[go: up one dir, main page]

MX2014011373A - Inhibidores de diacilglicerol aciltransferasa 2. - Google Patents

Inhibidores de diacilglicerol aciltransferasa 2.

Info

Publication number
MX2014011373A
MX2014011373A MX2014011373A MX2014011373A MX2014011373A MX 2014011373 A MX2014011373 A MX 2014011373A MX 2014011373 A MX2014011373 A MX 2014011373A MX 2014011373 A MX2014011373 A MX 2014011373A MX 2014011373 A MX2014011373 A MX 2014011373A
Authority
MX
Mexico
Prior art keywords
compound
tautomer
mmol
inhibitors
piperidin
Prior art date
Application number
MX2014011373A
Other languages
English (en)
Inventor
Markus Boehm
Jian Wang
Kay Ahn
Shawn Cabral
Philip A Carpino
Kentaro Futatsugi
David Hepworth
Daniel W Kung
Suvi Orr
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48428540&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=MX2014011373(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of MX2014011373A publication Critical patent/MX2014011373A/es

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/538—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/10—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for impotence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/12—Ophthalmic agents for cataracts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/02—Non-specific cardiovascular stimulants, e.g. drugs for syncope, antihypotensives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
    • C07D473/32—Nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)

Abstract

En la presente se describen compuestos de la fórmula I que inhiben la actividad de la diacilglicerol aciltransferasa 2 (DGAT2) y sus usos en el tratamiento de enfermedades ligadas a los mismos en animales.

