MXPA98009014A - Inhibidores de la proteina cinasa c, halo-sustituidos - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a nuevos compuestos de bis-indolmaleimida halo-sustituidos de la fórmula. La invención proporciona además un método de preparación de los compuestos expuestos y la preparación de la formulación farmacéutica para uso de la inhibición de la Proteína Cinasa C en mamíferos.

Description

Inhibidores de la Proteina Cinasa C, Halo-Sustituidos La proteína cinasa C (PCC) consiste de una familia de enzimas estrechamente relacionadas que funcionan como cinasas de serina/treonina. La proteína cinasa C juega un papel importante en la señalización, la expresión de gen y en la diferenciación y crecimiento celular. En el presente, existen actualmente al menos diez isozimas conocidas de la PCC que difieren en su distribución de tejido, especificidad enzimática, y regulación. Nishizuka Y. Annu. Rev. Biochem. 5_a: 31-44 (1989); Nishizuka Y. Science 258: 607-614 (1992).

Las isozimas de la proteína cinasa C son cadenas de polipéptidos simples que se encuentran en el rango de 592 a 737 aminoácidos de longitud. Las isozimas contienen un dominio regulatorio y un dominio catalítico conectado mediante un péptido enlazador. Los dominios regulatorios y catalíticos pueden subdividirse además en regiones constantes y variables. El dominio catalítico de la proteína cinasa C es muy similar al observado en otras proteínas cinasas mientras que el dominio regulatorio es único a las isozimas de PCC. Las isozimas PCC demuestran entre 40-80% de homología en el nivel de aminoácido entre el grupo. Sin embargo, la homología de una isozima simple entre las especies diferentes es en REF.: 028760 general mayor de 97%.

La proteína cinasa C es una enzima asociada por membrana que se regula alostéricamente mediante un número de factores, que incluyen fosfolípidos membranales, calcio y ciertos lípidos membranales tales como diacilgliceroles que se liberan en respuesta a las actividades de las fosfolipasas . Bell, R.M. and Burns, D.J., J. Biol. Chem. 266: 4661-4664 (1991); Nishizuka Y. Science 258: 607-614 (1992). Las isozimas de la proteína cinasa C, alfa, beta-1, beta-2 y gama requieren el fosfolípido membranal, calcio y esteres de diacilglicerol/forbol para la activación total. Las formas delta, epsilon, eta y teta de la PCC son independientes de calcio y su forma de activación. Las formas zeta y lambda de la PCC son independientes de calcio y diacilglicerol y se cree que requieren solo el fosfolípido membranal para su activación.

Sólo uno o dos de las isozimas de la proteína cinasa C podría involucrarse en un estado de enfermedad dado . Por ejemplo, los niveles de glucosa sanguíneos elevados encontrados en la diabetes conducen a una elevación específica de la isozima beta-2 en los tejidos vasculares. Inoguchi et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 89: 11059-11065 (1992) . Una elevación enlazada con la diabetes de la isozima beta en las plaquetas de humano se ha correlacionado con su respuesta alterada a agonistas. Bastyr III, E.J. and Lu, J. Diabetes 42: (Suppl. 1) 97A (1993). El receptor de la vitamina D de humano se ha mostrado que es selectivamente fosforilatada por la proteína cinasa C beta. Esta fosforilación se ha enlazado a alteraciones en el funcionamiento del receptor. Hsieh et al., Proc. Nati. Acad. Sci- USA 88: 9315-9319 (1991); Hsieh et al., J. Biol. Chem. 268: 15118-15126 (1993) . Además, el trabajo reciente ha mostrado que la isozima beta-2 es la responsable para la proliferación celular de eritroleucemia mientras que la isozima alfa está involucrada en la diferenciación de megacariocito en estas mismas células . Murray et al . , J. Biol- Chem. 268: 15847-15853 (1993) .

La naturaleza ubicua de las isozimas de la proteína cmasa C y sus papeles importantes en la fisiología proporcionan inventivos para producir inhibidores de PCC altamente selectivos. Dada la evidencia que demuestra el enlazamiento de ciertas isozimas a los estados de enfermedades, es razonable asumir que los compuestos inhibidores que son selectivos a otras isozimas de PCC y otras proteínas cinasas son agentes terapéuticos superiores . Tales compuestos deberían demostrar mayor eficiencia y menor toxicidad en virtud de su especificidad.

La estaurosporina, un indolcarbazol microbiano, es un potente inhibidor de la proteína cinasa C que interactúa con el dominio catalítico de la enzima. Tamaoki et al., Biochem.

Biophys. Res. Commun. 135: 397-402 (1986); Gross et al., Biochem. Pharmacol. 40: 343-350 (1990) . Sin embargo, la utilidad terapéutica de esta molécula y los compuestos estrechamente relacionados se limita por la carencia de especificidad para la proteína cinasa C sobre otras proteínas cinasas. Ruegg, U.T. and Burgees, GM., Trends Pharmacol . Sci . 10.: 218-220 (1989) . Esta carencia de selectividad resulta en la toxicidad inaceptable en esta clase de moléculas .

Una clase adicional de compuestos relacionados con la estaurosporina, la bisindolmaleimidas, ha sido el foco del trabajo reciente. Davis et al., FEBS Lett. 259: 61-63 (1989); Twoeny et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 171: 1087-1092 (1990); Toullec et al., J. Biol. Chem. 266: 15771-15781 (1991); Davis et al., J. Med. Chem. 35: 994-1001 (1992); Bitetal., J.Med. Chem. 36: 21-29 (1993). Algunos de estos compuestos han demostrado selectividad para la proteína cinasa C sobre otras proteínas cinasas.

Aunque los compuestos que demuestran especificidad a la proteína cinasa C han sido descubiertos, muy poco se conoce con respecto a la selectividad de isozima. Por ejemplo, el análisis de la selectividad de isozima de la estaurosporina, muestra pequeña selectividad de isozima con la excepción de la pobre inhibición de la isozima zeta con relación a otras enzimas. 50 McGlynn et al., J. Cell. Biochem. 49: 239-250 (1992); Ward, N.E., and O'Brian, C.A., Malee. Pharmacol. 41: 387-392 (1992) . Los estudios del compuesto selectivo de PCC, 3- [1- (3-dimetilaminopropil) -indol-3-il] -4- (lH-indol-3-il) -1H-pirrol-2, 5-diona, sugiere una ligera selectividad para las isozimas dependientes de calcio. Toullec et al., J. Biol. Chem. 266: 15771-15781 (1991) . Los estudios subsecuentes de este compuesto no observó diferencia, o posiblemente ligera selectividad, para isozimas alfa sobre beta-l y beta-2. Martiny-Baron et al., J. Biol. Chem. 268: 9194-9197 (1993); Wilkinson, et al., Biochem J. 294: 335-337 (1993).

Por lo tanto, a pesar de los años de investigación y la identificación de clases de compuestos que inhiben la proteína cinasa C contra otras proteínas cinasas, permanece una necesidad para los inhibidores selectivos de isozima terapéuticamente efectivos. Los inhibidores selectivos de la isozima tienen utilidad en el tratamiento de condiciones asociadas con la diabetes mellitus y sus complicaciones, además del tratamiento de isquemia, inflamación, desórdenes del sistema nervioso central, enfermedad cardiovascular, enfermedad dermatológica y cáncer.

Una modalidad de la presente invención son los inhibidores de PCC de la fórmula I : en donde; R1 es independientemente hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo Cx-C4, alcoxi Cj_-C4, NR3R4 o -NHCO (alquilo Ci-C ; T es alquileno opcionalmente sustituido con halo o alquilo C1.-C4; W es alquileno C^-Ca opcionalmente sustituido con halo o alquilo Cx-C4; J es -X- C- o cuando T y W son ambos metileno, J se selecciona del grupo que consiste de en donde n y m son independientemente 1 o 2 ; X es oxígeno, azufre o un enlace entre los átomos de carbono unidos por el puente X; Y es halo, alquilo Cj.-C.-i o hidrógeno; RL es hidrógeno o alquilo C^Cj,- S es -CHO o el grupo en donde M es hidrógeno, -CH2OR5, -CH2NR3R4 o -NR3R4; R2 es hidrógeno o halo; Z es hidrógeno o -0R6; en donde R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo C^-C^, halo(alquilo C1-C4) , alcanoilo C?.-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros; y R5 y Rs son independientemente hidrógeno, alquilo C^-C^, halo(alquilo C3.-C , alcanoilo Ci-C halo (alcanoilo C3.-C o juntos forman un grupo divalente seleccionado del grupo que consiste de -CR7R8- en donde R7 y R3 son independientemente hidrógeno, alquilo d-d o halo (alquilo Cx-C4) o R7 y Rß tomados junto con el átomo C al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros con la condición de que al menos uno de Y, S, T o W es halo o un grupo halo sustituido, o T y W son ambos metileno.

De acuerdo con otra modalidad de la presente invención los nuevos intermediarios de la Fórmula II también se proporcionan: en donde R' es independientemente hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo ; V es oxígeno o CH3 I -N-; T es alquileno Ci-C,, opcionalmente sustituido con halo o alquilo C-C,,; es alquileno Cj.-C4 opcionalmente sustituido con halo o alquilo Ci-C,; J es Y I -x-c- I s o cuando T y W son ambos metileno, J se selecciona del grupo que consiste de en donde n y m son independientemente 1 o 2 ; X es oxígeno, azufre o un enlace entre el átomo de carbono unido por el puente X Y es halo, alquilo Cx-C4 o hidrógeno; S es -CHO o el grupo en donde M es hidrógeno, -CH2OR5, -CH2NR3R4 o -NR3R4; R2 es hidrógeno o halo; Z es hidrógeno o -0R6; en donde R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo C-.-C4, halo(alquilo Ct-C4) , alcanoilo -d, halo (alcanoilo Ci- J o tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros; y R5 y R6 son independientemente hidrógeno, alquilo Cj.-C4, halo(alquilo 03.-04), alcanoilo C..-C4, halo (alcanoilo Ci-C o juntos forman un grupo divalente seleccionado del grupo que consiste de -CR7Ra- en donde R7 y R¡¡ son independientemente 5 hidrógeno, alquilo Cj.-C4 o halo (alquilo C1.-C4) o R7 y Rs tomados junto con el átomo C al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros con la condición de que al menos uno de Y, S, T o W es halo o un grupo halo sustituido, o T y W son ambos metileno.

• Un aspecto de la presente invención es un método o preparación de los compuestos de la Fórmula I que comprende las etapas de combinación a una concentración de aproximadamente 0.001 molar a aproximadamente 1.5 molar de un compuesto de la fórmula: • en donde V es oxígeno o NCH3 , R' es independientemente hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo Cx-C4, alcoxi d-C*,, NR3R4 o -NHCO (alquilo Ci-C ; y un agente de alquilación a una concentración de aproximadamente 0.001 a aproximadamente 1.5 molar de la fórmula: L L \ / T W \ ^ en donde L es un grupo saliente; T es alquileno d-C3 opcionalmente sustituido con halo o alquilo CL-C4; W es alquileno Cj.-C4 opcionalmente sustituido con halo o alquilo Cj.-C4; J es -X-C- I s o cuando T y W son arabos metileno, J se selecciona del grupo que consiste de en donde n y m son independientemente 1 o 2 ; X es oxígeno, azufre o un enlace entre el átomo de carbono unido por el puente X Y es halo, alquilo Cx-C4 o hidrógeno; S es -CHO o el grupo en donde M es hidrógeno, -CH2OR5, -CH2NR3R4 o -NR3R4; R2 es hidrógeno o halo; y Z es hidrógeno o -0RS; en donde R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo Cj.-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros; y Rs y R6 son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo C1.-C4) o juntos forman un grupo divalente seleccionado del grupo que consiste de -CR7R8- en donde R7 es hidrógeno o metilo y R8 es alquilo Cx-C4 o halo (alquilo Cx-C4) o tomados juntos con el átomo C al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros, y aproximadamente 0.5 a aproximadamente 10 equivalentes de Cs2C03 a una velocidad de aproximadamente 0.1 mL/hora a aproximadamente 2.0 mL/hora en un solvente aprótico polar.

