MXPA98000915A - Uso de la l-carnitina y derivados para reducir los niveles de ceramida y para potenciamiento antirretroviral - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un novedoso uso de la L-carnitina, los derivados de la misma y sus sales farmacológicamente aceptables, en combinación con fármacos antirretrovirales parareducir los niveles de ceramida y mejorar la actividad de los fármacos antirretrovirales anteriormente mencionados, para el tratamiento terapéutico de la infección por VIH y el SIDA.

Description

USO DE LA L-CARNITINA Y DERIVADOS PARA REDUCIR LOS NIVELES DE CERAMIDA Y PARA POTENCIAMIENTO ANTIRRETROVIRAL DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a un nuevo uso terapéutico de la L-carnitina, a los derivados de la misma, y a sus sales farmacológicamente aceptables en combinación con fármacos antirretrovirales para el tratamiento terapéutico de la infección por VIH y SIDA. Más particularmente, la presente invención se refiere al uso de la L-carnitina, a las acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo, lineal o ramificado, tiene de 2 a 6 átomos de carbono, y a las sales farmacológicamente aceptables de las mismas, en combinación con los inhibidores similares al nucleósido de la transcriptasa inversa, los inhibidores no nucleosidicos de la transcriptasa inversa y los inhibidores de la proteasa del VIH, para reducir los niveles de ceramida y mejorar la actividad de los fármacos antirretrovirales anteriormente mencionados en pacientes infectados con VIH. La mayoria de los mecanismos patogenéticos que contribuyen a la progresión de la infección debida al REF: 26792 virus de inmunodeficiencia humana 1 ó 2 (VIH-1, VIH-2) están directa o indirectamente relacionados al estado general de activación del sistema inmune. La activación crónica del sistema inmune potencia la replicación viral via la secreción de un número de citocinas que favorecen la expresión del VIH y mediante el mantenimiento de una reserva de células inmunes activadas las cuales actúan como blancos u objetivos para el VIH y facilitan su replicación. Además, el estado de activación persistente del sistema inmune induce anormalidades de tal naturaleza (por ejemplo, una apoptosis incrementada) para conducir a un debilitamiento progresivo de las respuestas inmunes . De este modo se establece un circulo vicioso: la pérdida progresiva de la competencia del sistema inmune -> diseminación viral -» eliminación reducida del virus —» activación crónica del sistema inmune. El proceso anterior puede durar varios años hasta que ocurre un deterioro notable del sistema inmune, para conducir a una replicación viral descontrolada y al inicio de infecciones oportunistas, o al desarrollo del síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). Con base en los mecanismos patogenéticos anteriormente descritos, parece claro que cualquier tratamiento anti-VIH debe de ser dirigido a reducir la replicación viral y a bloquear el deterioro del sistema inmune . Como lo contempla la terapia antirretroviral, desafortunadamente el VIH está caracterizado por un alto grado de variabilidad genética que se origina por encima de todo en la falta muy sustancial de precisión de la transcriptasa inversa. La enzima retroviral carece de sistemas enzimáticos para el control de los posibles errores en la transcripción. El resultado es el surgimiento de variantes del virus, en una amplia gama que es una función de la replicación viral, las cuales son responsables para la evitación progresiva del sistema inmune y de la resistencia a los fármacos antirretrovirales. En el caso de la zidovudina (AZT, ZDV) la pérdida de eficacia clínica en situaciones de monoterapia es un hecho extensamente reconocido. Incluso los agentes antirretrovirales descubiertos más recientemente, por ejemplo, zalcitabina [ddc], didanosina [ddl] y lamivudina [3TC] sufren del mismo inconveniente. Se ha demostrado recientemente que la ceramida estimula la expresión del VIH. Lo que es más, la ceramida es uno de los factores capaces de inducir la apoptosis celular, un fenómeno que es incrementado en sujetos con infección por VIH y el cual contribuye a la disminución de los linfocitos TCD4 y TCD8. Parece asi evidente que los cambios en la concentración o en el metabolismo de la ceramida pueden afectar la carga viral y la apoptosis celular en sujetos infectados con VIH (Papp B., y colaboradores, AIDS, Res. Hum. Retrovirus, 10(7) ,775-80) . Sorprendentemente, se ha encontrado ahora que la L-carnitina y los derivados de la misma, por ejemplo, las acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo, lineal o ramificado tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables de las mismas, inhiben la síntesis de la ceramida por al menos 25%, y cuando éstas son utilizadas en combinación con fármacos antirretrovirales tales como, por ejemplo, AZT, estavudina [d4T], fluorotimidina [FLT], azidouridina [Azdu], nucleósidos aciclicos fosfonados [PMEA], nucleósidos específicos del VIH-1 [TSAO], zalcitabina [ddC], didanosina [ddl] y lamivudina [3TC], dipiridodiazepinonas, tetrahidroimidazobenzo-diazepinonas, piridonas o L-fármacos, bis-heteroarilpiperazinas, derivados de alfa-anilinofenil-acetamida, derivados de quinaxolina, Ro-31-8959, U-81749, KNI-227, SC-52151, HOE/BAY 793 y similares, mejoran la actividad antirretroviral y la defensa del sistema inmune ejercida por estos fármacos.