Description

INHIBIDORES DE DIACILGLICEROL AC I LTR AN S F E R AS A 2 CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a compuestos farmacéuticos nuevos, composiciones farmacéuticas que contienen estos compuestos, y su uso para inhibir la actividad de la diacilglicerol aciltransferasa 2 (DGAT2).
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los triglicéridos o triacilgliceroles (TAG, por sus siglas en inglés) representan una forma principal de almacenamiento de energía en mamíferos. Se forman TAGs por la esterificación en secuencia de glicerol con tres ácidos grasos de longitudes de cadena variantes y grados de saturación. TAG sintetizados en el intestino o hígado son empacados a tejidos periféricos en donde se hidrolizan a sus ácidos grasos constituyentes y glicerol por lipoproteína lipasa (LPL, por sus siglas en inglés). Los ácidos grasos no esterificados resultantes (NEFA, por sus siglas en inglés) se pueden metabolizar además para producir energía o re-esterif ¡car y almacenar.
Bajo condiciones fisiológicas normales, el TAG denso de energía sigue secuestrado en varios depósitos adiposos hasta que hay una demanda por su liberación, en donde se hidroliza a glicerol y ácidos grasos libres que después son liberados en el torrente sanguíneo. Este proceso es muy regulado por las acciones opuestas de insulina y hormonas tales como catecolaminas que promueven la deposición y movilización de TAG almacena bajo varias condiciones fisiológicas. En el marco post-prandial , la insulina actúa para inhibir lipólisis, por tanto, restringir la liberación de energía en la forma de NEFA y asegurando el almacenamiento apropiado de lípidos dietéticos en depósitos adiposos. Sin embargo, en pacientes con diabetes tipo 2, la habilidad de la insulina de suprimir lipólisis se mejora y se eleva de forma inapropiada el flujo de NEPA de adipocitos. Esto, a su vez; resulta en la administración aumentada de lípido a tejidos tales como músculo e hígado. En ausencia de demanda energética, el TAG y otros metabolitos de lípido, tal como diacilglicerol (DAG, por sus siglas en inglés) pueden acumular y causar una pérdida de sensibilidad de insulina. La resistencia a insulina en músculo se caracteriza por absorción de glucosa reducida y almacenamiento de glicógeno, mientras en el hígado, la pérdida de señalización de insulina da lugar a salida de glucosa desregulada y sobre-producción de VLDL rico en TAG, un distintivo de diabetes tipo 2. La secreción elevada de VLDL enriquecido con TAG, las llamadas partículas de VLDL1 , se cree que estimula la producción de lipoproteína pequeña, densa de baja densidad (sdLDL), una subfraccion proaterogénica de LDL que se asocia con riesgo elevado de enfermedad del corazón coronario.
Las diacilglicerol aciltransferasas (DGAT, por sus siglas en inglés) catalizan el paso terminal en síntesis de TAG, específicamente, la esterificación de un ácido graso con diacilglicerol resultando en la formación de TAG. En mamíferos, dos enzimas de DGAT (DGAT1 y DGAT2) han sido caracterizados. Aunque estas enzimas catalizan la misma reacción enzimática, sus secuencias de aminoácido respectivas no se relacionan y ocupan familias de genes distintas. Los ratones que albergan una disrupción en el gen codificando DGAT1 son resistentes a obesidad inducida con dieta y tienen gasto de energía elevado y actividad. Los ratones Dgatl-/- exhiben liberación postabsortiva desregulada de quilomicrones y acumulan lípido en los enterocitos. El fenotipo metabólicamente favorable en estos ratones es sugerido para ser impulsado por pérdida de expresión de DGAT1 en el intestino. De manera importante, a pesar de un defecto en lactación en ratones Dgatl-/- hembra, estos animales retienen la capacidad de sintetizar TAG sugiriendo la existencia de enzimas DGAT adicionales. Esta observación y el aislamiento de una segunda DGAT del hongo Mortierella rammaniana condujo a la identificación y caracterización de DGAT2.
DGAT2 es altamente expresada en hígado y adiposo, y a diferencia de DGAT1, exhibe especificidad de sustrato exquisita para DAG. La omisión del gen de DGAT2 en roedores resulta en crecimiento intrauterino defectuoso, lipemia severa, función de barrera de piel afectada, y muerte post-natal temprana. Debido a la letalidad causada por pérdida de DGAT2, mucho de nuestro entendimiento del papel fisiológico de DGAT2 se deriva de estudios realizados con oligonucleótidos anti-sentido (ASO, por sus siglas en inglés) en modelos roedores de enfermedad metabólica. En este marco, la inhibición de DGAT2 hepática resultó en mejoras en perfil de lipoproteina de plasma (disminución en coiesterol y TAG total) y una reducción de carga de lipido hepático que fue acompañada por sensibilidad a insulina mejorada y control de glucosa de cuerpo entero. Aunque los mecanismos moleculares por debajo de estas observaciones no son elucidados por completo, es claro que la supresión de DGAT2 resulta en una regulación descendente de la expresión de múltiples genes codificando proteínas involucradas en lipogénesis, incluyendo proteínas de unión de elemento regulador esterol 1c (SREBPIc) y estearoil CoA-desaturasa 1 (SCD1). En paralelo, se inducen vías oxidativas como se evidencia por expresión aumentada de genes tal como carnitina palmitoil transferasa 1 (CPT1). El resultado neto de estos cambios es disminuir los niveles de DAG hepático y lipido de TAG que, a su vez, conduce a sensibilidad de insulina mejorada en el hígado. Además, la inhibición de DGAT2 suprime la secreción y reducción de VLDL TAG hepática en niveles de coiesterol circulantes. Finalmente, se suprimieron niveles de apolipoproteína B de plasma (APOB, por sus siglas en inglés), posiblemente debido a suministro disminuido de TAG para lipidación de la proteína APOB recién sintetizada. Los efectos benéficos de inhibición de DGAT2 tanto en control glicémico como soporte de perfil de coiesterol de plasma que esta diana puede ser valiosa en el tratamiento de enfermedad metabólica.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente solicitud está dirigida a compuestos de la fórmula (I) I en donde: A es CR6R7, O o S; B es un enlace, oxetanilo, en donde m es 0, 1 o 2; p es 1 , 2, 3 o 4; C y D cada uno son seleccionados individualmente a partir de N, CH, CF y C(CH3), en donde sólo uno de C y D es N; R1 es -C(0)-heterociclilo, -C(0)-NR R5, o un heteroarilo, en donde dicho heterocicli lo o heteroarilo es opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustitutos seleccionados independientemente a partir de (C1-C4)alquilo, (C3-C6)cicloalquilo, (C1-C )alcoxi, halo, hidroxi(Ci-C4 ) a Iq u i I o , mono-N- o di-N,N-(C1-C4)alquilamino, mono-N- o di-N,N-(C3-C6)cicloalquilamino, heterociclilo, hidroxilo y ciano; R2 es (d-C4)alquilo, (C1-C4)alcoxi, (C3-C6)cicloalquilo, (C3-C6)cicloalcoxi, arilo, ariloxi, heteroariloxi, heteroarilo, heterociclilo, aralquilo, heteroaralquilo, -C(0)-heterociclilo, -C(0)-NR R5, o -NR4-C(0)-R5, en donde alquilo, alcoxi, cicloalquilo, cicloalcoxi, aralquilo, heteroaralquilo, arilo, ariloxi, heteroariloxi, heteroarilo, heterociclilo son cada uno opcionalmente sustituidos con uno, dos o tres sustitutos seleccionados independientemente a partir de (C-|-C4)-alquilo, (Ci-C4)alcoxi, (C3-C6)cicloalquilo, (C3-C6)cicloalcoxi, -C(O)-(C1-C4)alquilo, -C(0)-(C3-C6)cicloalquilo, halo, -C(0)-(C1-C4)alcoxi, -C(0)-(C3-C6)cicloalcoxi, mono-N- o di-N,N-(C1-C4)alquilamino, mono-N- o di-N,N-(C3-C6)cicloalquilamino, (Ci-C )alquilcarbonilamino, (C3-C6)cicloalquilcarbonilamino, (Ci-C4)alquilcarbonil-N-(C1-C4)alquil-amino, (C -C4)alquilcarbonil-N-(C3-C6)cicloalquilamino, (C3-C6)-cicloalquilcarbonil-N-(Ci-C4)alqui lamino, (C3-C6)cicloalquilcarbonil-N-(C3-C6)cicloalquilamino, aminocarbonilo, mono-N- o d¡-N,N-(Ci-C4)-alquilaminocarbonilo, mono-N- o di-N,N-(C3-C6)cicloaminocarbonilo, mono-N-o di-N,N-(C1-C4)alquilcarbonilo, mono-N- o di- , N-(C3-C6)-cicloalcoxicarbonilo, (Ci-C4)alquiltio, (C3-C6)cicloalquiltio, amino-sulfonilo, (Ci-C4)alquilsulfinilo, (Ci-C4)alquilsulfonilo, (C3-C6)ciclo-alquilsulfinilo, (C3-C6)cicloalquilsulfonilo, mono-N- o di-N , N-(d-C4)-alquilaminosulfonilo, mono-N- o di-N,N-(C3-C6)cicloalquilamino-sulfonilo, (C1-C )alquilsulfonilamino, (C3-C6)cicloalquilsulfonilamino, (C1-C )alquilsulfonil-N-(C1-C4)alquilamino, (C1-C )alquilsulfonil-N-(C3-C6)cicloalquilamino, (C3-C6)cicIoalquilsulfonil-N-(Ci-C )alquil-amino, (C3-C6)cicloalquilsulfonil-N-(C3-C6)cicloalquilamino, arilo, heteroarilo, heterociclilo, oxo, carboxilo, amino, hidroxilo y ciano, en donde dicho alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, heterociclilo, alcoxi y cicloalcoxi son opcionalmente sustituidos independientemente con uno a nueve flúor, o 1, 2 o 3 sustitutos seleccionados a partir de halo, -C(0)-OH, -C(0)-(C1-C4)alcoxi, aminocarbonilo, mono-N- o di- , N-(d -C4)alquilcarbonilo, mono-N- o di-N,N-(C3-C6)cicloalquilcarbonilo, ciano, amino e hidroxilo; R3 es (C1-C4)alquilo, (C3-C6)cicloalquilo, hidroxilo o flúor, en donde dicho alquilo es opcionalmente sustituido con uno a nueve flúores y dicho (C3-C6)cicloalquilo es opcionalmente sustituido con uno a seis flúores; R4 y R5 son cada uno independientemente seleccionados a partir de hidrógeno, (Ci-C4)alquilo, (C3-C6)cicloalquilo, arilo, heteroarilo, ariloxi, heteroariloxi, a ra I q u i I o , heteroaralquilo, heterociclilo, (C1-C4)alcoxi y (C3-C6)c¡cloalcox¡, en donde R4 y R5 son cada uno opcionalmente sustituidos con (C1-C )alquilo, (C1-C4)alcoxi, (C3-C6)cicloalquilo, (C3-C6)cicloalcoxi, halo o ciano, en donde cada uno de dichos alquilo, cicloalquilo, alcoxi o cicloalcoxi es opcionalmente sustituido con uno a nueve flúores; R6 y R7 son cada uno independientemente hidrógeno, (C -C )-alquilo, flúor, (C1-C4)alcoxi, hidroxilo o ciano, en donde dicho alquilo es opcionalmente sustituido con uno a nueve flúores; R8 se selecciona a partir de flúor, metilo o trifluorometilo; R9 y R10 cada uno son independientemente seleccionados a partir de hidrógeno, flúor, (d-C4)alquilo, (C3-C6)cicloalquilo, arilo o heteroarilo, en donde dicho alquilo es opcionalmente sustituido con uno a nueve flúores, y dicho cicloalquilo es opcionalmente sustituido con uno a seis flúores, y dicho arilo y heteroarilo son opcionalmente sustituidos con 1, 2 o 3 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor, cloro, metilo, etilo, ¡sopropilo, ciclopropilo, metiltio, metoxi, ciano, trifluorometilo, difluorometilo, trif luorometoxi, difluorometoxi, oxo y trifluorometiltio; y n es 0, 1 o 2; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
La presente invención también está dirigida a composiciones farmacéuticas que incluyen un compuesto de fórmula 1 o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero, presente en una cantidad terapéuticamente efectiva, en mezcla con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.
Además, la presente invención está dirigida a composiciones farmacéuticas que incluyen un compuesto de fórmula I o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero, presente en una cantidad terapéuticamente efectiva, en mezcla con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable y que además incluye al menos un agente farmacéutico adicional seleccionado a partir del grupo que consiste de un agente anti-obesidad, un agente anti-diabético, y un agente modulador de colesterol/l ¡pido.
La presente invención está dirigida también a un método para el tratamiento de diabetes que comprende la administración de una cantidad efectiva de compuesto de fórmula 1 o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero a un paciente en necesidad del mismo.
La presente invención también está dirigida a un método para tratar una enfermedad, condición o trastorno metabólico o relacionado con el metabolismo que comprende el paso de administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula I o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
La presente invención también está dirigida a un método para tratar una enfermedad, condición o trastorno metabólico o relacionado con el metabolismo que comprende el paso de administrar a un paciente en necesidad de dicho tratamiento dos composiciones farmacéuticas separadas que comprenden (i) una primera composición farmacéutica que incluye un compuesto de fórmula I o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero, presente en una cantidad terapéuticamente efectiva en mezcla con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable; y (ii) una segunda composición que comprende por lo menos un agente farmacéutico adicional seleccionado a partir del grupo que consiste de un agente anti-obesidad y un agente anti- diabético, y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también está dirigida a un método para tratar una enfermedad, condición o trastorno modulado por la inhibición de DGAT2 en animales que comprende el paso de administrar a un animal en necesidad de dicho tratamiento un compuesto inhibidor de DGAT2 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el compuesto inhibidor de DGAT2 es una 5-(piperidin-1 -i l)-3H-i m id azo [4 , 5-b]pi rid i na sustituida, una 5-morfolino-3/-/-imidazo[4, 5-b]piridina sustituida, una 6-(piperidin-1-il)-1 H-imidazo[4,5-b]pirazina sustituida, una 6-m orfol ino- 1 H-imidazo-[4,5-b]pirazina sustituida, una 2-(piperidin- -il)-9H-purina sustituida, o un compuesto de 2-morfolino-9/-/-purina sustituida.
Se debe entender que tanto la descripción general anterior como la siguiente descripción detallada sólo son ejemplares y explicativas y no deben restringir la invención como se reclama.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La figura 1 es un patrón de difracción en polvo de rayos X característico que muestra una forma cristalina del ejemplo 109-B (eje vertical: intensidad (CPS); eje horizontal: dos theta (grados)).
La figura 2 es un patrón de difracción en polvo de rayos X característico que muestra una forma cristalina del ejemplo 109-C (eje vertical: intensidad (CPS); eje horizontal: dos theta (grados)).
La figura 3 es un patrón de difracción en polvo de rayos X característico que muestra una forma cristalina del ejemplo 196-B (eje vertical: intensidad (CPS); eje horizontal: dos theta (grados)).
La figura 4 es efectos agudos de inhibidores de DGAT2 en niveles de TAG de plasma en ratas Sprague Dawley para los ejemplos 95, 108 y 109A.
La figura 5 representa un espectro de resonancia magnética nuclear en estado sólido 13C para el ejemplo 109B. Los picos marcados por asteriscos son bandas laterales giratorias. (Eje vertical: intensidad (CPS); eje horizontal 13C cambio químico (ppm)).
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se pueden entender más prontamente por referencia a la siguiente descripción detallada de modalidades ejemplares de la invención y los ejemplos incluidos ahí.
Cabe señalar que esta invención no se limita a métodos sintéticos específicos de hacerlos que desde luego pueden variar.
También se debe entender que la terminología usada en la presente sea para el propósito de describir modalidades particulares solamente y no debe ser limitante. En esta especificación y en las reivindicaciones que siguen, se hará referencia a un número de términos que deben ser definidos para tener los siguientes significados: Como se usa en la presente en la especificación, "un" o "uno" pueden significar uno o más. Como se usa en la presente en la reivindicación(es), cuando se usa en conjunto con la palabra "comprendiendo", las palabras "un" o "uno" pueden significar uno o más de uno. Como se usa en la presente "otro" puede significar al menos un segundo o más.
El término "aproximadamente" se refiere a un término relativo que denota una aproximación de más o menos 10% del valor nominal se refiere, a más o menos 5%, en otra modalidad, a más o menos 2%. Para el campo de esta descripción, este nivel de aproximación es apropiado a menos que el valor específicamente mencione que requiere un rango más ajustado "Compuestos" cuando se usa en la presente incluye cualquier derivado o variación farmacéuticamente aceptable, incluyendo isómeros conformacionales (por ejemplo, isómeros cis y trans) y todos los isómeros ópticos (por ejemplo, enantiómeros y diaestereómeros) , racémicos, diaestereoméricos y otras mezclas de dichos isómeros, así como solvatos, hidratos, isomorfos, polimorfos, tautómeros, ésteres, formas de sal y profármacos. Por "tautómeros" quiere decir compuestos químicos que pueden existir en dos o más formas de estructura diferente (isómeros) en equilibrio, las formas que difieren, usualmente, en la posición de un átomo de hidrógeno. Varios tipos de tautomerismo pueden ocurrir, incluyendo ceto-enol, tautomerismo de anillo-cadena y anillo-anillo. La expresión "profármaco" se refiere a compuestos que son precursores de fármaco que después de la administración liberan el fármaco in vivo vía algún proceso químico o fisiológico (por ejemplo, un profármaco en ser llevado al pH fisiológico o a través de acción enzimática se convierte a la forma de fármaco deseada). Los profármacos ejemplares al cortar liberan el ácido libre correspondiente, y dichos residuos hidrolizables formadores de éster de los compuestos de la presente invención incluyen pero no se limitan aquellos que tienen una porción de carboxilo en donde el hidrógeno libre es reemplazado por (Ci-C4)alquilo, (C2-C7)alcanoiloximetilo, 1 -(alcanoiloxi)etilo teniendo de 4 a 9 átomos de carbono, 1 -metil-1 - (alcanoiloxi)-etilo teniendo de 5 a 10 átomos de carbono, alcoxicarboniloximetilo teniendo de 3 a 6 átomos de carbono, 1 -(alcoxicarboniloxi)etilo teniendo de 4 a 7 átomos de carbono, 1 -metil-1 -(alcoxicarboniloxi)-etilo teniendo de 5 a 8 átomos de carbono, N-(alcoxicarbonil)-aminometilo teniendo de 3 a 9 átomos de carbono, 1 -(N-(alcoxi-carbonil)amino)etilo teniendo de 4 a 10 átomos de carbono, 3-ftalidilo, 4-crotonolactonilo, gamma-butirolacton-4-ilo, di-N,N-(d-C2)alquilamino( C2-C3)alquilo (tal como ß-dimetilaminoetilo), carbamoil-(C-i-C2)alquilo, N,N-di(Ci-C2)alquilcarbamoil-(Ci-C2)alquilo y piperidino-, pirrolidino- o morfolino(C2-C3)alquilo.
Como se usa en la presente, una flecha, "7 / " o línea ondulada, " / denota un punto de fijación de un sustituto a otro grupo.
Por "halo" o "halógeno" se quiere decir cloro, bromo, yodo o flúor.
Por "alquilo" se quiere decir hidrocarburo saturado de cadena recta o hidrocarburo saturado de cadena ramificada. Ejemplos de dichos grupos alquilo (suponiendo la longitud designada abarca el ejemplo particular) son metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, butilo terciario, ¡sobutilo, pentilo, isopentilo, neopentilo, pentilo terciario, 1 -metilbutilo, 2-metilbutilo, 3-metilbutilo, hexilo, isohexilo, heptilo y octilo.
Por "alcoxi" se quiere decir alquilo saturado de cadena recta o alquilo saturado de cadena ramificada unida a través de un oxi. Ejemplos de dichos grupos alcoxi (suponiendo la longitud designada abarca el ejemplo particular) son metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, butoxi terciario, pentoxi, isopentoxi, neopentoxi, pentoxi terciario, hexoxi, ¡sohexoxi, heptoxi y octoxi.
El término "arilo" significa un sistema aromático carbocíclico que contiene uno, dos o tres anillos en donde dichos anillos se pueden fusionar. Si los anillos se fusionan, uno de los anillos debe ser completamente insaturado y el anillo(s) fusionado ' debe ser completamente saturado, parcialmente insaturado o completamente insaturado. El término "fusionado" significa que un segundo anillo está presente (es decir, fijo o anexo) al tener dos átomos adyacentes en común (es decir, compartido) con el primer anillo. El término "fusionado" es equivalente al término "condensado". El término "arilo" abarca radicales aromáticos tales como fenilo, naftilo, tetrahidronaftilo, indanilo, bifenilo, benzo[b][1 ,4]oxazin-3(4H)-onilo, 2, 3-d i h id ro- 1 H-indenilo y 1 ,2,3,4-tetrahidronaftalenilo.
El término "aralquilo" significa un grupo alquilo con un grupo arilo (definido antes) sustituyendo para un átomo de hidrógeno del grupo alquilo. Ejemplos de dichos grupos aralquilo son bencilo y fenetilo.
"Ariloxi" significa un grupo O-arilo en donde arilo es definido antes. Ejemplos de dichos grupos ariloxi son feniloxi y naftiloxi.
"Cicloalquilo" se refiere a un anillo no aromático que es completamente hidrogenado y existe como un anillo sencillo. Ejemplos de dichos anillos carbocícl icos incluyen ciclopropi lo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.
Por "cic!oalcoxi" se quiere decir cicloalquilo enlazado a través de un oxi. Ejemplos de dichos grupos cicloalcoxi son ciclopropoxi, ciclobutoxi, ciclopentoxi y ciclohexoxi.
El término "heteroarilo" significa un sistema carbocíclico aromático que contiene uno, dos, tres o cuatro heteroátomos seleccionados independientemente a partir de oxígeno, nitrógeno y azufre y teniendo uno, dos o tres anillos en donde dichos anillos se pueden fusionar, en donde fusionar es definido antes. El término "heteorarilo" incluye, pero no se limita a, furilo, tienilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, isotirazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridiazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridin-2-(1 /-/)-onilo, piridazin-2( 1 H)-onilo, pirimidin-2(1H)-onilo, pirazin-2(1H)-onilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, pirazolo[1,5-a]piridinilo, 5,6,7,8-tetrahidroisoquinolinilo, 5,6,7,8-tetrahidroquinolinilo, 6,7-dihidro-5H-ciclopenta[£>]piridinilo, 6,7- dihidro-5/-/-ciclopenta[c]piridinilo, 1, ,5,6 -t etrahidrociclopenta[ c]-p i razo I i I o , 2,4,5,6-tetrahidrociclopenta[c]pirazolilo, 5,6-dihidro-4/-/-pirrolo[1,2- j]pirazolilo, 6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-¿>][1,2,4]triazol¡lo, 5,6)7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]p¡ridinilo, 4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[1 ,5-a]piridinilo, 4,5,6,7-tetrahidro-1 H-indazolilo y 4,5,6,7-tetrahidro-2/-/-¡ndazolilo.
El término "heteroaralquilo" significa un grupo alquilo con un grupo heteroarilo sustituyendo un átomo de hidrógeno del grupo alquilo. Ejemplos de dichos grupos heteroaralquilo son piridinil-(CH2)- y pirazolil-(CH2)-.
Por "heteroariloxi" se quiere decir un O-heteroarilo en donde heteroarilo es definido antes. Ejemplos de dichos grupos heteroariloxi son pirazoliloxi, piridiniloxi y pirimidiniloxi.
El término "heterociclilo" significa un sistema carbocíclico no aromático que contiene uno, dos, tres o cuatro heteroátomos seleccionados independientemente a partir de oxígeno, nitrógeno y azufre y teniendo uno, dos o tres anillos en donde dichos anillos se pueden fusionar, en donde fusionar es definido antes. Heterociclilo también incluye estructuras bicíclicas que pueden estar en puente o espirocíclicas en naturaleza con cada anillo individual dentro del biciclo variando de 3-8 átomos, y conteniendo 0, 1 o 2 átomos de N, O o S. El término "heterociclilo" incluye pero no se limita a lactonas, lactamas, éteres cíclicos y aminas cíclicas, incluyendo los siguientes sistemas de anillo ejemplares: pirrolidinonilo, 2 , 5-d ih idro- 1 H-pirrolilo, piperidinonilo, morfolinonilo, piperazinonilo, oxazolidinonilo, imidazolidinonilo, 1,3-oxazinan-2-onilo, tetrahidropirimidin-2(1H)-onilo, epoxidilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, dioxanilo, aziridinilo, azetidinilo, oxetanilo, pirrolidinilo, oxazolidinilo, tiazolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo, tiomorfolinilo, 1,3-oxazinanilo, 1 ,3-tiazinanilo, 2-azabiciclo[2.1. ]hexanilo, 5-azabiciclo-[2.1.1]hexanilo, 6-azabiciclo[3.1.1]heptanilo, 2-azabiciclo[2.2.1]-heptanilo, 3-azabiciclo[3.1.1]heptanilo, 2-azabiciclo[3.1.1]heptanilo, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanilo, 2-azabiciclo[3.1.0]hexanilo, 3-azabiciclo-[3.2.1]octanilo, 8-azabiciclo[3.2.1]octanilo, 3-oxa-7-azabiciclo[3.3.1]-nonanilo, 3-oxa-9-azabiciclo[3.3.1 ]nonanilo, 2-oxa-5-azabiciclo-[2.2.1]heptaniio, 6-oxa-3-azabiciclo[3.1.1]heptanilo, 2-azaspiro[3.3]-heptanilo y 2-oxa-6-azaspiro[3.3]heptanilo.
Se debe entender que si una porción carbocíclica o heterocíclica se puede enlazar o de lo contrario fijar a un substrato designado a través de átomos de anillo que difieren sin denotar un punto específico de fijación, entonces todos los puntos posibles son pretendidos, ya sea a través de un átomo de carbono o, por ejemplo, un átomo de nitrógeno trivalente. Por ejemplo, el término "piridilo" significa 2-, 3- o 4-piridilo, el término "tienilo" significa 2- o 3-tienilo, y así sucesivamente.
"Paciente" se refiere a animales de sangre caliente tales como, por ejemplo, conejillos de india, ratones, ratas, jerbos, gatos, conejos, perros, ganado, cabras, ovejas, caballos, monos, chimpancés y humanos.
Por "farmacéuticamente aceptable" se quiere decir que la sustancia o composición puede ser compatible químicamente y/o toxicológicamente, con los demás ingredientes comprendiendo una formulación y/o el mamífero siendo tratado con la misma.
Como se usa en la presente, las expresiones "solvente inerte a reacción" y "solvente inerte" se refieren a un solvente o una mezcla del mismo que no interactúa con materiales de partida, reactivos, intermediarios o productos en una manera que adversamente afecta el rendimiento del producto deseado.
Como se usa en la presente, el término "selectividad" o "selectivo" se refiere a un grado mayor de un compuesto en un primer ensayo, comparado con el efecto del mismo compuesto en un segundo ensayo. Por ejemplo, en compuestos "selectivos de intestino", el primer ensayo es para la vida media del compuesto en el intestino y el segundo ensayo es para la vida media del compuesto en el hígado.
"Cantidad terapéuticamente efectiva" significa una cantidad de un compuesto de la presente invención que (i) trata o previene la enfermedad, condición o trastorno particular, (ii) atenúa, mejora o elimina uno o más síntomas de la enfermedad, condición o trastorno particular, o (iii) previene o retrasa el comienzo de uno o más síntomas de la enfermedad, condición o trastorno particular descritos en la presente.
El término "tratando", "tratar" o "tratamiento" como se usa en la presente abarca tanto tratamiento preventivo, es decir, profiláctico como paliativo, es decir, mitiga, alivia o retarda el progreso de la enfermedad (o condición) del paciente o cualquier daño al tejido asociado con la enfermedad.
Los compuestos de la presente invención pueden contener centros asimétricos o quirales, y, por lo tanto, existen en diferentes formas estereoisoméricas. A menos que se especifique lo contrario, se pretende que todas las formas estereoisoméricas de los compuestos de la presente invención así como mezclas de los mismos, incluyendo mezclas racémicas, forman parte de la presente invención. Además, la presente invención abarca todos los isómeros geométricos y posicionales. Por ejemplo, si un compuesto de la presente invención incorpora un enlace doble o un anillo fusionado, tanto las formas cis- como trans-, así como mezclas, están abarcadas dentro del alcance de la invención.
Compuestos quirales de la invención (y precursores quirales de los mismos) se pueden obtener en forma enantioméricamente enriquecida usando cromatografía, típicamente cromatografía líquida a presión alta (HPLC, por sus siglas en inglés), en una resina con una fase estacionaria asimétrica y con una fase móvil que consiste en un hidrocarburo, típicamente heptano o hexano, conteniendo de 0 a 50% isopropanol, típicamente de 2 a 20% y de 0 a 5% de una alquilamina, típicamente 0.1% dietilamina (DEA, por sus siglas en inglés). La concentración del eluente da la mezcla enriquecida.
Las mezclas diaestereoméricas se pueden separar en sus d iaestereoisómeros individuales sobre la base de sus diferencias químicas físicas por métodos bien conocidos a aquellos expertos en la técnica, tal como por cromatografía y/o cristalización fraccional. Se pueden separar enantiómeros al convertir la mezcla enantiomérica en una mezcla diaestereomérica por reacción con un compuesto ópticamente activo apropiado (por ejemplo, auxiliar quiral tal como un alcohol quiral o cloruro de ácido Mosher), separando los diaestereoisómeros y convirtiendo (por ejemplo, hidrolizando) los diaestereoisómeros individuales a los enantiómeros puros correspondientes. También se pueden separar enantiómeros por uso de una columna de HPLC quiral. Alternativamente, los estereoisómeros específicos se pueden sintetizar al usar un material de partida ópticamente activo, por síntesis asimétrica usando reactivos ópticamente activos, sustratos, catalizadores o solventes, o al convertir un estereoisomero en la otra transformación asimétrica.
En donde los compuestos de la presente invención poseen dos o más centros estereogén icos y la estereoquímica absoluta o relativa es dada en el nombre, las designaciones R y S se refieren respectivamente a cada centro estereogénico en orden numérico ascendiente (1, 2, 3, etc.) a los esquemas de número IUPAC convencionales por cada molécula. En donde los compuestos de la presente invención poseen uno o más centros estereogénicos y ninguna estereoquímica es dada en el nombre o estructura, se entiende que el nombre o estructura debe abarcar todas las formas del compuesto, incluyendo la forma racémica. Los compuestos e intermediarios descritos más adelante fueron nombrados usando la convención denominada provista con Chem BioDraw Ultra, Versión 12.0 (Cambridge Soft Corp., Cambridge, Massachusetts).
Los compuestos de esta invención pueden contener enlaces dobles de tipo olefina. Cuando dichos enlaces están presentes, los compuestos de la invención existen como configuraciones cis y trans y como mezclas de los mismos. El término "cis" se refiere a la orientación de dos sustitutos con referencia entre sí y el plano del anillo (ya sea "arriba" o "abajo"). Análogamente, el término "trans" se refiere a la orientación de dos sustitutos con referencia entre sí y el plano del anillo (los sustitutos estando en lados opuestos del anillo).
También es posible que los intermediarios y compuestos de la presente invención puedan existir en formas tautoméricas diferentes, y todas dichas formas están abarcadas dentro del alcance de la invención. El término "tautómero" o "forma tautomérica" se refiere a isómeros estructurales de energías diferentes que son interconvertibles vía una barrera de energía baja. Por ejemplo, los tautómeros de protones (también conocidos como tautómeros prototrópicos) incluyen interconversiones vía migración de un protón, tales como isomerizaciones de ceto-enol e i m i n a-e n a m i na . Un ejemplo específico de un tautómero de protones es la porción de imidazol en donde el protón puede migrar entre los dos nitrógenos de anillo. Por ejemplo, lo siguiente es ilustrativo de tautómeros de los compuestos de fórmula I.
Los tautómeros de valencia incluyen interconversiones por reorganización de algunos de los electrones de enlace.
Dentro del alcance de los compuestos reclamados de la presente invención se incluyen todos los estereoisómeros, isómeros geométricos y formas tautoméricas de los compuestos de fórmula (I), incluyendo compuestos que exhiben más de un tipo de ¡somerismo, y mezclas de uno o más de los mismos. También se incluyen sales acidas de adición o base en donde el contraión es ópticamente activo, por ejemplo, D-lactato o L-lisina, o racémico, por ejemplo, DL-tartrato o DL-arginina.
La presente invención incluye todos los compuestos farmacéuticamente aceptables isotópicamente marcados de fórmula (I) en donde uno o más átomos son reemplazados por átomos que tienen el mismo número atómico, pero una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica o número de masa usualmente encontrada en naturaleza.
Ejemplos de isótopos adecuados para inclusión en los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, tales como 2H y 3H, carbón, tal como 11C, 13C y 1 C, cloro, tal como 36CI, flúor, tal como 18F, yodo, tal como 123l y 125l, nitrógeno, tal como 13N y 5N, oxígeno, tal como 50, 170 y 180, fósforo, tal como 32P y azufre tal como 35S.
Ciertos compuestos isotópicamente marcados de fórmula (I), por ejemplo, aquellos que incorporan un isótopo radioactivo, son útiles en estudios de distribución de fármaco y/o tejido de sustrato. Los isótopos radioactivos tritio, es decir, 3H y carbón-14, es decir, 1 C, son particularmente útiles para este propósito en vista de su facilidad de incorporación y medios listos de detección.
La sustitución con isótopos más pesados tal como deuterio, es decir, 2H, puede dar ciertas ventajas terapéuticas resultando de mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, vida media in vivo aumentada o requerimientos de dosificación reducida, y por tanto se pueden preferir en algunas circunstancias.
La sustitución con isótopos emisores de positrón, tales como 11C, 18F, 15° y 13N, pueden ser útiles en estudios de Tomografía de Emisión de Positrón (PET, por sus siglas en inglés) para examinar ocupación de receptor de sustrato.
Los compuestos isotópicamente marcados de fórmula (I) en general pueden ser preparados por técnicas convencionales conocidas a aquellos expertos en la técnica o por procesos análogos a aquellos descritos en los ejemplos y preparaciones acompañantes usando un reactivo apropiado isotópicamente marcado en vez del reactivo no marcado previamente empleado.
Los compuestos de la presente invención se pueden aislar y usar per se, o cuando sea posible, ---en la forma de su sal farmacéuticamente aceptable. El término "sales" se refiere a sales inorgánicas y orgánicas de un compuesto de la presente invención. Estas sales se pueden preparar in situ durante el aislamiento y purificación final de un compuesto, o al tratar por separado el compuesto con un ácido o base orgánico o inorgánico y aislando la sal así formada. Los ácidos cuando se usan para preparar las sales acidas de adición farmacéuticamente aceptables de los compuestos base antes mencionados de esta invención son aquellos que forman sales ácidas de adición no tóxicas, (es decir, sales que contienen aniones farmacéuticamente aceptables, tales como sales de clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, nitrato, sulfato, bisulfato, fosfato, fosfato ácido, acetato, lactato, citrato, citrato ácido, tartrato, bitartrato, succinato, maleato, fumarato, gluconato, sacarato, benzoato, metanosulfonato, etanosulfonato, bencenosulfonato, naftilato, mesilato, glucoheptonato, lactobionato, lauri Isulfonato, hexaf luorofosfato, bencenosulfonato, tosilato, formato, trifluoro-acetato, oxalato, besilato, palmitato, pamoato, malonato, estearato, laurato, malato, borato, p-toluenosulfonato y pamoato (es decir, 1 ,1 '-metileno-bis-(2-hidroxi-3-naftoato)).
La invención también se refiere a sales básicas de adición de los compuestos de la presente invención. Las bases químicas que se pueden usar como reactivos para preparar sales básicas farmacéuticamente aceptables de aquellos compuestos de la presente invención que son ácidos en naturaleza son aquellos que forman sales básicas no tóxicas con dichos compuestos. Dichas sales básicas no tóxicas incluyen, pero no se limitan a aquellas derivadas de dichos cationes farmacéuticamente aceptables tales como cationes de metal alcalino (por ejemplo, litio, potasio y sodio) y cationes de metal alcalino térreo (por ejemplo, calcio y magnesio), sales ácidas de adición de amonio o solubles en agua tales como N-metilglucamina-(meglumina), tetrametilamonio, tetraetilamonio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, etilamina, y las sales de alcanolamonio menores y otras básicas de aminas orgánicas farmacéuticamente aceptables. Ver, por ejemplo, Berge y otros ¡L Pharm. Sci. 66, 1-19 (1977).
Ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en más de una forma de cristal (en general referidos como "polimorfos"). Se pueden preparar polimorfos por cristalización bajo varias condiciones, por ejemplo, usando solventes diferentes o mezclas de solvente diferentes para recristalización; cristalización a temperaturas diferentes; y/o varios modos de enfriamiento, variando de enfriamiento muy rápida a muy lenta durante la cristalización. También se pueden obtener polimorfos al calentar o fundir el compuesto de la presente invención seguido por enfriamiento gradual o rápido. La presencia de polimorfos se puede determinar por espectroscopia de NMR de sonda sólida, espectroscopia de IR, calorimetría de escaneo diferencial, difracción de rayos X en polvo o dichas otras técnicas.
En una modalidad de compuestos de fórmula 1. R1 es -C(O)-heterociclilo, -C(0)-NR4R5, piridilo, 6,7-dihidro-5H-pirrolo[1 ,2,4]- triazolilo, 6, 7-dihidro-5H-pirrolo[ 1 ,2-c]imidazol¡lo, en donde R1 es opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor, metilo, hidroxilo o -CH2OH; D es CH, N o CF; B es un enlace, oxetanilo o en donde p es 1 o 2; R3 es flúor o metilo; R6 y R7 son cada uno independientemente hidrógeno, flúor o metilo; R8 se selecciona a partir de flúor o metilo; y R9 y R10 son cada uno individualmente seleccionados a partir de hidrógeno, flúor o metilo; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
En otra modalidad de compuestos de fórmula 1, R1 es -C(O)-heterociclilo o -C(0)-NR4R5 en donde dicho heterociclilo es opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor y metilo; B es un enlace, en donde p es 1 o 2; R2 se selecciona a partir de fenilo, furilo, tienilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, 1 ,2,3-triazolilo, 1 ,2,4-triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridiazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridin-2(1 H)-onilo, piridazin-2(1/-/)-onilo, pirimidin-2(1/-/)-onilo, pirazin-2(1H)-onilo, imidazo[1,2-a]piridinilo, pirazolo[1,5-a]piridinilo, 2H-benzo[¿>][1,4]-oxazin-3( H)-onilo, 2,3-dihidro-1/-/-indenilo, 1,2,3,4-tetrahidro-naftalenilo, 5,6,7,8-tetrahidroisoquinolinilo, 5,6,7,8-tetrahidro-quinolinilo, 6,7-dihidro-5/-/-ciclopenta[£>]piridinilo, 6,7-dihidro-5H-ciclopenta[c] piridinilo, 1,4,5,6-tetrahidrociclopenta[c]pirazolilo, 2,4,5,6-tetrahidrociclopenta[c]pirazolilo, 5,6-dihidro-4H-pirrolo[1 ,2-¿»]pirazolilo, 6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-6][1 ,2,4]triazolilo, 5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]piridinilo, 4,5,6,7-tetrahidropirazolo-[1,5-a]piridinilo, 4,5,6,7-tetrahidro-1/-/-indazolilo, 4,5,6,7-tetrahidro-2/-/-indazolilo, feniloxi, piridiniloxi, bencilo, piridinil-(CH2)-, pirazolil-(CH2)-, ciclopropilo y ciclobutilo; en donde dicho R2 es opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustitutos independientemente seleccionados a partir de (C -C4)alquilo, (d-C4)alcox¡, (C3-C6)-cicloalcoxi, ciclopropilo, halo, hidroxilo, amino, dimetilamino, metilamino, ciclopropilamino, aminocarbonilo, metilaminocarbonilo, (Ci-C4)alquiltio, (C3-C6)cicloalquiltio, aminosulfonilo, metilamino-sulfonilo, fenilo y heteroarilo en donde heteroarilo se selecciona a partir de furilo, tienilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, triazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridiazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridin-2(1 H)-onilo, piridazin-2(1 H)-onilo, pirimidin-2(1 H)-onilo, pirazin-2(1 H)-onilo, oxetanilo, azetidinilo y pirrolidinilo, en donde dicho alquilo, ciclopropilo, azetidinilo, pirrolidinilo, alcoxi y cicloalcoxi son opcionalmente sustituidos con oxo, ciano o hasta tres flúor o hidroxilo, y dicho fenilo o heteroarilo es opcionalmente sustituido independientemente con hasta tres grupos seleccionados a partir de halo, metilo, trifluorometilo, difluorometilo, metoxi, trifluorometoxi, difluorometoxi, ciano, ciclopropilo, metiltio, oxo y trifluorometiltio; y R9 y R10 son cada uno individualmente seleccionados a partir de hidrógeno y metilo; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
En otra modalidad de compuestos de fórmula 1 , R es -C(O)-heterociclilo o -C(0)-NR4R5 en donde dicho heterociclilo se selecciona a partir de pirrolidinilo, 2,5-dihidro-1 H-pirrolilo, azetidinilo, piperidinilo y morfolinilo y dicho heterociclilo es opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor y metilo; C es CH, N o CF; A es CH2 u O; R2 es fenilo, furilo, tienilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridiazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridin-2(1 H)-on'\\o, piridazin-2(1 H)-onilo, pi ri m id i n-2( 1 H)-on i lo , pirazin-2(1 H)-onilo, feniloxi, piridiniloxi, bencilo, piridinil-(CH2)- o pirazolil-(CH2)-, en donde R2 es opcionalmente sustituido con 1 , 2 o 3 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor, cloro, metilo, etilo, isopropilo, ciclopropilo, hidroxilo, amino, metiltio, metoxi, ciano, trifluorometilo, d if luorometilo , trifluorometoxi, difluorometoxi, oxo y trifluorometiltio; R4 es hidrógeno o metilo; R5 es hidrógeno o metilo; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
En otra modalidad de compuestos de fórmula I, R es -C(O)-heterociclilo, en donde dicho heterociclilo se selecciona a partir de pirrolidinilo, 2 , 5-dih idro-1 H-pirrolilo, 3,3-difluoroazetidinilo, 3,3-difluoropirrolidinilo y morfolinilo; B es en donde p es 1 o 2; y R2 es fenilo, furilo, tienilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, triazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridiazinilo, pirimidinilo, p i ra z i n i I o , feniloxi, piridiniloxi, bencilo, piridinil-(CH2)- o pi razo I i l-( C H2)- , en donde R2 es opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor, cloro, metilo, etilo, isopropilo, ciclopropilo, metiltio, metoxi, ciano, trifluorometilo, difluorometilo, trifluorometoxi, difluorometoxi, oxo y trifluorometiltio; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
En otra modalidad de compuestos de fórmula I, R2 es p i razo I i I o enlazado a N opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor, cloro, metilo, etilo, isopropilo, ciclopropilo, hidroxilo, amino, metiltio, metoxi, ciano, trifluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, dif luorometoxi y trif luorometiltio o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
En otra modalidad de compuestos de fórmula I, R1 es C es CH o CF; A es CH2; n es 0; y R2 es pirazolilo A/-enlazado sustituido en la posición 4 con flúor o cloro; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
Otra modalidad incluye los compuestos: (1-(2-(1-(4-fluoro-1 -/-pirazol-1-il)ciclopropil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(8-(1-(4-cloro-1H- pirazol-1 - il)ciclopropil)-9 H- purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(2-(1- (4 -cloro -1H- pira zol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo [4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(2-(2-(4-cloro-1 -/-pirazol-1-il)propan-2-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-{2-[1-(4-cloro-1/-/-pirazol-1-il)ciclopropil]-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il}(2,2,6,6-2/-/4)piperidin-3-il](pirrolidin-1-il)metanona; (1 - (2-((R)-1 - (4-fluoro-1 H-pi razo I- 1 -i I )et i I )-3H-¡ m idazo [4, 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1 -(2-((S)-1 -(4-fluoro-1 H-pirazol-1 -i I )et i I )-3H-i m idazo [4, 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(2-({S)-1-(4-cloro-1 --pirazol-1-il)etil)-3 -/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(2-((R)-1-(4-cloro-1 -/-pirazol-1-il)etil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(8-((S)-1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)etil)-9H-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(8-((R)-1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)etil)-9/-/-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; y (1-(8-(1-(4-fluoro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-9H-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
Otra modalidad incluye los compuestos: (( ?)-1-(2-((S)-1-(4-cloro-1 H- p i razo I- 1 -i I )et i I )-3H-¡ m id azo[4 , 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona, ((fi)-1-(2-((R)-1-(4-cloro-1 H-pirazol-1 - i l)et i l)-3W-imidazo[4, 5-b]p¡ridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona, ((S)-1 -(2-((S)-1 - (4-cloro-1 H-pirazol-1 -i I ) e t i I ) - 3 H- i m ¡dazo[4, 5-b]piridin-5-il)piper¡din-3-il)(pirrolid¡n-1-il)metanona, o ((S)-1-(2-((ft)-1-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -i l)et i l)-3H- i m id azo [4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona, o una mezcla de los mismos, o un tautómero de los mismos o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
Otra modalidad incluye los compuestos: (R)-(1 - (2-(1 - (4-cloro-1 H-pirazol-1 - i l)ciclopropil)-3H-imidazo[4, 5-b]p¡ridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolid¡n-1-il)metanona, y (S)-(1 -(2-(1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 - i I ) c i c I op r o p i l)-3H-imidazo[4, 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona, o una mezcla de los mismos; o tautómero de los mismos o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
Otra modalidad incluye un compuesto que tiene la estructura: o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
Otra modalidad incluye un compuesto que tiene la estructura: o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
En una modalidad de las composiciones farmacéuticas de la presente invención, el agente anti-obesidad se selecciona a partir del grupo que consiste de inhibidores de MTP selectivos de intestino (por ejemplo, dirlotapida, mitratapida e implitapida, R56918 (No. CAS 403987) y No. CAS 913541-47-6), agonistas CCKa (por ejemplo, N-bencil-2-[4-(1H-indol-3-ilmetil)-5-oxo-1-fenil-4,5-dihidro-2,3,6,10b-tetraaza-benzo[e]azulen-6-M]-/V-¡sopropil-acetamida descritos en publicación de PCT No. WO 2005/116034 o publicación de E.U.A. No. 2005-0267100 A1), agonistas 5HT2c (por ejemplo, lorcaserin), agonista MCR4 (por ejemplo, compuestos descritos en US 6,818,658), inhibidor de lipasa (por ejemplo, Cetilistat), PYY3-36 (como se usa en la presente "PYY3.3S" incluye análogos, tales como PYY3-36 peglados, por ejemplo, aquellos descritos en la publicación de E.U.A. 2006/0178501), antagonistas opioides (por ejemplo, naltrexona), la combinación de naltrexona con buproprion, oleoil-estrona (No. CAS 180003-17-2), obinepitida (TM30338), pramlintida (Symlin®), tesofensina (NS2330), leptin, liraglutida, bromocriptina, orlistat, exenatida (Byetta®), AOD-9604 (No. CAS 221231-10-3) y sibutramina.
En otra modalidad de las composiciones farmacéuticas de la presente invención, el agente anti-diabético se selecciona a partir del grupo que consiste de un inhibidor de acetil-CoA-carboxilasa (ACC, por sus siglas en inglés) tales como aquellos descritos en WO2009144554, WO2003072197 , WO2009144555 y WO2008065508, un inhibidor de diacilglicerol O-aciltransferasa 1 (DGAT1), tal como aquellos descritos en WO09016462 o WO2010086820 , AZD7687 o LCQ908, inhibidores de monoacilglicerol O-aciltransferasa, un inhibidor de fosfodiesterasa (PDE)-10, un activador de AMPK, una sulfonilurea (por ejemplo, acetohexamida, clorpropamida, diabinesa, gilbenclamida, glipizida, gliburida, glimeprida, gliclazida, glipentida, gliquidona, glisolamida, tolazamida y tolbutamida), una meglitinida, un inhibidor de a-amilasa (por ejemplo, tendamistat, trestatin y AL-3688), un inhibidor de a-glucosida hidrolasa (por ejemplo, acarbosa), un inhibidor de a-glucosidasa (por ejemplo, adiposina, camiglibosa, emiglitato, miglitol, voglibose, pradimicin-Q y salbostatin), un agonista de PPARy (por ejemplo, balaglitazona. ciglitazona, darglitazona, englitazona, isaglítazona, pioglitazona y rosiglitazona), un agonista de PPAR a/? (por ejemplo, CLX-0940, GW-1536, GW-1929, GW-2433, KRP-297, L-796449, LR-90, MK-0767 y SB-219994), una biguanida (por ejemplo, metfomin), un modulador de péptido 1 tipo glucagón (GLP-1) tal como un agonista (por ejemplo, exendin-3 y exendin-4), liraglutida, albiglutida, exenatida (Byetta®), albiglutida, lixisenatida, dulaglutida, semaglutida, NN-9924, TTP-054, un inhibidor de proteína tirosina fosfatasa-1B (PTP-1B) (por ejemplo, trodusquemina, extracto de hirtiosal y compuestos descritos por Zhang, S., y otros, Druq Discovery Today, 12(9/10), 373-381 (2007)), activador SIRT-1 (por ejemplo, resveratrol, GSK2245840 o GSK184072), un inhibidor de dipeptidilo peptideasa IV (DPP-IV) (por ejemplo, aquellos en WO2005116014, sitagliptin, vildagliptin, alogliptin, dutogliptin, linagliptin y sexagliptin), un secreatagogo de insulina, un inhibidor de oxidación de ácido graso, un antagonista A2, un inhibidor de c-jun amino-terminal quinasa (JNK), activadores de glucoquinasa (GKa) tales como aquellos descritos en WO2010103437, WO2010103438, WO2010013161 , WO2007122482, TTP-399, TTP-355, TTP-547, AZD1656, ARRY403, MK-0599, TAK-329, AZD5658 o GKM-001, insulina, un mimético de insulina, un inhibidor de glicógeno fosforilasa (por ejemplo, GSK1362885), un agonista receptor de VPAC2, inhibidores de SGLT2, tales como aquellos descritos en E.C. Chao y otros Nature Reviews Druq Discovery 9, 551-559 (julio 2010) incluyendo dapagliflozin, canagliflozin, empagliflozin, tofoglif lozin (CSG452), ASP-1941, THR1474, TS-071, ISIS388626 y LX4211 así como aquellos en WO2010023594 , un modulador receptor de glucagón tal como aquellos descritos en Demong, D.E. y otros Reportes Anuales en Química Medicinal 2008, 43, 119-137, moduladores GPR119, en particular agonistas, tales como aquellos descritos en WO2010140092, WO2010128425, WO2010128414 , WO2010106457, Jones, R.M. y otros en Química Medicinal 2009, 44, 149-170 (por ejemplo, MBX-2982, GSK1292263, APD597 y PSN821). derivados o análogos de FGF21 tales como aquellos descritos en Kharitonenkov, A. y otros, Opinión Actual en Medicina de Investigación 2009, 10(4)359-364, moduladores receptores de TFR5 (también denominado GPBAR1), en particular agonistas, tales como aquellos descritos en Zhong, M., Temas Actuales en Química Medicinal, 2010, 10(4), 386-396 e INT777, agonistas GPR40, tales como aquellos descritos en Medina, J.C., Reportes Anuales en Química Medicinal, 2008, 43, 75-85, incluyendo, pero sin limitación a TAK-875, moduladores GPR120, en particular agonistas, activadores receptores de ácido nicotínico de alta afinidad (HM74A), e inhibidores de SGLT1, tal como GSK1614235, lista de agentes antidiabéticos encontrados en la página 28, línea 35 a página 30, línea 19 de WO2011005611 , inhibidores o moduladores de enzimas de carnitina palmitoil transferasa, inhibidores de fructosa 1,6-difosfatasa, inhibidores de aldosa reductasa, inhibidores receptores de m ineralocorticoide, inhibidores de TORC2, inhibidores de CCR2 y/o CCR5, inhibidores de isoformas PKC (por ejemplo, PKCa, ???ß, PKCy), inhibidores de sintetasa de ácido graso, inhibidores de serina palmitoil transferasa, moduladores de GPR81, GPR39, GPR43, GPR41, GPR105, Kv1.3, proteína 4 de unión a retinol, receptor glucocorticoide, receptores de somatostatin (por ejemplo. SSTR1, SSTR2, SSTR3 y SSTR5), inhibidores de moduladores de PDHK2 o PDHK4, inhibidores de MAP4K4, moduladores de familia IL1 incluyendo ILIbeta, moduladores de RXRalfa, agentes anti-diabéticos adecuados incluyen mecanismos listados por Carpino, P.A., Goodwin, B. Expert Opin. Ther. Pat, 2010, 20(12), 1627-51.
En otra modalidad de las composiciones farmacéuticas de la presente invención, el agente modulador de colesterol/lípido se selecciona a partir del grupo que consiste de inhibidores de HMG-CoA reductasa (por ejemplo, pravastatin, lovastatin, atorvastatin, simvastatin, fluvastatin, NK-104 (alias itavastatin o nisvastatin o nisbastatin) y ZD-4522 (alias rosuvastatin o atavastatin o visastatin)); inhibidores de escualeno sintetasa; fibratos; secuestradores de ácido biliar (tal como questran); inhibidores de ACAT; inhibidores de MTP; inhibidores de lipooxigenasa; inhibidores de absorción de colesterol; e inhibidores de proteína de transferencia de éster de colesterilo. Otros agentes aetoscleróticos incluyen moduladores de PCSK9.
En otra modalidad, la condición tratada se selecciona a partir del grupo que consiste de hiperlipidemia, diabetes tipo I, diabetes mellitus tipo II, diabetes idiopática tipo I (tipo Ib), diabetes autoinmune latente en adultos (LADA, por sus siglas en inglés), diabetes tipo 2 de inicio temprano (EOD, por sus siglas en inglés), diabetes atípica de inicio en juventud (YOAD, por sus siglas en inglés), diabetes de inicio en madurez de los jóvenes (MODY, por sus siglas en inglés), diabetes relacionada con malnutrición, diabetes gestacional, enfermedad cardiaca coronaria, embolia isquémica, restenosis después de angioplastia, enfermedad vascular periférica, claudicación intermitente, infarto al miocardio (por ejemplo, necrosis y apoptosis), dislipidemia, lipemia post-prandial, condiciones de tolerancia a glucosa impedida (IGT, por sus siglas en inglés), condiciones de glucosa de plasma por ayuno impedido, acidosis metabólico, quetosis, artritis, obesidad, osteoporosis, hipertensión, fallo al corazón congestivo, hipertrofia ventricular izquierda, enfermedad arterial periférica, retinopatía diabética, degeneración macular catarata, nefropatía diabética, glomerulosclerosis, fallo renal crónico, neuropatía diabética, síndrome metabólico, síndrome X, síndrome premenstrual, enfermedad de corazón coronaria, angina pectoris, trombosis, aterosclerosis, infarto al miocardio, ataques isquémicos transitorios, embolia, restenosís vascular, hiperglicemia, hiperinsulinemia, hiperlipidemia, hipertrigliceridemia, resistencia a insulina, metabolismo de glucosa dañado, condiciones de tolerancia a glucosa dañada, condiciones de glucosa de plasma por ayuno dañado, obesidad, disfunción eréctil, trastornos por piel y tejido conector, ulceraciones de pie y colitis ulcerante, disfunción del endotelio y elasticidad vascular impedida, hiper apo B lipoproteinemia, Alzheimer, esquizofrenia, deterioro cognitivo, enfermedad del intestino inflamatorio, colitis ulcerante, enfermedad de Crohn, y síndrome del intestino irritable, esteatohepatitis no alcohólica (NASH, por sus siglas en inglés), enfermedad del hígado graso no alcohólico (NAFLD, por sus siglas en inglés).
En una modalidad, cuando se administran dos composiciones, la primera composición y la segunda composición se administran simultáneamente. En otra modalidad, la primera composición y la segunda composición se administran en secuencia y en cualquier orden .
Los compuestos de la presente invención se pueden sintetizar por rutas sintéticas que incluyen procesos análogos a aquellos bien conocidos en la técnica química, en particular en luz de la descripción contenida en la presente. Los materiales de partida en general están disponibles de fuentes comerciales tales como Aldrich Chemicals (Milwaukee, Wl) o son prontamente preparados usando métodos bien conocidos a aquellos expertos en la técnica (por ejemplo, preparados por métodos en general descritos en Louis F. Fieser y Mary Fieser, Reagents for Orqanic Synthesis, v. 1-19, Wiley, Nueva York (1967-1999 ed.), o Beilsteins Handbuch der orqanischen Chemie, 4, Aufl. Ed. S pri n ger-Ve rlag , Berlín, incluyendo suplementos (también disponibles vía la base de datos en línea Beilstein)). Muchos de los compuestos usados en la presente se refieren a, o se derivan de compuestos en donde hay un gran interés científico y necesidad comercial, y por consiguiente muchos dichos compuestos están comercialmente disponibles o están registrados en la literatura o son prontamente preparados de otras sustancias comúnmente disponibles por métodos que son registrados en la literatura. Por ejemplo, se pueden encontrar métodos generales para sintetizar derivados de pirazol sustituido en Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, Elsevier, Oxford, UK, 1996, 3, 1-75, 817-932; Chem.
Rev. 2011 , 111, 6984-7034; Modern Heterocvclic Chemistrv. Wiley-VCH, Weinheim, Alemania, 2011 , 2, 635-725.
Para propósitos ilustrativos, los esquemas de reacción ilustrados más adelante proveen rutas potenciales para sintetizar los compuestos de la presente invención así como intermediarios clave. Para una descripción más detallada de los pasos de reacción individuales, ver la sección de Ejemplos más adelante. Aquellos expertos en la técnica apreciarán que otras rutas sintéticas se pueden usar para sintetizar los compuestos inventivos. Aunque se discuten más adelante materiales de partida y reactivos específicos, otros materiales de partida y reactivos se pueden sustituir prontamente para proveer una variedad de derivados y/o condiciones de reacción. Además, muchos de los compuestos preparados por los métodos descritos más adelante se pueden modificar además en luz de esta descripción usando química convencional bien conocida a aquellos expertos en la técnica.
En la preparación de los compuestos de fórmula I cabe señalar que algunos de los métodos de preparación útiles para la preparación de los compuestos descritos en la presente pueden requerir protección de funcionalidad remota (por ejemplo, amina primaria, amina secundaria, carboxilo en precursores de fórmula I). La necesidad por dicha protección variará dependiendo de la naturaleza de la funcionalidad remota y las condiciones de los métodos de preparación. La necesidad por dicha protección prontamente se determina por un experto en la técnica. El uso de dichos métodos de protección/desprotección también está dentro de la experiencia en la técnica. Para una descripción general de grupos protectores y su uso, ver T.W. Greene, Protective Groups in Orqanic Synthesis, John Wiley & Sons, Nueva York, 1991.
Por ejemplo, ciertos compuestos contienen aminas primarias o funcionalidades de ácido carboxílico que pueden interferir con reacciones en otros sitios de la molécula si se dejan desprotegidos. Por consiguiente, dichas funcionalidades se pueden proteger por un grupo protector apropiado que se puede eliminar en un paso posterior. Los grupos protectores adecuados para protección de amina y ácido carboxílico incluyen aquellos grupos protectores comúnmente usados en síntesis de péptido (tales como N-t-butoxicarbonilo (Boc), benciloxicarbonilo (Cbz) y 9-fluorenil-metilenoxicarbonilo (Fmoc) para aminas y esteres de alquilo o bencilo menor para ácidos carboxílicos) que en general no son químicamente reactivos bajo las condiciones de reacción descritas y típicamente se pueden eliminar sin alterar químicamente otra funcionalidad en el compuesto de fórmula I.
Los esquemas de reacción descritos más adelante deben proveer una descripción general de la metodología empleada en la preparación de los compuestos de la presente invención. Algunos de los compuestos de la presente invención contienen un solo centro quiral con designación estereoquímica R. En los siguientes esquemas, los métodos generales para la preparación de los compuestos se muestran en forma racémica o enantioenriquecida.
Además, la resolución al material ópticamente activo deseado puede ocurrir en cualquier punto deseado en la secuencia usando métodos bien conocidos tal como se describe en la presente y en la literatura química.
En los esquemas de reacción que siguen, los variables A, B, C, D, R\ R2, R3, R4, R5, R8, R9, R10, m, n y p son como se describe en el resumen excepto en donde se indique lo contrario.
El esquema de reacción I delinea los procedimientos generales que se pueden usar para proveer compuestos de la presente invención teniendo la fórmula I.
Esquema de reacción I Los compuestos de la fórmula (I) se pueden sintetizar partiendo de intermediarios apropiados a través de métodos descritos en la literatura tal como Synlett 2010, 2759; Tetrahedron Lett. 2009, 50, 1780; Tetrahedron Lett. 2006, 47, 2883; Synthesis, 2005, 47; J. Org. Chem. 2003, 68, 6814; Tetrahedron Lett. 2002, 43, 1893; Tetrahedron Lett. 2001, 42, 751; Synthesis, 2000, 1380; Heterocycles 1995, 47, 1045; J. Org. Chem. 1989, 54, 1144; Grimmet, M.R. en Comprehensive Heterocyclic Chemistry, 1984, Vol. 5, pp 457; Chem. Rev. 1974, 74, 279; J. Heterocycl. Chem. 1970, 7, 947; Cftem. Rev. 1951, 48, 397. Los materiales de partida (1a) están comercialmente disponibles o se pueden preparar vía métodos conocidos a aquellos expertos en la técnica. La síntesis de algunos derivados (1a) ha sido revisada (Bioorg. Med. Chem. 2008, 16, 601-635; Tetrahedron 2004, 60, 1701-1729; Tetrahedron 2003, 59, 2953-2989; Synthesis 2004, 641-662). La síntesis de materiales de partida que se pueden convertir en (1a) vía grupo protector o manipulaciones de grupo funcional que son bien conocidas a aquellos expertos en la técnica, se describen en la literatura. Para derivados (1a) en donde R3 es alquilo, métodos de síntesis se pueden utilizar tales como aquellos descritos en: J. Med. Chem. 2011, 54, 1871-1895; Eur. J. Org. Chem. 2007, 476-486; Org. Lett. 2011, 7, 55-58; Org. Biomol. Chem. 2010, 8, 3635-3637. Para derivados (1a) en donde R3 es flúor, se pueden utilizar métodos de síntesis tales como aquellos descritos en: J. Med. Chem. 2010, 53, 7778-7795; J. Fluorine Chem. 2011, 132, 838-845; Bioorg. Med. Chem. Lett. 2010, 20, 755-758.
El intermediario (1b) se puede preparar a partir de aminas (1a) vía sustitución aromática nucleofílica de un compuesto de haluro de heteroarilo en un solvente inerte de reacción tal como dimetilsulfóxido (DMSO), ?/,? -dimetilformamida (DMF) o acetonitrilo, en presencia de una base adecuada, tal como trietilamina o diisopropiletilamina a una temperatura entre 10°C y 120°C, preferiblemente entre 30°C y 110°C. El intermediario (1c) se puede preparar a partir de (1b) por una reducción del grupo nitro vía métodos conocidos a aquellos expertos en la técnica. Por ejemplo, el intermediario (1c) se puede preparar a partir de (1b) vía hidrogenación en presencia de un catalizador de hidrogenación adecuado tal como paladio sobre carbón en un solvente inerte de reacción tal como metanol, etanol o acetato de etilo en presencia o ausencia de ácido clorhídrico a una temperatura entre 0°C y 60°C, preferiblemente a temperatura ambiente. Alternativamente, el grupo nitro se puede reducir al disolver reducción de metal con hierro o zinc en presencia de cloruro de calcio, cloruro de amonio o formato de amonio en un solvente adecuado tal como agua, metanol, etanol o ácido acético a una temperatura entre 20°C y 120°C, preferiblemente entre 45°C y 100°C.
Los compuestos de fórmula (I) se pueden preparar a partir del intermediario (1b) y un aldehido de la fórmula R2-BCHO en presencia de azufre o hidrosulfito de sodio y una base tal como trietilamina en un solvente adecuado tal como DMF, etanol o agua a una temperatura entre 20°C y 120°C, preferiblemente entre 80°C y 110°C. Alternativamente, compuesto de fórmula (I) se pueden preparar en un paso a partir del intermediario (1c) y un ácido carboxílico de la fórmula R2-BC02H en presencia de un reactivo deshidratante tal como trifen i If osf ito en base orgánica tal como piridina o trietilamina a temperatura entre 20°C y 200°C, preferiblemente 200°C. Compuestos de fórmula (I) también pueden ser preparados en un paso del intermediario (1c) y un imidato de la fórmula R2-BCNH(OR) (en donde R es un grupo alquilo o f luoroalquilo pequeño tal como metilo, etilo o trifluoroetilo) en presencia de ácido acético, opcionalmente con una base tal como trietilamina o diisopropiletilamina, en un solvente adecuado tal como metanol o etanol a una temperatura entre 20°C y 130°C, preferiblemente entre 60°C y 130°C. Además, compuestos de fórmula (I) se pueden preparar en un paso del intermediario (1c) y un aldehido de la fórmula R2-BCHO en presencia de azufre y una base tal como trietilamina en un solvente adecuado tal como DMF, etanol o agua a una temperatura entre 20°C y 120°C, preferiblemente a 110°C.
Compuestos de fórmula (I) también se pueden preparar en dos pasos del intermediario (1b). Se puede preparar intermediario (1e) del intermediario (1b) y un ácido carboxílico de la fórmula R2-BC02H en presencia de un reactivo de acoplamiento de amida, tal como anhídrido de ácido fosfónico de propano (T3P) o 1,1 '-carbonildiimidazol (CDI) en un solvente de reacción tal como DMF, acetato de etilo, dioxano o tolueno en presencia de una base tal como trietilamina o diisopropiletilamina en presencia de otra base orgánica tal como N, /V-dimetil-4-aminopir¡dina (DMAP) a una temperatura entre 20°C y 150°C, preferiblemente entre 40°C y 110°C.
El ¡ntermediario (1e) entonces se puede convertir a compuestos de fórmula (I) por una reducción del grupo nitro y reacción de ciclización posterior vía hidrogenación o al disolver reducción de metal como se describió antes para intermediario (1b).
Alternativamente, compuestos de fórmula (I) se pueden preparar a partir del ¡ntermediario (1d). Se puede preparar el intermediario (1d) a partir del intermediario (1c) y un ácido carboxílico de la fórmula R2-BC02H en presencia de un reactivo de acoplamiento de amida, tal como T3P, CDI, hexaf luorofosfato de benzotriazo-1 -ilox¡tr¡s(dimetilam¡no)fosfon¡o (BOP, por sus siglas en inglés), hexafluorofosfato de 2-( 1 H-7-azabenzotriazol-1 -il)-1 , 1 , 3, 3-tetrametiluronio (HATU, por sus siglas en inglés), hexafluorofosfato de 0-benzotr¡azol-1-¡l-/V,/V,/V',/V'-tetrametiluronio (HBTU), ?/-(3-dimetilaminopropil)-A/'-etilcarbodiimida (EDCI) o 1 -hidroxibenzotriazol (HOBT) en un solvente inerte de reacción tal como diclorometano, DMF o acetato de etilo en presencia de una base tal como trietilamina o diisopropiletilamina a una temperatura entre 20°C y 140°C, preferiblemente entre 40°C y 60°C. El intermediario (1d) entonces se puede convertir en compuestos de fórmula (I) (1) en presencia de metóxido de sodio o etóxido de sodio en un solvente adecuado tal como metanol, etanol, s-butanol o isobutanol a una temperatura entre 20°C y 120°C, preferiblemente 110°C o (2) en presencia de ácido acético, HCI, ácido polifosfólico o ácido para-to I ue no s u If ón i co en un solvente tal como xileno, agua, etilenglicol, 1,4-dioxano o ácido acético a una temperatura entre 20°C y 200°C.
Esquema de reacción Alternativamente, compuestos de fórmula (I) se pueden preparar a partir del intermediario (2b) que se puede tener acceso a partir del intermediario (2a) al incorporar el grupo protector amino desead (Pg) como se muestra en el esquema de reacción II. Un grupo protector amino preferido es un grupo carbamato tal como t-butoxicarbonilo (Boc). El intermediario (2a) se puede preparar del intermediario (1b) por una reducción del grupo nitro vía métodos conocidos a aquellos expertos en la técnica o métodos descritos en el esquema de reacción I, seguido por protección del grupo amino deseado. Por ejemplo, el intermediario (2a) en donde Pg es Boc se puede preparar a partir de (1b) vía hidrogenación en presencia de un catalizador de hidrogenación adecuado tal como paladio sobre carbón en presencia de di-fer-butil dicarbonato ((Boc)20) en un solvente inerte de reacción tal como metanol, etanol o acetato de etilo en presencia o ausencia de una base tal como trietilamina a una temperatura entre 0°C y 60°C, preferiblemente entre temperatura ambiente y 50°C. Alternativamente, el intermediario (2a) se puede preparar a partir del intermediario (1c) al incorporar un grupo protector amíno adecuado por métodos conocidos a aquellos expertos en la técnica. El intermediario (2b) se puede preparar a partir del intermediario (2a) y un ácido carboxílico de la fórmula R2-BC02-H en presencia de un reactivo de acoplamiento de amida, tal como T3P en un solvente de reacción tal como DMF, acetato de etilo, dioxano o tolueno en presencia de una base tal como piridina, trietilamina o diisopropiletilamina a una temperatura entre 0°C y 100°C, preferiblemente entre 20°C y 60°C. El intermediario (2b) entonces se puede convertir en compuestos de fórmula (I) por eliminación del grupo protector y reacción de ciclización posterior bajo condiciones ácidas con un ácido tal como ácido clorhídrico, ácido trifluoroacético, ácido acético, ácido metano sulfónico o combinaciones de los mismos, opcionalmente con una base tal como acetato de sodio en un solvente tal como acetonitrilo, etilacetato, agua o combinaciones de los mismos a una temperatura entre 0°C y 100°C.
Esquema de reacción III Alternativamente, compuestos de la fórmula (I) se pueden preparar a partir del intermediario (3a) como se muestra en el esquema de reacción III. El intermediario (3a) se puede preparar a partir de 6-halopiridina-2,3-diamina, 6-halopirimidina-2,3-diamina o 6-halopirazina-2,3-diamina y un ácido carboxilico de la fórmula R2-BC02H usando las condiciones descritas para el intermediario (1c) en el esquema I o con un imidato de la fórmula R2-B-CNH(OR) (en donde R es un grupo alquilo o fluoroalquilo pequeño tal como metilo, etilo o trifluoroetilo) usando las condiciones descritas para el intermediario (1c) en el esquema de reacción I. El intermediario (3a) se puede convertir entonces en compuestos de fórmula (I) por sustitución aromática nucleofílica con aminas (1a) en presencia de base tal como carbonato de potasio y fluoruro de cesio en un solvente adecuado tal como diglima a una temperatura entre 100°C y 150°C, preferiblemente 150°C.
Esquema de reacción IV Compuestos de fórmula (II) en donde Ra es -NR R5 o heterocidilo opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustitutos seleccionados independientemente a partir de (C1-C4)alquilo, (C3-C6)cicloalquilo, (C -C4)alcoxi, (C3-C6)cicloalcoxi, halo, hidroxi(d-C4)alquilo, mono-N- o di-N, N-(C -C4)alquilamino, mono-N- o di-N,N-(C3-C6)cicloalquilamino, heterocidilo, hidroxilo y ciano como se describe en el resumen anterior, se puede preparar de conformidad con el esquema de reacción IV. El intermediario (4a) se puede preparar a partir de ésteres de aminoácido vía sustitución aromática nucleofílica de compuesto de haluro de heteroarilo como se describe para el intermediario (1a) en el esquema de reacción I. El intermediario (4a) se puede convertir en el intermediario (4b) con un aldehido de la fórmula R2-BCHO por los métodos como se describe en el esquema de reacción I. Alternativamente, el intermediario (4b) se puede preparar a partir del intermediario (4a) en dos pasos vía una reducción del grupo nitro y reacción del intermediario diamina con un ácido carboxílico de la fórmula R2-BC02H o imidato R2-BCNH(OR) (en donde R es un grupo alquilo o fluoroalquilo pequeño tal como metilo, etilo o trifluoroetilo) como se describe en el esquema de reacción I. Compuestos de fórmula (II) (en donde Ra es NR4R5 o heterociclilo) se puede preparar en dos pasos a partir del intermediario (4b) vía hidrólisis del éster en presencia de una base inorgánica acuosa tal como hidróxido de sodio, hidróxido de litio, hidróxido de potasio o carbonato de potasio en un solvente adecuado tal como metanol, etanol, tetrahidrofurano o agua, o una combinación del mismo a una temperatura entre 0°C y 50°C, preferiblemente entre 0°C y 20°C, seguido por una reacción de acoplamiento con aminas de fórmula R4NHR5 o heterociclilo en presencia de un reactivo de acoplamiento, tal como HATU, HBTU, CDI, HOBT o EDCI en presencia de una base tal como trietilamina o diisopropilamina y 4-dimetilaminopiridina (DMAP) en un solvente de reacción tal como diclorometano, DMF o tetrahidrofurano a una temperatura entre 0°C y 50°C, preferiblemente a temperatura ambiente. Además, compuestos de fórmula (II) se pueden preparar de conformidad con procedimientos mostrados en el esquema de reacción I.
Esquema de reacción V Compuestos de fórmula (III) en donde Rb es -NR R5 o heterociclilo, se pueden preparar usando el intermediario (5a) como se muestra en el esquema de reacción V. El intermediario (5a) se puede preparar a partir del intermediario (1c) y 2,2,2-tricloroacetimidato de metilo en presencia de ácido fórmico en un solvente adecuado tal como 2,2,2-trifluoroetanol a una temperatura entre 20°C y 100°C, preferiblemente entre 20°C y 60°C. El intermediario (5a) se puede convertir en compuestos de fórmula (III) (en donde Rb es NR4R5 o heterociclilo) con una amina de fórmula R NHR5 o un heterociclilo en un solvente adecuado, tal como 2,2,2-trifluoroetanol a una temperatura entre 20°C y 100°C, preferiblemente a 60°C.
Esquema de reacción Los materiales de partida de fórmula SM1, S 1 ' , SM2, S M2 ' , SM3 y SM3' se pueden preparar de conformidad con el esquema de reacción VI. Aquellos expertos en la técnica reconocerán que existe una variedad de métodos para preparar el intermediario (6a). Por ejemplo, el intermediario (6a) se puede preparar a partir de la fórmula X-CH2-CN (X es un grupo saliente) tal como bromoacetonitrilo y un nucleofilo para introducir la porción de R2. El reactivo nucleofílico se puede definir como R2H, en donde R2 es definido como para el compuesto de fórmula I, y el átomo de H se ubica en un heteroátomo (N, O o S). Ejemplos de reactivos R2H incluirían pero no se limitarían a grupos NH que contienen heteroarilo o heterociclo (tales como pirazoles, piridonas, morfolinonas, etc) o compuestos fenólicos, en presencia de una base tal como hidrato de sodio, carbonato de potasio, carbonato de sodio o carbonato de cesio en un solvente tal como acetonitrilo, acetato de etilo, tetrahidrofurano, D F o una combinación de los mismos a una temperatura entre 0°C y 100°C. El intermediario (6b) se puede preparar a partir de acetonitrilos (6a) y un alcano conteniendo dos grupos salientes, tal como dibromoetano (cuando m es 0 y p es 1) en presencia de una base tal como hidróxido de sodio y bromuro de ter-butilamonio en un hidrato de agua o sodio en un solvente tal como tolueno, DMF o DMSO a una temperatura entre 0°C y 25°C El intermediario (6b', R10 es H) se puede preparar análogamente a partir de acetonitrilos (6a) y un agente alquilante de la fórmula R9-X tal como yodometano usando los métodos descritos para el intermediario (6b). Bajo las condiciones de reacción análoga, la reacción posterior con el segundo agente alquilante de la fórmula R 0-X se puede realizar para la síntesis de intermediario (6b', R 0 no es H). Además, los intermediarios (6b) y (6b') se pueden preparar a partir del intermediario (6h) y (6h'), respectivamente, y R2-X por (1) reacción de desplazamiento nucleofílico usando los métodos descritos en la literatura tal como J. Org. Chem. 2005, 70, 10186-10189 y J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 712-713 o (2) una reacción de arilación mediada con metal de transición (en donde R2 es arilo o heteroarilo) usando los métodos descritos en la literatura tal como J. Am. Chem. Soc. 2002, 124, 9330-9371, J. Org. Chem. 2003, 68, 8003-8007 o Angew. Chem. Int. Ed. 2003, 42, 5031-5053. Los intermediarios (6c) y (6c') se pueden preparar a partir de los intermediarios (6i) y (6G) y R2-X en una manera similar a aquella descrita para los intermediarios (6b) y (6b') vía una reacción de desplazamiento nucleofílico, o una reacción de arilación mediada por metal de transición (en donde R2 es arlo o heteroarilo) usando los métodos reportados en la literatura tales como Org. Lett. 2008, 10, 1545-1548, Org. Lett. 2008, 10, 1549-1552 o J. Am. Chem. Soc 2002, 124, 12557-12565. Los intermediarios (6b) y (6b') se pueden convertir en SM1 y SM1', respectivamente en presencia de una base inorgánica acuosa tal como hidróxido de sodio, hidróxido de litio o hidróxido de potasio en un solvente adecuado tal como metanol, etanol, tetrahidrofurano o agua a una temperatura entre 0°C y 50°C, preferiblemente entre 0°C y 20°C. Los intermediarios (6b) y (6b') se pueden convertir en SM2 y SM2', respectivamente en presencia de ácido clorhídrico o cloruro de acetilo en un solvente tal como etanol o metanol a una temperatura entre 0°C y 70°C. Alternativamente, los intermediarios (6b) y (6b') se pueden convertir en SM2 y SM2', respectivamente en presencia de etóxido de sodio o metóxido de sodio en un solvente tal como etanol o metanol a una temperatura entre 0°C y 80°C. El intermediario (6c) se puede preparar a partir de derivados de acetato (6d) y un alcalino conteniendo dos grupos salientes, tal como dibromoetano (cuando m es 0 y p es 1) en presencia de una base, tal como carbonato de cesio, carbonato de potasio, carbonato de sodio o hidrato de sodio en un solvente de reacción tal como DMF o DMSO a una temperatura entre 0°C y 25°C. El intermediario (6b', R 0 es H) se puede preparar análogamente a partir de derivados de acetato (6d) y un agente alquilante de fórmula R9-X tal como yodometano usando los métodos descritos para el intermediario (6c). La reacción posterior con un segundo agente alquilante de fórmula R10-X se puede realizar para la síntesis de intermediario (6c', R10 no es H). Si R es un grupo alquilo, los intermediarios (6c) y (6c') se pueden convertir en SM1 y SM1' respectivamente (1) en presencia de una base inorgánica acuosa tal como hidróxido de sodio, hidróxido de litio, hidróxido de potasio o carbonato de potasio en un solvente adecuado tal como metanol, etanol, tetrahidrofurano o agua a una temperatura entre 0°C y 50°C, preferiblemente entre 0°C y 20°C, o (2) en presencia de un ácido acuoso tal como ácido clorhídrico en un solvente adecuado tal como agua a una temperatura entre 0°C y 120°C. Si R1 es un grupo bencilo, los intermediarios (6c) y (6c') se pueden convertir en SM1 y SM1' respectivamente vía hidrogenación en presencia de paladio sobre carbón en un solvente de reacción tal como metanol, etanol o acetato de etilo a temperatura ambiente. Si R es un grupo /er-butilo, los intermediarios (6c) y (6c') se pueden convertir en SM1 y SM1' respectivamente en presencia de un ácido, tal como ácido trifluoroacético, ácido clorhídrico, ácido metanosulfónico en un solvente tal como diclorometano, dioxano, tolueno, metanol o éter etílico a una temperatura entre 0°C y 45°C. Alternativamente, el intermediario (6c) se puede preparar de (6e) y un reactivo nucleofílico R2H, en donde R2 se define como para el compuesto de fórmula I, y el átomo H se ubica en un heteroátomo (N, O o S).
Ejemplos de reactivos R2H incluirían pero no se limitarían a grupos NH que contienen eteroarilo o heterociclo (tales como pirazoles, piridonas, morfolinas, etc) o compuestos fenólicos, en presencia de una base tal como hidrato de sodio o trimetilsilanolato de potasio en un solvente de reacción tal como tetrahidrofurano, tetrahidrof urano de 2-metilo, DMF, D SO o combinaciones de los mismos a una temperatura entre 0°C y 40°C. Además, los intermediarios (6c) y (6c') se pueden preparar a partir del agente alquilante adecuado (6f) para intermediario (6c), (6f) para intermediario (6c')) y un reactivo nucleofílico R2H, en donde R2 se define como para el compuesto de fórmula I, y el átomo H se ubica en un heteroátomo (N, O o S). Ejemplos de reactivos R2H incluirían pero no se limitarían a grupos NH que contienen heteroarilo o heterociclo (tales como pirazoles, piridonas, morfolinonas, etc) o compuestos fenólicos, en presencia de una base tal como hidrato de sodio carbonato de potasio, carbonato de sodio o carbonato de cesio en un solvente tal como acetonitrilo, acetato de etilo, tetrahidrofurano o DMF o una combinación de los mismos a una temperatura entre 0°C y 100°C. Los intermediarios (6b) y (6b') se pueden preparar a partir de (6g) y (6g') respectivamente, y un reactivo nucleofílico R2H, en donde R2 se define como para el compuesto de fórmula I, y el átomo H se ubica en un heteroátomo (N, O o S). Ejemplos de reactivos R2H incluirían pero no se limitarían a grupos NH que contienen heteroarilo o heterociclo (tales como pirazoles, piridonas, morfolinonas, etc.), o compuestos fenólicos, en la manera descrita para intermediarios (6c) y (6c'). Los materiales de partida de fórmula SM3 y SM3' se pueden preparar a través de la reducción de SM1 , SM1', SM2, SM2', (6c) o (6c') usando los métodos bien conocidos a aquellos expertos en la técnica. Además, los materiales de partida de fórmula SM1 y SM1' se pueden preparar a partir de SM3 y SM3' respectivamente por métodos conocidos a aquellos expertos en la técnica.
Esquema de reacción VII Compuestos de fórmula (IV) y (V) se pueden preparar de acuerdo con el esquema de reacción VII. Compuestos de fórmula (IV) se pueden preparar a partir de compuestos de fórmula (I) en donde D es CH, por reacción con un agente de fluorinación electrof ílico tal como Selectfluor® en un solvente tal como acetonitrilo o DMF a una temperatura entre 0°C y 100°C. Alternativamente, compuestos de fórmula (IV) se pueden preparar a partir del intermediario (7a) vía (1) fluorinación de las especies organometálicas correspondientes preparadas por reacción de intercambio de halógeno-metal de intermediario protegido con NH (7a), análogo a los métodos descritos en WO2008080015, o (2) fluorinación nucleofílica con un agente de fluorinación tal como fluoruro de potasio en presencia o ausencia de un éter de corona tal como 18-corona-6 en un solvente polar tal como DMSO o NMP a una temperatura entre 20°C y 180°C. El intermediario (7a) se puede preparar a partir de compuestos de fórmula (I) en donde D es CH, por reacción con un agente de halogenación electrof ílico tal como /V-bromosuccinimida (NBS) o N-yodosuccinimida (NIS) en un solvente tal como diclorometano, DMF o acetonitrilo a una temperatura entre 0°C y 100°C. Compuestos de la fórmula (V) se pueden preparar a partir del intermediario (7a) vía una reacción de acoplamiento mediada por metal de transición con la especie de metal apropiada tal como ácido borónico de metilo por los métodos descritos por Hikawa y otros en Tetrahedron , 2010, 66, 9552-9559 u otros métodos conocidos a aquellos expertos en la técnica.
Esquema de reacción VIII PG= Grupo orotector E-CH„ o. un" s q^O.1.2 X= Grupo Saliente Compuestos de fórmula (VI) se pueden preparar a través del intermediario (8a), que se puede tener acceso a partir del intermediario (1b) e intermediario (8b) (en donde E es CH2, O, NRe o S, q es 0, 1 o 2, y Rc y Re son grupos descritos como sustitutos opcionales para R2 en el resumen anterior) por los métodos descritos en el esquema de reacción I - 1 , o VII, como se muestra en el esquema de reacción VIII. Compuestos de fórmula (VI) se pueden preparar por eliminación del grupo protector amino tal como Boc usando los métodos descritos en T.W. Greene, Protective Groups ¡n Organic Synthesis, John Wiley & Sons, Nueva York, 1991, seguido por reacción con el agente electrofílico apropiado Rd-X (en donde Rd es un grupo descrito como un sustituto opcional para R2 en el resumen anterior, X es grupo saliente) tal como haluro de heteroarilo, cloruro ácido, cloroformato o cloruro de sulfonilo bajo condiciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica.
Esquema de reacción IX Compuestos de fórmula (I) en donde B es un enlace se pueden preparar de conformidad con el esquema de reacción IX. Un grupo protector de nitrógeno apropiado tal como grupo [2-(trimetilsilil)-etoxi]metilo (SEM) se puede introducir para intermediario (1c) o (9a-e) dependiendo de la naturaleza de funcionalidad remota y las condiciones de los métodos de preparación. Los métodos para protección/desprotección de dichos grupos protectores de nitrógeno se pueden encontrar en T.W. Greene, Protective Groups in Orqanic Synthesis, Jonh Wiley & Sons, Nueva York, 1991. Los compuestos de la fórmula (I) en donde B es un enlace y R2 es ariloxi, se puede preparar heterociclilo /V-enlazado o heteroarilo /V-enlazado a partir del intermediario (9b) o (9d) y R2-H con una base tal como hidrato de sodio, carbonato de cesio, carbonato de potasio o carbonato de sodio en un solvente tal como acetonitrilo, D F o DMSO a una temperatura entre 0°C y 100°C, o por los métodos descritos en WO2007039297 o J. Med. Chem. 2006, 49, 3719-3742, u otros métodos conocidos a aquellos expertos en la técnica. Los compuestos de fórmula (I) en donde B es un enlace y R2 es enlazado a C, se pueden preparar vía una reacción de acoplamiento mediada por metal de transición partiendo del intermediario (9b) y especie de metal R2 tal como derivados de ácido borónico por los métodos descritos por Grivas y otros en J. Heterocyclic. Chem., 1995, 32, 467-471 u otros métodos conocidos a aquellos expertos en la técnica. El intermediario (9b) y (9d) se pueden preparar a partir del intermediario (1c) usando los métodos descritos en WO2007039297 o J. Med. Chem. 2006, 49, 3719-3742, u otros métodos conocidos a aquellos expertos en la técnica. Además, el intermediario (9b) en donde D es N se puede preparar a partir del intermediario (9e) (accesible a partir del intermediario (1c) como se describe en el esquema de reacción I, II o IV) usando los métodos descritos en J. Med. Chem. 2011, 54, 655-668.
AGENTES DE COMBINACIÓN Los compuestos de la presente invención se pueden administrar solos o en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales. Por "administrado en combinación" o "terapia de combinación" se quiere decir que un compuesto de la presente invención y uno o más agentes terapéuticos adicionales son administrados concurrentemente al mamífero siendo tratado. Cuando se administra en combinación cada componente se puede administrar al mismo tiempo o en secuencia en cualquier orden en puntos diferentes en tiempo. De esta manera, cada componente se puede administrar por separado pero lo suficientemente cerca en tiempo para así proveer el efecto terapéutico deseado. De esta manera, los métodos de prevención y tratamiento descritos en la presente incluyen uso de agentes de combinación.
Los agentes de combinación son administrados a un mamífero en una cantidad terapéuticamente efectiva. Por "cantidad terapéuticamente efectiva" se quiere decir una cantidad de un compuesto de la presente invención que, cuando se administra solo o en combinación con un agente terapéutico adicional a un mamífero, es efectivo para tratar la enfermedad/condición deseada, por ejemplo, obesidad, diabetes y condiciones cardiovasculares tales como agentes anti-hipertensos y enfermedad cardiaca coronaria.
Ejemplos de agentes anti-diabéticos adecuados incluyen (por ejemplo, insulinas, metformina, inhibidores de DPPIV, agonistas de GLP-1, análogos y mimétícos, inhibidores de SGLT1 y SGLT2). Agentes anti-diabéticos adecuados incluyen un inhibidor de acetil-CoA carboxilasa (ACC) tales como aquellos descritos en WO2009144554, W02003072197 , WO2009144555 y WO2008065508, un inhibidor de diacilglicerol O-aciltransferasa 1 (DGAT-1), tales como aquellos descritos en WO09016462 o WO2010086820 , AZD7687 0 LCQ908, inhibidores de monoacilglicerol O-aciltransferasa, un inhibidor de fosfodiesterasa (PDE)-10, un activador de AMPK, un sulfonilurea (por ejemplo, acetohexamida, clorpropam ida, diabinesa, glibenclamida, glipzida, gliburida, glimeprida, gliclazida, glipentida, gliquidona, glisolamida, tolazamida y tolbutamida), una meglitinida, un inhibidor de a-amilasa (por ejemplo, tendamistat, trestatin y AL-3688), un inhibidor de a-glucosidasa hidrolasa (por ejemplo, acarbosa), un inhibidor de a-glucosidasa (por ejemplo, adiposina, camiglibosa, emiglitato, miglitol, voglibosa, pradimicin-Q y salbostatin), un agonista PPARy (por ejemplo, balaglitazona, ciglitazona, darglitazona, englitazona, i sag I it azo na , pioglitazona y rosiglitazona), un agonista PPAR a/? (por ejemplo, CLX-0940, GW- 1536, GW-1929, GW-2433, KRP-297, L-796449, LR-90, MK-0767 y SB-219994), una biguanida (por ejemplo, metformina), un modulador de péptido 1 tipo glucagón (GLP-1) tal como un agonista (por ejemplo, exendin-3 y exendin-4), liraglutida, albiglutida, exenatida (Byetta®), albiglutida, lixisenatida, dulaglutida, semaglutida, NN-9924, TTP-054, un inhibidor de proteína tirosina fosfatasa-1B (PTP-1B) (por ejemplo, trodusquemina, extracto de hirtiosal, y compuestos descritos por Zhang, S., y otros, Druq Discovery Today, 12(9/10), 373-381 (2007)), activador de SIRT-1 (por ejemplo, resveratrol, GSK2245840 o GSK184072), un inhibidor de dipeptidilo peptideasa IV (DPP-IV) (por ejemplo, aquellos en WO2005116014, sitagliptin, vildagliptin, alogliptin, dutogliptin, linagliptin y saxagliptin), un secreatogogo de insulina, un inhibidor de oxidación de ácido graso, un antagonista A2, un inhibidor de c-jun amino-terminal quinasa (JNK), activadores de glucoquinasa (GKa) tales como aquellos descritos en WO2010103437, WO2010103438, WO2010013161 , WO2007122482, TTP-399, TTP-355, TTP-547, AZD1656, ARRY403, MK-0599, TAK-329, AZD5658 o GKM-001, insulina, un mimético de insulina, un inhibidor de glicógeno fosforilasa (por ejemplo, GSK1362885), un agonista receptor de VPAC2, inhibidores de SGLT2, tales como aquellos descritos en E.C. Chao y otros, "Nature Reviews Drug Discovery" 9, 551-559 (julio 2010) incluyendo dapaglifloziina, canagliflozina, empagliflozina, tofogliflozina (CSG452), ASP-1941, THR1474, TS-071, ISIS388626 y LX4211 así como aquellos en WO2010023594, un modulador receptor de glucagón tales como aquellos descritos en Demong, D.E. y otros "Annual Reports in Medicinal Chemistry" 2008, 43, 119-137, moduladores GPR119, en particular agonistas, tales como aquellos descritos en WO2010140092, WO2010128425, WO2010128414, WO2010106457, Jones, R.M. y otros, en Química Medicinal 2009, 44, 149-170 (por ejemplo, MBX-2982, GSK1292263, APD597 y PSN821), derivados de FGF21 o análogos tales como aquellos descritos en Kharitonenkov A. y otros, "Current Opinión in Investigational Drugs" 2009, 10(4)359-364, moduladores receptores TGR5 (también denominado GPBAR1), en particular agonistas, tales como aquellos descritos en Zhong, M., "Current Topics in Medicinal Chemistry" 2010, 10(4), 386-396 e INT777, agonistas GPR40, tales como aquellos descritos en Medina, J.C., Reportes anuales en química medicinal, 2008, 43, 75-85, incluyendo pero sin limitación a TAK-875, moduladores GPR120, en particular agonistas, activadores receptores de ácido nicotínico de alta afinidad (HM74A), e inhibidores de SGLT1, tal como GSK1614235. Otra lista representativa de agentes anti-diabéticos que se pueden combinar con los compuestos de la presente invención se pueden encontrar, por ejemplo, en página 28, línea 35 a página 30, línea 19 de WO2011005611. Los agentes anti-diabéticos preferidos son metformin e inhibidores DPP-IV (por ejemplo, sitagliptin, vildagliptin, alogliptin, dutogliptin, linagliptin y saxagliptin). Otros agentes antidiabétícos pueden incluir inhibidores o moduladores de enzimas de carnitina palmitoil transferasa, inhibidores de fructosa 1,6-difosfatasa, inhibidores de aldosa reductasa, inhibidores receptores de mineralcorticoide, inhibidores de TORC2, inhibidores de CCR2 y/o CCR5, inhibidores de isoformas de PKC (por ejemplo, PKCa, ???ß, PKCy), inhibidores de sintetasa de ácido graso, inhibidores de serina palmitoil transferasa, moduladores de GPR81, GPR39, GPR41, GPR105, Kv1.3, proteína 4 de unión a retinol, receptor de glucocorticoide, receptores de somatostatin (por ejemplo, SSTR1, SSTR2, SSTR3 y SSTR5), inhibidores o moduladores de PDHK2 o PDHK4, inhibidores de MAP4K4, moduladores de familia IL1 incluyendo ILIbeta, moduladores de RXRalfa. Además, los agentes anti-diabéticos adecuados incluyen mecanismos listados por Carpino, P.A., Goodwin, B. Expert Opin. Ther. Pat, 2010, 20(12), 1627-52.
Los agentes anti-obesidad adecuados incluyen inhibidores de 11 ß-hidroxi esteroide deshidrogenasa-1 (? ? ß-HSD tipo 1 ), inhibidor de estearoil-CoA desaturasa-1 (SCD-1 ), agonistas MC -4, agonistas colecistoquinina-A (CCK-A), inhibidores de re-absorción de monoamina (tal como sibutramina) , agentes simpatomiméticos, agonistas ß3 adrenérgicos, agonistas de dopamina (tal como bromocriptina), análogos de hormona estimuladora de melanocito, agonistas 5HT2c, antagonistas de hormona concentradora de melanina, leptina (la proteína OB), análogos de leptina, agonistas de leptina, antagonistas de galanina, inhibidores de lipasa (tales como tetrahidrolipstatina, es decir, orlistat), agentes anorécticos (tal como agonista de bombesina), antagonistas de neuropéptido Y (por ejemplo, antagonistas NPY Y5), PYY3-36 (incluyendo análogos de los mismos), agentes tiromiméticos, deshidroepiandrosterona o un análogo de la misma, agonistas o antagonistas glucocorticoides, antagonistas de orexina, agonistas de péptido 1 tipo glucagón, factores neurotróf icos ciliares (tal como Axokine™ disponible de Regeneron Pharmaceuticals, Inc., Tarrytown, NY y Procter & Gamble Company, Cincinnati, OH), inhibidores de proteína relacionada a agouti humano (AGRP), antagonistas de ghrelina, antagonistas de histamina 3 o agonistas inversos, agonistas de neuromedina U, inhibidores de MTP/ApoB (por ejemplo, inhibidores de MTP selectivos de intestino, tal como dirlotapida), antagonista opioide, antagonista de orexina, la combinación de naltrexona con buproprion y similares.
Los agentes anti-obesidad preferidos para usarse en los aspectos de combinación de la presente invención incluyen inhibidores de MTP selectivos de intestino (por ejemplo, dirlotapida, mitratapida e implitapida, R56918 (No. CAS 403987) y No. CAS 913541-47-6), agonistas CCKa (por ejemplo, W-bencil-2-[4-(1 H-indol-3-ilmetil)-5-oxo-1 - fe nil-4,5-dihidro-2, 3,6,1 Ob-tetraazabenzo[e]azulen-6-il]-A/-isopropil-acetamida descrita en la publicación de PCT No. WO 2005/116034 o publicación de E.U.A. No. 2005-0267100 A1), agonistas 5HT2c (por ejemplo, lorcaserina), agonista MCR4 (por ejemplo, compuestos descritos en US 6,818,658), inhibidor de lipasa (por ejemplo, Cetilistat), PYY3-36 (como se usa en la presente "PYY3_ 36" incluye análogos, tal como PYY3.36 peglado, por ejemplo, aquellos descritos en la publicación de E.U.A. 2006/0178501 ), antagonistas opioides (por ejemplo, naltrexona), la combinación de naltrexona con buproprion, oleoil-estrona (No. CAS 180003-17-2), obinepitida (TM30338), pramlintida (Symlin®), tesofensina (NS2330), leptina, liraglutida, bromocriptina, orlistat, exenatida (Byetta®), AOD-9604 (No. CAS 221231-10-3) y sibutramina. Preferiblemente, compuestos de la presente invención y terapias de combinación se administran en conjunto con ejercicio y una dieta sensible.
Los compuestos de la presente invención se pueden usar en combinación con agentes moduladores de colesterol (incluyendo agentes reductores de colesterol) tal como un inhibidor de lipasa, un inhibidor de HMG-CoA reductasa, un inhibidor de HMG-CoA sintasa, un inhibidor de expresión de gen HMG-CoA reductasa, un inhibidor de expresión de gen HMG-CoA sintasa, un inhibidor de secreción de MTP/Apo B, un inhibidor de CETP, un inhibidor de absorción de ácido biliar, un inhibidor de absorción de colesterol, un inhibidor de síntesis de colesterol, un inhibidor de escualeno sintetasa, un inhibidor de escualeno epoxidasa, un inhibidor de escualeno ciclasa, un inhibidor de escualeno epoxidasa/escualeno ciclasa combinado, un fibrato, niacina, una resina de intercambio de iones, un antioxidante, un inhibidor de ACAT o un secuestrador de ácido biliar o un agente tal como mipomersen.
Ejemplos de agentes reductores de colesterol/lipido adecuados y terapias de perfil de lípido incluyen: inhibidores de HMG-CoA reductasa (por ejemplo, pravastatina, lovastatina, atorvastatina, simvastatina, fluvastatina, NK-104 (alias itavastatna o nisvastatina o nisbastatina) y ZD-4522 (alias rosuvastatina, o atavastatina o visastatina)) ; inhibidores de escualeno sintetasa; fibratos; secuestradores de ácido biliar (tal como questran); inhibidores de ACAT; inhibidores de MTP; inhibidores de lipooxigenasa; inhibidores de absorción de colesterol: e inhibidores de proteína de transferencia de éster de colesterilo. Otros agentes ateroscleróticos incluye moduladores de PCSK9.
En otra modalidad, un compuesto de fórmula I se puede coadministrar con agentes para el tratamiento de esteatohepatitis no alcohólica (NASH) y/o enfermedad de hígado graso no alcohólico (NAFLD), tal como Orlistat, TZDs y otros agentes sensibilizadores de insulina, análogos de FGF21, Metform in , ésteres etílicos de ácido Omega 3 (por ejemplo, Lovaza), Fibratos, inhibidores de HMG CoA-reductasa, Ezitimbe, Probucol, ácido ursodesoxicólico, agonistas TGR5, agonistas FXR, vitamina E, betaína, pentoxifilina, antagonistas CB1, carmitina, /V-acetilcisteína, glutationa reducida, lorcaserina, la combinación de naltrexona con buproprion, inhibidores de SGLT2, fentermina, topiramato, incretina (GLP y GIP) análogos y bloqueadores receptores de angiotensina.
Agentes terapéuticos adicionales incluyen agentes inhibidores anti-coagulantes o de coagulación, agentes inhibidores anti-plaqueta o plaqueta, inhibidores de trombina, agentes trombolíticos o fibrinol íticos, agentes anti-arrítmicos, agentes anti-hipertensos, bloqueadores de canal de calcio (tipo L y tipo T), glicósidos cardiacos, diuréticos, antagonistas receptores mineralcorticoides, agentes NO donadores tales como organonitratos, agentes NO promotores tales como inhibidores de fosfodiesterasa, agentes reductores de colesterol/lípido y terapias de perfil de lípido, agentes anti-diabéticos, anti-depresivos, agentes anti-inflamatorios (esferoides o no esferoides), agentes anti-osteoporosis, terapias de reemplazo hormonal, anticonceptivos orales, agentes anti-obesidad, agentes anti-ansiedad, agentes anti-proliferantes, agentes antitumor, agentes de enfermedad de reflujo anti-úlcera y gastroesófago, hormona del crecimiento y/o secretagogos de hormona del crecimiento, miméticos de tiroides (incluyendo antagonista receptor de hormona de tiroides), agentes anti-infectivos, agentes anti-virales, agentes anti-bacterianos y agentes anti-fúngicos.
Se incluyen agentes usados en un ambiente de unidad de cuidados intensivos (ICU, por sus siglas en inglés), por ejemplo, dobutamina, dopamina, dipenefrina, nitroglicerina, nitroprussida, etc.
Se incluyen agentes de combinación útiles para tratar vasculitis, por ejemplo, azatioprina, ciclofosfamida, micofenolato, mofetil, rituximab, etc.
En otra modalidad, la presente invención provee una combinación en donde el segundo agente es al menos un agente seleccionado a partir de un inhibidor de factor Xa, un agente anti-coagulante, un agente anti-plaqueta, un agente inhibidor de trombina, un agente trombolítico, y un agente fibrinolítico. Los inhibidores ejemplares de factor Xa incluyen apixaban y rivaroxaban. Ejemplos de anti-coagulantes adecuados para usarse en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen heparinas (por ejemplo, heparinas no fraccionadas y de peso molecular bajo tales como enoxaparina y dalteparina) .
En otra modalidad preferida, el segundo agente es al menos un agente seleccionado a partir de warfarina, dabigatran, heparina no fraccionada, heparina de peso molecular bajo, pentasacárido sintético, hirudina, argatrobanas, aspirina, ibuprofeno, naproxeno, sulindaco, indometacina, mefenamato, droxicam, diclofenaco, sulfinpirazona, piroxicam, ticlopidina, clopidogrel, tirofibano, eptifibatida, abciximab, melagatran, disulfatohirudina, activador de plasminógeno de tejido, activador de plasminógeno de tejido modificado, anistreplasa, uroquinasa y estreptoquinasa.
Un segundo agente preferido es al menos un agente antiplaqueta. Los agentes anti-plaqueta especialmente preferidos son aspirina y clopidogrel.
El término agentes anti-plaqueta (o agentes inhibidores de plaqueta), como se usa en la presente, denota agentes que inhiben función de plaqueta, por ejemplo, al inhibir la agregación, adhesión o secreción granular de plaquetas. Agentes incluyen, pero no se limitan a, los varios fármacos anti-lnflamatorios no esferoides conocidos (NSAIDS, por sus siglas en inglés) tales como aspirina, ibuprofeno, naproxeno, sulindaco, indometacina, mefenamato, droxicam, diclofenaco, sulfinpirazona, piroxicam y sales o profármacos farmacéuticamente aceptables de los mismos. De los NSAIDS, los inhibidores de aspirina (ácido acetilsalicílico o ASA) y COX-2 tales como CELEBREX o piroxicam, son preferidos. Otros agentes inhibidores de plaqueta adecuados incluyen antagonistas llb/llla (por ejemplo, tirofiban, eptifibatida y abciximab), antagonistas receptores de tromboxano-A2 (por ejemplo, ifetroban), inhibidores de tromboxano-A2-sintetasa, inhibidores de PDE-lll (por ejemplo, Pletal, dipiridamol) , y sales o profármacos farmacéuticamente aceptables de los mismos.
El término agentes anti-plaqueta (o agentes inhibidores de plaqueta), como se usa en la presente, también debe incluir antagonistas receptores de ADP (adenosina difosfato), preferiblemente antagonistas de los receptores purinérgicos P2Y1 y P2Y12, con ^2^12 siendo incluso más preferido. Los antagonistas receptores de P2Y12 incluyen ticagrelor, prasugre, ticlopidina y clopidogrel, incluyendo sales o profármacos farmacéuticamente aceptables de los mismos. Clopidogrel es un agente incluso más preferido. Ticlopidina y clopidogrel también son compuestos preferidos ya que son conocidos por ser moderados sobre el tracto gastro-intestinal en uso.
