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MX2014006674A - Inhibidores de tirosina cinasa de bruton. - Google Patents

Inhibidores de tirosina cinasa de bruton.

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Publication number
MX2014006674A
MX2014006674A MX2014006674A MX2014006674A MX2014006674A MX 2014006674 A MX2014006674 A MX 2014006674A MX 2014006674 A MX2014006674 A MX 2014006674A MX 2014006674 A MX2014006674 A MX 2014006674A MX 2014006674 A MX2014006674 A MX 2014006674A
Authority
MX
Mexico
Prior art keywords
butyl
pyridin
tert
fluoro
phthalazin
Prior art date
Application number
MX2014006674A
Other languages
English (en)
Inventor
Francisco Javier Lopez-Tapia
Yan Lou
Christine Brotherton-Pleiss
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of MX2014006674A publication Critical patent/MX2014006674A/es

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Abstract

Esta solicitud describe compuestos de acuerdo con la Fórmula genérica I: en la que las variables se definen como se describió en el presente documento, y que inhiben la Btk. Los compuestos descritos en el presente documento son útiles para modular la actividad de Btk y tratar enfermedades asociadas con la excesiva actividad Btk. Los compuestos son útiles además para el tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunes asociadas con la proliferación aberrante de células B, tales como la artritis reumatoide. También se describen composiciones que contienen compuestos de fórmula I y por lo menos un portador, diluyente o excipiente.

Description

INHIBIDORES DE TIROSINA CINASA DE BRUTON Campo de la invención La presente invención se refiere al uso de nuevos derivados que inhiben Btk y son útiles para el tratamiento de enfermedades autoinmunes e inflamatorias causadas por la activación de células B aberrantes. Los compuestos nuevos descritos en este documento son útiles para el tratamiento de artritis reumatoide y asma.
Antecedentes de la invención Las proteínas cinasas constituyen una de las mayores familias de enzimas humanas y regulan muchos procesos de señalización diferentes mediante la adición de grupos fosfato a las proteínas (T. Hunter, Cell 1987 50:823-829). Específicamente, las proteínas de fosforilato de tirosina cinasas en el resto fenólico de los residuos de tirosina. La familia de la tirosina cinasa incluye miembros que controlan el crecimiento celular, la migración y la diferenciación. Actividad de cinasa anormal ha sido implicada en una variedad de enfermedades humanas incluyendo cáncer, enfermedades autoinmunes e inflamatorias. Puesto que las proteínas cinasas son algunos de los principales reguladores de la señalización celular que proporcionan un objetivo para modular la función celular con inhibidores pequeños de la cinasa molecular y por lo tanto hacen buenos objetivos de diseño de fármacos. Además Ref.:248392 del tratamiento de procesos patológicos mediados por la cinasa, inhibidores selectivos y eficaces de la actividad de cinasa también son útiles para la investigación de procesos de señalización celular y la identificación de otros objetivos celulares de interés terapéutico.
Hay buena evidencia de que las células B desempeñan un papel clave en la patogénesis de enfermedades autoinmunes y/o inflamatorias. Terapias basadas en proteínas que agotan las células B tales como Rituxan son eficaces contra las enfermedades inflamatorias accionadas por autoanticuerpos tales como artritis reumatoide (Rastetter et al. Annu Rev Med 2004 55:477). Por lo tanto los inhibidores de las proteínas cinasas que juegan un papel en la activación de células B deben ser agentes terapéuticos útiles para patología de enfermedades mediada por células B tales como la producción de autoanticuerpos.
La señalización a través del receptor de células B (BCR, por sus siglas en inglés) controla una gama de respuestas de células B, incluyendo la proliferación y la diferenciación en células que producen anticuerpos maduros. El BCR es un punto regulador clave para la actividad de células B y la señalización aberrante puede causar la proliferación de células B desreguladas y la formación de autoanticuerpos patógenos que conducen a múltiples enfermedades autoinmunes y/o inflamatorias. La tirosina cinasa de Bruton (Btk, por sus siglas en inglés) es una cinasa no asociada con BCR que es proximal de la membrana e inmediatamente posterior de BCR. La falta de Btk se ha mostrado que bloquea la señalización de BCR y por lo tanto, la inhibición de Btk podría ser un acercamiento terapéutico útil para bloquear procesos de enfermedad mediados por células B.
Btk es un miembro de la familia Tec de tirosina cinasas, y se ha mostrado que es un regulador crítico del desarrollo de células B tempranas y la activación y la supervivencia de células B maduras (Inmunidad 1995 3:283 Khan et al;. Ellmeier et al. J. Exp. Med. 2000 192: 1611). La mutación de Btk en los seres humanos lleva a la condición agamaglobulinemia ligada al X (XLA) (revisada en Rosen et al. New England. J. Med 1995 333:431 y Lindvall et al. Immunol . Rev. 2005 203:200) . Estos pacientes están inmunocomprometidos y muestran maduración deteriorada de las células B, inmunoglobulina disminuida y niveles de células B periféricos, respuestas inmunes independientes de células T disminuidas, así como la movilización de calcio atenuada después de la estimulación del BCR.
La evidencia de un papel de la Btk en las enfermedades autoinmunes e inflamatorias también ha sido proporcionada por los modelos de ratón deficientes de Btk. En modelos murinos preclínicos de lupus sistémico eritematoso (LES) , los ratones deficientes de BTK muestran marcada mejora de progresión de la enfermedad. Además, los ratones deficientes en Btk son resistentes a la artritis inducida por colágeno (Jansson and Holmdahl Clin. Exp. Immunol. 1993 94:459) . Un inhibidor de Btk selectivo ha demostrado la eficacia dependiente de la dosis en un modelo de artritis de ratón (Z. Pan et al., Chem. Med. Chem. 2007 2:58-61) .
Btk también es expresada por células distintas de las células B que pueden estar involucradas en los procesos de la enfermedad. Por ejemplo, Btk es expresada por mastocitos y la médula ósea deficiente de Btk derivada de mastocitos demostró de s gr anu 1 a c ión inducida por el antigeno deteriorado (Iwaki et al. J. Biol. Chem. 2005 280:40261) . Esto muestra que Btk podría ser útil para tratar respuestas de mastocitos patológicos tales como alergia y asma. También monocitos de pacientes de XLA, en los que la actividad Btk está ausente, muestran la producción de TNF alfa disminuida después de la estimulación (Horwood et al J. Exp. Med. 197: 1603, 2003) . Por lo tanto la inflamación mediada por TNF alfa podría ser modulada por pequeños inhibidores de Btk moleculares. También, Btk se ha informado que desempeña un papel en la apoptosis (Islam and Smith Immunol. Rev. 2000 178:49) y por lo tanto los inhibidores de Btk serían útiles para el tratamiento de ciertos linfomas de células B y leucemias (Feldhahn et al. J. Exp Med 2005 201:1837) .
Sumario de la invención La presente solicitud proporciona los compuestos inhibidores de Btk de Fórmula I, métodos de uso de los mismos, como se describe en el presente documento a continuación: en donde: cada X es CH o Q es CH o N; A es en donde: un X1 es N y el resto son CH, o cada X1 es CH; un X2 es N y el resto son CH, o cada X2 es CH, o un X2 es N y el resto son CH o CNH2; R es H, -R1, -R^R^R3, -R1-R3, o -R2-R3; R1 es arilo, heteroarilo, heteroarilo biciclico, cicloalquilo, heterocicloalquilo, o heterociclo bicíclico, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más alquilo inferior, alquilo hidroxi, hidroxi alquilo inferior, alcoxi inferior, halo, nitro, amino, amido, ciano, oxo, o haloalquilo inferior; R2 es -C(=0), -C(=0)0, -C(=0)NR2', -NHC (=0)0, -C(R2')2, -O, -S, -C(=NH)NR2' o -S(=0)2; cada R2' es independientemente H o alquilo inferior; R3 es H o R4; R4 es alquilo inferior, haloalquilo inferior, alcoxi inferior, amino, alquilo inferior amino, cicloalquilo amino, dialquilamino inferior amino, arilo, arilalquilo, alquilarilo, heteroarilo, alquilo inferior heteroarilo, heteroarilo alquilo inferior, cicloalquilo, alquilo inferior cicloalquilo, cicloalquilo alquilo inferior, heterocicloalquilo, alquilo inferior heterocicloalquilo, heterocicloalquilo alquilo inferior, cicloalquilo bicíclico, heterocicloalquilo bicíclico, espirocicloalquilo, espiroheterocicloalquilo, o espiroheterocicloalquilo bicíclico, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más alquilo inferior, halo, alquilo inferior amino, dialquilo inferior amino, hidroxi, hidroxi alquilo inferior, alcoxi inferior, alcanoilo inferior, halo, nitro, amino, amido, acilo, ciano, oxo, sulfonilo, alquilo inferior sulfonilo, guanidino, hidroxil amino, carboxi, carbamoilo, carbamato, halo alcoxi inferior, heterocicloalquilo, o halo alquilo inferior, en donde dos grupos alquilo inferior juntos pueden formar un anillo; Y es H, halo, Y1, Y2, o Y3; Y1 es alquilo inferior, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de haloalquilo inferior, halógeno, hidroxi, amino, ciano, y alcoxi inferior; Y2 es cicloalquilo inferior, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de alquilo inferior, haloalquilo inferior, halógeno, hidroxi, amino, ciano, y alcoxi inferior; y Y3 es amino, opcionalmente sustituido con uno o más alquilo inferior, alcoxi alquilo inferior, o hidroxi alquilo inferior; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
La solicitud proporciona un método para el tratamiento de una condición inflamatoria y/o autoinmune que comprende administrar a un paciente en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto inhibidor de Btk de Fórmula I .
La solicitud proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto inhibidor de Btk de cualquiera de Fórmula I, mezclado con por lo menos un portador, excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptable.
Descripción detallada de la invención Definiciones La frase "una" entidad tal como se utiliza aquí se refiere a una o más de esa entidad; por ejemplo, un compuesto se refiere a uno o más compuestos o por lo menos un compuesto. Como tal, los términos "uno" (o "una"), "uno o más", y "por lo menos uno" pueden utilizarse indistintamente en el presente documento.
La frase "como se definió en este documento anteriormente" se refiere a la definición más amplia para cada grupo según lo dispuesto en el Sumario de la invención o la reivindicación más amplia. En todas las otras modalidades que se proporcionan a continuación, los sustituyentes que pueden estar presentes en cada modalidad y que no están definidos de forma explícita mantienen la definición más amplia proporcionada en el Sumario de la Invención.
Tal como se utiliza en esta descripción, ya sea en una frase de transición o en el cuerpo de la reivindicación, los términos "comprenden" y "que comprende" deben ser interpretados como que tienen un significado abierto. Es decir, los términos deben ser interpretados como sinónimos con las frases "que tiene por lo menos" o "que incluye por lo menos" . Cuando se utiliza en el contexto de un proceso, el término "que comprende" significa que el proceso incluye por lo menos los pasos citados, pero puede incluir pasos adicionales. Cuando se utiliza en el contexto de un compuesto o composición, el término "que comprende" significa que el compuesto o composición incluye por lo menos las características o componentes citados, pero puede incluir también características o componentes adicionales.
Tal como se utiliza aquí, a menos que se indique específicamente lo contrario, la palabra "o" se utiliza en el sentido "inclusivo" de "y/o" y no el sentido "exclusivo" de "ya sea/o" .
El término "independientemente" se usa aquí para indicar que una variable se aplica en cualquier instancia sin tener en cuenta la presencia o ausencia de una variable que tiene la misma o una definición diferente dentro del mismo compuesto. Por lo tanto, en un compuesto en el que R" aparece dos veces y es definido como "independientemente carbono o nitrógeno" , ambos "s pueden ser carbono, ambos R"s pueden ser nitrógeno, o un R" puede ser carbono y el otro nitrógeno.
Cuando cualquier variable aparece más de una vez en cualquier resto o fórmula que representa y describe compuestos empleados o reivindicados en la presente invención, su definición en cada aparición es independiente de su definición en cualquier otra aparición. También, las combinaciones de sustituyentes y/o variables son permisibles sólo si tales compuestos resultan en compuestos estables.
Los símbolos "*" en el extremo de un enlace o " " dibujados a través de cada uno se refieren al punto de unión de un grupo funcional u otro resto químico al resto de la molécula de la que es una parte. Así, por ejemplo: MeC(=0)0R4 en donde R= o MeC(=0) Un enlace dibujado en el sistema de anillo (en oposición al conectado en un vértice distinto) indica que el enlace puede estar unido a cualquiera de los átomos del anillo apropiados.
El término "opcional" u "opcionalmente" como se usa en el presente documento significa que un suceso o circunstancia descrito posteriormente puede, pero no necesita, ocurrir y que la descripción incluye casos en los que se produce el evento o circunstancia y casos en los que no lo hace. Por ejemplo, "opcionalmente sustituido" significa que el resto opcionalmente sustituido puede incorporar un átomo de hidrógeno o un sustituyente .
La frase "enlace opcional" significa que el enlace puede o no puede estar presente, y que la descripción incluye enlaces sencillos, dobles, o triples. Si un sustituyente se designa para ser un "enlace" o "ausente" , los átomos unidos a los sustituyentes son entonces conectados directamente.
El término "aproximadamente" se utiliza aquí en el sentido de de manera aproximada, en la región de, más o menos, o alrededor. Cuando el término "aproximadamente" se utiliza junto con un intervalo numérico, modifica ese intervalo extendiendo los límites por encima y por debajo de los valores numéricos establecidos. En general, el término "aproximadamente" se utiliza aquí para modificar un valor numérico por encima y por debajo del valor indicado por una variación de 20%.
Ciertos compuestos de Fórmulas I pueden presentar tautomerismo . Compuestos tautoméricos pueden existir como dos o más especies interconvertibles. Tautómeros prototrópicos resultan de la migración de un átomo de hidrógeno unido covalentemente entre dos átomos . Los tautómeros generalmente existen en equilibrio e intentan aislar un tautómero individual normalmente producen una mezcla cuyas propiedades químicas y físicas son consistentes con una mezcla de compuestos. La posición del equilibrio es dependiente de las características químicas dentro de la molécula. Por ejemplo, en muchos aldehidos alifáticos y cetonas, tales como acetaldehído, la forma ceto predomina mientras que; en fenoles, predomina la forma enol . Tautómeros prototrópicos comunes incluyen tautómeros ceto/enol (-C(=0)-CH- ? -C(-OH)=CH-), amida/ácido imídico (-C(=0)-NH- ? -C(-0H)=N-) y amidina (-C(=NR)-NH- ? -C ( -NHR) =N- ) . Los dos últimos son particularmente comunes en anillos heteroarilo y heterocíclicos y la presente invención abarca todas las formas tautoméricas de los compuestos.
Los términos técnicos y científicos usados en este documento tienen el significado comúnmente entendido por una persona experimentada en la técnica a la que pertenece la presente invención, a menos que se defina lo contrario. Se hace referencia en este documento a diversas metodologías y materiales conocidos por las personas experimentadas en la técnica. Trabajos de referencia estándar que establecen los principios generales de la farmacología incluyen Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Terapeutics, 10a ed., McGraw Hill Companies Inc., Nueva York (2001). Cualquier material y/o métodos apropiados conocidos por las personas experimentadas en la técnica pueden ser utilizados en la elaboración de la presente invención. Sin embargo, se describen los materiales y métodos preferidos. Materiales, reactivos y similares a los que se hacen referencia en la siguiente descripción y ejemplos se pueden obtener de fuentes comerciales, a menos que se indique lo contrario.
Las definiciones que se describen en este documento pueden ser agregadas para formar combinaciones químicamente relevantes, como "heteroalquilarilo" , "haloalquilheteroarilo" , "arilalquilheterociclilo" , "alquilcarbonilo" , "alcoxialquilo" , y similares. Cuando el término "alquilo" se utiliza como un sufijo después de otro término, como en "fenilalquilo" o "hidroxialquilo" , este está previsto para referirse a un grupo alquilo, como se definió anteriormente, que está sustituido con uno a dos sustituyentes seleccionados del otro grupo nombrado específicamente. Así, por ejemplo, "fenilalquilo" se refiere a un grupo alquilo que tiene uno a dos sustituyentes fenilo, y así incluye bencilo, feniletilo, y bifenilo. Un "alquilaminoalquilo" es un grupo alquilo que tiene de uno a dos sustituyentes alquilamino. "Hidroxialquilo" incluye 2-hidroxietilo, 2-hidroxipropilo, 1- (hidroximetilo) -2-metilpropilo, 2-hidroxibutilo, 2 , 3 -dihidroxibutilo, 2- (hidroximetilo) , 3 -hidroxipropilo, etc. De acuerdo con ello, tal como se utiliza aquí, el término "hidroxialquilo" se utiliza para definir un subconjunto de grupos heteroalquilo definidos a continuación. El término - (ar) alquilo se refiere tanto a un grupo alquilo no sustituido o un grupo aralquilo. El término (hetero) arilo o (het)arilo se refiere tanto a un grupo arilo o un grupo heteroarilo.
El término "espirocicloalquilo" , como se usa aquí, significa un grupo cicloalquilo espirocxclico, tal como, por ejemplo, espiro [3 , 3] heptano . El término espiroheterocicloalquilo, como se usa aquí, significa un heterocicloalquilo espirocíclico, tal como, por ejemplo, espiro 2 , 6-diaza [3.3] heptano .
El término "acilo" tal como se utiliza aquí significa un grupo de fórmula -C(=0)R en donde R es hidrógeno o alquilo inferior tal como se define en el presente documento. El término "alquilcarbonilo" , como se utiliza aquí significa un grupo de fórmula C(=0) R en donde R es alquilo como se define en el presente documento. El término acilo Ci-6 se refiere a un grupo C(=0)R que contiene 1-6 átomos de carbono. El término "arilcarbonilo" tal como se utiliza en el presente documento significa un grupo de fórmula C(=0)R en donde R es un grupo a ilo; el término "benzoilo" como se usa aquí un grupo "arilcarbonilo" en donde R es fenilo.
El término "éster" tal como se utiliza aquí significa un grupo de fórmula -C(=0)OR en donde R es alquilo inferior como se define aquí.
El término "alquilo" tal como se utiliza aquí significa un residuo de hidrocarburo de cadena no ramificada o ramificada, saturada, monovalente que contiene de 1 a 10 átomos de carbono. El término "alquilo inferior" significa un residuo de hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de carbono. "Alquilo Ci-i0" tal como se utiliza aquí, se refiere a un alquilo compuesto de 1 a 10 átomos de carbono. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, pero no se limitan a, grupos alquilo inferior incluyen metilo, etilo, propilo, i-propilo, n-butilo, i-butilo, t-butilo o pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, heptilo, y octilo .
Cuando el término "alquilo" se utiliza como un sufijo después de otro término, como en "fenilalquilo" , o "hidroxialquilo" , este está previsto para hacer referencia a un grupo alquilo, como se definió anteriormente, que está sustituido con uno a dos sustituyentes seleccionados del otro grupo nombrado específicamente. Así, por ejemplo, "fenilalquilo" indica el radical R'R"-, en donde R' es un radical fenilo, y R" es un radical alquileno tal como se define en el presente documento con el entendimiento de que el punto de unión del resto fenilalquilo estará en el radical alquileno. Ejemplos de radicales arilalquilo incluyen, pero no se limitan a, bencilo, feniletilo, 3-fenilpropilo. Los términos "arilalquilo" o "aralquilo" se interpretan de manera similar, excepto R' es un radical arilo. Los términos " (het) arilalquilo" o " (het) aralquilo" se interpretan de forma similar excepto que R' es opcionalmente un arilo o un radical heteroarilo.
Los términos "haloalquilo" o "halo-alquilo inferior" o "haloalquilo inferior" se refiere a un residuo hidrocarburo de cadena lineal o ramificada que contiene de 1 a 6 átomos de carbono en donde uno o más átomos de carbono están sustituidos con uno o más átomos de halógeno.
