MXPA99003734A - Derivados de acidos 4-bifenil-4-hidroxibutirico sustituidos como inhibidores de metaloproteasas de matriz - Google Patents

Abstract

Inhibidores para metaloproteasas de matriz, composiciones farmacéuticas que las contienen, y un procedimiento para usarlas para tratar una variedad de condiciones fisiológicas. Los compuestos de la invención tienen la fórmula generalizada en la que T es un grupo substituyente farmacéuticamente aceptable;A es CH2, CH, o N;G es CH2 o CH;y R1 es cualquiera de una variedad de grupos substituyentes descriptos. La clase de compuestos de la invención incluye materiales que contienen anillos en los que la unidades A y G están unidas. Los compuestos de la invención son mezclas de diastereómeros, o son diastereómeros individuales que constituyen estas mezclas.

Description

TITULO: ' DERIVADOS DE ÁCIDOS 4-BIFENIL-4-HIDROXtBUTÍRICO SUSTITUIDOS COMO INHIBIDORES DE METALOPROTEASAS DE MATRIZ. CAMPO: Esta invención se refiere a inhibidores enzimáticos y más particularmente a nuevos derivados de ácido 4-bifenil-4-hidrobutírico que son útiles para inhibir las metaioproteasas de matriz. ANTECEDENTES: Las metaloproteasas de matriz (conocidos como metaloendo-proteinasas de matriz o MMPs) son una familia de endoproteinasas de zinc que no incluyen pero no están limitadas a colágenas intersticial (conocida también como MMP-1), estromelicina (conocida también como proteoglicanasa, transina o MMP-3), gelatinasa A (conocidas también como, 72kDa-gelatinasa o MMP-2) y gelatinasa B (conocida también como, 95kDa-gelatinasa o MMP-9). Estos MMP son secretados por una variedad de células incluyendo fibroblastos y condrocitos, junto con inhibidores proteináceos naturales conocidos como TIMPs( inhibidor de tejidos de metaloproteinasas). MMPs son capaces de destruir una variedad de componentes de tejidos conectivos de cartílago articular o membranas de base. Cada MMP es secretado como proenzima inactiva que debe ser disociada en una etapa subsiguiente antes de que sea capaz de ejercer su propia actividad proteolítica. Además del efecto destructor de la matriz, algunos de MMPs tales MMP-3 han sido implicados como activador in vivo para otros MMPs tales como MMP-1 y MMP-9 (lío, A. y Nagase, H., Harch. Biochem. Biophys-. 267, 211-6 (1988); Ogata, Y., Enghild, J. y Nagasse, H., J. Biol. Chem 26Z, 3581-4 (1992)). Por lo tanto, una cascada de actividad proteolítica puede iniciarse mediante un exceso de MMP-3. Surge que los inhibidores MMP-3 específicos deberían limitar la actividad de otros MMPs que no son directamente inhibidos por dichos inhibidores. Se ha informado también que MMP-3 puede disociar y por lo tanto inactivar los inhibidores endógenos de otras proteinasas tales como elastasa (Winyard, P. G.; Zhang, Z.; Chidwick, K.; Carrel, R. W.; Murphy, G., FEBS lett. 27g_, 91-4 (1991). Los inhibidores de MMP-3 podrían influenciar por lo tanto la actividad de otras proteinasas destructoras al modificar el nivel de sus inhibidores endógenos. Una variedad de enfermedades se consideran que son intermediadas por un exceso o por una actividad indeseable de metaloproteasa destructora de matriz o por un desequilibrio en la relación del MMPs a TIMP. Estos incluyen: a) osteoartritis Woessner, J. F., Jr.; Selzer, M. G., J. Biol. Chem. 2J5.9, 3633-8 (1984) y Phadke, K., J. Rhematol. 1_Q, 852-60 (1983)), b) artritis reumatoide (Mullins, D. E.; Rohrlich, S. T., Biochim. Biophys. Acta 695, 117.214 (1983); Woolley, D. E. Crossley, M, J.; Evanson, M. j., Arthritis Rheum. 2O, 1231-9 (1977); y Gravalese E. M.; Darling, J. M.; Ladd, A. L.; Katz, J. N., Glimcher, L H., Arthritis Rheum. 3.4, 1076-84 (1991)), c) artritis séptica (Williams, R. J., III; Smith, R. L; Schurman, D J., Arthritis Rheum, 3_3_, 533-41 (1990)), d) metóstasis tumoral (Reich, R. Thompson, E. W.; Iwamoto, Y.; Martin, G. R.; Deason, J. R.; Fuller, G. O; Miskin R., Cáncer Res. 4S_, 3307-12 (1988) y Matrisian, L M.; Bowden, G. T., Krieg, P. Fuerstenberger, G.; Briand. J. P.; Leroy, P.; Breathanach, R., Proc. Nati. Acad Sci. U. S. A. £3., 9413-7 (1986)), e) enfermedades periodontales (Overall, O M. Wiebkin, O. W.; Thonard, J. C. J. Peridontal. Res 22, 81-8 (1997)), f) ulceración corneal (Burns, F. R., F. R.; Stack, M. S.; Gray, R. D.; Paterson, C. A., Invest. Ophtalmol, Vis. Sci. 3J), 1569-75 (1989)), g) proteinuria (Baricos, W. H.; Murphy, G.; Zhou, Y.; Nguyen, H. H.; Shah, S. V. Biochem. J. 254, 609-12 (1988)), h) trombosis coronaria por ruptura de la placa aterosclerótica, (Davies, M. J.; Foster, K.; Hembry, R.; Murphy, G.; Humphries, S.; Proc. Nati. Acad. Sci. U. S. A. 88., 8154-8) (1991), i) enfermedad aórtica aneurismal (Vine, N,: Powell T., Clin, Sci. d .,233-9 (1991)), j) control de nacimientos (Woessner, J. F., Jr.; Morioka, N., Zhu, C, Mukaida, T.; Butler, T., LeMaire, W. J., Steroids 54, 491-9 (1989)), k) epidermolosis hullosa distrófica (Kronberger, A.; Valle, K. J.; Eissen, A. Z.; Bauen, E. A.; J. Invest- Dermotol. 79_, 208-11 (1982)), y I) pérdida degenerativa del cartílago después del daño traumático de las articulaciones, condiciones todas que conducen a respuestas inflamatorias, osteopenias intermediadas por actividad MMP, enfermedades de las articulaciones temperomandibulares, enfermedades desmielinizantes del sistema nervioso, etc. (Chantry, A.; Earl, C; Groóme, N.; Glunn, P., J. Neurochem. 50, 688-94 (1988)). La necesidad de hallar nuevas terapias es especialmente importante en el caso de enfermedades artríticas. El efecto primario incapacitante de la osteartritis (OA), artritis reumatoide (AR), y artritis séptica es la pérdida progresiva del cartílago articular y por lo tanto de la función normal de las articulaciones. Ningún agente farmacéutico actualmente comercializado es capaz de evitar o de hacer más lenta esta pérdida de cartílago, aunque se han administrado drogas antiinflamatorias no esferoidales (NSAIDs) para controlar el dolor y la hinchazón. El resultado final de estas enfermedades es la pérdida total de la función articular que puede tratarse únicamente mediante cirugía de reemplazo de la articulación. Se espera que los inhibidores de MMP detengan o inviertan el avance de la perdida de cartílago y obvien o demoren la intervención quirúrgica. Las proteasas son elementos críticos en varias etapas en el progreso del cáncer metastático. En este proceso, la degradación proteolítica de la proteína estructural en la membrana basal permite la expansión de un tumor en el sitio primario, la evasión de éster sitio así como también la ocupación e invención en sitios distantes secundarios. Asimismo, la angiogénesis inducida por tumores es necesaria para que se desarrolle un tumor y depende de la remodelación del tejido proteolítico. Los experimentos de transfección con varios tipos de proteasas han demostrado que las metaloproteasas de matriz, en particular A y B (MM-2 y MM-9, respectivamente) juegan un rol dominante en estos procesos. Para una revisión de este campo ver (Mullins, D. E.; Rohrlich, S. T., Biochim. Biophys. Acta 695. 117.214 (1983); Ray, J. M.; Stetler-Stevenson, W. G., Eur. Respir. J. 7, 2062-72 (1994) y Birkelad-Hansen, H.; Moore, W. G. L; Bodden, M. K.; Windsor, L. J.; Birkedal-Hansen, B.; Decarlo, A.; Englar, J. A., Crit. Rev. Oral. Biol. Med. 4, 197-250 (1993). Además, podría demostrarse que la inhibición de la matriz extracelular por el inhibidor de metaloproteasa de matriz nativa TIMP-2 (una proteína) detiene el desarrollo de cáncer (De clerk, Y. A.; Pérez, N.; Shimada, H.; Boone, T. C; Langley, K. E.; Taylor, S. M., Cáncer Res. 52, 701-8 (1992) y que y que TIMP-2 inhibe la angiogénesis inducida por tumores en sistemas experimentales (Moses, M. A.; Sudhalter, J.; Langer, R., Science 248_, 1408-10 (1990). Para una revisión ver De Clerk, Y., Shimada, H.; Taylor, S. M. Langley, K. E., Ann. N. Y. Acad. Sci. 732, 222-32 (1994). Se demostró también que el inhibidor de metaloproteasa de matriz sintético batimastat cuando es administrado intraperitonealmente inhibe el desarrollo y diseminación del tumor de colón humano en ratones ver (Wang, X.; Fu, X.; Brown, P. D., Crimmin, M. J.; Hoffman, R. M. Cáncer Res. =4, 4726-8 (1994) y prolonga la supervivencia de los ratones que son portadores de xenoinjertos de carcinoma ovárico humano. (Davies, B.; Brown, P. D.; East, N.; Crimmin, M. J.; Balkwill. F. R. 53-, 2087-91 (1993). El uso de éste y otros compuestos relacionados han sido descriptos en la patente WO-A-9321942. Existen varias patentes y solicitudes de patentes que describen el uso de inhibidores de metaloproteinasas para retardar el cáncer matastático para promover la regresión del tumor, para inhibir la proliferación de las células cancerosas, para hacer más lento o para evitar la pérdida del cartílago que está asociada con osteoartritis o para el tratamiento de otras enfermedades tales como , las indicadas precedentemente (por ejemplo, WO-A-9519965, WO-A-9519956, WO-A-9519957; WO-A-9519961 ; WO-A-9321942; WO-A-9321942; WO-9421625; patente norteamericana N° 4.599.361 ; patente norteamericana N° 5.190.937; patente europea N° 0574 758 A1 , publicada el 22 de Diciembre de 1993; patente europea 026 436 A1 publicada el 3 de agosto de 1988; y patente europea N° 0520 573 A1 , publicada el 30 de Diciembre de 1992). Los compuestos preferidos de estas patentes tienen esqueletos peptídicos con un grupo formador de complejo de zinc (ácido hidroxámico, tiol, ácido carboxílico o ácido fosfínico) en un extremo de una variedad de cadenas laterales, encontrándose ambas en los aminoácidos naturales así como también en aquellos que tienen más grupos funcionales nuevos. Dichos pequeños peptidos son a menudo muy pobremente absorbidos, y exhiben baja disponibilidad oral. También están sujetos a un rápido metabolismo proteolítico, teniendo por lo tanto corta vida media corta. Como ejemplo, el batimastat, que es el compuesto descripto en la WO-A-9321942, puede administrarse únicamente en forma intraperitoneal. En la WO 9615096, publicada el 23 de mayo de 1996, describe ácido 4-diarilbutírico o 5-diarilpentanoico sustituidos y derivados como inhibidores de metaloproteasas de matriz. Esta es una continuación en parte de la solicitud de patente norteamericana Acta N° 08/339.846, presentada el 15 de noviembre de 1994 que se incorpora aquí como referencia. La solicitud describe dos derivados de ácido 4-bifenil-4-hidroxibutirico sustituido (ejemplos 33 y 34, tal como ee muestran a continuación). Estos compuestos son menos potentes como inhibidores MMP-3 que los correspondientes derivados de ácido 4-bifenil-4-oxobutírico.

