencias de nucleótidos (SEC ID NO: 3) y de aminoácidos (SEC ID NO: 4) de C(1,15)S, un análogo de KGF que tiene substituciones de serina por cisteina en las posiciones de los aminoácidos 1 y 15 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 3 muestra las secuencias de nucleótidos (SEC ID NO: 5) y de aminoácidos (SEQ ID NO: 6) de ?N3(C(15)S, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 3 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de serina por la cisteina en la posición 15 de los aminoácidos de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1.

La Figura 4 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 7) y aminoácidos (SEQ ID NO: 8) de ?N3/C(15)-, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros tres aminoácidos de la terminal de amino y una deleción de la cisteina en la posición 15 de los aminoácidos de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 5 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 9) y aminoácidos (SEQ ID NO: 10) de ?N8/C(15)S, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 8 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de la cisteina en la posición 15 de los aminoácidos de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 6 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID N0:11) y aminoácidos (SEQ ID NO:12) de ?N8/C(15)-, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 8 aminoácidos de la terminal de amino y una deleción de la cisteina en la posición 15 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a --0 o 1. La Figura 7 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO:13) y aminoácidos (SEQ ID NO:14) de ?N15, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros quince aminoácidos de la terminal de amino de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 8 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID N0:15) y aminoácidos (SEQ ID NO: 16) de ?N16, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 16 aminoácidos de la terminal de amino de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 9 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 17) y aminoácidos (SEQ ID NO: 18) de ?N17, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 17 aminoácidos de la terminal de amino de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 10 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 19) y aminoácidos (SEQ ID NO: 20) de ?N18, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 18 aminoácidos de la terminal de amino de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 11 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO:21) y aminoácidos (SEQ ID NO:22) de ?N19, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 19 aminoácidos de la terminal de amino de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 12 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO:23) y aminoácidos (SEQ ID NO:24) de ?N20, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 20 aminoácidos de la terminal de amino de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 13 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO:25) y aminoácidos (SEQ ID NO:26) de ?N21, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 21 aminoácidos de la terminal de amino de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 14 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 27) y aminoácidos (SEQ ID NO: 28) de ?N22, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 22 aminoácidos de la terminal de amino de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 15 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 29) y aminoácidos (SEQ ID NO: 30) de ?N23, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 16 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID N0:31) y aminoácidos (SEQ ID NO:32) de ?N24, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 24 aminoácidos de la terminal de amino de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 17 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 33) y aminoácidos (SEQ ID NO: 34) de C(1,15)S/R(144)E, un análogo de KGF que tiene substituciones de serina por cisteina en las posiciones de aminoácidos 1 y 15 y una substitución de ácido glutámico por arginina en la posición de 144 aminoácidos de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 18 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 35) y aminoácidos (SEQ ID NO: 36) de C(1,15)S/R(144)Q, un análogo de KGF que tiene substituciones de serina por cisteina en las posiciones de aminoácidos 1 y 15 y una substitución de glutamina por arginina en la posición de 144 aminoácidos de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1.

La Figura 19 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 37) y aminoácidos (SEQ ID NO: 38) de ?N23/R(144)Q, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de glutamina por arginina en la posición 144 de los aminoácidos de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 20 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 39) y aminoácidos (SEQ ID NO: 40) de C(1,15,40)S, un análogo de KGF que tiene substituciones de serina por cisteina en las posiciones de aminoácidos 1, 15 y 40 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 21 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO:41) y aminoácidos (SEQ ID NO:42) de C(l, 15, 102) S, un análogo de KGF que tiene substituciones de serina por cisteina en las posiciones de aminoácidos 1, 15 y 102 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 22 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 43) y aminoácidos (SEQ ID NO: 44) de C(1,15,102,106)S, un análogo de KGF que tiene substituciones de serina por cisteina en las posiciones de aminoácidos 1, 15, 102, y 106 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 23 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 45) y aminoácidos (SEQ ID NO: 46) de ?N23/N(137)E, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de ácido glutámico por asparagina en la posición 137 de los aminoácidos de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 24 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO:47) y aminoácidos (SEQ ID NO:48) de ?N23/K(139)E, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de ácido glutámico por lisina en la posición 139 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 25 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 49) y aminoácidos (SEQ ID NO: 50) de ?N23/K(139)Q, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino --y una substitución de glutamina por lisina en la posición 139 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 26 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 51) y aminoácidos (SEQ ID NO: 52) de ?N23/R(144)A, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de alanina por arginina en la posición 144 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 27 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 53) y aminoácidos (SEQ ID NO: 54) de ?N23/K(144) E, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de ácido glutámico por arginina en la posición 144 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 28 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 55) y aminoácidos (SEQ ID NO: 56) de ?N23/R(144)L, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de leucina por arginina en la posición 144 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 29 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 57) y aminoácidos (SEQ ID NO: 58) de ?N23/K(147)E, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de ácido glutámico por lisina en la posición 147 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 30 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 59) y aminoácidos (SEQ ID NO: 60) de ?N23/K(147)Q, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de glutamina por lisina en la posición 147 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 31 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 61) y aminoácidos (SEQ ID NO: 62) de ?N23/K(153) E, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de ácido glutámico por lisina en la posición 153 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 32 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 63) y aminoácidos (SEQ ID NO: 64) de ?N23/K(153)Q, un análogo de KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino --y una substitución de glutamina por lisina en la posición 153 de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1. La Figura 33 muestra las secuencias de nucleótidos (SEQ ID NO: 65) y aminoácidos (SEQ ID NO: 66) de ?N23/Q(152)E/K(153)E, un análogo de KGF ue tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal de amino y una substitución de ácido glutámico por glutamina en la posición 152 de los aminoácidos de KGF y de ácido glutámico por lisina en la posición 153 de aminoácidos de KGF, con el aminoácido inicial que es Mn en donde n es igual a 0 o 1.

Descripción Detallada de la Invención Proteina (s) de KGF De acuerdo con la presente invención, el término "proteina (s) de KGF" se entiende que la proteina definida por los aminoácidos Cys32 a Thr194 de SEC ID NO: 2 (KGF maduro) y proteínas variables de la misma. (A menos que se indique de otra manera, la numeración de los aminoácidos para las moléculas descritas aqui corresponderá a aquella presentada para la forma madura de la molécula (es decir, menos la secuencia de la señal), como se muestra por los aminoácidos 32 a 194 para la SEC ID NO: 2, con la MET inicial en cada una de tales secuencias que es el número residual "0") . El término "proteina (s) de KGF" incluye asi una proteina en la cual uno o más residuos de aminoácidos han sido delecionados de ("variante (s) de deleción"), insertados en ("variante (s) de adición"), y/o substituidos por ("variante (s) de substitución"), los residuos dentro de la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2 y los cuales retienen la actividad biológica. Seré apreciado por aquellos expertos en la técnica que se pueden hacer muchas combinaciones de deleciones, inserciones, y substituciones (variante (s) individuales o colectivas), siempre que la proteina final sea biológicamente activa. El término "actividad biológica" como se utiliza aqui significa que una(s) proteina (s) de KGF poseen algunas pero no necesariamente todas las mismas propiedades (y no necesariamente al mismo grado que) el KGF. La selección de las propiedades particulares de interés depende del uso deseado de la(s) proteina (s) de KGF deseadas. Existen dos variables principales en la construcción de la(s) variante (s) de las secuencias de aminoácidos: La localización del sitio de mutación y la naturaleza de la mutación. En el diseño de cada una de la(s) variante (s), la localización de cada sitio de mutación y la naturaleza de cada mutación dependerá de la(s) característica (s) bioquímica (s) que van a ser modificadas. Cada sitio de mutación puede ser modificado individualmente o en serie, por ejemplo, (1) por la deleción del residuo de aminoácidos de blanco u objetivo, (2) por la inserción de uno o más residuos de aminoácidos adyacentes al sitj^p localizado o (3) por la substitución primero con las elecciones de los aminoácidos conservadores y, dependiendo del resultado logrado, luego con selecciones más radicales. Las deleciones de la secuencia de aminoácidos generalmente varían desde aproximadamente 1 hasta 30 residuos de aminoácidos, preferentemente desde aproximadamente 1 hasta 20 aminoácidos, más preferentemente desde aproximadamente 1 hasta 10 residuos de aminoácidos y aún más preferentemente desde aproximadamente 1 hasta 5 residuos. Las deleciones amino-terminales, carboxi-terminales y de intrasecuencias internas son contempladas. Se pueden hacer deleciones dentro de la secuencia de aminoácidos de KGF, por ejemplo, en las regiones de homología reducida con las secuencias de otros miembros de la familia de FGF. Las deleciones dentro de la secuencia de aminoácidos de KGF en las áreas de homología substancial con las secuencias de otros elementos de la familia de FGF será más probable que modifique significativamente la actividad biológica. El número de las deleciones totales y/o las deleciones consecutivas preferentemente serán seleccionadas para preservar la estructura terciaria de KGF en el dominio afectado, por ejemplo, la reticulación de la cisteína. Una adición de la secuencia de aminoácidos puede incluir las inserciones de una fusión amino- y/o carboxilo-terminal de longitud variable desde un residuo hasta cien o más residuos, así como inserciones íntrasecuencia interna de residuos de aminoácidos simples o múltiples. Las adiciones internas pueden variar generalmente desde aproximadamente 1 hasta 20 residuos de aminoácidos, preferentemente desde aproximadamente 1 hasta 10 residuos de aminoácidos, más preferentemente desde aproximadamente 1 hasta 5 residuos de aminoácidos, y aún más preferentemente desde aproximadamente 1 hasta 3 residuos de aminoácidos. Las adiciones dentro de la secuencia de aminoácidos de KGF se pueden hacer en las regiones de homología baja con las secuencias de otros miembros de la familia de FGF. Las adiciones dentro de la secuencia de aminoácidos de KGF en áreas de homología substancial con las secuencias de otros miembros de la familia de FGF será más probable que modifiquen significativamente la actividad biológica. Las inserciones o adiciones preferentemente incluyen las secuencias de aminoácidos derivadas de las secuencias de otros miembros de la familia de FGF.

Una adición de amino-terminal es contemplada para que incluya la adición de metionina (por ejemplo, como una argucia de la expresión directa en ei cultivo celular recombinante bacteriano) o un residuo de aminoácidos o la secuencia de KGF. Un ejemplo adicional de una adición amino-terminal incluye la fusión de una secuencia de la señal al amino-terminal de KGF para facilitar la secreción de la proteína a partir de las células huésped recombinantes. Tales secuencias de la señal generalmente serán obtenidas de y por consiguiente serán homologas con respecto a las especies de la célula huésped propuesta. Para las células huésped procarióticas que no renocen y procesan la secuencia de la señal natural, la secuencia de la señal puede ser substituida por una secuencia de la señal procariótica seleccionada, por ejemplo, a partir del grupo de las secuencias directoras de fosfatasa alcalina, penicilinasa o enterotoxima II estable en el calor. Para la expresión en las células huésped, cada polipéptido puede tener una secuencia de la señal seleccionada, por ejemplo, a partir de las secuencias conductoras del grupo de la invertasa de la levadura, el factor alfa o de la fosfatasa acida. En la expresión de las células de mamífero específicamente, las secuencias de la señal de KGF son satisfactorias, aunque otras secuencias de señal de mamífero pueden ser adecuadas, por ejemplo las secuencias derivadas de otros miembros de la familia de FGF pueden ser adecuadas. Un ejemplo de una adición de la terminal amino o carboxi incluye las proteínas quiméricas que comprenden la fusión amino-terminal o carboxi-terminal de una proteína de KGF con todo o una parte del dominio constante de la cadena ligera o pesada de la inmunoglobulina humana (individual o colectivamente, ("KGF Fc(s)"). Tales polipéptidos quiméricos son preferidos en donde la porción de inmunoglobulina de cada uno comprende la totalidad de los dominios excepto el primer dominio de la región constante de la cadena pesada de la inmunoglobulina humana tal como IgG (por ejemplo, IgGl o IgG3), IgA, IgM o IgE. Un artesano experto apreciará que cualquier aminoácido de la porción de inmunoglobulina puede ser delecionada o substituida con uno o más aminoácidos, o uno o más aminoácidos pueden ser agregados siempre que la porción de proteína de KGF sea capaz de estimular las células epiteliales y la porción de inmunoglobulina muestre una o más de sus propiedades características . Otro grupo de variante (s) es (son) la(s) variante (s) de substitución de los aminoácidos, de la secuencia de aminoácidos de KGF. Esta(s) son variante (s) en donde al menos un residuo de aminoácido en KGF es removido y un residuo diferente es insertado en su lugar. La(s) variante (s) de substitución incluyen la(s) variante (s) alélicas), las cuales están caracterizadas por los cambios de las secuencias de nucleótidos que se presentan en forma natural en la población de las especies que pueden o no pueden conducir a un cambio de aminoácidos. Un experto en la técnica puede utilizar cualquier información conocida acerca de la unión o el sitio activo del polipéptido en la selección de los sitios de mutación posibles. Un método para identificar los residuos de aminoácidos o las regiones para la mutagénesis de una proteína es llamado "mutagénesis por exploración de alanina", como se describe por Cunningham y Wells (1989), Science, 244:1081-1085, la descripción de la cual es incorporada por el presente para referencia. En este método, un residuo de aminoácido o grupo de residuos de blanco u objetivo de una proteína, es identificado (por ejemplo, los residuos cargados tales como Arg, Asp, His-, Lys y Glu) y reemplazado por un aminoácido neutral o cargado negativamente (más preferentemente alanina o polialanina) para afectar la interacción de los aminoácidos con el medio ambiente acuoso circundante dentro o fuera de la célula. Aquellos dominios/residuos que demuestran sensibilidad funcional a las substituciones son refinados entonces por la introducción de residuos adicionales o alternativos en los sitios de substitución. Por consiguiente, el sitio para la introducción de la modificación de la secuencia de aminoácidos está predeterminado. Para optimizar el funcionamiento de una mutación en un sitio dado, la exploración con alanina o la mutagénesis al azar puede ser conducida y la(s) variante (s) pueden ser seleccionadas para la combinación óptima de la actividad y el grado deseado de la actividad. Los sitios de interés más grande para la mutagénesis substitucional incluyen los sitios en los cuales los residuos particulares dentro de KGF son substancialmente diferentes de varias especies u otros miembros de la familia de FGF en términos del volumen de la cadena lateral, la carga, y/o la hidrofobicidad. Otros sitios de interés incluyen aquellos en los cuales los residuos particulares dentro de KGF son idénticos entre varias especies u otros miembros de la familia de FGF, porque tales posiciones son generalmente importantes para la actividad biológica de una proteína. Una persona experta apreciará que inicialmente estos sitios deben ser modificados por la substitución de una manera relativamente conservativa. t> Tales substituciones conservativas son mostradas en la Tabla 1 bajo el título de "Substituciones Preferidas". Si tales substituciones conducen a un cambio en la actividad biológica, entonces más cambios substanciales (Substituciones Ejemplares) pueden ser introducidos y/u otras adicionales se pueden hacer y los polipéptidos resultantes seleccionados.

TABLA 1: Substituciones de Aminoácidos Durante la realización de tales cambios, el índice hidropático de los aminoácidos puede ser considerado. La importancia del índice de aminoácidos hidropático en el caso de conferir una función biológica interactiva sobre una proteína, es entendida generalmente en la técnica (Kyte y Doolittle (1982), J. Mol. Biol., 157:105-131. La descripción de la cual es incorporada aquí para referencia) . Se sabe que ciertos aminoácidos pueden ser substituidos por otros aminoácidos que tienen un índice o evaluación hidropática similar y todavía retienen una actividad biológica similar. También se sobreentiende en la técnica que la substitución de aminoácidos semejantes se puede hacer efectivamente con base en la hidrofilicidad, particularmente en donde la proteína o péptido funcionalmente equivalente creado por el presente esté propuesto para su uso en las modalidades inmunológicas, como en el presente caso. La patente U.S. No. 4,554,101, la descripción de la cual es incorporada aquí para referencia, establece que la hidrofilicidad promedi-o local más grande de una proteína, cuando está gobernada por la hidrofilicidad de sus aminoácidos adyacentes, se correlaciona con su in unogenicidad y antigenicidad, es decir, con una propiedad biológica de la proteína.

La patente U.S. No. 4,554,101 también enseña la identificación y preparación de los epítopes a partir de las secuencias de aminoácidos primarias con base en la hidrofilicidad. Por medio de los métodos descritos en la Patente U.S. No. 4,554,101 un artesano experto podría ser capaz de identificar los epítopes, por ejemplo, dentro de la secuencia de aminoácidos de KGF. Estas regiones también son referidas como "regiones de núcleo epitópico". Numerosas publicaciones científicas han sido devotas con respecto a la predicción de la estructura secundaria, y con respecto a la identificación de los epítopes, a partir del análisis de las secuencias de aminoácidos (Chou y Fasman (1974). Biochemistry, 13(2) :222-245; Chou y Fasman (1974), Biochemistry, 23(2) .211-222; Chou y Fasman (1978), Adv. Enzymol. Relat. Áreas Mol. Biol., 47:45-148; Chou y Fasman (1978), Ann. Rev. Biochem., 47:251-276 y Chou y Fasman (1979), Byophys. J., 26:367-384, la descripción de las cuales se incorpora aquí para referencia) . Además, actualmente están disponibles programas de computadora para ayudar con la predicción de las porciones antigénicas y las regiones de núcleo epitópico de las proteínas. Los ejemplos incluyen aquellos programas basados en el análisis de Jameson-Wolf (Jameson y Wolf (1998), Comput. Appl. Biosci., 4(1) .181-186 y Wolf et al. (1988), Comput.