El término "alquileno" o "alquilenilo" tal como se utiliza aquí significa un radical hidrocarburo divalente lineal saturado de 1 a 10 átomos de carbono (por ejemplo, (a¾)?) o un radical de hidrocarburo divalente saturado ramificado de 2 a 10 átomos de carbono (por ejemplo, -CHe- o -C¾CH(i-Pr)CH2-) , a menos que se indique lo contrario. Excepto en el caso de metileno, las valencias abiertas de un grupo alquileno no están unidas al mismo átomo. Ejemplos de radicales alquileno incluyen, pero no se limitan a, metileno, etileno, propileno, 2-metil-propileno, 1 , 1-dimetil-etileno, butileno, 2-etilbutileno .
El término "alcoxi" como se usa aquí significa un grupo -O-alquilo, en donde alquilo es como se definió anteriormente tal como metoxi, etoxi, n-propiloxi, i-propiloxi, n-butiloxi, i-butiloxi, t-butiloxi, pentiloxi, hexiloxi, incluyendo sus isómeros. "Alcoxi inferior" tal como se utiliza aquí significa un grupo alcoxi con un grupo "alquilo inferior" tal como se definió anteriormente. "Alcoxi Ci-io" tal como se utiliza aquí se refiere a un -O-alquilo en donde alquilo es Ci-io · El término "PCy3" se refiere a una fosfina trisustituida con tres restos cíclicos.
Los términos "haloalcoxi" o "halo alcoxi -inferior" o "haloalcoxi inferior" se refieren a un grupo alcoxi inferior, en donde uno o más átomos de carbono están sustituidos con uno o más átomos de halógeno.
El término "hidroxialquilo" , como se usa aquí, significa un radical alquilo como se define aquí en donde uno a tres átomos de hidrógeno en átomos de carbono diferentes es/son sustituidos por grupos hidroxilo.
Los términos "alquilsulfonilo" y "arilsulfonilo" tal como se utiliza aquí, se refiere a un grupo de fórmula -S(=0)2R en donde R es alquilo o arilo respectivamente y alquilo y arilo son como se definen en el presente documento. El término "heteroalquilsulfonilo" tal como se utiliza aquí, se refiere a un grupo de fórmula -S(=0)2R en donde R es "heteroalquilo" tal como se define en el presente documento.
Los términos "alquilsulfonilamino" y "arilsulfonilamino" tal como se utiliza aquí, se refiere a un grupo de fórmula -NR'S(=0)2R en donde R es alquilo o arilo, respectivamente, R' es hidrógeno o alquilo Ci-3/ y alquilo y arilo son como se definen en el presente documento.
El término "cicloalquilo" tal como se utiliza aquí, se refiere a un anillo carbocíclico saturado que contiene de 3 a 8 átomos de carbono, en este caso ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo o ciclooctilo. "Cicloalquilo C3-7" tal como se utiliza aquí, se refiere a un cicloalquilo inferior, compuesto de 3 a 7 carbonos en el anillo carbocíclico.
El término alquilo-carboxi tal como se utiliza aquí, se refiere a un resto alquilo en donde un átomo de hidrógeno ha sido sustituido con un carboxilo con el entendimiento de que el punto de unión del radical heteroalquilo es a través de un átomo de carbono. El término "carboxi" o "carboxilo" se refiere a un resto -C02H.
El término "heteroarilo" o "heteroaromático" , como se usa en este documento significa un radical monocíclico o bicíclico de 5 a 12 átomos de anillo, que tiene por lo menos un anillo aromático o parcialmente insaturado que contiene de cuatro a ocho átomos por anillo, que incorpora uno o más de heteroátomos N, 0, o S, los átomos de anillo restantes son carbono, con el entendimiento de que el punto de unión del radical heteroarilo estará en un anillo aromático o parcialmente insaturado. Como es bien conocido para las personas experimentadas en la técnica, los anillos heteroarilo tienen menos carácter aromático que todas sus contrapartes de carbono. Por lo tanto, para los fines de la invención, un grupo heteroarilo necesita sólo tener algún grado de carácter aromático. Los ejemplos de restos heteroarilo incluyen heterociclos aromáticos monocíclicos que tienen 5 a 6 átomos del anillo y de 1 a 3 heteroátomos incluyen, pero no se limitan a, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, oxazinilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, 4 , 5-dihidro-oxazolilo, 5 , 6 -dihidro-4H- [1, 3] oxazolilo, isoxazol, tiazol, isotiazol, triazolina, tiadiazol y oxadiaxolina que opcionalmente puede estar sustituido con uno o más, preferiblemente uno o dos sustituyentes seleccionados de hidroxi, ciano, alquilo, alcoxi, tio, haloalcoxi inferior, alquiltio, halo, haloalquilo inferior, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo, halógeno, amino, alquilamino, dialquilamino, aminoalquilo, alquilaminoalquilo, y dialquilaminoalquilo, nitro, alcoxicarbonilo y carbamoilo, alquilcarbamoilo, dialquilcarbamoilo, arilcarbamoilo, alquilcarbonilamino y arilcarbonilamino . Ejemplos de restos bicíclicos incluyen, pero no se limitan a, 4, 5, 6, 7-tetrahidro-pirazolo [1, 5-a]pirazin-2-ilo, quinolinilo, iscquinolinilo, benzofurilo, benzotiofenilo, benzoxazol, bencisoxazol, benzotiazol, naftiridinilo, 5 , 6 , 7, 8-tetrahidro- [1 , 6] naftiridinilo, y benzisotiazol . Los restos bicíclicos pueden estar opcionalmente sustituidos en cualquiera de los anillos, sin embargo, el punto de unión está en un anillo que contiene un heteroátomo.
El término "heterociclilo" , "heterocicloalquilo" o "heterociclo" , como se utiliza aquí significa un radical cíclico saturado monovalente, que consiste de uno o más anillos, preferiblemente de uno a dos anillos, incluyendo sistemas de anillos espirocíclicos , de tres a ocho átomos por anillo, que incorpora uno o más heteroátomos en el anillo (seleccionados de N, 0 o S (0) 0-2) / y que opcionalmente pueden estar sustituidos independientemente con uno o más, preferiblemente uno o dos sustituyentes seleccionados de hidroxi, oxo, ciano, alquilo inferior, alcoxi inferior, haloalcoxi inferior, alquiltio, halo, haloalquilo inferior, hidroxialquilo, nitro, alcoxicarbonilo, amino, alquilamino, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, alquilaminosulfonilo, arilaminosulfonilo, alquilsulfonilamino, arilsulfonilamino, alquilamino carbonilo, arilaminocarbonilo, alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, y formas iónicas de los mismos, a menos que se indique lo contrario. Ejemplos de radicales heterocíclicos incluyen, pero no se limitan a, morfolinilo, piperazinilo, piperidinilo, azetidinilo, pirrolidinilo, hexahidroazepinilo, oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, oxazolidinilo, tiazolidinilo, isoxazolidinilo, tetrahidropiranilo, tiomorfolinilo, quinuclidinilo e imidazolinilo, y formas iónicas de los mismos. Ejemplos también pueden ser bicíclicos, tal como, por ejemplo, 3,8-diaza-biciclo [3.2.1] octano, 2 , 5-diaza-biciclo [2.2.2] octano, o octahidro-pirazino [2 , 1-c] [1,4] oxazina.
Inhibidores de Btk Esta solicitud está relacionada con la solicitud de patente Estadounidense No Ser. 12/316,343, presentada el 11 de diciembre de 2008, la patente Estadounidense 7,902,194, presentada el 24 de junio de 2009, la solicitud de patente Estadounidense No Ser. 12/460,226, presentada el 15 de julio del 2009, solicitud de patente Estadounidense No Ser. 12/711,312, presentada el 24 de febrero de 2010 y la solicitud de patente Estadounidense No Ser. 12/978,187, presentada el 10 de enero de 2011.
La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I, I en donde : cada X es CH o Q es CH o N; A es en donde : un X1 es N y el resto son CH, o cada X1 es CH; un X2 es N y el resto son CH, o cada X2 es CH, o un X2 es N y el resto son CH o CNH2; R es H, -R1, R1-R2-R3, -R1-R3 , o-R2-R3; R1 es arilo, heteroarilo, heteroarilo bicíclico, cicloalquilo, heterocicloalquilo, o heterociclo bicíclico, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más alquilo inferior, hidroxi, alquilo hidroxi alquilo inferior, alcoxi inferior, halo, nitro, amino, amido, ciano, oxo, o haloalquilo inferior; R2 es -C(=0), -C(=0)0, -C(=0)NR2', - HC(=0)0, -C(R ')2, -0, -S, -C(=NH)NR 'o -S(=0)2; cada R2' es independientemente H o alquilo inferior; R3 es H o R4; R4 es alquilo inferior, haloalquilo inferior, alcoxi inferior, amino, alquilo inferior amino, cicloalquil amino, dialquilamino inferior, arilo, arilalquilo, alquilarilo, heteroarilo, alquilo inferior heteroarilo, heteroarilo alquilo inferior, cicloalquilo, alquilo inferior cicloalquilo, cicloalquilo alquilo inferior, heterocicloalquilo, alquilo inferior heterocicloalquilo, heterocicloalquilo alquilo inferior, cicloalquilo bicíclico, heterocicloalquilo bicíclico, espirocicloalquilo, espiroheterocicloalquilo, o espiroheterocicloalquilo bicíclico, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más alquilo inferior, halo, alquilo inferior amino, dialquilo inferior amino, hidroxi, hidroxi alquilo inferior, alcoxi inferior, alcanoilo inferior, halo, nitro, amino, amido, acilo, ciano, oxo, sulfonilo, alquilo inferior sulfonilo, guanidino, hidroxil amino, carboxi , carbamoilo, carbamato, halo alcoxi inferior, heterocicloalquilo, o halo alquilo inferior, en donde dos grupos alquilo inferior pueden formar juntos un anillo; Y es H, halo, Y1, Y2, o Y3; Y1 es alquilo inferior, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de haloalquilo inferior, halógeno, hidroxi, amino, ciano, y alcoxi inferior; Y2 es cicloalquilo inferior, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de alquilo inferior, haloalquilo inferior, halógeno, hidroxi, amino, ciano, y alcoxi inferior; y Y3 es amino, opcionalmente sustituido con uno o más alquilo inferior, alcoxi alquilo inferior, o hidroxi alquilo inferior; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula que A es La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula que A es La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula que A es La solicitud prop ompuesto de Fórmula donde A es La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I, en La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I, en donde A es La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I, en donde A es La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula donde A es La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I, en donde A es La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I, en donde R es -R^R^R3.
La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I, en donde R1 es piridilo, cada X es CH, y Q es N.
La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I, en donde R1 es piridilo, un X es N, y Q es N.
La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I, en donde R2 es -C(=0) o CH2.
La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I, en donde R es -R1-R3, cada X es CH, y Q es N.
La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I seleccionado del grupo que consiste de: 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] - [1,2, ] triazolo [1, 5-a]piridin-6-il}-fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -imidazo [1, 2-b]piridazin-6-il}-fenil) -2H-f talaz in- 1 -ona ; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [5- (4-isopropil-piperazin-l-il) -piridin-2-ilamino] -imidazo [1, 2-b]piridazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [5- (4-metil- piperazin-1-ilmetil) -piridin-2-ilamino] -imidazo [1,2-b]piridazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-Butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{6- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -piridazin-4-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{2- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -piridin-4-il}-fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [4- (morfolina-4-carbonil) -fenilamino] -imidazo[l,2-a]pirazin-6-il}-fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [4- (1-metil-piperidin-4-il) -fenilamino] -imidazo [1, 2-a]pirazin-6-il}-fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [4- (morfolina-4-carbonil) -fenilamino] -imidazo[l,2-a]piridin-6-il}-fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -imidazo[l,2-a]piridin-6-il}-fenil) -2H-ftalazin-1-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- (1' -metil-1'2'3'4'5'6' -hexahidro- [3,4']bipiridin-6-ilamino] -imidazo[1,2-a]piridin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{6- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -piridin-4-il}-fenil) -2H-ftalazin-l-ona; y 6-tert-Butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -quinolin-6-il}-fenil) -2H-ftalazin-l-ona.
La solicitud proporciona un compuesto de Fórmula I para uso como sustancia terapéuticamente activa.
La solicitud proporciona un método para el tratamiento de una condición inflamatoria y/o autoinmune que comprende administrar a un paciente en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de Fórmula I.
La solicitud proporciona un método para el tratamiento de artritis reumatoide que comprende administrar a un paciente en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de Fórmula I .
La solicitud proporciona un método para tratar el asma que comprende administrar a un paciente en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de Fórmula I.
La solicitud proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto de Fórmula I .
La solicitud proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto de Fórmula I, mezclado con por lo menos un portador excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptable.
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno inflamatorio.
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno autoinmune.
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de artritis reumatoide .
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de asma.
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I para el tratamiento de un trastorno inflamatorio.
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I para el tratamiento de un trastorno autoinmune .
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I para el tratamiento de artritis reumatoide.
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I para el tratamiento de asma.
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno inflamatorio.
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno autoinmune.
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I para la preparación de un medicamento para el tratamiento de artritis reumatoide.
La solicitud proporciona un uso del compuesto de fórmula I para la preparación de un medicamento para el tratamiento de asma .
La solicitud proporciona un compuesto de fórmula I para uso en el tratamiento de un trastorno inflamatorio.
La solicitud proporciona un compuesto de fórmula I para uso en el tratamiento de un trastorno autoinmune .
La solicitud proporciona un compuesto de fórmula I para uso en el tratamiento de artritis reumatoide.
La solicitud proporciona un compuesto de fórmula I para uso en el tratamiento de asma.
La solicitud proporciona un compuesto, método, o composición tal como se describe en el presente documento. Compuestos inhibidores de Btk Los ejemplos de compuestos representativos abarcados por la presente invención y dentro del alcance de la invención se proporcionan en la siguiente Tabla. Estos ejemplos y preparaciones que siguen se proporcionan para permitir a las personas experimentadas en la técnica entender más claramente y practicar la presente invención. No deben ser considerados como limitativos del alcance de la invención, sino como simplemente ilustrativos y representativos de la misma.
En general, la nomenclatura utilizada en esta Solicitud está basada en AUTONOMTM v.4.0, un sistema computarizado del Instituto Beilstein para la generación de la nomenclatura sistemática IUPAC. Si hay una discrepancia entre una estructura representada y un nombre dada a esa estructura, a la estructura representada se le debe atribuir más peso. Además, si la estereoquímica de una estructura o una porción de una estructura no están indicadas con, por ejemplo, líneas en negrita o discontinuas, la estructura o porción de la estructura debe interpretarse como que abarca todos los estereoisómeros de la misma.
La tabla 1 representa ejemplos de compuestos de piridazinona de acuerdo con la fórmula genérica I : 6-ter-butil-8-f luoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- [4--8 ( l-me il-piperidin-4 - il ) f enilamino] -imidazo [1,2- a]pirazin-6-il}-fenil) - 2H-f talazin-l-ona 6-ter-butil-8-f luoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- [4--9 (raorf olina-4-carbonil) - fenilamino] -imidazo [1, 2- a] piridin-6-il } -fenil) - 2H-f talazin-l-ona 6-ter-butil-8-fluoro-2- (2- hidroximetil-3-{8- [5--10 (morfolina-4-carbonil) - piridin-2-ilamino] - imidazo [1, 2-a]piridin-6-il}¦ fenil) -2H-ftalazin-l-ona 6-ter-butil-8-fluoro-2- (2- hidroximetil-3-{8- (1' -metil--11 1 ' 2 ' 3 ' 5 ' 6 ' - hexahidro- [3,4'] bipiridin-6-ilamino] - imidazo [1 , 2 -a] piridin-6 - il } - fenil) -2H-f talazin-l-ona PRECAUCION 5: Por favor observar: El orden alfabético de los prefijos es ignorado mientras se numera un anillo 6-1er-buti1-8 -fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {6- [5- 1-12 (morfolina-4 -carbonil) - piridin-2 - ilamino] - piridin-4-il } -fenil) -2H- ftalazin-l-ona 6-ter-Butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- { 8- [5- 1-13 (morfolina-4 -carbonil ) - piridin-2-ilamino] - quinolin-6-il}-fenil) -2H- ftalazin-l-ona Síntesis Esquemas de reacción de síntesis generales Esquema de reacción 1 Esquema de reacción 2 1, K3P04, Pd(dba)2, X-fos butanol, H20, 110 °C Esquema de reacción 3 Esquema de reacción 4 1. 1, Pd2(dba)3, X-fos KJCOJ, dioxano/agua reflujo 2. K2C03, MeOH Y = N, CH X = Cl, Br Esquema de reacción 5 Esquema de reacción 6 1. Pd2(dba)„X-fos Esquema de reacción 7 Esquema de reacción 8 En los esquemas de reacción anteriores, R puede ser H, -R1, -Rx-R2-R3, -R1-R3, o-R2-R3; R1 puede ser arilo, heteroarilo, heteroarilo bicíclico, cicloalquilo, heterocicloalquilo, o heterociclo bicíclico, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más alquilo inferior, hidroxi, hidroxi alquilo inferior, alcoxi inferior, halo, nitro, amino, amido, ciano, oxo, o haloalquilo inferior; R2 puede ser -C(=0), -C(=0)0, -C(=0)NR2', -NHC(=0)0, -C(R2')2, -O, -S, -C(=NH)NR2', o -S(=0)2; cada R2' puede ser independientemente H o alquilo inferior; R3 puede ser H o R4; R4 puede ser alquilo inferior, haloalquilo inferior, alcoxi inferior, amino, alquilo inferior amino, cicloalquil amino, dialquilamino inferior, arilo, arilalquilo, alquilarilo, heteroarilo, alquilo inferior heteroaril, heteroaril alquilo inferior, cicloalquilo, cicloalquil alquilo inferior, heterocicloalquilo, alquilo inferior heterocicloalquilo, heterocicloalquilo alquilo inferior, cicloalquilo bicíclico, heterocicloalquilo bicíclico, espirocicloalquilo, espiroheterocicloalquilo, o espiroheterocicloalquilo bicíclico, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más alquilo inferior, halo, alquilo inferior amino, dialquilo inferior amino, hidroxi , hidroxi alquilo inferior, alcoxi inferior, alcanoilo inferior, halo, nitro, amino, amido, acilo, ciano, oxo, sulfonilo, alquilo inferior sulfonilo, guanidino, hidroxil amino, carboxi, carbamoilo, carbamato, halo alcoxi inferior, heterocicloalquilo, o halo alquilo inferior, en donde dos grupos alquilo inferior juntos pueden formar un anillo.
COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS Y ADMINISTRACIÓN Los compuestos de la presente invención se pueden formular en una amplia variedad de formas de dosificación de administración oral y portadores. La administración oral puede ser en forma de tabletas, tabletas recubiertas, grageas, cápsulas de gelatina dura y blanda, soluciones, emulsiones, jarabes, o suspensiones. Los compuestos de la presente invención son eficaces cuando se administran por otras vías de administración incluyendo continua (goteo intravenoso) parenteral tópica, intramuscular, intravenosa, subcutánea, transdérmica (que puede incluir un agente de mejoramiento de penetración), bucal, nasal, inhalación y administración con supositorio, entre otras vías de administración. La manera preferida de administración es generalmente oral utilizando un régimen de dosificación conveniente diario que se puede ajustar de acuerdo con el grado de aflicción y de la respuesta del paciente al ingrediente activo.
Un compuesto o compuestos de la presente invención, así como sus sales farmacéuticamente utilizables, junto con uno o más excipientes, portadores o diluyentes, convencionales, pueden ser colocados en la forma de composiciones farmacéuticas y dosis unitarias. Las composiciones farmacéuticas y formas de dosificación unitarias pueden estar comprendidas de ingredientes convencionales en proporciones convencionales, con o sin compuestos o principios activos adicionales, y las formas de dosificación unitaria pueden contener cualquier cantidad efectiva apropiada del ingrediente activo correspondiente con el intervalo de dosificación diaria que pretende ser empleada. Las composiciones farmacéuticas se pueden emplear como sólidos, tales como tabletas o cápsulas rellenas, semisólidos, polvos, formulaciones de liberación sostenida, o líquidos tales como soluciones, suspensiones, emulsiones, elixires, o cápsulas rellenas para uso oral; o en la forma de supositorios para administración rectal o vaginal; o en la forma de soluciones inyectables estériles para uso parenteral . Una preparación típica contendrá desde aproximadamente 5% hasta aproximadamente 95% de compuesto o compuestos activos (peso/peso) . El término "preparación" o "forma de dosificación" pretende incluir tanto formulaciones sólidas como líquidas del compuesto activo y una persona experimentada en la técnica apreciará que un ingrediente activo puede existir en diferentes preparaciones dependiendo del órgano o tejido objetivo y en la parámetros de dosis y farmacocinéticos deseados.
