MXPA97002272A

MXPA97002272A - Inhibicion del crecimiento del cabello

Info

Publication number: MXPA97002272A
Application number: MXPA/A/1997/002272A
Authority: MX
Inventors: Shander Douglas; S Ahluwalia Gurpreet; Styczynski Peter
Original assignee: S Ahluwalia Gurpreet; Shander Douglas; Styczynski Peter
Priority date: 1994-09-28
Filing date: 1997-03-26
Publication date: 1997-06-01

Abstract

La presente invención se refiere a el crecimiento del cabello de un mamífero es reducido por la aplicación a la piel, de una composición que incluye un inhibidor de la proteína cinasa C.

Description

INHIBICIÓN DEL CRECIMIENTO DEL CABELLO DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La invención se refiere a un método para reducir el crecimiento no deseado del cabello en mamíferos, y a un método cosmético para este propósito. Una función principal del cabello de los mamíferos es proporcionar protección contra el ambiente. No obstante, esta función ha sido perdida en gran medida en humanos, en los cuales el cabello es mantenido o eliminado de diversas partes del cuerpo esencialmente por razones cosméticas. Por ejemplo, se prefiere en general tener cabello sobre el cuero cabelludo pero no sobre la cara. Han sido empleados diversos procedimientos para eliminar el cabello no deseado, incluyendo afeitado, electrólisis, cremas depiladoras o lociones, ceras, depilado, y antiandrógenos terapéuticos. Estos procedimientos convencionales tienen en general inconvenientes asociados con ellos. El afeitado, por ejemplo, puede provocar rayas y cortes, y puede también promover la percepción de un incremento en la velocidad o proporción del recrecimiento del cabello. El afeitado puede dejar barba cerdosa. La electrólisis, por otro REF: 24417 lado, puede dejar un área tratada libre de cabello por periodos prolongados de tiempo, pero puede ser cara, dolorosa, y algunas veces deja cicatrices. Las cremas depiladoras, aunque son muy efectivas, no son recomendadas típicamente para el uso frecuente debido a su alto potencial de irritación. El uso de ceras y depilació pueden provocar dolor, incomodidad, y pobre eliminación del cabello corto. Finalmente, los antiandrógenos --los cuales han sido utilizados para tratar hirsutismo femenino-- pueden tener efectos colaterales no deseados. Se ha descrito previamente que la velocidad o proporción y el carácter del crecimiento del cabello pueden sec alterados mediante la aplicación a la piel de inhibidores de ciertas enzimas. Estos incluyen los inhibidores de la 5-alfa-reductasa, ornitina-descarbox lasa, S-adenosilmetionina-descarboxilasa, gamma-gluramil-transpeptidasa, y transglutaminasa. Ver, por ejemplo, Breuer y colaboradores, Patente Norteamericana No. 4,885,289; Shander, Patente Norteamericana No. 4,720,489; Ahluwalia, Patente Norteamericana No. 5,095,007; Ahlu alia y colaboradores, Patente Norteamericana No. 5,096,911; Shander y colaboradores, Patente Norteamericana No. 5,132,293; y Shander y colaboradores, Patente Norteamericana No. , 143, 925. Se ha encontrado ahora que el crecimiento no deseado del cabello del mamífero (incluyendo el hombre) --particularmente el crecimiento del cabello estimulado por andrógenos-- puede ser inhibido por la aplicación a la piel de una composición que incluye un inhibidor de la proteína-cinasa C ("PKC") en una cantidad efectiva para reducir el crecimiento del cabello. El crecimiento no deseado del cabello, el cual es reducido puede ser el crecimiento normal del cabello, o el crecimiento del cabello que resulta de una condición anormal o por enfermedad. a PKC es una familia de enzimas sensibles al calcio, dependientes de los fosfolípidos, que tienen la habilidad para fosforilar proteínas. PKC incluye un sitio de enlace al ATP, un sitio de enlace al calcio, y una región que interactúa con el fosfolípido. Los inhibidores preferidos de PKC incluyen aquellos inhibidoras que interactúan con uno o más de estos sitios de enlace específicos. Entre los inhibidores de PKC que pueden ser utilizados están 1) las isoquinolin-sulfonamidas tales como 1- (5-isoquinolinil-sulfonil) -2-metilpiperizina y sus derivados (J. Biol. Chem. 264:810-815, 1989); 2) bisindolil aleimidas tales como el monoclorhidrato de 3-[1- (3-dimetilamino)propil]-lH-indol-3-il]-4- (lH-indol-3-il)-lH-pirrol-2, 5-diona (GF109203X), Ro 31-7549, y derivados de Ro 31-7549 (Biochem. J. 294:335-337, 1993; J. Biol. Chem. 266:15771-15781, 1991; y J. Invest. Der atol. 100:240-246, 1993); 3) derivados de fenotiazi a tales como tioridazina, trifluoperizina, y triflucarbina (J. Dermat. Sci. 4:18-25, 1992; y J. Biol. Chem. 255 8378-8380, 1980); 4) lisoesfingolípidos tales como esfingosina y derivados de esfingosina (Science 235: 670-6''4, 1987; y Ann . Rev. Pharmacol . Toxicol. 32:377-39'', 1992); 5) estaurosporina, y derivados de estaurosporina tales como 7-oxostaurosporina y 11-hidroxistaurosporina (Carcinogenesis 13:355-359, 1992; J. Antibiot. 45:195-198, 1992; y J. Org. Chem. 57:6327-6329, 1992); 6) verapamilo, fentolamina e imipramina (J. Biol. Chem. 255:8378-8380, 1980); 7) 6-palmitato de ácido L-ascórbico (Cáncer Pos. ^ : 6633-6638, 1987); 8) glucósido del ácido tl i ri rr"t- ínico y ácido 18ß-glicirretínico (Cáncer <->t*-»rs 49:9-12, 1990); 9) polimixin B, sangivamicina, y doxorrubicina-Fe (III) (J. Dermat. Sci. 4:18-25, 1992; J. Biol. Chem. 263:1682-1692, 1988; y Trends in Pharmacol. Sci. 12:188-194, 1991); 1.0 ) el producto fúngico, balanol, aislado de Verti ci l l - Um bal anoi des (J. A . Chem. Soc . 115:6452-6453, 1993); 11) indolocarbazoles substituidos (Bioorg.