De acuerdo con una modalidad de la presente invención, se proporciona un compuesto de fórmula III: en donde; Rx es alquilo Cx-C4 o hidrógeno; T es alquileno C2-C4 opcionalmente sustituido con halo o alquilo Cx-C4; W es etileno opcionalmente sustituido con halo o alquilo C - C • X es oxígeno, azufre o un enlace entre el átomo de carbono unido por el puente X; Y es halo, alquilo Cx-C4 o hidrógeno; S es -CHO o el grupo en donde M es hidrógeno, -CH2OR5, -CH2NR3R4 o -NR3R4; R2 es hidrógeno o halo; y Z es hidrógeno o -0R6; en donde R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros; y R5 y Rs son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o juntos forman un grupo divalente seleccionado del grupo que consiste de -CR7R8- en donde R7 es hidrógeno o metilo y R8 es alquilo Cx-C4 o halo (alquilo Cx-C4) o tomados juntos con el átomo C al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros , con la condición de que al menos uno de Y, S, T o W es halo o un grupo halo sustituido.

En otra modalidad de la presente invención se proporciona un compuesto de Fórmula IV: en donde J se selecciona del grupo que consiste de en donde n y m son independientemente 1 o 2 ; y R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros.

De acuerdo con una modalidad de la presente invención, se proporciona un método de inhibición de la actividad de la PCC. El método comprende la administración a un mamífero en necesidad de tal tratamiento, una cantidad farmacéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula I . La presente invención también se refiere a un método de inhibir selectivamente las isozimas de la proteína cinasa C beta-1 beta-2, el método comprende la administración a un mamífero en necesidad de tal tratamiento de una cantidad farmacéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula I.

La invención también proporciona métodos para el tratamiento de las condiciones que la proteína cinasa C ha sido demostrada teniendo un papel en la patología, tal como isquemia, inflamación, desórdenes del sistema nervioso central, enfermedades cardiovasculares, enfermedades dermatológicas y cáncer. El método comprende la administración a un mamífero en necesidad del tratamiento de una cantidad farmacéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula I .

Esta invención es particularmente útil en el tratamiento de complicaciones diabéticas. Por lo tanto, la presente invención también proporciona un método para el tratamiento de diabetes mellitus, el cual comprende la administración a un mamífero en necesidad de tal tratamiento de una cantidad farmacéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula I .

En otro aspecto de esta invención es una formulación farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula I junto con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, vehículos o diluyentes .

Descripción Detallada de la Invención Como se observó anteriormente, la invención proporciona compuestos de la Fórmula I que inhiben selectivamente la proteína cinasa C. Los compuesto preferidos de esta invención son aquellos de la Fórmula I en donde los radicales -T-J-W contienen de 4 a 8 átomos, que podrían ser sustituidos o insustituidos (con grupos halo o alquilo) . Más preferentemente, los radicales -T-J-W contienen 6 átomos. Otros compuestos preferidos de esta invención son aquellos de la Fórmula I en donde Rx es hidrógeno, y J es Y I •o-c- I s Un grupo preferido de los compuestos son los compuestos de la Fórmula V: en donde; Rx es alquilo Cx-C4 o hidrógeno; T es alquileno C2-C4 opcionalmente sustituido con halo o alquilo Cx-C4; W es etileno opcionalmente sustituido con halo o alquilo Cx-C4 X es oxígeno, azufre o un enlace entre el átomo de carbono unido por el puente X; Y es halo, alquilo Cx-C4 o hidrogéne¬ M es hidrógeno -CH2OR5 , -CH2NR3R4 o -NR3R4 R2 es hidrógeno o halo; Z es hidrógeno o -0RS; en donde R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros; y R5 y R6 son independientemente hidrógeno, alquilo C3.-C4, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o juntos forman un grupo divalente seleccionado del grupo que consiste de -CR7R¡¡- en donde R7 es hidrógeno o metilo y Rß es alquilo Cx-C4 o halo (alquilo Cx-C4) o tomados juntos con el átomo C al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros, y en donde al menos uno de Y, R2, Z, M, T o W es halo o un grupo halo sustituido, más preferentemente, flúor o grupo sustituido con flúor.

Los compuestos preferidos de la Fórmula V incluyen los compuestos en donde X es oxígeno, Rx es hidrógeno, T es alquileno C2-C3, opcionalmente sustituido y W es etileno, opcionalmente sustituido. Preferentemente T y/o W se sustituyen con uno o más grupos flúor.

En otra modalidad de la presente invención se proporciona un compuesto de Fórmula VI: en donde J se selecciona del grupo que consiste de en donde Rx es alquilo o hidrógeno; n y m son independientemente 1 o 2 ,- y R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros .

El término "halo" representa flúor, cloro, bromo o yodo.

El término "alquilo Cx-C4" se refiere a un ciclo, grupo alquilo de cadena lineal o ramificada, que tiene de uno a cuatro átomos de carbono tales como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, ciclobutilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, t-butilo y similares. Similarmente, un "alquilo C2-C4" representa un ciclo, grupo alquilo de cadena lineal o ramificada, que tiene de uno a cuatro átomos de carbono. Un grupo haloalquilo es un grupo alquilo sustituido con uno o más átomos halo, preferentemente de uno a tres átomos halo. Un ejemplo del grupo haloalquilo es trifluorometilo. Un alcoxi Cx-C4 es un grupo alquilo Cx-C4 enlazado covalentemente por medio del enlace -0- .

El término "alquileno Cx-C4" es un radical alquileno de cadena lineal de la fórmula -(CH2)-, en donde r es uno a cuatro. Los ejemplos de alquileno Cx-C4 incluyen metileno, etileno, trimetileno, tetrametileno y similares. Similarmente, "un alquileno C2-C4" representa un alquileno de cadena lineal de dos a cuatro carbonos.

El término "alquileno Cx-C4" representa un hidrocarburo de cadena lineal de uno a cuatro carbonos que contiene uno o más enlaces dobles, típicamente uno o dos enlaces dobles. Lo ejemplos de grupos alquenileno C2-C4 incluyen etenileno, propenileno, y l, 3-butadieneilo.

El término "alcanoilo Cx-C4" es el residuo acilo de un ácido carboxílico Cx-C4. Ejemplos de grupos alcanoilo Cx-C4 son acetilo, propanoilo, butanoilo y similares. Un grupo haloalcanoilo es un grupo alcanoilo sustituido con uno o más átomos halo, típicamente de uno o tres átomos halo. Un ejemplo de un grupo haloalcanoilo es trifluoroacetilo.

El término "grupo saliente" como se usa en la especificación se entiende por aquellos expertos en el arte. En general, un grupo saliente es cualquier grupo o átomo que mejora la electrofilicidad del átomo al cual se une para el desplazamiento. Los grupos salientes preferidos son triflato, mesilato, tosilato, imidato, cloruro, bromuro y yoduro.

El término "grupo protector carboxi" (P) como se usa en la especificación se refiere a uno de los derivados éster del grupo ácido carboxílico comúnmente empleado para bloquear o proteger el grupo ácido carboxílico mientras que las reacciones se llevan a cabo sobre los otros grupos funcionales en el compuesto. Las especies del grupo protector carboxi empleado no es crítico con tal de que el ácido carboxílico derivado sea estable para la condición de las reacciones subsecuentes y puede removerse en el punto apropiado sin interrumpir el resto de la molécula. T.W. Greene and P. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis , John Wiley and Sons, New York, N.Y., 1991, Capítulo 5, proporciona una lista de los grupos protectores comúnmente empleados. Ver también E. Haslam, Protective Groups in Organic Chemistry, J.G.W. McOmie, Ed. , Plenum Press, New York, N.Y., 1973. Un término relacionado es "carboxi protegido" el cual se refiere a un grupo carboxi protegido con un grupo protector carboxi .

El término "grupo protector hidroxi" (P) como se usa en la especificación se refiere a uno de los derivados éter o éster del grupo hidroxi comúnmente empleado para bloquear o proteger el grupo hidroxi mientras que las reacciones se llevan a cabo sobre los grupos funcionales en el compuesto. Las especies del grupo protector hidroxi empleado no es crítico con tal de que el grupo hidroxi derivado sea estable a la condición de las reacciones subsecuentes y puede removerse en el punto apropiado sin interrumpir el resto de la molécula. T.W. Greene and P. Wuts, Protective Groups in 5 Organic Synthesis. John Wiley and Sons, New York, N.Y., 1991, Capítulo 5, proporciona una lista de los grupos protectores comúnmente empleados . Los grupos protectores hidroxi preferidos son ter-butildifenilsiloxi (TEDPS) , ter- butildimetilsililoxi (TBDMS) , trifenilmetil (tritil) , ¿K 10 metoxitritil, o un alquil o aril éster. Un término relacionado es "hidroxi protegido" el cual se refiere a un grupo hidroxi protegido con un grupo protector hidroxi.

El término "grupo protector amino" (P) como se usa en la especificación se refiere a los sustituyentes del grupo amino comúnmente empleado para bloquear o proteger la funcionalidad amino mientras que reaccionan otros grupos funcio-aales en el compuesto. Las especies del grupo protector a ino empleadas no es crítico con tal de que el grupo amino derivado sea estable a la condición de las reacciones subsecuentes y puede removerse en el punto apropiado sin interrumpir el resto de la molécula. T.W. Greene and P. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis . John Wiley and Sons, New York, N.Y., 1991, Capítulo 7, proporciona una lista de los grupos protectores comúnmente empleados. Ver también J. W. Barton, Protective Groups in Organic Chemistry, Capítulo 2. Los grupos protectores amino preferidos son t-butoxicarbonilo, ftalida, un alquilo cíclico y benciloxicarbonilo. El término relacionado "amino protegido" define un grupo amino sustituido con un grupo protector amino como se definió.

El término "grupos protectores -NH" como se usa en la especificación se refiere a la sub-clase de los grupos protectores amino que se emplean comúnmente para bloquear o proteger la funcionalidad -NH mientras que reaccionan otros grupos funcionales en el compuesto. Las especies del grupo protector empleado no es crítico con tal de que el grupo amino derivado sea estable a la condición de las reacciones subsecuentes y pueda removerse en el punto apropiado sin interrumpir el resto de la molécula. T.W. Greene and P. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York, N.Y., 1991, Capítulo 7, página 362-385, proporciona una lista de los grupos protectores comúnmente empleados. Los grupos protectores -NH preferidos son carbamato, amida, alquil o aril sulfonamida. El término relacionado "NH protegido" define un grupo sustituido con un grupo protector -NH como se definió.

El término "cantidad farmacéuticamente efectiva", como se define aquí, representa una cantidad de un compuesto de la invención que es capaz de inhibir la actividad de PCC en los mamíferos. La dosis particular del compuesto administrado de acuerdo a esta invención, se determinará, por supuesto, mediante las circunstancias particulares que rodean el caso, incluyendo el compuesto administrado, la ruta de administración, la condición particular a ser tratada y consideraciones similares. Los compuestos pueden administrarse mediante una variedad de rutas incluyendo las rutas oral, rectal, transdérmica, subcutánea, tópica, intravenosa, intramuscular o intranasal. Para todas las indicaciones, una dosis típica diariamente contendrá de aproximadamente 0.01 mg/kg a aproximadamente 20 mg/kg del compuesto activo de esta invención. Las dosis diariamente preferidas será de aproximadamente 0.05 a aproximadamente 10 mg/kg, idealmente aproximadamente 0.1 a aproximadamente 5 rog/kg. sin embargo, para la administración tópica una dosificación típica es de aproximadamente 500 µg de compuesto por cm2 de un tejido afectado. Preferentemente, la cantidad aplicada de compuesto se encontrará en el rango de aproximadamente 30 a aproximadamente 300 µg/cm2, más preferentemente, de aproximadamente 50 a aproximadamente 200 µg/cm2, y, más preferentemente, de aproximadamente 60 a aproximadamente 100 µg/cm2.

El término "tratamiento", como se usa aquí, describe el manejo y cuidado de un paciente para el propósito de combatir la enfermedad, condición, o desorden e incluye la administración de una cantidad de la presente invención para prevenir el inicio de los síntomas o complicaciones, aliviar los síntomas o complicaciones, o eliminar el tejido, condición o desorden.

El término "selectivo de isozima" significa la inhibición preferencial de la isozima de la proteína cinasa C (o subgrupo) sobre las otras isozimas. Por ejemplo un compuesto podría inhibir selectivamente las isozimas beta-1 o beta-2 sobre las isozimas alfa, gama, delta, epsilon, zeta y eta de la proteína cinasa C. En general, los compuestos selectivos de isozimas demuestran un mínimo de una diferencial de ocho veces (preferentemente una diferencial de diez veces) en la dosificación requerida para inhibir un subtipo comparado a la dosificación requerida para la inhibición igual o un subtipo diferente (por ejemplo, la inhibición de la isozima beta-1 o beta-2 de PCC conforme se compara con la isozima alfa de la proteína cinasa C) conforme se mide en la prueba de la PCC. Los compuestos demuestran esta diferencial a través del rango de inhibición y se ejemplifican en el IC50, p. ej . , un 50% de inhibición. Así, por ejemplo, un compuesto selectivo de isozima beta-l y beta-2 inhibe las isozimas beta-1 y beta-2 de la proteína cinasa C a concentraciones muy inferiores con la toxicidad inferior en virtud de su inhibición mínima de las otras isozimas de la CC.

