MXPA99004294A - (4r-5s,6s,7r)-hexahidro-1-[5-(3-aminoinazol)metil]3-butil-5,6-dihidroxi-4,7-bis(fenilmetil)-2h-1,3-diazepin-2-ona, su preparacion y su uso como inhibidor de proteasa de vih - Google Patents

Abstract

La presente invención se relaciona con compuestos de fórmula (I) o formas de sal farmacéuticamente aceptable o promedicamentos de los mismos, los cuales sonútiles como inhibidores de proteasa de VIH, y con composiciones farmacéuticas y equipos de diagnóstico que comprenden a los mismos, y con métodos para utilizar los mismos, y con métodos que utilizan los mismos para tratar infecciones virales o como un estándar o reactivo de ensayo.

Description

(4R,5S,6S,7R) -HEXAHIDRO-1- C5- (3-AMIN0INAZ0L)METIL3 -3- BUTIL-5,ß-DIHIDROXI-4,7-BIS TFENILMETIL] -2H-1 , 3-DIAZEPIN- 2-ONA, Sü PREPARACIÓN Y Sü USO COMO INHIBIDOR DE PROTEASA DE VIH CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se relaciona generalmente con urea 1- (3 -aminoindazol-5-il) -3 -butilcíclica compuestos los cuales son útiles como inhibidores de proteasa de VIH, con composiciones farmacéuticas y con equipos diagnósticos que comprenden los mismos, y con métodos para utilizar los mismos para tratar infecciones virales o como estándares o reactivos de ensayo.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Etiológicamente se han relacionado dos retrovirus distintos, el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) tipo-1 (VIH-1) o tipo-2 (VIH-2) , con las enfermedades inmunosupresoras, el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) . Los individuos seropositivos al VIH generalmente son asintomáticos pero típicamente desarrollan un complejo relacionado con SIDA (ARC) seguido por SIDA. Los individuos afectados muestran inmunosupresión grave lo REF.: 29939 que los predispone a debilitamiento y finalmente a infecciones oportunistas mortales. La enfermedad SIDA es el resultado final de un virus VIH-1 o VIH-2 posterior a su complejo ciclo de vida propio. El ciclo de vida del virión comienza cuando el virión se une a si mismo a las células inmunes linfocitos T4 humanos huésped a través de la unión de una glicoproteína en la superficie de la cubierta protectora del virión con la proteína CD4 sobre la célula linfocítica. Una vez unido, el virión elimina su cubierta de glicoproteína, penetra en la membrana de la célula huésped y elimina el recubrimiento de su ARN. La enzima del virión, una transcriptasa inversa, dirige el proceso de transcribir el ARN en ADN de una sola cadena. Se degrada el ARN viral y se genera una segunda cadena de ADN. El nuevo ADN ahora de doble cadena se integra a los genes de las células humanas y aquellos genes se utilizan para reproducción celular. En este punto, la célula humana lleva a cabo su proceso de reproducción utilizando sus propias ARN polimerasas para transcribir el ADN integrado en ARN viral. El ARN viral se traduce en la poliproteína de fusión gag-pol precursora. La poliproteína después se separa por la enzima proteasa de VIH para proporcionar las proteínas virales maduras. Por lo tanto, la proteasa es VIH es la responsable de regular la cascada de eventos de ruptura que llevan a la maduración de la partícula de virus en un virus que es capaz de infectividad completa. La respuesta típica del sistema inmune humano, ' destruir al virión invasor, es costosa debido a que una gran porción de ciclo de vida del virión se desarrolla en un estado latente dentro de la célula inmune. Además, la transcriptasa inversa viral, la enzima utilizada para elaborar la nueva partícula de virión, no es muy específica y provoca errores de transcripción que resultan en glicoproteínas que cambian continuamente sobre la superficie de la cubierta protectora viral . Esta carencia de especificidad disminuye la efectividad del sistema inmune debido a que los anticuerpos producidos específicamente contra una glicoproteína pueden ser inútiles contra otra, y por lo tanto reducen el número e anticuerpos disponibles para luchar contra el virus. El virus continúa reproduciéndose mientras la respuesta del sistema inmune continúa delilitándose . Finalmente, el VIH mantiene en gran medida un ámbito libre sobre el sistema inmune del cuerpo, lo que permite que se establezcan infecciones oportunistas, y sin la administración de agentes antivirales, inmunomoduladores o ambos, se puede producir la muerte.

Existen por lo menos tres puntos críticos en el ciclo de vida del virus los cuales se han identificado como posibles objetivos para los medicamentos antivirales: (1) la unión inicial del virión al linfocito T4 o sitio del macrófago, (2) la transcripción del ARN viral a ADN viral (transcriptasa inversa, RT) y (3) el ensamblaje de la nueva partícula de virus durante la reproducción (por ejemplo la proteasa de ácido aspártico VIH o proteasa VIH) . Los genomas de retrovirus codifican para una proteasa que es la responsable para el procesamiento proteolítico de uno o más precursores de poliproteína tales como los productos de gen pol y gag. Véase Wellink, Arch . Virol . 9.8 1 (1988) . Las proteasas retrovirales procesan de manera más común el precursor gag dentro de las proteínas del núcleo, y también procesan el precursor pol dentro de la transcriptasa inversa y la proteasa retroviral. El procesamiento correcto de las poliproteínas precursoras por la proteasa retroviral es necesaria para el ensamblado de los viriones infecciosos. Se ha demostrado que la mutagénesis ín vi tro que produce virus defectuoso en proteasa lleva a la producción de formas de núcleo inmaduras las cuales carecen de infectividad. Véase Crawford et al., J. Virol . 53 899 (1985); Katoh et al., Virology 145 280 (1985) . Por lo tanto, la inhibición de la proteasa retroviral proporciona un objetivo atractivo para la terapia antiviral. Véase Mitsuya , Nature 325 775 (1987) . La capacidad para inhibir a la proteasa viral proporciona un método para bloquear la replicación viral y por lo tanto un tratamiento para enfermedades virales, tales como SIDA, que pueden tener efectos colaterales menores, ser más eficaces y ser menos susceptibles a resistencia a medicamentos cuando se comparan con tratamientos actuales. Como resultado, actualmente se venden en el mercado tres inhibidores de proteasa para VIH, saquinavir de Roche, ritonavir de Abbott e indinavir de Merck y numerosos inhibidores de proteasa potenciales están en ensayos clínicos, por- ejemplo VX-478 de vértex, nelfinavir de Agouron, KNI-272 de Japan energy y CGP-61755 de Ciba Geigy. Como se evidencia por los inhibidores de proteasa actualmente vendidos y sus ensayos clínicos se han estudiado una amplia variedad de compuestos como inhibidores potenciales de proteasa de VIH. Han recibido atención significativa ureas cíclicas de un núcleo. Por ejemplo, en la solicitud PCT número 094/19329, Lam et al., describen genéticamente ureas cíclicas de la fórmula: y métodos para preparar estas ureas. Aunque los presentes compuestos se encuentran dentro de la descripción de Lam et al., no se describen específicamente la misma. Las ureas cíclicas adicionales se describen en Lam et al, J. Med. Chem . 1996, 39, 3514-3525. Aunque en esta publicación se describen diversas ureas cíclicas, no se describen compuestos que contengan undazolmetilo . Incluso con el éxito actual de los inhibidores de proteasa, se ha encontrado que los pacientes con VIH se vuelven resistentes a un inhibidor de proteasa único. Por lo tanto, es deseable desarrollar inhibidores de proteasa adicionales para combatir adicionalmente una infección por VIH.