El término "excipiente" tal como se utiliza aquí, se refiere a un compuesto que es útil en la preparación de una composición farmacéutica, generalmente segura, no tóxica y ni biológicamente ni de otro modo indeseable, e incluye excipientes que son aceptables para uso veterinario así como para uso farmacéutico humano. Los compuestos de esta invención se pueden administrar solos pero generalmente se administrarán en mezcla con uno o más excipientes farmacéuticos, diluyentes o portadores apropiados seleccionados con respecto a la vía prevista de administración y la práctica farmacéutica estándar.
"Farmacéuticamente aceptable" significa que es útil en la preparación de una composición farmacéutica que es generalmente segura, no tóxica, y ni biológicamente ni de otra manera indeseable e incluye que es aceptable para uso veterinario así como uso farmacéutico humano.
Una forma de "sal farmacéuticamente aceptable" de un ingrediente activo también puede conferir inicialmente una propiedad farmacocinética deseable en el ingrediente activo que en la forma no salina estaba ausente, y puede afectar incluso positivamente la farmacodinámica del ingrediente activo con respecto a su actividad terapéutica en el cuerpo. La frase "sal farmacéuticamente aceptable" de un compuesto significa una sal que es farmacéuticamente aceptable y que posee la actividad farmacológica deseada del compuesto original. Tales sales incluyen: (1) sales de adición de ácido, formadas con ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, y similares; o formadas con ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido propiónico, ácido hexanoico, ácido ciclopentanopropiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido 3- (4-hidroxibenzoil) benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 1,2-etano-disulfónico, ácido 2 -hidroxietanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido 4-clorobencenosulfónico, ácido 2-naftalenosulfónico, ácido 4 -toluenosulfónico, ácido canforsulfónico, ácido 4-metilbiciclo [2.2.2] oct-2-eno-l-carboxílico, ácido glucoheptónico, ácido 3 -fenilpropiónico, ácido trimetilacético, ácido butilacético terciario, ácido lauril sulfúrico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido hidroxinaf oico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido mucónico, y similares; o (2) sales formadas cuando un protón ácido presente en el compuesto original se reemplaza por un ion metálico, por ejemplo, un ion de metal alcalino, un ion alcalinotérreo, o un ion de aluminio; o se coordina con una base orgánica tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina, N-metilglucamina, y similares.
Las preparaciones en forma sólida incluyen polvos, tabletas, pildoras, cápsulas, sellos, supositorios, y gránulos dispersables . Un portador sólido puede ser una o más sustancias que pueden actuar también como diluyentes, agentes aromatizantes, solubilizantes , lubricantes, agentes de suspensión, aglutinantes, conservadores, agentes disgregantes de tabletas, o un material encapsulante . En los polvos, el excipiente es en general un sólido finamente dividido que es una mezcla con el componente activo finamente dividido. En tabletas, el componente activo generalmente se mezcla con el portador que tiene la capacidad de unión necesaria en proporciones apropiadas y se compacta en la forma y tamaño deseados. Los portadores apropiados incluyen, pero no se limitan a carbonato de magnesio, estearato de magnesio, talco, azúcar, lactosa, pectina, dextrina, almidón, gelatina, tragacanto, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, una cera de bajo punto de fusión, manteca de cacao, y similares.
Preparaciones en forma sólida pueden contener, además del componente activo, colorantes, sabores, estabilizantes, soluciones amortiguadoras, edulcorantes artificiales y naturales, dispersantes, espesantes, agentes solubilizantes , y similares.
Las formulaciones líquidas también son apropiadas para administración oral incluyen formulación líquida incluyendo emulsiones, jarabes, elixires, soluciones acuosas, suspensiones acuosas. Estas incluyen preparaciones en forma sólida que están previstas a convertirse en preparaciones de forma líquida poco antes de su uso. Las emulsiones pueden prepararse en soluciones, por ejemplo, en soluciones de propilenglicol acuoso o pueden contener agentes emulsionantes tales como lecitina, monooleato de sorbitán, o acacia. Las soluciones acuosas pueden prepararse disolviendo el componente activo en agua y agregando colorantes, aromatizantes, estabilizantes, y agentes espesantes. Las suspensiones acuosas pueden prepararse dispersando el componente activo finamente dividido en agua con material viscoso, tal como gomas naturales o sintéticas, resinas, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, y otros agentes de suspensión bien conocidos.
Los compuestos de la presente invención se pueden formular para la administración parenteral (por ejemplo, mediante inyección, por ejemplo inyección de bolo o infusión continua) y pueden presentarse en forma de dosis unitaria en ampollas, jeringas precargadas, infusión de pequeño volumen o en contenedores de múltiples dosis con un conservante agregado. Las composiciones pueden tomar formas tales como suspensiones, soluciones, o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, por ejemplo soluciones en polietilenglicol acuoso. Ejemplos de portadores diluyentes, disolventes o vehículos aceitosos o no acuosos, incluyen propilenglicol , polietilenglicol, aceites vegetales (por ejemplo, aceite de oliva) , y ésteres orgánicos inyectables (por ejemplo, oleato de etilo) , y pueden contener agentes de formulación tales como agentes conservantes, humectantes, emulsionantes o de suspensión, estabilizantes y/o dispersantes.
Alternativamente, el ingrediente activo puede estar en forma de polvo, obtenido por aislamiento aséptico de sólido estéril o por liofilización de la solución para constitución antes del uso con un vehículo apropiado, por ejemplo, agua estéril libre de pirógenos.
Los compuestos de la presente invención se pueden formular para la administración tópica a la epidermis como ungüentos, cremas o lociones, o como un parche transdérmico . Los ungüentos y cremas pueden, por ejemplo, formularse con una base acuosa u oleosa con la adición de agentes espesantes y/o agentes gelificantes apropiados. Las lociones pueden formularse con una base acuosa u oleosa y en general contendrán también uno o más agentes emulsionantes, agentes estabilizantes, agentes dispersantes, agentes de suspensión, agentes espesantes, o agentes colorantes. Las formulaciones apropiadas para administración tópica en la boca incluyen pastillas que comprenden agentes activos en una base saborizada, normalmente sacarosa y goma arábiga o tragacanto; pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base inerte tal como gelatina y glicerina o sacarosa y acacia; y enjuagues bucales que comprenden el ingrediente activo en un vehículo líquido apropiado.
Los compuestos de la presente invención pueden formularse para administración como supositorios. Una cera de bajo punto de fusión, tal como una mezcla de glicéridos de ácidos grasos o manteca de cacao se funde primero y el componente activo se dispersa homogéneamente, por ejemplo, por agitación. La mezcla homogénea fundida se vierte entonces en moldes de tamaño conveniente, se deja enfriar y solidificar .
Los compuestos de la presente invención pueden formularse para administración vaginal. Pesarios, soluciones amortiguadoras, cremas, geles, pastas, espumas o espray que contienen además del ingrediente activo, portadores que se conocen en el arte previo por ser apropiados.
Los compuestos de la presente invención pueden formularse para administración nasal. Las soluciones o suspensiones se aplican directamente a la cavidad nasal por medios convencionales, por ejemplo, con un gotero, pipeta o espray. Las formulaciones se pueden proporcionar en una forma individual o en múltiples dosis. En el último caso de un gotero o pipeta, esto puede conseguirse por el paciente administrando un volumen predeterminado apropiado de la solución o suspensión. En el caso de un espray, esto puede conseguirse por ejemplo por medio de una bomba de atomización de espray dosificadora .
Los compuestos de la presente invención pueden formularse para la administración en aerosol, particularmente al tracto respiratorio e incluyendo la administración intranasal . El compuesto tendrá generalmente un tamaño de partícula pequeño, por ejemplo del orden de cinco (5) mieras o menos. Tal tamaño de partícula puede obtenerse por medios conocidos en el arte previo, por ejemplo por micronización . El ingrediente activo se proporciona en un envase presurizado con un propelente apropiado tal como un clorofluorocarbono (CFC) , por ejemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, o diclorotetrafluoroetano, o dióxido de carbono u otro gas apropiado. El aerosol también puede contener convenientemente un tensioactivo tal como lecitina. La dosis de fármaco puede controlarse mediante una válvula calibrada. Alternativamente, los ingredientes activos pueden proporcionarse en una forma de un polvo seco, por ejemplo una mezcla de polvo del compuesto en una base en polvo apropiada tal como lactosa, almidón, derivados de almidón tales como hidroxipropilmetil celulosa y polivinilpirrolidina (PVP) . El portador en polvo formará un gel en la cavidad nasal . La composición en polvo puede presentarse en forma de dosis unitaria por ejemplo en cápsulas o cartuchos de, por ejemplo, gelatina o en envases tipo blister a partir del cual el polvo puede ser administrado por medio de un inhalador.
Cuando se desee, las formulaciones pueden prepararse con recubrimientos entéricos adaptados para la administración de liberación sostenida o controlada del ingrediente activo. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención pueden formularse en dispositivos transdérmicos o subcutáneos de liberación de fármacos. Estos sistemas de liberación son ventajosos cuando es necesaria la liberación sostenida del compuesto y cuando el cumplimiento del paciente con un régimen de tratamiento es crucial. Los compuestos en los sistemas de liberación transdérmicos se incorporan frecuentemente a un soporte sólido adhesivo a la piel. El compuesto de interés también se puede combinar con un potenciador de penetración, por ejemplo, Azona (1-dodecilaza-cicloheptan-2 -ona) . Sistemas de suministro de liberación sostenida se insertan subcutáneamente en la capa subdérmica mediante cirugía o inyección. Los implantes subdérmicos encapsulan el compuesto en una membrana soluble de lípidos, por ejemplo, caucho de silicona, o un polímero biodegradable, por ejemplo, ácido poliláctico.
Las formulaciones apropiadas, junto con los portadores, diluyentes y excipientes farmacéuticos se describen en Remington: The Science and Practice of Pahrmacy 1995, editado por E.W. Martin, Mack Publishing Company, 19a edición, Easton, Pennsylvania . Un científico de formulaciones puede modificar las formulaciones dentro de las enseñanzas de la descripción para proporcionar numerosas formulaciones para una vía particular de administración sin hacer que las composiciones de la presente invención sean inestables o comprometer su actividad terapéutica.
La modificación de los presentes compuestos para hacerlos más solubles en agua u otro vehículo, por ejemplo, puede lograrse fácilmente mediante modificaciones menores (formulación de sal, esterificación, etc.), que están dentro de la experiencia ordinaria en el arte previo. También está dentro de la experiencia ordinaria del arte previo modificar la ruta de administración y régimen de dosificación de un compuesto particular con el fin de controlar la farmacocinética de los presentes compuestos para el máximo efecto beneficioso en los pacientes.
El término "cantidad terapéuticamente eficaz" como se usa en el presente documento significa una cantidad requerida para reducir los síntomas de la enfermedad en un individuo.
La dosis se ajustará a los requerimientos individuales en cada caso particular. Esa dosificación puede variar dentro de amplios límites dependiendo de numerosos factores tales como la gravedad de la enfermedad a tratar, la edad y estado de salud general del paciente, otros medicamentos con los que está siendo tratado el paciente, la ruta y forma de administración y las preferencias y experiencia del practicante médico involucrado. Para la administración oral, una dosis diaria de entre aproximadamente 0.01 y aproximadamente 1000 mg/kg de peso corporal por día debe ser apropiada en monoterapia y/o en terapia de combinación. Una dosificación diaria preferida está entre aproximadamente 0.1 y aproximadamente 500 mg/kg de peso corporal, más preferido 0.1 y aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal y lo más preferido 1.0 y aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal por día. Por lo tanto, para la administración a una persona de 70 kg, el intervalo de dosificación sería aproximadamente 7 mg a 0.7 g por día. La dosis diaria puede administrarse como una sola dosis o en dosis divididas, típicamente entre 1 y 5 dosificaciones por día. Generalmente, el tratamiento se inicia con dosificaciones más pequeñas que son menores que la dosis óptima del compuesto. Después de esto, la dosificación se aumenta en pequeños incrementos hasta que se alcanza el efecto óptimo para el paciente individual. Una persona experimentada en el tratamiento de las enfermedades descritas en el presente documento será capaz, sin experimentación indebida y confiando en el conocimiento personal, experiencia y las descripciones de esta solicitud, de determinar una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos de la presente invención para una enfermedad y paciente dados.
Las preparaciones farmacéuticas están preferiblemente en formas de dosificación unitarias. En tal forma, la preparación se subdivide en dosis unitarias que contienen cantidades apropiadas del componente activo. La forma de dosificación unitaria puede ser una preparación envasada, el envase contiene cantidades discretas de la preparación, tales como tabletas envasadas, cápsulas, y polvos en viales o ampollas. También, la forma de dosificación unitaria puede ser una cápsula, tableta, sello o pastilla, o puede ser el número apropiado de cualquiera de éstos en forma envasada .
INDICACIONES Y MÉTODOS DE TRATAMIENTO Los derivados de piridazinona descritos en este documento son inhibidores de cinasa, en particular, inhibidores de Btk. Estos inhibidores pueden ser útiles para tratar una o más enfermedades que responden a la inhibición de cinasa, incluyendo enfermedades sensibles a la inhibición de Btk y/o la inhibición de la proliferación de células B, en los mamíferos. Sin desear estar limitado a ninguna teoría particular, se cree que la interacción de los compuestos de la invención con Btk resulta en la inhibición de la actividad de Btk y por lo tanto en la utilidad farmacéutica de estos compuestos. Por lo tanto, la invención incluye un método de tratamiento de un mamífero, por ejemplo un ser humano, que tiene una enfermedad sensible a la inhibición de la actividad de Btk, y/o inhibición de la proliferación de células B, que comprende administrar al mamífero que tiene tal enfermedad, una cantidad eficaz de por lo menos una entidad química proporcionada en este documento. Una concentración eficaz puede determinarse experimentalmente , por ejemplo ensayando la concentración en sangre del compuesto, o teóricamente, calculando la biodisponibilidad. Otras cinasas que pueden verse afectadas además de Btk incluyen, pero no se limitan a, otras tirosina cinasas y serina/treonina cinasas.
Las cinasas desempeñan papeles notables en las vías de señalización que controlan los procesos celulares fundamentales, tales como la proliferación, la diferenciación, y la muerte (apoptosis) . Actividad cinasa anormal ha sido implicada en una amplia gama de enfermedades, incluyendo varios tipos de cáncer, enfermedades autoinmunes y/o inflamatorias, y reacciones inflamatorias agudas. El papel multifacético de las cinasas en las principales vías de señalización celular ofrece una importante oportunidad para identificar nuevos fármacos dirigidos a cinasas y vías de señalización.
Una modalidad incluye un método de tratamiento de un paciente que tiene una enfermedad autoinmune y/o enfermedad inflamatoria, o una reacción inflamatoria aguda sensible a la inhibición de la actividad Btk y/o la proliferación de células B.
Las enfermedades autoinmunes y/o inflamatorias que pueden ser afectadas usando los compuestos y composiciones de acuerdo con la invención incluyen, pero no se limitan a: psoriasis, alergia, enfermedad de Crohn, síndrome del intestino irritable, enfermedad de Sjogren, rechazo del injerto de tejidos, y rechazo hiperagudo de órganos trasplantados, asma, lupus eritematoso sistémico (y glomerulonefritis asociada) , dermatomiositis , esclerosis múltiple, esclerodermia, vasculitis (asociada a ANCA y otras vasculitis) , hemolítica autoinmune y estados trombocitopénicos, síndrome de Goodpasture (y glomerulonefritis y hemorragia pulmonar asociadas) , aterosclerosis, artritis reumatoide, púrpura trombocitopénica idiopática crónica (ITP) , enfermedad de Addison, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, diabetes, choque séptico, y miastenia gravis.
Se incluyen en este documento métodos de tratamiento en los que por lo menos una entidad química proporcionada en el presente documento se administra en combinación con un agente anti- inflamatorio. Los agentes anti- inflamatorios incluyen, pero no se limitan a NSAIDs, inhibidores de la enzima ciclooxigenasa específicos para COX-2 y no específicos, compuestos de oro, corticosteroides , metotrexato, receptor de factor de necrosis tumoral (TNF) , antagonistas de los receptores, inmunosupresores y metotrexato.
Los ejemplos de NSAIDs incluyen, pero no se limitan a, ibuprofeno, flurbiprofeno, naproxeno y naproxeno sódico, diclofenaco, combinaciones de diclofenaco de sodio y misoprostol, sulindaco, oxaprozina, diflunisal, piroxicam, indometacina, etodolaco, fenoprofeno de calcio, ketoprofeno, nabumetona de sodio, sulfasalazina, tolmetina de sodio, e hidroxicloroquina. Los ejemplos de NSAIDs incluyen inhibidores específicos para COX-2, como celecoxib, valdecoxib, lumiracoxib y/o etoricoxib.
En algunas modalidades, el agente anti- inflamatorio es un salicilato. Los salicilatos incluyen por no se limitan a ácido acetil salicílico o aspirina, salicilato de sodio, y salicilatos de colina y magnesio.
El agente anti - inflamatorio también puede ser un corticosteroide . Por ejemplo, el corticosteroide puede ser cortisona, dexametasona, metilprednisolona, prednisolona, fosfato sódico de prednisolona o prednisona.
En modalidades adicionales el agente anti-inflamatorio es un compuesto de oro, tal como tiomalato sódico de oro o auranofxn.
La invención también incluye modalidades en las que el agente anti -inflamatorio es un inhibidor metabólico tal como un inhibidor de dihidrofolato reductasa, como metotrexato o un inhibidor de dihidroorotato deshidrogenasa, tal como leflunomida .
Otras modalidades de la invención se refieren a combinaciones en las que por lo menos un compuesto antiinflamatorio es un anticuerpo monoclonal anti-C5 (tal como eculizumab o pexelizumab) , un antagonista de TNF, tal como entanercept, o infliximab, que es un anticuerpo monoclonal anti-TNF alfa.
Todavía otras modalidades de la invención se refieren a combinaciones en las que por lo menos un agente activo es un compuesto anmunosupresor tal como un compuesto inmunosupresor seleccionado de metotrexato, leflunomida, ciclosporina, tacrolimus, azatioprina, y micofenolato de mofetilo.
La células B y los precursores de células B que expresan BTK se han implicado en la patología de enfermedades malignas de células B, incluyendo, pero no limitado a, linfoma de células B, linfoma (incluyendo linfoma de Hodgkin y no Hodgkin) , linfoma de células pilosas, mieloma múltiple, leucemia mielógena crónica y aguda y leucemia linfocítica crónica y aguda.
BTK ha mostrado ser un inhibidor de Fas/APO-1 (CD-95) , complejo de señalización que induce la muerte (DISC) en células linfoides de linaje B. El destino de las células de leucemia/linforna puede residir en el equilibrio entre los efectos proapoptóticos opuestos de las caspasas activadas por DISC y un mecanismo de regulación anti-apoptótico corriente arriba que involucra BTK y/o sus sustratos (Vassilev et al, J. Biol. Chem. 1998, 274, 1646-1656).
También se ha descubierto que los inhibidores de BTK son útiles como agentes sensibilizantes de quimioterapia, y, por lo tanto, son útiles en combinación con otros fármacos quimioterapéuticos , en particular, fármacos que inducen la apoptosis. Ejemplos de otros fármacos quimioterapéuticos que se pueden utilizar en combinación con inhibidores de BTK sensibilizantes a la quimioterapia incluyen inhibidores de la topoisomerasa I (camptotecina o topotecan) , inhibidores de la topoisomerasa II (por ejemplo, daunomicina y etopósido) , agentes alquilantes (por ejemplo, ciclofosfamida, melfalán y BCNU) , agentes dirigidos a tubulina (por ejemplo, taxol y vinblastina) , y agentes biológicos (por ejemplo, anticuerpos tales como anticuerpo anti CD20, IDEC 8, inmunotoxinas , y citoquinas) .