Los compuestos de la fórmula I que tienen un radical básico, p. ej. NR3R4, también podrían estar en la forma de sus sales de adición acida farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los ácidos comúnmente empleados para formar tales sales incluyen ácidos inorgánicos tales como, ácido clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, sulfúrico y fosfórico, además de ácidos tales como para-toluensulfónico, metansulfónico, oxálico, para-bromofenilsulfónico, carbónico, cítrico, benzoico, ácido acético y ácidos inorgánicos y orgánicos relacionados . Tales sales farmacéuticamente aceptables incluyen de esta manera sulfato, pirosulfato, bisulfito, fosfato, monohidrogenfosfato, dihidrogenfosfato, metafosfato, pirofosfato, cloruro, bromuro, yoduro, acetato, propionato, decanoato, caprilato, acrilato, formato, isobutirato, heptanoato, propionato, oxalato, malonato, succinato, suberato, sebacato, fumarato, maleato, 2-bu in-1,4-dionato, 3-hexin-2, 5-dionato, benzoato, clorobenzoato, hidroxibenzoa o, metoxibenzoato, ftalato, xilensulfonato, fenilacetato, fenilpropionato, fenilbutirato, citrato, lactato, hipurato, ß-hidroxibutirato, glicolato, maleato, tartrato, metansulfonato, propansulfonato, naftalen-1-sulfonato, naftalen-2 -sulfonato, mandelato y las sales similares .

Además de las sales farmacéuticamente aceptables, pueden usarse otras sales de acuerdo con la presente invención. Estos podrían servir como intermediarios en la purificación de los compuestos, en la preparación de otras sales, o en la identificación y caracterización de los compuestos o intermediarios .

Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la Fórmula I también pueden existir como varios solvatos, tales como con agua, metanol, dimetilformamida acetato de etilo y similares. Las mezclas de tales solvatos también pueden prepararse. La fuente de tales solvatos puede ser del solvente de cristalización, inherente en el solvente de la preparación o cristalización, o extrínseco a tales solventes. Tales solvatos están dentro del alcance de la presente invención.

Las varias formas estereoisoméricas de los compuestos de la Fórmula I podrían existir; por ejemplo, T o W podrían incluir un átomo de carbono quiral en el radical alquileno sustituido. Los compuestos de la Fórmula I se preparan típicamente como racematos y pueden usarse convenientemente como tales, pero los enantiómeros individuales pueden aislarse o sintetizarse mediante técnicas convencionales si así se desea. Tales racematos y enantiómeros individuales y mezclas de los mismos forman parte de la presente invención.

La presente invención también abarca las prodrogas farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la Fórmula I . Una prodroga es un fármaco que ha sido químicamente modificado o podría ser biológicamente inactivo (en el sitio de acción de la enzima) , pero puede degradarse o modificarse por uno o más procesos enzimáticos o otros procesos in vivo para producir la forma bioactiva de origen. La prodroga tiene preferentemente un perfil farmacocinético diferente que el origen, mejorando más fácil la absorción a través de la mucosa epitelial, mejor formación de sal o solubilidad, y/o estabilidad sistemática mejorada (por ejemplo, un aumento en la vida media del plasma) . Se describen procedimientos convencionales para la selección y preparación de derivados de prodrogas específicos, (por ejemplo, en H. Bundgaard, Design of Prodrugs, (1985) . Típicamente, tales modificaciones químicas incluyen lo siguiente: 1) derivados de éster o amida los cuales podrían romperse mediante esterasas o lipasas; 2) péptidos que pueden reconocerse mediante proteasas específicas o no específicas; o 3) derivados que se acumulan en el sitio de acción a través de la selección membranal de una forma de prodroga; o una forma de prodroga modificada, o cualquier combinación de 1 a 3, supra .

La síntesis de ciertos derivados bis-indol-N-maleimida se describe en Davis et al., Patente U.S. 5,057,614, la exposición de la cual se incorpora aquí por referencia. En general, los compuestos de la presente invención podrían prepararse como sigue: Esquema 1 I 2 I El grupo halo de acuerdo con el esquema 1 es preferentemente flúor, cloro, bromo o yodo. El compuesto 1 es preferentemente 2, 3-dicloro N-metilmaleimida. La reacción entre el Compuesto 1 y el indol, Compuesto 2, es comúnmente conocido como una reacción de Grignard. La reacción se lleva a cabo en un solvente inerte, tal como tolueno, a una temperatura entre la temperatura ambiente y la temperatura de reflujo de la mezcla de reacción. Más significativamente, la reacción representada en el Esquema I es dependiente de las condiciones del solvente. Cuando se lleva a cabo en un sistema de solvente de tolueno:THF:éter, la reacción proporciona el Compuesto 3. mayor de 80 por ciento de rendimiento y mayor de 95 por ciento de pureza. El producto se precipita de la mezcla de reacción con cloruro de amonio, NH4Cl . El intermediario resultante, Compuesto 2_, podría aislarse mediante técnicas estándar.

Bis-3,4 (3 ' -indolil) -lN-metil-pirrol-2, 5-diona, Compuesto 3_, podría después convertirse mediante hidrólis alcalina al anhídrido correspondiente de la fórmula 4 mediante las técnicas conocidas en el arte y descritas en Brenner et al., Tetrahedron 44: 2887:2892 (1988). Preferentemente, el Compuesto 3_ se hace reaccionar con KOH 5N en etanol a una temperatura que se encuentra en el rango de 25°C a la temperatura de reflujo para producir el compuesto de la Fórmula 4 Los compuestos de la Fórmula 3. son en general más estables que los compuestos de la Fórmula 4. ?>or lo tanto, se prefiere que los Compuestos 3. reaccionan de acuerdo con el Esquema 2 para producir los compuestos de la Fórmula. Sin embargo, un experto en el arte reconocería que los compuestos de la Fórmula 4, también podría hacerse reaccionar de acuerdo al esquema 2.

Compuestos 3 or 4 \ II / T, J y W son lo mismo como se describió previamente. L es un grupo saliente tal como cloro, bromo, yodo, mesilo, tosilo y similares. L también podría ser un hidroxi u otro precursor que podrían convertirse fácilmente a un buen grupo saliente mediante las técnicas conocidas en el arte. Por ejemplo, el hidroxi podría convertirse fácilmente a un éster sulfónico tal como mesilo mediante la reacción del hidroxi con cloruro de metansulfonilo para producir el grupo saliente de mesilato.

La reacción representada por el Esquema 2 se realiza por cualquiera de los métodos conocidos de preparación de Índoles N-sustituidos. Esta reacción usualmente involucra aproximadamente cantidades equimolares de los dos reactivos, aunque son operativas otras relaciones, especialmente aquellas en donde el reactivo de alquilación está en exceso. La reacción se lleva a cabo mejor en un solvente aprótico polar que emplea una sal de metal alcalino u otras de tales condiciones de alquilación como se aprecian en el arte. Cuando el grupo saliente es bromo o cloro, una cantidad catalítica de la sal de yoduro, tal como yoduro de potasio podría adicionarse para acelerar la reacción. Las condiciones de reacción incluyen lo siguiente: Hexametildisilazida de potasio en dimetilformamida o tetrahidrofurano, hidrato de sodio en dimetilformamida.

Preferentemente, la reacción se lleva a cabo bajo la adición inversa lenta con carbonato de cesio ya sea en acetonitrilo, dimetilformamida (DMF) , o tetrahidrofurano (THF) . La temperatura de la reacción es preferentemente de aproximadamente temperatura ambiente a aproximadamente temperatura de reflujo de la mezcla de reacción.

Un experto en el arte reconocería que la reacción descrita en el Esquema 2 podría emplearse con los compuestos L-T' y L-W', en donde T' y W son un carboxi protegido, hidroxi protegido o una amina protegida. Después de la alquilación del Esquema 2, T' y W' podrían convertirse a los radicales capaces de acoplar para formar J. El acoplamiento de T' y W1 para formar los derivados de éter o tioéter se conoce en el arte y se describe en, por ejemplo Ito et al., Chem. Pharm. Bull. 41(6): 1066-1073 (1993); Kato, et al. Synthesis 1981: 457; Harpp, et al., J. Am. Chem. Soc. 93: 2437 (1971); y Evans et al., J. Or . Chem. 50: 1830 (1985).

Un experto en el arte también reconocería que el compuesto 3. podría convertirse a los compuestos de la fórmula I en una síntesis de dos etapas como se describe en el Esquema 3.

C II T, J, W, V y L son como se define previamente. L2 es un hidroxi protegido u otro grupo que podría convertirse fácilmente a un buen grupo saliente mediante las técnicas conocidas en el arte. El acoplamiento entre el Compuesto 3 o 4 y el Compuesto £ es una alquilación como se discutió previamente. El intermediario monoalquilado, 7, se desprotege, y L2 se convierte a un grupo saliente. Por ejemplo si el hidroxi se protege con t-butildimetilsililo (TBDMS) , el TBDMS se remueve selectivamente usando metanol ácido. El hidroxi libre resultante después se convierte a un grupo saliente, tal como un haluro de alquilo, preferentemente un yoduro o bromuro de alquilo (CBr4 en trifenilfosfina) o sulfonato (cloruro de mesilo en trietilamina) . Después se forma la microlida mediante la alquilación bajo adición inversa lenta a una solución de la base, tal como hexametildisilazida de potasio, o hidrato de sodio, pero preferentemente Ca2C03 en un solvente polar aprótico tal como acetonitrilo, DMF, THF a la temperatura en el rango de la ambiente a reflujo.

Los compuestos de la Fórmula I podrían prepararse en rendimiento sustancialmente mayor cuando la alquilación se lleva a cabo bajo adición inversa lenta a Cs2C03 en un solvente aprótico polar. La adición inversa involucra la combinación de una mezcla del compuesto y el agente de alquilación (Esquema 2) o el compuesto (Esquema 3) con la base a una velocidad de aproximadamente 0.1 mL/hora a aproximadamente 2.0 mL/hora. La concentración de cada reactivo en la mezcla se de aproximadamente 1.5 molar a aproximadamente 0.001 molar. Cuando se lleva a cabo con el compuesto monoalquilado (Esquema 3) la concentración es de aproximadamente 3 molar a aproximadamente 0.001 molar. La adición lenta resulta en una concentración de reactivos en el recipiente de reacción de aproximadamente 0.01 molar a 1.5 molar. Un experto en el arte reconocería que podría usarse a una velocidad mayor de la adición a una concentración inferior de los reactivos. Asimismo, a una velocidad más lenta de la adición, una concentración superior de los reactivos podría usarse en la reacción. Preferentemente, el compuesto se adiciona a aproximadamente 0.14 mL/hora con el compuesto y el agente de alquilación a 0.37 molar. Se prefiere que el Cs2C03 esté en exceso -- más pref rentemente una relación 4:1 de Cs2C03 al agente de alquilación. Los solvente apróticos polares preferidos son acetonitrilo, dimetilformamida (DMF) , acetona, dimetilsulfóxido (DMSO) , dioxano, dietilen glicol metil éter (diglima) , tetrahidrofurano (THF) , u otros solventes apróticos polares en los cuales los reactivos son solubles. La reacción se lleva a cabo a temperaturas en el rango de aproximadamente 0°C a reflujo. Un experto en el arte reconocería que la relación de la mezcla del compuesto y el agente de alquilación no es crítica. Sin embargo, se prefiere que los reactivos se mezclen en una relación de 0.5 a 3 equivalentes de una a otro. Más preferentemente, los reactivos se mezclan 1:1.

Cuando V es N-CH3, el Compuesto II se convierte al anhídrido correspondiente (V es 0) mediante hidrólisis alcalina. La hidrólisis alcalina involucra la reacción del compuesto con la base (tal como hidróxido de sodio o hidróxido de potasio) , ya sea en alcohol Cx-C4 (preferentemente etanol) , DMSO/agua, dioxano/agua, o acetonitrilo/agua a una temperatura en el rango de aproximadamente 25°C a preferentemente aproximadamente reflujo. La concentración de los reactivos no es crítica.