Appi. Biosci., 4 (1) :187-191, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia); el programa PepPlot® (Brutlag et al. (1990), CABS, 6:237-245 y Weinberg et al. (1985), Science, 228:740-742, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia); y otros programas para la predicción de la estructura terciaria de las proteínas (Fetrow y Bryant (1993), BIOTECHNOLOGY, 11:479-483, la descripción de la cual se incorpora aquí para referencia) . En contraste, las modificaciones substanciales en las características funcionales y/o químicas de KGF pueden ser efectuadas seleccionando las substituciones que difieran significativamente en su efecto sobre el mantenimiento de (a) la estructura del esqueleto del polipéptido en el área de la substitución, por ejemplo, como una conformación de lámina o helicoidal, (b) la carga relativa o hidrofobicidad de la proteína en el sitio de blanco u objetivo o (c) el volumen de la cadena lateral. Los residuos que están presentes en forma natural son divididos en grupos basados en las propiedades de la cadena lateral común: 1) hidrofóbicos : norleucina, Met, Ala, Val, Leu, lie; 2) hidrofílicos neutrales: Cys, Ser, Thr; 3) ácidos: Asp, Glu; 4) básicos: Asn, Gln, His, Lys, Arg; 5) aromáticos: Trp, Tyr, Phe; y 6) residuos que influyen en la orientación de la cadena: Gly, Pro. Las substituciones no conservativas pueden involucrar el intercambio de un miembro de uno de estos grupos entre sí. Tales residuos substituidos pueden ser introducidos en las regiones de KGF de modo que, por ejemplo, sean homólogos con otros miembros de la familia de FGF o en regiones no homologas de la proteína. Se pueden hacer una variedad de substituciones o deleciones de aminoácidos para modificar o agregar sitios de glicosilación enlazados con N o enlazados con 0, conduciendo a una proteína con glicosilación alterada. La secuencia puede ser modificada para agregar sitios de glicosilación a, o para delecionar los sitios de glicosilación N-enlazados u O-enlazados, de las proteínas de KGF. Un sitio de reconocimiento de glicosilación enlazado a la asparagina comprende una secuencia de tripéptidos la cual es reconocida específicamente por las enzimas de glicosilación celulares apropiadas. Estas secuencias de tripéptidos son ya sea Asn-Xaa-Thr o Asn-Xaa-Ser, en donde Xaa puede ser cualquier aminoácido diferente de Pro. Las mutaciones específicas de las secuencias de KGF pueden involucrar la substitución de un Asn no natural en la posición 50 y Thr en la posición 52 para insertar un sitio de glicosilación enlazado con N. Tales modificaciones pueden ser de utilidad particular en la adición de un carbohidrato, el cual puede reducir la agregación (para incrementar la estabilidad térmica y en el almacenamiento) , incrementar la vida media en circulación, reducir el punto isoeléctrico, incrementar la solubilidad y reducir la antigenicidad de la proteína. En una modalidad específica, un polipéptido variable preferentemente será substancialmente homólogo con respecto a la secuencia de aminoácidos de KGF (SEC ID NO: 2) . El término "substancialmente homólogo" como se utiliza aquí, significa un grado de homología que está en exceso del 80%, preferentemente en exceso del 90%, más preferentemente en exceso del 95% o más preferentemente aún del 99%. El porcentaje de homología como se describe aquí, es calculado como el porcentaje de residuos de aminoácidos encontrados en la más pequeña de las dos secuencias las cuales se alinean con residuos de aminoácidos idénticos en la secuencia que es comparada cuando cuatro huecos de una longitud de 100 aminoácidos pueden ser introducidos para ayudar a este alineamiento, como se describe por Dayhoff (1972), Atlas of Protein Sequence and Structure, 5:124, National Biochemical Research Foundation, Washington, D.C., la descripción del cual es incorporado por el presente para referencia. También están incluidas dentro del término "substancialmente homologas" las variante (s) de KGF las cuales pueden ser aisladas en virtud de la reactividad cruzada con los anticuerpos para la secuencia de aminoácidos de SEC ID NO: 2, o cuyos genes pueden ser aislados a través de la hibridación con el ADN de la SEC ID N0:1 o con segmentos de la misma. Una(s) proteína (s) de KGF pueden ser seleccionadas rápidamente para evaluar sus propiedades físicas. Por ejemplo, el nivel de la actividad biológica (por ejemplo, la unión del receptor y/o la afinidad, la actividad mitogénica, proliferativa de las células y/o in vivo) puede ser probada utilizando una variedad de ensayos. Uno de tales ensayos incluye un ensayo mitogénico para probar la capacidad de una proteína para estimular la síntesis de ADN (Rubin et al. (1989), supra, la descripción de la cual es incorporada aquí para referencia) . Otro de tales ensayos incluye el ensayo proliferativo de las células para probar la capacidad de una proteína para estimular la proliferación celular (Falco et al. (1988), Oncogene, 2:573-578, la descripción de la cual se incorpora aquí para referencia) . Las variante (s) específica (s) de KGF se describen en WO 9008771, WO 9622369, WO 9611949 y WO 9611951, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia. Un ejemplo de KGF incluye las proteínas que tienen residuos que corresponden a Cys1 y Cys15 de SEC ID NO: 2 reemplazados o delecionados, con la molécula resultante que tiene una estabilidad mejorada cuando se compara con la molécula original (WO 96/11949) . Otro ejemplo de KGF incluye los polipéptidos con cambio de carga en donde uno o más de los residuos de aminoácidos 41-154 del KGF natural (preferentemente los residuos Arg41, Gln43, Lys55, Lys95, Lys128, Asn137, Gln138, Lys139, Arg144, Lys147, Gln152, Lys153 o Thr154) están delecionados o substituidos con un residuo neutral o residuo cargado negativamente seleccionado para efectuar una proteína con una carga positiva reducida (WO 96/11951). Un ejemplo todavía adicional de KGF incluye las proteínas generadas por la substitución de al menos un aminoácido que tiene un potencial formador de bucles o rizos más elevado para al menos un aminoácido dentro de la región formadora del bucle o rizo de Asn115-HisU6-Tyr117-Asn118-Thr119 de la KGF natural (WO 96/11950). Un ejemplo todavía adicional incluye las proteínas que tienen una o más substituciones, deleciones o adiciones de los aminoácidos dentro de una región de 123-133 (los aminoácidos 154-164 de la SEC ID NO:2) del KGF natural; estas proteínas tienen actividad agonista o antagonista.

Las proteínas descritas específicamente incluyen las siguientes: C(1,15)S (Figura 2); ?N3/C(15)S (Figura 3); ?N3/C(15)- (Figura 4); ?N8/C(15)S (Figura 5); ?N8/C(15)- (Figura 6); ?N15 (Figura 7); ?N16 (Figura 8); ?N17 (Figura 9); ?N18 (Figura 10); ?N19 (Figura 11); ?N20 (Figura 12); ?N21 (Figura 13); ?N22 (Figura 14); ?N23 (Figura 15); ?N24 (Figura 16); C(l, 15) S/R(14 ) E (Figura 17); C(1,15)S/R(144)Q (Figura 18); ?N3/R(144)Q (Figura 19); C(1,15,40)S (Figura 20); C(1,15,102)S (Figura 21) C(1,15,102,106)S (Figura 22); ?N23/N(137)E (Figura 23) ?N23/K(139)E (Figura 24) ?N23/K(139)Q (Figura 25) ?N23/R(144)A (Figura 26) ?N23/R(144)E (Figura 27) ?N23/R(144)L (Figura 28) ?N23/K(147)E (Figura 29) ?N23/K(147)Q (Figura 30) ?N23/K(153)E (Figura 31) ?N23/K(153)Q (Figura 32) y ?N23/Q(152)E/K(153) E (Figura 33) .

Derivados de Polipéptidos Los derivados modificados químicamente de las proteína de KGF en las cuales la proteína está enlazada a un polímero para modificar las propiedades de la proteína (referidos aquí como "derivados") estén incluidos dentro del alcance de la presente invención. Tales derivados pueden ser preparados por un experto en la técnica dadas las descripciones de aquí. Los conjugados pueden ser preparados utilizando proteínas de KGF glicosiladas, no glicosiladas o des-glicosiladas y las porciones químicas adecuadas. Típicamente las proteínas no glicosiiadas y los polímeros solubles en agua serán utilizados. Los polímeros solubles en agua son deseables a causa de que la proteína a la cual cada uno está fijado no se precipitará en un medio ambiente acuoso, tal como un medio ambiente fisiológico. Preferentemente, el polímero será aceptable farmacéuticamente para la preparación de un producto o composición terapéutica. Una persona con experiencia en la técnica será capaz de seleccionar el polímero deseado con base en tales consideraciones como si el conjugado del polímero/proteína será utilizado terapéuticamente y, si es así, el perfil terapéutico de la proteína (por ejemplo, la duración de la liberación sostenida; la resistencia a la proteólisis; los efectos, si es que existe alguno, sobre la dosificación; la actividad biológica; la facilidad de manipulación; el grado o la falta de antigenicidad y otros efectos conocidos del polímero soluble en agua sobre una proteína terapéutica) . Los polímeros solubles en agua, aceptables clínicamente, adecuados, incluyen, pero no están limitados a, polietilenglicol (PEG), polietilenglicol propionaldehido, copolímeros de etilenglicol/propilenglicol, nomometoxi-polioxietilenglicol, carboximetilcelulosa, dextrano, alcohol polivinílico (PVA), polivinil pirrolidona, poli-1, 3-dioxolano, poli—1, 3, 6-trioxano, copolímero de etileno/anhídrido maléico, poli (aminoácidos ß) (ya sea homopolimeros o copolímeros al azar), poli(n-vinil pirrolidona) polietilenglicol, homopolímeros de polipropilenglicol (PPG) y otros óxidos de polialquileno, copolímeros de óxido de polipropileno/óxido de etileno, polioles polioxietilados (POG) (por ejemplo, glicerol) y otros polioles polioxietilados, sorbitol polioxietilado, o glucosa polioxietilada, ácidos colónicos u otros polímeros de carbohidratos, Ficoll o dextrano y mezclas de los mismos. Cuando se utilice aquí, el polietilenglicol se entiende que abarca cualquiera de las formas que han sido utilizadas para derivar otras proteínas, tales como mono-(C1-C10) alcoxí- o ariloxi-polietilenglicol. El polietilenglicol propionaldehido puede tener ventajas en la fabricación debido a su estabilidad en el agua. Los polímeros solubles en agua cada uno pueden ser de cualquier peso molecular y pueden ser ramificados o no ramificados. En general, mientras más elevado sea el peso molecular o existan más ramificaciones, más elevada será la proporción de polímero:proteína. Los polímeros solubles en agua cada uno típicamente tienen un peso molecular promedio de entre aproximadamente 2 kDa hasta aproximadamente 100 kDa (el término "aproximadamente" indica que en las preparaciones de un polímero soluble en agua, algunas moléculas pesarán más, algunas menos, que el peso molecular establecido) . El peso molecular promedio de cada polímero soluble en agua preferentemente esté entre aproximadamente 5kDa y aproximadamente 40 kDa, más preferentemente entre aproximadamente 10 kDa y aproximadamente 35 kDa y aún más preferentemente entre aproximadamente 15 kDa y aproximadamente 30 kDa. Existen varios métodos de fijación o unión disponibles para las personas expertas en la técnica, incluyendo las reacciones de acilación o las reacciones de alquilación (preferentemente para generar una proteína modificada químicamente amino-terminal) con una molécula soluble en agua, reactiva. Véase, por ejemplo, EP 0 401 384, la descripción de la cual es incorporada aquí para referencia; véase también, Malik et al. (1992), Exp. Hematol., 20:1028-1035; Francis (1992), Focus on Growth Factors, 3(2):4-10, publicada por Mediscript, Mountain Court, Friern Barnet Lañe, London N20 OLD, UK; EP 0 154 316; EP 0 401 384; WO 92/16221; WO 95/34326; WO 95/13312; WO 96/11953; US96/19459; y las otras publicaciones citadas aquí que se refieren a la pegilación (tratamiento con PEG) , las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia. Una modalidad específica de la presente invención es una molécula de monometoxi-polietilenglicol aldehido no ramificada que tiene un pese molecular promedio ya sea de aproximadamente 20 kDa o de aproximadamente 33 kDa (por ejemplo, entre 30 kDa y 35 kDa), o un aditivo de polietilenglicol butilo terciario que tiene un peso molecular promedio de aproximadamente 33 kDa (por ejemplo, entre 30 kDa y 35 kDa) conjugado por medio de la alquilación reductiva a las proteínas de KGF.

Formas Polivalentes Las formas polivalentes, es decir, las moléculas que comprenden más de una porción activa, pueden ser construidas. En una modalidad, la molécula puede poseer proteína (s) de KGF múltiples. Adicionalmente, la molécula puede poseer al menos una(s) proteína (s) de KGF y, dependiendo de la característica deseada de la forma polivalente, al menos otra molécula. En una modalidad, la forma polivalente puede ser construida, por ejemplo, por el acoplamiento químicamente de al menos una(s) proteína (s) de KGF y otra porción con cualquier enlazador aceptado clínicamente (por ejemplo, un polímero soluble en agua) . En un principio, el enlazador no debe impartir una nueva inmunogenicidad ni, en virtud de los nuevos residuos de aminoácidos, alterar el balance de hidrofobicidad y de la carga de la estructura lo cual afecte su biodistribución y espaciado o despeje. Los polímeros solubles en agua pueden ser, con base en los monómeros listados anteriormente, homopolímeros, copolímeros de bloques o al azar, terpolímeros de cadena recta o ramificada, substituidos o no substituidos. El polímero puede ser de cualquier longitud o peso molecular, pero estas características pueden afectar las propiedades biológicas. Los pesos moleculares promedio poliméricos particularmente útiles para reducir las velocidades de espaciado o despeje en aplicaciones farmacéuticas están en el intervalo de 2,000 hasta 35,000 daltons. Además, la longitud del polímero se puede hacer variar para optimizar o conferir la actividad biológica deseada. Las porciones activas pueden ser enlazadas utilizando las técnicas de acoplamiento convencionales (véase WO 92/16221, WO 95/13312 y WO 95/34326, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia) .

Alternativamente, una molécula bivalente puede consistir de dos repeticiones en serie de las proteína (s) de KGF separadas por una región enlazadora de polipéptido. El diseño de los enlazadores de polipéptidos es similar en su diseño a la inserción de secuencias de bucle o rizo cortas entre los dominios en el nuevo diseño de las proteínas (Mutter (198 8), TIBS, 13:260-265 y Regan y DeGrado (1998), Science, 241:976-978, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia) . Varias construcciones enlazadoras diferentes han sido montadas y se muestran que van a ser útiles para formar anticuerpos de cadena simple; la mayoría de los enlazadores funcionales varía en tamaño desde 12 hasta 25 aminoácidos (los aminoácidos que tienen grupos laterales no reactivos, por ejemplo, alanina, serina y glicina) los cuales conjuntamente constituyen una secuencia hidrofílica, tienen pocos residuos cargados opuestamente para mejorar la solubilidad y son flexibles (Whitlow y Filpula (1991), Methods: A Companion to Methods in Enzymology, 2:97-105; y Brigido et al. (1993), J. Immunol., 150:469-479, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia) . Adicionalmente, la(s) proteína (s) de KGF pueden ser unidas químicamente a una biotina, y al conjugado resultante se le permite entonces unirse a la avidina, conduciendo a la(s) proteína (s) de avidina/biotina/KGF tetravalentes. La(s) proteína (s) de KGF también pueden ser unidas covalentemente al dinitrofenol (DNP) o trinitrofenol (TNP) y los conjugados resultantes precipitados con anti-DNP 0 anti-TNP-IgM para formar conjugados decaméricos. En todavía otra modalidad, las proteínas de fusión recombinantes también pueden ser producidas en donde cada molécula quimérica recombinante tiene una secuencia de proteína de KGF fusionada amino-terminalmente o carboxi-terminalmente a la totalidad o a parte de los dominios constantes, pero al menos un dominio constante, de la cadena pesada o ligera de la inmunoglobulína humana. Por ejemplo, una proteína de fusión de IgGl/proteína de KGF quimérica (o proteína IgGl/KGF) puede ser producida a partir del gen quimérico que contiene la cadena ligera, un agente quimérico de la cadena ligera kappa humana/proteína de KGF (proteína de KGF/Ck) o una cadena ligera kappa humana/agente quimérico de proteína de KGF (Ck/proteína KGF); o un gen quimérico que contiene la cadena pesada: un agente quimérico de cadena pesada gamma-1 humano/proteína de KGF (proteína KGF/Cg-1) o un agente quimérico de proteína KGF/cadena pesada gamma-1 humana (Cg-1/proteína KGF) . A continuación de la transcripción y translación de un gen quimérico ae cadena pesada, o de un gen que contiene la cadena ligera y un gen quimérico de cadena pesada, los productos del gen pueden ser ensamblados en una sola molécula quimérica que tiene una(s) proteína (s) exhibidas bivalentemente. Los detalles adicionales que se refieren a la construcción de tales moléculas quiméricas se describen en la Patente de los Estados Unidos de América 5,116,964, WO 89/09622, WO 91/16437 y EP 315062, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia. En todavía una modalidad adicional, las proteínas de fusión recombinantes también pueden ser producidas en donde cada molécula quimérica recombinante tiene al menos una(s) proteína (s) de KGF, como se describió anteriormente, y al menos una porción de la región 186-401 de la osteoprotegerina (OPG) , como se describe en la Solicitud de Patente Europea No. 96309363.8, la descripción de la cual se incorpora aquí para referencia. Ya sea la(s) proteína (s) de KGF o la porción de osteoprotogerina pueden estar en la terminal amino o la terminal o extremidad carboxi de la molécula quimérica. La producción de la(s) proteína (s) de KGF se describe con detalle adicional posteriormente. Tales proteínas pueden ser preparadas, por ejemplo, por técnicas recombinantes o por síntesis química in vitro de la(s) proteína (s) de KGF deseadas.

Polinucleótidos Con base en la presente descripción y utilizando la tabla de codones universal, una persona con experiencia ordinaria en la técnica puede determinar fácilmente la totalidad de las secuencias de ácido nucleico que codifican la secuencia de aminoácidos de la(s) proteína (s) de KGF. Las técnicas de expresión recombinantes conducidas de acuerdo con las descripciones mostradas posteriormente pueden ser seguidas para producir estos polinucleótidos y para expresar las proteínas codificadas. Por ejemplo, insertando una secuencia de ácido nucleico la cual codifica una(s) proteína (s) de KGF en un vector apropiado, una persona con experiencia ordinaria en la técnica puede producir fácilmente grandes cantidades de la secuencia de nucleótidos deseada. Las secuencias pueden ser utilizadas entonces para generar sondas de detección o cebadores de amplificación. Alternativamente, un polinucleótido que codifica una(s) proteína (s) de KGF puede ser insertado en un vector de expresión. Introduciendo el vector de expresión en un huésped apropiado, la(s) proteína (s) deseada (s) también pueaen ser producidas en grandes cantidades. Como se describe adicionalmente aquí, existen nu eroros sistemas de vector/huésped disponibles para la propagación de las secuencias de ácidos nucleicos deseadas y/o la producción de la proteína deseada. Estas incluyen, pero no están limitadas a, vectores 'de plásmido, virales e insercionables, y huéspedes procarióticos y eucarióticos. Un experto en la técnica puede adaptar un sistema de vector/huésped el cual es capaz de propagar o expresar el ADN heterólogo para producir o expresar las secuencias de la presente invención. Además, se apreciará por estos expertos en la técnica que, en vista de la presente descripción, las secuencias de ácido nucleico dentro del alcance de la presente invención incluyen la secuencia de ácido nucleico de la Figura 1, así como las secuencias de ácido nucleico degeneradas de los mismos, las secuencias de ácido nucleico las cuales codifican la(s) variante (s) de KGF y aquellas secuencias de ácido nucleico las cuales se hibridizan (bajo las condiciones de hibridización descritas en la sección de selección de la biblioteca de ADNc abajo, o condiciones equivalentes o condiciones más estrictas) con los complementos de la secuencia de ácido nucleico de la Figura 1. También se proporcionan por la presente invención las construcciones de ADN recombinantes que involucran el ADN del vector junto con las secuencias de ADN que codifican las proteínas deseadas. En cada una de tales construcciones de ADN, la secuencia de ácido nucleico que codifica una proteína deseada (con o sin los péptidos de la señal) está en asociación operativa con una secuencia reguladora o de control de la expresión, adecuada, capaz de dirigir la replicación y/o expresión de la proteína deseada en un huésped seleccionado.

Preparación de Polinucleótidos Una secuencia de ácido nucleico que codifica una(s) proteína (s) de KGF puede ser obtenida fácilmente en una variedad de formas que incluyen, sin limitación, la síntesis química, la selección de la biblioteca genómica o ADNc, la expresión de la selección de la biblioteca y/o la amplificación por PCR del ADNc. Estos métodos y otros los cuales son útiles para el aislamiento de tales secuencias de ácido nucleico se describen en Sambrook et al. (1989), Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold. Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; por Ausubel et al. (1994), Current Protocois in Molecular Biology, Current Protocols Press; y por Berger y Kimmel (1987), Methods in Enzymology: Guide to Molecular Cloning Techniques, Vol. 152, Academic Press, Inc., San Diego, CA, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia. La síntesis química de una secuencia de ácido nucleico la cual codifica unas proteínas deseadas puede ser efectuada utilizando métodos bien conocidos en la técnica, tales como aquellos descritos por Engels et al. (1989), Angew. Chem. Intl. Ed., 28:716-734 y Wells et al. (1985), Gene, 34:315, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia. Estos métodos incluyen, inter alia, los métodos del fosfotriéster, fosforamidita y H-fosfonato de la síntesis de la secuencia de ácido nucleico. Las secuencias de ácido nucleico grandes, por ejemplo aquellas más grandes que aproximadamente 100 nucleótidos de longitud, pueden ser sintetizadas como varios fragmentos. Los fragmentos pueden ser unidos entonces conjuntamente para formar una secuencia de ácido nucleico adecuada. Un método preferido es la síntesis soportada por un polímero utilizando la química de fosforamidita estándar. Alternativamente, una secuencia de ácido nucleico adecuada puede ser obtenida seleccionando una biblioteca de ADNc apropiada (es decir, una biblioteca preparada a partir de una o más de las fuentes de tejido o de células que se cree que expresan la proteína) o una biblioteca genómica (una biblioteca preparada a partir del ADN genómico total) . La fuente de la biblioteca de ADNc es típicamente un tejido de cualesquiera especies que Jse cree que expresan una proteína deseada en cantidades razonables. La fuente de la biblioteca genómica puede ser cualquier tejido o tejidos de cualquier mamífero u otras especies que se cree que contienen un gen que codifica una proteína deseada. El medio de hibridación puede ser seleccionado en base a la presencia de un ADN que codifique una proteína deseada utilizando una o más sondas de ácido nucleico (oligonucleótidos, ADNc o fragmentos de ADN genómico que posean un nivel aceptable de homología con respecto al ADNc o gen que va a ser clonado) que se hibridizará selectivamente con el (los) ADNC(s) o el (los) gen (es) presentes en la biblioteca. Las sondas utilizadas típicamente para tal selección codifican una región pequeña de la secuencia de ADN de las mismas especies o de especies similares como las especies a partir de las cuales la biblioteca es preparada. Alternativamente, las sondas pueden degenerarse, como se describió aquí.