DESCRIPCIÓN BREVE DE LA INVENCIÓN En consecuencia, un objetivo de la presente invención es proporcionar inhibidores novedosos de proteasa. Otro objetivo de la presente invención es proporcionar composiciones farmacéuticas con actividad inhibidora de proteasa que comprenden un portador f rmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos uno de los compuestos de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Otro objetivo de la presente invención es proporcionar un método novedoso para tratar una infección por VIH el cual comprende administrar a un huésped en necesidad de tal tratamiento una cantidad terapéuticamente efectiva de por lo menos uno de los compuestos de la presente invención o una sal o forma de promedicamento farmacéuticamente aceptable del mismo. Otro objetivo de la presente invención es proporcionar un método novedoso para tratar la infección por VIH el cual comprende administrar a un huésped en necesidad del mismo una combinación terapéuticamente efectiva de (a) uno de los compuestos de la presente invención, y (b) uno o más compuestos que se seleccionan del grupo que consiste de inhibidores de transcriptasa inversa de VIH e inhibidores de proteasa de VIH. Otro objetivo de la presente invención es proporcionar un método para inhibir el VIH presente en una muestra de fluido corporal, el cual comprende tratar la muestra de fluido corporal con una cantidad efectiva de un compuesto de la presente invención. Otro objetivo de la presente invención es proporcionar un equipo o recipiente que contiene por lo menos uno de los compuestos de la presente invención en una cantidad efectiva para uso como un estándar o reactivo en una prueba o ensayo para determinar la capacidad de una sustancia farmacéutica potencial para inhibir la proteasa de VIH, el crecimiento de VIH, o ambas cosas. Estos y otros objetivos, se volverán evidentes durante la siguiente descripción detallada, que han obtenido en base al descubrimiento de los inventores de que los compuestos de fórmula I: o sales o formas de promedicamento farmacéuticamente aceptables del mismo son inhibidores efectivos de proteasa.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LAS MODALIDADES PREFERIDAS Por lo tanto, en una primera modalidad, la presente invención proporciona un compuesto novedoso de fórmula I : o una sal farmacéuticamente aceptable o forma de prome-dicamento del mismo. En una segunda modalidad, la presente invención proporciona una composición farmacéutica novedosa que comprende un portador farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula I o una sal o forma de promedicamento farmacéuticamente aceptable del mismo. En una tercera modalidad, la presente invención proporciona un método novedoso para tratar una infección por VIH el cual comprende administrar a un huésped en necesidad de tal tratamiento una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable o forma de promedicamento del mismo. En una cuarta modalidad, la presente invención proporciona un método novedoso para tratar una infección por VIH el cual comprende, en combinación, administrar a un huésped en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente efectiva de: (a) un compuesto de fórmula I; y, (b) por lo menos un compuesto que se selecciona del grupo que consiste de inhibidores de transcriptasa inversa de VIH e inhibidores de proteasa de VIH. En otra modalidad preferida, el inhibidor de transcriptasa inversa es un inhibidor de transcriptasa inversa de nucleósido. En otra modalidad preferida, el inhibidor de transcriptasa inversa de nucleósido se selecciona de AZT, 3TC, ddl, ddC y d4T y el inhibidor de proteasa se selecciona de saquinavir, ritonavir, indinavir, VX-478, nelfinavir, KNI-272, CGP-61755 y U-103017. En una modalidad preferida adicional, el inhibidor de transcriptasa inversa de nucleósido se selecciona de AZT y 3TC y el inhibidor de proteasa se selecciona de saquinavir, ritonavir e indinavir. En una modalidad preferida adicional, el inhibidor de transcriptasa inversa de nucleósido es AZT.

En otra modalidad preferida adicional, el inhibidor de proteasa es indinavir. En una quinta modalidad, la presente invención proporciona un equipo farmacéutico útil para tratamiento de infección por VIH, el cual comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de: (a) un compuesto de fórmula I; y (b) por lo menos un compuesto que se selecciona del grupo que consiste de inhibidores de transcriptasa inversa de VIH e inhibidores de proteasa de VIH, en uno o más recipientes estériles. En una sexta modalidad, la presente invención proporciona un método novedoso para inhibir VIH presente en una muestra de fluido corporal, el cual comprende tratar la muestra de fluido corporal con una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I . En una séptima modalidad, la presente invención proporciona un equipo novedoso o recipiente que comprende un compuesto de la fórmula I o II en una cantidad efectiva para uso como un estándar o reactivo en una prueba o ensayo para determinar la capacidad de una sustancia farmacéutica potencial para inhibir la proteasa de VIH, el crecimiento de VIH o ambos .

DEFINICIONES Como se utiliza en la presente, los siguientes términos y expresiones tienen los significados indicados. Se apreciará que los compuestos de la presente invención contienen un átomo de carbono sustituido asimétricamente, y se pueden aislar en formas ópticamente activa o racémica. Es bien conocido en la técnica la manera en como preparar formas ópticamente activas, por ejemplo por separación de formas racémicas o por síntesis, o bien comenzando con materiales iniciales ópticamente activos. Todas las formas quirales, diastereoméricas, racémicas y todas las formas isoméricas geométricas de una estructura están entendidas, a menos que se indique específicamente una estereoquímica o forma isomérica específica. Como se utiliza en la presente, "inhibidor de transcriptasa inversa por VIH" se pretende que se refiera a inhibidores tanto de nucleósido como no nucleósidos de transcriptasa inversa de VIH (RT) . Los ejemplos de inhibidores de RT de nucleósído incluyen, pero no se limitan a, AZT, ddC, ddl, d4T y 3TC. Los ejemplos de inhibidores de RT no nucleósido, incluyen, pero no se limitan a viviradina (Pharmacia and Upjohn U90152S) , derivados de TI30, BI-RG-587, nevirapina, L-697,661, LY 73497 y Ro 18,893 (Roche;.

Como se utiliza en la presente, se pretende que "inhibidor de proteasa por VIH" se refiera a compuestos los cuales inhiben la proteasa de VIH. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a saquinavir (Roche, Ro31-8959) , ritonavir (Abbott, ABT-538) , indinavir (Merck, MK-639) , VX-478 (Vertex/Glaxo Wellcome) , nelfinavir (Agouron, AG-1343), KNI-72 (Japan Energy), CGP-61755 (Ciba-Geigy), y U-103017 (Pharmacia and Upjohn) . Los ejemplos adicionales incluyen ios inhibidores de proteasa cíclica descritos en WO93/07128, WO 94/19329, WO 94/22840 y Solicitud PCT Número US96/03426. Como se utiliza en la presente, "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos descritos en donde el compuesto original se modifica al producir sales acidas o básicas de los mismos.

Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a sales de ácidos minerales u orgánicos de residuos básicos tales como aminas; sales alcalinas u orgánicas de residuos ácidos tales como ácidos carboxílicos; y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales no tóxicas convencionales o las sales de amonio cuaternarias del compuesto original formado, por ejemplo, a partir de ácidos inorgánicos u orgánicos no tóxicos. Por ejemplo, tales sales no tóxicas convencionales incluyen aquellas derivadas de ácidos inorgánicos tales como clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, sulfámico, fosfórico, nítrico y similares; y las sales preparadas de ácidos orgánicos tales como acético, propiónico, succínico, glicólico, esteárico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, pamoico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glutámico, benzoico, salicílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzoico, fumárico, toluensulfónico, metansulfónico, etanodisulfónico, oxálico, isetiónico y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención se pueden sintetizar del compuesto original el cual contiene una porción básica o acida por métodos químicos convencionales. Generalmente tales sales se pueden preparar al hacer reaccionar formas de ácido o base libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido apropiado en agua o en un solvente orgánico, o en una mezcla de los dos; generalmente un medio no acuoso como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo como preferidos. Las listas de sales adecuadas se encuentran en Remington ' s Pharmaceu tical Sciences , 17th ed., Marek Pubiishing Company, Easton, PA, 1985, p. 1418, la descripción de la cual se incorpora en la presente como referencia. La frase "aceptable farmacéuticamente" se utiliza en la presente para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación las cuales están dentro del alcance del juicio médico sano, adecuadas para uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad excesiva, irritación, respuestas alergicasu otros problemas o complicaciones conmensurables con la relación beneficio-riesgo razonable. Se pretende que el término "promedicamento" incluya cualquier portador unido covalentemerite el cual libere al medicamento original activo de acuerdo con la fórmula I u otras fórmulas o compuestos de la presente invención in vivo cuando tal promedicamento se administra a un sujeto mamífero. Los promedicamentos de un compuesto de la presente invención, por ejemplo fórmula (I) se preparan al modificar grupos funcionales presentes en el compuesto de manera que la modificación se separa, ya sea por manipulación habitual o in vivo, al compuesto original. Los promedicamentos incluyen compuestos de la presente invención en donde el grupo hidroxi o amino se une a cualquier grupo que, cuando el promedicamento se administra a un sujeto mamífero, se separa para formar un hidroxilo libre o amino libre, respectivamente. Los ejemplos de promedicamentos incluyen, pero no se limitan a derivados de acetato, formiato o benzoato de alcohol y grupos funcionales amina en los compuestos de fórmula I; esteres de fosfato, esteres de dimetilglicina, esteres de aminoalquilbencilo, esteres de aminoalquilo y esteres de carboxialquilo de grupos funcionales alcohol en los compuestos de fórmula I; y similares. Los ejemplos adicionales incluyen compuestos en donde dos grupos hidroxi de fórmula I se unen para formar un epóxido; -OCH2SCH20-; -0C(=0)0-; -OCH20-; -OC(=S)0-; -OC (=0) C (=0) 0; -OC(CH3)20-; -0C( (CH2)3NH2) (CH3)0-; -OC (0CH3) (CH2CH2CH3) O- ; o -OS (=0)0-. Los términos "compuesto estable" y ""estructura estable" se quiere significar que indican un compuesto que es lo suficientemente resistente para sobrevivir al aislamiento hasta un grado útil de pureza a partir de una mezcla de reacción y su formulación en un agente terapéutico eficaz. Únicamente se contemplan compuestos estables por la presente invención. El término "sustituidos" se pretende que indique que uno o más átomos de hidrógeno indicados en la expresión que utilicen términos "sustituidos" estén reemplazados con una selección del grupo o grupos indicados, con la condición de que no se exceda la valencia normal del átomo indicado, y que la sustitución resulte en un compuesto estable. Cuando el sustituyente es el grupo ceto "es decir, =0)", entonces se sustituyen 2 hidrógenos en el átomo. Se pretende que el término "(cantidad terapéuticamente efectiva" incluya una cantidad de un compuesto de la presente invención o una cantidad de la combinación de compuestos reivindicados efectivos para inhibir la infección por VIH o tratar los síntomas de infección por VIH en un huésped. La combinación de compuestos preferiblemente es una combinación sinergística. La sinergia, como se describe por ejemplo por Chou y Talalay, Adv. Enzyme Regul. 22:27-55 (1984), se presenta cuando el efecto (en este caso, la inhibición de la replicación de VIH) de los compuestos cuando se administran en combinación es mayor que el efecto aditivo de los compuestos cuando se administran solos como un solo agente. En general, el efecto sinergístico se demuestra más claramente a concentraciones subóptimas de los compuestos. La sinergia se puede presentar en términos de citotoxicidad inferior, efecto antiviral aumentado o algún otro efecto benéfico de la combinación en comparación con los componentes individuales. Otras características de la invención se volverán evidentes en el curso de las siguientes descripciones de las modalidades ejemplares las cuales se proporcionan para ilustración de la invención.

Ejemplos Las abreviaturas utilizadas en los ejemplos son como se definen a continuación "°C" para grados Celsius, "d" para doblete, "dd" para doblete de doblete, "eq" para equivalente o equivalentes, "g" para gramo o gramos "mg" para miligramo o miligramos, "ml" para mililitro o mililitros, "H" para hidrógeno o hidrógenos, "h" para hora u horas, "m" para multiplete, "M" para molar, "min" para minuto o minutos, "MHz" para megahertz, "EM" para espectroscopia de masas, "rmn" o "RMN" para espectroscopia de resonancia magnética nuclear, "t" para triplete, y "CCD" cromatografía en capa delgada.

EJEMPLO 1 Preparación de (4R, 5S, 6S, 7R) -h.exahidro-1- [5- (3- aminoindazol) metil] -3 -butil-5, 6-dihidroxi-4, 7- bis [fenilmetil] -2H-1, 3 -diazepin-2 -ona (I) Se puede preparar el compuesto A por métodos conocidos. Por ejemplo, en el esquema 1 de Rossano et al { Tetr. Lett, 1995, 36(28), 4967, 4968), (se muestra la preparación del compuesto A) , el contenido de la cual se incorpora en la presente como referencia. Un método adicional de preparación de compuesto A se muestra en el ejemplo 6 de la patente norteamericana número 5,530,124, el contenido de la cual se incorpora en la presente como referencia.