El anhídrido (V es 0) se convierte a la maleimida de la Fórmula I mediante amonólisis. La amonólisis involucra la reacción del anhídrido con un exceso de hexametildisilazano o una sal de amonio (acetato de amonio, bromuro, o cloruro) y alcohol Cx-C4 (preferentemente metanol) en un solvente aprótico polar tal como DMF a temperatura ambiente. Preferentemente, el hexametildisilazano o una sal de amonio se hace reaccionar a una relación mayor de aproximadamente 5:1 equivalentes de anhídrido.

El Esquema 4 representa la preparación de un intermediario útil de acuerdo con la presente invención para la preparación de los compuestos de la Fórmula III, en donde X es 0.

Esquema 4 OEt 22 26 •31- 26 Los siguientes ejemplos y preparaciones se proporcionan simplemente para ilustrar adicionalmente la invención y no limitarla.

Ejemplo 1 Síntesis de Bisindolilmaleimidas enlazadas por Seis Átomos Bisfluorados Un compuesto de la fórmula VII: se produce como sigue OEt OH • El compuesto 8a se convierte en el compuesto de la Fórmula Vil usando las etapas representadas en el esquema 4.

Un compuesto de la fórmula VIII: se produce como sigue: Este compuesto se convierte en el compuesto de la Fórmula VIII usando las etapas representadas en el esquema 4.

Un compuesto de la fórmula IX: duce como sigue: Este compuesto, en donde R' es H o F, se convierte en el compuesto de la Fórmula IX usando las etapas representadas en el esquema 4.

Ejemplo 2 Síntesis de Bisindolilmaleimidas enlazadas por Siete Átomos C2-Monofluoradas Un compuesto de la fórmula X: se produce como sigue: Este compuesto se convierte en el compuesto de la Fórmula X usando las etapas representadas en el esquema 4.

Ejemplo 3 Síntesis de Bisindolilmaleimidas enlazadas por Siete Átomos C6-Monofluoradas Un compuesto de la fórmula XI : se produce como sigue: Este compuesto se convierte en el compuesto de la Fórmula XI usando las etapas representadas en el esquema 4.

Ejemplo 4 Síntesis de Bisindolilmaleimidas enlazadas por Siete Átomos C6-Difluoradas Un compuesto de la fórmula XII: se produce como sigue: Este compuesto se convierte en el compuesto de la Fórmula XII usando las etapas representadas en el esquema 4.

Ejemplo 5 Síntesis de Bisindolilmaleimidas Tio-enlazadas por Seis Átomos Fluorados Un compuesto de la fórmula XIII: produce como sigue: OEt Este compuesto se convierte en el compuesto de la Fórmula XIII usando las etapas representadas en el esquema 4.

Ejemplo 6 Síntesis de Derivados de Cadena Lateral C4 de Bisindolilmaleimidas Enlazadas por Seis Átomos Fluorados Un compuesto de la fórmula XIV : se produce como sigue : Este compuesto se convierte en el compuesto de la Fórmula XIV usando las etapas representadas en el esquema .

Ejemplo 7 Síntesis de Bisindolilmaleimidas Enlazadas por Seis tomos de Fluoroalqueno Un compuesto de la fórmula XV: ; se produce como sigue: Este compuesto se convierte en el compuesto de la Fórmula XV usando las etapas representadas en el esquema 4.

Ejemplo 8 Síntesis de Bisindolilmaleimidas Enlazadas por Siete Átomos de Fluoroalqueno Un compuesto de la fórmula XVI (fo 2 se produce como sigue: Este compuesto se convierte en el compuesto de la Fórmula XVI usando las etapas representadas en el esquema 4.

Un compuesto de la Fórmula XVII: (fo se produce como sigue: Este compuesto se convierte en el compuesto de Fórmula XVII usando las etapas representadas en el esquema 4. Un compuesto de la fórmula XVIII: XVIII (formas E y Z) se produce como sigue : Este compuesto se convierte en el compuesto de la Fórmula XVIII usando las etapas representadas en el esquema 4.

Ejemplo 9 Síntesis de Bisindolilmaleimidas Enlazadas por Seis Átomos Fluorados C2-Metilados Un .compuesto de la Fórmula XIX: se produce como sigue: b. aldehido OH s (3 -indolil) maleimida, Cs2C03 XIX Ejemplo 10 Síntesis de Bisindolilmaleimidas Enlazadas por Seis Átomos Fluorados Derivados C3 Ejemplo 11 Síntesis de Bisindolilmaleimidas Enlazadas por Seis Átomos Fluorados Derivados C3 Ejemplo 12 Síntesis de Bisindolilmaleimidas Enlazadas por Seis Átomos Fluorados Derivados C3 En los siguientes ejemplos y preparaciones, el punto de fusión, el espectro de resonancia magnética nuclear, el espectro de masa, la cromatografía líquida a alta presión sobre gel de sílice, N, N-dimetilformamida, paladio sobre carbón vegetal, tetrahidrofurano y acetato de etilo se abrevian Pt . Fus., RMN, MN, HPLC, DMF, Pd/C, THF y EtOAc, respectivamente. Los términos "RMN" y "MS" indican que el espectro fue consistente con la estructura deseada.

Ejemplo 13 Preparación de bisindolilmaleimida de la fórmula (3S.4R) -2-fluoro-3-hidroxi-4.5-O-isopropiliden entanoato de etilo.

A un matraz de fondo redondo agitado que contiene 50 mL de THF anhidro y 3.1 mL (0.03 mol) de hexametil disilazano (HMDS) a 0°C, se adicionó 12 mL (0.03 mol) de solución 2.5M de butil-litio en hexano. La mezcla resultante se dejó regresar a la temperatura .ambiente y se agitó durante 10 min. Después se disminuyó a -85°C. Una mezcla de 1.80 g (0.10 mol) de hexametil triamida fosfórica (HMPA) y 1.00 mL (0.010 mol) de fluoroacetato de etilo se adicionó gota a gota tan rápidamente como fue posible mientras que no se permitió que la temperatura se elevara de -85°C. Después de 5 min adicionales, se adicionó 880 mg (0.0067 mol) de 2,3-0-isopropiliden D-gliceraldehído (8) . La mezcla se agitó durante 10 min y después se apagó a -85°C con 5 mL de cloruro de amonio saturado. Calentando a temperatura ambiente la mezcla se diluyó con 80 L de CH2C12 y se lavó con agua (60 ml x 3) . La capa de CH2C12 se separó y se secó con Na2S04. Después de la evaporación de los volátiles in vacuo, el residuo se cargó en una columna de gel de sílice corta. Se lavó con CH2C12 después CH3CN/CC14 (o acetato de etilo) , produciendo el producto crudo.

El producto crudo se cromatografió en una columna de gel de sílice usando CH3CN/CC14 al 15% (v/v) como el eluyente, produciendo dos fracciones con separación parcial de los dos diastereómeros: fracción 1, 177 mg, (9a, 34%, 9b, 66% basado en XHRMN) .

Fracción 2, 377 mg (9a, 62%, 9b, 38%) . Rendimiento global de 34.7%, en el cual 9a, fue 52.7%, y 9b fue 47.3% 9b: 2S 10b: 2S (3S, 4R) 3-aliloxi-2-fluoro-4.5.0-isopropiliden pentanoato de etilo.

Alcohol 9, 327 mg (1.39 mmol, el cual es una mezcla de 9a, 62% y 9b, 38%), se evaporó con tolueno y 327 mg (1.39 mmol), se disolvió en 6 mL de ciciohexano. Bajo atmósfera de N2 y agitación, tricloroacetimidato de alilo (423 µL, 561 mg, 2.78 mmol) se adicionó, seguido de ácido trifluorometansulfónico (20 µL) en porciones de 5 µL durante 20 min. Comenzó a formarse instantáneamente un precipitado. aceitoso café obscuro. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 60 h. Se formó un precipitado blanco, y tal precipitado se filtró y lavó dos veces con ciciohexano. El filtrado se evaporó a un líquido aceitoso. Se cromatografió en una columna de gel de sílice usando acetato de etilo-hexano al 10% (v/v) como el eluyente, proporcionando dos fracciones . La primera fracción contenía principalmente 10a y la segunda fracción 10b. Las fracciones se purificaron en una columna de sílice usando hexano/CH2Cl2 al 25% (v/v) como el eluyente, produciendo 10a, 133 mg (34.8%) y 10b, 83 mg (21.7%) . Rendimiento total 56.5%. 10b: 2S llb: 2R (3S.4R) 3-Aliloxi-2-fluoro-4.5-0-isopropilidenpentanoi (11) .

El éster 10a, 60 mg (0.217 mmol) se evaporó dos veces con tolueno. Este se disolvió en 3.0 mL de THF seco y se enfrió hasta -75°C. Bajo atmósfera de N2 con agitación, se adicionó solución de tolueno DIBAL-H 0.68 mL (1.29 M, 0.877 mmol) gota a gota durante 20 min. La solución resultante se agitó a -75°C durante otras 1.5 h. Después se dejó calentar a -5°C y se apagó con 4 mL de acetato de etilo. Después de agitar durante 10 min. se adicionó Na2S04 (2 g) húmedo. La mezcla se agitó a -5°C durante 2 h. El sólido se filtró y se lavó con dos veces con acetato de etilo. El filtrado se evaporó a presión reducida. El residuo se cromatografió en una columna de gel de sílice usando acetato de etilo-hexano al 30% (v/v) como el eluyente, produciendo lia puro, 32 mg (63.4%) . llb se obtiene de la misma manera que llb.

Diol (12 ) : El compuesto 11 (una mezcla de lia y llb), 23 mg (0.099 mmol) se disolvió en 3 mL de CH30H y 1 mL de CH2C12. A -78°C, se burbujeó con 03 hasta que la solución cambió a azul brillante. La solución después se burbujeó con argón durante 5 min. Se adicionó una gota de sulfuro de dimetilo, y la mezcla se agitó durante 10 min. Borohidrato de sodio 30 mg (0.794 mmol, 8 eq) se adicionó y se agitó durante 5 min. La mezcla de reacción se dejó regresar a la temperatura ambiente y después se agitó durante otra 1 h. Después de adicionar 3 gotas de solución acuosa de Na4Cl saturado, la mezcla se agitó durante otra 1 h. Los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se disolvió en metanol, y se adicionó acetato de etilo para reemplazar el metanol por co-evaporación. El precipitado blanco se filtró y el filtrado se evaporó. El residuo se cromatografió en una columna de gel de sílice usando acetato de etilo. Después de la remoción de las trazas de los componentes desconocidos, se obtuvieron 13 mg (55.3%) de 12a y 7 mg (29.8%) de 12b.

Reacciones de Mesilación y Acoplamiento El diol (12a), 12 mg (0.050 mmol) se disolvió en 5 mL de éter et-llico anhidro y se enfrió a 0°C bajo atmósfera de N2. Se adicionó bajo agitación 35 µL (0.250 mmol, 5 eq.) de Et3N, seguido de 20 µL (0.25 mmol, 5 eq.) de cloruro de mesilo. La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 5 h. El precipitado se filtró y se lavó con éter etílico. El filtrado se lavó con agua (2x) y salmuera (2x) y se secó con Na2S04. Después de la evaporación de los solventes in vacuo , se obtuvo un aceite amarillento 13a, 9 mg (43.3%).

El precipitado se disolvió en agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se lavó con solución acuosa de NaHC03 dos veces y se secó con Na2S04. Después de la evaporación del solvente in vacuo, se obtuvo 11 mg (55.3%) de 13a. Se obtuvo totalmente 20 mg de 13a, un 100% de rendimiento .

Dimesilato 13a, 20 mg (0.0507 mmol) y bisindolil-maleimida 17.3 mg (0.0507 mmol) se combinaron y disolvieron en 2.5 mL de DMF anhidra (se secaron con cribas moleculares) y se adicionó por vía de una bomba de jeringa además de una suspensión de carbonato de cesio (66 mg, 0.203 mmol en 3 mL de DMF anhidra a 50°C bajo N2 durante 40 h) . La mezcla de reacción se filtró a 50°C durante otras 10 h. Se evaporó in vacuo para remover los volátiles. Los residuos se disolvieron en CHC13 y se lavaron con solución acuosa de NaHC03 saturada y salmuera. La capa de cloroformo se separó y se secó con Na2S04. Después de la evaporación, el residuo sólido rojo se cromatografió en columna de gel de sílice con elución de acetona/CHCl3 al 10% (v/v) . El compuesto deseado 14a, 7 mg (25.4%) se eluyó primero, seguido por uno de los materiales iniciadores, bisindol-maleimida 13 mg (75%) .