La hibridación es efectuada típicamente por el recocido de una sonda de oligonucleótido o ADNc con respecto a los clones bajo condiciones estrictas que previenen la unión no específica pero que permiten la unión de estos clones que tienen un nivel significativo de homología con la sonda o el cebador. La hibridación típica y el lavado en condiciones estrictas dependen en parte del tamaño (es decir, el número de nucleótidos de longitud) del ADNc o la sonda de oligonucleótidos y si la sonda es degenerada. La probabilidad de identificar un clon también se considera en el diseño del medio de hibridación (por ejemplo, si una biblioteca genómica o de ADNc está siendo seleccionada) . En donde un fragmento de ADN (tal como un ADNc) es utilizado como una sonda, las condiciones de hibridación típicas incluyen aquellas como se describen en Ausubel et al. (1994), supra. Después de la hibridación, el medio de hibridación es lavado a condiciones estrictas adecuadas, dependiendo de varios factores tales como el tamaño de la sonda, la homología esperada de la sonda con respecto clon, el medio de hibridación que es seleccionado, el número de clones que van a ser seleccionados y semejantes. Las condiciones de hibridación estrictas ejemplares son la hibridación en 6 x SSC a 62-67 °C, seguido por lavado en 0.1 x SSC a 62-67 °C durante aproximadamente una hora. Alternativamente, las condiciones de hibridación estrictas ejemplares son la hibridación en formamida al 45-55%, 6 x SSC a 40-45 °C, seguido por el lavado en 0.1 x SSC a 62-67 °C durante aproximadamente una hora. También están incluidas las secuencias las cuales se hibridizan a las secuencias de ácido nucleico descritas en la Figura 1 bajo condiciones de hibridación relajadas y las cuales codifican la(s) proteína (s) de KGF. Los ejemplos de tales condiciones de las condiciones de hibridación de características estrictas relajadas son 6 x SSC a 45-55 °C o hibridación con formamida al 30-40% a 40-45 °C, seguido por el lavado en 1-2 x SSC a 55 °C durante aproximadamente 30 minutos. Véase Maniatis et al. (1982), Molecular Cloning (A Laboratory Manual), Cold Spring Harbor Laboratory, páginas 387 a 389, la descripción del cual se incorpora aquí para referencia. También existen protocolos ejemplares para las condiciones de lavado estrictas en donde las sondas de oligonucleótidos son utilizadas para seleccionar el medio de hibridación. Por ejemplo, un primer protocolo utiliza 6 X SSC con pirofosfato de sodio al 0.05 por ciento a una temperatura de aproximadamente 35 °C a 63 °C, dependiendo de la longitud de la sonda. Por ejemplo, 14 sondas base son lavadas a 35-40 °C, 17 sondas base a 45-5C °C, 2C sondas base a 52-57 °C, y 23 sondas base a 57-63 °C. La temperatura puede ser incrementada 2-3 °C en donde la unión no especifica al fondo parece elevada. Un segunde protocolo utiliza cloruro de tetrametilamonio (TMAC) para el lavado. Una de tales soluciones de lavado en condiciones estrictas es 3 M TMAC, 50 mM Tris-HCl, pH 8.0 y 0.2% SDS. Otro método para obtener una secuencia de ácido nucleico adecuada que codifica una proteína de KGF es la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) . En este método, el ADNc es preparado a partir del poli(A)+ARN o ARN total utilizando la transcriptasa inversa de la enzima. Dos cebadores, típicamente complementarios con dos regiones separadas de ADNc (oliglonucleótidos) que codifican la proteína deseada, son agregados entonces al ADNc en compañía de una polimerasa tal como una Taq polimerasa, y la polimerasa amplifica la región de ADNc entre los dos cebadores. Las secuencias de oligonucleótidos seleccionadas como sondas o cebadores deben ser de longitud adecuada y suficientemente no ambiguas para minimizar la cantidad de unión no específica que puede ocurrir durante la selección o amplificación por PCR. La secuencia real de las sondas o cebadores está basada en secuencias o regiones conservadas o altamente homologas. Opcionalmente, las sondas o cebadores pueden degenerarse total o parcialmente, es decir, pueden contener una mezcla de sondas/cebadores, todas que codifican la misma secuencia de aminoácidos pero utilizando diferentes codones y etcétera. Una alternativa para preparar las sondas degeneradas es colocar una inosina en alguna o la totalidad de aquellas posiciones del codón que varían por especies. Las sondas o cebadores de oligonucleótidos pueden ser preparadas por métodos de síntesis química para el ADN como se describió aquí.

Vectores El ADN que codifica la proteína deseada puede ser insertado en vectores para la clonación adicional (amplificación del ADN) o para la expresión. Los vectores adecuados están disponibles comercialmente o pueden ser construidos específicamente. La selección o construcción de un vector apropiado dependerá de (1) si el mismo va -.a ser utilizado para la amplificación de ADN o para la expresión de ADN, (2) el tamaño del ADN que va a ser insertado en el vector y (3) la célula huésped propuesta que va a ser transformada con el vector.

Los vectores cada uno involucran típicamente una secuencia de ácido nucleico la cual codifica una proteína deseada unida operativamente a una o más de las siguientes secuencias de control o reguladoras de la expresión capaces de dirigir, controlar o efectuar de otra manera la expresión de una proteína deseada por una célula huésped seleccionada. Cada vector contiene varios componentes, dependiendo de su función (amplificación del ADN o expresión del ADN) y su compatibilidad con la célula huésped propuesta. Los componentes del vector generalmente incluyen, pero no están limitados a, uno o más de los siguientes: una secuencia de la señal, un origen de replicación, uno o más genes marcadores o de selección, un promotor, un elemento mejorador, una secuencia de terminación de la transcripción y semejantes. Estos componentes pueden ser obtenidos de las fuentes naturales o pueden ser sintetizados por procedimientos conocidos. Los ejemplos de los vectores de clonación procarióticos adecuados incluyen bacteriófagos tales como los derivados lambda, o los plásmidos de E. coli (por ejemplo pBR322, col El, pUC, el factor F y los derivados del plásmido Bluescript® (Stratagene, LaJolla, CA) ) . Otros vectores de expresión apropiados, de los cuales se conocen en la técnica numerosos tipos para las células huésped descritas aquí, también pueden ser utilizados para este propósito.

Secuencia de la Señal El ácido nucleico que codifica una secuencia de la señal puede ser insertado 5' de la secuencia que codifica una proteína deseada, por ejemplo, la misma puede ser un componente de un vector o puede ser una parte de un ácido nucleico que codifica una proteína deseada. El ácido nucleico que codifica la secuencia de la señal natural de KGF es conocida (WO 90/08771).

Origen de la Replicación Los vectores de expresión y clonación cada uno incluyen generalmente una secuencia de ácido nucleico que hace posible que el vector se replique en una o más células huésped seleccionadas. En un vector de clonación, esta secuencia es típicamente una que hace posible que el vector se replique independientemente del ADN cromosómico huésped e incluye un origen de replicación o secuencia que se replica autónomamente. Tales secuencias son bien conocidas. El origen de la replicación del plásmido pBR322 es adecuado para la mayoría de las bacterias Gram-negativas, y varios orígenes (por ejemplo, SV4C, polioma, adenovirus, VSV o BPV) son útiles para clonar vectores en células de mamíferos. En general, el origen de la replicación no es necesario para la expresión de los vectores de mamíferos (por ejemplo, el origen de SV40 es frecuentemente utilizado solo a causa de que el mi smo contiene el promotor inicial) .

Selección del Gen Los vectores de expresión y clonación cada uno contienen típicamente un gen de selección. Este gen codifica una proteína "marcadora" necesaria para la sobrevivencia o crecimiento de las células huésped transformadas cuando se hacen crecer en un medio de cultivo selectivo. Las células huésped que no son transformadas con el vector no* contendrán el gen de selección y, por lo tanto, no sobrevivirán en el medio de cultivo. Los genes de selección típicos codifican las proteínas que (a) confieren resistencia a los antibióticos u otras toxinas, por ejemplo, ampicilina, neomicina, metotrexato o tetraciclina; (b) complementar deficiencias auxotróficas o (c) suministrar nutrientes críticos no disponibles del medio de cultivo.

Otros genes de selección pueden ser utilizados para amplificar los genes que van a ser expresados. La amplificación es ei proceso en donde los genes los cuales están en una mayor demanda de la producción de una proteína crítica para el crecimiento son reiterados en serie dentro de los cromosomas de las generaciones sucesivas de las células recombinantes. Los ejemplos de los marcadores seleccionables adecuados para las células de mamíferos incluyen la dihidrofolato reductasa (DHFR) y timidina cinasa. Los transformantes de la célula son colocados bajo presión de selección la cual solamente los transformantes están adaptados para sobrevivir en virtud del marcador que está presente en los vectores. La presión de la selección impuesta por el cultivo de las células transformadas bajo las condiciones en las cuales la concentración del agente de selección en el medio es cambiada sucesivamente, por lo cual conduce a la amplificación de tanto el gen de selección como del ADN que codifica la proteína deseada. Como resultado, las cantidades incrementadas de la proteína deseada son sintetizadas a partir del ADN amplificado. Por ejemplo, las células transformadas con el gen de selección de DHFR son primero identificadas por el cultivo de la totalidad de los transformantes en un medio de cultivo que contiene metotrexato, un antagonista competitivo de DHFR. Una célula huésped apropiada cuando el DHFR del tipo silvestre es utilizado, es la línea celular del ovario de hámster Chino deficiente en actividad de DHFR (Urlaub y Chasin (1980), Proc. Nati. Acad. Sci., USA, 77 (7 ): 4216-4220, la descripción de la cual es incorporada aquí para referencia) . Las células transformadas son expuestas entonces a niveles incrementados de metotrexato. Esto conduce a la síntesis de copias múltiples del gen de DHFR y, concomitantemente, a copias múltiples del otro ADN presente en el vector de expresión, tal como el ADN que codifica una proteína deseada.

Promotor Los vectores de expresión y clonación cada uno típicamente contendrán un promotor que es reconocido por el organismo huésped y están enlazados operativamente a una secuencia de ácido nucleico que codifica la proteína deseada. Un promotor es una secuencia no transladada localizada corriente arriba (5') con respecto al codón de inicio de un gen estructural (generalmente dentro de aproximadamente 100 a 1000 bp) que controla la transcripción y translación de una secuencia de ácido nucleico particular. Un promotor puede ser agrupado convencionalmente en una de dos clases, promotores inducibles y promotores constitutivos. Un promotor inducible inicia los niveles incrementados de la transcripción a partir del ADN bajo su control en respuesta a algún cambio en las condiciones del cultivo, tales como la presencia o ausencia de un nutriente o un cambio en la temperatura. Un gran número de promotores, reconocidos por una variedad de células huésped potenciales, son bien conocidos. Un promotor puede estar enlazado operativamente al ADN que codifica una proteína deseada removiendo el promotor del ADN fuente por la digestión de la enzima de restricción y la inserción de la secuencia promotora deseada. La secuencia promotora de KGF natural puede ser utilizada para dirigir la amplificación y/o expresión del ADN que codifica una proteína deseada. Un promotor heterólogo es preferido, sin embargo, si el mismo permite una transcripción más grande y rendimientos más elevados de la proteína expresada cuando se compara con el promotor natural y si el mismo es compatible con el sistema de la célula huésped que ha sido seleccionada para su uso. Por ejemplo, cualquiera de las secuencias promotoras naturales de otros miembros de la familia de FGF pueden ser utilizados para dirigir la amplificación y/o expresión del ADN que codifica una proteína deseada.

Los promotores adecuados para su uso con huéspedes procarióticos incluyen la beta-lactamasa y los sistemas promotores de lactosa; la fosfatasa alcalina, un sistema promotor de triptófano (trp) ; un sistema de gen de luminiscencia bacteriana (luxR) y promotores híbridos tales como el promotor de tac. Otros promotores bacterianos conocidos también son adecuados. Sus secuencias de nucleótidos han sido publicadas, por lo cual se hace posible para un experto en la técnica ligarlas a la(s) secuencia (s) de ADN deseadas utilizando enlazadores o adaptadores cuando sea necesario para suministrar cualesquiera sitios de restricción requeridos. Las secuencias promotoras adecuadas para su uso con los huéspedes de levadura también son bien conocidas en la técnica. Los promotores adecuados para su uso con las células huésped de mamífero son bien conocidos e incluyen aquellos obtenidos de los genomas de virus tales como el virus de polioma, el virus de piel de gallina, adenovirus (tales como Adenovirus 2), virus de papiloma de bovino, virus de sarcoma de aves de corral, citomegalovirus, un retrovirus, el virus de la hepatitis-B y, más preferentemente, el virus de Simio 40 (SV40) . Otros promotores de mamífero adecuados incluyen los promotores de mamífero heterólogos, por ejemplo, los promotores de choques térmicos y el promotor de actina.

Elemento Mejorador Los vectores de expresión y clonación cada uno contendrán típicamente una secuencia mejoradora para incrementar la transcripción por los eucariotas más elevados de una secuencia de ADN que codifica una proteína deseada. Los mejoradores son elementos de actuación cis del ADN, usualmente desde aproximadamente 10-300 pb de longitud, que actúan sobre el promotor para incrementar su transcripción. Los mejoradores son relativamente independientes de la orientación y la posición. Los mismos han sido encontrados en 5' y 3' con respecto a la unidad de transcripción. Los mejoradores de la levadura son utilizados ventajosamente con los promotores de la levadura. Varias secuencias mejoradoras disponibles de los genes de mamíferos son conocidas (por ejemplo, globina, elastasa, albúmina, alfa-ceto-proteína e insulina) . Adicionalmente, los mejoradores virales tales como el mejorador SV40, el mejorador del promotor inicial del citomegalovirus, el mejorador del polioma y los mejoradores del adenovirus son elementos mejoradores ejemplares para la activación de los promotores eucarióticos. Aunque un mejorador puede ser dividido en un vector en una posición 5' o 3' con respecto a un ADN que codifica una proteína deseada, el mismo está localizado típicamente en un sitio 5' del promotor.

Terminación de la Transcripción Los vectores de la expresión utilizados en las células huésped eucarióticas cada uno típicamente contendrán una secuencia necesaria para la terminación de la transcripción y para estabilizar el ARNm. Tales secuencias están disponibles comúnmente de las regiones no transladadas 5' y ocasionalmente 3' de los ADNs o ADNcs eucaríóticos. Estas regiones contienen segmentos de nucleótidos transcritos como fragmentos poliadenilados en la porción no transladada del ARNm que codifica una proteína deseada.

Construcción del Vector La construcción de un vector adecuado que contiene uno o más de los componentes listados anteriormente (junto con la secuencia de codificación deseada) pueden ser efectuada por las técnicas de unión o ligación estándares. Los plásmidos o fragmentos de ADN aislados son escindidos, adaptados y religados en el orden deseado para generar el vector requerido. Para confirmar que la secuencia correcta ha sido construida, la mezcla de ligación o unión puede ser utilizada para transformar el E. coli, y los transformantes exitosos pueden ser seleccionados por las técnicas conocidas como se describió aquí. Las cantidades del vector a partir de los .transformantes son preparadas entonces, analizadas por digestión de la endonucleasa de restricción y/o secuenciadas para confirmar la presencia de la construcción deseada. Un vector que proporciona la expresión temporal del ADN que codifica una proteína deseada en las células del mamífero también puede ser utilizado. En general, la expresión temporal involucra el uso de un vector de expresión que es capaz de replicarse eficientemente en una célula huésped, de tal modo que la célula huésped acumule muchas copias del vector de expresión y, a su vez, sintetice los niveles elevados de la proteína deseada, codificados por el vector de expresión. Cada sistema de expresión temporal, que comprende un vector de expresión adecuado y una célula huésped, permite la identificación positiva conveniente de las proteínas codificadas por los ADNs clonados así como la selección rápida de tales proteínas para las propiedades biológicas o fisiológicas deseadas.

Células Huésped Cualquiera de una variedad de células huésped recombinantes, cada una de las cuales contiene una secuencia de ácido nucleico para su uso en la expresión de una proteína deseada, también es provisto por la presente invención. Las células huésped procarióticas y eucarióticas ejemplares incluyen células bacterianas, de mamíferos, de hongos, de insectos, de levadura o de plantas. Las células de huésped procarióticas incluyen, pero no están limitadas a, eubacterias tales como organismos Gram-negativos o Gram-positivos (por ejemplo, E. coli (HB101, DH5a, DH10, y MC1061); Bacilli spp. tales como B. subtilis; Pseudomonas spp. tales como P. aeruginosa; Streptomyces spp.; Salmonella spp. tales como S. typhimurium; o Serratia spp. tales como S. marcescans. En una modalidad específica, una proteína deseada puede ser expresada en E. coli. Además de las células huésped procarióticas, una(s) proteína (s) de KGF pueden ser expresadas en la forma glicosilada por cualquiera de varias células huésped adecuadas derivadas de organismos multicelulares. Tales células huésped son capaces del procesamiento complejo y actividades de glicosilación. En un principio, cualquier cultivo de células eucarióticas más elevadas podría ser utilizado, si tal cultivo involucra las células de vertebrados o invertebrados, incluyendo células de plantas e insectos. Los microbios eucarióticos tales como los hongos filamentosos o la levadura, pueden ser huéspedes adecuados para la expresión de una proteína deseada. El Saccharomyces cerevisiae, o la levadura para hornear común, es el utilizado más comúnmente entre los microorganismos huésped eucarióticos inferiores, pero varios de otros géneros, especies y cepas son bien conocidos y están disponibles comúnmente. Las células de vertebrado pueden ser utilizadas, como la propagación de las células de vertebrado en el cultivo (cultivo del tejido), en un procedimiento que es bien conocido. Los ejemplos de las líneas de células huésped de mamífero útiles incluyen, pero no están limitados a, la línea de CVl del riñon de mono transformada por SV40 (COS-7), la línea del riñon embrionario humano (293 células o 293 células subclonadas para el crecimiento en un cultivo en suspensión), células del riñon del hámster recien nacido y células de los ovarios del hámster Chino. Otras líneas de las células de mamíferos adecuadas incluyen, pero no están limitadas a, Hela, células L-929 del ratón, líneas 3T3 derivadas de los ratones Suizo, Balb-c o NIH, y las líneas celulares del hámster BHK o HaK. En una modalidad específica, una proteína deseada puede ser expresada en las células COS o en las células del baculovirus. Una célula puede ser transfectada y preferentemente transformada con un ácido nucleico deseado bajo condiciones apropiadas que permitan la expresión del ácido nucleico. La selección de las células huésped adecuadas y los métodos para la transformación, el cultivo, la amplificación, la selección y la producción de productos y la purificación, son bien conocidos en la técnica (Gething y Sambrook (1981), Nature, 293:620-625 o, alternativamente, Kaufman et al. (1985), Mol. Cell. Biol., 5 (7) : 1750-1759, o la Pat. U.S.

