MX2014011694A

MX2014011694A - Metodos para modular la inmunidad celular usando oligosacaridos de leche humana.

Info

Publication number: MX2014011694A
Application number: MX2014011694A
Authority: MX
Inventors: Debra L Thomas; Rachael Buck
Original assignee: Abbott Lab
Priority date: 2012-03-27
Filing date: 2013-03-11
Publication date: 2015-01-22
Also published as: CA2866313C; PH12014502163A1; CN104363962A; CA2866313A1; EP2830712A1; US20150064220A1; HK1205970A1; MY168661A; MX366952B; SG11201406022YA; CN110301646A; WO2013148134A1

Abstract

La presente invención se refiere a métodos para mejorar la inmunidad celular en un individuo, mediante el uso de composiciones nutricionales que incluyen oligosacáridos de leche humana. Los oligosacáridos de leche humana son oligosacáridos de leche humana sialilados, oligosacáridos de leche humana fucosilados, o una combinación de los mismos. Los oligosacáridos de leche humana pueden mejorar las respuestas mediadas por células T y las respuestas reguladoras de células T.

Description

METODOS PARA MODULAR LA INMUNIDAD CELULAR USANDO OLIGOSACARIDOS DE LECHE HUMANA REFERENCIA CRUZADA CON SOLICITUDES RELACIONADAS La presente solicitud reclama el beneficio de la solicitud de patente provisional con el mismo título, No. de Serie 61/616,230, presentada el 27 de marzo de 2012, la cual se incorpora en su totalidad en la presente como referencia.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere al uso de oligosacáridos de leche humana para modular y mejorar la inmunidad celular. Más particularmente, la presente invención se refiere a métodos para utilizar oligosacáridos de leche humana sialilados, oligosacáridos de leche humana fucosilados, o una combinación de los mismos, para modular y mejorar la inmunidad celular en un individuo.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La respuesta inmunitaria es una serie multifacética de interacciones en el cuerpo, entre componentes celulares y/o no celulares (humorales) que reaccionan a alguna agresión o amenaza al cuerpo percibida. En particular, la inmunidad celular principalmente está dirigida contra microbios que sobreviven en los fagocitos y a microbios que infectan células no fagocíticas (es decir, células epiteliales mucosales), o células que muestran autoantígenos alterados, tales como las células cancerosas. La inmunidad celular es más efectiva para remover células infectadas por virus, pero también participa en la defensa contra hongos, protozoarios, cánceres y bacterias intracelulares.

Un tipo de célula inmunitaria involucrada en la respuesta inmune celular, es el linfocito derivado del timo, o célula T. En el contexto de la inmunidad celular, las células T proporcionan protección al inducir apoptosis en células del cuerpo que desplieguen epítopos de antígenos extraños en su superficie, tales como células infectadas por virus, células con bacterias intracelulares, y células cancerosas que despliegan antígenos tumorales. Las células T también producen citosinas que influencian la función de otras células involucradas en todos los tipos de respuesta inmunitaria, celular o humoral, innata, o adaptativa. Así pues, una respuesta funcional mediada por células (respuesta celular) es un prerrequisito para la salud óptima de un individuo.

Aunque el beneficio se hizo notar anteriormente, las respuestas inmunitarias no controladas, inapropiadas o desreguladas, están implicadas en enfermedades inflamatorias crónicas tales como alergias, síndrome de irritación intestinal, enfermedades autoinmunitarias y similares. Como tal, la salud óptima requiere respuestas inmunitarias efectoras funcionales, balanceadas con respuestas inmunitarias reguladoras apropiadas.

Por lo tanto, sería deseable proporcionar composiciones nutricionales que proporcionen componentes individuales que mejorarán la respuesta inmunitaria celular. Sería además benéfico si la mejoría de la respuesta inmunitaria celular pudiera ser proporcionada sin crear una respuesta inmunitaria exacerbada, tal como una inflamación incontrolada, lo cual puede tener numerosos resultados dañinos y finalmente rebasar los aspectos benéficos.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a métodos para mejorar la inmunidad celular en un individuo, incluyendo lactantes, pediátricos, adultos y adultos mayores, utilizando oligosacáridos de leche humana. En algunas modalidades, el oligosacárido de leche humana utilizado es un oligosacárido de leche humana sialilado. En otras modalidades, el oligosacárido de leche humana es un oligosacárido de leche humana fucosilado. En todavía otras modalidades, se utiliza una combinación de oligosacárido de leche humana sialilado y fucosilado, para mejorar la inmunidad celular del individuo. Les oligosacáridos de la leche humana mejoran las respuestas mediadas por las células T y mejoran las respuestas reguladoras de células T.

En algunas modalidades, la presente invención se refiere a un método para mejorar la inmunidad celular en un individuo que lo necesite. El método comprende administrarle al individuo que lo necesite, una composición nutricional que comprende un oligosacárido de leche humana sialilado, en una cantidad suficiente para mejorar la respuesta mediada por células T.

En otras modalidades, la presente invención se refiere a un método para mejorar la inmunidad celular de un individuo que lo necesite. El método comprende administrarle al individuo que lo necesite, una composición nutricional ( que comprende un oligosacárido de leche humana fucosilado, en una cantidad suficiente para mejorar la respuesta reguladora de células T.

En otras modalidades, la presente invención se refiere a un método para mejorar la inmunidad celular en un individuo que lo necesite. El método comprende administrarle al individuo que lo necesite, una composición nutricional que comprende un oligosacárido de leche humana sialilado, en una cantidad suficiente para mejorar la respuesta mediada por células T y un oligosacárido de leche humana fucosilado en una cantidad suficiente para mejorar 'a respuesta reguladora de células T.

En otra modalidad, la presente invención se refiere a un método para mejorar la respuesta mediada por células T en un individuo que lo necesite. El método comprende administrarle al individuo que lo necesite, una composición nutricional que comprende un oligosacárido de leche humana sialilado, en una cantidad suficiente para mejorar la respuesta mediada por células T.

En otra modalidad, la presente invención se refiere a un método para mejorar la respuesta reguladora de células T en un individuo que lo necesite. El método comprende administrarle al individuo que lo necesite, una composición nutricional que comprende un oligosacárido de leche humana fucosilado, en una cantidad suficiente para mejorar la respuesta reguladora de células T.

Se ha descubierto que los oligosacáridos de la leche humana afectan la inmunidad celular y que no todos los oligosacáridos del a leche humana afectan la inmunidad celular de la misma manera.

Específicamente, se ha descubierto que los oligosacáridos de leche humana sialilados afectan las respuestas inmunitarias de células T de una manera que es diferente a la de los oligosacáridos de leche humana fucosilados; en donde ambos afectan de una manera positiva. Los oligosacáridos de leche humana sialilados mejoran las respuestas mediadas por células T, mientras que los oligosacáridos de la leche humana fucosilados mejoran las respuestas reguladoras de células T. Como tales, los oligosacáridos de leche humana sialilados promueven las respuestas antiviral, antibacteriana, antimicótica, antiprotozoarios, y anticáncer mediadas por células T, mientras que los oligosacáridos de leche humana fucosilados inducen respuestas reguladoras, las cuales previenen o disminuyen la enfermedad inflamatoria crónica.

Adicionalmente, inesperadamente se encontró que una combinación de un oligosacárido de leche humana sialilado y un oligosacárido de leche humana fucosilado, demuestran los beneficios de incrementar la función mediada por células T e incrementar la regulación, de modo que las funcionalidades de los oligosacáridos de leche humana sialilados y de los oligosacáridos de leche humana fucosilados no son mutuamente excluyentes. Como tales, se ha encontrado que los oligosacáridos de leche humana sialilados y fucosilados se pueden usar en combinación para mejorar las respuestas inmunitarias balanceadas, al prevenir o disminuir enfermedades infecciosas y cáncer, sin inducir un trastorno inflamatorio crónico. Adicionalmente, al variar la relación de los oligosacáridos de leche humana sialilados y fucosilados, cuando se utilizan en combinación, ahora es posible disminuir un trastorno inflamatorio crónico sin inducir una inmunosupresión global o mejorar un trastorno de inmunosupresión sin inducir ninguna inflamación. Debido a que el uso de los oligosacáridos de leche humana tal como se describe en la presente no es específico de algún antígeno (como las vacunas, por ejemplo), dichos oligosacáridos pueden producir una mejoría global de la inmunidad celular balanceada.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Los dibujos adjuntos, que se incorporan en un componente aparte de la presente descripción, ilustran modalidades y junto con la descripción general anteriormente dada, y la (descripción detallada de las modalidades que se presenta a continuación, sirven para explicar los principios de la presente invención.

La Figura 1 es una gráfica que ilustra las respuestas proliferativas de CMSP estimuladas con PHA en presencia de OLHs individuales y mezclas de OLHs, tal como se analiza en el Ejemplo 11.

La Figura 2 es una gráfica que ilustra respuestas proliferativas de CMSP, sin estimulación, a OLHs individuales y mezclas de OLHs tal como se analiza en el Ejemplo 11.

La Figura 3 es una gráfica que ilustra el porcentaje de células T reguladoras, en ganglios linfáticos mesentéricos de ratones suplementados con y sin 2'FL, tal como se analiza en el Ejemplo 12.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a métodos para proporcionar una mejoría global de la inmunidad celular en un individuo. A diferencia de otros métodos convencionales que emplean uno o más componentes nutricionales específicos o fármacos sintéticos para mejorar la inmunidad celular en un individuo, a través ya sea de una mejoría en la respuesta mediada por células T, o una mejoría en la respuesta reguladora de células T, los métodos de la presente invención proporcionan una mejoría de la inmunidad celular, al mejorar de manera simultánea tanto las respuestas mediadas por células T como las respuestas reguladoras de células T. Esto permite mejores beneficios inmunológicos para un individuo, sin incrementar el riesgo de inflamación no deseada.

Estos beneficios duales se obtienen en los métodos de la presente invención, al emplear una combinación de oligosacárido de leche humana en una composición nutricional. Debido a que inesperadamente se encontró que los beneficios duales no son mutuamente excluyentes y pueden ser proporcionados en una sola composición nutricional, los métodos de la presente invención son particularmente benéficos. En algunas modalidades, las composiciones nutricionales incluyen un primer oligosacárido de leche humana sialilado y un segundo oiigosacáridos de leche humana fucosilado. Dependiendo del resultado deseado para el individuo, las cantidades y relaciones de los dos oiigosacáridos de leche humana pueden variar, para producir el resultado deseado.

Estas y otras características de las composiciones nutricionales y métodos, así como algunas de las muchas variaciones y adiciones opcionales, se describen en detalle a continuación.

Los términos "inmunidad celular" e "inmunidad mediada por células T" tal como se utilizan en la presente, a menos que se especifique de otra manera, se refieren a la respuesta inmunitaría producida cuando células T vírgenes o sensibilizadas atacan directamente antígenos extraños y secretan citosinas que inician la respuesta inmunitaria humoral del cuerpo.

Los términos "empaque esterilizado en autoclave" y "esterilización en autoclave" se utilizan indistintamente en la presente, y a menos que se especifique de otra manera, se refieren a la práctica común de llenar un recipiente, típicamente una lata de metal u otro empaque similar, con un líquido nutricional y después someter el empaque lleno de líquido a la etapa de esterilización por calor necesaria, para formar un producto nutricional líquido empacado en un recipiente esterilizado en autoclave.