PARTE A: A una suspensión de compuesto 1 (10.0 g; 27.3 mmoles) en 1, 2-dicloroetano (100 ml) se agrega metiltriflato (3.4 ml , 30 mmoles) . Después de someter a reflujo durante la noche, la reacción se lava con NaHC03 saturado, NaCl saturado, se. seca (Na2S04) y se evapora lo que proporciona 12.5 g de un aceite amarillo. La cromatografía en columna (Si02 instantánea; EtOAc/hexano al 25%) proporciona 7.86 g del compuesto 2 como un aceite amarillo claro el cual cristaliza al dejar reposar (rendimiento 75%), p.f. = 97-100°C. MH* = 381.

PARTE B: A una solución de 1 (10.0 g, 26.3 mmoles) en DMF anhidro (30 ml) se agrega hidruro de sodio (1.58 g, 65.8 mmoles) . La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 45 minutos seguido por adición a gotas a una solución de 1-yodobutano (9.68 g, 52.6 mmoles) en DMF anhidra (10 ml ) . Después de la adición, se continúa la agitación a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se enfría a 0°C y se agrega metanol (5 ml ) para eliminar el exceso de hidruro de sodio. La mezcla se divide entre acetato de etilo (200 ml) y agua (150 ml) . La fase orgánica se separa y se lava con agua (4 x 100 ml) , salmuera (100 ml) y se seca sobre sulfato de sodio. La purificación cromatográfica instantánea (EtOAc 25%/Hex.) proporciona n-butilisourea 2 (10.5 g, rendimiento 92%) : ?M(NH,-CI/DDIP) (M+H*) 437.2 (100%); RMN XU (300 MHz, CDCl3, 25°C) : d 7.23 (m, 10H) , 4.19 ( , 3H) , 3.64 (m, 1H) , 3.44 (s, 3H) , 3.36 (m, 1H) , 3.02 (m, 2H) , 2.76 (m, 2H) , 2.04 (m, 1H) , 1.52 (s, 3H) , 1.49 (s, 3H) , 1.21 (m, 4H) , 0.82 (t, J = 7.0 Hz, 3H) . PARTE C: (4R, 5S, 6S, 7R) -hexahidro-1- [3 -ciano-4 - fluorofenil) metil] -5 , 6-0-isopropiliden-4 , 7-bis (4- fenilmetil) -3 -fenilmetil-2H-l , 3-diazepin-2-ona (3) .

A una solución de 2 (5.0 g, 11.5 mmoles) en acetonitrilo (40 ml) se agrega bromuro de 4-fluoro-3-cianobencilo (3.68 g, 17.25 mmoles) . La mezcla de reacción se somete a reflujo durante la noche. Después de que el solvente se remueve bajo presión reducida, el residuo se purifica utilizando cromatografía instantánea (35% de ?tOAc/Hex.) para proporcionar la urea cíclica 3 como un sólido blanco (4.5 g, 71% de rendimiento): E (NH,-CI/DDIP) (M+H*) 556.3 (100%); RMN :H (300 MHz, CDC13, 25°C): d 7.41 (m, 1H) , 7.28 (m, 7H) , 7.13 (d, J = 9.2Hz, 2H) , 7.05 (t, J = 8.8 Hz, 1H) , 6.95 (d, J = 9.2 Hz , 2H) , 4.50 (d, J = 14.0 Hz, 1H) , 4.07 (m, 2H) , 3.70 (m, 3H) , 3.44 (t, J = 7.7 Hz, 1H) , 2^90 (m, 4H) , 2.12 (m, 1H) , 1.50 (s, 6H) , 1.26 (m, 4H) , 0.83 (t, J = 7.0 Hz, 3H) .

PARTE D: (4R, 5S, 6S, 7R) -hexahidro-1- [5- (3 - aminoindazol) metil] -3 -butil-5 , 6-dihidroxi-4 , 7- bis [fenilmetil] -2H-1, 3-diazepin-2-ona (I) A una solución de 3 (4.5 g, 8.11 mmoles) en n-butanol (20 ml) se agrega hidrato de hidrazina (0.81 g, 16.2 mmoles) . La mezcla se somete a reflujo durante 6 h. Se remueven bajo presión reducida el solvente y el exceso de hidrazina. El residuo se disuelve en metanol anhidro (20 ml) seguido por la adición de HCl 4 M en dioxano (2 ml) . La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 2 h. Se remueve el metanol y el residuo se divide entre acetato de etilo (80 ml) y bicarbonato de sodio (saturado) (50 ml ) . La fase orgánica se separa, se lava con agua (2x 50 ml) y se seca sobre sulfato de sodio (anhidro) . La purificación cromatográfica instantánea proporciona I (3.0 g, rendimiento 72%) como un sólido blanco: p.f. 129-131°C; EM (NH3-CI/DDIP) (M+H*) 528.3 (100%) calculado HRMS para CflH37NE0-.+l 528.2975, encontrado 528.2958; RMN XH (300 MHz, CD30D, 25°C) : d 7.19 (m, 12H) , 6.98 (d, J = 1.5 Hz, 2H) , 4.74 (d, J = 13.9 Hz , 1H) , 3.85 (dd, J = 10.25, 4.76 Hz, 1H) , 3.65 (m, 1H) , 3.56 (m, 4H) , 3.15 (m, 2H) , 2.96 (m, 3H) , 2.07 (m, 2H) , 1.37 (m, 2H) , 1.22 (m, 2H) , 0.84 (t, J = 7.0, 3H) .

Utilidad Los compuestos de fórmula I poseen actividad inhibidora de proteasa de VIH y por lo tanto son útiles como agentes antivirales para el tratamiento de infección por VIH como agentes antivirales para el tratamiento de infección por VIH y enfermedades asociadas. Los compuestos de fórmula I poseen actividad inhibidora de proteasa de VIH y son efectivos como inhibidores de crecimiento de VIH. La capacidad de los compuestos de la presente invención para inhibir el crecimiento viral o la infectividad se demuestra por ensayos estándar de crecimiento viral o infectividad, por ejemplo, utilizando el ensayo descrito a continuación. Los compuestos de fórmula I de la presente invención también son útiles para la inhibición de VIH en una muestra ex vivo que contiene VIH o que espera que se exponga a VIH. Por lo tanto, los compuestos de la présente invención se pueden utilizar para inhibir VIH presente en una muestra de fluido corporal (por ejemplo, una muestra de suero o semen) , la cual contiene o se sospecha que contiene o está expuesta a VIH. Los compuestos proporcionados por esta invención también son útiles como compuestos estándar o de referencia para uso en pruebas o ensayos para determinar la capacidad de un agente para inhibir la replicación de una clona viral y/o la proteasa de VIH, por ejemplo, en un programa de investigación farmacéutica. Por lo tanto, los compuestos de la presente invención se pueden utilizar como un control o compuesto de referencia en tales ensayos y como un estándar de control de calidad. Los compuestos de la presente invención se pueden proporcionar en un equipo comercial o recipiente para uso como tal estándar o compuesto de referencia. Puesto que los compuestos de la presente invención muestran especificidad por proteasa de VIH, los compuestos de la presente invención también pueden ser útiles en reactivos diagnósticos en ensayos diagnósticos para la detección de proteasa VIH. Por lo tanto, la inhibición de la actividad de proteasa en un ensayo (tales como los ensayos descritos en la presente) por un compuesto de la presente invención serían indicativos de la presencia de proteasa de VIH y de virus de VIH. Como se utiliza en la presente "µg" indica microgramos, "mg" indica miligramos, "g" indica gramos, "µl" indica microlitros, "ml" indica mililitros, "1" indica litros, "nM" indica nanomolar, "µM" indica micromolar, "mM" indica milimolar, "M" indica molar, y "nm" indica nanómetros. "Sigma" indica Sigma-Aldrich Corp. de St . Louis, MO.