El término inhibidores de trombina (o agentes anti-trombina), como se usa en la presente, denota inhibidores de la serina proteasa trombina. Al inhibir trombina, varios procesos mediados por trombina, tal como activación de plaqueta mediada por trombina (es decir, por ejemplo, se interrumpe la agregación de plaquetas, y/o la secreción granular de inhibidor 1 activador de plasminógeno y/o serotonina) y/o formación de fibrina. Un número de inhibidores de trombina son conocidos a un experto en la técnica y estos inhibidores son contemplados para usarse en combinación con los presentes compuestos. Dichos inhibidores incluyen, pero no se limitan a, derivados de boroarginina, boropéptidos, dabigatran, heparinas, hirudina, argatroban, y melagatran, incluyendo sales y profármacos farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los derivados de boroarginina y boropéptidos incluyen derivados de N-acetilo y péptido de ácido borónico, tales como derivados de ácido alfa-aminoborónico de terminal C de lisina, ornitina, arginina, homoarginina y análogos de isotiouronio correspondientes de los mismos. El término hirudina, como se usa en la presente, incluye derivados adecuados o análogos de hirudina, referidos en la presente como hirúlogos, tal como disulfatohirudina. El término agentes trombolíticos o f i bri no I ít icos (o trombolíticos o fibrinolíticos), como se usa en la presente, denota agentes que lisan coágulos de sangre (trombos). Dichos agentes incluyen activador de plasminógeno de tejido (natural o recombinante) y formas modificadas de los mismos, anistreplasa, uroquinasa, estreptoquinasa, tenecteplasa (TNK), lanoteplasa (nPA), inhibidores de factor V 11 a , inhibidores de PAI-1 (es decir, inactivadores de inhibidores activadores de plasminógeno de tejido), inhibidores de alfa2-antiplasmina, y complejo activador de plasminógeno estreptoquinasa anisoilado, incluyendo sales o profármacos farmacéuticamente aceptables de los mismos. El término anistreplasa, como se usa en la presente, se refiere a complejo activador de plasminógeno estreptoquinasa anisoilada, como se describe, por ejemplo, en EP 028,489, la descripción de lo cual se incorpora a la presente por referencia. El término uroquinasa, como se usa en la presente, debe denotar tanto uroquinasa de cadena dual como individual, lo último también siendo referido en la presente como prouroquinasa.
Ejemplos de agentes antí-arrítm icos adecuados incluyen: agentes de clase I (tal como propafenona) ; agentes de clase II (tales como metoprolol, atenolol, carvadiol y propranolol) ; agentes de clase III (tales como sotalol, dofetilida, amiodarona, azimilida e ibutilida); agentes de clase IV (tales como ditiazem y verapamil); abridores de canal K+ tales como inhibidores de lAch> e inhibidores de l«ur (por ejemplo, compuestos tales como aquellos descritos en WO01/40231 ).
Los compuestos de la presente invención se pueden usar en combinación con agentes antihipertensos y dicha actividad anti-hipertensa se determina prontamente por aquellos expertos en la técnica de acuerdo con ensayos estándar (por ejemplo, mediciones de presión sanguínea). Ejemplos de agentes anti-hipertensos adecuados incluyen: bloqueadores alfa adrenérgicos; bloqueadores beta adrenérgicos; bloqueadores de canal de calcio (por ejemplo, diltiazem, verapamil, nifedipina y amlodipina); vasodilatadores (por ejemplo, h idra lazi na ) , diuréticos (por ejemplo, clorotiazida, hidroclorotiazida, flumetiazida, hidroflumetiazida, bendrof lumeti-azida, metilclorotiazida, triclorometiazida, politiazida, benztiazida, tricrinafeno de ácido etacrínico, clortalidona, torsemida, furosemida, musolimina, bumetanida, triamtreneno, amilorida, espironolactona); inhibidores de renina; inhibidores de ACE (por ejemplo, captopril, zofenopril, fosinopril, enalapril, ceranopril, cilazopril, delapril, pentopril, quinapril, ramipril, lisinopril); antagonistas receptores AT-1 (por ejemplo, losarían, irbesartan, valsartan); antagonistas receptores ET (por ejemplo, sitaxsentan, atrsentan y compuestos descritos en las patente de E.U.A. Nos. 5,612,359 y 6,043,265); antagonista ET/AII dual (por ejemplo, compuestos descritos en WO 00/01389); inhibidores de endopeptidasa neutral (NEP); inhibidores de vasopepsidasa (inhibidores de NEP-ACE dual) (por ejemplo, gemopatrilat y nitratos). Un agente antianginal ejemplar es ivabradina.
Ejemplos de bloqueadores de canal de calcio adecuados (tipo L o tipo T) incluyen diltiazem, veraparmil, nifedipina y amlodipina y mibefradil.
Ejemplos de glicosidos cardiacos adecuados incluyen digitalis y ouabain.
En una modalidad, un compuesto de la fórmula I se puede coadministrar con uno o más diuréticos. Ejemplos de diuréticos adecuados incluyen (a) diuréticos de asa tales como furosemida (tal como LASIX™), torsemida (tal como DEMADEX™), bemetanida (tal como BUMEX™), y ácido etacrínico (tal como EDECRIN™); (b) diuréticos de tipo tiazida tal como clorotiazida (tal como DIURIL™, ESIDRIX™ o HYDRODIURIL™), hidroclorotiazida (tal como MICROZIDE™ o ORETIC™, benztiazida, hidroflumetiazida (tal como SALURON™), bendroflumetiazida, meticlortiazida, politiazida, triclormetiazida e indapamida (tal como LOZOL™); (c) diuréticos de tipo f ta I i m id i n a tal como clortalidona (tal como HYGROTON™), y metolazona (tal como ZAROXOLYN™); (d) diuréticos del tipo quinazolina tal como quinetazona; y (e) diuréticos moderados en potasio tal como triamtereno (tal como DYRENIUM™), y amilorida (tal como MIDAMOR™ o MO D U R ETI C™ ) .
En otra modalidad, un compuesto de fórmula I se puede coadministrar con un diurético de asa. Todavía en otra modalidad, el diurético de asa se selecciona a partir de furosemida y torsemida.
Todavía en otra modalidad, uno o más compuestos de las fórmulas I o II se puede co-administrar con furosemida. Todavía en otra modalidad, uno o más compuestos de las fórmulas I o II se puede coadministrar con torsemida que opcionalmente puede ser una forma de liberación controlada o modificada de torsemida.
En otra modalidad, un compuesto de fórmula I se puede coadministrar con un diurético de tipo tiazida. Todavía en otra modalidad, el diurético se selecciona a partir del grupo que consiste de clorotiazida e hidroclorotiazida. Todavía en otra modalidad, uno o más compuestos de fórmula I o II se puede co-administrar con clorotiazida. Todavía en otra modalidad, uno o más compuestos de fórmula I o II se puede co-administrar con hidroclorotiazida.
En otra modalidad, uno o más compuestos de fórmula I o II se puede co-administrar con un diurético de tipo ftalimidina. Todavía en otra modalidad, el diurético de tipo ftalimidina es clortalidona.
Ejemplos de antagonistas receptores mineralcorticoides adecuados incluyen esprionolactona y eplerenona.
Ejemplos de inhibidores de fosfodiesterasa adecuados incluyen: inhibidores PDE III (tal como cilostazol); e inhibidores PDE V (tal como sildenafil).
Aquellos expertos en la técnica reconocerán que los compuestos de esta invención también se pueden usar en conjunto con otros tratamientos cardiovasculares o cerebrovasculares incluyendo PCI, colocar un stent, stents eluyendo fármaco, terapia de célula madre y dispositivos médicos tales como marcapasos implantados, desfibriladores o terapia de resincronización cardiaca.
La dosificación del agente farmacéutico adicional en general es dependiente de un número de factores incluyendo la salud del sujeto siendo tratado, el grado de tratamiento deseado, la naturaleza y clase de terapia concurrente, si acaso, y la frecuencia de tratamiento la naturaleza del efecto deseado. En general, el rango de dosificación del agente farmacéutico adicional está en el rango de alrededor de 0.001 mg a aproximadamente 100 mg por kilogramo de peso corporal del individuo por día, preferiblemente de alrededor de 0.1 mg a aproximadamente 10 mg por kilogramo de peso corporal del individuo por día. Sin embargo, alguna variabilidad en el rango de dosificación general también se puede requerir dependiendo de la edad y peso del sujeto siendo tratado, la ruta de administración destinada, el agente anti-obesidad particular siendo administrado y similares. La determinación de rangos de dosificación y dosificaciones óptimas para un paciente particular también está dentro de la habilidad de un experto en la técnica de tener el beneficio de la presente descripción.
De acuerdo con los métodos de tratamiento de la invención, un compuesto de la presente invención o una combinación de un compuesto de la presente invención y por lo menos un agente farmacéutico adicional (referido en la presente como una "combinación") se administra a un sujeto en necesidad de dicho tratamiento, preferiblemente en la forma de una composición farmacéutica. En el aspecto de combinación de la invención, el compuesto de la presente invención y por lo menos otro agente farmacéutico (por ejemplo, otro agente anti-obesidad, se puede administrar ya sea por separado o en una composición farmacéutica comprendiendo ambos. En general se prefiere que dicha administración sea oral.
Cuando una combinación de un compuesto de la presente invención y por lo menos otro agente farmacéutico se administran juntos, dicha administración puede ser secuencial en tiempo o simultánea. La administración simultánea de combinaciones de fármaco en general se prefiere. Para administración secuencial, un compuesto de la presente invención y el agente farmacéutico adicional se puede administrar en cualquier orden. En general se prefiere que dicha administración sea oral. En especial se prefiere que dicha administración sea oral y simultánea. Cuando un compuesto de la presente invención y el agente farmacéutico adicional se administran en secuencia, la administración de cada uno puede ser la misma o por métodos diferentes.
De acuerdo con los métodos de la invención, un compuesto de la presente invención o una combinación se administra preferiblemente en la forma de una composición farmacéutica. Por consiguiente, un compuesto de la presente invención o una combinación se puede administrar a un paciente por separado o juntos en cualquier forma de dosificación convencional oral, rectal, transdérmica, parenteral (por ejemplo, intravenosa, intramuscular o subcutánea), intracisternal, intravaginal, intraperitoneal, tópica (por ejemplo, polvo, ungüento, crema, aspersor o loción), bucal o nasal (por ejemplo, aspersor, gotas o inhalador).
Los compuestos de la invención o combinaciones se pueden administrar solos pero en general serán administrados en una mezcla con uno o más excipientes farmacéuticos adecuados, adyuvantes, diluyentes o portadores conocidos en la técnica y seleccionados con respecto a la ruta de administración deseada y práctica farmacéutica estándar. El compuesto de la invención o combinación se puede formular para proveer formas de dosificación intermedia, retrasada, modificada, sostenida, a pulso o controlada dependiendo de la ruta deseada de administración y la especificidad de perfil de liberación, proporcional con necesidades terapéuticas.
La composición farmacéutica comprende un compuesto de la invención o una combinación en una cantidad por lo general en el rango de alrededor de 1% a aproximadamente 75%, 80%, 85%, 90% o incluso 95% (en peso) de la composición, usualmente en el rango de alrededor de 1%, 2% o 3% a aproximadamente 50%, 60% o 70%, más con frecuencia en el rango de alrededor de 1%, 2% o 3% a menos de 50% tal como aproximadamente 25%, 30% o 35%.
Métodos de preparar varias composiciones farmacéuticas con una cantidad específica de compuesto activo son conocidos a aquellos expertos en la técnica. Por ejemplo, ver Remington: The Practice of Pharmacv, Lippincott Williams and Wilkins, Baltimore Md. 20sup.th. ed. 2000.
Las composiciones adecuadas para inyección parenteral en general incluyen soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones acuosas o no acuosas estériles farmacéuticamente aceptables, y polvos estériles para reconstitución en soluciones o dispersiones inyectables estériles. Ejemplos de portadores o diluyentes acuosos o no acuosos adecuados (incluyendo solventes y vehículos) incluyendo agua, etanol, polioles (propilenglicol, polietilenglicol, glicerol y similares), mezclas adecuadas de los mismos, triglicéridos incluyendo aceites vegetales tal como aceite de oliva, y ésteres orgánicos inyectables tal como oleato de etilo. Un portador preferido es éster de ácido caprílico/cáprico de marca M i g I y o I . RTM. con glicerina o propilenglicol (por ejemplo, Míglyol. RTM. 812, Miglyol RTM. 829, Miglyol. RTM. 840) disponible de Condea Vista Co., Cranford, N.J. Se puede mantener fluidez propia, por ej'emplo, por el uso de un recubrimiento tal como lecitina, por el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersiones, y por el uso de agentes tensioactivos.
Estos compuestos para inyección parenteral también pueden contener excipientes tales como agentes conservadores, humectantes, emulsores y dispersantes. La prevención de contaminación de microorganismo de las composiciones se puede lograr con varios agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico y similares. También se puede desear incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, cloruro de sodio y similares. La absorción prolongada de composiciones farmacéuticas inyectables se puede causar por el uso de agentes capaces de retrasar la absorción, por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina.
Las formas de dosificación sólida para administración oral incluyen cápsulas, tabletas, masticables, pastillas, pildoras y preparaciones de multi-partícula (gránulos). En dichas formas de dosificación sólida, un compuesto de la presente invención o una combinación se mezcla con al menos un excipiente inerte, diluyente o portador. Excipientes, diluyentes o portadores adecuados incluyen materiales tales como citrato de sodio o fosfato de dicalcio y/o (a) uno o más rellenos o extensores (por ejemplo, celulosa microcristalina (disponible de Avicel TM de FMC Corp.) almidones, lactosa, sacarosa, manitol, ácido silícico, xilitol, sorbitol, dextrosa, fosfato de hidrógeno de calcio, dextrina, alfa-ciclodextrina, beta-ciclodextrina, polietilenglicol, ácidos grasos de cadena mediana, óxido de titanio, óxido de magnesio, óxido de aluminio y similares); (b) uno o más aglutinantes (por ejemplo, carboximetilcelulosa, metilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, gelatina, goma arábiga, celulosa de etilo, alcohol pol i vin í I ico , pululan, almidón pre-gelatinizado, agar, tragacanto, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarosa, acacia y similares); (c) uno o más humectantes (por ejemplo, glicerol y similares); (d) uno o más agentes desintegrantes (por ejemplo, agar-agar, carbonato de calcio, almidón de papa o tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos complejos, carbonato de sodio, laurilsulfato de sodio, glicolato de almidón de sodio (disponible como Explotab.TM. de Edward endell Co.), polivinilpirrolidona entrelazada, croscarmelosa de sodio tipo A (disponible como Ac-di-sol.TM.), poliacrilina de potasio (una resina de intercambio de iones) y similares; (e) uno o más retardadores de solución (por ejemplo, parafina y similares); (f) uno o más aceleradores de absorción (por ejemplo, compuestos de amonio cuaternario y similares), (g) uno o más agentes humectantes (por ejemplo, alcohol cetílico, monoestearato de glicerol y similares); (h) uno o más adsorbentes (por ejemplo, caolín, bentonita y similares); y/o (i) uno o más lubricantes (por ejemplo, talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, ácido esteárico, estearato de polioxilo, cetanol, talco, aceite de ricino hidrogenado, ésteres de sacarosa de ácido graso, dimetilpolisiloxano, cera microcristalina, cera de abeja amarilla, cera de abeja blanca, polietilenglicoles sólidos, laurilsulfato de sodio y similares). En el caso de cápsulas y tabletas, las formas de dosificación también pueden comprender agentes reguladores.
Las composiciones sólidas de un tipo similar también se pueden usar como rellenos en cápsulas de gelatina dura o rellenas usando dichos excipientes como lactosa o azúcar de leche, así como polietilenglicoles de peso molecular alto, y similares.
Las formas de dosificación sólida tales como tabletas, grageas, cápsulas y gránulos se pueden preparar con recubrimientos y cubiertas, tales como capas entéricas y otros bien conocidos en la técnica. También pueden contener agentes opacificantes y también pueden ser de dicha composición que liberan el compuesto de la presente invención y/o el agente farmacéutico adicional en una manera retrasada. Ejemplos de composiciones incrustantes que se pueden usar son sustancias poliméricas y ceras. El fármaco también puede estar en forma microencapsulada, de ser apropiado, con uno o más de los excipientes antes mencionados.
Para tabletas, el agente activo típicamente comprenderá menos de 50% (en peso) de la formulación, por ejemplo, menos de aproximadamente 10% tal como 5% o 2.5% en peso. La porción predominante de la formulación comprende rellenos, diluyentes, desintegrantes, lubricantes y opcionalmente, sabores. La composición de estos excipientes es bien conocida en la técnica. Con frecuencia, los rellenos/diluyentes comprenderán mezclas de dos o más de los siguientes componentes: celulosa mícrocristalina, manitol, lactosa (todos los tipos), almidón, y fosfato de di-calcio. Las mezclas de relleno/diluyente típicamente comprenden menos de 98% de la formulación y preferiblemente menos de 95%, por ejemplo, 93.5%o. Los desintegrantes preferidos incluyen Ac-di-sol.TM. , Explotab.T . , almidón y laurilsulfato de sodio. Cuando está presente un desintegrante, usualmente comprenderá menos de 10% de la formulación o menos de 5%, por ejemplo, aproximadamente 3%. Un lubricante preferido es estearato de magnesio. Cuando está presente un lubricante usualmente comprenderá menos de 5% de la formulación o menos de 3%, por ejemplo, aproximadamente 1%.
Se pueden fabricar tabletas por procesos de formación de tableta estándar, por ejemplo, compresión directa o una granulación húmeda, seca o fundida, proceso de coagulación fundida y extrusión. Los núcleos de tableta pueden ser mono o multi-capa(s) y se pueden revestir con sobrecapas apropiadas conocidas en la técnica.
Las formas de dosificación líquida para administración oral incluyen emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elíxires farmacéuticamente aceptables. Además del compuesto de la presente invención o la combinación, la forma de dosificación líquida puede contener diluyentes inertes comúnmente usados en la técnica, tal como agua u otros solventes, agentes solubilizantes y emulsores, como, por ejemplo, alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1 , 3-but i I eng li col , d imet i If orm a m id a , aceites (por ejemplo, aceite de semilla de algodón, aceite de cacahuate, aceite de germen de maíz, aceite de oliva, aceite de ricino, aceite de semilla de ajonjolí y similares, Miglyole. RTM . (disponible de CONDEA Vista Co., Cranford, N.J.), glicerol, alcohol de tetrahidrofurfurilo, polietilenglicoles y ésteres de ácido graso de sorbitán, o mezclas de estas sustancias y similares.
Aparte de dichos diluyentes inertes, la composición también puede incluir excipientes, tales como agentes humectantes, agentes emulsores y de suspensión, agentes edulcorantes, saborizantes y perfumantes.
Las formas líquidas orales de los compuestos de la invención o combinaciones incluyen soluciones, en donde el compuesto activo se disuelve por completo. Ejemplos de solventes incluyen todos los solventes farmacéuticamente aceptables adecuados para administración oral, en particular aquellos en donde los compuestos de la invención muestran buena solubilidad, por ejemplo, polietilenglicol, polipropilenglicol, aceites comestibles y sistemas a base de glicerilo y glicérido. Los sistemas a base de glicerilo y glicérido pueden incluir, por ejemplo, los siguientes productos de marca (y productos genéricos correspondientes): Captex.TM. 355 EP (tricaprilato/caprato de glicerilo, de Abitec, Columbus Ohio), Crodamol.TM GTC/C (triglicérido de cadena mediana, de Croda, Cowick Hall, Reino Unido) o Labrafac.TM. CC (triglicéridos de cadena mediana, de Gattefosse), Captex.TM. 500P (triacetato de glicerilo, es decir, triacetina, de Abitec), Capmul.TM. MCM (mono- y diglicéridos de cadena mediana, de Abitec), Migyol.TM. 812 (triglicérido caprílico/cáprico, de Condea, Cranford N.J.), Migyol.TM. 829 (triglicérido caprílico/cáprico/succínico, de Condea), Migyol.TM. 840 (dicaprilato/dicaprato de propilenglicol, de Condea), Labrafil.Tm. M1944CS (glicéridos de oleoilo macrogol-6, de Gattefosse), Peceol.TM. (monooleato de glicerilo, de Gattefosse) y Maisine.TM. 35-1 (monooleato de glicerilo, de Gattefosse). De interés particular son la cadena mediana (aproximadamente C.sub.8 a C.sub.10) aceites de triglicérido. Estos solventes con frecuencia forman la porción predominante de la composición, es decir, más de aproximadamente 50%, usualmente más de aproximadamente 80%, por ejemplo, aproximadamente 95% o 99%. Los adyuvantes y aditivos también se pueden incluir con los solventes principalmente como agentes de máscara de sabor, gusto y agentes saborizantes, antioxidantes, estabilizadores, modificadores de textura y viscosidad y solubilizadores.
Suspensiones, además del compuesto de la presente invención o la combinación, pueden comprender además portadores tales como agentes de suspensión, por ejemplo, alcoholes isoestearí I icos etoxilados, sorbitol de polioxietileno y ésteres de sorbitán, celulosa microcristalina, metahidróxido de aluminio, bentonita, agar-agar, y tragacanto, o mezclas de estas sustancias, y similares.
Las composiciones para administración rectal o vaginal comprenden de preferencia supositorios que se pueden preparar al mezclar un compuesto de la presente invención o una combinación de excipientes o portadores no irritantes adecuados, tales como mantequilla de cacao, polietilenglicol o una cera de supositorio que son sólidos a temperatura ambiente ordinaria, pero líquidos a temperatura corporal, y por tanto, se derriten en el recto o cavidad vaginal así liberando el componente(s) activo.
Las formas de dosificación para administración tópica de los compuestos de la presente invención o combinaciones incluyen ungüentos, cremas, lociones, polvos y aspersores. Los fármacos se mezclan con un excipiente, diluyente o portador farmacéuticamente aceptable y cualquier conservador, regulador o propulsor que se pueda requerir.
Muchos de los presentes compuestos son pobremente solubles en agua, por ejemplo, menos de aproximadamente 1 mu.g/mL. Por lo tanto, las composiciones líquidas en solventes no acuosos solubilizantes tales como los aceites de triglicérido de cadena mediana discutidos antes son una forma de dosificación preferida para estos compuestos.
Las dispersiones amorfas sólidas, incluyendo dispersiones formadas por un proceso de secado por aspersión, también son una forma de dosificación preferida para los compuestos pobremente solubles de la invención. Por "dispersión amorfa sólida" se quiere decir un material sólido en donde por lo menos una porción del compuesto pobremente soluble está en la forma amorfa y se dispersa en un polímero soluble en agua. Por "amorfo" se quiere decir que el compuesto pobremente soluble es no cristalino. Por "cristalino" se quiere decir que el compuesto exhibe orden de rango largo en tres dimensiones de al menos 100 unidades de repetición en cada dimensión. De esta manera, el término amorfo debe incluir no sólo material que tiene en esencia ningún orden, sino también material que puede tener algún grado pequeño de orden, pero el orden es menos de las tres dimensiones y/o sólo es sobre distancias cortas. El material amorfo se puede caracterizar por técnicas conocidas en la técnica tal como cristalografía de difracción de rayos X en polvo (PXRD, por sus siglas en inglés), NMR de estado sólido o técnicas térmicas tal como calorimetría de barrido diferencial (DSC, por sus siglas en inglés).
Preferiblemente, al menos una porción principal (es decir, por lo menos aproximadamente 60% en peso) del compuesto pobremente soluble en la dispersión amorfa sólida es amorfo. El compuesto puede existir dentro de la dispersión amorfa sólida en dominios o regiones amorfos relativamente puros, como una solución sólida del compuesto homogéneamente distribuido a través del polímero o cualquier combinación de estos estados o aquellos estados que se encuentran intermedios entre ellos. Preferiblemente, la dispersión amorfa sólida es sustancialmente homogénea de modo que el compuesto amorfo se dispersa de manera tan homogénea como sea posible a través del polímero. Como se usa en la presente, "sustancialmente homólogo" significa que la fracción del compuesto que está presente en dominios o regiones amorfos relativamente puros dentro de la dispersión amorfa sólida es relativamente pequeña, en el orden de menos de 20% en peso, y preferiblemente menos de 10% en peso de la cantidad total de fármaco Los polímeros solubles en agua adecuados para usarse en las dispersiones amorfas sólidas deben ser inertes, en el sentido que no reaccionan químicamente con el compuesto pobremente soluble en una manera adversa, son farmacéuticamente aceptables, y tienen al menos alguna solubilidad en solución acuosa a pHs fisiológicamente relevantes (por ejemplo, 1-8). El polímero puede ser natural o ionizable y debe tener una solubilidad acuosa de al menos 0.1 mg/mL sobre al menos una porción del rango de pH de 1-8.
Los polímeros solubles en agua adecuados para usarse con la presente invención pueden ser celulósicos o no celulósicos. Los polímeros pueden ser neutrales o ionizables en solución acuosa. De estos, se prefieren polímeros ionizables y celulósicos, con polímeros celulósicos ionizables siendo más preferidos.
Los polímeros solubles en agua ejemplares incluyen acetato succinato de hidroxipropil metilcelulosa (HPMCAS), hidroxipropil metilcelulosa (HPMC), hidroxipropil metilcelulosa ftalato (HPMCP), carboxi metiletilcelulosa (C EC), acetato ftalato de celulosa (CAP), acetato trimelitato de celulosa (CAT), polivinilpirrolidona (PVP), hidroxipropil celulosa (HPC), metil celulosa (MC), copolímeros en bloque de óxido de etileno y óxido de propileno (PEO/PPO, también conocidos como poloxámeros), y mezclas de los mismos. Los polímeros especialmente preferidos incluyen HPMCAS, HPMC, HPMCP, CMEC, CAP, CAT, PVP, poloxámeros y mezclas de los mismos. Muy preferido es HPMCAS. Ver publicación de solicitud de patente europea No. 0 901 786 A2, la descripción de la cual se incorpora a la presente por referencia.
Las dispersiones amorfas sólidas se pueden preparar de acuerdo con cualquier proceso para formar dispersiones amorfas sólidas que resulte en al menos una porción principal (por lo menos 60%) del compuesto pobremente soluble estando en el estado amorfo. Dichos procesos incluyen procesos mecánicos, térmicos y de solvente. Los procesos mecánicos ejemplares incluyen molienda y extrusión; los procesos de fundición incluyendo fusión a temperatura alta, fusión modificada con solvente y procesos de solidificación-fusión; y procesos de solvente incluyendo precipitación de no solvente, recubrimiento por aspersión y secado por aspersión. Ver, por ejemplo, las siguientes patentes de E.U.A. Nos. 5,456,923 y 5,939,099, que describen formar dispersiones por procesos de extrusión; Nos. 5,340,591 y 4,673,564, que describen formar dispersiones por procesos de molienda; y Nos. 5,707,646 y 4,894,235, que describen formar dispersiones por procesos de solidificación de fusión. En un proceso preferido, la dispersión amorfa sólida se forma por secado por aspersión, como se describe en la publicación de solicitud de patente europea No. 0 901 786 A2. En este proceso, el compuesto y polímero se disuelven en un solvente, tal como acetona o metanol, y el solvente entonces se elimina con rapidez de la solución por secado por aspersión para formar la dispersión amorfa sólida. Las dispersiones amorfas sólidas se pueden preparar para contener hasta 99% en peso del compuesto, por ejemplo, 1% en peso, 5% en peso, 10% en peso, 25% en peso, 50% en peso, 75% en peso, 95% en peso o 98% en peso, según se desee.
Se puede usar la dispersión sólida como la forma de dosificación en sí o puede servir como un producto de uso de fabricación (MUP, por sus siglas en inglés) en la preparación de otras formas de dosificación tales como cápsulas, tabletas, soluciones o suspensiones. Un ejemplo de una suspensión acuosa es una suspensión acuosa de una dispersión de secado por aspersión de 1:1 (p/p) compuesto/HPMCAS-HF que contiene 2.5 mg/mL de compuesto en 2% polisorbato 80. Las dispersiones sólidas para usarse en una tableta o cápsula en general se mezclarán con otros excipientes o adyuvantes típicamente encontrados en dichas formas de dosificación. Por ejemplo, un relleno ejemplar para cápsulas contiene una dispersión secada por aspersión de 2:1 (p/p) compuesto/HPMCAS-MF (60%), lactosa (flujo rápido) (15%), celulosa microcristalina (por ejemplo, Avixel.sup. (RO-102) (15.8%), almidón de sodio (7%), laurilsulfato de sodio (2%) y estearato de magnesio (1%).
Los polímeros de HPMCAS están disponibles en grados bajos, medianos y altos como Aqoa.sup.(R)-LF, Aqoat.sup. (R)-MF y Aqoat.sup. (R)-HF respectivamente de Shin-Etsu Chemical Co., LTD, Tokio, Japón. Los grados de MF y HF superiores son generalmente preferidos.
Los siguientes párrafos describen formulaciones ejemplares, dosificaciones, etc., útiles para animales no humanos. La administración de los compuestos de la presente invención y combinaciones de los compuestos de la presente invención con agentes anti-obesidad se puede realizar oralmente o no oralmente.
Una cantidad de un compuesto de la presente invención o combinación de un compuesto de la presente invención con otro agente anti-obesidad se administra de modo que se recibe una dosis efectiva. En general, una dosis diaria que se administra oralmente a un animal es entre alrededor de 0.01 y aproximadamente 1,000 mg/kg de peso corporal, por ejemplo, entre alrededor de 0.01 y aproximadamente 300 mg/kg o entre alrededor de 0.01 y aproximadamente 100 mg/kg o entre alrededor de 0.01 y aproximadamente 50 mg/kg de peso corporal, o entre alrededor de 0.01 y aproximadamente 25 mg/kg, o alrededor de 0.01 y aproximadamente 10 mg/kg o alrededor de 0.01 y aproximadamente 5 mg/kg.
De manera conveniente, un compuesto de la presente invención (o combinación) puede ser portado en el agua para beber de modo que se ingiere una dosificación terapéutica del compuesto con el suministro de agua diaria. El compuesto se puede medir directamente en agua potable, preferiblemente en la forma de un líquido, concentrado soluble en agua (tal como un solución acuosa de una sal soluble en agua).
De manera conveniente, un compuesto de la presente invención (o combinación) también se puede agregar directamente a la alimentación, como tal, o en la forma de un suplemento de alimentación a animal, también referido como una premezcla o concentrado. Una premezcla o concentrado del compuesto en un excipiente, diluyente o portador se emplea más comúnmente para la inclusión del agente en la alimentación. Los excipientes, diluyentes o portadores adecuados son líquidos o sólidos, según se desee, tal como agua, varios alimentos tales como harina de alfalfa, harina de soya, harina de aceite de semilla de algodón, harina de aceite de linaza, harina de mazorca y harina de maíz, melaza, urea, harina de hueso, y mezclas minerales tal como se emplean comúnmente en alimentos para aves. Un excipiente, diluyente o portador particularmente efectivo es el alimento para animal respectivo; es decir, una porción pequeña de dicho alimento. El portador facilita distribución uniforme del compuesto en el alimento terminado con el cual se mezcla la premezcla. Preferiblemente, el compuesto se mezcla por completo en la premezcla y, posteriormente, la alimentación. En este respecto, el compuesto se puede dispersar o disolver en un vehículo oleoso adecuado tal como aceite de soya, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón, y similares, o en un solvente orgánico volátil y después se mezcla con el portador. Se apreciará que las proporciones de compuesto en el concentrado son capaces de variación amplia ya que la cantidad del compuesto en la alimentación terminada se puede ajustar al mezclar la proporción apropiada de premezcla con la alimentación para obtener un nivel deseado de compuesto.
Se pueden mezclar concentrados de potencia alta por el fabricante del alimento con portador proteínico tal como aceite de soya y otros alimentos, como se describió antes, para producir suplementos concentrados, que son adecuados para alimentación directa a animales. En dichas instancias, los animales son permitidos para consumir la dieta usual. Alternativamente, dichos suplementos concentrados se pueden agregar directamente al alimento para producir un alimento nutricionalmente balanceado que contenta un nivel terapéuticamente efectiva de un compuesto de la presente invención. Las mezclas se mezclan por completo por procedimientos estándar, tal como en una mezcladora de doble masa, para asegurar homogeneidad.
Si se usa el suplemento como un aderezo superior para el alimento, asimismo ayuda a asegurar uniformidad de distribución del compuesto sobre la parte superior del alimento aderezado.
El agua para beber y el alimento efectivos para aumentar la deposición de carne magra y para mejorar la relación de carne magra a grasa en general se preparan al mezclar un compuesto de la presente invención con una cantidad suficiente de alimento para animales para proveer de alrededor de 10.sub.- 3 a aproximadamente 500 ppm del compuesto en el alimento o agua.
El alimento para cerdos, ovejas y cabras medicados preferidos en general contiene de alrededor de 1 a aproximadamente 400 gramos de un compuesto de la presente invención (o combinación) por tonelada de alimento, la cantidad óptima de estos animales usualmente siendo de alrededor de 50 a aproximadamente 300 gramos por tonelada de alimento.
Los alimentos para aves y mascotas domésticas preferidos usualmente contienen de alrededor de 1 a aproximadamente 400 gramos y preferiblemente de alrededor de 10 a aproximadamente 400 gramos de un compuesto de la presente invención (o combinación) por tonelada de alimento.
Para administración parenteral en animales, los compuestos de la presente invención (o combinación) se pueden preparar en la forma de una pasta o una pildora y se administran como un implante, usualmente bajo la piel de la cabeza u oreja del animal en donde se busca aumento en deposición de carne magra y mejora en relación de carne magra a grasa.
Se pueden preparar formulaciones de pasta al dispersar el fármaco en un aceite farmacéuticamente aceptable tal como aceite de cacahuate, aceite de ajonjolí, aceite de maíz o similar.
Las pildoras que contienen una cantidad efectiva de un compuesto de la presente invención, composición farmacéutica o combinación se pueden preparar al mezclar un compuesto de la presente invención o combinación con un diluyente tal como carbocera, cera de carnuba, y similar, y un lubricante, tal como estearato de magnesio o calcio, se puede agregar para mejorar el proceso de peletización.
Desde luego, se reconoce que más de una pildora se puede administrar a un animal para lograr el nivel de dosis deseado que proveerá el aumento en deposición de carne magra y mejora en relación deseada de carne magra a grasa. Además, también se pueden hacer implantes periódicamente durante el periodo de tratamiento a animal a fin de mantener el fármaco propio en el cuerpo del animal.
La presente invención tiene varios aspectos veterinarios ventajosos. Para el propietario de la mascota o veterinario quien desea aumentar la flaqueza y/o cortar grasa no deseada de mascotas, la presente invención provee el medio por el cual esto se puede lograr. Para aves, carne y criaderos de cerdos, la utilización del método de la presente invención produce animales más magros que ordenan precios de venta más altos de la industria de carne.
EJEMPLOS A menos que se especifique lo contrario, los materiales de partida en general están disponibles a partir de fuentes comerciales tal como Aldrich Chemicals Co. ( ilwaukee, Wl), Lancaster Synthesis, Inc. (Windham, NH), Acros Organics (Fairlawn, NJ), Maybridge Chemical Company, Ltd. (Cornwall, Inglaterra) y Tyger Scientific (Princeton, NJ). Ciertas abreviaciones comunes y acrónimos se han empleado que pueden incluir: AcOH (ácido acético), BOP (hexafluorofosfato de benzotriazo- -iloxitris-(dimetilamino)fosfonio), DBU (1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno), CDI (1 , 1 '-carbonildimidazol), DCM (diclorometano), DEA (dietilamina), DMAP (4-dimetilaminopiridina), DMF (?/,?/'-dimetilformamida), DIVISO (dimetilsulfóxido), EDCI (?/-(3-dimetilaminopropil)-/V'-etilcarbodiimida), Et20 (éter dietílico), EtOAc (acetato de etilo), EtOH (etanol), HATU (2-(1 H-7-azabenzotriazol-1 -il)-1 , 1 ,3,3-tetrametilo uronio hexafluorofosfato metanaminio), HBTU (0-benzotriazol-1-il-A/, N, N', ?/'-tetrametiluronio hexafluoro fosfato), HOBT (1-hidroxibenzotriazol), IPA (alcohol isopropílico), KHMDS (hexametildisilizano de potasio), MeOH (metanol), MTBE (éter ter-butilmetílico) , NaBH(OAc)3 (triacetoxiborhidrato de sodio), NaHMDS (hexametildisilizano de sodio), NMP (/V-metilpirrolidona); SEM ([2- (trimetils¡lil)etoxi]metilo), TFA (ácido trif luoroacético) , THF (tetrahidrofurano), y T3P (anhídrido de ácido fosfónico de propano).
Se realizaron reacciones en aire o, cuando se emplearon reactivos o intermediarios sensibles a oxígeno o humedad, bajo una atmósfera inerte (nitrógeno o argón). Cuando sea apropiado, se secaron aparatos de reacción al vacío dinámico usando una pistola de calor, y se emplearon solventes anhidros (productos Sure-Seal™ de Aldrich Chemical Company, Milwaukee, Wisconsin o productos DriSolv™ de EMD Chemicals, Gibbstown, NJ). Se usaron solventes y reactivos comerciales por irradiación de microondas usando Biotage Initiator o microondas Personal Chemistry Emuys Optimizer. Se monitoreó progreso de reacción usando cromatografía de capa delgada (TLC, por sus siglas en inglés), cromatografía liquida-espectrometría de masa (LCMS, por sus siglas en inglés), cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC, por sus siglas en inglés), y/o análisis de cromatografía de gas-espectrometría de masa (GCMS, por sus siglas en inglés). Se realizó TLC en placas de gel de sílice pre-cubiertas con un indicador de fluorescencia (254 nm excitación longitud de onda) y se visualizó bajo luz UV y/o con l2, KMn0 , CoCI2, ácido fosfomolíbdico, y/o manchas de molibdato de amonio cérico. Se adquirieron datos de LCMS en un instrumento Agilent 1100 Serie con un a uto m ue st read or Leap Technologies, columnas Gemini C18, gradientes de MeCN/agua, y TFA, ácido fórmico, o modificadores de hidróxido de amonio. Se analizó el eluyente de columna usando escaneo de espectrómetro de masa Waters ZW en modos de iones positivos y negativos de 100 a 1200 Da. También se usaron otros instrumentos similares. Se adquirieron datos de HPLC en un instrumento Agilent 1100 Serie usando columnas Gemini o XBridge C18, gradientes de MeCN/agua, y TFA o modificadores de hidróxido de amonio. Se adquirieron datos de GCMS usando un horno Hewlett Packard 6890 con un inyector HP 6890, columna HP-1 (12 mx0.2mmx0.3nm), y gas portador de helio. La muestra fue analizada en un escaneo detector selectivo de masa HP 5973 de 50 a 550 Da usando ionización de electrones. Se realizaron purificaciones por cromatografía líquida de rendimiento mediano (MPLC, por sus siglas en inglés) usando Isco CombiFlash Companion, AnaLogix IntelliFlash 280, Biotage SP1, o instrumentos Biotage Isolera One y cartuchos de sílice pre-empacados Isco RediSep o Biotage Snap. Se realizaron purificaciones quirales por cromatografía fluida supercrítica quiral (SFC, por sus siglas en inglés) usando instrumentos Berger o Thar; ChiralPAK-AD, -AS, -IC, Chiralcel-OD u -OJ columnas; y mezclas de C02 con MeOH, EtOH, ¡PrOH, o MeCN, solos o modificados usando TFA o ¡PrNH2. Se usó detección de UV para disparar colección de fracción Se reportan datos de espectrometría de masa de análisis LCMS. Se registraron espectros de resonancia magnética nuclear (NMR, por sus siglas en inglés) en espectrómetros Varian de 400 y 500 MHz. Se expresan cambios químicos en partes por millón (ppm, d) referenciados a los picos residuales de solvente desuterado. Se adquirieron datos de SFC analíticos en un instrumento analítico Berger como se describió antes. Se adquirieron datos de rotación óptica en un polarímetro PerkinElmer modelo 343 usando una celda de 1 dm.
La concentración al vacío se refiere a evaporación de solvente bajo presión reducida usando un evaporador giratorio.
A menos que se señale lo contrario, se realizaron reacciones químicas a temperatura ambiente (aproximadamente 23 grados Ce Is i us) .
Los compuestos e intermediarios descritos más adelante fueron nombrados usando la convención de nombre provista con ChemBioDraw Ultra, versión 12.0 (CambridgeSoft Corp., Cambridge, Massachusetts). La convención de nombre provista con ChemBioDraw Ultra, versión 12.0 es bien conocida por aquellos expertos en la técnica y se cree que la convención de nombre provista con ChemBioDraw Ultra, versión 12.0 en general se comporta con las recomendaciones de la IUPAC (Unión internacional para química pura y aplicada) en Nomenclatura de Química Orgánica y las reglas de índice de CAS. A menos que se indique lo contrario, todos los reactivos fueron obtenidos comercialmente sin más purificaciones o se prepararon usando métodos conocidos en la literatura.
Se dan cambios químicos de espectroscopia magnética nuclear de protones (1H NMR) en partes por millón a partir de tetrametilsilano y se registraron en un espectrómetro Varían Unity 300, 400 o 500 MHz (megaHertz) (Varían Inc.; Palo Alto, CA). Se expresan cambios químicos en pares por millón de tetrametilsilano. Las formas pico se denotan de la siguiente manera, s, singlete; d, doblete; t, triplete; q, cuarteto; quin, quinteto; m, multipleto; br s, singlete amplio. Se realizó espectrometría de masa (MS, por sus siglas en inglés) vía ionización química a presión atmosférica (APCI, por sus siglas en inglés), ionización de electroaspersión (ESI, por sus siglas en inglés), ionización de impacto de electrones (El, por sus siglas en inglés), o fuentes de ionización de barrido de electrones (ES). Se realizó cromatografía de gel de sílice primariamente usando un Biotage de presión media o sistemas ISCO usando columnas pre-empacadas por varios vendedores comerciales incluyendo Biotage e ISCO. Se realizaron microanálisis por Quantitative Technologies Inc. y estaban dentro de 0.4% de los valores calculados.
Los términos "concentrado" y "evaporado" se refieren a la eliminación de solvente a presión reducida en un evaporador giratorio con una temperatura de baño de menos de 60°C. La abreviación "min" y "h" significan "minutos" y "horas", respectivamente. El término "TLC" se refiere a cromatografía de capa delgada, "temperatura ambiente" significa una temperatura entre 18 a 25°C, "GCMS" se refiere a cromatografía de gas-espectrometría de masa, "LC S" se refiere a cromatografía liquida-espectrometría de masa, "UPLC" se refiere a cromatografía líquida de rendimiento ultra y "HPLC" se refiere a cromatografía líquida de presión alta.
Se puede realizar hidrogenación en un Parr Shaker bajo gas de hidrógeno a presión, o en aparato de hidrogenación de flujo Thales-nano H-Cube a hidrógeno completo y una velocidad de flujo entre 1-2 mL/min a temperatura especificada.
Se realizó calentamiento de microondas de reacciones usando un sintetizador de microondas de iniciador Biotage®.
Se midieron los tiempos de retención de HPLC, UPLC, LCMS y GCMS usando los siguientes métodos: Método A: Columna: Waters Atlantis dC18 4.6x50 mm, 5 µ??; fase móvil A: 0.05% ácido trifluoroacético en agua (v/v); fase móvil B: 0 05% ácido trifluoroacético en acetonitrilo (v/v): gradiente: 95% A/5% B lineal a 5% A/95% B en 4.0 minutos, mantenido a 5% A/95% B durante 5.0 minutos; velocidad de flujo: 2.0 mL/minuto.
Método B: Columna: Waters XBridge C18 4.6x50 mm, 5 µ??; fase móvil A: 0.03% hidróxido de amonio en agua (v/v); fase móvil B: 0.03% hidróxido de amonio en acetonitrilo (v/v); gradiente: 95% A/5% B lineal a 5% A/95% B en 4.0 minutos, mantenido a 5% A/95% B durante 5.0 minutos; velocidad de flujo: 2.0 mL/minuto.
Método C: Columna: XBridge C18 2.1 x 50 mm, 5 um; fase móvil A: 0.0375% ácido trifluoroacético en agua; fase móvil B: 0.01875% ácido trifluoroacético en acetonitrilo; gradiente: inicial - 1% B, tiempo (min)/%B: 0.00/1, 0.60/5, 4.00/100, 4.30/1, 4.70/1; velocidad de flujo: 0.8 mL/min; temperatura de columna: 50°C Método D: Columna: XBridge C18 2.1 x 50 mm, 5 µ?t?; fase móvil A: 0.0375% ácido trifluoroacético en agua; fase móvil B: 0.01875% ácido trifluoroacético en acetonitrilo; gradiente: inicial - 10% B, tiempo (min)/%B: 0.00/10, 0.50/10, 4.00/100, 4.30/10, 4.70/10; velocidad de flujo: 0.8 mL/min; temperatura de columna: 50°C Método E: Columna: Zorbax SB-C18 (2.1 x 30)mm, 3.5 µ??; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en agua; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; gradiente: inicial - 2%, tiempo (min)/%B: 0.00/2, 0.40/2, 1.60/90, 2.9/90, 3.0/2; velocidad de flujo: 0.8 mL/min; temperatura de columna: 40°C Método F: Columna: AQUITY BEH C-18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µ??; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo, fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; gradiente: tiempo (min)/%B: 0/90, 0.7/90, 2/15, 4/15, 4.01/90; flujo: 0.5 mL/min.
Método G: Columna: AQUITY BEH C-18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µ?t?; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo, fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; gradiente: tiempo (min)/%B: 0/90, 0.7/90, 2/55, 3/55, 3.8/5, 5.8/5, 6/90; flujo: 0.5 mL/min.
Método H: Columna: XBridge C-18, 4.6 x 150 mm, 3.5 µG?; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 5 mM acetato de amonio en agua; tiempo (min)/%B: 0/95, 1/95, 3/5, 10/5, 10.5/95; flujo: 0.8 mL/min.
Método I: Columna: XBridge C-18, 4.6 x 75 mm, 3.5 µ??; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; t¡empo(min)/%B: 0/90, 0.8/90, 1.8/55, 3/5, 6.5/5, 7/90; flujo: 0.8 mL/min, temperatura de columna: 40°C Método J: Columna: Symmetry C-18, 2.1 x 50 mm, 3.5 µ??; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; tiempo(min)/%B: 0/90, 0.5/90, 2/55, 3/55, 3.5/10, 6/10, 7/90; flujo: 0.5 mL/min, temperatura de columna: 45°C Método K: Columna: Discovery C8, 250 x 4.6 mm; fase móvil A: metanol; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; tiempo(min)/%B: 0/80, 2/80, 8/20, 18/20, 19/20, 20/80; velocidad de flujo: 1.0 mL/min, temperatura de columna: 40°C Método L: Columna. Phenomenex Gemini-NX, 4.6mm x 50mm, C18, 3µ??, 110 A; fase móvil 1: 0.1% ácido fórmico en agua (v/v); fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo (v/v); gradiente: condiciones iniciales: A-95%:B-5%, rampa lineal a A-0%:B-100% sobre 0.0-4.10 min, mantenido a A-0%:B-100% de 4.10-4.50 min, regreso a condiciones iniciales: 4.50-5.0 min; velocidad de flujo: 1.5 mL/minuto. Temperatura: 60°C Método M: Columna: Phenomenex Gemini-NX, 4.6mm x 50mm, C18, 3µ??, 110 A; fase móvil 1: 0.1% ácido fórmico en agua (v/v); fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo (v/v); gradiente: condiciones iniciales: A-95%:B-5%, rampa lineal 0.0-1.90 min; mantenido de 1.90-2.25 min, regreso a condiciones iniciales: 2.25-2.50 min; velocidad de flujo: 1.50 mL/minuto. Temperatura: 60°C Método N: Columna: Waters Acquity UPLC BEH, 2.1 mm x 50 mm, C18, 3µ??, 1.7µ??; temperatura de columna 60°C; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en agua (v/v); fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo (v/v); flujo-1.25ml/min; gradiente: condiciones iniciales: A-95%:B-5%, mantenido a inicial A-5%:B-95% de 0.8-0.9 min, regreso a condiciones iniciales 0.9-1.2min Método O: Columna: 12 m x 0.2 mm; HP-1 siloxano de metilo, 0.33 µ?? película, 1.0 mL/min flujo de columna; 7.6 min: temperatura de horno inicial 105°C, 0.1 min mantenido, 30°C/min rampa a 300°C punto final a 7.6 min; parámetros de entrada: entrada frontal, división 30:1, He, 8 PSI presión, 250°C inyector, 33.9 mL/min flujo total; instrumento Agilent 5890 GC horno con Agilent 5973 detector selectivo de masa Método P: Columna: Waters Acquity UPLC BEH, 2.1mm x 50mm, C18, 1.7µ??; temperatura de columna: 60°C; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en agua (v/v); fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo (v/v); flujo-1.25ml/min; gradiente: condiciones iniciales: A-95%:B-5%; mantenido a inicial e 0.0 - 0.1 m i n ; rampa lineal a A -5%:B-95% sobre 0.1-2.6min; mantenido a A-5%:B-95% de 2.6-2.95min; regreso a condiciones iniciales: 2.95-3.0min Método Q: Columna: Phenomenex Kinetex C18 50 x 3.0 mm 2.6 µp?; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en agua; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en metanol; gradiente: tiempo (min)/%B: 0.00/0, 0.30/0, 3.00/100, 3.70/100, 3.71/0, 4.00/0; flujo. 1.0 mL/min; Método R: Columna: AQUITY BEH C-18, 2.1 x 50 mm, 1.7µ??: fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; tiempo(min)/%B: 0/90, 0.7/90, 2/15, 4/15, 4.01/90; flujo: 0.5 mL/min Método S: Columna: AQUITY BEC C18 1.7 µpt?, 2.1 x 50 mm; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; tiempo(m¡n)/%B: 0/100, 1.5/100, 4.0/10, 6.0/10, 6.01/100; flujo: 0.4 mL/min; temperatura de columna: 40°C Método T: Columna: Acquity BEC C18 (2.1x50) 1.7 µ??; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; t¡empo(min)/%B: 0.00/2, 1.30/90, 1.55/90, 1.56/2; velocidad de flujo: 1.0 mL/min; temperatura de columna: 50°C Método U: Columna: Resteck C18 (2.1x30) 3.0 µp?; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en agua; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; t¡empo(min)/%B: 0.00/2, 1.33/90, 1.55/90, 1.56/2; velocidad de flujo: 1.0 mL/min; temperatura de columna: 25°C Método V: Columna: ACQUITY CSH C18 1.7 µp? 2.1 x 50; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en agua; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; tiempo(min)/%B: 0.00/2, 1.3/90, 1.55/90, 1.56/2; velocidad de flujo: 1.0 mL/min; temperatura de columna: 50°C Método W: Columna. ACQUITY BEC C18 (2.1x50) 1.7 µ? ; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; tiempo(min)/%B: 0/90, 0.7/90, 2/10, 4/10, 4.01/90; velocidad de flujo: 0.5 mL/min; temperatura de columna: 40°C Método X: Columna: XBridge C-18 4.6 x 150mm 3.5 µ??; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 5 mM acetato de amonio en agua; tiempo(min)/%B: 0/95, 1/95, 3/5, 8/5, 9/95, 10/80; velocidad de flujo: 0.8 mL/min Método Y: Columna: XBridge C-18 4.6x150mm 3.5 µp?; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; tiempo(min)/%B: 0/95, 2/95, 4/5, 6.5/5, 7/100, 8/100; velocidad de flujo: 0.8ml_/m¡n Método Z: Columna: X-Bridge C18 4.6x75mm 3.5µ??: fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo, fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; Tiempo(min)/%B: 0/90, 0.8/90, 2.0/55, 3.0/55, 3.5/10, 6.0/10, 7/90; flujo. 0.8mL/min, temperatura de columna: 35°C; Método A1: Columna: X-Bridge C18 4.6x150mm 3.5µ??: fase móvil A: acetonitrilo:agua (90:10) 0.1% ácido fórmico, fase móvil B: agua:acetonitrilo (90:10) 0.1% ácido fórmico; Tiempo(min)/%B: 0/100, 1/100, 2.0/50, 4/5, 6.5/5, 8/100; flujo. 0.8mL/min, temperatura de columna: 40°C; Método B1: Columna: XBRIDGE-C18 4.6x75mm 3.5µ??; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 5mM acetato de amonio; tiempo(min)/%B: 0/95, 2/95, 3.5/5, 5/5, 6.5/95, 7/95; flujo: 0.8ml_/min, temperatura de columna: 40°C; Método C1: Columna: Sy m m etry-C 18 2.1 x50mm 3.5µ??; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico, fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; tiempo(min)/%B: 0/90, 0.5/90, 2/55, 3/55, 3.5/10, 6.5/10, 7/90; flujo: 0.5mL/min, temperatura de columna: 40°C Método D1: Columna: Nucleodurbiowidepore C8 4.6x50mm, 5µ??; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; tiempo(min)/%B: 0/80, 0.5/80, 1.2/10, 5.5/10, 6/80; flujo: 0.7mL/min, temperatura de columna: 45°C Método E1: Nucleodurbiowidepore C8, 4.6x50mm, 5µm; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua, tiempo (min)/%B: 0/80, 0.5/80, 1.2/10, 5.5/10, 5.8/80, 6/80; flujo: 0.7mL/min; temperatura de columna: 50°C Método F1: HP-5 (30m x 0.32mm x 0.25,um) N2 = 1.2ps¡, lny = 230°C, Det = 250°C, División = 20: 1 , ?.? = 3.0µ1_, programa: 80°C/min/20oC/min/250°C/15min Método G1: Zorbax SB-C18 2.1x30mm, 3.5µ??: fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1 ácido fórmico en agua; gradiente: tiempo(min)/%B: 0/90, 1/90, 2.5/15, 4.5/15, 4.8/90, 5/90; flujo: 0.6 ml/min; temperatura: 40°C Método H: columna: Symmetry C18 2.1x50 mm 3.5 µ?t?; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; tiempo(min)/%B: 0/90, 0.5/90, 2/55, 3/55, 3.5/10, 6.5/10, 7/90; flujo: 0.5 mL/min; temperatura de columna: 45°C Método 11: columna: Symmetry RP-18 4.6x75mm 3.5 µ?t?; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 5mM acetato de amonio en agua; tiempo(min)/%B: 0/80, 1/80, 2.0/45, 6.3/45, 7.2/10, 10/10, 10.2/80; flujo: 0.8ml_/min; temperatura de columna: 30°C Método J1: Columna: Symmetry RP-18 4.6x75mm, 3.5µ??; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 5mM acetato de amonio en agua; tiempo (min)/%B: 0/80, 1/80, 1.5/5, 8.5/5, 9/80, 10/80; flujo: 0.7mL/min.
Método K1: Columna: ZORBAX C-18 4.6x50mm, 1.8µ?p; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 5mM acetato de amonio en agua; tiempo (min)/%B: 0/80, 1.0/80, 1.5/5, 5.5/5, 6.0/80, 7.0/80; flujo: 0.7mL/min.
Método L1: Columna: Symmetry-C18 2.1 x50mm, 3.5µ??; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; tiempo(min)/%B: 0/90, 0.7/90, 1.5/10, 4/10, 4.5/90, 5/90; flujo: 0.5mL/min, temperatura de columna: 40°C Método M1: Columna: AQUITY BEH C18 1.7µ??, 2.1x50mm; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; tiempo(min)/%B: 0/100, 1 5/100, 4.0/20, 4.5/20, 5.5/100, 6/100: flujo: 0.4mL/min; temperatura de columna: 40°C Método N1: Columna: AQUITY BEH C-18 2.1 x50mm, 1.7 µpt?; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en 90:10 acetonitrilo:agua; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en 90:10 agua:acetonitrilo; tiempo(min)/%B: 0/100, 0.7/100, 2/55, 3/55, 3.8/5, 5.8/5, 6.0/100; flujo: 0.5mL/min; temperatura de columna: 40°C Método 01: Columna: Zorbax Eclipse C18 4.6x50mm, 1.8µ??; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; Tiempo(min)/%B: 0/80, 0.5/80, 1.5/5, 5.5/5, 6/80, 7/80; flujo: 0.7 m L/m i n Método P1: Columna: Symmetry C-18, 2.1x50mm, 5µ??; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; Tiempo(min)/%B: 0/90, 1.5/90, 2/15, 5.5/15, 6/90, 7/90; flujo: 0.5 mL/min, temperatura de columna: 40°C Método Q1: Columna: X-Bridge C18 4.6x75mm, 3.5µ?t?; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en aceton it ri I o : ag ua (90:10); fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua.acetonitrilo (90:10); Tiempo(min)/%B: 0/90, 1/90, 2/50, 4/5, 7.5/5, 8.0/90; flujo: 0.8mL/min, temperatura de columna: 40°C Método R1: Columna: XBRIDGE-C18, 4.6x75mm, 3.5µm; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 5mM acetato de amonio; Tiempo(min)/%B: 0/100, 2/100, 2.8/55, 3.2/5, 6.8/5, 7.5/100; flujo: 0.8mL/min, temperatura de columna: 40°C Método S1: Columna: X-Bridge C18, 4.6x75mm, 3.5µ??; fase móvil A: acetonitrilo:agua (90:10) 0.1% ácido fórmico; fase móvil B: agua:acetonitrilo (90:10) 0.1% ácido fórmico; Tiempo(min)/%B: 0/90, 1/90, 2.0/50, 4/5, 6.5/5, 8/90; flujo: 0.8mL/min, temperatura de columna: 40°C Método T1: Columna: XBRIDGE-C18, 4.6x75 MM, 3.5µm; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 5mM acetato de amonio; Tiempo(min)/%B: 0/100, 2/100, 2.8/5, 6.8/5, 7.5/100; flujo: 0.8 mL/min, temperatura de columna: 40°C Método U1: Columna: Sy m metry-C 18 , 2.1x50mm, 3.5µ??; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; Tiempo(min)/%B: 0/90, 1.5/90, 2/15, 5.5/15, 6/90, 7/90; flujo: 0.5 mL/min, temperatura de columna: 45°C Método V1: Columna: X-Bridge C18 4.6x75mm, 3.5µ??; fase móvil A: acetonitrilo:agua (90:10) 0.1% ácido fórmico; fase móvil B: agua:acetonitrilo (90:10) 0.1% ácido fórmico en agua; Tiempo(min)/%B: 0/100, 1/100, 1.8/50, 3.1/5, 7/5, 7.01/100; flujo: 0.8 mL/min, temperatura de columna: 40°C Método W1: Columna: X-Bridge C18 4.6x75mm, 3.5µ??; fase móvil A: a ceton itri I o: ag u a (90:10) 0.1% ácido fórmico; fase móvil B: agua:acetonitrilo (90:10) 0.1% ácido fórmico en agua; Tiempo(min)/%B: 0/100, 1/100, 2.0/50, 4/5, 7.5/5, 8/100; flujo: 0.8 mL/min, temperatura de columna: 40°C Método X1: Columna: XBridge-C18 4.6x75mm, 3.5,um; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 5Mm acetato de amonio; Tiempo(min)/%B: 0/100, 2/55, 2.8/5, 6.8/5, 7.5/100; flujo: 0.8 mL/min, temperatura de columna: 40°C Método Y1: Columna: X-Bridge C18 4.6x75mm, 3.5µ?t?; fase móvil A: a ceton itri I o: ag u a (90:10) 0.1% ácido fórmico; fase móvil B: agua:acetonitrilo (90:10) 0.1% ácido fórmico en agua; Tiempo(min)/%B: 0/100, 1/100, 1.8/50, 3.1/5, 7/5, 7.01/100; flujo: 0.8 mL/min, temperatura de columna: 40°C Método Z1: Columna: Symmetry-C18 2.1x50mm 3.5µ??; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; Tiempo(min)/%B: 0/90, 0.5/90, 2.0/55, 3.0/55, 3.5/10, 6.0/10, 7.0/90; flujo: 0.5 mL/min, temperatura de columna: 45°C Método A2: Columna: Symmetry-C18 2.1x50mm, 3.5µ??; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; Tiempo(min)/%B: 0/90, 1.5/90, 2/15, 4.5/15, 6.5/90, 7.0/90; flujo: 0.5 mL/min, temperatura de columna: 45°C Método B2: Columna: Symmetry-C18 2.1x50mm 3.5µG?; fase móvil A: acetonitrilo; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en agua; Tiempo(min)/%B: 0/90, 1.5/90, 2/15, 5.5/15, 6.5/90, 7/90; flujo: 0.5 mL/min, temperatura de columna: 45°C Preparación de Intermediarios y Ejemplos Intermediario 1 : diclorhidrato de (R)-C\ -(5,6-Diaminopiridin-2-il)-piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : 3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidina-1 -carboxilato de (R)-'\-íer-buti lo A una solución de ácido (R)-1 -(fer-butoxicarbonil)piperidina-3-carboxílico (50.64 g, 220.9 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (552 mL) a 2°C se agregó 1 , 1 '-carbonildimidazol (77.59 g, 460 mmol). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas, se enfrió a 10°C y después se agregó pirrolidina (74 mL, 890 mmol) lentamente. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y agua (200 mL) se agregó al residuo. La mezcla fue extraída con acetato de etilo (2x). Los orgánicos combinados se lavaron con ácido clorhídrico acuoso (200 mL x 4, 1 N) y con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (200 mL x 2). Los orgánicos se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar 3-( pi rro I id i n a- 1 -carbonil)piperidina-1 -carboxilato de (ft)-fer-butilo como un sólido blando (58.82 g). El compuesto fue usado para el siguiente paso sin más purificación. H N R (400 MHz, CD3OD) d 1.39-1.54 (m, 10H), 1.59-1.65 (m, 1H), 1.67 (d, 1H), 1.69-1.77 (m, 1H), 1.80-2.05 (m, 5H), 2.58 (tt, 1H), 2.77 (br s, 1H), 3.33-3.46 (m, 2H), 3.51-3.66 (m, 2H), 3.98-4.12 (m, 2H); MS (AP + ) (M + H) 283.3.
Paso 2: Clorhidrato de (f?)-piperidin-3-il(pirrolidin-1 -il)metanona A una solución de 3-(pi rro lí d i n a-1 -carbonil)piperidina-1 -carboxilato de ( )-fer-butilo (58.82 g, 208.3 mmol) en diclorometano anhidro (100 mL) se agregó cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (260 mL, 1040 mmol, 4M). La mezcla de reacción fue agitada vigorosamente a temperatura ambiente durante 1 hora. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dejó reposar durante la noche a temperatura ambiente. El residuo fue titulado con éter (250 mL). El éter se decantó y se agregó diclorometano seguido por sonicación en un baño caliente. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el sólido resultante fue colocado al alto vacío a 40°C durante 1 hora para dar clorhidrato de (R)-piperidin-3-il(pirrolidin-1 -il)metanona (48.41 g). El material fue usado para el siguiente paso sin más purificación. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) d 1.75-2.05 (m, 8H), 3.04-3.17 (m, 2H), 3.19-3.28 (m, 3H), 3.35-3.66 (m, 4H); MS (ES + ) (M + H) 183.3.
Paso 3: (R)-(1-(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una suspensión de clorhidrato de ( ?)-piperidin-3-il(pirrolidin-1 -il)metanona (45.56 g, 208.3 mmol) en acetonitrilo anhidro (200 mL) a 10°C se agregó trietilamina (50 ml_). La suspensión fue vertida en un frasco de 3 cuellos de 2L equipado con un termómetro y un agitador magnético. Al frasco original se agregó acetonitrilo anhidro seguido por sonicación y adición de trietilamina (80 ml_). Las suspensiones se combinaron y enfriaron a 10°C y se agregó 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (32.97 g, 190 mmol). La solución amarillo brillante fue agitada bajo nitrógeno mientras la temperatura aumentó gradualmente a 80°C en 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. La suspensión resultante se filtró y los sólidos se enjuagaron con acetato de etilo. El filtrado se concentró bajo presión reducida. Una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (500 mL) se agregó al residuo y la mezcla fue extraída con acetato de etilo (2x). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, concentraron bajo presión reducida y se secaron durante 18 horas al alto vacío para dar (R)-(1 -(5-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona como una espuma amarilla (63.51 g). 1H NMR (400 Hz, CD3OD) d 1.47-1.64 (m, 1H), 1.71-2.07 (m, 7H), 2.68 (tt, 1H), 3.01 (q, 2H), 3.33-3.46 (m, 2H), 3.52 (dt, 1H), 3.60-3.70 (m, 1H), 4.41 (br s, 1H), 4.71 (d, 1H), 6.23 (d, 1H), 8.05 (d, 1H); MS (ES + ) (M + H) 320.4.
Paso 4: Diclorhidrato de (f?)-(1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-¡l)(pirrolidin-1-il)metanona En una botella Parr se agregó 10% paladio-sobre-carbón (50% húmedo, 1487.2 mg) seguido por etanol (10 ml_) que previamente se burbujeó con nitrógeno y se enfrió a 0°C con un baño de agua helada. Se agregó (R)-(1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (10.612 g, 33.228 mmol) en etanol (84 ml_) en la botella Parr seguido por ácido clorhídrico concentrado (8.59 ml_, 99.6 mmol) disuelto en etanol (10 ml_) bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se purgó con nitrógeno y se evacuó 3 veces. La mezcla se sometió a una atmósfera de hidrógeno (45 PSI). Una caída en presión fue observada y se aumentó a 46 PSI. Este proceso se repitió varias veces sobre un periodo de 30 minutos. La mezcla de reacción fue agitada por un total de 1 hora. Entonces se filtró a través de celita y el residuo se enjuagó con etanol (1 L). El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se redisolvió en metanol. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el sólido se secó al alto vacío para dar el compuesto del título (12.0 g). El material se usó sin más purificación. 1H N R (400 MHz, CD3OD) d 1.67-1.81 (m, 2H), 1.83-2.10 (m, 6H), 2.85-2.95 (m, 1H), 3.32-3.55 (m, 5H), 3.66 (dt, 1H), 3.89 (d, 1H), 3.97 (dd, 1H), 6.38 (d, 1H), 7.64 (d, 1H); MS (ES + ) (M + H) 290.2.
Preparación alternativa de (R)-(1-(5,6-diaminopirid¡n-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de (/ )-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-i I ) ( pi rro I id i n- 1 -il)metanona (150 mg, 0.47 mmol) en etanol (20 ml_) se agregó 10% paladio-sobre-carbón (100 mg). La mezcla de reacción fue agitada bajo una atmósfera de hidrógeno usando un globo relleno con gas de hidrógeno durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró a través de Celita y el residuo fue enjuagado con etanol bajo una atmósfera de nitrógeno. El filtrado se usó sin más purificación.
Preparación alternativa para (R)-( 1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-¡l)-piperidin-3-il)(p¡rrolidin-1 -iQmetanona (intermediario 1 , pasos 1-3) Paso 1 : 3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidina-1 -carboxilato de (R)-ter-butilo Se agregó ácido (R)-1 -(íer-butoxicarbonil)piperidina-3-carboxílico (6.0 kg, 26 mol) en porciones a una mezcla de 1 ,1 '-carbonildiimidazol (5.1 kg, 31 mol) en tetrahidrof urano (48 L) a una temperatura de 18-22°C. La mezcla se mantuvo a esta temperatura durante 3 horas, después se agregó pirrolidina (2 28 kg, 32 mol) al mismo tiempo manteniendo una temperatura de 18-25°C, y la mezcla de reacción resultante se mantuvo a esta temperatura durante 2 horas. Entonces se agregó ciclohexano (48 L) y solución de carbonato de potasio acuoso (preparado de 4.8 kg carbonato de potasio y 48 L agua) en secuencia, y la mezcla fue agitada durante 30 minutos antes de la separación de las capas. La capa orgánica entonces fue lavada con otra porción de solución de carbonato de potasio acuoso (preparado a partir de 4.8 kg carbonato de potasio y 48 L agua). Las capas acuosas combinadas fueron extraídas con ciclohexano (30 L). Las capas orgánicas combinadas entonces se lavaron con solución de cloruro de sodio acuoso (preparada a partir de 3.0 kg cloruro de sodio y 30 L agua). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio (2.0 kg), después el ciclohexano fue eliminado por destilación bajo presión reducida a 45°C. Se agregó isopropanol (43 L) y la mezcla fue agitada durante 30 minutos. La presencia de 3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidina-1 -carboxilato de (í?)-íer-butilo se confirmó por análisis de HPLC: tiempo de retención de HPLC: 5.98 min (columna: Halo C18, 4.6 x 150 mm, 2.7µ??; fase móvil A: 0.1% ácido ortofosfórico y 2% acetonitrilo en agua, fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: 20%B a 90%B en 7 minutos, después se mantuvo durante 3 minutos; flujo: 0.8 mL/min; temperatura: 25°C; detección de UV a 210 y 226 nM). Este material se usó en el siguiente paso sin purificación adicional.
Paso 2: Clorhidrato de (f?)-piperidin-3-il(pirrolidin-1 -il)metanona En un periodo de 1 hora, se agregó ácido clorhídrico (9.8 kg) a la solución de 3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidina-1 -carboxilato de (R)-íer-butilo en isopropanol del paso previo, manteniendo a temperatura de 20-25°C. La mezcla de reacción se calentó a 50-55°C y se mantuvo a esa temperatura durante 6 horas. Se eliminó solvente por destilación bajo presión reducida a 50°C. Se condujeron en secuencia cuatro ciclos de solvatación y después destilación bajo presión reducida a 50°C: isopropanol (2 x 14.5 L), tolueno (18.5 L), y tetrahidrofurano (12.0 L). Otra porción de tetrahidrofurano (12.0 L) se agregó y la mezcla fue agitada a 25-30°C durante 1 hora. La mezcla se centrifugó y el líquido madre fue eliminado; la torta resultante se lavó con tetrahidrofurano (3.7 L), después se secó a 40-50°C para dar clorhidrato de ( )-piperidin-3-il(pirrolidin-1-il)metanona (4.8 kg, 84% en dos pasos). Tiempo de retención de HPLC: 1.67 minutos (columna: Halo C18, 4.6 x 150 mm, 2.7µ??; fase móvil A: 0.1% ácido ortof osf órico y 2% acetonitrilo en agua, fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: 20%B a 90%B en 7 minutos, después se mantuvo durante 3 minutos; flujo: 0.8 mL/min; temperatura: 25°C; detección de UV a 210 y 226 nM).
Paso 3: (R)-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se agregó trietilamina (4.65 kg, 46 mol) en un periodo de 1 hora a una mezcla de clorhidrato de (R)-piperidin-3-il(pirrolidin-1 -il)metanona (4.8 kg, 22 mol) y acetonitrilo (48 L), manteniendo una temperatura de 15-20°C. La mezcla se mantuvo a esa temperatura durante 30 minutos, después se calentó a 38-42°C. Se agregó 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (3.8 kg, 22 mol) en forma de porción, y la mezcla se mantuvo a 38-42°C durante 3 horas. La mezcla entonces se enfrió a 15-20°C y se agregó en secuencia una solución acuosa de cloruro de amonio (preparada a partir de 6.24 kg de cloruro de amonio y 48 L de agua) y acetato de etilo (48 L), y las capas fueron agitadas y después separadas. La capa acuosa además fue extraída con acetato de etilo (2 x 24 L). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con una solución acuosa de cloruro de sodio (preparado a partir de 4.8 kg de cloruro de sodio y 24 L de agua) y después se secaron con sulfato de sodio (1.92 kg). La capa orgánica fue eliminada y el solvente fue evaporado bajo presión reducida a 40°C. Se agregó acetato de etilo (14.4 L) al producto crudo, y la mezcla se calentó a 35-40°C y se mantuvo a esa temperatura durante 15 minutos. La mezcla se enfrió a 20-25°C y se mantuvo a esta temperatura durante 6 horas, después se enfrió a 10-15°C y se mantuvo a esa temperatura durante 1 hora. La suspensión se centrifugó y el líquido madre fue eliminado. La torta resultante se lavó con acetato de etilo frío (4.8 L) y después se secó a 40-50°C para dar (R)-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)píperid¡n-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (4.6 kg, 66%). Tiempo de retención de HPLC: 5.30 min (columna: Halo C18, 4.6 x 150 mm, 2.7 µ? ; fase móvil A: 0.1% ácido ortofosfórico y 2% acetonitrilo en agua, fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: 20%B a 90%B en 7 minutos, después se mantuvo durante 3 minutos; flujo: 0.8 mL/min; temperatura: 25°C; detección de UV a 210 y 226 nM). Punto de fundición: 118.5-123.5°C. Contenido de agua por titulación Karl Fischer: 0.36% en peso.
Intermediario 2: Diclorhidrato de (R)-C\ -(4,5-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(p¡rrol¡din-1-il)metanona Paso 1 : (R)-(1-(4-amino-5-nitropirimidin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona Una mezcla de 2-cloro-5-nitropirimidin-4-amina (670 mg, 3.84 mmol, 80% puro), clorhidrato de (f?)-piperidin-3-il(pirrolidin-1 -il)metanona (preparado por el método descrito en los pasos 1 y 2 de intermediario 1 , 560 mg, 2.56 mmol) y trietilamina (0.761 mL, 5.46 mmol) en dimetilsulfóxido (5 mL) se calentó a 100°C durante 5 horas. La mezcla se diluyó con acetato de etilo (80 mL), se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (acetato de etilo/heptano: 40-70-100%) para dar ( )-(1 -(4-amino-5-nitropirim¡din-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona como un sólido amarillo (420 mg). 1H NMR (500 MHz, DMSO-cí6) d 1.45 (t, 1 H), 1.62 (d, 1H), 1.72-1.82 (m, 4H), 1.88 (d, 4H), 2.56 (br s, 1 H), 2.90-3.04 (m, 2H), 3.28 (t, 2H), 3.37-3.62 (m, 2H), 4.59-4.87 (m, 2H), 8.00 (br s, 1H), 8.16 (br s, 1 H), 8.90 (s, 1 H); MS (ES + ) (M + H) 321.2.
Paso 2: Diclorhidrato de (R)-{ 1 -(4 , 5-d iam inopi ri m id in-2-i I ) pi perid i n-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se agregó ácido clorhídrico concentrado (470 µ?, 37% en peso acuoso) a una solución de (R)-(1 -(4-amino-5-nitropirimidin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (380 mg, 1.13 mmol) en metanol (30 mL). La solución se hidrogenó usando el cubo H (10% PD/C, H2 completo, 18°C, 1mL/min). Un segundo ciclo se realizó usando las mismas condiciones. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se co-evaporó con tolueno varias veces para dar el compuesto del título como un sólido amarillo (405 mg). El material se usó sin más purificación. 1H NMR (CD3OD) d 1.68 (d, 1 H), 1.81 (d, 1 H), 1.91 (quin, 3H), 1.96-2 09 (m, 3H), 2.84 (t, 1 H), 3.34-3.47 (m, 4H), 3.52-3.59 (m, 1H), 3.61-3.70 (m, 1H), 4.32 (d, 1H), 4.17 (d, 1 H), 7.70 (s, 1 H); MS (ES + ) (M + H) 291.2.
Preparación alternativa para (R)-(1 -(4,5-diaminopirimidin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución agitada de (R)-(1 -(4-amino-5-nitropirimidin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (300 mg, 0.937 mmol) en etanol (15 ml_) se agregó bajo una atmósfera de nitrógeno una suspensión de 10% paladio-sobre-carbón (300 mg) en etanol. La mezcla de reacción se hidrogenó usando un globo lleno con gas de hidrógeno durante 2 horas a temperatura ambiente. La suspensión se filtró a través de Celita y el filtrado se usó sin más purificación.
Intermediario 3: Ácido 1 -(4-metil-1 /-/-pirazol-1 -¡Dciclopropano-carboxílico Paso 1 : 1 -(4-metil-1 H-pirazol- 1 -il)ciclopropanocarboxilato de ter-butilo En un frasco con el fondo redondo de 25 mL se agregó hidrato de sodio (60% dispersión en aceite mineral, 164.3 mg, 4.1 mmol) y tetrahidrofurano anhidro (8 ml_). La mezcla se enfrió con un baño de agua helada antes de agregar una solución de 4-metilpirazol (204.2 mg, 2.487 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (2 ml_). La mezcla fue agitada en el baño de agua helada durante 30 minutos antes de agregar en forma de gotas 2,4-dibromobutanoato de fer-butilo (0.48 mL, 2.2 mmol) a 0°C. La mezcla de reacción fue agitada a 0°C durante 30 minutos y después a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y se agregó agua y acetato de etilo al residuo. Las capas se separaron y la capa acuosa fue extraída con acetato de etilo (3x). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (0-50% acetato de etilo en heptanos) para dar 1 -(4-m et i I- 1 H-p i razo I- 1 -i I ) ciclo pro pa noca rbox i I ato de fer-butilo (218 mg, 44%). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.33 (s, 9H), 1.45-1.51 (m, 2H), 1.61-1.67 (m, 2H), 1.98-2.01 (m, 3H), 7.21 (s, 1H), 7.23-7.26 (m, 1 H).
Paso 2: Ácido 1 -(4-met¡l-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilico En un frasco en forma de pera de 100 mL que contiene 1-(4-metil-1 /-/-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de fer-butil (218 mg, 0.981 mmol) se agregó diclorometano (5 mL) y ácido trif luoroacétíco (0.2 mL, 3 mmol). La solución clara fue agitada a temperatura ambiente durante 30 minutos después de lo cual se agregó otros 0.3 mL de ácido trifluoroacético. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 45 minutos y se agregaron otros 0.3 mL de ácido trif luoroacético. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente y exceso de ácido trifluoroacético fueron eliminados bajo presión reducida para dar el compuesto del título (360 mg). El material se usó sin más purificación. H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1 78 (m, 2H), 2.02 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 7.54 (s, 1H), 7.74 (s, 1 H).
Intermediario 4: Ácido 1 -(4-fluoro-1 /-/-pirazol-1 -iDciclopropano-carboxílico Paso 1: 1 -(4-fluoro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de bencilo A una solución de 4-f luoropirazol (125 mg, 1.45 mmol) en tetrahidrofurano (4 mL) a 0°C se agregó hidrato de sodio (60% suspensión en aceite mineral, 116 mg, 2.90 mmol). La mezcla fue agitada a 0°C durante 40 minutos antes de agregar 2,4-dibromobutirato de bencilo (0.30 mL, 1.50 mmol) en forma de gotas. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea para dar 1 -(4-fluoro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de bencilo como un aceite claro (115 mg, 30.4%). H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.64-1.70 (m, 2H), 1.81-1.86 (m, 2H), 5.14 (s, 2H), 7.22-7.26 (m, 2H), 7.31-7.36 (m, 3H), 7.40 (td, 2H).
Paso 2: Ácido 1 -(4-fluoro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxílico Una solución de 1 -(4-fluoro-1 H-pirazol-1 -il)c¡clopropano-carboxilato de bencilo (115 mg; 0.442 mmol) en metanol (20 mL) se hidrogenó usando el cubo H (H2 completo, temperatura ambiente). El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar el compuesto del título como un sólido (70 mg). MS (AP + ) (M + H) 171.4; tiempo de retención de LCMS 1.06 minutos (Método M).
Intermediario 5: Ácido 1 -(4-ci a n o- 1 H-p irazo I- 1 -i I ) ci el opropa no-carboxílico El compuesto del título fue preparado por un método análogo al intermediario 4 pero usando 1 /-/-pirazol-4-carbonitrilo en el paso 1. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.65 (m, 2H), 1.89 (m, 2H), 7.80 (s, 1H), 8.02 (s, 1H); MS (ES-) (M-H) 176.4, tiempo de retención de LCMS: 1.04 minutos (Método M).
Intermediario 6: Ácido 1-(4-ciclopropil-1 H-pirazol- -iQciclopropano-carboxílico Paso 1: 1 -(4-bromo-1 /-/-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de bencilo Se preparó 1 -(4-bromo-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de bencilo por un método análogo al intermediario 4 usando 4-bromo-1H-pirazol en el paso 1. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.64-1.69 (m, 2H), 1.83-1.88 (m, 2H), 5.14 (s, 2H), 7.21-7.25 (m, 2H), 7.31-7.38 (m, 3H), 7.50 (d, 1H), 7.56 (d, 1H).
Paso 2: 1 -(4-ciclopropil-1 --pi razo I- 1 -il)ciclopropanocarboxilato de bencilo En un frasco de microondas de 20 ml_ se agregó 1-(4-bromo-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de bencilo (421 mg, 1.31 mmol), sal potásica de ciclopropiltrifluoroborato (582 mg, 3.93 mmol), complejo de 1 , 1 '-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(l I) con diclorometano (42.5 mg, 0.052 mmol) y carbonato de cesio (1710 mg, 5.24 mmol). El frasco se selló, evacuó y devolvió con nitrógeno dos veces seguido por la adición de tetrahidrofurano (7 ml_). La mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y al residuo se agregó agua (100 mL) y acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa acuosa fue extraída con acetato de etilo (2x). Después de la segunda extracción, una emulsión formada que fue despejada con la adición de salmuera, acetato de etilo y ácido clorhídrico acuoso (1 N). Las capas acuosas fueron extraídas una vez más con acetato de etilo (2x), el solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se purificó vía cromatografía instantánea (0-100% acetato de etilo en heptanos) para dar 1 -(4-ciclopropil-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de bencilo (91 mg, 25%). MS (ES + ) (M + H) 283.3; tiempo de retención de LCMS: 3.38 minutos (Método L).
Paso 3: Ácido 1 -(4-ciclopropil-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxílico El compuesto del título fue preparado por un método análogo al intermediario 4, paso 2. El material se usó sin más purificación. MS (EI + ) (M + ) 192; tiempo de retención de GCMS: 3.096 minutos (Método O).
Intermediario 7: Ácido 1 -(4-(trifluorometil)-1 H-pirazol-1 -iQciclo-propanocarboxílico El compuesto del título fue preparado por un método análogo al intermediario 4 pero usando 4-(trifluorometil)- /-/-pirazol en el paso 1. 1H N MR (400 MHz, CDCI3) d 1.60-1.79 (m, 2H), 1.83-1.95 (m, 2H), 7.75 (s, 1H), 7.78-7.89 (m, 1H), 11.82 (br s, 1H).
Intermediario 8: Ácido 1 -(3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxílico Paso 1: 1 -(3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxilato de metilo En un frasco con el fondo redondo de 15 mL se agregó 2-(3-metilisoxazol-5-il)acetato de metilo (250 mg, 1.61 mmol) disuelto en N, A/-dimetílformamida (7 mL) seguido por adición de hidrato de sodio (60% suspensión en aceite mineral, 322 mg, 8.06 mmol). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se agregó 1 ,2-dibromoetano (417 µ?, 4.83 mmol) en forma de gotas. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. Una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio se agregó a la mezcla y fue extraída con diclorometano (3x). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se disolvió en diclorometano (1.5 mL) y se lavó (3x) con una solución de cloruro de litio acuosa (10%) para eliminar residuos de N,N- dimetilformamida. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se decantaron y concentraron bajo presión reducida para dar 1-(3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxilato de metilo MS (ES + ) (M + H) 182.0; tiempo de retención de LCMS: 2.53 minutos (Método L). El material fue usado para el siguiente paso sin purificación .
Paso 2: Ácido 1 -(3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxílico A 1 -(3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxilato de metilo (100 mg, 0.552 mmol) se agregó una solución de monohidrato de hidróxido de litio (32 mg, 0.76 mmol) en metanol (2 mL) y agua (1 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente se redujo a aproximadamente 1 mL en volumen. Una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (2 mL) se agregó seguido por ácido clorhídrico acuoso (1N) hasta que el pH fue de aproximadamente 4. La mezcla fue extraída con éter (15 mL x 2). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar ácido 1-(3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxílico como un sólido blanco (43 mg, 47%). El material se usó sin más purificación. MS (ES + )(M + H) 168.0; tiempo de retención de LCMS: 2.0 minutos (Método L). 1H N MR (500 MHz, CD3OD) d 1.44-1.48 (m, 2H), 1.66-1.69 (m, 2H), 2.25 (s, 3H), 6.38 (s, 1H).
Intermediario 9: Ácido 1 -(5-metil¡soxazol-3-il)c¡clopropanoxarboxílico El compuesto del título fue preparado por un método análogo a uno usado para el intermediario 8, pero usando 5-metilisoxazol-3-carboxilato de etilo como el material de partida. MS (ES + ) (M + H) 168.0; tiempo de retención de LCMS; 2.06 minutos. (Método L). 1H NMR (500 MHz, CD3OD) d 1.38-1.42 (m, 2H), 1.58-1.62 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 6.32 (s, 1H).
Intermediarios 10 y 11 : Ácido 1-(3-metil-1 H-pirazol-1 -iQciclopropano-carboxilico y ácido 1 -(5-metil-1 /-/-pirazol-1 -iDciclopropanocarboxílico Paso 1 : 1 -(3-metil-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de ter-butilo y 1 -(5-metil-1 H-pirazol-1 -il)c¡clopropanocarboxilato de ter-buti lo A una solución de 3-metilpirazol (306 mg, 3.73 mmol) en tetrahidrof urano (10.0 mL) enfriado a 0°C se agregó hidrato de sodio (60% suspensión en aceite mineral, 242 mg, 6.05 mmol). La mezcla fue agitada a 0°C durante 40 minutos. Se agregó 2,3-dibromo-butanoato de fer-butilo (0.65 mL, 3.4 mmol) en forma de gotas. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea (0-25% acetato de etilo en heptanos) para dar una mezcla de dos regioisómeros, 1 -(3-meti I- H-pirazol-1 - il)ciclopropanocarboxilato de fer-butilo (peso total de mezcla: 264 mg).
Paso 2: Ácido 1 -(3-m eti 1-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxílico y ácido 1-(5-metil-1 H-pirazol-1 - il)ciclopropanocarboxílico A una solución de los regioisómeros, preparados en el paso previo, (320 mg, 1.44 mmol) en diclorometano (2 mL) se agregó ácido trif luoroacético (1.0 mL, 13.0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida. El residuo se purificó vía HPLC para dar dos regioisómeros. Regioisómero 1 (intermediario 10, 69 mg): 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.33-1.42 (m, 2H), 1.71 (d, 2H), 2.28 (s, 3H), 5.97 (dd, 1H), 7.31 (d, 1H). Regioisómero 2 (intermediario 11 , 82 mg): 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.30-1.37 (m, 2H), 1.59-1.66 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 5.96 (d, 1H), 7.36 (d, 1H).
Intermediario 12: Ácido 1 -( 1 H-pirazol- -iQciclobutanocarboxílico Paso 1: 1-(1 H-pirazol-1 -il)ciclobutanocarboxilato de etilo En un frasco con el fondo redondo de 50 mL se agregó hidrato de sodio (60% dispersión en aceite mineral, 452 mg, 11 mmol) y tetrahidrofurano anhidro (18 mL). A la mezcla se agregó pirazol (511.6 mg, 7.515 mmol) y tetrahidrofurano anhidro (1 mL). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas y después se secó a 0°C. Se agregó 1 -bromociclobutanocarboxilato de etilo (1.3 mL, 7.5 mmol) en forma de gotas. La mezcla de reacción fue agitada a 0°C durante 45 minutos y a temperatura ambiente en tres días. Se agregó HMPA (1.35 mL, 7.5 mmol) y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se calentó a 70°C durante 2 horas seguido por (a adición de N,N-dimetilformamida (4 mL). La mezcla de reacción fue agitada a 70°C por otras 2 horas antes de agregar más N, / -dimetilformamida (2 mL) y después se agitó a 70°C durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida. Al residuo se agregó agua y se extrajo con una mezcla de heptanos y acetato de etilo (3x). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. La cromatografía instantánea (0-40% acetato de etilo en heptanos) dio 1 -( 1 H-pirazol-1 -il)ciclobutanocarboxilato de etilo (688mg), lo que se usó sin más purificación.
Paso 2: Ácido 1 -(1 H-pirazol-1 -il)ciclobutanocarboxílico A 1 -( 1 H-pirazol-1 -il)ciclobutanocarboxilato de etilo (688 mg, 3.54 mmol) se agregó tetrahidrofurano (8 mL) y agua (0.9 mL). Se agregó hidróxido de sodio acuoso (1N, 4 mL, 4 mmol) a la mezcla. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y al residuo se agregó ácido clorhídrico acuoso (1N, 1 mL). La mezcla fue extraída con diclorometano (3x). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar el compuesto del título (108.9 mg). El material fue usado sin más purificación.
Intermediario 13: Clorhidrato de 1 -(pirimidin-5-il)ciclopropano-carbimidato de etilo Paso 1: 1 -(Pirimidin-5-il)c¡clopropanocarbonitrilo A una mezcla de 2- ( pi ri m id i n- 5- i I) a cet o n itr i I o (104 mg, 0.873 mmol), dibromoetano (113 µ?_, 1.31 mmol) y bromuro de tetrabutilamonio (65 mg, 0.23 mmol) disuelto en tolueno se agregó una solución acuosa de hidróxido de sodio (50%, 500 mg en 0.5 mL de agua, 12.5 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (2 mL), se lavó con agua (0.5 mL x 2) y salmuera (0.5 mL). Los orgánicos se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea (0-80% acetato de etilo en heptanos) para dar 1 -(pirimidín-5-íl)c¡clopropanocarbonitrilo como un sólido (28 mg, 22%). 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.50-1.56 (m, 2H), 1.85-1.95 (m, 2H), 8.72 (s, 2H), 9.19 (s, 1H).
Paso 2: Clorhidrato de 1 -(pirimidin-5-il)ciclopropanocarbimidato de etilo Se suspendió 1 -(pirimidin-5-il)ciclopropanocarbonitrilo (28 mg, 0.19 mmol) en etanol (2 mL) previamente saturado con cloruro de hidrógeno gaseoso. Se burbujeó cloruro de hidrógeno por 30 segundos adicionales a través de la mezcla y la mezcla resultante fue agitada durante 18 horas a temperatura ambiente. El solvente fue eliminado bajo un flujo de nitrógeno para dar el compuesto del titulo como un sólido blanco (43 mg) que se usó sin más purificación. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) d 1.45 (t, 3H), 1.70-1.76 (m, 2H), 1.98-2.07 (m, 15H), 4.43 (q, 2H), 8.96 (s, 2H), 9.24 (s, 1H).
Intermediario 14: 1 -(isoxazol-3-il)ciclopropanocarbimidato de etilo Paso 1: 1 -(isoxazol-3-il)ciclopropanocarbonitrilo A una suspensión de hidrato de sodio (136 mg, 5.39 mmol) en N, /V-dimetilformamida (5 mL) se agregó una solución de 2-(isoxazol-3-il)acetonitrilo (233 mg, 2.16 mmol) en N, / -dimetilformamida (2.5 mL) a 0°C. Después de la adición, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. La mezcla se enfrió a 0°C y se agregó 1 ,2-dibromoetano (0.3 mL, 3.48 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a 0°C durante 4 horas. Se agregó agua a la mezcla. La mezcla fue extraída con acetato de etilo (3x). Los orgánicos combinados se lavaron con agua, se lavaron con ácido clorhídrico acuoso (1N), se lavaron con bicarbonato de sodio acuoso y salmuera. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se disolvió con diclorometano y se lavó con solución de cloruro de litio acuoso (10%). Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida y se secaron bajo un chorro de nitrógeno para dar 1 -(isoxazol-3-il)ciclopropanocarbonitrilo (243 mg). 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.71-1.76 (m, 2H), 1.79-1.83 (m, 2H), 6.51 (s, 1H), 8.40 (s, 1H). El material fue usado sin más purificación.
Paso 2: Clorhidrato de 1 -(isoxazol-3-il)ciclopropanocarbim idato de etilo En un frasco de 8 mL que contiene 1 -(isoxazol-3-il)ciclopropanocarbonitrilo (243 mg, 1.4 mmol) y etanol (1.98 mL, 34 mmol) se agregó cloruro de acetilo (1.45 mL, 20.4 mmol) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante 18 horas a temperatura ambiente. Se eliminó una alícuota y el solvente evaporó; 1H NMR mostró la presencia de producto. 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.44 (t, 3H), 1.74-1.79 (m, 2H), 2.16-2.20 (m, 2H), 4.77 (q, 2H), 6.35 (d, 1H), 8.46 (d, 1 H). La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para dar el compuesto del título (203 mg). El material se usó sin más purificación.
Intermediario 15: Clorhidrato de 1 -(3-metoxifeníl)ciclopropano-carbimidato de metilo Paso 1 : 1 -(3-Metoxifenil)ciclopropanocarbonitrilo A una mezcla de 2-(3-metoxifenil)acetonitrilo (100 mg, 0.679 mmol), 1 ,2-dibromoetano (88 µ?, 1.02 mmol) y bromuro de tetrabutilamonio (50 mg, 0.16 mmol) en tolueno (1.0 mL) se agregó una solución acuosa de hidróxido de sodio (50%, 500 mg en 0.5 mL de agua, 12.5 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (2 mL) y se lavó con agua (0.5 mL x 2) y salmuera (0.5 mL). Los orgánicos se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida y se secaron al alto vacío. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea (0-60% acetato de etilo en heptanos) para dar 1 -(3-metoxifenil)ciclopropanocarbonitrilo como un aceite (56 mg, 48%). 1H NMR (500 MHz, CDCI3) 6 1.38-1.44 (m, 2H), 1.69-1.76 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 6.74-6.96 (m, 3H), 7.22-7.31 (m, 1H).
Paso 2: Clorhidrato de 1 -(3-metox¡fenil)ciclopropanocarbimidato de metilo Se disolvió 1 -(3-metoxifenil)c¡clopropanocarbonitr¡lo (56 mg, 0.32 mmol) en una solución saturada de cloruro de hidrógeno en etanol (1ml_). La mezcla de reacción se almacenó en el refrigerador (4°C) durante tres días. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y se secó al alto vacío. El residuo se disolvió en etanol (0.5 mL) y se agregó ácido sulfúrico de sílice (125 mg), preparado al seguir la literatura (Tetrahedron, 2001, 57, 9509-9511 ). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. El sílice se filtró y el filtrado se enfrió a 0°C y cloruro de hidrógeno gaseoso fue burbujeado a través de la solución durante 30 segundos. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se concentró bajo presión reducida para dar un aceite. El aceite se disolvió en una solución de cloruro de hidrógeno en metanol (1.25 M , 1 mL). Se burbujeó ácido clorhídrico gaseoso en la solución y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para dar el compuesto del título como un aceite (40 mg, 51%). El material fue usado sin más purificación.
Intermediario 16: Clorhidrato de 1 -(p-tolil)ciclopropanocarbimidato de etilo Una solución saturada de cloruro de hidrógeno en etanol (2 mL) se preparó y se agregó a 1 -(p-tolil)ciclopropanocarbonitrilo (100 mg, 0.64 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 16 horas. La temperatura de la mezcla de reacción se aumentó a 70°C y la mezcla fue agitada a esa temperatura durante 2 horas y después se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se dejó agitando a temperatura ambiente por otras 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se secó al alto vacío. El material fue usado sin purificación adicional.
Intermediario 17: 2-(etoxi(imino)metil)-6-metoxiisonicotinato de etilo Paso 1: 2-cloro-6-metoxiisonicotinato de etilo A una suspensión previamente sonicada de ácido 2-cloro-6-metoxiisonicotínico (4.0g, 21 mmol) en etanol (50 mL) se agregó cloruro de t i o n i I o (4.64 mL, 64.0 mmol) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 2 horas y después a temperatura ambiente durante 18 horas. Se agregó lentamente cloruro de tionllo (4.64 mL, 64.0 mmol) y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla de reacción fue extinguida al verter lentamente en una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (200 mL). Se agregó hielo a la mezcla para bajar la temperatura. La mezcla fue extraída con éter dietílico (150 mL x2). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar un jarabe claro como producto crudo. El producto crudo se secó durante 2 horas al alto vacío al mismo tiempo calentando a 80°C. El residuo resultante se concentró de tolueno (500 mL) para dar 2-cloro-6-metoxiisonicotinato de etilo como un sólido blanco crudo (3.205 g). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.40 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 4.39 (s, 2H), 7.22 (s, 1H), 7.44 (s, 1H).
Paso 2: Ácido 2-ciano-6-metoxiisonicotínico En un frasco de microondas secado al horno se agregó 2-cloro-6-metoxiisonicotinato de etilo (0.6 g, 2.78 mmol), cianuro de zinc (392 mg, 3.34 mmol), polvo de zinc (36.4 mg, 0.2 mmol) y N,N-dimetilacetamida (10 mL). El frasco fue tapado, evacuado y llenado con nitrógeno. Este proceso se repitió 3 veces. Entonces la tapa del frasco fue quitada y se agregó bis(tri-f-butilfosfina)paladio(0) (142 mg, 0.278 mmol). El frasco fue tapado de nuevo, evacuado y llenado con nitrógeno (3x). La mezcla de reacción se calentó a 95°C y se dejó agitando durante 18 horas. La mezcla de reacción fue diluida con acetato de etilo (100 mL) y filtrada a través de Celita. El filtrado se vertió en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, se lavó con salmuera y se secó sobre sulfato de sodio. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se purificó vía cromatografía instantánea para dar ácido 2-ciano-6-metoxiisonicotínico (260 mg, 45.3%) como un sólido blanco 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.42 (s, 3H), 4.01 (s, 3H), 4.43 (s, 2H), 7.53 (s, 1 H), 7.82 (s, 1 H).
Paso 3: 2-(etoxi(imino)metil)-6-metoxiisonicotinato de etilo Se agregó metal de sodio (previamente enjuagado con heptanos, 10 mg, 0.44 mmol) en un frasco que contiene etanol anhidro (2.0 mL) enfriado con un baño de agua helada. Se observó evolución de gas inmediatamente después de la adición. El etóxido de sodio formado se agregó a una suspensión de agitación de ácido 2-ciano-6-metoxiisonicotínico (150 mg, 0.727 mmol) en etanol anhidro (5.0 mL) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se sónico durante 5 minutos, agitada a 0°C durante 30 minutos y después se calentó a temperatura ambiente sobre un periodo de 30 minutos. Análisis de GCMS (MS (EI + ) (M + ) 252; tiempo de retención de GCMS 3.601 minutos, Método O) de la mezcla mostró conversión del material de partida al compuesto del título. La mezcla de reacción se usó sin más purificación.
Intermediario 18: 2-(etox¡(imino)metil)-6-etilisonicot¡nato de etilo Se preparó el compuesto del título por un método análogo al intermediario 17 pero usando 2-cloro-6-etilisonicotinato de etilo como el material de partida. Análisis de GCMS de la mezcla de reacción mostró la presencia del producto deseado. MS (EI + ) (M + ) 250; tiempo de retención de GCMS 3.611 minutos (Método O).
Intermediario 19: 2-ciclopropilpirimidina-4-carbimidato de etilo Paso 1: 2-Ciclopropilpirimidina-4-carbonitrilo A una solución de 2-ciclopropilpirimidina-4-carbaldehído (29.13 g, 196.6 mmol) en N, /V-dímetílformamida (200 ml_) se agregó clorhidrato de hidroxilamina (13.9g , 197 mmol) seguido por trietilamina (35 ml_, 250 mmol) disuelto en A/,/V-dimetilformamida (40 ml_) a temperatura ambiente. Un 50% solución de anhídrido propilfosfónico en /V,/\/-dimet¡lformam¡da (140mL 230 mmol) se agregó y la mezcla de reacción fue agitada a 110°C durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio se agregó con acetato de etilo. La mezcla fue agitada vigorosamente y se agregó bicarbonato de sodio sólido. La mezcla se filtró para eliminar sólidos no disueltos y las capas se separaron. La capa acuosa fue extraída con acetato de etilo (3x). Los orgánicos combinados se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida, y el residuo resultante se secó al alto vacío para dar 2-ciclopropílpirimidina-4-carbonitrilo (20.97 g). El material se usó sin más purificación. 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.15-1 22 (m, 4H), 7.36 (s, 1H), 8.76 (s, 1H).
Paso 2: 2-ciclopropilpirimidina-4-carbimidato de etilo A una solución de 2-ciclopropilpirimidina-4-carbonitrilo (20.97 g, 144.5 mmol) en etanol (100 mL) se agregó etóxido de sodio (1.8 g, 78.9 mmol de metal de sodio en 30 mL de etanol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se agregó éter dietílico (300 mL) a la mezcla de reacción seguido por una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (50 mL). La mezcla fue extraída con éter dietílico (100 mL x 3). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mL x 2), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, se concentraron bajo presión reducida y se secaron al alto vacío para dar el compuesto del título. El material fue usado sin más purificación. 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.10-1.15 (m, 2H), 1.16-1.22 (m, 2H), 1.43 (t, 3H), 2.32 (tt, 1H), 4.44 (q, 2H), 7.50 (d, 1H), 8.72 (d, 1H).
Intermediario 20: Clorhidrato de 1 -(4-(trif luorometil)fen¡l)ciclo-propanocarbimidato de etilo En un frasco de 4 mL se agregó 1 -(4-(trif luorometil)fenil)ciclo-propanocarbonitrilo (21 mg, 0.1 mmol), etanol (70 µ?) y cloruro de acetilo (56 µ?, 0.792 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar el compuesto del título como un sólido blanco (30 mg). El material fue usado sin más purificación. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) d 1.45 (t, 3H), 1.61-1.66 (m, 2H), 1.95-2.00 (m, 2H), 4.44 (d, 2H), 7.70 (d, 2H), 7.75 (d, 2H).
Intermediario 21: 6-(3-Hidroxioxetan-3-il)picolinaldehído Paso 1: 2-Bromo-6-(1 ,3-dioxolan-2-il)piridina A una solución de 6-bromopir¡dina-2-carbaldeh ido (3 g, 16.22 mmol) en tolueno (60 mL) se agregó etilenglicol (4.97 g, 80.2 mmol) y ácido p-toluenosulfónico (0.152 g, 0.8 mmol). La mezcla de reacción se refluyó durante 3 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar el crudo que fue disuelto en acetato de etilo y se lavó con agua. Las capas orgánicas se lavaron con una solución de salmuera, y se secaron sobre sulfato de sodio. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar 2-bromo-6-(1 ,3-dioxolan-2-il)piridina (3.7 g). El material fue usado para el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2: 3-(6-(1 ,3-Dioxolan-2-il)piridin-2-il)oxetan-3-ol A una solución de 2-bromo-6-(1 ,3-dioxolan-2-il)piridina (2.49 g, 10.8 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (40 mL) se agregó una solución de n-butillitio (2.5 M, 4.3 mL, 10.8 mmol) a -78°C. Después de agitar durante 30 minutos, una solución de oxetan-3-ona (0.6 g, 8.32 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (12 mL) se agregó lentamente y la mezcla fue agitada a esa temperatura durante 1 hora. La mezcla de reacción se extinguió con agua y extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida para dar el compuesto crudo. El material crudo se purificó vía TLC preparativo eluyendo con 35% acetato de etilo en éter de petróleo para dar 3 - ( 6 - ( ,3-dioxolan- 2-il)pir¡din-2-il)oxetan-3-ol (500 mg, 27%). MS (ES + ) (M + H) 224.20; tiempo de retención de LCMS: 2.76 minutos (Método S).
Paso 3: 6-(3-Hydroxioxetan-3-il)picolinaldehído Una solución de 3-(6-(1 ,3-dioxolan-2-il)piridin-2-il)oxetan-3-ol (67 mf, 0.30 mmol) y ácido p-toluenosulfónico (14.8 mg, 0.26 mmol) en acetona (3.00 mL) se calentó a 50°C y se agitó durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar el compuesto del título. El material se usó sin purificación adicional. MS (ES + ) (M + H) 180.0; tiempo de retención de LCMS: 1.57 minutos (Método L).
Intermediario 22: 1 -(3-formilfenil)ciclopropanocarboxilato de etilo Paso 1: 1 -(3-bromofenil)ciclopropanocarboxilato de etilo Se disolvió ácido 1 -(3-bromofenil)ciclopropanocarboxílico (976 g, 4.05 mmol) en etanol (20 mL) y se agregó ácido p-toluenosulfónico (139 mg, 0.810 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 15 horas. La temperatura del baño de aceite se aumentó de 80°C a 110°C y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a esa temperatura, después de lo cual la mezcla se enfrió y el solvente fue eliminado bajo presión reducida. El material crudo fue purificado vía cromatografía instantánea (pentano: acetato de etilo 9:1) para dar 1-(3-bromofenil)ciclopropanocarboxilato de etilo como un aceite incoloro (950 mg, 87.2%). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1 13-1.20 (m, 5H), 1.57-1.62 (m, 2H), 4.10 (q, 2H), 7.17 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.38 (s, 1 H), 7.47-7.50 (m, 1 H).
Paso 2: 1 -(3-(3-etoxi-3-oxoprop-1 -en-1 -il)fenil)ciclopropano-carboxi lato de (E)-etilo -(3-Bromofenil)ciclopropanocarboxilato de etilo (740 mg, 2.75 mmol) se disolvió en acetonitrilo (20 mL) y la solución fue tratada con acrilato de etilo (3.90 mL, 35.7 mmol) y fosfina de tri-o-tolilo (83.7 mg, 0.275 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente hasta que se había disuelto toda la tri-o-tolilo fosfina. Se agregó acetato de paladio (30.9 mg, 0.137 mmol) en una sola porción y la mezcla de reacción fue agitada a reflujo durante 16 horas Se agregó acetato de paladio (10 mg) y la mezcla de reacción fue agitada por otras 4 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (pentano/acetato de etilo 95/5 a 92/8) para dar 1 -(3-(3-etoxi-3-oxoprop-1 -en-1 -il)fenil)ciclopropanocarboxilato de (E)-etilo (438 mg, 55%). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.09-1.19 (m, 5H), 1.31 (t, 3H), 1.56-1.63 (m, 2H), 4.03-4.11 (m, 2H), 4.23 (q, 2H), 6.40 (d, 1H), 7.20-7.36 (m, 2H), 7.36-7.42 (m, 1H), 7.44-7.51 (m, 1H), 7.66 (d, 1 H).