No. 4,419,446, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia) . Por ejemplo, para las células de mamífero sin paredes celulares, se puede utilizar el método de precipitación de fosfato de calcio. La electroporación, la microinyección y otras técnicas conocidas también pueden ser utilizadas. También es posible que una proteína deseada pueda ser producida por la recombinación homologa o con los métodos de producción recombinantes que utilizan los elementos de control utilizados en las células que ya contienen el ADN que codifica una(s) proteína (s) de KGF. La recombinación homologa es una técnica desarrollada originalmente para la ubicación como blancos de los genes para inducir o corregir las mutaciones en los genes activos transcripcionalmente (Kucherlapati (1989), Prog. in Nucí. Acid Res. y Mol. Biol., 36:301, la descripción de las cuales es incorporada aquí para referencia) . La técnica básica fue desarrollada como un método para introducir las mutaciones específicas en las regiones específicas del genoma del mamífero (Thomas et al. (1986), Cell, 44:419-428; Thomas y Capecchi (1987), Cell, 51:503-512 y Doetschman et al. (1988), Proc. Nati. Acad. Sci., 85:8583:8587, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia) o para corregir las mutaciones específicas dentro de los genes defectuosos (Doetschman et al. (1987), Nature, 330:576-578, la descripción de la cual se incorpora aquí para referencia) . Las técnicas ejemplares se describen en la Patente U.S. No. 5,272,071; WO 92/01069; WO 93/03183; WO 94/12650 y WO 94/31560, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para ferencia.

Cultivo de Células Huésped El método para cultivar cada una de las una o más células huésped recombinantes para la producción de una proteína deseada variará dependiendo de muchos factores y consideraciones; ei procedimiento de producción óptimo para una situación dada será evidente para aquellos expertos en la técnica a través de la experimentación mínima. Tales células huésped recombinantes son cultivadas en medios adecuados y la proteína expresada es recuperada entonces opcionalmente, aislada y purificada desde el medio de cultivo (o desde la célula, si está expresada íntracelularmente) por medios apropiados conocidos por aquellos expertos en la técnica. Específicamente, cada una de las células recombinantes utilizadas para producir una proteína deseada pueden ser cultivadas en un medio adecuado para inducir promotores, seleccionar las células huésped recombinantes adecuadas o amplificar el gen que codifica la proteina deseada. El medio puede ser suplementado cuando se necesario con hormonas y/u otros factores de crecimiento (tales como la insulina, transferrina o el factor de crecimiento epidérmico), las sales (tales como el cloruro de sodio, el calcio, el magnesio y el fosfato), las soluciones amortiguadoras (tales come HEPES), nucleósidos (tales como adenosina y timidina), antibióticos (tales como gentamícina) , elementos de traza (definidos como compuestos inorgánicos usualmente presentes a concentraciones finales en el intervalo micromolar) , y glucosa y otras fuentes de energía. También pueden ser incluidos otros suplementos, a concentraciones apropiadas, como será apreciado por aquellos expertos en la técnica. Las condiciones de cultivo adecuadas, tales como la temperatura, el pH y semejantes, también son bien conocidas por aquellos expertos en la técnica para su uso con las células huésped seleccionadas. El producto de expresión resultante puede ser purificado entonces casi hasta la homogeneidad utilizando procedimientos conocidos en la técnica. Las técnicas de purificación ejemplares son enseñadas en WO 90/08771 y WO 96/11952, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia.

Usos La(s) proteína (s) de KGF y los derivados modificados químicamente de las mismas que tienen actividad biológica (colectivamente, "el (los) producto (s) de la proteína de KGF") pueden ser utilizados como reactivos de investigación y como agentes terapéuticos y de diagnóstico. Por consiguiente, uno(s) producto(s) de proteína de KGF pueden ser utilizados en ensayos de diagnóstico in vitro y/o in vivo para cuantificar la cantidad de KGF en una muestra de tejido o de órgano. Por ejemplo, uno(s) producto (s) de la proteína de KGF pueden ser utilizados para la identificación del (de los) receptor (s) para la(s) proteína (s) de KGF en varios fluidos corporales y muestras de tejido utilizando técnicas conocidas en el arte (WO 90/08771). Esta invención también contempla el uso de uno(s) producto (s) de proteína de KGF en la generación de anticuerpos hechos contra el (los) producto (s) de proteina de KGF, incluyendo KGF. Una persona con experiencia ordinaria en la técnica puede utilizar procedimientos publicados, bien conocidos, para obtener anticuerpos policlonales, monoclonales o anticuerpos recombinantes. Tales anticuerpos pueden ser utilizados entonces para purificar y caracterizar el (los) producto (s) de proteína de KGF.

Composiciones Farmacéuticas La presente invención abarca las preparaciones farmacéuticas que contienen cada una cantidades efectivas terapéuticamente o profilácticamente de un (os) producto (s) de proteína de KGF. Las composiciones farmacéuticas cada una generalmente incluirán una cantidad efectiva terapéuticamente o efectiva profilácticamente de uno(s) producto (s) de proteína de KGF, mezclados con un vehículo. El vehículo incluye preferentemente uno o más materiales de formulación aceptable farmacéutica o fisiológicamente mezclados con el (los) producto (s) de proteína de KGF. El solvente primario en un vehículo puede ser de naturaleza ya sea acuosa o no acuosa. Además, el vehículo puede contener otros excipientes aceptables farmacéuticamente para modificar o mantener el pH, preferentemente para mantener el pH a entre aproximadamente 6.5 y 7.0 (por ejemplo, las solucione-s amortiguadoras tales como los citratos, fosfatos y aminoácidos tales como la glicina); la osmolaridad (por ejemplo, el manitol y el cloruro de sodio); viscosidad; claridad; color; esterilidad; estabilidad (por ejemplo, sucrosa y sorbitol); olor de la formulación; velocidad de disolución (por ejemplo, solubilizadores o agentes de solubilización tales como alcoholes, polietilenglicoles y cloruro de sodio) ; velocidad de liberación; así como agentes que proporcionan volumen para la formulación liofilizada (por ejemplo, manitol y glicina); agentes tensioactivos (por ejemplo, polisorbato 20, polisorbato 80, tritón, y pluronics); antioxidantes (por ejemplo, sulfito de sodio y sulfito ácido de sodio) ; preservativos (por ejemplo, ácido benzoico y ácido salicílico) , agentes condimentantes y diluyentes; agentes emulsificantes, agentes de suspensión; solventes; rellenadores; vehículos de suministro; diluyentes y/o adyuvantes farmacéuticos. Otras formas de administración efectivas tales como formulaciones de liberación lenta, parenterales, nieblas de inhalación, formulaciones activas oralmente, o supositorios, también son contempladas. Las composiciones también involucran preparaciones particuladas de los compuestos poliméricos tales como los polímeros de erosión volumétrica (por ejemplo, los copolímeros de poli (ácido láctico-co-glicólico) (PLGA), mezclas de polímeros de PLGA, copolímeros de bloques de PEG, y ácido láctico y glicólico, poli (cianoacrilatos) ) ; los polímeros de erosión superficial (por ejemplo, poli (anhídridos) y poli (orto esteres)); esteres de hidrogel (por ejemplo, polioles plurónicos, poli (alcohol vinílico), poli (vinilpirrolidona) , copolímeros de éter alquil vinílico-anhídrido maléico, celulosa, derivados de ácido hialurónico, alginato, colágeno, gelatina, albúmina, y féculas y dextranos) y sistemas de composición de los mismos; o preparaciones de liposomas o microesferas. Tales composiciones pueden tener influencia en el estado físico, la estabilidad, la velocidad de la liberación in vivo, y la velocidad del despeje o espaciado in vivo de las presentes proteínas y derivados. La formulación farmacéutica óptima para una proteína deseada será determinada por un experto en la técnica dependiendo de la ruta de administración y la dosificación deseada. Las composiciones farmacéuticas ejemplares son descritas en Remington' s Pharmaceutical Sciences, 18/a. Ed., (1990), Mack Publishing Co., Easton, PA 18042, páginas 1435-1712; Gambotz y Pettit (1995, Bioconjugate Chem., 6:332-351; Leone-Bay, et al. (1995), Journal of Medicinal Chemistry, 38:4263-4269; Haas, et al. (1995), Clinical Immunology and Immunopathology, 76(1) :93; WO 94/06457; WO 94/21275; FR 2706772 y WO 94/21235, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia. Las composiciones de liberación sostenida específicas están disponibles de una variedad de proveedores incluyendo Depotech Corp. (Depofoam®, un iiposoma multivesicular) y Aikermes, Inc. (ProLease®, una microesfera de PLGA) . Cuando se utilice aquí, hialuronan está propuesto para incluir hyaluronan, ácido hialurónico, las sales de los mismos (tales como hialuronato de sodio) , esteres, éteres, derivados enzimáticos y geles reticulados del ácido hialurónico, y los derivados modificados químicamente del ácido hialurónico (tales como hilan) . Las formas ejemplares de hialuronan se describen en las Patentes U.S. Nos. 4,582,865, 4,605,691, 4,636,524, 4,713,448, 4,716,154, 4,716,224, 4,772,419, 4,851,521, 4,957,774, 4,863,907, 5,128,326, 5,202,431, 5,336,767, 5,356,883; Solicitudes de Patente Europea Nos. 0 507 604 A2 y 0 718 312 A2; y WO 96/05845, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia. Los proveedores de hialuran incluyen BioMatrix, Inc., Ridgefield, NJ; Fidia S.p.A., Abano Terme, Italia; Kaken Pharmaceutical Co., Ltd., Tokio, Japón; Pharmacia AB, Estocolmo, Suecia; Genzyme Corporation, Cambridge, MA; Pronova Biopolymer, Inc. Portsmourth, NH; Calbiochem-Novabiochem AB, Lautelfingen, Suiza; Intergen Company, Purchase, NY y Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd., Tokio, Japón. Para el tratamiento y/o la prevención de las indicaciones orales, una solución líquida o suspensión puede ser utilizada de una manera similar a un enjuague para la boca, en donde el líquido es golpeado o azotado alrededor de la boca para maxímizar el tratamiento de las lesiones (Patentes de los Estados Unidos de América 5,102,870, las enseñanzas de la cual se incorporan aquí para referencia) . El contacto más prolongado con la superficie mucosal puede ser logrado seleccionando un vehículo adecuado el cual es capaz de recubrir la mucosa. Los ejemplos típicos son las formulaciones que contienen pectina tales como Orábase® (Colgate-Hoyt Laboratories, Norwood, MA) , suspensiones de sucralfato, Kaopectate y Leche de Magnesia. La formulación también puede ser una crema que se puede rociar, gel, loción o ungüento que tiene un vehículo o portador no tóxico, aceptable farmacéuticamente. El (los) producto (s) de proteína de KGF también pueden ser incorporados en una pastilla o trocisco que se disuelve lentamente, una base de goma masticable, o una prótesis bucal o de suministro lento enganchada sobre un esqueleto molar, por ejemplo. Una vez que la composición farmacéutica ha sido formulada, la misma puede ser almacenada en ampolletas estériles como una solución, suspensión, gel, emulsión, sólido, o un polvo deshidratado o liofilizado. Tales formulaciones pueden ser almacenadas ya sea en una forma lista para su uso o en una forma (por ejemplo, liofilizada) que requiere la reconstitución previo a la administración. En una modalidad específica, la presente invención está dirigida a juegos o conjuntos para producir una unidad de administración de una sola dosis. Los juegos o conjuntos pueden contener cada uno tanto un primer recipiente que tiene una proteína seca como un segundo recipiente que tiene una formulación acuosa. Los juegos o conjuntos incluidos dentro del alcance de esta invención son jeringas prellenadas de una sola cámara y de cámaras múltiples (por ejemplo, jeringas con liquido, y liojeringas tales como Lyo-Ject®, una liojeringa prellenada de cámara doble) están disponibles de Vetter GmbH, Ravensburg, Alemania. Un (os) producto (s) de proteína de KGF pueden ser aplicados en cantidades efectivas terapéutica y profilácticamente a órganos o tejidos caracterizados específicamente porque tienen daño a o en números insuficientes clínicamente de las células epiteliales. Se debe señlar que la(s) formulaciones de los productos (s) de proteína de KGF descritas aquí pueden ser utilizadas para aplicaciones veterinarias así como humanas y que el término "paciente" no debe ser interpretado de una manera limitativa.

La frecuencia de dosificación del (de los) productos de proteina KGF a un paciente dependerá de la enfermedad y la condición del paciente, así como de los parámetros farmacocinéticos del (de los) productos (s) de proteína de KGF como se formularon, y la vía de administración. El (los) producto (s) de proteína de KGF pueden ser administrados una vez, administrados diariamente, o administrados con una dosis inicial de bolo seguido por una dosis continua o suministro sostenido. También se contempla que otros modos de dosificación continua o casi continua pueden ser practicados. Por ejemplo, la derivación química puede conducir a formas de liberación sostenida de la proteína las cuales tienen el efecto de una presencia continua en el torrente sanguíneo, en cantidades predecibles, con base en un régimen de dosificación determinado. Un paciente que tenga la necesidad de estimulación (incluyendo citoprotección, proliferación y/o diferenciación) de las células epiteliales, puede ser administrado con una cantidad efectiva de uno(s) producto (s) de proteína de KGF para ocasionar la respuesta deseada en el paciente. El régimen de dosificación involucrado en un método para prevenir o tratar una condición específicamente generalmente será determinada por el doctor que proporcione la atención, considerando varios factores los cuales modifiquen la acción de los fármacos, por ejemplo, la edad, la condición, el peso corporal, el sexo y la dieta del paciente, la severidad de cualquier infección, el tiempo de la administración y otros factores clínicos. Las dosificaciones apropiadas pueden ser averiguadas por medio del uso de ensayos establecidos para determinar las dosificaciones utilizadas en conjunción con los datos de respuesta a la dosis apropiados. Las dosificaciones típicas variarán desde 0.001 mg/kg de peso corporal hasta 500 mg/kg de peso corporal, preferentemente hasta 200 mg/kg de peso corporal, más preferentemente 100 mg/kg de peso' corporal. El (los) producto (s) de proteína de KGF pueden ser administrados por medio de administración tópica, enteral o parenteral incluyendo, sin limitación, la infusión, la administración intraarterial, intraarticular, intracapsular, intracardiaca, intradérmica, intramuscular, intraorbital, intratecal, intravenosa, intraperitoneal, intraespinal, inyección intraesternal, intraventricular, subcutánea, subcuticular, subcapsular, subaracnoidea y transtraqueal. El (los) producto (s) de proteína de KGF pueden ser administrados por medio de administración oral o administrados por medio de membranas mucosas, es decir, bucal, intranasal, rectal o sublingualmente para el suministro sistémico. El (los) producto (s) de proteína de KGF pueden ser utilizados una vez o administrados repetidamente, dependiendo de la enfermedad y la condición del paciente. En algunos casos, el (los) producto (s) de proteína de KGF pueden ser administrados como un adyuvante para otra terapia y también con otras preparaciones farmacéuticas. En otra modalidad, la terapia celular también es contemplada, por ejemplo, la implantación de células que producen proteína (s) de KGF. Esta modalidad de la presente invención puede incluir el implante en células de paciente las cuales son capaces de sintetizar y secretar una forma activa biológicamente de la(s) proteína (s) de KGF. Tales células que producen proteína (s) de KGF pueden ser células las cuales normalmente no producen proteína (s) de KGF pero las cuales han sido modificadas para producir proteínas de KGF(s), o las cuales pueden ser células cuya capacidad para producir proteína (s) de KGF ha sido aumentada para la transformación con un polinucleótido adecuado para la expresión y secreción de la(s) proteína (s) de KGF. Para minimizar una reacción inmunológica potencial en pacientes que son administrados con las proteína (s) de KGF de especies extrañas, se prefiere que las células sean de las mismas especies que ei paciente (por ejemplo, humanas), o que las células puedan ser encapsuladas con material que proporciona una barrera contra el reconocimiento inmune, o que las células sean colocadas en un lugar anatómico privilegiado inmunológicamente, como tal en los testículos, el ojo y ei sistema nervioso central. Las células animales humanas o no humanas pueden ser implantadas en pacientes en recintos o membranas poliméricas semipermeables, biocompatibles, para permitir la liberación de una(s) proteína (s) de KGF pero previniendo la destrucción de las células por el sistema inmune del paciente o por otros factores perjudiciales del tejido circundante. Alternativamente, las propias células del paciente, transformadas ex vivo para producir la(s) proteína (s) de KGF, podrían ser implantadas directamente en el paciente sin tal encapsulación. La metodología para la encapsulación de la membrana de las células vivientes es familiar para las personas con experiencia ordinaria en la técnica, y la preparación de las células encapsuladas y su implantación en pacientes puede ser efectuada con técnicas conocidas (Patentes U.S. Nos. 4,892,538; 5,011,472; y 5,106,627, las descripciones de las cuales son incorporadas por el presente para referencia) .