La actividad de Btk también puede estar asociada con algunas leucemias que expresan el gen de fusión bcr-abl que resulta de la translocación de las partes del cromosoma 9 y 22. Esta anomalía se observa con frecuencia en la leucemia mielógena crónica. Btk es constitutivamente fosforilado por la cinasa bcr-abl que inicia las señales de supervivencia corriente abajo que evita la apoptosis en células de bcr-abl. (N. Feldhahn et al. J. Exp. Med. 2005 201 (11) : 1837-1852) Ej emplos Abreviaturas comúnmente usadas incluyen: acetilo (Ac) , azo-bis-isobutirilnitrilo (AIBN) , atmósferas (atm) , 9-borabiciclo [3.3.1] nonano (9-BBN o BBN) , 2, 2' -bis (difenilfosfino) -1, 1' -binaftilo (BINAP) , ter-butoxicarbonilo (Boc), pirocarbonato de di-terc-butilo o anhídrido de boc (BOC20) , bencilo (Bn) , butilo (Bu) , Número de Registro de compendios químicos (CASR) , benciloxicarbonilo (CBZ o Z) , carbonil diimidazol (CDI) , l,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) , trifluoruro de azufre dietilamino (DAST) , dibencilidenacetona (dba) , l,5-diazabiciclo[4.3.0]non-5-eno (DBN) , 1,8-diazabiciclo [5.4.0]undec-7-eno (DBU) , N, ' -diciclohexilcarbodiimida (DCC) , 1,2-dicloroetano (DCE) , dicloroetano (DCM) , 2, 3-dicloro-5, 6-diciano-l,4-benzoquinona (DDQ) , azodicarboxilato de dietilo (DEAD) , di- iso-propilazodicarboxilato (DIAD) , di-iso-butilaluminiohidruro (DIBAL o DIBAL-H) , di-iso-propiletilamina (DIPEA) , ?,?-dimetil acetamida (DMA) , 4-N,N-dimetilaminopiridina (DMAP) , , N-dimetilformamida (DMF) , sulfóxido de dimetilo (DMSO) , 1 , 1 ' -bis- (difenilfosfino) etano (dppe) , 1, 1 ' -bis- (difenilfosfino) ferroceno (dppf) , hidrocloruro de 1- (3-dimetilaminopropil) -3-etilcarbodiimida (EDCI) , 2-etoxi-l-etoxicarbonil-l, 2-dihidroquinolina (EEDQ) , etilo (Et) , acetato de etilo (EtOAc) , etanol (EtOH) , etil éster del ácido 2-etoxi-2H-quinolina-l-carboxílico (EEDQ) , dietil éter (Et20) , etil isopropil éter (EtOiPr) , hexafluorofosfato de O- (7-azabenzotriazol-l-il) -N, N , N 1 1 - tetrametiluronio (HATU) , ácido acético (HOAc) , 1-N-hidroxibenzotriazol (HOBt) , cromatografía líquida de alta presión (HPLC) , iso-propanol (IPA) , cloruro de isopropilmagnesio (iPrMgCl) , hexametildisilazano (HMDS) , espectrometría de masas de cromatografía líquida (LCMS) , hexametildisilazano de litio (LiHMDS) , ácido meta-cloroperoxibenzoico (m-CPBA) , metanol ( eOH) , punto de fusión (mp) , MeS02- (mesilo o Ms) , metilo (Me) , acetonitrilo (MeCN) , ácido m-cloroperbenzoico (MCPBA) , espectro de masas (ms) , metil t-butil éter (MTBE) , metil tetrahidrofurano (MeTHF) , N-bromosuccinimida (NBS) , N-butil-litio (n-BuLi) , N-carboxianhídrido (NCA) , N-clorosuccinimida (NCS) , N-metilmorfolina (NM ) , N-metilpirrolidona (NMP) , clorocromato de piridinio (PCC) , dicloro- ( (bis-difenilfosfino) ferroceno) paladio (II) (Pd(dppf)Cl2) , acetato de paladio (II) (Pd(0Ac)2), tris (dibencilidenacetona) dipaladio (0) (Pd2(dba)3), dicromato de piridinio (PDC) , fenilo (Ph) , propilo (Pr) , iso-propilo (i-Pr), libras por pulgada cuadrada ( psi) , piridina (pyr) , 1,2,3,4, 5-pentafenil-1' - (di-terc-butilfosfino) ferroceno (Q-Phos) , temperatura ambiente (temperatura ambiente, rt o RT) , sec-butil-litio (sBuLi) , ter-butildimetilsililo o t-BuMe2Si (TBDMS) , fluoruro de tetra-n-butilamonio (TBAF) , trietilamina (TEA o Et3N) , 1-oxil 2, 2, 6, 6-tetrametilpiperidina (TEMPO) , triflato o CF3S02- (Tf) , ácido trifluoroacético (TFA) , 1,1'-bis-2 , 2 , 6 , 6 -tetrametilheptano-2 , 6-diona (TMHD) , Tetrafluoroborato de O-benzotriazol-l-il-?,?,?' ,?' - tetrametiluronio (TBTU) , cromatografía de capa fina (TLC) , tetrahidrofurano (THF) , trimetilsililo o Me3Si (TMS) , p-toluenosulfónico monohidratado (TsOH o pTsOH) , 4 -Me-C6H4S02- o tosilo (Ts) , N-uretano-N-carboxianhídrido (U CA) , y 2-diciclohexilfosfino-2 ' ,4' ,6' -triisopropil-bifenilo (XPHOS) . La nomenclatura convencional incluyendo los prefijos normal (n) , iso (i-), secundario (sec-), terciario (tere-) y neo tienen su significado habitual cuando se utiliza con un resto alquilo. (J. Rigaudy y Klesney DP, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford) .
Síntesis del compuesto 1-1: Esquema de reacción A Este ejemplo ilustra la síntesis de "6 -terc-butil- 8 -fluoro-2- ( 2 -hidroximetil - 3 - { 8 - [5- (morfolina-4 -carbonil ) - piridin-2-ilamino] - [1,2,4] triazolo [1 , 5-a] iridin-6-il } -fenil) -2H-ftalazin- 1-ona" Paso 1. Preparación de 2 - ( 8-bromo- [1 , 2 , ] triazolo [ , 5-a] iridin-6-il) -6- (6-terc-butil-8-fluoro-1-oxo-1H- ftalazin-2-il) -bencil éster del ácido acético.
A 8-bromo-6 -yodo- [1 , 2 , 4] triazolo [, 5-a] piridina (500 mg, 1.54 mmol, Ec : 1.00) y acetato de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-1-oxoftalazin-2 (lH)-il)-6-(4,4,575-tetrametil - 1 , 3,2-dioxaborolan-2-il) bencilo (763 mg, 1.54 mmol, Ec : 1.00) en dioxanos (50.0 mi) y agua (5.00 mi) se agregó carbonato de sodio (654 mg, 6.17 mmol, Ec : 4.00), seguido de tetraquis (trifenilfosfina) paladio (0) (178 mg, 154 µp??? , Ec : 0.10) . La mezcla de reacción se calentó a 95°C bajo argón durante 24 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. El solvente se evaporó. El residuo se disolvió en DCM/agua. Se separaron las capas. La capa orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró a vacío. El material crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 50 g, gradiente 25% a 50% de EtOAc/Hex) para dar una mezcla de 2-( 8 -bromo- [1,2,4] triazolo [ , 5-a] piridin-6 - il) -6 - (6 -terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -bencil éster del ácido acético y 2- [3- (8-bromo- [1, 2,4] triazolo [1, 5-a] piridin-6-il) -2-hidroximetil-fenil] -6-terc-butil-8-fluoro-2H-ftalazin-1-ona. La mezcla se colocó bajo vacío durante 18 horas. En un matraz de 100 mi de fondo redondo, 2- [3- (8-bromo- [1,2,4] triazolo [1, 5-a] iridin-6-il) -2-hidroximetil-fenil] -6-terc-butil-8-fluoroftalazin-1 (2H) -ona (419 mg, 802 µp??, Ec : 1.00), se combinó con acetato de 2-(8-bromo- [1,2,4] triazolo [1, 5-a] piridin-6-il) -6- ( 6-terc-butil - 8 -fluoro-1-oxoftalazin-2 (1H) bencilo (155 mg, 275 mol , Ec : 0.342), anhídrido acético (409 mg, 378 µ?, 4.01 mmol, Ec : 5.0) y piridina (190 mg, 195 µ?, 2.41 mmol, Ec : 3.0) en DCM (10.0 mi) para dar una solución incolora. La mezcla de reacción se calentó a 45°C y se agitó durante 8 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante 12 horas. La mezcla de reacción cruda se concentró a vacío para obtener un aceite de color tostado. El residuo se disolvió en DCM y se lavó una vez con agua. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 y se concentraron a vacío. El material crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 50 g, 50% de EtOAc/Hex) para dar 2- (8-bromo- [l,2,4]triazolo[,5-a] piridin-6 -il ) -6- (6 -terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -bencil éster del ácido acético (480 mg, 70%). CL/MS-ESI observado [M+H] + 564, 566.
Paso 2. Preparación de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6-{8- [5- (morfolina-4 -carbonil) -piridin-2-ilamino] - [1 , 2 , 4] triazolo [1 , 5-a] piridin-6-il } -bencil éster del ácido acético En un matraz de 100 mi, acetato de 2-(8-bromo- [1,2,4] triazolo [1, 5-a] iridin-6-il) -6- (6-terc-butil-8-fluoro-1-oxoftalazin-2 (1H) -il) bencilo (250 mg, 443 µ????, Ec : 1.00), (6-aminopiridin-3-il) (morfolino)metanona (110 mg, 532 µp???, Ec: 1.2) y carbonato de cesio (722 mg, 2.21 mmol, Ec: 5.0 ) se combinaron con dioxano (31.3 mi) para dar una suspensión de color naranja. Se agregaron 4,5-bis(difenilfosfino) -9, 9-dimetilxanteno (38.4 mg, 66.4 ymol, Ec: 0.15): tris (dibencilidenacetona) dipaladio(0) (20.3 mg, 22.1 µp???, Ec: 0.05) . La solución se desgasificó con Ar durante 10 min. La reacción se calentó a 100 °C durante 18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con 200 mi de DCM. Se agregó MgS04 y la mezcla se agitó. El sólido se retiró por filtración y se lavó varias veces con DCM. El filtrado combinado y los lavados se concentraron a vacío. El material crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 40 g, gradiente 5% a 10% de MeOH en DCM) . El residuo resultante se trituró con Et20. El sólido se filtró, y después se lavó con Et20. El sólido se secó durante la noche a 50°C para dar 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6-{8- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -[1,2,4] triazolo [1, 5-a]piridin-6-il} -bencil éster del ácido acético (289 mg, 95%) . LC/EM-ESI observado [M+H]+ 691.
Ej em lo 1 Paso 3. Preparación de 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- [5- (morfolina-4 -carbonil) -piridin-2-ilamino] - [1,2,4] triazolo [1, 5 -a] piridin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona .
A una solución de acetato de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-1-oxoftalazin-2 (1H) -il) -6- (8- (5- (morfolina-4 -carbonil ) iridin-2-ilamino) - [1,2,4] triazolo [1 , 5 -a] piridin-6 - il ) bencilo (289 mg, 418 ymol, Ec : 1.00) en THF (5.0 mi) se agregó NaOH (1.0 N, 5.0 mi, 5.00 mmol , Ec : 12.0). La solución se calentó a 60°C durante 18 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. La reacción se diluyó con una solución de NaHC03 (ac.) saturado y DCM. Las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo tres veces con DCM, y después se secó sobre MgS04. El sólido se retiró por filtración. El filtrado se concentró a vacío. El material crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, gradiente 0% a 10% de MeOH/DCM) para dar un residuo. El residuo se trituró con Et20 para dar 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2 -hidroximetil -3 -{ 8- [5- (morfolina-4 -carbonil ) -piridin-2 -ilamino] - [l,2,4]triazolo[l,5-a] piridin-6 -il}-fenil) -2H-ftalazin-l-ona (61 mg, 23%). 2H NMR (300 Hz, CL0R0F0RM0-d) d ppm 1.36 - 1.49 (m, 9 H) 3.51 - 3.95 (m, 8 H) 4.40 (s, 2 H) 7.20 (dd, J=18.13, 7.18 Hz , 1 H) 7.41 - 7.67 (m, 6 H) 7.76 (dd, J=8.31, 2.27 Hz, 1 H) 8.31 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.36 - 8.48 (ra, 2 H) 8.66 (s, 1 H) 8.95 (s, 1 H) LC/MS-ESI observado [M+H] + 649.
Síntesis del compuesto 1-2: Esquema de reacción B Este ejemplo ilustra la síntesis de "6-terc-butil-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [5- (morfolina-4 -carbonil ) -piridin-2 - ilamino) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona" Paso 1. Preparación de [6- (6-cloro-imidazo [1, 2-b] piridazin-8-ilamino) -piridin-3 - il] -morfolin-4 - il-metanona .
Una mezcla de 8-bromo-6-cloroimidazo [1, 2-b] piridazina (272 mg, 1.17 mmol, Ec : 1.00) y ( 6 -aminopiridin-3 -il) (morfolino) metanona (255 mg, 1.23 mmol, Ec : 1.05) en DMF (10.0 mi) se enfrió a 0°C. A esta mezcla de reacción se agregó hidruro de sodio (150 mg, (60% en aceite mineral) , 3.74 mmol, Ec : 3.2) . La reacción se dejó en agitación a 0°C durante 10 minutos y después se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó 18 horas. La mezcla de reacción se inactivo con una solución NaHC03 (ac.) saturada y se diluyó con agua y EtOAc . Un sólido insoluble se recogió por filtración para dar [6 - ( 6 -cloro- imidazo [1 , 2 -b] iridazin- 8 -ilamino) -piridin-3-il] -morfolin-4 - il-metanona (420 mg, 99%) . LC/MS-ESI observado [M+H] + 358.
Ejemplo 2 Paso 2. Preparación de 6-terc-butil-8-fluoro-2 hidroximetil-3-{8- [5- (morfolina- -carbonil ) -piridin-2-ilamino] - imidazo [1 , 2-b] iridazin-6-il } -fenil ) -2H-ftalazin ona .
En un tubo de ensayo de 50 mi, (6- (6-cloroimidazo [1, 2-b] piridazin-8-ilamino) piridin-3-il) (morfolino) metanona (150 mg, 418 pmol , Ec : 1.00) y acetato de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxoftalazin-2 (1H) -il) -6- (4,4,5, 5 -tetrametil - 1 , 3,2-dioxaborolan-2 - il) bencilo (354 mg, 502 µp??? , Ec : 1.2) se combinaron con BuOH (4 mi) para dar una solución naranja. Se agregó agua (1.0 mi) . La mezcla de reacción se purgó con argón. Se agregaron X-FOS (19.9 mg, 41.8 pmol, Ec : 0.1) y fosfato de potasio tribásico (177 mg, 836 µ???? , Ec : 2). Se burbujeó argón a través de la mezcla de reacción durante 2 min. Se agregó: Bis (dibencilidenacetona) aladio (0.05 12.0 mg, 20.9 µt???, Ec : .05) . La mezcla de reacción se purgó con argón. La reacción se calentó en un baño de aceite a 110°C durante 1.5 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió en 75 mi de H20 y se agregó EtOAc . Se formó un sólido. Se agregó DCM. El sólido permaneció. El sólido se recogió por filtración y se secó para dar 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- { 8- [5- (morfolina-4 -carbonil ) -piridin-2-ilamino] -imidazo [1 , 2b] piridazin-6-il } -fenil) -2H-ftalazin-l-ona (149 mg, 55%). XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) d ppm 1.37 (s, 9 H) 3.41 - 3.70 (m, 9 H) 4.42 (br. s., 2 H) 7.33 - 7.63 (m, 5 H) 7.64 - 7.96 (m, 4 H) 8.22 (s, 1 H) 8.31 - 8.46 (m, 2 H) 8.52 (d, J=2.64 Hz, 1 H) . LC/MS-ESI observado [M+H] + 649.
Síntesis del compuesto 1-3: Esquema de reacción C Este ejemplo ilustra la síntesis de "6-terc-butil-8-fluoro-2- ( 2 -hidroximetil - 3 - { 8 - [5- (4 - isopropil -piperazin- 1 - il) -piridin-2-ilamino] -imidazo [1, 2-b] irridazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona" Paso 1. Preparación de (6 - c loro - imidazo [ 1 , 2 -b]piridazin-8-il) - [5- (4-iso ro il-piperazin-l-il) -piridin-2-il] -amina.
Una mezcla de 8-bromo-6-cloroimidazo [1 , 2-b] piridazina (200 mg, 862 µp???, Ec : 0.95) y 5- (4-isopropil-l-il) piridin-2-amina (200 mg , 908 µ?t??? , Ec : 1.00) en D F (10.0 mi) se enfrió a 0°C. A esta mezcla de reacción se agregó hidruro de sodio (116 mg, (60% en aceite mineral), 2.9 mmoles, Ec : 3.2) . La reacción se dejó en agitación a 0°C durante 10 min y después se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó 18 horas. La mezcla de reacción se inactivo con una solución de NaHC03 (ac.) saturada y se diluyó con agua y EtOAc . La capa orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con EtOAc . Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre MgS04 y se concentró a vacío. El material crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 0% a 20% (60: 10: 1 de DCM: MeOH : NH4OH) /DCM) para dar un residuo que se colocó bajo alto vacío durante 18 horas para proporcionar (6-cloro-imidazo [l,2-b]piridazin-8-il) - [5 - (4-isopropil-piperazin-l-il) -piridin-2-il] -amina (78 mg, 23%). CL/EM-ESI observado [M + H] + 372.
Ejemplo 3 Paso 2. Preparación de 6-terc-butil-8-fluoro-2 - (2-hidroximetil-3- { 8- [5- (4-isopropil-piperazin-l-il) -piridin-2-ilamino] - imidazo [1 , 2-b] piridazin-6 -il } -fenil) -2H-ftalazin-1-ona .
En un tubo de ensayo de 50 mi, 6-cloro-N- (5 - (4-i so ro il-L-il)piridin-2-il) imidazo [1, 2-b]piridazin-8-amina (77.5 mg, 208 pmol , Ec : 1.00) y acetato de 2- (6-terc-butil-8-f luoro-1 - oxo f tal a z in - 2 (1H) -il) -6 -(4,4,5,5 - t et ramet i 1-1,3,2 - dioxaborolan- 2-il)bencilo (177 mg, 250 µ????, Ec : 1.2) se combinaron con BuOH (4 mi) para dar una solución naranja. Se agregó agua (1.0 mi) . X-FOS (9.94 mg, 20.8 µp???, Ec : 0.1) y fosfato de potasio tribásico (88.5 mg, 417 µp???, Ec : 2) adicionales. Se agregó: Bis (dibencilidenacetona) paladio (0.05 5.99 mg, 10.4 µp???, Ec : .05) .