Ensayo de ARN de VIH Plásmidos de ADN y transcritos de ARN in vi tro Se prepara el plásmido pDAB 72 que contiene ambas secuencias gag y pol de BH10 (pb 113-1816) clonados en PTZ 19R, de acuerdo con Erickson-Viitanen et al. AIDS Research and Human Retroviruses 1989, 5, 577. El plásmido se lineariza con Bam Hl antes de la generación de transcrito de AN in vi tro utilizando el equipo sistema II de Riboprobe Gemini (Promega) con ARN polimerasa T7. El ARN sintetizado se purifica por tratamiento con ARNasa libre de ADNasa (Promega), extracción con fenol -cloroformo y precipitación con etanol. Los transcriptos de ARN se disuelven en agua y se almacenan a -70°C. Se determina la concentración de ARN a partir de A260.

Sondas : Se purifican sondas de captura biotinadas por CLAP después de la síntesis en un sintetizador de ADN Applid Biosistems (Foster City, CA) por adición de biotina hacia el extremo 5' terminal del oligonucleótido, utilizando el reactivo de biotina-fosforoamidita de Cocuzza, Tet . Lett . 1989 30, 6287. La sonda 'de captura biotinada gag (5-biotin-CTAGCTCCCTGCTTGCCCATACTA 3') es complementaria a los nucleótidos 889-912 de HXB2 y la sonda de captura biotinada pol (5 ' -biotin-CCCTATCATTTTTGGTTTCCAT 3') es complementaria a los nucleótidos 2374-2395 de HXB2. Los oligonucleótidos conjugados de fosfatasa alcalina se utilizan como sondas indicadoras y se preparan por Syngene (San Diego, CA. ) (5'- CT6TCTTACTTT6ATAAAACCTC 3') . La sonda indicadora pol es complementaria a los nucleótidos 2403-2425 de HXB2. La sonda indicadora gag (5' CCCAGTATTTGTCTACAGCCTTCT 3 ' ) es complementaria a los nucleótidos 950-973 de HXB2. Todas las posiciones de nucleótidos son aquellas del banco de datos de secuencia genéticos GenBank accesado a través del paquete de software de análisis de secuencia de Genetics Computer Group (Devereau Nucleic Acids Research 1984, 12 , 387) . Las sondas indicadoras se preparan como concentrados de 0.5 µM en 2 x SSC (NaCl 0.3 M, citrato de sodio 0.03 M) , Tris 0.05 M, pH 8.8, 1 mg/ml de BSA. Las sondas de captura biotinadas se preparan como concentrados de 100 µM en agua.

Placas recubiertas con estreptavidina Se obtienen placas recubiertas con estreptavidina de Du Pont Biotchnology Systems (Boston, MA) .

Concentrados de células y virus Se mantienen células MT-2 y MT-4 en RPMI 1640 suplementado con suero bovino fetal 5% (FCS) para célula MT-2 o FCS 10% para células MT-4, L-glutamina-2 mM, y 50 µg/ml de gentamicina, todos de Gibco. Se propaga RF de VIH-1 en células MT-4 en el mismo medio. Los concentrados de virus se preparan aproximadamente 10 días después de la infección aguda de células MT-4 y se almacenan como alícuotas a -70°C. Los títulos infecciosos de concentrados de VIH-1 (RF) son de 1-3 x 107 UFP (unidades formadoras de placa/ml) , medidos por ensayo en placa en células MT-2 (véase abajo) . Cada alícuota de concentrado de virus utilizado para infección se calentó únicamente una vez. Para evaluación de eficacia antiviral, las células que van a ser infectadas se subcultivan un día antes de la infección. En el día de la infección, las células se resuspenden a 5 x 105 células/ml en RMPI 1640, FCS 5% para infecciones en volumen o a 2 x 106 ml en medio de Eagle modificado por Dulbecco con FCS al 5% por infección en placas de microtitulación. Se agregó virus y se continúa el cultivo durante 3 días a 37°C.

Ensayo de ARN de VIH: Los lisados de células o el ARN purificado en GED 3 M o 5 M se mezcló con GED 5 M y una sonda de captura hasta una concentración final de isotiocianato de guanidinio de 3 M y una concentración final de oligonucleótido de biotina de 30 nM. La hibridización se llevó a cabo en placas de cultivo de tejido de 96 pozos con fondo en forma de U, selladas (Nunc o Costar) durante 16-20 horas a 37°C. Las reacciones de hibridación de ARN se diluyeron 3 veces con agua desionizada hasta una concentración final de isotiocianato de guanidino de 1 M y se transfirieron alícuotas (150 µl) a pozos de placas de microtitulación recubiertos con estreptavidina. Se permitió que procediera durante 2 horas a temperatura ambiente la unión de sonda de captura y el híbrido de sonda de captura-ARN a la estreptavidma inmovilizada, después de lo cual se lavaron las placas seis veces con amortiguador de lavado de placa DuPont ELISA (solución salina amortiguada con fosfato (PBS), Tween 20 0.05%. Se llevó a cabo una segunda hibridación de sonda indicadora al complejo inmovilizado de sonda de captura y ARN objetivo hibridado, en un pozo recubierto con estreptavidina lavada por adición de 120 µl de una mezcla de hibridación que contiene 4 x SSC, tritón X100 0.66%, formamida desionizada 6 . 66^ , 1 mg/ml de BSA y sonda indicadora 5 nM. Después de la hibridación durante una hora a 37°C, la placa se lava nuevamente seis veces. Se detecta la actividad de fosfatasa alcalina inmovilizada por adición de 100 µl de fosfato de 4-metilumbeliferilo 0.2 mM (MUBP, JBL Scientific) en amortiguador d (dietanolamina 2.5 M, pH 8.9) (JBL Scientific), MgCl; 10 mM, acetato de zinc dihidratado 5 mM y ácido N-hidroxietiletilendiamina tetraacético 5 mM) . Las placas se incuban a 37°C. Se mide ia fluorescencia a 450 nM utilizando un fluorímetro de microplaca (Dynateck) de excitación a 365 nM.