WO 9615096 Ejemplo 1 Isómero A WO 9615096 Ejemplo 33 Cl50 486 nM (vs. MMP-3) Cl 5o 2.600 nM (vs. MMP-3) Isómero B WO 9615096 Ejemplo 34 Cl so 5.000 nM (vs. MMP-3) Es conveniente tener inhibidores MMP eficaces que posean biodisponibidad mejorada y estabilidad biológica relativa a los compuestos a base de péptidos de la técnica anterior y que pueden optimizarse para ser usados contra MMP particulares que constituyen el objetivo. Dichos compuestos son el objeto de la presente invención. COMPENDIO: En vista del hecho de que los ácidos-biaril-4-hidroxibutirico sustituidos descritos en WO 9615096 parecen ser menos activos como inhibidores de MMP que los ácidos 4-biaril-4-oxobutíricos análogos idénticamente sustituidos, resulta sorprendente que se halla hallado que el isómero activo de otros ácidos 4-biaril-4-hidroxibutiricos puedan ser significativamente más potentes como inhibidores MMP que los correspondientes compuestos 4-oxo. La presente invención se refiere a compuestos que tienen actividad inhibidora de metaloproteasa de matriz y que tienen la fórmula general (I) siguiente ) donde: T es un grupo sustituyente farmacéuticamente aceptable; X es 0, 1 ó 2; m es 0 o un integro de 1-4; n es 0 ó 1 ; y o bien A y G son ambos CH2; o A es un enlace químico y G es CH2; A es CH o N; y G es CH; y A está conectado a G mediante un enlace formador de anillo que tiene ia fórmula (CH2)o.3(Q)(CH2)0.3; donde Q es un enlace químico, S, u O; y C, S, y O constituyen átomos de enlace; se dan como resultado ia formación de un anillo que incluye A, dicho enlacé'formador de anillo y G; con las condiciones de que la suma de n más la cantidad de total de átomos de enlace en dicho enlace formador de anillo es un entero de desde 1 a 4; y la cantidad de heteroátomos en dicho anillo es de 0 ó 1 ; R1 es: * arilo de 6-10 carbonos, con la condición de que si este grupo arilo es fenilo, entonces X es uno o dos; * heteroarilo que comprende 4-9 átomos de carbono y por lo menos un heteroátomo N, O, o S; * alquenilo arilo-sustituido donde la porción arilo contiene 6-20 átomos de , carbono y la porción alquenilo contiene 2-5 átomos de carbonos; * alquenilo heteroarilo-sistituido donde la porción heteroarilo comprende 4- 9 átomos de carbono y por lo menos un heteroátomo N, O o S, y la porción alquenilo contiene 2-5 átomos de carbono; * alquenilo arilo-sustituido donde la porción arilo contiene 6-10 átomos de carbono y la porción alquenilo contiene 2-5 átomos de carbono; * alquenilo heteroarilo-sustituido donde la porción heteroarilo comprende 4-9 átomos de carbono y por lo menos un N, O, o S heteroátomo y la porción alquenilo contiene 2-5 átomos de carbono; *N-ftalimidoilo; *N-(1 ,2-naftalendicarboximidoilo); *N-(2,3-naftalendicarbox¡midoilo); *N-(1 l8-naftalendicarboximidoilo); *N-indoloilo; *N-(2-pirroldinonilo); *N-succinimidoilo; ^N-maleimidoilo; *3-hidantoinilo; *1 ,2,4-urazoilo *amido; *un uretano; *una urea; * un heterociclo no aromático sustituido o no sustituido que contiene y que está conectado a través de un átomo de N y que comprende un O o S adicional; *un amino; y *ZRd en el que Z representa ; y R8 es: * arilo de 6-10 átomos de carbono; * heteroarilo que comprende 4-9 átomos de carbono y por lo menos un heteroátomo N, O o S; * arilalquilo donde la porción arilo contiene 6-12 átomos de carbono y la porción contiene 1-4 átomos de carbono; o * heteroaril-alquilo donde la porción arilo comprende 4-9 átomos de carbono y por lo menos un heteroátomo N, O, o S y la porción alquilo contiene 1-4 átomos de carbono; y con la condición de que - cuando Z es O, R8 puede ser también alquilenoxi o polialquilenoxi terminado con H, alquilo o fenilo. Arilo o porciones heteroarilo de cualquiera de los grupos T o R1 que pueden ser portadores opcionalmente de hasta dos sustituyentes que están seleccionados del grupo que consiste en -(CH2)yS(O)R ,1"1, -(CH2)yS(O)R ,1? 1?, -(CH2)ySO2N(R11)2,-(CH2)yN(R11)2, -(CH2)yN(R11)COR12, -OC(R11)2O- en el que ambos átomos de oxígeno están conectados al anillo arilo, -(CH2)yCOR11, -(CH2)yCON(R11)2, -(CH2)yCO2R11, -(CH2)yOCOR11, -halógeno, -CHO, -CF3, -NO2, -CN, y -R12, en el que y es 0-4; R11 representa H o alquilo inferior de 1-4 átomos de carbono; y R12 representa alquilo inferior de 1-4 átomos de carbono.

Tal como se prepararon los compuestos de la invención son mezclas de , diastereómeros. Para cada compuesto, los materiales de interés son las mezclas de diaetereomeros o del diaestereomero único que tiene una actividad inhibidora MMP de los diaestereomeros que constituyen la mezcla de diaestereomeros. Las sales farmacéuticamente aceptables están también dentro del alcance de la invención. Además de los compuestos previamente descriptos, la invención se refiere también a composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la invención tal como se describió más arriba y en forma más detallada en la descripción detallada a continuación además de un portador farmacéuticamente aceptable. La invención se refiere además a un método para tratar una condición intermediada por una metaloproteasa de matriz en un mamífero para lograr un efecto que comprende administrar al mamífero una cantidad de un compuesto de la invención tal como se describió más arriba y en forma más detallada en la siguiente descripción detallada que es eficaz para tratar dicha condición.

