MX2012009735A - 4-[cicloalquiloxi (hetero) arilamino] tieno [2,3-d] pirimidinas que tienen actividad inhibitoria de mnk1/mnk2 para composiciones farmaceuticas. - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a nuevos compuestos de tienopirimidina de fórmula general (1) (ver fórmula (I)) composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos y su uso terapéutico para la profilaxis y/o el tratamiento de enfermedades que pueden verse influenciadas por la inhibición de la actividad quinasa de Mnk1 y/o Mnk2 (MnK2a o Mnk2b) y/o de variantes de las mismas.

Description

4-rCILOALQUILOXI (HETERO) ARI LAMIN ?? TIENO G2.3-?1 PIRIMIDINAS QUE TIENEN ACTIVIDAD INHIBITORIA DE MNK1/MNK2 PARA COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS La presente invención se refiere a compuestos de tienopirimidina y a nuevas composiciones farmacéuticas que comprenden compuestos de tienopirimidina.

Además de ello, la presente invención se refiere al uso de los compuestos de tienopirimidina de la invención para la producción de composiciones farmacéuticas para la profilaxis y/o el tratamiento de enfermedades que pueden verse influenciadas por la inhibición de la actividad quinasa de Mnk1 (Mnkla o MnK1b) y/o Mnk2 (Mnk2a o Mnk2b) o de variantes adicionales de las mismas. En particular, la presente invención se refiere al uso de los compuestos de tienopirimidina de la invención para la producción de composiciones farmacéuticas para la profilaxis y/o terapia de enfermedades metabólicas, tales como diabetes, hiperlipidemia y obesidad, trastornos hematopoyéticos, enfermedades neurodegenerativas, daño renal, trastornos inflamatorios y cáncer, y sus complicaciones consecutivas y trastornos asociados con las mismas.

Las enfermedades metabólicas son enfermedades provocadas por un proceso metabólico anormal y pueden ser congénitas debido a una anormalidad enzimática heredada, o adquirida debido a una enfermedad de un órgano endocrino o al fallo de un órgano metabólicamente importante, tal como el hígado o el páncreas.

La presente invención se refiere, más particularmente, al tratamiento y/o la profilaxis de, en particular, enfermedades metabólicas del metabolismo de los lípidos e hidratos de carbono y de las complicaciones consecutivas y trastornos asociados con las mismas.

Los trastornos de los lípidos cubren un grupo de estados que provocan anormalidades en el nivel y metabolismo de lípidos y lipoproteínas en el plasma. Por lo tanto, las hiperlipidemias son de particular relevancia clínica, ya que constituyen un importante factor de riesgo para el desarrollo de la aterosclerosis y subsiguientes enfermedades vasculares, tal como fallo cardiaco coronario.

La diabetes mellitus se define como una hiperglicemia crónica asociada a lesiones resultantes de los órganos y disfunciones de procesos metabólicos. Dependiendo de su etiología, se diferencia entre varias formas de diabetes, que son debidas a una carencia absoluta (carencia o secreción disminuida de insulina) o a una carencia relativa de insulina. La diabetes mellitus tipo I (IDDM, diabetes mellitus dependiente de insulina - siglas en inglés) se produce, por lo general, en adolescentes menores de 20 años de edad. Se asume que es de etiología autoinmune, lo que conduce a una insulitis con la subsiguiente destrucción de las células beta de los islotes de Langerhans, que son los responsables de la síntesis de insulina. Además, en diabetes autoinmune latente en adultos (LADA - siglas en inglés; Diabetes Care. 8: 1460-1467, 2001) las células beta se destruyen debido al ataque autoinmune. La cantidad de insulina producida por las restantes células de los islotes pancreáticos es demasiado pequeña, dando como resultado elevados niveles de glucosa en sangre (hiperglicemia). La diabetes mellitus de tipo II se produce, por lo general, en una edad más avanzada. Se encuentra, sobre todo, asociada con una resistencia a insulina en el hígado y los músculos del esqueleto, pero también con un defecto de los islotes de Langerhans. Altos niveles de glucosa en sangre (y también altos niveles de llpidos en sangre) conducen, a su vez, a una alteración de la función de las células beta y a un incremento en la apoptosis de las células beta.

La diabetes es una enfermedad de muy incapacitante, ya que los fármacos antidiabéticos comunes de hoy en día no controlan los niveles de azúcar en sangre lo suficiente para evitar por completo la aparición de altos y bajos niveles de azúcar en sangre. Fuera del intervalo, los niveles de azúcar en sangre son tóxicos y provocan complicaciones a largo plazo, por ejemplo retinopatía, renopatía, neuropatía y enfermedad vascular periférica. Existe también una gran cantidad de afecciones relacionadas, tales como obesidad, hipertensión, enfermedad cardiaca e hiperlipidemia, para las cuales personas con diabetes están esencialmente en riesgo.

La obesidad está asociada con un riesgo incrementado de enfermedades reiterativas, tales como enfermedades cardiovasculares, hipertensión, diabetes, hiperlipidemia y una mortalidad incrementada. La diabetes (resistencia a la insulina) y la obesidad son parte del "síndrome metabólico" que se define como la conexión entre varias enfermedades (también denominada síndrome X o síndrome de resistencia a la insulina). Éstas se producen en los mismos pacientes y son factores de riesgo principales para el desarrollo de diabetes de tipo II y enfermedad cardiovascular. Se ha sugerido que se requiere el control de los niveles de lípidos y niveles de glucosa para tratar la diabetes de tipo II, enfermedad cardiaca, y otras apariciones de síndrome metabólico (véase, p.ej., Diabetes 48: 1836-1841 , 1999; JAMA 288: 2209-2716, 2002).

En una forma de realización de la presente invención los compuestos y composiciones de la presente invención son útiles para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades metabólicas del metabolismo de hidratos de carbono y de sus complicaciones consecutivas, y trastornos, tales como tolerancia alterada a la glucosa, diabetes (preferiblemente diabetes de tipo II), complicaciones diabéticas, tales como gangrena diabética, artropatía diabética, osteopenia diabética, glomerosclerosis diabética, nefropatía diabética, dermopatia diabética, neuropatía diabética, cataratas diabéticas y retinopatía diabética, maculopatía diabética, síndrome de los pies diabéticos, coma diabético con o sin cetoacidosis, coma hiperosmolar diabético, coma hipoglicémico, coma hiperglicémico, acidosis diabética, cetoacidosis diabética, glomerulonefrosis intracapilar, síndrome de Kimmelstiel-Wilson, amiotrofia diabética, neuropatía autonómica diabética, mononeuropatía diabética, polineuropatía diabética, angiopatias diabéticas, angiopatía periférica diabética, úlcera diabética, artropatía diabética, u obesidad en diabetes.

En una forma de realización adicional, los compuestos y composiciones de la presente invención son útiles para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades metabólicas del metabolismo de los lípidos (es decir, trastornos de lípidos) y de sus complicaciones consecutivas, y trastornos, tales como hipercolesterolemia, hipercolesterolemia familiar, hiperlipoproteinemia de Fredrickson, hiperbetalipoproteinemia, hiperlipidemia, hiperlipoproteinemia del tipo de lipoproteínas de baja densidad [LDL - siglas en inglés], hipergliceridemia pura, hipergliceridemia endógena, hipercolesterolemia aislada, hipertrogliceridemia aislada, enfermedades cardiovasculares, tales como hipertensión, isquemia, venas varicosas, oclusión de las venas de la retina, aterosclerosis, angina de pecho, infarto de miocardio, estenocardia, hipertensión pulmonar, fallo cardiaco congestivo, glomerulopatía, trastornos tubulointersticiales, fallo renal, angioestenosis o trastornos cerebrovasculares, tales como apoplejía cerebral.

En otra realización de la presente invención, los compuestos y composiciones de la presente invención son útiles para el tratamiento y/o la profilaxis de trastornos hematopoyéticos y sus complicaciones y trastornos consecutivos, tales como leucemia mieloide aguda (AML - siglas en inglés), enfermedad de Hodgkin, linfoma no Hodgkin; enfermedad hematopoyética, leucemia no linfocítica aguda (ANLL - siglas en inglés), enfermedad mieloproliferativa, leucemia promielocítica aguda (APL - siglas en inglés), leucemia mielomonocítica aguda (AMMoL - siglas en inglés), mieloma múltiple, policitemia vera, linfoma, leucemia linfocítica aguda (ALL - siglas en inglés), leucemia linfocítica crónica (CCL - siglas en inglés), tumor de Wilm o sarcoma de Ewing.

En una realización adicional de la presente invención, los compuestos y composiciones de la presente invención son útiles para el tratamiento y/o la profilaxis de cáncer y complicaciones y trastornos consecutivos, tales como cáncer del tracto gastrointestinal superior, carcinoma pancreático, cáncer de mama, cáncer de colon, carcinoma de ovarios, carcinoma del cuello uterino, cáncer de endometrio, tumor cerebral, cáncer testicular, carcinoma de la laringe, osteocarcinoma, cáncer prostático, retinoblastoma, carcinoma de hígado, cáncer de pulmón, neuroblastoma, carcinoma renal, carcinoma de tiroides, cáncer de esófago, sarcoma de tejido blando, cáncer de piel, osteosarcoma, rabdomiosarcoma, cáncer de vejiga, cáncer metastásico, caquexia, o dolor.

Ciertos antineoplásicos tales como cisplatino se asocian a efectos colaterales graves, como nefrotoxicidad u ototoxicidad, lo cual puede limitar la dosis. La activación de Mnks se ha asociado a estos efectos colaterales. En otra realización de la presente invención, los compuestos y las composiciones de la presente invención son útiles para el tratamiento y/o la profilaxis de daño al oído o al riñon, en particular para la prevención o el tratamiento de daño al oído o al riñon inducido por fármacos.

Además, la presente invención se refiere al uso de compuestos de tienopirimidina para la producción de composiciones farmacéuticas para la profilaxis y/o terapia de enfermedades relacionadas con citoquinas.

Enfermedades de este tipo son, entre otros, enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunes, trastornos óseos destructivos, trastornos proliferativos, enfermedades infecciosas, enfermedades neurodegenerativas, alergias, u otros estados asociados con citoquinas proinflamatorias.

Enfermedades alérgicas e inflamatorias, tales como inflamación aguda o crónica, artritis inflamatoria crónica, artritis reumatoide, psoriasis, EPOC, enfermedad intestinal inflamatoria, asma y choque septicémico, y sus complicaciones consecutivas y trastornos asociados con las mismas.

Enfermedades inflamatorias, tales como artritis reumatoide, enfermedades inflamatorias de los pulmones, tales como EPOC, enfermedad intestinal inflamatoria y psoriasis afectan a una de cada tres personas en el curso de sus vidas. Estas enfermedades no solamente suponen inmensos costes para el cuidado de la salud, sino que también son a menudo incapacitantes y debilitadoras.

A pesar de que la inflamación es el proceso patógeno unificador de estas enfermedades inflamatorias que figuran más abajo, el actual enfoque del tratamiento es complejo y es, generalmente, específico para cualquier enfermedad. Muchas de las actuales terapias disponibles hoy en día solamente tratan los síntomas de la enfermedad y no la causa subyacente de la inflamación.

Las composiciones de la presente invención son útiles para el tratamiento y/o la profilaxis de enfermedades inflamatorias y complicaciones y trastornos consecutivos, tales como inflamación crónica o aguda, inflamación de las articulaciones, tales como artritis inflamatoria crónica, artritis reumatoide, artritis psoriásica, osteoartritis, artritis reumatoide juvenil, síndrome de Reiter, artritis traumática reumatoide, artritis rubéola, sinovitis aguda y artritis gotosa; enfermedades inflamatorias de la piel, tales como quemaduras por el sol, psoriasis, psoriasis eritrodérmica, psoriasis pustular, eczema, dermatitis, formación de injerto agudo o crónico, dermatitis atópica, dermatitis de contacto, urticaria y esclerodermia; inflamación del tracto gastrointestinal, tales como enfermedad intestinal inflamatoria, enfermedad de Crohn y estados relacionados, colitis ulcerosa, colitis y diverticulitis; nefritis, uretritis, salpingitis, ooforitis, endomiometritis, espondilitis, lupus eritematoso sistémico y trastornos relacionados, esclerosis múltiple, asma, meningitis, mielitis, encefalomielitis, encefalitis, flebitis, tromboflebitis, enfermedades respiratorias tales como asma, bronquitis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), enfermedad inflamatoria de los pulmones y síndrome de dificultad respiratoria aguda y rinitis alérgica; endocarditis, osteomielitis, fiebre reumática, pericarditis reumática, endocarditis reumática, miocarditis reumática, enfermedad de la válvula mitral reumática, enfermedad de la válvula aórtica reumática, prostatitis, prostatocistitis, espondoartropatías, espondilitis anquilosante, sinovitis, tenosinovitis, miositis, faringitis, polimialgia reumática, tendinitis en la espalda o bursitis, gota, pseudogota, vasculitis, enfermedades inflamatorias de tiroides, seleccionadas entre tiroiditis granulomatosa, tiroiditis linfocítica, tiroiditis fibrosa invasiva, tiroiditis aguda; tiroiditis de Hashimoto, enfermedad de Kawasaki, fenómeno de Raynaud, síndrome de Sjogren, enfermedad neuroinflamatoria, septicemia, conjuntivitis, queratitis, iridociclitis, neuritis óptica, otitis, linfoadenitis, nasofaringitis, sinusitis, faringitis, amigdalitis, laringitis, epiglotitis, bronquitis, neumonitis, estomatitis, gingivitis, esofagitis, gastritis, peritonitis, hepatitis, colelitiasis, colecistitis, glomerulonefritis, enfermedad de goodpasture, glomerulonefritis crescéntica, pancreatitis, endomiometritis, miometritis, metritis, cervicitis, endocervicitis, exocervicitis, parametritis, tuberculosis, vaginitis, vulvitis, silicosis, sarcoidosis, neumoconiosis, piresis, poliartropatías inflamatorias, artropatías psoriásicas, fibrosis intestinal, bronquiectasias y artropatías enteropáticas.

Además de ello, se piensa que las citoquinas están implicadas en la producción y el desarrollo de diversos trastornos cardiovasculares y cerebrovasculares, tales como enfermedad cardiaca congestiva, infarto de miocardio, formación de placas ateroscleróticas, hipertensión, agregación de plaquetas, angina, apoplejía, enfermedad de Alzheimer, lesión por reperfusión, lesión vascular, incluida restenosis y enfermedad vascular periférica y, por ejemplo, diversos trastornos del metabolismo de los huesos, tales como osteoporosis (incluida osteoporosis senil y postmenopáusica), enfermedad de Paget, metástasis de los huesos, hipercalcemia, hiperparatiroidismo, osteosclerosis, osteoporosis y periodontitis, y los cambios anormales en el metabolismo de los huesos que pueden acompañar a la artritis reumatoide y la osteoartritis.

Una producción excesiva de citoquinas también ha estado implicada en mediar en determinadas complicaciones de infecciones por bacterias, hongos y/o víricas, tales como choque endotóxico, choque septicémico y síndrome de choque tóxico, y en mediar en determinadas complicaciones de la cirugía del SNC o lesión, tal como neurotraumatismo y apoplejía isquémica.

Una producción excesiva de citoquinas, además, ha estado implicada en mediar en o exacerbar el desarrollo de enfermedades que implican la resorción del cartílago o del músculo, fibrosis pulmonar, cirrosis, fibrosis renal, la caquexia que se encuentra en determinadas enfermedades crónicas, tales como enfermedades malignas y el síndrome de la inmunodeficiencia adquirida (sida), invasión de tumores y metástasis de tumores, y esclerosis múltiple. El tratamiento y/o la profilaxis de estas enfermedades también se contemplan por parte de la presente invención.

Adicionalmente, las composiciones de la invención se pueden utilizar para tratar la inflamación asociada con enfermedades autoinmunes que incluyen, aunque sin limitarse a ello, lupus eritematoso sistémico, enfermedad de Addison, enfermedad poliglandular autoinmune (también conocida como síndrome poliglandular autoinmune), glomerulonefritis, esclerodermia de artritis reumatoide, tiroiditis crónica, enfermedad de Graves, gastritis autoinmune, diabetes, anemia hemolítica autoinmune, glomerulonefritis, neutropenia autoinmune de artritis reumatoide, trombocitopenia, dermatitis atópica, hepatitis activa crónica, miastenia grave, esclerosis múltiple, enfermedad intestinal ¡nflamatoria, colitis ulcerosa, enfermedad de Crohn, psoriasis, y enfermedad de injerto frente a hospedante.

En una forma de realización adicional, las composiciones de la presente invención se pueden utilizar para el tratamiento y la prevención de enfermedades infecciosas tales como sepsis, choque septicémico, Shigellosis y Helicobacter pilori, y enfermedades víricas, que incluyen herpes simples tipo 1 (HSV-1), herpes simples tipo 2 (HSV-2), citomegalovirus, Epstein-Barr, virus de la inmunodeficiencia humana (HIV - siglas en inglés), infección por hepatitis aguda (incluidas hepatitis A, hepatitis B y hepatitis C), infección por HIV y retinitis por CMV, sida o neoplasia maligna, malaria, infección micobacteriana y meningitis. Éstas también incluyen infecciones víricas, por virus de la influenza, virus varicella-zoster (VZV - siglas en inglés), virus Epstein-Barr, virus herpes-6 humano (HHV-6 - siglas en inglés), virus herpes-7 humano (HHV-7), virus herpes-8 humano (HHV-8), Poxvirus, virus de la vaccinia, virus de la viruela del mono, pseudorrabia y rinotraqueítis.

Las composiciones de la presente invención también se pueden utilizar por vía tópica en el tratamiento o la profilaxis de estados patológicos tópicos, mediados o exacerbados por una producción excesiva de citoquinas, tales como articulaciones inflamadas, eczema, psoriasis y otros estados inflamatorios de la piel, tales como quemaduras solares; estados inflamatorios de los ojos, incluida conjuntivitis; piresis, dolor y otros estados asociados con la inflamación.

La enfermedad periodontal también ha sido puesta en práctica en la producción de citoquinas, tanto por vía tópica como sistémica. Por lo tanto, es otro aspecto de la presente invención el uso de composiciones de la presente invención para controlar la inflamación asociada con la producción de citoquinas en enfermedades perorales de este tipo, tales como gingivitis y periodontitis.

Finalmente, las composiciones de la presente invención también se pueden usar para tratar o prevenir enfermedades neurodegenerativas seleccionadas entre enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, esclerosis lateral amiotrófica, enfermedad de Huntington, demencia lobular frontotemporal, ataxia espinocerebelar, demencia con cuerpos de Lewy, isquemia cerebral o enfermedad neurodegenerativa causada por lesión traumática, neurotoxicidad por glutamato o hipoxia.

En una realización preferida, las composiciones de la presente invención se pueden utilizar para tratar o prevenir una enfermedad seleccionada de inflamación crónica o aguda, artritis inflamatoria crónica, artritis reumatoide, psoriasis, EPOC, enfermedad intestinal inflamatoria, choque septicémico, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, esclerosis múltiple y asma.

Las proteínas quinasas son importantes enzimas implicadas en la regulación de muchas funciones celulares. El gen LK6-serina/treonina-quinasa de Drosophila melanogaster fue descrito como una quinasa de corta vida que se puede asociar con microtúbulos (J. Cell Sci. 1997, 110(2): 209-219). El análisis genético en el desarrollo del ojo compuesto de Drosophila sugirió un papel en la modulación de la vía de señales RAS (Genetics 2000 156(3): 1219-1230). Los homólogos humanos más próximos del LK6-quinasa de Drosophila son la quinasa 2 interactuante con MAP quinasa (Mnk2, p.ej. las variantes Mnk2a y Mnk2b) y la quinasa 1 interactuante con MAP quinasa (Mnk1) y variantes de la misma. Estas quinasas están localizadas, en su mayor parte, en el citoplasma. Las Mnks son fosforiladas por las p42 MAP quinasas Erk1 y Erk2 y las p38-MAP quinasas. Esta fosforilación es disparada en una respuesta a factores de crecimiento, ésteres forbólicos y oncogenes, tales como Ras y Mos, y por moléculas señalizantes del estrés y citoquinas. La fosforilación de proteínas Mnk estimula su actividad de quinasa hacia el factor de iniciación eucariótico 4E (elF4E) (EMBO J. 16: 1909-1920, 1997; Mol Cell Biol 19, 1871-1880, 1990; Mol Cell Biol 21 , 743-754, 2001). La interrupción simultánea de los dos genes Mnk1 y Mnk2 en ratones disminuye la fosforilación de elF4E basal y estimulada (Mol Cell Biol 24, 6539-6549, 2004). La fosforilación de elF4E resulta en una regulación de la traducción de la proteína (Mol Cell Biol 22: 5500-5511 , 2001).

Existen diferentes hipótesis que describen el modo de la estimulación de la traducción de proteínas por parte de proteínas Mnk. La mayoría de las publicaciones describe un efecto estimulante positivo en la traducción de proteínas dependiente del casquete tras la activación de quinasas interactuantes con MAP quinasa. Así, la activación de proteínas Mnk puede conducir a una estimulación indirecta o regulación de la traducción de proteínas, p. ej. por el efecto sobre la fosfolipasa 2 alfa citosólica (BBA 1488:124-138, 2000).

El documento WO 03/037362 describe un enlace entre genes Mnk humanos, en particular las variantes de los genes Mnk2 humanos, y enfermedades que están asociadas con la regulación del peso corporal o la termogénesis. Se postula que los genes Mnk humanos, en particular las variantes Mnk2, están implicados en enfermedades tales como, p. ej., enfermedades metabólicas, que incluyen obesidad, trastornos alimentarios, caquexia, diabetes mellitus, hipertensión, enfermedad cardiaca coronaria, hipercolesterolemia, dislipidemia, osteoartritis, cálculos biliares, cáncer de los genitales y apnea del sueño, y en enfermedades relacionadas con la defensa ROS, tales como, p. ej., diabetes mellitus y cáncer. El documento WO 03/03762 describe, además, el uso de secuencias de ácidos nucleicos de la familia de genes de la quinasa interactuante con la MAP quinasa (Mnk) y secuencias de aminoácidos que codifican a éstos y al uso de estas secuencias o de los efectores de ácidos nucleicos o polipéptidos de Mnk, en particular, inhibidores de Mnk y activadores en el diagnóstico, la profilaxis o terapia de enfermedades asociadas con la regulación del peso corporal o la termogénesis.

El documento WO 02/103361 describe el uso de quinasas 2a y 2b (Mnk2a y Mnk2b) que interactúan con la MAP quinasa humana en ensayos para la identificación de ingredientes farmacológicamente activos, particularmente útiles para el tratamiento de diabetes mellitus tipo 2. Además de ello, el documento WO 02/103361 describe también la profilaxis y/o terapia de enfermedades asociadas con la resistencia a la insulina, mediante modulación de la expresión o la actividad de Mnk2a o Mnk2b. Aparte de péptidos, peptidomiméticos, aminoácidos, análogos de aminoácidos, polinucleótidos, análogos de polinucleótidos, nucleótidos y análogos de nucleótidos, el éster metílico del ácido 4-hidroxibenzoico se describe como una sustancia que se une a la proteína Mnk2 humana.

Una primera prueba del papel de Mnks en la inflamación fue proporcionada por estudios que demuestran la activación de Mnk1 por parte de estímulos proinflamatorios. Las citoquinas TNF* e ??_a_-1ß? disparan la activación de Mnk1 in vitro (Fukunaga y Hunter, EMBO J 16(8): 1921-1933, 1997) e inducen la fosforilación del sustrato elF4E específico para Mnk in vivo (Ueda et al., Mol Cell Biol 24(15): 6539-6549, 2004). Además, la administración de lipopolisacárido (LPS), un potente estimulante de la respuesta inflamatoria, induce la activación de Mnk1 y nk2 en ratones, concomitante con una fosforilación de su sustrato elF4E (Ueda et al.. Mol Cell Biol 24(15): 6539-6549, 2004).

Además, Mnk1 ha demostrado estar implicado en la regulación de la producción de citoquinas proinflamatorias. Mnk1 refuerza la expresión de la quimioquina (Nikolcheva et al., J Clin Invest 110, 119-126, 2002). RANTES es un potente quimioatrayente de monocitos, eosinófilos, basófilos y células exterminadoras naturales. Activa e induce la proliferación de linfocitos T, media en la desgranulación de basófilos e induce el estallido respiratorio en eosinófilos (Conti y DiGioacchino, Allergy Asthma Proc 22(3): 133-7, 2001) El documento WO 2005/00385 y Buxade et al., Immunity 23: 177- 189, agosto de 2005 describen ambos una unión entre Mnks y el control de la biosíntesis de TNFa. El mecanismo propuesto es mediado por un elemento regulador rico en AU (ARE - siglas en inglés) en el ARNm de TNFa. Buxade et al. Demuestran proteínas que unen y controlan la función de ARE a ser fosforilada por Mnk1 y Mnk2. Específicamente, se ha sugerido la fosforilación mediada por Mnk de la proteína hnRNP A1 de unión al ARE para reforzar la traducción del ARNm de TNFa.