El término "empaque aséptico" tal como se utiliza en la presente, a menos que se especifique de otra manera, se refiere a la fabricación de un producto empacado sin depender de la etapa de empaque esterilizado en autoclave anteriormente descrita, en donde el líquido nutricional y el empaque son esterilizados por separado antes del llenado, y después se combinan bajo condiciones de procesamiento estériles o asépticas, para formar un producto líquido nutricional esterilizado, asépticamente empacado.

Los términos "grasa" y "aceite" tal como se utilizan en la presente, a menos que se especifique de otra manera, se emplean indistintamente para referirse a materiales lipidíeos derivados o procesados a partir de plantas o animales. Estos términos también incluyen materiales lipidíeos sintéticos, en tanto que dichos materiales sintéticos sean adecuados para administración oral a seres humanos.

El término "oligosacárido de leche humana" o "OLH" tal como se utiliza en la presente, a menos que se especifique de otra manera, se refiere en general a un número de carbohidratos complejos encontrados en la leche de pecho humana que puede estar en forma ácida o neutra, y a los precursores de los mismos. Ejemplos no limitantes de oligosacáridos de leche humana incluyen la 3'-sialillactosa, 6'-sialillactosa, 3'-fucosillactosa, 2'-fucosillactosa y lacto-N-neo-tetraosa. Ejemplos de precursores de oligosacáridos de leche humana incluyen el ácido siálico y/o la fucosa.

El término "estable en anaquel" tal como se utiliza en la presente, a menos que se especifique de otra manera, se refiere a un producto nutricional que permanece comercialmente estable después de haber sido empacado y luego almacenado a 18-24°C durante al menos 3 meses, incluyendo de aproximadamente 6 meses a aproximadamente 24 meses, y también incluyendo de aproximadamente 12 meses a aproximadamente 18 meses.

Los términos "formulación nutricional" o "composición nutricional" tal como se utilizan en la presente, se emplean de manera indistinta y, a menos que se especifique de otra manera, se refieren a fórmulas sintéticas que incluyen líquidos nutricionales, polvos nutricionales, sólidos nutricionales, semisólidos nutricionales, semilíquidos nutricionales, suplementos nutricionales, y cualquier otro producto alimenticio nutricional conocido en la técnica. Los polvos nutricionales pueden ser reconstituidos para formar un líquido nutricional, todos los cuales comprenden una o más grasas, proteínas y carbohidratos, y son adecuados para el consumo oral por un ser humano.

El término "líquido nutricional" tal como se utiliza en la presente a menos que se especifique de otra manera, se refiere a productos nutricionales en forma líquida lista para tomarse, en forma concentrada y líquidos nutricionales preparados mediante la reconstitución de los polvos nutricionales aquí descritos, antes de su uso.

El término "polvo nutricional" tal como se utiliza en la presente a menos que se especifique de otra manera, se refiere a productos nutricionales en una forma que pueda fluir o que pueda servirse con cuchara, que pueda ser reconstituida con agua u otro líquido acuoso antes de su consumo, e incluyen polvos secados por aspersión y polvos mezclados/combinados en seco.

El término "semisólido nutricional" tal como se utiliza en la presente, a menos que se especifique de otra manera, se refiere a productos nutricionales que tienen propiedades intermedias tales como la rigidez, entre los sólidos y los líquidos. Algunos ejemplos de semisólidos incluyen los purés, gelatinas y masas.

El término "semilíquido nutricional" tal como se utiliza en la presente, a menos que se especifique de otra manera, se refiere a productos nutricionales que tienen propiedades intermedias, tales como propiedades de flujo entre los líquidos y los sólidos. Algunos ejemplos de semilíquidos incluyen mezclas espesas y geles líquidos.

Los términos "susceptible" y "en riesgo" tal como se utilizan en la presente, a menos que se indique de otra manera, significan que se tiene poca resistencia a un cierto trastorno o enfermedad, incluyendo estar genéticamente predispuesto, tener un historial familiar de, y/o tener síntomas de, dicho trastorno o enfermedad.

Los términos "modulando" o "modulación" o "modular" tal como se utilizan en la presente, a menos que se especifique de otra manera, se refieren al movimiento dirigido hacia un objetivo, de una característica seleccionada.

Forma del Producto Las composiciones nutricionales utilizadas en los métodos de la presente invención, incluyen un oligosacárido de leche humana sialilado, un oligosacárido de leche humana fucosilado, o una combinación de un oligosacárido de leche humana sialilado y uno fucosilado, y se pueden formular y administrar en cualquier forma de producto oral conocida o adecuada de alguna otra manera. Cualquier forma sólida, líquida, semisólida, semilíquida, o en polvo, incluyendo combinaciones o variaciones de las mismas, son adecuadas para usarse en la presente, siempre y cuando tales formas permitan la administración segura y efectiva oral, al individuo, de los ingredientes que también se definen en la presente.

Las composiciones nutricionales utilizadas en los métodos de la presente invención, de manera deseable se formulan como productos dietéticos, los cuales se definen en la presente como aquellas modalidades que comprenden los ingredientes de la presente invención, en una forma de producto que contenga al menos una grasa, proteína, y carbohidrato, y de preferencia también contenga vitaminas, minerales o combinaciones de los mismos.

Las composiciones nutricionales pueden ser formuladas con suficientes tipos y cantidades de nutrientes, para proporcionar una sola, primaria, o suplementaria fuente de nutrición, o para proporcionar un producto nutricional especializado para utilizarse en individuos afectados por enfermedades o trastornos específicos, o con un beneficio nutricional objetivo tal como se describe más adelante.

Algunos ejemplos no limitantes de productos específicos que pueden ser adecuados para utilizarse de conformidad con la presente invención, incluyen fórmulas de lactantes pretérmino, fórmulas de lactantes a término, fortificadores de leche humana, fórmulas pediátricas, fórmulas nutricionales para adultos, fórmulas nutricionales para adultos mayores, fórmulas médicas, fórmulas nutricionales geriátricas, fórmulas nutrióionales diabéticas, y similares.

Líquidos Nutricionales Los líquidos nutricionales incluyen tanto líquidos concentrados como líquidos nutricionales listos para beber. Estos líquidos nutricionales muy típicamente están formulados como suspensiones o emulsiones, aunque otras formas líquidas también están dentro de los alcances de la presente invención.

Las emulsiones nutricionales adecuadas para utilizarse, pueden ser emulsiones acuosas que comprendan proteínas, grasas y carbohidratos. Las emulsiones por lo general son líquidos que pueden fluir o que se pueden beber a una temperatura de aproximadamente 1 a aproximadamente 25°C y típicamente están en forma de emulsiones aceite en agua, emulsiones agua en aceite, o emulsiones acuosas complejas, aunque tales emulsiones típicamente están en forma de emulsiones aceite en agua que tienen una fase acuosa continua y una fase oleosa discontinua.

Las emulsiones nutricionales pueden ser y típicamente son estables en anaquel. Las emulsiones nutricionales típicamente contienen hasta 95% en peso de agua, incluyendo de aproximadamente 50 a 95%, también incluyendo de aproximadamente 60 a aproximadamente 90% y también incluyendo de aproximadamente 70 a aproximadamente 85% de agua en peso de las emulsiones nutricionales. Las emulsiones nutricionales pueden tener una variedad de densidades del producto, pero más típicamente tienen una densidad mayor de 1.03 g/mL, incluyendo mayor de 1.04 g/mL, incluyendo mayor de 1.055 g/mL, incluyendo de aproximadamente 1.06 g/mL a aproximadamente 1.12 g/mL, y también incluyendo de aproximadamente 1.085 g/mL a aproximadamente 1.10 g/mililitro.

Las emulsiones nutricionales pueden tener una densidad calórica ajustada a las necesidades nutricionales del usuario final, aunque en la mayoría de los casos las emulsiones comprenden generalmente al menos 19 kcal/onza (660 kcal/litro), más típicamente de aproximadamente 20 kcal/onza (675-680 kcal/litro) a aproximadamente 25 kcal/onza (820 kcal/litro), incluso más típicamente de aproximadamente 20 kcal /onza (675-680 kcal/litro) a aproximadamente 24 kcal/onza (800-810 kcal/litro). En general, las fórmulas de 22-24 kcal/onza se usan más comúnmente en lactantes pretérmino o de bajo peso al nacer, y las de 20-21 kcal/onza (675-680 a 700 kcal/litro) se usan más a menudo en lactantes que nacieron a término. En algunas modalidades, la emulsión puede tener una densidad calórica de aproximadamente 50-100 kcal/litro a aproximadamente 660 kcal/litro, incluyendo de aproximadamente 150 kcal/litro a aproximadamente 500 kcal/litro. En algunas modalidades, la emulsión puede tener una densidad calórica de 25 ó 50 ó 75 ó 100 kcal/litro.

La emulsión nutricional puede tener un pH que varía dentro del rango de aproximadamente 3.5 a aproximadamente 8, pero más ventajosamente dentro de un rango de aproximadamente 4.5 a aproximadamente 7.5, incluyendo de aproximadamente 5.5 a aproximadamente 7.3, incluyendo de aproximadamente 6.2 a aproximadamente 7.2.

Aunque el tamaño de la porción de la emulsión nutricional puede variar dependiendo de un número de variables, un tamaño de porción típico generalmente es de al menos 1 mL, o incluso al menos 2 mL, o incluso al menos 5 mL, o incluso al menos 10 mL, o incluso al menos 25 mL, incluyendo rangos de 1 mL a aproximadamente 300 mL, incluyendo de aproximadamente 4 mL a aproximadamente 250 mL e incluyendo de aproximadamente 10 mL a aproximadamente 240 mililitros.

Sólidos Nutricionales Los sólidos nutricionales pueden estar en cualquier forma sólida, pero típicamente están en forma de composiciones de partículas fluidas o sustancialmente fluidas, o al menos composiciones particuladas. De manera particular, las formas de productos sólidos nutricionales pueden incluir composiciones secadas por aspersión, aglomeradas y/o polvos mezclados en seco. Las composiciones fácilmente pueden ser cuchareadas o medidas con una cuchara o algún otro dispositivo similar, y fácilmente pueden ser reconstituidas por el usuario pretendido, con un líquido acuoso adecuado, típicamente agua, para formar una composición nutricional para uso oral o enteral inmediato. En este contexto, el término "inmediato" generalmente significa dentro de un periodo de aproximadamente 48 horas, más típicamente dentro de un periodo de aproximadamente 24 horas, de preferencia justo después de la reconstitución.

Los polvos nutricionales pueden ser reconstituidos con agua antes de su uso, hasta una densidad calórica ajustada a las necesidades nutricionales del usuario final, aunque en la mayoría de los casos los polvos son reconstituidos con agua para formar composiciones que comprenden al menos 19 kcal/onza (660 kcal/litro), más típicamente de aproximadamente 20 kcal/onza (675-680 kcal/litro) a aproximadamente 25 kcal/onza (820 kcal/litro), incluso más típicamente de aproximadamente 20 kcal/onza (675-680 kcal/litro) a aproximadamente 24 kcal/onza (800-810 kcal/litro). En general, las fórmulas de 22-24 kcal/onza son las más comúnmente utilizadas en lactantes pretérmino o que nacieron con bajo peso, y las fórmulas de 20-21 kcal/onza (675-680 a 700 kcal/litro) son utilizadas más a menudo en lactantes que nacieron a término. En algunas modalidades, el polvo reconstituido puede tener una densidad calórica de aproximadamente 50-100 kcal/litro a aproximadamente 660 kcal/litro, incluyendo de aproximadamente 150 kcal/litro a aproximadamente 500 kcal/litro. En algunas modalidades específicas, la emulsión puede tener una densidad calórica de 25 ó 50 ó 75 ó 100 kcal/litro.