DESCRIPCIÓN DETALLADA: Esta invención se refiere en términos generales a compuestos inhibidores de metaloproteasas de matriz que tienen la fórmula general (I) tal como se muestra más arriba. El símbolo "T" en la fórmula (I) representa un grupo sustituyente farmacéuticamente aceptable. Ejemplos de los grupos T son porciones tales como halógeno; alquilo; haloalquilo; alquenilo; alquinilo; -(CH2)PQ en el que p es 0 o un entero de 1-4; y -alquenilo-Q en el que la porción alquenilo comprende 2-4 átomos de carbono. Q en estos últimos dos grupos puede ser arilo, heteroarilo, -CN, -CHO, -NO2, -CO2R4, -OCOR4, -SOR5, -SO2R5, -CON(R4)2, -COR4, -N(R4)2, - N(R4)COR4, N(R4)CO2R5, -N(R )CON(R )2, -OR6, y -SR6. En estas fórmulas R4 , representa H, alquilo, arilo, hateroarilo, arilalquilo, o heteroaril-alquilo; R5 representa alquilo, ariio, heteroarilo, arilalquilo, o heteroaril-alquilo; y R6 representa H, alquilo, arilo, hateroarilo, arilalquilo, heteroaril-alquilo, alquenilo, alquinilo, haloalquilo, acilo o alquilenoxi o polialquilenoxi terminado con H, alquilo o fenilo. La insaturación en una porción que está abarca por Q o que forma parte de Q está separada de cualquiera de N, O, o S de Q, mediante por lo menos un átomo de carbono. Este anillo fenilo terminador de (I) puede estar no sustituido o puede ser portador de hasta dos sustituyentes T. Por consiguiente, el suscripto x es 0, 1 ó 2. En el texto inmediatamente previo que se refiere a "T", corresponden las siguientes definiciones adicionales: "alquilo" se refiere a gruposs hidrocabonados cíclicos y policíclicos de cadena recta y ramificada que contienen 1-10 átomos de carbono; "haloalquilo" se refiere a grupos alquilo parcial o totalmente halogenados que contienen 1-10 átomos de carbono; "alquenilo" se refiere a grupos hidrocarbonados insaturados policíclicos y cíclicos rectos o ramificados que contienen 2-10 átomos de carbono y por lo menos un doble enlace; "alquinilo" se refiérela grupos hidrocarbonados cíclicos y policíclicos de cadena recta y ramificada que contienen 2-10 átomos de carbono y por lo menos un triple enlace; "arilo" se refiere a carbociclos aromáticos de un grupo carbocíclico de 6-12 átomos de carbono tales como fenil o bifenilo o naftilo; "hateroarilo" se refiere a grupos aromáticos cíclicos de 6-12 átomos de carbono que contienen 1-4 heteroátomos seleccionado de O, N y S; "arilalquilo" se refiere a un cadena alquilo de 1-4 átomos de carbono terminados con grupo arilo; "hateroarilo-alquilo" se refiere a una cadena alquilo de 1-4 átomos de carbono terminados con un grupo heteroarilo; "acilo" significa -Coalquilo, Coarilo, o Coheteroarilo; "alquilenoxi" se refiere a una cadena dirradical de 1-6 metileno de un oxígeno; y "polialquilenoxi" se refiere a una cadena dirradical de 1-6 y 2-3 oxígenos, con la condición de que cada oxígeno está separado de cada otro oxígeno mediante por lo menos un carbono. Más particularmente la invención se refiere en un primer aspecto a compuestos de fórmula (I) en los que cada uno de A y G es CH2 n es 0. Dichos compuestos tienen la fórmula (II) que se muestra a continuación. (ll) En la fórmula (II), m es preferiblemente 0, 1 ó 2, Además cuando m es 0, R1 es preferiblemente cuando m es 1 , R1 es preferiblemente ; y cuando m es 2, R1 es preferiblemente En un aspecto más preferido, en la fórmula (II) T es halógeno o OR6 donde R6 es alquilo de 1-6 carbonos o bencilo; x es 1 ; m es 0 ó 2; y cuando m es 0, R1 es ;y cuando m es 2, R es - ---- Además de los compuestos de fórmula (II) la invención se refiere en un segundo aspecto a los compuestos que tienen la fórmula (I) los cuales n es 0 ó 1 ;A es CH o N; G es CH; y A está conectado a G mediante un enlace formador de anillo que tiene la fórmula (CH2)0.3(Q)(CH2)0_3 en la que Q es un enlace químico, S, ó Q; y C, S, ó O constituyen átomos de enlace. Estas selecciones de parámetros dan como resultado la formación de un anillo que incluye A, el enlace formador de anillo previamente descrito y G, Este subgrupo de compuestos se basa en la fórmula (I) con las condiciones de que la suma de n más el número total de átomos de enlace en el enlace formador de anillo es un entero desde uno a cuatro; la cantidad de heteroátomos en el anillo es 0 ó 1. T, x, m, y R1 son tal como se han , definido con referencia a la fórmula (I). Estos compuestos poseen por lo tanto un anillo de 4 a 7 miembros que puede incluir un heteroátomo de N, O, o S, y están representados por la fórmula (III) siguiente.

(III) En un subgrupo preferido de los compuestos que contienen el anillo previamente descritos, n es 0; A es CH; Q es un enlace químico; y en enlace formador de anillo es -(CH2)2-- Los compuestos resultantes tienen la fórmula (Illa) que se muestra a continuación.

(Illa) Más preferiblemente los compuestos de fórmula (Illa) son materiales en los cuales T es halógeno o bien OR6 en el que R6 es alquilo de 1-6 átomos de carbono o bencilo; x es I y m es O ó l . Cuando m es 0, R1 es más preferiblemente ;y cuando m es 1 , R1 es más preferiblemente Los expertos en la materia apreciarán que cada uno de los compuestos de la invención existen en más de una forma diastereomérica, y comprenderán que dichos estereoisómeros exhiben generalmente diferentes actividades en los sistemas biológicos. Esta invención comprende todos los estereoisómeros posibles que poseen actividad inhibidora contra una MMP, independientemente de sus designaciones estereoisoméricas, aunque únicamente el más activo de los estereoisómeros en cada mezcla ha sido reivindicado aquí. Abarca también mezclas de estereoisómeros en las cuales por lo menos un miembro posee una actividad inhibidora de MMP. La invención abarca también las "prodrogas" farmacéuticamente aceptables de los compuestos reivindicados. Estos son derivados típicamente acilados de compuestos que contienen alcohol de la invención o de esteres alquilo inferior y amidas alquilo inferior de la porción de ácido carboxílico así como también lactonas formadas por la reacción entre la función de ácido carboxílico y el grupo hidroxilo. Otros tipos de prodrogas son sin embargo conocidos. Dichas prodrogas, que pueden ser intrínsecamente fisiológicamente inactivas o activas, se convierten a los compuestos activos de la invención en el cuerpo del sujeto tratado. Un esquela de la interconversión de la lactona y las formas de cadena recta de un material se muestra a continuación.

Las preparaciones de dichos derivados están dentro de la experiencia en la , materia. Los compuestos más preferidos de la presente invención son tal como se indican y denominan en la lista siguiente, ácido 4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-(feniltiometil)butanoico; ácido [2S,4R]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-feniltiometil)-butanoico; ácido 4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidrox¡-2-[(4-h¡drox¡fenil)-tiometiI]-butano¡co; el más activo de los compuestos, ácido [2S,4R]-4-[4-(4-clorofenlI)fenil]-4- hidroxi-2-[)4-hidroxifenil)-tiometil]butanoico y [2S,4S]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-[)4-hidroxifenil)-tiomet¡l]butanoico; ácido 4-[4-(4-clorofenll)fenil]-4-hidroxi-2-(3-fenilprop¡l)butano¡co; el más activo de los compuestos' [2S,4R]-4-[4-[4-)4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-(3-fenilpropil)-butanoico y [2S,4S]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidro-xi-2-(3-fenilpropil)butanoico; ácido 4-t4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-[2-3-N,N-diet¡lcarbamoil)-feniletiljbutanoico; el más activo de los compuestos, ácido [2S,4R]-4-[4(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-[2-)3-N,N-dietil-carbamo¡l)fenilet¡l]butanoico; y ácido [2S,4S]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidrox¡-2-[2-)3-N,N-d¡etiIcarbamoil)feniletil]butanoico; ácido 4-[4-(4-pentiloxifenil)fenii]-4-hidroxi-2-(3-fenilpropil)butano¡co; el más activo de los compuestos [2S,4R]-4-[4-(4-pentiloxifenil)fenil]-4-hidrox¡-2-(3-fenilprop¡l)-butano¡co; y ácido [2S,4S]-4-[4-(4-pentiloxifenil)fenil]-4-hidroxi-2-(3-fenilpropil)-butanoico; ácido 4-[4-)4-bencilox¡fen¡l)fenil]-4-hidroxi-2-(3-fenilpropil)butanoico; el más activo de los compuestos [2S,4R]-4-[4-(4-benciloxifenil)fenil]-4-hidroxi-2-(3-feniIpropil)butanoico; y ácido [2S,4S]-4-[4-(4-benciloxifenil)fenil]-4-hidroxi-2-(3-fenilpropil)butanoico; ácido 4-[4-)4-clorofenil)fenil]-4-h¡droxi-2-(2-ftalim¡doetil)butanoico; el más activo de los compuestos [2S,4R]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi- 2-(3-ftalimidoetil)-butanoico; y ácido [2S,4S]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-h¡drox¡-2-(2- ftalimidoetil)-butanoico; ácido trans-5-[(4-(4-clorofenil)fenil)h¡droximet¡l]-trans-2- feniltiociclopentanocarboxólico; el más activo de los compuestos (1 S,2R,5S)-trans-5-[(4-(4-clorofenil)fenil- S-hidroximetil]-trans-2-feniltiociclopentanocarboxílico; y ácido (1S,2R,5S)-trans-5- [(4-(4-clorofenil)fenil)-R-h¡droximetil]-trans-2-fen¡ltiociclopentanocarboxíl¡co; ácido trans-5-[(4-(4-clorofenil)fenil)hidroximetil]-cis-2-(2-metoxicarbonil-feniltio)ciclopentanocarboxílico; el más activo de los compuetos (1S,2S,5S)-trans-5-[(4-(4-clorofenil)fenil)-S- hidroximet¡ -cis-2-(2-metoxicarbon¡lfen¡ltio)ciclopentanocarboxíl¡co y ácido ( 1 S ,2S , 5S)-trans-5-[(4-)4-clorofen ¡I)fen il)-R-h id roximetil]-cis-2-(2-metoxicarbonilfeniltio)ciclopentanocarboxílico; ácido trans-5-[(4-(4-clorofenil)fenil)hidroximetil-trans-2-ftalim¡do-metilciclopentanocarboxílico; y el más activo de los compuestos (1 S,2R,5S)-trans-5-[(4-(4-clorofenil)fenil)-S-hidroximetiIj-trans-2-ftalimidometilciclopentanocarboxílico y ácido (1S,2R,5S)-trans-5-[(4-(4-clorofenil)fenil)-R-hidroximetiI]-trans-ftalimidometilciclopentanocarboxílico.

Método Preparativos Generales: Los compuestos de la invención pueden prepararse fácilmente mediante el uso de procedimientos y reacciones químicas conocidas. Sin embargo, los siguientes métodos preparativos generales se presentan para auxiliar al lector en la síntesis de los inhibidores, presentándose a continuación en la sección experimental ejemplos más detallados. Todos los grupos variables de estos métodos son tal como se han descripto en la descripción genérica si no han sido específicamente definidos a continuación.

Método General A Los compuestos de esta invención se preparan convenientemente mediante la reducción de derivados de ácido 4-bifenil-4-oxobutír¡co sustituidos con un agente reductor de hidruro selectivo tal como borohidruro de sodio o cianoborohidruro de sodio en un solvente tal como etanol o tetrahidrofurano a 0°C hasta temperatura ambiente. Alternativamente, el agente reductor puede ser cualquier número de otros reactivos usados por los expertos en la materia para reducir carbonilo a alcohol secundario con la en la condición de que dicho agente reductor no efectúe cambios indeseables en las partes T, carboxi, o R de dichos materiales de partida. Los isómeros del producto pueden aislarse en forma pura mediante una combinación de cristalización y cromatografía. Los derivados de ácido 4-bifenil-4-oxobutírico de partida se preparan tal como se describió en la solicitud de patente Norteamericana Acta N° 08/539.409 y WO 9615096.