TNFa no es la única citoquina regulada por un ARE. Los ARE funcionales se encuentran también en los transcritos de varias interleuquinas, interferones y quimioquinas (Khabar, J Interf Cytokine Res 25: 1-10, 2005). La fosoforilación de proteínas de unión a ARE, mediada por Mnk, tiene así el potencial de controlar la biosíntesis de citoquinas, además de la de TNFa.

Los datos actuales demuestran a las Mnks como dianas, situadas más abajo, de la señalización inflamatoria, así como mediadores de la respuesta inflamatoria. Su implicación en la producción de TNFa, RANTES, y citoquinas potencialmente adicionales sugiere la inhibición de Mnks como una estrategia para la intervención terapéutica antinflamatoria.

Mnk1 y Mnk2 (incluyendo todas las formas de empalme) fosforilan el factor de traducción elF4E en Serina 209. Los ratones con genes inactivados dobles Mnk1/2 carecen completamente de fosforilación en Serina 209, lo que indica que la quinasa Mnk es la única quinasa capaz de fosforilar este sitio in vivo (Ueda et al., Mol Cell Biol. 2004; 24(15):6539-49). elF4E se sobrexpresa en una amplia gama de tumores malignos humanos, y la alta expresión de elF4E frecuentemente se asocia con la enfermedad más agresiva y con un mal pronóstico. Asimismo, elF4E puede actuar como un oncogén cuando se ensaya en ensayos convencionales para actividad oncogénica (p. ej., en Ruggero et al., Nat Med. 2004 Mayo; 10(5):484-6). elF4E ejerce su actividad oncogénica estimulando la traducción de oncogenes tales como c-myc y cyclinDI (Culjkovic et al., J Cell Biol. 2006; 175(3):415-26), aumentando la expresión de factores de pro-supervivencia tales como MCP-1 (Wendel et al., Genes Dev. 2007; 21 (24):3232-7) y regulando positivamente las vías de resistencia a los fármacos (Wendel et al., Nature 2004; 428 (6980): 332-7; Graff et el., Cáncer Res. 2008; 68 (3): 631-4; De Benedetti y Graff, Oncogene 2004; 23 (18): 3189-99; Barnhart y Simón, J Clin Invest. 2007; 1 7(9):2385-8). La supresión de la expresión de elF4E por oligonucleótidos antisentido ha demostrado ser prometedora en experimentos preclínicos con células tumorales humanas (Graff et al., J Clin Invest. 2007; 1 17(9):2638-48). Se ha demostrado que la fosforilación en Ser209 se requiere estrictamente para la actividad oncogénica de elF4E in vitro e in vivo (Topisirovic et al., Cáncer Res. 2004; 64 (23): 8639-42; Wendel et al., Genes Dev. 2007; 21(24):3232-7). Por lo tanto, se espera que la inhibición de Mnk1 y Mnk2 tenga efectos beneficiosos en neoplasias malignas humanas.

Se han descrito inhibidores de Mnk (a los que se alude como CGP57380 y CGP052088) (véase Mol. Cell.Biol. 21 , 5500, 2001 ; Mol Cell Biol Res Comm 3, 205, 2000; Genomics 69, 63, 2000). CGP052088 es un derivado de estaurosporina con una CI5o de 70 nM para la inhibición de la actividad de quinasa in vitro de Mnk1. CGP57380 es un inhibidor de Mnk2 de bajo peso molecular, selectivo, no citotóxico (Mnk2a o Mnk2b) o de Mnk1 : La adición de CGP57380 a células del cultivo celular, transfectadas con Mnk2 (Mnk2a o Mnk2b) o Mnk1 , mostró una fuerte reducción de elF4E fosforilada.

Se han descrito otros inhibidores de Mnk. Véanse, por ejemplo, las solicitudes de patentes WO 06/066937, que describe compuestos de pirazolopirimidina, WO 06/136402 que describe ciertos compuestos de tienopirimidina, WO 07/115822 que describe otros compuestos de tienopirimidina con anillo de núcleo modificado, y WO 08/006547 que describe pirrolopirimidinas como inhibidores de Mnk quinasas.

El problema en el que se fundamenta la presente invención es proporcionar potentes y selectivos inhibidores de Mnk1 y/o Mnk2 que puedan utilizarse, de manera efectiva y segura, para el tratamiento de enfermedades metabólicas, enfermedades inflamatorias, cáncer, enfermedades neurodegenerativas, y sus complicaciones y trastornos consecutivos.

Se ha encontrado ahora, sorprendentemente, que determinados compuestos de tienopirimidina son potentes inhibidores de las enzimas quinasa Mnk1 y/o Mnk2 y/o variantes de las mismas y, como tales, pueden ser útiles en la profilaxis y/o terapia de enfermedades que pueden verse influenciadas por la inhibición de la actividad quinasa de Mnk1 y/o Mnk2 (Mnk2a o Mnk2b) y/o variantes de las mismas.

En contraste con los compuestos de tienopirimidina conocidos en la técnica, por ejemplo, los compuestos descritos en las solicitudes de patente de los solicitantes WO 06/136402 y WO 2007/115822, los compuestos de tienopirimidina de la presente invención proporcionan varias ventajas, a saber, mayor solubilidad, la posibilidad de formar sales estables, mejor estabilidad metabólica, mejores propiedades de farmacocinética, mejor actividad o actividad retenida en ensayos bioquímicos o celulares de actividad de Mnk y mejor selectividad o selectividad retenida contra otras quinasas.

Los compuestos de tienopirimidina descritos en los documentos WO 06/136402 y WO 07/1 15822 exhiben gran actividad en ensayos de la enzima Mnk y selectividad extremadamente alta, no obstante, exhiben una muy baja solubilidad y son, en la mayoría de los casos, metabólicamente inestables, lo cual proporciona propiedades de farmacocinética no deseadas.

Sorprendentemente, se ha descubierto que mediante la introducción de un grupo polar en la posición R4 en los compuestos de la fórmula general (I) a continuación se llega a una sorprendente estabilización metabólica sustancial, que hace que las tienopirimidínas de la presente invención sean útiles para aplicaciones farmacológicas in vivo.

Además, los compuestos descritos en esta solicitud también muestran mejor solubilidad, tienen una fuerte potencia inhibidora en ensayos bioquímicos y celulares y son altamente selectivos, lo que genera propiedades farmacológicas generales mucho mejores.

Si no se especifica lo contrario, cualquier resto alquilo mencionado en esta solicitud puede ser de cadena lineal o ramificado.

Los compuestos de tienopirimidina de la presente invención son compuestos de la fórmula general (I): en la que X es CH o N, R es un átomo de hidrógeno o halógeno, R2 es un grupo cicloalquilo C3-7 que está sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados entre oxo, halógeno, alquilo Ci-3, hidroxi, alcoxi C1-3, alcoxi Ci-4-carbonilo, amino y morfolinilo, donde los átomos de hidrógeno del grupo amino pueden estar opcionalmente reemplazados independientemente con un grupo alquilo C1.3, alcoxi C1-3-(CH2)m-, alcoxi C-i-4-carbonilo, alquilsulfonilo C1.3, alquil Ci.3-carbonilo, cicloalquil C3.6-carbonilo o piperidinilo, donde m es 2 ó 3 y donde el grupo piperidinilo puede estar opcionalmente sustituido con un grupo metilo, donde dos sustituyentes, que están unidos al mismo átomo de carbono, pueden formar juntos un grupo -0-(CH2)2-0-, y donde dos sustituyentes, que están unidos a dos átomos de carbono adyacentes, pueden formar juntos un grupo -0-CH2-0- o -0-C(CH3)2-0- R3 es un grupo alquilo C1.2 y R4 es un grupo carboxi, alcoxi Ci-3-carbonilo, aminocarbonilo, N-(alquil Ci-4)-aminocarbonilo o N,N-[di-(alquil C )]-aminocarbonilo, donde el grupo aminocarbonilo puede estar sustituido con un alquilsulfonilo d-3, CN, OH, alcoxi C1-3, cicloalquilo C3-6, -CH2-C=C-CH2-NH2, -CH2-C=C-CH2-NH(alquilo C1.3) o un grupo -CH2-C=C-CH2-N(alquilo Ci-3)2 o con un grupo piperidinilo o pirrolidinilo unido mediante un átomo de carbono, y donde los restos alquilo de los grupos N-(alqu¡l Ci^-amino-carbonilo y N,N-[di-(alquil C^^-aminocarbonilo anteriormente mencionados pueden estar opcionalmente sustituidos con un grupo aminocarbonilo, N-(alquil d^-aminocarbonilo o N,N-[di-(alquil Ci-3)]-aminocarbonilo, o con un grupo pirrolidinilo, oxazolilo, imidazolilo, piperidinilo o morfolinilo, cada uno unido mediante un átomo de carbono, o, de la posición 2 de un resto etilo, propilo o butilo hacia adelante, con un grupo OH, CN, alcoxi Ci.3, amino, N-(alquil examino, N,N-[di-(alquil C1-3)]-amino, alquiloxi Ci-5-carbonil-amino, morfolino, piperidino, piperazino o imidazolilo, donde cada uno de los grupos cicloalquilo, pirrolidinilo, oxazolilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo y imidazolilo anteriormente mencionados puede estar sustituido con un grupo metilo, amino, hidroxi o alcoxi Ci-3> o un tautómero, enantiómero, diastereómero o sal de los mismos.

Los compuestos preferidos de fórmula general (I) son aquellos en los que X, R1, R2 y R4son como se han definido anteriormente, y R3 es metilo, o un tautómero, enantiómero, diastereómero o sal de los mismos.

Un aspecto de la invención se refiere a compuestos de fórmula (I), en la que R2 a R4 son como se han definido anteriormente, y X es CH y R1 es un átomo de flúor, o un tautómero, enantiómero, diastereómero o sal de los mismos.

Otro aspecto de la invención se refiere a aquellos compuestos de fórmula (I), en la que R2 a R4 son como se han definido anteriormente, y X es N y R es un átomo de hidrógeno, o un tautómero, enantiómero, diastereómero o sal de los mismos. Los compuestos más preferidos de fórmula general (I) son aquellos en los que X y R1 a R3 son como se han definido anteriormente, y R4 es carboxi, alcoxi Ci-3-carbonilo, aminocarbonilo o un grupo N-(alquil Ci.3)-aminocarbonilo, donde el resto metilo del grupo N-(metil)-aminocarbonilo anteriormente mencionado puede estar opcionalmente sustituido con un grupo piperidinilo, N-metil-piperidinilo o morfolinilo, cada uno unido mediante un átomo de carbono, y donde el resto etilo resp. Propilo del grupo N-(alquil C2-3)-aminocarbonilo anteriormente mencionado puede estar opcionalmente sustituido terminalmente con hidroxi, metoxi, amino, N-metil-amino, N,N-dimetil-amino, morfolino, imidazolilo, 4-metil-piperazinilo, 1-metil-pirrolidinilo, piperidinilo, pirrolidinilo o un grupo 4-hidroxi-piperidino, o un tautómero, enantiómero, diastereómero o sal de los mismos.

Otros compuestos incluso más preferidos de fórmula (I) son aquellos en los que X y R1 a R3 son como se han definido anteriormente, y R4 es aminocarbonilo o un grupo N-(alquilo Ci.3)-, donde el resto metilo del grupo N-(metil)-aminocarbonilo anteriormente mencionado puede estar opcionalmente sustituido con un grupo piperidinilo, N-metil-piperidinilo o morfolinilo, cada uno unido mediante un átomo de carbono, y donde el resto etilo resp. propilo del grupo N-(alquil C2-3)-aminocarbonilo anteriormente mencionado puede estar opcionalmente sustituido terminalmente con hidroxi, metoxi, amino, N-metil-amino, ?,?-dimetil-amino, morfolino, imidazolilo, 4-metil-piperazinilo, 1-metil-pirrolidinilo, piperidinilo, pirrolidinilo o un grupo 4-hidroxi-piperidino, o un tautómero, enantiómero, diastereómero o sal de los mismos.

Otro conjunto de compuestos más preferidos de fórmula (I) es aquel en el que X, R1, R3 y R son como se han definido anteriormente, y R2 es ciclopentilo sustituido con uno o dos grupos hidroxi o metoxi o con un grupo amino, metilcarbonil-amino, N-metil-N-metilcarbonil-amino o donde los dos átomos de carbono adyacentes están unidos entre sí mediante un grupo -O-CH2-O- o -O-C(CH3)2-O-, o ciclohexilo sustituido con uno o dos átomos de flúor o uno o dos grupos hidroxi o metoxi o un grupo oxo, alcoxi Ci.3-carbonilo, morfolino, metil- piperidinilo o un grupo amino, donde los átomos de hidrógeno del grupo amino pueden estar opcional e independientemente reemplazados con un grupo metilo, metilcarbonilo, 2-metoxi-etilo o metilsulfonilo, o donde dos átomos de carbono adyacentes están unidos entre sí mediante un grupo -0-C(CH3)2-0- o donde dos átomos de hidrógeno unidos al mismo átomo de carbono se reemplazan con un grupo -0-(CH2)2-0-, o un tautómero, enantiómero, diastereómero o sal de los mismos, particularmente aquellos compuestos de fórmula (I), en los que X, R , R3 y R4 son como se han definido anteriormente, y R2 es ciclohexilo sustituido con un grupo hidroxi o metoxi, ciclopentilo sustituido con un grupo hidroxi, metoxi, metilcarbonil-amino o N-metil-N-metilcarbonil-amino o ciclopentilo, donde dos átomos de carbono adyacentes están unidos entre sí mediante un grupo -0-CH2-0-, o ciclobutilo sustituido con un grupo metilcarbonil-amino o metilcarbonil-N(metil)-amino, o un tautómero, enantiómero, diastereómero o sal de los mismos.

Los siguientes compuestos de la fórmula (I) son particularmente o una sal de éste.

Métodos típicos de preparar los compuestos de la invención se describen más abajo en la sección experimental.

El potente efecto inhibidor de los compuestos de la invención se puede determinar mediante ensayos enzimáticos in vitro, según se describe a continuación con mayor detalle.

Los compuestos de la presente invención se pueden sintetizar de acuerdo con los siguientes esquemas de síntesis: D Los compuestos de la fórmula general C pueden sintetizarse por reacción de un compuesto A con el alcohol desprotonado B en disolventes apropiados tales como THF o DMF a una temperatura entre 0 °C y 150 °C. La forma desprotonada de B puede obtenerse por desprotonación con una base tal como hidruro de sodio o hexametildisilazano de litio a una temperatura preferida de 0 °C. La hidrogenación del compuesto C con el fin de obtener un compuesto de la fórmula general D puede lograrse haciendo reaccionar C en presencia de hidrógeno y un catalizador tal como paladio o níquel Raney. El hidrógeno puede introducirse como gas o vapor desde una fuente de hidrógeno tal como formiato de amonio.

X = CH. N Los compuestos de fórmula general C pueden también obtenerse por reacción de Mitsunobu de un compuesto con la fórmula general E con un alcohol B en presencia de trifenilfosfina y un dialquilazodicarboxilato tal como dietilazodicarboxilato, diisopropilazodicarboxilato o di-terc.butilazodiacarboxilato en un disolvente tal como THF a temperaturas entre -10 °C y 80 °C, preferiblemente entre 0 °C y 30 °C.

Un compuesto de la fórmula G puede sintetizarse por reacción del compuesto D con F preferiblemente en presencia de un ácido tal como ácido p- toluenosulfónico o ácido clorhídrico en disolventes tales como dioxano a temperaturas entre 10 °C y 150 °C. La síntesis de un compuesto con la fórmula general H puede lograrse por reacción del compuesto G con una base tal como hidróxido de sodio o hidróxido de litio en disolventes tales como metanol, etanol, THF y agua o sus mezclas, preferiblemente en etanol/THF o THF/agua a temperaturas entre 10 °C y 100 °C. Un compuesto de la fórmula general J puede obtenerse por reacción del compuesto H con aminas de la fórmula general I usando procedimientos de acoplamiento de amida que emplean reactivos tales como TBTU, HATU o EDC/ N-Hidroxisuccinimida en presencia o ausencia de bases tales como diisopropiletilamina en disolventes tales como DMF o THF a temperaturas entre 0 °C y 120 °C, preferiblemente entre 0 °C y 30 °C.

Sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la invención de fórmula (1) se pueden formar con numerosos ácidos y bases orgánicas e inorgánicas. Sales por adición de ácidos a modo de ejemplo incluyen acetato, adipato, alginato, ascorbato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato, bisulfato, borato, butirato, citrato, canforato, camfosulfonato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanosulfonato, fumarato, glucoheptanoato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, 2-hidroxietianosulfonato, lactato, maleato, metanosulfonato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, nitrato, oxalato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilsulfonato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, salicilato, succinato, sulfato, sulfonato, tartrato, tiocianato, toluenosulfonato, tal como tosilato, undecanoato o similares.

Restos con contenido en nitrógeno de carácter básico se pueden cuaternizar con agentes tales como haluros de alquilo inferior, tales como cloruro, bromuro y yoduro de metilo, etilo, propilo y butilo; dialquilsulfatos, tales como dimetil-, dietil-, dibutil- y diamil-sulfatos, haluros de alquilo de cadena larga, tales como cloruro, bromuro y yoduro de decilo, laurilo, miristilo y estearilo, o haluros de aralquilo, tales como bromuros de bencilo y fenetilo, u otros. Con ello se obtienen productos solubles o dispersables en agua.

Sales por adición de bases farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan, a cationes basados en los metales alcalinos y alcalinotérreos, tales como sales de sodio, litio, potasio, calcio, magnesio, aluminio y similares, así como cationes de amonio cuaternario no tóxicos, y cationes de amina, que incluyen, pero no se limitan a amonio, tetrametilamonio, tetraetilamonio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, etilamina y similares. Otras aminas representativas, útiles para la formación de sales por adición de bases incluyen benzazetina, diciclohexilamina, hidrabina, N-metil-D-glucamina, N-metil-D-glucamida, t-butilamina, dietilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina y similares y sales con aminoácidos, tales como arginina, lisina, o similares.

A menos que se indique específicamente, en toda la memoria y en las reivindicaciones anejas, una fórmula química o nombre determinado abarcará tautómeros y todos los isómeros estéreo, ópticos y geométricos (p. ej., enantiómeros, diastereómeros, isómeros E/Z, etc.) y sus racematos, como también mezclas en diferentes proporciones de los enantiómeros separados, mezclas de diastereómeros o mezclas de cualquiera de las formas mencionadas donde existan dichos isómeros y enantiómeros, así como sus sales, incluyendo sus sales farmacéuticamente aceptables y sus solvatos, como por ejemplo hidratos, incluyendo solvatos de los compuestos libres o solvatos de una sal del compuesto.

Tal como se utiliza en esta memoria, el término "metabolito" se refiere a (i) un producto de metabolismo, incluidos intermedios y productos, (ii) cualquier sustancia implicada en el metabolismo (ya sea en forma de un producto del metabolismo o según sea necesario para el metabolismo), o (iii) cualquier sustancia producida o utilizada durante el metabolismo. En particular, se refiere al producto final que permanece después del metabolismo.

Tal como se utiliza en esta memoria, el término "profármaco" se refiere a (i) una forma inactiva de un fármaco que ejerce sus efectos una vez que procesos metabólicos dentro del cuerpo lo convierten en una forma utilizable o activa, o (ii) una sustancia que da lugar a un metabolito farmacológicamente activo, aunque no sea activo por sí mismo (es decir un precursor inactivo).

Las expresiones "profármaco" o "derivado de profármaco" se refieren a un derivado o vehículo unido covalentemente del compuesto parental o fármaco activo que experimenta al menos alguna biotransformación antes de presentar su efecto o efectos farmacológicos. En general, estos profármacos tienen grupos escindibles metabólicamente y se transforman rápidamente in vivo para producir el compuesto parental, por ejemplo, por hidrólisis en la sangre, y generalmente incluyen ésteres y análogos de amida de los compuestos parentales. El profármaco se formula con los objetivos de mejorar la estabilidad química, mejorar la aceptación y el seguimiento por parte del paciente, mejorar la biodisponibilidad, prolongar la duración de la acción, mejorar la selectividad de órganos, mejorar la formulación (por ejemplo, aumentar la hidrosolubilidad) y/o reducir los efectos secundarios (por ejemplo, la toxicidad). En general, los profármacos por sí mismos pueden tener una actividad biológica débil o nula y son estables en las condiciones normales. Los profármacos pueden prepararse fácilmente a partir de los compuestos parentales usando métodos conocidos en la técnica tales como los descritos en A Textbook of Drug Desiqn and Development. Krogsgaard-Larsen y H. Bundgaard (eds.), Gordon & Breach, 1991 , particularmente el Capítulo 5: "Design and Applications of Prodrugs"; Desiqn of Prodruqs. H. Bundgaard (ed.), Elsevier, 1985; Prodrugs: Topical and Ocular Druo Deliverv. K.B. Sloan (ed.), Marcel Dekker, 1998; ethods in Enzymologv, K. Widder eí al. (eds.), Vol. 42, Academic Press, 1985, particularmente pág. 309-396; Burqer's Medicinal Chemistrv and Drug Discoverv. 5a Ed., M. Wolff (ed.), John Wiley & Sons, 1995, particularmente Vol. 1 y pág. 172-178 y pág. 949-982; Pro-Drugs as Novel Deliverv Systems. T. Higuchi y V. Stella (eds.), Am. Chem. Soc, 1975; Bioreversible Carriers in Drug Design. E.B. Roche (ed.), Elsevier, 1987, incorporándose cada uno como referencia en su totalidad.

La expresión "profármaco farmacéuticamente aceptable", como se usa en la presente memoria, se refiere a un profármaco de un compuesto de la invención que, dentro del alcance de un criterio médico bien fundado, es adecuado para uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales inferiores sin que se produzca toxicidad indebida, irritación, respuesta alérgica y similares, en proporción con una relación beneficio/riesgo razonable y eficaz para el uso para el que está destinado, asi como las formas zwitteriónicas, cuando sea posible.

Tal como se utiliza en esta memoria, la expresión "cicloalquilo C^o" o "cicloalquilo C3_8" se refiere a un sustituyente alquilo o grupo carbocíclico mono o policíclico que tiene 3 a 10 o 3 a 8 átomos del anillo respectivamente, tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclobutenilo, ciclopentenilo, ciclopentadienilo, ciclohexenilo, ciclohexadienilo, cicloheptenilo, cicloheptadienilo, cicloheptatrienilo, naftaleno perhidratado o indeno, adamantilo o norbonanilo y similares.

La expresión "alquilo Ci-8 ", tal como se utiliza en esta memoria, solo o en combinación con otros términos, tal como en alcoxi, se refiere a un grupo alquilo/alcoxi CI-B, preferiblemente ci- de cadena lineal o ramificada, tal como metilo, etilo, propilo (¡so-, n-), butilo (iso-, n-, sec-, tere-), pentilo, hexilo, metoxi, etoxi, propoxi (iso-, n-), butoxi (iso-, n-, sec-, tere-), pentoxi, hexoxi; además, el término "alquilo Ci-8" también incluye un grupo alquilo que puede contener oxígeno en la cadena y que puede estar sustituido con halógeno para formar un grupo éter o éter halogenado.

Cualquier átomo de hidrógeno, particularmente en un grupo alquilo, alcoxi o alquenilo, puede reemplazarse con un átomo de flúor.

La expresión "alquenilo C2-8", por sí mismo o como parte de otro grupo, se refiere a un grupo alquenilo lineal o ramificado de 2 a 8 carbonos, preferiblemente de 2 a 6 carbonos en la cadena normal, que incluye uno o más dobles enlaces en la cadena normal, como vinilo, 2-propenilo, 3-butenilo, 2-butenilo, 4-pentenilo, 3-pentenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 2-heptenilo, 3-heptenilo, 4-heptenilo, 3-octenilo.

El término "heterociclilo" se refiere a grupos heterociclilo monocíclicos, saturados o insaturados con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de N, S y O, siendo el resto de los átomos del anillo átomos de carbono y teniendo preferiblemente un número total de átomos del anillo de 3 a 10, tales como morfolino, piperazinilo, piperidinilo, piridilo, pirimidinilo, tiazolilo, indolilo, imidazolilo, oxadiazolilo, tetrazolilo, pirazinilo, triazolilo, tiofenilo o furanilo.