La mezcla de reacción se purgó con argón. La reacción se calentó a 110°C durante 1.5 horas. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió en 75 mi de H20 y se extrajo con EtOAc. Las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo dos veces con EtOAc. Las capas orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS0 y se concentraron a vacio. El material crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 24 g, 50% a 75% (gradiente 60:10:1 de DCM : MeOH : NH4OH ) / DC ) para dar un residuo. El residuo se trituró con Et20 y se dejó reposar durante 24 horas para dar 6 - 1 e rc-butil-8-fluoro-2- ( 2-hidroximetil-3- { 8- [5- (4-isopropil-piperazin-l-il) -piridin-2-ilamino] -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il } -fenil) -2H-ftalazin-l-ona (75 mg, 55%) como un sólido blanco. 1H NMR (300 Hz, CHLOROFORMO-d) d ppm 1.17 (d, J=14.35 Hz, 6 H) 1.43 (s, 9 H) 2.74 (br. s., 5 H) 3.24 (br. s., 4 H) 3.95 - 4.17 (m, 1 H) 4.45 (d, J=7.18 Hz, 2 H) 7.01 (d, J=9.06 Hz, 1 H) 7.28 - 7.35 (m, 1 H) 7.40 - 7.66 (m, 5 H) 7.74 (d, J=6.80 Hz, 1 H) 7.87 (d, J=1.13 Hz, 1 H) 8.01 -8.15 (m, 2 H) 8.23 (s, 1 H) 8.30 (d, J=2.64 Hz, 1 H) . LC/ S-ESI observado [M+H]+ 662.
Síntesis del compuesto 1- : Esquema de reacción D Este ejemplo ilustra la síntesis de "6-terc-butil-8- flúoro-2- ( 2-hidroximetil-3- { 8- [ 5- ( 4-metil-piperazin-l- ilmetil ) -piridin-2-ilamino) -imidazo [l,2-b]piridazin-6-il}- fenil) -2H-ftalazin-l-ona" Paso 1. Preparación de 1- ( 6-cloro-ridin-3-ilmetil ) -4- meti1 -pipera zina .
En un matraz de fondo redondo de 500 mi de 6- cloronicotinaldehído (5 g, 35.3 mmol, Ec: 1.00) se suspendió en DCM (350 mi). Se agregó 1-metilpiperazina (4.42 g, 4.9 mi, 44.2 mmol , Ec : 1.25) seguido por ácido acético (4.24 g, 4.04 mi, 70.6 mmol, Ec : 2.0). Se agregó triacetoxiboroh druro de sodio (11.2 g, 53.0 mmol, Ec : 1.5) por porciones durante varios minutos. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante tres horas. Se agregaron agua y DCM y las capas se separaron. La capa acuosa se llevó a pH 10 con NaOH 1M. La capa acuosa se extrajo tres veces con DCM. El extracto combinado se secó sobre Na2S0 y se concentró a vacío para dar 1- (6-cloro-piridin-3-ilmetil) -4 -metil -piperazina (6.8 g, 85%) CL/EM-ESI observado [M + H] + 226. Se utilizó el material crudo "tal cual" en la siguiente reacción.
Paso 2. Preparación de 5- (4-metil-piperazin-l-ilmetil) - pi idin-2 - ilamina .
A 1- ( (6-cloropiridin-3-il) metil) -4 -metilpiperazina (6.79 g, 30.1 mmol, Ec : 1.00), 2 - (diciclohexilfosfino) bifenilo (2.11 g, 6.02 mmol, Ec: 0.20) y tris (dibencilidenacetona) dipaladio (0) (2.75 g, 3.01 mmol, Ec: 0.10) en un tubo sellado se agregó THF (75 mi) . La solución se colocó bajo nitrógeno. Se agregó bis (trimetilsilil) amida de litio (75.2 mi, 75.2 mmol, Ec : 2.50). La solución se desgasificó con argón y el tubo se selló y se calentó a 100°C durante 18 horas. La solución se filtró a través de Celite™. El solvente se evaporó bajo presión reducida. El residuo se recogió en DCM. HC1 (1N, 10 mi) se agregó lentamente para ajustar a pH = 1 mediante la adición de HC1 6 N y agua (según sea necesario) . Las capas se separaron. La capa orgánica se extrajo una vez con agua. Las capas acuosas se combinaron y se llevaron a pH 10 por adición lenta de NaOH sólido. Se agregó diclorometano . Las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo tres veces con DCM. Las capas orgánicas se combinaron y se secaron sobre Na2S04. El solvente se evaporó. El residuo se trituró con Et20. El sólido se recogió por filtración y se secó para dar 5- (4-metil-piperazin-l-ilmetil) -piridin-2-ilamina (2.3 g, 37%). LC/MS-ESI observado [M + H] + 207.
Paso 3a. Preparación de (6-cloro-imidazo [1,2-b] iridazin-8-il) - [5- (4-metil-piperazin-l-ilmetil) -piridin-2-il] -amina .
Una mezcla de 8-bromo-6-cloroimidazo [1, 2-b] piridazina (214 mg, 921 mol , Ec : 0.95) y 5- ( (4-metilpiperazin-l- il)metil)piridin-2-amina (200 mg, 970 µ?p??, Ec : 1.00) en DMF (10.0 mi) se enfrió a 0°C. A esto se agregó hidruro de sodio (60% en aceite mineral, 124 mg, 3.1 mmoles, Ec : 3.2) . La reacción se dejó en agitación a 0°C durante 10 min y después se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 72 horas. La reacción se inactivo con solución saturada de NaHC03 (ac.) y después se diluyó con agua y EtOAc . La capa orgánica se separó y la fase acuosa se lavó con EtOAc . Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre MgS04 y se concentraron a vacío. El residuo se disolvió en Et20. La capa orgánica se lavó con agua y se secó sobre MgS04. El agente de secado se retiró por filtración. La solución resultante se concentró a vacío para dar (6-cloro-imidazo [1 , 2 -b] piridazin-8-il) - [5- (4-metil-piperazin-l-ilmetil) -piridin-2-il] -amina (170 mg, 49%) como un sólido. CL/EM-ESI observado [M + H] + 358.
Paso 3b. Preparación de (2- (acetoximetil) -3- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxoftalazin-2 (1H) -il) fenil) trifluoroborato de potasio: Un matraz de fondo redondo equipado con un burbujeador, un termómetro, y un agitador magnético, se cargó con acetato de 2- (oxoftalazin-6-terc-butil-8-fluoro-l-oxoftalazin-2 (1H) -il) -6-clorobencilo (10 g, 24.8 mmol, Ec : 1.00), 4,4,4' ,4' ,5,5,5' ,5' -octametil-2 , 2 ' -bi- ( 1 , 3 , 2 -dioxaborolano) (9.46 g, 37.2 mmol, Ec : 1.5), Pd(OAc)2 (69.7 mg, 310 µt???, Ec: 0.0125), X-FOS (296 mg, 621 µp???, Ec : 0.025), y acetato de potasio (5.29 g, 53.9 mmol, Ec : 2.17). La mezcla de reacción se desgasificó (3 veces) . Se agregó MeTHF, después se desgasificó otra vez (3 veces) . La mezcla se calentó a 60°C durante la noche. La reacción no había terminado. La temperatura de reacción se incrementó a 65°C y se agitó durante 3 horas. HPLC mostró que la reacción se completó. La reacción se enfrió y se agregó HCl 2N (31.0 mi, 62.1 mmol, Ec: 2.5). La mezcla se agitó durante media hora, a continuación se pasó a través de un tapón de celite para eliminar un material negro. Las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con agua (60.0 g, 60.0 mi) y después se concentró hasta un aceite pesado. El aceite se disolvió en MeOH (79.2 g, 100 mi) y se trató con hidrógeno fluoruro de potasio, solución 3M (20.7 mi, 62.1 mmol, Ec : 2.5). LC mostró que la reacción no se terminó durante la noche. Se agregaron otros 0.5 equivalentes de KHF2. La suspensión resultante se calentó a 45°C durante 3 horas. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. El producto se aisló por filtración. La torta se lavó con metanol .
Después de secar al vacío, se obtuvo (2- (acetoximetil) - 3- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxoftalazin-2 (1H) -il) fenil) trifluoroborato de potasio (11.26 g, 23.7 mmol, rendimiento del 95.6%) .
Paso 4. Preparación de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6-{8- [5- (4-metil-piperazin-l-ilmetil) -piridin-2 -ilamino] -imidazo [l,2-b]piridazin-6-il} -bencilo éster del ácido acético.
En un tubo de ensayo de 50 mi, 6-cloro-N- (5- ( (4-metilpiperazin-l-il)metil)piridin-2-il) imidazo [1,2-b] piridazin-8-amina (170 mg, 475 µ?t???, Ec : 1.00) y (2-(acetoximetil) -3- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxoftalazin-2 (1H) - il) fenil) trifluoroborato de potasio (225 mg, 475 µ?t???, Ec : 1.00) se combinaron con BuOH (10 mi) para dar una solución naranja. Se agregó agua (2.5 mi). Se agregaron X-PHOS (22.6 mg, 47.5 µt???, Ec : 0.1) y fosfato de potasio tribásico (202 mg, 950 pmol , Ec : 2). Se agregó Bis (dibencilidenacetona) paladio (13.7 mg, 23.8 µt???, Ec : 0.05) . El tubo se purgó con argón y se selló. La solución se calentó en un baño de aceite a 100 °C durante 1.5 horas. La solución se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió en 75 mi de H20 y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y se concentró a vacío. El material crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 24 g, 50% a 100% (gradiente de 60:10:1 DCM :MeOH :NH40H/DCM) ) para dar un residuo. El residuo se trituró con Et20. Análisis LC/MS mostró que el material crudo era una mezcla de productos: 12% de 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3 - {8- [5- (4-metil-piperazin-l-ilmetil) -piridin-2 -ilamino] - imidazo [1 , 2-b] piridazin-6-il } -fenil ) -2H-ftalazin-l-ona y 88% de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-1-???-??-ftalazin-2-il) -6-{8- [5- (4-metil-piperazin-l-ilmetil) -piridin-2-ilamino] -imidazo [1, 2 -b] piridazin-6 - il } -benc i 1 éster del ácido acético por UV . (157 mg , 48%) . La mezcla se tomó en la siguiente reacción "tal cual" . LC/MS-ESI observado [M + H]+ 648 y 690.
Ejemplo 4 Paso 5. Preparación de [1 , 2 -b] piridazin-6 -il } -f enil) -2H-f talazin-l-ona .
A una solución de una mezcla de acetato de 2- (6-terc-butil-8-f luoro-l-oxoftalazin-2 (1H) -il) -6- (8- (5- ( (4-metilpiperazin-l-il)metil) piridin-2-ilamino) imidazo [1, 2-b] iridazin-6-il) bencilo y 6-terc-butil-8-f luoro-2- (2-hidroximetil-3 - {8- [5- (4-metil-piperazin-l-ilmetil) -piridin-2-i lamino] -imidazo [l,2-b]piridazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona (157 mg, 228 µp???, Ec: 1.00) en THF (3.0 mi) se agregó NaOH (1.0 N, 3.0 mi, 3.00 mmol, Ec: 13.2) . La solución fue calentada a 60°C durante 18 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con una solución de NaH003 (ac . ) saturada y 1X34. Las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo tres veces con DCM. Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 y se concentraron a vacío. El sólido resultante se trituró con Et20 y se recogió por filtración para dar 6-terc-butil-8-f luoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [5- (4-metil-piperazin-l-ilmetil) -piridin-2-ilamino] -imidazo [l,2-b]piridazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona (101 mg, 68%) . ? NM (300 Hz, CHLOROFORMO-d) d ppm 1.43 (s, 9 H) 2.36 (br. s., 2 H) 2.56 (br. s., 8 H) 3.51 (s, 3 H) 4.02 (br. s., 1 H) 4.46 (br. s. , 2 H) 7.02 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.40 - 7.70 (m, 6 H) 7.75 (d, J=7.18 Hz, 1 H) 7.90 (s, 1 H) 8.23 (s, 1 H) 8.30 (d, J=2.27 Hz, 2 H) 8.44 (s, 1 H) . LC/MS-ESI observado [M+H] + 648.
Síntesis del compuesto 1-5: Esquema de reacción E Este ejemplo ilustra la síntesis de "6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{6- [5- (morfolina-4 -carbonil ) -piridin-2-ilamino] -piridazin-4 - il } -fenil) -2H-ftalazin- 1-ona" Paso 1. Preparación de [6- (5-cloro-piridazin-3-ilamino) -piridin-3-il] -morfolin-4-il-metanona. 3 , 5-Dicloropiridazina (1.0 g, 4.83 mmol) , (4- aminof enil) (morf olino) metanona (864mg, 5.80 mmol) , CS2C03 (3.15 g, 9.66 mmol) se disolvieron en dioxano (20 ml) . Bajo atmósfera de N2, se agregaron Pd2(dba)3 (221 mg, 0.24 mmol) y Xantfos (280 mg, 0.48 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura de reflujo durante la noche. Después de la finalización de la reacción, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua (100 ml) , y se extrajo con DCM (100 ml) . Las fases orgánicas combinadas se lavaron con solución acuosa saturada de cloruro de sodio (100 ml) , se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se purificó mediante columna de gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 1:5) . El producto deseado se obtuvo como un sólido amarillo (715 mg, rendimiento de 46%) LC-MS:. 320 [M+l]+, tR = 1.208 min.
Paso 2. Preparación de 2- (6-terc-butil-8-f luoro-l-oxo- lH-f talazin-2-il) -6-{6- [5- (morf olina-4 -carbonil ) -piridin-2- ilamino] -piridazin-4 - il } -bencil éster del ácido acético [6- (5-Cloro-piridazin-3-ilamino) -piridin-3-il] -morfolin- 4-il-metanona (200 mg, 0.63 mmol), 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6- (4, 4,5,5-tetrametil [1 , 3 , 2] dioxaborolan-2-il) -bencil éster del ácido acético (470 mg, 1.25 mmol) y K2C03 (173 mg, 1.25 mmol) se disolvieron en dioxano/H20 (10:1, 11 mi) . Bajo atmósfera de N2, se agregaron Pd2(dba)3 (58 mg, 0.063 mmol) y X-fos (120 mg, 0.25 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura de reflujo durante la noche. Después de la finalización de la reacción, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se purificó mediante columna de gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 2:1) . El producto deseado se obtuvo como un sólido amarillo (240 mg, rendimiento 59%). LC-MS: 652 [M + 1]+, tR = 1.459 min.
Ejemplo 5 Paso 3. 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {6- [5-(morfolina-4-carbonil) -piridin-2 - ilamino] -piridazin-4 - il } -fenil) -2H-ftalazin-l-ona. 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6-{6-[5- (morfolina-4 -carbonil ) -piridin-2-ilamino] -piridazin-4 - il } - bencil éster del ácido acético (240 mg, 0.37 mmol) se disolvió en metanol (10 mi). Se agregó K2C03 (102 mg, 0.74 mmol) a temperatura ambiente y la mezcla se agitó a esa temperatura durante 2 horas. Después de la finalización de la reacción, la mezcla se filtró. El filtrado se lavó con agua, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El producto deseado se obtuvo como un sólido de color amarillo (150 mg, rendimiento 67%). ¾ 1SDR (300 MHz, DMSO) : d 10.56 (s, 1H), 8.96 (d, J= 1.9 Hz, 1H) , 8.55 - 8.51 (m, 1H) , 8.34 (d, J= 2.2 Hz, 1H), 8.23 (d, J= 1.9 Hz, 1H) , 7.88 (d, J= 1.6 Hz, 1H) , 7.85 - 7.73 (m, 3H), 7.65 - 7.47 (m, 3H) , 4.88-4.80 (m, 1H) , 4.28 (ddd, J= 4.3, 3.1, 2.0 Hz, 2H) , 3.65 - 3.46 (m, 8H) , 1.38 (s, 9H) . LC-MS 610[M+1]+, tR= 1.389 min. HPLC: 97.93 % a 214 nm, 98.77 % a 254 nm, tR = 3.532 min. Síntesis del compuesto 1-6: Esquema de reacción F Este ejemplo ilustra la síntesis de 6-tert-Butil-8- fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {2- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -piridin- - il } -fenil ) -2H-ftalazin-l-ona" Paso 1 Preparación de [6- (4-bromo-piridin-2 - ilamino) -piridin-3 -il] -morfolin-4 -il-metanona . 2 , 4 -dibromopiridina (0.7 g, 3.34 mmoles) , (4-aminofenil) (morfolino) metanona (733 mg, 3.54 mmol) y CS2C03 (1.92 g, 5.90 mmol) se disolvieron en dioxano (10 ml) . Bajo atmósfera de N2, se agregaron Pd2 (dba) 3 (135 mg, 0.15 mmol) y Xantfos (171 mg, 0.30 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura de reflujo durante la noche. Después de la finalización de la reacción, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua (100 ml) , se extrajo con DCM (100 ml) y después se lavó con solución acuosa saturada de cloruro de sodio (100 ml) . La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se purificó mediante columna de gel de sílice (éter de petróleo : acetato de etilo = 2:1). El producto deseado se obtuvo como un sólido amarillo (426 mg, rendimiento 40%) . 1H NMR (300 MHz, MeOD) : d 10.19 (s, 1H) , 8.34 (d, J= 2.3 Hz, 1H) , 8.18 - 8.09 (m, 2H) , 7.75 (dd, J= 8.6, 2.3 Hz, 1H) , 7.65 (d, J= 8.7 Hz, 1H) , 7.19 - 7.09 (m, 1H) , 3.55 (d, J= 23.3 Hz, 8H) . LC-MS: 363 [M+1] + , tR= 1.210 min.
Paso 2. Preparación de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6-{2- [5- (morfolina- -carbonil ) -piridin-2-ilamino] -piridin-4 - il } -bencil éster del ácido acético. [6- (4-bromo-piridin-2-ilamino) -piridin-3-il] -morfolin-4 -il-metanona (200 mg, 0.55 mmol) , 2- (6-terc-butil-8-fluoro-1-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6 - (4,4,5,5-tetrametil [1, 3 , 2] dioxaborolan-2-il) -bencill éster del ácido acético (410 mg, 0.83 mmol) y K2C03 (152 mg, 1.10 mmol) se disolvieron en dioxano/H20 (10:1.11 mi). Bajo atmósfera de N2, se agregaron Pd2 (dba) 3 (50 mg, 0.055 mmol) y X-fos (105 mg, 0.22 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura de reflujo durante la noche. Después de la finalización de la reacción, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. La capa orgánica se lavó con salmuera saturada, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se purificó mediante columna de gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo = 2:1) . El producto deseado se obtuvo como un sólido de color amarillo (200 mg, rendimiento 56%) . LC-MS: 651 [M+l]+, tR = 1.397 min.
Ejemplo 6 Paso 3. 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {2- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2 - ilamino] -piridin-4- il } -fenil) -2H-ftalazin-l-ona.
El 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6-{2- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2 - ilamino] -piridin-4-il}-bencil éster del ácido acético (200 mg, 0.31 mmol) se disolvió en metanol (10 mi) . K2C03 (86 mg, 0.62 mmol) se agregó a temperatura ambiente, y la mezcla se agitó a esa temperatura durante 2 horas. La mezcla se vertió en agua (10 mi) , se extrajo con DCM (100 mi) y después se lavó con solución acuosa saturada de cloruro de sodio (100 mi) . El extracto orgánico combinado se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se purificó mediante columna de gel de sílice (éter de petróleo : acetato de etilo = 1:2) . El producto deseado se obtuvo como un sólido blanco (130 mg, rendimiento de 69%). XH NMR (300 MHz, MeOD) : d 8.36 (d, J= 2.6 Hz, 1H) , 8.22 - 8.18 (m, 2H) , 7.73 (d, J= 1.5 Hz, 2H) , 7.65 - 7.60 (m, 2H) , 7.57 - 7.51 (m, 1H) , 7.50 - 7.46 (m, 1H) , 7.38 (d, J= 7.6 Hz , 2H) , 7.00 (dd, J= 5.2, 1.5 Hz, 1H) , 4.36 (s, 2H) , 3.59 (s 8H) , 1.36 (d, J= 5.7 Hz, 9H).LC-MS: 609 [M+1]+, tR= 1.407 min. HPLC: 97.79 % a 214 nm, 99.31 % a 254 nm, tR = 3.479 min.
Síntesis del compuesto 1-7: Esquema de reacción G Este ejemplo ilustra la síntesis de "6-terc-butil-8- fluoro-2- (2 -hidroximetil-3 - { 8- [4- (morfolina-4-carbonil) - fenilamino] midazo [l,2-a]pirazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l- ona" Paso 1. Preparación de [4- (6-bromo-imidazo [1, 2- a] pirazin-8-ilamino) -fenil] -morfolin-4-il-metanona.