Ejemplo 14 Preparación de bisindolil maleimida de la fórmula: Los compuestos 21a y 21b son estereoisómeros, 21a está en la conformación 2R; 21b está en la conformación 2S. La nomenclatura del centro quiral cambia cuando el éster se reduce al alcohol (p. ej . el compuesto 24a llega a ser 2S) . 22 ' A un matraz de fondo redondo agitado que contiene 40 mL de THF anhidro y 5.0 mL (0.0255 mol) de hexametil disilazano 9.0 mL (0.0225 mol) de una solución de butil litio 2.5 M en hexano se adicionó y se hizo reaccionar en un bajo de hielo bajo N2. Después de agitar a temperatura ambiente durante 10 min, se enfrió a -78°C, y 3.6 g (0.020 mol) de HMPA y 2.0 mL (0.020 mol) de fluoroacetato de etilo se adicionaron gota a gota en 5 min. Después de agitar durante 5 min adicionales, 760 mg (4.46 mmol) de ciclohexiliden-gliceraldehído (21, preparado como Ref. JOC, 1992, 57 página 648, y JOC, 1995, 60, páginas 585-587, destilado a 60°C/0.5 mmHg) se adicionó rápidamente. La mezcla se dejó agitar durante 10 min adicionales, y después se apagó a -78°C con 5 mL de cloruro de amonio saturado. Calentando a temperatura ambiente la mezcla se diluyó con 60 mL de hexano. La capa de hexano se separó. La capa restante se extrajo con 30 L de hexano. Las soluciones de hexano se combinaron y lavaron con cloruro de amonio saturado (100 mL x 3) y se secaron con Na2S04. Después de la evaporación a presión reducida, el residuo se cromatografió en una columna de gel de sílice usando acetato de etilo/hexano al 30%, produciendo el producto principal 22' 740 mg (47.6%), el cual es una mezcla de los dos isómeros con el isómero mayor 22' a (74%) y el isómero menor 22 'b (26%) basado en "?RMN. El lavado acuoso se extrajo con CHC13. Después de la evaporación y la cromatografía, 92 mg (7.5%) de 21 se obtuvo de la capa de cloroformo, la cual también es una mezcla de los dos isómeros. El isómero puro 22 'a se obtuvo de la mezcla 22 ' por cromatografía en columna de gel de sílice eluida con CHC13. 22 ' El material iniciador 22', 740 mg (2.1 mmol) se disolvió en 60 mL de CH3OH. Se adicionó 1.2 g de ácido cítrico. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. El solvente se removió en un rotavapor. El residuo se colocó con acetato de etilo (100 mL) y se lavó con solución saturada de NaHC03 (100 mL x 2) y agua. La capa de acetato de etilo se secó con Na2S04 y se evaporó, produciendo 22, 600 mg (100%) , la cual es una mezcla del isómero 22a (69%) y 22b (31%) basado en XHRMN. Se obtuvo 22a puro por hidrólisis de 22 'a bajo la misma condición produciendo un rendimiento del 100%.

El alcohol 22, 655 mg (2.37 mmol, una mezcla del isómero 21a (69%) y 21b (31%) se disolvió en 30 mL de ciciohexano y se adicionó 1.50 mL (9.8 mmol) de tricloroacetimidato de alilo. Después 100 µL de CF3S03H se adicionó gota a gota durante 30 min. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente bajo N2 durante 16 h. El TLC mostró que había aproximadamente 20% del material iniciador. Se adicionó 60 µL adicionales de CF3S03H y la mezcla de reacción se agitó durante 24 h. El precipitado se filtró y se lavó con ciciohexano. El filtrado se evaporó y el residuo se cromatografió en una columna de gel de sílice usando acetato de etilo al 10% como eluyente, produciendo 23a, 511 mg (68.1%) y 23b, 160 mg (21.3%).

También se obtuvo 23a puro a partir de 21a puro usando la misma condición anterior para comparación.

El éster 23a, 635 mg (2.00 mmol) se evaporó con tolueno dos veces y se disolvió en 10 mL de THF anhidro. Se adicionó gota a gota a una suspensión de 200 mg (5.27 mmol, 2.5 eq.) LiAlH4 en 40 mL de THF anhidro a -78°C bajo N2 con agitación.

Después de adicionar la muestra, la mezcla de reacción se agitó durante 20 min. Se calentó hasta 0°C y se agitó a 0°C durante 20 min. Después se adicionó 5 mL de acetato de etilo. Después de agitar durante 5 min. , se adicionó 4 g de sulfato de sodio húmedo. La mezcla se agitó durante 30 min. El sólido se filtró y lavó con acetato de etilo dos veces. El filtrado se evaporó en un rotavapor. El residuo se cromatografió en una columna de gel de sílice usando acetato de etilo/hexano al 30% como el eluyente. Después de la remoción de algún material iniciador 23a, 19 mg, se eluyó el producto principal, como 24a, 413 mg (75.0%), seguido de algo de 24b, 30 mg (5.5%) .

El compuesto 24b (44 mg) se obtuvo por reducción de 23b (112 mg) usando DIBAL-H en THF usando un procedimiento similar como el anterior, con rendimiento de 45%. 24a 25a El alcohol 24a, 295 mg (1.08 mmol) se disolvió en 20 mL de la mezcla de solvente de CH30H/CH2C12 (1:1) . Se enfrió a - 78°C. Se burbujeó ozono a hasta que comenzó a aparecer un color azul. Después se burbujeó argón hasta excluir el exceso de 03. Varias gotas de CH3SCH3 se adicionó y la solución se agitó durante 5 min. Después 245 mg (6.48 mmol) se NaBH4 se adicionó a -78°C. Después de agitar durante 5 min., la mezcla se dejó regresar a la temperatura ambiente y se agitó durante 1 h. Los volátiles se removieron in vacuo . El residuo se cromatografió en una columna de gel de sílice usando acetato de etilo como el eluyente, produciendo 25a, 232 mg (77.5%).

El diol 25b se obtuvo siguiendo el. mismo procedimiento anterior. La reacción se inició con 230 mg de 24 b, y se obtuvo 158 mg de 25b con un rendimiento de 67.7%. 25a 26a El diol 25a, 195 mg (0.70 mmol) se disolvió en 50 mL de éter dietílico. Se adicionó trietil amina 583 µL (4.2 mmol) y seguido por 342 µL (4.2 mmol) de cloruro de metansulfonilo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo N2 durante 3 h. Se adicionaron 50 mLs de agua para disolver el precipitado. La capa de éter se separó y lavó con agua (50 mL x 2) . Después de secar con Na2S04 anhidro, se evaporó a presión reducida para producir un líquido amarillento 26a, 308 mg (100%) .

A un matraz de fondo redondo que contiene 768 mg (2.36 mmol) de carbonato de cesio en 40 mL de DMF anhidra a 50°C bajo N2, 10 mL de solución de DMF que contiene 26a, 257 mg (0.59 mmol) y bisindolmaleimida, 202 mg (0.59 mmol) se adicionó gota a gota por vía de una bomba de jeringa durante un período de 48 h. Después de agitar a 50°C durante 24 h. adicionales, la mezcla de reacción se diluyó con 100 mL de CHC13 y se lavó con salmuera (50 mL x 2) , después agua (50 mL x 2 ) . La capa de cloroformo se secó con Na2S04 anhidro y se evaporó a presión reducida. El residuo se disolvió en CHC13 y se cromatografió en una columna de gel de sílice usando acetona/CHCl3 al 5% como el eluyente. El primer componente eluido es el producto deseado 27a, 185 mg. Se recristalizó a partir de CHC13/CH30H, produciendo 130 mg (37.7%) y un filtrado.

El compuesto 27b se obtuvo de la misma manera como el anterior, excepto que el tiempo de adición del mesilato y del bisindolil maleimida por vía de la bomba de jeringa fue de 80 h. La ¿reacción se inició con 97 mg del diol 25b, y 64 mg de 27 b se obtuvo con un rendimiento global de 26.1%.

El material iniciador 27a, 50 mg (0.099 mmol) se disolvió en 50 mL de metanol. Se adicionaron 1 mL de agua y 200 mg de ácido p-toluen-sulfónico monohidratado (1.05 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a 50°C durante 4 h. Se evaporó en un rotavapor y el residuo se cromatografió en columna de gel de sílice usando CH30H/CHC13 al 5% como el eluyente. El componente principal 28a se recristalizó a partir de acetona/CH3OH, produciendo 28a cristalino, 23 mg y un filtrado que contiene 18 mg de 28a (95.0%) . 28 a 29a El diol 28a, 55 mg (0.109 mmol) se disolvió en 20 mL de mezcla de acetona-HOAc (1:1) . A la solución, se adicionó 100 mg de NAI04 - 3H20 (0.373 mmol) en 2.5 mL de agua. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2.5 h. Se evaporó en un rotavapor para reducir el volumen de la solución a la mitad, y después se diluyó con 30 mL de CH2C12. La mezcla después se lavó con agua dos veces, NaHC03 acuoso y nuevamente agua. La capa de CH2C12 se separó, se secó con Na2S04 y se evaporó a sequedad, produciendo el aldehido crudo 29a.

El aldehido crudo 29a se disolvió en 14 mL de CH2C12 y se enfrió a -78°C. Se disolvió borohidrato de sodio, 30 mg (0.79 mmol) en 6 mL de alcohol reactivo SP y se adicionó a la solución. La mezcla se agitó bajo N2 durante 40 min. Se apagó con 500 µL de CH3CH0 y después se dejó regresar a la temperatura ambiente. La mezcla se evaporó para reducir el volumen de la solución a la mitad y después se mezcló con 10 mL de C2H5OH, 2 ml de solución acuosa saturada de tartrato de Sodio Potasio. La mezcla se agitó durante 5 h. Se evaporó y se colocó con 30 ml de CH2C12. La capa de CH2C12 se separó, se lavó con agua tres veces y se secó con Na2S04. Después de la evaporación, el residuo se cromatografió en una columna de gel de sílice usando acetato de etilo al 10% en CH2C12, produciendo el compuesto 30 'a, 7 mg (14.1 %) . El componente principal se eluyó con acetato de etilo, produciendo el producto deseado 30a, 41 mg (79.3%).

Se obtuvo el compuesto 30b del diol correspondiente 28b (con un rendimiento de 63.4%) siguiendo el mismo procedimiento corao el anterior excepto que el solvente para el corte del diol fue una mezcla de CH3CN-H20 (2:1) .

El alcohol 30a, 16 mg (0.0338 mmol) se disolvió en 10 mL de CH2C12. Se adicionaron a este 70 µL (0.52 mmol) de trietilamina y 28 µL (0.34 mmol) de cloruro de metansulfonilo. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente bajo N2 durante 3 h. Se transfirió a un embudo de separación y se lavó con agua tres veces .

Después de la evaporación se produjo 31a crudo, 23 mg. el TLC muestra un solo punto.

El mesilato crudo 31a, 23 mg (aproximadamente 0.0338 mmol) se colocó en un matraz de fondo redondo de 25 mL y se adicionó 12 mL de C2HsOH. El matraz se enfrió usando un baño de hielo seco/ acetona. En este se transfirieron 1.2 g de HN(CH3)2 y 3 mL de agua por vía cánula. El matraz después se selló con un tapón de teflón y se ató con alambre de cobre. Esta se agitó a 100°C durante 8 h. Después el matraz se enfrió a temperatura ambiente, los volátiles se removieron en un rotavapor. El residuo se disolvió en 20 mL de acetato de etilo y se lavó con HHCOa acuoso (20 mL x 2) , agua (20 mL x 2) . Después de remover el solvente se produjo 24 mg del producto crudo 32a el cual se recristalizó a partir de metanol, obteniendo 32a puro.

La imida 32a, 24 mg (0.048 mmol) se disolvió en una mezcla de 3 mL de C2H5OH y 3 mL de KOH 5N. Se agitó a 80°C durante 24 h. El etanol se removió en un rotavapor y la suspensión acuosa se enfrió a 0°C y se acidificó con HCl 5N. Apareció un precipitado violeta. Después de agitar durante 10 min, la mezcla acuosa se neutralizó con KOH diluido y se extrajo con acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se lavó con NaHC03 acuoso dos veces y agua. Después de secar con K2C03 y la evaporación, se produjo 24 mg de 33a crudo.