Métodos para Mejorar la Inmunidad Celular Los métodos de la presente invención utilizan oligosacáridos de leche humana sialilados, oligosacáridos de leche humana fucosilados, o una combinación de los mismos, para modular y/o mejorar las respuestas de inmunidad celular de un individuo. Como se anotó anteriormente, la inmunidad celular se dirige principalmente contra microbios que sobreviven en los fagocitos y microbios que infectan células no fagocíticas (es decir, células del epitelio mucosal) o células que muestran autoantígenos alterados, tales como células cancerosas. La inmunidad celular es más efectiva para remover células infectadas por virus, pero también defiende contra hongos, protozoarios, cánceres y bacterias intracelulares. Los métodos de la presente invención que modulan y/o mejoran la inmunidad celular, son benéficos para una amplia variedad de individuos, incluyendo lactantes pretérmino, lactantes, individuos pediátricos, adolescentes, adultos y adultos mayores (adultos de al menos 50 o más años de edad).

En algunas modalidades de la presente invención, la inmunidad celular es mejorada en un individuo al administrarle una cantidad efectiva de un oligosacárido de leche humana sialilado, que mejora las respuestas mediadas por células T en el individuo. Luego de la administración a un individuo, los oligosacáridos de leche humana sialilados promueven las respuestas antiviral, antibacteriana, antimicótica, antiprotozoarios y anticáncer mediadas por células T en el individuo, para mejorar la respuesta celular (respuesta mediada por células) en el individuo.

El oligosacárido de leche humana sialilado puede ser administrado a individuos generalmente sanos, o puede ser administrado a un subconjunto de individuos que necesiten mejores respuestas mediadas por células T. Algunos individuos que están en la necesidad específica de respuestas mejoradas mediadas por células T, pueden incluir lactantes, pacientes pediátricos, adolescentes o adultos propensos a alergias (lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos susceptibles a, o que están en riesgo de, padecer alergias), lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a enfermedades autoinmunitarias (lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos susceptibles a, o que están en un elevado riesgo de, una enfermedad autoinmunitaria), lactantes no amamantados, lactantes amamantados suplementados con fórmula o fortificadores de leche humana, adultos y adultos mayores inmunosenescentes, mujeres menópáusicas, mujeres posmenopáusicas, pacientes posquimioterapia, individuos inmuocomprometidos, individuos con SIDA, y similares. Los lactantes pretérmino, lactantes, pediátricos, adolescentes, adultos o adultos mayores pueden ser susceptibles a, o estar en elevado riesgo de, un trastorno o enfermedad debido al historial familiar, a la edad, al ambiente y/o al estilo de vida. Con base en lo anterior, debido a que algunas de las modalidades de los métodos de la presente invención que utilizan oligosacáridos de leche humana sialilados, se dirigen específicamente a las subpoblaciones o subclases de individuos identificadas (es decir, a la subpoblación o subclase de individuos "que necesitan" de asistencia para enfrentar una o más enfermedades o trastornos específicos como los aquí anotados), no todos los individuos caerán dentro de la subpoblación o subclase de individuos aquí descritos para ciertas enfermedades o trastornos.

En otras modalidades de la presente invención, la inmunidad celular es mejorada en un individuo al administrarle al individuo una cantidad efectiva de un oligosacárido de leche humana fucosilado, que mejora la respuesta reguladora de células T en el individuo. Después de la administración a un individuo, los oligosacáridos de leche humana fucosilados inducen respuestas reguladoras que previenen o disminuyen enfermedades crónicas o inflamación, para mejorar las respuestas reguladoras de células T en el individuo.

El oligosacárido de leche humana fucosilado puede ser administrado a individuos generalmente sanos, o puede ser administrado a un subconjunto de individuos que necesiten de respuestas reguladoras de células T mejoradas. Algunos individuos que tienen la necesidad específica de mejores respuestas reguladoras de células T, pueden incluir lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a alergias (lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos susceptibles a, o en elevado riesgo de, padecer alergias), lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a enfermedades autoinmunitarias (lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos susceptibles a, o en elevado riesgo de, una enfermedad autoinmunitaria), lactantes no amamantados, lactantes amamantados suplementados con fórmula o fortificadores de leche humana, adultos mayores, adultos y adultos mayores inmunosenescentes, mujeres menopáusicas, mujeres posmenopáusicas, individuos con enfermedad intestinal inflamatoria crónica, y similares. Los lactantes pretérmino, lactantes, pediátricos, adolescentes, adultos y adultos mayores pueden ser susceptibles a, o estar en elevado riesgo de, un trastorno o enfermedad debido al historial familiar, a la edad, al ambiente y/o al estilo de vida. Con base en lo anterior, debido a que algunas de las modalidades de los métodos de la presente invención que utilizan oligosacáridos de leche humana fucosilados se dirigen a subconjuntos específicos o subclases de individuos identificados (es decir, el subconjunto o subclase de individuos "que necesitan" ayuda para enfrentar una o más enfermedades específicas o trastornos específicos como los aquí anotados), no todos los individuos caerán dentro de la subpoblación o subclase de individuos como los aquí descritos para ciertas enfermedades o trastornos.

En otra modalidad deseable de la presente invención, la inmunidad celular es mejorada en un individuo mediante la administración de una cantidad efectiva de una combinación de un oligosacárido de leche humana siaiilado que mejora las respuestas mediadas por células T en el individuo y un oligosacárido de leche humana fucosilado que induce respuestas reguladoras en el individuo. Al administrarle a un individuo el oligosacárido de leche humana siaiilado, se promueve la actividad antiviral, antibacteriana, antimicótica, antiprotozoarios y anticáncer mediada por células T en el individuo, para mejorar la respuesta celular en el individuo, y los oligosacárido de leche humana fucosilados inducen respuestas reguladoras que previenen o disminuyen la enfermedad crónica o inflamación. Inesperadamente, una combinación de oligosacáridos de leche humana sialilados y fucosilados demuestra los beneficios tanto de un aumento de la respuesta/función mediada por células T como un incremento en la regulación. Como tal, sorpresivamente se encontró que las funcionalidades de los oligosacáridos de leche humana sialilados y fucosilados no son mutuamente excluyentes y se pueden emplear en combinación para mejorar el balance de respuestas ¡nmunitarias en un individuo, al prevenir o disminuir enfermedades infecciosas y cáncer, sin inducir ninguna respuesta o trastorno inflamatorio crónico que pudiera reducir el beneficio global de la administración de los oligosacáridos de leche humana. Adicionalmente, al variar las relaciones de cantidades de oligosacáridos de leche humana sialilados y fucosilados en la composición nutricional administrada al individuo, ahora es posible suprimir un trastorno inflamatorio crónico sin inducir ninguna inmunosupresión global, o mejorar una condición de inmunosupresión sin inducir ninguna inflamación no deseada.

La combinación de oligosacáridos de leche humana sialilados y fucosilados se puede administrar a individuos generalmente sanos, o se puede administrar a un subconjunto de individuos que necesiten respuestas mejoradas mediadas por células T y respuestas mejoradas reguladoras de células T. Algunos individuos que están en necesidad específica de respuestas mejoradas mediadas por células T y respuestas mejoradas reguladoras de células T, pueden incluir lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a una alergia (lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos susceptibles a, o en un riesgo elevado de, padecer alergias), lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a enfermedades autoinmunitarias (lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos susceptibles a, o en elevado riesgo de, una enfermedad autoin unitaria), lactantes no amamantados, lactantes amamantados suplementados con fórmula o con fortificador de leche humana, adultos mayores, adultos y adultos mayores inmunosenescentes, mujeres menopáusicas, mujeres posmenopáusicas, pacientes posquimioterapia, individuos con inmunosupresión, individuos con SIDA, individuos con enfermedad intestinal inflamatoria crónica, y similares. Los lactantes pretérmino, lactantes, pediátricos, adolescentes, adultos y adultos mayores, pueden ser susceptibles a, o estar en riesgo elevado de, un trastorno o enfermedad debido al historial familiar, la edad, el ambiente, y/o el estilo de vida. Con base en lo anterior, debido a que algunas modalidades del método de la presente invención que utilizan oligosacáridos de leche humana sialilados y fucosilados están dirigidas a subconjuntos o subclases específicas de individuos identificados (es decir, el subconjunto o subclase de individuos "que necesitan" ayuda para enfrentar una o más enfermedades específicas o trastornos específicos como los aquí anotados), no todos los individuos caerán dentro de la subpoblación o subclase de individuos como los aquí descritos para ciertas enfermedades o trastornos.

En un ejemplo de la presente invención, una fórmula para lactante pretérmino o que nació a término, puede incluir una combinación de oligosacáridos de leche humana sialilados y fucosilados, para respaldar respuestas inmunitarias efectoras balanceadas. En otro ejemplo de la presente invención, una fórmula para lactante pretérmino o llegado a término puede incluir altos niveles de oligosacáridos fucosilados de leche humana, en comparación con los oligosacáridos de leche humana sialilados, para prevenir o reducir enfermedades alérgicas, enfermedades autoinmunitarias o enfermedades crónicas. En otro ejemplo de la presente invención, una preparación nutricíonal para adulto puede incluir altos niveles de oligosacáridos de leche humana fucosilados, en comparación con los oligosacáridos de leche humana sialilados, para disminuir enfermedades alérgicas, enfermedades autoinmunitarias o enfermedades inflamatorias crónicas. En otro ejemplo de la presente invención, una preparación nutricíonal para adulto puede contener altos niveles de oligosacáridos de leche humana sialilados, en comparación con los oligosacáridos de leche humana fucosilados y se puede tomar en combinación con tratamientos contra el cáncer o tratamientos dirigidos contra el VIH y el SIDA.

Oligosacáridos de Leche Humana Sialilados y Fucosilados Los métodos de la presente invención para modular la inmunidad celular utilizan composiciones nutricionales que incluyen un oligosacárido de leche humana sialilado, un oligosacárido de leche humana fucosilado, o una combinación de los mismos. En algunas modalidades, las composiciones nutricionales incluyen un oligosacárido de leche humana sialilado y están sustancialmente libres de un oligosacárido de leche humana fucosilado. En otras modalidades, las composiciones nutricionales incluyen un oligosacárido de leche humana fucosilado y están sustancialmente libres de un oligosacárido de leche humana sialilado.

Las composiciones nutricionales opcionalmente pueden incluir uno o más oligosacáridos de leche humana adicionales, tal como se anota en la presente. El o los oligosacáridos de leche humana utilizados en la composición nutricional, pueden ser aislados o enriquecidos de leches secretadas por mamíferos, incluyendo, pero no limitándose a: seres humanos, bovinos, ovinos, porcinos o caprinos. Los oligosacáridos de leche humana también se pueden producir a través de fermentación microbiana, procesos enzimáticos, síntesis química, o combinaciones de los mismos.