Una solución de 6 , 8-dibromoimidazo [1 , 2-a] pirazina (500 mg, 1.8 mmoles) , (4-aminofenil) (morfolino) -metanona (408 mg, 1.98 mmoles) y CSA (356 mg, 1.53 mmoles) en iPrOH (30 mi) se agitó a 90°C durante la noche. El solvente se evaporó. El residuo se disolvió en DCM (30 mi) . Se agregó una solución de NaHC03 (10 mi) para ajustar a pH = 8. La capa orgánica se separó y se secó sobre Na2S04. El agente de secado se retiró por filtración y la solución resultante se concentró a vacío. El residuo fue purificado a través de una columna de gel de sílice (acetato de etilo: éter de petróleo = 1:1) para dar el producto deseado como un sólido (500 mg, rendimiento 69%) de color amarillo.
LC- S: 404 [M + 1] + tR = 1.409 min.
Paso 2. Preparación de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6- {8- [4- (morfolina-4 -carbonil ) -fenilamino] -imidazo [1 , 2 -a] irazin-6 -il } -bencil éster del ácido acético Una solución de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6- (4,4,5, 5-tetrametil [1,3,2] dioxaborolan-2 -il) -bencil éster del ácido acético (491.3 mg, 1 mmol) , [4- (6-bromo-imidazo [1, 2-a] pirazin-8-ilamino) -fenil] -morfolin-4-il-metanona (200 mg, 0.5 mmoles) , K2C03 (137 mg, 1 mmol) , Pd2(dba)3 (45.4 mg , 0.05 mmol) y X-Fos (94.5 mg , 0.2 mmol) en 30 mi de dioxano y 10 mi de agua se agitó a 90°C durante la noche. La mezcla de reacción cruda se filtró. El filtrado se evaporó y el residuo resultante se purificó a través de una columna de gel de sílice (acetato de etilo: éter de petróleo = 1:2) para dar el compuesto del producto deseado como un aceite amarillo (320 mg, rendimiento de 93%) .
LC- S: 690 [M + 1]+ TR = 1.618 min.
Ejemplo 7 Paso 3. 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- (8- [4- (morfolina-4 -carbonil ) -fenilamino] -imidazo [1 , 2 -a] pirazin-6-il}-fenil) -2H-ftalazin-l-ona.
Una solución de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6-{8- [4- (morfolina-4-carbonil) -fenilamino] -imidazo [1 , 2-a] pirazin-6-il } -bencil éster del ácido acético (320 mg, 0.47 mmol) y K2C03 (130 mg, 0.95 mmol) en MeOH (15 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción cruda se filtró. La torta del filtro se lavó con MeOH (5 mi) y se secó para proporcionar el producto deseado como un sólido (50 mg, rendimiento del 16%) de color amarillo. 1H NMR (301 MHz, DMSO) d 9.95 (s, 1H) , 8.51 (d, J = 2.5 Hz, 1H) , 8.31 (s, 1H) , 8.20 - 8.04 (m, 3H) , 7.86 (s, 1H) , 7.71 (dd, J = 16.3, 11.9 Hz, 3H) , 7.55 (t, J = 7.7 Hz, 1H) , 7.40 (dd, J = 27.6, 8.2 Hz, 3H) , 4.65 (t, J= 5.5 Hz, 1H) , 4.45 (s, 3H) , 3.58 (s, 5H) , 3.49 (s, 4H) , 1.37 (s, 9H) . LC-MS: 649 [M+l]+, tR = 1.582 min.
Síntesis del compuesto 1-8: Paso 1. Preparación de (6-bromo-imidazo [1, 2-a] pirazin-8-il) - [4- (l-metil-piperidin-4-il) -fenil] -amina.
Una solución de 6 , 8 -dibromoimidazo [1 , 2 -a] pirazina (500 mg, 1.8 mmol) , 4- (l-metilpiperidin-4-il)bencenamina (376 mg, 1.98 mmoles) y CSA (356 mg, 1.53 mmol) en iPrOH (30 mi) se agitó a 90 °C durante la noche. El solvente se evaporó. El residuo se disolvió en DCM (30ml) , se agregó una solución de NaHC03 (10 mi) para ajustar el pH = 8. La capa orgánica se secó sobre Na2S04 y se evaporó. El residuo se purificó a través de una columna de gel de sílice (acetato de etilo: éter de petróleo = 1:1) para proporcionar el producto deseado como un sólido (400 mg, rendimiento de 58%) de color amarillo. LC-MS : 388 [M + 1] + tR = 1.402 min.
Paso 2. Preparación de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo- lH-ftalazin-2-il) -6-{8- [4- (1-met i 1 -piperidin- 4 - il) - fenilaraino] -imidazo [l,2-a]pi azin-6-il} -benci 1 éster del ácido acético Una solución de acetato de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-1- oxoftalazin-2 (1H) -il) -6- (4,4,5, 5-tetrametil-l, 3,2- dioxaborolan-2 - il ) bencil (491.3 mg, 1 mmol) , (6-bromo- imidazo [l,2-a]pirazin-8-il) - [4- (1-meti1 -piperidin-4 -il) - fenil] -amina (200 mg, 0.52 mmol), K2C03 (137 mg, 1 mmol), Pd2(dba)3 (45.4 mg, 0.05 mmol), X-fos (94.5 mg, 0.2 mmol) en 30 mi de dioxano y 10 mi de agua se agitó a 90°C durante la noche. La mezcla de reacción se filtró. El filtrado se evaporó y el residuo se purificó a través de una columna de gel de sílice (acetato de etilo: éter de petróleo = 1:2) para dar el producto deseado como un aceite amarillo (320 mg, rendimiento del 92%) .
LC-MS: 674 [M + 1]+ tR = 1.539 min.
Ej emplo 8 Paso 3. 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- [4-(l-metil-piperidin-4-il) fenilamino] -imidazo [1, 2-a] pirazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona .
Una solución de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-1-???-??-ftalazin-2-il) -6-{8- [4- (l-metil-piperidin-4-il) -fenilamino] -imidazo [1, 2-a] pirazin-6-il} -bencil éster del ácido acético (150 mg, 0.22 mmol) y K2C03 (62 mg, 0.44 mmol) en MeOH (15 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se filtró la mezcla de reacción. La torta del filtro se lavó con MeOH (5 mi) y se secó para dar 50 mg del producto deseado como un sólido (rendimiento 36%) de color amarillo.
XH NMR (300 MHz, DMS0-6) d ppm 0.91 (d, J=6.42 Hz, 3 H) 1.09 - 1.30 (m, 2 H) 1.37 (s y traslape multiplete, 11 H) 1.66 (d, J=12.09 Hz, 2 H) 2.55 (d, J=12.09 Hz, 2 H) 3.31 (s, 3 H) 3.57 (d, J=12.09 Hz, 2 H) 4.39 (br. s., 2 H) 4.64 (br. s., 1 H) 6.86 (d, J=9.07 Hz, 2 H) 7.42 (d, J=7.55 Hz, 1 H) 7.53 (t, J=7.74 Hz, 1 H) 7.59 - 7.91 (m, 6 H) 8.01 (s, 1 H) 8.18 (s, 1 H) 8.51 (d, J=2.27 Hz, 1 H) 9.45 (s, 1 H) .
LC-MS: 632 [M+l]+, tR = 1.560 min.
Síntesis del compuesto 1-9: Esquema de reacción H Este ejemplo ilustra la síntesis de "6-terc-butil-8-f luoro-2- hidroximetil-3- {8- [4- (morfolina-4-carbonil) -feni lamino] midazo [1,2- a] ir idin- 6 - il } - f enil ) -2H- f talazin- 1 -ona" Paso 1. Preparación de 6-bromo-8-yodo-imidazo[l,2-a]piperidina. 5-bromo-3-yodopiridin-2-amina (1.0 g, 3.34 mmol) y 2- bromo- 1, 1 -dimetoxietano se disolvieron en etanol (20 mi) . A esta solución se agregó una mezcla de 50% de HBr en agua (4 mi) . La mezcla se agitó a temperatura de reflujo durante la noche . Después de la finalización de la reacción, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El residuo se suspendió en DCM (10 mi) y se agitó con la solución acuosa saturada de Na2C03. La capa orgánica se separó y se lavó con salmuera saturada, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El producto deseado se obtuvo como un sólido de color amarillo (950 mg, rendimiento 88%). LC-MS: 323 [M+l]+, tR = 1.299 min.
Paso 2. Preparación de [4- (6-bromo-imidazo [1, 2-a] piridin- 8 - ilamino) -fenil] -morfolin-4-il-metanona. 6-bromo-8-yodo-imidazo [1, 2-a] iridina (500 mg, 1.53 mmol) , (4 -aminofenil ) (morfolino) -metanona (348 mg, 1.69 mmol) y CsC03 (998 mg, 3.06 mmol) se disolvieron en dioxano (10 mi) . Bajo atmósfera de N2/ se agregaron Pd2(dba)3 (70 mg, 0.077 mmol) y Xantfos (89 mg, 0.153 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura de reflujo durante la noche. Después de la finalización de la reacción, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua (100 mi) y se extrajo con DCM (100 mi) . Los extractos orgánicos se lavaron con solución acuosa saturada de cloruro de sodio (100 mi) , se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron. El residuo se purificó mediante columna de gel de sílice (éter de petróleo : acetato de etilo 1:2) para proporcionar el producto deseado como un sólido de color amarillo (270 mg, rendimiento 44%). LC-MS: 401 [M +1]+, tR = 1.257 min.
Paso 3. Preparación de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-phthalazin-2-il) -6 - { 8 - [4- (morfol ina - 4- carbonil) -fenilamino] -imidazo[l,2-a]piridin-6-il} -bencil éster del ácido acético [4- (6-Bromo-imidazo [1, 2-a] piridin-8-ilamino) -fenil] morfolin- -il-metanona (270 mg, 0.68 mmoles) , acetato de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxoftalazin-2 (1H) -il) -6- ( , 4 , 5 , 5-tetrametil-l , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) bencil (670 mg, 1.35 mmol) y K2C03 (188 mg, 1.36 mmol) se disolvieron en una mezcla 10:1 de dioxano en H20 (11 mi). Bajo atmósfera de N2/ se agregaron Pd2(dba)3 (62 mg, 0.068 mmol) y X-fos (129 mg, 0.27 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura de reflujo durante la noche. Después de la finalización de la reacción, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua (100 mi) y se extrajo con DCM (100 mi) . Los extractos orgánicos se lavaron con solución acuosa saturada de cloruro de sodio (100 mi) , se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se purificó mediante columna de gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo 2:1) para proporcionar el producto deseado como un sólido amarillo (60 mg, rendimiento 25%). LC-MS: 689 [M +1]+, tR = 1.506 min.
Ejemplo 9 Paso 4. 6 -terc-butil -8-fluoro-2- (2 -hidroximetil-3 - {8- [4- (morfolina-4 -carbonil ) -fenilamino] -imidazo [1, 2-a] iridin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6- {8- [4- (morfol ina -4-carbonil) -fenilamino] -imidazo[l,2-a] piridin- 6 - il } -bencil éster del ácido acético (200 mg, 0.29 mmol) se disolvió en metanol (10 mi) . A esta solución se le agregó K2C03 (80 mg , 0.58 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de la finalización de la reacción, la mezcla se vertió en agua (10 mi), se extrajo con DCM (100 mi) . Los extractos orgánicos se lavaron con solución acuosa saturada de cloruro de sodio (100 mi) , se secó sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se purificó mediante columna de gel de sílice (éter de petróleo: acetato de etilo 1:3) para proporcionar el producto deseado como un sólido amarillo (30 mg , rendimiento 16%) . XH NMR (300 MHz , CDCl 3 ) : d 8.37 (d, J= 2.7 Hz , 1H), 8.04 (d, J= 1.3 Hz, 1H) , 7.78 (s, 1H) , 7.73 (d, J= 1.7 Hz , 1H), 7.61 (d, J = 1.7 Hz, 1H) , 7.57 (d, J = 1.6 Hz, 1H) , 7.45 (dd, J= 7.7, 5.7 Hz, 3H) , 7.36 (dd, J = 6.6, 2.7 Hz, 1H), 7.32 (s, 3H) , 7.19 (d, J= 1.4 Hz, 1H) , 4.38 (s, 2H), 3.57 (s, 8H) , 1.35 (s, 9H) .LC-MS: 647[M+1]+, tR= 1.407min. HPLC : 97.75 % a 214 nm, 98.27 % a 254 nm, tR = 3.633 min .
Síntesis del compuesto 1-10: Ejemplo 10 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3-{8- [5- (morfolina-4 -carbonilo) -piridin-2-ilamino] -imidazo [1, 2- a]piridin-6-il}-fenil) -2H-ftalazin-l-ona Preparación por un procedimiento similar al ejemplo 9 excepto que se empleó (6-amino-piridin-3-il) -morfolin-4 -il-metanona para (4-amino-fenil) -morfolin-4-il-metanona proporcionó el compuesto del título en forma de sólido amarillo (270 mg, 64%). XH NMR (300 MHz , CDC13) : d 9.54 (s, 1 H) , 8.51 (d, J= 2.7 Hz, 1 H) , 8.40 (d, J= 1.5 Hz , 1 H) , 8.31 (d, J= 2.1 Hz, 1 H) , 8.24 (d, J= 1.5 Hz, 1 H) , 7.98 (d, J= 1.2 Hz, 1 H) , 7.86 (d, J= 1.8 Hz , 1 H) , 7.76-7.68 (m, 2 H) , 7.60-7.45 (m, 5 H) , 4.64 (t, J= 5.1 Hz , 1 H) , 4.37-4.35 (m, 2 H) , 3.60-3.51 (m, 8 H) , 1.38 (s, 9 H) . LC-MS: 648 [ +l]+, tR= 1.418 min. HPLC : 99.82 % a 214 nm, 99.88 % a 254 nm, tR = 3.510 min.
Síntesis del compuesto 1-11: Esquema de reacción I s o Este ejemplo ilustra la síntesis de "6-terc-butil-8- fluoro-2-{2-hidroximetil-3- [8- (1' -metil-1' ,2',3',4',5',6'-hexahidro- [3 , 4 ' ] bipiridinil-6-ilamino) -imidazo [1 , 2-a] piridin-6-il] -fenil}-2H-ftalazin-l-ona" Paso 1. Preparación de ter-butil éster del ácido 6-nitro-3 ' ,6' -dihidro-2 ' H- [3,4'] bipiridinil - 1 ' -carboxílico Una solución de ter-butil éster del ácido 4- (4,4,5,5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2 -il) -3 , 6-dihidro-2H-piridina-1-carboxílico (5.38 g, 17.40 mmoles) , 5-bromo-2-nitro-piridina (3.52 g, 17.40 mmol) , Cs2C03 (11.34 g, 34.8 mmoles), y Pd(PPh3)2Cl2 (1.27 g, 1.74 mmoles ) en dioxano (50 mi) se agitó a 85°C bajo ambiente de N2 durante la noche. TLC mostró una reacción completa. La solución se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04, y se concentraron. La purificación por columna de cromatografía sobre gel de sílice (eluyente éter de petróleo: acetato de etilo, 2:1) proporcionó el producto deseado en forma de sólido de color amarillo (3.37 g, 64%) .
NMR (300 MHz, CDC13) : d 8.63 (d, J= 2.4 Hz, 1 H) , 8.20 J= 8.4 Hz, 1 H) , 7.93 (dd, J= 8.4, 2.4 Hz, 1 H) , 6.31 (s, 1 H) , 4.17-4.14 (m, 2 H) , 3.68 (t, J= 5.7 Hz , 1 H) , 2.57-2.54 (m, 2 H) , 1.49 (s, 9 H) .
Paso 2. Preparación de ter-butil éster del ácido 6-amino-3' ,4' ,5' ,6' -tetrahidro-2 ?- [3 , 4 ' ] bipiridinil-carboxílico.
A una solución de ter-butil éster del ácido 6-nitro-3' ,6'-dihidro-2'?- [3,4']bipiridinil-carboxílico (3 g, 9.84 mmol) en CH30H:DCM (40 mi, v/v = 3:1) se agregó Pd/C (600 mg) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de hidrógeno durante la noche. TLC mostró una reacción completa. La solución se filtró y el filtrado resultante se evaporó a sequedad para dar el producto crudo, que se utilizó directamente en el paso siguiente (2.6 g, 96%). NMR ¾ (300 MHz, CDCl3) : ¾ NMR (300 MHz, CDCI3) : d 7.89 (d, J= 2.4 Hz, 1 H) , 7.26 (dd, J= 8.4, 2.4 Hz, 1 H) , 6.46 (d, J= 8.4 Hz, 1 H) , 4.36 (bs, 2 H) , 4.23-4.19 (m, 2 H) , 2.81-2.73 (m, 2 H) , 2.58-2.47 (m, 1 H) , 1.78-1.73 (m, 2 H), 1.61-1.51 (m, 2 H) , 1.47 (s, 9 H) .
Paso 3. Preparación de ter-butil éster del ácido 6- (6-bromo- imidazo [1 , 2 -a] iridin- 8 -i lamino) -3 ' , 4 ' ,5' , 6 ' -tetrahidro-2 ' H- [3,4' ] bipiridinil-1' -carboxílico Una mezcla de ter-butil éster del ácido 6-amino- 3' ,4' , 5' , 6' - tetrahidro-2 ' H- [3,4' ] bipiridinil-carboxílico (971 mg, 3.0063 mmol) , 6 -bromo- 8 -yodo- imidazo [1 , 2 -a] iridina (1 g, 3.6075 mmol) , Pd2(dba)3 (138 mg, 0.1503 mmol) , Xantfos (174 mg, 0.3006 mmoles) , y Cs2C03 (2 g, 6.0126 mmol) se combinaron en dioxano (20 mi) y la solución se agitó a 90°C bajo atmosfera de N2 durante 5 horas en el punto en el que la TLC mostró que quedaba poco material de partida. La solución se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04, y se concentraron. La purificación por cromatografía de columna sobre gel de sílice (eluyente DCM:MeOH, 60:1) proporcionó el producto deseado en forma de sólido de color amarillo (1.15 g, 81%) . ¾ NMR (300 MHz, CDC13) : d 8.44 (d, J= 1.5 Hz, 1 H) , 8.20 (d, J = 2.1 Hz, 1 H) , 7.92 (s, 1 H), 7.84 (d, J = 1.5 Hz , 1 H) , 7.49 (s, 2 H) , 7.42 (dd, J= 8.4, 2.4 Hz , 1 H) , 6.84 (d, J= 8.4 Hz , 1 H) , 4.27- 4.23 (m, 2 H) , 2.85-2.77 (m, 2 H) , 2.68-2.58 (ra, 1 H) , 1.84-1.79 (m, 2 H) , 1.67-1.57 (m, 2 H) , 1.48 (s, 9 H) .
Paso 4. Preparación de ter-butil éster del ácido 6-{6- [ 2 - acetoximet i 1 - 3 - ( 6 - e c -but i 1 - 8 - f luoro - 1 - oxo - 1H -ftalazin-2-il) -fenil] -imidazo [1, 2-a]piridin-8-ilamino}-3' ,4' ,5' , 6 ' -tetrahidro-2 ?- [3 , 4 ' ] bipiridinil-carboxílico Una mezcla de ter-butil éster del ácido 6-(6-bromo-imidazo [1, 2 -a] piridin-8-ilamino) -3', 4', 5', 6' -tetrahidro-2 ' H-[3 , 4 ' ] bipiridinil-carboxílico (471 mg, 1 mmol), acetato de 2-(6-tert-butil-8-fluoro-l-oxoftalazin-2 ( 1H) -il) -6- (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-1, 3 , 2-dioxaborolan-2-il)bencilo (990 mg, 2 mmol), Pd2(dba)3 (92 mg, 0.1 mmoles) , X-Fos (191 mg, 0.4 mmol) y K2C03 (2 g, 6.01 mmol) en dioxano (15 mi) y H20 (1.5 mi) se agitó a 100°C bajo atmósfera de N2. Después de agitar durante 3 horas, la TLC mostró una reacción completa. La solución se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04, y se concentraron. La purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente éter de petróleo: acetato de etilo, 3:5) proporcionó el producto deseado en forma de sólido amarillo (310 mg, 41%) . 1H NMR (300 MHz, CDC13) : d 9.13 (s, 1 H) , 8.52-8.51 (ra, 1 H) , 8.36-8.35 (m, 1 H) , 8.14-8.12 (m, 2 H) , 7.96 (s, 1 H) , 7.86 (s, 1 H) , 7.75 (d, J= 13.2 Hz, 1 H) , 7.67-7.50 (m, 5 H) , 7.35 (d, J= 8.4 Hz, 1 H) , 4.92 (s, 2 H) , 2.80-2.72 (m, 2 H) , 2.64-2.56 (m, 1 H) , 1.74-1.69 (m, 2 H) , 1.63-1.62 (m, 2 H) , 1.54-1.44 (m, 2 H) , 1.41 (s, 9 H) , 1.38 (s, 9 H) .