Paso 3: -(3-formilfenil)ciclopropanocarboxilato de etilo Se disolvió 1 -(3-bromofenil)ciclopropanocarboxilato de etilo (538 mg, 1.9 mmol) en acetona (20 mL). Se agregó tetróxido de osmio (17.1 µ?_, 0.07 mmol) y Nal04 (1.1 g, 5.6 mmol) seguido por agua (10 mL). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. Se agregó agua (10 mL) seguido por pentano (35 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa fue extraída con pentano (20 mL x 2) y acetato de etilo (20 mL x 2). Los orgánicos combinados se lavaron con agua, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea (pentano/acetato de etilo 95:5) para dar el compuesto del título como un aceite (327 mg, 80%). MS (ES + ) (M + H) 219.
Intermediario 23: Ácido 3-benciloxetano-3-carboxílico Paso 1: 2-Bencil-2-(hidroximetil)propano- ,3-diol Una solución de 3-fenilpropanal (100g, 0.7mol), formaldehído (540 mL, 7.5 mol) y óxido de calcio (56 g, 1 mol) en etanol (1 L) se agitó a 40°C bajo nitrógeno durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró Se agregó agua (1L) al residuo. La mezcla fue extraída con acetato de etilo (1L x 3), las capas orgánicas combinadas se concentraron y purificaron vía cromatografía de gel de sílice (éter de petróleo/acetato de etilo 3:1) para dar 2-bencil-2-(hidroximetil)propano-1 ,3-diol como un sólido blanco (90 mg).
Paso 2: (3-Benc¡loxetan-3-il)metanol Una solución de /-butóxido de potasio en tetrahidrofurano (1M, 24 mL) se agregó en una solución de 2-bencil-2-(hidroximetil)propano-l , 3-diol (90 g, 0.5 mol) y carbonato de dietilo (55 g, 0.5 mol) en tetrahidrofurano (500 mL) bajo nitrógeno. La mezcla de reacción se refluyó durante 6 horas y después se calentó a 110°C para destilar el solvente. Entonces la mezcla fue agitada a 155°C durante 24 horas. La mezcla se purificó vía cromatografía de gel de sílice (éter de petróleo/acetato de etilo 10:1 a 2:1) para dar (3-benciloxietan-3-il)metanol (40 g, 0.226 mol, 49%) fue un sólido blanco.
Paso 3: Ácido 3-benciloxetan-3-carboxílico Reactivo Jones (130 mL de una solución de 2.3 M) previamente preparado al agregar ácido clorhídrico (46 mL) a agua (150 mL) seguido por óxido de cromo (VI) (55.5 g), se agregó en forma de gotas a una solución de (3-benciloxetan-3-il)metanol (40 g, 0.2 mol) en acetona (600 mL). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 5 horas. Se agregó isopropanol (18 g) y la mezcla fue extraída con éter (4 L), se lavó con NaH2P0 (1M en agua, 200 mL) y cloruro de sodio (1 M en agua, 200 mL). Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron. El residuo se tituló con éter (100 mL) para dar el compuesto del título (37 g, 0.2 mol, 85%) como un sólido blanco. H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 3.22 (s, 2H), 4.49 - 4.51 (d, 2H), 4.65-4.67 (d, 2H), 7.12-7.27 (m, 5H), 12.85 (s, 1 H).
Intermediario 24: Diclorhidrato de (R)-C\ -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(3,3-difluoro irrolidin-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a uno usado para intermediario 1 , pero usando 3,3-difluoropirrolidina en vez de pirrolidina para el paso 1 y una solución de cloruro de hidrógeno en metanol (1.25 M) para paso 2. MS (ES + ) (M + H) 326.1; tiempo de retención de LCMS: 0.26 minutos (Método M). H NMR (DMSO, 400 MHz): d 1.45-1.62 (m, 2H), 1.65-1.72 (m, 1 H), 1.82-1.90 (m, 1 H), 2.30-2.45 (m, 2H), 2.76-2.91 (m, 2H), 3.46-3.54 (m, 1 H), 3.64-3.78 (m, 2H), 3.84-3.92 (m, 1 H), 3.95-4.04 (m, 2H), 4.06-4.13 (m, 1 H), 4.13-4.62 (m, 6H), 6.14 (d, 1H), 7.24 (d, 1 H).
Intermediario 25: Diclorhidrato de ( - (5,6-d¡aminopiridin-2-il)piperidin-3-il)((S)-3-hidroxipirrolidin - 1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a uno usado para el intermediario 1 , pero usando (S)-pirrolidin-3-ol en vez de pirrolidina para el paso 1 y una solución de cloruro de hidrógeno en metanol (1.25 M) para paso 2. MS (ES + ) (M + H) 306.1; tiempo de retención de LCMS: 0.26 minutos (Método M).
Intermediario 26: Sal de clorhidrato de 6-(3-(6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-c1imidazol-3-il)piperidin-1-il)piridina-2,3-diam¡na Paso 1: 3-(5,6,7,7a-tetrahidro-1 H-pirrolo[1 , 2-c] i m id azol-3- i I ) -piperidina-1 -carboxilato de fer-butilo A una solución de pirrolidin-2-ilmetanamina (250 mg, 2.5 mmol) en tolueno (8.5 mL) se agregó piperidina-1 ,3-dicarboxilato de 3-etilo de 1 -fer-buti lo (635 mg, 2.5 mmol) bajo nitrógeno. La solución se enfrió con un baño de agua helada y trimetilaluminio (2M en tolueno, 2.2 mL, 4.4 mmol) se agregó. La solución resultante se transfirió a un tubo de presión y se calentó a 110°C durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se agregó agua (10 mL). La mezcla fue extraída con diclorometano (40 mL x2). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea (0-12% metanol en diclorometano) para dar 3-(5,6,7,7a-tetrahidro-1H-pirrolo[1,2-c]imidazol-3-il)piperidina-1-carboxilato de fer-butilo como un aceite incoloro (317 mg, 43.8%). MS (ES + ) (M + H) 294.2; tiempo de retención de LCMS: 1.03 minutos (Método M).
Paso 2: 3-(6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-c]imidazol-3-il)piperidina-1-carboxilato de fer-butilo A una solución de 3-(5,6,7,7a-tetrahidro-1 H- p i r ro I o [ 1 ,2-c]imidazol-3-il)piperidina-1 -carboxilato de fer-butilo (175 mg, 0.6 mmol) en tolueno (5 mL) se agregó BaMn04 (2.1 g, 18 mmol) y la reacción se calentó a 115°C durante 42 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y BaMn04 (2 g) se agregó seguido por tolueno (2 mL). La mezcla de reacción se calentó a 115°C durante 3 días. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de Celita seguido al enjuagar con diclorometano. El filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó" vía HPLC para dar 3-(6,7-dihidro-5H-pirrolo[1 ,2-c]imidazol-3-il)piperidina-1-carboxilato de fer-butilo como un aceite (25 mg, 14%). MS (ES + ) (M + H) 292.2; tiempo de retención de LCMS: 1.69 minutos (Método M).
Paso 3: Trif luoroacetato de 3-(piperidin-3-il)-6,7-dihidro-5H-p i r r o I o [ ,2-c]¡midazol 3-(6,7-Dihidro-5H-pirrolo[1,2-c]imidazol-3-il)piperidina-1-carboxilato de f- utilo (65 mg, 0.1 mmol) se disolvió en un 20% ácido trif luoroacético en solución de diclorometano (2.4 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2.5 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar sal de trifluoroacetato de 3-(piperidin-3-il)-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1 ,2-c]imidazol como un aceite (94 mg, 100%). El material se usó sin purificación adicional.
Paso 4: 6-(3-(6,7-Dihidro-5H-pirrolo[1,2-c]imidazol-3-il)piperidin-1-il)-3-n¡trop¡r¡din-2-amina A una solución de trifluoroacetato de sal de 3-(piperidin-3-il)-6,7-dihidro-5H-pirrolo[1 ,2-c]imidazol (94 mg) en acetonitrilo anhidro (1.1 mL) a 10°C se agregó trietilamina (130 µ?_, 0.93 mmol). Después se agregó 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (39 mg, 0.2 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 2 horas y después durante 18 horas a temperatura ambiente. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se disolvió en diclorometano (3 mL). La mezcla se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (1 mL), se lavó con agua (1 mL), se lavó con salmuera (1 mL), se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea (0-10% metanol en diclorometano) para dar 6-(3-(6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-c]imidazol-3-il)piperidin-1-il)-3-nitropiridin-2-amina como un aceite amarillo (60 mg, 82%). MS ( ES + ) (M + H) 329.2; tiempo de retención de LCMS: 1.61 minutos (Método L).
Paso 5: Sal de clorhidrato de 6-(3-(6,7-dihidro-5H-pirrolo[1 ,2-c]imidazol-3-il)piperidin-1-il)piridina-2,3-diamina Se disolvió 6-(3-(6,7-dihidro-5H-pirro!o[1 ,2-c]imidazol-3-il)piperidin-1 -il)-3-nitropiridin-2-amina (20 mg, 0 1 mmol) en etanol (0.5 mL) y agua (0.1 mL) bajo nitrógeno. Después malla de hierro 200 (27 mg, 0.5 mmol) y cloruro de calcio (3.3 mg, 0.03 mmol) se agregó y la mezcla se calentó a 70°C durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente seguido por filtración a través de 0.2 µ?? filtro de jeringa de nylon y enjuagando con etanol (0.5 mL) para dar el compuesto del título. El filtrado fue llevado al siguiente paso sin más purificación. MS (AP + ) (M + H) 299.1; tiempo de retención de LC S: 0.44 minutos (Método L).
Intermediario 27: Ácido 1 -(3-oxomorfolino)ciclopropanocarboxílico El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el intermediario 4, pero usando morfolin-3-ona en el paso 1. MS (ES + ) (M + H) 186.3; tiempo de retención de LCMS: 0.59 minutos (Método M).
Intermediario 28: 6-(1-((ferbut¡ld¡metilsilil)oxi)ciclopropil)picolino-nitrilo Paso 1: 2-Bromo-6-(1 - ((fer-butildimetilsilif)oxi)vinil)piridina A una solución de 1 -(6-bromopiridin-2-il)etanona (1000 mg, 5.0 mmol) y trietilamina (2.1 mL, 15.0 mmol) a 0°C en diclorometano (14 mL) se agregó fer-butildimetilsilanosulfonato de trifluorometilo (1.4 mL, 6.2 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, y se concentró. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea (0-30% acetato de etilo en heptanos) para dar 2-bromo-6-(1 -((fer-but¡ldimetilsilil)oxi)vin¡l)piridina como un aceite incoloro (1450 mg, 92%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 0.22 (s, 9H), 4.62-4.63 (m, 1H), 5.52 (s, 1H), 7.56-7.62 (m, 2H), 7.82 (s, 1H).
Paso 2: 2-Bromo-6-(1-((fer-butilmetilsilil)oxi)ciclopropil)piridina A una solución de dietilzinc (1M en hexano, 2.0 mL, 2.0 mmol) en diclorometano (3.7 mL) a -4°C se agregó cloroyodometano (714 mg, 4.0 mmol) disuelto en diclorometano (1 mL) en forma de gotas. La mezcla de reacción fue agitada a 0°C durante 15 minutos. Se agregó una solución de 2-bromo-6-(1 -((fer-butildimetilsilil)oxi)vinil)-piridina (200 mg, 0.6 mmol) en diclorometano (3.0 mL). La mezcla de reacción fue agitada a 0°C durante 2 horas. Una solución acuosa saturada fría de cloruro de amonio se agregó y la mezcla fue extraída con diclorometano. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (100% heptanos) para dar 2-bromo-6-(1-((rer-butildimet¡lsilil)oxi)ciclopropil)piridina (120 mg, 58%). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 0.11 (s, 6H), 0.95 (s, 9H), 1.22-1.28 (m, 2H), 1.39-1.45 (m, 2H), 7.23 (dd, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.60 (dd, 1 H).
Paso 3: 6-(1-((fer-Butildimetilsilil)oxi)ciclopropil)picolinonitrilo En un frasco se agregó 2-bromo-6-(1-((rer-butildimetilsil¡l)oxi)-ciclopropil)piridina (60.0 mg, 0.2 mmol), acetato de zinc (2.8 mg, 0.01 mmol), polvo de zinc (3.6 mg, 0.1 mmol), (1 ,1 ' - bi s (d if e n i I-fosfino)ferroceno)-dicloropaladio (II) (2.9 mg, 0.004 mmol) y cianuro de zinc (14.0, 0.1 mmol). Los sólidos fueron purgados con nitrógeno y después se agregó A/,A/-dimetilformamida (0.7 mL) y agua (0.1 mL). La suspensión se calentó a 100°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se cargó directamente en una columna de gel de sílice y se purificó vía cromatografía instantánea (0-5% acetato de etilo en heptanos) para dar el compuesto del título (45 mg, 90%). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 0.10 (s, 6H), 0.96 (s, 9H), 1.27-1.33 (m, 2H), 1.43-1.48 (m, 2H), 7.46 (s, 1 H), 7.73-7.80 (m, 1 H), 7.89 (s, 1H).
Intermediario 29: Diclorhidrato de (f?)-(4-(5,6-diam¡nopir¡din-2- ¡l)morfolin-2-M)(pirrolidin-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el intermediario 1 , pero usando ácido (R)-4-(ter-butoxicarbonil)morfolina-2-carboxílico para el paso 1. H NMR (400 MHz, CD3OD) d 1.81-2.03 (m, 4H), 3.37-3.51 (m, 3H), 3.60-3.73 (m, 3H), 3.75-3.85 (m, 2H), 3.90-3.97 (m, 2H), 4.49 (dd, 1H), 6.40 (d, 1 H), 7.73 (d, 1 H).
Intermediario 30: 6-Ciclopropilpirazina-2-carbimidato de etilo Paso 1 : 6-Ciclopropilpirazina-2-carbonitrilo Una suspensión de 6-ciano-2-cloropirazina (0.3 g, 2.1 mmol), ( 1 , 1 '-bis(difenilfosfino)ferroceno)-dicloropaladio (II) (153.6 mg, 0.21 mmol), fosfato de potasio (1.3 g, 6.30 mmol) y ácido ciclopropilborónico (0.184 mg, 2.1 mmol) en tetra h ¡d rof u ra n o (25 mL, nitrógeno burbujeado) se desgasó durante 15 minutos usando nitrógeno. La mezcla de reacción se refluyó durante 15 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de Celita y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 5-20% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 6-ciclopropilpirazina-2-carbonitrilo (250 mg, 50%).
Paso 2: 6-C¡clopropilpirazina-2-carbimidato de etilo Se agregó etóxido de sodio (140mg, 2.06 mmol) a una solución de 6-ciclopropilpiraz¡na-2-carbonitrilo (150 mg, 1.03 mmol) en etanol (6 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El solvente fue eliminado bajo presión reducida. El residuo se dividió entre agua y acetato de etilo. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida para dar el compuesto del título (250 mg). MS (ES + ) (M + H) 192.1012 Intermediario 31: (f?)-(4-(6-am¡no-5-nitropiridin-2-il)morfolin-2-il)-(pirrol¡din-2-il)metanona El compuesto del título se preparó por un método análogo al intermediario 1, pasos 1, 2 y 3, pero usando ácido ( ?)-4-(fer-butoxi-carbonil)morfolina-2-carboxílico como el material de partida. 1 H NMR (400 MHz, CD3OD) d 1.82-2.05 (m, 5H), 3.45 (s, 2H), 3.55-3.77 (m, 4H), 3.94-4.05 (m, 1H), 4.26 (s, 2H), 4.58 (s, 1H), 6.28 (s, 1H), 8.16 (s, 1 H).
Intermediario 32: 3-Nitro-6-(2-(piridin-2-il)morfolino)piridin-2-amina A una solución de clorhidrato de 2-(piridin-2-il)morfolina (1000 mg, 4.22 mmol) y trietilamina (1.3 ml_, 9.3 mmol) en dimetilsulfóxido (10 mL) se agregó 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (734 mg, 4.23 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a 100°C durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. Se agregó acetato de etilo y la mezcla se lavó con agua (20 mL). La capa acuosa fue extraída con acetato de etilo (20 mL x 2). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (40-100% acetato de etilo en heptanos) para dar el compuesto del título (0.897 g, 70%). H NMR (400 MHz, CDCI3) d 3.08 (s, 1H), 3.18-3.29 (m, 1H), 3.83 (s, 1H), 4.20 (s, 1H), 4.41 (d, 1H), 4.63 (dd, 1H), 4.67-4.80 (m, 1H), 6.18 (s, 1H), 7.23-7.26 (m, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.60 (s, 1H).
Intermediario 33: 2-Ciclobutilpirimidina-4-carbaldehído Paso 1: 4-(Dimetilamino)-1 , 1 -dimetoxibut-3-en-2-ona Una mezcla de 1 , -dimetoxi-W, A/-dimet¡lmetanamina (5.0 g, 41.96 mmol) y 1 , 1 -dimetoxipropan-2-ona (5.0 g, 41.96 mmol) se calentó a 80°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar 4-(dimetilamino)-1 , 1 -dimetoxibut-3-en-2-ona como un líquido de color negro. El material se usó sin más purificación.
Paso 2: Clorhidrato de ciclobutanocarboximidamida Se burbujeó gas de cloruro de hidrógeno a través de una solución de ciclobutanocarbonitrilo (2.0 g, 24.65 mmol) en metanol (10 mL) y éter dietílico (12 ml_) durante 2 horas a 0°C. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo se disolvió en metanol y se enfrió a 0°C. Se agregó amoniaco metanólico y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar clorhidrato de ciclobutanocarboximidamida (3.0 g, 92%). El material fue usado para el siguiente paso sin más purificación.
Paso 3: 2-Ciclobutil-4-(dimetoximetil)pirimidina A una solución de 4-(dimetilamino)-1 , 1 -dimetoxibut-3-en-2-ona (2.0 g, 11.5 mmol) en etanol se agregó clorhidrato de ciclobutanocarboximidamida (3.0 g, 22.3 mmol) y trietilamina (2.33 g, 23.0 mmol) bajo nitrógeno a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se refluyó durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida. Al residuo se agregó agua y la mezcla fue extraída con acetato de etilo. Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna para dar 2-ciclobutil-4-(dimetoximetil)pirimidina como un líquido incoloro (300 mg, 12%). MS (ES+APCI) (M + H) 209.2; tiempo de retención de LCMS: 3.257 minutos (Método J).
Paso 4: 2-C¡clobutilpir¡mid¡na-4-carbaldehído Una solución de 2-ci clobuti I - 4 - ( d i metoxi m eti I) pi ri m i di na (300 mg, 1.4 mmol) en ácido clorhídrico acuoso (3N, 5 ml_) se calentó a 50°C durante 16 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, después se diluyó con agua, neutralizó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con acetato de etilo. Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida para dar el compuesto del titulo como un líquido de color café (200 mg). MS (ES + ) (M + H) 163.16.
Intermediario 34: 2-Ciclopropiloxazol-4-carbaldehído Paso 1 : 2-Ciclopropil-N-metoxi-N-metiloxazol-4-carboxamida A una solución de ácido 2-ciclopropiloxazol-4-carboxílico (0 1 g, 0.653 mmol) en diclorometano seco (15 mL) se agregó carbodiimida de 1 -etil-3-(3-dimetilaminopropilo) (0.25 g, 1.3 mmol) e hidroxibenzotriazol (0.175 g, 1.3 mmol) a 0°C en forma de porción. Entonces se agregó N, O-dimetilhidroxilamina (64 mg, 0.653 mmol) seguido por trietilamina (0.26 mL, 1.95 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas después se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y solución de salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida. El compuesto crudo se purificó por TLC preparativo (25% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 2-ciclopropil-N-metoxi-N-metiloxazol-4-carboxamida (100 mg, 83%).
MS (ES + ) (M + H) 197.25; tiempo de retención de LCMS: 2.82 minutos (Método S).
Paso 2: 2-Ciclopropiloxazol-4-carbaldehído A una solución de 2-ciclopropil-N-metox¡-N-met¡loxazol-4-carboxamida (0.102 g, 0.52 mmol) en diclorometano seco (15 ml_) se agregó hidrato de diisobutilaluminio (1M en tolueno) (1.04 mi, 1.04 mmol) a -78°C. La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 45 minutos. La mezcla de reacción se extinguió con hidróxido de sodio acuoso (2M) y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida para dar 2-ciclopropiloxazol-4-carbaldeh ido que se usó sin más purificación. (65 mg) MS (API-ES + ) (M + H) 138.2.
Intermediario 35: 6-(Azetidin-1 -iDpicolinaldehído Paso 1: 2-(Azetidin-1 -il)-6-bromopiridina A una solución de 2,6-dibromopiridina (100 mg, 0.424 mmol) en dimetilsulfóxido (5 mL) se agregó carbonato de potasio (175.4 mg, 1.27 mmol) y cloruro de hidrógeno de azetidina (24.2 mg, 0.424 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a 80°C durante 16 horas, después se vertió en agua helada y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, y se concentraron bajo presión reducida para dar 2 -( azet id i n- -il)-6-bromopiridina (30 mg).
Paso 2: 6-(Azetidin-1 -il)picol¡naldehído Una solución de n-butillitio en hexanos (0.3 g, 4.69 mmol) se agregó en forma de gotas a una solución de 2-(azetidin-1 -il)-6-bromopiridina (0.5 g, 2.34 mmol) en tetrahidrofurano seco (20 ml_) a -78°C. Después de agitar durante 30 minutos a -78°C, se agregó N,N-dimetilformamida (0.34 g, 4.69 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a -78°C, después la mezcla de reacción se extinguió con una solución de cloruro de amonio acuosa y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (60-120 malla sílice; 4-5% acetato de etilo en éter de petróleo, dos veces) para dar 6-(azetid i n- 1 -i l)picol i n a Id eh í d o (0.2 g, 43%). MS (ES + ) ( + H) 163.1380; tiempo de retención de LCMS: 5.59 minutos (Método X).
Intermediario 36: 6-(Difluorometoxi)picol¡naldeh ido A una solución de 6-hidroxipicolinaldehído (2 g, 16 24 mmol) en acetonitrilo (20 mL) se agregó 2-cloro-2,2-difluoroacetato de sodio (4.46 g, 29.24 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a 70°C durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el sólido se filtró. Después, el material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (100-200 malla gel de sílice, 10% acetato de etilo en hexano) para dar el compuesto del título (1.2g, 42.85%). MS (ES + ) (M + H) 174.10 Intermediario 37: 6-(Difluorometil)picolinaldehido Paso 1: 6-(1 ,3-Dioxolan-2-il)picolinaldeh¡do A una solución de piridina-2,6-dicarbaldehído (5 g, 37.4 mmol) en benceno (100 ml_) se agregó etilenglicol (1.1 g, 18.5 mmol) y ácido p-toluenosulfónico (0.3 g, 1.8 mmol). La mezcla de reacción estaba equipada con un condensador Dean Stark y refluyó durante 15 minutos. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el crudo resultante se purificó vía cromatografía de columna para dar 6-(1 ,3-dioxolan-2-il)picolinaldehído (2 g, 30%). MS (ES + ) (M + H) 180.0495 Paso 2: 2-(Difluorometil)-6-(1 ,3-dioxolan-2-il)piridina A una solución de 6-(1 ,3-dioxolan-2-il)picolinaldehído (2 g, 11.1 mmol) en cloroformo (50 mL) se agregó trifluoruro de dietilaminoazufre (DAST) (2 mL) a 0°C. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 12 horas. La mezcla entonces se concentró bajo presión reducida, se diluyó con agua helada y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, se concentraron y purificaron vía cromatografía instantánea para dar 2-(difluorometil)-6-(1 ,3-dioxolan-2-il)piridina (1.62 g, 71%). MS (ES + API) (M + H) 202.1; tiempo de retención de LCMS: 2.876 minutos (Método H1).
Paso 3: 6-(Difluorometil)picolinaldehído A una solución de 2-(d if I u o rom et i l)-6-( 1.3-d i ox o la n-2- i I ) pi r i d i na (0.5 g, 2.4 mmol) se agregó 85% ácido fórmico (5 mL). La mezcla de reacción se calentó a 60°C durante 1.5 hora. La mezcla entonces se concentró bajo presión reducida, se diluyó con agua helada, se neutralizó con hidróxido de sodio acuoso (4N) y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, se concentraron y se purificaron vía cromatografía instantánea para dar 6-(difluorometil)picolinaldehído (0.2 g, 51%). MS (ES + ) (M + H) 158.16; tiempo de retención de LCMS: 5.28 minutos (Método H).
Intermediario 38: 3-Nitro-6-(2-(piridin-2-il)morfolino)piridin-2-arnina A una solución de 2-(piridin-2-il)morfolina (0.1 g, 0.609 mmol) en dímetilsulfóxido (5 mL) se agregó trietilamina (0.17 mL, 1.2 mmol). La solución resultante se agitó durante 10 minutos a temperatura ambiente, y después se agregó 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (105 mg, 0.609 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 4 horas, y después se enfrió a temperatura ambiente. Se agregó agua helada y la mezcla fue extraída con acetato de etilo. La capa orgánica combinada se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (80% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar el compuesto del título (0.1 g, 55%). MS (ES + ) (M + H) 302.25.
Intermediario 39: (ft)-1-(6-Amino-5-nitro iridin-2-il)-/V,/V-dimetil-piperidin-3-carboxamida Paso 1: 3-(Dimetilcarbamoil)piperidina-1 -carboxilato de (R)-fer-buti lo A una solución de ácido (R)-1 -(fer-butoxicarbonil)piperidina-3-carboxílico (10 g, 43.6 mmol) en N, V-dimetilformamida (150 ml_) se agregó 1 , 1 '-carbonildiimidazol (14.13 g, 87.23 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 10 minutos. Después se agregó en secuencia trietilamina (18.3 ml_, 130.2 mmol) y clorhidrato de dimetilamina (7.1 g, 87.2 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. El solvente se evaporó y el residuo fue tratado con agua- fría y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y concentró. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea para dar 3-(dimetilcarbamoil)piperid¡na-1 -carboxilato de (R)-ter-butilo (0.9g, 80%). MS (ES + APCI) (M + H) 257.1; tiempo de retención de LCMS: 2.829 minutos (Método D1).
Paso 2: Clorhidrato de (f?)-/V,A/-dimetilpiperidina-3-carboxamida A una solución de 3-(dimetilcarbamoil)piper¡dina-1 -carboxilato de (R)-fer-butilo (9 g, 35.15 mmol) en metanol (20 mL) a 0°C se agregó cloruro de hidrógeno en metanol (50 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El solvente se evaporó al vacío para dar clorhidrato de (f?)-A/,A/-dimetil-piperidina-3-carboxamida (7 g, 90%). MS (ES+APCI) [(M-2HCI) + H] 157.1; tiempo de retención de LCMS: 6.36 minutos (Método F1).
Paso 3: (R)-1-(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)-N,N-dimetilpiperidina-2-carboxamida A una solución de (R)-N, W-dimetilpiperidina-3-carboxamida (10 g, 64.04 mmol) en dimetilsulfóxido (100 ml_) se agregó trietilamina (17.8 mL, 128.08 mmol) y 6-cloro-3-nitrop¡ridin-2-amina (7.76 g, 44.82 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 16 horas. La mezcla de reacción se agregó a agua fría y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua fría 3 veces, se secó sobre sulfato de sodio y se evaporó bajo presión reducida. El compuesto crudo se purificó vía cromatografía instantánea y después se trató con 1 :1 éter de petróleo y éter dietílico para dar (R)-1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)-N,N-dimetilp¡peridina-3-carboxamida (11 g, 72%). MS (ES + APCI) (M + H) 294.1 ; tiempo de retención de LCMS: 2.777 minutos (Método E1).
Intermediario 40: (f?)-(1-(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-¡l)-(morfolino)metanona El compuesto del título fue preparado usando procedimientos análogos a aquellos usados para el intermediario 39, pero usando morfolina para el paso 1 , una solución saturada de cloruro de hidrógeno en éter, y éter dietílico como un solvente para el paso 2 y acetonitrilo para el paso 3. MS (ES+APCI) (M + H) 336.1 ; tiempo de retención de LCMS: 4.033 minutos (Método I).
Intermediario 41: 4-C¡clopropilpicol¡nimidato de etilo Paso 1: 4-Ciclopropilpicolinonitrilo A una solución de 4-bromopicolinonitrilo (0.2 g, 1.1 mmol) en tetrahidrof urano se agregó ácido borónico de ciclopropilo (0.093 g, 1.1 mmol) y tribásico de fosfato de potasio (0.694 g, 3.2 mmol). La mezcla de reacción resultante se desgasó con nitrógeno durante 10 minutos y después se agregó Pd(OAc)2 y S-phos. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 16 horas, después se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó vía cromatografía instantánea (10% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 4-ciclopropilpicolinonitrilo (0.1 g, 70%). MS (ES+APCI) (M + H) 145.2; tiempo de retención de LCMS: 3.02 minutos (Método J).
Paso 2: 4-Ciclopropilpicolinimidato de etilo A una solución de 4-ciclopropilpicolinonitrilo (0.04 g, 0.27 mmol) en etanol se agregó etóxido de sodio (0.022 g, 0.33 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla de reacción se concentró al vacío, se extinguió con agua, se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida para dar 4-ciclopropilpicolinimidato de etilo (0.045 g). El material se usó sin más purificación. MS (ES + APCI) (M + H) 190.9; tiempo de retención de LCMS: 1.700 minutos (Método G) Intermediario 42: 4-Ciclopropilpirimidina-2-carbimidato de etilo Paso 1 : 4-Ciclopropilpirimidina-2-carbonitrilo A una solución de diazabiciclooctano (0.013 g, 0.12 mmol) en dimetilsulfóxido y agua se agregó una solución de 2-cloro-4-ciclopropilpirimidina (0.2 g, 1.2 mmol) en dimetilsulfóxido seguido por cianuro de sodio (0.066 g, 1.3 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 48 horas. La mezcla entonces se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida. El compuesto crudo se purificó vía cromatografía instantánea (10% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 4-ciclopropilpírimidina-2-carbonitrilo (0.14 g, 77%). S (ES + APCI) (M + H) 146.1; tiempo de retención de LCMS 3.054 minutos (Método J).
Paso 2: 4-Ciclopropilpirimidina-2-carbimidato de etilo Se preparó 4-ciclopropílpirimidina-2-carbimidato de etilo usando un método análogo a aquél usado para el intermediario 41 paso 2 pero llevando a cabo la reacción por 16 horas en vez de 3 horas MS (ES + APCI) (M + H) 192.0.
Intermediario 43: 5-(/V-metilsulfamoil)nicot¡nim¡dato de etilo Paso 1 : 5-Ciano-/V-metilpiridina-3-sulfonamida A una solución de 5-bromo-/V-metilpiridina-3-sulfonamida (0.1 g, 0.39 mmol) en N, /V-dimetilformamida se agregó cianuro de zinc (0.056 g, 0.47 mmol). La solución se desgasó con nitrógeno durante 10 minutos, entonces se agregó tetraquis(trifenilfosfino)paladio(0) (30 mg). La mezcla de reacción fue calentada a 100°C durante 2 horas. La mezcla entonces se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánico se secó, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El compuesto crudo se purificó al enjuagar con éter dietílico para dar 5-ciano-N-metilpiridina-3-sulfonamida (60mg) que se usó sin más purificación.
Paso 2: 5-( W-met i I su If a m oi I ) n i cot i n i m id ato de etilo A una solución de 5-ciano-/V-metilpiridina-3-sulfonamida (0.1 g, 0.5 mmol) en etanol se agregó etóxido de sodio (0.03 g, 0.55 mmol).
Después de 2 horas, la mezcla se concentró bajo presión reducida.
El residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se concentró bajo presión reducida para dar 5-(/V-metilsulfamoil)-nicotinimidato (120 mg) como un sólido blanco crudo. El material se usó sin más purificación. MS (ES+APCI) 244.0; tiempo de retención de LCMS: 3.047 minutos (Método I).
Intermediario 44: 1-Óxido de 3-( 1 -ca rboxi cid opro pi I) p i rid ina Se agregó 70% ácido mefa-cloroperoxibenzoico (1.2 g, 4.9 mmol) a una solución de 1 -(piridin-3-il)ciclopropanocarboxilato de etilo (400 mg, 2.4 mmol) en diclorometano (5 mL) a temperatura ambiente y se agitó durante 16 horas. El precipitado resultante se filtró y tituló con diclorometano para dar el compuesto del titulo (250 mg).
Intermediario 45: 6-(3-(6.7-Dihidro-5H-pirrolof2.1 -clf 1 ,2,4Uriazol-3-il)piperidin-1-il)-3-nitropiridin-2-amina A una solución de 3-(piperidin-3-il)-6,7-dihidro-5H-pirrolo[2, 1 -c][1 ,2,4]triazol (900 mg, 4.68 mmol) en acetonitrilo (50 mL) se agregó 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (730 mg, 4.2 mmol) y trietilamina (1.42 g, 14.04 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción fue agitada durante 30 minutos a reflujo, después se dejó enfriar a temperatura ambiente y se agitó durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo resultante se dividió entre agua y acetato de etilo. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se concentraron bajo presión reducida y se purificaron vía cromatografía de columna para dar el compuesto del título (1.0 g, 64.9%). MS (ES + ) (M + H) 330.33; tiempo de retención LCMS: 2.85 minutos (Método S).
Intermediario 46: 1-(1-Metil-1H-pirazol-5-il)ciclopropanocarbonitrilo Paso 1: 2-Ciano-2-(1-metil-1 H-pirazol-5-il)acetato de íer-butilo A una solución de cianoacetato de íer-butilo (340 µ? 2.40 mmol) en 1,4-dioxano (5 mL) se agregó f-butóxido de potasio (1M en tetrahidrofurano, 5 mL, 5.0 mmol) a temperatura ambiente. Después de 10 minutos, una solución de 5-yodo-1 -metil-1 H-pirazol (500 mg, 2.40 mmol) en 1,4-dioxano (5 mL) y se agregó tetraquis(trifenil-fosfino)paladio(O) (75 mg, 0 065 mmol). La mezcla de reacción fue agitada durante 16 horas a 70°C. La mezcla se enfrió y después se diluyó con éter dietílico (50 ml_) y una solución de 10% acuosa de ácido cítrico. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con éter dietílico (2 x 10 ml_). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (15 mL) se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de gel de sílice (gradiente: 30% a 40% acetato de etilo en heptano) para dar 2-ciano-2-(1 -metil-1 H-pirazol-5-il)acetato de fer-butilo (132.8 mg) como un aceite café pálido. MS (ES + ) (M + H) 222.0, tiempo de retención de LCMS: 2.74 minutos (Método L); 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.50 (s, 9H), 3.93 (s, 3H), 4.80 (s, 1H), 6.39 (d, 1 H), 7.48 (d, 1 H).
Paso 2: 2-( 1 -Meti I- 1 H-pirazol-5-il)acetonitrilo Una mezcla de 2-ciano-2-(1 -metil-1 H-pirazol-5-il)acetato de ter-butilo (130 mg, 0.588 mmol) en hexafluoroisopropanol (1 mL) se sometió a radiación de microondas a 130°C durante 15 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con éter dietílico (30 mL), se lavó con agua (5 mL) y salmuera (5 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, se concentró bajo presión reducida y se secó al alto vacío para dar 2-(1 -metil-1 H-pirazol-5-il)acetonitrilo (68.3 mg) como un aceite amarillo pálido. H NMR (500 MHz, CDCI3) d 3.77 (s, 2H), 3.89 (s, 3H), 6.30 (s, 1 H), 7.45 (s, 1 H).
Paso 3: 1-(1-Metil-1 /-/-pirazol-5-il)c¡clopropanocarbonitrilo A una solución de 2-(1 -metil-1 H-pirazol-5-il)acetonitrilo (65 mg, 0.54 mmol) en N, / -dimetilformamida (3 mL) se agregó f-butóxido de potasio (1M en tetrahidrofurano, 1.2 mL, 1.2 mmol) y 1,2-dibromoetano (130 µ?, 1.5 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente después a 70°C durante 7h horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se extinguió con agua (2 mL) y se extrajo con éter dietílico (3x10 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (3 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y concentraron al vacío. El residuo se secó al alto vacío. Una solución del residuo y 1,2-dibromoetano (65 µL·, 0.75 mmol) en N, / -dimetilformamida (0.5 mL) se agregó en forma de gotas a una suspensión de hidrato de sodio (se lavó, 23 mg, 1.0 mmol) en N, / -dimetilformamida (1.0 mL) a temperatura ambiente. Después de 16 horas, se agregaron porciones adicionales de 1 ,2-dibromoetano (25 µ\_, 0.29 mmol) e hidrato de sodio (8 mg, 0.35 mmol) a la mezcla de reacción a temperatura ambiente. Después de 2 horas, la mezcla fue extinguida con agua (3 mL) y extraída con éter dietílico (2 x 10 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (3 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se seco al alto vacío para dar el 1 -( 1 -metil-1 H-pirazol-5-il)ciclopropanocarbonitrilo volátil (20.1 mg, 25%) como un aceite café. 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.34-1.41 (m, 2H), 1.70-1.76 (m, 2H), 4.03 (s, 3H), 6.10 (d, 1H), 7.39 (d, 1H).
Intermediario 47: Clorhidrato de 1 -(m-tolil)ciclopropanocarbimidato de etilo A 1 -(m-tolil)ciclopropanocarbonitrilo (100 mg, 0.64 mmol) se agregó una solución saturada de cloruro de hidrógeno en etanol (2 ml_). Después de 16 horas a temperatura ambiente y 2 horas a 70°C y otras 16 horas a temperatura ambiente, la mezcla se concentró al vacio y el residuo se secó al alto vacío para dar el compuesto del título (147.1 mg, 96.5%) como un sólido incoloro. MS (ES + ) (M + H) 204.1, tiempo de retención de LCMS: 3.10 minutos (Método L).
Intermediario 48: Clorhidrato de 1 -(4-metoxifenil)ciclopropano-carbimidato de etilo A una solución fría de 1 -(4-metoxifenil)ciclopropanocarbonitrílo (35 mg, 0.2 mmol) en etanol (100 µ?_, 2 mmol) se agregó cloruro de acetílo (170 µ?, 2.39 mmol). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 16 horas, después se concentró al vacío y se secó.
Al residuo se agregó una solución saturada frescamente preparada de cloruro de hidrógeno en etanol (1 ml_). Después de 16 horas, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para dar el compuesto del título (56 mg) como un aceite que se usó sin más purificación.
Intermediario 49: Clorhidrato de 1 -(2-metoxifenil)c¡clopropano-carbimidato de etilo El compuesto del título (50 mg, aceite) se preparó por un método análogo a aquél usado para el intermediario 48 pero usando 1-(2-metoxifenil)ciclopropanocarbonitrilo.
Intermediario 50: 5-Ciclopropilnicotinimidato de etilo Paso 1: 5-Ciclopropilnicotinonitrilo A una solución de 3-bromo-5-cianopiridina (1 g, 5.3 mmol) en tetrahidrofurano se agregó ácido borónico de ciclopropilo (0.5 g, 5.6 mmol) y fosfato de potasio (1.08 g, 15.9 mmol). La solución resultante se desgasó con nitrógeno durante 10 minutos y después se agregó acetato de paladio (II) y S-phos. La mezcla de reacción se refluyó durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo y se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna para dar 5-Ciclopropilnicotinonitrilo (0.45 g, 58%). MS (ES + ) (M + H) 145.1774.
Paso 2: 5-Ciclopropilnicotinimidato de etilo A una solución de 5-ciclopropilnicotinonitrilo (0.45 g, 3.1 mmol) en etano! se agregó etóxido de sodio (0.212 g, 3.1 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida, y el residuo se dividió entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se concentró bajo presión reducida para dar el compuesto del título (0.45 g) que se usó sin más purificación. MS (ES + APCI) (M + H) 191.2; tiempo de retención de LCMS 1.149 minutos (Método L1).
Intermediario 51 : (f?)-1-(5,6-diaminopirid¡n-2-il)-N-etil-N-metil-piperidina-3-carboxamida-1-(5,6-diaminopiridin-2-il)-N-etil-N-metilpiperidina-3-carboxamida Paso 1 ; 3-(Etil(metil)carbamoil)piperidina-1 -carboxilato de (R)-ter-butilo Se preparó 3-(etil(metil)carbamoil)piperidina-1 -carboxilato de (R)-fer-butilo por un método análogo a aquél usado para intermediario 1 , paso 1 , pero usando /V-metiletanamina y N,N-dimetilformamida. MS (ES + ) (M + H) 271.2; tiempo de retención de LCMS: 2.191 minutos (Método W).
Paso 2: (f?)-/V-etil-/V-metilpiperidina-3-carboxamida A una solución de 3-(etil(metil)carbamoil)p¡peridina-1 -carboxilato de (R)-ter-buiWo (1 g, 3.7 mmol) en éter dietílico (10 mL) a 0°C se agregó cloruro de hidrógeno etereal (15 mL). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó a esa temperatura durante 30 minutos. El solvente se destiló y el residuo resultante se lavó con éter dietílico para dar (R)-N-etW-N-metilpiperidina-3-carboxamida (1 g). MS (ES + ) (M + H) 171.23; tiempo de retención de LCMS: 2.38 minutos (Método M1).
Paso 3: (R)-1-(6-Amino-5-n¡tropiridin-2-il)-N-etil-N-met¡lpiper¡dina-3-carboxamida A una solución de ( )-N-etil-N-metilpiperidina-3-carboxamida (600 mg, 4.1 mmol) en dimetilsulfóxido (6 mL) se agregó 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (0.58 g, 3.3 mmol) y trietílamina (1.2 mL, 8.3 mmol) a temperatura ambiente La mezcla de reacción se calentó a 80°C durante 18 horas. La mezcla de reacción se vertió en agua helada, se extrajo con acetato de etilo y se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (10% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)-N-etil-N-metilpiperidina-3-carboxamida (500 mg, 28.4%). MS (ES + ) (M + H) 308.31.
Paso 4: (ft)-1-(5,6-Diaminopiridin-2-il)-/V-etil-A/-metilpiperidina-3-carboxamida A una solución de (f?)-1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)-/V-etil- V-metilpiperidina-3-carboxamida (200 mg, 0.65 mmol) en etanol (10 mL) se agregó paladio-sobre-carbón (0.2 g) en etanol (10 mL) a temperatura ambiente. La mezcla se sometió a una atmósfera de hidrógeno usando un globo relleno con gas de hidrógeno. La mezcla se filtró a través de Celita para dar el compuesto del título. El filtrado se usó sin más purificación.
Intermediario 52: (R)-(4-(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)morfolin-2-il)-(morfolino)metanona El compuesto del título se preparó por un método análogo al intermediario 51, pero refluyendo la mezcla de reacción durante 30 minutos y después agitando a temperatura ambiente durante 18 horas durante el paso 3 y omitiendo el paso final. MS (ES + APCI) (M + H) 338.2; tiempo de retención de LCMS: 2.734 minutos (Método J).
Intermediario 53: 6-(Trifluorometil)picolinimidato de etilo Se agregó etóxido de sodio (197 mg, 2.9 mmol) a una solución de 6-(trifluorometil)picolinonitrilo (250 mg, 1.45 mmol) en etanol (10 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada durante 2 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo resultante se disolvió en diclorometano, se lavó con agua, se secó sobre sulfato de sodio, y se concentró bajo presión reducida para dar el compuesto del título (291 mg) que se usó sin más purificación. MS (ES + ) (M + H) 219.16 Intermediario 54: 2-(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -M)-2-metilpropanimidato de etilo Paso 1: 2-(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -il)-2-metilpropanonitrilo A una suspensión de hidrato de sodio (630 mg, 16 mmol, 60% dispersión en aceite mineral) en dimetiisulfóxido (10 mL) se enfrió a 18°C se agregó una solución de 2-(4-cloro-1 H-pirazol- 1 -il)acetonitrilo (500 mg, 3.53 mmol) y metilyoduro (650 µ?_, 10.0 mmo!) en dimetilsulfóxido (5 mL) bajo nitrógeno. La suspensión fue agitada a temperatura ambiente durante 1.5 hora. La mezcla de reacción se agregó a una solución fría de cloruro de amonio acuoso saturado (25 mL) sobre un periodo de 5 minutos. La mezcla se extrajo con éter dietílico (20 mL x 3). Los orgánicos combinados se lavaron con agua (5 mL x 4) y salmuera (5 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida para dar 2-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)-2-metilpropanonitrilo (654.6 mg, >99%) que se usó sin más purificación. MS (ES + ) (M + H) 170.0; tiempo de retención de LCMS 2.70 (Método L).
Paso 2: 2-(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -il)-2-metilpropanimidato de etilo A una solución de etóxido de sodio, preparada de sodio (20 mg, 1 mmol) y etanol (4 mL), se agregó una solución de 2-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)-2-metilpropanonitrilo (225 mg, 1.33 mmol) en etanol 1 (mL). La mezcla de reacción fue agitada a 70°C durante 30 minutos. El solvente fue eliminado bajo un chorro de nitrógeno y el residuo se secó al alto vacío para dar el compuesto del título crudo como un sólido incoloro, que se usó sin más purificación.
Intermediario 55: Clorhidrato de 1 -(4-(metiltio)-1 /-- i razo I - 1 -iDciclo-propanocarbimidato de etilo Paso 1 : 4-(Metiltio)- 1 H-pirazol Una suspensión de 4-bromopirazol (4 g, 27 mmol) en tetrahidrofurano (68 mL) se enfrió a 0°C y n-butil-litio (2.5 M en hexanos, 35.9 mL, 90 mmol) se agregó en forma de gotas sobre un periodo de 20 minutos. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 1 hora y después se enfrió a 0°C. Se agregó 1 ,2-dimetildisulfuro (2.66 mL, 30.0 mmol) en forma de gotas. La mezcla de reacción fue agitada a 0°C durante 1.5 hora. La mezcla de reacción se vertió en agua (150 mL) y después se acidificó a pH-8 con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y una solución de ácido clorhídrico acuoso (1 N). La mezcla fue extraída con acetato de etilo (150 mL x 3) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida para dar 4-(metiltio)-1 H-pirazol (3300 mg). 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 2.36 (s, 3H), 7.63 (s, 2H).
Paso 2: 2-(4-( M et ¡ It io)- 1 H-p i razo I- 1 -i I ) a ceton itri I o Se agregó hidrato de sodio (631 mg, 16 mmol) a una solución de 4-(metiltio)- 1 H-pirazol (1500 mg, 13.14 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (30 mL) bajo nitrógeno a 0°C. La mezcla de reacción fue agitada a 0°C hasta que ya no se observó evolución ae gas. Se agregó bromoacetonitrilo (1.005 mL, 14 43 mmol) en forma de gotas y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla fue vertida en una solución de cloruro de amonio acuoso (30 mL) y se extrajo con acetato de etilo (60 mL x 3). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio. El residuo se filtró a través de un tapón de gel de sílice que se eluyó con acetato de etilo y el filtrado se concentró bajo presión reducida El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (0-50% acetato de etilo en heptanos) para dar 2-(4-(metiltio)-1 /--pirazol- -il)acetonitrilo (1460 mg, 72.54%). MS (ES + ) (M + H) 154.1 ; tiempo de retención de LCMS: 0.40 minuto (Método N).
Paso 3: 1-(4-(Metiltio)-1H-pirazol-1-il)ciclopropanocarbonitrilo A hidrato de sodio (2.29 g, 57 mmol, 60% dispersión en aceite mineral) se agregó éter de petróleo (40 mL). La suspensión fue agitada durante 10 minutos y el sobrenadante fue eliminado. Se agregó éter de petróleo (40 mL) una vez más y la suspensión fue agitada durante otros 10 minutos. El sobrenadante fue eliminado una vez más después de reposar la suspensión a fin de eliminar el aceite mineral. Se agregó lentamente dimetilsulfóxido (25 mL) a 20°C bajo nitrógeno. Una solución de 2-(4-(metiltio)-1 H-pirazol-1 - i I ) a cet o n itr i I o (1.46 g, 9.53 mmol) y 1 ,2-diclorometano (2.46 mL, 28.5 mmol) en dimetilsulfóxido (23 mL) se agregó en forma de gotas sobre un periodo de 15 minutos. Se agregó 1 ,2-dibromoetano adicional (0.5 mL) y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción fue vertida en una solución acuosa saturada fría de cloruro de amonio (150 mL). La mezcla fue agitada durante 10 minutos y después fue extraída con éter dietílico (100 ml_ x 3). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (95:5 a 60:40 heptano: acetato de etilo) para dar 1-(4-(metiltio)- H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbonitrilo (390 mg, 22.8%). 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.79-1.83 (m, 4H), 2.36 (2, 3H), 7.52 (s, 1 H), 7.58-7.60 (m, 1 H).
Paso 4: Clorhidrato de 1 - (4 - (m et i ! t i o )- 1 H-pirazol- 1 -il)ciclopropano-carbimidato de etilo A una solución saturada de cloruro de hidrógeno en etanol (3.5 mL) a 0°C se agregó una solución de 1 - (4 - ( m e t ¡ It i o) - 1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbonitrilo (125 mg, 0.697 mmol) en etanol (0.5 mL). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 1.5 hora. El solvente fue eliminado bajo un chorro de nitrógeno para dar el compuesto del título (210 mg). El material se usó sin más purificación.
Intermediario 56: 1-(4-Cloro-1 H-pirazol-1 - ¡Dciclopropanocarbimidato de etilo Paso 1: 1 -(4-Cloro-1 H-pirazol-1 - i I ) ci el o pro pa no ca rbo n it ri I o En un frasco con el fondo redondo de 2 L de 4 cuellos, previamente secado con una pistola de calor al alto vacío, se agregó dimetilsulfóxido (175 mL). El frasco fue colocado en un baño de 10°C e hidrato de sodio (60% dispersión de aceite, 17.0 g, 300 mmol) se agregó en forma" de porción con agitación bajo nitrógeno. La suspensión resultante se agitó durante 10 minutos antes de agregar una solución de 2-(4-cloro-1 H-pirazol-1 - i I ) a cet on it ri I o (10.0 g, 70.6 mmol) y 1 ,2-dibromoetano (18.3 mL, 213 mmol) en dimetilsulfóxido (175 mL) en forma de gotas sobre un periodo de 30 minutos. La temperatura interna se mantuvo entre 13 y 20°C durante el proceso de adición. La mezcla de reacción fue agitada durante 5.5 horas al mismo tiempo manteniendo la temperatura interna a o debajo de 20°C, seguido por agitación por 1 hora adicional a temperatura ambiente. La mezcla se enfrió a 10°C, y después se agregó lentamente una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (600 mL). La mezcla fue agitada a 10°C durante 15 minutos, después extraída con acetato de etilo (1000 mL x 3). Los orgánicos combinados fueron lavados con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (10-100% diclorometano en hexanos), y el residuo se cristalizó a partir de una mezcla de hexanos/éter dietílico para dar 1 -(4-cloro- 1 H-pirazol- 1 -il)ciclopropanocarbonitrilo (7.654 g). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.80-1.82 (m, 4H), 7.47 (d, 1H), 7.62 (d, 1H); MS (EI + ) (M + ) 167; tiempo de retención de GCMS 1.64 minutos (Método O).
Paso 2: 1-(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbimidato de etilo A una solución de 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbo-nitrilo (17.3 g, 103 mmol) en etanol (50 mL) se agregó etóxido de sodio (preparado a partir de 3.2 g, 139 mmol de metal de sodio disuelto en 150 mL de etanol). La mezcla de reacción fue agitada a 70°C durante 2 horas para dar 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -¡l)ciclopropano-carbimidato de etilo que se usó para el siguiente paso sin más purificación. Se concentró una alícuota de la solución para análisis: 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.25 (t, 3H), 1.46 (q, 2H), 1.73 (q, 2H), 4.15 (q, 2H), 7.51 (s, 1H), 7.52 (s, 1H).
Intermediario 57: 1-(4-Metoxi-1 H-pirazol-1 - ¡Dciclopropanocarbimidato de etilo El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el intermediario 56, pero usando 2-(4-metoxi-1 H-pirazol-1 -il)acetonitrilo como el material de partida. 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.37 (t, 3H), 1 63-1.72 (m, 4H), 3.76 (s, 3H), 4.16 (q, 2H), 7.17 (s, 1H), 7.35 (s, 1 H).
Intermediario 58: Ácido 1 -(2-cicloprop¡loxazol-4-il)ciclopropan-carboxílico Paso 1: 2-(2-Ciclopropiloxazol-4-il)acetato de etilo A una solución de ciclopropanocarboxamida (3.5 g, 41.46 mmol) en tolueno y 1,4-dioxano (50 mL, 1:1) se agregó 4-cloro-3-oxobutanoato de etilo (20.0 g, 121.95 mmol). La mezcla de calentó a 100°C durante 18 horas, después se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna en 100-200 malla sílice (20% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 2-(2-cicloprop¡loxazol-4-il)acetato de etilo (3.5 g). MS (ES + APCI) 196.1; tiempo de retención de LCMS: 4.029 minutos (Método Q1).
Paso 2: 1 -(2-Ciclopropiloxazol-4-il)ciclopropanocarboxilato de etilo Se agregó carbonato de cesio (8.39 g, 25.78 mmol) 1,2-dibromoetano a una solución de 2-(2-ciclopropiloxazol-4-il)acetato de etilo (2.0 g, 10.03 mmol) en N, /V-dimetilformamida (10 ml_) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se diluyó con agua, después se extrajo con acetato de etilo, se secó y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna en 100-200 malla sílice (10% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1 -(2-ciclopropiloxazol-4-il)ciclopropanocarboxilato de etilo (200 mg). MS (ES + ) (M + H) 222.2; tiempo de retención de LCMS: 2.514 minutos (Método N1).
Paso 3: Ácido 1 -(2-ciclopropiloxazol-4-il)ciclopropanocarboxílico Una solución acuosa de hidróxido de sodio (4N, 5 mL) se agregó a una solución de 1 -(2-ciclopropiloxazol-4-il)ciclopropano-carboxilato de etilo (200 mg, 0.9 mmol) en tetrahidrofurano y agua (4 mL, 1:1). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 12 horas. La mezcla se acidificó con una solución acuosa de ácido clorhídrico (4N), se extrajo con acetato de etilo, se secó y concentró bajo presión reducida para dar el compuesto del título (150 mg). MS (ES + APCI) (M + H) 194.1; tiempo de retención de LCMS: 3.515 minutos (Método Q1).
Intermediario 59: 2-(4-Fluoro-1 /-/-pirazol-1 -¡Dpropanimidato de etilo Paso 1: 2-(4-Fluoro-1 H-pirazol-1 -il)propanonitrilo Se agregó 4-fluoro-1 H-pirazol (300 mg, 3.49 mmol), 2-cloro-propanonitrilo (374 mg, 4.18 mmol), carbonato de cesio (1.84 g, 5.23 mmol) y acetonitrilo anhidro (5.0 mL) en un frasco con el fondo redondo. La mezcla de reacción se calentó a 100°C durante 2 horas. Se agregó agua y la mezcla fue extraída con éter (100 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (0-50% acetato de etilo en heptanos) para dar 2-(4-fluoro-1 /-/-pirazol-1 -il)propanonitrilo (398 mg, 82%). MS (EI + ) (M + ) 139, tiempo de retención de GCMS: 0.78 minuto (Método O) Paso 2: 2-(4-Fluoro-1 /-/-pirazol-1 -il)propanimidato de etilo - A una solución de etóxido de sodio, preparado al agregar metal de sodio sólido (64.4 mg, 2.80 mmol) a etanol (10 mL), se agregó una solución de 2-(4-fluoro-1 /-/-pirazol-1 -il)propanonitrilo (390 mg, 2.80 mmol) en etanol (2 mL). La mezcla de reacción fue agitada a 70°C durante 18 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se usó sin más purificación. MS (EI + ) (M + ) 186; tiempo de retención de GCMS: 1.27 minutos (Método O).
Intermediario 60: 2-(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -iDpropanimidato de etilo Paso 1: 2-(4-C loro- 1 H-p i razo I- 1 -i I ) propa n on itril o Se agregó 4-cloro-1 H-pirazol (4.05 g, 39.5 mmol), 2-cloropropanonitrilo (3.71 g, 41.5 mmol), carbonato de cesio (15.6 g, 44.3 mmol) y tetrahidrofurano anhidro (20 mL) en un tubo sellado y la mezcla de reacción se calentó a 100°C durante 2 horas. La mezcla se diluyó con éter (100 mL) y se filtró. Los sólidos se enjuagaron con éter (30 mL x 3) y el filtrado se diluyó con diclorometano (10 mL). La solución se concentró bajo presión reducida para dar el compuesto del titulo como aceite (7.15 g). El material fue tomado al siguiente paso sin más purificación. 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.90 (d, 3H), 5.21-5.30 (m, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.58 (s, 1H); MS (EI + ) (M + ) 155; tiempo de retención de GCMS: 1.23 minutos (Método O).
Paso 2: 2-(4-Cloro-1 -- p i razol- 1 -il)propanimidato de etilo Una solución de etóxido de sodio, preparado al agregar sodio sólido (420 mg, 18.2 mmol) en etanol (20 mL), se agregó a una solución de 2-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)propanonitrilo (2530 mg, 13.0 mmol) en etanol (4 mL). La mezcla de reacción fue agitada a 70°C durante 3 horas. Análisis 1H NMR de la mezcla de reacción mostró el producto deseado. La mezcla se usó sin más purificación. 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.30 (t, 3H), 1.75 (m, 3H), 4.19 (m, 2H), 4.86 (m, 1 H), 7.47 (s, 1 H), 7.52 (s, 1 H).
Intermediario 61: Ácido 1 -(pirazin-2-il)ciclopropanocarboxílico Paso 1: 1 -(Pirazin-2-il)ciclopropanocarbonitrilo A una solución de hidrato de sodio (0.386 g, 16.1 mmol) en N, /V-dimetilformamida anhidro (5 mL) se agregó en forma de gotas una solución de 2-(pirazin-2-il)acetonitrilo (0.55 g, 4.6 mmol) y 1,2-dibromoetano (2.25 g, 11.9 mmol) en N, / -dimetilformamida anhidra (8 mL) sobre un periodo de 10 minutos a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada durante 18 horas, después fue extinguida con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 100% diclorometano) para dar 1 -(pirazin-2-il)ciclopropanocarbonitrilo (210 mg, 31%).
Paso 2: Ácido 1 -(pirazin-2-il)ciclopropanocarboxílíco Una solución de hidróxido de sodio 20% acuoso (1 mL) se agregó a una solución de 1 -(pirazin-2-il)ciclopropanocarbonitrilo (0.2 g, 1.37 mmol) en metanol (10 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 36 horas. La mezcla se enfrió, y después el solvente fue eliminado bajo presión reducida. El residuo resultante se dividió entre agua y acetato de etilo. La capa acuosa se neutralizó con ácido clorhídrico acuoso (3N) y el agua fue eliminada bajo presión reducida. Al residuo se agregó metanol y diclorometano. La mezcla se filtró para eliminar los sólidos ¡nsolubles y el filtrado se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida para dar el compuesto del título (100 mg). S (ES-) ( -1) 162.9.
Intermediario 62: 1 -(Pir¡m¡din-2-il)ciclopropanocarbaldehído Paso 1: 1 -(Pirimidin-2-íl)ciclopropanocarbonitrilo Se preparó 1 -(pirimidin-2-il)ciclopropanocarbonitrilo por un método análogo a aquél usado para el intermediario 61, paso 1. MS (ES + ) (M + H) 146.1.
Paso 2: 1 -(Pirimidin-2-il)ciclopropanocarbaldehído Se agregó hidrato de diisobutilaluminio (1 en tetrahidrofurano, 10.9 mL, 11 mmol) en forma de gotas a una solución de -(pirimidín-2-il)ciclopropanocarbonitrilo (0.2 g, 1.37 mmol) en tolueno anhidro (10 mL) a -78°C sobre un periodo de 15 minutos. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y fue agitada a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se enfrió de nuevo a -78°C y se agregó otra porción de hidrato de diisobutilaluminio ( 1 M en tetrahidrofurano, 10.9 mL, 11 mmol). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante otros 30 minutos. La mezcla fue extinguida con hidróxido de sodio acuoso (2N) a -20°C y después se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celita y el filtrado fue extraído con acetato de etilo. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar el compuesto del título (0.125 g). El material se usó sin más purificación. MS (ES + APCI) (M + H) 149.0.
Intermediario 63: 1 -(1 H-pirazol-1 -¡Pciclopropanocarbimidato de etilo Paso 1: 1 -( 1 H-P i razo I- 1 -i I )ci el o pro pa noca rbo n it r i lo Se lavó hidrato de sodio (4.65 g, 121 mmol, 60% dispersión de aceite) con éter de petróleo bajo una atmósfera de nitrógeno. El sobrenadante fue eliminado después de reposar la suspensión a fin de eliminar el aceite mineral. Entonces una solución de 2-(1H-pirazol-1 -i I )aceton itri lo (3 g, 27 mmol) y 1 ,2-dibromoetano (6.98 mL, 81 mmol) en dimetilsulfóxido (90 mL) se agregó a 0°C sobre un periodo de 40 minutos. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 días. Una solución acuosa saturada de cloruro de amonio se agregó y la mezcla fue agitada a 0°C durante 15 minutos, extraída con éter dietílico, se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida. El crudo resultante se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 5-12% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1-( 1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbonitrilo (1 g, 28%).
Paso 2: 1-(1 H-pirazol- -il)ciclopropanocarbimidato de etilo Se agregó metal de sodio (12 mg 0.52 mmol) a etanol anhidro (3 mL) a temperatura ambiente y la mezcla fue agitada durante 15 minutos. Se agregó 1 -(1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbonitrilo (0.1 g, 0.75 mmol) disuelto en etanol (2 mL) y la mezcla de reacción se calentó a 70°C durante 90 minutos. La solución resultante se usó sin más purificación.
Intermediario 64: 1-(4-Fluoro-1/-/-pirazol-1-il)c¡clopropanocarb¡midato de etilo Paso 1: 2-(4-Fluoro-1 H-pirazol-1 - i I) a ceto n itri I o Se suspendió hidrato de sodio (306 mg, 12.78 mmol, 60% dispersión de aceite) en tetrahidrofurano y la suspensión se enfrió a 0°C. Una solución de 4-fluoro-1 H-pirazol (1.0 g, 11.62 mmol) y 2-bromoacetonitrilo (1.39 g, 11.62 mmol) en tetrahidrofurano a 0°C se agregó en forma de gotas sobre un periodo de 40 minutos. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas, y después se agregó una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La mezcla fue extraída con éter dietílico, y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 5-10% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 2-(4-fluoro-1 H-pirazol-1 -i I) aceton itri lo (1 g).
Paso 2: 1-(4-Fluoro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbonitrilo Se lavó hidrato de sodio (1.26 g, 52.75 mmol, 60% dispersión de aceite) con éter de petróleo bajo una atmósfera de nitrógeno. El sobrenadante fue eliminado después de reposar los sólidos, entonces se agregó una solución de 2-(4-fluoro-1 7-pirazol-1 -il)acetonitrilo (1.1 g, 8.79 mmol) y 1 ,2-dibromoetano (2.28 mL, 26.37 mmol) en dimetil-sulfóxido (90 mL) a 0°C sobre un periodo de 40 minutos. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. Una solución acuosa saturada de cloruro de amonio se agregó y la mezcla fue extraída con éter dietílico. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 5-12% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1 -(4-fluoro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropano-carbonitrilo (300 mg).
Paso 3: 1 -(4-Fluoro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbimidato de etilo Se agregó metal de sodio (47 mg, 1.98 mmol) a etanol anhidro (4 mL) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada durante 15 minutos. Se agregó una solución de 1 -(4-fluoro-1 H-pirazol-1 - i I ) c i c I o -propanocarbonitrilo (0.1 g, 0.66 mmol) en etanol (2 mL) y la mezcla de reacción se calentó a 70°C durante 90 minutos. La solución resultante se usó sin más purificación.
Intermediario 65: 1 -(2H-1 ,2,3-triazol-2-il)ciclopropanocarbimidato de etilo El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el intermediario 64, pero usando 1 ,2,3-triazol como el material de partida.
Intermediario 66: 1 -(1 H-imidazol-1 -il)ciclopropanocarbaldeh ido Paso 1: 1 -(1 H-imidazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de etilo Se agitó clorhidrato de 1 -aminociclopropanocarboxilato de etilo (850 mg, 6.58 mmol), ácido fosfórico (85%, 0.2 ml_), glioxal (40%, 0.76 ml_) y formaldehído (37%, 0.5 ml_) en agua (4 ml_) durante 15 minutos a temperatura ambiente. La mezcla de reacción entonces se calentó a 90°C seguido por la adición de cloruro de amonio (354 mg) en agua (3 mL). La mezcla resultante se agitó a 90°C durante 1 hora. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se neutralizó usando hidróxido de potasio acuoso (3N) a 10°C. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y se co-destiló con tolueno. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 0-5% metanol en dicloro metano) para dar 1-(1H-imidazol-1-il)ciclopropanocarboxilato de etilo (350 mg).
Paso 2: ( 1 -( 1 H-l m id azol- 1 -i I ) ci el opropi I ) m et a n o I Se agregó hidrato de diisobutilaluminio (1M en tetrahidrof urano, 8 mL, 8 mmol) en forma de gotas a una solución de 1 -(1 H-imidazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de etilo (0.3 g, 1.6 mmol) en diclorometano anhidro (20 mL) a -78°C. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó a esa temperatura durante 5 horas. Se agregó una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y la mezcla se agitó durante 30 minutos. Los sólidos resultantes se filtraron a través de una almohadilla de Celita y el filtrado se secó sobre sulfato de sodio. Los orgánicos se concentraron bajo presión reducida y el material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 0-6% metanol en diclorometano) para dar 1 -(1 H-imidazol-1 -il)ciclopropil)metanol 0.15 g). MS (ES + APCI) (M + H) 139.1.
Paso 3: 1 -(1 H-imidazol-1 -il)ciclopropanocarbaldehído A una solución de (1 -(1 H-imidazol- -il)ciclopropil)metanol (42.39 mg, 0 307 mmol) en acetato de etilo anhidro (10 mL) se agregó ácido 2-yodoxibenzoico (IBX, por sus siglas en inglés) (129 mg, 0.461 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 2 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró para dar el compuesto del título que se usó para el siguiente paso sin más purificación.
Intermediario 67: 1-(1-Metil-1 H-1,2,4-triazol-5-il)ciclopropano-carbimidato de etilo Paso 1 : Clorhidrato de 5-(clorometil)-1 -metil-1 H-1 ,2,4-triazol Se agregó cloruro de tionilo (20 mL) a (1 -metil-1 H-1 ,2, 4-triazol-5-il)metanol (2.0 g) a 0°C. La mezcla de reacción fue agitada durante 2 horas a 80°C. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y después se concentró bajo presión reducida. Se agregó acetato de etilo al precipitado resultante y la mezcla se filtró bajo una atmósfera de nitrógeno para dar clorhidrato de 5-(cloromet¡!)-1 -metil-1 H-1 ,2,4-triazol (1.5 g). El material fue usado para el siguiente paso sin purificación adicional. MS (EI + ) (M + ) 131.0 Paso 2: 2-(1 -Metil-1 H-1 ,2, 4-triazol-5-il)acetonitrilo Una solución de clorhidrato de 5-(clorometil)-1 -metil-1 H-1 ,2,4-triazol (1.5 g, 11.45 mmol) en dimetiisulfoxido (30 mL) se agregó a una suspensión agitada de cianuro de sodio (3.366 g, 68.70 mmol) en dimetiisulfoxido (20 mL), y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El producto crudo resultante se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 10-12% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 2-(1 -metil-1 H-1 ,2,4-triazol-5-il)acetonitrilo (1.2 g). MS (ES+APCI) (M + H) 123.2.
Paso 3: 1 -(1 -Metil-1 H-1 ,2, 4-triazol-5-il)ciclopropanocarbonitrilo Se agregó hidrato de sodio (60% dispersión en aceite mineral, 1.06 g, 44.2 mmol) dos veces con éter de petróleo bajo nitrógeno.
Entonces se agregó dimetiisulfoxido (10 mL) a temperatura ambiente.
Se agregó una solución de 2-(1 -metil-1 H-1 ,2, 4-triazol-5-il)acetonitrilo (0.9 g, 7.36 mmol) y 1 ,2-dibromoetano (4.147 g, 22.1 mmol) en dimetilsulfóxido (20 ml_) en forma de gotas a la suspensión de hidrato de sodio sobre un periodo de 20 minutos. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 5-15% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1 -(1 -metí I- 1 H-1 ,2,4-triazol-5-il)ciclopropanocarbonitrilo (0.7 g) como un aceite incoloro.
Paso 4: 1 -(1 -Metil-1 H-1 ,2,4-triazol-5-il)ciclopropanocarbimidato de etilo Se agregó metal de sodio (37 mg, 1.61 mmol) a etanol anhidro (5 mL) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada durante 30 minutos. Una solución de 1 -( 1 -metil- 1 H- ,2, -triazol-5-il)ciclo-propanocarbonitrilo (0.3 g, 2.0 mmol) en etanol (5 mL) se agregó y la mezcla de reacción se calentó a 60°C durante 1 hora. La mezcla resultante se usó sin más purificación. MS (ES + APCI) (M + H) 195.1.
Intermediario 68: Ácido (f?)-2-(4-cloro-1 /-/-pirazol-1 -¡Ppropanoico Paso 1: 2-(Trifluorometilsulfoniloxi)propanoato de (S)-metilo Se disolvió 2,6-lutidina (1.2 mL, 10 mmol) y (S)-lactato de metilo (1.041 g, 10.0 mmol) en una mezcla de heptanos:dicloro-metano (4:1, 10 mL) bajo nitrógeno. La solución se enfrió a -10°C usando un baño de hielo-salmuera. Se agregó anhídrido trifluoro- metanosulfónico (2.0 mL, 12 mmol) en forma de gotas en 10 minutos al mismo tiempo agitando la solución fría. Después de completar la adición, la mezcla de reacción fue agitada a -10°C durante 30 minutos, después se extinguió con ácido clorhídrico acuoso (0.5 M, 15 mL) y se agitó a -10°C por otros 30 minutos. La mezcla resultante se transfirió a un embudo separador y las fases se separaron. Se agregó gel de sílice (2g) al embudo que contiene la capa orgánica y la mezcla fue agitada, y después se filtró a través de un tapón de 2 g de gel de sílice (eluyendo con 40 mL de un 3% de acetato de etilo en solución de heptanos) El filtrado se concentró a temperatura ambiente para dar 2-(trifluorometilsulfoniloxi)propanoato de (S)-metilo como un aceite claro (1.538 g). 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.72 (d, 3H), 3.87 (s, 3H), 5.24 (q, 1H).
Paso 2: 2-(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -il)propanoato de (R)-metilo Se disolvió 4-cloro- 1 H-pirazol (668 mg, 6.51 mmol) en acetato de etilo y 2-(trifluorometilsulfoniloxi)propanoato de (S)-metilo (1.538 g, 6.51 mmol) se agregó seguido por carbonato de potasio (2 70 g, 19.5 mmol) al mismo tiempo agitando a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 18 horas. La mezcla se diluyó con éter metil fer-butílico (15 mL), se filtró a través de Celita, y se lavó con una mezcla de acetato de etilo: éter metil fer-butílico (1:1, 15 mL x 4). El filtrado se redujo en volumen por aproximadamente 30-40 mL después se lavó con ácido clorhídrico acuoso (0.1 M, 25 mL), agua y salmuera (15 mL). La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar 2-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)propanoato de (tf)-metilo (1.02 g). 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.77 (d, 3H), 3.76 (s, 3H), 5.05 (q, 1 H), 7.46 (s, 1 H), 7.54 (s, 1 H); MS (EI + ) (M + ) 188; tiempo de retención de HPLC quiral: 3.11 minutos (Método: Chiralpak AD-H 0.46x25 cm, fase móvil: 95/5 C02/metanol; flujo: 2.5 mL/min); 73.3% ee.
Paso 3: Ácido (R)-2-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)propanoico Se suspendió 2-(4-cloro-1 /-/-pirazol-1 -il)propanoato de (R)-metilo (1.00 g, 5.30 mmol) en una solución de ácido clorhídrico acuoso (6M, 8.8 ml_, 53 mmol). La mezcla de reacción fue agitada durante 18 horas a reflujo. La mezcla se enfrió a 0°C y se extinguió con una solución acuosa saturada de fosfato de sodio (NaH2P0 ). El pH se ajustó a 1-2 usando hidróxido de sodio acuoso y ácido clorhídrico. La mezcla fue extraída con acetato de etilo (20 mL x 3). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron. El residuo se secó al vacío, disuelto en una solución caliente de heptanos: acetato de etilo (3:1 , 9 mL) y se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se agregó un cristal de semilla al enfriar. La mezcla fue agitada durante 18 horas. Los sólidos fueron recolectados por filtración y se lavaron con una solución de heptanos:acetato de etilo (3:1, 2 mL x 2) y heptanos (2 mL x 2). Los sólidos resultantes se secaron al aire para dar ácido (f?)-2-(4-cloro-1 W-pirazol-1 -il)propanoico (310 mg, 33%). H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.8 (d, 3H), 5.13 (q, 1 H), 7.51 (s, 1 H), 7.55 (s, 1 H), 11.8 (s, 1 H); MS (EI + ) (M + ) 174; tiempo de retención de HPLC quiral: 3.81 minutos (Método: Chiralpak AD-H 0.46x25 cm, fase móvil: 90/100 C02/metanol; flujo: 2.5 mL/min); >99.5% ee.
Intermediario 69: Ácido 1 -(p¡ridazin-3-il)c¡clopropanocarboxílico Paso 1 : 2-(Piridazin-3-il)acetato de etilo Se agregó diisopropilamida de litio (2M en tetrahidrofurano, 6.83 g, 63.7 mmol) en forma de gotas a una solución agitada de 3-metilpiridazina (5.0 g, 53 12 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (80 ml_) a -78°C bajo una atmósfera de nitrógeno sobre un periodo de 20 minutos. La mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada durante 1 hora a temperatura ambiente y se enfrió una vez más a -78°C. Se agregó carbonato de dietilo (12.57 g, 106.2 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (20 mL) a -78°C sobre un periodo de 20 minutos. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente, agitada durante 16 horas y se dividió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida. El material crudo resultante se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 50-80% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 2-(piridazin-3-il)acetato de etilo (600 mg). MS (ES + ) (M + H) 167.1569.
Paso 2: 1 -(P¡ridazin-3-il)c¡clopropanocarboxilato de etilo Se lavó hidrato de sodio (60% suspensión en aceite mineral, 830 mg, 21.66 mmol) con éter de petróleo bajo una atmósfera de nitrógeno para eliminar el aceite mineral. Se agregó dimetilsulfóxido (10 mL) y la suspensión resultante se agitó durante 5 minutos antes de agregar 2-(piridazin-3-il)acetato de etilo (600 mg, 3.61 mmol) y 1 ,2-dibromoetano (2.03 g, 10.83 mmol) disuelto en dimetilsulfóxido (10 mL) a 10°C. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas. La mezcla se dividió entre una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo. El material crudo resultante se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 50-60% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1-(piridazin-3-il)ciclo-propanocarboxilato de etilo (300 mg). MS (ES+APCI) (M + H) 193.0.
Paso 3: Ácido 1 -(piridazin-3-il)ciclopropanocarboxílico Se agregó hidróxido de litio (196.4 mg, 4.68 mmol) a una solución de 1 -(piridazin-3-il)ciclopropanocarboxilato de etilo (300 mg, 156 mmol) en tetrahidrofurano y agua (1:1 , 10 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada durante 2 horas y se concentró. El residuo resultante se disolvió en agua y el pH fue ajustado a 2 usando 1N ácido clorhídrico acuoso. La mezcla fue extraída con acetato de etilo. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron para dar el compuesto del título (160 mg) que se usó sin más purificación. MS (ES + APCI) (M-H) 163.0; tiempo de retención de LCMS: 2.713 minutos (Método X1) Intermediario 70: Ácido 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -¡Dciclopropano-carboxílico Paso 1 : 1 -(4-Cloro-1 /-/-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de ter-b uti I o En un frasco se agregó trimetilsilanolato de potasio (20.85 g, 146.31 mmol), 4-cloro-1 /-/-pirazol (15 g, 146.31 mmol) y 2-metiltetra-hidrofurano (400 mL). La mezcla fue agitada durante 5 minutos seguido por la adición de 2,4-dibromobutiraton de fer-butilo (27.84 mL, 146.31 mmol) sobre un periodo de 20 a 30 segundos. La mezcla de reacción fue agitada durante 60 minutos. Se agregó trimetilsilanolato de potasio (20.85 g, 146.31 mmol) en 2-metiltetrahidro-furano (80 mL) sobre un periodo de 5 minutos. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora antes de agregar 2,4-dibromobutirato fer-butilo (1 mL, 5.3 mmol). Después de 30 minutos, se agregó una porción adicional de 2,4-dibromobutirato de íer-butilo (2 mL, 10.5 mmol). La mezcla fue agitada durante 40 minutos antes de agregar 2,4-dibromobutirato de íer-butilo (1 mL, 5.3 mmol) y trimetilsilanolato de potasio (2 g, 14 mmol). La mezcla de reacción fue agitada durante 5 minutos. Las capas se separaron, y los orgánicos fueron lavados con agua (200 mL) y se concentraron bajo presión reducida. Se agregó tolueno (100 mL) y la mezcla se concentró a sequedad para dar 1 -(4-cloro-1 /-/-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de fer-butilo (45 g). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.40 (s, 9H), 1.57 (q, 2H), 1.75 (q, 2H), 7.44 (s, 1H), 7.51 (s, 1H); MS (EI + ) (M + ) 242; tiempo de retención de GCMS: 2.37 minutos (Método O).
Paso 2: Ácido 1 -(4-cloro-1 H-pirazol- 1 -il)ciclopropanocarboxílico A una solución de 1 -(4-cloro-1 /-/-pirazol- 1 -il)ciclopropanocarboxilato de íer-butilo (45 g) en tolueno (60 mL) se agregó ácido trifluoroacético (33.19 mL, 438.92 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 45°C durante 3 horas, entonces se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante 18 horas. Se agregó otra porción de ácido trifluoroacético (2 mL). La mezcla de reacción se calentó a 45°C y se agitó durante 1 hora. La mezcla se redujo en volumen al vacío en un recipiente enchaquetado con la temperatura establecida a 50°C. Se agregó tolueno (200 mL) y la mezcla se concentró a volumen bajo, y después esto se repitió con otra porción de 200 mL de tolueno. Se agregó tolueno (200 mL), y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. Los orgánicos se lavaron en secuencia con 2N solución acuosa de hidróxido de potasio (150 mL), y 1N solución acuosa de hidróxido de potasio (150 mL). Las capas orgánicas se combinaron y acidificaron a pH-1 con ácido clorhídrico concentrado, entonces se extrajo con acetato de etilo (200 mL x 2). Los extractos combinados se concentraron a volumen bajo y el residuo se diluyó con acetato de etilo (100 mL) y se concentraron a sequedad para dar un sólido naranja (32 g). Se agregó tolueno (136 mL) al sólido y la mezcla se calentó a 60°C y se agitó durante 15 minutos hasta que todos los sólidos se disolvieron, después se enfriaron a 40°C, mantenidos a esa temperatura durante 1 hora, y después se enfriaron a 36°C y se mantuvieron a esa temperatura durante 1 hora. La mezcla se calentó a 50°C y n-heptano (136 mL) se agregó en forma de gotas sobre un periodo de 30 minutos. La mezcla se mantuvo a 50°C durante 10 minutos hasta que la solución se hizo turbia. La temperatura se aumentó a 55°C, mantenida a 1.5 horas, se enfrió a temperatura ambiente sobre un periodo de 2 horas y se granuló sobre un periodo de 18 horas. La mezcla se filtró y los sólidos se lavaron con una mezcla de tolueno: heptanos (1 1 , 55 mL) y se secaron en un horno al vacío a 40°C durante 4 horas para dar el compuesto del título como un sólido blanco (11.40 g, 41.76%). 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 1.41-1.71 (m, 4H), 7.54 (s, 1 H), 8.12 (s, 1 H), 13.09 (s, 1 H); MS (EI + ) (M + ) 186; tiempo de retención de GCMS: 2.56 minutos (Método O).
Preparación alternativa para ácido 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 - i I ) c i c I o -propanocarboxilico Paso 1 : 1 -(4-cl oro- 1 H- pi razo I- 1 -i I )ci el o pro pa n oca rboxi I ato de ter-butilo Se disolvió 4-cloro- 1 W-pirazol (2.87 kg, 28.0 mol) y 2,4-dibromobutirato de fer-butilo (9.89 kg, 32.8 mol) en 2-meti Itet rali id rof u rano (26.0 L) y la solución resultante se enfrió a 5°C. Se agregó una suspensión de trimetilsi lanolato de potasio (9.58 kg, 67.2 mol) en tetrahidrof urano (23.5 L) en 30 minutos al mismo tiempo manteniendo la temperatura debajo de 15°C. La suspensión resultante fue agitada a 22°C durante 12 horas. La presencia de 1-(4-cloro-1 H-pirazol- 1 -il)ciclopropanocarboxilato de fer-butilo se confirmó por análisis de HPLC [tiempo de retención de HPLC: 8.76 minutos (columna: Halo C18, 4.6 x 150 mm, 2.7 µ??; fase móvil A: acetonitrilo, fase móvil B: 0.05% ácido metanosulfónico en agua; gradiente lineal: 5:95 A:B a 95:5 A:B en 9 minutos, después se mantuvo durante 1 minuto; flujo: 1.0 mL/min; detección de UV a 210, 226 y 254 n )]. Se agregó ácido clorhídrico acuoso (2M, 22.5L, 45.0 mol) al mismo tiempo manteniendo la temperatura a 22°C. La capa acuosa fue eliminada y la capa orgánica se lavó con 13% solución de cloruro de sodio acuosa (9.6 L). La capa de lavado fue eliminada y la solución resultante de 1 -(4-cloro-1 H-pirazol- 1 -il)ciclopropano-carboxilato de fer-butilo se destiló bajo presión reducida a 40°C hasta que se logró un volumen de aproximadamente 8 L. Se intercambiaron solventes de tetrahidrofurano residuales para acetato de etilo (una porción de 9.6 L, seguido por adición continua de una porción de 19.0 L para mantener un volumen constante) por destilación bajo presión reducida a 40°C. El volumen se redujo a aproximadamente 8 L para dar una solución de 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxilato de fer-butilo y acetato de etilo, que se usó en el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2: Ácido 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 il)ciclopropanocarboxílico Una solución de 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropano-carboxilato de fer-butilo (del paso previo) en acetato de etilo (13 L, seguido por un enjuague de 2-L) se agregó a una solución de cloruro de hidrógeno anhidro (preparado al agregar cloruro de acetilo (9.0 L, 126 mol) a una solución de metanol (6.2 L, 154 mol) y acetato de etilo (19.0 L)) sobre un periodo de 10 minutos al mismo tiempo manteniendo una temperatura de 20°C. Sobre un periodo de 12 horas a esa temperatura se formó un precipitado. Se confirmó la presencia de ácido 1-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxílico por análisis de HPLC de la mezcla [tiempo de retención de HPLC: 5.49 minutos (Columna: Halo C18, 4.6 x 150 mm, 2.7 µ?t?; fase móvil A: acetonitrilo, fase móvil B: 0.05% ácido metanosulfónico en agua; gradiente lineal: 5:95 A:B a 95:5 A:B en 9 minutos, después mantenido durante 1 minuto; flujo: 1.0 mL/min; detección de UV a 210. 226 y 254 nM)]. La mezcla se enfrió a 10°C y se mantuvo a esa temperatura durante 2 horas Los sólidos fueron recolectados por filtración, enjuagando el recipiente de reacción con acetato de etilo (9.6 L). Los sólidos se secaron bajo un flujo de nitrógeno, y después se secaron en un horno al vacío a 40°C para eliminar solvente residual y cloruro de hidrógeno, para dar ácido 1 -(4-cloro- 1 W-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxílico (3.3 kg, 63% en 2 pasos).
Intermediario 71: 2-(2-Hidrox¡propan-2-il)¡sonicot¡naldehído Paso 1: 2-Acetilisonicotinonitrilo A una solución de isonicotinonitrilo (52 g, 0.5 mol) en diclorometano (1300 mL) y agua (1100 mL) se agregó persulfato de amonio ((NH4)2S208) (170 g, 0.75 mol), nitrato de plata (6.8 g, 0.04 mol) y ácido sulfúrico acuoso (40 mL, 98% ácido sulfúrico en 400 mL). Se agregó una solución de ácido 3-oxo-butírico (110 g, 1.25 mol) en diclorometano (100 mL) al mismo tiempo manteniendo el reflujo de mezcla. La mezcla de reacción se refluyó durante 2 horas. La mezcla resultante se basificó a pH ~8-9 usando polvo de carbonato de sodio. La mezcla se filtró y el filtrado fue extraído con diclorometano (500 mL x 3). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se recristalizó de etanol para dar 2-acetilisonicotinonitrilo (52.0 g, 71.9%).
Paso 2: 2-(2-Hidroxipropan-2-il)isonicotinonitrilo A una solución de 2-acetilisonicotinonitrilo (67.1 g, 0.457 mol) en tetrahidrofurano (2400 mL) se agregó en forma de gotas una solución de bromuro de metilmagnesio (3.0 M, 167.6 mL, 0.503 mol) en mezcla de tolueno/tetrahidrofurano (3:1) a ~40°C en un periodo de 2.5 horas. La mezcla de reacción fue agitada a ~40°C durante otras 2 horas. Se agregó una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (50 mL). La mezcla resultante se calentó a temperatura ambiente y se agregó otros 400 mL de una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Las capas se separaron y la capa acuosa fue extraída con diclorometano (400 mL x 2). Los orgánicos combinados se secaron sobre carbonato de sodio y sulfato de sodio y se concentraron. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea (acetato de etilo/éter de petróleo 1:20, 0.3% trietilamina) para dar 2-(2-hidroxipropan-2-il)isonicotinonitrilo (33.0 g, 44.3%).
Paso 3: 2-(2-Hidroxipropan-2-il)isonicotinaldehído A una solución de 2-(2-hidroxipropan-2-il)isonicotinonitrilo (41.4 g. 0.255 mol) en tolueno (500 mL) se agregó en forma de gotas una solución de hidrato de diisobutilaluminio (1 mol/L en hexano, 765 mL, 0.765 mol) a -70°C sobre un periodo de 1.5 horas. La mezcla de reacción fue agitada a -70°C durante 30 minutos. Se agregó metanol (30 mL) seguido por una solución 20% acuosa de tartrato de sodio (700 mL) al mismo tiempo agitando. Las capas se separaron y la capa acuosa fue extraída con diclorometano (400 mL x 2). Los orgánicos combinados se lavaron con un solución 20% acuosa de tartrato de sodio (700 mL). La fase orgánica fue agitada con una solución 10% acuosa de ácido sulfúrico (800 mL) durante 15 minutos. Los orgánicos se secaron sobre carbonato de sodio y sulfato de sodio y concentrados bajo presión reducida. Una solución acuosa saturada de bisulfato de sodio (400 mL) se agregó al residuo y la mezcla fue extraída con acetato de etilo (100 mL x 3). La capa acuosa fue neutralizada con carbonato de sodio acuoso y extraída con acetato de etilo (200 mL x 3). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida para dar el compuesto del título (23 g, 54%).
Intermediario 72: Ácido 2-(4-(trifluorometil)-1 H-1.2.3 -t r i a z o I - 1 -ih-acético El compuesto del título se puede preparar por hidrólisis del 2-(4-(trifluorometil)-1 , 2 , 3-triazol- 1 -il)acetato de etilo comercialmente disponible usando procedimientos bien conocidos en la literatura.
EJEMPLOS Ejemplo 1 : (f? -P¡rrolidin-1 -i 1(1 -(2-(3-(trif luorometoxi Henil )-3H- imidazor4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)metanona Paso 1 : 3-(Pirrolidina-1 -carbonil)piperidina-1 -carboxilato de (R)-ter-buti lo A una solución de pirrolidina (2.13 g, 30 mmol) en N, /V-dirmetil-formamida (240 ml_) se agregó ácido (R)-1 -(fer-butoxicarbonil)-piperidina-3-carboxílico (6.878 g, 30 mmol). Después se agregó en secuencia hidroxibenzotriazol (1.028 g, 6 mmol), clorhidrato de 1-etil-3-[3-(dimetilamino)propil]carbodiimida (5.751 g, 30 mmol), y trietilamina (7.59 g, 75 mmol). La mezcla fue agitada a 30°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y se agregó una solución acuosa de bicarbonato de sodio (200 mL, 0.1M). La mezcla fue extraída con acetato de etilo (200 mL x 3) y los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar 3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidina-1 -carboxilato de (ft)-fer-butilo, que se usó en el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2. (/?)-Piperidin-3-il(pirrolidin- 1 -íí)metanona A una solución de 3-(pi rro li d i n a-1 -carbonil)piperidina-1 -carboxilato de (f?)-fer-butilo (120 mL) se agregó lentamente una solución de cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (30 mL, 4M). La mezcla fue agitada a 30°C durante 2 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar (R)-piperidin-3-M(pirrolidin-1 -il)-metanona, que se usó en el siguiente paso sin más purificación.
Paso 3: (f?)-(1-(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona A una mezcla de (R)-piperidin-3-il(pirrolidin-1 -il)metanona en N, /V-dimetilformamida (120 mL) se agregó diisopropiletilamina (15 mL) seguido por 6-cl oro-3-? itrop i rid i ?-2-a m i n a (3.47 g, 20 mmol). La mezcla fue agitada a 50°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida El residuo se purificó vía cromatografía de columna instantánea sobre gel de sílice (acetato de etilo.éter de petróleo, 1:10 a 10:1) para dar (R)-( 1 -(6-amino-5-nitrop¡ridin-2-il)piperid¡na-3-il)(pirrolid¡n-1-¡l)metanona (4.838 g, 76.3%).
Paso 4: ( )-Pirrol idin-1 -il( 1 -(2-(3-(trif luorometoxi)fenil)-3/-/-imidazo-[4,5-b]p¡ridin-5-il)piper¡d¡n-3-¡l)metanona Se preparó una solución de (f?)-(1-(6-amino-5-n¡tropiridin-2-il)-piperidina-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona en etanol (0.0625 M), y se agregó 1200 µ?. de esta solución en un frasco de 8 mL que contiene 3-(trifluorometoxi)benzaldehído (150 µ????). Se agregó agua (60 µ?_) e hidrosulfito de sodio (65.25 mg, 375 µ????) bajo un flujo de nitrógeno. El frasco se tapó y agitó a 100°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado por Speedvac y la mezcla se purificó vía HPLC para dar el compuesto del titulo. MS API-ES+ (M + H) 460; tiempo de retención de HPLC: 2.59 minutos (Método D).
Los compuestos enlistados en la tabla 1 a continuación se prepararon usando una ruta análoga a aquella descrita antes para la preparación de (f?)-pirrolidin-1-íl(1-(2-(3-(trifluorometoxi)fenil)-1 H-imidazo[4,5-b]piridina-5-il)piperidina-3-il)metanona usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica.
Tabla 1 Ejemplo Nombre de Compuesto -B-R2 Datos Analíticos 1 1 (f?)-(1 -(2-(4-Metiltiazol-2-il)-3H- | MS API-ES+ (M+H) 397; Ejemplo 43: (R)-(1 -(2-(3-(Difluorometoxi)fenil)-3/-/-imidazof4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : 3-(Pirrolidina-1 -carbonil)piperidina-1 -carboxilato de (R)-ter-butilo Se preparó 3 - ( p i rro I i d i n a- 1 -carbonil)piperidina-1 -carboxilato de (R)-íer-butilo por un procedimiento análogo a aquél usado para el ejemplo , paso 1.
Paso 2: ( )-Piperidin-3-il(pirrolidin-1 -il)metanona En un frasco que contiene 3-(pirrolidina- -carbonil)piperidina- -carboxilato de ( )-fer-buti lo se agregó diclorometano (24 ml_) seguido por una solución de cloruro de hidrógeno en 1 ,4-dioxano (4M, 8 mL). La mezcla de reacción fue agitada a 30°C durante 2 horas. El solvente se evaporó bajo presión reducida para dar [R)-piperidin-3-il(pirrolidin-1 -il)metanona que se usó sin más purificación.
Paso 3: (f?)-(1-(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona Una solución de 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (0.175M, 20 mL, 3.5 mmol) en N, /V-dimetilformamida anhidro se agregó (R)-piperidin-3-il(pirrolidin-1 -il)metanona, seguido por diisopropiletilamina (1.3 mL, 7.0 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se purificó vía HPLC preparativa para dar {R)-( 1 -(6-amino-5-nitro-piridin-2-il)piperidina-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (1.0 g , 89.6%).
Paso 4: (R)-{ 1 -(2-(3-(Difluorometoxi)fenil)-3H-imidazo[4, 5 - ] p i ri d i n - 5-¡l)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 1 , paso 4, pero la mezcla de reacción fue agitada a 110°C. MS API-ES+ (M + H) 442; tiempo de retención de HPLC: 2.431 minutos (Método D).
Los compuestos enlistados en la tabla 2 a continuación fueron preparados usando una ruta análoga a aquella descrita antes para la preparación de (R)-( 1 -(2-(3-(dif luorometoxi)fen \\)-3H-\m idazo[4 , 5-b]- piridin-5-il)piperidin-3-il)pirrolidin-1 -il)metanona usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica.
Tabla 2 Ejemplo 48: ( )-(1-(2-((4-(Clorofenoxi)metil)-3/-/-imidazor4,5-b1-piridin-5-il)piperidin-3-ilHpirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : ( ?)-(1-(6-Amino-5-nitropirid¡n-2-il)piperidin-3-il)pirrolidin-1-il) meta non a A una solución de (R)-piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona en N. /V-dimetilformamida (16.3 mL, 0.6M) se agregó una solución de 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina en N, /V-dimetilformamida (16.3ml_, 0.6M). Entonces se agregó trietilamina (3.68mL, 26.5 mmol) a la mezcla. La mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar (R)-(1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)pirrolidin-1 -il)metanona y el producto crudo se usó sin más purificación.
Paso 2: (f?)-(1-(5,6-Diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolid¡ri-1-il)-metanona A una solución de (R)-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)pirrolidin-1 -il)metanona en metanol (9.8 mmol, 0.25 ) se agregó polvo de zinc (6.37 g, 98 mmol) a 0°C seguido por una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (39.2 ml_). La mezcla de reacción fue agitada a 30°C durante 16 horas. La mezcla se filtró y concentró bajo presión reducida. Se agregó agua (100 mL) al residuo y la mezcla fue extraída con acetato de etilo (200 mL x 3). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar ( ?)-(1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona. El material fue usado para el siguiente paso sin más purificación.
Paso 3: -(2-((4-Clorofenoxi)metil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se agregó ácido 2-(4-clorofenoxi)acético (75 µ?t???) en un frasco de 8 mL seguido por una solución de (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona en dioxano anhidro (600 µL·, 127.5 µp???, 0.21M). Se agregó trietilamina (90 µ?, 648 µ????) y anhídrido cíclico de ácido 1 -propanofosfónico (120 µ\~, 50% en acetato de etilo, 202 µ?t???). El frasco fue tapado y la mezcla de reacción fue agitada a 140°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado por Speedvac y el residuo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS API-ES+ (M + H) 440; tiempo de retención de HPLC 2.473 minutos (Método D).
Los compuestos enlistados en la tabla 3 a continuación fueron preparados usando la ruta descrita antes para la preparación del ejemplo 48 usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica.
Tabla 3 Ejemplo Nombre de Compuesto -B-R Datos Analíticos 49 (fi)-(1-(2-(2,3-Dihidro-1H- MS API-ES+ (M+H) inden-2-il)-3-/-imidazo[4,5- 416; Tiempo de b]piridin-5-il)piperidin-3- retención de HPLC: il)(pirrolidin-1-il)metanona 2.364 min (Método D) 50 MS API-ES+ (M+H) 424; Tiempo de retención de HPLC: 2.314 min (Método D) Ejemplo 57: (f?)-6-Metil-1-((5-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H-imidazor4,5-b1piridin-2-il)metil)piridin-2(1 /-y)-ona Paso 1 : (R)-/V-(2-Amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -?)-piridin-3-il)-6-metil-2-oxopiridina-1(2/-/)-carboxamida En un recipiente se agregó (R)-(1 -(5,6-diaminopiridin-2-¡l)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (100 µ????), ácido 6-metil-2-oxopiridina-1 (2H)-carboxílico y N, N-d i met i If orm am ida (1.5 ml_) seguido por hexaf luorofosfato de 0-(7-Azabenzotriazol-1 -il)-N, N, N', ?/'-tetrametiluronio (HATU) (200 µ????) y trietilamina (250 µGp??). El frasco fue agitado durante 16 horas a temperatura ambiente. La mezcla se concentró vía Speedvac. El residuo se dividió entre diclorometano y agua. Los orgánicos se evaporaron al vacio para dar (f?)-A/-(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -il)piridin-3-il)-6-metil-2-oxopiridina-1 (2H)-carboxam ida que se usó sin más purificación.
Paso 2: (R)-6-Metil-1 - ( ( 5- ( 3 - ( p i r r o I i d i n a - 1 -carbonil)piperidin-1 -il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)metil)piridin-2(1 H)-ona En un frasco se agregaron ( )-A/-(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-6-metil-2-oxopiridina-1 (2H)-carboxamida (1 equiv) y una solución de metanol e isobutanol (1 :1 , 1.5 mL). Se agregó metóxido de sodio (2.0 equiv) y la mezcla de reacción fue agitada a 110°C durante 2 horas. Se agregó agua y la mezcla fue extraída con una mezcla de metanol/diclorometano (1:1 ). Los orgánicos se concentraron por Speedvac y el material crudo se purificó vía HPLC preparativa para dar el compuesto del título. MS (ES + ) (M + H) 421.4; UPLC 1.09 minuto (Método T).
Ejemplo 58: (R)-( 1 -(2-( 1 -( 1 H-Pirazol- 1 - i I ) e t i I) - 3 H - i m idazo[4 , 5-bl-piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 57. MS (ES + ) (M + H) 394.5; tiempo de retención de UPLC: 1.1 minuto (Método T).
Ejemplo 59: 2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-5-(3-(piridin-2-il)piperidin-1-il)-3/-/-imidazor4,5-b]piridina Paso 1: Ácido 2-amino-6-(3-(piridin-2-il)piperidin-1 -¡l)nicotín¡co A una solución de ácido 2-amino-6-cloronicotínico (1.6 g, 9.248 mmol) en N, /V-dimetilformamida (41 ml_) se agregó 2-(piperidin-3-il)piridina (1.82 g, 11.098 mmol) y trietilamina (25.455 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se purificó vía cromatografía de columna para dar ácido 2-amino-6-(3-(piridin-2-il)piperidin-1-il)nicotínico.
Paso 2: 2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-5-(3-(piridin-2-il)píperidin-1 -il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridina En un frasco que contiene 2-ciclopropilpirimidina-4-carbaldehído se agregó ácido 2-amino-6-(3-(piridin-2-il)piperid¡n-1 -il)nicotínico (500 µ?_, 0.33M en etanol) seguido por etanol (500 µ?_), agua (50 µ?_), y una solución de hidrosulfito de sodio (100 mg, 574 µ?t???) en agua (50 µ?_). El frasco fue tapado y agitado a 110°C durante 18 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró por Speedvac. El residuo se purificó por HPLC para dar el compuesto del título. MS (API-ES + ) (M + H) 398.3; tiempo de retención de UPLC: 1.15 minuto (Método U).
Ejemplo 60: -(2-(3-(Difluorometoxi)fenin-3H-im¡dazor4,5-b1-piridin-5-il)-A/,A/-dimetilpiperidina-3-carboxamida Paso 1 : (R)-1-(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)-/\/,N-dimetilpiperidina-3-carboxamida A una solución de 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (4.15 g, 24.0 mmol) en N, A/-dimet¡lformamida (41 mL) se agregó {R)-N, W-dimetil-piperidina-3-carboxamida (3.74 g, 2.40 mmol) seguido por trietilamina (10.7 mL, 64.800 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se purificó vía cromatografía de columna para dar ( ?)-1 - (6-am¡no-5-nitrop¡ridin-2-ii)- V, /V-dimetilpiperidina-3-carboxamida.
Paso 2: ( R) - 1 - ( 2- ( 3-( Dif I uo ro m et ox¡ )f e n i I ) -3 H-i m id azo [4 , 5-b]p i rid i n-5-il)-/V,/V-dimetilpiperidina-3-carboxamida En un frasco de 4 mL se agregó (f?)-1 -(6-amino-5-nitropiridin-2- \)-N, /V-dimetilpiperidina-3-carboxamida (500 µ\-, 0.3M) disuelto en N, /V-dimetilformamida seguido por 3-(difluorometoxi)benzaldehído (950 µ?, 0.158M) disuelto en N, / -dimetilformamida. Se agregó agua (50 µ L ) seguido por hidrosulfito de sodio (574 µ????) bajo una atmósfera de nitrógeno. El frasco fue tapado y agitado a 110°C durante 18 horas. El solvente fue eliminado por Speedvac y el residuo se purificó por HPLC para dar el compuesto del título. MS (API-ES + ) (M + H) 416.2; tiempo de retención de HPLC: 1.392 minuto (Método E).
Ejemplo 61: 3-(5-(3-P¡rrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3/-/-¡m¡dazo-[4,5-b]pirid¡na-2-il)piper¡dina-1-carboxilato de (R)- /so-butilo Paso 1: 3-((2-amino-6-((R)-3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-piridin-3-il)carbamoil)piperidina-1-carboxilato de re r- butilo A una solución de (R)-(1-(5,6-diaminop¡ridin-2-il)piperidin-3-il)-(pirrolidin-1 -il)metanona (3.60 mmol) en 1,4-dioxano (20 mL) se agregó ácido (R)-1 -(fer-butoxicarbonil)piperidina-3-carboxílico (3.60 mmol), anhídrido cíclico de ácido -propanofosfónico (10.8 mmol), y trietilamina (32.4 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y una solución de metanol/diclorometano (1:9, 50 mL) se agregó seguido por una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (50 mL), y se separaron las capas. La capa acuosa fue extraída una vez más con metanol/diclorometano (1:9, 25 mL) y los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar 3-((2-amino-6-((^)-3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-carbamoil)piperidina-1 -carboxilato de fer-butilo que se usó sin más purificación.
Paso 2: 3-(5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidina-1-¡l)-3H-im¡dazo-[4, 5-b]piridina-2-il)piperidina-1 -carboxilato de (R)-feA"-butilo A una solución de 3-((2-amino-6-((R)-3-(p¡rrolidína-1 -carboníl)-piperidina-1-ií)pindin-3-il)carbamoil)piperidina-1 - carboxilato de ter-butilo en metanol/sec-butanol (1:2, 15 ml_) se agregó una solución de 25% de metóxido de sodio en metanol (9.0 mL). La mezcla de reacción fue agitada a 90°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y se agregó una solución de metanol/diclorometano (1:9, 50 mL) y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (50 mL) al residuo, y las capas se separaron. La capa acuosa fue extraída una vez más con metanol/diclorometano (1:9, 25 mL). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía de columna para dar 3- (5-(3-( pi rro I id i n a- 1 -ca rbon i I ) p i perid i n- 1 -i I )-3H-i m id azo [4 , 5-b]piridina-2-il)piperidina-1-carboxilato de (R)-fer-butilo.
Paso 3: (f?)-(1-(2-(Piperid¡n-3-¡l)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)-piperidin-3-il)pirrolid¡n-1-¡l)metanona Una solución de cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (4M) se agregó a 3-(5-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H-imidazo-[4,5-b]piridina-2-il)piperidina-1 -carboxilato de ( =?)- fer- b u ti I o para preparar una solución 1M. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 4 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar (R)-(1-(2-(piperidin-3-il)-3H-imidazo-[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)pirrolidin-1 -il)metanona que se usó sin más purificación.
Paso 4: 3-(5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridina-2-il)piperidina-1-carboxilato de (R)-/so-butilo A una solución de (R)-(1 -(2-(piperidin-3-il)-3H-imidazo[4,5-b]-piridin-5-il)piperidin-3-il)pirrolidin- -il)metanona (500 µ?_, 150 µ????, 0.13M) en N, /V-dimetilformamida se agregó una solución de cloro-formato de isobutilo en tetrahidrofurano (0.3M, 500 µ?_, 150 µ????) seguido por diisopropiletilamina (450 µ?t???). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 16 horas. El solvente fue eliminado y se agregó una solución de metanol/diclorometano (1:9, 50 mL) y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (50 mL) al residuo. La capa acuosa fue eliminada y los orgánicos se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ES + ) (M + H) 483; tiempo de retención de LCMS 1.11 minuto (Método V).
Los compuestos enlistados en la tabla 4 a continuación fueron preparados usando la ruta descrita antes para la preparación del ejemplo 61 usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o son preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica.
Tabla 4 Ejemplo 65: ( ( ) - 1 - ( 2 - ( 2 - C i c I o p r o p ? p i r i m i d i n -4 - ? ) - 3 H- i m i d az o f 4 , 5 -b1piridin-5-il)piperidin-3-il)((S)-3-fluoropirrolidin-1-il)metanona Paso 1: Ácido (R)-piperidina-3-carboxílico A ácido ( )-1 -(ter-butoxicarbonil)piperidina-3-carboxílico (7 0 mmol) se agregó diclorometano (48 mL) seguido por ácido clorhídrico (4M, 16 mL). La mezcla de reacción fue agitada a 30°C durante 2 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar ácido ( ?)-piperidina-3-carboxílico que se uso sin más purificación.
Paso 2: Ácido (R)-1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxílico Una solución de 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (0.175 M, 35 mL, 6.125 mmol) se agregó a ácido (R)-piperidina-3-carboxílico, preparado durante el paso previo, seguido por diisopropiletil amina (2.275 mL, 12.25 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar ácido (f?)-1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxilico que se usó para el siguiente paso sin más purificación.
Paso 3: Ácido (R)-1 -(2-(2-ciclopropilpiridin-4-il)-3H-¡midazo[4,5-b]-piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico Se disolvió ácido (R)-1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxílico, preparado durante el paso previo, en una mezcla de N,N-dimetilformamida (45.5 mL) y agua (4.9 ml_). Se agregó formato de amonio (1.925 g, 30.625 mmol) seguido por polvo de zinc (1.05 g, 15.3 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a 45°C durante 16 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró bajo presión reducida. Al residuo se agregó N, /V-dimetilformamida (24.5 mL) seguido por una solución de 2-ciclopropilpirimidina-4-carbaldehído en ?/, /V-dimetilformamida (24.5 mL, 6.125 mmol, 0.25M) y ácido acético (3.675 mL, 61.25 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a 60°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se purificó vía HPLC preparativo para dar el compuesto del título (0.637 g, 28.6%).
Paso 4: (( )-1-(2-(2-Ciclopropilpirimid¡n-4-¡l)-3/-/-imidazo[4,5-b]-piridin-5-il)piperidin-3-il)((S)-3-fluoropirrolidin-1-il)metanona Se agregó (S)-3-fluoropirrolidina (175 umol) a un frasco seguido por N, / -dimetilformamida (200 L) , trietilamina (35 µ?, 250 µ????) y ácido {R)-1 -(2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-3H-¡midazo[4,5-b]-piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico (200 µ?, 50 µ????, 0.25 M en N,N-dimetilformamida) y hexafluorofosfato de N, N, N', ?/'-tetrameti luronio (HATU) (250 µ?_, 100 µmol, 0.4 M solución en N, / -dimetilformamida). La mezcla de reacción fue agitada a 50°C durante 16 horas. El solvente se evaporó por Speedvac y el residuo se purificó vía HPLC preparativa para dar el compuesto del título. MS API-ES+ (M + H) 436; tiempo de retención de HPLC: 2.521 minutos (Método C).
Los compuestos enlistados en la tabla 5 a continuación fueron preparados usando procedimientos análogos a aquellos descritos antes para la síntesis del ejemplo 65 usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica por una ruta descrita antes.
Tabla 5 69 ((R)-1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)- MS API-ES+ (M+H) F 3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5- 436; tiempo de il)piperidin-3-il)((R)-3-fluoropirrolidin- j retención de HPLC 1-il)metanona ! 2.531 min (Método C) 70 (R)-(1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin MS API-ES+ (M+H) 3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5- 434; tiempo de peridin-3-il)(morfolino)metanona retención de HPLC 2.435 min (Método C) Ejemplo 71: í^?)-1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-3/-/-im¡dazof4,5-bl-piridin-5-il)-/V,A/-dimetilpiperidina-3-carboxam¡da Paso 1 : Ácido (f?)-piperidina-3-carboxilico A una solución de ácido (R)-1 -(fer-butoxicarbonil)piperidina-3-carboxílico (12.25 mmol) en d iclorometano (84 ml_) se agregó una solución de cloruro de hidrógeno en 1 ,4-dioxano (28 ml_, 4M). La mezcla de reacción fue agitada a 30°C durante 2 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar ácido (f?)-piperidina-3-carboxílico que se usó sin más purificación.
Paso 2: Ácido ( )-1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxilico Una solución de 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina en N, /V-dimetil-formamida (70 mL, 12.25 mmol, 0.175M) se agregó a ácido {R)- piperidina-3-carboxílico (12.25 mmol) seguido por diisopropiletil-amina (4.55 ml_, 24.5 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar ácido -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxílico que se usó sin más purificación.