Método General B - Los materiales isoméricamente. puros se preparan convenientemente tal como en el Método A pero mediante el uso de un agente reductor quiral tal como el sistema CBS (Corey, EJ; Bakshi, Shibata, S., J. Am. Chem. Soc. 1987, 5551-5553, o Corey, EJ; Bakshi, R.K. Shibata; S; Chen, C.P.; Singh, V.K., J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 7925-7926.) en lugar de borohidruro de sodio. Las sales farmacéuticamente apropiadas de los compuestos de la presente invención incluyen sales de adición formadas con bases orgánicas o inorgánicas. El ion formador de sal derivado de dichas bases puede estar constituido por iones metálicos, por ejemplo iones aluminio, de metales alcalinos, tales sodio, potasio, iones de metales alcalinos-térreos tales como calcio o magnesio, o un ion de una sal de amina, de la cual se conoce el número para tal propósito. Entre los ejemplos se incluyen sales de amonio, arilalquilaminas, tales como dibencilamina, y N,N-dibencilet¡lendiamina, alquilaminas inferiores tales como metilamina, t-butilamina, procaína, alquilpiperidinas inferiores tales como N-etilpiperidina, cicloalquilaminas tales como ciclohexilamina o diciclohexilamina, 1-adamantilamina, benzatina, o sales derivadas de amino ácidos tales como arginina; usina o similares. Las sales fisiológicamente aceptables tales como las sales de sodio o de potasio y las sales de aminoácidos pueden usarse medicinalmente tal como se describe a continuación y son las sales preferidas. Estas y otras sales que no son necesariamente fisiológicamente aceptables son útiles en la aislación o purificación de un producto aceptable para los propósitos descriptos a continuación. Por ejemplo, el uso de aminas enantioméricamente puras obtenibles en el comercio tales como (+)cinchonina en solventes apropiados pueden proveer cristales de sales de un enantiómero único de los compuestos de la invención, dejando al enantiómero opuesto en solución en un procedimiento mencionado a menudo como "de resolución clásica". Como un enantiómero de un compuesto determinado de la invención es usualmente > sustancialmente superior en su efecto fisiológico que su antípoda, este isómero activo puede encontrarse por lo tanto purificado tanto en los cristales como en la fase líquida. Las sales se producen mediante la reacción de la forma acida del compuesto con un equivalente de la base que provee el ¡ón básico deseado en un medio en el cual precipita la sal o en un medio acuoso, que luego es liofilizado. La forma acida libre puede obtenerse a partir de la sal mediante técnicas convencionales de neutralización, por ejemplo con bisulfato de potasio, ácido clorhídrico, etc.. Los derivados de amida y éster apropiados de los compuestos de la invención son por ejemplo esteres de ácidos carboxílicos de alquilo y arilo del grupo 4-hidroxilo o alquilo o esteres arilo del ácido carboxílico, o las amidas preparadas a partir del ácido carboxílico conjuntamente con alquil aminas inferiores o amino ácidos naturales. Los compuestos de la presente invención demostraron inhibir las metaloproteasas de matriz MMP-3, MMP-9, y MMP-2, y por lo tanto son útiles para tratar o para evitar las condiciones mencionadas más arriba. Como otras MMP no enumeradas más arriba comparten un alto grado de homología con las que se enumeran precedentemente, especialmente en el sitio catalítico, se estima que los compuestos de la invención deberían inhibir también dichas otras MMP en diferentes grados. La variación de los sustituyentes en las porciones arilo de las moléculas, así como también las de la cadena de ácido butanoico de los compuestos reivindicados, han demostrado que afectan la inhibición relativa de las MMP enumeradas. Por lo tanto, los compuestos de esta clase general pueden ser "afinados" seleccionado sustituyentes específicos tales como la inhibición de MMP específica asociada con condiciones patológicas específicas que pueden mejorar dejando las MMP no involucradas menos afectadas.

Los inhibidores e la presente invención han sido contemplados para ser usados en aplicaciones humanas y veterinarias. Por consiguiente esta invención se refiere a un método para tratar mamíferos (incluyendo humanos y/o animales criados para lácteos, carnes o en las industrias de la piel o como animales domésticos por ejemplo ratones, ratas, caballos, ganado, ovejas, perros, gatos, etc.) que sufren de condiciones intermediadas por metaloproteasas de matriz tales como las que han descripto previamente, mediante la administración de una cantidad eficaz de un compuesto de la invención. En este método de tratamiento el mamífero es preferiblemente un ser humano. Los efectos que pueden lograrse son: alivio de la osteoartritis, artritis reumatoide, artritis séptica, enfermedades periodontales, ulceración de córneas, proteinuria, enfermedades aórticas aneurismales, epidermolisis hullosa, distrofóbica, condiciones que conducen a respuestas inflamatorias, osteopenias intermediarias por actividad de MMP, enfermedades de las articulaciones tempero mandibulares, o enfermedades desmielinizantes del sistema nervioso; retardo de la metástasis tumoral o pérdida degenerativa del cartílago a continuación de daños de las articulaciones traumáticas; reducción de trombosis coronaria de ruptura de placa ateroesclerótica; o mejoras en el control de la natalidad. En este método de tratamiento, la cantidad de compuesto inhibidor es eficaz para inhibir la actividad de por lo menos una metaloprotéasa de matriz que da como resultado el logro del efecto deseado. Los compuestos de la invención se emplean en composiciones farmacéuticas que contienen ingredientes activos además de uno o más portadores, diluyentes, rellenadores, aglutinantes, farmacéuticamente aceptables, y otros excipientes, dependiendo del modo de administración y de la forma de administración contemplada.

La adminsitración de los inhibidores puede ser mediante cualquier modo apropiado conocido por los expertos en la materia. Ejemplos de administración parenteral apropiada incluyen rutas intravenosas, intraarticulares, subcutáneas e intramusculares. La administración intravenosa puede usarse para obtener una regulación exacta de las concentraciones pico de plasma de la droga. Una media vida mejorada y la dirección de la droga a las cavidades articulares puede ser auxiliada mediante el atrapamiento de la droga en los liposomas. Puede ser posible mejorar la selectividad del objetivo liposomal en las cavidades articulares mediante la incorporación de ligandos en la parte externa de los liposomas que se adhieren a las macromoléculas específicas sinoviales. Alternativamente, puede usarse una inyección de depósito intramuscular, intraarticular o subcutáneo con o sin encapsulación de la droga en microesferas degradables, por ejemplo que comprende poli(DL-láctido-co-glicóIido), para obtener la liberación de la droga sostenida y prolongada. Para mejorar la conveniencia de la forma de dosificación puede ser posible usar un depósito implantado en forma i.p. y septo tal como el sistema Percuseal obtenible en Pharmacia. Puede lograrse también mejor cumplimiento con el paciente y con las conveniencias mediante el uso o bien de plumas inyectoras (por ejemplo Novo Pin o Q-pen o bien inyectores por chorro libres de agujas (por ejemplo Bioject, Mediject o becton Dickinson). La liberación prolongada de cero-orden o controlada en forma precisa tal como la liberación pulsátil, puede obtenerse también cuando es necesario usando bombas implantables con liberación de la droga a través de una cánula en los espacios sinoviales. Entre los ejemplos se incluyen las bombas osmóticas subcutáneamente implantadas que pueden obtenerse en ALZA, tales como la bomba osmótica ALZET.

La administración nasal puede lograrse mediante la jncorporación de la , droga en portadores bioadhesivos en partículas (<200 µm) tales como los que comprenden celulosa, poliacrilato o policarbofil, conjuntamente con mejoradores de absorción mejorados tales como fosfolípidos o acilcamitinas. Los sistemas obtenibles incluyen los desarrollados por DanBiosys y Scios Nova. La administración oral puede lograrse mediante la incorporación de la droga en forma de tabletas, tabletas revestidas, grageas, cápsulas de gelatina duras y blandas, soluciones, emulsiones o suspensiones. La administración oral puede efectuarse también mediante la incorporación de la droga en cápsulas entéricas recubiertas diseñadas para liberar la droga en el colon donde la actividad digestiva de la proteasa es baja. Entre los ejemplos se incluyen los sistemas OROS-CT/Osmet™ y PULSINCAP™ ALZA y Sistema de Suministro de Drogas Scherer, respectivamente. Otros sistemas usan polímeros azo-reticulados que son degradados mediante azo reductasas bacterianas específicas de colon, o polímeros de' poliacrilato sensibles al pH que son activados mediante el aumento del pH en el colon. Los sistemas precedentes pueden usarse conjuntamente con una amplia gama de mejoradores de absorción disponibles. La administración rectal puede lograrse mediante la incorporación de la droga en supositorios. Los compuestos de la invención pueden manufacturarse en las formulaciones previamente enumeradas mediante la adición de varios portadores inorgánicos u orgánicos terapéuticamente inertes que son bien conocidos por los expertos en la materia. Entre los ejemplos de los mismos se incluyen pero no están limitados a lactosa, almidón de maíz, o derivados de los mismos, talco, aceites vegetales, ceras, grasas, polioles tales como polietilenglicol, agua, sacarosa, alcoholes, glicerina y similares. Pueden agregarse también varios presen/adores, emulsionantes, dispersantes, aromatizantes, agentes humectantes, antioxidantes, edulcorantes, colorantes, estabilizadores, sales, , buffer y similares según sea necesario para ayudar a la estabilización de la formulación o para ayudar a aumentar la biodisponibilidad de los ingredientes activos o para proveer una formulación de sabor u olor aceptable en el caso de dosificación oral. La cantidad de composición farmacéutica que debe emplearse dependerá de la persona que lo reciba y de la enfermedad que se trate. La cantidad requerida puede determinarse sin excesiva experimentación mediante protocolos que son bien conocidos por los expertos en la materia. Alternativamente, la cantidad requerida puede calcularse, en base a una determinación de la cantidad de enzima que constituye el objetivo y que debe ser inhibida con el fin de tratar la enfermedad. Típicamente, niveles de dosificación de desde aproximadamente 0,05 mg hasta aproximadamente 150 mg por kilogramo de peso del cuerpo por día (aproximadamente 4 mg hasta aproximadamente 12 gramos por humano adulto por día) son útiles para el tratamiento de las condiciones antes indicadas.