Med. Chem. Let . 3:1959-1964, 1993); 12) 2- (aminomet:.l)piperidinas (J. Med. Chem. 34:2928-2931, 1991); 13) curcumina (FEBS Letters 341:19-22, 1994); 14) 4-propil-5- (4-piridinil) -2- (3H) -oxazolona (Cáncer Research 52:1195-1200, 1992); y 15) decualinio (Trends in Pharmacol. Sci. 12:188-194, 1991). Los inhibidores pueden ser irreversibles o reversibles (competitivos y no competitivos) . 31 inhibidor de PKC se incorpora pref rentemente en una composición tópica que incluye un vehículo o portador dermatológicamente aceptable, no tóxico, eL cual está adaptado para ser esparcido sobro la piel. Los ejemplos de vehículos apropiados son acetona, alcoholes, o una crema, loción, o gel que puod*» distribuir de manera efectiva el compuesto activo. t^n vehículo de este tipo se describe en la solicitud copendiente PCT/US 93/0506A. Además, puede ser agregada un mejorador de la penetración al vehículo, para mejonr adicíonalmente la efectividad de la formulación. La concentración del inhibidor en . i composición puede variarse sobre un amplio intervalo, hasta una solución saturada, preferentemente desde 0.!* hasta 30% en peso o incluso más; la reducción »! crecimiento del cabello se incrementa conforme incrementa la cantidad de inhibidor aplicado por unidad de área de la piel. La cantidad máxima aplicada de manera efectiva está limitada únicamente por la proporciór a la cual penetra la piel el inhibidor. En general, ..as cantidades efectivas están en el intervalo de 100 a 3000 microgramos o más por centímetro cuadrado de piel. La composición debe de ser tópicamente aplicada a un área seleccionada del cuerpo a partir de la cual se desea inh:.bir el crecimiento del cabello. Por ejemplo, la composición puede ser aplicada a la cara, particularmente al área de la barba de la cara, por ejemplo, las mejillas, el cuello, la parte superior del labio y el mentón. La composición puede también ser aplicada a las piernas, brazos, torso y axilas. La composición es particularmente apropiada para la reducción del crecimiento del cabello no deseado en mujeres que sufren de hirsutismo o de otras condiciones. En los humanos, la composición debe de ser aplicada una vez o dos veces al día, o incluso más frecuentemente, por al menos tres meses, para lograr una reducción percibida en el crecimiento del cabello. La reducción en el cocimiento del cabello es demostrada cuando 1 frecuencia de eliminación del cabello (afeitado, depilado con pinzas, uso de depiladores, ceras) or reducida, o la persona percibe menos cabello sobre o sitio tratado, o cuantitativamente, cuando se reduce el peso del cabello eliminado mediante afeitados (por ejemplo, La masa del cabello). Los beneficios de la frecuencia reducida de eliminación del cabello incluyen la conveniencia y menos irritación a la piel. Los hámsters Golden Syrian intactos, machos, se considerar modelos aceptables para el crecimiento del cabello de la barba humana, ya que muestran órganos de los costados de forma oval, uno sobre cada lado, cada uno de aproximadamente 8 mm de diámetro mayor, los cuales crecen como cabello negro grueso y burdo similar al cabello de la barba humana. Estos órganos producen pelo en respuesta a los andrógenos en el hámster. Para evaluar la efectividad de un inhibidor de PKC particular, los órganos de los flancos de cada uno del grupo de hámsters son depilados mediante la aplicación de un depilador químico basado en tioglicolato (Surgex) . A un órgano de cada animal se aplican 10-25 µl de vehículo únicamente una vez al día, mientras que al otro órgano de cada animal se le aplica una cantidad igual de vehículo que contiene un inhibidor de PKC. Después de trece aplicaciones (una aplicación por día durante cinco días de una semana) , los órganos de los flancos son rasurados y la cantidad de cabello recuperado (masa capilar) de cada uno, es pesada. La reducción porcentuaL del crecimiento del pelo es calculada mediante la substracción del valor de la masa del pelo (mg) del lado tratado con el compuesto de prueba, del valor de la masa capilar del lado tratado con vehículo; el valor delta obtenido es luego dividido entre el valor de la masa del cabello del lado tratado con vehículo, y el número resultante es multiplicado por 100. El ensayo anteriormente descrito será denominado en la presente como ensayo de "hámster Golden Syrian". Las composiciones preferidas proporcionan una inhibición en el crecimiento del cabello de al menos aproximadamente 35%, más preferentemente al menos aproximadamente 50% y aún más preferentemente de al menos aproximadamente 70%, cuando se prueban en el ensayo de hámster Golden Syrian. Un número de inhibidores de PKC fueron probados en el ensayo de hámster Golden Syrian; los resultados se presentan en la Tabla I.