Paso 3: Ácido (f?)-1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidina-3-carboxíl¡co A una solución de ácido -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxílico en /V./V-dimetilformamida (91 mL) se agregó agua (9.8 mL), formato de amonio (3.85 g, 61.25 mmol), y polvo de zinc activado (2.1 g, 30.6 mmol) bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción fue agitada a 45°C durante 16 horas. La mezcla se filtró y concentró bajo presión reducida para dar ácido (ft)-1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidina-3-carboxil¡co que se usó sin más purificación.
Paso 4: Ácido (R)-1 -(2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]-piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico A una solución de ácido (R)-1-(5,6-diaminopiridin-2-il)-piperidina-3-carboxílico en N, /V-dimetilformamida (49 mL, 12.25 mmol, 0.25M) se agregó una solución de 2-ciclopropilpirimidina-4-carbaldehído en N, /V-dimetilformamida (49 mL, 12.25 mmol, 0.25M) seguido por ácido acético (7.35 mL, 122.5 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a 60°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se purificó vía HPLC para dar ácido (R)-1 -(2-(2-ciclopropilpirimidin-4-M)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-¡l)piper¡dina -3-carboxílico.
Paso 5: (R)-1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-¡l)-3/-/-¡m¡dazo[4,5-b]piridin-5-¡l)-N,N-dimet¡lpiperidina-3-carboxamida A una solución de dimetilamina (175 µ????) en ?/, W-dimetil-formamida (200 µ?) se agregó trietilamina (35 µ?, 250 µGp??) y ácido (f?)-1-(2-(2-ciclopropilptrimidin-4-il ) -3 H- i m i d azo [4 , 5- b] p iridin-5-il)-piperidina-3-carboxílico (200 µL·, 50 µ m o 1 , 0.25M en N, /V-dimetil-formamida) seguido por hexafluorofosfato de 2-( 1 ?-7-azabenzo-triazol-1 -il)-1 ,1 ,3,3-tetrametilo uronio (250 µ?, 100 µ????, 0.4M en N, /V-dimetilformamida). La mezcla de reacción fue agitada a 50°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado por Speedvac y el residuo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS API-ES+ (M + H) 392; tiempo de retención de HPLC 2.43 minutos (Método C).
Ejemplo 72: (R)-(1 -(2-(1 - (4-Metil- 1 H-pirazol-1 -il)cicloprop¡l)-3H-imidazo[4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)pirrolidin-1-il)metanona En un frasco de microondas de 5 mL se agregó diclorhidrato de (R)-(1-(5,6-diarninopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrol¡din-1-¡l)metanona (intermediario 1 ) (296 mg, 0.814 mmol) y ácido 1 - (4- m et i I- 1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxílico (intermediario 3) (137.5 mg, 0.827 mmol) y piridina (2 mL). El frasco fue tapado y se agregó trifenilfosfito (0.650 mL, 2.48 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 200°C en un microondas por 10 minutos. A la mezcla se agregó acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. Las capas se separaron y la capa acuosa fue extraída con acetato de etilo (2x). Los orgánicos combinados se lavaron en secuencia con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (2x) y salmuera (1x), después se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 420.2, tiempo de retención de HPLC: 2.04 minutos (Método A).
Los compuestos enlistados en la tabla 6 a continuación fueron preparados usando procedimientos análogos a aquellos descritos antes para la síntesis del ejemplo 72 usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica o preparados por una ruta descrita antes.
Tabla 6 Ejemplo 8 : (f?)-(1-(2-(1-(Pirid¡n-3nl)c¡cloprop¡l)-3rt-¡midazoí4,5-bl-pirid¡n-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : (R)-/V-(2-Amino-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-piridin-3-il)-1-(pirid¡n-3-il)ciclopropanocarboxamida Se agregó ácido 1 -(piridin-3-il)ciclopropanocarboxílico (30.7 mg, 0.188 mmol), diclorhidrato de (f?)-(1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)-piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (intermediario 1) (75 mg, 0.19 mmol), y /V-metilmorfolina (83 µ?_, 0.76 mmol) y se disolvieron en N, /V-dimetilformamida (1.0 mL). Se agregó hexafluorofosfato de benzotriazol-1 -iloxi-tris-(dimetilamino)-fosfonio (BOP) (122 mg, 0.207 mmol) y la mezcla de reacción fue agitada a 50°C durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se disolvió en diclorometano. Se agregó una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Los orgánicos se recolectaron y la capa acuosa fue extraída con diclorometano. Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea (0-10% metanol en diclorometano) para dar (f?)-A/-(2-amino-6-(3-pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-1 -(piridin-3-il)ciclopropanocarboxamida (69 mg, 84%). MS (AP + ) (M + H) 435.2; tiempo de retención de LCMS 1.51 minuto (Método L).
Paso 2: (R)-( 1 -(2-( 1 -(Pirid i n-3-il)ciclopropil)-3H-im idazo[4, 5-b]-piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de (R)-A/-(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)-piperidin-1-il)piridin-3-il)-1-(piridin-3-il)ciclopropanocarboxamida (35 mg, 0.081 mmol) en isobutanol (500 µ?) se agregó metóxido de sodio (18 mg, 0.335 mmol) en metanol (250 µ?_). La mezcla de reacción fue agitada a 110°C durante 18 horas. El solvente se evaporó bajo un chorro de nitrógeno. El residuo se dividió entre agua (0.5 mL) y acetato de etilo (1.5 mL x 3). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía HPLC para dar (R)-(1-(2-(1-(piridin-3-il)ciclopropil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-¡l)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (7.2 mg). MS (ESI + ) (M + H) 417.3; tiempo de retención de HPLC 1.59 minuto (Método A).
Los compuestos enlistados en la tabla 7 a continuación fueron preparados usando procedimientos análogos a aquellos descritos antes para la síntesis del compuesto del ejemplo 81 usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica o preparados por una ruta descrita antes.
Tabla 7 Ejemplo 86: (R)-(1-(2-(1-(3-Metilisoxazol-5-il)ciclopropil)-3H-imidazo-[4,5-blpiridin-5-il)p¡peridin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : (f?)-/N/-(2-Amino-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-piridina-3-il)-1-(3-metilisoxazol-5-il)ciclopropanocarboxamida Se combinaron ácido 1 -(3-metilisoxazol-5-¡l)ciclopropano-carboxílico (40 mg, 0.24 mmol), diclorhidrato de (R)-( 1 -(5,6-diamino-piridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (intermediario 1) (86 mg, 0.24 mmol) y diisopropiletilamina (200 µ?_, 1.2 mmol) y se disolvieron en ?/,/V-dimetilformamida (1.25 mL). Se agregó hexaf luorofosfato de 0-benzotriazol-/V,/V, ? , ?/'-tetrametiluronio (HBTU) (109 mg, 0.287 mmol) y la mezcla de reacción fue agitada a 40°C durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se disolvió en diclorometano. Se agregó una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Los orgánicos fueron recolectados y la capa acuosa fue extraída con diclorometano. Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea (0-12% metanol en diclorometano) para dar (f?)-A/-(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridina-3-il)-1-(3-metilisoxazol-5-il)ciclo-propanocarboxamida (56 mg, 53%). MS (ES + ) (M + H) 439.2; tiempo de retención de LCMS 1.94 minuto (Método L).
Paso 2: (R)-( 1 -(2-( 1 -(3-Meti lisoxazol-5-il ) ci el o pro pil)-3H-i m id azo [4 , 5 b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de (f?)-A/-(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil) pipendin-1-il)piridina-3-il)-1-(3-metilisoxazol-5-il)ciclopropano- carboxamida (94 mg, 0.21 mmol) en isobutanol (2 ml_) se agregó metóxido de sodio (25% en metanol, 98µ?_, 0.43 mmol) seguido por metanol (0.9 ml_). La mezcla de reacción fue agitada a 110°C durante 18 horas. Un porción adicional de metóxido de sodio (25% en metanol, 98 ,uL, 0.43 mmol) se agregó y la mezcla de reacción fue agitada a 110°C durante 3 horas La mezcla se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en diclorometano, se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía HPLC para dar {R)-( 1 -(2-( 1 -(3-metilisoxazol-5-il)ciclopropil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)p¡peridin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona. MS (ESI + ) (M + H) 421.2; tiempo de retención de HPLC 2.02 minutos (Método A).
Los compuestos enlistados en la tabla 8 a continuación fueron preparados usando procedimientos análogos a aquellos descritos antes para la síntesis del ejemplo 86 usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica o preparados por una ruta descrita antes.
Tabla 8 Ejemplos 89 y 90: ( )-(1-(2-(3- etil-1H-pirazol-1-¡nciclopropin-3H-imidazo[4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona y (R)-(1-(2-(1-(5-metil-1 H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b1piridin-5-il)piperid¡n-3-il)(pirrolidin-1-il metanona Paso 1 : (R)-A/-(2-Amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -il)piridin-3-il)-1-(3-metil-1/-/-pirazol-1-il)ciclopropanocarboxamida o (R)-A/-(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-1-(5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclopropanocarboxamida En un frasco se agregó intermediario 10 (60.0 mg, 0.361 mmol), diclorhidrato de (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)-(pirrolidin-l-il)metanona (intermediario 1) (131 mg, 0.361 mmol), diisopropiletilamina (314 µ?, 1.80 mmol), hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-l-ilJ-W.^/V'^'-tetrametiluronio (HATU) (206 mg, 0.541 mmol) y N, /V-dimetilformamida (3.0 mL). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se purificó vía cromatografía instantánea (0-6% metanol en diclorometano) para dar (R)-A/-(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)-piperidin-1-il)piridin-3-il)-1-(3-metil-1 /- -pirazol-1-il)ciclopropano-carboxamida o (f?)-/V-(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-1-(5-metil-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxamida (62 mg).
Paso 2: (R)-(1-(2-(1-(3-Metil-1/-/-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo-[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona o {R)-(1-(2-(5-metil-1 H-pirazol-1-il)cicloprop¡l)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)-piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona En un frasco que contiene (R)-A/-(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-1-(3-metil-1/-/-pirazol-1-il)ciclo-propanocarboxamida o (R)-/V-(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 - carbón i I)-piperidin-1 - il)piridin-3-il)-1 - (5-metil-1 H-pirazol-1 - il)ciclopropano-carboxamida (60 mg, 0.14 mmol) y metóxido de sodio (25% en peso en metanol, 118 µ?_) se agregó isobutanol (0.4 mL) y metanol (0.2 mL). La mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 5 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se purificó vía HPLC para dar (R)-( 1 -(2-( 1 -(3-meti I- 1 H-pirazol- 1 - i I ) c i c! o p r o p i I ) -3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidín-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona o (R)_(1-(2-(1-(5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]-piridin-5-il)piperidin-3-il)(p¡rrolidin-1-il)metanona (ejemplo 89, a partir del intermediario 10): MS (ESI + ) (M + H) 420.3; tiempo de retención de HPLC 1.85 minuto (Método A).
Se usó un procedimiento análogo para la síntesis del otro regioisómero, a partir de 84.9 mg de intermediario 11. Ejemplo 90: MS (ESI + ) (M + H) 420.2; tiempo de retención HPLC 1.99 minuto (Método A).
Ejemplo 91: ( )-(1-(2-(1-(Pirimidin-5-il)ciclopro il)-3H-imidazor4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)pirrolidin-1-il)metanona A una solución de diclorhidrato de (R)-(1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin- -il)metanona (64 mg, 0.18 mmol) en metanol (0.5 ml_) y ácido acético (160 µ?_, 2.9 mmol) se agregó trietilamina (100 µ?_, 0.72 mmol). Se agregó una solución de 1-(pirimidin-5-il)ciclopropanocarbimidato de etilo (40 mg, 0.18 mmol) en metanol (0.3 ml_). La mezcla de reacción fue agitada a 70°C durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se disolvió en acetato de etilo. Los orgánicos fueron lavados con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y después con agua, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía HPLC. MS (ESI + ) (M + H) 419.9; tiempo de retención de HPLC: 1.694 minuto (Método A).
Ejemplo 92: ( )-(1-(2-(1-(2-Metoxifenil)ciclODropil)-3H-imidazof4.5-blpir¡din-5-¡l)piper¡d¡n-3-il)(pirrol¡din-1-il)metanona A una solución de diclorhidrato de ( R)-( 1 -(5 , 6-d ia m i n opi rid i n-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (32 mg, 0.088 mmol) en etanol (0.5 ml_) se agregó trietilamina (50µ?_, 1.42 mmol) y ácido acético (82µ?_, 1.42 mmol). Después se agregó una solución de clorhidrato de 1 -(2-metoxifenil)ciclopropanocarbimidato de etilo (50 mg, 0.09 mmol) en etanol (0.3 ml_) y la mezcla de reacción se calentó a 75°C durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dividió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con agua, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 446.1 ; tiempo de retención de HPLC: 2.299 minutos (Método A).
Los compuestos enlistados en la tabla 9 a continuación fueron preparados usando procedimientos análogos a aquellos descritos antes para la síntesis del ejemplo 92 usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica o preparados por una ruta descrita antes.
Tabla 9 Ejemplo 95: (ff)-(1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-3H-imidazo[4,5-bl-piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una suspensión de diclorhidrato de (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (1.0 g, 2.76 mmol) y ácido acético (2.5 mL, 43.4 mmol) en etanol (7 mL) se agregó trietilamina (1.5 mL, 10.8 mmol). Se agregó una solución de 2-ciclopropilpirimidina-4-carbimidato de etilo (530 mg, 2.77 mmol) en etanol (3 mL). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 30 minutos, después se enfrió. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y se agregó acetato de etilo (100 mL) al residuo seguido por agua (10 mL) y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (50 mL). Las capas se separaron y los orgánicos se lavaron con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (75 mL) y salmuera (50 mL), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. Al residuo resultante se agregó diclorometano (4 mL) y éter metil fer-butílico (35 mL). La mezcla fue agitada a 40°C hasta que fue homogénea. La solución se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante 18 horas. Los sólidos resultantes se filtraron y enjuagaron con éter para dar el compuesto del título. H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.10-1.17 (m, 2H), 1.18-1.23 (m, 2H), 1.57-1.70 (m, 1H), 1.82-2.05 (m, 7H), 2.27-2.34 (m, 1H), 2.63-2.72 (m, 1H), 2.97-3.07 (m, 1H), 3.14-3.22 (m, 1H), 3.43-3.54 (m, 3H), 3.58-3.67 (m, 1H), 4.37 (d, 1H), 4.53 (d, 1H), 6.76 (d, 1H), 7.95 (m, 2H), 8.67 (d, 1H), 10.46 (br, 1H). MS (ES + ) (M + H) 418.5; tiempo de retención de LCMS 2.27 minutos (Método L).
Los compuestos enlistados en la tabla 10 a continuación se prepararon usando procedimientos análogos a aquellos descritos antes para la síntesis del compuesto del ejemplo 95 usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica por una ruta descrita antes.
Tabla 10 Ejemplo 102: (R)-(1-(2-(1-(3-Metoxifenil)ciclopropil)-3H-¡midazof4,5-blpir¡din-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de diclorhidrato de (R)-(1 - (5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (60 mg, 0.17 mmol) en metanol (0.5 ml_) y ácido acético (150µ?, 2.7 mmol) se agregó trietilamina (94 µ?_, 0.67 mmol) y una solución de clorhidrato de 1-(3-metoxifenil)ciclopropanocarbimidato de etilo (40mg, 0.16 mmol) en metanol (0.3 mL). La mezcla de reacción se calentó en un microondas durante 45 minutos a 130°C. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dividió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con agua, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 446.3; tiempo de retención de HPLC 2.3 minutos (Método A).
Ejemplo 03: (R)- Pirro lid in- 1 - i 1(1 -(2-(1 -(p-tolil )ciclopropil)-3 H-imidazo[4,5-blpiridin-5-il)piper¡d¡n-3-il)metanona A una suspensión de diclorhidrato de (R)-(1 -(5,6-diamino-piridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (220 mg, 0.60 mmol) en etanol (2 mL) se agregó trietilamina (250 µ?_, 1.8 mmol), una solución de clorhidrato de 1 -(p-tolil)ciclopropanocarbimidato de etilo (140 mg, 0.58 mmol) en etanol (1 mL), y ácido acético (0.5 mL, 8.70 mmol). La mezcla de reacción se calentó en un microondas durante 45 minutos a 130°C. El solvente fue eliminado bajo presión reducida. Se agregó acetato de etilo (10 mL) al residuo y la solución se lavó con hidróxido de sodio acuoso (1 N, 5 mL). La capa orgánica fue extraída con acetato de etilo (10 mL x 3). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 430.2; tiempo de retención de HPLC 2.51 minutos (Método A).
Ejemplo 104: (R)-( 1 -(2-11 -( 1 -Metil- 1 H-pirazol-5-il )ciclopropil)-3 H-imidazo[4,5-blp¡r¡din-5-¡l)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-¡l)metanona A una solución de 2-(1 -metil- 1 H-pirazol-5-il)acetonitrilo (14.5 mg, 0.10 mmol) en etanol (150 µ!_, 2.6 mmol) se agregó cloruro de acetilo (110 µ?_, 1.5 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida bajo un chorro de nitrógeno. Se agregó etanol (0.5 mL) al residuo seguido por una solución de diclorhidrato de (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (36 mg, 0.01 mmol) y trietilamina (70 µ\-, 0.50 mmol) en etanol (1 mL). Se agregó ácido acético (100 µL·, 1.75 mmol) y la mezcla de reacción se calentó en el microondas durante 45 minutos a 130°C. El solvente fue eliminado bajo un chorro de nitrógeno. Se agregó acetato de etilo (10 mL) al residuo. La solución fue lavada con hidróxido de sodio acuoso (1 N, 3 mL), se lavó con agua (3 mL), se lavó con salmuera (3 mL), se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El material crudo es purificó via HPLC para dar el compuesto del título. MS ( ES I + ) (M + H) 420.3; tiempo de retención de HPLC 1.88 minuto (Método B).
Ejemplo 105: 2-Etil-6-( 5-(3-( pirro I ¡dina- 1 - carbón il)piperidin-1 - i D-3H-im¡dazoí4,5-blpiridin-2-il)isonicotinato de ( )-etilo A una solución diclorhidrato de (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)-piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (116 mg, 0.595 mmol) en etanol anhidro (5.0 ml_) se agregó ácido acético (0.293 ml_, 5.12 mmol) seguido por trietilamina (0.179 ml_, 1.28 mmol). Se agregó clorhidrato de 2-(etoxi(imino)metil)-6-etilsionicotinato de etilo (80 mg, 0.32 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 30 minutos. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente fue eliminado bajo presión reducida. El residuo se dividió entre una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (50 ml_) y acetato de etilo (50 ml_). El pH de la capa acuosa se ajustó a 3 usando una solución acuosa de ácido clorhídrico (1N). La capa acuosa fue extraída con acetato de etilo (50 mL x 2). Las capas orgánicas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) ( + H) 477.2; tiempo de retención de HPLC 2.7 minutos (Método A).
Ejemplo 106: (fl)-Pirrolidin-1-il(2-(1-(4-(trifluorometil)fenil)ciclo-propil)-3/-/-imidazor4,5-b1piridin-5-il)piperidin-3-il)metanona El compuesto del titulo fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 92, pero se usó metanol como el solvente y la mezcla de reacción se calentó a 70°C. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) d 1.60-1.82 (m, 6H), 1.87-2.05 (m, 6H), 2.72-2.81 (m, 1H) 2.91-2.99 (m, 2H), 3.43 (t, 2H), 3.53 (dt, 1H), 3.68-3.75 (m, 1H), 4.26 (d, 1H), 4.53 (d, 1H), 6.78 (d, 1H), 7.52 (d, 2H), 7.65 (d, 3H).
Eiemplo 107: (R)-(1-(2-(6-C¡clopropilpirazin-2-¡l)-3H-imidazor4.5-b1-piridin-5-il)piperid¡n-3-¡l)(morfolino)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 95, pero usando diclorhidrato de {R)-C\-(5,6-diaminopiridin-2-il)piper¡din-3-¡l)(morfolino)metanona (sintetizado por hidrogenación análoga a aquella usada para el intermediario 1, a partir del intermediario 40) e intermediario 30. 1 H NMR (300 MHz, D SO-cí6) d 1.06 (dd, 2H), 1.20-1.33 (m, 3H), 1.54-1.74 (m, 3H), 1.80-1.93 (m, 1H), 2.19-2.33 (m, 2H), 2.79 (br s, 1H), 2.87-3.09 (m, 3H), 3.55 (m, 5H), 4.30-4.53 (m, 2H), 6.88 (d, 1H), 7.86 (d, 1H), 8.61 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 13.05 (s, 1H).
Ejemplo 108: (R -(1-(8-(1-(4-Cloro-1H-pirazol-1-i!)ciclopropil)-9H-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de diclorhidrato de - (4,5-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (320 mg, 0.881 mmol) y 1-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbimidato de etilo (227 mg, 1.06 mmol) en etanol (2 mL) se agregó ácido acético glacial (0.81 mL, 14 mmol) y trietilamina (0.50 mL, 3.5 mmol). La solución se calentó a 110°C durante 2 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se disolvió en diclorometano. Los orgánicos se lavaron con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La capa acuosa fue extraída con diclorometano. Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó por cromatografía instantánea (0-10% metanol en acetato de etilo) para dar el producto como un sólido rojo. El sólido se purificó más vía cromatografía instantánea (0-20% acetona en diclorometano), seguido por pasar a través del tapón una alúmina básica (80-100% acetato de etilo en heptanos) para dar el compuesto del título como un sólido rosa (75 mg, 19% rendimiento). H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.46-1.55 (m, 1 H), 1.75-2.00 (m, 1H), 2.51-2.57 (m, 1 H), 2.85-2.90 (m, 1 H), 3.04 (dd, 1H), 3.39-3.50 (m, 3H), 3.58-3.63 (m, 1H), 4.72-4.83 (m, 2H), 7.56 (s, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 8.57 (br s, 1 H), 9.83 (br s, 1 H). MS (AP + ) (M + H) 441.2; tiempo de retención de LCMS 2.63 minutos (Método L) .
Ejemplo 109: (R)-( 1 -(2-( 1 -(4-Cloro- 1 H-pi razol- 1 -iDciclopropi \)-3H-imidazor4,5-b1pir¡d¡n-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-¡l)metanona A una solución de diclorhidrato de ( R)-( 1 -(5 , 6-d ia m i n opi rid i n-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (5.5 g, 15.2 mmol) y ácido acético (17.4 mL, 305 mmol) en etanol (20 ml_) se agregó una solución de 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbimidato de etilo (3.25 g, 15.2 mmol) en etanol (30 mL) seguido por trietilamina (12.7 mL, 91.2 mmol). La mezcla resultante fue purgada con nitrógeno. La mezcla de reacción se agitó durante 18 horas a 100°C. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y el solvente fue eliminado bajo presión reducida. El residuo fue divido entre una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (50 mL) y diclorometano (50 mL). La capa acuosa fue extraída con diclorometano (50 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y la capa acuosa resultante fue extraída con diclorometano (50 mL). Los orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (0-5% metanol en diclorometano) para dar (R)-( 1 -(2-( 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-¡l)metanona (6.33 g, 94%). 1H N R (500 MHz, CDCI3) d 1.55-1.70 (m, 1 H), 1.72-2.05 (m, 11H), 2.60-2.70 (m, 1H), 2.90-2.95 (m, 1H), 3.03-3.10 (m, 1 H), 3.42-3.50 (m, 3H), 3.56-3.62 (m, 1 H), 4.20-4.25 (m, 1 H), 4.38-4.44 (m, 1 H), 6.62-6.68 (m, 1 H), 7.59 (s, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 7.66-7.72 (m, 1 H); MS (ES + ) (M + H) 440; tiempo de retención de UPLC 0.47 minuto (Método N).
Preparación alternativa para (R)-( 1 -(2-( 1 -(4-cloro- 1 H-pirazol-1 -ciclopropil)-3H-irnidazo[4,5-b]pir¡din-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : ( R)- 1 - (4-C loro- 1 H-pi razo I- 1 -¡ I )-N- ( 3- n i t ro-6- ( 3-( p i rro I id i n a carbonil)piperidin-1-il)piridin-2-il)ciclopropanocarboxamida En un reactor enchaquetado Atlas de 1-L se agregó ácido 1-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxílico (49.08 g, 263.02 mmol), (R)-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)-metanona (70 g, 219.19 mmol), 4-dimetilaminopiridina (5.41 g, 43.84 mmol), tolueno (600 mL) y diisopropiletilamina (95.56 mL, 547.96 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 45°C y se agitó durante 10 minutos hasta que se disolviera la mayoría de los sólidos. Se agregó anhídrido cíclico de ácido 1 -propanofosfónico (195.70 mL, 328.78 mmol, 50% solución en acetato de etilo) y la temperatura aumentó a 110°C. La mezcla de reacción se agitó durante 19 horas antes de agregar más solución de anhídrido cíclico de ácido 1-propanofosfónico (25 mL). La mezcla fue agitada a 110°C durante 5 horas. La mezcla se concentró a un volumen bajo vía destilación con temperatura de chaqueta de 80°C. Una mezcla de etanol:agua (1 :1 , 1000 mL) se agregó para mantener la temperatura alrededor de 70°C. Una vez completa la adición, la mezcla se enfrió a 15°C sobre un periodo de 2 horas y se dejó granular durante 18 horas. Los sólidos se filtraron y enjuagaron con una mezcla de etanohagua (1 :1 , 750 ml_) y se secaron en un horno al vacío a 40°C con un chorro de nitrógeno por 18 horas para dar (H)-1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -?)-?/-(3-nitro-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-2-il)ciclopro-panocarboxamida (72 g). 1H N R (500 MHz, CDCI3) d 1.50-1.66 (m, 4H), 1.82-2.05 (m, 11 H) , 2.53-2.61 (m, 1 H), 3.00-3.20 (m, 2H), 3.34-3.42 (m, 1 H), 3.49 (t, 2H), 6.32 (d, 1 H), 7.61 (s, 1 H), 7.68 (s, 1H), 8.21 (d, 1 H), 11.01 (s, 1 H); MS (ES + ) (M + H) 488; tiempo de retención de HPLC: 7.520 minutos (Método: Columna: Halo C18, 4.6 x 150 mm, 2.7µ[?; fase móvil B: 0.1 M ácido fosfórico (H3P04) en agua; fase móvil D: acetonitrilo; gradiente: 80%-10% fase móvil B hasta 7.00 minutos; mantenida hasta 10.00 minutos; rampa rápida de 80% fase móvil B hasta 10.1 minutos; equilibrar hasta 12.1 minutos; flujo: 0.8 mL/min; temperatura de columna: 30°C; DAD 1 A, Sig = 254 nm).
Paso 2: (R)-(1-(2-(1-(4-Cloro-1 H-pirazol-1 - ¡ I ) c i c I o p r o p i I ) - 3 H-imidazo-[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona En un frasco se agregó (R)-1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)-A/-(3-nitro-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-2-il)ciclo-propanocarboxamida (107 g, 219.29 mmol) y ácido acético (750 mL, 6.74 mol). La mezcla fue agitada durante 5 minutos. Se agregó polvo de zinc (71.70 g, 1.10 mol). Se observó un exotermo a 79°C sobre un periodo de 30 segundos. La mezcla de reacción se calentó a 100°C y se agitó durante 2 horas. La mezcla se enfrió a 50°C y se agregó agua (750 ml_). La mezcla fue agitada durante 10 minutos y se enfrió a 10°C. Se agregó acetato de etilo (500 mL) y la mezcla fue agitada durante 20 minutos y se filtró a través de Celita enjuagando con acetato de etilo (300 mL). El filtrado se enfrió a 10°C y se agregó hidróxido de amonio acuoso (936.92 mL, 6.74 mol) en forma de gotas sobre un periodo de 20 minutos. Las capas se separaron y los orgánicos se lavaron con una mezcla de agua:salmuera (1:1, 500 mL) y se concentraron bajo presión reducida seguido por la adición de acetonitrilo (500 mL). La mezcla se concentró a sequedad a 45°C para dar (R)-(1-(2-(1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo-[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrol¡din-1 -il)metanona (100 g) como un material amorfo. 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.55-1.70 (m, 1H), 1.72-2.05 (m, 11H), 2.60-2.70 (m, 1H), 2.90-2.95 (m, 1H), 3.03-3.10 (m, 1H), 3.42-3.50 (m, 3H), 3.56-3.62 (m, 1H), 4.20-4.25 (m, 1H), 4.38-4.44 (m, 1H), 6.62-6.68 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.66-7.72 (m, 1H); MS (ES + ) (M + H) 440; tiempo de retención de HPLC: 4.450 minutos (Método: mismo como en el paso 1).
Ejemplo 109-B: Metanosulfonato de f f?)-(1 -(2-( 1 -(4-cloro- 1 H-pirazol-1-il)ciclo ropil)-3/-/-imidazo[4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -¡Qmetanona A una solución de (f?)-(1-(2-(1-(4-cloro-1 H-pirazol-1-il)c¡clo-propil)-3/-/-imidazo[4,5-b]p¡ridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)-metanona (ejemplo 109-A, 56.49 g, 128.4 mmol) en acetonitrilo (130 ml_) se agregó ácido metanosulfónico (8.33 ml_, 128 mmol). La mezcla fue agitada durante 18 horas a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y los sólidos se enjuagaron con acetonitrilo. Los sólidos fueron recolectados y se secaron al alto vacío por 1 hora para dar metanosulfonato de (R)-(1 -(2-(1 -(4-cloro- 1 H-pirazol-1 -il)-ciclopropil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (62.5 g, 90%). 1H NMR (500 MHz, CDCI3) ó 1.65-1.75 (m, 1H), 1.84-2.13 (m, 11H), 2.75-2.85 (m, 1H), 2.87 (s, 3H), 3.28-3.35 (m, 1H), 3.39-3.57 (m, 4H), 3.65-3.72 (m, 1H), 4.02-4.09 (m, 1H), 4.11-4.17 (m, 1H), 6.73-6.82 (m, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 8.13 (d, 1H); MS (ES + ) (M + H) 440; tiempo de retención de UPLC 0.47 min (Método N). mp = 212-214°C. Anal. Calculado para C22H26CI 70 -CH4O3S: C, 51.53; H, 5.64; N, 18.29; Cl, 6.61; S, 5.98. Encontrado: C, 51.28; H, 5.65; , 18.19; Cl, 6.56; S, 5.96.
Preparación alternativa para metanosulfonato de (R)-{ 1 -(2-( 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il) meta nona A (ft)-(1 -(2-(1 -(4-cloro-1 H-pirazol- 1 -if)ciclopropil)-3H-imidazo-[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(p¡rrolidin-1-il)metanona (ejemplo 109-A, 100 g) preparado por el método alternativo descrito en el ejemplo 109-A (paso 1 y paso 2), se agregó acetonitrilo (500 mL). La mezcla fue agitada durante 5 minutos a temperatura ambiente antes de agregar ácido metanosulfónico (14.38 mL, 219.29 mmol) sobre un periodo de 15 segundos. La mezcla fue agitada durante 2 horas al mismo tiempo enfriando de nuevo a 19°C. Los sólidos se filtraron y lavaron con acetonitrilo (250 mL) y se secaron bajo nitrógeno durante 18 horas para dar el compuesto del título (86 g, 73% en dos pasos del paso 2, método alternativo para el ejemplo 109-A) como un sólido blanco. Tiempo de retención de HPLC: 4.452 minutos (Método: mismo como para el paso 1 en el método alternativo descrito para el ejemplo 109-A). Tiempo de retención de HPLC quiral: 3.837 minutos (Método: Columna: OJ-H 4.6x250mm, 5µp?; S10(S): acetonitrilo + 0.1% isopropilamina, 150 bar, 4 mL/min, 40°C, 0-5.5 min: 5-45% S, 5.5-7.5 min: 45% S, 7.51-8 min: 5% S). H NMR (500 MHz, DMSO-d6) d 1.35-2.03 (m, 12H), 2.32 (s, 3H), 2.53-2.65 (m, 1 H), 2.91-3.13 (m, 2H), 3.20-3.35 (m, 2H), 3.35-3.55 (m, 2H), 4.20-4.36 (m, 2H), 7.05 (d, 1 H), 7.73 (s, 1 H), 7.83 (d, 1 H), 8.30 (s, 1 H).
Preparación alternativa para metanosulfonato de (R)-(1 -(2-(1 -(4-cloro-1/-/-pirazol-1-il)ciclopropil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)-piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : 2-Amino-6-(3-( irrolidina-1 -carbón il)piperidin-1 - i l)piridin-3-il-carbamato de (R)-fer-buti lo Se cargó en secuencia un recipiente de reacción purgado con nitrógeno en secuencia con 5% paladio-sobre-carbón (0.208 kg, 0.10 mol), ( )-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)-metanona (1.3 kg, 4.1 mol), acetato de etilo (14 L), carbonato de di-fer-butilo (0.906 kg, 4.15 mol), y trietilamina (0.824 kg, 8.14 mol). Una carga adicional de acetato de etilo (1.3 L) se agregó para asegurar que todos los residuos fueron enjuagados en el recipiente de reacción. El recipiente fue purgado y presurizado con nitrógeno, después se purgó y presurizó con hidrógeno a 50 psig. La reacción se calentó a 40°C y se mantuvo a esa temperatura por 6 horas. La mezcla entonces se enfrió a 20°C y el recipiente se purgó con nitrógeno. Se confirmó la presencia de 2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -il)piridin-3-ilcarbamato de (R)-rer-butilo por análisis de HPLC de la mezcla [tiempo de retención de HPLC: 5.25 minutos (Columna: Halo C18, 4.6 x 150 mm, 2.7 µ?t?; fase móvil A: acetonitrilo, fase móvil B: 0.05% ácido metanosulfónico en agua; gradiente lineal: 5:95 A:B a 95:5 A:B en 9 minutos, después se mantuvo durante 1 minuto; flujo: 1.0 mL/min; detección de UV a 210, 226 y 254 nM)]. La mezcla se filtró y se enjuagó con acetato de etilo (6.5 L). El filtrado fue transferido a otro recipiente de reacción, enjuagando con acetato de etilo (1 L). Para extinguir exceso de carbonato de di-íer-butilo, se agregó N, /V-dietilamina (59.5 g, 0.81 mol) al mismo tiempo manteniendo una temperatura de 20°C; la mezcla de reacción se mantuvo durante 30 minutos a esa temperatura. Tres cargas de material en esta escala se combinaron y se usaron en el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2: Metanosulfonato de (R)-(1 -(2-(1-(4-cloro-1 H-pirazol-1-il)-ciclopropil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Una solución de 2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -il)piridin-3-ilcarbamato de (R)-fer-butilo en acetato de etilo a partir de las tres cargas combinadas del paso 1 (65 L volumen total) se destiló bajo presión reducida a 40°C hasta que el volumen residual fue aproximadamente 8 L. Se agregó una porción adicional de acetato de etilo (48 L), y se destiló la solución resultante bajo presión reducida a 40°C hasta que el volumen residual fue aproximadamente 8 L. Se agregó en secuencia acetato de etilo (33 L), ácido 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarboxílico (2.28 kg, 12.2 mol) y N, /V-diisopropiletilamina (4.74 kg, 36.7 mol). A la mezcla de reacción a 20°C se agregó una solución de anhídrido cíclico de ácido 1 -propanof osf órico en acetato de etilo (50% solución, 14.0 kg, 22.0 mol; más un enjuague de acetato de etilo de 2.0-L). La mezcla resultante se calentó a 40°C y se mantuvo a esta temperatura durante 8 horas. La presencia de 2-(1-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclo-propanocarboxaldehído)-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-ilcarbamato de (R)-te r-but \o se confirmó por análisis HPLC de la mezcla [tiempo de retención de HPLC: 8.53 minutos (Columna: Halo C18, 4 6 x 150 mm, 2.7 µG?; fase móvil A: acetonitrilo, fase móvil B: 0.05% ácido metanosulfónico en agua; gradiente lineal: 5:95 A:B 95:5 A:B en 9 minutos, después mantenida durante 1 minuto; flujo: 1.0 mL/min; detección de UV a 210, 226 y 254 nM)]. La mezcla entonces se dividió entre acetato de etilo (38 L) y una solución 10% acuosa de ácido cítrico (2 x 50 L). La capa orgánica después se lavó en secuencia con una solución 10% acuosa de carbonato de potasio (31 L) y con agua (24 L). La capa orgánica entonces se destiló bajo presión reducida a 40°C hasta que el volumen resultante fue aproximadamente 8 L. Se agregó acetonitrilo (49 L) y la solución se destiló bajo presión reducida a 40°C hasta que el volumen restante fue aproximadamente 26 L. Se agregó ácido metanosulfónico (1.41 kg, 14.7 mol) vía embudo de adición, seguido por un enjuague de acetonitrilo (0.5 L). La mezcla de reacción se calentó a 70°C y se mantuvo a esa temperatura durante 12 horas, después se enfrió a 20°C sobre un periodo de 2 horas. La suspensión resultante se filtró, enjuagando con acetonitrilo (29 L). Los sólidos se secaron bajo un flujo de nitrógeno y después en un horno al vacío (40°C) para dar ( R)-( 1 -( 2- ( 1 -(4-cl oro- 1 H-p i razol- 1 -i I ) ci cío propi I )-3 H-imidazo[4,5-b]-piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (3.1 kg, 47% en dos pasos). Tiempo de retención de HPLC: 5.85 minutos (Columna: Halo C18, 4.6 x 150 mm, 2.7µG?; fase móvil A: acetonitrilo, fase móvil B: 0.05% ácido metanosulfónico en agua; gradiente lineal: 5:95 A:B 95:5 A:B en 12 minutos, después mantenida durante 2 minutos; flujo: 1.0 mL/min; detección de UV a 210 nM). Tiempo de retención de HPLC quiral: 4.30 minutos; Columna: AS-H 4.6 x 150 mm, 5µ???; fase móvil A: dióxido de carbono supercrítico, fase móvil B: 0.1% isopropilamina en metanol; gradiente: 5% B a 45% B en 6 minutos, después mantenida a 45% B por 2 minutos; flujo: 4.0 mL/min; temperatura de columna 40°C; detección de UV mantenida a 230 nM).
Ejemplo 109-C: Clorhidrato de (R)-(1 -(2-( 1 -(4-cloro-1 H-pirazol- 1 -il)ciclopropil)-3/--imidazor4,5-blpiridin-5-il)p¡peridin-3-il)(pi,rrolidin-1- ¡Dmetanona Se disolvió (R)-(1 - (2-(1 - (4-cloro-1 H-pirazol- 1 - i I) ciclo propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (140 mg, ejemplo 109-A) en 0.5 mL acetona a 22°C. Se agregó un equivalente molar de HCI concentrado (36% en agua), en forma de gotas, a la solución rápidamente agitada. La muestra se hizo turbia de inmediato. La muestra se calentó a 40°C y se agregó una acetona adicional (0.5 mL). Después de aproximadamente 30 minutos, la muestra se enfrió (~1°C/min) a 22°C. Se formaron sólidos opacos blancos. La muestra se filtró al vacío y los sólidos se recolectaron/secaron a temperatura ambiente (~22°C) para dar clorhidrato de (/?)-( 1 -(2-(1 -(4-cloro-1 H-pirazol- 1 - i I) ciclo propil )-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona. H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 1.43-2.01 (m, 12H), 2.60 (t, 1H), 2.92-3.10 (m, 2H), 3.29 (t, 2H), 3.38-3.46 (m, 1 H), 3.46-3.56 (m, 1 H), 4.26 (d, 1 H), 4.32 (d, 1 H), 7.04 (d, 1 H), 7.72 (s, 1 H), 7.82 (d, 1 H), 8.32 (s, 1 H).
Análisis elemental y Karl Fischer confirmaron la forma cristalina resultante para contener 4.4% agua.
Anal. Calculado para C22H26CIN70 - HCI - H20: C, 53.4; H, 5.9; N, 19.8; Cl, 14.3. Encontrado: C, 53.3; H, 6.0; N, 19.2; Cl, 14.8.
Ejemplo 110: 2-(3-(5-(3-(pirrolid¡na-1-carbon¡l)piperid¡n-1-il)-3H-¡midazor4,5-blpirid¡n-2-il)fenil)acetato de (ft)-metilo En un frasco se agregó 2-(3-formilfenil)acetato de metilo (98 mg, 0.55 mmol), ( R)-( 1 -(6-am i ??-5-? itropi rid in-2-i I) pi perid i ?-3-i I)-(pirrolidin-1 -il)metanona (intermediario 1 , paso 3) (140 mg, 0.45 mmol) y etanol (1.5 ml_). Entonces se agregó ditionato de sodio (388 mg, 2.23 mmol) y agua (0.5 mL) a la mezcla. El frasco se selló. La mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 18 horas. La solución se enfrió a temperatura ambiente. Se agregó trietílamina (0.15 mL, 1.1 mmol) y la solución fue agitada a 100°C durante 18 horas. Una muestra (0.8 mL) de la solución fue eliminada y concentrada a sequedad, y el residuo resultante se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 448.2; tiempo de retención de HPLC 2.28 minutos (Método A).
Ejemplo 111 : (R)-(J\ -(2-(6-(3-Hidroxioxetan-3-il)piridin-2-il)-3H-imidazof4,5-b1piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona En un frasco se agregó 6-(3-h¡droxioxetan-3-M)picol¡naldehído (54 mg, 0.30 mmol), (ft)-(1 -(6-am¡no-5-n¡tropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (intermediario 1 , paso 3) (76 mg, 0.24 mmol) y etanol (1.2 mL). Entonces se agregó ditionato de sodio (0.20 g, 1.2 mmol), trietilamina (82 µ L , 0.59 mmol) y agua (1.0 mL). La solución se calentó a 110°C durante 18 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con acetato de etilo. La mezcla se lavó con agua, se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, se lavó con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se lavó con salmuera. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se secó al alto vacío para dar un aceite verde que se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 448.9; tiempo de retención de HPLC 1.89 minutos (Método A).
Ejemplo 112: (R)-Pirrolidin-I -il(1 -(2-(6-(trifluorometi])piridin-2-il)-3H-imidazoí4,5-b1piridin-5-¡npiperidin-3-il)metanona En un tubo se agregó 6-(trifluorometil)picolinaldehído (150 mg, 0.47 mmol), (f?)-(1 -(5-amino-5-nitropiridin-2-il)pipendin-3-il)(pirrolid¡n-1 -il)metanona (intermediario 1, paso 3) (82.2 mg, 0.47 mmol), ditionito de sodio (310.7 mg, 1.78 mmol), etanol (10 mL) y agua (1.5 mL). El recipiente se selló y la mezcla de reacción se agitó a 110°C durante 16 horas. El solvente se evaporó bajo presión reducida y se agregó agua al residuo resultante. La mezcla fue extraída con acetato de etilo, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía TLC preparativa para dar el compuesto del título (50 mg, 29%) como un sólido amarillo. MS (ES+APCI) (M + H) 445.2; tiempo de retención de LCMS 2.657 minutos (Método G).
Los compuestos enlistados en la tabla 11 a continuación fueron preparados usando procedimientos análogos a aquellos descritos antes para la síntesis del ejemplo 112 usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica o preparados por una ruta descrita antes.
Tabla 11 Ejemplo Nombre de Compuesto Datos Analíticos (R)-(1 -(2-(5-Fluoropindin-3-il)-3H- imidazo[4,5-b]piridin-5-¡l)p¡perid¡n-3 ¡l)(pirrolidin-1 -il)metanona Ejemplo 123: 6-(5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-1H-imidazo[4,5-blpiridin-2-il)ptcolinato de (f?)-metilo El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 112, pero usando metanol como el solvente. 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1.77-2.12 (m, 8H), 2.62-2.77 (m, 1H), 2.96-3.21 (m, 2H), 3.41-3.56 (m, 3H), 3.63-3.75 (m, 1H), 4.34 (d, 1H), 4.58 (d, 1H), 6.73 (d, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.96 (m, 1H), 8.10 (d, 1H), 8.48 (d, 1H), 10.89 (br s, 1H). MS (ES + ) (M + H) 434.6744; tiempo de retención de LCMS: 5.39 minutos (Método H).
Ejemplo 124: 1-(3-(5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H-imidazof4,5-b1piridin-2-il)fenil)ciclopropanocarboxilato de (f?)-etilo El compuesto del título fue preparado usando un método análogo a aquél usado para el ejemplo 112, pero usando 1-(3-formil-fenil)c¡clopropanocarboxilato de etilo y omitiendo la trietilamina. MS (ESI + ) (M + H) 488.1; tiempo de retención de HPLC 2.6338 minutos (Método B).
Ejemplo 125: 3-(5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H- ¡midazof4,5-blpiridin-2-il)benzoato de ( )-metilo En un frasco se agregó 3-formilbenzoato de metilo (102 mg, 0.6 mmol) y una solución de ( ?)-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-¡l)(pirrolidin-1 -il)metanona (140 mg, 0.4 mmol) en etanol (1.5 ml_). Se agregó ditionato de sodio (388 mg, 2.2 mmol) y agua (0.5 mL). El frasco se selló y la solución se agitó a 110°C durante 18 horas. La solución se enfrió a temperatura ambiente y se agregó trietilamina (0.1 mL). La solución fue agitada a 100°C durante 18 horas. Se eliminó una alícuota de 0.8 mL y se concentró a sequedad, y el residuo resultante se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 434.2; tiempo de retención de HPLC 2.25 minutos (Método A).
Ejemplo 126: Ácido (ft)-2-metoxi-6-(5-(3-(pirrol¡d¡na-1 -carbonil)-piperidin-1-il)-3 -/-¡midazof4,5-b1pir¡din-2-il)isonicotínico A una solución de 2-metoxi-6-(5-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)-piperidin-1 -il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)isonicotinato de (R)-etilo (ejemplo 96, 50 mg, 0.1 mmol) en tetrahidrofurano (1.0 mL) se agregó una solución de hidróxido de litio (14.9 mg, 0.6 mmol) en metanol (1.0 mL) y agua (1.0 mL). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se concentró bajo presión reducida. Al residuo se agregó una solución saturada de cloruro de amonio en agua (10 mL). El pH de la mezcla se ajustó a 3 usando ácido clorhídrico acuoso ( 1 ) . La mezcla fue extraída con acetato de etilo (20 mL x 3). Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 451.1; tiempo de retención de HPLC 2.21 minutos (Método A).
Ejemplo 127: f -f 2-f 3-(Meti Isu Ifo n il)f enih-3 H-¡ m idazof4 , 5-bl-piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de diclorhidrato de (R)-(1 - (5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (125 mg, 0.3 mmcl) en N,N-dimetilformamida anhidro (2.5 mL) se agregó 3-(metilsulfonil)-benzaldehído (76 mg, 0.4 mmol). La solución fue agitada a 80°C durante 1 hora. Se agregó azufre (25 mg, 0.8 mmol) seguido por trietilamina (140 µ?, 1.0 mmol). La mezcla fue agitada a 85°C por 24 horas seguido por agitación a temperatura ambiente por otras 24 horas. La mezcla se concentró bajo presión reducida y el residuo se dividió entre diclorometano y agua. La capa acuosa fue extraída con diclorometano y los extractos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía instantánea (20-100% acetato de etilo en gradiente de heptanos seguido por 0-10% metanol en diclorometano). El residuo se volvió a purificar vía cromatografía instantánea (0-10% metanol en diclorometano) para dar un sólido amarillo que fue agitado en acetonitrilo (3 mL) a 40°C durante 2.5 horas. El sólido se filtró, se lavó con acetonitrilo frío y se secó al alto vacío a 40°C para dar el compuesto del título. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) ó 1.60-1.74 (m, 1H), 1.77-1.89 (m, 2H), 1.89-2.11 (m, 4H), 2.81 (br s, 1H), 2.97-3.09 (m, 2H), 3.17-3.26 (m, 3H), 3.41-3.52 (m, 2H), 3.52-3.63 (m, 1H), 3.74 (br s, 1H), 4.37 (br s, 1H), 4.64 (d, 1H), 6.91 (br s, 1H), 7.74-7 89 (m, 2H), 8.05 (d, 1H), 8.35 (br s, 1H), 8.65 (br s, 1 H).
Ejemplo 128: 3-(3-(5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H-imidazoH, 5-b1piridin-2-il)fenil)propanoato de (f?)-etilo El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 127, pero usando 3-(3-formil-fenil)propanoato de etilo como el material de partida. MS (ESI + ) (M + H) 476.2; tiempo de retención de HPLC 2.07 minutos (Método A).
Ejemplo 129: (R) -?, ?-? i eti l-5-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H-im¡dazof4,5-blpirid¡na-2-carboxamida En un frasco que contiene diclorhidrato de (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin -3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (125 mg, 0.3 mmol) se agregó ácido fórmico (73.5 µ?_, 1.7 mmol) seguido por 2,2-trifluoroetanol (1.7 mL) y 2 , 2 , 2-tricloroacetim idato de metilo (47.0 µ L , 0.4 mmol). El frasco fue sellado y agitado a temperatura ambiente durante 13 minutos. La mezcla de reacción se calentó a 60°C y agitado durante 3 horas a esa temperatura. Una alícuota de 0.3 mL se transfirió en otro frasco que contiene dietilamina (89.1 µ?, 0.9 mmol). La mezcla resultante se concentró bajo presión reducida y el residuo resultante se dividió entre agua y acetato de etilo. El acuoso fue extraído más con acetato de etilo. Los orgánicos combinados se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 399.1; tiempo de retención de HPLC 1.9864 minuto (Método A).
Ejemplo 130: (ff)-A/-(Piridin-2-il)-5-(3-(pirrolidina-1 - carbonil)- iper¡din-1-¡l)-3H-imidazoí4,5-b^piridina-2-carboxam¡da El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 129, pero usando piridin-2-amina como la amina. MS (ESI + ) (M + H) 420.0; tiempo de retención de HPLC 2.1276 minutos (Método B).
Ejemplo 131: (R)-C\ -(2-(2-C¡clopropilpirimidin-4-in-3H-imidazo[4,5-bl-piridin-5-il)piperidin-3-il)(3,3-difluoropirrolidin-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 96, pero usando 2-ciclopropilpirimidína-4-carbimidato de etilo. MS (ES-API+) (M + H) 454.0; tiempo de retención de HPLC 3.827 minutos (Método Q).
Ejemplo 132: ((R)-1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-3H-imidazor4,5-b1-p i r i d i n - 5 - i I) p i p e r i d i n - 3 - i I) ( ( S ) - 3 - h i d r o x i p i r r o I i d i n - 1 - i I ) m e t a n o n a El compuesto del título fue preparado por un método análogo aquél usado para el ejemplo 1 , pero usando 2-ciclopropilpirimídina-4 carbimidato de etilo. MS (ES-API + ) (M + H) 434.0; tiempo de retenció de HPLC 3.636 minutos (Método Q).
Ejemplo 133: 2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-5-(3-(6,7-dihidro-5/-/-pirrolo[1,2-c1imidazol-3-il)piperidin-1-il)-3/-/-imidazo[4,5-blpiridina A una solución de diclorhidrato de (1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (18 mg, 0.06 mmol) y ácido acético (55 µ?_, 0.96 mmol) en etanol (0.5 mL) se agregó trietilamina (17 µ?_, 0.12 mmol) seguido por 2-ciclopropilpirimidina-4-carbimidato de etilo (11.5 mg 0.06 mmol) disuelto en etanol (0.5 mL). La mezcla de reacción se calentó a 70°C durante 1.25 hora. El solvente fue eliminado bajo presión reducida. El residuo se suspendió en acetato de etilo y los sólidos no disueltos se filtraron. El filtrado se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, lavado con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y se lavó con salmuera. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ES I + ) (M + H) 427.1; tiempo de retención de HPLC 2.0183 (Método A).
Ejemplos 134 y 135: (ff)-2-f2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-5-(3-(6,7-dihidro-5H-pirrolo[1 ,2-c1imidazol-3-il)piperid¡n-1-¡l)-3H-imidazoí4,5-blpiridina y (S)-2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-5-(3-(6,7-dihidro-5/-/-pirrolo[1,2-climidazol-3-il)p¡peridin-1-il)-3H-imidazo[4,5-blpir¡dina A una solución de 6-(3-(6,7-dihidro-5H-pirrolo[1 ,2-c]imidazol-3-i I ) pi perid i n- 1 - i I) pi rid i na-2 , 3-d i a m i n a (36 mg, 0.1 mmol) en etanol (1.0 ml_) se agregó trietílamina (34 µ?_, 0.2 mmol) seguido por ácido acético (111 µ?_, 1.9 mmol). Entonces se agregó una solución de 2-ciclopropilpirimidina-4-carbimidato de etilo (23 mg, 0.1 mmol) en etanol (1.0 ml_). La mezcla de reacción se calentó a 70°C durante 1.5 hora. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo resultante se disolvió en acetato de etilo. Los sólidos se filtraron y el filtrado se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio, una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y salmuera. Entonces los orgánicos se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar un sólido. El sólido se purificó vía cromatografía instantánea (0-12% metanol en diclorometano) para dar el compuesto del título como una mezcla racémica. Los enantiómeros se separaron vía HPLC quiral (SFC-2 instrumento, Chiralcel OJ-H columna 4.6 mm x 25 cm, 75/25 C02/etanol fase móvil, 0.2% isopropilamina como un modificador y un flujo de 2.5 mL/min) para dar dos enantiómeros. Enantiómero 1 (ejemplo 134, 3.1 mg, 6% rendimiento): tiempo de retención de HPLC quiral 4.93 minutos (Método: Columna: Chiralcel OJ-H 10 x 250; fase móvil 75/25 C02/Etanol; Modificador: 0.2% isopropilamina; flujo: 10.0 mL/min); 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.09-1.40 (m, 8H), 1.63-1.78 (m, 1 H), 1.64-1.78 (m, 2H), 1.87-2.02 (m, 1H), 2.12-2.24 (m, 1H), 2.27-2.42 (m, 1 H), 2.72-2.89 (m, 1 H), 3.03 (br s, 1 H), 3.28-3.40 (m, 1 H), 3.56-3.68 (m, 1 H), 3.74 (d, 1 H), 4.12-4.38 (m, 2H), 6.76-6.90 (m, 1 H), 7.01-7.11 (m, 1H), 7.86-8.08 (m, 2H), 8.64-8.79 (m, 1H). Enantiómero 2 (Ejemplo 135, 4.4 mg, 9% rendimiento): tiempo de retención de HPLC quiral 5.41 minutos (Método: igual como Enantiómero 1): H NMR (500 MHz, CDCI3) d 0.84-0.92 (m, 2H), 1.14 (dd, 2H), 1.70 (d, 1 H), 1.92 (d, 1 H), 2.16 (d, 1 H), 2.27-2.39 (m, 1H), 2.79 (dt, 2H), 3.02 (d, 2H), 3.32 (br s, 2H), 3.54-3.78 (m, 2H), 3.98-4.72 (m, 4H), 6.81 (d, 1 H), 7.05 (br s, 1 H), 7.96 (br s, 2H), 8.68 (d, 1 H).
Ejemplo 136: (R)-( 1 -(2-(2-C iclopropilpirim id i ?-4-i l)-6-f I uoro-3H-imidazo[4,5-b1piridin-5-il)piperid¡n-3-il)(p¡rrolidin-1-il)metanona Se disolvió (/?)-( 1 -(2-(2-C iclopropilpirim i d i n - 4 - i f ) - 3 H- i midazo-[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (Ejemplo 95, 100 mg, 0.2 mmol) en N, /V-dimetilformamida. Se agregó la solución se enfrió a 0°C y Selectfluor (87 mg, 0.2 mmol). La mezcla de reacción se dividió entre acetato de etilo y agua. Los orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del titulo. MS (ESI + ) (M + H) 436.2; tiempo de retención de HPLC 2.72 minutos (Método A).
Ejemplo 137: ( )-4-(1-(5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H-imidazor4,5-blpiridin-2-il)ciclopropil)morfolin-3-ona Paso 1: A/-(2-Amino-6-(3-(6,7-díhidro-5H-pirrolo[1,2-c]imidazol-3-il)-piperidin-1-il)piridin-3-il)-1-(3-oxomorfolino)ciclopropanocarboxamida En un frasco se agregó ácido 1 -(3-oxomorfolino)c¡clopropano-carboxílico (33 mg, 0.2 mmol), diclorhidrato de (R)-(1-(5,6-diamino-piridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (77.5 mg, 0.2 mmol), hexafluoro fosfato 0-(7-azabenzotriazol-1-¡I)-/V, N, ?/', /V'-tetra-metiluronio (135 mg, 0.4 mmol), diisopropiletilamina (155 µ\-, 0.9 mmol) y N, W-dimetilformamida (3.0 mL). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se cargó directamente a una columna y se purificó vía cromatografía instantánea (0-6% metanol en diclorometano) para dar A/-(2-amino-6- (3-(6,7-dih¡dro-5/-/-pirrolo[1,2-c]¡midazol-3-¡l)p¡per¡d¡n-1-¡l)p¡r¡d¡n-3-il)-1 -(3-oxomorfol¡no)ciclopropanocarboxamida (77.0 mg, 94.7%). MS (ES + )(M + H) 457.3; tiempo de retención de LCMS 1.56 minuto (Método L).
Paso 2: (ft)-4-(1-(5-(3-(P¡rrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)ciclopropil)morfol¡n-3-ona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 86, paso 2. MS (ESI + ) (M + H) 439.2; tiempo de retención de HPLC 1.76 minuto (Método A).
Ejemplo 138: (R)-(1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-1/-/-imidazo[4,5-b1-pirazin-6-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1: 6-Bromo-2-(2-cicloprop¡lpirimid¡n-4-il)-1H-imidazo[4,5-b]-pirazina Se calentó una mezcla de 5-bromopirazina-2,3-diamina (50 mg, 0.3 mmol) y 2-cicloprop¡lp¡rimidina-4-carbimidato de etilo (intermediario 19, 50.7 mg, 0.3 mmol), trietilamina (73.8 µ?_, 0.5 mmol), ácido acético (244 µ L , 4.2 mmol) y etanol (0.8 m L ) a 100°C durante 30 minutos. La mezcla se concentró y diluyó con agua. Entonces una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio se agregó y la mezcla fue extraída con acetato de etilo. Los orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, y se concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (0-5% metanol en diclorometano) para dar 6-bromo-2-(2-ciclopropilpirimidin-4-¡l)-1H-imidazo[4,5-b]pirazina (21 mg, 25%).
Paso 2: (R)-(1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-1/-/-imidazo[4,5-b]-pirazin-6-il)piperid¡n-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se calentó una mezcla de 6-bromo-2-(2-cicloprop¡lpirimidin-4-il)-1 H-im¡dazo[4,5-b]pirazina (86 mg, 0.3 mmol), (R)-piperidin-3-il-(pirrolidin-1 -il)metanona (95 mg, 0.4 mmol), carbonato de potasio (98.4, 0.7 mmol), fluoruro de cesio (124 mg, 0.8 mmol) y diglima (1.0 mL) a 150°C durante 3 días. La mezcla se diluyó con agua y ácido clorhídrico acuoso (1N). La mezcla fue extraída con acetato de etilo (3x). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del titulo. MS (ESI + ) ( + H) 419.3, tiempo de retención de HPLC 2.44 minutos (Método A).
Ejemplo 139: (R)-(1-(2-(6-(1-Hidroxiciclopropil)piridin-2-il)-3H-imidazof4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1: (R)-(1 -(2-(6-(1 -((fer-Butildimet¡lsilil)oxi)ciclopropil)p¡ridin-2-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de 6-( 1 - ((íer-butildimetilsrl¡!)oxi)crclopropil)-picolinonitrilo (45.0 mg, 0.164 mmol) en etanol (0.3 mL) se agregó en forma de gotas una solución de etóxido de sodio en etanol (0.1 mL, 21% en peso, 0.2 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 50 minutos y después se calentó a 35°C durante 1.5 hora. A la mezcla se agregó diclorhidrato de (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-íl)metanona (77.2 mg, 0.2 mmol), trietilamina (47 µ?, 0.3 mmol) y ácido acético (47 µ?). La mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 50 minutos. La solución se transfirió a un frasco de microondas y se calentó a 145°C durante 20 minutos. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar ( ?)-(1-(2-(6-(1-((fer-but¡ldimetilsilil)oxi)ciclopropil)piridin-2-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona. 3e usó el material sin más purificación.
Paso 2: (f?)-(1-(2-(6-(1-Hidroxiciclopropil)piridin-2-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se agregó fluoruro de tetrabutilamonio (1 M en tetrahidrofurano, 0.6 ml_, 0.6 mmol) a una solución de (/?)-( 1 -(2-(6-( 1 -((íer-buti Idi meti I-silil)oxi)ciclopropil)piridin-2-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (89.7 mg, 0.2 mmol) en tetrahidrofurano (0.5 mL). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 40 minutos. La mezcla se dividió entre agua y acetato de etilo (3x). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 433.1 ; tiempo de retención de HPLC 2.1091 minutos (Método B).
Ejemplo 140: ( R)-( 1 -(2-(4-(2- H id rox i pro pan-2-i IU i azo l-2-i ?-3?-imidazoi4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : (R)-(1 -(2-(4-Bromotiazol-2-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)-piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se preparó (ft)-(1-(2-(4-bromotiazol-2-M)-3H-imidazo[4,5-b]píridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidín-1 -il)metanona por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 139, paso 1 , pero usando 4-bromotiazol-2-carbonitrilo como el material de partida (152 mg). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.56-2.08 (m, 8H), 2.59-2.83 (m, 1 H), 2.96- 3.14 (m, 1 H), 3.13-3.26 (m, 1 H), 3.37-3.55 (m, 3H), 3.59-3.71 (m, 1 H), 4.18-4.38 (m, 1 H), 4.41-4.59 (m, 1 H), 6.66-6.89 (m, 1 H), 7.31 (s, 1 H), 7.76-7.93 (m, 1H).
Paso 2: 2-(5-(3-(Pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)tiazol-4-carboxilato de (R)-metilo Se agregó (R)- ( 1 -(2-(4-brom ot iazo l-2-il )-3H-i m idazo[4 , 5-b]-piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (50.8 mg, 0.1 mmol), (1 , 1 '-bis(difen¡lfosf¡no)ferroceno)-dicloropalad¡o (II) (13.1 mg, 0.02 mmol) y metanol (1.0 ml_) a un frasco. El frasco fue evacuado y llenado con monóxido de carbono (3x). Se agregó trietilamina (46.0 µ L , 0.3 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 85°C durante 1.5 hora. La mezcla de reacción se cargó directamente sobre una columna de gel de sílice y se purificó vía cromatografía instantánea para dar 2-(5-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)tiazol-4-carboxilato de (R)-metilo (43 mg, 89%). MS (ES + ) (M + H) 441.1 ; tiempo de retención de LCMS 2.70 minutos (Método L).
Paso 3: ( R)-{ 1 -(2-(4-(2- H id roxi propa ?-2-i I )t i azo l-2-i I )-3 H-\ m id azo [4 , 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de 2-(5-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)tiazol-4-carboxilato de (R)-metilo (43.0 mg, 0.1 mmol) en tetrahidrofurano (0.8 mL) a 0°C se agregó en forma de gotas una solución de bromuro de metilmagnesio (3M en éter dietílico, 110 µ?_, 0.3 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 1 hora. Una solución acuosa saturada de cloruro de amonio se agregó y la mezcla fue extraída con acetato de etilo (4 mL x 5). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 441.1; tiempo de retención de HPLC 2.04 minutos (Método A).
Eiemplo 141: (/?)- (4- (2-( 1 - (4-C loro- H -p i razo I- 1 - i l)ci cío propi l)-3 H-¡midazo[4.5-blpiridin-5-¡l)morfolin-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 96. MS (ESI + ) (M + H) 442.1; tiempo de retención de HPLC 2.1091 minutos (Método A).
Ejemplo 142: (R)-(4-(2-(6-Ciclopropilpiridin-2-il)-3H-¡midazoí4,5-bl-piridin-5-il)morfolin-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 112, pero usando el intermediario 31 y 6-ciclopropilpicolinaldehído. MS (ES + ) (M + H) 418.9; tiempo de retención de LCMS 2.411 minutos (Método G).
Ejemplo 143: (R) -Pirro lidin-1 -il(4-(2-(6-(trifl uoromet il)piridin-2-il -3 H-imidazor4,5-blpiridin-5-il)morfolin-2-il)metanona El compuesto del titulo fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 112, pero usando 6 - (t r if I u o ro m et i I ) -picolinaldehído. MS (ESI + ) (M + H) 447.1; tiempo de retención de HPLC 2.6238 minutos (Método A).
Ejemplo 144 y 145: (R)-4-(2-(3-(Difluorometoxi)fenin-3H-imidazo[4.5-blpiridin-5-il)-2-(piridin-2-il)morfolina y (S)-4-(2-(3-(difluorometoxi)-fenil)-3H-imidazo[4,5-b1piridin-5-il)-2-(pirid¡n-2-il)morfolina Los compuestos del título fueron preparados por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 112, pero usando 3-(difluoro-metoxi)benzaldehído para dar una mezcla racémica que además se purificó vía HPLC quiral usando las siguientes condiciones: Chiralpak AS-H columna 10 x 250; fase móvil 80/20 dióxido de carbono/etanol ; flujo 10.0 mL/min para dar compuestos del título. Enantiómero 1 (ejemplo 144, 10% rendimiento): tiempo de retención de HPLC quiral: 5.67 minutos (Método: Columna: Chiralpak AS-H 10 x 250; fase móvil: 80/20 C02/Etanol; Flujo: 10.0 mL/min); 1H NMR (CDCI3, 400 MHz): d 2.96-3.01 (m, 1H), 3.16-3.22 (m, 1H), 3.92-3.96 (m, 1H), 4.14- 4.17 (m, 1H), 4.22-4.25 (m. 1H), 4.60-4.62 (m, 1H), 4.76 (dd, 1H), 6.61 (t, 1H), 6.78 (d, 1H), 7.20-7.26 (m, 2H), 7.48-7.51 (m, 2H), 7.57 (d, 1H), 7.74-7.80 (m, 2H), 7.90-7.93 (m, 1H), 8.62-8.63 (m, 1H); Enantiómero 2 (ejemplo 145, 10% rendimiento): tiempo de retención de HPLC quiral: 7.17 minutos (Método: igual como para el otro enantiómero 1); 1H NMR (CDCI3, 400 MHz): d 2.95-3.03 (m, 1H), 3.15- 3.26 (m, 1H), 3.91-4.01 (m, 1H), 4.14-4.21 (m, 1H), 4.22-4.28 (m, 1H), 4.58-4.64 (m, 1H), 4.78 (dd, 1H), 6.62 (t, 1H), 6.80 (m, 1H), 7.20-7.26 (m, 2H), 7.48-7.54 (m, 2H), 7.57 (d, 1H), 7.72-7.80 (m, 2H), 7.90-7.95 (m, 1H), 8.60-8.64 (m, 1H).
Ejemplo 146: (R)-(4-(2-(6-C¡cloprop¡lpirazin-2-il)-3H-imidazoí4,5-b1-pirid¡n-5-il)morfolin-2-il)(p¡rrol¡din-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo al ejemplo 105 usando 6-ciclopropilpirazina-2-carb¡midato de etilo (intermediario 30) y (/?)-(4-(5,6-diaminopiridin-2-il)morfolin-2-il)-(pirrolidin-1 -il)metanona (intermediario 29). MS (ESI + ) (M + H) 420.2; tiempo de retención de HPLC 2.432 minutos (Método A).
Ejemplo 147: ( )-(1-(2-(2-Ciclobutilpirimidin-4-il)-3/-/-imidazor4,5-b1-p¡ridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)-(pirrolidin-1 -il)metanona (135.9 mg, 0.5 mmol) en etanol se agregó 2-ciclobutilpirimidina-4-carbaldehído (76.2 mg, 0.5 mmol), azufre (30.1 mg, 0.9 mmol) y ácido acético (0.15 mL) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. La mezcla de reacción fue agitado durante 16 horas a reflujo. El solvente fue eliminado bajo presión reducida. Se agregó agua al residuo y la mezcla fue extraída con acetato de etilo. Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía TLC preparativo para dar el compuesto del título como un sólido amarillo. MS (ES + APCI) (M + H) 432.1; tiempo de retención de LCMS 2.567 minutos (Método G).
Ejemplo 148: ( )-Pirrolidin-1-il(1-(2-(2-(trifluorometil)pirimidin-4-il)-3H-imidazor4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 147, pero usando 2-(trifluorometil)-pirimidina-4-carbaldehído. MS (ES+APCI) (M + H) 446.2; tiempo de retención de LCMS 3.549 minutos (Método J).
Ejemplo 149: (R)-(1-(2-(4-Ciclopropilpirimidin-2-il)-3/-/-imidazof4.5-b1-piridin-5-il)pipendin-3-il)(morfolino)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 95, pero usando diclorhidrato de (R)-( -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(morfolino)metanona (sintetizado por hidrogenación análoga a aquella usada para el intermediario 1 , partiendo del intermediario 40) e intermediario 42. MS (ES+APCI) (M + H) 434.2; tiempo de retención de LCMS 1.996 minuto (Método G).
Ejemplo 150: (R)-1-(2-(6-Ciclopropilpiridin-2-il)-3H-imidazof4.5-bl-piridin-5-il)-A/,/V-dimetilpiperidina-3-carboxamida El compuesto del título fue preparado usando un método análogo a aquél usado para el ejemplo 112 pero usando (f?)-1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)-N,N-dimetilpiperidina-3-carboxamida y 6-ciclopropilpicolinaldehído como materiales de partida. 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1.01-1.18 (m, 4H), 1.63-1.74 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 1.93 (m, 2H), 2.10 (br s, 1H), 2.85 (br s, 1H), 2.96-3.03 (m, 3H), 3.08 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 3.50 (s, 1H), 4.35 (d, 1H), 4.50 (d, 1H), 6.73 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.89 (d, 1H), 8.10 (br s, 1H), 10.14 (br s, 1H); MS (ES + APCI) (M + H) 391.2; tiempo de retención de LCMS 1.831 minuto (Método W).
Ejemplos 151 y 152; (S)-4-(2-(3-Clorofenil)-3H-imidazor4,5-blpiridin-5-il)-2-(piridin-2-il)morfolina v (R)-4-(2-(3-clorofenil)-3H-¡m¡dazoí4,5-blpiridin-5-il)-2-(piridin-2-il)morfolina Los compuestos del título fueron preparados usando un método análogo a aquél usado para el ejemplo 112, pero usando 3-cloro- benzaldehído y 3-nitro-6-(2-(piridin-2-il)morfolino)piridin-2-amina como materiales de partida. El compuesto crudo se purificó por TLC preparativa (5% acetona en diclorometano) para proveer el material racémico, que se separó más usando cromatografía quiral para dar compuestos del título. Enantiomero 1 (ejemplo 151, 21 mg, 9% rendimiento): MS (ES+APCI) 392.2; tiempo de retención de LCMS 2.057 minutos (Método G1); tiempo de retención de HPLC quiral 8.767 minutos (Método: Columna: CH I RAL PAK IC, 4.6 x 250 mm, 5µ??; fase móvil A: n-Hexano; fase móvil C: Etanol; isocrático: 75:25; Flujo: 0.8 mL/min; temperatura de columna: 25°C; 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 2.98 (dd, 1H), 3.17 (m, 1H), 3.91 (m, 1H), 4.20 (m, 2H), 4.58 (m, 1H), 4.76 (dd, 1H), 6.78 (d, 1H), 7.26 (m, 1H), 7.41 (m, 2H), 7.55 (d, 1H), 7.75 (m, 1H), 7.88 (m, 2H), 8.02 (s, 1H), 8.63 (d, 1H). Enantiomero 2 (ejemplo 152, 26 mg, 10% rendimiento): MS (ES + APCI) (M + H) 392.2; tiempo de retención de LCMS 2.06 minutos (Método G1). 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 2.98 (dd, 1H), 3.17 (m, 1H), 3.91 (m, 1H), 4.20 (m, 2H), 4.58 (m, 1H), 4.76 (dd, 1H), 6.78 (d, 1H), 7.26 (m, 1H), 7.41 (m, 2H), 7.55 (d, 1H), 7.75 (m, 1H), 7.88 (m, 2H), 8.02 (s, 1H), 8.63 (d, 1H); tiempo de retención de HPLC quiral 10.551 minutos (mismo método usado para enantiomero 1).
Los compuestos enlistados en la tabla 12 a continuación fueron preparados usando procedimientos análogos a aquellos descritos antes para la síntesis del ejemplo 112 y usando los materiales de partida apropiados que están comercialmente disponibles o preparados usando preparaciones bien conocidas a aquellos expertos en la técnica o preparados por una ruta descrita antes. La temperatura de la mezcla de reacción para el ejemplo 153 fue 100°C y para ejemplos 154 y 155 fue 80°C.
Tabla 12 Ejemplo 156: ( )-1-(6-(5-(3-(Pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1-il)-1 -/-imidazo[4,5-blpiridin-2-il)piridin-2-il)ciclopropanocarbonitrilo Paso 1 : (R)-(1-(2-(6-Bromopiridin-2-il)-1H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se preparó (R)-( 1 -(2-(6-Bromop¡ ridi n - 2 - i I ) - 1 H-\ m idazo[4 , 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolid¡n-1 -il)metanona usando un método análogo a aquél usado para el ejemplo 112, pero usando (R)-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-M)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona y 6-bromopicolinaldeh ido como materiales de partida. MS (ES + APCI) (M + H) 455.0; tiempo de retención de LCMS 3.238 minutos (Método C1 ).
Paso 2: (f?)-1-(6-(5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)piridin-2-il)ciclopropanocarbonitr¡lo A una solución agitada de (R)-(1 -(2-(6-bromopiridin-2-il)-1 AVimidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (300 mg, 0.658 mmol) en tolueno se agregó carbonitrilo de ciclopropano. La mezcla se enfrió a 0°C, después se agregó una solución 1 M de bis(trimetilsilil)amida de sodio en THF en forma de gotas. La mezcla de reacción fue agitada durante 16 horas a temperatura ambiente. La mezcla se extinguió con agua y después fue extraída con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó vía TLC preparativo (dos veces) para dar (R)-1 -(6-(5-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 - il) - 1 AV-im idazo[4 , 5-b]piridin-2-il)piridin-2-il)ciclopropanocarbonitrilo (20 mg, 7%) MS (ES+APCI) (M + H) 442.2; tiempo de retención de LCMS 2.969 minutos (Método C1 ); H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.24-1.31 (m, 4H), 1.65-1.71 (m, 2H), 1.78-2.04 (m, 6H), 2.69 (m, 1 H), 3.01 (t, 1H), 3.07-3.18 (m, 1 H), 3.43-3.56 (m, 3H), 3.60-3.72 (m, 1 H), 4.35 (br s, 1 H), 4 54 (d, 1 H), 6.72 (d, 1 H), 7.48 (d, 1 H), 7.79-7.95 (m, 2H), 8.58 (d, 1 H), 10.28 (br s, 1 H).
Ejemplo 157: (f?)-(1-(2-(1-Feniletil)-3H-imidazor4.5-blpiridin-5-il)piperidin-5-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de diclorhidrato de (f?)-(1 -(5,6-diaminopir¡d¡n-2- ¡l)p¡peridin-3-il)(pirrolid¡n-1 -il)metanona (intermediario 1) (0.5 g, 1.7 mmol) en etanol (20 ml_) se agregó trietilamina (1 ml_) y 2-fenilpropanal (0.25 mg, 1.9 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 12 horas. La mezcla entonces se concentró bajo presión reducida, se diluyó con agua helada y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas se secaron, filtraron y concentraron, y el residuo resultante se purificó por TLC preparativa para dar el compuesto del titulo (65 mg, 9%). MS (ES + APCl) (M + H) 404.2; tiempo de retención de LCMS 2.206 minutos (Método Y).
Ejemplo 158 (R)-(1-(2-(6-Ciclopropilp¡r¡din-2-¡l)-3H-¡m¡dazoí4,5-bl-piridin-5-il)piperidin-3-il)(2,5-dihidro-1/-/-pirrol-1-il)metanona Paso 1 : 1-(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo A una solución de piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (1 g, 6.33 mmol) en dimetilsulfóxido (15 ml_) se agregó 2-am ino-3-nitro-6-cloropiridina (1.098 g, 6.33 mmol) y trietilamina (1.921 g, 18.99 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a 100°C durante 18 horas, después se vertió en agua helada y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó, se filtró y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (100-200 malla sílice, 30% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-¡l)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (650 mg, 93.5%). MS (ES+APCI) (M + H) 295.1 ; tiempo de retención de LCMS 2.832 minutos (Método G).
Paso 2: 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo A una solución de 1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (300 mg, 1.019 mmol) en etanol (15 mL) se agregó una suspensión de 10% paladio-sobre-carbón (200 mg) en etanol bajo atmósfera de nitrógeno. La mezcla se hidrogenó usando un globo de hidrógeno durante 2 horas a temperatura ambiente después se filtró a través de una almohadilla de Celita. El filtrado se concentró para dar 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (250 mg) que se usó sin más purificación.
Paso 3: 1-(2-(6-Ciclopropilpiridin-2-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo A una solución de 1 -(5,6-díaminopiridin-2-¡l)p¡peridina-3-carboxilato de (R)-etilo (250 mg, 0.686 mmol) en etanol (15 mL) se agregó 6-ciclopropilpicolinaldehído (55 mg, 0.823 mmol), azufre (43 mg, 1.372 mmol) y ácido acético (1.5 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 18 horas. La mezcla de reacción se vertió en agua helada y fue extraída con acetato de etilo. Los orgánicos se concentraron bajo presión reducida y el material crudo se purificó vía TLC preparativa (80% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1 -(2-(6-ciclopropilpiridin-2-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilato de (R)- etilo (180mg). MS (ES + APCI) (M + H) 392.2; tiempo de retención de LCMS 3.757 minutos (Método J).
Paso 4: Ácido (R)-1 -(2-(6-ciclopropilp¡ridin-2-il)-3H-¡midazo[4,5-b]-piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico A una solución de 1-(2-(6-cic!opropilpiridin-2-i!)-3H-imidazo-[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilato (150 mg, 0.383 mmol) en etanol (15 mL) es agregó una solución 2N de hidróxido de sodio (5 mL) a 0°C. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas, después se neutralizó con una solución 2M de ácido clorhídrico y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida para dar ácido (R)-1 -(2-(6-ciclopropilpiridin-2-il)-3/-/-imidazo[4,5- b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico (150 mg). MS (ES + APCI) (M + H) 364.2: tiempo de retención de LCMS 2.974 minutos (Método J).
Paso 5: ( )-(1-(2-(6-C¡clo ropilpiridin-2-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(2,5-dihidro-1/-/-pirrol-1-il)metanona A una solución agitada de ácido ( ?)-1-(2-(6-ciclopropilpiridin-2-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico (150 mg, 0.686 mmol) en N, /V-dimetilformamída (15 mL) se agregó 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (150 mg, 0.825 mmol), hidroxibenzotriazol (111 mg, 0.826 mmol), y 3-pirrolina (57 mg, 0.826 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada durante 24 horas a temperatura ambiente, después vertida en agua helada y extraída con acetato de etilo. La capa orgánica se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía TLC preparativa (80% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar el compuesto del título (30 mg, 17%). MS (ES + APCI) (M + H) 415.0; tiempo de retención de LCMS 2.493 minutos (Método G). H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1.09 (m, 4H), 1.70 (m, 2H), 1.90 (m, 3H), 2.09 (m, 1H), 2.69 (m, 1H), 3.02 (m, 1H), 3.16 (m, 1H), 4.28 (m, 3H), 4.51 (m, 2H), 5.84 (m, 1H), 5.93 (m, 1H), 6.71 (d. 1H), 7.20 (d, 1H), 7.66 (m, 1H), 7.87 (d, 1H), 8.04 (m, 1H), 10.18 (br s, 1H).
Ejemplo 159: (fl)-(1 -(8-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-9H-purin-2-il)-piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : ( R)-( 1 -(4 , 5- D ia m i no pi ri d i ?-2-i l)pi perid i ?-3-i I) (pi rro I id i n- 1 -i I )-metanona A una solución agitada de -(4-amino-5-nitropirimidin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (300 mg, 0.937 mmol) en etanol (15 mL) se agregó una suspensión húmeda de paladio sobre carbón 10% (300 mg) en etanol bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se hidrogenó usando un globo relleno con gas de hidrógeno a temperatura ambiente durante 2 horas. La suspensión se filtró a través de celita y el filtrado se usó para el siguiente paso sin purificación.
Paso 2: (ft)-(1-(8-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-9H-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución agitada de (R)-(1 -(4,5-diaminopirimidin-2-il)-piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona, obtenida del paso previo, en etanol (20 mL) se agregó 2-ciclopropilpirimidina-4-carbaldehído (91 mg, 0.62 mmol), azufre (33 mg, 1.034 mmol), y ácido acético (0.5 mL). La mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 16 horas. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y se dividió entre agua y acetato de etilo. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, y se concentraron bajo presión reducida. El crudo se purificó vía HPLC preparativa y se tituló con una mezcla de éter dietílico:éter de petróleo para dar el compuesto del título (50 mg, 24%). MS (ES + ) (M + H) 419.3070; tiempo de retención de LCMS 3.75 minutos (Método J1 ). 1 H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1.08-1.31 (m, 5H), 1.79-2.08 (m, 7H), 2.33 (td, 1 H), 2.60 (m, 1H), 2.90-3.05 (m, 1 H), 3.07-3.22 (m, 1 H), 3.40-3.56 (m, 3H), 3.59-3.73 (m, 1 H), 4.79-5.02 (m, 2H), 7.92 (d, 1 H), 8.71 (d, 1 H), 8.81 (s, 1 H), 10.20 (br s, 1 H).
Ejemplo 160: 1-Óxido de (R )-3-( 1 -( 5- f 3-p i rro I i d ¡na- 1 -carboni D-piperidin-1-M)-3H-imidazo[4,5-blpiridin-2-il)ciclopropil)piridina Paso 1 : 1-Óxido de (R)-3-(1 -(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)-piperidin-1-il)píridin-3-ilcarbamoil)cicloprop¡l)piridina A una suspensión de 1-óxido de 3-(1 -carboxiciclopropil)pirid¡na (0.2 g, 1.1 mmol) y hexafluorofosfato de 2-( 1 ?-7-azabenzotriazol- 1 -¡l)-1 , 1 ,3,3-tetrametiluronio (HATU) (506 mg, 1.33 mmol) en dicloro-metano seco (5 ml_) se agregó diisopropiletilamina (0.63 ml_, 3.63 mmol). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 10 minutos, y después se agregó intermediario 1 (0.48 g, 1.33 mmol).
Después de 15 minutos, la mezcla se extinguió con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se purificó vía cromatografía instantánea (100-200 malla sílice, 0-10% metano! en diclorometano) para dar 1-óxido de (R)-3-(1 -(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)-piperidina-1 -il)piridin-3-ilcarbamoil)ciclopropil)piridina (250mg). MS (ES + APCI) (M + H) 451.1; tiempo de retención de LC S 5.133 minutos (Método A1 ).
Paso 2: 1-Óxido de (R)-3-(1 -(5-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -il)-3H-imidazo[4,5-b]piridm-2-il)ciclopropil)piridina A una solución de 1-óxido de ( f?) - 3 - ( 1 -(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-ilcarbamoil)ciclopropil)-piridina (0.25 g, 0.55 mmol) en ¡sobutanol (5 ml_) se agregó una solución de metóxido de sodio (0.15 g, 2.77 mmol) en metanol (2 ml_) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 16 horas. La mezcla entonces se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se secó, filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se purificó primero vía cromatografía instantánea (100-200 malla gel de sílice, 0-10% metanol en diclorometano) después vía HPLC preparativa para obtener el producto que se purificó además por separación quiral para dar 1-óxido de (R)-3-(1 -(5-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)ciclopropil)-piridina (70 mg). Tiempo de retención de HPLC quiral: 13.808 minutos (Método: C H I RAL PAK IA, 4.6 x 250 mm 5µ?? columna, fase móvil A: 0.1% DEA en n-hexano, fase móvil B: etanol; ¡socrático; 70:30, 1 imL/min, temperatura 25°C min MS (ES+APCI) (M + H) 433.1; tiempo de retención de LCMS 4.698 minutos (Método B1). H NMR (400 MHz, CD3OD) d 1.52-1.57 (m, 2H), 1.59-1.69 (m, 1H), 1.71-1.84 (m, 4H), 1.86-2.08 (m, 5H), 2.75 (t, 2H), 2.88-3.00 (m, 2H), 3.43 (t, 2H), 3.47-3.57 (m, 1H), 3.68 (br s, 1H), 4.27 (d, 1H), 4.52 (d, 1H), 6.78 (d, 1H), 7.50-7.56 (m, 1H), 7.58-7.72 (m, 2H), 8.26 (d, 1H), 8.31 (br s, 1 H).
Ejemplo 161: (RM1 - Í2-M -(Piridin-4-inciclopropil^3H-¡midazof4.5-b1- irid¡n-5-¡l)piperid¡n-3-il)( irrol¡din-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 160, usando ácido 1 -(piridin-4-il)ciclo-propanocarboxílico como el material de partida. MS (ES + ) (M + H) 417.1; tiempo de retención de LCMS 4.850 minutos (Método R1).
Ejemplo 162 (f?)-(1-(2-(2-Ciclopropilpirim¡din-4-il)-7-met¡l-3H-imidazof4,5-blpiridin-5-¡l)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1: (R)-(1-(6-Am¡no-4-metil-5-nitropirid¡n-2-il)piperidin-3-il)-(pirrolidin-l-il)metanona Se preparó (R)-(1-(6-amino-4-met¡l-5-nitropiridin-2-il)p¡peridin-3-il)(pirrol¡din-1 -il)metanona usando un método análogo a aquél usado para el intermediario 2, paso 1 pero usando 6-cloro-4-metil-3-nitropiridin-2-am¡na y (f?)-piperidin-3-il(p¡rrolidin-1 -il)metanona como materiales de partida. La mezcla de reacción se llevó a cabo a 70°C durante 1 hora. MS (ES + APCI) (M + H) 333.9; tiempo de retención de LCMS 4.322 minutos (Método Z).
Paso 2: (R)-(1-(5,6-Diamino-4-metilpiridin-2-il)piperidin-3-il)-(pirrolidin-l-il)metanona Se preparó (R)-(1-(5,6-diarnino-4-rnetilpiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona usando un método análogo a aquél usado para el intermediario 1 paso 4 pero sin cloruro de hidrógeno MS (ES + ) (M + H) 305.0.
Paso 3: (R)-(1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-7-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il) (pirro lidin-1 - i I) metan o na Se preparó (R)-(1 -(2-(2-ciclopropilpirimid¡n-4-il)-7-metil-3H-imidazo[4,5-b]piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona usando un método análogo a aquél usado para el ejemplo 147 a 80°C. MS (ES + ) (M + H) 456.2; tiempo de retención de LCMS 2.482 minutos (Método G). H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.08-1.29 (m, 5H), 1.65-1.72 (m, 1H), 1.78-2.08 (m, 5H), 2.24-2.35 (m, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.64-2.74 (m, 1 H), 2.99 (td, 1 H), 3.14 (dd, 1 H), 3.43-3.55 (m, 2H), 3.63 (dt, 1 H), 4.36 (d, 1H), 4.46-4.56 (m, 1 H), 6.56 (s, 1 H), 7.95 (d, 1 H), 8.64 (d, 1 H), 10.25 (br s, 1 H).
Eiemplo 163: (R)-C\ -(2-(3-(2H-Tetrazol-5-il)fenil)-3/-/-imidazoi4,5-bl-piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : (R)-3-(5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H-imidazo-[4,5-b]piridin-2-il)benzonitrilo A una solución de (R)-( 1 -(6-am¡no-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (intermediario 1 , paso 3) (50 mg, 0.15 mmol) y 3-formilbenzonitrilo (34 mg, 0.31 mmol) en etanol (2 ml_) se agregó ditionito de sodio (52 mg, 0.4 mmol), y agua (0.5 ml_). Después de 20 horas a 80°C, la mezcla se concentró. El residuo se dividió entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se concentró bajo presión reducida y el residuo resultante se purificó por TLC preparativa para dar (R)-3-(5-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)benzonitrilo como un sólido amarillo (40 mg, 81%). MS (ES + APCI) (M + H) 401.0; tiempo de retención de HPLC 4.016 minutos (Método I).
Paso 2: (R)-(1-(2-(3-(2H-Tetrazol-5-il)fenil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-¡l)piperidin-3-il)(pirrol¡din-1-il)metanona A una solución de (R)-3-(5-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -il)-3/-/-imidazo[4,5-b]pir¡din-2-il)benzonitrilo (30 mg, 0.07 mmol) en N, / -dimetilformamida (2 mL) se agregó azida de sodio (6 mg, 0.09 mmol) y yodo (3 mg). La mezcla de reacción se calentó durante 12 horas a 120°C, después se enfrió. La mezcla se filtró, y el filtrado se concentró. El residuo resultante se tituló con éter dietílico para dar (R)-(1 - (2-(3-(2H-tetrazol-5-il)fenil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)-piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona como sólido amarillo (36 mg, 92%). MS (ES + APCI) (M + H) 444.1; tiempo de retención de HPLC 3.551 minutos (Método C1). 1H N R (400 MHz, DMSO-cí6) d 1.50-2.00 (m, 8H), 2.60-2.68 (m, 1H), 2.83-2.97 (m, 3H), 3.25-3.31 (m, 1H), 3.42-3.50 (m, 1H), 3.52-3.60 (m, 1H), 4.32 (d, 1H), 4.42 (d, 1H), 6.83 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.81 (d, 1H), 7.94-8.02 (m, 2H), 8.79 (s, 1H), 13.02 (s, 1H).
Ejemplos 164 y 165: (fl)-1 -(2-(2-(cicloprop¡lpirimidin-4-il)-3/-/-imidazof4,5-blpiridin-5-il)-5,5-difluoro-A/,/V-dimetilpiperidina-3-carboxamida y (S)-1-(2-(2-ciclopropilpirimid¡n-4-il)-3/--¡midazof4,5-blpiridin-5-il)-5, 5-difluoro-A/, A/-di metí lpiperidina-3-carboxam ida Paso 1: 5-Oxopiperidina- , 3-dicarboxilato de 1-íer-butil 3-metilo A una solución de dimetilsulfóxido (2.2 mL, 41.46 mmol) en diclorometano seco (50 mL) a -78°C se agregó en forma de gotas a cloruro de oxalilo (1.57 mL, 18.2 mmol). Después de 10 minutos, se agregó una solución de 5-hidroxipiperidina-1 ,3-dicarboxilato de 1-fer-butilo 3-metilo (4.3 g, 16.59 mmol) en diclorometano en forma de gotas. Después de 15 minutos, se agregó trietilamina (6.92 mL, 49.7 mmol) en forma de gotas y la mezcla de reacción se dejó calentar entonces a temperatura ambiente Después de 3 horas, la mezcla se diluyó con diclorometano y se lavó con agua, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida para dar 5-oxopiperidina-1 , 3-dicarboxilato de 1-íer-butil 3-metilo (4.2 g) que se usó en el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2: 5, 5-Difluoropiperidina-1 ,3-dicarboxilato de 1-íer-butil 3-metilo A una solución de 5-oxopiperidina-1 ,3-dicarboxilatc de 1-íer-butil 3-metilo (4.2 g, 16.33 mmol) en diclorometano se agregó trifluoruro de bis(2-metoxietil)aminoazufre (Deoxo-fluor, 4.74 mL, 25.72 mmol). Después de 3 horas, se agregó etanol (0.42 mL). Después de 16 horas, la mezcla se diluyó con diclorometano, se lavó con agua, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía de gel de sílice para dar 5, 5-difluoropiperidina-1 ,3-dicarboxilato de 1-fer-butil 3-metilo (3.0 g, 67% en dos pasos) como un líquido amarillo pálido.
Paso 3: Ácido 1 -(f er-butox ica rbo n i I )-5 , 5-d if I uoro p i perid i na-3-carboxílico A una solución de 5,5-difluoropiperidina-1 , 3-dicarboxilato de 1-fer-butil 3-metilo (3.0 g, 10.74 mmol) en metanol (35 mL) se agregó una solución 1N acuosa de hidróxido de sodio (20 mL) a menos de 5°C. La mezcla se calentó a temperatura ambiente, y después de 16 horas, la mezcla se concentró bajo presión reducida. La cápa acuosa restante se acidificó con una solución 1N acuosa de ácido clorhídrico (a pH~4) y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida para dar ácido 1 -(rer-butoxicarbonil)-5,5-difluoropiperidina-3-carboxílico (2.5 g) como un sólido amarillo pálido que se usó sin más purificación.
Paso 4: 5-(D¡metilcarbamo¡l)-3,3-difluoropiperidina-1 -carboxílato de fer-butilo A una solución de ácido 1 -(fer-butoxicarbonil)-5,5-difluoro-piperidina-3-carboxílico (2.1 g, 7.92 mmol) en N, /V-dimetilformamida (100 mL) se agregó 1 , 1 '-carbonildiimidazol (CDI, 2.56 g, 15.82 mmol), clorhidrato de dimetilamina (1.29 g, 15.82 mmol) y trietil-amina (2.4 g, 23.71 mmol). Después de 16 horas, la mezcla se diluyó con acetato de etilo, después se lavó en secuencia con agua fría (x2) y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía de gel de sílice par dar 5-(dimetil-carbam o i I ) - 3 , 3-d ifluoropiperid i na- 1 -carboxi lato de íer-butilo (1.4 g, 60% en dos pasos) como un sólido amarillo pálido.
Paso 5: 5, 5-Dif I uoro-/V, N-d meti I pi perid i na-3-ca rboxa m ida , sal de ácido clorhídrico A una solución de 5-(d i met i lea rba m o i I )-3 , 3-d if I u oro pi perid i n a- 1 -carboxilato de fer-butilo (1.2 g, 4.1 mmol) en éter dietílico (25 ml_) se agregó una solución de cloruro de hidrógeno en éter (20 ml_) a menos de 5°C. Después de 15 minutos, la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente. Después de 4 horas, el solvente se evaporó al vacío y el residuo resultante se tituló con éter dietílico para dar 5,5-difluoro-/V, /V-dimetilp¡pend¡na-3-carboxamida, sal de ácido clorhídrico (0.8 g, 86%) como un sólido amarillo pálido.
Paso 6: 1-(6-Amino-5-nitrop¡ridin-2-il)-5,5-difluoro-A/,/V-dimetil-pi perid ina-3-carboxam ida A una solución de 5,5-difluoro-/V,/V-dimetilpiperidina-3-carboxamída (700 mg, 3.05 mmol) en dimetilsulfóxido (30 mL) se agregó trietilamina (619.2 mg, 6 11 mmol) y 2 -a m i n ?-6-cl oro-3-? it ro-piridina (531.1 mg, 3.059 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100°C. Después de 16 horas, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se dividió entre acetato de etilo y agua (2x). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró al vacío. El residuo resultante se tituló con pentano para dar 1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)-5,5-difluoro-/V, /V-dimetil-piperidina-3-carboxamida (0.9 g) como un sólido amarillo. MS (ES + APCI) (M + H) 330.2: tiempo de retención de LCMS: 3.066 minutos (Método U 1 ).
Paso 7: 1-(5,6-Diaminopiridin-2-il)-5,5-difluoro-A/, /V-dimetilpiperidina-3-carboxam ida A una solución de 1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)-5, 5-difluoro- A/,/V-dimetilpiperidina-3-carboxamida (400 mg, 1.21 mmol) en etanol (50 ml_) se agregó 10% palad io-sobre-carbón (300 mg). Después de 2 horas bajo hidrógeno, la mezcla se filtró a través de Celita que después se lavó con etanol para dar 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)-5,5-difluoro-/v\ /V-dimetilpiperidina-3-carboxamida como un filtrado que se usó directamente para el siguiente paso.
Paso 8: (R)-1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)-5,5-difluoro-/V,/V-dimetilpiperidina-3-carboxamida y (S)-1-(2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)-5,5-difluoro-/v\A/-dimetilpiper¡dina-3-carboxam¡da A una solución de 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)-5,5-difluoro-/V, N-dimetilpiperidina-3-carboxamida (363.5 mg, 1.21 mmol) en etanol se agregó 2-ciclopropilpirimidina-4-carbaldehído (179.9 mg, 1.21 mmol), azufre (77.7 mg, 2.42 mmol) y ácido acético (0.4 ml_). Después de 16 horas a reflujo, la mezcla se enfrió y después se concentró bajo presión reducida. El residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se secó, se filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por TLC preparativa para dar una mezcla racémica de los compuestos deseados. La mezcla racémica se purificó vía HPLC preparativa quiral para dar compuestos del título. Enantiómero 1 (ejemplo 164, 37 mg): MS (ES+APCI) (M + H) 428.2; tiempo de retención de HPLC quiral 5.835 minutos (Método: Columna: CH I RAL PAK IA, 4.6 x 250mm; 5µ?; fase móvil A: n-Hexano (0.1% ácido trifluoroacético); fase móvil C: Etanol; ¡socrático 50:50; Flujo: 1.0mL/min; temperatura de columna: 25°C). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.11-1.25 (m, 4H), 2.26-2.42 (m, 3H), 3.03 (s, 3H), 3.04-3.15 (m, 1H), 3.23 (s, 3H), 3.25-3.37 (m, 2H), 4.56-4.71 (m, 2H), 6.78 (d, 1H), 7.84-7.99 (m, 2H), 8.68 (d, 1H), 10.18-10.51 (m, 2H). Enantiómero 2 (ejemplo 165, 39 mg): MS (ES + ) (M + H) 428.2: tiempo de retención de HPLC quiral 7.336 minutos (Método: mismo para enantiómero 1).
Ejemplo 166: (fi)-(1-(2-D¡fluoro(fenil)met¡l)-3H-im¡dazoí4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : (R)-(1-(2-Bencil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)-(pirrolidin-l-il)metanona Se preparó (ft)-(1 -(2-bencil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-¡l)-piper¡d¡n-3-il)(p¡rrol¡din-1 -il)metanona se preparó por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 163, paso 1 a una temperatura de 120°C usando (R)-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)-p¡peridin-3-il)(p¡rrolidin-1 -M)metanona y 2-fenilacetaldehído. S (ES + APCI) (M + H) 390.1 ; tiempo de retención de LCMS 3.859 minuto (Método I).
Paso 2: (R)-(1-(2-Benzoil-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-¡l)(pirrolidin-1-il)metanona Se agregó óxido de manganeso (IV) (2 g) a una solución de (R)-( 1-(2-bencil-3H- imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (200 mg, 0.51 mmol) en dioxano (30 mL). Después de calentar a 120°C durante 48 horas en un tubo sellado, la mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celita y se lavó con acetato de etilo. El filtrado se concentró al vacío y el residuo resultante se purificó vía TLC preparativa para dar {R)-( 1 -(2-benzoil-3H-imidazo-[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (80 mg). MS (ES + APCI) (M + H) 404.1 ; tiempo de retención de LCMS 2.855 minutos (Método G).
Paso 3: (R)-(1-(2-(Difluoro(fenil)metil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)-piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se agregó trifluoruro de dietilaminoazufre (DAST, 0.5 mL) a una solución de (R)-(1-(2-benzoil-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (80 mg, 0.17 mmol) en cloroformo (15 mL) a 0°C. Después de 48 horas a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con diclorometano y se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró al vacío. El residuo se purificó por HPLC preparativa para dar el compuesto del título (8 mg, 11%). MS (ES + APCI) (M + H) 426.1; tiempo de retención de LCMS 3.626 minutos (Método C1).
Ejemplos 167 y 168: (R)-2-(2-ciclopropilpir¡m¡din-4-il)-5-(3-(6,7-dihidro-5/-/-pirrolo[2,1-cir ,2,4ltriazol-3-il)piperidin-1-il)-3H-imidazo-[4,5-blpiridina y (S)-2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-5-(3-(6,7-dihidro-5H-pirrolo[2.1 -cin ,2,4]triazol-3-il)piperidin-1 - il)-3H-imidazor4.5-b1-piridina Paso 1: 6-(3-(6,7-Dihidro-5H-pirrolo[2, 1 -c][1 ,2,4]triazol-3-il)piperidin-1 -i I) p i rid in a-2 , 3-d ia m i n a , sal de clorhidrato A una solución del intermediario 45 (300 mg, 0.91 mmol) en etanol (50 mL) se agregó 10% paladio-sobre-carbón (200 mg).
Después de 2 horas bajo hidrógeno, la mezcla se filtró sobre Celita y se lavó con etanol. Una solución de cloruro de hidrógeno en éter se agregó al filtrado y después de 10 minutos la mezcla se concentró bajo presión reducida. El residuo se tituló con éter dietílico para dar 6-(3-(6,7-dihidro-5H-pirrolo[2, 1 - c][1 ,2,4]triazol-3-il)piperidin-1 -il)piridina-2,3-diamina, sal de clorhidrato (339 mg).
Paso 2: 2-Ciclopropilpirimidina-4-carbonitrilo A una solución de 2-ciclopropilpirimidina-4-carbaldehído (1.0 g, 6.68 mmol) en N, A/-dimetilformam¡da (10 mL) se agregó clorhidrato de hidroxilamina (500 mg, 7.02 mmol) y trietilamina (1.2 mL). La mezcla de reacción se calentó a 50°C y anhídrido propilf osf órico (T3P) se agregó en forma de gotas. Después de 16 horas a 110°C, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extinguió con bicarbonato de sodio. La mezcla fue extraída con acetato de etilo, después la capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía de gel de sílice para dar 2-ciclopropil-pirimidina-4-carbonitrilo (600 mg, 62%) como un líquido amarillo pálido. MS (ES + APCI) ( + H) 145.9; tiempo de retención de LCMS 2.224 minutos (Método G).
Paso 3: 2-Ciclopropilpirimidina-4-carbimidato de etilo A una solución de 2-ciclopropilpirimidina-4-carbonitrilo (600 mg, 4.13 mmol) en etanol (10 mL) se agregó etóxido de sodio (561.9 mg, 8.27 mmol). Después de 2 horas, la mezcla se concentró al vacío. El residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida para dar 2-ciclopropilpir¡mid¡na-4-carb¡midato de etilo (400 mg) como un líquido amarillo pálido. El material se usó sin más purificación.
Paso 4: ( ?)-2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-¡l)-5-(3-(6,7-dihidro-5H-pirrolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-il)piperidin-1-il)-3H-imidazo[4,5-b]-piridina y (S)-2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-5-(3-(6,7-dihidro-5/-/-pirrolo[2,1-c][1,2,4]triazol-3-il)piperidin-1-il)-3H-imidazo[4,5-b]-piridina A una solución de 6-(3-(6,7-dihid r o-5 H-p i rrol o [2 , 1 -c][1,2,4]triazol-3-il)piperidin-1-il)piridina-2,3-diamina, sal de clorhidrato (339.1 mg) en etanol (10 mL) se agregó 2-ciclopropilpirimidina-4-carbimidato de etilo (175.1 mg, 0.91 mmol) y ácido acético (2 mL). Después de 16 horas a reflujo, la mezcla se enfrió y se concentró al vacío. El residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó vía TLC preparativa para dar una mezcla racémica que se purificó más vía HPLC preparativa quiral para dar compuestos del título. Enantiómero 1 (Ejemplo 167, 17 mg): MS (ES + )(M + H) 428.0; tiempo de retención de HPLC quiral 10.085 minutos (Método: Columna: CHIRALCEL ODH, 4.6 x 250mm, 5µ??; fase móvil D: n-Hexano (0.1% DEA); fase móvil C: Etanol, 70:30; Flujo: 1.0 mL/min; temperatura de columna: 25°C). H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1.07-1.33 (m, 4H), 1.45 (d, 2H), 1.89-2.13 (m, 3H), 2.18-2.36 (m, 2H), 2.70-2.90 (m, 2H), 2.94-3.15 (m, 3H), 3.21-3.35 (m, 1H), 3.92-4.10 (m, 2H), 4.36 (d, 1H), 4.72 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 7.84-7.98 (m, 2H), 8.67 (d, 1H), 10.29 (br s, 1H). Enantiómero (Ejemplo 168, 17 mg): MS (ES + ) (M + H) 428.0; tiempo de retención de HPLC quiral 13.738 minutos (Método: igual como para pico 1). 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1.07-1.33 (m, 4H), 1.45 (d, 2H), 1.89-2.13 (m, 3H), 2.18-2.36 (m, 2H), 2.70-2.90 (m, 2H), 2.94-3.15 (m, 3H), 3.21-3.35 (m, 1H), 3.92-4.10 (m, 2H), 4.36 (d, 1H), 4.72 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 7.84-7.98 (m, 2H), 8.67 (d, 1 H), 10.29 (br s, 1 H).
Ejemplo 169: 2-(6-Ciclopropilpiridin-2-il)-5-(3-(6,7-dihidro-5H-pirrolo-r2,1-cin.2,4ltr¡azol-3-¡l)piperidin-1-il)-3H-imidazor4,5-b1piridina Una mezcla de 6-(3-(6,7-dihidro-5/-/-pirrolo[2 1 -c][1 , 2 ,4]triazo I-3-il)piperidin-1-il)-3-nitropiridin-2-amina (intermediario 45) (300 mg, 0.91 mmol), 2-ciclopropilpiridina-6-aldehído (187.5 mg, 1.27 mmol), ditionita de sodio (602.6 mg, 4.46 mmol), etanol (15 ml_) y agua (2.4 ml_) en un tubo sellado se calentó a 110°C durante 16 horas. La mezcla se concentró bajo presión reducida y el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó vía TLC preparativa para dar el compuesto del título (80 mg, 21%) como una mezcla racémica. MS (ES + ) (M + H) 427.3; tiempo de retención de LCMS 2.687 minutos (Método J). 1 H NMR (400 MHz, CDCI3) d 1.02-1.15 (m, 4H), 1.73-1.82 (m, 1H), 1.89-2.13 (m, 3H), 2.21 (d, 1H). 2.74-2.85 (m, 2H), 2.94-3.01 (m, 2H). 3.02-3.12 (m, 2H), 3.21-3.32 (m, 1H), 3.91-4.10 (m, 2H), 4.33 (d, 1H), 4.65 (d, 1H), 6.75 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.66 (t, 2H), 7.88 (d, 1H), 8.05 (d, 1H), 10.20 (br s, 1 H).
Ejemplos 170 y 171: ( )-2-(6-Ciclopropilp¡rid¡n-2-il)-5-(3-(6,7-dihidro-5H-pirrolor2, 1 -clf 1 ,2,4ltriazol-3-il)piperidin-1 - il)-3H-im¡dazor4,5-bl-piridina y/o (S)-2-(6-ciclopropilpiridin-2-in-5-(3-(6.7-dihidro-5/-/-pirrolo[2,1-cin.2,41triazol-3-il)piperidin-1-il)-3/-/-¡midazo[4,5-b1-piridina Los compuestos del título fueron obtenidos vía purificación de HPLC preparativa quiral del ejemplo 169. Enantiómero 1 (ejemplo 170, 32 mg): MS (ES + ) (M + H) 427.36; tiempo de retención de HPLC quiral 9.561 minutos (Método: Columna: CHIRALCEL ODH, 4.6 x 250mm, 5µ?t?; fase móvil A: n-Hexano (0.1% DEA en n-Hexano; fase móvil C: etanol, 70:30; Flujo: I .OmLJmin; temperatura de columna: 25°C) Enantiómero 2 (ejemplo 171 , 31 mg): S (ES + ) (M + H) 427.3; tiempo de retención de HPLC quiral 12.719 minutos (Método: igual como para pico 1). 1H NMR (400 MHz, CDCI3) d 0.98-1.18 (m, 4H), 1.90-2.14 (m, 4H), 2.16-2.26 (m, 1 H), 2.73-2.89 (m, 2H), 2.94-3.12 (m, 4H), 3.19-3.31 (m, 1 H), 3.92-4.10 (m, 2H), 4.33 (d, 1 H), 4.65 (d, 1 H), 6.75 (d, 1 H), 7.20 (dd, 1 H), 7.67 (t, 1 H), 7.89 (d, 1 H), 8.05 (d, 1 H), 10.22 (br s, 1 H).
Ejemplo 172: f ¾-6-f 5-(3-( P irrol i d i n a- 1 -carboninpiperidin-1 -il)-3H- ¡midazor4,5-b1pir¡din-2-il)picolinamida Paso 1 : 6-(5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)picolinato de (R)-metilo Se preparó 6-(5-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 - \)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)picolinato de (R)-metilo (150 mg) por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 112, pero usando (R)-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (intermediario 1 , paso 3), 6-formilpicolinato de metilo, y metanol como el solvente. MS (ES + ) (M + H) 434.67; tiempo de retención de LCMS 5.39 minutos (Método HJ .
Paso 2: (R)-6-(5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H-imidazo-[4,5-b]piridin-2-M)picolinamida A 6-(5-(3-(pirrolidina-1-carbonM)piperidin-1-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il)picolinato de (R)-metilo (200 mg, 0.460 mmol) en tolueno (5 mL) se agregó en secuencia una solución saturada frescamente preparada de amoniaco en dioxano (10 mL) a -20°C, y trimetilalumlnio (0.099 g, 1.348 mmol). El recipiente de reacción se selló y se calentó a 100°C durante 16 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante fue titulado dos veces con metanol:éter dietílico (1:10) para dar el compuesto del título (40 mg). MS (ES + ) (M + H) 420.2892; tiempo de retención de LCMS 3.71 minutos (Método 11 ).
Ejemplo 173: (R)-A/,A/-Dimetil-6-(5-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-3H-¡midazoí4,5-blpiridin-2-il)picolinam¡da El compuesto del titulo (40 mg, 20%) fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 172, pero para el paso 2 se usó 2-dimetilamina. MS (ES + ) (M + H) 448.1; tiempo de retención de LCMS 3.783 minutos (Método I). 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1.41-1.48 (m, 1H), 1.51-1.57 (m, 1 H), 1.78-2.10 (m, 7H), 2.69 (d, 1 H), 3.03 (dd, 1 H), 3.09 (br s, 3H), 3.20 (s, 3H), 3.39-3.58 (m, 2H), 3.59-3.73 (m, 1 H), 4.29-4.39 (m, 1 H), 4.52 (d, 1 H), 6.73 (d, 1 H), 7.59 (d, 1 H), 7.82-7.97 (m, 2H), 8.33 (d, 1 H), 10.24 (br s, 1 H).
Ejemplo 174: ( 1 R, 4fi)-2-Oxa-5-aza b i ci cl ?G2.2.11 he otan -5 -i 1 ( (R)- 1 -(2- (2-ciclopropilpirimidin-4-il)-3/-/-imidazor4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3- ¡Dmetanona Paso 1 : 1 -(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)piper¡d¡na-3-carboxilato de (R)-metilo Se preparó 1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (ft)-metilo por un método análogo al ejemplo 158, paso 1 , pero la temperatura de la mezcla de reacción fue 80°C. MS (ES + APCI) (M + H) 281.1.
Paso 2: 1 -(5,6-Diaminopiridin-2-il)piperid¡na-3-carboxilato de (R)-metilo Se preparó 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidina de ( )-metilo por un método análogo al ejemplo 158, paso 2. El material se usó sin más purificación.
Paso 3: 1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-H)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)p¡per¡dina-3-carboxilato de (f?)-metilo Se preparó 1 -(2-(2-cíclopropilpirimid¡n-4-¡l)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piper¡dina-3-carboxilato de (R)-metilo por un método análogo al ejemplo 158, paso 3, pero usando 2-ciclopropilpirimidina-4-carbaldehído. MS (ES + APCI) (M + H) 379.0.
Paso 4: Ácido (R)-1 -(2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-3H-imidazo[4, 5-b]-piridin-5-il)p¡peridina-3-carboxílico A una solución de 1 -(2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-3/-/-imidazo- [4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilato de (ft)-metilo (250 mg, 0 66 mmol) en etanol (10 mL), se agregó una solución acuosa de hidróxido de sodio (1N, 5 mL). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. El solvente se destiló y el residuo se dividió entre agua y acetato de etilo. La capa acuosa se acidificó con ácido clorhídrico acuoso (10%) a pH~2. El precipitado resultante fue recolectado por filtración y se secó al vacío para dar (R)-1-(2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]pirimidin-5-il)piperidina-3-carboxílico (200 mg). MS (ES + APCI) (M + H) 365.2.