En todavía otra modalidad, la terapia del gen in vivo también es contemplada, en donde una secuencia de ácidos nucleicos que codifica una(s) proteína (s) de KGF es introducida directamente en un paciente. La transferencia del gen de duración prolongada y eficiente a los hepatocitos es requerida para la terapia del gen efectiva para la expresión local de la proteína para prevenir y/o tratar las enfermedades del hígado y/o para la secreción de la proteína, para prevenir y/o tratar las enfermedades en otros órganos o tejidos. La construcción de ADN puede ser inyectada directamente en el tejido del órgano que va a ser tratado, en donde la misma pueda ser recibida in vivo y expresada, siempre que el ADN esté unido operativamente a un promotor que es activo en tal tejido. La construcción de ADN también puede incluir adicionalmente la secuencia del vector, de vectores tales como un vector de adenovirus, un vector retroviral, un vector de virus de papiloma y/o de virus de herpes, para ayudar a la recepción en las células. La transferencia física puede ser lograda in vivo por inyección local de la construcción del ácido nucleico deseado u otro vector de suministro apropiado que contenga la secuencia de ácido nucleico deseada, tal como la transferencia mediada por liposomas, la inyección directa (ADN desnudo), transferencia mediada por el receptor (complejo de ADN-ligando), o bombardeo de micropartículas (pistola de genes) . Para la regeneración in vivo de hepatocitos en ei hígado, el uso de vectores retrovirales de Moloney puede ser especialmente efectivo (Bosch, et al. (1996), Cold Spríng Harbor, Gene Therapy Meeting, 25-29 de septiembre de 1996, y Bosch, et al. (1996), Journal of Clinical Investigation, 98 (12) :2683-2687, la descripción de las cuales son incorporadas aquí para referencia). Un (os) producto (s) de proteína de KGF pueden ser aplicados en cantidades efectivas terapéutica y profilácticamente a órganos o tejidos caracterizados específicamente porque tienen un daño con respecto a, o números insuficientes clínicamente de células epiteliales. Se debe señalar que uno(s) producto (s) de proteína de KGF pueden ser utilizados para aplicaciones veterinarias así como humanas y que el término "paciente" no debe ser interpretado de una manera limitativa. De acuerdo con la presente invención, un (os) producto (s) de proteína de KGF pueden ser utilizados in vivo para inducir la estimulación (incluyendo la citoprotección, proliferación y/o diferenciación), la proliferación y/o diferenciación de las células epiteliales que incluyen, pero que no están limitadas a, el ojo, el oído, las encías, el cabello, los pulmones, la piel, el páncreas (endocrino y exócrino) , el timo, la tiroides, la vejiga urinaria, el hígado y el tracto gastrointestinal incluyendo las células en la cavidad oral, en el esófago, en el estómago granduiar y el intestino delgado, en el colon y la mucosa intestinal, en el recto y en el canal anal. Las indicaciones en las cuales uno(s) producto (s) de proteína de KGF pueden ser administradas exitosamente incluyen, pero no están limitados a: quemaduras y otras lesiones parciales y de grosor total, que tengan la necesidad de estimulación de las estructuras adnexales tales como los folículos del cabellos, las glándulas sudoríparas; las lesiones provocadas por la epidermólisis bulosa, el cual es un defecto en la adherencia de la epidermis a la dermis subyacente, conduciendo a ampollas dolorosas, frecuentemente abiertas, las cuales provocan morbididad severa; alopecia inducida por quimioterapia y la calvicie de patrón masculino, o la pérdida progresiva de cabello en los hombres y las mujeres; las úlceras gástrica y duodenal; la toxicidad del intestino en los regímenes del tratamiento con radiación y quimioterapia; las erosiones del tracto gastrointestinal (por ejemplo, el esófago, el estómago y los intestinos) incluyen la gastritis erosiva, esofagitis, reflujo esofágico o enfermedades inflamatorias del intestino, tales como la enfermedad de Crohn (que afecta principalmente al intestino delgado) y la colitis ulcerativa (que afecta principalmente el intestino grueso); los desórdenes o el daño al tejido de la glándula salival incluyendo los efectos de radiación/quimioterapia, las enfermedades autoinmunes tales como el Síndrome de Sjogren los cuales pueden provocar la insuficiencia de la glándula salival (síndrome de Sicca); la producción insuficiente de moco en todo el tracto gastrointestinal; el síndrome de tensión respiratoria del adulto (ARDS), la neumonía, la enfermedad de la membrana de hialina (es decir, el síndrome de tensión respiratoria de los niños y la displasia broncopulmonar) en niños prematuros; el daño crónico o agudo de los pulmones o la insuficiencia debida a lesiones por inhalación (incluyendo niveles elevados de oxígeno) , enfisema, el daño a los pulmones de las substancias quimioterapéuticas, el trauma del ventilador u otras circunstancias de daño de los pulmones; la cirrosis hepática, la falla fulminante del hígado, el daño provocado por la hepatitis viral aguda y/o ataques tóxicos al hígado y/o desórdenes del conducto biliar, y la transferencia del gen mediado viralmente al hígado, la abrasión córnea y/o las ulceraciones córneas debidas a las substancias químicas, las bacterias o los virus; la enfermedad progresiva de las encías; el daño al tímpano; las ulceraciones y/o las inflamaciones que incluyen las condiciones que resultan de la quimioterapia y/o la infección; los desórdenes pancreáticos y las insuficiencias pancreáticas incluyendo la diabetes (Tipo I y Tipo II), la pancreatitis, la fibrosis cística, y como un adyuvante en el trasplante de la célula del islote. Los agentes terapéuticos tales como analgésicos y anestésicos también pueden ser administrados para aliviar el dolor y agentes antiinfecciosos, antibacterianos, antifungosos y/o antisépticos también pueden ser administrados para prevenir y/o tratar la infección secundaria de las lesiones. Esta invención por consiguiente tiene implicaciones significativas en términos de hacer posible la aplicación del (de los) producto (s) de proteína de KGF caracterizada específicamente por él uso profiláctico y/o terapéutico de KGF para reducir, retardar y/o bloquear el inicio del daño a, o las deficiencias en estos tipos particulares de células. La siguiente es una descripción más específica de las enfermedades y las condiciones médicas las cuales pueden ser tratadas con producto (s) de proteína de KGF de acuerdo con la invención. El (los) producto (s) de proteína de KGF es (son) útil (es) para incrementar la citoprotección, proliferación y/o diferenciación de los hepatocitos para incrementar la función del hígado. El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir la cirrosis hepática, la falla fulminante del higadc, el daño provocado por la hepatitis viral aguda, los ataques tóxicos al hígado y los desórdenes del conducto biliar. La cirrosis hepática, secundaria a la hepatitis viral y la ingestión crónica de alcohol, es una causa significativa de morbididad y mortalidad. El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir el desarrollo de la cirrosis. Un modelo in vivo estándar de la cirrosis hepática ya es conocido (Tomaszewski et al. (1991), J. Appl. Toxicol., 11:229-231, la descripción de la cual es incorporada por la presente para referencia) . La falla fulminante del hígado es una condición amenazante de la vida que se presenta con la cirrosis en la etapa terminal y la cual es tratable actualmente solo con el transplante de hígado. El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir la falla fulminante del hígado. Los modelos estándares in vivo de la falla del hígado fulminante ya son conocidos (Mitchell et al. (1973), J. Pharmacol. Exp. Ther., 187:185-194; Thakore y Mehendale (1991), Toxicologic Pathol., 19:47-58; y Havill et al. (1994), FASEB Journal, 8(4-5):A930, Abstract 5387, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia) . La hepatitis viral aguda es frecuentemente subclínica y autolimitativa. Sin embargo, en una minoría de pacientes puede resultar el daño severo del hígado durante el transcurso de varias semanas. El (los) producto (s) de la proteína de KGF son útiles en la prevención y/o el tratamiento de la hepatitis viral. Los modelos in vivo estándares de la proliferación de hepatocitos ya son conocidos (Housley et al. (1994), Journal of Clinical Investigation, 94 (5) : 1764-1777; y Havill et al. (1994), supra, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia. Los ataques tóxicos al hígado provocados por el acetaminofen, halotano, tetracloruro de carbono y otras toxinas puede ser prevenido y/o tratado por producto (s) de proteína de KGF. Los modelos in vivo estándares de la toxicidad del hígado ya son conocidos (Mitchell et al. (1973), supra; Thakore y Mehendale (1991), supra, y Havill et al. (1994), supra, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia) . El (los) producto (s) de la proteína de KGF son útiles para incrementar la citoprotección, proliferación y/o diferenciación de las células epiteliales en el tracto gastrointestinal (por ejemplo, la cavidad oral, el esófago, el estómago, el intestino delgado, el colon, el recto y el canal anal) . Los términos "tracto gastrointestinal", como se definen aquí, e "intestino" son términos bien reconocidos en la técnica y son utilizados intercambiablemente aquí. Específicamente, el (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir las úlceras gástricas, las úlceras duodenales, la enfermedad inflamatoria del intestino, la toxicidad del intestino y las erosiones del tracto gastrointestinal. Las úlceras gástricas provocan una morbididad significativa, tienen una velocidad de recurrencia relativamente elevada, y sanan por formación de cicatrices sobre el recubrimiento de la mucosa. El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para prevenir la degeneración de la mucosa grandular y para regenerar la mucosa grandular más rápidamente, por ejemplo, ofreciendo una mejora terapéutica significativa en el tratamiento de las úlceras gástricas. Los modelos estándares in vivo de las úlceras gástricas ya son conocidos (Tarnawski et. al. (1991), "Indomethacin Impairs Quality of Experimental Gastric Ulcer Healing: A Quantitative Histological and Ultrastructural Analysis", In:Mechanisms of Injury, Protection and Repair of the Upper Gastrointestinal Tract, (Eds) Garner y O'brien, Wiley & Sons; Brodie (1968), Gastroenterology, 55:25; y Ohning et al. (1994), Gastroenterology, 106(4 Suppl. ) :A624, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia) . Las úlceras duodenales, de manera semejante a las úlceras gástricas, provoca una morbididad significativa y tienen una velocidad de recurrencia relativamente elevada. Lo(s) producto (s) de proteína de KGF son útiles para prevenir la degeneración del recubrimiento de la mucosa y para regenerar rápidamente el recubrimiento de la mucosa del duodeno para sanar estas úlceras y reducir su recurrencia. Los modelos in vivo estándares de las úlceras duodenales ya son conocidas (Berg et al. (1949), Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 7:374-376; Szabo y Pihan, Cronobiol. Int. (1987), 6:31-42; y Robert et al. (1970), Gastroenterology, 59:95-102, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia) . La toxicidad del intestino es un factor limitativo principal asociado con el tratamiento del cáncer, tanto en la radiación (abdominal, cuerpo completo o local, por ejemplo, cabeza y cuello) y quimioterapia. Son de interés principal aquellos pacientes que padecen; quimioterapia para el cáncer tales como leucemia, cáncer del pecho o como un adyuvante para la remoción de tumores; la radiaterapia para el cáncer de la cabeza y el cuello; y la quimioterapia y radioterapia combinadas para los trasplantes de médula ósea. La severidad del daño está relacionada con el tipo y la dosificación del (de los) agente (s) quimioterapéutico (s) y la terapia concomitante tal como la radioterapia. La mucositis en porciones del tracto gastrointestinal puede tomarse en cuenta para el dolor significativo y las molestias de estos pacientes, y la variación en la severidad del enrojecimiento y la hinchazón de las lesiones ulcerativas francas. Las lesiones frecuentemente llegan a ser infectadas secundariamente y llegan a ser mucho más difíciles de sanar. Los modelos in vivo estándares de la toxicidad del intestino inducida por la radiación ya son conocidos (Withers y Elkind (1970), Int. J. Radiat., 17 (3) :261-267, la descripción de la cual es incorporada aquí para referencia) . Los modelos estándares in vivo de la toxicidad del intestino inducida por quimioterapia ya son conocidos (Farrel et al., The American Society of Hematology, 38th Annual Meeting (Orlando, FL) , 6-8 de diciembre de 1996; Sonis et al. (1990), Oral Surg. Med. & Oral Pathol., 69 (4) :437-443; y Moore (1985), Cáncer Chemotherapy Pharmacol., 15:11-15, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia) .

Los agentes quimioterapéuticos ejemplares incluyen, pero no están limitados a, BCNU, busulfan, carboplatino, ciclofosfamida, cisplatino, citosina arabinosida, daunorrubicina, doxorrubicina, etoposida, 5-fluorouracilo, gemcitabina, ifosfamida, irinotecan, melfalan, metotrexato, navelbina, topotecan, taxol y taxótero, y los regímenes de tratamiento ejemplares incluyen, pero no están limitados a, BEAM (busulfan, etoposida, citosina arabinosida, metotrexato) ; ciclofosfamida y la irradiación completa del cuerpo; la ciclofosfamida, la irradiación total del cuerpo y la etoposida; la ciclofosfamida y el busulfan; y el 5-fluorouracilo con leucovorin o levamisol. El tratamiento, pretratamiento y/o postratamiento, con el (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para generar un efecto citoprotector o regeneración o ambos, por ejemplo, sobre la mucosa del intestino delgado, permitiendo dosificaciones incrementadas de tales terapias mientras que se reducen los efectos laterales fatales potenciales de la toxicidad del intestino. El (los) producto (s) de proteína de KGF pueden ser administrados preferentemente en los siguientes medios ambientes. Los pacientes colon-rectales rutinariamente son administrados con 5-fluorouracilo con leucovorin en los días 1 a 5; el (los) producto (s) de proteína de KGF pueden ser administrados en los días -2, -1 y 0. Los pacientes con cáncer en la cabeza y el cuello comúnmente son administrados con terapia por radiación hipofraccionada, más 5-fluorouracilo y cisplatino durante un período de siete semanas, el (los) productos de proteina de KGF pueden ser administrados los días -2, -1 y 0 y después de esto una vez por semana hasta el final de la terapia de radiación. En pacientes de transplante de linfoma los mismos son administrados frecuentemente por terapia de BEAM durante 6 días (los días 1 a 6); lo(s) producto (s) de proteína de KGF pueden ser administrados durante los días -2, -1 y 0 y como un postratamiento de tres días (los días 7 a 9) . En las modalidades específicas, el (los) producto (s) de proteína de KGF pueden ser administrados profilácticamente y/o terapéuticamente para reducir, retardar y/o bloquear el inicio de la mucositis (debido a la quimioterapia y/o radioterapia), en combinación con una o más citocinas para retardar y/o bloquear el inicio de la citopenia. Típicamente, las células de la médula ósea, las células progenitoras de la sangre, periféricas o las células del vastago (McNiece et al. (1989), Blood, 74:609-612 y Moore et al. (1979), Blood Cells, 5:297-311, las descripciones de la cual son incorporadas por la presente para referencia) son removidas de un paciente previo a la terapia citoreductora mielosupresiva (quimioterapia sola o con terapia de radiación) y son administradas entonces al paciente concurrentemente con o a continuación de la terapia citorreductora para contrarrestar los efectos ielosupresivos de tal terapia. Muchos enfoques diferentes han sido emprendidos para proteger un organismo de los efectos laterales de la radiación o las substancias químicas tóxicas. Un enfoque es reemplazar las células de la médula ósea antes de que la toxicidad se haya desarrollado. Otro enfoque es utilizar las células progenitoras de la sangre periférica (PBPC) . Estas PBPC pueden ser colectadas por la aféresis o flebotomía a continuación de la terapia sola (G-CSF o GM-CSF), o con quimioterapia o citocinas. Las mismas pueden ser nuevamente frescas o citopreservadas. Si se desea, las células pueden ser CD34+ seleccionadas, libres o agotadas de células Tn, libres o agotadas de células tumorígenas, o las células progenitoras pueden ser expandidas (se provoca que se multipliquen) por medios conocidos en la técnica, previo a la administración. Los beneficios de la reinfusión de los progenitores autólogos o alogenéicos a continuación de la terapia mielosupresiva han sido descritos en la literatura (Morse et al. (1992), Ann. Clin. Lab. Sci., 22:221-225; Kessinger y Ar itage (1991), Blood, 77:211-213, Kessinger et al. (1989), Blood, 74:1260-1265; Takam et al. (1989), Blodd, 74:1245-1245 y Kessinger et al. (1988), Blood: 723-727, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia) . Cuando se utilice aquí, el término "citocina" es un término genérico para las proteínas liberadas por una población de células la cual actúa sobre otra célula como mediadores intercelulares. Los ejemplos de tales citocinas sin las linfocinas, las onocinas y las hormonas de polipéptidos tradicionales. Incluidas entre las citocinas están los factores de crecimiento semejantes a la insulina; la hormona del crecimiento humana; la hormona del crecimiento humano de N-metionilo; la hormona del crecimiento de bovino, la hormona de la paratiroides; la tiroxina; insulina; proinsulina; relaxina; prorrelaxina; hormonas de glicoproteína tales como la hormona estimulante de los folículos (FSH), la hormona estimulante de la tiroides (TSH) y la hormona leutinizante (LH); el factor de crecimiento hemopoyético; el factor de crecimiento hepático; el factor de crecimiento de fibroblastos; la prolactina; el lactógeno placental, el factor alfa y -beta de necrosis del tumor, el péptido asociado con la gonadotropina del ratón; la inhibina; la activina; el factor de crecimiento endotelial vascular; la integrina; la trombopoyetina; los factores de crecimiento de los nervios tales como beta-NGF; factores de crecimiento de las plaquetas tales como TPO y MGDF; factores de crecimiento transformantes (TGFs) tales como TGF-alfa y TGF-beta; el factor de crecimiento I y II semejante a la insulina; la eritropoyetina; los factores osteoinductivos; las interferonas tales como la interferona-alfa, beta y gama, los factores estimulantes de las colonias (CSFs) tales como macrófagos-CSF (M-CSF), granulocitos-macrófagos-CSF (GM-CSF) , y granulocitos-CSF (C-CSF); interleucinas (lis) tales como IL-1, IL-2, 11-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, 11-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-13, IL-14, IL-15 e IL-16; y otros factores de polipéptidos. Las citocinas pueden ser utilizadas solas o en combinación para brindar protección contra, mitigar y/o invertir la toxicidad mieloide o hematopoyética asociada con los agentes citotóxicos. El modo de administración de lo(s) producto (s) proteína de KGF, así como de la citocina, deben coordinados y optimizados. Dependiendo de las circunstancias, una dosis apropiada del (de los) productos de proteína de KGF puede ser administrada previo a o subsiguientemente a la administración de los agente(s) terapéutico (s) . Por ejemplo, un parámetro que va a ser considerado es si la citocina es administrada en una sola dosis o en dosis múltiples durante ei curso de la terapia. Ciertas citocinas son borradas o despejadas rápidamente del cuerpo y requerirán una administración periódica o continua para que su eficacia sea maximizada. La manera de la administración puede diferir, dependiendo de si se da un pretratamiento o postratamiento de la citocina. Por ejemplo, si la citocina es provista previo al agente citotóxico, es preferible administrar la citocina por inyección de bolo intravenoso durante varias horas y, opcionalmente, repetir tal administración durante uno o más días mientras que y después que se complementa la terapia citotóxica. En una modalidad específica, el (los) producto (s) de proteína de KGF son administrados (por ejemplo intravenosamente) a 0.1 a 500 microgramos/kg/dosis, preferentemente hasta aproximadamente 200 microgramos/kg/dosis, previo a (por ejemplo, 1 a 3 días) y/o después de la terapia de radiación o quimioterapia, y el G-CSF (Neupogen® --o Lenograstim®) o GM-CSF (Sargramostim®) es administrado (por ejemplo, subcutáneamente) a 5 microgramos kg/kg/dosis durante 1 a 10 días (preferentemente 7 a 10 días) después de la quimioterapia.

Las erosiones del tracto gastrointestinal (por ejemplo, el esófago, el estómago y el intestino) incluyen la gastritis erosiva, la esofagitis, el reflujo esofágico y las enfermedades inflamatorias del intestino. Las enfermedades inflamatorias del intestino, tales como la enfermedad de Cron (que afecta principalmente el intestino delgado) y la colitis ulcerativa (que afecta principalmente el intestino grueso) , son enfermedades crónicas de etiología desconocida que conducen a la destrucción de la superficie de la mucosa, la inflamación, la formación de cicatrices y adhesión durante la reparación, y una morbididad significativa con respecto a los individuos afectados. El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para regenerar el recubrimiento de la mucosa y disminuir la recurrencia de estas erosiones, conduciendo a un sanado más rápido, y pueden ser de beneficio en controlar la progresión de la enfermedad. Los modelos in vivo estándares de la erosión del tracto gastrointestinal ya son conocidos (Geisinger et al. (1990), Mod-Pathol., 3 (5) : 619-624; Carlborg et al. (1983), Laryngoscope, 93 (2) : 184-187; Carlborg et al. (1980), Eur-Surg-Res., 12 (4) :270-282; Keshavarzian et al. 81991), Alcohol-Clin-Exp-Res., 15(1) :116-121; Katz et al. (1988), Dig-Dis-Sci-., 33 (2) :217-224; y Zeeh et al. (1996), Gastroenterology, 110 (4) : 1077-1083, las descripciones de las cuáles se incorporan aquí para referencia) . Los modelos in vivo estándares de la enfermedad inflamatoria del intestino son bien conocidos (Morris et ai. (1989), Gastroenterology, 96:795-803, Rachmilewitz et al. (1989), Gastroenterology, 97:326-327; Allgayer et al. (1989), Gastroenterology, 96:1290-1300; y Kim y Borstad (1992), Scand. J. Gastroenterol, 27(7):529-537, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia) . Los estudios de animales han establecido la relación entre la nutrición parenteral total (TPN) y la atrofia de la mucosa intestinal (Buch an et al. (1195), Journal of Parenteral and Enteral Nutrition, 19:453-460). La disminución en la altura del vello intestinal es atribuida a la falta de estímulos de crecimiento provistos a través de la admisión oral de nutrientes. Esto es reflejado en una reducción en el Índice de etiquetación, una medida del crecimiento. Las reducciones en la altura del vello también están correlacionadas con las reducciones en las actividades específicas de las enzimas involucradas en la absorción de nutrientes. El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles ya sea para brindar protección contra la atrofia durante el ayuno y/o para facilitar el recrecimiento durante la reintroducción de los nutrientes orales.