TABLA I Masa capilar (medio ± SEM) Compuesto Vehículo3 Dosis H No tratado Tratado % de inhibición Verapamilo A 10% 5.5 1.45 ±.12 0.43 ±.05 69 ± 5 Tioridazina A 10% 4.5 2.41 ±.19 0.74 ±.07 68 ± 4 Curcumina C 10% 5.5 1.66 ±.19 0.55 ±.ll 68 ± 5 Trifluoperizina A 10% 7.5 2.38 ±.25 1.03 ±.16 56 ± 6 H-7' A 1Ü% 6.0 1.76 ±.18 0.81 ±.08 54 ± 3 VD 6-palmi ato del ácido L-ascórbic A 10% 8.5 2.82 ±.31 1.48 ±.14 46 ± 5 glucósido del ácido glicirretínico A 10% 4.0 1.841.19 0.94 ±.17 46 ± 10 ácido 18ß-glicirretínico B 75% 7.5 2.011.22 1.07 ±.10 44 ± 6 Imipramina A 10% 5.5 1.521.22 0.94 ±.18 38 ± 5 Fentola ina A 10% 6.0 2.05±.27 1.61 ±.22 19 ± 9 J El vehículo A incluye agua pura (68%), etanol (16%), propilenglicol (5%), dipropilenglicol (5%), alcohol bencílico (4%) y carbonato de propileno (2%); el vehículo B incluye etanol (80%), agua pura (10%) y dipropilenglicol (10%); y el vehículo C incluye acetona (40%), etanol (20%), DMSO (20%), y agua (20%) . ?-7 es 1- ( 5-isoquinolinilsulfonil) -2-metilpiperazina .

La actividad de PKC se valoró en folículos capilares aislados de los órganos de los flancos utilizando un equipo de ensayo comercial obtenido de GIBCO BPL (Gaithersburg, MD) . El ensayo está basado en la fosforilación (incorporación de 3-P) de la proteína básica de mielina acetilada. Después del aislamiento, los folículos capilares de los órganos de los flancos se lavaron en solución salina amortiguada con fosfato y se homogeneizaron en un amortiguador que contenía Tris 20 M, pH 7.5, EDTA 0.5 mM, 0.5% de Tritón X-100, ß-mercaptoetanol 10 mM, y 25 µg de cada uno de los inhibidores de proteasa, aprotinina y leupeptína. El homogenei zado del folículo capilar so agregó a la mezcla de reacción de PKC a una concentración final de 10-20 µg/ensayo. El ensayo también incluyó amortiguador, H0, fosfolípido. El ensayo se realizó en presencia o ausencia «^ inhibidores de PKC selectos. El volumen de la mezc de reacción fue de 50 µl, se agregó substrato 32P-ATP en un volumen de 10 µl . T,a reacción procedió a 3?ß por 15 minutos, después de lo cual se retiró um alícuota de 16.3 µl de la mezcla de reacción, y r*» mostró gráficamente sobro un filtro de papel. ! *5 filtros se lavaron dos veces en ácido fosfórico al 1% con agitación suave por 5 minutos. Los filtros fuer"" luego lavados dos veces en H0 y se colocaron en frascos de cintilación. La incorporación de 32P, una medida de la actividad enzimática, se determinó utilizando las técnicas estándares de cintilación de líquidos. Se observó una inhibición significativa con tisridazina (inhibición de 30% a 500 µM) y trifluoperizina (inhibición de 42% a 500 µM) --los cuales se piensa que interfieren con el sitio de enlace a los fosfolípidos-- así como H-7, el más selectivo de los inhibidores de PKC y antagonista del sitio de enlace al ATP. Se produjo una inhibición del 86% de la fosforilación debido a la inhibición de la actividad de PKC, por 200 µM de H-7. La inhibición de actividad de PKC fue casi del 100%, con el glucósido del ácido glicirretínico (gl icirrizina) a 200 µM; y 52% con ácido 18ß-glicirret ínico a 500 µM. Podrá ser apreciado por aquellos expertos en la técnica, que la invonción puede ser realizada dentro de un amplio intervalo de parámetros equivalentes de la composición y condiciones, sin apartarse del espíritu o alcance de la invención o cualquier modalidad de la misma.