Evaluación del compuesto basado en microplaca en células MT-2 infectadas con VIH-1: Los compuestos que van a ser evaluados se disuelven en DMSO y se diluyen en medio de cultivo a dos veces la concentración más elevada que se va a probar y una concentración máxima de DMSO de 2%. Posteriormente se realizan diluciones seriadas triples del compuesto en medio de cultivo directamente en placas de microtitulación con fondo en U (Nunc) . Después de dilución del compuesto, se agregan células MT-2 (50 µl) hasta una concentración final de 5 x 10S por ml (1 x 105 por pozo) . Las células se incuban con compuestos durante 30 minutos a 37°C en un incubador de C02. Para evaluación de la potencia antiviral, se agrega a los pozos de cultivo una dilución apropiada de concentrado de virus (50 µl) (RF) VIH-1, pozos de cultivo los cuales contienen células y diluciones de los compuestos de prueba. El volumen final en cada uno de los pozos es de 200 µl. Se dejaron sin infectar ocho pozos por placa con 50 µl de medio agregado en lugar de virus, mientras que ocho pozos se dejaron infectados en ausencia de compuesto antiviral alguno. Para la evaluación de la toxicidad del compuesto, se cultivaron placas en paralelo sin infección con virus. Después de 3 días de cultivo a 37°C en una cámara humidificada dentro de u incubador con C02, se removió todo excepto los 25 µl de medio/pozo de las placas infectadas con VIH. Se agregaron 37 µl de GED 5 M que contiene sonda de captura biotinada a las células sedimentadas y el medio restante en cada pozo hasta una concentración final de GED 3 M y sonda de captura 30 nM. La hibridación de la sonda de captura a ARN de VIH en el lisado celular se llevó a cabo en el mismo pozo de microplacas utilizado para cultivo de virus al sellar la placa con un sellador de placa (Costar) e incubar durante 16-20 h en un incubador a 37°C. Después se agrega a cada pozo agua destilada para diluir la reacción de hibridación tres veces y se transfieren 150 µl de esta mezcla diluida a una placa de microtitulación recubierta con estreptavidina. Se cuantifica el ARN de VIH como se describe antes. Una curva estándar, preparada al adicionar cantidades conocidas de pDAB 72 de transcripto de ARN in vi tro a pozos que contienen células no infectadas lisadas, si corre en cada placa de microtitulación con el fin de determinar la cantidad de ARN viral elaborado durante la infección. Con el fin de estandarizar el inoculo de virus utilizado en la evaluación de compuestos para actividad antiviral, se seleccionaron diluciones de virus las cuales resultaban en un valor CI90 (concentración de compuesto necesaria para reducir el nivel de ARN de VIH en 90%) para didesoxicitidina (ddC) de 0.2 µg/ml. Los valores de CI90 de otros compuestos antivirales, ambos más y menos potentes que ddC, fueron reproducibles utilizando varios concentrados de VIH-1 (RF) cuando este procedimiento se siguió. Esta concentración de virus corresponde a -3 x 10s UFP (medido por ensayo en placa en células MT-2) por pozo de ensayo y típicamente produce aproximadamente 75% del nivel máximo de ARN viral asequible a cualquier inoculo de virus. Para el ensayo de ARN de VIH, se determinaron valores de CI90 a partir del por ciento de reducción de la señal neta (señal de muestras de células infectadas menos la señal de muestras de células no infectadas) en el ensayo de ARN en relación a la señal neta de células infectadas no tratadas en la misma placa de cultivo (promedio de 8 pozos) . Se realizó un juicio del funcionamiento válido de la infección individual y de las pruebas de ensayo de ARN de acuerdo con tres criterios. Se requirió que la infección de virus resultará en una señal de ensayo de ARN igual a o mayor que la señal generada a partir de 2 ng de transcrito de AFNpDAB 72 in vi tro . Las CI90 para DDC, determinada en cada corrida de ensayo, debe estar entre 0.1 y 0.3 µg/ml. Finalmente, el nivel de meceta o estable de ARN viral producido por un inhibidor de proteasa efectivo debe ser menor de 10% del nivel alcanzado en una infección no inhibida. Se considera que un compuesto es activo si CI90 se encuentra que es menor de 1 µM. Para las pruebas de potencia antiviral, todas las manipulaciones en las placas de microtitulación, seguidos por la adición inicial de una solución de compuesto concentrada 2X a una sola hilera de pozos, se realizó utilizando un equipo ProPette Perkin Elmer/Cetus .

Dosificación y formulación Los compuestos antivirales de esta invención se pueden administrar como tratamiento para infecciones virales por cualquier medio que produzca contacto del agente activo con el sitio de acción del agente, es decir, la proteasa viral, en el cuerpo de un mamífero. Se puede administrar por cualquier medio convencional disponible para uso junto con sustancias farmacéuticas, ya sea agentes terapéuticos individuales o en una combinación de agentes terapéuticos. Se pueden administrar solas, pero preferiblemente se administran con un portador farmacéutico que se selecciona en base de la vía elegida de administración y la práctica farmacéutica estándar. Por supuesto, la dosificación administrada variará en base en factores conocidos tales como las características farmacodinámicas del agente particular y su modo y vía de administración; la edad, salud y peso del receptor; la naturaleza y extensión de los síntomas; la clase de tratamiento concurrente; la frecuencia de tratamiento; y el efecto deseado. Se puede esperar que una dosificación diaria de ingrediente activo sea de aproximadamente 0.001 a aproximadamente 1000 miligramos por kilogramo de peso corporal, con una dosis preferida encontrándose entre aproximadamente 0.1 y aproximadamente 30 mg/kg. Las formas de dosificación de composiciones adecuadas para administración contienen desde aproximadamente 1 mg hasta aproximadamente 100 mg de ingrediente activo por unidad. En estas composiciones farmacéuticas, el ingrediente activo habitualmente estará presente en una cantidad desde aproximadamente 0.5-95% en peso en base en el peso total de la composición. El ingrediente activo se puede administrar oralmente en forma de dosificación sólida, tales como cápsulas, tabletas y polvos, o en formas de dosificación líquida, tales como elíxires, jarabes y suspensiones. También se puede administrar parenteralmente, en forma de dosificación líquida estéril. Las cápsulas de gelatina contienen el ingrediente activo y portadores pulverizados tales como lactosa, almidón, derivados de celulosa, estearato de magnesio, ácido esteárico y similares. Se pueden utilizar diluyentes y similares para elaborar tabletas comprimidas. Tanto las tabletas como las cápsulas se pueden fabricar como productos de liberación sostenida para proporcionar liberación continua de medicamento durante un período de oras. Las tabletas comprimidas se pueden recubrir con azúcar o una película de recubrimiento para enmascarar cualquier sabor desagradable y para proteger la tableta de la atmósfera, o se pueden recubrir con una capa entérica para desintegración selectiva en el tracto gastrointestinal. Las formas de dosificación líquida para administración oral pueden contener colorantes y saborizantes para incrementar la aceptación del paciente. En general, el agua, un aceite adecuado, solución salina, dextrosa acuosa (glucosa) y soluciones de azúcar relacionadas y glicoles tales como propilenglicol o polietilenglicoles son portadores adecuados para soluciones parenterales. Las soluciones para administración parenteral preferiblemente contienen una sal soluble en agua del ingrediente activo, agentes .estabilizantes adecuados, y si es necesario, sustancias amortiguadoras. Los agentes estabilizantes adecuados son agentes antioxidantes tales como bisulfito de sodio, sulfito de sodio o ácido ascórbico, ya sea solo o combinado. También se utilizan ácido cítrico y sus sales, y EDTA sódico. Además, las soluciones parenterales pueden contener preservativos, tales como cloruro de benzalconio, metil- o propil -parabeno y clorobutanol. Los portadores farmacéuticos adecuados se describen en Remington ' s Pharmaceu t? ca.1 Sciences , supra , un texto de referencia estándar en este campo.