Los oligosacáridos de leche humana sialilados adecuados para utilizarse en las composiciones nutricionales, incluyen al menos un residuo de ácido siálico en la estructura del oligosacárido. El oligosacárido de leche humana sialilado también puede incluir dos o más residuos de ácido siálico. Ejemplos específicos no limitantes de oligosacáridos de leche humana sialilados para utilizarse en la presente descripción, incluyen sialil oligosacáridos, ácido siálico (es decir, ácido siálico libre, ácido siálico unido a lípidos, ácido siálico unido a proteínas), lactosialotetraosa, '3'-sialil-3-fucosillactosa, d ¡asía lomo nofucosillacto-N-neohexaosa, monofucosilmonosialillacto-N-octaosa (sialil Lea), sialillacto-N-fucohexaosa II, disialillacto-N-fucopentaosa II, monofucosildisialillacto-N-tetraosa, sialilfucosil oligosacáridos, 2'-sialillactosa, 2-sialillactosamina, 3'-sialillactosa, 3'- sialillactosamina, 6'-sialillactosa, 6'-sialillactosamina, sialillacto-N-neotetraosa c, monosialillacto-N-hexaosa, disialillacto-N-hexaosa I, monosialillacto-N-neohexaosa I, monosialillacto-N-neohexaosa II, disialillacto-N-neohexaosa, disialillacto-N-tetraosa, disialillacto-N-hexaosa II, sialillacto-N-tetraosa a, disialillacto-N- hexaosa I, sialil-lacto-N-tetraosa b, sialil-lacto-N-tetraosa a, sialil-lacto-N-tetraosa b, sialillacto-N-tetraosa c, s¡alil-fucosil-lacto-N-tetraosa I, sialil-fucosil-lacto-N-tetraosa II, disialil-lacto-N-tetraosa, y combinaciones de los mismos. Los oligosacáridos de leche humana sialilados particularmente deseables incluyen la 3'-sialillactosa, 6'-siaIillactosa , y combinaciones de las mismas.

Ejemplos no limitantes específicos de oligosacáridos de leche humana fucosilados para utilizarse en la presente descripción, incluyen fucosiloligosacáridos, lacto-N-fucopentaosa I, lacto-N-fucopentaosa II, 2'-fucosillactosa, 3'-fucosillactosa, lacto-N-fucopentaosa III, lacto-N-difucohexaosa I, lactodifucotetraosa, monofucosillacto-N-hexaosa II, lacto-N-hexapsa fucosilada isomérica (1), lacto-N-hexaosa fucosilada isomérica (3), lacto-N-hexaosa fucosilada isomérica (2), difucosil-para-lacto-N-neohexaosa, difucosil-para-lacto-N-hexaosa, difucosillacto-N-hexaosemonofucosillacto-neooctaosa, monofucosillacto-N-octaosa, difucosillacto-N-octaosa I, difucosillacto-N-octaosa I, difucosillacto-N-neooctaosa I, lacto-N-fucopentaosa V, lacto-N-decaosa, trifucosillactosa-N-neooctaosa, trifucosillacto-N-octaosa, trifucosil-iso-lacto-N-octaosa, lacto-N-difuco-hexaosa I! y combinaciones de los mismos. Los oiigosacáridos de leche humana fucosilados particularmente deseables incluyen la 2'-fucosillactosa, 3'-fucosillactosa, y combinaciones de las mismas.

Otros ejemplos de oiigosacáridos de leche humana adecuados que pueden ser incluidos en las composiciones nutricionales para utilizarse en los métodos de la presente invención, incluyen la lacto-N-hexaosa, para-lacto-N-hexaosa, lacto-N-neohexaosa, para-lacto-N-neohexaosa, lacto-N-neooctaosa, para-lacto-N-octanosa, iso-lacto-N-octaosa, lacto-N-octaosa, y combinaciones de las mismas.

Los oiigosacáridos de leche humana sialilados y fucosilados (y cualesquiera oiigosacáridos de leche humana opcionales adicionales) están presentes en las composiciones nutricionales en una cantidad de oligosacárido de leche humana en la composición nutricional (mg de oligosacárido de leche humana por mL de composición), de al menos 0.001 mg/mL, incluyendo al menos 0.01 mg/mL, incluyendo de 0.001 mg/mL a aproximadamente 20 mg/mL, incluyendo de aproximadamente 0.01 mg/mL a aproximadamente 20 mg/mL, incluyendo de 0.001 mg/mL a aproximadamente 10 mg/mL, incluyendo de aproximadamente 0.01 mg/mL a aproximadamente 10 mg/mL, incluyendo de 0.001 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL, incluyendo de aproximadamente 0.01 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL, incluyendo de 0.001 mg/mL a aproximadamente 1 mg/mL, incluyendo de 0.001 mg/mL a aproximadamente 0.23 mg/mL, incluyendo de aproximadamente 0.01 mg/mL a aproximadamente 0.23 mg/mL de oligosacárido de leche humana total en la composición nutricional. Típicamente, la cantidad especifica de oligosacárido de leche humana sialilado y/u oligosacárido de leche humana fucosilado presente en la composición nutricional, dependerá del oligosacárido de leche humana específico u oligosacáridos de leche humana específicos presentes y de las cantidades de otros componentes en la composición nutricional, incluyendo la cantidad de cualquier oligosacárido de leche humana opcional.

En una modalidad, cuando la composición nutricional es un polvo nutricional, la concentración total de oligosacárido de leche humana en el polvo nutricional es de aproximadamente 0.0005% a aproximadamente 5%, incluyendo de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 1% (en peso del polvo nutricional).

En otras modalidades, cuando el producto nutricional es un líquido nutricional listo para tomar, la concentración total de oligosacáridos de leche humana en el líquido nutricional listo para tomar, es de aproximadamente 0.0001% a aproximadamente 0.50%, incluyendo de aproximadamente 0.001% a aproximadamente 0.15%, incluyendo de aproximadamente 0.0.1% a aproximadamente 0.10%, e incluyendo además de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 0.03%o (en peso del líquido nutricional listo para tomar).

En otras modalidades, cuando el producto nutricional es un líquido nutricional concentrado, la concentración total de oligosacáridos de leche humana en el líquido nutricional concentrado, es de aproximadamente 0.0002% a aproximadamente 0.60%, incluyendo de aproximadamente 0.002% a aproximadamente 0.30%, incluyendo de aproximadamente 0.02% a aproximadamente 0.20%, e incluyendo además de aproximadamente 0.02% a aproximadamente 0.06% (en peso del líquido nutricional concentrado). Ácidos Grasos Poliinsaturados de Cadena Larga (AGPICL) Además de los oligosacáridos de leche humana anteriormente descritos, las composiciones nutricionales opcionalmente pueden incluir AGPICL. Los AGPICL están incluidos en las composiciones nutricionales para proporcionar soporte nutricional, así como para reducir el estrés oxidativo y mejorar el crecimiento y desarrollo funcional del epitelio intestinal y las poblaciones de células inmunitarias asociadas.

Algunos AGPICL de ejemplo para utilizarse en las composiciones nutricionales, incluyen, por ejemplo ?-3 AGPICL y ?-6 AGPICL. Algunos AGPICL específicos incluyen el ácido docosahexaenoico (DHA), ácido eicosapentaenoico (EPA), ácido docosapentaenoico (DPA), ácido araquidónicp (ARA), ácido linoleico, ácido linolénico (ácido alfa-linolénico) y ácido gamma-linolénico de fuentes oleosas tales como aceites de plantas, plancton marino, aceites de hongos, y aceites de peces. En una modalidad particular, los AGPICL se derivan de aceites de pescado tales como aceite de sábalo del atlántico, salmón, anchoa, bacalao, halibut (fletán), atún, o arenque. Los AGPICL particularmente preferidos para utilizarse en las composiciones nutricionales con los OLHs, incluyen el DHA, ARA, EPA, DPA, y combinaciones de los mismos.

Con el fin de reducir los efectos secundarios potenciales de dosis altas de AGPICL en las composiciones nutricionales, el contenido de AGPICL de preferencia no excede de aproximadamente 3% en peso el contenido de grasas totales, incluyendo menos del 2% en peso del contenido de grasas totales, e incluyendo menos del 1% en peso del contenido de grasa total en la composición nutricional.

Los AGPICL se pueden proporcionar en forma ácidos grasos libres, en forma de triglicéridos, en forma de diglicéridos, en forma de monoglicéridos, en forma de fosfolípidos, en forma esterificada, o en forma de una mezcla de una o más de las anteriores, de preferencia en forma de triglicérido.

Las composiciones nutricionales como las aquí descritas, típicamente contendrán concentraciones totales de AGPICL de aproximadamente 0.01mM a aproximadamente 10mM, incluyendo de aproximadamente 0.01mM a aproximadamente 1 milimolar. Alternativamente, las composiciones comprenden concentraciones totales de AGPICL de aproximadamente 0.001 g/L a aproximadamente 1 g/litro.

Antioxidantes Adicionalmente, las composiciones nutricionales de manera opcional incluyen uno o más antioxidantes, en combinación con los oligosacáridos de leche humana, para' proporcionar soporte nutricional, así como para reducir el estrés oxidativo.

Se pueden incluir cualesquiera oxidantes adecuados para administración oral, para utilizarse en las composiciones nutricionales de la presente invención, incluyendo por ejemplo, vitamina A, vitamina E, vitamina C, retinol, tocoferol y carotenoides, incluyendo luteína, beta-caroteno, zeaxantina y licopeno, y combinaciones de los mismos.

Las composiciones nutricionales pueden comprender al menos uno de entre luteína, licopeno, zeaxantina y beta-caroteno, para proporcionar una cantidad total de carotenoide de aproximadamente 0.001 pg/mL a aproximadamente 10 µ g/m i I i litro . Más particularmente, las composiciones nutricionales comprenden luteína en una cantidad de aproximadamente 0.001 pg/mL a aproximadamente 10 pg/mL, incluyendo de aproximadamente 0.001 pg/mL a aproximadamente 5 pg/mL, incluyendo de aproximadamente 0.001 pg/mL a aproximadamente 0.0190 pg/mL, incluyendo de aproximadamente 0.001 pg/mL a aproximadamente 0.0140 pg/mL, y también incluyendo de aproximadamente 0.044 pg/mL a aproximadamente 5 pg/mL de luteína. También generalmente es preferible que las composiciones nutricionales comprendan de aproximadamente 0.001 pg/mL a aproximadamente 10 pg/mL, incluyendo de aproximadamente 0.001 pg/mL a aproximadamente 5 pg/mL, de aproximadamente 0.001 pg/mL a aproximadamente 0.0130 pg/mL, incluyendo de aproximadamente 0.001 pg/mL a aproximadamente 0.0075 pg/mL, y también incluyendo de aproximadamente 0.0185 pg/mL a aproximadamente 5 pg/mL de licopeno. También generalmente es preferible que las composiciones nutricionales comprendan de aproximadamente 1 pg/mL a aproximadamente 10 pg/mL, incluyendo de aproximadamente 1 pg/mL a aproximadamente 5 pg/mL, incluyendo de aproximadamente 0.001 pg/mL a aproximadamente 0.025 pg/mL, incluyendo de aproximadamente 0.001 pg/mL a aproximadamente 0.011 pg/mL, y también incluyendo de aproximadamente 0.034 pg/mL a aproximadamente 5 pg/mL de beta-caroteno. Debe entenderse que cualquier combinación de estas cantidades de beta-caroteno, luteína, zeaxantina y licopeno, se puede incluir en las composiciones nutricionales de la presente invención. Opcionalmente se pueden incluir otros carotenoides en las composiciones nutricionales como las aquí descritas. Todos y cada uno de los carotenoides incluidos en las composiciones nutricionales aquí descritas, pueden provenir de una fuente natural, o pueden ser artificialmente sintetizados.

Nucleótidos Además de los oligosacáridos de leche humana, las composiciones nutricionales de la presente invención, adicional y opcionalmente incluyen nucleótidos y/o precursores de nucleótidos que se seleccionan del grupo que consiste de nucleósidos, bases púricas, bases pirimídicas, ribosa y desoxirribosa. El nucleótido puede estar en forma de monofosfato, difosfato o trifosfato. El nucleótido puede ser un ribonucleótido o un desoxirribonucleótido. Los nucleótidos pueden ser monoméricos, diméricos o poliméricos (incluyendo ARN y ADN). El nucleótido puede estar presente en la composición nutricional en forma de ácido libre, o en forma de una sal, de preferencia una sal monosódica.