. El anhídrido 33a, 24 mg se disolvió en 5 mL de DMF anhidra. A esta se adicionó 250 µL (1.19 mmol 1,1,1,3,3,3-hexametil disilazano, seguido de la adición de 25 µL de CH30H (0.62 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente bajo N2 durante 38 h. Los volátiles se removieron in vacuo . El residuo se disolvió en 6 mL de la mezcla de la solución de CH3CN - HCl 1 N (2:1) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. El solvente orgánico se removió y la suspensión acuosa se neutralizó con KOH ÍN y se extrajo con acetato de etilo. La capa de acetato de etilo se lavó con KOH 0.1 N y agua dos veces y se evaporó a sequedad. El residuo se separó en una columna de gel de sílice eluida con acetato de etilo. La segunda banda eluida es el producto deseado 14a el cual se recristalizó a partir de CH2C12 - hexano, produciendo 5 mg (rendimiento global de 30a, 20%) .

Ejemplo 15 Esquema Alternativo para la Producción de Compuestos 34 b) a partir de los Compuestos (a y b) .

DMF, HMDS CH3CN, MeOH, 36 | ?N Hcl 34a + b El alcohol 30a, 50 mg (0.106 mmol) se mezcló con 20 mL de C2H5OH - KOH 5N (1:1) . Se agitó a 70°C bajo N2 durante 20 h. Después se enfrió a 0°C y se acidificó con HCl 5N. Apareció inmediatamente el precipitado rojo. Se adicionó cloruro de metileno, 40 mL. La capa orgánica se separó y se lavó con agua (30 mL x 4) , y se secó con Na2S04. Después de la evaporación, el residuo se cromatografió en una columna de gel de sílice usando acetato de etilo al 5% en CH2C12 produciendo 35a, 33 mg (68%) .

' El anhídrido 35a, 54 mg (0.117 mmol) se disolvió en 5 mL de DMF anhidra. HMDS (1, 1, 1, 3,3,3, -hexametil disilazano) . Se adicionaron 500 µL (2.36 mmol) y metanol, 48 µl (2.36 mmol) . La mezcla se agitó bajo N2 a temperatura ambiente durante 36 h. Los volátiles se removieron in vacuo y el residuo se agitó con 10 mL de CH3CN y 5 mL de HCl ÍN durante 1 h. Después se concentró y extrajo con CH2C12. La capa de cloruro de metileno se lavó con agua, salmuera, y se secó con Na2S04, y evaporó. El residuo se separó en una columna de gel de sílice usando CH2C12 - CH3CN (9:1), produciendo el primer componente el cual fue el material iniciador a 36a, 31 mg (57.4%).

El compuesto 36b, 3.4 mg (39%) se obtuvo del alcohol correspondiente 30b, 9 mg (0.019 mmol) siguiendo el mismo procedimiento como el anterior excepto que se usó más exceso de HMDS (250 µL, 1.18 mmol) y metanol (24 µL, 1.18 mmol) que para 36a.

Aminación: El compuesto 36a, 31 mg (0.068 mmol) se disolvió en 15 mL de THF anhidro. A este se adicionaron 240 µL (1.56 mmol) de trietilamina y 84 µL (1.02 mmol) de cloruro de metan sulfonilo bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Los volátiles se removieron in vacuo. El residuo se disolvió en 30 mL de CH2C12 y se lavó con HCl ÍN, salmuera dos veces, se secó con Na2S04 y evaporó. El residuo se disolvió en 6 ml de THF destilado y 1 ml de dimetilformamida al 40% en agua. El matraz se selló con un tapó de Teflón y se agitó a 50° durante 24 h. La mezcla se enfrió a 0°C y evaporó para remover los volátiles . El residuo se purificó en una columna de gel de sílice usando Et3N 0-10% en acetato de etilo, produciendo el compuesto deseado 34a, 13.2 mg (40.2%) .

El compuesto 34b (1.9 mg) se obtuvo de 36b (3.4 mg) usando el mismo procedimiento como para 34a con un rendimiento de 52%.

Ejemplo 16 Síntesis de un Derivado de Ditiocarbamato: mg del Compuesto 38 (0.04 mmol, 1 eq.) se transfirió a un matraz de fondo redondo de 25 mL equipado con una barra agitadora, pared separadora y N2. 10 µL de THF se adicionó por vía cánula seguido de 4.5 mg de trietilamina (0.044 mmol, 1.1 eq.) y después 3.8 mg de disulfuro de carbono (0.05 mmol, 1.2 eq.) por vía de jeringa. Esta solución roja se dejó agitar durante aproximadamente 15 min y después 7.1 mg de yoduro de metilo (0.05 mmol, 1.2 eq.) se adicionó por vía jeringa. La reacción se dejó agitar a temperatura ambiente toda la noche.

La solución roja clara cambió a turbia después de aproximadamente dos horas. TLC (MeOH al 10% en CH2C12) mostró pérdida total del material iniciador. La reacción se transfirió a un embudo de separación con EtOAc y se lavó con 40 mL de H20 seguido de 40 mL de salmuera. La capa orgánica se colectó y pasó a través de MgS04 en un embudo de vidrio vitrificado para secarlo. El solvente se removió para dar un sólido púrpura (compuesto 39) . Se analizó una muestra por IS/MS. La IS/MS detectó un pico MH* en 559, el rendimiento total fue de 23 mg.

Conversión del Ditiocarbamato al Grupo Trifluorometilo Se disolvió 23 mg (0.041 mmol, 1 eq) de ditiocarbamato 39 en CH2C12 anhidro en un matraz de fondo redondo de 25 mL seco equipado con barra agitadora, separadores y nitrógeno. La solución se enfrió en un baño de hielo durante aproximadamente 15 min. Después se adicionó rápidamente 0.047 g de 1,3-dibromo 5, 5-dimetilhidantoina (0.164 mmol, 4 eq.) como un sólido seguido de 0.06 g de dihidrogentrifluoruro de tetrabutilamonio (0.205 mmol, 5 eq.) por vía jeringa. (La solución fue de un color rojizo/púrpura a uno naranja/café) .

La reacción se agitó a 0°C durante 1.5 horas. Después se vertió en un embudo de separación llenado con 30 mL de H20. La capa de CH2C12 se lavó nuevamente' con 25 ml de H20, col_ctada, y derivada con MgS04. El solvente se removió para dar un aceite café obscuro/anaranjado. El producto se purificó por medio de uso de gel de sílice, iniciando con CH2C12 como la fase móvil y adicionando gradualmente metanol. Se obtuvieron tres puntos separados, la tercera muestra se colectó y el solvente se removió para proporcionar 16.5 mg (75%) del producto 40.

Ejemplo 17 Acilación de la amina del Compuesto A 7 mg (0.0154 mmol) del Compuesto A se disolvió en 1 mL de CH2C12 seco. Se colectó a 0°C bajo N2, y se agitó mientras se adicionó 3.7 µL (0.046 mmol, 3 eq) de piridina, seguido por 2.06 µL (0.018 mmol, 1.2 eq.) de anhídrido trifluoroacético (Aldrich) . La mezcla de reacción se agitó a 0°C de 2:17 p.m. a 4:20 p.m. (TLC 1) y se continuó hasta las 7:00 p.m. (TLC 2) . No hubo más progreso de la reacción. Otro baño de 3.7 µL de piridina 2.6 µL de anhídrido trifluoroacético se adicionaron. Después de agitar durante 4 h, TLC no muestra progreso significativo de la reacción. La mezcla de reacción se dejó calentar hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 3 h. Nuevamente, TLC no muestra progreso significativo de la reacción. Un tercer baño de 3.7 µL de piridina y 2.0 mL de anhídrido trifluoroacético se adicionó, la mezcla se agitó durante 2 h, TLC muestra que la conversión se mejora.

La reacción se paró y los volátiles se evaporaron a presión reducida. El residuo se disolvió en CHC13 y se lavó con solución acuosa saturada de NaHC03 y agua, dos veces y la capa de CHC13 se evaporó. El residuo se cromatografió en una columna de gel de sílice eluida con acetona-CHCl3 al 10% (v/v) obteniendo dos componentes puros, 208.1 y 208.2. El material iniciador restante en la columna se eluyó con CH3OH-CHC13 conteniendo Et3N al 10%, etiquetado como 208.3. 208.1 aproximadamente 1 mg Rf = 0.67 208.2 aproximadamente 3 mg Rf = 0.45 208.3 aproximadamente 4 mg Rf = 0 'HR N en CDC13 208.2 archivo: GZ .013 (Dept. 3): -N-CH,, d 3.10 ppm. 208.3 archivo: GZ .014 (Dept. 3): -N-CH3, d 2.40 ppm.

En CDC13 , la señal del grupo metilo muestra un campo significativamente pequeño que se mueve de d 2.40 ppm a d 3.10 ppm. Por lo tanto el producto deseado es el producto 2 (compuesto 41) .

El experimento se repitió como se describe posteriormente : Una colección del material recuperado 208.1, aproximadamente 5 mg (0.011 mmol) se co-evaporó con tolueno dos veces y se disolvió en 2 mL de CH2C12 seco (con criba molecular) . Se adicionó 40 µL de piridina (0.497 mmol, 45 eq) a 0°C, seguido de 10 µL (0.071 mmol. 6.5 eq.) de (CF3CO)20). La mezcla se agitó bajo N2 durante 2 h, TLC 1 mostró que la reacción se completó. Los volátiles se evaporaron in vacuo y el residuo se pasó a través de una columna de gel de silicio pequeña usando acetona - CHC13 al 10% como el eluyente, produciendo 5 mg del producto etiquetado como 209-2.

Ejemplo 18 Preparación de bisindolil maleimida de la fórmula: 0H El compuesto 24a, 140 mg (0.511 mmol) se evaporó con tolueno dos veces y se disolvió en 5.0 ml de THF anhidro destilado fresco. Se enfrió a 0°C (baño de hielo) y se agitó bajo N2. Se adicionó 5.0 mL (5.0 mmol) de solución de BH3 - THF 1.0 M por vía de una jeringa. La mezcla resultante se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente y se agitó bajo N2 durante 15 h. Se enfrió con un baño de hielo y después se adicionó 10 ml de NaOH al 10%, seguido de la adición de 10 ml de H202 al 50%. La mezcla resultante blanca turbia se agitó a temperatura ambiente durante 5 h. Se evaporó en un rotavapor para remover el THF y el residuo se diluyó con 50 ml de agua. Se extrajo con acetato de etilo (40 ml x 3) . La capa de acetato de etilo se lavó con salmuera (50 mL) y se secó con Na2S04. Después de la evaporación el residuo se separó en una columna de gel de sílice (1 cm X 12.5 cm, cromatografía rápida) usando tolueno (20 ml) , acetato de etilo 30% - 100% en hexano (145 ml) . El cuarto componente se identificó para ser el producto deseado 42a, 69 mg (46%) .

El compuesto 49 se sintetizó usando las siguientes etapas y el mismo procedimiento general como se discutió en detalle en el Ejemplo 14. 42a 43a 130mg ( 0. 5mmol) 197mg (98.8%) 45a 51mg (0.099mmol, 801) (0. 46a 46mg (0.094 iti ol, 95%) • 46mg a. DMF 47a HMDS 36mg (0.076 -mmol. 81%) CH3OH b. H+ 48a 20mg (0.043 iraaol, 56%) 48a 49; Ejepplo 19 Prueba de Inhibición de la Proteína cinasa C In Vitro Mezcla de Reacción: µl Ca +H" (reserva 9 .4 mM) 55 µl lípidos (PS 5 µg/pozo, DG 0.6 µ/pozo) o HEPES µl Compuesto o DMSO (Compuestos de prueba concentración inicial a 5000 nM) 10 µl Sustrato de Proteína Basal Mielina (MBP) (MBP 3 mg/ml, lot # 451-026) µL ATP (ATP 300 µM, 0.25 µCi/pozo AT32P, y MgCl2 10 mM) µL Enzima (PCC a 1:80 en HEPES, ß?r 1:30, en HEPES) Reserva de amortiguador de HEPES es de 100 mM, pH 7.5.

La Mezcla de Reacción total se igualó a 100 µl y se incubó durante 10 minutos a 30°C. La reacción se paró con la adición de 100 µL TCA al 25%. 25 µl de una solución BSA 1 mg/ml se adicionó y 200 µl de la mezcla de reacción se transfirió a una placa de filtración de fibra de vidrio de 96 pozos (Millipore Cat. # MAFCNOB50) . El sobrenadante se filtró y se lavó tres veces con TCA al 10% . El fondo de la placa de filtración y el vehículo instalado se removió. 100 µl de un Microscint-20 (Packard Cat. # 6013621) se adicionó y las muestras se cargaron en un contador Packard.