En una modalidad específica, la presente invención está dirigida al método de utilización de los productos de proteína de KGF y los productos de ia proteína de GLP-2 en combinación para incrementar la citoprotección, la proliferación y/o la diferenciación de las células epiteliales en el tracto gastrointestinal. Específicamente, la terapia combinada es útil para tratar y/o prevenir las úlceras gástricas, las úlceras duodenales, la enfermedad inflamatoria del intestino, la toxicidad del intestino y las erosiones del tracto gastrointestinal. El término "péptido de GLP-2" se refiere colectivamente aquí a GLP-2 humana (SEQ ID NO: 67) y a las variantes de los mismos (definidos, por ejemplo, en WO 96/32414 y, por ejemplo, hGLP-2(g2), un GLP-2 variante en el cual la glicina está substituida por la asparagina en la posición 2 (SEQ ID NO: 68) y hGLP-2(S2), un GLP-2 variante en el cual la serina está substituida por la asparagina en la posición 2 (SEQ ID NO: 69, descrita aquí) . La GLP-2 y las variantes de la misma pueden ser producidas y purificadas por técnicas estándar (véase, por ejemplo, WO 96/31414, la descripción de la cual se incorpora aquí para referencia) . WO 96/32414 reportó que la GLP-2 tiene efectos sobre el intestino delgado y los islotes pancreáticos.

La enfermedad de la membrana de hialina de los niños prematuros conduce a la ausencia de producción de agente tensioactivo por el tipo de neumocitos II dentro del pulmón, conduciendo al colapso de los alveolos. El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir la enfermedad de la membrana de hialina. La inhalación de humo es una causa significativa de morbididad y mortalidad en la semana siguiente a las lesiones por quemadura, debido a la necrosis del epitelio bronquiolar y los alveolos. Los productos de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir las lesiones por inhalación. El enfisema resulta de la pérdida progresiva de los alveolos. El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir el enfisema. Los desórdenes del páncreas pueden estar relacionados endocrinamente tales como la diabetes del Tipo I o del Tipo II, o pueden estar relacionados exócrinamente tales como la pancreatitis y las ineficiencias pancreáticas o la fibrosis cística. Los pacientes con diabetes del Tipo I diagnosticada requieren la administración de insulina exógena constante. Los pacientes con progreso de diabetes del Tipo II diagnosticada a través de las etapas variables de resistencia/insuficiencia de la insulina hasta nuestros dias también requieren la administración de insulina exógena. El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para mejorar, retardar y/o evitar la manifestación permanente de la diabetes mellitus o como un adyuvante en la fijación o ajuste del trasplante de las células del islote por la inducción de la función celular beta pancreática para normalizar los niveles de la glucosa de la sangre durante demandas metabólicas variables, evitando todavía la hipoglicemia frecuente o profunda. Los modelos estándares de diabetes ya son conocidos (Junod et al. (1967), Proc. Soc. Exp. Bio. Med. 126(1) :201-205; Rerup (1970), Pharm. Rev., 22:485-518; Rossini et al. (1977), P.N.A.S., 74:2485-2489; y Ar'Rajab y Ahren (1993), Páncreas, 8:50-57, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí para referencia) . Un modelo estándar de proliferación de las células pancreáticas ya es conocido (Yi et al. (1994), American Journal of Pathology, 145 (1) :80-85, la descripción de la cual es incorporada aquí para referencia) . Las células de la córnea pueden ser dañadas por la abrasión de la córnea y/o las ulceraciones de la córnea debidas a las substancias químicas, bacterias o virus. El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir la degeneración de la córnea.

Los modelos in vivo estándares de la regeneración de las células de la córnea ya son conocidos (Inatomi et al. (1994), Investigative Opthalmology and Visual Science, 35(4):1318, Abstract 299; Sotozono et al. (1994), Investigative Opthamology and Visual Science, 35(4):1941, Abstract 317; Wilson et al. (1994), Investigative Opthalmology and Visual Science, 35(4):1319, Abstract 301; Wilson et al. (1993), The FASEB Journal, 7(3):A493, Abstract 2857; Inatomi et al. (1994), Investigative Ophthalmology & Visual Science, 35(4):1318; Wilson et al. (1994), Experimental Eye Research, 59 (6) : 665-678; y Sotozono et al. (1995), Investigative Ophthalmology & Visual Science, 36 (8) :1524-1529, las descripciones de las cuales son incorporadas aquí por la presente para referencia) . El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir la enfermedad de las encías. Los modelos estándares in vivo de la enfermedad de las encías ya son conocidos. El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir la ulceración y/o las condiciones inflamatorias que incluyen las condiciones relacionadas con la quimioterapia (como se describió anteriormente) y/o la infección. Los modelos in vivo estándares del daño de la vejiga urinaria ya son conocidos (Ford y Hess (1976), Arch. Intern. Med., 136:616-619 y Droller, et al. (1982), Urol., 20:256-258, las descripciones de las cuales se incorporan aquí para referencia) . El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir el daño del tímpano. Los modelos in vivo estándares de las perforaciones de la membrana timpánica ya son conocidos (Clymer et al. (1996), Laryngoscope (USA), 106 (3) :280-285, la descripción de la cual es incorporada aquí para referencia) . El (los) producto (s) de proteína de KGF son útiles para tratar y/o prevenir los desórdenes o daños al tejido de las glándulas salivales, incluyendo los efectos de radiación/quimioterapia (como se describió anteriormente) y las enfermedades autoinmunes tales como el Síndrome de Sjogren el cual puede provocar la glandinsuficiencia salival (síndrome de sicca) . Los modelos estándares in vivo del daño al tejido de la glándula salival ya son conocidos. Los siguientes ejemplos están incluidos para ilustrar de manera más completa la presente invención. Se sobreentiende que se pueden hacer modificaciones en los procedimientos descritos sin apartarse del espíritu de la invención.

EJEMPLOS Los métodos estándares para muchos de los procedimientos descritos en los siguientes ejemplos, o los procedimientos alternativos adecuados, son provistos en manuales reconocidos ampliamente de biología molecular tales como, por ejemplo, Molecular Cloning, Segunda Edición, Sambrook et al., Cold Spring Harbor Laboratory Press (1987) y Current Protocols in Molecular Biology, Ausabel et al. (1990), Greene Publishing Associates/Wiley Interscience, New York. Todas las substancias químicas son ya sea de grado analítico o de grado USP.

Materiales Los materiales de prueba utilizados en los siguientes estudios in vivo fueron un KGF que tiene una deleción de los primeros 23 aminoácidos de la terminal amino de KGF (es decir, ?N23 KGF) utilizando técnicas estándares (WO 96/11946) . Todas las proteínas fueron producidas por la expresión recombinante en E. coli y se purificaron hasta la homogeneidad. Cada proteína fue administrada como una formulación subcutánea. El polipéptido de hGLP-2(G2) se sintetizó por el método de química de péptidos en fase sólida a base de Fmoc (fluorenilmetoxicarbonilo) /t-butilo. Un sintetizador de péptidos de ABI 431A (Perkin Elmer Corp., Foster City, CA) utilizando un programa de acoplamiento único para llevar a cabo el montaje de la cadena. La resina de poliestireno derivado de Fmoc-aminoácido-HMP (hidroximetil-fenilacetilo) precargado disponible comercialmente, se utilizó para preparar los péptidos de carboxi-ácido terminal. Los aminoácidos subsiguientemente fueron acoplados o unidos como esteres de HOBT (hidroxibenzotriazol) . La protección de la cadena lateral se empleó como sigue: Arg (PMC (2, 2, 5, 7, 8-pentametilcroman-6-sulfonilo) ) , Asn(TrT), Asp (OtBu), Cys (Trt), Gln(Trt), Glu(OtBu), His (Trt), Ser(tBu), Thr(tBu), y Tyr(tBu). El Gly(FmocHmb) se incorporó para eliminar el riesgo de la formación de subproductos de aspartimida o piperidina. Durante la remoción del Fmoc N-terminal final, los grupos protectores de la cadena lateral fueron removidos y los péptidos escindidos de la resina por el tratamiento durante 4 horas con TFA: triisopropilsilano: agua: fenol (85:5:5:5). La suspensión resultante se filtra, y el volumen del filtrado reducido por roto-evaporación. El péptido crudo se precipita y se lava con éter, luego se seca in vacuo durante la noche. Todos los péptidos fueron purificados hasta >95% de homogeneidad por CLAR en fase inversa sobre una columna Vydac C18 (2.5 cm x 25 cm) preparativa con gradientes lineales de 99.95% de acetonitrilo más 0.05% de TFA contra 0.1% de TFA acuoso. Los espectros de masa para los péptidos sintéticos fueron obtenidos sobre un espectrómetro de masa de cuadropolo único Sciex API (Perkin Elmer Corp.).

Todas las muestras espectrales de masa fueron fracciones fuera de la purificación por CLAR preparativa. Los análisis de aminoácidos fueron efectuados sobre un derivador/hidrolizador ABI 420A con un sistema de separación 130A (Perkin Elmer Corp.). Los péptidos fueron hidrolizados utilizando HCl 6N a 200 °C durante 30 minutos y luego derivados como el derivado de PTC (isotiocinato de fenilo) . La mezcla de aminoácidos fue separada entonces por CLAR sobre una columna Brownlee PTC Cis, 5 mieras de tamaño de poro, 2.1 x 220 mm con un gradiente lineal de 70 % de acetonitrilo contra agua. Ambos solventes fueron amortiguados con acetato de sodio hasta un pH=5.4. Las determinaciones de aminoácidos fueron cuantificadas por la comparación de las relaciones de picos desconocidas con un aminoácido equimolar estándar.

EJEMPLO 1: Crecimiento Intestinal en Animales Normales Ratones BDFl normales fueron tratados con ?N23 KGF dado como una inyección diaria única de 5 mg/kg/día sola, hGLP-2 (G2) dado como una inyección dos veces diariamente de 30 ug/inyección, o ambos. Los ratones fueron tratados durante 6 días y eutanizados para la remoción de los intestinos el día 7. La longitud total del intestino delgado fue removida, y se colgó bajo 5 g de tensión para la medición de la longitud y la subdivisión en 3 segmentos. Los primeros 10 cm fueron designados el duodeno, los últimos 10 cm fueron designados como el íleo y la porción central restante el yeyuno. Los segmentos fueron inundados en solución salada enfriada con hielo, secados con golpecitos y pesados. Los valores del peso húmedo promedio fueron convertidos a incrementos de porcentaje con relación al control y los datos son presentados en la Tabla 2 que se da enseguida.

Tabla 2 Como se observa en la Tabla 2, el tratamiento con hGLP-2 (G2) o ?N23 KGF administrado solo tuvo un efecto significativo sobre el peso húmedo en el intestino. Sorprendentemente, el pretratamiento con ?N23 KGF y hGLP (G2) mostró un efecto sinergístico sobre el incremento del peso húmedo en el intestino.

EJEMPLO 2 Modelo de Mucositis inducida por Quimioterapia Un modelo animal de mucositis inducida por quimioterapia se utilizó para investigar la terapia combinada de ?N23 KGF y hGLP-2 (G2) . Los ratones (15/grupo) tratados con 5- fluorouracilo (Roche Laboratories, Nutley NJ) , fueron administrados con el vehículo solo (salmuera), y con ?N23 KGF (formulado en salmuera y/o hGLP-2 (G2) en bicarbonato de amonio 0.1 M de acuerdo con el siguiente programa: Grupo de control: En los días -2 a 0, a un grupo de ratones se les administró salmuera los días -2 a 0, y se inyectaron intraperitonealmente con 5-fluorouracilo (5-FU, 60 mg/kg/día) en los días 1 a 4.

Pretratamiento con ?N23 KGF: En los días -2 a 0, un grupo de ratones fueron inyectados subcutáneamente con ?N23 KGF (5 mg/kg) . En los días 1 a 4, los ratones fueron inyectados intraperitonealmente con 5-fluorouracilo (5-FU, 60 mg/kg/día) .

Pretratamiento con hGLP-2 (G2) : En los días -5 a 0, un grupo de ratones fueron inyectados subcutáneamente con hGLP-2 (G2) (3 mg/kg) (dosis dividida). En los días 1 a 4, los ratones fueron inyectados intraperitonealmente con -fluorouracilo (5-FU, 60 mg/kg/día) .

Pretratamiento con ?N23 y hGLP-2 (G2) : En los días -2 a 0, un grupo de ratones fueron inyectados subcutáneamente con hGLP-2(G2) (3 mg/kg (dosis dividida)-.) e inyectados subcutáneamente con ?N23 KGF (5 mg/kg) . En los días 1 a 4, los ratones fueron inyectados intraperitonealmente con 5-fluorouracilo (5-FU, 60 mg/kg/día) .

Los efectos sobre los pesos corporales y la supervivencia de varios grupos fueron analizados. Los pesos corporales fueron tomados diariamente desde el dia 0 hasta la terminación el día 30. Los ratones fueron examinados visualmente dos veces/día para verificar las señales de morbididad durante 30 días y todos los animales moribundos fueron eutanizados. El cambio porcentual en el peso corporal en el nadir del día 6 se muestra en la tabla 3.

Como se observa en la Tabla 3, ei pretratamiento con hGLP2(G2) administrado solo no brindó protección contra la pérdida de peso, pero el tratamiento con ?N23 KGF administrado solo tuvo un efecto significativo. El pretratamiento con ?N23 KGF y hGLP-2(G2) mostró una mejora relativa con respecto ai pretratamiento con ?N23 KGF o hGLP-2(G2) solo. Los abcesos hepáticos son encontrados comúnmente en el control, pero los ratones supervivientes, no pretratados con ?N23 KGF, indican que su toxicidad de 5-FU es en parte debido al peso de la función de la barrera gastrointestinal. Además, los ratones pretratados con ?N23 KGF perdieron menos peso y consumieron más alimentos y agua durante el período de tratamiento con 5-FU. El pretratamiento con ?N23 KGF incrementó la capacidad de supervivencia en 30 días con relación a la salmuera (75% contra 35%), pero no el tratamiento concurrente (0% contra 35%) . El pretratamiento con ?N23 KGF y hGLP-2(G2) condujo a que todos los animales subrevivieron durante los 30 días. El hGLP-2(2) dado concurrentemente con el ?N23 KGF como un pretratamiento mejoró significativamente la supervivencia comparado con la supervivencia en el grupo al que se le dio solo el ?N23 KGF como un pretratamiento.

Aunque la presente invención ha sido descrita anteriormente tanto en forma general como en términos de las modalidades preferidas, se sobreentiende que se le ocurrirán otras variaciones y modificaciones a aquellos expertos en la técnica a la luz de la descripción anterior.