Los nucleótidos y/o nucleósidos adecuados para utilizarse en las composiciones nutricionales, incluyen uno o más de entre 5'-monofosfato de citidina, 5'-monofosfato de uridina, 5'-monofosfato de adenosina, 5'-1 -monofosfato de guanosina, y/o 5'-monofosfato de inosina, más particularmente 5'-monofosfato de citidina, 5'-monofosfato de uridina, 5'-monofosfato de adenosina, 5'-monofosfato de guanosina y 5'-monofosfato de inosina.

Los nucleótidos están presentes en los productos nutricionales en cantidades totales de al menos 5 mg/L, incluyendo al menos 10 mg/L, incluyendo de aproximadamente 10 mg/L a aproximadamente 200 mg/L, incluyendo de aproximadamente 42 mg/L a aproximadamente 102 mg/L e incluyendo cuando menos aproximadamente 72 mg/L del producto nutricional.

Macronutrientes Las composiciones nutricionales que incluyen el oligosacárido de leche humana pueden ser formuladas para que incluyan al menos uno de entre proteínas, grasas y carbohidratos. En muchas modalidades, las composiciones nutricionales incluirán el oligosacárido de leche humana con proteínas, carbohidratos y grasas.

Aunque las concentraciones totales o cantidades de grasas, proteínas y carbohidratos pueden variar dependiendo del tipo de producto (es decir, fortificador de leche humana, fórmula para infantes pretérmino, fórmula infantil, fórmula pediátrica, fórmula para adultos, fórmula médica, etcétera), la forma del producto (es decir, sólido nutricional, polvo, líquido listo para tomarse, o líquido concentrado) y de las necesidades dietéticas objetivo del usuario pretendido, dichas concentraciones o cantidades más típicamente caen dentro de uno de los siguientes rangos de modalidades, incluyendo cualquiera otro ingrediente de grasa, proteína y/o carbohidrato esencial, tal como aquí se describe.

Para fórmulas infantiles y de adultos,; las concentraciones de carbohidratos más típicamente estarán dentro del rango de aproximadamente 5% a aproximadamente 40%, incluyendo de aproximadamente 7% a aproximadamente 30%, incluyendo de aproximadamente 10% a aproximadamente 25% en peso; las concentraciones de grasas más típicamente caerán dentro del rango de aproximadamente 1% a aproximadamente 30%, incluyendo de aproximadamente 2% a aproximadamente 15% y también incluyendo de aproximadamente 3% a aproximadamente 10% en peso; y las concentraciones de proteínas más típicamente caen dentro del rango de aproximadamente 0.5% a aproximadamente 30%, incluyendo de aproximadamente 1% a aproximadamente 15%, y también incluyendo de aproximadamente 2% a aproximadamente 10% en peso.

La cantidad de carbohidratos, grasas y/o proteínas en cualesquiera composiciones nutricionales líquidas aquí descritas, también puede estar caracterizada, en adición, o de manera alternativa, como un porcentaje de las calorías totales en la composición nutricional líquida, tal como se establece en la siguiente tabla. Estos macronutrientes para composiciones nutricionales líquidas de la presente invención, más típicamente se formulan dentro de cualquiera de los rangos calóricos (modalidades A-F) descritos en la siguiente tabla (en donde cada valor numérico va precedido por el término "aproximadamente").

Nutriente % Calorías Totales Modalidad A Modalidad B Modalidad C Carbohidratos 0-98 2-96 10-75 Proteínas 0-98 2-96 5-70 Grasas 0-98 2-96 20-85 Nutriente % Calorías Totales Modalidad D Modalidad E Modalidad F Carbohidratos 30-50 25-50 25-50 Proteínas 15-35 10-30 5-30 Grasas 35-55 1-20 2-20 En un ejemplo específico, las fórmulas infantiles líquidas (tanto las que están listas para tomarse como los líquidos concentrados) incluyen aquellas modalidades en las cuales el componente de proteína puede comprender desde aproximadamente 7.5% hasta aproximadamente 25% del contenido calórico de la fórmula; el componente carbohidrato puede comprender de aproximadamente 35% a aproximadamente 50% del contenido calórico total de la fórmula infantil; y el componente grasa puede comprender de aproximadamente 30% a aproximadamente 60% del contenido calórico de la fórmula infantil. Estos rangos se proporcionan únicamente como ejemplo y no se pretende que sean limitantes. En la siguiente tabla se anotan rangos adecuados adicionales (en donde cada valor numérico está precedido por el término "aproximadamente").

Nutriente % Calorías Totales Modalidad G Modalidad H Modalidad I Carbohidratos 20-85 30-60 35-55 Grasas 5-70 20-60 25-50 Proteínas 2-75 5-50 7-40 Cuando el producto nutricional es una fórmula en polvo para lactantes pretérmino o lactantes que nacieron a término, el componente proteína está presente en una cantidad de aproximadamente 5% a aproximadamente 35%, incluyendo de aproximadamente 8% a aproximadamente 12% e incluyendo de aproximadamente 10% a aproximadamente 12% en peso de la fórmula para lactantes pretérmino o lactantes que nacieron a término; el componente grasa está presente en una cantidad de aproximadamente 10% a aproximadamente 35%, incluyendo de aproximadamente 25% a aproximadamente 30%, e incluyendo de aproximadamente 26% a aproximadamente 28% en peso de la fórmula para lactantes pretérmino o lactantes que nacieron a término; y el componente carbohidrato está presente en una cantidad de aproximadamente 30% a aproximadamente 85%, incluyendo de aproximadamente 45% a aproximadamente 60%, incluyendo de aproximadamente 50% a aproximadamente 55% en peso de la fórmula para lactantes pretérmino o lactantes que nacieron a término.

Para los fortificadores de leche humana en polvo, el componente proteína está presente en una cantidad de aproximadamente 1% a aproximadamente 55%, incluyendo de aproximadamente 10% a aproximadamente 50% e incluyendo de aproximadamente 10% a aproximadamente 30% en peso del fortificador de leche humana; el componente grasa está presente en una cantidad de aproximadamente 1% a 'aproximadamente 30%, incluyendo de aproximadamente 1% a aproximadamente 25% e incluyendo de aproximadamente 1% a aproximadamente 20% en peso del fortificador de leche humana; y el componente carbohidrato está presente en una cantidad de aproximadamente 15% a aproximadamente 75%, incluyendo de aproximadamente 15% a aproximadamente 60%, e incluyendo de aproximadamente 20% a aproximadamente 50% en peso del fortificador de leche humana.

La cantidad total o concentración de grasas, carbohidratos y proteínas en las composiciones nutricionales en polvo de la presente invención, pueden variar considerablemente, dependiendo de la composición seleccionada y de las necesidades de la dieta o médicas del usuario pretendido. Ejemplos adecuados adicionales de concentraciones de macronutrientes se presentan a continuación. En este contexto, la cantidad total o concentración se refiere a todas las fuentes de grasa, carbohidratos y proteínas, en el producto en polvo. Para composiciones nutricionales en polvo, tales cantidades totales o concentraciones más típicamente y de preferencia se formulan dentro de cualquier rango de las modalidades descritas en la siguiente tabla (en donde cada valor numérico está precedido por el término "aproximadamente").

Nutriente % Calorías Totales Modalidad J Modalidad K Modalidad L Carbohidratos 1-85 30-60 35-55 Grasas 5-70 20-60 25-50 Proteínas 2-75 5-50 7-40 Grasas Las composiciones nutricionales utilizadas en los métodos de la presente invención, pueden incluir una fuente o fuentes de grasas. Las fuentes adicionales adecuadas de grasas para utilizarse en la presente, incluyen cualquier grasa o fuente de grasa que sea adecuada para utilizarse en un producto nutricional oral y que sea compatible con los elementos y características de tales productos. Por ejemplo, en una modalidad específica, la grasa adicional se deriva de ácidos grasos de cadena corta.

Ejemplos adicionales no limitantes de grasas o fuentes de las mismas adecuadas para utilizarse en los productos nutricionales aquí descritos, incluyen el aceite de coco, aceite de coco fraccionado, aceite de soya, aceite de maíz, aceite de oliva, aceite de cártamo, aceite de cártamo con alto contenido oleico, ácidos oleicos (EMERSOL 6313 OLEIC ACID, Cognis Oleochemicals, Malasia), aceite MCT (triglicéridos de cadena mediana), aceite de girasol, aceite de girasol con alto contenido oleico, aceite de palma y de palmiste, oleína de palma, aceite de cañóla, aceites marinos, aceites de peces, aceites de hongos, aceites de algas, aceites de semilla de algodón, y combinaciones de los mismos.

Proteínas Las composiciones nutricionales utilizadas en los métodos de la presente invención, opcionalmente pueden comprender proteínas. Cualquier fuente de proteínas es adecuada para utilizarse en las composiciones nutricionales orales y si es compatible con los elementos y características de tales productos, es adecuada para utilizarse en las composiciones nutricionales.

Ejemplos no limitantes de proteínas adecuadas o fuentes de las mismas para utilizarse en los productos nutricionales, incluyen proteínas o fuentes de proteínas hidrolizadas, parcialmente hidrolizadas o no hidrolizadas, las cuales pueden derivarse de cualquier fuente conocida o de alguna otra manera adecuada, tales como leche (por ejemplo, caseína, suero), proteínas animales (por ejemplo, de carne, pescado), cereales (por ejemplo, arroz, maíz), vegetales (por ejemplo, soya, chícharo) o combinaciones de los mismos. Ejemplos no limitantes de tales proteínas incluyen aislamientos de proteínas de leche, concentrados de proteínas de leche como los descritos en la presente, aislamientos de proteína caseína, caseína extensamente hidrolizada, proteínas del suero de la leche, caseinatos de calcio o de sodio, leche de vaca entera, leche parcial o completamente desgrasada, aislamientos de proteínas de soya, concentrados de proteínas de soya, concentrados de proteínas de chícharos intactos, aislamientos de proteínas de chícharo intactos, concentrados de proteínas de chícharo hidrolizados, aislamientos de proteínas de chícharo hidrolizadas, etcétera. En una modalidad específica, las composiciones nutricionales incluyen una fuente de proteínas derivada de las proteínas de leche humana y/o de origen bovino.

Carbohidratos Los productos nutricionales que se utilizan en los métodos de la presente invención, además y opcionalmente pueden comprender cualesquiera carbohidratos que sean adecuados para utilizarse en un producto nutricional oral y que sean compatibles con los elementos y características de tales productos.

Ejemplos no limitantes de carbohidratos adecuados o fuentes de los mismos para utilizarse en los productos nutricionales descritos en la presente, pueden incluir la maltodextrina, almidón o almidón de maíz hidrolizado o modificado, polímeros de glucosa, jarabe de maíz, sólidos del jarabe de maíz, carbohidratos derivados del arroz, carbohidratos derivados del chícharo, carbohidratos derivados de la papa, tapioca, sacarosa, glucosa, fructosa, lactosa, jarabe de maíz con alto contenido de fructosa, miel, alcoholes de azúcar (por ejemplo, maltitol, eritritol, sorbitol), edulcorantes artificiales (por ejemplo, sucralosa, acesulfame potásico, estevia) y combinaciones de los mismos. Un carbohidrato particularmente deseable es una maltodextrina con bajo equivalente a dextrosa (DE).