Debe entenderse sin embargo que el nivel de dosificación específico para cualquier sujeto particular dependerá de una variedad de factores incluyendo la edad del sujeto, el peso del cuerpo, la salud en general, el sexo y la dieta, la actividad y el nivel de efectos secundarios esperados del compuesto específico empleado, el tiempo y vía de administración, el régimen de excreción así como también las combinaciones de droga y ia gravedad de las condiciones particulares que se están tratando. Los inhibidores de metaloproteasas de matriz de la invención son útiles no solo para el tratamiento de las condiciones fisiológicas discutidas más arriba, sino que son también útiles en dichas actividades como purificación de metaloproteasas, y para probar la actividad de las metaloproteasas de matriz. Dichos ensayos de actividad pueden usarse tanto in vitro usando preparaciones enzimáticas naturales o sintéticas, o in vivo usando por ejemplo modelos de animales en los cuales se han encontrado espontáneamente niveles anormales de enzimas destructoras (uso de animales genéticamente mutados o trapsgénicos), o son inducidos por administración de agentes exógenos o por cirugía que quiebra la estabilidad articular.

Experimentos: Procedimientos Generales: Todas las reacciones se llevaron a cabo en vajilla secada al horno o secada en llama bajo una presión de argón positiva y se agitaron magnéticamente a menos que se indicara lo contrario. Las soluciones y líquidos sensibles fueron transferidos a través de la jeringa o cánula y fueron introducidos en los recipientes de reacción a través de septos de caucho. Las soluciones de los productos de reacción se concentraron usando un evaporador Buchi a menos que se indicara lo contrarío.

Materiales: Se usaron solventes y reactivos de calidad comercial sin purificación adicional excepto que el éter dietílico y el tetrahidrofurano se destilaron usualmente bajo atmósfera de argón a partir de cetil benzofenonas, y cloruro de metileno que se destiló bajo argón a partir de hidruro de calcio. Muchos de los materiales de partida orgánicos u organometálicos especiales y los reactivos se obtuvieron en Aldrich, 1001 West Saint Paul Avenue, Miiwaukee, Wl 53233. Los solventes fueron a menudo obtenidos en EM Science distribuidos por VWE Scientific.

Cromatografía: Se efectuó cromatografía analítica de capa delgada (TLC) en placas de 250 µm de gel de sílice de 60 A F-254, con base de vidrio y previamente recubiertas. La visualización de las manchas se efectuó mediante una de las siguientes técnicas: (a) iluminación ultravioleta, (b) exposición a vapor de yodo, (c) inmersión de la placa en una solución al 10% de ácido fosfomolíbdico en etanol seguido de calentamiento, y (d) inmersión de la placa en una solución al 3% de p-anisaldehído en etanol que contiene 0,5% de ácido sulfúrico concentrado seguido por calentamiento. La cromatografía en columna se llevó a cabo usando gel de sílice malla 230-400 EM Science®. La cromatografía líquida de alto rendimiento analítica (HPLC) se efectuó a 1 mL min"1 en una columna de 4,6 x 250 mm Microsorb® monitoreada a 288 nm, y la HPLC semipreparativa se efectuó a 24 mi min"1 en una columna de 21 ,4 x 250 mm Microsorb® monitoreada a 288 nm. Instrumentación: Los puntos de fusión (pf) se determinaron con un aparato para medir el punto de fusión Thomas-Hoover y no están corregidos. Los espectros de resonancia magnética nuclear protónica (1H ) (RMN) (excepto para los experimentos NOESY) se midieron con un espectrómetro de General Electric GN-OMEGA 300 (300 Mhz), y los espectros RMN de carbono 13 (13C) se midieron con un espectrómetro de General Electric GN-OMEGA 300 (75 MHz). La mayoría de los compuestos sintetizados en los experimentos siguientes fueron analizados mediante RMN, y los espectros coincidieron con las estructuras propuestas en cada caso. Los espectros de 1HRMN NOESY (Espectroscopia de Efecto Overhauser Nuclear) se recogieron en un espectrómetro de RMN Bruker DMX-500 (TH = 500.15 MHz , 13 C = 125,78 MHz). El procesamiento de los datos se efectuó usando el software Bruker XWINNMR en una computadora Silicon Graphics Indy. Los datos de espectro de masa (MS) se obtuvieron en un espectrómetro Kratos Concept 1-H mediante ¡ón secundario de cesio-líquido (LCIMS), una versión actualizada de bombardeo rápido de átomos (FAB). La mayoría de los compuestos sintetizados en los experimentos siguientes fueron analizados por espectroscopia de masa y los espectros coincidieron con las estructuras propuestas para cada caso.

Comentarios Generales: Para los procedimientos de multietapas, las etapas secuenciales se indicaron con números. Las variaciones dentro de las etapas se indican con letras. Las líneas de trazos en los datos tabulares indican punto de adhesión.

Procedimientos Experimentales Ejemplos 1 y 2 Preparación de ácido [2S.4R1-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4R-hidroxi-2-(feniltiometil)butanoico y ácido f2S.4S]-4-[4-(4-clorofenil)fen¡l]-4-hidroxi-2-(feniltiometil)butanoico Se preparó ácido [S]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-oxo-2-(fenllt¡ometiI)-butano¡co (Compuesto de Referencia A) de la manera que se ha descripto en WO- 09615096 (Ejemplo 197). Una solución de este material (6,52 g, 15,9 mmol) en etanol absoluto (100 mi) se agitó bajo atmósfera de argón en un baño de hielo (0°C) enfriando a medida que se agregaba en porciones borohidruro de sodio (4,12 g, 109 mmol). La mezcla de reacción se agitó a medida que se fundía el baño de hielo y luego a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla resultante que contenía un sólido blanco significativo se apagó mediante la adición de agua (100 mi), y a continuación se evaporó al vacío hasta casi un tercio de su volumen. La mezcla condensada se mezcló con casi 100 mi de acetato de etilo y luego se mezcló vigorosamente a medida que se apagaba cautelosamente con ácido clorhídrico 1 N hasta que la fase acuosa fue fuertemente acídica (desprendimiento de gas hidrógeno del exceso de borohidruro). La fase acuosa se extrajo y luego la fase orgánica se lavó varias veces con agua, luego con salmuera y a continuación se secó sobre sulfato de sodio y se evaporó al vacío. El residuo se disolvió tanto como fue posible en 100 mi de una mezcla de cloruro de metlleno/metanol (99:1) y luego se filtró para eliminar el sólido blanco que demostró ser un isómero único puro ácido [2S,4S]-4-[4-(4-clorofeniI)fenil]-4hidroxi-2-(fen¡ltiometil)-butano¡co tal como se muestra por HPLC analítico (columna de sílice, 1 ml/minuto, 99:1 de cloruro de metileno/metanol además de 0,05% de ácido acético, pico de detección a 254 nM, este isómero 4-S es el segundo de eluirse). El filtrado fue cromatografiad'o sobre una columna de HPLC preparativa de sílice (46 mm ID) usando el mismo solvente a 80 ml/min para obtener 444 mg del isómero puro 4R por condensación de las mejores fracciones al vacío hasta bajo volumen, enfriando y recogiendo los cristales por filtración. El material sustancial que se eluyó muy tempranamente demostró ser una mezcla de los isómeros de lactona de los ácidos 4-hidroxi que se separaron tal como se muestra en los procedimientos para los Compuestos de Referencia B y C. La evaluación de la RMN de lactonas y la correlación de -estos isómeros con * los de los Ejemplos 1 y 2 condujo a la identificación de la estereoquímica en el carbono 4 de los hidroxiácidos (ver procedimientos para los compuestos B y C). Ejemplo 1 (2S, 4R): MP 122-122°C; HPLC (1 ml/min, 1 % de metanol en cloruro de metlleno además de 0,05% de ácido acético, Rainin columna de sílice 4,6 mm x 25 cm) lR = 10,02 min; [a]D + 64,4° (c 0,55, acetona); 1HRMN (Acetona d6) d 7,12-12,77 (m, 13H), 4,82 (dd, J = 4,08, 8,45 Hz, 1 H), 3,2 (m, 2H), 2,98 (m, 1 H) otros bajo pico de acetona. Ejemplo 2 (2S, 4S); PF 137-138°C; HPLC (condiciones precedentes) 'R = 13,11 min; [ ]D + 28,8° (c. 0,93, acetona); 1HRMN (acetona-d6) d 7,15-15-7,7 (m, 13H), 4,83 (dd, J = 5,88, 8,46 Hz, 1H), 3,25 (d, J = 6,61 Hz, 2H), 2,79 (m, 1 H), 1 ,95-2,25 (m, 2H).

Compuestos de Referencia B y C Aislación de r2S.4R]-4-f4-(4-clorofenil)fenil]-2-(feniltiometil)-?-butirolactona v 2S.4S]-4-[4-í4-clorofen¡l)fenil]-2-(,feniltio-metil)-y-butirolactona: La HPLC preparativa de las fracciones tempranas condensadas de la purificación de ácido [2S,4S y R]-4-[4-(4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidrox¡-2-(feniltiometil)-butanoico en columnas de sílice usando o bien 5% de acetato de etilo en hexano o un gradiente lento de 0-1 % de metanol en cloruro de metileno condujo a la aislación de muestras puras de cada uno de los isómeros de ?-butirolactona (Compuesto de referencia B y C).