Las formas de dosificación farmacéuticas útiles para administración de los compuestos de esta invención se pueden ilustrar como sigue: Cápsulas Se pueden preparar una gran cantidad de unidades de cápsula al llenar cápsulas de gelatina dura estándar de dos piezas cada una con 100 mg de ingrediente activo pulverizado, 150 mg de lactosa, 50 mg de celulosa y 6 mg de estearato de magnesio.

Cápsulas de gelatina suave Se puede preparar una mezcla de ingrediente activo en un aceite digerible tal como aceite de frijol de soya, aceite de semilla de algodón o aceite de oliva y se puede inyectar por medio de una bomba de desplazamiento positivo dentro de gelatina para formar cápsulas de gelatina suave que contienen 100 mg del ingrediente activo. Las cápsulas después deben ser lavadas y secadas.

Tabletas Se puede preparar una gran cantidad de tabletas por procedimientos convencionales de manera que la unidad de dosificación sea de 100 mg de ingrediente activo, 0.2 mg de dióxido de silicio coloidal, 5 mg de estearato de magnesio, 275 mg de celulosa microcristalina, 11 mg de almidón y 98.8 mg de lactosa. Se pueden aplicar los recubrimientos apropiados para incrementar el sabor agradable o para recargar la absorción.

Suspensión Se puede preparar una suspensión acuosa para administración oral de manera que cada 5 ml contengan 25 mg de ingrediente activo finamente dividido, 200 mg de carboximetilcelulosa de sodio, 5 mg de benzoato de sodio, 1.0 g de solución de sorbitol, USP y 0.025mg de vainillina.

Solución inyectable Se puede preparar una composición parenteral adecuada para administración por inyección al agitar 1.5% en pesó de ingrediente activo y 10% en volumen de propilenglicol y agua. La solución se esteriliza por técnicas utilizadas comúnmente.

Combinación de los componentes (a) y (b) Cada componente de agente terapéutico de esta invención puede estar independientemente en cualquier forma de dosificación, tales como aquellas descritas antes, y también se puede administrar de diversas maneras, como se describe en lo anterior. En la siguiente descripción, se debe entender que el componente (bi representa uno o más agentes como se ha descrito previamente. Por lo tanto, si los componentes (a) y (b) no son tratados igual o independientemente, cada agente de componente (b) también puede ser tratado igual o independientemente. Los componentes (a) y (b) de la presente invención se pueden formular juntos, en una unidad de dosificación única (esto es, combinados juntos en una cápsula, tableta, polvo, líquido, etc.), como un producto de combinación. Cuando el componente (a) y (b) no se formulan juntos en una unidad de dosificación única, el componente (a) se puede administrar al mismo tiempo que el componente (b) o en cualquier orden; por ejemplo, el componente (a) de esta invención se puede administrar primero, seguido por administración del componente (b) o se puede administrar en orden inversa. Si el componente (b) contiene más de un agente, por ejemplo un inhibidor de RT y un inhibidor de proteasa, estos agentes se pueden administrar juntos o en cualquier orden. Cuando no se administran al mismo tiempo, preferiblemente la administración del componente (a) y (b) se produce con una diferencia de menos de una hora. Preferiblemente, la vía de administración del componente (a) y (b) es oral. Los términos agente oral, inhibidor oral, compuesto oral o similar, como se utilizan en la presente, indican compuestos los cuales pueden ser administrados oralmente.

Aunque se prefiere que el componente (a) y el componente (b) se administren ambos por la misma ruta (esto es, por ejemplo, ambos oralmente) o por forma de dosificación, si se desea, se pueden administrar cada uno por vías diferentes (esto es, por ejemplo, un componente del producto de combinación se puede administrar oralmente, y otro componente se puede administrar intravenosamente) o formas de dosificación.