Otros Ingredientes Opcionales Las composiciones nutricionales tal como se utilizan en los métodos de la presente invención, pueden comprender además otros componentes opcionales que pudieran modificar las características físicas, químicas, estéticas o de procesamiento, de los productos o que puedan servir como componentes nutricíonales farmacéuticos o adicionales cuando se utilizan en la población objetivo. Muchos de tales ingredientes opcionales son conocidos o de alguna otra manera adecuados para utilizarse en alimentos médicos u otros productos nutricíonales o formas farmacéuticas, y también se pueden utilizar en las composiciones de la presente, siempre y cuando tales ingredientes opcionales sean seguros para la administración oral y sean compatibles con los ingredientes esenciales y otros ingredientes de la forma de producto seleccionada.

Ejemplos no limitantes de tales ingredientes opcionales, incluyen conservadores, agentes emulsificantes, amortiguadores de pH, fructooligosacáridos, galactoolígosacáridos, polidextrosa y otros prebióticos, probióticos, ingredientes activos farmacéuticos, agentes antiinflamatorios, nutrientes adicionales como los aquí descritos, colorantes, saborizantes, agentes espesantes y estabilizantes, agentes emulsificantes, lubricantes, etcétera.

Las composiciones nutricíonales pueden comprender además un agente edulcorante, de preferencia incluyendo al menos un alcohol de azúcar tal como manitol, eritritol, sorbitol xilitol, manítol, isomalta y lactitol, y también de preferencia incluyendo al menos un edulcorante artificial o de alta potencia, tal como el acesulfame K, aspartame, sucralosa, sacarina, estevia y tagatosa. Estos agentes edulcorantes, especialmente como combinación de un alcohol de azúcar y un edulcorante artificial, son especialmente útiles para formular modalidades de bebidas líquidas de la presente invención, con un perfil de sabor deseable. Estas combinaciones de edulcorantes, son especialmente efectivas para enmascarar sabores no deseados, a veces asociados con la adición de proteínas vegetales a una bebida líquida. Las concentraciones del alcohol de azúcar opcional en el producto nutricional varían dentro del rango de al menos 0.01%, incluyendo de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 10% y también incluyendo de aproximadamente 1% a aproximadamente 6% en peso del producto nutricional. Las concentraciones de edulcorantes artificiales opcionales pueden variar dentro del rango de al menos 0.01%, incluyendo de aproximadamente 0.05% a aproximadamente 5%, y también incluyendo de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 1.0% en peso del producto nutricional.

Se puede incluir un agente de flujo o agente para evitar la formación de pasta en las composiciones nutricionales, tal como se describe en la presente, para retardar la aglutinación o formación de pasta del polvo con el tiempo y para preparar una modalidad en polvo que fluya con facilidad desde su contenedor. Cualquier agente mejorador de flujo o que evite la formación de una masa que sea conocido o de cualquier otra manera adecuado para utilizarse en el polvo nutricional o producto en polvo, es adecuado para utilizarse en la presente, ejemplos no limitantes del cual incluyen el fosfato tricálcico, silicatos y combinaciones de los mismos. Las concentración del agente mejorador de flujo o agente evitar la formación de masa en la composición nutricional, varía dependiendo de la forma del producto, de los demás ingredientes seleccionados, de las propiedades de flujo deseadas, etcétera, pero más típicamente varía dentro del rango de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 4%, incluyendo de aproximadamente 0.5% a aproximadamente 2% en peso de la composición nutricional.

También se puede incluir un estabilizante en las composiciones nutricionales. Cualquier estabilizante que se sepa o que sea de alguna otra manera adecuado para utilizarse en una composición nutricional, también es adecuado para usarse en la presente, algunos ejemplos no limitantes del cual son gomas tales como la goma de xantano. El agente estabilizante puede representar de aproximadamente 0.1% a aproximadamente 5.0%, incluyendo de aproximadamente 0.5% a aproximadamente 3%, incluyendo de aproximadamente 0.7% a aproximadamente 1.5% en peso de la composición nutricional.

Las composiciones nutricionales además pueden comprender cualquiera de una variedad de otras vitaminas o nutrientes relacionados, ejemplos no limitantes de los cuales incluyen la vitamina A, vitamina D, vitamina E, vitamina K, tiamina, riboflavina, piridoxina, vitamina B12, carotenoides (por ejemplo, beta-caroteno, zeaxantina, luteína, licopeno), niacina, ácido fólico, ácido pantoténico, biotina, vitamina C, colina, inosítol, sales y derivados de los mismos, y combinaciones de los mismos.

Las composiciones nutricionales además pueden comprender cualquiera de una variedad de otros minerales adicionales, ejemplos no limitantes de los cuales incluyen calcio, fósforo, magnesio, fierro, zinc, manganeso, cobre, sodio, potasio, molibdeno, cromo, cloruro, y combinaciones de los mismos.

Métodos de Manufactura Las composiciones nutricionales de la presente invención se pueden preparar mediante cualquier técnica de manufactura conocida o de alguna otra manera efectiva para preparar la forma sólida o líquida del producto seleccionado. Muchas de tales técnicas son conocidas para cualquier forma de producto dada, tal como líquidos o polvos nutricionales, y pueden ser fácilmente aplicadas por un técnico en la materia a las composiciones nutricionales descritas en la presente.

Las composiciones nutricionales de la presente invención, por lo tanto, pueden ser preparadas por cualquiera de una variedad de métodos de formulación o manufactura conocidos o de alguna otra manera efectivos. En un proceso de manufactura adecuado, por ejemplo, se preparan al menos tres lechadas por separado, incluyendo una lechada de proteína en grasa (PEG), una lechada de carbohidrato-mineral (CHO-MIN), y una lechada de proteína en agua (PEA). La lechada PEG se forma calentando y mezclando el aceite (por ejemplo, aceite de cañóla, aceite de maíz, etcétera) y después agregando un emulsificante (por ejemplo, lecitina), vitaminas solubles en grasa, y una porción de la proteína total (por ejemplo, concentrado de proteínas de leche, etcétera) con agitación y calentamiento continuos. La lechada CHO-MIN se forma agregando, con agitación en caliente a agua: minerales (por ejemplo, citrato de potasio, fosfato dipotásico, citrato de sodio, etcétera), minerales traza y ultratraza (premezcla MT/MUT), agentes espesantes o suspensores (por ejemplo, avicel, gelán, carragenina). La lechada CHO-MIN resultante se mantiene durante 10 minutos en agitación continua con calor antes de agregar los minerales adicionales (por ejemplo, cloruro de potasio, carbonato de magnesio, yoduro de potasio, etcétera) y/o los carbohidratos adicionales (por ejemplo, OLHs, fructooligosacárido, sacarosa, jarabe de maíz, etcétera). Después, la lechada PEA se forma al mezclar, con calor y agitación, la proteína restante, si la hay.

Las lechadas resultantes, entonces, se combinan con agitación en caliente y el pH se ajusta a 6.6-7.0, después de lo cual la composición es sometida a un proceso de alta temperatura por un tiempo corto (ATTC), durante el cual la composición es tratada con calor, emulsificada y homogenizada, y después se deja enfriar. Se agregan vitaminas hidrosolubles y ácido ascórbico, el pH se ajusta al rango deseado, si fuera necesario, se añaden los saborizantes y se agrega agua hasta alcanzar el nivel total de sólidos deseado. Luego, la composición es empacada asépticamente para formar una emulsión nutriciorial asépticamente empacada. Posteriormente, esta emulsión se puede diluir aún más, se puede tratar con calor y se puede empacar para formar un líquido listo para tomarse o un líquido concentrado, o se puede tratar con calor y posteriormente procesar y empacar en forma de un polvo reconstituible, por ejemplo deshidratado por aspersión, mezclado en seco, aglomerado.

El sólido nutricionai, tal como un polvo nutricional deshidratado por aspersión o un polvo nutricional mezclado en seco, se puede preparar mediante una variedad de técnicas conocidas o de cualquier otra manera efectivas, adecuadas para la fabricación y formulación de un polvo nutricional.

Por ejemplo, cuando el polvo nutricional es un polvo nutricional deshidratado por aspersión, el paso de deshidratado por aspersión, de manera similar, puede incluir cualquier técnica de deshidratación por aspersión que sea conocida o que sea de alguna otra manera adecuada para utilizarse en la producción de polvos nutricionales.

Se conocen numerosos métodos y técnicas diferentes de deshidratación por aspersión, para utilizarse en el campo de la nutrición, todos los cuales son adecuados para usarse en la fabricación de polvos nutricionales deshidratados por aspersión de la presente.

Un método para preparar el polvo nutricional secado por aspersión, comprende formar y homogenizar una lechada acuosa o líquido que comprenda grasa predigerida y opcionalmente proteínas, carbohidratos y otras fuentes de grasa, y después deshidratar por aspersión la lechada o líquido, para producir un polvo nutricional deshidratado por aspersión. El método puede comprender además el paso de deshidratar por aspersión, mezclar en seco, o agregar de alguna otra manera ingredientes nutricionales adicionales, incluyendo cualesquiera uno o más de los ingredientes aquí descritos, al polvo nutricional deshidratado por aspersión.

Otros métodos adecuados para preparar productos nutricionales, se describen, por ejemplo, en la Patente Norteamericana U.S. 6,365,218 (Borschel, et al ); U.S. 6,589,576 (Borschel, et al.), U.S. 6,306,908 (Carlson, et al ); Solicitud de Patente Norteamericana No. de Serie 20030118703 A1 (Nguyen, et al.), cuyas descripciones se incorporan en la presente como referencia, hasta el grado en que sean consistentes con la presente.

La presente solicitud abarca un método para mejorar la inmunidad celular en un individuo que lo necesite, en donde el método comprende administrarle al individuo que lo necesite, una composición nutricional que comprenda un oligosacárido de leche humana sialilado en una cantidad suficiente para mejorar las respuestas mediadas por células T.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito en donde el individuo que lo necesita, se selecciona del grupo que consiste de lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a alergia; lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a enfermedades autoinmunitarias; lactantes no amamantados, lactantes amamantados suplementados con la fórmula o fortificador de leche humana, adultos inmunosenescentes y otros adultos, mujeres menopáusicas, mujeres posmenopáusicas, pacientes en quimioterapia, individuos inmunocomprometidos, individuos con SIDA, y combinaciones de los mismos.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional es un líquido y comprende de 0.001 mg/mL a aproximadamente 20 mg/mL de oligosacárido de leche humana sialilado. La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional es un líquido y comprende de 0.001 mg/mL a aproximadamente 10 mg/mL de oligosacárido de leche humana sialilado La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional es un líquido y comprende de 0.001 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL de oligosacárido de leche humana sialilado.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional es un polvo y comprende de aproximadamente 0.0005% a aproximadamente 5% de oligosacárido de leche humana sialilado, en peso del polvo. La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional es un polvo y comprende de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 1% de oligosacárido de leche humana sialilado, en peso del polvo.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde el oligosacárido de leche humana sialilado se selecciona del grupo que consiste de 3'-sialillactosa, 6'-sialillactosa, lactosialotetraosa, y combinaciones de las mismas.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional está sustancialmente libre de un oligosacárido de leche humana fucosilado.