El término "heteroarilo" se refiere a un grupo aromático mono o bicíclico con 1 a 4 heteroátomos, seleccionados de N, S y O, siendo el resto de los átomos del anillo átomos de carbono y teniendo de preferencia un número total de átomos del anillo de 5 a 10. Ejemplos sin limitación de grupos heteroarilo son benzofuranilo, furilo, tienilo, benzotienilo, tiazolilo, imidazolilo, oxazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, benzotiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, pirrolilo, piranilo, tetrahidropiranilo, pirazolilo, piridilo, quinolinilo, isoquinolinilo, purinilo, carbazolilo, benzoxazolilo, benzamidazolilo, indolilo, isoindolilo, pirazinilo, diazinilo, pirazina, triaziniltriazina, tetrazinilo, tetrazolilo, benzotiofenilo, benzopiridilo y bencimidazolilo.

En un aspecto adicional, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de tienopirimidina de la presente invención y, opcionalmente, un vehículo farmacéuticamente aceptable.

Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la presente invención pueden comprender, además, un agente terapéutico adicional. Se prefieren particularmente las composiciones en las que el agente terapéutico adicional se selecciona entre antidiabéticos como insulina, análogos de insulina de larga y corta acción, sulfonilureas, biguanidas, inhibidores de DPP-IV, inhibidores de SGLT2, inhibidores de 11&-HSD, activadores de glucocinasa, activadores de AMPK, agonistas de los receptores de Glp-1 , agonistas de los receptores de GIP, inhibidores de DGAT, agonistas de PPARgamma, agonistas de PPARdelta y otros antidiabéticos derivados de tiazolidinadionas, agentes reductores de lípidos tales como estatinas, fibratos, derivados de ácido nicotínico y resinas de intercambio iónico, o inhibidores de HMG-CoA reductasa, terapéuticos cardiovasculares como nitratos, antihipertensivos tales como ß-bloqueantes, inhibidores de ACE, bloqueantes del canal de Ca, antagonistas de los receptores de angiotensina II, diuréticos, inhibidores de agregación de trombocitos o antineoplásicos tales como alcaloides, agentes alquilantes, antibióticos o antimetabolitos, o agentes antiobesidad. Composiciones adicionales preferidas son composiciones en las que el agente terapéutico adicional se selecciona de un antagonista de histamina, un antagonista de bradiquinina, antagonista de serotonina, leucotrieno, un agente antiasmático, un AINE, un antipirético, un corticosteroide, un antibiótico, un analgésico, un agente uricosúrico, un agente quimioterapéutico, un agente antigota, un broncodilatador, un inhibidor de la cicloxigenasa-2, un esteroide, un inhibidor de la 5-lipoxigenasa, un agente inmunosupresor, un antagonista de leucotrieno, un agente citostático, un antineoplásico, un inhibidor de mTor, un inhibidor de tirosina quinasa, anticuerpos o fragmentos de los mismos contra citoquinas y partes solubles (fragmentos) de receptores de citoquina.

Se prefieren más particularmente los compuestos tales como insulina NPH humana, insulina lente o ultralente humana, insulina Lispro, insulina Aspart, insulina Glulisine, insulina detemir o insulina Glargine, metformina, fenformina, acarbosa, miglitol, voglibosa, pioglitazona, rosiglizatona, rivoglitazona, aleglitazar, alogliptin, saxagliptin, sitagliptin, vildagliptin, exenatida, liraglutida, albiglutida, pramlintida, carbutamida, clorpropamida, glibenclamida (gliburida), gliclazida, glimepirida, glipizida, gliquidona, tolazamida, tolbutamida, atenolol, bisoprolol, metoprolol, esmolol, celiprolol, talinolol, oxprenolol, pindolol, propanolol, bupropanolol, penbutolol, mepindolol, sotalol, certeolol, nadolol, carvedilol, nifedipin, nitrendipin, amlodipin, nicardipin, nisoldipin, diltiazem, enalapril, verapamil, gallopamil, quinapril, captopril, lisinopril, benazepril, ramipril, peridopril, fosinopril, trandolapril, irbesatán, losartán, valsartán, telmisartán, eprosartán, olmesartán, hidroclorotiazida, piretanid, clorotalidona, mefrusida, furosemida, bendroflumetiazid, triamtereno, deshidralazina, ácido acetilsalicílico, tirofiban-HCI, dipiramidol, triclopidin, iloprost-trometanol, eptifibatida, clopidogrel, piratecam, abciximab, trapidil, simvastatina, bezafibrato, fenofibrato, gemfibrozil, etofilina, clofibrato, etofibrato, fluvastatina, lovastatina, pravastatina, colestiramida, colestipol-HCI, xantinol nicotinat, inositol nicotinat, acipimox, nebivolol, glicerolnitrato, mononitrato de isosorbida, dinitrato de isosorbida, pentaeritritil tetranitrato, indapamida, cilazepril, urapidil, eprosartán, nilvadipin, metoprolol, doxazosin, molsidormin, moxaverin, acebutolol, prazosina, trapidil, clonidina, vinca alcaloides y análogos tales como vinblastina, vincristina, vindesina, vinorelbina, derivados de podofilotoxina, etopósido, tenipósido, agentes alquilantes, nitroso ureas, análogos de N-lost, cicloplonfamid, estamustina, melfalán, ifosfamid, mitoxantron, idarrubicina, doxorrubicina, bleomicina, mitomicina, dactinomicina, daptomicina, docetaxel, paclitaxel, carboplatino, cisplatino, oxaliplatino, BBR3464, satraplatino, busulfán, treosulfán, procarbazina, dacarbazina, temozolomida, clorambucil, clormetina, ciclofosfamida, ifosfamida, melfalán, bendamustina, uramustina, ThioTEPA, camptotecina, topotecán, irinotecán, rubitecán, etopósido, tenipósido, cetuximab, panitumumab, trastuzumab, rituximab, tositumomab, alemtuzumab, bevacizumab, gemtuzumab, ácido aminolevulínico, metil aminolevulinato, porfímero sódico, verteporfin, axitinib, bosutinib, cediranib, dasatinib, erlotinib, gefitinib, imatinib, lapatinib, lestaurtinib, nilotinib, semaxanib, sorafenib, sunitinib, vandetanib, retinoides (alitretinoína, tretinoína), altretamina, amsacrina, anagrelida, trióxido de arsénico, asparaginasa (pegaspargasa), bexarotena, bortezomib, denileuquina diftitox, estramustina, ixabepilona, masoprocol, mitotano, testolactona, tipifarnib, abetimus, deforolimus, everolimus, gusperimus, pimecrolimus, sirolimus, tacrolimus, temsirolimus, antimetabolitos tales como citarabina, fluorouracil, fluoroarabina, gemcitabina, tioguanina, capecitabina, combinaciones tales como adriamicina/daunorrubicina, citosina arabinósido/citarabina, 4-HC, u otras fosfamidas.

Otros compuestos particularmente preferidos son compuestos tales como clemastina, difenhidramina, dimenhidrinato, prometazina, cetirizina, astemizol, levocabastina, loratidina, terfenadina, ácido acetilsalicílico, salicilato de sodio, salsalato, diflunisal, ácido salicilsalicílico, mesalazina, sulfasalazina, osalazina, acetaminofen, indometacina, sulindac, etodolac, tolmetin, ketorolac, betametasona, budesonida, ácido cromoglicínico, dimeticona, simeticona, domperidona, metoclopramid, acemetacina, oxaceprol, ibuprofeno, naproxen, ketoprofeno, flubriprofeno, fenoprofeno, oxaprozin, ácido mefenámico, ácido meclofenámico, fenilbutazona, oxifenbutazona, azapropazona, nimesulida, metamizol, leflunamida, eforicoxib, lonazolac, misoprostol, paracetamol, aceclofenac, valdecoxib, parecoxib, celecoxib, propifenazona, codeína, oxapozin, dapson, prednisona, prednisolona, triamcinolona, dexibuprofeno, dexametasona, flunisolida, albuterol, salmeterol, terbutalina, teofilina, cafeína, naproxen, sulfato de glucosamina, etanercept, ketoprofeno, adalimumab, ácido hialurónico, indometacina, dimaleato de proglumetacina, hidroxicloroquina, cloroquina, infliximab, etofenamato, auranofin, oro, cloruro de [224Ra]radio, ácido tiaprofénico, dexketoprofeno (trometamol), cloprednol, aurotiomalato de sodio, aurotioglucosa, colchicina, allopurinol, probenecid, sulfinpirazona, benzbromarona, carbamazepina, lornoxicam, fluorcortolon, diclofenac, efalizumab, idarrubicina, doxorrubicina, bleomicina, mitomicina, dactinomicina, daptomicina, citarabina, fluorouracilo, fluoroarabina, gemcitabina, tioguanina, capecitabina, adriamidina/daunorrubicina, citosina arabinósido/citarabina, 4-HC, u otras fosfamidas, penicilamina, una preparación de ácido hialurónico, arteparon, glucosamina, MTX, fragmentos solubles del receptor de TNF (tal como etanercept (Enbrel)) y anticuerpos contra TNF (tales como infliximab (Remicade), natalizumab (Tysabri) y adalimumab (Humira)).

Se apreciará por parte de una persona de experiencia ordinaria en la técnica que los compuestos de la invención y el agente terapéutico adicional se pueden formular en una forma de dosificación única, o pueden estar presentes en formas de dosificación separadas y se pueden administrar concomitantemente (es decir al mismo tiempo) o secuencialmente.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden estar en cualquier forma adecuada para el método de administración pretendido.

Los compuestos de la presente invención se pueden administrar por vía oral, parenteral, tal como broncopulmonar, subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, intratecal, transdérmica, transmucosal, subdural, local o tópica, a través de iontoferesis, sublingual, por spray de inhalación, aerosol o por vía rectal y similares, en formulaciones de dosificación unitaria que comprenden excipientes farmacéuticamente aceptables convencionales.

Excipientes que se pueden utilizar en la formulación de las composiciones farmacéuticas de la presente invención comprenden soportes, vehículos, diluyentes, disolventes tales como alcoholes monohídricos, tales como etanol, isopropanol, y alcoholes polihídricos, tales como glicoles y aceites comestibles tales como aceite de soja, aceite de coco, aceite de oliva, aceite de cártamo, aceite de semilla de algodón, ésteres oleosos, tales como oleato de etilo, miristato de isopropilo; aglutinantes, adyuvantes, solubilizantes, agentes espesantes, estabilizantes, desintegrantes, deslizantes, agentes lubricantes, agentes tampón, emulsionantes, agentes humectantes, agentes de suspensión, agentes edulcorantes, colorantes, saporíferos, agentes de revestimiento, conservantes, antioxidantes, agentes de tratamiento, modificadores y reforzadores del suministro de fármacos, tales como fosfato de calcio, estearato de magnesio, talco, monosacáridos, disacáridos, almidón, gelatina, celulosa, metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, dextrosa, hidroxipropil-ß-ciclodextrina, polivinilpirrolidona, ceras de bajo punto de fusión, resinas de intercambio iónico.

Otros excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences, 15a Ed., Mack Publishing Co., New Jersey (1991).

Formas de dosificación para la administración oral incluyen comprimidos, cápsulas, pastillas, pildoras, obleas, gránulos, líquidos orales, tales como jarabes, suspensiones, soluciones, emulsiones, polvo para reconstitución.

Formas de dosificación para la administración parenteral incluyen soluciones o emulsiones acuosas u oleosas para infusión, soluciones, suspensiones o emulsiones acuosas u oleosas para inyección, jeringas pre-cargadas y/o polvos para reconstitución.

Formas de dosificación para la administración local/tópica comprenden insuflaciones, aerosoles, aerosoles de dosis medida, sistemas terapéuticos transdérmicos, parches medicados, supositorios rectales y/u óvulos.

La cantidad del compuesto de la presente invención que se puede combinar con los excipientes para formular una forma de dosificación sencilla variará en función del hospedante tratado y del modo particular de administración.

Las composiciones farmacéuticas de la invención se pueden producir de una manera conocida per se para la persona experta según se describe, por ejemplo, en Remington's Pharmaceutical Sciences, 15a Ed., Mack Publishing Co., New Jersey (1991).

En un aspecto adicional de la invención, se proporciona el uso de un compuesto de tienopirimidina de la presente invención para la producción de una composición farmacéutica para inhibir la actividad quinasa de Mnk1 o Mnk2 (Mnk2a, Mnk2b) o variantes adicionales de las mismas, en particular para la profilaxis o terapia de enfermedades metabólicas, trastornos hematopoyéticos, cáncer, y sus complicaciones y trastornos consecutivos. Con lo cual, se prefiere la profilaxis y terapia de enfermedades metabólicas del metabolismo de los hidratos de carbono y/o lípidos.

Enfermedades de la invención que se ven influenciadas por la inhibición de la actividad quinasa de Mnk1 y/o Mnk2 (Mnk2a o Mnk2b) y/o variantes adicionales de las mismas incluyen enfermedades relacionadas con la regulación de enfermedades metabólicas, tales como obesidad, trastornos en la alimentación, caquexia, diabetes mellitus, síndrome metabólico, hipertensión, enfermedades cardiacas coronarias, hipercolesterolemia, dislipidemia, osteoartritis, cálculos biliares y/o apnea del sueño, y enfermedades relacionadas con compuestos de oxígeno reactivos (defensa ROS), tales como diabetes mellitus, enfermedades neurodegenerativas y cáncer.

Las composiciones farmacéuticas de la invención son particularmente útiles para la profilaxis y el tratamiento de la obesidad, diabetes mellitus y otras enfermedades del metabolismo de los hidratos de carbono y lípidos tal como se ha establecido antes, en particular diabetes mellitus y obesidad.

Así, en una forma de realización más preferida de esta invención se proporciona el uso de un compuesto de tienopirimidina para la producción de una composición farmacéutica para la profilaxis o terapia de enfermedades metabólicas.

Todavía en un aspecto adicional de la invención se proporciona el uso de un compuesto de tienopirimidina de la invención para la producción de una composición farmacéutica para tratar o prevenir un trastorno mediado por citoquinas, tal como una enfermedad inflamatoria.

Las composiciones farmacéuticas de la invención son, así, útiles para la profilaxis o terapia de enfermedades inflamatorias, en particular inflamación crónica o aguda, artritis inflamatoria crónica, artritis reumatoide, artritis psoriásica, osteoartritis, artritis reumatoide juvenil, artritis gotosa; psoriasis, psoriasis eritrodérmica, psoriasis pustular, enfermedad intestinal inflamatoria, enfermedad de Crohn y afecciones relacionadas, colitis ulcerosa, colitis, diverticulitis, nefritis, uretritis, salpingitis, ooforitis, endomiometritis, espondilitis, lupus eritematoso sistémico y trastornos relacionados, esclerosis múltiple, asma, meningitis, mielitis, encefalomielitis, encefalitis, flebitis, tromboflebitis, enfermedad obstructiva crónica (EPOC), enfermedad intestinal inflamatoria, rinitis alérgica, endocarditis, osteomielitis, fiebre reumática, pericarditis reumática, endocarditis reumática, miocarditis reumática, enfermedad reumática de la válvula mitral, enfermedad reumática de la válvula aórtica, prostatitis, prostatocistitis, espondoartropatías, espondilitis anquilosante, sinovitis, tenosinovotis, miositis, faringitis, polimialgia reumática, tendinitis de la espalda o bursitis, gota, pseudogota, vasculitis, enfermedades inflamatorias de tiroides seleccionadas de tiroiditis granulomatosa, tiroiditis, linfocítica, tiroiditis fibrosa invasiva, tiroiditis aguda; tiroiditis de Hashimoto, enfermedad de Kawasaki, fenómeno de Raynaud, síndrome de Sjogren, enfermedad neuroinflamatoria, septicemia, conjuntivitis, queratitis, iridociclitis, neuritis óptica, otitis, linfoadenitis, nasofaringitis, sinusitis, faringitis, amigdalitis, laringitis, epiglotitis, bronquitis, neumonitis, estomatitis, gingivitis, esofagitis, gastritis, peritonitis, hepatitis, colelitiasis, colecistitis, glomerulonefritis, enfermedad de goodpasture, glomerulonefritis crescéntica, pancreatitis, dermatitis, endomiometritis, miometritis, metritis, cervicitis, endocervicitis, exocervicitis, parametritis, tuberculosis, vaginitis, vulvitis, silicosis, sarcoidosis, neumoconiosis, poliartropatías inflamatorias, artropatías psoriásicas, fibrosis intestinal, bronquiectasias y artropatías enteropáticas.

Como ya se ha establecido antes, las composiciones de la presente invención son particularmente útiles para tratar o prevenir una enfermedad, seleccionada de inflamación crónica o aguda, artritis inflamatoria crónica, artritis reumatoide, psoriasis, EPOC, enfermedad intestinal inflamatoria, choque septicémico, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, esclerosis múltiple y asma.

Así, en una forma de realización más preferida de esta invención se proporciona el uso de un compuesto de tienopirimidina para la producción de una composición farmacéutica para la profilaxis o terapia de enfermedades inflamatorias seleccionadas de inflamación crónica o aguda, artritis inflamatoria crónica, artritis reumatoide, psoriasis, EPOC, enfermedad intestinal inflamatoria, choque septicémico, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, esclerosis múltiple y asma.

Todavía en un aspecto adicional de la invención se proporciona el uso de un compuesto de tienopirimidina de la invención para la producción de una composición farmacéutica para tratar o prevenir el cáncer, enfermedades víricas o enfermedades neurodegenerativas.

Para los fines de la presente invención, una dosificación terapéuticamente eficaz será generalmente de aproximadamente 1 a 2000 mg/día, preferiblemente de aproximadamente 10 a aproximadamente 1000 mg/día, y lo más preferiblemente de aproximadamente 10 a aproximadamente 500 mg/día, que se puede administrar en una o múltiples dosis.

Se apreciará, sin embargo, que el nivel de dosis específica de los compuestos de la invención para cualquier paciente particular dependerá de una diversidad de factores, tales como la edad, el sexo, peso corporal, estado de salud general, dieta, respuesta individual del paciente a tratar, tiempo de administración, gravedad de la enfermedad a tratar, la actividad del compuesto particular empleado, forma de dosificación, modo de aplicación y medicación concomitante. La cantidad terapéuticamente eficaz para una situación dada se determinará fácilmente mediante una experimentación rutinaria y está dentro de de la experiencia y juicio del clínico o médico ordinario.

ENSAYOS DE QUINASA MEDIANTE POLARIZACIÓN POR FLUORESCENCIA Principio del ensayo: Se verificó la potencia inhibidora de compuestos contra Mnk1 , Mnk2a y otras quinasas con ensayos basados en un formato conocido por los expertos en la técnica como la polarización por fluorescencia indirecta (competitiva). El sistema de detección del ensayo comprende un pequeño fosfo-péptido marcado con fluoróforo (denominado ligando) unido a un anticuerpo fosfo-específico. El producto generado por la reacción de la quinasa compite con el ligando por la unión al anticuerpo. En base al mayor volumen de la molécula del ligando unido, que resulta en una velocidad de rotación menor en solución, su luz emitida tiene un mayor grado de polarización que la que procede del ligando libre.

Descripción del ensayo de quinasa homogénea específica Ejemplo 2A. Ensayo de quinasas Mnk1 y Mnk2a in vitro Como una fuente de enzimas, Mnk1 humana y Mnk2a humana se expresaron como proteínas de fusión GST en E. coli, se purificaron hasta una homogeneidad de >80% mediante cromatografía de afinidad con glutatión y se activaron in vitro con ERK2 pre-activado. En síntesis, los marcos de lectura abiertos de Mnk1 y Mnk2a humanas se amplificaron a partir de ADNc utilizando los pares de cebadores directos/inversos SEC ID NO: 1 5'TTTAGGATCCGTATCTTCTCAAAAGTTGG / SEC ID NO: 2 5' CTGGGTCGACTCAGAGTGCTGTGGGCGG y SEC ID NO: 3 5'ACAGGGATCCGTGCAGAAGAAACCAGCC / SEC ID NO: 4 5'GATGGTCGACTCAGGCGTGGTCTCCCACC (subrayados los sitios de restricción utilizados), respectivamente, y se clonaron en los sitios BamHI y Salí del vector pGEX-4T1 (Amersham, Suecia, n° de cat. 27-4580-01). Estas construcciones permiten la expresión procariótica de Mnk1 o Mnk2a en forma de una proteína de fusión con una etiqueta glutatión S-transferasa (GST) N-terminal, a la que se alude como GST-Mnk1 o GST-Mnk2a. El proceso de expresión y purificación siguiente era idéntico para GST- Mnk1 y GST-Mnk2a, aludiéndose en general a GST-Mnk, cuando no se distingue entre las dos isoformas. La expresión de GST-Mnk se efectuó en E. coli BL21 (Merck Biosciences, Alemania, n° de cat. 69449). Las células se desarrollaron en LB-Bouillon (Merck, Alemania, n° de cat. 1.10285) suplementado con 100 ug/ml de ampicilina (Sigma, Alemania, n° de cat. A9518) a 37°C. Cuando el cultivo había alcanzado una densidad correspondiente a un A6oo de 0,8, se añadió un volumen equivalente de LB enfriado con hielo/ampicilina, el cultivo se transfirió a 25°C y se indujo durante 4 h con tiogalactósido de isopropilo 1 mM (IPTG, Roth, Alemania, cat. no. 2316.4). Las células, recolectadas mediante centrifugación, se re suspendieron en 10 mi de tampón de lisis (hidrocloruro de tris (hidroximetil) aminometano 50 mM (Tris/HCI, Sigma, Alemania, n° de cat. T5941) pH 7.5, cloruro de sodio 300 mM (NaCI, Sigma, Alemania, n° de cat. S7653), glicerol al 5% (p/v) (Sigma, Alemania, n° de cat. G5516), ditiotreitol DTT 3 mM (DTT, Sigma, Alemania, n° de cat. D9779)) por gramo de peso en húmedo del sedimento de células. Los lisados se prepararon mediante rotura de células con un sonificador y subsiguiente clareamiento mediante centrifugación a 38000 g durante 45 min a 4°C.

El lisado se aplicó a una columna GSTPrep FF 16/10 (Amersham, Suecia, n° de cat. 17-5234-01) equilibrado con tampón de lisis. La separación de material no unido se efectuó con 3 volúmenes de columna (CV - siglas en inglés) de tampón de lisis. La elución se efectuó con 2 CV de tampón de elución (Tris/HCI 50 mM pH 7.5, NaCI 300 mM, glicerol al 5% (p/v), glutatión 20 mM (Sigma, Alemania, n° de cat. G4251)). Las fracciones pico se agruparon y la proteína se transfirió a tampón de almacenamiento (Tris/HCI 50 mM pH 7.5, NaCI 200 mM, ácido etilen-glicol-bis (2-aminoet¡léter)-N,N,N',N'-tetraacético 0.1 mM (EGTA, Aldrich, Alemania, n° de cat. 23,453-2), DTT 1 mM, glicerol al 10% (p/v), sacarosa 0.5 M (Sigma, Alemania, n° de cat. S0389) mediante filtración en gel sobre una columna desaladora PD10 (Amersham, Suecia, n° de cat. 17-0851-01). Partes alícuotas se congelaron por choque en nitrógeno líquido y se almacenaron a 80°C.

La activación de Mnk1 y Mnk2a se efectuó a una concentración de 2,5 µ? de GST-Mnk1 o GST-Mnk2a purificado mediante incubación con 150 nM de NHis-ERK2 pre-activado (véase el ensayo de ERK2 para la preparación) y 50 µ? de adenosina trifosfato (ATP, Sigma, n° de cat. A2699) en un tampón que comprende N-(2-hidroxietil) piperazina-N'-(ácido 2-etanosulfónico) (HEPES, Fluka, Alemania, n° de cat. 54459)/hidróxido de potasio (KOH, Roth, Alemania, n° de cat. 6751.1) pH 7.4, cloruro de magnesio 10 mM (MgCI2, Sigma, Alemania, n° de cat. M2670), DTT 0.25 mM, polioxietileno-20 esteariléter al 0.05% (p/v) (Brij 78, Sigma, Alemania, n° de cat. P4019) (tampón HMDB) durante 45 min a 30°C. Después de la incubación, la preparación se repartió en partes alícuotas en muestras de un solo uso, se congeló por choque en nitrógeno líquido, se almacenó a 80°C y se utilizó para los ensayos de quinasas Mnk1 o Mnk2a según se detalla más abajo. La presencia de quinasa activante ha sido ensayada para no interferir con el ensayo de la actividad de Mnk.

SUSTRATO: Un péptido 12mero carboxi-terminal amidado, con la secuencia SEC ID NO: 5 TATKSGSTTKNR, derivado de la secuencia de aminoácidos en torno a la serina 209 del factor de iniciación de la traducción eucariótico 4E (elF4E) ha sido sintetizado y purificado mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC - siglas en inglés) hasta >95% (Thermo, Alemania). Está subrayado el residuo serina fosforilado por parte de quinasas Mnk.

LIGANDO: El péptido TATKSG-pS-TTKNR, que contiene un extremo carboxi amidado y conjugado en el extremo amino con el fluoróforo derivado de oxazina descrito más abajo, se sintetizó y utilizó como ligando.