Paso 5: (1R,4R)-2-Oxa-5-azabiciclo[2.2.1]heptan-5-il((/?)-1-(2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3- ¡l)metanona A una solución de ácido (R)-1 -(2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-3H-imidazo[4, 5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico (70 mg, 0.192 mmol) en N, /V-d¡met¡lformam¡da (10 mL) se agregó 1-etil-3-(3- dimet¡laminopropil)carbo¡¡mida (EDCI) 73.2 mg. 0.383 mmol), hidroxibenzotriazol (52 mg, 0.383 mmol), trietilamina (58.2 mg, 0.575 mmol), (1R,5S)-8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octano (186 mg, 1.64 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (3 mg) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada durante 18 horas, vertida en agua helada, se extrajo con acetato de etilo, se lavó con agua fría y se concentró. El crudo se purificó via TLC preparativa (3% metanol en diclorometano) para dar el compuesto del título (9 mg). MS (ES + ) (M + H) 446.3; tiempo de retención de LCMS 1.816 minutos (Método F).
Ejemplo 175: (R)-(4-(2-(6-(Difluorometil)piridin-2-il)-3H-imidazor4,5- blpir¡din-5-il)morfolin-2-il)(pirrolidin-1-M)metanona El compuesto del título (20 mg) fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 163, paso 1 pero usando 6- (difluorometil)picolinaldehído y purificando el material crudo por cromatografía de gel de sílice. MS (ES + ) (M + H) 429.0; tiempo de retención de LCMS 4.092 minutos (Método I).
Ejemplo 176: (/?)-(1-(2-(2-Ciclopropilpirimidin-4-il)-3H-imidazoi4,5-b1-piridin-5-il)piperidin-3-il)(3,3-difluoroazetidin-1-il)metanona El compuesto del título (26 mg, 43%) se preparó por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 158 pero usando 3,3-difluoro-azetidina para el paso 5. S (ES + ) (M + H) 440.5090; tiempo de retención de LCMS 3.649 minutos (Método J1). 1H NMR (300 MHz, CDCI3) ó 1.10-1.24 (m, 4H), 1.26 (s, 1 H), 1.79-1.99 (m, 3H), 2.24-2.36 (m, 1 H), 2.42-2 58 (m, 1 H), 2.98-3.20 (m, 2H), 4.19-4.43 (m, 3H), 4.44-4.70 (m, 3H), 6.75 (d, 1 H), 7.84-7.97 (m, 2H), 8.67 (d, 1H), 10.31 (br s, 1 H).
Ejemplos 177 y 178: (2R, 5S)-4-(2-(3-Ciclofenil)-3H-imidazor4,5-bl-piridin-5-il)-5-metil-2-(piridin-2-il)morfolina y (2S.5S)-4-(2-(3-cloro-fenil)-3/-/-imidazo[4,5-blpiridin-5-il)-5-metil-2-(piridin-2-il)morfol¡na Paso 1 : 1 -Óxido de 2-(oxiran-2-il)pi ridina A una suspensión de ácido 3-cloroperoxibenzoico (m-CPBA, 172 g, 1000 mmol) en dicloroetano (500 mL) se agregó 2-vinilpiridina (30 g, 285.7 mmol). Después de 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 36 horas. La solución entonces se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía de alúmina neutral (10% metanol en diclorometano) para dar 1-óxido de 2-(oxiran-2-il)piridina como un sólido blanco (4.5 g, 10%).
Paso 2: 1-Óxido de 2-(2-(bencil((S)-1 -hidroxipropan-2-il)amino)-1 -hidroxietil)piridina A una solución de 1-óxido de 2-(oxiran-2-il)piridina (6.6 g, 48.48 mmol) en etanol (150 mL) se agregó (S)-2-(bencilamino)-propan-1-ol (16 g, 96.96 mmol) y carbonato de potasio (13.3 g, 96.96 mmol). Después de 2 horas, la mezcla se concentró bajo presión reducida y el residuo resultante se purificó vía cromatografía de alúmina (1% metanol en diclorometano) para dar 1-óxido de 2-(2-(bencil((S)-1-hidroxipropan-2-il)amino)-1-hidroxietil)piridina como un líquido amarillo (7 g, 22%).
Paso 3: 1-Óxido de 2-((5S)-4-bencil-5-metilmorfolin-2-il)piridina Se disolvió 1-óxido de 2-(2-(bencil((S)-1 -hidroxipropan-2-ol)-amino-1 -hidroxietil)piridina (7 g, 23.17 mmol) en 70% ácido sulfúrico (70 mL) y la mezcla se calentó a reflujo durante 7 horas. La mezcla se enfrió y después se diluyó con agua, se neutralizó con una solución de carbonato de sodio acuosa y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de alúmina (1% metanol en diclorometano) para dar 1-óxido de 2-((5S)-4-bencil-5-metilmorfolin-2-il)piridina como un líquido amarillo (3 g, 45%).
Paso 4: (5S)-5-Metil-2-(pindin-2-il)morfolina A una suspensión de 10% paladio-sobre-carbón (2 g) en etanol (30 mL) se agregó una solución de 1-óxido de 2-((5S)-4-bencil-5-metilmorfolin-2-il)piridina (3.5 g, 13.06 mmol) en etanol (10 mL). La mezcla se sometió a una atmósfera de hidrógeno usando un globo llenado con gas de hidrógeno durante 2 horas. La mezcla se filtró a través de Celita y el filtrado se concentró bajo presión reducida para dar (5S)-5-metil-2-(piridin-2-il)morfolina (0.7 g). S (ES + ) (M + H) 179.0.
Paso 5: 6-((5S)-5-Metil-2-(piridin-2-il)morfolino)-3-nitropiridin-2-am i na A una solución de (5S)-5-metil-2-(piridin-2-il)morfolina (0.7 g, 3.93 mmol) en dimetiisulfóxido (20 mL) se agregó trietilamina (0.68 g, 7.86 mmol). Después de 10 minutos, se agregó 6-cloro-3-nitro-piridin-2-amina (0.68 g, 3.93 mmol). Después de 4 horas a 110°C, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente, y después se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó via cromatografía de gel de sílice (80% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 6-((5S)-5-metil-2-(pindin-2-il)morfolino)-3-nitropiridin-2-amina (0 5 g, 41%).
Paso 6: (2ft,5S)-4-(2-(3-Clorofenil)-3H-im¡dazo[4,5-b]pirid¡n-5-il)-5-metil-2-(p¡ridin-2-il)morfolina y (2S,5S)-4-(2-(3-clorofenil)-3H[4,5-b]-pir¡din-5-¡l)-5-met¡l-2-(piridin-2-il)morfol¡na A una solución de 6-((5S)-5-metil-2-(pirid¡n-2-il)morfolino)-3-nitropiridin-2-amina (200 mg, 0.634 mmol) en etanol (10 ml_) en un tubo sellado se agregó 3-clorobenzaldeh ido (100 mg, 0.698 mmol), ditionito de sodio (420 mg, 2.40 mmol) y agua (0.8 ml_). La mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 18 horas. La mezcla se enfrió; se agregó agua fría y la mezcla resultante fue agitada durante 10 minutos. El sólido resultante se aisló por filtración y se purificó por TLC preparativa (5% acetona en diclorometano) para dar dos diaestereómeros. Diaestereómero 1 (ejemplo 177, 13 mg): MS (ES + ) (M + H) 406.0824; tiempo de retención de LCMS 3.61 minutos (Método K1). Diaestereómero 2 (ejemplo 178, 21 mg): MS (ES + ) (M + H) 406.1; tiempo de retención de LCMS 3.69 minutos (Método K1).
Ejemplo 179: ( R)-( 1 - (2-( 5-( M et M s u If o n i l) piridi n-3- i l)-3H-im id azo , 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : (R)-(1-(2-(5-Bromopiridin-3-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)p¡perid¡n-5-il)(pirrol¡din-1-il)metanona A una solución de (R)-(1 -(4-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (0.5 g, 1.5 mmol) en una mezcla de etanol y agua se agregó 5-bromonicotinaldehído (0.35 g, 1.6 mmol) y ditionato de sodio (1.1 g, 5.9 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 120°C durante 16 horas. La mezcla de reacción se concentró y se dividió entre agua y acetato de etilo. Los orgánicos se concentraron bajo presión reducida y el crudo resultante se purificó vía TLC preparativa para dar (R)-(1 -(2-(5-bromopiridin-3-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (400 mg, 60%).
Paso 2: ( ?)-(1-(2-(5-(Metilsulfonil)piridin-3-il)-3H-imidazo[4,5-b3-piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de (R)-(1 -(2-(5-bromop¡ridin-3-¡l)-3/-/-imidazo-[4, 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (0.05 g, 0.1 mmol) en dimetilsulfóxido se agregó metilsulfinato de sodio (NaS02Me) (13 mg, 0.13 mmol), yoduro de cobre, L-prolina y hidróxido de sodio. La mezcla de reacción se calentó a 90°C durante 14 horas. La mezcla de reacción se dividió entre agua y acetato de etilo. Los orgánicos se concentraron bajo presión reducida y el crudo resultante se purificó vía TLC preparativa para dar el compuesto del título (25 mg, 45%). MS (ES+APCI) (M + H) 455.0; tiempo de retención de LCMS 3.859 minutos (Método I).
Ejemplos 180 v 181: (3R.4f?)-1 -(2-(3-(Difluorometoxi)fenil)-3H- imidazor4,5-blpiridin-5-il)-/V,A/-4-trimetilpiperidina-3-carboxamida y (3S,4S)-1-(2-(3-(difluorometoxi)fenil)-3/-/-imidazor4,5-blpiridin-5-il)- A/,A/,4-trimetilpiperidina-3-carboxamida Paso 1: 3-(Dimet¡lcarbamoil)-4-met¡lpiper¡dina-1 -carboxilato de cis- fer-butilo A una solución de ácido cis-1 -(fer-butoxicarbonil)-4-metil- piperidina (preparado por protección de A/-Boc de ácido c/s-4-metil- piperidina-3-carboxílico, sintetizado por el método descrito en Bulletin de la Societe Chimique de France 1986, 4, 663-8) (0.4 g, 1.64 mmol) en tetrahidrofurano se agregó trietilamina (0.2 ml_, 1.64 mmol), clorhidrato de dimetilamina (132 mg, 1.64 mmol) y 1,1'- carbonilimidazol (CDI, 265 mg, 1.64 mmol). Después de 2 horas, la mezcla fue extinguida con agua y la capa acuosa fue extraída con acetato de etilo (2 x 10 ml_). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar 3-(dimetilcarbamoil)-4-metilpiperidina-1 - carboxilato de cis-rer-butilo (0.3 g, 68%) como un sólido amarillo. El material se usó sin más purificación.
Paso 2: Clorhidrato de cis-A/, /V-trimetilpiperidina-3-carboxamida A 3-(dimetilcarbamoil)-4-metilpiperidina de cis-íer-butilo (0.3g, 1.12 mmol) se agregó una solución de cloruro de hidrógeno en éter. La mezcla fue agitada durante 30 minutos, y después se concentró bajo presión reducida para dar clorhidrato de c s-N, ?/-4 -t ri m e t i I -piperidina-3-carboxamida (0.16 g) como un sólido blanco. El material fue usado sin más purificación.
Paso 3: cis-1-(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)-/V, W-4-trimetilpiperidina-3-carboxamida A una solución de N, A/-4-trimetilpiperidina-3-carboxamida (0.16 g, 0.96 mmol) en dimetilsulfóxido (5 mL) se agregó trietilamina (0.2 mL, 0.96 mmol) y 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (0.168 g, 0.96 mmol). La mezcla de reacción se calentó durante 12 horas a 80°C, después se enfrió. La mezcla se diluyó con agua y la capa acuosa fue extraída con acetato de etilo (2 x 10 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó vía cromatografía de gel de sílice para dar cis-1 -(6-amino-5-n¡tropiridin-2- \)-N, /V;4-trimetilpiperidina-3-carboxamida (0.2 g, 68%).
Paso 4: (3R,4R)-1-(2-(3-(Difluorometoxi)fenil)-3H-imidazo[4,5-b]-p i r i d i ?-5-i I ) - V, /V,4-trimetilpiperidina-3-carboxamida y (3S,4S)-1-(2-(3-(difluorometoxi)fenil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)-/V, A/,4-trimet¡l-piperidina-3-carboxamida Los compuestos del título se prepararon por un método análogo a aquél usado para nitropiridin-2-amina para dar una mezcla racémica que se purificó más vía HPLC quiral para obtener enantiómero 1 y enantiómero 2. Enantiómero 1 (ejemplo 180, 8.4 mg): MS (ES + APCI) (M + H) 430.2; tiempo de retención de LCMS 2.965 minutos (Método P1 ). H N MR (300 MHz, DMSO-d6) 6 0.86 (d, 1 H), 0.95 (d, 3H), 1.50-1.62 (m, 1 H), 1.73-1.86 (m, 1 H), 2.27 (m, 1H), 2.68-2.75 (m, 1 H), 2.82 (br s, 3H), 2.95-3.06 (m, 3H), 3.34-3.50 (m, 1 H), 3.90-4.08 (m, 2H), 6.80 (d, 1 H), 7.21 (d, 1 H), 7.32 (t, 1 H), 7.55 (d, 1 H), 7.79 (d, 1H), 7.88-7.92 (m, 1 H), 7.97 (d, 1 H), 13.09 (s, 1 H). Enantiómero 2 (ejemplo 181 , 6.6 mg): MS (ES+APCI) (M + H) 430.3; tiempo de retención de LCMS 2.963 minutos (Método P1).
Ejemplo 182: (R)-(1-(2-(6-Cicloprop¡lp¡ridin-2-¡l)-3H-imidazoí4.5-bl-piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de {R)-{ 1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (250 mg, 0.711 mmol) en etanol (15 mL) se agregó 6-ciclopropilpicolinaldehído (0.137 g, 0.974 mmol), ditionito de sodio (536 mg, 2.96 mmol) y agua (2 mL). La mezcla de reacción fue agitada durante 16 horas a 100°C en un tubo sellado. La mezcla se enfrió, y el solvente fue eliminado bajo presión reducida. Se agregó agua al residuo y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó por TLC preparativa eiuyendo con 4% metanol en diclorometano para dar el compuesto del título (55 mg, 17%). MS (ES+APCI) (M + H) 417.2; tiempo de retención de LCMS 1.944 (Método F). 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1.00-1.09 (m, 2H), 1.09-1.16 (m, 2H), 1.63-1.74 (m, 1H), 1.81-2.14 (m, 7H), 2.62-2.76 (m, 1H), 2.99 (dd, 1H), 3.08-3.21 (m, 1H), 3.44-3.55 (m, 3H), 3.58-3.70 (m, 1H), 4.35 (d, 1H), 4.48 (d, 1H), 6.71 (d, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.66 (t, 1H), 7.87 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 10.18 (br s, 1 H).
Ejemplo 183: ( ?)-(1-(2-(5-Ciclopropilpiridin-3-il)-3H-imidazor4,5-bl-piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de 5-ciclopropilnicotinimidato de etilo (0.2 g, 1.04 mmol) en etanol se agregó ácido acético (0.1 mL), trietilamina (0.1 mL) y una solución de sal de diclorhidrato de (R)-(1-(5,6- diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (0.4 g, 1.1 mmol) en etanol. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 24 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y al residuo resultante se agregó una solución acuosa saturada de cloruro de amonio. La mezcla fue extraída con acetato de etilo. La capa orgánica se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía TLC preparativa para dar el compuesto del título (0.025 g). 1H NMR (400 MHz, DMSO-cí6) d 0.85 (br s, 2H), 1.07 (d, 2H), 1.47-1.74 (m, 4H), 1.74-1.96 (m, 5H), 1.98-2.10 (m, 1H), 2.61 (br s, 2H), 2.92 (d, 2H), 3.41-3.59 (m, 2H), 4.33 (d, 1H), 4.39 (d, 1H), 6.86 (d, 1H), 7.81 (d, 1H), 8.00 (br s, 1H), 8.47 (br s, 1H), 9.05 (br s, 1H), 13.07 (br s, 1H). MS (ES + ) (M + H) 417.36; tiempo de retención de LCMS 3.03 minutos (Método S).
Ejemplo 184: (ftM 1 - (2-(6-CiclopropM piridi n-2-¡ l)-3H-¡m idazo , 5-bl-piridin-5-il)piperidin-3-il)(3,3-difluoropiridin-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 158, pero usando 3,3-difluoropirrolidina en vez de 3-pirrolina y 4-dimetilaminopiridina para el paso final. H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1.01-1.17 (m, 4H), 1.78-2.01 (m, 3H), 2.02-2.16 (m, 2H), 2.31-3.61 (m, 3H), 2.65-2.78 (m, 1H), 3.01-3.21 (m, 2H), 3.66-4. OÚ (m, 3?), 4.24 (d, 1H), 4.54 (t, 1H), 6.71 (dd, 1H), 7.20 (dd, 1H), 7.58-7.71 (m, 1H), 7.88 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 10.17 (br s, 1H). MS (ES + APCI) (M + H) 452.9; tiempo de retención de LCMS tiempo 4.371 minutos (Método I).
Ejemplo 185: (f?)-1-(2-(2-(Ciclopropilpirimidin-4-il)-3/-/-imidazor4,5-bl-piridin-5-il)-/V-etil-/V-metilpiperidina-3-carboxamida A una solución de (ft)-1 - (5 , 6-d ia m in o p i r id i n- 2 - i I ) -/V-et i I- ?-metilpiperidina-3-carboxamida (200 mg, 0.772 mmol) en etanol (10 mL) se agregó 2-ciclopropilpirimidina-4-carbaldehído (106 mg, 0.722 mmol), polvo de azufre (69 mg, 2.16 mmol), y ácido acético (0.2 mL). La mezcla de reacción se calentó a 80°C durante 18 horas. El solvente se evaporó y el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía HPLC preparativa para dar el compuesto del título (40 mg, 13.5%). 1H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1 09-1 18 (m, 3H), 1.19-1.31 (m, 4H), 1.65-1.73 (m, 1H), 1.84 (d, 1H), 1.88-1.98 (m, 2H), 2.31 (d, 1H), 2.69-2.87 (m, 1H), 2.99 (br s, 1H), 3.03 (br s, 1H), 3.11 (br s, 1H), 3.14-3.27 (m, 1H), 3.37-3.57 (m, 2H), 4.37 (d, 1H), 4.45-4.59 (m, 1H), 6,76 (d, 1H), 7.79-7.96 (m, 1H), 8.67 (d, 1H), 10.25 (br s, 1H). MS (ES + APCI) (M + H) 406.3; tiempo de retención de LCMS tiempo 3.055 minutos (Método U1).
Ejemplo 186: (fí)-(4-(2-(6-C¡clopropilpir¡din-2-il)-3H-imida2of4,5-bl-piridin-5-il)morfolin-2-il)(morfolino)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 112, pero el extracto orgánico sólo se lavó con agua en vez de una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1.02-1.17 (m, 4H), 1 99-2.16 (m, 2H), 3.14-3.31 (m, 1H), 3.38 (dd, 1H), 3.50-3.62 (m, 2H), 3.66-3.84 (m, 7H), 4.01-4.17 (m, 2H), 4.20-4.36 (m, 2H), 6.74 (d, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.67 (t, 1H), 7.92 (d, 1H), 8.01-8.09 (m, 1H), 10.23 (br s, 1H). MS (ES + APCI) (M + H) 435.2, tiempo de retención de LCMS tiempo 2.322 minutos (Método G).
Ejemplo 187: (R)-Pirrolidin-1-il(1-(8-(6-(trifluorometil)piridin-2-il)-9H-purin-2-il)piperidin-3-il)metanona A una solución de 6-(trifluorometil)picolinimidato de etilo (291 mg, 1.3 mmol) y trietilamina (0.6 ml_, 4.4 mmol) en etanol (5 ml_) se agregó en forma de gotas una solución de diclorhidrato de (R)-(1-(4,5-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (400 mg, 1.1 mmol) y ácido acético (0.3 ml_, 6.6 mmol) en etanol (10 ml_) a temperatura ambiente en un periodo de 10 minutos. La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 120°C. La mezcla se concentró y el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía TLC preparativa para dar el compuesto del título (110 mg, 20%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 1.18-1.32 (m, 1H), 1.48 (d, 1H), 1.71 (t, 2H), 1.76-1.83 (m, 2H), 1.89 (dt, 3H), 2.55-2.64 (m, 2H), 2.85-3.03 (m, 2H), 3.42-3.50 (m, 1H), 3.51-3.63 (m, 1H), 4.76 (d, 2H), 8.00 (d, 1H), 8.22-8.32 (m, 1H), 8.49 (d, 1H), 8.83 (br s, 1H), 13.41 (br s, 1H). MS (ES + APCI) (M + H) 446.33; tiempo de retención de LCMS tiempo 3.34 minutos (Método S).
Ejemplo 188: (R)-(1 -(2-(2-(4-Cloro-1 H-pirazol-1 - il)propan-2-il)-3H-imidazor4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : (f?)-(1-(5,6-Diam¡nopirid¡n-2-il)p¡peridin-3-¡l)(p¡rrolid¡n-1-¡l)-metanona Una solución de (R)-(1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (1.5 g, 4.7 mmol) en etanol (20 ml_) se agregó a una suspensión de 10% paladio-sobre-carbón (800 mg) a temperatura ambiente. La mezcla se hidrogenó durante 4 horas, se filtró a través de Celita y se lavó con etanol. El filtrado se usó para el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2: (R)-(1 -(2-(2-(4-Cloro-1 /-/-plrazol-1 -il)propan-2-M)-3/-/-imidazo-[4, 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il) metanona Se agregó ácido acético (2.9 mL, 48.58 mmol) y 2-(4-cloro-1 H-pirazol-1-il)-2-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)-metanona de etilo a una solución de ( R) - ( 1 -( 5 , 6-d i am i n op i rid i ?-2-i I )-piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona en etanol, preparada en el paso previo. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 18 horas. La mezcla se concentró y el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 5% metanol en acetato de etilo) para dar el compuesto del título (530 mg, 25% rendimiento en 2 pasos). 1H NMR (500 MHz. CDCI3) d 1.53-1.65 (m, 1 H), 1.74-2.00 (m, 7H), 2.10 (s, 6H), 2.58-2.70 (m, 1 H), 2.88-2.93 (m, 1 H), 3.01-3.09 (m, 1 H), 3.40-3.50 (m, 3H), 3.55-3.63 (m, 1 H), 4.22 (d, 1 H), 4.43 (d, 1 H), 6.63 (d, 1 H), 7.57 (d, 2H), 7.79 (d, 1 H), 10.08 (br s, 1 H). MS (ES + APCI) (M + H) 442.2; tiempo de retención de LCMS tiempo 2.216 minutos (Método N 1 ).
Ejemplo 189: (RM1 - (2-( 1 -(4-(Metiltio)-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropil)-3/-/-imidazo[4,5-b]pir¡din-5-¡np¡peridin-3-il)(pirrolidin-1-il)met anona A una solución de diclorhidrato de (R)-(1 - (5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (189 mg, 0.653 mmol) y 1-(4-(metiltio)-l H-pi razo I- 1 -il)ciclopropanocarbimidato de etilo (157 mg, 0.697 mmol) en etanoi (1.86 mL) se agregó ácido acético (0.372 mL) seguido por trietilamina (0.545 mL, 3.91 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 2 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, el solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dividió entre una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (100 mL) y diclorometano (200 mL). La capa acuosa fue extraída con diclorometano (100 mL) y los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 452.2; tiempo de retención de HPLC 2.11 minutos (Método A).
Ejemplos 190 v 191: f( )-1 -(2-? -(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -¡Dciclopropill-3/-/-imidazof4,5-b]pir¡din-5-il)f2,2,6.6-2 -/^)piperidin-3-ilUpirrolidin-1-il) meta non a v f(S)-1 - 2- M - (cloro- 1 H-p¡ razo 1-1 - i Dciclopropi 11-3H-imidazor4,5-blpiridin-5-ilU2,2,6,6-2H4)piperidin-3-ill(pirrolidin-1 - il)-metanona Paso 1: Ácido 1 -nitrosopiperidina-3-carboxílico Se agregó ácido clorhídrico acuoso (2N, 20 ml_) a ácido piperidina-3-carboxílico (5.02 g, 38.87 mmol). La mezcla se enfrió con un baño de hielo y se agregó una solución de nitrito de sodio (2.78 g, 40.29 mmol) en agua (4 mL). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura durante 15 horas. La mezcla fue extraída con diclorometano (20 mL x 3). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (2x), se eliminaron sólidos por filtración y el filtrado se concentró bajo presión reducida para dar ácido 1 -nitrosopiperidina-3-carboxílico (4.5 g). MS (EI + ) (M + ) 158.
Paso 2: Ácido (2,2,6,6-2H4)piperidina-3-carboxíl¡co Se agregó deuteróxido de sodio acuoso (1N, 35 mL) a ácido 1-nitrosopiperidina-3-carboxílico (2.50 g, 15.32 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 70°C durante 48 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y el pH se ajustó a 3 usando ácido clorhídrico deuterado acuoso. La mezcla fue extraída con diclorometano (30 mL x 5), y los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio/sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar un sólido (0.81 g). La capa acuosa se concentró bajo presión reducida y se destiló azeotrópicamente solvente residual con metanol-c,, (5 mL x 2). El residuo se calentó a 50°C en metanol-d (15 mL) durante 30 minutos y después se enfrió a temperatura ambiente. Los sólidos insolubles fueron eliminados por filtración y el filtrado fue evaporado y se secó para dar un sólido (1.64 g). Ambos lotes de sólidos aislados se combinaron, y se agregó una solución de deuteróxido de sodio (0.5 M , 2.5 deuteróxido de sodio en 45 mL de agua deuterada (D20)). La mezcla se calentó a 75°C durante 2 horas, entonces se enfrió a temperatura ambiente y después a 0°C. Se agregó lentamente aleación de aluminio-níquel (11g). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 3 días, después se calentó a 35°C durante 3.5 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y los sólidos fueron eliminados por filtración. Los sólidos se lavaron con agua deuterada (D20) (3 mL x 3). El pH del filtrado se ajustó de 0 a 3 y la solución se concentró bajo presión reducida a 50°C y después el residuo resultante se secó al vacío a 40°C durante 18 horas. El residuo seco se agitó a 40°C en metanol-d4 deuterado (12 mL). La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y los sólidos fueron eliminados por filtración. El filtrado se concentró bajo presión reducida para dar ácido (2,2,6,6-2/-/4)piperidina-3-carboxílico (1.65 g).
Paso 3: (2,2,6,6-2/-/4)Piperidina-3-carboxilato de etilo A una suspensión de ácido (2,2,6,6- H4)piperidina-3-carboxilico (500 mg, 2.94 mmol) en etanol a 0°C se agregó cloruro de tionilo (0.6 mL, 8.84 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Se eliminó cloruro de tionilo bajo presión reducida para dar (2,2,6,6-2/-/4)piperidina-3-carboxilato de etilo (500 mg). El material fue usado sin más purificación.
Paso 4: 1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)(2,2,6,6-2/-/4)piperidina-3-carboxilato de etilo A una solución de (2,2,6,6-2H4)piperidina-3-carbox¡lato de etilo (500 mg, 2.53 mmol) y trietilamina (1 mL, 7.59 mmol) en acetonitrilo (15 mL) se agregó 6-cloro-3-nitropiridina (306 mg, 1.77 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a 80°C. La mezcla se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía usando 100-200 malla gel de sílice (20-40% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)(2,2,6,6- -/4)piperidina-3-carboxilato de etilo (500 mg).
Paso 5: 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)(2,2,6,6-2/-/4)piperidina-3-carboxilato de etilo A una suspensión de 10% paladio-sobre-carbón (300 mg) en etanol (20 ml_) se agregó 1 -(6-amino-5-nitrop¡r¡din-2-il)(2, 2,6,6-2H4)piperidina-3-carboxilato de etilo (500 mg, 1.67 mmol). La mezcla de reacción se sometió a una atmósfera de hidrógeno durante 4 horas a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de Celita y se lavó con etanol para dar 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)(2,2,6,6-2H4)piperidina-3-carboxilato de etilo que se usó sin más purificación.
Paso 6: 1-{2-[1-(4-Cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil]-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il}(2,2,6,6-2H4)piperidina-3-carboxilato de etilo Al filtrado que contiene 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)(2,2,6,6-2H4)-piperidina-3-carboxilato de etilo del paso previo se agregó 1-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbimidato de etilo (intermediario 57), ácido acético (0.5 mL) y azufre (2 mg) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna usando 100-200 malla gel de sílice (30-70% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1-{2-[1-(4-cloro-1 H-pirazol-1 - il)ciclopropil]-3 /-/-¡midazo[4, 5-b]piridin-5-¡l}(2,2,6,6-2H4)piperidina-3-carboxilato de etilo (500 mg).
Paso 7: Ácido 1 -{2-[1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropi l]-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il}(2,2,6,6-2H4)piperidina-3-carboxilico Se agregó hidróxido de litio (146 mg, 3.57 mmol) a una solución de 1 -{2-[1 - (4-cloro- 1/-/- pira zol-1 - il)ciclopropil]-3/-/-imidazo[4,5-b]-pirid¡n-5-il}(2,2,6,6-2H4)piperidina-3-carbox¡lato de etilo (500 mg, 1.19 mmol) en una mezcla de tetrahidrofurano:agua (15 ml_) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada durante 2 horas. Se eliminó tetrahidrofurano bajo presión reducida y la capa acuosa se diluyó con ácido clorhídrico acuoso (2N) hasta que el pH fue 6. La capa acuosa fue extraída con acetato de etilo (2x). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar ácido 1 -{2-[1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1-il)ciclopropil]-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il}(2, 2,6,6-2H4)piperidina-3-carboxílico (300 mg).
Paso 8: [( F?)-1 -{2 -[1 - (4- Cloro -1 H-pirazol-1 - il)ciclopro pil]-3H- imdazo-[4,5-b]piridin-5-il}(2,2,6,6-2H4)piperidin-3-il](pirrolidin-1-il)metanona y [( S)- 1 -{2-[ 1 -(4-cl o ro- 1 H-pirazol-1 - il) ciclo pro pil]-3H-im id azo[4, 5-b]-piridin-5-il}(2,2,6,6- H4)piperidin-3-il](pirrolidin-1-il)metanona Se agregó pirrolidina (0.1 mL, 0.25 mmol) a una solución de ácido 1 - {2-[1 - (4-cl oro - 1 H-pirazol-1 - i l)ci el opropil]-3H- i m id azo[4, 5-b]-piridin-5-il}(2,2,6,6-2H4)piperidina-3-carboxílico (100 mg, 0.25 mmol), hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1 -\\)-N, ?,?', ?G-tetrametil-uronio (HATU) (116 mg, 0.30 mmol) y diisopropiletilamina (0.14 mL, 0.76 mmol) en diclorometano (10 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada durante 2 horas. La mezcla se dividió entre diclorometano y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía TLC preparativa seguido por separación quiral para dar dos enantiómeros. Enantiómero 1 (ejemplo 190, 37 mg, 33% rendimiento): 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.57-1.61 (m, 1H), 1.75-2.04 (m, 11H), 2.62-2.64 (m, 0.5H*), 3.41-3.48 (m, 3H), 3.56-3.61 (m, 1H), 6.64 (d, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.68 (d, 1H); tiempo de retención de HPLC quiral 13.727 minutos (Método: Columna: CHIRAL PAK IA 4.6 x 250 mm, 5µ?; fase móvil D: 0.1% DEA en n-hexano; fase móvil C: etanol; ¡socrático: 75:25; velocidad de flujo: 1.0 mL/min). Enantiómero 2 (ejemplo 191, 35 mg, 31% rendimiento): H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.57-1.62 (m, 1H), 1.76-2.05 (m, 11H), 2.64-2.66 (m, 0.5H*), 3.41-3.49 (m, 3H), 3.57-3.61 (m, 1H), 6.65 (d, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.70 (d, 1H); tiempo de retención de HPLC quiral 11.905 minutos (Método: igual como para enantiómero 1). *Para ambos enantiómeros, la integración de 1H NMR indica incorporación parcial de deuterio en esta posición.
Ejemplos 192 y 193: ((/?)- -(2-( (R)-1 -(4-FI uoro- 1 H-pirazol-1 -iDetil)-3/--¡m¡dazof4,5-blpir¡din-5-il)p¡peridin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona y -(2-((S)-1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)etil)-3/-/-imidazof4.5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de diclorhidrato de (R)-(1 - (5,6-diamínopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (1.02 g, 2.8 mmol) en etanol (14.0 ml_) se agregó ácido acético (3.21 ml_, 56 mmol) seguido por la adición de una solución de 2-(4-fluoro-1 H-pirazol-1 -il)propanimidato de etilo (intermediario 59) vía cánula. Se agregó trietilamina (2.34 ml_). La mezcla fue purgada con nitrógeno y se calentó a 90°C durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dividió entre una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (100 ml_) y diclorometano (100 ml_). Las capas se separaron y la capa acuosa una vez más fue extraída con diclorometano (200 mL). Las capas orgánicas combinadas se lavaron en secuencia con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (200 mL) y salmuera (300 mL). La capa orgánica entonces se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (0-25% metanol en diclorometano) para dar una mezcla diaestereomérica de los compuestos del título (125 mg, 11% rendimiento). Se separaron diaestereómeros por HPLC quiral preparativa. Diaestereómero 1 (ejemplo 192, 34 mg): tiempo de retención de HPLC quiral 7.575 minutos; H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.52-1.63 (m, 1 H), 1.73-1.78 (m, 1 H), 1.79-1.97 (m, 6H), 1.99 (d, 3H), 2.58-2.67 (m, 1 H), 2.86-2.94 (m, 1H), 3.00-3.08 (m, 1H), 3.39-3.51 (m, 3H), 3.53-3.61 (m, 1 H), 4.21 (d, 1 H), 4.46 (d, 1 H), 5.64 (q, 1 H), 6.64 (d, 1 H), 7.41 (d, 1 H), 7.45 (d, 1 H), 7.75 (d, 1 H); MS (ES + ) (M + H) 412.3. Diaestereómero 2 (ejemplo 193, 36 mg): tiempo de retención de HPLC quiral 8.903 minutos. (Método quiral: columna: Phenomenex Kinetex C18 50 x 3.0 mm 2.6 µ?; Gradiente: fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en agua; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en metanol; tiempo(min)%B: 0.00/0, 0.30/0, 3.00/100; 3.70/100, 3.71/0; 4.00/0; Flujo: 1.0 mL/min). H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.52-1.64 (m, 1 H), 1.74-1.81 (m, 1 H), 1.81-1.98 (m, 6H), 2.00 (d, 3H), 2.59-2.69 (m, 1 H), 2.87-2.95 (m, 1H), 3.01-3.10 (m, 1H), 3.40-3.51 (m, 3H), 3.55-3.62 (m, 1 H), 4.23 (d, 1 H), 4.45 (d, 1 H), 5.65 (q, 1H), 6.65 (d, 1 H), 7.43 (d, 1H), 7.47 (d, 1 H), 7.75 (d, 1 H); MS (ES + ) (M + H) 412.3.
Ejemplo 194: (R)-(^ -(2-(1 -(4-Metox¡-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropil)-3H-imidazof4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de 1 -(4-metoxi-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropano-carbimidato de etilo crudo (79.5 mg, 0.380 mmol) en etanol (1.5 mL) se agregó diclorhidrato de (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)p¡peridin-3-il)(pirrolidiin-1 -il)metanona (151 mg, 0.417 mmol) seguido por ácido acético glacial (0.435 mL, 7.59 mmol). La mezcla se desgasó con nitrógeno, y entonces se agregó trietilamina (0.318 mL, 2.28 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100°C durante 20 minutos y después a 85°C durante 18 horas. La mezcla se vertió en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (40 mL) y se extrajo con diclorometano (50 mL x 3). Los orgánicos combinados se lavaron con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. La capa acuosa fue extraída con diclorometano (40 mL x 2). Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título. MS (ESI + ) (M + H) 436.2; tiempo de retención de HPLC 1.85 minuto (Método A).
Ejemplo 195: - (2-f 1 - (2-C icio propiloxazol-4-il) ciclo pro pil)-3 H-imidazo[4,5-b1piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 160, pero usando ácido 1 -(2-ciclopropil-oxazol-4-il)ciclopropanocarboxílico como el material de partida para dar una mezcla enriquecida con enantiómero que se purificó más vía HPLC quiral para dar el compuesto del título. MS (ES + ) (M + H) 447.3; tiempo de retención de LCMS 2.062 minutos (Método N1).
Ejemplos 196-A y 197: ((f?)-1 -(2-((S)-1 -(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -il)et¡n-3 --imidazor4,5-b1pir¡din-5-il)p¡peridina-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona y ((RM-(2-((R)-1-(4-cloro-1 H-pirazol- 1 -i Het i l)-3H-im id azo[4.5-bl-piridin-5-il)piperidina-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una suspensión de diclorhidrato de (f?)-(1 -(5,6-diamino-piridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (3.65 g, 10.1 mmol) en etanol (15 mL) se agregó una solución de mezcla cruda de 2-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)propanimidato de etilo (intermediario 60) seguido por ácido acético (11.5 mL, 201 mmol) a temperatura ambiente. Se agregó trietilamina (8.4 mL, 60.4 mmol) en forma de gotas y la mezcla de reacción fue agitada a 100°C durante 1 hora. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dividió entre acetato de etilo (250 mL) y una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (200 ml_). La capa acuosa fue extraída una vez más con acetato de etilo (200 ml_). Los orgánicos combinados fueron lavados en secuencia con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (150 mL) y salmuera (150 mL), y después se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (0-5% metanol en acetato de etilo) para dar una mezcla diaestereomérica de los compuestos del título. La mezcla se purificó vía HPLC quiral preparativa (Método: Columna: Phenomenex Cellulose-2 250 x 21.2 mm 5µ; fase móvil A: heptano; fase móvil B: etanol; gradiente: inicial - 5%B, tiempo (min)/%B: 0.00/5, 1.50/5, 10.0/100, 11.0/100, 12.5/5; velocidad de flujo: 28 mL/min) para dar dos diaestereómeros. Cada diaestereómero se purificó más vía cromatografía instantánea (0-40% de un 20% de metanol en solución de diclorometano a diclorometano) para dar compuestos del título como diaestereómeros individuales. Diaestereómero 1: ((í?)-1 -(2-((S)-1-(4-Cloro-1/-/-pirazol-1-il)etil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrol i d i n - 1 -il)metanona (ejemplo 196-A, 1.05 g, 24% rendimiento): 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.54-1.66 (m, 1H), 1.75-2.00 (m, 7H), 2.04 (d, 3H), 2.59-2.70 (m, 1H), 2.89-3.00 (m, 1H), 3.08 (dd, 1H), 3.42-3.54 (m, 3H), 3.58-3.63 (m, 1H), 4.23 (br d, 1H), 4.46 (br d, 1H), 5.76 (q, 1H), 6.68 (d, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.78 (d, 1H); MS (ES + ) (M + H) 428.3; tiempo de retención de HPLC quiral 7.587 minutos (Método: Columna: Phenomenex Kinetex C18 50 x 3.0 mm 2.6µ; fase móvil A: 0.1% ácido fórmico en agua; fase móvil B: 0.1% ácido fórmico en metanol; gradiente: inicial - 0%, tiempo (min)/%B: 0.00/0, 0.30/0, 3.00/100, 3.70/100, 3.71/0, 4.00/0; velocidad de flujo: 1.0 mL/min). Diaestereómero 2: ((R)-1 -(2-((f?)-1 -(4-cloro-1H-pirazol-1-il)etil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (ejemplo 197, 0.84 g, 19% rendimiento): 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.55-1.63 (m, 1H), 1.76-1.99 (m, 7H), 2.03 (d, 3H), 2.62-2.68 (m, 1H), 2.91-2.96 (m, 1H), 3.04-3.09 (m, 1H), 3.43-3.50 (m, 3H), 3.58-3.62 (m, 1H), 4.23 (br d, 1H), 4.47 (br d, 1H), 5.74 (q, 1H), 6.66 (d, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.78 (d, 1H); MS (ES + ) (M + H) 428.3; tiempo de retención de HPLC quiral 9.306 minutos (Método: igual como aquél del ejemplo 196-A).
Ejemplo 196-B: Clorhidrato í(ff)-1 -(2-((S)-1 -(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -il)etil)-3/-/-imidazo[4,5-blpir¡din-5-il)piperidin-3-il)(pirrolid¡n-1-¡Dmetanona A una solución del ejemplo 196-A (457 mg, 1.07 mmol) en THF (1.5 ml_) se agregó 1N HCI recién preparado en dioxano/THF (1:3, 1.07 ml_). La mezcla fue tratada con 8 mg de clorhidrato de (( )-1-(2-(( S)- 1 -(4-cl oro- 1 H-pirazol-1 -i I ) et i l)-3H-im id azo[4,5-b]piridi n -5- i I )-piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona como cristales de semilla, y se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El material sólido precipitado se rompió con una espátula, se sónico para ca. 30 segundos y se agitó por 3 horas adicionales a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con THF adicional (4.5 ml_) y la suspensión homogénea blanca, cremosa fue agitada durante 17 horas a temperatura ambiente. La suspensión se filtró, y los sólidos recolectados se lavaron con THF (20 mL). La torta de filtro se secó bajo presión reducida durante la noche a 40°C para dar el compuesto del título como un sólido blanco crudo (380 mg, 76%). La examinación bajo un microscopio de luz polarizada muestra por completo material cristalino. 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.60-1.68 (m, 1H), 1.77-1.93 (m, 4H), 1.98-2.05 (m, 3H), 2.04 (d, 3H), 2.74-2.80 (m, 1H), 3.11-3.23 (m, 2H), 3.40-3.46 (m, 2H), 3.51-3.56 (m, 1H), 3.61-3.66 (M, 1H), 4.33 (br d, 1H), 4.48 (br d, 1H), 6.04 (q, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.91 (d, 1H), 8.00 (s, 1H); MS (ES + ) (M + H) 428.3; Anal. Calculado para C21 H28C I N70 - HCI: C, 52.29; H, 6.06; , 20.32; Cl, 14.70. Encontrado: C, 52.06; H, 6.09; N, 19.97; Cl, 14.66.
Las estereoconfiguraciones absolutas del ejemplo 196-A y 197 fueron confirmadas por la comparación de tiempo de retención de HPLC quiral entre el ejemplo 196-A y 197 sintetizadas a través del método anterior y ((R)-1 -(2-((ft)-1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)etil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidiin-1-il)metanona (ejemplo 197) sintetizado por el siguiente procedimiento a partir ácido (/c?)-2-(4-cloro-1/-/-pirazol-1 -il)propanoico (intermediario 68): Paso 1: 2-Amino-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-ilcarbamato de (R)-fer-butilo Se suspendió dicarbonato de di-fer-butilo (327 mg, 1.50 mmol) y sal de diclorhidrato de (R)-(1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (362, 1.00 mmol) en tetrahidrofurano (5 mL) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. Se agregó una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (2.5 mL) y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 1.5 hora. La mezcla se diluyó con acetato de etilo (20 mL), y después se lavó en secuencia con agua y salmuera. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (50-100% acetato de etilo en heptanos) para dar 2-a m i no-6-( 3-( i rro I id i n a- 1 -carbonil)piperidin-1 -il)piridin-3-ilcarbamato de (R)-fer-butilo (295 mg, 76%). H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.49 (s, 9H), 1.52-1.58 (m, 1H), 1.70-1.72 (m, 1H), 1.78-2.00 (m, 6H), 2.56-2.63 (m, 1H), 2.84 (dt, 1H), 2.94 (dd, 1H), 3.42-3.49 (m, 3H), 3.60-3.64 (m, 1H), 4.13-4.17 (m, 1 H), 4.37-4.40 (m, 1 H), 4.41 (br s, 1 H), 5.88 (br s, 1H), 6.04 (d, 1 H), 7.20 (d, 1H); MS (ES + ) (M + H) 390.4.
Paso 2: 2-((R)-2-(4-cloro- 1 H-p¡ razo 1-1 -il)propanamido)-6-((R)-3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-ilcarbamato Ácido (f?)-2-(4-cloro-1 /-/-pirazol-1 -il)propanoico (105 mg, 0.60 mmol) y 2-amino-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-ilcarbamato de (ft)-ier-butilo (195 mg, 0.50 mmol) se disolvieron en acetato de etilo (0.5 ml_) con piridina (0.20 ml_, 2.5 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se enfrió a 0°C. Se agregó anhídrido cíclico de ácido 1 -propanofosfónico (0.375 mL, 50% solución en acetato de etilo, 1.25 mmol) al mismo tiempo agitando a 0°C. La mezcla resultante fue agitada durante 15 minutos, y después se calentó a temperatura ambiente. Después de agitar durante 1.5 hora a temperatura ambiente, la mezcla fue extinguida con una solución acuosa de ácido clorhídrico (0.5 M, 1 mL). La mezcla se dividió entre acetato de etilo (10 mL) y agua (5 mL). La capa orgánica se lavó en secuencia con agua (5 mL), una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (5 mL) y salmuera (5 mL). Los orgánicos se secaron bajo presión reducida para dar 2-{(R)-2-(A- cío G?-? - pira zol-1 - il)pro panamido)-6-((R) -3- (pirro lidina-1-carbonil)-piperidin-1 -il)piridin-3-ilcarbamato de íer-butilo (268 mg, 98% rendimiento). 1H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.48 (s, 9H), 1.48-1.55 (m, 1H), 1.73-1.76 (m, 1H), 1.80-2.05 (m, 6H), 1.86 (d, 3H), 2.53-2.59 (m, 1H), 2.84-2.90 (m, 1H), 2.96-3.01 (m, 1H), 3.43-3.51 (m, 3H), 3.55-3.60 (m, 1H), 4.12 (br d, 1H), 4.33 (br d, 1H), 5.10 (br s, 1H), 6.56 (d, 1H), 7.30 (br s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.76 (br s, 1H), 8.58 (br s, 1H); S (ES + ) (M + H) 546.3; tiempo de retención de HPLC quiral 4.61 minutos (Método: Chiralpak AS-H 0.46 x 25 cm; fase móvil: C02/metanol; flujo: 2.5 mL/min); 97.1% de.
Paso 3: ((R)-1-(2-((R)-1 - (4-Cloro-1 H-pirazol-1-il)etil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se disolvió 2-((R)-2-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)propanamido)-6-((R)-3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-ilcarbamato de íer-butilo (55 mg, 0.10 mmol) en ácido acético (0.5 mL). Se agregó ácido metanosulfónico (32 µ?_, 0.50 mmol) al mismo tiempo agitando a temperatura ambiente. La solución fue agitada a temperatura ambiente durante 1 hora. La suspensión resultante fue agitada durante 1 hora y después se extinguió con agua (2.5 mL). La mezcla resultante fue extraída con acetato de etilo (5 mL x 3). Los orgánicos combinados se lavaron en secuencia con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (10 mL x 2), agua (10 mL) y salmuera (5 mL). Los orgánicos se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y concentraron. El residuo fue transferido a un frasco que contiene diclorometano y la mezcla fue concentrada para dar un vidrio transparente. El vidrio se secó al vacío para dar el compuesto del título (39.8 mg, 93% rendimiento). 'H NMR (500 MHz, CDCI3) d 1.54-1.62 (m, 1 H), 1.76-2.05 (m, 7H), 2.02 (d, 1 H), 2.62-2.66 (m, 1 H), 2.89-2.95 (m, 1 H), 3.03-3.08 (m, 1 H), 3.42-3.49 (m, 3H), 3.57-3.61 (m, 1H), 4.23 (br d, 1 H), 4.46 (br d, 1 H), 5.70 (q, 1H), 6.65 (d, 1 H), 7.51 (S, 1H), 7.57 (S, 1 H), 7.76 (br S, 1 H), 10.22 (br s, 1 H); MS (ES + ) (M + H) 428.3; tiempo de retención de HPLC quiral 13.08 minutos (Método: Chiralpak AD-H 0.46 x 15 cm; fase móvil: 1.5 minuto 10% alcohol isopropílico/heptanos, 1.5-10 minutos 10% alcohol isopropílico/heptanos a 90% alcohol isopropílico/heptanos, 10-18 minutos 90% alcohol isopropílico/heptanos; flujo: 0.4 mL/min); 98.3% de.
Ejemplos 198 y 199: ((P?)-1 -(8-((S)-1 -(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -iDmetil)- 9/-/-purin-2-¡l)piperidin-3-ilUpirrolidin-1-¡l)metanona v (( ^-' -(S-dR)- 1-(4-cloro-1/-/-pirazol-1-il)etil)-9/-/-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin- 1 -¡Qmetanona En un frasco se agregó sal de diclorhidrato de ( )-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (1.24 g, 3.416 mmol), etanol (4 mL), ácido acético (3.9 mL, 68.3 mmol) y 2-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)propanimidato de etilo mezcla de reacción cruda (758 mg, 3.76 mmol, 1.1 eq. en 8 mL de etanol). La mezcla fue purgada con nitrógeno, y después se agregó trietilamina (2.9 mL). La mezcla de reacción se calentó a 100°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dividió entre una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (20 mL) y diclorometano (20 mL). La capa acuosa fue extraída con diclorometano (20 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (20 mL). El lavado base fue extraído una vez más con diclorometano (20 mL). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mL), se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía instantánea (0-50% metanol en diclorometano) para dar una mezcla diaestereomérica de los compuestos del título (0.68 g, 46% rendimiento). La mezcla fue purificada vía HPLC quiral preparativa para dar dos diaestereómeros. Diaestereómero 1 (ejemplo 198, 189 mg, 13% rendimiento): ?? NMR (500 MHz, CD3OD) 6 1.50-1.59 (m, 1 H), 1.75-2.03 (m, 10H), 2.63-2.70 (m, 1 H), 2.90-2.96 (m, 1 H), 3.01 (dd, 1H), 3.42 (t, 2H), 3.49-3.54 (m, 1 H), 3.68-3.72 (m, 1 H), 4.77-4.83 (m, 2H), 5.72-5.77 (m, 1H), 7.50 (s, 1 H), 7.86 (s, 1 H), 8.58 (s, 1 H); MS (ES + ) (M + H) 429.2; tiempo de retención de HPLC quiral 3.03 minutos (Método: Chiralcel OJ-H 10 x 250; fase móvil 80/20 C02/Metanol; Flujo: 10.0 mL/min). Diaestereómero 2 (ejemplo 199, 197 mg, 14% rendimiento): 1H NMR (500 MHz, CD3OD) d 1.53-1.60 (m, 1 H), 1.75-2.03 (m, 10H), 2.65-2.71 (m, 1H), 2.91-2.97 (m, 1H), 3.01 (dd, 1 H), 3.43 (t, 2H), 3.50-3.55 (m, 1H), 3.70-3.74 (m, 1 H), 4.78-4.84 (m, 2H), 5.75 (q, 1 H), 7.50 (s, 1 H), 7.87 (s, 1 H), 8.58 (s, 1 H); MS (ES + ) (M + H) 429.2; tiempo de retención de HPLC quiral 3.77 minutos (Método: igual como diaestereómero 1).
Ejemplo 200: (R)-( 1 -(2-( 1 -(4-C loro- 1 H-pirazol- 1 -i l)cicloprop¡n-3H-imidazof4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)(3,3-difluoroazetidin-1-iDmetanona Paso 1 : 1 -(6- Am i ??-5-nitropi rid i ?-2-i I ) pi erid i na-3-ca rboxi I ato de (R)-eti lo A una solución de sal de clorhidrato de piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (1 2 g, 6.21 mmol) en acetonitrilo (20 ml_) se agregó trietilamina (2.61 ml_, 18.64 mmol). La mezcla fue agitada durante 10 minutos a temperatura ambiente. Se agregó 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (753 mg, 4.31 mmol) y la mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 3 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se agregó agua. La mezcla fue extraída con acetato de etilo. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar 1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de ( R) -et i I o (1.1 g). MS (ES + APCI) (M + H) 295.2.
Paso 2: 1 -(5,6-Diaminopiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo Una solución de 1 -(6-amino-5-nitrop¡ridin-2-il)p¡perid¡na-3-carboxilato de ( )-etilo (1.0 g, 6.60 mmol) en etanol (30 ml_) se agregó a una suspensión de 10% paladio-sobre-carbón (500 mg) en etanol a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se hidrogenó durante 4 horas usando un globo llenado con gas de hidrógeno. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celita y el filtrado se usó sin más purificación.
Paso 3: Sal de clorhidrato de 1 -(4-cloro-1 /-/-pirazol-1 -il)ciclopropano-carbimidato de etilo Gas de cloruro de hidrógeno seco se burbujeó a través de una solución de 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbonitrilo (1.2 g, 0.75 mmol) en etanol (10 mL) a 0°C durante 15 minutos. La mezcla entonces se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbimidato de etilo. El material crudo se usó sin más purificación.
Paso 4: 1-(2-(1-(4-Cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]pirid¡n-5-¡l)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo Se agregó ácido acético (2.5 mL, 41.66 mmol) a una solución de 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (ft)-etílo, preparado en el paso 2, seguido por sal de clorhidrato de 1-(4-cloro-1 /-/-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbimidato, preparado en el paso 3). La mezcla se calentó a reflujo durante 18 horas, después se enfrió y concentró bajo presión reducida. El residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 gel de sílice, 25-70% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1 -(2-( 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (900 mg). MS (ES + ) (M + H) 415.2; tiempo de retención de LCMS 2.506 minutos (Método N1).
Paso 5: Ácido -(2-(1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropil)-3H-imídazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxíl¡co. Se agregó hidróxido de litio (500 mg, 10.20 mmol) a una solución de 1-(2-(1-(4-cloro - 1 H-pirazol-1 - i I ) c i c I o p r o p i I )- 3 H- i midazo[4, 5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilato de (K)-etilo (900 mg, 2.17 mmol) en tetrahidrofurano/agua (1:1, 10 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada durante 3 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y al residuo se agregó agua. El pH de la mezcla se ajustó a 6 usando una solución acuosa de ácido clorhídrico (1N). La mezcla fue extraída con acetato de etilo y los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron para dar ácido -(2-(1-(4-cloro-1H-pirazol-1 -il)-ciclopropil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico (700 mg). MS (ES + ) (M + H) 387.1; tiempo de retención de LCMS 1.971 minutos (Método N 1 ).
Paso 6: (R)-(1-(2-(1-(4-Cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3/-/-imidazo-[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(3,3-difluoroazetidin-1-il)metanona Se agregó 3,3-difluoroazetidina (33 mg, 0.2 mmol) a una mezcla de ácido (f?)-1 -(2-(1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilico (100 mg, 0.25 mmol), diisopropiletilamina (0.1 mL, 0.77 mmol) y hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-A/,A/,/V',/\/,-tetrametiluronio (HATU) (118 mg, 0.31 mmol) en diclorometano anhidro (5 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada durante 2 horas, entonces se dividió entre diclorometano y agua. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía TLC preparativa para dar el compuesto del titulo (40 mg, 43% rendimiento). MS (ES + ) (M + H) 462.2; tiempo de retención de LCMS 2.163 minutos (Método N1). H NMR (300 MHz, CDCI3) d 1.17-1.39 (m, 1H), 1.71-2.24 (m, 7H), 2.35-2.58 (m, 1H), 2.83-3.13 (m, 2H), 4.04-4.78 (m, 6H), 6.63 (d, 1H), 7.62 (s, 2H), 7.69-7.80 (m, 1H), 9.15 (br s, 1H).
Ejemplo 201 : ((R)-1 -(2-(1 - (4-Cloro-1 H-pi razo 1-1 -il)ciclopropil)-3H-imidazor4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)((R)-2-metilpirrolidin-1-il)-metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 200, pero usando (/?)-2-metilpirrolidina para el paso 5. MS (ES + ) (M + H) 454.3; tiempo de retención de LCMS 2.233 minutos (Método N1).
Ejemplo 202: ((/?M -(2-11 -(4-Cloro- 1 H-pirazol- -i I) cid o pro pi \)-3H-i m i d a z o f 4 , 5 - b ] p i r i d i n - 5 - i I ) p i p e r i d i n - 3 - i I ) ( ( S ) - 2 - m e t i I p i r r o I i d i n - 1 - i I ) -metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 200, pero usando (S)-2-metilpirrolidina para el paso 5. MS (ES + ) (M + H) 454.2; tiempo de retención de LCMS 2.228 minutos (Método N1).
Ejemplo 203: (ft)-(1-(2-(1-(Pirazin-2-il)ciclopropil)-3H-imidazor4,5-bl-pir¡din-5-il)piperidin-3-¡l)(pirrol¡din-1-il)metanona Paso 1 : (R)-A/-(2-Amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidin-1 -il)-p¡ridin-3-il)-1-(pirazin-2-il)ciclopropanocarboxamida A una solución de ácido 1 -(pirazin-2-il)ciclopropanocarboxílico (0.11 g, 0.669 mmol) en diclorometano anhidro (15 ml_) se agregó hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-/V, ?/,?/", /V'-tetrametil-uronio (HATU) (0.3 g, 0.803 mmol) y d i i s o p ro p i l et i I a m i n a (0.35 ml_, 2 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada durante 10 minutos y después se agregó diclorhidrato de (R)-( 1 -(5,6-diamino-piridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (0.29 g, 0.803 mmol). La mezcla de reacción fue agitada durante 30 minutos. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 0-5% metanol en diclorometano) para dar (R)-/V-(2-am ino-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)p¡peridin-1-il)piridin-3-il)-1-(piraz¡n-2-il)ciclo-propanocarboxamida (100 mg). MS (ES+APCI) (M + H) 436.1.
Paso 2: (R)-(1 -(2-(1 -(Pirazin-2-il)c¡clopropil)-3H-imidazo[4,5-b]-piridin-5-¡l)piperidin-3-il)(pirrol¡din-1-¡l)metanona A una solución de (R)-/V-(2-amino-6-(3-(pirrolidina-1 -carbonil)-piperidin-1-il)piridin-3-il)-1-(pirazin-2-il)c¡clopropanocarboxamida (0.1 g, 0.22 mmol) en metanol anhidro (0.072 mL, 1.78 mmol) se agregó metóxido de sodio (54 mg, 1.1 mmol) e ¡sobutanol (3.5 mL). La mezcla de reacción se calentó a 100°C durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el material crudo se purificó vía TLC preparativa para dar el compuesto del título (19 mg). MS (ES+APCI) (M + H) 418.1 ; tiempo de retención de LCMS 4.792 minutos (Método R1 ).
Ejemplo 204: f ?)-f1-f2-f1-(Pirim¡din-2-inciclopropil)-3H-imidazor4.5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1 : ( ?)-(1-(5,6-Diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de (R)-{ 1 -(6-a m i no-5- n it rop i ridi ?-2-i I ) pi e rid i n-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (0.2 g, 0.62 mmol) en etanol (10 mL) se agregó 10% paladio-sobre-carbón (200 mg). La mezcla se hidrogenó a temperatura ambiente durante 3 horas usando un globo llenado con gas de hidrógeno. La mezcla se filtró a través de Celita y el filtrado se usó para el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2: (R)-(1-(2-(1-(Pir¡midin-2-il)ciclopropil)-3H-im¡dazo[4,5-b]-pirid¡n-5-il)piperidin-3-¡l)(pirrolidin-1-il)metanona Se agregó 1 -(pirimidin-2-il)ciclopropanocarbaldehído (0.11 g, 0.747 mmol), azufre (40 mg, 1.24 mmol), y ácido acético (0.6 mL) a una solución de (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)-(pirrolidin-1 -il)metanona, preparado durante el paso previo, en etanol. La mezcla de reacción se calentó a 80°C durante 18 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el material crudo se purificó vía HPLC preparativa para dar el compuesto del título (8 mg). MS (ES + APCI) (M + H) 418.2; tiempo de retención de LCMS 3.273 minutos (Método S1 ).
Ejemplo 205: (R)-Azetidin-I - il(1 -(2-? -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -iDciclo-propil)-3/-/-imidazof4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)metanona Paso 1 : 1 -(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo Se agregó 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (1.25 g, 7.22 mmol) a una solución de piperidina-3-carboxilato de (fi)-etilo (2.0 g, 10.32 mmol) y trietilamina (2.87 mL, 20.65 mmol) en acrilonitrilo (25 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a 80°C, después se enfrió y se dividió entre acetato de etilo y agua. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 0-25% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (2 g). MS (ES + APCI) (M + H) 295.0; tiempo de retención de LCMS 5.246 minutos (Método R1).
Paso 2: Diclorhidrato de 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo Se agregó una solución de 1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)-piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (400 mg, 1.36 mmol) en etanol (10 mL) a una suspensión de 10% paladio-sobre-carbón (200 mg) en etanol a temperatura ambiente. La mezcla se hidrogenó durante 4 horas, después se filtró a través de una almohadilla de Celita y se lavó con etanol. Se agregó una solución de cloruro de hidrógeno al filtrado para precipitar diclorhidrato de 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)-piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo. MS (ES + ) (M + H) 265.1404.
Paso 3: 1-(2-(1-(4-Cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]pirid¡n-5-il)piperid¡na-3-carboxilato de (R)-etilo Se agregó ácido acético (0.5 ml_, 8.88 mmol), 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbimidato de etilo (445 mg, 1.78 mmol), una cantidad catalítica de azufre y trietilamina (0.8 mL, 5.92 mmol) a una suspensión de diclorhidrato de 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (500 mg, 1.48 mmol) en etanol (25 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 18 horas, después se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se dividió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 25-70% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1 -(2-( 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (300 mg). MS (ES + ) (M + H) 415.2.
Paso 4: Ácido (f?)-1 -(2-(1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico Se agregó hidróxido de litio (27.6 mg, 1.1 mmol) a una solución de 1-(2-(1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (300 mg, 0.77 mmol) en tetrahidrofurano/agua (1:1, 6 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida. El residuo se disolvió en agua y el pH se ajustó a 6 usando cloruro de hidrógeno acuoso (1 N). La mezcla fue extraída con acetato de etilo. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar ácido (R)-1-(2-(1 -(4-cloro - 1 H- pira zol-1 - il)ciclopropil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico (200 mg). MS (ES + APCI) (M + H) 387.1 ; tiempo de retención de LCMS 3.432 minutos (Método S1).
Paso 5: ( R) - Aze t i d i n - 1 - i I ( 1 - (2-(1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]pir¡din-5-il)piperidin-3-¡l)metanona Se agregó azetidina (0.1 mL, 1.42 mmol) a una solución de ácido (R)-1-(2-(1-(4-cloro-1 H-pirazol-1-¡l)c¡cloprop¡l)-3H-irñidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico (50 mg, 1.29 mmol), hexafluoro-fosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-A/,/\/,/\/', ?/'-tetrametiluronio (HATU) (49 mg, 1.29 mmol) y diisopropiletilamina (0.1 mL, 3.88 mmol) en diclorometano anhidro (5 mL). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas, entonces se dividió entre diclorometano y agua. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se preparó vía TLC preparativa para dar el compuesto del título (35 mg). MS (ES+APCI) (M + H) 426.1 ; tiempo de retención de LCMS: 3.440 minutos (Método S1).
Ejemplo 206: (R)-(1 -(2-( 1 -(4-Cloro-1 H-pirazol- 1 -iDciclopropi D-3H-imidazo[4,5-blp¡r¡d¡n-5-¡l)piperidin-3-il)(morfolino)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 205, pero usando morfolina para el paso 5. MS (ES + APCI) (M + H) 456.1 ; tiempo de retención de LCMS 3.502 minutos (Método S1 ).
Ejemplos 207 y 208: ((3R.4fl)-1 -(8-(1 -(1 H-Pirazol-1 -il)ciclopropin-9H-purin-2-il)-4-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona y ((3S,4S)-1-(8-(1-(1 H-pirazol-1-il)c¡clopropil)-9H-purin-2-il)-4-metilp¡peridin-3-il)(pirrolidin-1-¡l)metanona Paso 1 : Ácido 4-met¡lpiperid¡na-3-carboxílico Se agregó ácido 4-metilnicotínico (5.0 g, 36.46 mmol) en ácido acético (40 mL) a una solución húmeda de óxido de platino (500 mg) bajo una atmósfera de nitrógeno. La suspensión se hidrogenó bajo una atmósfera de hidrógeno (200 PSI) a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celita bajo nitrógeno y el filtrado se concentró bajo presión reducida para dar ácido 4-metilpiperidina-3-carboxílico (6.0 g). El material fue usado sin más purificación.
Paso 2: 4-Metilpiperidina-3-carboxilato de etilo Se burbujeó gas de cloruro de hidrógeno en una solución de ácido 4-metilpiperidina-3-carboxílico (6.0 g, 41.90 mmol) en etanol (150 ml_) y ácido acético (30 ml_) a 0°C bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 48 horas, entonces se enfrió y se dividió entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y concentró bajo presión reducida para dar 4-metilpiperidina-3-carboxilato de etilo (5.0 g). El material fue usado sin más purificación.
Paso 3: 3-Etil-4-metilpiperidina-1 ,3-dicarboxilato de cis-1 -rer-butilo Se agregó dicarbonato de di-fer-butilo (3.26 g, 15.20 mmol) a una solución de 4-metilpiperidina-3-carboxilato de etilo (2.0 g, 11.68 mmol) y trietilamina (3.9 mL, 28.05 mmol) en diclorometano anhidro (50 mL) a 0°C. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se dividió entre diclorometano y agua. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar una mezcla de los cis y trans diaestereómeros de 3-et i l-4-m et i I pi peri d i n a- , 3-d i ca rboxi I ato de 1-fer-butilo (3.0 g). El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (5-10% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 3-et¡l-4-metilpiperidina-1 ,3-carboxilato de cis-1 -fer-butilo (2.5 g).
Paso 4: Ácido cis-1 -(fer-butoxicarbonil)-4-metilp¡peridina-3-carboxílico Se agregó una solución acuosa de hidróxido de sodio (2N, 20 ml_) a una solución de 3-etil-4-metilpiperidina-1 ,3-dicarboxilato de cis-1 -fer-butilo (2.5 g, 9.21 mmol) en metanol (20 ml_) a 0°C La mezcla de reacción fue agitada a 0°C durante 2 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dividió entre agua y acetato de etilo. La capa acuosa se acidificó a pH 2 usando ácido clorhídrico acuoso (1N) y se extrajo con acetato de etilo. Los orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar ácido cis-1-(fer-butoxicarbonil)-4-metilpiperidina-3-carboxílico (2.2 g).
Paso 5: 4-Met i l-3-( pi rro I ¡d i na- 1 -ca rbo n i I ) pi per id i na- 1 -ca rbox i I ato de cis-fer-butilo Se agregó hexaf luorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1 -il)- N, N, N', ?/'-tetrametiluronio (HATU) (4.12 g, 10.85 mmol), diisopropil-etilamina (2.33 g, 18.08 mmol) y pirrolidina (782 mg, 10.85 mmol) a una solución de ácido cis-1 -(fer-butoxicarbonil)-4-metilpiperidina-3-carboxílico (2.2 g, 9.04 mmol) en diclorometano anhidro (30 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla se extinguió con agua y se extrajo con diclorometano. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar 4-metil-3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidina-1-carboxilato de cis-fer-butilo (2.6 g).
Paso 6: cis-(4-Met i I p i pe ri di ?-3-i I) ( p i rrol id i n- 1 -il ) meta n on a Se agregó cloruro de hidrógeno etereal saturado (40 mL) a una solución de 4-metil-3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidina-1-carboxilato de cis-fer-butilo (2.6 g, 8.78 mmol) en éter (20 mL) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar cis-(4-metil-piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (1.7 g).
Paso 7: c i s - ( 1 -(4-Amino-5-nitropirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-3-il)-(pirrolidin-l-il)metanona A una solución de cis-(4-metilpiperidin-3-il)(pirrolid¡n-1 -limeta no na (1.7 g, 8.60 mmol) en acetonitrilo (20 mL) se agregó trietilamina (3.65 mL, 26.02 mmol). La mezcla fue agitada durante 10 minutos a temperatura ambiente. Entonces se agregó 2-cloro-5-nitro-pirimidin-4-amina (1.19 g, 6.9 mmol) y la mezcla de reacción fue agitada a 80°C durante 3 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. Se agregó agua helada y la mezcla fue extraída con acetato de etilo. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (40-100% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar cis-(1-(4-amino-5-nitropiridin-2-il)-4-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)-metanona (1.6 g) MS (ES + ) (M + H) 335.3.
Paso 8: cis-(1-(4,5-Diaminopirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-3-il)-(pirrolídin-l-il)metanona Una suspensión de 10% paladio-sobre-carbón (350 mg) en etanoi se agregó a una solución de cis-(1-(4-amino-5-nitropirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (600 mg, 1.79 mmol) en etanoi (20 mL) a temperatura ambiente bajo nitrógeno. La mezcla se hidrogenó usando un globo llenado con gas de hidrógeno a temperatura ambiente durante 2 horas. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de Celita bajo una atmósfera de nitrógeno y el filtrado se usó para el siguiente sin más purificación.
Paso 9: ((3/?,4R)-1 - (8-(1 -(1 H-P¡ razo 1-1 -il)ciclopropil)-9H-purin-2-il)-4-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)met anona y ((3S,4S)-1-(8-(1-(1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-9H-purin-2-il)-4-metilpiperidin-3-il)(p¡rrol¡din-1 -il)metanona Se agregó 2-( 1 H-p i razo I- 1 -il)acetonitrilo (385 mg, 2.15 mmol), azufre (60 mg) y ácido acético (1.7 mL, 28.73 mmol) al filtrado que contiene (1-(4,5-diaminopirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-3-il)-(pirrolidin- -il)metanona, preparada en el paso previo. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 0-4% metanol en acetato de etilo) para dar una mezcla racémica de los compuestos del título. Se separaron enantiómeros por HPLC quiral. Enantiómero 1 (ejemplo 207, 75 mg); tiempo de retención de HPLC quiral: 7.222 minutos (Método: Columna: CHIRALPAK IA 4.6 x 250MM, 5µ?; fase móvil D: 0.1 % DEA en n-Hexano; fase móvil: alcohol isopropílico (IPA); ¡socrático 70:30; Flujo: 1.0 mL/min). MS (ES + ) (M + H) 421.3; tiempo de retención de LCMS: 1.978 minutos (Método N1). Enantiómero 2 (ejemplo 208, 78 mg); tiempo de retención de HPLC quiral: 8.745 minutos (Método: igual como el enantiómero 1); MS (ES + ) (M + H) 421.3; tiempo de retención de LCMS: 1.966 minutos (Método N1).
Ejemplo 209: (R)-( 1 -(8-( 1 -(4-F I uoro- 1 /-/-pirazol- 1 - i Dciclo propi l)-9 H-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1: (R)-(1-(4,5-Diaminopirimidin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Una suspensión de 10% paladio-sobre-carbón (100 mg) en etanol se agregó a una solución de (R)-(1 -(4-amino-5-nitropirimidin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (200 mg, 0.62 mmol) en etanol (10 ml_) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se hidrogenó usando un globo relleno con gas de hidrógeno a temperatura ambiente durante 2 horas. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de Celita bajo una atmósfera de nitrógeno y el filtrado se usó para el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2: (ft)-( 1 - (8-( 1 - (4-Fluoro-1 H-pirazol-1 - il)ciclopropil)-9H-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se agregó 1 -(4-fluoro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbimidato de etilo (148 mg, 0.75 mmol) y ácido acético (0.8 mL) al filtrado que contiene (R)-(1-(4,5-diaminopirimidin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona, preparada en el paso previo. La mezcla de reacción y el residuo se dividió entre acetato de etilo y agua. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 0-4% metanol en acetato de etilo) para dar el compuesto del título. MS (ES + APCI) ( + H) 425.2; tiempo de retención de LCMS: 3.545 minutos (Método V1).
Ejemplo 210: (ff )-( 1 -(8-( 1 -( 1 H-Pirazol-1-il)cicloprop¡n-9H-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 209, pero usando 1-(1 H-pirazol-1 -il)-ciclopropanocarbimidato de etilo para el paso 2. MS (ES + APCI) ( + H) 407.1; tiempo de retención de LCMS: 3.997 minutos (Método T1).
Ejemplo 211: (f?)-5-(3-(P¡rrolidina-1-carbonil)p¡peridin-1-¡n-A/-(6- (trifluorometil)pir¡d¡n-3-il)-3H-imidazo[4,5-blpiridina-2-carboxamida Paso 1: Diclorhidrato de (/?)-(1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piper¡din-3-il)(pirro!idin-1-il)metanona A una solución de (R)-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin- 3-i I ) ( p i rro I id i n - 1 -il)metanona (4.0g) en etanol (40 mL) se agregó 10% paladio-sobre-carbón. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas bajo una atmósfera de hidrógeno usando un globo relleno con gas de hidrógeno. La mezcla se filtró a través de Celita y cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (4N, 15 mL) se agregó al filtrado. El solvente fue eliminado bajo presión reducida para dar diclorhidrato de (f?)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperid¡n-3-il)-(pi rro I id i n- 1 -i I) m eta no na que se usó para el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2: (f?)-P¡rrolidin-1-il(1-(2-(trifluoromet¡l)-3H-¡m¡dazo[4,5-b]-piridin-5-il)piperidin-3-il)metanona Se agregó ácido fórmico (2.8 mL) y trifluoroetanol (61 mL) a diclorhidrato de (^?)-(1-(5,6-diaminoptridin-2-il)piperid¡n-3-il)-(pirrolidin-1 -il)metanona. Se agregó 2,2,2-tricloroacetimidato de metilo (1.65 mL) y la mezcla de reacción fue agitada a 60°C durante 3 horas. La mezcla se usó para el siguiente paso sin elaboración o purificación adicional Paso 3: (R)-5-(3-(Pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-/\/-(6-(trifluoro-metil)piridin-3-il)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridina-2-carboxamida En un frasco se agregó 6-(trifluorometil)piridin-3-amina (2.0 eq. 300 µG???) seguido por (R)-pirrol idin-1 -i l( 1 -(2-(triclorometil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)metanona (815 µ?, 150 µ?p??, 0.2 M solución preparada en el paso previo). La mezcla de reacción fue agitada a 60°C durante 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo se dividió entre agua y acetato de etilo (2 mL). Los orgánicos se concentraron bajo presión reducida y el material crudo se purificó vía HPLC para dar el compuesto del título.
MS (ES + ) (M + H) 488.2; tiempo de retención de HPLC 1.490 minutos (Método P).
Ejemplo 212: ( R)-(1 -(2-11 -(4-Cloro- 1 H-pirazol- 1 - il)cicloprop¡n-3H-imidazo[4,5-b1p¡ridin-5-il)piperidin-3-il)(2,5-dihidro-1/-/-pirrol-1-il)-metanona Paso 1 : 1-(6-Amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo Se agregó 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (0.8 g, 4.64 mmol) a una solución de piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (1.0 g, 5.16 mmol) y trietilamina (1.56 g, 15.48 mmol) en acetonitrilo (20 ml_) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a 80°C durante 3 horas. La mezcla se dividió entre acetato de etilo y agua. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 10-50% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (1.0 g). MS (ES + ) (M + H) 295.22.
Paso 2: 1 -(5,6-Diaminop¡r¡d¡n-2-il)piper¡d¡na-3-carboxilato de (R)-etilo A una solución de 1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-M)piperidina-3-carboxilato de (fi)-etilo (1.0 g, 3.39 mmol) en etanol (30 ml_) se agregó una suspensión de 10% paladio-sobre-carbón (500 mg) en etanol a temperatura ambiente. La mezcla se hidrogenó usando un globo relleno con gas de hidrógeno por 4 horas. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celita y el filtrado se usó para el siguiente paso sin más purificación.
Paso 3: 1-(2-(1-(4-cloro-1 H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-¡m¡dazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilato de ( )-etilo Se agregó ácido acético (4.3 g, 67.2 mmol) a una solución de 1 -(5,6-diaminopiridin-2-il)piperid¡na-3-carboxilato de ( R) -etilo (890 mg, 3.36 mmol), 1 -(4-cloro- 1 H-pirazol- 1 -il)ciclopropanocarbim ¡dato de etilo (445 mg, 1.78 mmol) y trietilamina (0.8 mL, 5.92 mmol) en etanol (25 mL) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó a reflujo durante 16 horas, después se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se dividió entre acetato de etilo y agua. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 20-60% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar 1-(2-(1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]pir¡din-5- il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (600 mg). MS (ES + ) (M + H) 415.2859.
Paso 4: Ácido ( R)- 1 - ( 2-( 1 - (4-clo ro- 1 H-pi razo I- 1 -i I ) ci c I o pro p i I )-3 H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilico Se agregó hidróxido de litio (182.4 mg, 4.32 mmol) a una solución de 1 -(2-( 1 -(4-clo ro- 1 H-pi razo I- 1 -i I )ci el opropil )-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxilato de (R)-etilo (600 mg, 1.44 mmol) en tetrahidrofurano:agua (1 :1 , 20 ml_) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 3 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo resultante se disolvió en agua. El pH de la solución se ajustó a 2 usando ácido clorhídrico acuoso (1 N), y el producto fue extraído con acetato de etilo. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida para dar ácido (R)- 1 -(2-( 1 -(4-cloro-1H-pirazol-1-M)ciclopropil)-3H-¡midazo[4,5-b]p¡r¡din-5-il)piperidina-3-carboxílico (500 mg). El material fue usado para el siguiente paso sin más purificación. MS (ES + ) (M + H) 387.3246.
Paso 5: (R)-(1-(2-(1-(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropil)-3H-imidazo-[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(2,5-dihidro-1 /-/-pirrol-1-il)metanona Se agregó 3-pirrolina (98.5 mg, 1.41 mmol) a una solución de ácido ( ?)-1-(2-(1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3/-/-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidina-3-carboxílico (500 mg, 1.29 mmol), hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol- 1 -il)-/V, N, N', ?/'-tetrametil- uronio (HATU) (541 mg, 1.41 mmol) y diisopropiletilamina (334.7 mg, 2.58 mmol) en diclorometano anhidro (20 ml_). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se dividió entre diclorometano y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida. El material crudo se tituló con pentano para dar el compuesto del título (510 mg). MS (ES + ) (M + H) 438.0; tiempo de retención de LCMS 4.935 minutos (Método R1).
Ejemplo 213: íft)-(4-(8-(1-(4-Cloro-1 H-p¡ razo 1-1 - i ? c i c I o p ro p i I) - 9 H-purin-2-il)morfol¡n-2-il)(pirrolidin-1 - iQmetanona Paso 1 : 2-(Pirrolidina-1 -carbonil)morfolina-4-carboxilato de (R)-ter-butilo Se agregó hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1 -il)-N, N, ?G, ? -tetrametiluronio (HATU) (1.47 g, 4.3 mmol) a una solución de ácido (f?)-4-(fer-butoxicarbon¡l)morfolina-2-carboxílico (1 g, 4.3 mmol) y diisopropiletilamina (1.11 g, 8.6 mmol) en diclorometano anhidro (20 mL) a temperatura ambiente. Se agregó pirrolidina (0.45 mL, 5.62 mmol) y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se dividió entre agua y diclorometano. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida y el residuo resultante se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 0-0.5% metanol en diclorometano) para dar 2-(pirrolidina-1 -carbonil)-morfolina-4-carboxilato de ( )-íer-butilo (0.62 g).
Paso 2: Clorhidrato de ( =?)-morfolin-2-il(pirrolidin-1-¡l)metanona Se agregó una solución de cloruro de hidrógeno en 1 ,4-dioxano (20 mL) a una solución de 2-(pirrolidina-1 -carbonil)morfolina-4-carboxilato de (R)-fer-butilo (0.62 g, 2.1 mmol) en 1 ,4-dioxano (5 mL). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 3 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el material crudo resultante fue titulado con éter dietílico para dar clorhidrato de (R)-morfolin-2-il(pirrolidin-1 -il)metanona (0.4 g).
Paso 3: ( )-(4-(4-Amino-5-nitropiridimin-2-il)morfolin-2-il)(pirrolidin-1 -il)metanona Se agregó 2-cloro-5-n¡tropirimidin-4-amina (106 mg, 0.612 mmol) a una solución de clorhidrato de ( R)-mo rf o I i n-2- i I (pi rro I id i n- 1 -il)metanona (0.15 g, 0.68 mmol) y trietilamina (0.28 mL, 2.04 mmol) en acetonitrilo (10 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a 80°C durante 1 hora, después se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante 12 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el material crudo resultante se tituló con éter dietílico para dar (R)-(4-(4-amino-5-nitropirimidin-2-¡l)morfolin-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona (0.11 g). MS (ES+APCI) (M + H) 323.1; tiempo de retención de LCMS: 3.518 minutos (Método S1).
Paso 4: (R)-(4-(4,5-Diaminopirimidin-2-il)morfolin-2-il)(pirrolidin-1-il)-metanona A una solución de (R)-(4-(4-amino-5-nitropiridin-2-il)morfolin-2-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (0.15 g, 0.46 mmol) en etanol (15 ml_) se agregó 10% paladio-sobre-carbón (300 mg). La mezcla se hidrogenó usando un globo relleno con gas de hidrógeno a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celita y el filtrado se usó para el siguiente paso sin más purificación .
Paso 5: (R)-(4-(8-(1-(4-Cloro-1 -/-pirazoM-¡l)ciclopropil)-9/-/-purin-2-il)morfolin-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se agregó 1 -(4-cloro-1 W-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbimidato (0.13 g, 0.46 mmol), azufre (15 mg), ácido acético (0.53 mL, 9.3 mmol) y trietilamina (0.39 mL, 2.79 mmol) al filtrado que contiene (R)-(4-(4,5-diaminopirimidin-2-il)morfolin-2-il)(pirrolidin-1-il)metanona, preparado en el paso previo, a temperatura ambiente.
La mezcla de reacción se calentó a 100°C durante 24 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el material crudo resultante se purificó vía TLC preparativa para dar el compuesto del título (13 mg). MS (ES + APCI) (M + H) 443.0; tiempo de retención de LCMS 4.485 minutos (Método T1).
Ejemplo 21 : (R )-( 1 -(2-( 1 -(2 H- 1 , 2 , 3-Tri azo l-2-i I ) ci cío prop i I )-3H-imidazo[4,5-b1piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-¡l)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (0.4 g, 1.36 mmol) en etanol se agregó 1-(2H-1 ,2,3-triazol-2-il)ciclopropanocarbimidato de etilo (600 mg, crudo), trieti lam i na (5 ml_) y ácido acético (6 mL). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 12 horas. El solvente se evaporó y el residuo se disolvió en acetato de etilo. La solución se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El material crudo se purificó vía TLC preparativa para dar el compuesto del título (16 mg). MS (ES + ) (M + H) 407.3; tiempo de retención de LCMS 1.793 minutos (Método N1).
Ejemplo 215: (ft)-(1-(2-(1-(1 H-imidazol-1-il)cicloprop¡l)-3H-¡midazo-[4,5-blpiridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1: (R)-(1-(5,6-Diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona A una solución de (R)-(1-(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (0.11 g, 0.34 mmol) en etanol (15 ml_) se agregó 10% paladio-sob re -carbón (210 mg). La suspensión resultante se hidrogenó usando un globo relleno con gas de hidrógeno por 3 horas a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celita y el filtrado se usó para el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2: (R)-(1-(2-(1-(1H-imidazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]-pindin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se agregó 1 -(1 H-imidazol-1 -il)ciclopropanocarbaldehído (60 mg, 0.44 mmol), azufre (10 mg) y ácido acético (0.5 mL) al filtrado que contiene (R)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona, preparado en el paso previo. La mezcla de reacción se calentó a 80°C durante 24 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el material crudo resultante se purificó vía TLC preparativa (10% metanol en diclorometano) para dar el compuesto del título. MS (ES + APCI) 406.1 ; tiempo de retención de LCMS 4.739 minutos (Método R1).
Ejemplos 216 v 217: H3R.6S))- 1 -12-11 -(4-Cloro-1 H-pirazol- 1 -i Dciclo-prop¡l)-3H-imidazor4,5-blpiridin-5-il)-6-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1 -ihmet anona v ((3S.6R)-J\ -(2-(1 - f 4-cl oro- 1 H-pirazol- 1 - i Dciclopropi D-3/-/-im¡dazo[4,5-bTpir¡din-5-il)-6-metilpiperidin-3-il)(p¡rrolidin-1-¡Dmetanona Paso 1 : 2- etil-5-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidina-1 -carboxilato de cis-fer-butilo Se agregó hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1 -il)- N, N, ?G, ?/'-tetrametiluronio (HATU) (7.50 g, 19.72 mmol), diisopropil-etilamina (7.08 ml_, 39.45 mmol) y pirrolidina (1.40 g, 19.72 mmol) a una solución de ácido c/s-1 -(fer-butoxicarbonil)-6-metilpiperdina-3-carboxílico (sintetizado por /V-Boc de ácido c/s-6-metilpiperidina-3-carboxílico, análogamente preparado por el método descrito en J. Med. Chem. 2011 , 54, 1871 -1895) (4.0 g, 16.44 mmol) en diclorometano anhidro (40 ml_) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 4 horas. Se agregó agua y la mezcla fue extraída con diclorometano. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida para dar 2-metil-5-(pirrolidina-1 -carbonil)piperidina- 1 -carboxilato de cis-fer-butilo (4.0 g). El material fue usado sin más purificación.
Paso 2: Clorhidrato de cis-(6-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona Se agregó una solución saturada de cloruro de hidrógeno en éter (50 ml_) a una solución de 2-metil-5-(pirrolidina-1-carbonil)-piperidina-1-carboxilato de cis-fer-butilo (4.0 g, 13.49 mmol) en éter (10 ml_) a 0°C. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas. El exceso de cloruro de hidrógeno etereal se evaporó y el residuo se concentró de éter dietílico para dar clorhidrato de cis-(6-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (3.0 g). El material fue usado sin más purificación.
Paso 3: cis-(1 -(6-Amino-5-nitropiperidin-2-il)-6-metilpiperidin-3-il)(p¡rrolidin-1-il)metanona A una solución de clorhidrato de cis-(6-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (0.5 g, 2.15 mmol) en acetonitrilo (10 ml_) se agregó trietilamina (0.89 ml_, 6.46 mmol). La mezcla fue agitada a temperatura ambiente durante 10 minutos. Entonces se agregó 6-cloro-3-nitropiridin-2-amina (260 mg, 1.50 mmol) y la mezcla de retención fue agitada a 80°C durante 3 horas y después a temperatura ambiente durante 12 horas. Se agregó agua y la mezcla fue extraída con acetato de etilo. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y concentraron bajo presión reducida para dar cis- (1-(6-amino-5-nitropir¡din-2-¡l)-6-metilp¡per¡din-3-il)(pirrolid¡n-1-il)metanona (0.5 g). MS (ES + APCI) (M + H) 334.2; tiempo de retención de LCMS 4.028 minutos (Método S1).
Paso 4: cis( -(5,6-Diaminopiridin-2-il)-6-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona Una solución de cis-(1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)-6-metil-piperidin-3-il)(pirrolidin- -il)metanona (500 mg, 1.50 mmol) en etanol (20 mL) se agregó una suspensión de 10% paladio-sobre-carbón (250 mg) en etanol bajo una atmósfera de nitrógeno. La suspensión se hidrogenó usando un globo relleno con gas de hidrógeno durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de Celita y el filtrado se usó para el siguiente paso sin purificación adicional.
Paso 5: ((3R, 6S)- 1 -(2-( 1 -(4-Cloro- 1 H-pirazol- 1 -i I ) c i c I o p ro p i I ) - 3 H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)-6-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1-¡l)-metanona y ((3S, 6/?)- 1 - (2-( 1 - (4-cloro-1 H-pi razo 1-1 - i I) ciclo propil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)-6-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)-metanona Se agregó 1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopropanocarbimidato de etilo (485 mg, 1.80 mmol) y ácido acético (1.5 mL) al filtrado que contiene cis-(1-(5,6-diaminopir¡din-2-il)-6-metilpiperidin-3-il)-(pirrolidin-1 -il)metanona, preparada en el paso previo. La mezcla de reacción fue agitada a 80°C por 16 horas. El solvente fue eliminado bajo presión reducida y el residuo resultante se dividió entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó vía cromatografía de columna (0-4% metanol en acetato de etilo) para dar una mezcla racémica de los compuestos del título (180 mg). La mezcla racémica se purificó además vía HPLC quiral para dar dos enantiómeros. Enantiómero 1 (ejemplo 216, 65 mg): tiempo de retención de HPLC quiral 12.120 minutos (Método: C H I RAL PACK IA 4.6 x 250MM, 5µ?; fase móvil D: 0.1% DEA en n-Hexano; fase móvil C: etanol; isocrático: 80:20; flujo: 1.0 mL/mm); MS (ES + APCI) (M + H) 454.1 ; tiempo de retención de LCMS: 3.636 minutos (Método S1). Enantiómero 2 (ejemplo 217, 60 mg): tiempo de retención de HPLC quiral 15.424 minutos (Método: igual como para enantiómero 1); MS (ES + APCI) (M + H) 454.2; tiempo de retención de LCMS: 3.640 minutos (Método S1 ).
Ejemplos 218 y 219: ((3R, 6SM -(8-(1 -(4-Cloro-1 H-pirazol-1 -iDciclo-propil)-9/-/-purin-2-il)-6-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona y ((3S.6R)-1 -(8-(1 -(4-cloro-1 H-pirazol-1 - i Dciclopropi l)-9H-purin-2-i l)-6-metilpiperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Los compuestos del título se prepararon por un método análogo a aquél usado para los ejemplos 216 y 217, pero usando 2-cloro-5-nitropirimidin-4-amina para el paso 3. Enantiómero 1 (ejemplo 218, 28 mg): tiempo de retención de HPLC quiral 9.672 minutos (Método: C H I RAL PAK IA 4.6 x 250mm, 5µ??; flujo: 1.0 mL/min); MS (ES + ) (M + H) 455.3; tiempo de retención de LCMS: 2.318 minutos (Método N1). Enantiómero 2 (ejemplo 219, 18 mg): tiempo de retención de HPLC quiral 11.149 minutos (Método: igual como enantiómero 1); MS (ES + ) (M + H) 455.3; tiempo de retención de LCMS: 2.315 minutos (Método N1).
Ejemplo 220: (f?)-Azetidin-1 - - (2-(2-ciclopropilpirimidin-4-il)-3/-/-imidazor4,5-b1piridin-5-il)piperidin-3-il)metanona El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 71. MS API-ES+ (M + H) 404; tiempo de retención de HPLC 2.447 minutos (Método C).
Ejemplo 221: (ff)-A/-(Ciclopropilmetin-1-(2-(2-ciclopropilp¡rimid¡n-4-il)-3H-im¡dazor4,5-b]piridin-5-il)-A/-metilpiperid¡na-3-carboxamida El compuesto del título fue preparado por un método análogo a aquél usado para el ejemplo 71 MS API-ES+ (M + H) 432; tiempo de retención de HPLC 2.749 minutos (Método C).
Ejemplo 222: (R)-(1-(2-(1-(Piridazin-3-il)ciclopropil)-3H-imidazor4,5-b1piridin-5-il)piperid¡n-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1: ( )-A/-(2-Amino-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-piridin-3-il)-1-(piridazin-3-il)ciclopropanocarboxamida A una mezcla de ácido 1 -(piridazin-3-il)ciclopropanocarboxílico (160 mg, 0.97 mmol), hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1 -?)-?/, ?/, ?/', ?/'- tetra me til uro nio (HATU) (445 mg, 1.17 mmol) y diisopropiletil amina (330 mg, 2.4 mmol) en diclorometano anhidro (10 mL) se agregó diclorhidrato de (^?)-(1-(5,6-diaminopiridin-2-il)-piperidin-3-il)(p¡rrolid¡n- -il)metanona (350 mg, 0.98 mmol) disuelto en diclorometano anhidro (10 mL) con diisopropiletil amina (330 mg, 2.4 mmol). La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente durante 2 horas, diluida con diclorometano y se lavó con agua. Los orgánicos se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron bajo presión reducida. El crudo resultante se purificó vía cromatografía de columna (100-200 malla gel de sílice, 60-80% acetato de etilo en éter de petróleo) para dar (R)-/V-(2-amino-6-(3- pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)piridin-3-il)-1-(piridazin-3-il)ciclo-propanocarboxamida (100 mg, 23%) MS (ES + APCI) (M + H) 436.2; tiempo de retención de LCMS: 3.390 minutos (Método W1).
Paso 2: (R)-(1-(2-(1-(Piridazin-3-M)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Se agregó metóxido de sodio (74.4 mg, 1.37 mmol) a una solución de ( )-/V-(2-am¡no-6-(3-(pirrolidina-1-carbonil)piperidin-1-il)-piridin-3-il)-1 -(piridazin-3-il)ciclopropanocarboxamida (100 mg: 0.22 mmol) en isobutanol (2 ml_) y metanol (2 ml_). La mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 16 horas. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el crudo resultante se purificó vía TLC preparativa para dar el compuesto del título (35 mg). MS (ES + APCI) (M + H) 418.2; tiempo de retención de LCMS: 3.439 minutos (Método W1).
Ejemplo 223: (f?)-(1-(2-(1-(1-Metil-1hf-1,2,4-triazol-5-¡l)cicloprop¡n-3/-/-¡midazof4,5-b1pir¡din-5-¡l)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona Paso 1: (R)-(1-(5,6-Diaminopiridin-2-M)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-¡l)metanona A una solución de (f?)-(1 -(6-amino-5-nitropiridin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1 -il)metanona (0.500 g, 1.56 mmol) en etanol (25 ml_) se agregó paladio sobre carbón 10% (500 mg) suspendido en etanol. La mezcla de reacción se hidrogenó usando un globo relleno con gas de hidrógeno por 3 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró a través de Celita y el filtrado se usó para el siguiente paso sin más purificación.
Paso 2: (R)-(1 -(2-(1 -(1 -Metil-1 H-1 ,2,4-tr¡azol-5-M)ciclopropil)-3/-/-im¡dazo[4,5-b]p¡ridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (R)-(1-(5,6-Diaminopiridin-1-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)-metanona, preparada durante el paso previo, se agregó a una suspensión de 1 -(1 -metil-1 H-1 ,2,4-triazol-5-il)ciclopropano-carbimidato de etilo (0.39 mg, 2.0 mmol), azufre (20 mg, 0.31 mmol) y ácido acético (0.96 mL, 15.5 mmol) en etanol (10 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a 80°C durante 16 horas. La mezcla se concentró bajo presión reducida y el crudo resultante se disolvió en acetato de etilo, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró bajo presión reducida. El crudo resultante se purificó vía TLC preparativa para dar el compuesto del título (120 mg, 18%). MS (ES + APCI) (M + H) 421.2; tiempo de retención de LCMS: 3.311 minutos (Método Y1).
DATOS FARMACOLÓGICOS Los siguientes protocolos desde luego pueden ser variados por aquellos expertos en la técnica.
Generación de construcción DGAT2 humana (hDGAT2) Se generó una construcción para dHDGAT2 con una etiqueta FLAG N-terminal (un octapéptido con la secuencia de aminoácido de AspTyrLysAspAspAspAspLys). Para la construcción hDGAT2 etiquetada con FLAG, el cADN para hDGAT2 se sintetizó a la medida en Genscript y se clonó en el vector pFastBac 1 (Invitrogen) al usar enzimas de restricción BamHI/Xhol para generar una construcción pFastBad -FLAG-hDGAT2 N-terminalmente etiquetada con FLAG (aminoácidos 1-388). La construcción fue confirmada al secuenciar en ambas direcciones.
Expresión y preparación de DGAT2 de la fracción de membrana DGAT2 Se generó baculovirus recombinante para la hDGAT2 etiquetada con FLAG en células de insecto SF9 usando sistema de expresión de baculovirus Bac-to-Bac (Invitrogen) de acuerdo con el protocolo del fabricante. Para la expresión de h DG AT2 , células SF9 (20 L) crecidas en medio S f 90011 se infectaron con baculovirus hDGAT2 a una multiplicidad de infección de 1 en una bolsa de onda Wave Bioreactor System 20/50P (GE Healthcare). Después de 40 horas de infección, las células entonces se cosecharon por centrifugación a 5,000 x g. Las pellets celulares se lavaron al resuspender en solución salina regulada con fosfato (PBS) y se recolectaron por centrifugación a 5,000 x g. La pasta celular se congeló en N2 líquido y se almacenó a -80°C hasta que ser necesario. Todas las operaciones a continuación fueron a 4°C a menos que se señale lo contrario. Las células se resuspendieron en regulador de lisis (50 m Tris-HCI, pH 8.0, 250 m M sacarosa) incluyendo 1 m M ácido etilenodiaminatetraacético (EDTA, por sus siglas en inglés) y el coctél inhibidor de proteasa completo (Roche Diagnostics) a una relación de regulador de 3 mi por 1 g pasta celular. Las células se lísaron por homogenizador dounce El desecho celular fue eliminado por centrifugación a 1 ,000 x g por 20 minutos, y el sobrenadante se centrifugó a 100,000 x g por 1 hora. La pellet resultante se enjuagó tres veces al rellenar tubos ultracentrifugos en la parte superior con PBS helado antes de decantar. La pellet lavada se resuspendió con agitación ligera por 1 hora en regulador de lisis conteniendo 8 mM 3-[(3-colamidopropil)dimetilamonio]-1 -propanosulfonato (CHAPS) a una relación de 1 mL regulador por 1 g de pasta celular original y centrifugado de nuevo a 100,000 x g durante 1 hora. El sobrenadante resultante (hDGAT2 fracción de membrana) se alicuotó, congeló en N2 líquido y almacenó a -80°C hasta usarse.
Ensayo de DGAT2 in vitro y determinación de valores 1C50 para inhibidores de DGAT2 Para determinación de valores IC50, se llevaron a cabo reacciones en Poliplacas blancas de 384 pozo (Perkin Elmer) en un volumen total de 20 µ?_. A 1 µ?_ de compuestos disueltos en 100% DMSO y vistos en el fondo de cada pozo, 5 µ?_ de 0.04% de albúmina de suero bovino (BSA, por sus siglas en inglés) (ácido graso libre, Sigma Aldrich) se agregó y la mezcla se incubó a temperatura ambiente durante 20 minutos. A esta mezcla, se agregó 10 µ?_ de fracción de membrana de hDGAT2 (0.01 mg/ml_) diluido en 100 mM Hepes-NaOH pH 7.4, 20 mM MgCI2 conteniendo 200 nM fluorofosfato de metilaraquidonilo (Cayman Chemical; secado a partir de solución de reserva de acetato de etilo bajo gas de argón y disuelto en DMSO como 5 mM reserva). Después de esta mezcla se preincubó a temperatura ambiente durante 2 horas, se iniciaron reacciones de DGAT2 por la adición de 4 µ?_ de sustratos conteniendo 30 µ? [1-1 C]decanoil-CoA (sintetizado a la medida por Perkin Elmer, 50 mCi/mmol) y 125 µ? 1 ,2-didecanoil-sn-glicerol (Avanti Polar Lipids) disuelto en 12.5% acetona. Las mezclas de reacción se incubaron a temperatura ambiente durante 40 minutos y las reacciones se detuvieron por adición de 5 µ?_ de 1% H3P04. Después de la adición de 45 µ?_ MicroScint-E (Perkin-Elmer), se sellaron placas con cubiertas Top Seal-A (Perkin-Elmer) y división de fase de sustratos y productos se logró usando un agitador orbital de microplaca HT- 91100 (Big Bear Automation, Santa Clara, CA). Se centrifugaron placas a 2,000 x g durante 1 minuto un centrífugo Allegra 6R (Beckman Coulter) y después se sellaron de nuevo con cubiertas frescas antes de leer en un contador 1450 Microbeta Wallac Trilux Scintillation Counter (Perkin Elmer). Se midió actividad de DGAT2 al cuantificar el producto generado [1 C]tridecanoilglicerol en la fase orgánica superior.
La actividad de antecedentes obtenida usando 50 µ? de ácido ( 1 R, 2/?)-2-({3'-fluoro-4'-[(6-fluoro-1 , 3-benzot iazo I-2- i l)a m in o]- 1 , 1 '-bifenil-4-il}carbonil)ciclopentanocarboxílico (US 20040224997, ejemplo 26) para inhibición completa de DGAT2 se sustrajo de todas las reacciones. Se probaron inhibidores a once concentraciones diferentes para generar valores IC50 para cada compuesto. Las once concentraciones inhibidoras empleadas típicamente incluyeron 50, 15.8, 5, 1.58, 0.50, 0.16, 0.05, 0.016, 0.005, 0.0016 y 0.0005 µ?. Los datos se plotearon como porcentaje de inhibición contra concentración inhibidora y se ajusta a la ecuación, y = 100/[x/IC50)z], en donde IC50 es la concentración inhibidora a 50% inhibición y z es la inclinación de Hill (la inclinación de la curva en su punto de inflexión). La tabla 13 a continuación provee los valores IC50 de los ejemplos para inhibición de DGAT2 de conformidad con el ensayo descrito antes. Se registran resultados como valores IC50 geométricos promedio. Los valores en los paréntesis son valores IC50 geométricos promedio obtenidos por el ensayo antes descrito usando (R)- 1 - (2-(( S)- 1 -(4-cloro- 1 H-pirazol- 1 -i l)eti l)-3H-im idazo[4, 5- b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona (ejemplo 196-A) en vez de 50 µ? de ácido ( 1 R, 2f?)-2-({3 '-f I u oro-4 '-[(6-f I uoro- 1 , 3-benzotiazol-2-il)amino]-1 ,1'-b¡fen¡l-4-il}carbonil)ciclopentanocarboxílico para inhibición completa de DGAT2.
Tabla 13 Valores IC50 de ejemplos para inhibición de DGAT2 Determinación de valores IC50 para inhibidores de DGAT2 en hepatocitos humanos Para evaluación de los efectos de inhibidores de DGAT2 en un ajuste a base de células, hepatocitos humanos crioconservados (Lot QOC, Celsis, Chicago, IL) se descongelaron y colocaron en placas en placas cubiertas con colágeno tipo I de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Después de un periodo de recuperación de 24 horas durante la noche, las células se colocaron con medio que contiene 250 µ?/Gp? Matrigel (BD Biosciences, San José, CA). Al día siguiente, se aspiraron medios y se colocaron con Medio Williams E libre de suero (Life Technologies, Grand Island, NY) conteniendo 400 µ? dodecanoato de sodio ( S ig m a- A Id ri ch , St. Louis. MO). Cuarenta minutos después, inhibidores de DGAT2 (preparados como 100X reservas en 25% DMSO, 75% medios E de Williams) se agregaron a la concentración final deseada. Todos los pozos tuvieron un inhibidor de DGAT1 selectivo (ejemplo 3, WO2009016462) a una concentración (3 µ?) que suprimió por completo la actividad de DGAT1 endógena. Después de una pre-incubación de 20 minutos, se agregó 0.2 µ?? [1 , 3-14C]-glicerol (American Radio Chemicals, St. Louis, MO) a cada pozo y se mezcló con pipeteo suave a una incubación de 3 horas. En este punto, se aspiraron medios y las células se lisaron en alcohol isopropílico: tetrahidrofurano (9:1) antes de centrifugación a 3000 rpm durante 5 minutos. Se resolvieron lípidos radiomarcados usando un sistema de 2 solventes por cromatografía de capa delgada usando técnica estándar (solvente 1 contuvo acetato de etilo: alcohol isopropílico: cloroformo: metanol: 0.25% cloruro de potasio en agua (100:100:100:40.2:36.1, v/v/v/v) y solvente 2 contuvo hexano: éter dietílico: ácido acético (70:27:3, v/v/v). Después de la separación, se visualizaron lípidos radiomarcados usando un sistema Phosphorlmager de Molecular Dynamics. Se determinaron concentraciones inhibidoras máximas medias (valores !C50) usando GraphPad Prism (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA).
La tabla 14 a continuación provee valores IC50 para los ejemplos de conformidad con el ensayo descrito antes. Se reportaron resultados como valores IC5o promedio, rango de IC50 bajo y alto (95% intervalo de confidencia).
Tabla 14 Valores IC50 de inhibidores DGAT2 seleccionados en heptatocito humano primario Efectos agudos de inhibidores DGAT2 en niveles de TAG de plasma Se ha mostrado bloqueo de actividad DGAT2 hepática para inhibir la secreción de VLDL TAG (18). Para evaluar los efectos agudos de inhibidores de DGAT2 en producción de TAG hepática, ratas macho Sprague Dawley (-200 g, Harían Laboratories Inc.) fueron alimentadas una dieta baja en grasa, alta en sacarosa (TD03045, Harían Laboratories Inc.) por 2 días antes de dosificar con inhibidores de DGAT2. En este momento, animales ayunaron por 4 horas y compuestos administrados como una solución en 0.5% metilcelulosa. Dos horas después del tratamiento con inhibidores de DGAT2, se extrajo sangre de la vena lateral de la cola y se determinaron los niveles de TAG de plasma usando un analizador Roche Hitachi Chemistry de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se analizaron los datos usando GraphPad Prism (GraphPad Software, Inc., La J o 11 a , CA) y se muestran como una gráfica de caja-y-bigotes con los bigotes definiendo el primer y 99° percentil. Se realizó análisis estadístico usando ANOVA de un camino seguido por prueba de comparación múltiple de Dunnett. * p<0.05, **p<0.001, ***p<0.0001.
La figura 4 provee efectos agudos de inhibidores de DGAT2 en niveles de TAG de plasma en ratas Sprague Dawley para los ejemplos 95, 108 y 109-A de conformidad con el método descrito antes.
Difracción de rayos X en polvo Se realizó análisis de difracción en polvo usando un d if ractómetro Bruker D8 equipado con una fuente de radiación de Cu, ranuras fijas (divergencia = 1.0 mm, anti-dispersor = 0.6 mm, y receptor = 0.6 mm) y un detector contador de centelleo. Se recolectaron datos en el goniómetro Theta-Theta a la longitud de onda de Cu Ka1 =1.54056 A de 3.0 a 40.0 grados 2-Theta usando un tamaño de paso de 0.040 grados y un tiempo de paso de 2.0 segundo. Se ajustó el voltaje del tubo de rayos X y amperaje a 40 kV y 40 mA respectivamente. Se prepararon muestras por colocación en un disco Nickel (Gasser & Sons, Inc. Commack, NY) y rotaron durante la recolección de datos. Se recolectaron y analizaron datos usando software Bruker DIFFRAC Plus (versión 2.6). Un patrón de difracción en polvo de rayos X y lista de pico total para forma cristalina 1 del ejemplo 109-B se muestran en la tabla 15. Además, un patrón de difracción en polvo de rayos X y lista de pico total para forma cristalina 1 del ejemplo 196-B se muestran en la tabla 17. Los picos con intensidad relativa de > 7% se eligieron de forma general. Los picos que no fueron resueltos o fueron consistentes con ruido también se descartaron. Los valores de difracción de rayos X en polvo en general son precisos a dentro de ± 0.2 grados 2-Theta, debido a variaciones ligeras de instrumento y condiciones de prueba.
Tabla 15. Patrón de difracción en polvo de rayos X: Lista Pico Total para forma cristalina 1 del ejemplo 109-B.
Tabla 16. Patrón de difracción en polvo de rayos X: Lista Pico Total para forma cristalina 1 del ejemplo 109-C. Ángulo Intensidad % 2-Theta 0 % 7.8 86 8.8 15 9.7 13 10.0 19 10.6 47 1 1 .9 63 13.3 28 15.2 100 15.6 44 16.7 56 17.6 27 18.0 43 Ángulo Intensidad % 2-Theta ° % 18.2 33 18.6 15 19.5 66 20.0 18 20.2 40 20.7 29 20.9 40 21 .1 29 21 .5 52 22.1 40 22.6 54 Tabla 17. Patrón de difracción en polvo de rayos X: Lista Pico Total para forma cristalina 1 del ejemplo 196-B.
NMR de estado sólido: Se empacó de forma muy justa una muestra del compuesto del ejemplo 109-B en un rotor de Zr02 4 mm. Se recolectaron espectros a temperatura ambiente y presión en sonda Varian 4 mm CPMAS en un espectrómetro de NMR Varian Unity Inova 400 MHz (frecuencia 1H). El rotor empacado fue orientado al ángulo mágico y girado a 12.0 kHz. El espectro de estado sólido 13C fue recolectado usando un experimento giratorio de ángulo mágico de polarización cruzada desacoplado de protones (CPMAS). El tiempo de contacto de polarización cruzada se estableció a 5.0 ms. Se aplicó un campo desacoplador de protones de aproximadamente 95 kHZ. Se recolectaron 2048 escaneos con retraso de reciclado de 5 segundos. El espectro de carbón fue referenciado usando un estándar externo de glicina cristalina, ajusfando su resonancia ascendente a 176.5 ppm. Los datos de cambio químico son dependientes de las condiciones de prueba (es decir, velocidad giratoria y sujetador de muestra), material de referencia, y parámetros procesadores de datos, entre otros factores. Típicamente, los resultados de NMR de estado sólido (ss-NMR) son precisos para estar dentro de aproximadamente ± 0.2 ppm.
Tabla 18. Patrón de difracción de ss-NMR: Lista Pico Total para forma cristalina 1 del ejemplo 109-B. 13C Cambios Químicos [ppm]a 41.5 41.9 45.7 46.6 47.6 103.7 107.0 111.4 115.3 119.0 125.0 127.0 130.7 132.1 138.8 142.8 143.6 145.1 148.1 152.2 156.0 158.5 13C Cambios Químicos [ppm]1 170.3 173.2 (a) Referenciados a muestra externa de glicina de fase sólida a 176.5 ppm.
A lo largo de esta solicitud, se hace referencia a varias publicaciones. Las descripciones de estas publicaciones en sus totalidades se incorporan a la presente por referencia en esta solicitud para todos los propósitos Será evidente a aquellos expertos en la técnica que varias modificaciones y variaciones se pueden hacer en la presente invención sin alejarse del alcance o espíritu de la invención. Otras modalidades de la invención serán evidentes a aquellos expertos en la técnica a partir de consideración de la especificación y práctica de la invención descrita en la presente. Se pretende que la especificación y ejemplos sean considerados sólo como ejemplares, con un verdadero alcance y espíritu de la invención siendo indicado por las siguientes reivindicaciones.