Las sales farmacéuticamente aceptables de la L-carnitina o la acil-L-carnitina incluyen, además de las sales internas, cualquier sal de éstas, con ácidos que no den surgimiento a efectos tóxicos o colaterales indeseables. Estos ácidos son bien conocidos para los farmacólogos medianamente expertos y expertos en la tecnología farmacéutica. Los ejemplos no limitantes de las sales adecuadas incluyen, cloruro; bromuro; yoduro; aspartato; particularmente aspartato ácido; citrato, particularmente citrato ácido; tartrato; fosfato, particularmente fosfato ácido; fumarato, particularmente fumarato ácido; glicerofosfato; glucosa-fosfato; lactato; maleato, particularmente maleato ácido; orotato; oxalato, particularmente oxalato ácido; sulfato, particularmente sulfato ácido; tricloroacetato; trifluoroacetato y metansulfonato . Particularmente preferidas son la L-carnitina, acetil-, propionil-; butiril-; valeril- e isovaleril-L-carnitina. La administración combinada de L-carnitina y sus derivados como se definieron anteriormente más un agente antirretroviral, es en general conducida via las rutas oral o parenteral a dosis diarias en el intervalo de 1 a 500 mg/kg, con una preferencia particular para dosis de 20 a 100 mg/kg, en una proporción de L-carnitina y sus derivados como se define anteriormente, al agente antirretroviral en el intervalo de 1:40 a 40:1, con una preferencia particular para proporciones de 1:10 a 10:1. Convenientemente, la administración tendrá la forma de una dosis unitaria que incluye ambos ingredientes activos, y ésta también puede incluir excipientes e ingredientes activos adicionales bien conocidos por aquellos expertos en la técnica, tales como, por ejemplo, dextrano, inhibidores de TNF-alfa (por ejemplo pentoxifilina) , glutatión y otros fármacos antioxidantes (por ejemplo, acetilcisteina) , fármacos inmunomodulatorios, agentes inmunosupresores o quimioterapéuticos, vitaminas y oligoelementos . Finalmente, se debe de hacer notar que todo sugiere que otros aminoácidos básicos, particularmente lisina, derivados acilados de aminoácidos básicos y sus sales farmacéuticamente aceptables, son capaces de reducir los niveles de ceramida y potenciar la actividad de los fármacos antirretrovirales para el manejo terapéutico de la infección por VIH y el SIDA. El propósito de los ejemplos siguientes es ilustrar la invención y éstos no deben de ser considerados de ningún modo como limitantes de la gama de posibilidades.

EJEMPLO 1 Fue evaluado el efecto de administración de una combinación de L-carnitina (8 g diariamente de manera oral por 4 semanas) más AZT (600 mg diariamente oralmente) en 13 pacientes que sufren de SIDA con niveles normales de carnitina y acetilcarnitina en suero e intracelularmente, quienes hablan sido sometidos previamente al tratamiento con AZT (600 mg diarios oralmente) por al menos 6 meses. Se llevaron a cabo determinaciones antes del tratamiento combinado, mientras que los pacientes estaban tomando únicamente AZT (T0), después de 4 semanas de terapia con la combinación de L-carnitina-AZT (TI) y un mes después de la descontinuación del tratamiento con L-carnitina (T2), dejando a los pacientes con AZT solo. Se midieron los linfocitos TCD4 mediante citometria de flujo por medio de un anticuerpo monoclonal especifico (número de linfocitos por mm3) y los linfocitos apoptósicos mediante citometria de flujo después de la tinción con yoduro de propidio, cuantificando las células con núcleos hipoliploides (número de linfocitos por 50,000 células). La carga viral (número de partículas virales por mi de suero) fue determinada mediante la cuantificación del ARN del VIH-1, por medio de una reacción en cadena de polimerasa (sistema de detección de VIH, Amplicor por Roche). Se utilizó la prueba de ilcoxon para el procesamiento estadístico . Los resultados se muestran en la Tabla 1 siguiente .