ANTICUERPO: Conejos blancos SPF de Nueva Zelanda se han inmunizado de acuerdo con protocolos estándares con el péptido NH2-CTAT SG-pS-TTKNR-CONH2, acoplado a hemocianina de la lapa bocallave (KLH - siglas en inglés). La fracción de inmunoglobulina G (IgG) se purificó a partir de suero de animales estimulados mediante técnicas conocidas en la técnica. En síntesis, el suero se sometió a cromatografía de afinidad de proteína A. El material eluido se precipitó en sulfato de amonio saturado frío al 50%, los sedimentos se disolvieron y desalaron. El material resultante era apropiado para uso en el ensayo descrito más abajo, sin purificación específica para el antígeno adicional.

ESTIPULACIÓN DEL ENSAYO: La inhibición de la actividad quinasa de Mnk1 y Mnk2a se confirmó con el mismo sistema de ensayo, utilizando GST-Mnk1 o GST-Mnk2a pre-activado, respectivamente. La reacción de la quinasa contiene 30 µ? de péptido sustrato, 20 µ? de ATP, 60 nM de ligando y uno cualquiera de 25 nM de Mnk1 pre-activado o 2.5 nM de Mnk2a pre-activado. Las condiciones del tampón de reacción son HEPES/KOH 16 mM pH 7.4, MgCI2 8 mM, DTT 0.4 mM, albúmina de suero bovino al 0.08 % (p/v) (BSA, Sigma, Alemania, n° de cat. A3059), Pluronic F127 al 0.008% (p/v) (Sigma, Alemania, n° de cat. P2443), DMSO al 3% (v/v) (Applichem, Alemania, n° de cat. A3006). La reacción de la quinasa es a 30°C durante 40 min. La reacción de la quinasa se termina mediante la adición de 0.67 volúmenes de reacción de 1 µ? de anticuerpo en HEPES/KOH 20 mM pH 7.4, ácido etilendiaminotetraacético, sal disódica 50 mM (EDTA, Sigma, Alemania, n° de cat. E5134), DTT 0.5 mM, monolaureato de polioxietileno-sorbitán (Tween 20, Sigma, Alemania, n' de cat. P7949). Después de un tiempo de equilibrio de 1 h a la temperatura ambiente, las muestras se someten a medición de la polarización por fluorescencia. La lectura de la polarización por fluorescencia se generó en un lector multimodo Analyst AD (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, EE.UU.) equipado con un espejo dicroico DLRP650 (Omega Opticals, Brattleboro, VT, EE.UU., n° de cat. XF2035), un filtro pasa banda 630AF50 (Omega Opticals, Brattleboro, VT, EE.UU., n° de cat. XF1069) sobre el lado de excitación y un filtro pasa banda 695AF55 sobre el lado de emisión (Omega Opticals, Brattleboro, VT, EE.UU., n° de cat. XF3076).

La actividad de las proteínas Mnk puede ensayarse también mediante otros formatos de ensayo in vitro. Por ejemplo, los ensayos de quinasa adecuados se han descrito en la bibliografía, en Knauf et al., Mol Cell Biol. 2001 Agosto; 21 (16):5500-11 o en Scheper et al., Mol Cell Biol. 2001 Feb; 21 (3):743-54. En general, los ensayos de Mnk quinasa pueden realizarse de modo tal que un sustrato de Mnk tal como una proteína o un péptido, que puede incluir o no modificaciones según se describe a continuación, u otros, son fosforilados por las proteínas Mnk que tienen actividad enzimática in vitro. La actividad de un agente candidato puede entonces determinarse mediante su capacidad de disminuir la actividad enzimática de la proteína Mnk. La actividad de la quinasa se puede detectar cambiando las propiedades químicas, físicas o inmunológicas del sustrato debido a la fosforilación.

En un ejemplo, el sustrato de quinasa puede tener características, con diseño o endógenas, para facilitar su unión o detección con el fin de generar una señal que sea adecuada para el análisis del estado de fosforilación de los sustratos. Estas características pueden ser, aunque sin limitarse a ello, una molécula de biotina o su derivado, un resto glutatión-S-transferasa, un resto de seis o más residuos histidina consecutivos, una secuencia de aminoácidos o hapteno que funcione como un marcador de epítopo, un fluorocromo, una enzima o un fragmento de enzima. El sustrato de quinasa puede estar unido a éstas u otras características con un brazo espaciador molecular para evitar el impedimento esférico.

En otro ejemplo, el sustrato de quinasa puede estar marcado con un fluoróforo. A la unión del reactivo al sustrato marcado en solución le puede seguir la técnica de polarización por fluorescencia, como se describe en la bibliografía. En una variante de este ejemplo, una molécula indicadora de fluorescencia puede competir con el sustrato para que el analito detecte la actividad quinasa mediante una técnica conocida por los expertos en la técnica como polarización por fluorescencia indirecta.

Incluso en otro ejemplo, se utiliza gamma-ATP radiactivo en la reacción de quinasa, y el efecto del agente de ensayo en la incorporación del fosfato radiactivo en el sustrato de ensayo se determina en relación a las condiciones del control.

Se ha demostrado que los compuestos de la invención exhiben valores CI50 bajos en ensayos de rastreo biológico in vitro, según se describe en el ejemplo 2a para la inhibición de la actividad quinasa de Mnk 1 y/o Mnk 2. La siguiente tabla contiene los resultados del ensayo para compuestos ilustrativos. 10 10 Ejemplos Los datos HPLC provistos en los ejemplos que se describen a continuación se obtuvieron de la siguiente manera: Método A: Waters ZQ2000; Bomba Waters 1515, Detector Waters PDA 996, Inyector Waters 2747 Fase móvil: A Agua + ácido fórmico al 0.1 % B Acetonitrilo + ácido fórmico al 0.1 % Gradiente: tiempo en min %A %B caudal en ml/min 0.00 95.0 5.0 1.00 0.10 95.0 5.0 1.00 3.10 2.00 98.00 1.00 4.50 2.00 98.00 1.00 5.00 95.0 5.0 1.00 Fase estacionaria: X-terra, M MS C18 2.5 µp? 4.6 mm x 30 mm temperatura de columna aproximadamente 25°C Longitud de onda de detección de matriz de diodos: 210 - 420 nm Masa m/z 80 bis 800 Modo de ionización: ESI positivo Método B Waters ZQ2000; Bomba Waters 1515, Detector Waters PDA 996, Inyector Waters 2747 Fase móvil: A Agua + ácido fórmico al 0.1 % B Acetonitrilo + ácido fórmico al 0.1 % Gradiente: tiempo en min %A %B caudal en ml/min 0.00 95.0 5.0 1.00 0.10 95.0 5.0 1.00 3.10 2.00 98.00 1.00 4.50 2.00 98.00 1.00 5.00 95.0 5.0 1.00 Fase estacionaria: X-terra™ MS C18 2.5 pm 4.6 mm x 30 mm temperatura de columna aproximadamente 25°C Longitud de onda de detección de matriz de diodos: 210 - 420 nm Masa: m/z 80 bis 800 Modo de ionización: ESI positivo y negativo en modo conmutación Método C Merck Cromolith Velocidad ROD; RP18e; 4.6x50mm Caudal: 1.5 ml/min Disolvente A: H20 0.1% HCOOH; Disolvente B: Acetonitrilo 0.1% HCOOH Gradiente: tiempo 0.00: 10%B; 4.50: 90%B; 5.00: 90%B; 5.50: 10%B Método D: Columna: Merck Cromolith Speed ROD, RP18e, 4.6x50mm Caudal: 1.5 ml/min Disolventes: agua con ácido fórmico al 0.1% (A) y acetonitrilo con ácido fórmico al 0.1% (B) Gradiente: Tiempo (min) A (%) B (%) 0.00 90 10 4.50 10 90 5.00 10 90 5.50 90 10 Agilent 1 100, MS G1956, bomba cuaternaria, DAD 190-400 nm fragmentador 70, ganancia EMV umbral 1.0, intervalo de masa 100 -Método E Columna: Waters Sunfire C18, 4.6x50mm, 3.5pm Caudal: 2 ml/min Disolventes: A= H20, TFA al 0.1%; B= metanol Gradiente: Tiempo: 0.00: 80%A; 1.70: 0%A; 2.50: 0%A; 2.60: 80%A temperatura de columna 60°C Método F Columna: Waters Sunfire C18, 4.6x50mm, 3.5µ?? Caudal: 1.5 ml/min Disolventes: A= H20, TFA al 0.1 %; B= metanol Gradiente: Tiempo: 0,00: 95%A; 1.30: 0%A; 2.50: 0%A; 2.60: 95%A temperatura de columna 40°C Método G Columna: XBridge C18 Caudal: 1 ml/min Disolventes: A= H20, 0.032% NH40H; B= metanol Gradiente: tiempo 0.00: 95%A; 2.00: 0%A; 2.50: 0%A; 2.60: 95%A temperatura de columna 60°C Método H Columna: Waters XBridge C18; 3.0x30mm 2.5pm Caudal: 1.50 Disolvente: H20 0.1% NH3 Gradiente: 0.00: 10%B; 2.20:100%B; 2.40: 100%B; 2.60: 10%B; 2.80: 10%B; temperatura de columna 40°C Método I Columna: Waters Sunfire C18; 4.6x50mm, 3.5µ?t? Caudal: 2 ml/min Disolvente: A: H20, 0.1% TFA; B: metanol Gradiente: 0.00:80%A; 1.70:0%A; 2.50:0%A; 2.60: 80%A temperatura de columna 60°C Método J Columna: Waters XBridge C18; 4.6x30mm 2.5pm Caudal: 3.1 Disolvente: H2O ácido trifluoroacético al 0.1 % Gradiente: 0.00: 10%B; 1.50:100%B; 1.70: 100%B; 1.85: 10%B; 2.00: 10%B; temperatura de columna aproximadamente 50°C Método K Columna: Waters ZQ2000; Bomba Waters 1515, Detector Waters PDA 996, Inyector Waters 2747 Fase móvil: A Agua + ácido fórmico al 0.1 % B Acetonitrilo + ácido fórmico al 0.1 % Gradiente tiempo en min %A %B caudal en ml/min tiempo en min %A %B caudal en ml/min 0.00 95.0 5.0 2.00 0.0 100 2.50 0.0 100 2.60 95.0 5.0 Fase estacionaria: X-terra MS C18 2.5 µ?? 4.6 mm x 30 mm temperatura de columna aproximadamente 25°C Longitud de onda de detección de matriz de diodos: 200 - 420 nm Masa: m/z 80 bis 800 Modo de ionización: ESI positivo Método L Waters ZQ2000; Bomba Waters 1515, Detector Waters PDA 996, Inyector Waters 2747 Columna: X-terra™ MS C18 2.5 µ?? 4.6 mm x 30 mm Fase móvil: A Agua + ácido fórmico al 0.1 % B Acetonitrilo + ácido fórmico al 0.1% Gradiente: tiempo en min %A %B caudal en ml/min 0.00 95.0 5.0 1.5 2.00 0.0 100 1.5 2.50 0.0 100 1.5 2.60 95.0 5.0 1.5 Temperatura de columna aproximadamente 25°C Longitud de onda de detección de matriz de diodos: 200 - 420 nm Masa: m/z 80 bis 800 Modo de ionización: ESI positivo/negativo Método M Columna: XBridge C18; 3 x 30mm, 2.5 pm Caudal: 2.2 ml/min Disolvente: A: H2 O, 0.1 % TFA B: metanol, 0.1 % TFA Gradiente: 0.0: 95 % A 0.30: 95% A 1.50: 0% A 1.55: 0% A 1.65: 0%A temperatura de columna 60°C Método N Columna: XBridge C18; 4.6 x 30mm , 2.5 pm Caudal: 4-3 ml/min Disolvente: A: hh O, 0.1 % TFA B: metanol, 0.1 % TFA Gradiente: 0.0: 95 % A Flujo: 4 ml/min 0.05: 95% A Flujo: 3 ml/min 2.05: 0% A Flujo: 3 ml/min 2.10: 0% A Flujo: 4ml/min 2.35: 0%A Flujo:4ml/min temperatura de columna 60°C Método X: Columna: Ascentis Express, C18, 2.1x50 mm, 2.7 pm Disolventes:A% H2O que contiene TFA al 0.1%; B% acetonitrilo que contiene TFA al 0.1% Gradiente: Tiempo A% B% Flujo en ml/min 0.00 95.0 5.0 1.050 1.00 5.0 95.0 1.050 1.25 5.0 95.0 1.050 1.30 95.0 5.0 1.050 Temperatura de columna (°C) 65.0 Abreviaturas: HATU: hexafluorofosfato de (2-(7-aza-1 H-benzotriazol-1-il)-1 , 1 ,3,3-tetrametiluronio TBTU: 2-(1 H-Benzotriazol-1-il)-1 ,1 ,3,3-tetrametiluroniumtetrafluorborato THF: tetrahidrofurano EtOH: etanol MeOH: metanol DCM: cloruro de metileno DMF: N,N-dimet¡lformamida EtOAc: acetato de etilo HCI: ácido clorhídrico t-BuOH: tere, butanol DTAD: azodicarboxilato de di-terc-butilo DEAD: azodicarboxilato dietílico; DIAD: azodicarboxilato de diisopropilo LiHMDS: heximetildisilazano de litio DIPEA: diisopropiletilamina EDC: 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida TFA: ácido trifluoroacético TEA: trieti!amina salmuera: solución saturada de cloruro de sodio en agua TA/ta: temperatura ambiente min: minuto/s Producto intermedio I racemico 1.1. 2-(Ciclohex-2-eniloxi)- -fluoro-1 -nitro-benceno Se añadieron 1.89 mi de DEAD a una solución enfriada con hielo de 1.57 g de 5-fluoro-2-nitro-fenol, 1.18 mi de 2-ciclohexenol y 3.15 g de trifenilfosfina en cloruro de metileno. La mezcla de reacción se agitó y se dejó calentar a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se eliminó al vacío. La purificación se logra por cromatografía en columna sobre gel de sílice con iso-hexano/EtOAc (gradiente: 100% i-hexano -> 10:1 i-hexano/EtOAc).

Rendimiento: 1.9 g I.2. estereoquímica relativa Una solución de 1.85 g de 2-(ciclohex-2-eniloxi)-4-fluoro-1 -nitro-benceno en 5 mi de t-butanol se añadió a una solución pre-mezclada, enfriada con hielo, de 10.9 g de AD-mix-alfa en 80 mi de t-BuOH/agua (1:1). La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 1 hora y a TA toda la noche. La mezcla de reacción se enfrió en agua con hielo y se añadió metabisulfito de sodio (11.7 g). Después de 10 minutos, el refrigerante se eliminó y la mezcla se agitó a ta durante 1 hora. Después, la mezcla se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera y se evaporó.

Rendimiento: 2.15 g estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo III.2, a partir de 2.11 g del compuesto I.2.

Rendimiento: 1.59 g Producto intermedio II trans-3-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexanol racémico 11.1. (3-Benciloxi-fenoxi)-ferc-butil-dimetil-silano Se añadieron 43.459 mi de ferc-butil-cloro-dimetil-silano a ta a una solución de 17 g de imidazol y 25 g de 3-benciloxi-fenol en 400 mi de THF. Después de 3 horas, se añadió agua a la mezcla de reacción y la mezcla se extrajo luego con cloruro de metileno. La fase orgánica se extrajo tres veces con agua, se secó sobre sulfato sódico y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en cloruro de metileno y se filtró con Alox (neutro) y se concentró.

Rendimiento: 37 g tiempo de retención (HPLC): 4.15 min (método A) Espectro de masas ESI: m/z = 315 (M+H)+ II.2. 3-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-ciclohexanol Una mezcla de 37.6 g de (3-benciloxi-fenoxi)-terc-butil-dimetil-silano y 3.8 g de catalizador de Nishimura en 200 mi de etanol se hidrogenó a ta bajo 50 psi durante 6 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. Rendimiento: 26.48 g Espectro de masas ESI: m/z = 231 (M+H)+ 11.3. íerc-Butil-[cis-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexiloxi]-dimetil-silano racémico y ferc-Butil-[trans-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexiloxi]-dimetil-silano racémico Se añadieron 15,211 mi de DIAD a una solución de 20.118 g de trifenilfosfina en 300 mi de THF y se agitó durante 30 min a TA. Se añadieron 9.272 g de 5-fluoro-2-nitrofenol en porciones y la mezcla de reacción resultante se agitó durante 30 minutos. Después de ese periodo, se añadieron 17 g de 3-(ferc-butil-dimetil-silaniloxi)-ciclohexanol y la mezcla se agitó durante 18 horas. Se añadió una solución adicional de trifenilfosfina y DIAD en THF a la mezcla, y ésta se agitó durante 2 horas. La mezcla de reacción se vertió entonces en agua y después se extrajo con cloruro de metileno. La fase orgánica se extrajo tres veces con agua, se secó sobre sulfato sódico y se concentró al vacío. Se añadió éter de petróleo al residuo y la mezcla se filtró. El filtrado se concentró La purificación se consigue por cromatografía en columna sobre gel de sílice ciclohexano/cloruro de metileno (gradiente: 90:10 a 75:25). terc-Butil-fc¡s-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexiloxi1-dimetil-silano racémico Rendimiento: 2.6 g tiempo de retención (HPLC): 4.10 min (método B) Espectro de masas ESI: m/z = 370 (M+H)+ terc-Butil-[trans-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexilox¡1-dimetil-silano racémico Rendimiento: 5.7 g tiempo de retención (HPLC): 4.17 min (método B) Espectro de masas ESI: m/z = 370 (M+H)+ II.4. 2-[trans-3-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-ciclohexiloxi]-4-fluoro-fenilamina Una mezcla de 9.2 g de terc-Butil-[trans-3-(5-fluoro-2-nitro-fenox¡)-c¡clohexiloxi]-dimet¡l-silano racémico y 0.92 g de níquel Raney en 200 mi de metanol se hidrogenó a ta bajo 50 psi durante 6 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró.

Rendimiento: 8.1 g Espectro de masas ESI: m/z = 340 (M+H)+ II.5. trans-3-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexanol racémico Una solución de 8.1 g de 2-[trans-3-(terc-butil-dimetil-silanilox¡)-ciclohexilox¡]-4-fluoro-fenilamina en 50 mi de HCI en etanol (1.25 M) se agitó durante 1 hora a ta. Se añadió luego solución de hidróxido sódico (1 N) a la mezcla de reacción, lo que resultó en un pH básico. Esta mezcla se extrajo con cloruro de metileno. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró.

Rendimiento: 5.2 g Espectro de masas ESI: m/z = 226 (M+H)+ Producto intermedio III 2-(1 ,4-Dioxa-espiro [4.5] dec-8-iloxi)-4-fluoro-fenilamina -fenoxi)-1 ,4-dioxa-espiro [4.5] decano Se añadieron gota a gota 63 mi de LiHMDS (1 M en THF) a una solución agitada de 10 g de 1 ,4-dioxa-espiro [4.5] decan-8-ol en THF (60ml) a 0°C y la reacción se agitó durante 30 min. Se añadió luego una solución de 2,4-difluor-1 -nitro-benceno en THF (20ml) durante 5 min y la reacción se calentó a TA y se agitó durante 16h. La reacción se inactivo con solución saturada de cloruro de amonio y se ajustó hasta pH 7 con HCI 2N. El disolvente se eliminó al vacío y el residuo se repartió entre EtOAc (200 mL) y agua (100 mL). La capa orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 50 mi). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 mi) y se separaron. La fase orgánica se evaporó para dar un sólido que se usó sin purificación ulterior.

Rendimiento: 14.47g III.2. 2-(1 ,4-Dioxa-espiro [4.5] dec-8-iloxi)-4-fluoro-fenilamina Se añadieron 0.446 g de Pd/C (5%) a una mezcla de 4.46 g de (8-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)- ,4-dioxa-espiro [4.5] decano y 4.03 g de formiato de amonio en 50 mi de metanol anhidro a TA. La reacción se inició calentando moderadamente. La reacción se dejó enfriar y se agitó durante otras 0.5 horas. La suspensión se filtró a través de celite y se lavó con metanol. Los compuestos orgánicos combinados se concentraron al vacío y el residuo se trituró a partir de éter dietílico. Los sólidos se filtraron y el filtrado se recogió y concentró al vacío para proveer un sólido.

Rendimiento: 3.95 g Producto intermedio IV Trans-/N/-[4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-metanosulfonamida IV.1. Éster terc-butílico de ácido 4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-carbámico Se añadieron 1.2 g de hidruro de sodio a una solución enfriada con hielo de 2.15 g de éster terc-butílico de ácido trans-(4-hidroxi-ciclohexil)-carbámico en 50 mi de DMF. Después de 1 hora, se añadieron 1.64 mi de 2,4-difluoronitrobenceno y la mezcla se agitó a esta temperatura durante 1 hora. El refrigerante se eliminó y la mezcla de reacción se agitó durante 4 horas. La mezcla se diluyó con EtOAc y se lavó con agua y salmuera dos veces. La mezcla se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y el filtrado se evaporó. La purificación se logra por cromatografía en columna sobre gel de sílice con iso-hexano/EtOAc (gradiente: 100% iso-hexano -> 5:1 iso-hexano: EtOAc -> 3:1 iso-hexano: EtOAc).

El residuo se trituró con éter dietílico.

Rendimiento: 1.19 g IV.2. Hidrocloruro de trans-4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexilamina Se añadieron 10 mi de una solución de HCI en dioxano (4 M) a 1.19 g de éster terc-butílico de ácido trans-[4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-carbámico en cloruro de metileno. La mezcla se agitó durante 3 horas y se añadieron 2 mi de HCI en dioxano (4 M). Se agitó la mezcla de reacción durante 1 hora y se concentró al vacío.

Rendimiento: 1.09 g IV.3. trans-/V-[4-(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metanosulfonamida Se añadieron 120 µ? de cloruro de metanosulfonilo a una suspensión enfriada con hielo de 300 mg de hidrocloruro de trans-4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexilamina y 431 µ? de trietilamina en 5 mi de cloruro de metileno. La mezcla de reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente durante una noche. Después la mezcla se diluyó con cloruro de metileno y se lavó con sulfato de hidrógeno de potasio al 10%. La mezcla se filtró a través de una frita hidrófoba y se evaporó. El residuo se trituró con éter.

Rendimiento: 0.227g IV.4. trans-A/-[4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohex¡l]-metanosulfonamida Se preparó análogamente al ejemplo 111.2, a partir de 0.218 g de trans-A/-[4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metanosulfonamida.

Rendimiento: 0.170g Producto intermedio V trans-/V-[4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-/\/-metil-metanosulfonamida Éster terc-butílico de ácido trans-[4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico Se preparó análogamente al ejemplo III.1 , a partir de 1.11 mi de 2,4-difluoronitrobenceno y 1.56 g de éster terc-butílico de ácido trans-(4-hidroxi-ciclohexil)-metil-carbám¡co.

Rendimiento: 2.25 g V.2. Hidrocloruro de trans-[4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-amina Se preparó análogamente al ejemplo IV.2, a partir de 2.2 g de éster terc-butílico de ácido trans-[4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico. Rendimiento: 1.41 g V.3. trans-/V-[4-(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-/V-metil-metanosulfonamida Se preparó análogamente al ejemplo IV.3, a partir de 0.305 g de hidrocloruro de trans-[4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-amina y cloruro de metanosulfonilo.

Rendimiento. 0.331 g V.4. trans-A/-[4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-c¡clohexil1-/N/-metil-metanosulfonamida Se preparó análogamente al ejemplo III.2, a partir de 0.329 g de trans-A -[4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-N-metil-metanosulfonamida.

Rendimiento: 0.083 g Producto intermedio VI trans-/V-[4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-acetamida VI.1. trans-A/-[4-(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-acetamida Se añadieron 166 µ? de anhídrido acético a una mezcla de 0.341 g de hidrocloruro de trans-4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexilamina y 327 µ? de trietilamina en 5 mi de cloruro de metileno. La mezcla de reacción se agitó toda la noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con cloruro de metileno e hidrógenosulfato de potasio acuoso al 10% y carbonato de potasio acuoso al 10%. Luego la mezcla se pasó por una frita hidrófoba y el disolvente se evaporó. Rendimiento: 0.325 g VI.1. trans-/S/-[4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-acetamida Se preparó análogamente al ejemplo 111.2 a partir de 0.15 g de trans-/V-[4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-acetamida.

Rendimiento: 0.14 g Producto intermedio VII trans-/V-[4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-/\/-metil-acetamida VII.1. trans- A/-[4-(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-/V-metil-acetamida Se preparó análogamente al ejemplo IV.1 , a partir de 0.305 g de hidrocloruro de trans-[4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-amina y anhídrido de ácido acético.

Rendimiento: 0.329 g VII.2. trans-/V-[4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-/\/-metil-acetamida Se preparó análogamente al ejemplo III.2, a partir de 0.305 g de trans-/V-[4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-N-metil-acetamida.