Claims (24)

REIVINDICACIONES
1.- Un compuesto de fórmula (I) I en donde: A es CR6R7, O o S; B es un enlace, oxetanilo, en donde m es 0, 1 o 2; p es 1 , 2, 3 o 4; C y D cada uno son seleccionados individualmente a partir de N, CH, CF y C(CH3), en donde sólo uno de C y D es N; R1 es -C(0)-heteroc¡clilo, -C(0)-NR4R5, o un heteroarilo, en donde dicho heterociclilo o heteroarilo es opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustitutos seleccionados independientemente a partir de (Ci-C4)alquilo, (C3-C6)cicloalquilo, (d-d)alcoxi, halo, hidroxi(d-C4 ) a I q u i I o , mono-N- o di-N,N-(d-C4)alquilamino, mono-N- o di-N,N-(C3-Ce)cicloalquilamino, heterociclilo, hidroxilo y ciano; R2 es (d-d)alquilo, ( C - -C4) a I cox i , (C3-C6)cicloalquilo, (C3- C6 ) c i cloa Icox i , a r i I o , ariloxi, hetero a ri lo xi , heteroarilo, heterociclilo, aralquilo, heteroaralquilo, -C(0)-heterociclilo, -C(0)-NR4R5, o -NR4-C(0)-R5, en donde alquilo, alcoxi, cicl oa Iq u i I o , cicloalcoxi, aralquilo, heteroaralquilo, arilo, ariloxi, heteroariloxi, heteroarilo, heterociclilo son cada uno opcionalmente sustituidos con uno, dos o tres sustitutos seleccionados independientemente a partir de (Ci-C4)-alquilo, (C1-C4)alcoxi, (C3-C6)cicloalquilo, (C3-C6)cicloalcox¡, -C(O)-(Ci-C4)alquilo, -C(0)-(C3-C6)cicloalquilo, halo, -C(0)-(Ci -C4)alcoxi , -C(0)-(C3-C6)cicloalcoxi, mono-N- o di-N,N-(C1-C4)alquilamino, mono-N- o di-N, N-(C3-C6)cicloalquilamino, (C ·, -C ) a I q u i I ca rbo n i I a m i n o , (C3-C6)cicloalquilcarbonilamino, (Ci-C4)alquilcarbonil-N-(Ci-C4)alquil-amino, (C1-C4)alquilcarbonil-N-(C3-C6)cicloalquilamino, (C3-C6)-cicloalquilcarbonil-N-(C1-C4)alquilamino, (C3-C6)cicloalquilcarbonil-N-(C3-C6)cicloalquilamino, aminocarbonilo, mono-N- o di-N,N-(C1-C )-alquilaminocarbonilo, mono-N- o di-N,N-(C3-C6)cicloaminocarbonilo, mono-N-o di-N, N-(C1-C4)alquilcarbonilo, mono-N- o di-N , N-(C3-C6)-cicloalcoxicarbonilo, (C1-C4)alquiltio, (C3-C6)cicloalquiltio, amino-sulfonilo, (C1-C4)alquilsulfinilo, (C1-C4)alquilsulfonilo, (C3-C6)ciclo-alquilsulfinilo, (C3-CB)cicloalquilsulfonilo, mono-N- o di- , N-(d-C4)-alquilaminosulfonilo, mono-N- o di-N, N-(C3-C6)cicloalquilamino-sulfonilo, (C1-C )alquilsulfonilamino, (C3-C6)cicloalquilsulfonilamino, (Ci-C4)alquilsulfonil-N-(C1-C4)alquilamino, (C1-C4)alquilsulfonil-N-(C3-C6)cicloalquilamino, (C3-C6)cicloalquilsulfonil-N-(Ci-C4)alquil-amino, (C3-C6)cicloalquilsulfonil-N-(C3-C6)c¡cloalquilamino, arilo, heteroarilo, heterociclilo, oxo, carboxilo, amino, hidroxilo y ciano, en donde dicho alquilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, heterociclilo, alcoxi y cicloalcoxi son opcionalmente sustituidos independientemente con uno a nueve flúor, o 1, 2 o 3 sustitutos seleccionados a partir de halo, -C(0)-OH, -C(0)-(C -C4)alcox¡, aminocarbonilo, mono-N- o di-N,N-(Ci-C4)alquilcarbonilo, mono-N- o di-N,N-(C3-C6)cicloalquilcarbonilo, ciano, amino e hidroxilo; R3 es (Ci-C4)alquilo, (C3-C5)cicloalquilo, hidroxilo o flúor, en donde dicho alquilo es opcionalmente sustituido con uno a nueve flúores y dicho (C3-C6)cicloalquilo es opcionalmente sustituido con uno a seis flúores; R4 y R5 son cada uno independientemente seleccionados a partir de hidrógeno, (C1-C4)alquilo, (C3-C3)cicloalquilo, arilo, heteroarilo, ariloxi, heteroariloxi, aralquilo, heteroaralquilo, heterociclilo, (C1-C )alcoxi y (C3-C6)cicloalcoxi, en donde R4 y R5 son cada uno opcionalmente sustituidos con (Ci-C4)alquilo, (d-C4)alcoxi, (C3-C6)cicloal quilo, (C3-C6)cicloalcoxi, halo o ciano, en donde cada uno de dichos alquilo, cicloalquilo, alcoxi o cicloalcoxi es opcionalmente sustituido con uno a nueve flúores; R6 y R' son cada uno independientemente hidrógeno, (d-C4)-alquilo, flúor, (C ·, -C4)a Icoxi , hidroxilo o ciano, en donde dicho alquilo es opcionalmente sustituido con uno a nueve flúores; R8 se selecciona a partir de flúor, metilo o trif luorometilo; R9 y R 0 cada uno son independientemente seleccionados a partir de hidrógeno, flúor, (C1-C4)alquilo, (C3-C6)cicloalquilo, arilo o heteroarilo, en donde dicho alquilo es opcionalmente sustituido con uno a nueve flúores, y dicho cicloalquilo es opcionalmente sustituido con uno a seis flúores, y dicho arilo y heteroariio son opcionalmente sustituidos con 1, 2 o 3 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor, cloro, metilo, etilo, isopropilo, ciclopropilo, metiltio, metoxi, ciano, trifluorometilo, difluorometilo, trifluorometoxi, difluorometoxi, oxo y trifluorometiltio; y n es 0, 1 o 2; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
2 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, en donde R es -C(0)-heterociclilo, -C(0)-NR R5, piridilo, 6,7-dihidro-5H-pirrolo[2,1 - c][1 , 2 , 4 ] t r ¡ a z o I ¡ I o , 6-7-dihidro-5H-pirrolo[1 ,2-c]-imidazolilo, en donde R es opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustitutos independientemente seleccionados a partir de fluoro, metilo, hidroxilo o -CH2OH; D es CH, N o CF; B es un enlace, oxetanilo o en donde p es 1 o 2; R3 es flúor o metilo; R6 y R7 son cada uno independientemente hidrógeno, flúor o metilo; R8 se selecciona a partir de flúor o metilo; y R9 y R10 son cada uno individualmente seleccionados a partir de hidrógeno, flúor o metilo; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
3.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, en donde R 1 es -C(0)-heterociclilo o -C(0)-NR4R5 en donde dicho heterociclilo es opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor y metilo; B es un enlace, en donde p es 1 o 2; R2 se selecciona a partir de fenilo, furilo, tienilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, 1 ,2,3-triazolilo, 1 ,2,4-triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridiazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridin-2(1 H)-onilo, piridazin-2(1H)-onilo, pirimidin-2(1H)-onilo, pirazin-2(1/-/)-onilo, imidazo[1 ,2-a]piridinilo, pirazolo[1 ,5-a]piridinilo, 2H-benzo[£)][1 ,4]-oxazin-3(4H)-onilo, 2,3-dihidro-1H-indenilo, 1,2,3,4-tetrahidro-n afta I e n i I o , 5,6,7,8-tetrahidroisoquinolinilo, 5,6,7,8-tetrahidro-quinolinilo, 6,7-dihidro-5/-/-ciclopenta[¿>]piridinilo, 6,7-dihidro-5H-ciclopenta[c] piridinilo, 1,4,5,6-tetrahidrociclopenta[c]pirazolilo, 2, 4, 5, 6-tetrahidrociclopenta[c] pirazolilo, 5,6-dihidro-4/-/-pirrolo[1,2-¿)]pirazolilo, 6,7-dihidro-5H-pirrolo[1,2-b][1,2,4]triazolilo, 5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[1,5-a]piridinilo, 4,5,6,7-tetrahidropirazolo-[1,5-a]piridinilo, 4,5,6,7-tetrahidro-1/-/-indazolilo, 4,5,6,7-tetrahidro-2H-indazolilo, feniloxi, p i ri d i n i I ox i , bencilo, p iri d i n i i-(CH2)- , pirazolil- (CH2)-, ciclopropilo y ciclobutilo; en donde dicho R2 es opcionalmente sustituido con 1 , 2 o 3 sustitutos independientemente seleccionados a partir de (C -C4)alquilo, (C -C4)alcoxi, (C3-C6)-cicloalcoxi, ciclopropilo, halo, hidroxilo, amino, dimetilamino, metilamino, ciclopropilamino, aminocarbonilo, metilaminocarbonilo, (C1-C4)alquiltio, (C3-C6)cicloalquiltio, aminosulfonilo, metilamino-sulfonilo, fenilo y heteroarilo en donde heteroarilo se selecciona a partir de furilo, tienilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, p i ra z o l i I o , triazolilo, isoxazolilo, i sot iazo I i I o , oxadiazolilo, tiadiazolilo, p i r i d i n i I o , piridiazinilo. pirimidinilo, pirazinilo, piridin-2( 1 /- ) - o n i I o , piridazin-2(1 H) -o n i I o , pirimidin-2(1 H)-onilo, p i r a z i n - 2 ( 1 /- ) - o n i I o , oxetanilo, azetidinilo y pirrolidinilo, en donde dicho alquilo, ciclopropilo, azetidinilo, pirrolidinilo, alcoxi y cicloalcoxi son opcionalmente sustituidos con oxo, ciano o hasta tres flúor o hidroxilo, y dicho fenilo o heteroarilo es opcionalmente sustituido independientemente con hasta tres grupos seleccionados a partir de halo, metilo, trifluorometilo, difluorometilo, metoxi, trifluorometoxi, difluorometoxi, ciano, ciclopropilo, metiltio, oxo y trifluorometiltio; y R9 y R10 son cada uno individualmente seleccionados a partir de hidrógeno y metilo; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
4 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 3, en donde R1 es -C(0)-heterociclilo o -C(0)-NR R5 en donde dicho heterociclilo se selecciona a partir de pirrolidinilo, 2,5-dihidro-1 H- pirrolMo, azetidinilo, piperidinilo y morfolinilo y dicho heterociclilo es opcionalmente sustituido con 1 o 2 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor y metilo; C es CH, N o CF; A es CH2 u O; R2 es fenilo, furilo, tienilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, i sot i azo I i I o , oxa d iazo I i I o , tiadiazolilo, piridinilo, piridiazinilo, p i ri m id i n i I o , pirazinilo, piridin-2(1 H)-onilo, piridazin-2(1 H)-onilo, p i ri m id i n-2 ( 1 H)-on i lo , pirazin-2(1H)-onilo, feniloxi, piridiniloxi, bencilo, piridinil-(CH2)- o pirazolil-(CH2)-, en donde R2 es opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor, cloro, metilo, etilo, isopropilo, ciclopropilo, hidroxilo, amino, metiltio, metoxi, ciano, trifluorometilo, difluorometilo, trifluorometoxi, difluorometoxi, oxo y trifluorometiltio; R4 es hidrógeno o metilo; R5 es hidrógeno o metilo; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
5.- El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, en donde R1 es -C(0)-heterociclilo, en donde dicho heterociclilo se selecciona a partir de pirrolidinilo, 2 , 5-di h id ro- 1 H-pi rro li I o , 3,3-difluoroazetidinilo, 3,3-difluoropirrolidinilo y morfolinilo; B es en donde p es 1 o 2; y R2 es fenilo, furilo, tienilo, oxazolilo, tiazolilo, ¡midazolilo, pirazolilo, triazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridiazinilo, pirirmidinilo, pirazinilo, feniloxi, piridiniloxi, bencilo, p¡rid¡nil-(CH2)- o pirazolil-(CH2)-, en donde R2 es opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor, cloro, metilo, etilo, ¡sopropilo, ciclopropilo, metiltio, metoxi, ciano, trifluorometilo, difluorometilo, trifluorometoxi, difluorometoxi, oxo y trifluorometiltio; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
6. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 5, en donde R2 es pirazolilo enlazado a N opcionalmente sustituido con 1, 2 o 3 sustitutos independientemente seleccionados a partir de flúor, cloro, metilo, etilo, isopropilo, ciclopropilo, hidroxilo, amino, metiltio, metoxi, ciano, trifluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, difluorometoxi y trifluorometiltio o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
7. - El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, en donde R1 es C es CH o CF; A es CH2; n es 0; y R2 es pirazolilo /V-enlazado sustituido en la posición 4 con flúor o cloro; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
8 - El compuesto: (1-(2-(1-(4-fluoro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(8-(1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-9H-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(2-(1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-¡midazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1 -(2-(2-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -il)propan-2-il)-3H-¡midazo[4,5-b]piridin-5-il)p¡per¡din-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-{2-[1-(4-cloro-1 H-pirazol-1 - il)ciclopropil]-3 H-imidazo[4, 5-b]piridin-5-il}(2,2,6,6-2/-/ )piperidin-3-il](pirrolidin-1-il)metanona; (1 - (2-((R)-1 -(4-fluoro-1 H-pirazol-1 - i l)et i l)-3H-imidazo[4, 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1 - (2-((S)-1-(4-fluoro-1 H-pirazol-1 - M)etil)-3H-¡midazo[4, 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(2-((S)-1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)et¡l)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-M)(pirrolidin-1-il)metanona; (1 -(2-((R)-1-(4-cloro-1 H-pi razo I- 1 - i l)et¡ I )-3H-i m id azo[4 , 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(8-((S)-1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)etil)-9H-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; (1-(8-(( )-1-(4-cloro-1H-pirazol-1-il)etil)-9H-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; y (1-(8-(1-(4-fluoro-1H-pirazol-1-il)ciclopropil)-9H-purin-2-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona; o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
9.- El compuesto (( =?)-1-(2-((S)-1-(4-cloro-1H-p¡razol-1-il)etil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piper¡din-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona, ((R)-1-(2-((fi)-1-(4-cloro-1 H-pirazol-1-il)etil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona, ((S)-1-(2-((S)-1-(4-cloro-1 H-pirazol-1 -i I )eti l)-3H-i m idazo [4 , 5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona, o ((S)-1 -(2-((R)-1 -(4-cl oro- H-pirazol-1 -i l)etil)-3 H- i midazo [4,5-b]pirid¡n-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona, o una mezcla de los mismos, o un tautómero de los mismos o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
10.- El compuesto (R)-(1 - (2-(1-(4-cloro-1 H- pira zol-1-il)ciclopropil)-3/-/-irmidazo [4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona, y (S)-(1-(2-(1-(4-cloro-1/-/-pirazol-1-il)ciclopropil)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-5-il)piperidin-3-il)(pirrolidin-1-il)metanona, o una mezcla de los mismos; o tautómero de los mismos o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
11.- El compuesto teniendo la estructura o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
12.- El compuesto teniendo la estructura o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
13.- Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-12 o un tautómero del ismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero, presente en una cantidad terapéuticamente efectiva, en mezcla con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.
14. - La composición de conformidad con la reivindicación 13 que comprende además por lo menos un agente farmacéutico adicional seleccionado a partir del grupo que consiste de un agente anti-obesidad, un agente anti-diabético y un agente modulador de colesterol/lípido.
15. - La composición de conformidad con la reivindicación 14, en donde dicho agente anti-obesidad se selecciona a partir del grupo que consiste de inhibidores de MTP selectivos de intestino (por ejemplo, dirlotapida, mitratapida y implitapida, R56918, agonistas CCKa, agonistas 5HT2c, agonista MCR4, inhibidor de lipasa, PYY3.36l antagonistas opioides, la combinación de naltrexona con bupropion, oleoil-estrona, obinepitida, pramlintida, tesofensina, leptina, liraglutida, bromocriptina, orlistat, exenatida, AOD-9604 y sibutramina.
16. - La composición de conformidad con la reivindicación 14, en donde dicho agente anti-diabético se selecciona a partir del grupo que consiste de inhibidor de acetil-CoA carboxilasa-(ACC), un inhibidor de diacilglicerol O-aciltransferasa 1 (DGAT-1 ), AZD7687, LCQ908, inhibidores de monoacilglicerol l-aciltransferasa, un inhibidor de fosfodiesterasa (PDE)-10, un activador de AMPK, una sulfonilurea, una meglítinida, un inhibidor de a-amilasa, un inhibidor de -glucosida de hidrolasa, un inhibidor de a-g I ucos i dasa , un agonista PPARy- un agonista PPAR a/y (una biguanida, un modulador de péptido 1 tipo glucagón (GLP-1) tal como un agonista, liraglutida, albiglutida, exenatida, albiglutida, lixisenatida, dulaglutida, semaglutida, NN-9924, TTP-054, un inhibidor de proteína tirosina fosfatasa-1B (PTP-1B), activador SIRT-1, un inhibidor dipeptidilo peptideasa IV (DPP-IV), un secretagogo de insulina, un inhibidor de oxidación de ácido graso, un antagonista A2, un inhibidor de c-jun amino-terminal quinasa (JNK), activadores de glucoquinasa (GKa), insulina, un mimético de insulina, un inhibidor de glicógeno fosforilasa, un agonista receptor de VPAC2, inhibidores de SGLT2, un modulador receptor de glucagón, moduladores GPR119, derivados o análogos de FGF21, moduladores receptores de TFR5 (también denominado GPBAR1), agonistas GPR40, moduladores GPR120, activadores receptores de ácido nicotínico de alta afinidad (HM74A), e inhibidores de SGLT1, inhibidores o moduladores de enzimas de carnitina palmitoil transferasa, inhibidores de fructosa 1,6-difosfatasa, inhibidores de aldosa reductasa, inhibidores receptores de mineralocorticoide, inhibidores de TORC2, inhibidores de CCR2 y/o CCR5, inhibidores de isoformas PKC (por ejemplo, PKCa, ???ß, PKCy), inhibidores de sintetasa de ácido graso, inhibidores de serina palmitoil transferasa, moduladores de GPR81, GPR39, GPR43, GPR41, GPR105, Kv1.3. proteína 4 de unión a retinol, receptor glucocorticoide, receptores de somatostatin (por ejemplo, SSTR1, SSTR2, SSTR3 y SSTR5), inhibidores de moduladores de PDHK2 o PDHK4, inhibidores de MAP4K4, moduladores de familia IL1 incluyendo I L 1 beta , y moduladores de RXRalfa.
17. La composición de conformidad con la reivindicación 14 en donde dicho agente modulador de colesterol/lípido se selecciona a partir del grupo que consiste de inhibidores de HMG-CoA reductasa; inhibidores de escualeno sintetasa; fibratos; secuestradores de ácido biliar; inhibidores de ACAT; inhibidores de MTP; inhibidores de lipooxigensasa; inhibidores de absorción de colesterol; moduladores de PCSK9 e inhibidores de proteína de transferencia de éster de colesterilo.
18. - Un método para el tratamiento de diabetes que comprende la administración de una cantidad efectiva de compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-12 o un tautomero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautomero a un paciente en necesidad del mismo.
19. - Un método para tratar una enfermedad, condición o trastorno metabólica o relacionada con el metabolismo que comprende el paso de administrar a un paciente una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-12 o un tautomero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautomero.
20. - Un método para tratar una condición seleccionada a partir del grupo que consiste de hiperlipidemia, diabetes tipo I, diabetes mellitus tipo II, diabetes idiopática tipo I (tipo Ib), diabetes autoinmune latente en adultos (LADA), diabetes tipo 2 de inicio temprano (EOD), diabetes atípica de inicio en juventud (YOAD), diabetes de inicio en madurez de los jóvenes (MODY), diabetes relacionada con malnutrición, diabetes gestacional, enfermedad cardiaca coronaria, embolia isquémica, restenosis después de angioplastia, enfermedad vascular periférica, claudicación intermitente, infarto al miocardio (por ejemplo, necrosis y apoptosis), dislipidemia, lipemia post-prandial, condiciones de tolerancia a glucosa impedida (IGT), condiciones de glucosa de plasma por ayuno impedido, acidosis metabólico, quetosis, artritis, obesidad, osteoporosis, hipertensión, fallo al corazón congestivo, hipertrofia ventricular izquierda, enfermedad arterial periférica, retinopatía diabética, degeneración macular, catarata, nefropatía diabética, glomerulosclerosis, fallo renal crónico, neuropatía diabética, síndrome metabólico, síndrome X síndrome premenstrual, enfermedad de corazón coronaria, angina pectoris, trombosis, aterosclerosis, infarto al miocardio, ataques isquémicos transitorios, embolia, restenosis vascular, hiperglicemia, hiperinsulinemia, hiperlipidemia, hipertrigliceridemia, resistencia a insulina, metabolismo de glucosa dañado, condiciones de tolerancia a glucosa dañada, condiciones de glucosa de plasma por ayuno dañado, obesidad, disfunción eréctil, trastornos por piel y tejido conector, ulceraciones de pie y colitis ulcerante, disfunción del endotelio y elasticidad vascular impedida, hiper apo B lipoproteinem ia, Alzheimer, esquizofrenia, deterioro cognitivo, enfermedad del intestino inflamatorio, colitis ulcerante, enfermedad de Crohn, y síndrome del intestino irritable, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), enfermedad del hígado graso no alcohólico (NAFLD), que comprende la administración de una cantidad efectiva de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-12 o un tautómero del mismo o una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto o tautómero.
21. - Un método para tratar una enfermedad, condición o trastorno metabólico o relacionado con el metabolismo que comprende el paso de administrar a un paciente en necesidad de dicho tratamiento dos composiciones farmacéuticas separadas comprendiendo (iii) una primera composición de conformidad con la reivindicación 13; y (iv) una segunda composición que comprende al menos un agente farmacéutico adicional seleccionado a partir del grupo que consiste de un agente anti-obesidad y un agente anti-diabético, y al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.
22. - El método de conformidad con la reivindicación 21, en donde dicha primera composición y dicha segunda composición se administran simultáneamente.
23 - El método de conformidad con la reivindicación 21, en donde dicha primera composición y dicha segunda composición se administran en secuencia y en cualquier orden.
24.- Un método para tratar una enfermedad, condición o trastorno modulado por la inhibición de DGAT2 en animales comprendiendo el paso de administrar a un animal en necesidad de dicho tratamiento un compuesto inhibidor de DGAT2 o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el compuesto inhibidor de DGAT2 es un compuesto de 5-(piperidin-1 -il)-3H-imidazo[4,5-b]piridina sustituida, una 5-morfolino-3/-/-imidazo[4,5-b]-piridina sustituida, una 6-(piperidin-1 -M)-1 -/-imidazo[4,5-b]pirazina sustituida, una 6-morfolino-1 H-imidazo[4,5-b]pirazina sustituida, una 2-(piperidin-1 -il)-9/-/-purina sustituida o 2-morfolino-9/-/-sustituida.
MX2014011373A 2012-04-06 2013-03-26 Inhibidores de diacilglicerol aciltransferasa 2. MX2014011373A (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261621144P 2012-04-06 2012-04-06
PCT/IB2013/052404 WO2013150416A1 (en) 2012-04-06 2013-03-26 Diacylglycerol acyltransferase 2 inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
MX2014011373A true MX2014011373A (es) 2014-10-14