Se hace constar que con relación a esta fecha, l mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes:

Claims

5. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es trifluoperizina . 6. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es 1- (5-isoquinolinilsulfonil) -2-metilpiperazina . 7. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es 6-palmitato del ácido L-ascórbico. 8. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es glucósido del ácido glici rrot ínico . 9. El procer^ do conformidad con la reivindicación 1, carácter! ? ado porque el inhibidor es ácido ldß-glicirretínic . 10. El procoro do conformidad con la reivindicación 1, caracterimdn porque el inhibidor es imipramina. 11. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es fentolamina . 12. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es una isoq inolin-sulfonamida . 13. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es una bis-i'ndolilmaleimida. 14. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor *»s un derivado de fenotiazina. 15. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor <=>«* un lisoesfingolípido. 16. El procoso do conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor *»« una estaurosporina. 17. El procoso de conformidad con reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor -? selecciona del grupo que consiste de polimixina B, sangivamlcina, y doxorrubicina-Fe ( III ) . 18. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es balanol . 19. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es un indolcarbazol substituido. 20. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es una 2- (a inometil)piperidina . 21. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es 4-propil-5 (4-piridinil)-2-(3H) -oxazolona. 22. El proceso do conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es decualinio . 23. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor interactúa con el sitio del enlace al ATP en PKC. 24. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor interactúa con el sitio del enlace al calcio en PKC. 25. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor interactúa con la región en PKC que interactúa con el fosfolípido. 26. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor es un inhibidor irreversible. 27. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la concentración del inhibidor en la composición está entre 1% y 30%. 28. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la composición se aplica a la piel en una cantidad desde 100 hasta 3000 microgramos del inhibidor por centímetro cuadrado de piel. 29. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la composición se aplica a la piel sobre la cara de dicho mamífero. 30. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la composición proporciona una reducción en el crecimiento del cabello de al menos 30%, cuando se trata en el ensayo de hámster Golden Syrian. 31. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la composición proporciona una reducción en el crecimiento del cabello de al menos 50%, cuando se trata en el ensayo de hámstsr Golden Syrian. 32. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la composición proporciona una reducción en el crecimiento del cabello de al menos 70%, cuando se trata en el ensayo de hámster Golden Syrian. 33. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el mamífero es un humano . 34. El uso de un inhibidor de la proteína-cinasa C para la fabricación de un medicamento para la inhibición del crecimiento del cabello en mamíferos. 35. El uso de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado porque el inhibidor es como se define de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 2 a la 26. 36. Un método para la producción de una composición para la inhibición del crecimiento del cabello de un mamífero, caracterizado porque comprende la selección de un inhibidor de la proteína-cinasa C, y la combinación de dicho inhibidor, en una cantidad efectiva para reducir el crecimiento del cabello, con un vehículo o portador no tóxico, dermatológicamente aceptabl . 37. Un método d*» conformidad con la reivindicación 36, carar*- r * ado porque el vehículo o portador está adaptado para sor esparcido sobre la piel de an mamífero. 38. Un método do conformidad con la reivindicación 36, caracteri ado porque el inhibidor es como se define de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 2 a la 26. 39. El nuevo uso de un inhibidor de la proteína-cinasa C para la reducción del crecimiento del cabeLlo. 40. Una composición, cuando se utiliza para la inhibición del crecimiento del cabello de un mamífero, caracterizada porque incluye un inhibidor de la proteína-cinasa C en una cantidad efectiva para reducir el crecimiento del cabello, y un vehículo o portador no tóxico, dermatológicamente aceptable. 41. Una composición de conformidad con la reivindicación 40, caracterizada porque el inhibidor es como se define de conformidad con cualquiera de lar reivindicaciones 2 a la 2 € .