Rendimiento: 0.14 g Producto intermedio VIII Cis-/V-[4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-/V-metil-metanosulfonamida VIII.1. Éster 4-cis-(ferc-butoxicarbonil-metil-amino)-c¡clohex¡lo de ácido benzoico Se añadieron gota a gota 1.74 mi de DEAD a una solución enfriada (agua fría) de 1.69 g de éster terc-butílico de ácido trans-(4-hidroxi-ciclohexil)-metil-carbámico, 1.35 g de ácido benzoico y 2.9 g de Trifenilfosfina en 20 mi de THF. Después de 10 minutos, el refrigerante se eliminó y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas. Después la mezcla se diluyó con cloruro de metileno y se lavó con solución acuosa de carbonato de potasio al 10%. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se evaporó. La purificación se logra por cromatografía en columna sobre gel de sílice con iso-hexano/EtOAc (gradiente: 100% iso-hexano -> 5:1 iso-hexano).

Rendimiento: 1.32 g VIII.2. Éster terc-butílico de ácido cis-(4-hidroxi-ciclohexil)-metil-carbámico Se añadieron 0.807 g de carbonato de potasio a una solución de 1.3 g de éster 4-(terc-butoxicarbonil-metil-amino)-ciclohexilo de ácido cis-benzoico en 10 mi de metanol. La mezcla de reacción se agitó toda la noche a temperatura ambiente. Se añadieron 2 mi de solución de hidróxido de sodio (2M) y la mezcla se agitó durante 4 horas. Después de ese periodo, la mezcla se diluyó con EtOAc y se lavó con agua y salmuera. La fase orgánica se pasó por una frita hidrófoba y el disolvente se evaporó. La purificación se logró por cromatografía en columna sobre gel de sílice (gradiente: 100% i-hex. -> 100% cloruro de metileno -> 20:1 cloruro de metileno/metanol).

Rendimiento: 0.876 g VIII.3. Éster terc-butílico de ácido [cis-4- 5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico Se preparó análogamente al ejemplo III.1 , a partir de 500 µ? de 2,4-difluoronitrobenceno y 0.876 g de éster terc-butílico de ácido cis-(4-hidroxi-ciclohexil)-metil-carbámico.

Rendimiento: 0.709 g VIII.4. Hidrocloruro de cis-4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-amina Se preparó análogamente al ejemplo IV.2, a partir de 0.698 g de éster terc-butílico de ácido-[cis-4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico.

Rendimiento: 0.511 g VIII.5. /V-[cis-4-(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-/ /-metil-metanosulfonamida Se preparó análogamente al ejemplo IV.3, a partir de 0.252 g de hidrocloruro de [cis-4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-amina y cloruro de metanosulfonilo.

Rendimiento: 0.296 g V.4. cis-A/-[4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-/\/-metil-metanosulfonamida Se preparó análogamente al ejemplo II 1.2, a partir de 0.259 g de N-[cis-4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-N-metil-metanosulfonamida.

Rendimiento: 0.226 g Producto intermedio IX A/-[cis-4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-/\/-metil-acetamida nitro-fenoxi)-ciclohexil]-A/-metil-acetamida Se preparó análogamente al ejemplo IV.1 , a partir de 0.252 g de hidrocloruro de [cis-4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-amina y anhídrido de ácido acético.

Rendimiento: 0.259 g IX.2. /V-[cis-4-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-A/-metil-acetamida Se preparó análogamente al ejemplo III.2, a partir de 0.259 g de N-[cis-4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-N-metil-acetamida.

Rendimiento: 0.226 g Producto intermedio X Éster metílico de ácido [trans-4-(2-amlno-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico X.1. Éster metílico de ácido [trans-4-(2-nitro-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico Se añadieron 129 µ? de cloroformiato de metanosulfonilo a una mezcla enfriada con hielo de 0.305 g de hidrocloruro de trans-4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-amina y 417 µ? de trietilamina en 5 mi de cloruro de metileno. Después de 10 minutos, el refrigerante se eliminó y la mezcla se agitó a ta durante una noche. Después la mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y se lavó con solución acuosa de sulfato de hidrógeno y potasio al 10% y solución acuosa de carbonato de potasio al 10%. La fase orgánica se pasó por una frita hidrófoba.

Rendimiento: 0.295 g X.2. Éster metílico de ácido [trans-4-(2-amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico Se preparó análogamente al ejemplo III.2, a partir de 0.292 g de éster metílico de ácido trans-4-(2-Nitro-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico Rendimiento: 0.248 g Producto intermedio XI XI.1. éster terc-butílico de ácido [trans-4-(2-amino-5-fluoro-fenox¡)-ciclohexil]-metil-carbámico Se preparó análogamente al ejemplo III.2, a partir de 1.42 g de éster terc-butílico de ácido [trans-4-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico. Rendimiento: 1.4 g Producto intermedio XII /V-[trans-2-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-A/-metil-metanosulfonamida estereoquímica relativa XII.1. Éster terc-butílico de ácido (trans-2-hidroxi-ciclohexil)-carbámico racémico estereoquímica relativa Se añadió una solución de 3.64 g de dicarbonato de di-terc-butilo en 5 mi de cloruro de metileno a una solución de 3.02 g de trans-2-aminociclohexanol racémico y 4,2 mi de trietilamina en 40 mi de cloruro de metileno. Después de completar la reacción, se añadió cloruro de metileno mezcla se lavó con solución acuosa de hidrógenosulfato de potasio al 10% fase orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró.

Rendimiento: 3.62 g XII.2. trans-2-Metilamino-ciclohexanol racémico estereoquímica relativa Se añadieron 3.51 g de éster terc-butílico de ácido trans-(2-hidroxi-ciclohexil)-carbámico racémico a una suspensión de 3.09 g de hidruro de aluminio y litio en THF. Se calentó la mezcla de reacción a reflujo durante la noche. Después de ese periodo, se añadieron subsiguientemente 3.1 mi de agua, 3.1 mi de solución de hidróxido sódico (2M) y 3.1 mi de agua. La mezcla se agitó luego durante 45 minutos y después se filtró a través de celite. El lecho de celite se lavó con EtOAc. El disolvente se evaporó.

Rendimiento: .9 g XII.3. Éster terc-butílico de ácido trans-(2-hidroxi-ciclohexil)-metil-carbámico estereoquímica relativa Se preparó análogamente a XII.1 , a partir de 1.9 g de trans-2-Metilamino-ciclohexanol racémico.

Rendimiento: 3.49 g XII.4. Éster terc-butílico de ácido [trans-2-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico racémico estereoquímica relativa Se preparó análogamente al ejemplo III.1 , a partir de 0.33 mi de 2,4-difluoro-nitrobenceno y 0.687 g de éster terc-butílico de ácido trans-(2-hidroxi-ciclohexil)-metil-carbámico racémico.

Rendimiento: 0.844 g XII.5. Hidrocloruro de [[trans-2-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-amina racémico estereoquímica relativa Se preparó análogamente a IV.2, a partir de 0.84 g de éster terc-butílico de ácido [trans-2-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico racémico.

Rendimiento: 0.621 g XII.6. /V-[trans-2-(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-A/-metil-metanosulfonamida racémica estereoquímica relativa Se preparó análogamente a IV.3, a partir de 0.29 g de hidrocloruro de trans-[[trans-2-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-amina racémico.

Rendimiento: 0.283 g XII.7. /V-[trans-2-(5-Fluoro-2-amino-fenoxi)-ciclohexil]-yV-metil-metanosulfonamida racémica estereoquímica relativa Se preparó análogamente a III.2 a partir de 0.274 g de N-[trans-2-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-N-metil-metanosulfonamida racémica.

Rendimiento: 0.265 g Producto intermedio XIII A/-[trans-2-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-A/-metil-acetamida racémica estereoquímica relativa XIII.1 /V-[trans-2-(2-nitro-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-A/-metil-acetamida racémica Se preparó análogamente a IV.1 , a partir de 0.29 g de hidrocloruro de [trans-2-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-c¡clohexil]-metil-amina racémico y anhídrido de ácido acético.

Rendimiento: 0.289 g XIII.2. Trans-/V-[2-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-/ /-metil-acetamida racémica estereoquímica relativa Se preparó análogamente a III.2 a partir de 0.285 g de N-[trans-2-(2nitro-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-N-metil-acetamida racémica.

Rendimiento: 0. 25 g Producto intermedio XIV /V-[trans-4-(2-Am¡no-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-2,2,2-trifluoro-acetamida XIV.1 /V-[trans-4-(2-Nitro-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-2,2,2-trifluoro-acetamida Una mezcla de reacción de 0.071 g de hidrocloruro de trans-4-(5- fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexilamina, 0.05 g de trifluoroacetato de etilo y 0.075 g de trietilamina en 2 mi de metanol se agitó durante una noche. La mezcla se concentró y se repartió entre 5 mL de EtOAc y 5 mL de agua. La fase orgánica se lavó con agua, solución de HCI (2M) y agua. La fase orgánica se secó y el disolvente se evaporó.

Rendimiento: 0.079 g XIV.2 /V-[trans-4-(2-Nitro-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-2,2,2-trifluoro-acetamida Se preparó análogamente al ejemplo 111.2 a partir de 0.075 g de N- [trans-4-(2-nitro-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-2,2,2-trifluoro-acetamida.

Rendimiento: 0.05 g Producto intermedio XV Éster terc-butílico de ácido [3-(2-amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico XV.1 Éster terc-butílico de ácido (3-hidroxi-ciclohexil)-carbámico Se preparó análogamente a XII.1, a partir de 1.357 g de 3-amino-ciclohexanol.

Rendimiento: 0.933 g XV.2 3-Metilamino-ciclohexanol Se preparó análogamente a XII.2, a partir de 0.933 g de éster terc-butílico de ácido (3-hidroxi-ciclohexil)-carbámico.

Rendimiento: 0.203 g XV.3 Éster terc-butílico de ácido (3-hidroxi-ciclohexil)-metil-carbámico.

Se preparó análogamente a XII.1 , a partir de 0.268 g de 3-metilamino-ciclohexanol.

Rendimiento: 0.277 g XV.4 Éster terc-butílico de ácido [3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico Se preparó análogamente a III.1 , a partir de 81 µ? de 2,4-difluoronitrobenceno y 0.17 g de éster terc-butilico de ácido (3-hidroxi-ciclohexil)-metil-carbámico.

Rendimiento: 0.14 g XV.5 Éster terc-butílico de ácido [3-(2-amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico Se preparó análogamente al ejemplo 111.2, a partir de 0.175 g de éster terc-butílico de ácido [3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexil]-metil-carbámico. Rendimiento: 0.14 g Producto intermedio XVI. cis-4-Fluoro-2-(2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina racémica estereoquímica relativa XVI.1 cis-4-Fluoro-2-(2-metoxi-ciclohexiloxi)-1 -nitro-benceno Se añadieron 2.36 mi de DEAD a una solución enfriada con hielo de 1.57 g de 5-fluoro-2-nitrofenol, 1.95 mi de 2-metoxiciclohexanol y 3.93 g de trifenilfosfina en 30 mi de THF. Se permitió calentar la mezcla de reacción a TA durante toda la noche. La mezcla se agitó durante 48 h más. Después la mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y se lavó con solución acuosa de carbonato de potasio al 10%. La fase orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se evaporó. La purificación se logró por cromatografía en columna sobre gel de sílice (disolvente: 10:1 iso-hexano: EtOAc).

Punto superior: 186mg, trans-4-Fluoro-2-(2-metoxi-ciclohexiloxi)-1 -nitro-benceno racémico 1 H-NMR: 7.89 -7.85 (1H, m); 6.94-6.91 (1 H, m); 6.71-6.66 (1 H, m); 4.24-4.19 (1 H, m); 3.40-3.34 (4H, m); 2.14-1.26 (8H, m) Punto mixto: 380 mg 1 ,7:1 mezcla de isómeros Punto inferior: 474mg: cis-4-Fluoro-2-(2-metoxi-ciclohexiloxi)-1 -nitro-benceno racémico 1H-N R: 7.92-788 (1H, m); 6.91-6.87 (1H, m)¡ 6.69-6.66 (1H, m); 4.66-4.65 (1 H, m); 3.44-3.38 (4H, m); 2.10-1.31 (8H, m) XVI.2 cis-4-Fluoro-2-(2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina racémica Se preparó análogamente a 111.2, a partir de 0.47 g de cis-4-fluoro-2-(2-metox¡-ciclohexiloxi)-1 -nitro-benceno.

Rendimiento: 0.373 g Producto intermedio XVII. trans-4-Fluoro-2-(2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina racémica Se preparó análogamente a 111.2, a partir de 1.25 g de trans-4-fluoro-2-(2-metoxi-ciclohexiloxi)-1-nitro-benceno.

Rendimiento: 1.09 g Producto intermedio XVIII (/?,f?)-4-Fluoro-2-(2-Metoxiciclohexiloxi)-anilin Quiral XVIII.1 (f?,f?)-4-Fluoro-2-(2-Metoxiciclohexiloxi)-nitrobenceno A (f?,/?)-4-fluoro-2-(2-hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno (0.200 g) disuelto en cloruro de metileno (10.0 mi) se le añadió tetrafluoroborato de trimetiloxonio (0.348 g). La mezcla se agitó durante una noche a ta; se añadió agua; la fase orgánica se separó y evaporó a sequedad para proveer un aceite amarronado.

Rendimiento: 207 mg Espectro de masas ESI: m/z = 270 (M+H)+ XVIII.2 (f?,f?)-4-Fluoro-2-(2-Metoxiciclohexiloxi)-anilin Quiral (R,f?)-4-fluoro-2-(2-metoxiciclohexiloxi)-nitrobenceno (0.18 g) en metanol (20.0 mi) se hidrogenó en atmósfera de 50 psi de hidrógeno durante 20 h a TA, usando paladio sobre carbón (5%) (40 mg) como catalizador. El catalizador se separó por filtración; la solución resultante se evaporó a sequedad para proveer un aceite.

Rendimiento: 300 mg Espectro de masas ESI: m/z = 240 (M+H)+ Producto intermedio XIX (S,S)-4-Fluoro-2-(2-Metoxiciclohexiloxi)-anilin Quiral El compuesto se puede preparar de manera análoga a XVIII, comenzando por (S,S)-4-fluoro-2-(2-Hidroxiciclohexiloxi)-anilin.

Producto intermedio XX (R,R)-4-Fluoro-2-(2-Hidroxiciclohexiloxi)-anilin (2-Hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno 2,4-Difluoronitrobenceno (1.89 mi), (íf?,2R)-1 ,2-ciclohexanodiol (2.00 g) y bis(trimetilsilil)amida de litio (solución 1 mol/l en THF; 17.2 mi) en THF (20.0 mi) se agitaron durante una noche a ta. El disolvente se eliminó al vacío; el residuo se recogió en acetato de etilo. La solución se extrajo una vez con ácido clorhídrico (1 mol/I) y dos veces con solución de NaOH (1 mol/l), se secó con sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó a sequedad. El residuo se purificó por cromatografía de columna (sílice; cloruro de metileno / metanol 100. => 97:3) para proveer un aceite amarillento que cristalizó tras almacenarse.

Rendimiento: 2.00 g Espectro de masas ESI: m/z = 256 (M+H)+ XX.2 (f?, ?)-4-Fluoro-2-(2-Hidroxiciclohexiloxi)-anilin (R,R)-4-Fluoro-2-(2-hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno (1.99 g) en metanol (20.0 mi) se hidrogenó en atmósfera de 50 psi de hidrógeno durante 5 h a TA, usando paladio sobre carbón (5%) (200 mg) como catalizador. El catalizador se separó por filtración; la solución resultante se evaporó a sequedad para proveer un aceite.

Rendimiento: 1.70 g Espectro de masas ESI: m/z = 226 (M+H)+ Producto intermedio XXI (S,S)-4-Fluoro-2-(2-Hidroxiciclohexiloxi)-anilin El compuesto se preparó de manera análoga a XX, comenzando por (S,S)-1 ,2-Ciclohexanodiol.

Espectro de masas ESI: m/z = 226 (M+H)+ Productos intermedios XXII Enantiómeros puros de cis-4-Fluoro-2-(2-Hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno XXII.1 cis-4-Fluoro-2-(2-Hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno racémico A 2,4-Difluoronitrobenceno (0.549 mi) y cis-1 ,2-ciclohexanodiol (0.581 g) en THF (10.0 mi), enfriados con un baño de hielo, se les añadió bis (trimetilsilil) amida de litio (s1 mol/l de solución en THF; 5.00 mi). La mezcla se agitó toda la noche a ta y después se evaporó a sequedad. El residuo se recogió en acetato de etilo, se extrajo una vez con ácido clorhídrico (1 mol/l) y dos veces con solución de NaOH (1 mol/l), se secó con sulfato de magnesio, se filtró y se evaporó a sequedad. El residuo se purificó por cromatografía de columna (sílice; cloruro de metileno / metanol 100:0 => 97:3) para proporcionar un aceite amarillento.

Rendimiento: 455 mg Espectro de masas ESI: m/z = 256 (M+H)+ XXII.2 Enantiómeros puros de cis-4-fluoro-2-(2-Hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno La mezcla racémica de XXI 1.1 se separó en los enantiómeros por cromatografía SFC quiral: Columna: Daicel ADH; 250 mm x 4.6 mm Fase móvil: CO2 / 2-Propanol 75:25 (con adición de amina dietílica al 0.2%) XXI l-A: Espectro de masas ESI: m/z = 522 (M+H)+ Rt (HPLC): 2 min XXI l-B: Espectro de masas ESI: m/z = 522 (M+H)+ Rt (HPLC): 3.04 min La estereoquímica absoluta de los isómeros no se determinó y, por lo tanto, no puede asignarse.

XXII.3 Enantiomero puro de cis-4-fluoro-2-(2-hidroxiciclohexiloxi)-anilin compuesto intermedio XXII-A (tiempo de retención: 2 min) Se preparó de manera análoga a XX.2, a partir de 0.5 g de cis-4-fluoro-2-(2-hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno (comp. XXII-A, Tiempo te retención: 2 min).

XXI 1.4 Enantiomero puro de cis-4-fluoro-2-(2-hidroxiciclohexiloxi)-anilin a partir del compuesto intermedio XXII-B (tiempo de retención: 3.04 min) Quiral Se preparó de manera análoga a XX.2, a partir de 0.5 g de cis-4-fluoro-2-(2-hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno (comp. XXII-B, tiempo de retención: 3.04).

Producto intermedio XXIV trans-4-(3-Amino-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol XXIV.1 trans-4-(3-nitro-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol Se preparó de manera análoga a III.1 , a partir de 4.054 g de 2-fluoro-3-nitropiridina y 2.26 g de trans-1 ,4-ciclohexanodiol.

Rendimiento: 0.29 g XXIV.2 trans-4-(3-Amino-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol Una mezcla de 0.29 g de trans-4-(3-nitro-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol y 0.05 g de níquel Raney en 50 mi de metanol se hidrogenó a 5 bar y TA durante 4.5 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró.

Rendimiento: 0.203 g Espectro de masas ESI: miz = 209 (M+H)+ Productos intermedios XXV 4-Fluoro-2-(trans-4-metoxiciclohexiloxi)-anilina y 4-Fluoro-2-(cis-4-metoxiciclohexiloxi)-anilina 4-Metoxiciclohexanol (mezcla de isómeros cis y trans) Se hidrogenó 4-metoxifenol (100 g) en etanol (759 mi) en atmósfera de 50 psi de hidrógeno, usando catalizador de Nishimura (10.0 g) a ta durante 4.5 h. El catalizador se separó por filtración; el disolvente se eliminó al vacío para proporcionar el producto deseado como 95% de líquido amarillento puro.

Rendimiento: 114 g Espectro de masas EXI: m/z = 131 (M+H)+ XXV.2 4-Fluoro-2-(trans-4-metoxiciclohexiloxi)-anilina y 4-Fluoro-2-(cis-4-metoxiciclohexiloxi)-anilina A una solución enfriada (baño de agua, aprox. 10 °C) de 5-fluoro-2-nitrofenol (18.9 g) y 4-metoxicilohexanol (19.0 g) en THF (250 mi) se le añadieron simultáneamente con agitación magnética azodicarboxilato de di-terc-butilo (41.0 g) y trifenil fosfina (47.0 g). La mezcla se agitó durante otras 2 h a ta y se añadió paladio sobre carbón al 10% (1.90 g) La mezcla se hidrogenó a ta en atmósfera de 50 psi de hidrógeno durante 20 h. El catalizador se separó por filtración. La solución resultante se diluyó con DCM y se extrajo dos veces con ácido clorhídrico (1 mol/I). Las fases acuosas combinadas se alcalificaron con solución de NaOH (4 mol/I) y se extrajeron dos veces con cloruro de metileno. Las capas orgánicas combinadas se secaron con sulfato sódico, se filtraron y se concentraron al vacío. La mezcla resultante se sometió a cromatografía en columna (sílice; cloruro de metileno/acetato de etilo 9:1) proporcionando ambos isómeros como fracciones separadas. 4-fluoro-2-(trans-4-metoxiciclohexiloxi)-anilin Rendimiento: 3.10 g Espectro de masas ESI: m/z = 240 (M+H)+ 4-Fluoro-2-(c¡s-4-metoxiciclohexiloxi)-anilin Rendimiento: 2.00 g Espectro de masas ESI: m/z = 240 (M+H)+ Productos intermedios XXVI 4-Fluoro-2-(cis-4-Hidroxiciclohexiloxi)-anilin y trans-4-Fluoro-2-(trans-4- Hidroxiciclohexiloxi)-anilin XXVI .1 4-Fluoro-2-(cis/trans-4-Hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno A una solución de 1 ,4-ciclohexanodiol (100 g) en THF (1000 mi) se le añadió NaH (60% en aceite mineral; 38.5 g). La mezcla se sometió a reflujo durante 1 h. Se añadió gota a gota 2,4-difluoronitrobenceno (48.0 mi) durante 1 h. La mezcla se sometió a reflujo durante 2 d, se concentró al vacío, se recogió en agua y se extrajo varias veces con cloruro de metileno. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron con sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se sometió a cromatografía en columna (sílice; cloruro de metileno/metanol 100:0 => 98:2; detección UV a 220 nm) proporcionando la mezcla de isómeros en forma de un aceite amarronado. Rendimiento: 49.2 g Espectro de masas ESI: m/z = 273 (M+NH4)+ Separación en 4-fluoro-2-(cis-4-Hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno y 4-Fluoro-2-(trans-4-Hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno La mezcla cis/trans de XXVI.1 se separó en los isómeros por cromatografía SFC: Columna: Daicel OJH 250 mm x 4.6 mm Fase móvil: CO2 / Metanol 85:15 (con adición de 0.2% Dietil amina) Primera elución: isómero cis; segunda elución: isómero trans XXVI .2 4-Fluoro-2-(cis-4-Hidroxiciclohexiloxi)-anilin Se hidrogenó 4-fluoro-2-(cis-4-hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno (2.00 g) en metanol (15.0 mi) en atmósfera de 50 psi de hidrógeno, usando paladio sobre carbono (5%) como catalizador (300 mg) a TA durante 2 h. El catalizador se separó por filtración; el disolvente se eliminó al vacío para proporcionar el producto deseado como 95% de aceite puro.

Rendimiento: 1.96 g Espectro de masas ESI: m/z = 226 (M+H)+ Producto intermedio XXVII 4-Fluoro-2-(trans-4-hidroxiciclohexilox¡)-anilin Se preparó de manera análoga a XXVI.3, a partir de 2.26 g de 4-Fluoro-2-(trans-4-hidroxiciclohexiloxi)-nitrobenceno.

Rendimiento: 2 g Espectro de masas ESI: m/z = 226 (M+H)+ Producto intermedio XXVIII cis-5-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-c¡clohexano-1,3-diol Isómero XXVIII A Isómero XXVIII B Se preparó análogamente a III.1 , a partir de 1 mi de 2,4-difluoro-nitrobenceno y 3.965 g de ciclohexano-1 ,3,5-triol Isómero XXVIII A: 0.6 g Espectro de masas ESI: m/z = 272 (M+H)+ Rf (gel de sílice): cloruro de metileno/metanol= 9:1 : 0.41 Isómero XXVIII B: 0.43 g Espectro de masas ESI: m/z = 272 (M+H)+ Rf (gel de sílice), (cloruro de metileno/metanol= 9:1): 0.42 XXVI II.2 cis-5-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexano-1 ,3-diol Se preparó de manera análoga a XXIV.2, a partir de 0.6 g de Isómero XXVIII A.

Rendimiento: 0.58 g Producto intermedio XXIX Se preparó de manera análoga a XXIV.2, a partir de 0.43 g de Isómero XXVIII B.