Preparación Lípida Los lípidos (Avanti Polar Lipids) se adicionaron a un tubo de cultivo de vidrio de borosilicato (25 x 150 mm) . Los lípidos se secaron bajo nitrógeno hasta que el cloroformo se evaporó. Los lípidos se resuspendieron en el amortiguador HEPES, y sonicados durante aproximadamente 30 segundas, después formando vórtice para mezclar bien. Los lípidos se mantuvieron en hielo húmedo hasta la adición a la prueba.

Resultados Los valores IC50 se determinaron para cada uno de los siguientes compuestos, usando el anterior ensayo in vitro. Se probaron cinco concentraciones de cada compuesto contra alfa PCC (PCC o.) y PCC beta II (PCC ß„) . Las concentraciones de los compuestos probados fueron 5000 nM, 500 nM, 50 nM, 5 nM, 1 nM y cero (sin compuesto, solo DMSO) . La muestra sin ningún compuesto adicionado se usó para determinar el 100% de actividad de la enzima PCC en la prueba. Los valores de IC50 se estimaron de las curvas de inhibición empleando estas concentraciones .

Valores IC50 en nanoHolar (nM) PKC a PKC ßa 57 5.0 Valores IC5fl en nanoMolar (m^) PKC a PKC ßa 79 5.5 Valores IC5g en nanoHolar (nM) PKC a PKC ßn 140 3.5 Valores IC5g en nanoHolar (nM) PKC a PKC ßa • 26 2.4 Valores IC5g en nanoHolar (nM) PKC a PKC ßa 2.6 2.2 Valores IC5fl en nanoHolar ' (nM) PKC a KC ßn 2700 100 48a Valores IC50 en nanoHolar (nM) PKC a PKC ßa 130 13 49a Valores IC50 en nanoMolar (nM) KC a PKC ßp 1300 90 Como un inhibidor de la proteína cinasa C, los compuestos expuestos aquí son útiles en el tratamiento de las condiciones en las cuales la proteína cinasa C ha demostrado un papel en la patología. Las condiciones reconocidas en el arte incluyen: diabetes mellitus y sus complicaciones, isquemia, inflamación, desórdenes del sistema nervioso central, enfermedad cardiovascular, enfermedad de Alzheimer, enfermedad dermatológica y cáncer.

Los inhibidores de la proteína cinasa C han sido mostrados para bloquear las respuestas inflamatorias tales como neutrófilo oxidativo, regulación en bajo de CD3 en los linfocitos T y edema de mano forbol-inducido. Twoeny, B. et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. 171: 1087-1092 (1990); Mulqueen, M.J. et al. Agents Actions 37: 85-89 (1992) . Por lo tanto, como los inhibidores de PCC, los compuestos presentes son útiles en el tratamiento de la inflamación.

La actividad de la proteína cinasa C juega un papel central en el funcionamiento del sistema nervioso central . Huang, K.P. Trends Neurosci. 12: 425-432 (1989). Además, los inhibidores de la proteína cinasa C han sido mostrados para prevenir el daño observado en la lesión cerebral isquémico focal y central y el edema cerebral. Hará, H. et al. J. Cereb. Blood Flow Metab. 10: 646-653 (1990); Shibata, S. et al. Brain Res. 594: 290-294 (1992). Recientemente, la proteína cinasa C ha sido determinada para ser implicada en la enfermedad de Alzheimer. Shimohama, S. et al., Neurology 43: 1407-1413 (1993) . Por lo tanto, los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer y en la lesión cerebral isquémica.

La actividad de la proteína cinasa C ha sido asociada con el crecimiento celular, promoción de tumor y cáncer. Rotenberg, S.A. and einstein, I.B. Biochem. Mol. Aspects Sel . Cáncer l : 25-73 (1991). Ahmad et al., Molecular Pharmacology: 43 858-862 (1993) . Se conoce que los inhibidores de la proteína cinasa C son efectivos en la prevención del crecimiento de tumores en animales. Meyer, T. et al. Int. J. Cáncer 43: 851-856 (1989); Akinagaka, S. et al. Cáncer Res. 51: 4888-4892 (1991). Los compuestos de la presente invención también actúan como agentes inversos multidroga (MDR) haciéndolos compuestos efectivos cuando se administran en conjunto con otros agentes quimioterapéuticos.

La actividad de la proteína cinasa C también juega un importante papel en la enfermedad cardiovascular. La actividad de la proteína cinasa C aumentada en la vascularidad ha sido mostrada que causa vasoconstricción e hipertensión aumentada. Un inhibidor de la proteína cinasa C conocido previenen este aumento. Bilder, G.E. et al. J. Pharmacal. Exp. Ther. 252: 526-530 (1990) . Debido a que los inhibidores de la proteína cinasa C demuestran inhibición del neutrófilo oxidativo, los inhibidores de la proteína cinasa C también son útiles en el tratamiento de isquemia cardiovascular y el mejoramiento de la función cardíaca siguiendo isquemia. Muid, R.E. et al. FEBS Lett. 293 : 169-172 (1990); Sonoki, H. et al. Kokyu-To Junkan 37: 669-674 (1989). El papel de la proteína cinasa C en la función de plaquetas también ha sido investigado y ha mostrado niveles de la proteína cinasa C elevados que se correlacionan con la respuesta aumentada a agonistas. Bastyr III, E.J. and Lu, J. Diabetes 42 : (Suppl. 1) 97A (1993). La PCC ha sido implicada en la ruta bioquímica en la modulación del factor de actividad de plaquetas de la permeabilidad microvascular. Kobayashi et al., Amer. Phys . Soc . H1214-H1220 (1994). Los inhibidores de la proteína cinasa C potentes han sido demostrados para afectar la agregación inducida de agonistas en las plaquetas. Toullec, D. et al. J. Biol. Chem. 266: 15771-15781 (1991) . Los inhibidores de la proteína cinasa C también bloquean la proliferación celular de músculo liso inducida agonista. Matsumoto, H. and Sasaki, Y. Biochem. Biophys. Res. Commun. 158: 105-109 (1989) . Por lo tanto, los presentes compuestos son útiles en el tratamiento de enfermedad cardiovascular, ateroesclerósis y restenosis.

La actividad anormal de la proteína cinasa C también ha sido enlazada a desórdenes dermatológicos tales como psoriasis. Horn, F. et al. J. Invest. Dermatol. 88: 220-222 (1987); Raynaud, F. and Evain-Brion, D. Br. J. Dermatol. 124: 542-546 (1991) . La psoriasis se caracteriza por la proliferación anormal de queratinocitos. Los inhibidores de la proteína cinasa C conocidos han sido mostrados para inhibir la proliferación de queratinocito de una manera paralela a su potencia como los inhibidores de la PCC. Hegemann, L. et al. Arch. Dermatol. Res. 286: 456-460 (1991); Bollag, W.B. et al. J. Invest. Dermatol. 100: 240-246 (1993). Por lo tanto, los compuestos como inhibidores de la PCC son útiles en el tratamiento de psoriasis. .

La proteína cinasa C ha sido enlazada a varios aspectos diferentes de diabetes. La actividad excesiva de la proteína cinasa C ha sido enlazada a los defectos de señalización de insulina y por lo tanto a la resistencia a la insulina observada en la diabetes de tipo II. Karasik, A. et al. J. Biol. Chem. 265: 10226-10231 (1990); Chen, K.S. et al. Trans . Assoc. Am. Physicians 104: 206-212 (1991); Chin, J.E. et al. J. Biol. Chem. 268: 6338-6347 (1993) . Además, los estudios han demostrado un marcado aumento en la actividad de la proteína cinasa C en los tejidos conocidos a ser susceptibles de complicaciones diabéticas cuando se exponen a condiciones hiperglicémicas . Lee, T. S. et al . J. Clin. Invest. 83: 90-94 (1989); Lee, T.S. et al. Proc. Nati. Acad. Sci. USA 86: 5141-5145 (1989); Craven, P.A. and DeRubertis, F.R. J. Clin. Invest. 83: 1667-1675 (1989); Wolf, B.A. et al. J. Clin. Invest. 87: 31-38 (1991); Tesfaramariam, B. et al. J. Clin. Invest. 87: 1643-1648 (1991) .

Los compuestos de la Fórmula I se formulan preferentemente antes de la administración. Por lo tanto, aún otro aspecto de la presente invención es una formulación farmacéutica que comprende un compuestos de la Fórmula I y uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables, diluyentes o excipientes .

Las presentes formulaciones farmacéuticas se preparan mediante procedimientos conocidos usando ingredientes disponibles fácilmente y bien conocidos. En la elaboración de los compuestos de la presente invención, el ingrediente activo se mezclará usualmente con un vehículo, o diluido por un vehículo, o adjunto dentro de un vehículo que podría estar en la forma de una cápsula, pastilla, papel u otro recipiente. Cuando el vehículo sirve como un diluyente, este podría ser un material sólido, semisólido o líquido el cual actúa como un vehículo, excipiente o medio para el ingrediente activo. Así, las composiciones pueden ser en la forma de tabletas, pildoras, polvos, pastillas, elíxires, suspensiones, emulsiones, soluciones, jarabes, aerosol (como un sólido o en un medio líquido) , cápsulas de gelatina suaves y duras, supositorios, soluciones inyectables esterilizadas y polvos empaquetados esterilizados.

Algunos ejemplos de vehículos apropiados, excipientes y diluyentes incluyen lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol, almidones, goma de acacia, fosfato de calcio, alginatos, tragacanto, gelatina, silicato de calcio, celulosa microcristalina, polivinilpirrolidona, celulosa, jarabe de agua, metil celulosa, metil y propilhidroxibenzoatos, talco, estearato de magnesio y aceite mineral. Las formulaciones pueden incluir adicionalmente agentes lubricantes, agentes humidificantes, agentes emulsificantes y de suspensión, agentes preservativos, agentes edulcorantes o agentes saborizantes . Las composiciones de la invención podrían formularse para proporcionar liberación rápida, sostenida o prolongada del ingrediente activo después de la administración al paciente. Las composiciones se formulan preferentemente en una forma de dosificación, cada dosificación contiene de aproximadamente 1 a aproximadamente 500 mg, más típicamente de aproximadamente 5 a aproximadamente 300 mg, del ingrediente activo. Sin embargo, se entenderá que la dosificación terapéutica administrada se determinará por el médico en la claridad de las circunstancias relevantes incluyendo la condición a ser tratada, la elección del compuesto a ser administrado y la elección de la ruta de administración. Por lo tanto los rangos de dosificaciones anteriores no se pretenden limitar el alcance de la invención de ninguna manera. El término "forma de dosificación unitaria" se refiere a unidades físicamente discretas apropiadas como dosificaciones unitarias para los sujetos humanos y otros mamíferos, cada unidad contiene una cantidad predeterminada del material activo calculado para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con un vehículo farmacéutico apropiado.

Además de las formulaciones anteriores, los compuestos de la presente invención podrían administrarse tópicamente. Las formulaciones tópicas son ungüentos, cremas, y geles. Los ungüentos en general se preparan usando ya sea (1) una base oleaginosa, p. ej . , una base que consiste de aceites fijos o hidrocarburos, tales como petrolato blanco o aceite mineral, o (2) una base absorbente, p. ej . , una base que consiste de una sustancia anhidra o sustancias que pueden absorber agua, por ejemplo lanolina anhidra. Usualmente, siguiendo la formación de la base, ya sea oleoginosa o absorbente, el ingrediente activo (compuesto) se adiciona a una cantidad que proporciona la concentración deseada.

Las cremas son emulsiones aceite/agua. Estas consisten de una fase aceitosa (fase interna) , que comprende típicamente aceites fijos, hidrocarburos, y similares, tales como ceras, petrolato, aceite mineral, y similares, y una fase acuosa (fase continua) , que comprende agua y cualquier sustancia soluble en agua, tales como sales. Las dos fases se estabilizan mediante el uso de un agente de emulsificación, por ejemplo, un agente activo superficial, tal como lauril sulfato de sodio, coloides hidrofílicos, tales como arcillas coloidales de acacia, goma V y similares. Debido a la formación de la emulsión, el ingrediente activo (compuesto) usualmente se adiciona a una cantidad para lograr la concentración deseada.

Los geles comprenden una base seleccionada de una base oleoginosa, agua, una base de emulsión-suspensión. A la base se adiciona una agente gelatinizante el cual forma una matriz en la base, aumentando su viscosidad. Ejemplos de agentes gelatinizantes son hidroxipropil celulosa, polímeros de ácido acrílico, y similares. Usualmente, el ingrediente activo (compuestos) se adiciona a la formulación a la concentración deseada en un punto precedente a la adición del agente gelatinizante .