La determinación de la estereoquímica relativa alrededor de ios carbonos de anillo quiral puede lograrse identificando la posición relativa de los protones adheridos a estos carbonos, es decir si los pares de protones están en el mismo lado o en lados opuestos del plano del anillo. La espectroscopia de RMN, en particular, una espectroscopia Overhauser nuclear de una dimensión b¡- dimensional (NOESY), es la técnica ideal para resolver este problema, aprovechando las mejoras nucleares diferenciales Overhauser (NOEs) basadas en la proximadad espacial relativa de los protones. Ver, Macura, S. y Ernst, R.R., J. Mol. Biol., 1980, 206, 397. Esto se efectuó para los dos isómeros de la ?- butilactona para demostrar un NOE superior entre H-1 y H-4 del isómero con aquellos protones cis (2S, 4S) a la de los isómeros con los protones trans (2S.4R). Todos los otros NOE observados entre los otros protones en el anillo lactona y CH2 adheridos de los dos isómeros fueron autoconsistentes con esta interpretación. Aunque los hidroxi ácidos cristalinos purificados (Ejemplos 1 y 2) son relativamente estables como sólidos, las soluciones envejecidas de estos compuestos mostraron lentamente una u otra de las lactonas como resultado de que ocurría una lactonización espontánea. Esto se evidenció por el desplazamiento químico de H-4 en ia lactona a 4S a d 540 ppm y la de 4R lactona en d 5,65 ppm. El hidroxi ácido que se convirtió a la lactona 2S, 4R fue identificado por lo tanto como el ácido 2S.4R hidroxi (Ejemplo 1) y ese fue el que se convirtió a la 2S.4S lactona identificada como hidroxi ácido 2S,4S (Ejemplo 2).

El compuesto B (2S.4R): PF 122-123°C; 1HRMN (CDCl3, 500 MHz) d 7,21-7,60 (series de m, 13H H aromático), 5,65 (dd, J = 4,59, 7,98 Hz, 1 H, H-4), 3,55 (dd, J = 3,74, 13,29 Hz, 1 H, SCH), 3,04 (dd, J = 9,97, 13,28 Hz, 1 H, SCH), 2,94-2,98 (m, 1 H, H-2), 2,64-2,70 (m, 1 H, H-3A), 2,46-2,51 (m, 1H, H-3B).

Compuesto C (2S, 4S): PF 142-143°C; 1HRMN (CDCI^, 500 MHz) d 7,21- 7,60 (series de m, 12H, H aromático) 5,40 (dd, J = 5,79, 10,58 Hz, 1 H, H-4), 3,65 (dd, J = 3,50, 13,40 Hz, 1 H, SCH), 2,96 (dd, J = 9,90, 13,37 Hz, 1 H, SCH), 3,02- 3,07 (m, 1 H, H-2), 2,87-2,92 (m, 1H, H-3A), 2,07 (dd, J = 12,26, 23,08 Hz, 1H, H- 3B). Ejemplos 3 y 4 Preparación de Acido [2S.4R]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4R-hidroxi-2-(3-fepilpropiPbutanoico y ácido [2S.4S]-4-[4-(4-clorofenil -fenil]-4-hidroxi-2-(3-fenilpropil)butanoico Se preparó ácido [S]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-oxo-2-(fenilpropil)butanoico (Compuesto de Referencia D) tal como se describió en WO-09615096 (Ejemplo 116). Una solución de este material (1 ,00 g, 2,46 mmol) en etanol absoluto (30 mi) se agitó bajo atmósfera de argón con un baño de hielo (0°C) a medida que se agregaba borohidruro de sodio (0,743 g, 19,6 mmol) en porciones. La mezcla de reacción se agitó al fundirse el baño de hielo y luego a temperatura ambiente durante varios días. La mezcla resultante que contenía un sólido blanco significativo se apagó mediante la adición de agua (150 mi) dé acetato de etilo y la mezcla resultante se agitó vigorosamente mientras se agregaba ácido sulfúrico concentrado por goteo para que la fase acuosa fuera fuertemente acídica. La fase acuosa fue extraída y la fase orgánica se lavó varias veces con agua, se secó sobre sulfato de sodio y evaporó al vacío. El residuo blanco se cromatografió sobre una columna preparativa HPLC (cargada con Prochrom con 13-23 µm de sílice angular) usando 1 % de metanol en cloruro de metileno para proporcionar 292 mg de isómero puro de primera elución y 267 mg de isómero puro de segunda elución. Las ?-lactonas pueden formarse a partir de los isómeros de ácido 4- hidroxicarboxílico por tratamiento de cada uno de ellos por separado con vestigios de ácido toluensulfónico en benceno a reflujo usando una trampa Dean Stark para eliminar el agua. Los experimentos con espectroscopia Overhauser nuclear (NOESY) en las lactonas pueden usarse luego para establecer cuál de estos isómeros de lactona tiene la estereoquímica 4S y cuál tiene la estereoquímica 4R y por consiguiente cuáles de los ácidos hidrocarboxílicos tienen cada estereoquímica puesto que la conversión a lactona no da como resultado un cambio de estereoquímica. Ejemplo 3 (o 4) (Primera elución): PF 103-104°C; HPLC (2 ml/min 1% metanol en cloruro de metileno, Rainin columna de sílice 4,6 mm x 15 cm) *R = 6,55 min; 1HRMN (DMSO-d6) d 12,10 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,46 Hz, 2H), 7,59 (d, J = 84,6 Hz, 2H), 7,48 (D, J = 8,46 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 8,09 Hz, 2H), 7,24 (t, J = 7,36 Hz, 2H), 7,11-7,15 (m, 3H), 5,28 (d, J = 4,78 Hz, 1 H, OH), 4,46-4,52 (m, 1 H), 2,46-2,61 (m, 3H parcialmente bajo DMSO), 1 ,76-1 ,89 (m, 1 H) 1 ,36-165 (m, 5H).

Ejemplo 4 (ó 3) (Segunda elución): PF 155-157°C; HPLC (condiciones precedentes) lR = 9,75 min; 1HRMN (DMSO-d6) d 12,04 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,82 Hz, 2H), 7,60 (d, J = 8,46 Hz, 2H), 7,48 (d, J = 8,46 Hz, 2H), 7,36 (d, J = 8,09 Hz, 2H), 7,22 (t, J = 6,99 Hz, 2H), 7,10-7,15 (m, 3H), 5,28 (bs, 1 H, OH), 4,49 (bm, 1H), 2,3-2,7 (m, 2H bajo DMSO), 2,21-2,28 (m, 1 H), 1 ,88-1 ,97 (m, 1 H), 1 ,4-1 ,65 (m, 5H).

Compuestos de Referencia F Y G Aislación de ácido [2S]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-oxo-2-[(4-hidroxi- fenil)tiometil]butanoico y ácido [2R]-4-[4-(4-clorofenil)fenilj-4-oxo-2-[(4- hidroxifenil)tiometil]butanoico Acido 4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-oxo-2-[(4-hidroxifenil)-tiometil]butano¡co racémico (5,6 g) fue preparado tal como se describió en WO-09615096 (Ejemplo 204). La cromatografía de este material en una fase estacionaria quiral registrada de acuerdo con los procedimientos generales de D. Arlt, B. Boemer, R. Grosser y W. Lange, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 30 (1991) N° 12, páginas 1662 - 1664 se usó para separar este racemato en los enantiómeros. El primer isómero a eluir fue el isómero 2S (1 ,60 g) con un signo más de rotación y el segundo en eluir fue el isómero 2R (1 ,43 g) con un signo negativo de rotación. El compuesto F (2S): MP 130-132°C; HPLC (1 ml/min. 1 % de etanol en hexano, Registrado, columna quiral de 4,6 mm x 25 cm) lR = 7,72 min, 99,6% puro; [a]D + 102,6° fe 0,88, acetona); 1HRMN (CD3OD) d 7,97 (d, J = 8,46 Hz, 2H), 7,69 (d, J = 8,46 Hz, 2H), 7,64 (d, J = 8,45 Hz, 2H); 7,44 (d, J = 8,82 Hz, 2H), 7,28 (d, J = 8,46 Hz, 2H), 6,70 (d, J = 8,82 Hz, 2H), 4,86 (bs, 2H), 2,98-3,54 (series de m, 5H). El compuesto G (2R): HPLC (1 ml/min. 1 % etanol en hexano, Registrado columna quiral de 4,6 mm x 25 cm) lR = 10,80 min, 99,8% puro; [a]D -103,8° (c 10,0, acetona), 1HRMN (CD3OD) igual que el Compuesto C.

Ejemplos 5 y 6 Preparación de ácido [2S,4R]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-h¡droxi-2-[(4- hidroxifenil)tiometilJbutanoico y ácido [2S,4S]-4-[4-(4-clorofenil)fen¡IJ-4-hidrox¡-2- [(4-hidroxifenil)clorometil]butanoico El método general de los Ejemplos 1 y 2 puede usarse para preparar estos compuestos excepto que se usó el Compuesto de Referencia F en vez del ácido [S]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-oxo-2-(feniltiometil)butanoico.

Ejemplos 7 - 16: Los nombres y estructuras se muestran a continuación. El método general de los ejemplos 5 y 6 pueden usarse para preparar los compuestos de los Ejemplos 9 - 20 excepto que los compuestos 4-oxo apropiados son preparados de acuerdo con los procedimientos de WO-09615096 fueron empleados en vez del ácido [S]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-oxo-2-(2-ftaliminoetil)butanoico.