Family

ID=48428540

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MX2014011373A MX2014011373A (es) 2012-04-06 2013-03-26 Inhibidores de diacilglicerol aciltransferasa 2.

Country Status (27)

Country Link
US (1) US9296745B2 (es)
EP (1) EP2834238B1 (es)
JP (1) JP2015515472A (es)
KR (1) KR20140137404A (es)
CN (1) CN104334557A (es)
AP (1) AP2014007953A0 (es)
AU (1) AU2013245353A1 (es)
CA (1) CA2869587A1 (es)
CL (1) CL2014002541A1 (es)
CO (1) CO7160030A2 (es)
CR (1) CR20140468A (es)
CU (1) CU20140115A7 (es)
DO (1) DOP2014000225A (es)
EA (1) EA201400990A1 (es)
EC (1) ECSP14021251A (es)
GT (1) GT201400213A (es)
HK (1) HK1206735A1 (es)
IL (1) IL234928A0 (es)
MA (1) MA37385B1 (es)
MD (1) MD20140103A2 (es)
MX (1) MX2014011373A (es)
NI (1) NI201400120A (es)
PE (1) PE20142164A1 (es)
PH (1) PH12014502057A1 (es)
SG (1) SG11201405477XA (es)
TN (1) TN2014000419A1 (es)
WO (1) WO2013150416A1 (es)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9255154B2 (en) 2012-05-08 2016-02-09 Alderbio Holdings, Llc Anti-PCSK9 antibodies and use thereof
AR098394A1 (es) 2013-11-25 2016-05-26 Lilly Co Eli Inhibidores de dgat2 (diacilglicerol o-aciltransferasa 2)
CR20160405A (es) * 2014-03-17 2016-11-07 Pfizer Inhibidores de diacilglicerol aciltransferasa 2
WO2016105118A2 (ko) * 2014-12-24 2016-06-30 주식회사 엘지생명과학 Gpr120 효능제로서의 바이아릴 유도체
CN107635975B (zh) 2015-05-20 2020-07-24 伊莱利利公司 Dgat2抑制剂
AU2016294347B2 (en) * 2015-07-10 2022-07-28 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of diacyglycerol acyltransferase 2 (DGAT2)
US20190055212A1 (en) * 2016-02-16 2019-02-21 Stephen Gwaltney Histone demethylase inhibitors
AR109179A1 (es) * 2016-08-19 2018-11-07 Pfizer Inhibidores de diacilglicerol aciltransferasa 2
TWI841671B (zh) 2019-01-24 2024-05-11 日商第一三共股份有限公司 具有取代基之脲化合物
TWI771766B (zh) 2019-10-04 2022-07-21 美商輝瑞股份有限公司 二醯基甘油醯基轉移酶２ 抑制劑
JP2022058085A (ja) 2020-02-24 2022-04-11 ファイザー・インク ジアシルグリセロールアシルトランスフェラーゼ２阻害剤とアセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ阻害剤との組合せ
CN111214449B (zh) * 2020-03-02 2021-09-07 广东彼迪药业有限公司 一种盐酸西替利嗪片剂及其制备方法
US11478533B2 (en) 2020-04-27 2022-10-25 Novo Nordisk A/S Semaglutide for use in medicine
TW202208359A (zh) 2020-05-18 2022-03-01 美商默沙東藥廠 新穎二醯基甘油酯o-醯基轉移酶2抑制劑
AU2021329323A1 (en) * 2020-08-19 2023-03-16 Bristol-Myers Squibb Company 1H-benzo(d)imidazole derivatives as TLR9 inhibitors for the treatment of fibrosis
TWI817191B (zh) * 2020-09-04 2023-10-01 南韓商Ｌｇ化學股份有限公司 新穎聯芳基衍生物及其作為針對二醯基甘油醯基轉移酶２之抑制劑之用途
MX2023003842A (es) 2020-10-08 2023-04-14 Merck Sharp & Dohme Llc Preparacion de derivados de benzoimidazolona como nuevos inhibidores de la diacilglicerol o-aciltransferasa 2.
JP7482324B2 (ja) 2020-10-08 2024-05-13 メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー 新規なジアシルグリセリドｏ－アシルトランスフェラーゼ２阻害剤としてのオキシインドール誘導体の製造
UY39484A (es) * 2020-11-02 2022-06-30 Novartis Ag Inhibidores de interleucina-17
WO2023026180A1 (en) 2021-08-26 2023-03-02 Pfizer Inc. Amorphous form of (s)-2-(5-((3-ethoxypyridin-2-yl)oxy)pyridin-3-yl)-n-(tetrahydrofuran-3- yl)pyrimidine-5-carboxamide
WO2023159154A1 (en) * 2022-02-18 2023-08-24 Bristol-Myers Squibb Company Substituted imidazopyridinyl compounds useful as inhibitors of tlr9
AR131250A1 (es) 2022-12-02 2025-02-26 Merck Sharp & Dohme Llc Preparación de derivados condensados de azol como nuevos inhibidores de la diacilglicerol o-aciltransferasa 2
WO2025194014A1 (en) * 2024-03-15 2025-09-18 Dem Biopharma, Inc. Hetero aryl modulators of apmap and uses thereof

Family Cites Families (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0028489B1 (en) 1979-11-05 1983-10-05 Beecham Group Plc Enzyme derivatives, and their preparation
ES2111065T5 (es) 1991-04-16 2005-06-16 Nippon Shinyaku Company, Limited Procedimiento para producir una dispersion solida.
US5612359A (en) 1994-08-26 1997-03-18 Bristol-Myers Squibb Company Substituted biphenyl isoxazole sulfonamides
DE19504832A1 (de) 1995-02-14 1996-08-22 Basf Ag Feste Wirkstoff-Zubereitungen
TW536540B (en) 1997-01-30 2003-06-11 Bristol Myers Squibb Co Endothelin antagonists: N-[[2'-[[(4,5-dimethyl-3-isoxazolyl)amino]sulfonyl]-4-(2-oxazolyl)[1,1'-biphenyl]-2-yl]methyl]-N,3,3-trimethylbutanamide and N-(4,5-dimethyl-3-isoxazolyl)-2'-[(3,3-dimethyl-2-oxo-1-pyrrolidinyl)methyl]-4'-(2-oxazolyl)[1,1'-biphe
EP0901786B1 (en) 1997-08-11 2007-06-13 Pfizer Products Inc. Solid pharmaceutical dispersions with enhanced bioavailability
EE200100006A (et) 1998-07-06 2002-06-17 Bristol-Myers Squibb Company Bifenüülsulfoonamiidid kui duaalse angiotensiin-endoteliini retseptori antagonistid
MY125533A (en) 1999-12-06 2006-08-30 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclic dihydropyrimidine compounds
CN1633297A (zh) 2001-02-28 2005-06-29 麦克公司 作为黑皮质素－4受体激动剂的酰化哌啶衍生物
EP1401831A1 (en) 2001-07-03 2004-03-31 Chiron Corporation Indazole benzimidazole compounds as tyrosine and serine/threonine kinase inhibitors
NZ534582A (en) 2002-02-27 2006-03-31 Pfizer Prod Inc ACC inhibitors
FR2852957B1 (fr) * 2003-03-31 2005-06-10 Sod Conseils Rech Applic Nouveaux derives d'imidazo-pyridine et leur utilisation en tant que medicament
AR044152A1 (es) 2003-05-09 2005-08-24 Bayer Corp Derivados de alquilarilo, metodo de preparacion y uso para el tratamiento de la obesidad
AP2320A (en) 2004-05-12 2011-11-07 Pfizer Procucts Inc Proline derivatives and their use as dipeptidyl peptidase IV inhibitors.
AU2005247693A1 (en) 2004-05-25 2005-12-08 Pfizer Products Inc. Tetraazabenzo[E]azulene derivatives and analogs thereof
PA8660701A1 (es) 2005-02-04 2006-09-22 Pfizer Prod Inc Agonistas de pyy y sus usos
ES2274712B1 (es) 2005-10-06 2008-03-01 Laboratorios Almirall S.A. Nuevos derivados imidazopiridina.
WO2007122482A1 (en) 2006-04-20 2007-11-01 Pfizer Products Inc. Fused phenyl amido heterocyclic compounds for the prevention and treatment of glucokinase-mediated diseases
BRPI0721053A2 (pt) 2006-11-29 2014-07-29 Pfizer Prod Inc INIBIDORES DE ESPIROCETONA ACETIL-CoA CARBOXILASE
BRPI0720695A2 (pt) 2006-12-21 2014-02-18 Plexxikon Inc Compostos e métodos para modulação de cinase, e indicações para estes
US20090036425A1 (en) 2007-08-02 2009-02-05 Pfizer Inc Substituted bicyclolactam compounds
WO2009144554A1 (en) 2008-05-28 2009-12-03 Pfizer, Inc. Pyrazolospiroketone acetyl-c0a carboxylase inhibitors
JP2011521940A (ja) 2008-05-28 2011-07-28 ファイザー・インク ピラゾロスピロケトンアセチルＣｏＡカルボキシラーゼ阻害剤
EP2318370A1 (en) 2008-07-29 2011-05-11 Pfizer Inc. Fluorinated heteroaryls
AU2009286380B2 (en) 2008-08-28 2011-09-15 Pfizer Inc. Dioxa-bicyclo[3.2.1.]octane-2,3,4-triol derivatives
WO2010086820A1 (en) 2009-02-02 2010-08-05 Pfizer Inc. 4-amino-5-oxo-7, 8-dihydropyrimido [5,4-f] [1,4] oxazepin-6 (5h) -yl) phenyl derivatives, pharmaceutical compositions and uses thereof
PL2406253T3 (pl) 2009-03-11 2013-10-31 Pfizer Pochodne benzofuranylu jako inhibitory glukokinazy
CA2754685A1 (en) 2009-03-11 2010-09-16 Pfizer Inc. Substituted indazole amides
EP2408780A2 (en) 2009-03-20 2012-01-25 Pfizer Inc. 3-oxa-7-azabicycloý3.3.1¨nonanes
MX2011011516A (es) * 2009-04-30 2011-11-18 Astex Therapeutics Ltd Compuestos farmaceuticos.
JP2012526096A (ja) 2009-05-08 2012-10-25 ファイザー・インク Ｇｐｒ１１９調節因子
CA2759843A1 (en) 2009-05-08 2010-11-10 Pfizer Inc. Gpr 119 modulators
NZ596467A (en) 2009-06-05 2014-01-31 Pfizer L- ( piperidin-4-yl) -pyrazole derivatives as gpr 119 modulators
WO2011005611A1 (en) 2009-07-09 2011-01-13 Merck Sharp & Dohme Corp. Neuromedin u receptor agonists and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
MD20140103A2 (ro) 2015-01-31
HK1206735A1 (en) 2016-01-15
US9296745B2 (en) 2016-03-29
IL234928A0 (en) 2014-12-31
AP2014007953A0 (en) 2014-09-30
CA2869587A1 (en) 2013-10-10
AU2013245353A1 (en) 2014-09-25
GT201400213A (es) 2015-06-02
EP2834238B1 (en) 2017-02-01
US20150087585A1 (en) 2015-03-26
CN104334557A (zh) 2015-02-04
PH12014502057A1 (en) 2014-12-10
WO2013150416A1 (en) 2013-10-10
ECSP14021251A (es) 2015-09-30
JP2015515472A (ja) 2015-05-28
EP2834238A1 (en) 2015-02-11
MA201637385A2 (fr) 2016-03-31
KR20140137404A (ko) 2014-12-02
CU20140115A7 (es) 2014-11-27
DOP2014000225A (es) 2014-11-30
MA37385B1 (fr) 2019-09-30
CR20140468A (es) 2014-11-17
TN2014000419A1 (fr) 2016-03-30
EA201400990A1 (ru) 2015-01-30
CL2014002541A1 (es) 2015-01-16
MA37385A3 (fr) 2016-12-30
NI201400120A (es) 2015-11-18
PE20142164A1 (es) 2014-12-27
SG11201405477XA (en) 2014-11-27
CO7160030A2 (es) 2015-01-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2834238B1 (en) Diacylglycerol acyltransferase 2 inhibitors
US20240140937A1 (en) Diacylglycerol Acyl Transferase 2 Inhibitors
US10188653B2 (en) Diacylglycerol acyltransferase 2 inhibitors
JP2022532145A (ja) 置換ベンズイミダゾロン化合物
EP4444708A1 (en) Melanocortin 4 receptor antagonists and uses thereof
WO2017076484A1 (en) 1,4-dicarbonyl-piperidyl derivatives
OA17143A (en) Diacylglycerol acyltransferase 2 inhibitors
CN118369317A (zh) 黑皮质素4受体拮抗剂及其用途
EA048136B1 (ru) Спиросоединения в качестве антагонистов рецептора меланокортина 4 и их применения
OA19183A (en) Diacylglycerol Acyltransferase 2 inhibitors.