Paso 5. Preparación de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6-[8-(l',2',3',4',5',6' -hexahidro- [3,4'] bi iridinil -6 -ilamino) - imidazo [1 , 2-a] piridin-6 - il] -bencil éster del ácido acético A la solución de ter-butil éster del ácido 6-{6-[2- acetoximetil-3 - (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) fenil] -imidazo [1 , 2 -a] iridin- 8- ilamino} -3',4',5',6'-tetrahidro-2 ?- [3 , 4 ' ] bipiridinil -1 ' -carboxílico (280 mg, 0.3689 mmol) en DCM (8 mi) se agregó TFA (1.4 mi) y la solución se agitó a temperatura ambiente durante una hora. TLC mostró una reacción completa. La solución se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04, y se concentraron para dar el producto crudo utilizado directamente para el siguiente paso (260 mg) . LC-MS: 660 [M + 1] + tR = 1.270 min.
Paso 6. Preparación de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6- [8- (1' -metil- (1',2',3',4',5',6'-hexahidro- [3,4'] bipiridinil-6- ilamino) -imidazo [1 , 2-a] piridin-6-il] -bencil éster del ácido acético A una solución de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-1-???-??-ftalazin-2-il) -6- [8- (1' ,2' ,3' ,4' ,5' ,6' -hexahidro- [3,4'] bipi idinil-6 - ilamino) - imidazo [1 , 2 -a] piridin-6- il] -bencil éster del ácido acético (260 mg, 0.3945 mmol) en CH30H (10 mi) se agregó formaldehído (163 mg de 37%) . Después de agitar durante 10 minutos a temperatura ambiente, se agregaron dos gotas de ácido acético seguido de NaBH(OAc)3 (418 mg, 1.9727 mmol) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. TLC mostró una reacción completa. La solución se lavó con agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04, y se concentraron para dar el producto crudo (270 mg) . LC-MS: 674 [M + 1] + tR = 1.265 min.
Ejemplo 11 Paso 7. 6 -terc-butil -8-fluoro-2 - { 2 -hidroximetil-3 - [8- (R-metil-1' ,2', 3', ', 5', 6' -hexahidro- [3,4' ] bipiridinil-6-ilamino) -imidazo [1, 2 -a] piridin-6-il] -fenil} -2H-ftalazin-l-ona .
Una solución de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-1-???-??-ftalazin-2-il) -6- [8- (1' -metil-1' ,2', 3', 4', 5', 6' -hexahidro-[3,4' ] bipiridinil-6- ilamino) - imidazo [1 , 2 -a] piridin-?- il] -bencil éster del ácido acético (270 mg, 0.4012 mmol) y K2C03 (166 mg, 1.2036 mmol) en CH30H (15 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. TLC mostró una reacción completa.
La solución se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2S04, y se concentraron para dar el producto deseado (200 mg) con alta pureza. XH NMR (300 MHz, CDC13) : d 9.07 (s, 1 H) , 8.50 (d, J= 2.4 Hz , 1 H) , 8.33 (s, 1 H) , 8.15 (s, 1 H) , 8.09 (d, J= 2.4 Hz, 1 H) , 7.95 (s, 1 H) , 7.86 (d, J= 1.5 Hz, 1 H) , 7.73 (dd, J= 13.2, 1.8 Hz , 1 H) , 7.57-7.43 (m, 5 H) , 7.35 (d, J= 8.4 Hz, 1 H) , 4.63 (bs, 1 H) , 2.85-2.81 (m, 2 H) , 2.43-2.32 (m, 2 H) , 2.17 (s, 3 H) , 1.97-1.88 (m, 2 H) , 1.71-1.60 (m, 4 H) , 1.38 (s, 9 H) . LC-MS : 632 [M+l]+, tR = 1.392 min. HPLC: 95.50 % a 214 nm, 96.03 % a 254 nm, tR = 3.198 min .
Síntesis del compuesto 1-12: Paso 1. Preparación de (6-bromo-piridin-3-il) -morfolin-4-il-metanona.
La mezcla de ácido 6 -bromonicotínico (700 mg, 3.5 mmoles) , morfolina (391 mg, 4.5 mmol) , HATU (220 mg, 0.59 mmol) y DIPEA (0.3 mi) en 10 mi de THF seco se agitó a temperatura ambiente durante 14 horas. La solución de reacción se evaporó a sequedad. Al residuo se le agregaron 20 mi de hidrocloruro 0.5 N, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (50 mi x 3) . La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentró para dar (6-bromopiridin-3-il) (morfolino)metanona (750 mg, 79%). LC - MS : 271' 273 [M + H] +, tR = 1.290 min.
Paso 2. Preparación de [6- ( 6 -cloro-pirimidin-4 - ilamino) -piridin-3 -il] -morfolin-4-il-metanona A una solución agitada de (6-bromopiridin-3-il) (morfolino) metanona (0.75 g, 2.78 mmol) en tolueno (5 mi) se agregó 6-cloropirimidin-4-amina (0.43 g, 3.33 mmol), Pd2(dba)3 (100 mg, 0.3 mmol), Davephos (157 mg, 0.4 mmol) y NaOt-Bu (848 mg, 8 mmol) . La mezcla se agitó a 150°C durante 13 horas bajo N2. La mezcla se evaporó y el residuo se recogió en acetato de etilo (50 mi) y H20 (20 mi) . La fase orgánica se lavó con H20 (2 X 20 mi) y después con salmuera (2 X 20 mi) y se secó sobre Na2S04. Después de la filtración y concentración, el producto final (350 mg, 40%) se obtuvo como un sólido amarillo. LC - MS : 320.1 [M + H]+, tR = 1.306 min.
Paso 3. Preparación de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6-{6- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -pirimidin-4-il} -bencil éster del ácido acético.
A una solución agitada de (6- (6-cloropirimidin-4 -ilamino) piridin-3-il) (morfolino) metanona (0.15 g, 0.45 mmol) en 1,4-dioxano (5 mi) se agregó acetato de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxoftalazin-2 (1H) -il) -6- (4,4,5, 5-tetrametil-l , 3,2-dioxaborolan-2-il)bencilo (0.250 g, 0.5 mmol), Pd(PPh3)4 (30 mg, 0.08 mmoles) , Na2C03 (212 mg, 2 mmol) y H20 (2 mi). La mezcla se agitó a 80°C durante 13 horas bajo N2. La mezcla se evaporó y acetato de etilo (50 mi) y H20 (20 mi) se agregaron al residuo resultante. La fase orgánica se lavó con H20 (2 X 20 mi), salmuera (2 X 20 mi) y se secó sobre Na2S04. Después de la filtración y concentración, el producto final (90 mg, 30%) se obtuvo como un sólido amarillo. LC - MS : 652.2 [M + H]+, tR = 1.499 min.
Ejemplo 12 Paso 5. Preparación de 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2- hidroximetil-3-{6- [5- (morfolina-4 -carbonil ) -piridin-2- ilamino] -pirimidin-4-il} -fenil) -2H-ftalazin- 1-ona A una solución de acetato de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-1- oxoftalazin-2 (1H) -il) -6- (6- (5- (morfolina-4 -carbonil ) piridin- 2-ilamino)pirimidin-4-il)bencilo (90 mg, 0.14 mmol) en 1,4- dioxano (5 mi) se agregó NaOH 1N (10 mi) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas . La mezcla se acidificó a pH = 2, seguido por la adición de acetato de etilo (50 mi) y H20 (20 mi) . La fase orgánica se lavó con H20 (2 X 20 mi) , después con salmuera (2 X 20 mi) y se secó sobre Na2S04. Después de la filtración y concentración, el residuo se purificó por HPLC prep. para proporcionar (30 mg, 36%). XH NMR (300 MHz , CD30D) : d 8.98 (s, 1H) , 8.52 - 8.48 (m, 2H) , 8.39 (s, 1H) , 7.99 - 7.95 (m, 1H) , 7.85 (s, 1H) , 7.73 - 7.68 (m, 5H) , 4.55 (s, 2H) , 3.72 (brs, 8H) , 1.46 (s, 9H) . LC-MS (ESI): 610.3, [M+l] + HPLC: 97.17% a 214nm, 99.01% a 254nm, tR = 5.761 min.
Esquema de reacción J Preparación de Este ejemplo ilustra la síntesis de "6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2 -ilamino] -quinolin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona" Paso 1. Preparación de 8-bromo-6 -nitroquinolina .
A un matraz que contiene 6-nitroquinolina (4 g, 23 mmol) en ácido sulfúrico (20 mi) se agregó N-bromo-succinimida (5.31 g, 29.9 mmoles) . La mezcla se calentó a 60°C (baño de aceite) durante 6 horas y después se almacenó en un congelador durante la noche. La mezcla de reacción cruda se vertió en un vaso de precipitados que contiene hielo (250 mi) . El material se basificó mediante la adición primero de bicarbonato de sodio sólido y después una solución saturada de bicarbonato de sodio (a un pH de aproximadamente 10) . Durante este procedimiento también se agregó acetato de etilo (60 mi) . El material se filtró para eliminar el material insoluble y el filtrado se transfirió a un embudo de separación. Se agregó acetato de etilo (100 mi) y el material bifásico se agita. La fase orgánica se recogió y se agitó con un volumen igual de solución de salmuera. La fase de acetato de etilo se recogió y las fases acuosas se volvieron a extraer con acetato de etilo (2 X 100 mi) . La fase orgánica combinada se evaporó para proporcionar un sólido. El sólido de la filtración anterior se recogió en acetato de etilo caliente (60 mi) . El material se enfrió hasta la temperatura ambiente, se secó sobre sulfato de magnesio y se filtró. El solvente se eliminó y el producto sólido crudo se combinó con el material obtenido de tratamiento acuoso. Este material se cristalizó del acetato de etilo caliente/hexano para proporcionar el producto deseado como un polvo de color amarillo (2.05 g) .
(M + H)+ = 253/255 m/e.
Paso 2. Preparación de 8-bromo uinolin-6-amina .
A un matraz que contiene 8-bromo-6-nitroquinolina (2.05 g, 8.1 mmol) , hierro electrolítico (2.26 g, 40.5 mmol) y cloruro de amonio (2.25 g, 42.1 mmol) se agregó etanol (20 mi) y agua (10 mi) . El matraz se equipó con un condensador de reflujo eficiente y después se calentó casi a reflujo (baño de aceite) durante 3 horas. El material caliente se filtró a través de un tapón de celita y se enjuagó con metanol caliente (100 mi) . El solvente se eliminó. El residuo se recogió en acetato de etilo (60 mi) y agua (60 mi) y se transfirió a un embudo separador, se agitó y la fase orgánica recogida. La fase orgánica se lavó con un volumen igual de salmuera. Las fases acuosas se extrajeron de nuevo con acetato de etilo (2 X 50 mi) . Los extractos de acetato de etilo combinados se secaron sobre MgS04, y se concentraron a vacío. El residuo resultante se cristalizó de diclorometano/hexanos calientes para proporcionar el producto deseado como un polvo de color marrón (860 mg) .
(M + H)+ = 223/225 m/e.
Paso 3. Preparación de 8-bromo-6-cloroquinolina . 8-Bromoquinolin-6-amina (300 mg, 1.34 mmoles) se recogió en ácido clorhídrico concentrado (8 mi) y se enfrió a 0°C (baño de hielo) . El nitrito de sodio (1.86 g, 26.9 mmol) se agregó en tres porciones iguales durante 10 minutos. La mezcla se retiró del baño de refrigeración y se agregó cloruro de cobre (I) (3.33 g, 33.6 mmol) en 3 porciones, durante aproximadamente 6 minutos. En agitación de una espuma desarrollada que se eleva verde-negro. Se continuó la agitación durante 45 minutos y después la mezcla de reacción se enfrió a 0°C (baño de hielo) . Una mezcla de agua con hielo (75 mi) e hidróxido de amonio (75 mi) se agregó con agitación vigorosa. Se agregó diclorometano (150 mi) y el material se agitó en un embudo de separación. La fase orgánica se recogió y se agitó con un volumen igual de salmuera. Las fases acuosas se extrajeron de nuevo con diclorometano (2 x 120 mi) . Los orgánicos se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron a vacío. El producto crudo se purificó por cromatografía en capa fina preparativa (2 placas) , eluyendo primero con metanol/diclorometano al 1% y después volver a desarrollar la placa con 25% de acetato de etilo/hexano . La banda de producto se recogió, proporcionando el producto deseado como un sólido blanco-amarillo ligero (287 mg) . (M + H)+ = 242/244 m/e .
Paso 4. Preparación de [6- (6-cloro-quinolin-8-ilamino) -piridin-3 -il] -morfolin-4-il-metanona .
Una mezcla de 8-bromo-6-clorquinolina (140 mg, 0.56 mmoles) , (6-aminopiridin-3-il) (morfolino) metanona (92 mg, 0.44 mmol) , xantfos (38.5 mg, 0.067 mmol) y carbonato de cesio se recogió en dioxano seco (6.5 mi) . El matraz de reacción se evacuó y se volvió a llenar con argón (repetido 5 veces) . Se agregó tris (dibencilidenacetona) paladio (0) (31 mg, 0.033 mmol) y el matraz se evacuó y se volvió a llenar con argón (repetido 3 veces) . El material se calentó a 90°C (baño de aceite) en atmósfera de argón durante 14 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de tapón corto de celita, enjuagando bien con dioxano. El solvente se eliminó y el residuo resultante se cargó en 2 placas de cromatografía en capa fina preparativa. Las placas se eluyeron con 75% de acetato de etilo/hexano y la banda de producto se recogió. Esto proporcionó el producto deseado como un aceite viscoso de color marrón claro (180 mg) . (M + H) + = 369 m/e.
Paso 5. Preparación de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxo-lH-ftalazin-2-il) -6-{8- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -quinolin-6-i} -benc ll éster del ácido acético.
En un matraz de fondo redondo de 25 mi que contiene de acetato de 2- (6-terc-butil-8-fluoro-l-oxoftalazin-2 (1H) -il) -6- (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-l , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) bencil (563 mg, 683 µp??? , Ec : 1.4), (6 - (6-cloroquinolin- 8- ilamino) piridin-3 -il) (morfolino) metanona (180 mg, 488 µp??? , Ec : 1.00), X-FOS (34.9 mg, 73.2 µp???) y fosfato de potasio (228 mg, 1.07 mmol) se agregaron BuOH (7 mi) y H20 (1.65 mi). El matraz se evacuó y se rellenó con argón antes de la adición de Pd(dba)2 (19.6 mg, 34.2 µ?t???) . El matraz se evacuó y se rellenó de nuevo con argón y se calentó a 110°C durante 2.5 horas. LC/MS mostró la presencia del producto deseado como una mezcla con 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- [5- (morfolina-4 - carbonil) -piridin-2-ilamino] -quinolin-6-il}-fenil) -2H-ftalazin-l-ona . La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con 35 mi de agua y 35 mi de EtOAc y se agitó. La fase de EtOAc se recogió y se lavó con un volumen igual de salmuera. La fase acuosa se volvió a extraer con 2 X 30 mi de EtOAc. El extracto orgánico combinado se secó ( gS04) , y se concentró a vacío. El producto crudo se purificó por cromatografía en capa fina preparativa (3 placas) , eluyendo con 2% de metanol/cloruro de metileno para proporcionar el producto deseado (junto con algo de 6 -tere-butil-8-fluoro-2- (2 -hidroximetil-3 -{ 8- [5- (morfolina-4 -carbonil) -piridin-2 -ilamino] -quinolin-6-il } -fenil) -2H-ftalazin-l-ona) como un sólido espumoso de color marrón claro (310 mg) . (M + H) + = 701 m/e.
Ejemplo 13 Paso 6. Preparación de 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3 - {8- [5 - (morfolina-4 -carbonil) -pi idin-2 -ilamino-quinolin- 6 -il } -fenil) -2H-ftalazin-l-ona .
Esta reacción se lleva a cabo bajo condiciones similares a las descritas en el paso 3, ejemplo 1-1. Después de la elaboración del producto se purificó por cromatografía en capa fina preparativa (2 placas) , eluyendo con 8% de metanol/cloruro de metileno (a mitad del recorrido hacia arriba de la placa) . Las placas después se volvieron a desarrollar con 2% y después 4% de metanol/cloruro de metileno. Esto proporcionó el producto deseado como un polvo de color amarillo (94 mg) . (M + H) + = 659 m/e. XH NMR (300 MHz , CHLOROFORMO-d) d ppm 9.45 (s, 1 H) 8.94 (d, J=1.51 Hz, 1 H) 8.85 (dd, J=4.15, 1.51 Hz, 1 H) 8.39 (d, J=2.27 Hz, 1 H) 8.31 (d, J=2.64 Hz, 1 H) 8.23 (dd, J=8.31, 1.51 Hz, 1 H) 7.74 (dd, J=8.69, 2.27 Hz , 1 H) 7.65 (d, J=1.51 Hz, 1 H) 7.60 -7.63 (m, 1 H) 7.55 - 7.59 (m, 2 H) 7.50 -7.54 (m, 1 H) 7.49 (d, J=4.15 Hz, 1 H) 7.44 (dd, J=7.55, 1.89 Hz, 1 H) 7.11 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 4.44 (d, J=6.42 Hz, 2 H) 3.65 - 3.84 (m, 8 H) 3.61 (t, J=6.80 Hz, 1 H) 1.44 (s, 9 H) .
Ensayo biológico de datos Ensayo de inhibición de tirosina cinasa de Bruton (Btk) El ensayo es una captura de producto fosforilado 33P radioactivo a través de filtración. Las interacciones de Btk, sustrato de peptido de SH2 biotinilado (homología Src) , y ATP condujo a la fosforilación del sustrato de péptido. Producto biotinilado se une a microesferas de sefarosa con estreptavidina . Todos los productos radiomarcados, unidos se detectan mediante un contador de centelleo.
Las placas ensayadas son placas (Millipore) de filtro de PVDF hidrofílicas de 1.2 µp? de 96 pozos y de polipropileno (Greiner) de 96 pozos. Las concentraciones encontradas son las concentraciones de ensayo finales: 10 a 100 µ? de compuestos en DMSO (Burdick and Jackson) , 5-10 nM de enzima Btk (marcada con Histidina, de longitud completa) , 30 µ? de sustrato de peptido (Biotina-Aca-AAAEEIYGEI -N¾) , 100 µ? de ATP (Sigma) , 8 mM de imidazol (Sigma, pH 7.2), 8 mM de glicerol-2-fosfato (Sigma) , 200 µ? de EGTA (Roche Diagnostics) , 1 mM de MnCl2 (Sigma) , 20 mM de MgCl2 (Sigma) , 0.1 mg/ml de BSA (Sigma), 2 mM de DTT (Sigma), 1 µ??33 P ATP (Amersham) , 20% de microesferas de sefarosa estreptavidina (Amersham) , 50 mM de EDTA (Gibco) , NaCl 2 M (Gibco) , NaCl 2 M peso/1% de ácido fosfórico (Gibco) , Microscint-20 (Perkin Elmer) .