Rendimiento: 0.4 g Producto intermedio XXX cis- 2-(3,5-Dimetox¡-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamina XXX.1 cis-2-(3,5-Dimetoxi-ciclohexiloxi)-4-fluoro-1 -nitro-benceno Se preparó análogamente a III.1 , a partir de 2.193 mi de 2,4-difluoro-nitrobenceno y 3.2 g de cis-1 ,3,5-trimetoxi-ciclohexano.

Rendimiento: 2.8 g Espectro de masas ESI: m/z = 300 (M+H)+ XXX.2 cis- 2-(3,5-Dimetoxi-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilam¡na Se preparó análogamente a XXIV.2, a partir de 2 g de cis-2-(3,5- dimetoxi-ciclohexiloxi)-4-fluoro-1-nitro-benceno.

Rendimiento: 1.8 g Producto intermedio XXXI 2-(4,4-Dimetil-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamina XXXI.1 2-(4,4-Dimetil-ciclohexiloxi)-4-fluoro-1 -nitro-benceno Se preparó análogamente a III.1 , a partir de 2 mi de 2,4-difluoro-nitrobenceno y 2.339 g de 4,4-dimetil-ciclohexanol.

Rendimiento: 4.1 g Espectro de masas ESI: m/z = 285 (M+NH4)+ XXXI .2 2-(4,4-Dimetil-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamina Se preparó análogamente a XXIV.2, a partir de 4.1 g de 2-(4,4-dimetil-ciclohexiloxi)-4-fluoro-1-nitro-benceno Rendimiento: 3.2 g Espectro de masas ESI: m/z = 238 (M+H)+ Rf (gel de sílice), (cloruro de metileno/metano 30:1): 0.42 Producto intermedio XXXII 2-(4,4-Difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamina XXXII.1 metoxi-metil-amida de ácido 4,4-difluoro-ciclohexanocarboxílico Se añadieron 2.78 g de HATU a una solución de 1 g de ácido 4,4-difluoro-ciclohexanocarboxílico y 1.3 mi de diisopropiletiamina en 10 mi de DMF anhidra a 0°C. La reacción se agitó a 0°C durante 0.5 horas, momento en que se añadieron 0.891 g de hidrocloruro de O./V-dimetil-hidroxilamina. Se permitió calentar la reacción a TA durante toda la noche. La solución se concentró al vacío por co-evaporación con tolueno (3x) y se filtró. El filtrado se concentró al vacío. La purificación se logró por cromatografía en columna sobre gel de sílice (disolvente: 5:1->3:1 éter de petróleo/ EtOAc).

Rendimiento: 0.582 g XXXII.2 1 -(4,4-difluoro-ciclohexil)-etanona Se añadieron 2 mi de de metil litio (1 M en éter dietílico) a una solución de 0.593 g de metoxi-metil-amida de ácido 4,4-difluoro- ciclohexanocarboxílico en 5 mi de THF anhidra a 0°C. La reacción se dejó calentar hasta ta durante una noche. La reacción se inactivo con solución saturada de cloruro de amonio (~50ml) y se diluyó con solución saturada de hidrógenocarbonato sódico (25ml). La capa acuosa se extrajo con éter dietílico (3 x 50 mi) y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación se logró por cromatografía en columna sobre gel de sílice (disolvente: 5:1-> 1 :1 petróleo/éter (40-60).

Rendimiento: 0.262 g XXXII.3 4,4-difluorociclohexanol Se añadieron 0.361 g de ácido meta-cloro-perbenzoico a una solución de 0.262 g de 1-(4,4-difluoro-ciclohexil)-etanona en 5 mi de cloroformo. La reacción se agitó a TA durante 2 horas, cuando la TLC indicó el consumo de la 1-(4,4-difluoro-ciclohexil)-etanona. La solución se vertió en solución saturada de hidrógenocarbonato sódico y se extrajo con cloroformo (3 x 50 mi). Las fases orgánicas combinadas se pasaron por un separador de fases concentrado al vacío. El producto bruto se resuspendió en metanol (5 mi) y solución acuosa al 10% de carbonato de potasio (5 mi) y se agitó a ta durante un fin de semana. La solución se diluyó con cloroformo (25 mi) y solución sat. de hidrógenocarbonato sódico. Las fases orgánicas se separaron y la fase acuosa se extrajo con cloruro de metileno (3 x 25 mi). Las fases orgánicas combinadas se pasaron por un separador de fases concentrado al vacío. La purificación se logró por cromatografía en columna sobre gel de sílice (disolvente: 100%-> 1 :1 éter de petróleo/éter dietílico).

Rendimiento: 0.105 g XXXII. 2-(4,4-Difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-1 -nitro-benceno Se añadieron 0.213 g de DTAD a una solución de 5-fluoro-2-nitro-fenol, 0.105 g de 4,4-difluorociclohexanol, 0.25 g de trifenilfosfina en 2 mi de cloruro de metileno anhidro a TA. La mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche, cuando el análisis TLC indicó el consumo del 5-Fluoro-2-nitro-fenol. Después la mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno (50 mi) y se lavó con solución acuosa de carbonato de potasio al 10%. La capa acuosa se extrajo con cloruro de metileno (2x 25 mi) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con solución de hidrogenocarbonato sódico (25 mi). La capa orgánica se pasó por un separador de fases y se concentró al vacío. La purificación se logró por cromatografía en columna sobre gel de sílice (disolvente: 100%-> 1 :1 iso-hexano/ EtOAc).

Rendimiento: 0.141 g XXXII.5 2-(4,4-Difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamina Se preparó análogamente a III.2, a partir de 0.141 g de 2-(4,4-difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-1-nitro-benceno.

Rendimiento: 0.08 g Producto intermedio XXXIII 2-(trans-3-Metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamina racémica XXXIII.1 3-Metoxiciclohexanol Se preparó análogamente a II.2, a partir de 25 g de 3-metoxifenol. Rendimiento: 25.5 g Espectro de masas ESI: m/z = 131 (M+H)+ XXXIII.2 2-(cis-3-Metoxi-ciclohexiloxi)-3-nitro-piridina racémica y 2-(trans-3- Metoxi-ciclohexiloxi)-3-nitro-piridina racémica Se preparó de manera análoga a III.1 , a partir de 5.1 g de 2-fluoro-3-nitropiridina y 5 g de 3-metoxiciclohexanol. La purificación se logró por cromatografía en columna sobre gel de sílice (disolvente: éter de petróleo/EtOAc=70:30 durante 20 minutos y dentro de 20 minutos hasta 50:50). 2-(trans-3-Metoxi-ciclohexiloxi)-3-nitro-piridina racémica eluyendo primero: Rendimiento: 1.6 g tiempo de retención (HPLC): 3.77 min (método C).

Espectro de masas ESI: m/z = 253 (M+H)+ 2-(cis-3-Metoxi-ciclohex¡lox¡)-3-n¡tro-pirid¡na racémica eluyendo en segundo lugar: Rendimiento: 5.82 g tiempo de retención (HPLC): 3.65 min (método C) Espectro de masas ESI: m/z = 253 (M+H)+ XXXIII.3 2-(trans-3-Metoxi-ciclohexiloxi)-pir¡d¡n-3-ilamina racémica Se preparó de manera análoga a III.2, a partir de 1.59 g de 2-(trans-3-metoxi-ciclohexiloxi)-3-nitro-piridina racémica Rendimiento: 1.11 g Producto intermedio XXXIV 2-(cis-3-Metoxi-ciclohexiloxi)-p¡ridin-3-ilamina racémica Se preparó de manera análoga a III.2, a partir de 5.8 g de 2-(cis-3-metoxi-ciclohexiloxi)-3-nitro-piridina racémica Rendimiento: 4.32 g Producto intermedio XXXV /V-[trans-3-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclobutil]-acetamida XXXV.1. Éster terc-butílico de ácido [trans-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclobutil]-carbámico Se preparó de manera análoga a XVI.1, a partir de 2.3 g de éster terc-butílico de ácido trans-(3-hidroxi-ciclobutil)-carbámico, 1.6 g de 5-fluoro-2-nitrofenol y 2.423 mi de DIAD.

Rendimiento: 2.8 g Espectro de masas ESI: m/z = 327 (M+H)+ XXXV.2 trifluoroacetato de trans-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclobutilamina Se añadieron 14 mi de ácido trifluoroacético a una mezcla de 2.8 g de éster terc-butílico de ácido [trans-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclobutil]-carbámico en 100 mi de cloruro de metileno a 0 °C. La mezcla se agitó luego durante 2 horas a TA y después se concentró. El residuo se agitó con éter diisopropílico y se filtró.

Rendimiento: 2.85 g Espectro de masas ESI: m/z = 227 (M+H)+ XXXV.3 Trifluoroacetato de /V-[trans-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclobutil]-acetamida Se añadieron 450 µ? de cloruro de acetilo a una mezcla de 1.8 g de trifluoroacetato de trans-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclobutilamina y 3.7 mi de trietilamina en 30 mi de cloruro de metileno, y se agitó durante 2 horas a ta. La mezcla se extrajo dos veces con agua. La fase orgánica se secó y se concentró. El residuo se agitó con éter dietílico y se filtró. El residuo se secó en un receptáculo de secado.

Rendimiento: 1.4 g Espectro de masas ESI: m/z = 269 (M+H)+ XXXV.4 A/-[trans-3-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclobutil]-acetamida Se preparó análogamente a XXIV.2, a partir de 1.4 g de A/-[trans-3- (5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclobutil]-acetamida Rendimiento: 1.55 g Espectro de masas ESI: m/z = 239 (M+H)+ Producto intermedio XXXVI estereoquímica relativa XXXVI.1. 2-(Ciclopent-3-eniloxi)-4-fluoro-1 -nitro-benceno Se preparó de manera análoga a XVI.1, a partir de 1 g de ciclopentenol, 1.57 g de 5-fluoro-2-nitrofenol y 1.89 mi de DEAD.

Rendimiento: 2,11 g XXXVI.2 3-(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-6-oxa-biciclo [3.1.0] hexano Se añadieron 2.95 g de ácido meta cloroperbenzoico a una solución enfriada con hielo de 2.05 g de 2-(ciclopent-3-eniloxi)-4-fluoro-1 -nitro-benceno en 45 mi de cloruro de metileno. Se permitió calentar la mezcla de reacción a TA durante toda la noche. Después la mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y se lavó con solución acuosa de carbonato de potasio al 0% (2X). Las fases orgánicas se pasaron por una frita hidrófoba y el disolvente se evaporó. Relación 33:1 de isómeros de epóxido.

Rendimiento: 2.31 g XXXVI .3 estereoquímica relativa Se calentaron 2.2 g de 3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-6-oxa-biciclo[3.1.0]hexano a reflujo en 0.2M H2S04/THF durante 5 horas y luego se agitó durante una noche. El disolvente se eliminó al vacío y el residuo se extrajo con cloruro de metileno (2x). Las fases orgánicas se lavaron con solución acuosa al 10% de carbonato de potasio y se evaporaron. La purificación se logró por cromatografía en columna sobre gel de sílice (disolvente: 100% iso-hexano -> 100% cloruro de metileno-> 25:1 cloruro de metileno/MeOH).

Rendimiento: 1.61 g XXXVI .4 estereoquímica relativa Se preparó análogamente a III.2, a partir de 1.6 g de XXXVI.3.

Rendimiento: 1.04 g Producto intermedio XXXVII Éster terc-butílico de ácido [(1S,3S)-3-(2-amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclopentil]-carbámico XXXVII .1 Éster terc-butílico de ácido (1 S,3S)-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentil]-carbámico Se añadieron 2.57 g de hidruro de sodio (55%) a una mezcla de 9.862 g de éster terc-butílico de ácido ((1S,3S)-3-hidroxi-ciclopentil)-carbámico en 100 mi de THF a 0 °C y se agitó a TA durante 30 minutos. Se añadieron 5.372 mi de 2,4-difluoro-nitrobenceno y la mezcla de reacción se sometió a reflujo durante 6 horas. Después de enfriar hasta TA, la mezcla de reacción se extrajo con agua y cloruro de metileno. La fase orgánica se secó y se concentró. La purificación se logró por cromatografía en columna sobre gel de sílice (disolvente: cloruro de metileno).

Rendimiento: 6.79 g Espectro de masas ESI: m/z = 341 (M+H)+ XXXVII .2 Éster terc-butílico de ácido [(1S,3S)-3-(2-amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclopentilj-carbámico Se preparó de manera análoga a XXIV.2, a partir de 1.64 g de éster terc-butílico de ácido [(1S,3S)-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentil]-carbámico. Rendimiento: 1.49 g Espectro de masas ESI: m/z = 311 (M+H)+ Producto intermedio XXXVIII A/-[(1S,3S)-3-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclopentil]-A/-metil-acetamida XXXVIII.1 Éster terc-butílico de ácido [(1S,3S)-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentil]-metil-carbámico Se añadieron 7.1 mi (1M en THF) de LiHMDS a 0 °C a una mezcla de 2 g de éster terc-butílico de ácido (1S,3S)-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentilj-carbámico en 60 mi de THF. La mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a TA. Luego se añadieron 398 µ? de yoduro de metilo y la mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción luego se concentró y se extrajo con agua/cloruro de metileno. La fase orgánica se secó y se concentró. La purificación se logró por cromatografía en columna sobre gel de sílice (disolvente: solución de cloruro de metileno/metanol/amoniaco acuoso = 90:10:1).

Rendimiento: 1.34 g Espectro de masas ESI: m/z = 355 (M+H)+ XXXVIII.1 [(1S,3S)-3-(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentil]-metil-amina Se preparó de manera análoga a XXXV.2, a partir de 1.34 g de éster terc-butílico de ácido [(1S,3S)-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentil]-metil-carbámico.

Rendimiento: 1.203 g Espectro de masas ESI: m/z = 255 (M+H)+ XXXVIII.3 A/-[(1S,3S)-3-(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentil]-/V-metil-acetamida Se preparó de manera análoga a XXXV.3, a partir de 0.703 g de trifluoroacetato de [(1S,3S)-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentil]-metil-amina y cloruro de acetilo.

Rendimiento: 0.588 g Espectro de masas ESI: m/z = 297 (M+H)+ XXXVI II .4 /V-[(1 S,3S)-3-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclopentil]-/V-metil-acetamida Se preparó de manera análoga a XXIV.2, a partir de 0.58 g de éster terc-butílico de ácido [(1S,3S)-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentil]-metil-carbámico.

Rendimiento: 0.52 g Espectro de masas ESI: m/z = 267 (M+H)+ Producto intermedio XXXIX Cis/trans-4-(3-Amino-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol -(3-nitro-pirid¡n-2-iloxi)-ciclohexanol Se preparó de manera análoga a III.1 , a partir de 3.6 g de 2-fluoro-3-nitropiridina y 2.9 g de 1 ,4-ciclohexanodiol.

Rendimiento: 1.6 g XXXIX.2 Cis/trans-4-(3-Amino-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol Se preparó de manera análoga a III.2, a partir de 1.6 g de cis/trans- 4-(3-nitro-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol.

Rendimiento: 1.53 g Producto intermedio XXXX -4-Fluoro-2-(3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina ns-3-Metoxi-ciclohexanol Una mezcla de cis- y trans-4-metoxi-ciclohexanol (7:3) se preparó por hidrogenación de 3-metoxi-fenol en metanol a temperatura ambiente presencia de catalizador de Nishimuras.

XXXX.2. 4-Fluoro-2-(cis-3-metoxi-ciclohexiloxi)-1 -nitro-benceno LiHMDS (solución 1 M en THF; 5.0 mi) se añadió lentamente a una solución enfriada con hielo/etanol de 3-metoxi-ciclohexanol (mezcla 7:3 de isómeros cis- y trans; 601 mg) en THF (8 mi). Se suspendió el enfriamiento después de 5 minutos, y la mezcla se agitó durante 15 minutos a temperatura ambiente antes de la adición de 2,4-difluoro-1 -nitro-benceno (482 µ?). Después de 4 horas, se añadieron otros 1.5 mi de LiHMDS (solución 1 M en THF) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se inactivo por adición de ácido clorhídrico (0.1 M), se diluyó con acetato de etilo y se filtró a través de celite. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgS04 y se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía en columna (gel de sílice, ciclohexano/acetato de etilo 85:15) para dar el isómero cis (650 mg) y el isómero trans (230 mg).

Rendimiento: 650 mg (55%) MS (ESI+): 270 (M+H+) HPLC-MS (Método D): Rt 3.89 min XXXX.3. 4-Fluoro-2-(cis-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina Se añadió formiato de amonio (738 mg) a una suspensión de 4-fluoro-2-(cis-3-metoxi-ciclohexiloxi)-1 -nitro-benceno (630 mg) y paladio al 10% sobre carbón (70 mg) en metanol (10 mi) a temperatura ambiente, y la mezcla se calentó a reflujo durante 30 mín hasta que la LCMS indicó la conversión completa del material de partida. La mezcla se diluyó con diclorometano (50 mi) y agua (20 mi), se filtró a través de celite, y la torta de filtración se lavó con diclorometano (20 mi). La capa orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía en columna (gel de sílice, ciclohexano/acetato de etilo 70:30) para dar el producto deseado.

Rendimiento: 440 mg (79%) MS (ESI+): 240 (M+H+) HPLC-MS (Método D): Rt 2.21 min Producto intermedio XXXXI trans-4-Fluoro-2-(3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina oro-2-(trans-3-metoxi-ciclohexiloxi)-1 -nitro-benceno El compuesto se preparó como se describe en XXXX.2.

Rendimiento: 230 mg (19%) MS (ESI+): 270 (M+H+) HPLC-MS (Método D): Rt 3.99 min XXXXI.2. 4-Fluoro-2-(trans-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina El compuesto se preparó a partir de 4-fluoro-2-(trans-3-metoxi-ciclohexiloxi)-1 -nitro-benceno (2.07 g) como se describe para el isómero cis en XXXX.3.

Rendimiento: 1.94 g (96%) MS (ESI+): 240 (M+H+) HPLC-MS (Método D): Rt 2.24 min Producto intermedio XXXXII cis-2-(3-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamina etoxi-ciclohexiloxi)-3-nitro-piridina LiHMDS (solución 1 M en THF; 40.0 mi) se añadió lentamente a una solución enfriada con hielo/etanol de cis/trans-4-metoxi-ciclohexanol (5.00 g) en THF (10 mi). La refrigeración se suspendió después de completar la adición, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió lentamente una solución de 2-fluoro-3-nitro-piridina (5.10 g) en THF (10 mi) mientras se mantenía la temperatura debajo de 24 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente, se neutralizó por adición de ácido clorhídrico (1 M) y se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgS04 y se concentraron al vacío. El residuo se sometió a cromatografía en columna (gel de sílice, éter de petróleo/acetato de etilo 70:30 -> 50:50) para dar el isómero cis (5.82 g) y el isómero trans (1.60 g).

Rendimiento: 5.82 g (64%) MS (ESI+): 253 (M+H+) HPLC-MS (Método D): Rt 3.65 min XXXXII.2. 2-(cis-3-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamina Se añadió formiato de amonio (7.25 g) a una suspensión de 2-(cis-3-metoxi-ciclohexiloxi)-3-nitro-piridina (5.80 mg) y paladio al 10% sobre carbón (400 mg) en metanol (40 mi) a temperatura ambiente, y la mezcla se calentó a reflujo durante 30 min hasta que la LCMS indicó la conversión completa del material de partida. La mezcla se diluyó con diclorometano (100 mi) y agua (40 mi), se filtró a través de celite, y la torta de filtración se lavó con diclorometano (30 mi). La capa orgánica se secó sobre MgSO_i y se concentró al vacío. El residuo se sometió a cromatografía en columna (gel de sílice, éter de petróleo/acetato de etilo 70:30) para dar el producto deseado.

Rendimiento: 4.32 g (85%) MS (ESf): 223 (M+H+) HPLC-MS (Método D): Rt 2.36 min Producto intermedio XXXXIII 2-(trans-3-metoxi-ciclohexiloxi)-pir¡din-3-ilamina 3-metoxi-ciclohexiloxi)-3-nitro-piridina El compuesto se preparó como se describe en III.1.

Rendimiento: 1.60 g (18%) MS (ESI+): 253 (M+H+) HPLC-MS (Método D): Rt 3.77 min XXXXIII.2. trans-2-(3-metoxi-c¡clohexiloxi)-piridin-3-ilamina El compuesto se preparó a partir de 2-(trans-3-metox¡-ciclohexiloxi)-3-nitro-piridina (1.59 g) como se describe para el isómero cis en III.2.

Rendimiento: 1.11 g (79%) MS (ESP): 223 (M+H+) HPLC-MS (Método D): Rt 2.36 min Producto intermedio XXXXIV 4-Fluoro-2-((1S,2S)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina -2-((1S,2S)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-1 -nitro-benceno Se preparó de manera análoga a III.1 , a partir de 926 µ? de 2,4- difluor-nitrobenceno y 1 g de (1S,2S)-2-metoxiciclohexanol.

Rendimiento: 1.34 g XXXXIV.2. 4-Fluoro-2-((1 S,2S)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina Se preparó de manera análoga a III.2, a partir de 0.142 g de trans- 4-Fluoro-2-(2-metoxi-ciclohexiloxi)-1-nitro-benceno.

Rendimiento: 0.115 g Producto intermedio XXXXV química relativa estereoquímica relativa Se añadió AD-mix-alfa (19.60 g) a t-butanol (70.0 mi) y agua (70.0 mi). La mezcla se enfrió a 0°C y se añadió 2-(ciclopent-3-eniloxi)-4-fluoro-1-nitrobenceno (3.14 g). Después de 2 h, la mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante una noche, después se volvió a enfriar a 0°C y se añadió metabisulfito de sodio (22 g). Después de 15 minutos, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se concentraron. Al residuo se le añadió 2,2-dimetoxipropano (25.0 mi) y ácido p-toluenosulfónico (270 mg), y la mezcla se calentó a reflujo durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con 2CO3 acuoso al 10% y salmuera. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía para obtener el producto deseado.

Rendimiento: 1.77 g XXXXV.2. 2 estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 111.2, a partir de 0.458 g del compuesto XXXXV.1.

Rendimiento: 382 mg Producto intermedio XXXXVI estereoquímica relativa estereoquímica relativa Al compuesto XXXXV: 1 (521 mg) en THF (5.0 mi) se le añadió HCI acuoso 2 M. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1.5 h, después se concentró al vacío para dar el producto deseado.

Rendimiento: 438 mg XXXXVI .2. 0 estereoquímica relativa El compuesto XXXXVI.1 (438 mg) y bromuro de tetra-n-butilamonio (55 mg) en hidróxido sódico acuoso al 46/48% (7.0 mi) y dibromometano (7.0 mi) se agitaron a 60°C durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y agua. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con cloruro de metileno. Las fases orgánicas se pasaron por una frita hidrófoba y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía para obtener el producto deseado.

Rendimiento: 100 mg XXXXVI.3.

El compuesto XXXXVI.2 (100 mg), formiato de amonio (117 mg) y Pd/C (20 mg) en metanol (2,0 mi) se calentaron a reflujo durante 40 min. La mezcla de reacción se dejó enfriar, se filtró a través de un lecho de celite y la torta de filtración se lavó con cloruro de metileno. El filtrado se concentró. El residuo se suspendió en cloruro de metileno, se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío para dar el producto deseado.

Rendimiento: 124 mg Producto intermedio XXXXVII XX 2 estereoquímica relativa XXXXVII.1. estereoquímica relativa Se añadió AD-mix-alfa (19.60 g) a t-butanol (70.0 mi) y agua (70.0 mi). La mezcla se enfrió a 0°C y se añadió 2-(ciclopent-3-eniloxi)-4-fluoro-1-nitrobenceno (3.14 g). Después de 2 h, la mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante una noche, después se volvió a enfriar a 0°C y se añadió metabisulfito de sodio (22 g). Después de 15 minutos, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se concentraron. Al residuo se le añadió 2,2-dimetoxipropano (25.0 mi) y ácido p-toluenosulfónico (270 mg), y la mezcla se calentó a reflujo durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con K2CO3 acuoso al 10% y salmuera. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía para obtener el producto deseado.

Rendimiento: 2.04 g XXXXVII.2.

O estereoquímica relativa Se añadió HCI acuoso 2 M (7.0 mi) al compuesto XXXXVII.1 (695 mg) en THF (7.0 mi) y la mezcla se calentó a reflujo. Después de 1.5 h, la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 521 mg XXXXVII.3. estereoquímica relativa Se añadió hidruro de sodio (240mg, 60%) a 0°C a una mezcla del compuesto XXXXVII.2 (514 mg) y yodometano (380 µ?) en DMF (10.0 mi). La mezcla de reacción se dejó calentar a la temperatura ambiente durante una noche, luego se diluyó con EtOAc y se lavó con agua y salmuera. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El bruto se trituró con hexano para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 430 mg XXXXVII.4.

Se preparó de manera análoga a II 1.2, a partir del compuesto XXXXVII.3 (430 mg).