Tabla 1 .ente Linfocitos TCD-J/mm" Lin f ocit os VIH (particulas apoptós i cos/50, 000 vi rales por mi ) células TO TI T2 TO TI T2 T0 TI 1 195 211 172 85 59 130 3,500 900 2 239 254 264 112 37 84 2,400 1,600 3 172 176 176 90 29 35 2,800 1,600 4 254 287 279 91 40 39 1,700 1,500 141 165 165 59 47 66 62,000 1,100 6 125 205 146 280 81 36 2,200 2,000 7 40 51 47 41 26 88 3,800 3,100 8 309 423 411 82 67 41 5,900 3,900 9 303 502 402 102 20 41 5,300 3,300 47 46 43 65 42 64 2,300 2,300 11 120 120 116 52 52 55 1,400 1,400 Tabla 1 (continuación) Pacieni-e Lin tor-it- - r t-D /mm3 Linfocitos VIH (partículas apoptós icos/ 50 00 virales por mi ¡ células TO Ti T2 TO TI T2 TO Ti 12 52 60 41 148 111 104 900 1,300 13 26 378 378 113 38 54 43,000 7,000 Media 178 221 203 101 50 64 10,553 2,384 Pa-iente Linfocitos TD4/mm3 linfocitos VIH (partículas apoptós?cos/50, 000 células virales por mi) D.E. 101 144 133 61 25 64 19,070 1,661 Signifi- 0.001 0.02 0.001 0.04 0.004 cancia Estadística En los mismos sujetos los niveles de ceramida en linfocitos, medidos por medio del ensayo de cinasa de DAG (diacilglicerol) (Cifone M. G. y colaboradores. J.

Exp. Med. 180(4), 1547-52) disminuyeron de 48±8 pmol/106 linfocitos medidos a partir del tratamiento en combinación (T0) hasta 27±5 pmol/106 linfocitos (TI) (P<0.01), elevándose nuevamente hasta 38±9 pmol/10D linfocitos un mes después de la descontinuación de la L- carnitina (T2 ) . Estos resultados muestran claramente que el tratamiento con AZT solo, incluso cuando se prolongó previamente por más de 6 meses (T0), no proporciona aquellos mejoramientos inmunológicos y virológicos que son logrables con la combinación con L-carnitina-AZT en únicamente 4 semanas (TI) . Estos mejoramientos tienden a declinar con la descontinuación del tratamiento (T2).

EJEMPLO 2 Fueron tratados 4 sujetos con SIDA, con 600 mg de AZT diariamente por la via oral. De éstos, dos fueron también tratados con L-carnitina con 3 gramos diariamente. La duración total del tratamiento fue de 6 meses. Se realizaron biopsias musculares antes y después del tratamiento. La ceramida presente a nivel de las células musculares, fue determinada antes y después del tratamiento, después de la sonicación y homogenización del material de la biopsia. La carga viral fue determinada en los homogenizados del músculo mismo, como se describe en el Ejemplo 1. Los resultados se muestran en la Tabla 2 siguiente .

Tabla 2 eramida Ceramida VIH VIH pretratamíer.to postratamiento pretratamiento postratami ento (pmol/mg de ( mol/mg (partículas (partículas proteína ) proteina ) virales/ mg de virales/mg de pr teína proteína Paciente 1 89 95 3, 800 4, 100 (AZT) Paciente 2 95 103 5, 900 5, 800 (AZT) Media 92 99 4, 850 4, 950 D.E. 4 6 1,485 1,202 significann. s n. s cia estadística Paciente 3 129 39 10,200 3,200 (AZT + L- carnitina) Paciente 4 79 27 5, 100 1, 300 (AZT + L- carnitina Media 104 33 7, 650 4, 950 D.E. 35 8 3, 606 1,344 significan0.01 0.05 cia estadística Es aparente que el tratamiento con la combinación de L-carnitina-AZT es distintamente más efectivo al reducir la carga viral y los niveles de ceramida, también a nivel muscular, en comparación al tratamiento con AZT solo.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el convencional para la manufactura de los objetos a que la misma se refiere .

Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes:

Claims (13)

REIVINDICACIONES

1. El uso de la L-carnitina, acil-L-carnitinas, caracterizadas porque el grupo acilo, lineal o ramificado, tiene de 2 a 6 átomos de carbono, y sus sales farmacológicamente aceptables, para la producción de un medicamento adecuado para la reducción de los niveles de ceramida para el tratamiento terapéutico de la infección por VIH y el SIDA.

2. El uso de conformidad con la reivindicación 1, en combinación con inhibidores de la transcriptasa inversa similares a nucleósidos, inhibidores no nucleosidicos de la transcriptasa inversa e inhibidores de la proteasa del VIH, caracterizados porque son para la producción de un medicamento adecuado para reducir los niveles de ceramida y el mejoramiento de la actividad de los fármacos antirretrovirales anteriormente mencionados para el tratamiento terapéutico de la infección por VIH y el SIDA.