Como se aprecia por una persona familiarizada con la técnica médica, la dosificación de la terapia de combinación de la invención puede variar en base en diversos factores tales como las características farmacodinámicas del agente particular y su modo y vía de administración, la edad, salud y peso del receptor, la naturaleza y extensión de los síntomas, la clase de tratamiento concurrente, la frecuencia de tratamiento y el vectorizado, como se describe antes. La dosificación adecuada de los componentes (a) y (b) de la presente invención se determinará fácilmente por una persona familiarizada en la práctica médica en base en la presente descripción. A modo de guía general, típicamente una dosificación diaria puede ser de aproximadamente 100 miligramos hasta aproximadamente 1.5 gramos de cada componente. Si el componente (b) representa más de un compuesto, entonces típicamente una dosificación diaria será de aproximadamente 100 miligramos hasta aproximadamente 1.5 gramos de cada agente de componente (b) . Por medio de una guía general, los compuestos del componente (a) y del componente (b) se administran en combinación, la cantidad de dosificación de cada componente se puede reducir en aproximadamente 70-80% en relación a la dosificación habitual del componente cuando se administra solo como un agente único para el tratamiento de infección por VIH. Los productos de combinación de esta invención se pueden formular de manera que, aunque los ingredientes activos se combinan en una unidad de dosificación única, se minimiza el contacto físico entre los ingredientes activos. Para minimizar el contacto, por ejemplo, cuando el producto se administra oralmente, un ingrediente activo puede estar recubierto entéricamente. Al recubrir entéricamente uno de los ingredientes activos, es posible no solo minimizar el contacto entre los ingredientes activos combinados, sino también es posible controlar la liberación de estos componentes en el tracto gastrointestinal de manera que uno de estos componentes no sea liberado en el estómago sino más bien sea liberado en los intestinos. Otra modalidad de esta invención en donde se desea la administración oral proporciona un producto de combinación en donde uno de los ingredientes activos es recubierto con un material de liberación sostenida el cual lleva a cabo una liberación sostenida a través del tracto gastrointestinal y también sirve para minimizar el contacto físico entre los ingredientes activos combinados. Además, el componente de liberación sostenida se puede recubrir entéricamente de manera adicional de manera que la liberación de este componente se produzca únicamente en el intestino. Otro enfoque adicional involucraría la formulación de un producto de combinación en el cual un componente es recubierto con un polímero de liberación sostenida y/o entérica, y el otro componente también está recubierto con un polímero tal como un grado de baja viscosidad de hidroxipropilmetilcelulosa u otros materiales adecuados conocidos en la técnica, con el fin de separar los componentes activos. El recubierto de polímero sirve para formar una barrera adicional para interacción con otros componentes. En cada formulación, en donde se evita el contacto entre componentes (a) y (b) vía un recubrimiento o algún otro material, también se puede evitar el contacto entre agentes individuales del componente (b) . Las formas de dosificación de los productos de combinación de la presente invención en donde un ingrediente activo se recubre entéricamente, puede estar en forma de tabletas tales como un componente recubierto entérico y el otro ingrediente activo se mezcla junto y después se comprime en una tableta de manera que el componente recubierto entérico sea comprimido en una capa de tableta y el otro ingrediente activo se comprima en una capa adicional. Opcionalmente, con el fin de separar más las dos capas, pueden estar presentes una o más capas placebo de manera que la placa placebo se encuentre entre las capas de ingredientes activos. Además, las formas de dosificación de la presente invención pueden estar en forma de cápsulas en donde un ingrediente activo es comprimido de una tableta o en forma de una pluralidad de microtabletas, partículas, granulos o materiales inocuos, los cuales después se recubren entéricamente. Estas microtabletas recubiertas entéricas, partículas, granulos o materiales inocuos después se colocan en una cápsula o se comprimen en una cápsula junto con una granulación del otro ingrediente activo. Estas así como otras maneras de minimizar el contacto entre los componentes de productos de combinación de la presente invención, cuando se administran en una forma de dosificación única o cuando se administran en formas separadas pero al mismo tiempo o concurrentemente de ia misma manera, serán evidentes fácilmente para aquellos familiarizados en la técnica, en base en la presente descripción. Los equipos farmacéuticos útiles para el tratamiento de infección por VIH los cuales comprenden una cantidad terapéuticamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende un compuesto del componente (a) en uno o más compuestos del componente (b) en uno o más recipientes estériles, también está dentro del ámbito de la presente invención. La esterilización del recipiente se puede llevar a cabo utilizando metodología de esterilización convencional bien conocida por aquellos familiarizados en la técnica. El componente (a) y el componente (b) pueden estar en el mismo recipiente estéril o en recipientes estériles separados. Los recipientes estériles de los materiales pueden comprender recipientes separados, o uno o más recipientes con partes múltiples, según se desee. El componente (a) y el componente (b) pueden estar separados, o físicamente combinados en una forma o unidad de dosificación única como se describe antes. Tales equipos pueden incluir, además, si se desea, uno o más componentes de equipo farmacéutico convencional, tales como por ejemplo, uno o más portadores farmacéuticamente aceptables, frascos adicionales para mezclar los componentes, etc., como serán fácilmente evidente para aquellos familiarizados con la técnica. También se pueden incluir en el equipo instrucciones ya sea como insertos o como etiquetas, indicando cantidades de los " componentes que se van a administrar, las líneas de guía para administración y/o las líneas guía para mezclado de los componentes . Evidentemente, son posibles numerosas modificaciones o variaciones de la presente invención a la luz de las enseñanzas anteriores. Por lo tanto, se debe entender que dentro dei alcance de las reivindicaciones anexas, la invención se puede llevar a la práctica de otras maneras además de la descrita específicamente en este documento. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el convencional para la manufactura de los objetos o productos a que la misma se refiere .

Claims (15)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede , se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicacines:

1 . Un compuesto de fórmula I : 0 una sal farmacéuticamente aceptable o forma de promedicamento, en donde un promedicamento de fórmula 1 es un compuesto en el que dos grupos hidroxi se unen para formar un grupo epóxido; -OCH2SCHO- ; -OC(=0)0-; -OCH20- ; -OC(=S)0-; -OC(=O)C(=0)0; -0C(CH,).0-; -OC ( (CH,) 3NH?) (CH3) O- ; -OC(OCH3) (CH2CH2CH3)0-; O -OS(=0)0-.

2. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto es de fórmula I .

3. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende un portador farmacéuticamente aceptable y • una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmaceú- ticamente aceptable o forma de promedicamento del mismo.

4. La composición de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el compuesto es de fórmula I .

5. El uso de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable o forma de promedicaeto del mismo, para la fabricación de un medicamento para tratar infección por VIH: en donde un promedicamento de fórmula I es un compuesto en el que se unen dos grupos hidroxi para formar un grupo epóxido; -OCH2SCH20- ; -OC(=0)0-; -0CH20- ; -OC(=S)0-; -OC(=0) C(=0)0; -OC(CH3)20-; -OC ( (CH2) 3NH2) ( CH3) O- ; -OC(OCH3) (CH2CH2CH3)0-; o -OS (=0)0-.

6. El uso de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque el compuesto es de fórmula I .

7. El uso de una combinación de (a) y (b) para la fabricación de un medicamento para tratar infección por VIH, en donde: (a) es un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable o forma de promedicamento del mismo: en donde un promedicamento de fórmula I es un compuesto en el que dos grupos hidroxi se unen para formar un grupo epóxido; -OCH2SCH20- ; -0C(=0)0-; -0CH20- ; -0C(=S)0-; -0C(=0) C(=0)0; -OC(CH3)20-; -OC ( (CH2) 3NH2) (CH3) O- ; -OC(OCH3) (CH2CH2CH3)0-; o -OS (=0)0- y (b) es por lo menos un compuesto que se selecciona del grupo que consiste de inhibidores de transcriptasa inversa de VIH e inhibidores de proteasa de VIH.

8. El uso de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el compuesto es de fórmula I .

9. El uso de conformidad con la reivindicación 7, caracterizado porque el inhibidor de transcriptasa inversa es un inhibidor de transcriptasa inversa de nucleósido.

10. El uso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque el inhibidor de transcriptasa inversa de nucleósido se selecciona de AZT, 3TC, ddl, ddC y d4T y el inhibidor de proteasa se selecciona de saquinavir, ritonavir, indinavir, VX-478, nelfinavir, KNI-272, CGP-61755 y U-103017.

11. El uso de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el inhibidor de transcriptasa inversa de nucleósido se selecciona de AZT, y 3TC y el inhibidor de proteasa se selecciona de saquinavir, ritonavir e mdinavir.

12. El uso de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el inhibidor de transcriptasa inversa de nucleósido es AZT.

13. El uso de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el inhibidor de transcriptasa es indinavir.

14. Un equipo farmacéutico, útil para el tratamiento de infección por VIH, caracterizado porque comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de: (a) un compuesto de conformidad con la reivindicación 1; y (b) por lo menos un compuesto que se selecciona del grupo que consiste de. inhibidores de transcriptasa inversa de VIH e inhibidores de proteasa de VIH, en uno o más recipientes estériles.

15. El equipo de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el componente (a) es un compuesto de fórmula I.