Rendimiento: 365 mg Producto intermedio XXXXVIII 0 estereoquímica relativa El compuesto XXXXVII.2 (500 mg) y bromuro de tetra-n-butilamonio (63 mg) en hidróxido sódico acuoso al 46% (7.0 mi) y dibromometano (7.0 mi) se agitaron a 60°C durante 2 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar y se filtró. El filtrado se separó. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El bruto se purificó por cromatografía para obtener el producto deseado.

Rendimiento: 178 mg XXXXVHI.2.

Se preparó de manera análoga a III.2, a partir de XXXXVIII.1 (166 mg).

Rendimiento: 141 mg Producto intermedio XXXXIX Se preparó de manera análoga a III.2, a partir del compuesto XXXXVII.1 (458 mg).

Rendimiento: 391 mg Producto intermedio XXXXX XXXXX.1. 2-(Ciclopent-2-eniloxi)-4-fluoro-1 -nitrobenceno A una mezcla de 5-fluoro-2-nitrofenol (1.48 g), 2-clclopenten-1-ol (662 mg) y trifenilfosfina (2.47 g) en THF (25.0 mi) se le añadió dietilazodicarboxilato (1.48 mi) a 0°C. Después de agitar a temperatura ambiente durante una noche, la mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y se lavó con KHSO4 acuoso al 10%. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía para obtener el producto deseado.

Rendimiento: 1.25 g XXXXX.2. 3-(5-Fluoro-2-nitrofenoxi) ciclopentano-1 ,2-diol Se añadió AD-mix-alfa (7.57 g) a t-butanol (20.0 mi) y agua (25.0 mi) y se agitó durante 10 min. La mezcla se enfrió a 0°C y se añadió 2-(ciclopent-2-eniloxi)-4-fluoro-1-nitrobenceno (1.21 g). Después de agitar a temperatura ambiente durante una noche, la mezcla se volvió a enfriar a 0°C y se añadió metabisulfito de sodio (8.13 g). Después de 10 minutos, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h y se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se pasaron por una frita hidrófoba y se concentraron al vacío para dar el producto deseado.

XXXXX.3. compuesto XXXXX.3.1 compuesto XXXXX.3.2 A 3-(5-fluoro-2-n¡trofenoxi) ciclopentano-1 ,2-diol (1.40 g) en 2,2-dimetoxipropano (5.0 mi) se le añadió ácido p-toluenosulfónico (103 mg) y la mezcla se calentó a reflujo durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y K2CO3 acuoso al 10%, se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía (gel de sílice; Disolvente: 100% iso-hexano -> iso-hexano/EtOAc (5:1), el compuesto XXXXX.3.1 se eluyó primero.

Rendimiento: 1.31 g Se preparó de manera análoga a III.2., a partir del compuesto XXXXX.3.1 (595 mg).

Rendimiento: 515 mg Producto intermedio XXXXXI Se preparó de manera análoga a 111.2, a partir del compuesto XXXXX.3.2 (106 mg).

Rendimiento: 91 mg Producto intermedio XXXXXII cis-2-(2-amino-5-fluorofenoxi)ciclopentanol racémico is-2-(5-fluoro-2-nitrofenoxi)ciclopentanol racémico Se preparó de manera análoga a III.1 , a partir de cis-1 ,2-ciclopentandiol (1.0 g) y 1.28 mi de 2,4-difluoronitrobenceno.

Rendimiento: 1.34 g XXXXXII.2 cis-2-(2-amino-5-fluorofenoxi)ciclopentanol racémico Se preparó de manera análoga a 111.2, a partir de cis-2-(5-fluoro-2-nitrofenoxi) ciclopentanol racémico (2.36 g).

Rendimiento: 388 mg Producto intermedio XXXXXIII 3-(2-amino-5-fluorofenoxi) ciclopentanol XXXXXIII.1. 3-(5-fluoro-2-nitrofenoxi) ciclopentanol Se añadió azodicarboxilato de di-terc-butilo a 0°C a una mezcla de 1 ,3-ciclopentandiol (1.02 g), 5-fluoro-2-nitrofenol (0.79 g) y trifenilfosfina (1.97 g) en THF (15.0 mi). Después de agitar a temperatura ambiente durante el fin de semana, la mezcla se trató con HCI acuoso 2 M (20.0 mi) y se sometió a reflujo durante 30 min. La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno. Se separaron las capas. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El bruto se purificó por cromatografía para obtener el producto deseado.

Rendimiento: 1.10 g XXXXXIII.2. 3-(2-amino-5-fluorofenox¡) ciclopentanol Se preparó de manera análoga a III.2, a partir de 3-(5-fluoro-2-nitrofenoxi) ciclopentanol (1.09 g).

Rendimiento: 868 mg Producto intermedio XXXXXIV cis- 2-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexanol racémico estereoquímica relativa XXXXXIV.1 cis- 2-(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexanol racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a II 1.1, a partir de cis-1 ,2-ciclohexandiol (1.0 g) y 0.94 mi de 2,4-difluoronitrobenceno.

Rendimiento: 1.34 g XXXXXIV.2 cis-2-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexanol racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a III.2, a partir de cis- 2-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexanol ciclopentanol racémico (2.198 g).

Rendimiento: 627 mg Producto intermedio XXXXXVI 3-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexanol -(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexanol Se preparó de manera análoga a XVI.1 , a partir de -1 ,3-ciclohexandiol (2.32.0 g) y 1.57 de 5-fluoro-2-nitrofenol.

Rendimiento: 0.952 g XXXXXIV.2 3-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclohexanol Se preparó de manera análoga a III.2, a partir de 3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclohexanol (0.945 g).

Rendimiento: 487 mg Producto intermedio XXXXXVI I 4-Fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina XXXXXVII.1 4-Fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-1 -nitro-benceno Se añadieron 0.6 g de hidruro de sodio (60%) a una solución enfriada (~7°C) de 2.55 g de 4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-1 -nitro- benceno y yodometano en 30 mi de DMF. La mezcla se dejó calentar a la temperatura ambiente durante una noche, se diluyó con EtOAc y se lavó con salmuera (x3). La fase orgánica se secó (MgS04), se pasó por una frita hidrófoba y se evaporó. El residuo se purificó por cromatografía en columna de resolución rápida (gel de sílice, 100% i-hexano --> 7:1 i-hexano:EtOAc).

XXXXXVII.2 4-Fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina Se preparó de manera análoga a III.2, a partir de 1.81 g de 4- Fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-1-nitro-benceno.

Rendimiento: 1.48 g xiciclohexanol Una mezcla de 100 g de 4-metoxifenol y catalizador de Nishimura en 750 mi de etanol se hidrogenó (50 psi de hidrógeno) a temperatura ambiente durante 4.5 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró.

Rendimiento: 114 g Espectro de masas ESI: m/z = 131 (M+H)+ XXXXXVIII.2 4-Fluoro-2-(cis-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina y 4-Fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina Una mezcla de 18.9 g de 2-nitro-5-fluorofenol y 19 g de 4-metoxiciclohexanol en 250 mi de THF se dispuso en un baño de agua con agua fría. Se añadieron simultáneamente 41 g de DTAD y 47 g de trifenilfosfina. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se añadieron 1.9 g de Pd/C (10%) y la mezcla de reacción se hidrogenó (50 psi de hidrógeno) a temperatura ambiente durante 20 horas. Se filtró la mezcla y se concentró. Se añadió cloruro de metileno al residuo y la mezcla se extrajo dos veces con HCI (2M). La fase acuosa se ajustó hasta pH~básico por adición de_ solución acuosa de hidróxido sódico (4M) y se extrajo dos veces con cloruro de metileno. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. La purificación se logró por cromatografía en columna sobre sílice (eluyente: cloruro de metileno/EtOAc= 9:1). 4-Fluoro-2-(cis-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina Rendimiento: 2 g Espectro de masas ESI: m/z = 240 (M+H)+ 4-Fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamina Rendimiento: 3.8 g Espectro de masas ESI: m/z = 240 (M+H)+ Producto intermedio XXXXXIX 4-(3-Amino-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol Nitro-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol Se preparó de manera análoga a III.1 , a partir de 3.6 g de 2-fluoro-3-nitropiridina y 2.9 g de 1 ,4-ciclohexanodiol Rendimiento: 3 g XXXXXIX.2 4-(3-Amino-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol Se preparó de manera análoga a III.2, a partir de 1.6 g de 4-(3-Nitro-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol Rendimiento: 1.53 g Producto intermedio XXXXXX trans-4-(3-Amino-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol XXXXXX.1 trans-4-(3-Nitro-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol Se preparó de manera análoga a III.1 , a partir de 4.054 g de 2-fluoro-3-nitropiridina y 2.266 g de trans-1,4-ciclohexanodiol.

Rendimiento: 0.298 g XXXXXX.2 trans-4-(3-Amino-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol Se preparó de manera análoga a XXIV.2, a partir de 0.29 g de trans-4-(3-nitro-piridin-2-iloxi)-ciclohexanol.

Rendimiento: 0.203 g Espectro de masas ESI: m/z = 209 (M+H)+ Producto intermedio XXXXXXI -(ciclopent-3-eniloxi)-4-fluoro-1 -nitrobenceno A una mezcla de 5-fluoro-2-nitrofenol (1.57 g), 2-ciclopentenol (1.00 g) y trifenilfosfina (3.15 g) en cloruro de metileno (30.0 mi) se le añadió, a 0°C, dietilazodicarboxilato (1.89 mi). Después de agitar toda la noche a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía para obtener el producto deseado.

Rendimiento: 2.11 g XXXXXXI.2. 3-(5-fluoro-2-nitrofenoxi)-6-oxabiciclo [3.1.0] hexano A 2-(ciclopent-3-eniloxi)-4-fluoro-1-nitrobenceno (2.05 g) en cloruro de metileno (45.0 mi) a 0°C se le añadió ácido 3-cloroperoxibenzoico (2.95 g) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y se lavó con K2CO3 acuoso al 10%. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y el disolvente se evaporó para dar el producto deseado.

Rendimiento: 2.31 g estereoquímica relativa Se calentó 3-(5-fluoro-2-nitrofenoxi)-6-oxabiciclo [3.1.0] hexano (2.20 g) en ácido sulfúrico 0.2 M (50.0 mi) y THF (50.0 mi) durante 5 h. Después de agitar a temperatura ambiente durante una noche, la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se extrajo con cloruro de metileno. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con K2CO3 acuoso al 10% y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía para obtener el producto deseado. Rendimiento: 1.61 g estereoquímica relativa El compuesto XXXXXXI.3 (1.60 g), formiato de amonio (1.96 g) y Pd/C (0.30 g) en metanol (30.0 mi) se calentaron a reflujo durante 1h. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de celite y la torta de filtración se lavó con DCM. El filtrado se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía para dar el producto deseado.

Rendimiento: 1.04 g Producto intermedio XXXXXXII /\Z-[(1S,3S)-3-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclopentil]-acetamida oroacetato de (1S,3S)-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)- A éster terc-butílico de ácido [(1S,3S)-3-(5-fluoro-2-nitro-fenox¡)-ciclopentilj-carbámico, compuesto XXXVII.1 (2.13 g) en DCM (150 mi) se le añadió, a 0°C, TFA (10 mi) y se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se concentró a TA y se trituró con éter diisopropílico para dar el compuesto deseado.

Rendimiento: 1.80 g Espectro de masas ESI: m/z = 241 (M+H)+ XXXXXXII.2 /V-[(1 S,3S)-3-(5-Fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentil]-acetamida Se añadió cloruro de acetilo (360 µ?), a 0°C, a una mezcla de trifluoroacetato de (1S,3S)-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentilamina (1.80 g) y DIPEA (4.4 mi) en cloruro de metileno (150 mi) y se agitó a TA durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluyó con agua y la capa orgánica se secó y se concentró. El bruto se trituró con éter diisopropílico para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 1.40 g Espectro de masas ESI: m/z = 283 (M+H)+ XXXXXXII.3 A/-[(1 S,3S)-3-(2-Amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclopentil]-acetamida Una mezcla de A/-[(1S,3S)-3-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-c¡clopent¡l]-acetamida (1.45 g) y níquel Raney (200 mg) en MeOH (150 mi) se agitó a TA durante una noche en atmósfera de hidrógeno (5 bar). El catalizador se retiró por filtración y el filtrado se concentró para dar el producto deseado.

Rendimiento: 1.89 g (65% puro) Espectro de masas ESI: m/z = 253 (M+H)+ Compuesto intermedio XXXXXXIII Éster terc-butílico de ácido [4-(3-amino-pirid¡n-2-iloxi)c¡clohexil]-carbámico Una mezcla de 7.8 g de éster terc-butílico de ácido [4-(3-nitro-piridin-2-iloxi) ciclohexil]-carbám¡co y 0.8 g de níquel Raney en 100 mi de metanol se hidrogenó a TA en atmósfera de 50 psi durante una noche. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró.

Rendimiento: 6.9 g Espectro de masas ESI: m/z = 308 (M+H)+ Compuesto intermedio XXXXXXIV Éster terc-butílico de ácido (1S.2S) [2-(2-amino-5-fluoro-fenoxi)-ciclopentil]- carbámico XXXXXXIV.1 Ester terc-butílico de ácido (1S,2S)[2-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)- ciclopentil]-carbámico Se disolvió (1S,2S)-trans-N-boc-2-aminociclopentanol en 50 mi de THF y se enfrió hasta 10°C. A la mezcla de reacción se le añadieron 32.2 mi de LiHMDS 1M en THF. Después de una hora, se añadieron 2.72 mi de 2,4- difluoronitrobenzol y la mezcla se agitó a TA durante la noche. Luego la mezcla se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, se secó y se concentró al vacío.

Rendimiento: 9.0 g Espectro de masas ESI: m/z = 341 (M+H)+ XXXXXXIV.2 Éster terc-butílico de ácido (1S.2S) [2-(2-amino-5-fluoro-fenoxi)- ciclopentilj-carbámico Se preparó de manera análoga al ejemplo 111.2, a partir de 9.0 g de éster terc-butílico de ácido (1S,2S)[2-(5-fluoro-2-nitro-fenoxi)-ciclopentil]-carbámico (compuesto XXXXXXIV.1) Rendimiento: 8.0 g Espectro de masas ESI: m/z = 311 (M+H) + XXXXXXIV.3 Éster metílico de ácido (1S.2S) 4-[2-(2-terc-butoxicarbonilam¡no-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil tieno[2,3-d]p¡rimidina-6-carboxílico Una mezcla de reacción de 2.0 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3d]-pirimidina-6-carboxílico, 2.5 g del compuesto intermedio XXXXXXIV.2 y 0.283 g de ácido p-toluenosulfónico en 20 mi de Dioxano, se calentó a 110°C en el microondas durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH y se filtró. El filtrado se lavó con dioxano/MeOH. El residuo se trituró con éter diisopropílico.

XXXXXXIV.4 Ácido (1S.2S) 4-[2-(2-terc-butoxicarbonilamino-ciclopentiloxi)-4- fluoro-fenilamino]-5-metil t¡eno[2,3-d]p¡rimidina-6-carboxílico Una mezcla de 2.4 g de éster metílico de ácido (1S.2S) 4-[2-(2-terc-butoxicarbonilamino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico y 20ml de solución de hidróxido sódico 1M en 50 mi de MeOH se agitó a TA durante una noche.

A la mezcla de reacción se le añadieron 20 mi de ácido clorhídrico 1 M hasta alcanzar un intervalo de pH de 2-3. La mezcla se diluyó con agua y se filtró. El sólido se secó al vacío a 50°C.

Rendimiento: 2.2 g Espectro de masas ESI: m/z = 503 (M+H) + XXXXXXIV.5 Éster terc-butílico de ácido (1S.2S) {2-(2- (6-carbamoil-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilam¡no)-5-fluoro-fenoxi]-ciclopentil}-carbámico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4, a partir de 2.20 g de ácido (1 S,2S) 4-[2-(2-terc-butoxicarbonilamino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (compuesto XXXXXXIV.4) y amoniaco. Rendimiento: 2.1 g Espectro de masas ESI: m/z = 502 (M+H) + XXXXXXIV.6 Amida de ácido (1S.2S) 4-[2-(2-amino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil t¡eno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de reacción de 2.1 g de éster terc-butílico de ácido 1 S,2S) {2-(2- (6-carbamoil-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamino)-5-fluoro-fenoxi]-ciclopentil}-carbámico, y 1.24 mi de ácido trifluoroacético en 50 mi de DCM se agitó durante 3 días a 46°C.

La mezcla se concentró, se diluyó con tolueno y se concentró. El residuo se extrajo con DCM y agua, donde la capa de agua tuvo el intervalo de pH de 10. La capa orgánica se secó y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía.

Rendimiento: 0.5 g Espectro de masas ESI: m/z = 402 (M+H) + Compuestos finales Ejemplo 1 tereoquímica relativa estereoquímica relativa Una mezcla de reacción de 0.265 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico, 0.265g del compuesto intermedio I y 0.02 g de ácido p-toluenosulfónico en 3 mi de dioxano se calentó a 110°C durante 8 horas.

Se añadió luego solución de hidróxido de amonio acuoso (3M). La mezcla se filtró y el sólido se lavó con agua y éter dietílico. El sólido se secó al vacío a 50°C durante 3h y a TA durante el fin de semana.

Rendimiento: 0.385 g 1.2 estereoquímica relativa Se calentaron 0.385 g del compuesto 1.1, 0.016 g de ácido p-toluenosulfónico y 1 mi de 2,2-dimetoxipropano en 1 mi de DMF a 80°C durante 45 minutos. Después la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con solución acuosa de carbonato de potasio al 10% y salmuera (2x). La fase orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se evaporó. El residuo se trituró con éter dietílico.

Rendimiento: 0.306 g 1.3 estereoquímica relativa Se añadieron 1.6 mi de solución de hidróxido sódico (2M) a una mezcla de 0.306 g del compuesto 1.2. en 6 mi de EtOH/THF (1 :1). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 45 minutos y a reflujo durante 40 minutos. Después el disolvente se eliminó al vacío y el residuo se suspendió en agua. Se añadió solución acuosa de ácido clorhídrico (2M). La mezcla se filtró y se lavó el sólido con agua. El sólido se suspendió en etanol y la mezcla luego se concentró. Este procedimiento se repitió dos veces.

Rendimiento: 0.274 g 1.4 estereoquímica relativa Se añadieron 0.256 g de HATU a una solución enfriada con hielo de 0.265 g del compuesto 1.3 y 117 µ? de DIPEA en 3 mi de DMF. Después de 30 minutos a esta temperatura, se añadieron 1.5 mi de una solución de amoniaco en metanol (7 mol/I). Se permitió calentar la mezcla a TA durante toda la noche. Se evaporó la DMF al vacío y el residuo se evaporó a partir de tolueno (3x). El residuo se suspendió en metanol y se calentó a reflujo. Se filtró la mezcla de reacción, se lavó el sólido con éter d ¡etílico y se secó.

Rendimiento: 0.185 g Espectro de masas ESI: m/z = 473 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.42 min (método X) Ejemplo 2 Una mezcla de 0.155 g del compuesto 1.4 y 2 mi de solución acuosa de ácido clorhídrico (2M) en 2 mi de THF se calentó a reflujo durante 20 minutos. La mezcla de reacción se filtró a TA. El sólido se lavó con agua y éter dietílico y se secó al vacío sobre pentóxido de fósforo.

Rendimiento: 0.110 g Espectro de masas ESI: m/z = 433 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.23 min (método X) Ejemplo 3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metanosulfonilamino-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico 3.1. Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metanosulfonilamino-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio IV (0.16 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (0.129 g).

Rendimiento: 0.223 g 3.2. Ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metanosulfonilamino-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.22 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metanosulfonilamino-ciclohexilox¡)-fenilamino]-5-met¡l-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 3.1).

Rendimiento: 0.118 g 3.3. Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metanosulfonilamino-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.11 g de ácido 4- [4-fluoro-2-(trans-4-metanosulfon¡lamino-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico (compuesto 3.2).

Rendimiento: 0.080 g Espectro de masas ESI: m/z = 494 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.31 min (método X) Ejemplo 4 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida 4.1 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio V (0.242 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-met¡l-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (0.155 g).

Rendimiento: 0.272 g 4.2 Ácido 4-(4-fluoro-2-(trans-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.272 g de 4-(4-fluoro-2-(trans-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 4.1).

Rendimiento: 0.118 g 4.3 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) feriilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.137 g de ácido 4- (4-fluoro-2-(trans-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 4.2).

Rendimiento: 0.099 g Espectro de masas ESI: m/z = 508 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.37 min (método X) Ejemplo 5 4-(2-(trans-4-acetamidociclohexiloxi)-4-fluorofenilamino)-5-met¡ltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida 5.1 4-(2-(trans-4-Acetamidociclohex¡loxi) 4-fluorofenilamino)-5-metilt¡eno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio VI (0.422 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (0.243 g).

Rendimiento: 0.301 g 5.2 Ácido 4-(2-(trans-4-acetamidociclohexiloxi) 4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.301 g de 4-(2-(trans-4-acetamidociclohexilox¡) 4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 5.1).

Rendimiento: 0.283 g 5.3 4-(2-(trans-4-acetamidociclohexiloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.100 g de ácido 4-(2-(trans-4-acetamidociclohexiloxi) 4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 5.2).

Rendimiento: 0.073 g Espectro de masas ESI: m/z = 458 (M+H)+ R, (HPLC): 1.29 min (método X) Ejemplo 6 4-(2-(trans-4-acetamidociclohexiloxi)-4-fluorofen¡lamino)-N-(3-(dimetilamino) propil)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.092 g de ácido 4-(2-(trans-4-acetamidociclohexiloxi) 4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 5.2) y 3-(dimetilamino) propilamina (126 µ?). Rendimiento: 0.050 g Espectro de masas ESI: m/z = 543 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.24 min (método X) Ejemplo 7 4-(4-fluoro-2-(trans-4-(N-metilacetamidociclohex¡loxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] p¡rim¡d¡na-6-carboxam¡da 7.1 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(N-metilacetamido)c¡clohexiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]p¡rimid¡na-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio VII (0,255 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3- ] pirimidina-6-carboxílico (0.184 g).

Rendimiento: 0.225 g 7.2 Ácido 4-(4-fluoro-2-(trans-4-(N-metilacetamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.225 g de 4-(4-fluoro-2-(trans-4-(N-metilacetam¡dociclohexilox¡) fenilamino)-5-met¡lt¡eno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 7.1).

Rendimiento: 0.221 g 7.3 4-(4-fluoro-2-(trans-4-(N-metilacetamidociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.118 g de ácido 4- (4-fluoro-2-(trans-4-(N-met¡lacetamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 7.2).

Rendimiento: 0.062 g Espectro de masas ESI: m/z = 472 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.34 min (método X) Ejemplo 8 N-(3-(dimetilamino) propil)-4-(4-fluoro-2-(trans-4-(N-metilacetamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.094 g de ácido 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(N-metilacetamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 7.2) y 3-(dimetilamino) propilamina (126 µ?).

Rendimiento: 0.060 g Espectro de masas ESI: m/z = 557 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.27 min (método X) Ejemplo 9 4-(4-Fluoro-2-(cis-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5- metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida 9.1 4-(4-Fluoro-2-(cis-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio VIII (0.229 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (0.146 g).

Rendimiento: 0.213 g 9.2 Ácido 4-(4-fluoro-2-(cis-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)- 5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.213 g de 4-(4-fluoro-2-(cis-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 9.1).

Rendimiento: 0.205 g 9.3 4-(4-Fluoro-2-(cis-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.193 g de ácido 4-(4-fluoro-2-(cis-4-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 9.2).

Rendimiento: 0.096 g Espectro de masas ESI: m/z = 508 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.28 min (método X) Ejemplo 10 4-(4-fluoro-2-(cis-4-(N-metilacetamidociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida 10.1 4-(4-Fluoro-2-(cis-4-(N-metilacetamidociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio IX (0.217 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (0.155 g).

Rendimiento: 0.157 g 10.2 Ácido 4-(4-fluoro-2-(cis-4-(N-metilacetamidociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.157 g de 4-(4-fluoro-2-(cis-4-(N-metilacetamidociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 10.1).

Rendimiento: 0.118 g 10.3 4-(4-Fluoro-2-(cis-4-(N-metilacetamidociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2, 3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.113 g de ácido 4-(4-fluoro-2-(cis-4-(N-metilacetamidociclohexiloxi) fenilam¡no)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 10.2).

Rendimiento: 0.084 g Espectro de masas ESI: m/z = 472 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.24 min (método X) Ejemplo 11 trans-4-(2-(6-Carbamoil-5-metiltieno [2,3-d]pirimidin-4-ilamino)-5-fluorofenoxi)ciclohexil(metil)carbamato de metilo 1 1.1 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(metoxicarbonil (metil) amino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio X (0.236 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (0.166 g).