Eiemplos 7 - 8 Preparación de ácido [2S.4R]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-[2-(3-N.N- dietilcarbamoiDfeniletiljbutanoico: ácido [2S,4S')-4-j4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2- [2-(3-N.N-dietilcarbamoil)-fen¡letil]butanoico Ejemplos 9 - 10 Preparación de ácido [2S.4R1-4-(4-pentiloxifenil)fenil]-4-hidroxi-2-(3-feniipropinbutanoico: ácido [2S.4S]-4-f4-(4-pentiloxifenil)fenil]-4-hidrox¡-2-(3-fenilpropiPbutanoico Ejemplos 11 - 12 Preparación de ácido [2S.4R]-4-[4-í4-benciloxifenil)-fenil]-4-hidrox¡-2-(3-fenilpropiKbutanoico y ácido [2S.4S]-4-[4-(4-benciloxi-fenil)-fenil-4-hidroxi-2-(3-fenilpropíPbutanoico Ejemplos 13 - 14 Preparación de (1 S.2R.5S)-trans-5-[(4-(4-clorofenil)-fenil)-S-h¡droximetil]-trans-2- feniltiociclopentancarboxílico y ácido (1 S.2R.5S)-trans-5-[(4-(4-clorofenil)fenil)-R- hidroximetil]trans-2-feniltiociclopentanocarboxílico Ejemplos 15 - 16 Preparación de ácido (1S.2S.5S)-trans-5-[(4-(4-clorofenil)-fenil)-S-hidroximetil]-cis- 2-(2-metoxicarbonilfeniltioVciclopentano-carbox?lico y ácido (1 S.2S.5S)-trans-5- [(4-(4-clorofenip-fenil)-R-hidrox¡metil]-cis-2-(2-metoxicarbonilfeniltio)ciclo-pentano-carboxílico Protocolos Biológicos y datos de Ensayo in vitro Ensayo de Fluorescencia Apagado P218 para Inhibición con MMP El ensayo de fluorescencia apagado P218 (Ensayo de Perfilación Microfluorométrica) es una modificación del descripto originalmente por C.G. Knight et al, FEBS Letters, 296, 263-266 (1992) para un sustrato relacionado y para una variedad de metaloproteinasas de matriz (MMP) en cubetas. El ensayo se llevó a cabo con cada compuesto de ejemplo de la invención y con los tres MMP, MMP-3, MMP-9, y MMP-2, analizados en paralelo, adaptados de la manera siguiente para una placa microtituladora de 96 pozos y una estación de trabajo Hamilton AT®. Sustrato Fluoroaénico P218 P218 es un sustrato sintético que contiene un grupo de 4-acetil-7- metoxicumarina (MCA) en la posición N-terminal y un grupo 3-(2,4-dinitrofenil)-(L)- 2,3-diaminopropionilo (DPA) internamente. Esta es una modificación de un péptido reportado por Knight (1992) que se usó como sustrato para las metaloproteinasas de matriz. Una vez disociado el péptido P218 (sitio de clip putativo en el enlace Ala-Leu) puede detectarse la fluorescencia del grupo MCA en un fluorómetro con excitación a 328 nm y con emisión a 393 nm. El P218 se produce corrientemente mediante BACHEM exclusivamente para Bayer Corp. El P218 tiene la estructura: H-MCA-Pro-Lys-Pro-Leu-Ala- Leu-DPA-Ala-Arg-NH2 (PM 1332.2) Estromelicina CHO Humana recombinante (MMP-3 : Pro-MMP-3 CHO humana recombinante: La pro-estromelisina CHO 257 (pro-MMP-3) se expresó y purificó tal como ha sido descripto por T.J. Housely et al., J. Biol. Chem. 2Ü8, 4481-4487 (1993). La activación de Pro-MMP-3: Pro-MMP-3 a 1 ,72 µM (100 µg/ml) en un buffer de activación MMP-3 que consistía en 5 mM de Tris a pH 7,5, 5 mM CaCI2, 25 mM NaCl, y 0,005% Brij-35 fue activado mediante incubación con TPCK (N-tosil-(L)-fenilalanina clorometil cetona) tripsina (1 :100 p/p a pro-MMP-3) a 25°C durante 30 minutos. La reacción se interrumpió mediante la adición de un inhibidor de tripsina de soja (SBTI; 5,1 p/p a concentración de tripsina). Este protocolo de activación da como resultado la formación de MMP-3 activo de 45 kDa, que contiene aún la porción C-terminal de la enzima.

Preparación de Pro-aelatinasa A recombinante humana (MMP^-2): Pro-MMP-2 recombinante humana: se preparó pro-geiatinasa A humana (pro-MMP-2) usando un sistema de expresión de vacunas de acuerdo con el método de R. Fridman et a., J. Biol. Chem. 2£Z, 15398-405, (1992). Activación de Pro-MMP-2: Pro-MMP2 a 252 mg/ml se diluyó a 1 :5 hasta una concentración final de una solución de 50 mg/ml en un buffer de activación MMP-2 que consistía en 25 nN de Tris a pH 7,5, 5 mM de CaCI2, 150 mM de NaCI, y 0,005% de Brij-33. Se preparó acetato p-aminofeniimercúrico (APMA) a 100 mM (3,5 mg/ml en 0,05 N NaOH. La solución de APMA se agregó a 1/20 del volumen de reacción para una concentración final de APMA de 0,5 mm y la enzima se incubó a 37°C durante 30 minutos. El MMP-2 activado (15 mi) fue dlalizado dos veces versus 2 litros de MMPA-2 de buffer de activación (las membranas de diálisis fueron pretratadas con una solución que consistía en 0,1% de BSA en buffer de activación MMP-2 durante 1 minuto, seguido por un lavado extenso con H2O. La enzima se concentró en concentradores Centricon (los concentrados fueron también pretradados con una solución que consistía en 0,1% de solución BSA en buffer de activación MMP-2 durante 1 minuto seguido por lavado con H2O, y luego con buffer de activación MMP-2), con redilución seguida por reconcentración repetida dos veces. La enzima se diluyó hasta 7,5 mi (0,5 veces el volumen original) con buffer de activación MMP-2. Preparación de Pro-gelatinasa B recombinante humana (MMP-9): Pro-MMP-9 recombinante humana: La pro-gelatinasa B recombinante humana (pro-MMP-9) derivada de ADNc de U397 tal como fue descripta por S. M. Wilhelm et al, Biol, Chem, 264, 17213-17221 (1989) se expresó como forma de longitud total usando un sistema de expresión de proteína de baculovirus. La proenzima fue purificada usando los métodos descriptos previamente por M.S. Hibbs, et al., J. Biol. Chem., 260, 2493-500 (1984).

Activación de Pro-MMP-9: Pro-MMP-9 (20 µg/ml) en un. buffer de activación , de MMP-9 que consistía en 50 mM Tris a pH 7,4, 150 mM NaCI, 10 mM CaCI2 y 0,005%) Brij-35 se activó mediante incubación con un acetato p- aminofenilmercúrico 0,5 mM (APMA) durante 3,5 horas a 37°C. La enzima fue dializada contra el mismo buffer para eliminar APMA. Instrumentación: Hamilton Microlac AT Plus®: El ensayo de perfilación de MMP se llevó a cabo en forma robótica usando un Hamilton MicroLab AT Plus®. El Hamilton se programó a: (1) se diluyó en serie hasta once potenciales inhibidores automáticamente usando una solución de carga de 2,5 mM del inhibidor en 100% de DMSO; (2) se distribuyó el sustrato seguido de inhibidor en una placa Cytofluor de 96 pozos; y (3) se agregó una enzima única a la placa mezclando para comenzar la reacción. Las placas subsiguientes para cada enzima adicional se prepararon automáticamente iniciando el programa en el punto de adición del sustrato, remezclando los inhibidores diluidos, e iniciando la reacción mediante la adición de enzima. De esta manera se efectuaron todos los ensayos MMP usando las mismas diluciones de inhibidor. Millipore Cytoflour II: Después de la incubación, la placa se leyó sobre un lector de placa Cytofluor II fluorométrico con excitación a 340 nM y con emisión a 395 nM con el indicador fijado en 80. Buffers: Buffer de reacción microfluorométrico (MRB): Las diluciones de los compuestos de ensayo, las enzimas y el sustrato P218 para el ensayo microfluorométrico se efectuaron en el buffer de reacción microfluorométrico (MRB) que consistía en 50 mM de ácido 2-(N-morfolino)etansulfónico (MES) a pH 6,5 con 10 mM CaCI2, 150 mM NaCI, 0,005% Brij-35 y 1 % de DMSO. Métodos: Ensayo de perfilación microfíuorométrica MMP: Este ensayo se efectuó con , una concentración final de P218 de 6 µM, aproximadamente 0,5 a 0,8 nM de MMP activado (un MMP por cada placa de 96 pozos), y con concentraciones de inhibidor variables. El Hamilton MicroLab AT Plus® se programó para diluir en forma seriada hasta once compuestos de una carga de 2,5 mM (100% de DMSO) hasta diez veces la concentración de compuesto final en el ensayo. Inicialmente, el instrumento proporcionó varias cantidades de buffer de reacción microfluorométrica (MRB) en un estante de 96 tubos, en tubos de dilución de 1 mi Marsh. El instrumento recogió hasta 20 µL de inhibidor (2,5 mM) y se mezcló con el buffer en la fila A del estante Marsh, dando como resultado una concentración de 50 µM de inhibidor. Los inhibidores fueron luego diluidos en serie hasta 10, 1 , 0,2, 0,05 y 0,01 µM. La posición 1 en el estante de muestra contenía únicamente DMSO para los pozos con "enzima solamente" en el ensayo, que dió como resultado ningún inhibidor en la columna 1, filas A hasta H. El instrumento distribuyó luego 107 µL de P218 a una placa microtituladora Cytofluor única de 96 pozos. El instrumento se remezcló y cargó 14,5 µL de compuesto diluido de las hileras A hasta G en la hilera Marsh hasta las hileras correspondientes en la placa microtituladora. La hilera A representa la hilera "de base". A esto se le agregaron 39,5 µL del buffer de reacción microfluorométrico en lugar de la droga o enzima. La reacción se inició agregando 25 µL de la enzima apropiada (a 5,86 veces la concentración de enzima final) de un depósito de reactivo tratado con BSA a cada uno de los pozos, excluyendo la hilera H, que es la hilera "base". (El depósito de enzima fue pretratado con 1 % de BSA en 50 mM Tris a pH 7,5 que contenía 150 mM de NaCI durante 1 hora a temperatura ambiente seguido por un lavado extenso con H2O y secando a temperatura ambiente). Después de la adición y mezcla de la enzima la placa se cubrió y se incubó durante 25 minutos a 37°C. Se ensayaron las enzimas adicionales de la misma manera iniciando el programa Hamilton con la distribución del sustrato P218 a la placa microtituladora seguido por remezclado y distribución de la droga a partir de la misma hilera Marsh a la placa microtituladora. La segunda MMP (o tercera, etc.) que se ensayó fue luego distribuida desde una hilera de reactivos hasta la placa microtituladora mezclando antes de cubrir e incubar. Determinación de ia Cl50 en ensayo microfluorométrico. Los datos generados en el Cytofluor II se copiaron de un archivo "CSV" exportado a un master Excel spreadsheet. Los datos de varias MMP diferentes (una placa de 96 de pozos por cada MMP), fueron calculados en forma simultánea. El porcentaje de inhibición se determinó para cada concentración de droga comparando la cantidad de hidrólisis (unidades de fluorescencia generada durante 25 minutos de hidrólisis), de los pozos que contenían el compuesto con los pozos que "contenían enzimas solamente" de la columna 1. Después de sustracción de la base, el porcentaje de inhibición se calculó como: ((Valores de Control - Valores Tratados)? alores de Control) x 100 Las inhibiciones porcentuales fueron determinadas para las concentraciones de inhibidor de 5, 1 , 0,5, 0,1 , 0,02, 0,005 y 0,001 µM. El análisis de regresión lineal de la inhibición porcentual versus concentración inhibidora logarítmica se usó para obtener los valores de Cl50.