LISTADO DE SECUENCIAS (1) INFORMACIÓN GENERAL: (I) SOLICITANTE: Amgen Inc. (ii) TITULO DE LA INVENCIÓN: Factores de Crecimiento de Queratinocitos y su Uso en Combinación con Derivados de Péptidos Semejantes al Glucagon (iii) NUMERO DE SECUENCIAS: 69 (iv) DIRECCIÓN PARA CORRESPONDENCIA: (A) DESTINATARIO: Amgen Inc. (B) CALLE: 1840 Dehavilland Drive (C) CIUDAD: Thousand Oaks (D) ESTADO: California (E) PAÍS: E.U.A. (F) CÓDIGO POSTAL: 91320-1789 (v) FORMA LEÍBLE PARA LA COMPUTADORA: (A) TIPO DE MEDIO: Disco magnético flexible (B) COMPUTADORA: Compatible con IBM PC (C) SISTEMA OPERATIVO: PC-DOS/MS-DOS (D) PROGRAMA: Patentln Reléase #1.0, Versión #1.30 (vi) DATOS DE LA PRESENTE SOLICITUD: (A) NUMERO DE SOLICITUD: TODAVÍA NO CONOCIDO (B) FECHA DE PRESENTACIÓN: 08-DIC-1997 (C) CLASIFICACIÓN: (vii) DATOS DE SOLICITUD PREVIA: (A) NUMERO DE SOLICITUD: US 60/032,533 (B) FECHA DE PRESENTACIÓN: 06-DIC-1996 (vii) DATOS DE SOLICITUD PREVIA: (A) NUMERO DE SOLICITUD: US 60/062,074 (B) FECHA DE PRESENTACIÓN: 15-OCT-1997 (viii) INFORMACIÓN DE APODERADO/MANDATARIO: (A) NOMBRE: Zindrick, Thomas D. (B) NUMERO DE REGISTRO: 32,185 (C) NUMERO DE REFERENCIA/REGISTRO: A-481B (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO:l: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 862 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 108..692 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO:l: CAATCTACAA TTCACAGATA GGAAGAGGTC AATGACCTAG GAGTAACAAT CAACTCAAGA so TTCATTTTCA TTATGTTATT CATGAACACC CGGAGCACTA CACTATA ATG CAC AAA 116 Mee His Lys 1 TGG ATA CTG ACÁ TGG ATC CTG CCA ACT TTG CTC TAC AGA TCA TGC TTT 164 Trp lie Leu Thr Trp lie Leu Pro Thr Leu Leu Tyr Arg Ser Cys =he 5 10 15 CAC ATT ATC TGT CTA GTG GGT ACT ATA TCT TTA GCT TGC AAT GAC ATG 212 His lie lie Cys Leu Val Gly Thr lie Ser Leu Ala Cys Asn Asp Met 20 25 30 35 ACT CCA GAG CAÁ ATG GCT ACÁ AAT GTG AAC TGT TCC AGC CCT GAG CGA 260 Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Cys Ser Ser Pro Glu Arg 40 45 50 CAC ACÁ AGA AGT TAT GAT TAC ATG GAA GGA GGG GAT ATA AGA GTG AGA 308 His Tr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp lie Arg Val Arg 55 60 65 AGA CTC TTC TGT CGA ACÁ CAG TGG TAC CTG AGG ATC GAT AAA AGA GGC 356 Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg lie Asp Lys Arg Gly 70 75 80 AAA GTA AAA GGG ACC CAÁ GAG ATG AAG AAT AAT TAC AAT ATC ATG GAA 404 Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn lie Mee Glu 85 90 95 ATC AGG ACÁ GTG GCA GTT GGA ATT GTG GCA ATC AAA GGG GTG GAA AGT 452 lie Arg Thr Val Ala Val Gly lie Val Ala lie Lys Gly Val Glu Ser 100 105 110 H5 GAA TTC TAT CTT GCA ATG AAC AAG GAA GGA AAA CTC TAT GCA AAG AAA 500 Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys 120 125 130 GAA TGC AAT GAA GAT TGT AAC TTC AAA GAA CTA ATT CTG GAA AAC CAT 548 Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu lie Leu Glu Asn His 135 140 145 TAC AAC ACÁ TAT GCA TCA GCT AAA TGG ACÁ CAC AAC GGA GGG GAA ATG 596 Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met 150 155 160 TTT GTT GCC TTA AAT CAÁ AAG GGG ATT CCT GTA AGA GGA AAA AAA ACG 644 Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr 165 170 175 AAG AAA GAA CAÁ AAA ACÁ GCC CAC TTT CTT CCT ATG GCA ATA ACT TAA 692 Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 180 185 190 135 TTGCATATGG TATATAAAGA ACCCAGTTCC AGCAGGGAGA TTTCTTTAAG TGGACTGTTT 752 TCTTTCTTCT CAAAATTTTC TTTCCTTTTA TTTTTTAGTA ATCAAGAAAG GCTGGAAAAA 812 CTACTGAAAA ACTGATCAAG CTGGACTTGT GCATTTATGT TTGTTTTAAG 862 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 2: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 195 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 2 Met His Lys Trp He Leu Thr Trp He Leu Pro Thr Leu Leu v Aro 1 5 10 Í5 Ser Cys Phe His He He Cys Leu Val Gly Thr He Ser Leu Ala Cvs 20 25 3o Asn Asp Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Cys Ser Ser 35 40 45 Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Mee Glu Gly Gly Asp He 50 55 60 Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp 65 70 75 80 Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn 85 90 95 He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly 100 105 no Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tvr 115 120 125 Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu 130 135 1 o Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly 145 150 155 160 Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Ars Glv 165 170 175 Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Mee Ala 180 185 190 He Thr * 195 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 3: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 495 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE : CDS (B) LOCALIZACION : 1 . . 495 (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 3 : ATG TCT AAT GAT ATG ACT CCG GAA CAG ATG GCT ACC AAC GTT AAC TCC 48 Met Ser Asn Asp Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Ser 1 5 10 15 TCC TCC CCG GAA CGT CAC ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT 96 Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly 20 25 30 GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT 144 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 35 40 45 ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC 192 He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn 50 55 60 TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC 240 Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 65 70 75 80 AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA 288 Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys 85 90 95 CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG 136 Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu 100 105 110 ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC 384 He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His 115 120 125 AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCG GTT 432 Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 130 135 140 CGT GGT AAA AAA ACC AAA AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG 480 Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 145 150 155 160 495 ATG GCA ATC ACT TAA Met Ala He Thr • 165 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 4: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 165 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 4 Met Ser Asn Asp Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Ser 1 5 ?o 15 Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Glv 20 25 30 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 35 40 45 He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn 50 55 60 Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 65 70 75 80 Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys 85 90 95 Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu 100 105 no He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His 115 120 125 Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 130 135 140 Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 145 150 155 160 Met Ala He Thr * 165 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 5: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 483 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (iii) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..483 ( xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 5 : ATG ACT CCG GAA CAG ATG GCT ACC AAC GTT AAC TCC TCC TCC CCG GAA 48 Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Ser Ser Ser Pro Glu 1 5 10 15 CGT CAC ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA 96 . Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Mee Glu Gly Gly Asp He Arg Val 20 25 30 CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC 144 Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg 35 40 45 GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG 192 Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Mee Lys Asn Asn Tyr Asn He Met 50 55 60 GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA 240 Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu 65 70 75 80 TCT GAA TTC TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA 286 Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys 85 90 95 AAA GAA TGC AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC 336 Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn 100 • 105 no CAC TAC AAC ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA 384 His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu 115 120 125 ATG TTC GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCG GTT CGT GGT AAA AAA 432 Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys 130 135 140 ACC AAA AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT 480 Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr 145 150 155 160 TAA 483 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 6: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 161 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 6: Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Ser Ser Ser P^o Glu 1 5 10 15 Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val 20 25 30 Arer Arg Leu Phe cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg 35 40 45 Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met 50 55 60 Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu 65 70 75 80 Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lye Leu Tyr Ala Lys 85 90 95 Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu lie Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu 115 120 25 Met P e Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lvs 130 135 140 3 * uy* ^y* Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr 150 155 160 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 7: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 480 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc iii) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..480 [xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA SEC ID NO: ATG ACT CCG GAA CAG ATG GCT ACC AAC GTT AAC TCT TCT CCT GAA CGT 48 Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Ser Ser Pro Glu Arg 1 5 10 15 CAT ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT 96 His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg 20 25 30 CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC 144 Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly 35 40 45 AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA 192 Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu 50 55 60 ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT 240 He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser 65 70 75 80 GAA TTC TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA 288 Glu Phe Tyr Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys 85 90 95 GAA TGC AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC 336 Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu As His 100 105 110 TAC AAC ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG 384 Tyr Asn Thr Tyr Ala Sez Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met 115 120 125 TTC GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCG GTT CGT GGT AAA AAA ACC 4-32 Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr 130 135 140 AAA AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 480 Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 145 150 155 160 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 8 (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 160 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 8 Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Ser Ser Pro Glu Ars 1 5 10 15 His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Ars 20 25 30 Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys ?rs Glv 35 40 45 Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu 50 55 60 He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser 65 70 75 80 Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys 85 90 95 Glu Cye Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His 100 105 no Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met 115 120 125 Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr 130 135 140 Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 145 150 155 160 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 9: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 468 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..468 ( xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 9 ; ATG GCT ACT AAT GTT AAC TCC TCT TCT CCT GAA CGT CAT ACG CGT TCC 48 Met Ala Thr Asn Val Asn Ser Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser 1 5 10 15 TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG TTC TGC 96 Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys 20 25 30 CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC AAG GGC 144 Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly 35 40 45 ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT - 192 Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val 50 55 60 GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAC CTG 240 Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu 65 70 75 80 GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC AAC GAA 288 Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu 85 90 95 GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC ACC TAC 336 Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn HÍS Tyr Asn Thr Tyr 100 105 110 GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT GCT CTG 38 Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu 115 120 125 AAC CAG AAA GGT ATC CCG GTT CGT GGT AAA AAA ACC AAA -AAA GAA CAG 43 Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln 130 135 140 AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 46 Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Mee Ala He Thr * 145 150 155 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 10 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 156 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D ) TOPOLOGÍA: lineal ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 10 : Met Ala Thr Asn Val Asn Ser Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser 1 5 10 15 Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg"Val Arg Arg- eu Phe Cys 20 25 30 Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly 35 40 45 Thr Gln Glu Met Lys Asn Aen Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val 50 55 60 Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu 65 70 75 80 Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lye Lys Glu Cys Asn Glu 35 90 95 Asp Cys Asn Phe Lys Giu Leu He Leu Giu Asn His Tyr Asn Thr Tyr 100 105 no Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Mee Phe Val Ala Leu 115 120 125 Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln 130 135 140 Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 145 150 155 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 11 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 465 pares base ( B ) TIPO : ácido nucleico ( C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc ( ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..465 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 11: ATG GCT ACT AAT GTT AAC TCT TCT CCT GAA CG CF.T ACG CGT TCC TAC 48 Mee ?ia. Thr Asn Val Asn Ser Ser Pro Glu Arg His Tr.r Arg Ser Tyr 1 5 10 15 GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG TTC TGC CGT 96 Asp Tyr Met Glu Giy Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg 20 25 30 ACC CAG TGG TAC CTG CCT ATC GAC AAA COZ GGC AAA GTC AAG GGC ACC 144 Thr Cln Trp Tyr Leu Arq lie Asp Lys Ars Gly Lys Val Lys Gly Thr 35 40 45 CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT 192 Gln Glu Met Lys A=n Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala 50 55 60 GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAC CTG GCA 240 Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Giu Phe Tyr Leu Ala 65 70 75 80 ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC AAC GAA GAC 288 Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp 85 90 95 TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC ACC TAC GCA 336 Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala 100 105 HO TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT GCT CTG AAC 384 Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn 115 120 125 CAG AAA GGT ATC CCG GTT CGT GGT AAA AAA ACC AAA AAA GAA CAG AAA 432 Gln Lye Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys 130 135 140 ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 465 Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 145 150 155 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 12: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 155 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína ¡xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 12 Met Ala Thr Asn Val Asn Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr 1 5 10 15 Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Aro 20 25 30 Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr 40 45 Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala 50 55 60 Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala 65 70 75 80 Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp 85 90 95 Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn Kis Tyr Asn Thr Tvr Ala 100 105 no " Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn 115 120 125 Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu G1!. Lys 130 135 140 Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 145 150 155 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 13: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 450 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida ;ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..450 (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 13 : ATG TCT TCT CCT GAA CGT CAT ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT 48 Mee Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly 1 5 10 15 GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG 96 Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu 20 25 30 CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC 144 Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Mee Lys Asn 35 40 45 AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA 192 Asn Tyr Asn He Mee Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala 50 55 60' ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT 240 He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly 65 70 75 80 AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA 288 Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu 85 90 95 CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC 336 Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr 100 105 ' 110 CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCG 384 His Asn Gly Gly Glu Mee Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro 115 120 125 GTT CGT GGT AAA AAA ACC AAA AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG 432 Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu 130 135 140 CCG ATG GCA ATC ACT TAA 450 Pro Met Ala He Thr * 145 150 ( 2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 14 ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 150 aminoácidos ( B) TIPO : aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína ( xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 14 Met Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly 1 5 10 15 Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu 20 25 30 Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn 35 40 45 Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala 50 55 60 He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly 65 70 75 80 Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cye Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu 85 90 95 Leu He Leu Glu Asn His Tyr A=n Thr Tyr Ala Ser Ala Lye Trp Thr 100 105 no His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu A=n Gln Lys Gly He Pro 115 120 125 Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu 130 135 140 Pro Met Ala He Thr * 145 150 NFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 15 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 447 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..447 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 15 ATG TCT CCT GAA CGT CAT ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT 48 Met Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Glv 1 5 10 15 GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT 96 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Glr. Trp Tyr Leu Arg 20 25 30 ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC 144 He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gin Glu Mee Lys Asn Asn 35 40 45 TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC 192 Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 50 55 60 AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA 240 Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lye 65 70 75 80 CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG 288 Leu Tyr Ala Lys Lys Giu Cye Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu 85 90 95 ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC 336 He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr Hie 100 105 HO AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCG GTT Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 384 115 120 125 CGT GGT AAA AAA ACC AAA AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 432 130 135 1 0 ATG GCA ATC ACT TAA Met Ala He Thr * 447 145 (2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 16 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 149 aminoácidos (B) TIPO : aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína ixi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 16 : Met Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly 1 5 10 15 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 20 25 30 He Asp Lye Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn 35 40 45 Tyr Asn He Met Glu Xle Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 50 55 60 Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys 65 70 75 80 Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu ASD Cys Asn Phe Lys Glu Leu 85 90 95 He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His 100 105 HO Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 115 120 12S Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 130 135 140 Met Ala He Thr * 145 (2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 17 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 444 pares base (B) TIPO : ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido ( D) TOPOLOGÍA: desconocida ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc ( ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..444 (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 17 GAC 48 Asp ATC CGC GTA CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC 96 He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Aro He 20 25 30 GAC AAA CGC GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC 144 Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Mee Lys Asn Asn Tyr 35 40 45 AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA 192 Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys 50 55 60 GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG 240 Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu 65 70 75 80 TAC GCA AAA AAA GAA TGC AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC 288 Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu A=p Cye A=n Phe Lys Glu Leu He 85 90 95 CTG GAA AAC CAC TAC AAC ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC 336 Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr Kis Asn 100 105 110 GGT GGT GAA ATG TTC GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT AmC CCG GTT CGT 384 Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lye Gly lie Pro Val Arg 115 120 125 GGT AAA AAA ACC AAA AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG 437 Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Mee 130 135 1 0 GCA ATC ACT TAA Ala He Thr * 44 145 ( 2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 18 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 148 aminoácidos ( B ) TIPO : aminoácido ( D) TOPOLOGÍA: lineal ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína ,'xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 18 : Met Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Glv ASD 1 5 10 15 He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He 20 25 30 Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr 35 40 45 Asn He Mee Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala tle Lys 50 55 60 Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys Leu 65 70 75 80 Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He 85 90 95 Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn 100 105 HO Gly Gly Glu Mee Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg 115 120 125 Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Prc Mee 130 135 140 Ala He Thr 145 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 19: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 441 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..441 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 19: ATG GAA CGT CAT ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC 4 Mee Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Mee Glu Gly Gly Asp He 1 5 10 15 CGC GTA CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC 9 Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp 20 25 30 AAA CGC GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT 14 Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn 35 40 45 ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT 19 He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly 50 55 60 GTT GAA TCT GAA TTC TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC 24 Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr 65 70 75 80 GCA AAA AAA GAA TGC AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG 28 Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu 85 90 95 GAA AAC CAC TAC AAC ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT 33 Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly 100 105 110 GGT GAA ATG TTC GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCG GTT CGT GGT 384 Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly 115 120 125 AAA AAA ACC AAA AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA 43 Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala 130 135 140 ATC ACT TAA 44 He Thr * 145 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 20: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 147 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO:20: Met Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Mee Glu Gly Gly Asp He 10 15 Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp 20 25 30 Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys A=n Asn Tyr Asn 35 40 45 He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lvs Glv 50 55 60 Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr 65 70 75 8o Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu 85 90 95 Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly 100 105 no Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Aro Glv 115 120 125 Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala 130 135 140 He Thr * 145 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 21 (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 438 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (íx) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1.. 38 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO:21 ATG CGT CAT ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC 4 Mee Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg 1 5 10 15 GTA CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA 9 Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys 20 25 30 CGC GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT 144 Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He 35 40 45 ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT 19 Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val 50 55 60 GAA TCT GAA TTC TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA 24 Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala 65 70 75 80 AAA AAA GAA TGC AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA 28 Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu 85 90 95 AAC CAC TAC AAC ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT -.33 Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly 100 105 no GAA ATG TTC GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCG GTT CGT GGT AAA 384 Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys 115 120 125 AAA ACC AAA AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC 432 Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala Hie Phe Leu Pro Met Ala He 130 135 140 ACT TAA 438 Thr * 145 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 22: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 146 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 22: Met Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg 1 5 10 15 Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys 20 25 30 Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Mee Lys Asn Asn Tyr Asn He 35 40 45 Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val 50 55 60 Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala 65 70 75 80 Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu 85 90 95 Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly 100 105 no Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys 115 120 125 LyS xa© yS LVS Glu Gln ? 13?5 Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He 140 Thr 145 ;2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 23: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 435 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE : CDS (B) LOCALIZACION : 1 . . 435 (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 23 : ATG CAT ACT CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA 4 Met His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val 1 5 - 10 15 CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC 9 Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg 20 25 30 GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG 14 Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met 35 40 45 GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA 19 Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu 50 55 60 TCT GAA TTC TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA 24 Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys 65 70 75 80 £ K SE £ ffi S 35 í£ S £ ffi S S 2 ? ¡S 28S S Sf S S S? s E S £ S S K j- « ¿ ? 336 u :> 110 S tí f E ? E SS S S «g¡ e -j « JJJ « 384 ACC AAA AAA GAA CAG AAA Arr rr>* >r »-. i J» ^ -. «x. ííí S S Sí S ™ S ™ g «c «r 432 140 TAA * 145 435 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 24 (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 145 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 24: -t Thr Arg ser tyr ssp ^ Met cly 01y Asp ne ^ ^^ ?o 15 Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tvr Leu »m * 20 P 2?5 ??r le Ar9 He Asp Lys Arg 30 Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met 35 40 45 Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu 50 55 55 60 Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys 65 70 75 80 Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn 85 90 95 Kis Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu 100 105 no Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg -Gly Lys Lys 115 120 125 Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr 130 135 140 * 145 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 25: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 432 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..432 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 25: ATG ACT CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT 48 Met Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Aro 1 5 10 15 CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC 96 Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly 20 25 30 AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA 144 Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu 35 40 45 ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT 192 He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser 50 55 60 GAA TTC TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA 240 Glu Phe Tyr Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys 65 70 75 80 GAA TGC AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC 288 Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His 85 9° 95 TAC AAC ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG 336 Tyr Aen Thr Tyr Ala Ser Ala Lye Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met 100 105 110 TTC GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCG GTT CGT GGT AAA AAA ACC 384 Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr 115 120 125 AAA AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 432 Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 26: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 144 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal ;ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína ¡ xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 26 Met Thr Arg Ser Tyr A=p Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg 1 5 10 15 Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Aso Lys Arg Gly 20 25 " 30 Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Mee Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu 35 40 45 He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lvs Gly Val Glu Ser 50 55 60 Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lye Leu Tyr Ala Lys Lvs 65 70 75 y Q Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn HAS 85 so 95 Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Glv Glu Met 100 105 uj¡ Mec Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 1 0 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 27: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 429 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..429 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 27 ATG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT 48 Met Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg 1 5 10 15 CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA 96 Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys 20 25 30 GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC 144 Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He 35 40 45 CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA 192 Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu 50 55 60 TTC TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA 240 Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu 65 70 75 80 TGC AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC 288 Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr 85 90 95 AAC ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC 336 Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe 100 105 HO GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCG GTT CGT GGT AAA AAA ACC AAA 384 Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys 115 120 125 AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 429 Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Mee Ala He Thr * 130 135 140 2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 28 (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 143 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 28 Met Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg 1 5 ?o 15 Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys 20 25 3o Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He 35 40 45 Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu 50 55 60 Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu 65 70 75 80 Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tvr 85 90 95 Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe 100 105 no Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lye Thr Lys 115 120 125 Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 ¡2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 29: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 426 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 29: ATG TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG 48 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly A=p He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC 96 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Aro He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT 144 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn A=n Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 192 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC 240 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC 288 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 336 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 HO GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCG GTT CGT GGT AAA AAA ACC AAA AAA 384 Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 426 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 30: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 30: Mee Ser Tyr Asp Tyr Mee Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 Phe Cye Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He AeD Lye Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lye Gly Thr Gln Glu Met Lye Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cvs 65 70 75 80 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 no Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Mee Ala He Thr * 130 135 1 0 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 31 : (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 423 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..423 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 31 ATG TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG TTC 48 Mee Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe 1 5 10 15 TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC AAG 96 Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys 20 25 30 GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT 144 Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Mee Glu He Arg Thr 35 40 45 GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAC 192 Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr 50 55 60 CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC AAC 240 Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn 65 70 75 80 GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC ACC 288 Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr 85 90 95 TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT GCT 336 Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala 100 105 110 CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCG GTT CGT GGT AAA AAA ACC AAA AAA GAA 364 Leu A=n Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu 115 120 125 CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 423 Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 32: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 141 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 32 Met Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe 1 5 10 15 Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys 20 25 30 Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr 35 40 45 Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr 50 55 60 Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn 65 70 75 80 Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu A=n His Tyr Asn Thr 85 90 95 Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu MeC Phe Val Ala 100 105 no Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu 115 120 125 Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 33: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 495 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..495 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 33: ATG TCT AAT GAT ATG ACT CCG GAA CAG ATG GCT ACC AAC GTT AAC TCC 48 Met Ser Asn Asp Met Thr Pro Glu Gln Mee Ala Thr Asn Val Asn Ser 1 5 10 15 TCC TCC CCG GAA CGT CAC ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT 96 Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly 20 25 30 GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT 144 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 35 40 45 ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC 192 He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn 50 55 60 TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC 240 Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 65 70 75 80 AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAT CTT GCA ATG AAC AAG GAA GGA AAA Lye Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys 85 90 95 CTC TAT GCA AAG AAA GAA TGC AAT GAA GAT TGT AAC TTC AAA GAA CTA Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu 100 105 no ATT CTG GAA AAC CAT TAC AAC ACÁ TAT GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC He Leu Glu Asn His Tyr A=n Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His 115 120 125 AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCT GTT A=n Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 130 135 140 GAA GGT AAG AAA ACC AAG AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG Glu Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 145 150 155 160 ATG GCA ATC ACT TAA Met Ala He Thr * 165 INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 34 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 165 aminoácidos ( B) TIPO : aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 34 Met Ser Asn Asp Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Aen Val Asn Ser 1 5 10 15 Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly 20 25 30 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 45 He Asp Lys Arg Giy Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu 55 Mee Lys Asn Asn 60 TVr A*„ n. Met Glu „. »-- thr V l A1> =iy ^ ^ Ala He - «y v.! G1 S|| 01ü Ph. ^ ^ ^ t5 ^ ^ ^ ^ 8»0 -» *r ?l. ^ ,ys „. cys ^ Asp ^ Asn phe ^ » 110 He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala 115 120 Ser Ala Lys Trp Thr His 125 Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu 130 135 Asn Gln Lys Gly He Pro Val 140 Glu Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 145 150 155 160 Mee Ala He Thr * 165 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 35: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 495 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..495 (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 35 : ATG TCT AAT GAT ATG ACT CCG GAA CAG ATG GCT ACC AAC GTT AAC TCC 48 Met Ser Asn Asp Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Ser 1 5 10 15 TCC TCC CCG GAA CGT CAC ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT 96 Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly 20 25 30 GAC ATC CGC CTA CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT 144 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 35 40 45 ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC 192 He Aep Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn 50 55 60 TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC 240 Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 65 70 75 80 AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAT CTT GCA ATG AAC AAG GAA GGA AAA 288 Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys 85 90 95 CTC TAT GCA AAG AAA GAA TGC AAT GAA GAT TGT AAC TTC AAA GAA CTA 336 Leu Tyr Ala Lye Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Aen Phe Lye Glu Leu 100 105 no ATT CTG GAA AAC CAT TAC AAC ACÁ TAT GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC 384 He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His 115 120 125 AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCT GTT 432 A=n Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 130 135 140 CAÁ GGT AAG AAA ACC AAG AAA GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG 480 Gln Gly Lye Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 145 150 155 160 ATG GCA ATC ACT TAA 4-95 Met Ala He Thr * 165 \2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 36 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 165 aminoácidos ( B) TIPO : aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 36 : Met Ser Asn Asp Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Ser 1 5 10 15 Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly 20 25 30 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 35 40 45 He Asp Lys Ars Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn 50 55 60 Tyr Aen He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 65 70 75 80 Lye Gly Val Giu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Mee Asn Lye Glu Gly Lye 85 90 95 Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu 100 105 no He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His 115 120 125 Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 130 135 140 Gln Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 145 150 155 160 Met Ala He Thr * 165 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 37 (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 426 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 37.