La presente solicitud abarca un método para mejorar la inmunidad celular en un individuo que lo necesite, en donde el método comprende administrarle al individuo que lo necesite, una composición nutricional que comprende un oligosacárido de leche humana fucosilado, en una cantidad suficiente para mejorar las respuestas reguladoras de células T La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde el individuo que lo necesita, se selecciona del grupo que consiste de lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a alergia; lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a enfermedades autoinmunitarias; lactantes no amamantados, lactantes amamantados suplementados con fórmula o fortificador de leche humana; adultos inmunosenescentes y adultos mayores, mujeres menopáusicas, mujeres posmenopáusicas, individuos afectados con una enfermedad inflamatoria crónica, y combinaciones de los mismos.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional es un líquido y comprende de 0.001 mg/mL a aproximadamente 20 mg/mL de oligosacárido de leche humana fucosilado. La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional es un líquido y comprende de 0.001 mg/mL a aproximadamente 10 mg/mL de oligosacárido de leche humana fucosilado. La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional es un líquido y comprende de 0.001 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL de oligosacárido de leche humana fucosilado.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional es un polvo y comprende de aproximadamente 0.0005% a aproximadamente 5% de oligosacárido de leche humana fucosilado, en peso del polvo. La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional es un polvo y comprende de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 1% de oligosacárido de leche humana fucosilado, en peso del polvo.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde el oligosacárido de leche humana fucosilado se selecciona del grupo que consiste de 2'-fucosillactosa, 3'-fucosillactosa, lacto-N-fucopentaosa, monofucosillacto-N-hexaosa, y combinaciones de las mismas.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional está sustancialmente libre de oligosacárido de leche humana sialilado.

La presente solicitud abarca un método para mejorar la inmunidad celular en un individuo que lo necesite, en donde el método comprende administrarle al individuo que lo necesite, una composición nutricional que comprende un oligosacárido de leche humana sialilado en una cantidad suficiente para mejorar las respuestas mediadas por células T y un oligosacárido de leche humana fucosilado, en una cantidad suficiente para mejorar las respuestas reguladoras de células T.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde el individuo que lo necesite, se selecciona del grupo que consiste de lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a alergia; lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a enfermedades autoinmunitarias; lactantes no amamantados, lactantes amamantados suplementados con fórmula o fortificador de leche humana, adultos inmunosenescentes y adultos mayores, mujeres menopáusicas, mujeres posmenopáusicas, pacientes en quimioterapia, individuos afectados por una enfermedad inflamatoria crónica, individuos inmunocomprometidos, individuos con SIDA, y combinaciones de los mismos.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricionai es un líquido y comprende de 0.001 mg/mL a aproximadamente 20 mg/mL de oligosacárido de leche humana sialilado y fucosilado. La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricionai es un líquido y comprende de 0.001 mg/mL a aproximadamente 10 mg/mL de oligosacárido de leche humana sialilado y fucosilado. La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricionai es un líquido y comprende de 0.001 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL de oligosacárido de leche humana sialilado y fucosilado.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricionai es un polvo y comprende de aproximadamente 0.0005% a aproximadamente 5% de oligosacárido de leche humana sialilado y fucosilado , en peso del polvo . La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde la composición nutricional es u n polvo y comprende de aproximadamente 0.01 % a aproximadamente 1 % de oligosacárido de leche humana sialilado y fucosilado , en peso del polvo.

La presente solicitud abarca el método previamente descrito, en donde el oligosacárido de leche h umana sialilado se selecciona del grupo que consiste de 3'-sialillactosa , 6'-sialillactosa , lactosialotetraosa, y combinaciones de las mismas; y el oligosacárido de leche humana fucosilado se selecciona del grupo que consiste de 2'-fucosillactosa, 3'-fucosillactosa , lacto-N-fucopentaosa , monofucosillacto-N-hexaosa, y combinaciones de las mismas .

La presente solicitud abarca un método para mejorar las respuestas mediadas por células T en un individuo que lo necesite, en donde el método comprende administrarle al individuo que lo necesita , una composición nutricional que comprende un oligosacárido de leche humana sialilado en una cantidad suficiente para mejora r las respuestas med iadas por células T.

La presente solicitud abarca un método para mejorar las respuestas reguladoras de células T en un individuo que lo necesite , en donde el método comprende administrarle al individuo que lo necesita, una composición nutricional que com prende un oligosacárido de leche humana fucosilado, en una cantidad suficiente para mejorar las respuestas reguladoras de células T.

Todos los porcentajes, partes y relaciones utilizadas en la presente, están dados en peso de la composición total, a menos que se especifique de otra manera. Todos estos pesos, cuando pertenezcan a ingredientes listados, se basan en el nivel activo y, por lo tanto, no incluyen solventes o subproductos que pudieran estar incluidos en los materiales disponibles en el comercio, a menos que se especifique de otro modo.

Los rangos numéricos utilizados en la presente, se pretende que incluyan todos los números y subconjuntos de números dentro de ese rango, ya sean específicamente mencionados, o no. Además, se debe considerar que estos rangos numéricos proporcionan respaldo para una reivindicación que se refiera a cualquier número o subconjunto de números en ese rango. Por ejemplo, la descripción de 1 a 10 se debe considerar que soporta un rango de 2 a 8, de 3 a 7, de 5 a 6, de 1 a 9, de 3.6 a 4.6, de 3.5 a 9.9, etcétera.

Todas las referencias a características o limitaciones en singular de la presente descripción, deberán incluir las correspondientes características o limitaciones en plural, y viceversa, a menos que se especifique de otra manera o que lo contrario esté claramente implícito en el contexto en el cual se hizo la referencia.

Todas las combinaciones de las etapas del método o proceso utilizadas en la presente, se pueden realizar en cualquier orden, a menos que se especifique de otra manera o que esté claramente implícito lo contrario en el contexto en el cual se hizo la combinación referida.

Las diversas modalidades de las composiciones nutricionales de la presente invención, también pueden estar sustancialmente libres de cualquier ingrediente o característica opcional o seleccionada aquí descrita, siempre y cuando la composición nutricional restante todavía contenga todos los ingredientes o características requeridos según lo descrito aquí. En este contexto, y a menos que se especifique de otra manera, el término "sustancialmente libre" significa que la composición nutricional seleccionada contiene menos de una cantidad funcional del ingrediente opcional, típicamente menos del 1%, incluyendo menos de 0.5%, incluyendo menos de 0.1%, y también incluyendo cero por ciento, en peso de tal ingrediente opcional o seleccionado.

Las composiciones nutricionales y métodos pueden comprender, consistir de, o consistir esencialmente de, los elementos esenciales de las composiciones y métodos como describen aquí, así como cualquier elemento adicional u opcional aquí descrito o útil de cualquier otra manera en las aplicaciones del producto nutricional.

Toda vez que la presente invención ha sido ilustrada mediante la descripción de varias modalidades y mientras que las modalidades ilustrativas han sido descritas en considerable detalle, no es la intención del solicitante restringir o limitar de ninguna manera los alcances de las reivindicaciones anexas, a tales detalles. Pueden ser evidentes ventajas y modificaciones adicionales para los técnicos en la materia.

EJEMPLOS Los siguientes ejemplos ilustran modalidades específicas y/o características de las composiciones nutricionales de la presente invención. Los ejemplos se dan únicamente para propósitos de ilustración y no se debe considerar como limitaciones de la presente invención, ya que son posibles muchas variaciones de la misma sin apartarse del espíritu y los alcances de la invención. Todas las cantidades ejemplificadas son porcentajes en peso basados en el peso total de la composición, a menos que se especifique de otro modo.

Las composiciones de ejemplo son composiciones nutricionales estables en anaquel preparadas de conformidad con los métodos de fabricación aquí descritos, de tal modo que cada composición ejemplificada, a menos que se especifique de otra manera, incluye una modalidad procesada asépticamente y una modalidad empacada esterilizada en autoclave.

Ejemplos 1-5 Los Ejemplos 1-5 ilustran emulsiones nutricionales listas para tomar de la presente descripción, cuyos ingredientes se listan en la tabla que se presenta a continuación. Las cantidades de todos los ingredientes se listan en forma de kilogramo por cada 1000 kilogramos por lote de producto, a menos que se especifique de otra manera.

Ejemplos 1-5 SSN = según sea necesario Ejemplos 6-10 Los Ejemplos 6-10 ilustran modalidades de emulsiones nutricionales listas para beber de la presente invención, cuyos ingredientes se listan en la tabla que se presenta a continuación.

Las cantidades de todos los ingredientes se listan en forma de kilogramo por cada 1000 kilogramos de lote de producto, a menos que se especifique de otra manera.

Ejemplos 6-10 SSN = según sea necesario Ejemplo 11 En este ejemplo, se analizan los efectos de los oligosacáridos de leche humana (OLHs) sobre las respuestas inmunitarias mediadas por células T.

Los OLHs o mezclas de OLHs utilizadas en este ejemplo, incluyeron 2'-fucosilIactosa (2'FL), 3'-fucosillactosa (3'FL), 3'-sialillactosa (3'SL), 6'-sialillactosa (6'SL), lacto-N-neotetraosa (LNnT), una mezcla de FL (mezcla FL) que contiene 2'FL y 3'FL a una relación de 2'FL con respecto a 3'FL de 85:15, una mezcla de SL (mezcla SL) que contiene ácido siálico, 3'SL, y 6'SL, en una relación de ácido siálico con respecto a 3'SL y 6'SL, de 50:10:40, y una mezcla de OLHs (mezcla OLH) aislados de leche humana. La composición de la mezcla OLH se muestra en la tabla que se presenta a continuación. Las composiciones fueron determinadas por HPLC-chip TOF MS.

Las respuestas mediadas por células T se evaluaron mediante las respuestas proliferativas al mitógeno de células T fitohemaglutinina (PHA) (simula una infección). Se tomó sangre en tubos heparinizados Vacutainer™ de cinco lechones de diez días de edad que habían sido alimentados con una fórmula de leche de cerdo artificial desde el nacimiento; esta fórmula de leche de cerdo artificial no contenía ningún oligosacárido de leche humana. Se aislaron células mononucleares de sangre periférica (CMSP) utilizando una técnica de densidad de gradiente estándar (Ficoll-Paque PLUS). Se Usaron las células eritrocitarias residuales con una solución hipotónica de cloruro de amonio. Las células se lavaron y resuspendieron en RPMI (Medio del Roswell Park Memorial Institute) conteniendo: 10% de suero fetal bovino, glutamina 2mM, piruvato de sodio ImM, HEPES 20mM (ácido 4- (2- h id roxi e ti I )- 1 -piperazinoetansulfónico), 50 pg/mL de gentamicina, 1000 UI/mL de penicilina y 100 pg/mL de estreptomicina, a una concentración de 1x106/mL, y después se cultivaron en presencia o ausencia de OLHs individuales o mezclas de OLHs, a una concentración de 125 pg/mL, solos o en combinación con 25 pg/mL de PHA. Las células se cultivaron durante 72 horas y se determinó la proliferación celular utilizando una metodología de incorporación de timidina tritiada estándar. Los resultados se muestran en las Figuras 1 y 2.