3. El uso de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porque se utiliza la L-carnitina .

4. El uso de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porque la acil-carnitina es isovaleril-L-carnitina.

5. El uso de conformidad con la reivindicación 1 6 2, caracterizado porque se utiliza un aminoácido básico, un aminoácido básico acilado o una sal farmacológicamente aceptable de los mismos.

6. Una composición farmacéutica oral o parenteralmente administrable, para reducir los niveles de ceramida, para el tratamiento terapéutico de la infección por VIH y el SIDA, caracterizada la composición porque comprende como ingrediente activo una cantidad de L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo, lineal o ramificado, tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables de los mismos, efectiva para reducir los niveles de ceramida, y al menos un excipiente farmacológicamente aceptable.

7. Una composición farmacéutica, oral o parenteralmente administrable para el tratamiento terapéutico de la infección por VIH y el SIDA, en combinación con la administración de los inhibidores de la transcriptasa inversa similares a nucleósido, inhibidores no nucleosidicos de la transcriptsa inversa o inhibidores de la proteasa del VIH, caracterizada la composición porque comprende una cantidad de L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo, lineal o ramificado, tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables de los mismos, efectiva para reducir los niveles de ceramida y la carga viral, para mejorar la inmunocompetencia de los pacientes infectados por VIH, y al menos- un excipiente-farmacológicamente aceptable.

8. Una composición farmacéutica oral o parenteralmente administrable en forma de dosis unitaria, para reducir los niveles de ceramida y mejorar la eficiencia de los fármacos antirretrovirales para el tratamiento terapéutico de la infección por VIH y el SIDA, caracterizada la composición porque comprende al menos un fármaco antirretroviral seleccionado de los inhibidores similares a nucleósidos de la transcriptasa inversa, inhibidores no nucleosidicos de la transcriptasa inversa o inhibidores de la proteasa del VIH, y una cantidad de L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo, lineal o ramificado, tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables de los mismos, efectiva para reducir los niveles de ceramida y la carga viral, y mejorar la inmunocompetencia de los sujetos infectados por VIH, y al menos un excipiente farmacológicamente aceptable.

9. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 6 ó 7, caracterizada porque la cantidad de L-carnitina, acil L-carnitinas en donde el grupo acilo, lineal o ramificado que tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables de los mismos, es tal que la dosis diaria de L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo, lineal o ramificado, tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables de los mismos y los fármacos antirretrovirales, es de 1 a 500 mg/kg, y la proporción entre la L-carnitina y las acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo, lineal o ramificado tiene de 2 a 6 átomos de carbono, y sus sales farmacológicamente aceptables, y el fármaco antirretroviral, es de 1:40 a 40:1.

10. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 6 ó 7, caracterizada porque la cantidad de la L-carnitina, acil L-carnitinas en donde el grupo acilo lineal o ramificado tiene de 2 a 6 átomos de carbono y sus sales farmacológicamente aceptables, es tal que la dosis diaria de L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo lineal o ramificado tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables del mismo y el fármaco antirretroviral, es de 20 a 100 mg/kg, y la proporción entre la L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo, lineal o ramificado tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables del mismo, y el fármaco antirretroviral es de 1:10 a 10:1.

11. La composición farmacéutica oral o parenteralmente administrable de conformidad con la reivindicación 8, en forma de dosis unitaria, caracterizada porque la cantidad de la L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo lineal o ramificado tiene de 2 a 6 átomos de carbono y sus sales farmacológicamente aceptables, es tal que la dosis diaria de L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo lineal o ramificado tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables del mismo y el fármaco antirretroviral, es de 1 a 500 mg/kg, y la proporción entre la L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo, lineal o ramificado tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables del mismo, y el fármaco antirretroviral es de 1:40 a 40:1.

12. La composición farmacéutica oral o parenteralmente administrable de conformidad con la reivindicación 8, en forma de dosis unitaria, caracterizada porque la cantidad de la L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo lineal o ramificado tiene de 2 a 6 átomos de carbono y sus sales farmacológicamente aceptables, es tal que la dosis diaria de L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo lineal o ramificado tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables del mismo y el fármaco antirretroviral, es de 20 a 100 mg/kg, y la proporción entre la L-carnitina, acil-L-carnitinas en donde el grupo acilo, lineal o ramificado tiene de 2 a 6 átomos de carbono y las sales farmacológicamente aceptables del mismo, y el fármaco antirretroviral es de 1:10 a 10:1.

13. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a la 12, caracterizada porque comprende además al menos un componente seleccionado de dextrano, inhibidores de alfa-TNF, fármacos antioxidantes, inmunomoduladores , inmunosupresores, agentes quimioterapéuticos, vitaminas y oligoelementos .