ATG TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG 4 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC 9 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Ara He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA "ATC CGT 14 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 19 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 TAT CTT GCA ATG AAC AAG GAA GGA AAA CTC TAT GCA AAG AAA GAA TGC 24 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 AAT GAA GAT TGT AAC TTC AAA GAA CTA ATT CTG GAA AAC CAT TAC AAC 28 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 ACÁ TAT GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 33 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 110 GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCT GTT CAÁ GGT AAG AAA ACC AAG AAA 384 A a Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Gln Gly Lys Lys Thr Lys Lye 115 120 125 GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 426 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 \ 2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 38: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 38 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 110 Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Gln Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr • 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 39: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 495 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..495 (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 39 : ATG TCT AAT GAT ATG ACT CCG GAA CAG ATG GCT ACC AAC GTT AAC TCC 46 Met Ser Asn Asp Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Ser 1 5 10 15 TCC TCC CCG GAA COT CAC ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT 96 Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly 20 25 30 GAC ATC CGC GTA CGC CGT TTG TTC TCT CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT 144 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Ser Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 35 40 45 ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC 192 He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Glv Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn 50 55 60 TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC 240 Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 65 70 75 80 AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAT CTT GCA ATG AAC AAG GAA GGA AAA 288 Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys 85 90 95 CTC TAT GCA AAG AAA GAA TGC AAT GAA GAT TGT AAC TTC AAA GAA CTA 336 Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu 100 105 110 ATT CTG GAA AAC CAT TAC AAC ACÁ TAT GCA TCA GCT AAA TGG ACÁ CAC 384 He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His 115 120 125 AAC GGA GGG GAA ATG TTT GTT GCC TTA AAT CAÁ AAG GGG ATT CCT GTA 432 Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 130 135 140 AGA GGA AAA AAA ACG AAG AAA GAA CAÁ AAA ACÁ GCC CAC TTT CTT CCT 480 Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 145 150 155 160 ATG GCA ATA ACT TAA 495 Met Ala He Thr * 165 ( 2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 40 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 165 aminoácidos ( B) TIPO: aminoácido ( D) TOPOLOGÍA: lineal ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 40 : Met Ser Asn Asp Me Thr Pro Glu Gln Mee Ala Thr Asn Val Asn Ser 1 5 10 15 Ser Ser Pro Glu Arg Hie Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly 20 25 30 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Ser Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg -3-1 40 45 He Asp Lye Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Aen ? 55 60 Ty Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 65 70 75 80 Lye Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys 85 90 95 Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu 100 105 iio He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys p Thr His 115 120 125 Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 130 135 140 Arg Gly Lys Lys Thr Lye Lye Glu Gln Lye Thr Ala His Phe Leu Pro 45 150 155 160 Met Ala He Thr * 165 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 41: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 495 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..495 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 41: ATG TCT AAT GAT ATG ACT CCG GAA CAG ATG GCT ACC AAC GTT AAC TCC 48 Met Ser Asn Asp Mee Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Ser 1 5 10 15 TCC TCC CCG GAA CGT CAC ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT 96 Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Mee Glu Gly Gly 20 25 30 GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT 144 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 35 40 45 ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC 192 He Aep Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn 50 55 60 TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC 240 Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 65 70 75 80 AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAC CTG GCT ATG AAC AAA GAA GGT AAA 288 Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys 85 90 95 CTG TAC GCT AAA AAA GAA TCC AAT GAA GAT TGT AAC TTC AAA GAA CTA 336 Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Ser Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu 100 105 110 ATT CTG GAA AAC CAT TAC AAC ACÁ TAT GCA TCA GCT AAA TGG ACÁ CAC 384 He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His 115 120 125 AAC GGA GGG GAA ATG TTT GTT GCC TTA AAT CAÁ AAG GGG ATT CCT GTA 432 A=n Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 130 135 140 AGA GGA AAA AAA ACG AAG AAA GAA CAÁ AAA ACÁ GCC CAC TTT CTT CCT 480 Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 145 150 155 160 ATG GCA ATA ACT TAA 495 Met Ala He Thr * 165 [2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 42: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 165 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 2 : Met Ser Asn Asp Mee Thr Pro Glu Gln Mee Ala Thr Asn Val Asn Ser 1 5 10 15 Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Mee Glu Gly Gly 20 25 30 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 35 40 45 He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Mee Lys Aen Asn 50 55 60 Tyr Asn He Mee Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 65 70 75 80 Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Giy Lys 85 90 95 Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Ser Asn Glu ASD Cys Asn Phe Lys Glu Leu 100 105 no He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His 115 120 1 5 Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 130 135 1 0 Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 145 150 155 ?60 Met Ala He Thr * 165 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 43 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 495 pares base ( B) TIPO : ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..495 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 3 ATG TCT AAT GAT ATG ACT CCG GAA CAG ATG GCT ACC AAC GTT AAC TCC 48 Met Ser Asn Asp Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr Asn Val Asn Ser 1 5 10 15 TCC TCC CCG GAA CGT CAC ACG CGT TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT 96 Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly 20 25 30 GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT 144 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cye Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 35 40 45 ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC 192 He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn 50 55 60 TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC 240 Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 65 70 75 80 AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC TAC CTG GCT ATG AAC AAA GAA GGT AAA 288 Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Glv Lys 85 90 95 CTG TAC GCT AAA AAA GAA TCC AAT GAA GAT TCT AAC TTC AAA GAA CTA 336 Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Ser Asn Glu Asp Ser Asn Phe Lys Glu Leu 100 105 110 ATT CTG GAA AAC CAT TAC AAC ACÁ TAT GCA TCA GCT AAA TGG ACÁ CAC -- 38 He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His 115 120 125 AAC GGA GGG GAA ATG TTT GTT GCC TTA AAT CAÁ AAG GGG ATT CCT GTA 43 Asn Gly Gly Glu Met Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 130 135 140 AGA GGA AAA AAA ACG AAG AAA GAA CAÁ AAA ACÁ GCC CAC TTT CTT CCT 48 Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 145 150 155 160 ATG GCA ATA ACT TAA 49 Met Ala He Thr * 165 , 2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 44 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 165 aminoácidos (B) TIPO : aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína 10 (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 44 Met Ser Asn Asp Met Thr Pro Glu Gln Met Ala Thr A=n Val Asn Ser 1 5 ?o 15 Ser Ser Pro Glu Arg His Thr Arg Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Glv 20 25 30 15 Asp He Arg Val Arg Arg Leu Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg 35 40 45 He Asp Lys Arg Gly Lys Val Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn 50 55 60 Tyr Asn He Met Glu He Arg Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He 65 70 75 80 Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys 85 90 95 Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Ser A=n Glu Aep Ser Aen Phe Lys Glu Leu 100 105 no He Leu Glu Asn His Tyr Asn Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His 115 120 125 Asn Gly Gly Glu Mee Phe Val Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val 130 135 140 Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro 145 150 155 160 Met Ala He Thr * 165 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 45: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 426 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 5: ATG TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Ara Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT 1 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 1 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC 2 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC 2 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 336 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 110 GCT CTG GAA CAG AAA GGT ATC CCT GTT CGT GGT AAG AAA ACC AAG AAA 384 Ala Leu Glu Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 426 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 46: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 46: Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lys Giy Thr Glr. Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cvs 65 70 75 80 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 no Ala Leu Glu Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr 130 135 140 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 7 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 426 pares base ( B) TIPO : ácido nucleico ( C ) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc ( ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 47 ATG TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG 4 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC 9 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT 14 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 19 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 *T£AC -CT.G MGC-A «ATG „AA_C £AAA SGAíA gGGjT &»*» ™„.-.„ T?C gj £ ^ ^ „c 240 SO AAC GAA GAC TGC Air t-rr »»» -.. A=n Glu Asp J£ ¡¿ «J ™ JJC CTG CAÁ AAC CAC TAC AAC 85 U "* Leu Glu Asn His Tyr Asn 288 « A<_rC ,T*AC AG1C-A JTJCJT „GC.T LAyAAs ^Tr- «»rr -»,- « «j c=t gj „_ „ 336 110 GCT CTG AAC CAG GAA GGT ATC CCT GTT CCT GG * Ala Leu Asn Gln Glu Gly He ££ ^1 AS Glv ° ** ACC "* *** 115 120 val Ar9 Gly Lys Lys Thr Lys Lye 384 GAA CAG AAA ACC GCT CAC TC GTG r>nn «„„ «u gn ,ys ». I. a.. £ S S K S ÍS ÍS ^ 426 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 48: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 48 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Mee Glu He Arg 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 ">* Asn Glu A=p Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu MeC Phe Val 100 105 110 Ala Leu Asn Gln Glu Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr 130 135 140 ( 2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 49 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 426 pares base ( B) TIPO : ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida 'ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 49: CTG Leu 48 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 96 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT 14 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 19 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC 24 Tyr Leu Ala Met Asn Lye Glu Gly Lye Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 BO AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC 28 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 33 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 110 GCT CTG AAC CAG CAÁ GGT ATC CCT GTT CGT GGT AAG AAA ACC AAG AAA 38 Ala Leu Asn Gln Gln Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 426 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 ( 2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 50 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos ( B ) TIPO : aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína ( xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 50 ; Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Aro Leu 1 5 10 15 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lye Asn Asn Tyr Asn He Mee Glu He Arg 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Met A=n Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn Hie Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 110 Ala Leu Asn Gln Gln Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lye 115 120 125 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 51: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 426 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 'xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 51 ATG TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG 48 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Ars Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC 96 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT i 44 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Mee Glu He Ars 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 192 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC 2 0 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lye Lys Glu Cye 65 70 75 80 AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC 288 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu A=n His Tyr Asn 85 90 95 ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 336 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 110 GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCT GTT GCT GGT AAG AAA ACC AAG AAA 384 Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Ala Gly Lys Lye Thr Lys Lys 115 120 125 GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 426 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 52: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal ; ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína ' xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 52 : Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 ?o 15 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Ars 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 BO Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 no Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Ala Gly Ly= Lys Thr Lys Lys 115 120 125 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 NFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 53 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 426 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 ¡xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 53: ATG TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG 48 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC 96 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lye Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT 144 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lye Asn Asn Tyr A=n He Met Glu He Arg 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 192 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 TAT CTT GCA ATG AAC AAG GAA GGA AAA CTC TAT GCA AAG AAA GAA TGC 240 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 AAT GAA GAT TGT AAC TTC AAA GAA CTA ATT CTG GAA AAC CAT TAC AAC 288 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 ACÁ TAT GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 336 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 no GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCT GTT GAA GGT AAG AAA ACC AAG AAA 384 Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Glu Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 426 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 54: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 54 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cvs 65 70 75 80 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 no Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Glu Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 55: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 426 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 55 ATG TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG 48 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Ars Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC 96 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lvs Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT 144 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr A=n He Met Glu He Arg 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 192 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC 240 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lye Lys Glu Cye 65 70 75 80 AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC 288 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 336 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 HO GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCT GTT CTG GGT AAG AAA ACC AAG AAA 384 Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Leu Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 426 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Mee Ala He Thr * 130 135 140 |2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 56: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 56: Mee Ser Tyr Asp Tyr Mee Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lys Gly Thr Gln Glu Mee Lys Asn Asn Tyr Asn He Mee Glu He Arg 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 no Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Leu Gly Lys Lye Thr Lye Lye 115 120 125 Glu Gln Lys Thr Al a His Phe Leu Pro Met Ala He Thr 130 135 140 ( 2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 57 (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 426 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 57 ATG TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG 48 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC 96 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT 1 4 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 192 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC 240 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC 288 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 336 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 110 GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATT CCT GTT CGT GGT AAG GAA ACC AAG AAA 384 Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Glu Thr Lys Lys 115 120 125 GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 4 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Mee Ala He Thr * 130 135 140 INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 58: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 58: Mee Ser Tyr Asp Tyr Mee Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 2 25 30 Lys Gly Thr Gln Glu Mee Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Ars 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Mee Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cvs 65 70 75 so Asn Glu Asp Cys Aen Phe Lye Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 no Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Glu Thr Lys Lvs 115 120 125 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Mee Ala He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 59: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 426 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 59: ATG TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG 48 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTO CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC 96 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT .144 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 192 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC 240 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC 288 Asn Glu A=p Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 336 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Mee Phe Val 100 105 no GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCT GTT CGT GGT AAG CAÁ ACC AAG AAA 384 Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Gln Thr Lys Lys 115 120 125 GAA CAG AAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 426 Glu Gin Lys Thr Ala Hxs Phe Leu Pro Mee Ala He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 60: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ü) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 60: Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Aen He Met Glu He Arg 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 Asn Glu ASD Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 o 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 110 Ala Leu Asn Gln Lvs Gly He Pro Val Arg Gly Lys Gln Thr Lys Lys 115 " 120 125 Glu Gln Lys Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 61: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 426 pares base (B) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 61.

ATG TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG 48 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC 96 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT 144 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 192 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC 240 Tyr Leu Ala Met Asn Lvs Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lye Glu Cye 65 70 75 80 AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC 288 A=n Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 336 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Mee Phe Val 100 105 no GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCT GTT CGT GGT AAG AAA ACC AAG AAA 384 Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 GAA CAG GAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 426 Glu Gln Glu Thr Ala His Phe Leu Pro Mee Ala He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 62: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 62 Mee Ser Tyr Asp Tyr Mee Glu Gly Gly Asp He Arg Val Ars Arg Leu 1 5 10 - is Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn A=n Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Giu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 110 Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 Glu Gln Glu Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr 130 135 140 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 63 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 426 pares base (B ) TIPO : ácido nucleico ( C ) TIPO DE HEBRA: desconocido ( D) TOPOLOGÍA: desconocida ( ií ) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc ( ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 63: ATG TCC TAC GAC TAC ATG GAA GGT GGT GAC ATC CGC GTA CGT CGT CTG 46 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC 96 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT 144 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 192 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC 240 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cye 65 70 75 80 AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC 288 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 336 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Mee Phe Val 100 105 110 GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCT GTT CGT GGT AAG AAA ACC AAG AAA 384 Ala Leu A=n Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 GAA CAG CAÁ ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 426 Glu Gln Gln Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 ( 2 ) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 64 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 142 aminoácidos (B) TIPO : aminoácido (D) TOPOLOGÍA: lineal ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína [ xi ) DESCRI PCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 64 Met Ser Tyr A=p Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lye Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 110 Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lye Thr Lys Lys 115 120 125 Glu Gln Gln Thr Ala Hie Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 65 : ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 426 pares base (B ) TIPO: ácido nucleico (C) TIPO DE HEBRA: desconocido (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: ADNc (ix) CARACTERÍSTICA: (A) NOMBRE/CLAVE: CDS (B) LOCALIZACION: 1..426 (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 65: 4 Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 TTC TGC CGT ACC CAG TGG TAC CTG CGT ATC GAC AAA CGC GGC AAA GTC 9 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He Asp Lys Arg Gly Lys Val 20 25 30 AAG GGC ACC CAÁ GAG ATG AAA AAC AAC TAC AAT ATT ATG GAA ATC CGT 144 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Arg 35 40 - 45 ACT GTT GCT GTT GGT ATC GTT GCA ATC AAA GGT GTT GAA TCT GAA TTC 192 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60' TAC CTG GCA ATG AAC AAA GAA GGT AAA CTG TAC GCA AAA AAA GAA TGC 240 Tyr Leu Ala Met Asn Lys Glu Gly Lys. Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 AAC GAA GAC TGC AAC TTC AAA GAA CTG ATC CTG GAA AAC CAC TAC AAC 288 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 ACC TAC GCA TCT GCT AAA TGG ACC CAC AAC GGT GGT GAA ATG TTC GTT 336 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 110 GCT CTG AAC CAG AAA GGT ATC CCT GTT CGT GGT AAG AAA ACC AAG AAA 384 Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lys Lys Thr Lys Lys 115 120 125 GAA GAG GAA ACC GCT CAC TTC CTG CCG ATG GCA ATC ACT TAA 426 Glu Glu Glu Thr Ala His Phe Leu Pro Met Aia He Thr * 130 135 140 (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 66: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 142 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido [D) TOPOLOGÍA: lineal ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína ;xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 66: Met Ser Tyr Asp Tyr Met Glu Gly Gly Asp He Arg Val Arg Arg Leu 1 5 10 15 Phe Cys Arg Thr Gln Trp Tyr Leu Arg He A=p Lye Arg Gly Lys Val 20 25 30 Lys Gly Thr Gln Glu Met Lys Asn Asn Tyr Asn He Met Glu He Ara 40 45 Thr Val Ala Val Gly He Val Ala He Lys Gly Val Glu Ser Glu Phe 50 55 60 Tyr Leu Ala Met Asn Lye Glu Gly Lye Leu Tyr Ala Lys Lys Glu Cys 65 70 75 80 Asn Glu Asp Cys Asn Phe Lys Glu Leu He Leu Glu Asn His Tyr Asn 85 90 95 Thr Tyr Ala Ser Ala Lys Trp Thr His Asn Gly Gly Glu Met Phe Val 100 105 no Ala Leu Asn Gln Lys Gly He Pro Val Arg Gly Lye Lys Thr Lye Lys 115 120 125 Glu Glu Glu Thr Ala His Phe Leu Pro Met Ala He Thr * 130 135 140 INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO : 67 ( i ) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD : 33 aminoácidos (B) TIPO : aminoácido (C) TIPO DE HEBRA: desconocida ( D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína Ixi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 67 His Ala Asp Gly Ser Phe Ser Asp Glu Met Asn Thr He Leu Asp Asn 1 5 10 is Leu Ala Ala Arg Asp Phe He Asn Trp Leu He Gln Thr Lys He Thr 20 25 30 Asp (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 68: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 33 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (C) TIPO DE HEBRA: desconocida (D) TOPOLOGÍA: desconocida ( ii ) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi ) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO : 68 His Gly Asp Gly Ser Phe Ser A=p Glu Mee A=n Thr He Leu Asp Asn 1 5 ?o 15 Leu Ala Ala Arg Asp Phe [le A=n Trp Leu He Gln Thr Lys He Thr 20 25 30 Asp (2) INFORMACIÓN PARA LA SEC ID NO: 69: (i) CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA: (A) LONGITUD: 33 aminoácidos (B) TIPO: aminoácido (C) TIPO DE HEBRA: desconocida (D) TOPOLOGÍA: desconocida (ii) TIPO DE MOLÉCULA: proteína (xi) DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEC ID NO: 69; H. Ser A=p Gly Ser Phe Ser Asp Glu Mee Asn Thr He Leu Asp Asn Leu Ala Ala Arg Asp Phe He Asn Trp Leu He Gln Thr Lys He Thr ¿U 25 30 Asp Se hace constar que con relación a esta fecha el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un método para incrementar ia citoprotección, la proliferación y/o la diferenciación de las células epiteliales en el tracto gastrointestinal, caracterizado porque comprende administrar al paciente una cantidad efectiva de un (os) producto (s) de proteína de KGF y un producto de GLP-2.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el producto de la proteína de KGF se selecciona del grupo que consiste de C(1,15)S, ?N15, ?N16, ?N17, ?N18, ?N19, ?N20, ?N21, ?N22, ?N23, ?N24, ?N3/C(15)S, ?N3/C(15)-, ?N8/C(15)S, ?N8/C(15)-, C(1,15)S/R(144)E, C ( 1, 15 ) S/R ( 144 ) Q y ?N23/R(144)Q.

3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el producto de GLP-2 se selecciona del grupo que consiste de GLP--2 humana, hGLP-2(G2) y hGLP-2(S2).

4. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el producto de GLP-2 y el (los) productos) de proteína de KGF-2 son administrados en cantidades efectivas profilácticamente para tratar la mucositis.

5. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el producto de GLP-2 se selecciona del grupo que consiste de GLP-2 humana, hGLP-2(G2) y hGLP-2(S2).