Datos del Ensayo de Perfilación para Ciertos Compuestos de la Invención Tabla 5 Datos de Perfilaci?n de las MMP. Todos los valores de Cl50 se expresan como nM.

* Los números de ejemplo de los diastereómeros 3 y 4 pueden invertirse, debido, a que la estereoquímica en el átomo de carbono portador del grupo hidroxilo no ha sido determinada. Otras realizaciones de la invención resultarán aparentes para los expertos en la materia a partir de una consideración de esta memoria o mediante la práctica de la invención descripta aquí. Se propone que la memoria y los ejemplos se consideren únicamente ejemplos, indicándose el verdadero alcance y espíritu de la invención mediante las siguientes reivindicaciones.

Claims (16)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto que tiene actividad inhibidora de metal o proteasa de matriz que tiene la fórmula general donde: T es un grupo sustituyente farmacéuticamente aceptable; X es 0, 1 ó 2; m es 0 o un integro de 1-4; n es 0 ó 1 ; y o bien A y G son ambos CH2;

A es un enlace químico y G es CH2;

A es CH o N; y G es a " ~ _ _ y A está conectado a G mediante un enlace formador de anillo que tiene la fórmula (CH2)0.3(Q)(CH2)0-3; donde Q es un enlace químico, S, u O; y C, S, y O consituyen átomos de enlace; se dan como resultado la formación de un anillo que incluye A, dicho enlae formador de anillo y G; con las condiciones de que la suma de n más la cantidad de total de átomos de enlace en dicho enlace formador de anillo es un entero de desde 1 a 4; y la cantidad de heteroatomos en dicho anillo es de 0 ó 1 ; R1 es: * arilo de 6-10 carbonos, con ia condición de que si este grupo arilo es fenilo, entonces X es uno o dos; * heteroarilo que comprende 4-9 átomos de carbono y por lo menos un hetero átomo N, O, o S; * alquenilo arilo-sustítuido donde la porción arilo contiene 6-20 átomos de carbono y la porción alquenilo contiene 2-5 átomos de carbonos; * alquenilo heteroarilo-sistituido donde la porción heteroarilo comprende 4-9 átomos de carbono y por lo menos un heteroatomo N, O o S, y la porción alquenilo contiene 2-5 átomos de carbono; * alquenilo arilo-sustituido donde la porción arilo contiene 6-10 átomos de carbono y la porción alquenilo contiene 2-5 átomos de carbono; * alquenilo heteroarilo-sustituido donde la porción heteroarilo comprende 4-9 átomos de carbono y por lo menos un N, O, o S heteroatomo y la porción alquenilo contiene 2-5 átomos de carbono; *N-ftalimidoilo; *N-(1 ,2-naftalendícarboximidoilo); *N-(2,3-naftalendicarboximidoilo); *N-(1 ,8-naftalendicarboximido¡lo); *N-indoloilo; *N-(2-pirroldinonilo); *N-succinimidoilo; *N-maleimidoilo; *3-hidantoinilo; *1 ,2,4-urazoilo *amido; *un uretano; *una urea; * un heterociclo no aromático sustituido o no sustituido que contiene y que está conectado a través de un átomo de N y que comprende un O o S adicional; *un amino; y *ZR8 en el que Z representa // ; y R8 es: *arilo de 6-10 átomos de carbono; *heteroarilo que comprende 4-9 átomos de carbono y por lo menos un heteroatomo N, O o S; * arilalquilo donde la porción arilo contiene 6-12 átomos de carbono y la porción contiene 1-4 átomos de carbono; o * heteroaril-alquilo donde la porción arilo comprende 4-9 átomos de carbono y por lo menos un heteroatomo N, O, o S y la porción alquilo contiene 1-4 átomos de carbono; y con la condición de que - cuando Z es O, R8 puede ser también alquilenoxi o polialquilenoxi terminado con H, alquilo o fenilo. Arilo o porciones heteroarilo de cualquiera de los grupos T o R1 que pueden ser portadores opcionalmente de hasta dos sustituyentes que están seleccionados del grupo que consiste en -(CH2)yC(R11)(R12)OH, -(CH2)yOR11, -(CH2)ySR11, -(CH2)yS(O)R11, -(CH2)yS(O)R11, 2z)/yyN(R 1)COR12, -OC(R11)2O- en el que ambos átomos de oxígeno están nl n a oll a onillllo a aririllno, 11, (CH2)yCON(R11)2) -(CH2)yCO2R11, -(CH2)yOCOR11, -halógeno, -CHO, -CF3, -NO2, -CN, y -R12, en el que y es 0-4; R11 representa H o alquilo inferior de 1-4 átomos de carbono; y R12 representa alquilo inferior de 1-4 átomos de carbono. siendo dicho compuesto una mezcla de diastereómeros, o un diastereómero único que tiene la actividad inhibidora de MMP más alta que los diastereómeros que constituyen dicha mezcla de diastereómeros; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. 2. El compuesto de la reivindicación 1 donde A es CH2; G es CH2 y n es 0; teniendo dicho compuesto la fórmula donde T, x, m, y R1 son tal como se han definido en la reivindicación 1. 3. El compuesto de la reivindicación 2 donde m es O, 1 , o 2; y cuando m es O, R1 es cuando m es 1, R1 es cuando m es 2, R es ; y

4. El compuesto de la reivindicación 3 donde T es halógeno o bien OR6 donde R6 es alquilo de 1-6 átomos de carbono o bencilo; x es 1 ; m es 0 o 2; cuando m es 0, R1 es ; y cuando m es 2, R1 es

5. Un compuesto de la reivindicación 2 que tiene el nombre ácido 4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-(fenilt¡ometil)butanoico; ácido [2S, 4R]-4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-(feniltiometil)-butanoico; ácido 4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-[(4-hidroxifenil)-tiomet¡l]-butanoico; ácido 4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-(3-fenilprop¡I)butanoico; ácido 4-[4-(4-clorofenil)fenil]-4-hidroxi-2-[2-(3-N,N-dietilcarbamo¡l)-feniletil] butanoico; ácido 4-[4-(4-pentilox¡fenil)fenll]-4-h¡droxi-2-(3-fen¡iprop¡l) butanoico; ácido 4-[4-(4-benciloxifenil)fenil]-4-hidroxi-2-(3-fenilpropil) butanoico; ácido 4-[4r(4-clorofenil)feníl]-4-hidrox¡-2-(2-ftal¡d¡midoet¡l) butanoico;

6. El compuesto de la reivindicación 1 donde n es 0 o 1 ; y A es CH o N; y G es CH; y A está conectado a G mediante un enlace formador de anillo que tiene la fórmula: (CH2)0-3(Q)(CH2)0.3; donde Q es un enlace químico, S, u O; y C, S, y O constituyen átomos de enlace; que da como resultado la formación de un anillo que incluye A, dicho enlace formador de anillo es G; y teniendo dicho compuesto la fórmula con las condiciones de que la suma de n más la cantidad total de átomos de enlace en dicho enlace formador de anillos es un entero de 1 a 4; y la cantidad de heteroátomos en dicho anillo es 0 o 1; T, x, m, y R1 son tal como se han definido en ia reivindicación 1.

7. El compuesto de la reivindicación 6 donde n es 0; A es CH; Q es un enlace químico; y dicho enlace formador de anillo es -(CCH2)2; y dicho compuesto tiene la fórmula

8. El compuesto de la reivindicación 7 donde T es halógeno u OR6 donde R6 es alquilo de 1-6 átomos de carbono o bencilo; x es 1 ; m es 0 o 1 ; y cuando m es 0, R1 es ; y cuando m es 1 , R1 es

9. Un compuesto de la reivindicación 6, que tiene el nombre ácido trans-5-[(4-4-clorofen¡l)feníl)hidroximet¡l]-trans-2-fenilt¡ociclopentano- carboxílico; ácido trans-5-[(4-(4-clorofenil)feníl)hidroximet¡l]-cis-2-(2-metoxicarbonil- feniltio)ciclopentanocarboxílico; y ácido trans-5-[)4-(4-clorofenil)fenil)hidroximetiI]-trans-2-ftalimidometilciclo- pentanocarboxílico.

10. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 y un portador farmacéuticamente aceptable.

11. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 y un portador farmacéuticamente aceptable.

12. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 6 y un portador farmacéuticamente aceptable.

13. Un método para tratar una condición intermediada por una metaloproteasa de matriz en un mamífero para lograr un efecto, que comprende administrar a dicho mamífero una cantidad de un compuesto.de la reivindicación 1 que es eficaz para tratar dicha condición.

14. El método de la reivindicación 13 donde dicho mamífero es un ser humano.

15. El método de la reivindicación 13 donde dicho efecto es: alivio de osteoroartritis, artritis reumatoide, artritis séptica, enfermedades periodontales, ulceración corneana, proteinuria, enfermedad aórtica aneurismal, epidermólisis hullosa distrofóbica, condiciones que conducen a respuestas inflamatorias, osteopenias intermediadas para actividad MMP, enfermedades tempero mandibulares articulares, o enfermedades desmielimisantes del sistema nervioso; retardo de metástasis tumoral o pérdida degenerativa de cartílagos después de baños traumáticos articulares; reducción de la trombosis coronaria por la ruptura de placas ateroscleróticas; o mejor control de la natalidad; y dicha cantidad de compuesto de la reivindicación 1 es eficaz para inhibir la actividad de por lo menos una metaloproteasa de- matriz en dicho mamífero, obteniendo de este modo dicho efecto.

16. Un método para preparar un compuesto que tiene la fórmula que comprende: reducir a un grupo hidroxilo en la cetona carbonilo en un compuesto que tiene la fórmula 1 donde T, x, G, n, A, m y R1 son tal como se han definido en la reivindicación 1.