La cantidad del compuesto que se incorpora en una formulación tópica no es crítica; la concentración solo debería ser un rango suficiente para permitir la aplicación adecuada de la formulación al área de tejido afectado en una cantidad que liberará la cantidad deseada del compuesto.

La cantidad usualmente de una formulación tópica a ser aplicada a un tejido afectado dependerá del tamaño de tejido afectado y la concentración del compuesto en la formulación. En general, la formulación será aplicada al tejido afectado en una cantidad que proporcione de aproximadamente 1 a aproximadamente 500 µg del compuesto por cm2 de un tejido afectado. Preferentemente, la cantidad aplicada del compuesto dependerá se encontrará en el rango de . aproximadamente 30 a aproximadamente 300 µg/cm2, más preferentemente, de aproximadamente 50 a aproximadamente 200 µg/cm2, y, más preferentemente de aproximadamente 60 a aproximadamente 100 µg/cm2.

Los siguientes ejemplos de formulación son solo ilustrativos y no pretenden limitar el alcance de la invención de ninguna manera.

Formulación 1 Las cápsulas de gelatina dura se preparan usando los siguientes ingredientes: Los ingredientes anteriores se mezclan y rellenan en cápsulas de gelatina duras en cantidades de 460 mg.

Formulación 2 Una tableta se prepara usando los ingredientes posteriores : Los componentes se mezclan y comprimen para formar las tabletas cada una pesando 665 mg.

Formulación 3 Una solución en aerosol se prepara conteniendo los siguientes componentes: El compuesto activo se mezcla con etanol. La mezcla se adiciona a una porción del propulsante 22, se enfría a -30°C y se transfiere a un dispositivo rellenador. La cantidad requerida después se alimenta a un recipiente de acero inoxidable y se diluye con lo restante del propulsante. Las unidades de la válvula después se calibran en el recipiente.

Formulación 4 Las tabletas cada una conteniendo 60 mg del ingrediente activo se elaboran como sigue: El ingrediente activo, almidón y celulosa se pasan a través de una criba U.S. de malla No. 45 y se mezclan completamente. La solución de polivinil pirrolidona se mezcla con los polvos resultantes los cuales después se pasan a través de una criba U.S. de malla No. 14. los granulos así producidos se secan a 50°C y se pasan a través de una criba U.S. de malla No. 18. El almidón de carboximetilo de sodio, estearato de magnesio y el talco, previamente pasados a través de una criba U.S. de malla No. 60, después de adicionan a los granulos que, después de mezclar se comprimen en una máquina de formación de tabletas para producir las tabletas cada una pesando 150 mg.

Formulación 5 Las cápsulas cada una conteniendo 80 mg del medicamento se elaboran como sigue: El ingrediente activo, celulosa, almidón y estearato de magnesio se mezclan, se pasan a través de una criba U.S. se malla No. 45, y rellenan en cápsulas de gelatina duras en cantidades de 200 mg.

Formulación 6 Los supositorios cada uno conteniendo 225 mg del ingrediente activo podrían elaborarse como sigue: El ingrediente activo se pasa a través de una criba U.S. de malla No. 60 y se suspendió en glicéridos de ácidos grasos saturados previamente fundidos usando un mínimo necesario de calor. La mezcla después se vertió en un molde de supositorio de capacidad nominal de 2 g y se deja enfriar.

Formulación 7 Las suspensiones cada una conteniendo 50 mg del medicamento por 5 mL de dosis se elaboran como sigue: El medicamento se pasa a través de una criba U.S. de malla No. 45 y se mezcla con la celulosa microcristalina de sodio y el jarabe para formar una pasta suave. La solución de ácido benzoico, el saborizante y el color se diluyen con algo de agua y se adiciona, con agitación. Después se adiciona suficiente agua para producir el volumen requerido.

Formulación 8 Una formulación intravenosa podría prepararse como sigue; La solución de los ingredientes anteriores se administra intravenosamente a una velocidad de 1 mL por minuto a un sujeto en necesidad del tratamiento.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el convencional para la manufactura de los objetos a que la misma se refiere.

Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes.

Claims (26)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de la fórmula: caracterizado porque: R' es independientemente hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo -C,,, alcoxi Cj.-C4, NR3R4 o -NHCO (alquilo C^-C- ; V es -O-, -NH- o alquilo -NO.-C,,; T es alquileno Ci-Q opcionalmente sustituido con halo o alquilo C3.-C4; W es alquileno Cí- 2 opcionalmente sustituido con halo o alquilo Ci-G,; J es •x-c- I s o cuando T y W son ambos metileno, J se selecciona del grupo que consiste de en donde n y m son independientemente 1 o 2 ; X es oxígeno, azufre o un enlace entre los átomos de carbono unidos por el puente X; Y es halo, alquilo Cx-C4 o hidrógeno ; Ri. es hidrógeno o alquilo Cj.-C4; S es -CHO o el grupo en donde M es hidrógeno, -CH20Rs, -CH2NR3R4 o -NR3R4; R2 es hidrógeno o halo; y Z es hidrógeno o -0RS; en donde R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo Q.-G, halo(alquilo Cj.-C4) , alcanoilo C^-C,, halo (alcanoilo Cx-C4) o R3 y R4 tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros; y R5 y Rs son independientemente hidrógeno, alquilo C-.-C., halo(alquilo CL-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo C-.-C o juntos forman un grupo divalente seleccionado del grupo que consiste de -CR7R8- en donde R7 y R8 son independientemente hidrógeno, alquilo Ci-C4 o halo (alquilo C^-C,) o R7 y R8 tomados junto con el átomo C al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros con la condición de que al menos uno de Y, S, T o W es halo o un grupo halo sustituido, o T y W son ambos metileno.

2. El compuesto de la reivindicación 1, caracterizado porque al menos uno de Y, S, T o W es flúor o un grupo sustituido con flúor.

3. Un compuesto de la fórmula: caracterizado porque: R. es alquilo Cj.-C4 o hidrógeno; T es alquileno C2-C4 opcionalmente sustituido con halo o alquilo C^-C,; W es etileno opcionalmente sustituido con halo o alquilo X es oxígeno, azufre o un enlace entre los átomos de carbono unidos por el puente X; Y. es halo, alquilo Cx-C4 o hidrógeno; Rj. es hidrógeno o alquilo C¡.-C4; S es -CHO o el grupo en donde M es hidrógeno, -CH2OR5, -CH2NR3R4 o -NR3R4; R2 es hidrógeno o halo; y Z es hidrógeno o -0RS; en donde R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo C^-C,, halo(alquilo C-.-C4) , alcanoilo C-C^, halo (alcanoilo Ci-C-) o R3 y R4 tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros; y Rs y Rs son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo C-C4) , alcanoilo G-G, halo (alcanoilo -C o juntos forman un grupo divalente seleccionado del grupo que consiste de -CR7RB- en donde R7 y R8 son independientemente hidrógeno, alquilo G.- o halo (alquilo G-C4) o R7 y R8 tomados junto con el átomo C al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros • con la condición de que al menos uno de Y, S, T o W es halo o un grupo halo sustituido, o T y W son ambos metileno.

4. El compuesto de la reivindicación 3, caracterizado porque al menos uno de Y, S, T o W es flúor o un grupo sustituido con flúor.

5. El compuesto de la reivindicación 3, caracterizado porque W es etileno sustituido con flúor.

6. El compuesto de la reivindicación 3, caracterizado porque T es etileno sustituido con flúor.

7. El compuesto de la reivindicación 3, caracterizado porque T es trimetileno sustituido con flúor.

8. El compuesto de la reivindicación 3, caracterizado porque ^ e Y son hidrógeno y X es oxígeno .

9. El compuesto de la reivindicación 5, caracterizado porgue RL e Y son hidrógeno, X es oxígeno y S es M I -CH I R2

10. El compuesto de la reivindicación 9, caracterizado porque T es etileno.

11. Un compuesto de la fórmula: caracterizado porque J se selecciona del grupo que consiste de en donde Rx es alquilo Cx-C4 o hidrógeno ; n y m son independientemente 1 o 2; y R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo G-G, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo CX=C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros.

12. El compuesto de la reivindicación 9, caracterizado porque Rx es hidrógeno.

13. El compuesto de la reivindicación 9, caracterizado porque el sustituyente halo de J es flúor.

14. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto de la fórmula: en donde; R1 es independientemente hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo Cx-C4, alcoxi Cx-C4, NR3R4 o -NHCO (alquilo Cx-C4) ; Rx es alquilo Cx-C4 o hidrógeno; T es alquileno Cx-C4 opcionalmente sustituido con halo o alquilo Cx-C4; es alquileno Cx-C2 opcionalmente sustituido con halo o alquilo Cx-C4; J. es Y I -x-c- I s o cuando T y W son ambos metileno, J se selecciona del grupo que consiste de en donde n y m son independientemente 1 o 2 ; X es oxígeno, azufre o un enlace entre los átomos de carbono unidos por el puente X; Y es halo, alquilo Cx-C4 o hidrógeno; S es -CHO o el grupo L en donde M es hidrógeno, -CH20R5, -CH2NR3R4 o -NR3R4; R2 es hidrógeno o halo; y Z es hidrógeno o -0R6 ; en donde R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o R3 y R4 tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros; y R5 y Rs son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o juntos forman un grupo divalente seleccionado del grupo que consiste de -CR7R8- en donde R7 y R8 son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4 o halo (alquilo Cx-C4) o R7 y R8 tomados junto con el átomo C al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros con la condición de que al menos uno de Y, S, T o W es halo o un grupo halo sustituido, o T y W son ambos metileno; y un excipiente, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable .

15. La composición farmacéutica de la reivindicación 14, caracterizada porque J es Y I -x-c-

16. La composición farmacéutica de la reivindicación 15, caracterizada porque S es « / -M 1, X es oxígeno; y Rx es hidrógeno.

17. La composición farmacéutica de la reivindicación 16, caracterizada porque al menos uno de Y, S, T o W es flúor o un grupo sustituido con flúor.

18. La composición farmacéutica de la reivindicación 14, #• caracterizada porque T y W son metileno y el sustituyente halo es flúor.

19. Un método de tratamiento de un mamífero que tiene una enfermedad o una condición asociada con la actividad anormal de la proteína cinasa C, caracterizado porque dicho método comprende administrar al mamífero una cantidad farmacéuticamente efectiva del compuesto de la fórmula: en donde: R' es independientemente hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo Cx-C4, alcoxi Cx-C4, NR3R4 o -NHCO (alquilo Cx-C4) ; Rx es alquilo Cx-C4 o hidrógeno; T es alquileno Cx-C4 opcionalmente sustituido con halo o alquilo Cx-C4; W es alquileno Cx-C2 opcionalmente sustituido con halo o alquilo Cx-C4; J. es Y I •x-c- I s o cuando T y W son ambos metileno, J se selecciona del grupo que consiste de -t 143 en donde n y son independientemente 1 o 2 ; X es oxígeno, azufre o un enlace entre los átomos de carbono unidos por el puente X; Y es halo, alquilo Cx-C4 o hidrógeno; S es -CHO o el grupo en donde M es hidrógeno, -CH20R5, -CH2NR3R4 o -NR3R4; R2 es hidrógeno o halo; y Z es hidrógeno o -0RS; en donde R3 y R4 son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o R3 y R4 tomados juntos con el átomo N al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros; y Rs y R6 son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4, halo(alquilo Cx-C4) , alcanoilo Cx-C4, halo (alcanoilo Cx-C4) o juntos forman un grupo divalente seleccionado del grupo que consiste de -CR7Ra- en donde R7 y R8 son independientemente hidrógeno, alquilo Cx-C4 o halo (alquilo Cx-C4) o R7 y R8 tomados junto con el átomo C al cual están unidos forman un anillo de 5 o 6 miembros con la condición de que al menos uno de Y, S, T o W es halo o un grupo halo sustituido, o T y W son ambos metileno; y un excipiente, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

20. El método de la reivindicación 19, caracterizado porque J es Y I •x-c-

21. El método de la reivindicación 20, caracterizado porque S es / -M fc X es oxígeno; y Rx es hidrógeno.

22. El método de la reivindicación 20, caracterizado porque al menos uno de Y, S, T o W es flúor o un grupo sustituido con flúor.

23. El método de la reivindicación 19, caracterizado porque T y W son metileno y el sustituyente halo es flúor.

24. El método de la reivindicación 19, caracterizado porque W es etileno sustituido con flúor.

25. El método de la reivindicación 19, caracterizado porque T es etileno sustituido con flúor.

26. El método de la reivindicación 19, caracterizado porque T es trimetileno sustituido con flúor.