Como se muestra en la Fig. 1, la adición de sialillactosa (SL), a través de la mezcla SL y de la mezcla OLH, a los cultivos celulares en presencia de PHA, intensificó la proliferación de células mononucleares de sangre periférica. Este es un resultado inesperado, ya que la modificación inmunitaria por OLHs previamente había sido asociada a efectos antiinflamatorios o modulación del sistema inmunitario innato (Jantscher-Krenn E., et al., "Human Milk Oligosaccharides and Their Potential Benefits for the Breast-Fed Neonate", Minerva Pediatr. 64: 83-99, 2012). Además, Kuntz et al. (2008) reportaron que la exposición a SL de células epiteliales gastrointestinales, disminuía la proliferación e incrementaba la diferenciación (Kuntz S., et al., "Oligosaccharides from Human Milk Influence Growth-Related Characteristics of Intestinally Transformed and Non-Transformed Intestinal Cells", Br. J. of Nutr., 99: 462-471, 2008). De manera consistente con el reporte de Kuntz, Eiwegger et al. (2004) reportaron la modulación de inducción de células T en sangre de cordón umbilical de algunas citosinas asociadas con la diferenciación de células vírgenes a tipo 1 (IFN-?) e incrementó el porcentaje de células T CD4+ que coexpresaban CD25 (un marcador de activación), en presencia de una combinación de ocho oligosacáridos ácidos: 3'SL, 6'SL, ácido siálico, fucosil-sialil-lacto-N-neohexaosa, lactosialil-tetrasacárido (LST)a, LSTb, LSTc, y disialil-lacto-N-tetraose (DSLNT) (Eiwegger T., eí a/., "Human Milk-Derived Oligosaccharides and Plant-Derived Oligosaccharides Stimulate Cytokine Production of Cord Blood T-Cells in Vitro", Pediatr. Res. 56: 536-540, 2004).

La fucosillactosa (FL) no mejoró significativamente la proliferación, ni tampoco la LNnT; sin embargo, la mezcla de OLH que contenía SL, FL y LNnT, mejoró la proliferación en comparación con cultivos que no contenían OLH. Tomados en conjunto, estos hallazgos sugieren que la 3'SL y/o la 6'SL pueden ser el o los componentes clave en la mezcla OLH que condujeron a una mejoría significativa en la proliferación de células mononucleares de sangre periférica. Aunque la mezcla SL contenía ácido siálico libre, no había ácido siálico libre en la mezcla OLH, lo cual indica que la mejoría en la proliferación ocurrió sin la presencia de ácido siálico libre.

Como se muestra en la Fig. 2, la adición de FL a los cultivos celulares disminuyó la proliferación de células mononucleares de sangre periférica no estimulada. Esta observación se encontró en cultivos de células que contenían 2'FL, 3'FL, la mezcla FL, y la mezcla OLH, pero no se observó en cultivos que contenían cualquier forma de SL o LNnT, lo cual indica que el componente en la mezcla OLH que dirige la observación, podría ser la FL.

Estos datos demuestran los efectos diferenciales de SL y FL sobre la inmunidad mediada por células T. Cuando la SL incrementaba la proliferación de CMSP en células estimuladas con PHA, la FL disminuía la proliferación de CMSP en células no estimuladas. Además, estos compuestos tienen influencia sobre la proliferación de una manera que no es mutuamente excluyente; es decir, la mezcla OLH que contenía tanto el componente SL como el FL, ninguno de ellos de la mezcla OLH inhibía los atributos del otro. La mezcla OLH incrementaba la proliferación de cultivos celulares estimulados con PHA de manera similar a la mezcla SL, mientras que la mezcla OLH disminuía la proliferación en cultivos celulares no estimulados, de manera similar a los compuestos FL.

La modulación de la inmunidad celular es benéfica ya que la estimulación con PHA generalmente se reconoce como subordinada a la inmunidad celular in vivo a infecciones con antígenos microbianos o alteraciones de los antígenos "propios". El incremento en la respuesta proliferativa con PHA causada por las formas de SL, indicó una mejoría en la inmunidad celular, y de esta manera, incrementa la resistencia a patógenos microbianos intracelulares, hongos, protozoarios y células tumorales.

Además, después de la inducción de una respuesta celular y la atenuación del riesgo, el cuerpo puede deshacerse él mismo de la acumulación de un número amplificado de células efectoras, las cuales ahora están en espera o no estimuladas. Debido a que las formas de FL disminuyeron la proliferación de células no activadas, la FL puede mejorar la resolución de la respuesta inmunitaria y, de esta manera, atenuar el desarrollo de una respuesta inflamatoria no controlada. En combinación, como se indicó para la mezcla OLH, la SL y FL incrementaron la resistencia a patógenos microbianos intracelulares (virus y bacterias), hongos, protozoarios y células tumorales, mientras que mejoran la resolución de la respuesta inmunitaria, previniendo de esta manera una respuesta inflamatoria no controlada o crónica.

EJEMPLO 12 En este Ejemplo, se analizaron los efectos de la 2'FL sobre la regulación de células T, y se evaluaron.

Se suplementaron oralmente ratones con 7.5 mg de 2'FL en 200 µ?_ de PBS (n = 5) o 200 L de PBS (n = 5) diariamente durante 5 días. En el día seis, los ratones fueron sacrificados y se tomaron los linfocitos de ganglios linfáticos mesentéricos y se aislaron utilizando los métodos estándar. Los linfocitos de ganglios linfáticos mesentéricos (LGLMs) se tiñeron con anticuerpos monoclonales marcados con fluorocromo, específicos contra los marcadores de superficie CD4 y CD25. Después, las células se fijaron con una solución de paraformaldehído para mantener la integridad de la tinción del marcador de superficie. Los LGLMs teñidos fueron permeabilizados con una solución a base de saponina, para permitir la incorporación intracelular de anticuerpos monoclonales y después se tiñeron con un anticuerpo monoclonal marcado con fluorocromo, específico contra el factor de transcripción FoxP3. Todos los métodos de preparación de células utilizados se basaron en las recomendaciones del fabricante del anticuerpo monoclonal. Las suspensiones de LGLMs se analizaron por citometría de flujo. Las células FoxP3+, CD4+, y CD25\ se clasificaron como células T reguladoras.

Las células T reguladoras que coexpresan FoxP3, CD4 y CD25, se derivan del timo. Estas células desempeñan una función crítica en la prevención de respuestas aberrantes a antígenos propios y antígenos no propios, dando como resultado, por ejemplo, la prevención de enfermedades autoinmunitarias y de enfermedades alérgicas. Así pues, la 2'FL moduló la inmunidad celular al prevenir las respuestas inmunitarias aberrantes mediante la generación de células reguladoras T (Fig. 3), así como mediante la resolución o mantenimiento de respuestas inmunitarias apropiadas, al disminuir la proliferación de células no activadas, tal como se muestra en el Ejemplo 11 (Figura 2).

En resumen, los datos de los Ejemplos 11 y 12 respaldan el desarrollo/mejoría de respuestas inmunitarias mediadas por células T apropiadamente reguladas, mediante una combinación de SL y FL. El beneficio de esta combinación de oligosacaridos es un aumento en la resistencia a patógenos microbianos ¡ntracelulares, hongos, protozoarios, y células tumorales, un aumento en la resolución de infecciones y/o procesos inflamatorios (inflamación crónica), y la prevención de enfermedades autoinmunitarias y alérgicas. La SL por sí sola se puede usar para mejorar respuestas inmunitarias mediadas por células T deficientes en aquellas personas que necesiten una mejoría de las respuestas inmunitarias mediadas por células T, incluyendo, pero no limitándose a ancianos, o aquellas personas que se recuperan de formas de terapias inmunosupresoras, tales como la quimioterapia, o aquellas personas afectadas por un trastorno inmunosupresor, tal como una infección por VIH. La FL por sí sola se puede usar para prevenir o tratar respuestas inmunitarias exageradas, incluyendo, pero no limitándose a enfermedades alérgicas, autoinmunitarias y enfermedades inflamatorias crónicas.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un método para mejorar la inmunidad celular en un individuo que lo necesite, caracterizado porque comprende administrarle al individuo que lo necesite, una composición nutricional que comprende un oligosacárido de leche humana sialilado o un oligosacárido de leche humana fucosilado, en una cantidad suficiente para mejorar la inmunidad celular.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado por que el individuo que lo necesite se selecciona del grupo que consiste de lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a alergias; lactantes, pediátricos, adolescentes o adultos propensos a enfermedades autoinmunitarias; lactantes no amamantados; lactantes amamantados suplementados con fórmula o fortificador de leche humana; adultos inmunosenescentes y adultos mayores; mujeres menopáusicas; mujeres posmenopáusicas; pacientes en quimioterapia; individuos ¡nmunocomprometidos; individuos con SIDA; y combinaciones de los mismos.

3. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque la composición nutricional es un líquido que comprende de aproximadamente 0.001 mg/mL a aproximadamente 20 mg/mL de oligosacárido de leche humana sialilado u oligosacárido de leche humana fucosilado, de preferencia de aproximadamente 0.001 mg/mL a aproximadamente 10 mg/mL de oligosacárido de leche humana sialilado u oligosacárido de leche humana fucosilado, más preferiblemente de aproximadamente 0.001 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL de oligosacárido de leche humana sialilado u oligosacárido de leche humana fucosilado.

4. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque la composición nutricional es un polvo que comprende de aproximadamente 0.0005% a aproximadamente 5% de oligosacárido de leche humana sialilado u oligosacárido de leche humana fucosilado, de preferencia de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 1% de oligosacárido de leche humana sialilado u oligosacárido de leche humana fucosilado, en peso del polvo.

5. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el oligosacárido de leche humana sialilado se selecciona del grupo que consiste de 3'-sialillactosa, 6'-sialillactosa, lactosialotetraosa, y combinaciones de las mismas.

6. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque la composición nutricional está sustancialmente libre de un oligosacárido de leche humana fucosilado,

7. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque el oligosacárido de leche humana fucosilado se selecciona del grupo que consiste de 2'-fucosillactosa, 3'-fucosillactosa, lacto-N-fucopentaosa, monofucosillacto-N-hexaosa, y combinaciones de las mismas.

8. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 ó 7, caracterizado porque la composición nutricional está sustancialmente libre de un oligosacárido de leche humana sialilado.

9. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la composición nutricional comprende un oligosacárido de leche humana sialilado, en una cantidad suficiente para mejorar las respuestas mediadas por células T, y un oligosacárido de leche humana fucosilado, en una cantidad suficiente para mejorar las respuestas reguladoras de células T.

10. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, 7 ó 9, caracterizado porque la composición nutricional es un líquido que comprende de aproximadamente 0.001 mg/mL a aproximadamente 20 mg/mL de cada uno de entre el oligosacárido de leche humana sialilado y el fucosilado, de preferencia de aproximadamente 0.001 mg/mL a aproximadamente 10 mg/mL de cada uno de entre el oligosacárido de leche humana sialilado y el fucosilado, más preferiblemente de aproximadamente 0.001 mg/mL a aproximadamente 5 mg/mL de cada uno de entre el oligosacárido de leche humana sialilado y el fucosilado.

11. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, 7, 9 ó 10, caracterizado porque la composición nutricional es un polvo que comprende de aproximadamente 0.0005% a aproximadamente 5% de cada uno de entre el oligosacárido de leche humana sialilado y el fucosilado, de preferencia de aproximadamente 0.01% a aproximadamente 1 % de cada uno de entre el oligosacárido de leche humana sialilado y el fucosilado, en peso del polvo.

12. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, 7 ó 9-11, caracterizado porque el oligosacárido de leche humana sialilado se selecciona del grupo que consiste de 3'-sialillactosa, 6'-sialillactosa, lactosialotetraosa, y combinaciones de las mismas, y el oligosacárido de leche humana fucosilado se selecciona del grupo que consiste dé 2'-fucosillactosa, 3'-fucosillactosa, lacto-N-fucopentaosa, monofucosillacto-N-hexaosa, y combinaciones de las mismas.

13. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-6, ó 9-12, caracterizado porque la composición nutricional comprende un oligosacárido de leche humana sialilado, en una cantidad suficiente para mejorar las respuestas mediadas por células T.

14. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-5, ó 7-13, caracterizado porque la composición nutricional comprende un oligosacárido de leche humana fucosilado, en una cantidad suficiente para mejorar las respuestas reguladoras de células T.