Las determinaciones IC50 se calculan a partir de 10 puntos de datos por compuesto que utiliza los datos producidos a partir de una plantilla de ensayo de placa 96 pozos estándar. Un compuesto de control y siete inhibidores desconocidos fueron probados en cada placa y cada placa se corrió dos veces. Típicamente, los compuestos se diluyeron en diluciones semilogarítmicas iniciando en 100 µ? y terminando en 3 nM. El compuesto de control era estaurosporina . El fondo se contó en ausencia de sustrato péptido. La actividad total se determinó en la presencia de sustrato de péptido. El siguiente protocolo se utilizó para determinar la inhibición de Btk. 1) Preparación de la muestra: Los compuestos de ensayo se diluyeron en incrementos de media unidad logarítmica en solución amortiguadora de ensayo (imidazol, glicerol-2-fosfato, EGTA, MnCl2, MgCl2, BSA) . 2) Preparación de la microesfera a. ) Enjuagar microesferas por centrifugación a 500 g b. ) Reconstituir las microesferas con PBS y EDTA para producir una suspensión de microesferas al 20% 3) Pre-incubar la mezcla de reacción sin sustrato (solución amortiguadora de ensayo, DTT, ATP, 33P ATP) y mezclar con sustrato (solución amortiguadora de ensayo, DTT, ATP, 33P ATP, sustrato peptídico) 30°C durante 15 min. 4) Para comenzar el ensayo, pre-incubar 10 µ? de Btk en solución amortiguadora de enzima (imidazol, glicerol-2-fosfato, BSA) y 10 µ? de los compuestos de ensayo durante 10 min a temperatura ambiente . 5) Agregar 30 µ? de mezcla de reacción con o sin sustrato para Btk y compuestos . 6) Incubar 50 µ? de mezcla de ensayo total durante 30 minutos a 30°C. 7) Transferencia de 40 µ? de ensayo hasta 150 µ? de suspensión de microesferas en placa de filtro para detener la reacción. 8) Lavar la placa de filtro después de 30 minutos, con siguientes pasos a. 3 x 250 µ? de NaCl b. 3 x 250 µ? de NaCl que contienen ácido fosfórico al 1% c. 1 x 250 µ? de H20 9) Secar la placa durante 1 hora a 65°C o durante la noche a temperatura ambiente 10) Agregar 50 µ? de microscint-20 y contar 33P cpm en un contador de centelleo. calcular el porcentaje de actividad de datos brutos en cpm porcentaje de actividad = (muestra - bkg) / (actividad total - bkg) x 100 Calcular IC50 por ciento de la actividad, usando modelo sigmoidal de respuesta a la dosis de un solo sitio y = A+ ( (B-A)/(L+((x/C)D)))) x = cmpd conc . , y =% de actividad, A = min, B = max, C = IC50/ D = 1 (pendiente del centro de la transición de la curva) Inhibición de la activación de células B en sangre total medida por la expresión de CD69 Un procedimiento para probar la capacidad de los inhibidores de Btk para suprimir la activación mediada por el receptor de células B de las células B en la sangre humana es el siguiente: Sangre entera humana (HWB, por sus siglas en inglés) se obtiene a partir de voluntarios sanos, con las siguientes restricciones: 24 hr libres de fármacos, no fumadores. La sangre se recogió por punción venosa en tubos Vacutainer anticoagulados con heparina de sodio. Los compuestos de prueba diluyen hasta diez veces la concentración de fármaco de partida deseado en PBS (20x) , seguido por diluciones en serie de tres veces en DMSO al 10% en PBS para producir una curva dosis-respuesta de nueve puntos. 5.5 µ? de cada dilución del compuesto se agrega por duplicado a una placa de fondo en V de 2 mi de 96 pozos (Analitical Sales and Services, # 59623-23); 5.5 µ? de DMSO al 10% en PBS se agrega para control y pozos sin estimulo. HWB (100 µ?) se agrega a cada pozo, y después de mezclar las placas se incuban a 37 °C, C02 al 5%, 100% de humedad durante 30 minutos. Anti-IgM humana de cabra F(ab')2 (Southern Biotech, # 2022-14) (10 µ? de una solución de 500µg/ml, concentración final de 5C^g/ml) se agregó a cada pozo (excepto los pozos sin estímulo) con mezclado y las placas se incubaron durante 20 horas adicionales.
Al final de la incubación de 20 horas, las muestras se incubaron con anticuerpos marcados con sonda fluorescente (15 µ? PE de ratón anti-humano CD20, BD Pharmingen, #555623, y/o 20 ul de APC CD69 de ratón anti-humano, BD Pharmingen # 555533) durante 30 minutos, a 37°C, 5% de C02, 100% de humedad. Se incluye el control inducido, sin marcar y marcado con un colorante para ajustes de compensación y ajustes de tensión iniciales. Las muestras después son lisadas con 1 mi de IX Pharmingen Lyse Buffer (BD Pharmingen # 555899) , y las placas se centrifugaron a 1800 rpm durante 5 minutos. Los sobrenadantes se eliminan a través de succión y los gránulos restantes son lisados nuevamente con otro 1 mi de solución amortiguadora de Lyse Pharmingen IX, y las placas se centrifugaron como anteriormente. Los sobrenadantes se aspiran y los gránulos restantes se lavaron en solución amortiguadora de FACS (PBS + FBS al 1%) . Después de un centrifugado final, los sobrenadantes se eliminan y gránulos se resuspenden en 180µ1 de solución amortiguadora de FACs . Las muestras se transfirieron a una placa de 96 pozos apropiada para ser corrida en el sistema HTS de 96 pozos en el citómetro de flujo BD LSR II.
Al utilizar longitudes de onda de excitación y emisión apropiadas para los fluoróforos utilizados, los datos son adquiridos y el porcentaje de valores de células positivas se obtienen utilizando el Software Cell Quest. Los resultados se analizaron inicialmente por el software de análisis de FACS (Flow Jo) . La IC50 para los compuestos de ensayo se define como la concentración que disminuye en un 50% el porcentaje de células positivas CD69 que también son positivas CD20 después de la estimulación por anti-IgM (promedio de 8 pozos de control, después de la sustracción del promedio de 8 pozos para el fondo sin estímulo) . Los valores de IC5o se calcularon usando el software XLfit versión 3, Ecuación 201.
Datos de compuestos representativos para este ensayo se enumeran a continuación en la Tabla II.
Inhibición de la activación de células B - ensayo FLIPR de células B en células Ramos La inhibición de la activación de células B por los compuestos de la presente invención se demuestra mediante la determinación del efecto de los compuestos de prueba en respuestas de células B estimuladas por anti-IgM.
El ensayo FLIPR de células B es un método funcional a base de células para determinar el efecto de los inhibidores potenciales del aumento de calcio intracelular de la estimulación por un anticuerpo anti-IgM. Células Ramos (línea celular de linfoma de Burkitt humano. ATCC No. CRL-1596) se cultivaron en Medio de Crecimiento (descrito a continuación) . Un día antes del ensayo, las células Ramos se resuspendieron en medio de crecimiento fresco (igual al anterior) y se ajustaron a una concentración de 0.5 x 106/ mi en matraces de cultivo de tejidos. El día del ensayo, las células se contaron y se fijaron en una concentración de 1 x 106/mLl en medios de crecimiento suplementados con ?µ? FLUO-3 AM (TefLabs. Cat-No 0116, preparado en DMSO anhidro y ácido plurónico al 10%) en un matraz de cultivo tisular, y se incubaron a 37°C (C02 al 4%) durante una hora. Para eliminar colorante extracelular , las células se recogieron por centrifugación (5 minutos, 1000 rpm) , se resuspendieron en solución amortiguadora de FLIPR (descrita a continuación) en 1 x 106 células/ml y después se suministran en placas negras/claras recubiertas con poli-D-lisina de 96 pozos (BD. Cat-n 356692) en 1 x 105 células por pozo. Los compuestos de prueba se agregaron a varias concentraciones que van desde 100 µ? hasta 0.03 µ? (7 concentraciones, detalles a continuación), y se dejó incubar con las células durante 30 min a temperatura ambiente. Células Ramos de señalización Ca2+ s estimularon por la adición de 10 µ9/??1 de anti-IgM (Southern Biotech, Cat No. 2020-01) y se mide en un FLIPR (Dispositivos moleculares, imágenes de captura de placas de 96 pozos utilizando una cámara CCD con un láser de argón a 480 nM de excitación) .
Medios/Soluciones amortiguadoras: Medio de crecimiento: medio RPMI 1640 con L-glutamina (Invitrogen, Cat. No-61870- 010 ) , suero bovino fetal al 10% (FBS, Summit Biotecnología Cat No. FP-100-05) ; 1 mM de piruvato de sodio (Invitrogen Cat. No. 11360-070) .
Solución amortiguadora FLIPR: HBSS (Invitrogen, Cat-No 141175-079), 2 mM de CaCl2 (Sigma, Cat. No. P-8761) HEPES (Invitrogen, Cat-No 15630-080) 2.5 mM de probenecid (Sigma Cat. No. C-4901) , BSA al 0.1% (Sigma, Cat. No. A-7906) , 11 mM de glucosa (Sigma, cat No. G-7528) Detalles de dilución del compuesto: Con el fin de lograr la concentración final de ensayo más alta de 100 µ , 24 µ? de 10 mM solución concentrada del compuesto (hecha en DMSO) se agrega directamente a 576 µ? de solución amortiguadora de FLIPR. Los compuestos de prueba se diluyen en solución amortiguadora de FLIPR (usando pipeta robotizada Biomek 2000) , resultando en el siguiente esquema de dilución: vehículo, 1.00 x 10"4 M, 1.00 x 10~5, 3.16 x 10~6, 1.00 X 10"6, 3.16 x 10"7, 1.00 x 107, 3.16 x 10~8.
Ensayo y análisis: Aumentos intracelulares en el calcio se reportaron mediante una Estadística máx - min (restando la referencia en reposo desde el pico causado por la adición del anticuerpo estimulador usando un control FLIPR de dispositivos Moleculares y software de exportación de la estadística. El IC50 se determinó usando un ajuste de curva no lineal (software GraphPad Prism) .
Artritis inducida por colágeno de ratón (mCIA) En el día 0, los ratones se inyectan en la base de la cola o varios puntos en la parte posterior con una emulsión de Colágeno Tipo II (i.d.) en adyuvante de Freund completo (CFA) . Después de la inmunización de colágeno, los animales desarrollarán artritis en aproximadamente 21 a 35 días. La aparición de la artritis está sincronizada (estimulada) por la administración sistémica de colágeno en adyuvante de Freund incompleto (IFA; i.d.). En el día 21 animales se examinan diariamente después del día 20 de cualquier inicio de la artritis leve (puntuación de 1 ó 2; ver descripción de puntuación abajo) que es la señal para estimular. Después del impulso, los ratones se califican y se dosifican con agentes terapéuticos candidatos por el tiempo prescrito (generalmente 2-3 semanas) y la frecuencia de dosificación, diario (QD) o dos veces al día (BID) .
Artritis inducida por colágeno de rata (rCIA) En el día 0, las ratas se inyectaron con una emulsión de bovino de colágeno tipo II en adyuvante de Freund (incompleto IFA) , se inyectaron por vía intradérmica (ID) en varias ubicaciones en la parte posterior. Una inyección de refuerzo de emulsión de colágeno se da alrededor del día 7, (i.d.) en la base de la cola o sitios alternativos en la parte posterior. La artritis se observa generalmente 12-14 días después de la inyección inicial de colágeno. Los animales pueden ser evaluados para el desarrollo de la artritis como se describe a continuación (Evaluación de la artritis) desde el día 14 en adelante. Los animales son dosificados com agentes terapéuticos candidatos de manera preventiva a partir del momento de desafío secundario y durante el tiempo prescrito (normalmente 2-3 semanas) y la frecuencia de dosificación, diario (QD) o dos veces al día (BID) .
Evaluación de artritis: En ambos modelos, el desarrollo de la inflamación de las patas y articulaciones de las extremidades se cuantifica utilizando un sistema de puntuación que implica la evaluación de las 4 patas siguiendo los criterios descritos a continuación: Puntuación: 1 = hinchazón y/o enrojecimiento de la pata o un dedo . 2 = hinchazón en dos o más articulaciones. 3 = inflamación total de la pata con más de dos articulaciones involucradas. 4 = artritis grave de toda la pata y los dedos.
Las evaluaciones se realizaron en el día 0 para la medición de la referencia y comenzar de nuevo en los primeros signos o hinchazón durante un máximo de tres veces por semana hasta el final del experimento. El índice artrítico para cada ratón se obtiene sumando las puntuaciones de los cuatro patas individuales, dando una puntuación máxima de 16 por animal. Modelo de Asma de Rata In Vivo Ratas Noruega cafés macho son sensibilizadas i.p. con 100 pg de OA (ovoalbúmina) en 0.2 mi de alúmina una vez por semana durante tres semanas (días 0, 7 y 14) . En el día 21 (una semana después de la última sensibilización) , las ratas se dosifican una vez al día con vehículo o formulación de compuesto por vía subcutánea 0.5 horas antes del estímulo de aerosol de OA (OA al 1% durante 45 minutos) y se terminaron 4 o 24 horas después del estímulo. En el momento del sacrificio, suero y plasma se recogen de todos los animales para la serología y PK, respectivamente. Se inserta una cánula traqueal y los pulmones se lavan 3 veces con PBS . El fluido BAL se analiza para el número de leucocitos totales y recuento diferencial de leucocitos. El número de leucocitos total en una alícuota de las células (20-100 µ?) se determina mediante un contador Coulter. Para recuentos de leucocitos diferenciales, 50-200 µ? de la muestra se centrifuga en un Cytospin y la muestra teñida con Diff-Quik. Las proporciones de monocitos, eosinófilos, neutrófilos y linfocitos se contaron bajo el microscopio óptico utilizando criterios morfológicos estándar y se expresan como un porcentaje. Inhibidores representativos de Btk muestran una disminución de conteo total de leucocitos en el BAL de OA sensibilizada y ratas estimuladas en comparación con los niveles de control.
La invención anterior se ha descrito en algún detalle a modo de ilustración y ejemplo, para propósitos de claridad y comprensión. Será obvio para una persona experimentada en la técnica que cambios y modificaciones se pueden practicar dentro del alcance de las reivindicaciones anexas. Por lo tanto, se debe entender que la descripción anterior pretende ser ilustrativa y no restrictiva. El alcance de la invención debe, por lo tanto, ser determinada no con referencia a la descripción anterior, sino que debe determinarse con referencia a las siguientes reivindicaciones anexas, junto con el alcance completo de equivalentes a los que tales reivindicaciones tienen derecho.
Todas las patentes, solicitudes de patentes y publicaciones citadas en esta solicitud se incorporan por referencia en su totalidad para todos los propósitos en la misma medida como si cada patente individual, solicitud de patente o publicación fuera de manera individual.
Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (1)

  1. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Un compuesto de la Fórmula I, caracterizado porque: cada X es CH o Q es CH o N; A es en donde : un X1 es N y el resto son CH, o cada X1 es CH; un X2 es N y el resto son CH, o cada X2 es CH, o un X2 es N y el resto son CH o CNH2; R es H, -R1, R1-R2-R3, -R^R3, o-R-R3; R1 es arilo, heteroarilo, heteroarilo bicíclico, cicloalquilo, heterocicloalquilo, o heterociclo bicíclico, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más alquilo Ci-6, hidroxi, hidroxi alquilo C1-6, alcoxi Ci-6, halo, nitro, amino, amido, ciano, oxo, o haloalquilo Ci-6; R2 es -C(=0), -C(=0)0, -C(=0)NR2', -NHC(=0)0, -C(R2')2, -O, -S, -C(=NH)NR2'o -S(=0)2; cada R2' es independientemente H o alquilo Ci-6; R3 es H o R4; R4 es alquilo Ci-6, haloalquilo Ci-6, alcoxi Ci-6, amino, alquilo Ci-6 amino, cicloalquil amino, dialquilo Ci_6 amino, arilo, arilalquilo, alquilarilo, heteroarilo, alquilo Ci-6 heteroarilo, heteroarilo alquilo 0?.6? cicloalquilo, alquilo Ci-6 cicloalquilo, cicloalquilo alquilo Ci-6, heterocicloalquilo, alquilo Ci-6 heterocicloalquilo, heterocicloalquilo alquilo Ci-6, cicloalquilo bicíclico, heterocicloalquilo bicíclico, espirocicloalquilo, espiroheterocicloalquilo, o espiroheterocicloalquilo bicíclico, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más alquilo Ci_6, halo, alquilo Ci-6 amino, dialquilo C1-6 amino, hidroxi, hidroxi alquilo Ci-6, alcoxi Ci-s, alcanoilo Ci-6, halo, nitro, amino, amido, acilo, ciano, oxo, sulfonilo, alquilo Ci_6 sulfonilo, guanidino, hidroxil amino, carboxi, carbamoilo, carbamato, halo alcoxi Ci-6, heterocicloalquilo, o halo alquilo Ci-6, en donde dos grupos alquilo Ci-6 pueden formar juntos un anillo; Y es Y1; 5. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque A es 6. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, caracterizado porque A es 7. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque A es 8. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque A es 9. El compuesto de conformidad con la reivindicación caracterizado porque A es 10. El compuesto de conformidad con la reivindicación caracterizado porque A es 11. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-10, caracterizado porque R es -R1-!?.2-!*3. 12. El compuesto de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque R1 es piridilo, cada X es CH, y Q es N. 13. El compuesto de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque R2 es -C(=0) o CH2. 14. El compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-10, caracterizado porque R es -R1-R3, cada X es CH, y Q es N. 15. El compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque es seleccionado del grupo que consiste de: 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- [5-(morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -[1,2,4] triazolo [1, 5-a] piridin-6-il } -fenil) -2H-ftalazin- 1-ona ; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {d- [5-(morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2 -hidroximet il - - { 8 - [5- (4-isopropil-piperazin-l-il) -piridin-2-ilamino] -imidazo [1,2-b] piridazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3 - {8- [5- (4-metil-piperazin-l-ilmetil) -piridin-2 - ilamino] -imidazo [1,2-b] piridazin-6-il } -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-Butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {6- [5- (morfolina-4-carbonil) -piridin-2 - ilamino] -piridazin-4-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {2- [5- (morfolina-4 -carbonil ) -piridin- 2 - ilamino] -piridin-4 - il } -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- [4-(morfolina-4 -carbonil) -fenilamino] -imidazo [1 , 2 -a] pirazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- [4- (1-metil -piperidin-4 - il) -feni lamino] - imidazo [1 , 2 -a] pirazin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- [4-(morfolina-4-carbonil) -fenilamino] -imidazo [1, 2-a] piridin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- [5- (morfolina-4 -carbonil ) -piridin-2 - ilamino] - imidazo [1,2-a] piridin-6- il } - fenil) -2H- ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {8- (1' -metil-1'2'3'4'5'6' -hexahidro- [3,4'] bipiridin-6-ilamino] -imidazo [1 , 2 -a] iridin-6 - il } -fenil ) -2H-ftalazin-l-ona; 6-terc-butil-8-fluoro-2- (2-hidroximetil-3- {6- [5-(morfolina-4 -carbonil ) -piridin-2 - ilamino] -piridin-4 -il } -fenil) -2H-ftalazin-l-ona; y 6-terc-Butil-8-fluoro-2- (2 -hidroximetil -3 - {8- [5-(morfolina-4-carbonil) -piridin-2-ilamino] -quinolin-6-il} -fenil) -2H-ftalazin- 1-ona . 16. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende el compuesto inhibidor de Btk de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-15. 17. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-15, caracterizado porque es para uso como sustancia terapéuticamente eficaz. 18. El uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-15 para tratar una condición inflamatoria y/o autoinmune. 19. El uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-15 para tratar una condición inflamatoria y/o autoinmune. 20. El uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-15 para la preparación de un medicamento para tratar una condición inf lamatoria y/o autoinmune . 21 . Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 - 15 , caracteri zado porque es para usarse para tratar una condición inf lamatoria y/o autoinmune . 22 . Una composición farmacéutica caracteri zada porque comprende el compuesto inhibidor de Btk de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-15, mezclada con por lo menos un portador, excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptable .
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