Rendimiento: 0.311 g 11.2 Ácido 4-(4-fluoro-2-(trans-4-(metoxicarbonil (metil) amino) ciclohexiloxi)-fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.311 g de 4-(4-fluoro-2-(trans-4-(metoxicarbonil (metil) amino) ciciohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 11.1).

Rendimiento: 0.249 g 1 1.3 trans-4-(2-(6-Carbamoil-5-metiltieno [2,3-d] p¡rimidin-4-ilamino)-5-fluorofenoxi) ciclohexil (metil) carbamato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.098 g de ácido 4-(4-fluoro-2-(trans-4-(metoxicarbonil (metil) amino) ciciohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 11.2).

Rendimiento: 0.021 g Espectro de masas ESI: m/z = 488 (M+H)+ R, (HPLC): 1.42 min (método X) Ejemplo 12 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(met¡lamino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida 12.1 4-(2-(trans-4-(terc-Butoxicarbonil (metil) amino) ciclohexiloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio XI (1 ,29 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (0.728 g). Purificación por cromatografía.

Rendimiento: 0.439 g 12.2 Ácido 4-(2-(trans-4-(terc-butoxicarbonil (metil) amino) ciclohexiloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.747 g de 4-(2-(trans-4-(terc-butoxicarbonil (metil) amino) ciclohexiloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 12.1).

Rendimiento: 0.747 g 12.3 terc-Butil-trans-4-(-2-(6-carbamoil-5-metiltieno [2,3-d] pirimidin-4-ilamino)-5-fluorofenoxi) ciclohexil (metil) carbamato Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.747 g de ácido 4-(2-(trans-4-(terc-butoxicarbonil (metil) amino) ciclohexiloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 12.2).

Rendimiento: 0.684 g 12.4 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(metilamino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Una mezcla de 0.684 g de terc-butil-trans-4-(-2-(6-carbamoil-5-metiltieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamino)-5-fluorofenoxi)ciclohexil(metil)carbamato en 5 mi de 4 M HCI/dioxano y 5 mi de MeOH se agitó a TA durante 1.5 h. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El bruto se purificó por cromatografía para obtener el producto deseado.

Rendimiento: 0.387 g Ejemplo 13 4-(4-Fluoro-2-(trans-2-(N-met¡lmet¡lsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilam¡no)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida racémica relativa 13.1 4-(4-Fluoro-2-(trans-2-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio XII (0.231 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (0.147 g).

Rendimiento: 0.279 g 13.2 Ácido 4-(4-fluoro-2-(trans-2-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico relativa Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.279 g de 4-(4-fluoro-2-(trans-2-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo racémico (compuesto 13.1).

Rendimiento: 0.242 g 13.3 4-(4-Fluoro-2-(trans-2-(N-metilmet¡lsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida racémica Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.101 g de ácido 4-(4-fluoro-2-(trans-2-(N-metilmetilsulfonamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico (compuesto 13.2).

Rendimiento: 0.015 g Espectro de masas ESI: m/z = 508 (M+H)+ R, (HPLC): 1.33 min (método X) Ejemplo 14 4-(4-Fluoro-2-(trans-2-(N-metilacetamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida racémica relativa 14.1 4-(4-Fluoro-2-(trans-2-(N-met¡lacetamido) ciciohexiloxi) fenilamino)-5- metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio XIII (0.225 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3- d]pir¡m¡dina-6-carboxílico (0.162 g).

Rendimiento: 0.180 g 14.2 Ácido 4-(4-fluoro-2-(trans-2-(N-metilacetamido) ciciohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.180 g de 4-(4- fluoro-2-(trans-2-(N-metilacetamidociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo racémico (compuesto 14.1).

Rendimiento: 0.170 g 14.3 4-(4-Fluoro-2-(trans-2-(N-metilacetamido) ciciohexiloxi) fenilamino)- 5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.095 g de ácido 4-(4-fluoro-2-(trans-2-(N-metilacetamido) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 14.2). Purificación por cromatografía.

Rendimiento: 0.040 g Espectro de masas ESI: m/z = 472 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.34 min (método X) Ejemplo 15 4-(2-(trans-4-aminociclohexiloxi)4-fluorofenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxamida 15.1 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(2,2,2-trifluoroacetamido)ciclohexiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio XIV (0.050 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metíl-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílíco (0.038 g).

Rendimiento: 0.062 g 15.2 4-(2-(trans-4-Am¡nociclohexiloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se agitaron 0.100 g de 4-<4-fluoro-2-(trans-4-(2,2,2-trifluoroacetamido)ciclohexiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 15.1) y 2 mi de amoniaco 7 M en MeOH en un tubo de presión durante una noche a 70°C y 8 días a 90°C. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía para obtener el compuesto deseado.

Rendimiento: 0.067 g Ejemplo 16 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(1 -metilpiperidin-4-ilamino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se añadieron 0,019 g de 1-metil-4-piperidona en 1.5 mi de MeOH seguidos de una gota de ácido acético a una mezcla de 0.070 g de 4-(2-(trans-4- aminociclohexiloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida (compuesto 15.2) en 2 mi de metanol. Se añadió cianoborohidruro de sodio y la mezcla se agitó a TA durante 40 min. Después de agitar a 50°C durante 3 h horas, se añadieron 0.010 g de 1-metil-4-piperidona y 0.010 g de cianoborohidruro de sodio y se siguió calentando durante la noche. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía, seguido de recristalización a partir de MeOH.

Rendimiento: 0.056 g Espectro de masas ESI: m/z = 513 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.16 min (método X) Ejemplo 17 4-(4-Fluoro-2-(cis-3-(N-metilamino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida 17.1 4-(2-(3-(terc-Butoxicarbonil (metil) amino) ciclohexiloxi-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio XV (0.170 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (0.130 g). Purificación por cromatografía (gradiente: CH2CI2-> 2% eOH/ CH2CI2 usando Biotage SP4) Rendimiento: 0.190 g 17.2 Ácido 4-(2-(3-(terc-butoxicarbonil (metil) amino) ciclohexiloxi-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidína-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.190 g de 4-(2-(3-(terc-butoxicarbonil (metil) amino) ciclohexiloxi-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 17.1). El bruto se trituró en MeCN caliente.

Rendimiento: 0.120 g 17.3 3-(2-(6-Carbamoil-5-metiltieno [2,3-d] pirimidin-4-ilamino)-5-fluorofenoxi) ciclohexil (metil) carbamato de tere-butilo Se preparó de manera análoga a .4, a partir de 0.110 g de ácido 4- (2-(3-(terc-butoxicarbonil (metil) amino) ciclohex¡loxi-4-fluorofenilamino)-5- metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 17.2). Purificación por cromatografía (gradiente: CH2CI2-> 20%MeOH/ CH2CI2 usando Biotage SP4) Rendimiento: 0.090 g 17.4 4-(4-Fluoro-2-(cis-3-(N-metilamino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5- metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida 220 µ? de HCI 4 M en dioxano se añadieron a 0.093 g de 3-(2-(6- carbamoil-5-metiltieno [2,3-d] pirimidin-4-ilamino)-5-fluorofenoxi) ciclohexil (metil) carbamato de tere-butilo (compuesto 17.3) en 4 mi de dioxano. La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a TA, momento en que se añadieron más alícuotas de HCI 4 M en dioxano. Se añadió metanol y la mezcla se agitó durante 2 días a TA. La mezcla se purificó por cromatografía (gradiente: CH2CI2-> 20%MeOH/ CH2CI2 usando Biotage SP4).

Espectro de masas ESI: m/z = 430 (M+H)+ Rt (HPLC):1.20 min (método X) Ejemplo 18 4-(4-Fluoro-2-(trans-3-(N-metilamino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 17.4, a partir de 0.093 g de 3-(2- (6-carbamoil-5-metiltieno [2,3-d] pirimidin-4-ilamino)-5-fluorofenoxi) ciclohexil (metil) carbamato de tere-butilo (compuesto 17.3).

Espectro de masas ESI: m/z = 430 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.20 min (método X) Ejemplo 19 4-(2-(1 ,4-Dioxaespiro [4.5] decan-8-iloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida 19.1 4-(2-(1 ,4-Dioxaespiro [4.5] decan-8-iloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir del compuesto intermedio III (2.300 g) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3 cflpirimidina-6-carboxílico (2.080 g) a 80°C.

Rendimiento: 3.600 g Espectro de masas ESI: m/z = 474 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.65 min (método X) 19.2 Ácido 4-(2-(1 ,4-dioxaespiro [4.5] decan-8-iloxi)-4-fluorofenilamino)-5 metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se añadieron 1.065 g de hidróxido de litio a 2.003 g de 4-(2-(1 ,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-iloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 19.1 ) en 100 mi de THF y 60 mi de agua. Después de agitar a TA durante una noche, la mezcla de reacción se inactivo con HCI acuoso 2 M y se concentró al vacío. Se filtró la capa acuosa resultante. La torta de filtración se secó y se trituró con MeOH:Et.20 20:1 para dar el compuesto deseado.

Rendimiento: 1.280 g 19.3 4-(2-(1 ,4-Dioxaespiro [4.5] decan-8-iloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 1.287 g de ácido 4- (2-(1 ,4-dioxaespiro [4.5] decan-8-iloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 19.2). Purificación por cromatografía.

Rendimiento: 1.210 g Ejemplo 20 4-(4-Fluoro-2-(4-oxociclohexilox¡) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se añadió 1.000 g de ácido p-toluenosulfónico a 0.500 g de 4-(2-(1 ,4-dioxaespiro [4.5] decan-8-iloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 19.1) en 10 mi de THF y 5 mi de agua. Después de someter a reflujo durante una noche, la mezcla de reacción se ajustó hasta pH 8, usando Na2C03 acuoso. La capa acuosa se extrajo con cloroformo. Los extractos combinados se pasaron por una frita hidrófoba y se concentraron para dar el compuesto deseado.

Rendimiento: 0.413 g Espectro de masas ESI: m/z = 430 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.50 min (método X) Ejemplo 21 4-(4-Fluoro-2-(4-oxociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga al Ejemplo 20, a partir de 1 4-(2-(1 ,4-dioxaespiro[4.5]decan-8-iloxi)-4-fluorofenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pir¡m¡dina-6-carboxamida (compuesto 19.3). El bruto se trituró con MeOH.

Rendimiento: 0.888 g Espectro de masas ESI: m/z = 415 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.27 min (método X) Ejemplo 22 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-((2-metoxietil)(metil)amino)ciclohexiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxam¡da 22.1 4-(4-Fluoro-2-(4-((2-metoxietil)(metil)amino)ciclohexiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilato de metilo A una mezcla agitada de 0.100 g de 4-(4-fluoro-2-(4-oxociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltleno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 20) en 3 mi de cloruro de metileno se le añadieron 0.045 g de 2-(metoxietil) metilamina. Después de 15 min a TA, se añadieron 0.045 g de triacetoxiborohidruro de sodio y se siguió agitando durante una noche. La reacción se inactivo por adición de agua. La mezcla se pasó por una frita hidrófoba y la capa orgánica se concentró. El bruto se cristalizó en amoniaco 7 M en MeOH para dar el compuesto deseado.

Rendimiento: 0.062 g 22.2 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-((2-metoxietil) (metil) amino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 15.2, a partir de 0.060 g de 4-(4-fluoro-2-(4-((2-metoxietil)(metil)amino)ciclohexiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 22.1) a 100°C durante 14 h. El compuesto del título se obtuvo por separación de HPLC.

Rendimiento: 0.011 g Espectro de masas ESI: m/z = 488 (M+H)+ Rt (HPLC):1.22 min (método X) Ejemplo 23 4-(4-Fluoro-2-(cis-4-((2-metoxietil) (metil) amino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] plrimidina-6-carboxamlda Se preparó de manera análoga a 15.2, a partir de 0.060 g de 4-(4-fluoro-2-(4-((2-metoxietil)(metil)amlno)ciclohexiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 22.1) a 100°C durante 14 h. El compuesto del título se obtuvo por separación de HPLC.

Rendimiento: 0.007 g Espectro de masas ESI: m/z = 488 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.16 min (método X) Ejemplo 24 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(2-metoxietilamino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-amida 24.1 4-(4-Fluoro-2-(4-(2-metox¡et¡lam¡no)ciclohex¡loxi)fenilamino)-5-met¡ltieno[2,3-d]pir¡midina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 22.1 , a partir de 0.249 g de 4-(4-fluoro-2-(4-oxociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 20). La cristalización se reemplazó por purificación por cromatografía.

Rendimiento: 0.280 g 24.2 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-(2-metoxietilamino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 15.2, a partir de 0.280 g de 4-(4-fluoro-2-(4-(2-metoxietilamino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 24.1). El compuesto del título se obtuvo por separación de HPLC.

Rendimiento: 0.055 g Espectro de masas ESI: m/z = 474 (M+H)+ R, (HPLC): 1.21 min (método X) Ejemplo 25 4-(4-Fluoro-2-(cis-4-(2-metoxietilamino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 15.2, a partir de 0.280 g de 4-(4-fluoro-2-(4-(2-metoxietilamino) ciclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 24.1). El compuesto del título se obtuvo por separación de HPLC.

Rendimiento: 0.104 g Espectro de masas ESI: m/z = 474 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.18 min (método X) Ejemplo 26 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-morfolinociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida 26.1 4-(4-Fluoro-2-(4-morfolinociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo Se preparó de manera análoga a 22.1 , a partir de 0.249 g de 4-(4-fluoro-2-(4-oxociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 20.). La cristalización se reemplazó por purificación por cromatografía.

Rendimiento: 0.275 g 26.2 4-(4-Fluoro-2-(trans-4-morfolinociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 15.2, a partir de 0.280 g de 4-(4-fluoro-2-(4-morfolinociclohexilox¡) fenilamino)-5-met¡lt¡eno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 26.1). El compuesto del título se obtuvo por separación de HPLC.

Rendimiento: 0.025 g Espectro de masas ESI: m/z = 486 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.20 min (método X) Ejemplo 27 4-(4-Fluoro-2-(cis-4-morfolinociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 15.2, a partir de 0.280 g de 4-(4-fluoro-2-(4-morfolinociclohexiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (compuesto 26.1). El compuesto del título se obtuvo por separación de HPLC.

Rendimiento: 0.023 g Espectro de masas ESI: m/z = 486 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.15 min (método X) Ejemplo 28 Una mezcla de reacción de 0.503 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico, 0.500 g del compuesto intermedio XXVIII y 0.070 g de ácido p-toluenosulfónico en 8 mi de dioxano se calentó bajo irradiación de microondas a 140°C durante 15 minutos. La mezcla se enfrió, se filtró y se purificó por cromatografía. El bruto se trituró con éter dietílico. Rendimiento: 0.320 g Espectro de masas ESI: m/z = 448 (M+H)+ Rt (HPLC): .74 min (método K). 28.2 Una mezcla de 3.4 mi de solución de hidróxido sódico (1M) y 0.300 g del compuesto 28.1 en 10 mi de MeOH se agitó a 100°C durante 2 horas y a reflujo durante 40 minutos. Luego la mezcla se neutralizó con HCI acuoso, se concentró y se filtró. La torta de filtración se lavó con EtOH y éter dietílico, y se secó.

Rendimiento: 0.230 g Espectro de masas ESI: m/z = 434 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.47 min (método K 28.3 Una mezcla de 0.060 g del compuesto 28.2, 0.018 mi de N,N-dimetil-propano-1 ,3-diamina, 0.045 g de TBTU y 0.049 mi de DIPEA en 7.5 mi de THF/DMF 2/1 se agitó a TA durante el fin de semana. La mezcla se concentró y el bruto se purificó por cromatografía.

Rendimiento: 0.100 g Espectro de masas ESI: m/z = 518 (M+H)+ Rt (HPLC):1.37 min (método K) Ejemplo 29 Se sintetizó análogamente a 28.1 , a partir de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (1.532 g) y el compuesto intermedio XXX (1.700 g). La mezcla se filtró y la torta de filtración se lavó con dioxano, MeOH y éter dietílico.

Rendimiento: 2.150 g Espectro de masas ESI: m/z = 476 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.08 min (método K) Rf (TLC): 0.79 (gel de sílice, cloruro de metileno/metanol 9/1) Se preparó de manera análoga a 28.2, a partir de 1.500 g del compuesto 28.1.

Rendimiento: 1.200 g Espectro de masas ESI: R, (HPLC):1.77 min (método K) Una mezcla de 0.150 g del compuesto 29.2, 0.700 mi de amoniaco 0.5 M en THF, 0.112 g de TBTU y 0.122 mi de DIPEA en 10 mi de THF se agitó a TA durante el fin de semana. La mezcla se concentró. El bruto se diluyó con DCM, se lavó con agua, se secó sobre Na2S04 y se concentró. El residuo se trituró con éter dietílico.

Rendimiento: 0.085 g Espectro de masas ESI: m/z = 461 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.59 min (método K) Ejemplo 30 estereoquímica relativa estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 29.1 , a partir de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirímidina-6-carboxílico (0.362 g) y el compuesto intermedio XXIX (0.360 g).

Rendimiento: 0.290 g Espectro de masas ESI: m/z = 448 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.65 min (método K) Se preparó de manera análoga a 28.2, a partir de 0.280 g del compuesto 30.1.

Rendimiento: 0.230 g Espectro de masas ESI: m/z = 434 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.48 min (método K) Ejemplo 31 Amida de ácido 4-[2-(4,4-dimetil-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico 31.1 Éster metílico de ácido 4-[2-(4,4dimetil-ciclohex¡loxi)-4-fluoro-fen¡lamino]-5- metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 29.1 , a partir de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (1.500 g) y el compuesto intermedio XXXI (1.467 g).

Rendimiento: 2.000 g Espectro de masas ESI: m/z = 444 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.15 min (método K) 31.2 Ácido 4-[2-(4,4-dimetil-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 28.2, a partir de 1.000 g de éster metílico de ácido 4-[2-(4,4-dimet¡l-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2, 3-d] pinmidina-6-carboxílico (compuesto 31.1).

Rendimiento: 0.850 g Espectro de masas ESI: m/z = 430 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.27 min (método K) 31.3 Amida de ácido 4-[2-(4,4-dimetil-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 29.3, a partir de 0.150 g de ácido 4-[2-(4,4-dimetil-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 31.2).

Rendimiento: 0.065 g Espectro de masas ESI: m/z = 429 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.09 min (método K) Ejemplo 32 (3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 4-[2-(4,4-dimetil-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-t¡eno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 29.3, a partir de 0.150 g de ácido 4-[2-(4,4-dimetil-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 31.2) y 0.044 mi de A/,A/-dimet¡l-propano-1 ,3-diamina. Rendimiento: 0.128 g Espectro de masas ESI: m/z = 514 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.46 min (método K) Ejemplo 33 Amida de ácido 4-[2-(4,4-difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico 33.1 Éster metílico de ácido 4-[2-(4,4-difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c/]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de 0.087 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-cO pirimidina-6-carboxílico, 0.088 g del compuesto intermedio XXXII y 0.006 g de ácido p-toluenosulfónico en 2 mi de dioxano se calentó a 120°C durante 1.5 h. La mezcla de reacción se enfrió, se filtró, y la torta de filtración se lavó con dioxano y se secó.

Rendimiento: 0.115 g 33.2 Ácido 4-[2-(4,4-difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-0] pirimidina-6-carboxílico Se añadieron 0.620 mi de solución de hidróxido sódico (2 ) a 0.110 g de éster metílico de ácido 4-[2-(4,4-difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico (compuesto 33.1) en 4 mi de THF/MeOH (1/1). Se añadió una parte alícuota adicional de solución de hidróxido sódico al momento de agitar la mezcla de reacción a TA. Después de otras 6 horas a TA, la mezcla se concentró, la capa acuosa resultante se ajustó hasta pH 4-5 con HCI acuoso 2 M y se agitó bajo enfriamiento durante 30 minutos. Luego la mezcla se filtró, la torta de filtración se lavó con agua y se secó.

Rendimiento: 0.100 g 33.3 Amida de ácido 4-[2-(4,4-difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se añadieron 0.029 g de EDC a una mezcla de 0.050 g de ácido 4-[2-(4,4-difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico (compuesto 33.2) y 0.020 g de 1-hidroxi-pirrolidina-2,5-diona en 1 mi de DMF y se agitó a TA durante el fin de semana. Después de añadir 0.327 mi de amoniaco (7M), la mezcla de reacción se agitó a TA durante otras 1.5 horas. La mezcla se concentró y el residuo recristalizó a partir de MeOH caliente.

Rendimiento: 0.041 g Espectro de masas ESI: m/z = 437 (M+H)+ Rt (HPLC):1.38 min (método X) Ejemplo 34 (3-D¡metilamino-propil)-amida de ácido 4-[2-(4,4-difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 33.3, a partir de 0.050 g de ácido 4-[2-(4,4-difluoro-ciclohexiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 33.2) y 0.126 mi de A/,W-dimet¡l-propano-1 ,3-diamina. Rendimiento: 0.023 g Espectro de masas ESI: m/z = 522 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.29 min (método X) Ejemplo 35 Amida de ácido 4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico 35.1 Éster metílico de ácido 4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de 1.700 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-c] pirimidina-6-carboxílico, 2.000 g del compuesto intermedio XXXV y 0.255 g de ácido p-toluenosulfónico en 20 mi de dioxano se calentó bajo irradiación de microondas a 110°C durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró y la torta de filtración se lavó con dioxano y se agitó con MeOH. Luego se añadió agua y la mezcla se filtró.

Rendimiento: 1.700 g Espectro de masas ESI: m/z = 445 (M+H)+ 35.2 Ácido 4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de 1.800 g de éster metílico de ácido 4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 35.1) en 17 mi de solución de hidróxido sódico (1 M) y 30 mi de MeOH se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se neutralizó con HCI (1M) acuoso y se concentró. El residuo se filtró y la torta de filtración se lavó con éter dietílico.

Rendimiento: 1.680 g Espectro de masas ESI: m/z = 431 (M+H)+ 35.3 Amida de ácido 4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se añadieron 0.050 mi de DIPEA a una mezcla de 0.100 g de ácido 4-[2-(trans-3-acetilamino-c¡clobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (compuesto 35.2) y 0.095 g de HATU en 1.5 mi de DMF y se agitó a TA durante 15 minutos. Se añadieron 2.323 mi de amoniaco en THF (0.5M) y se siguió agitando durante otras 6 horas. Después, la mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por cromatografía.

Rendimiento: 0.015 g Espectro de masas ESI: m/z = 430 (M+H)+ 89 R, (HPLC): 0.86 (método A) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 35.3: Ejemplo 42 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 S,2S)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil- tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico 42.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((1S,2S)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c(]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.1 , a partir de 0.846 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico y 1.000 g del compuesto intermedio XXXXIV.

Rendimiento: 1.390 g 42.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-((1 S,2S)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se añadieron 7 mi de solución de hidróxido sódico (2M) a una mezcla de 1.270 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((1S,2S)-2-metox¡- ciclohexiloxi)-fenilam¡no]-5-metil-t¡eno[2,3-d]pirimid¡na-6-carboxílico (compuesto 42.1) en 10 mi de MeOH/THF (1 :1). La mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 15 minutos, luego se enfrió y se acidificó con HCI acuoso 2M. El disolvente se eliminó al vacío, el residuo se suspendió en agua, se filtró y se secó. 42.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1S,2S)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5- metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilico Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.100 g de ácido 4- [4-fluoro-2-((1 S,2S)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3- cflpirimidina-6-carboxílico.

Rendimiento: 0.074 g Espectro de masas ESI: m/z = 431 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.41 min (método X) Ejemplo 43 (3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1S,2S)-2-metoxi- ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c(]pirimidina-6-carboxílico 43.1 Éster 2,5-dioxo-pirrolidin-1-ilo de ácido 4-[4-fluoro-2-((1S,2S)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c pirimidina-6-carboxíli Se añadió EDC (53 mg, 0.28 mmol) a una mezcla de 0.100 g de ácido 4-[4-fluoro-2-((1S,2S)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-cdpirimidina-6-carboxílico (compuesto 42.2) y 0.040 g de N-hidroxisuccinimida en 1 mi de DMF. Se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con agua y salmuera. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró.

Rendimiento: 0.100 g 43.2 (3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1S,2S)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c/lpirimidina-6-carboxílico Se añadieron 0.129 g de 3-dimetilaminopropilamina a 0.155 g de éster 2,5-dioxo-pirrolidin-1-ilo de ácido 4-[4-fluoro-2-((1S,2S)-2-metox¡- ciclohexiloxi)-fen¡lamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico en 2 mi de DMF y se agitó a TA durante 30 minutos. La mezcla de reacción se concentró. El residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con agua y salmuera, se pasó por una frita hidrófoba y se concentró.

Rendimiento: 0.129 g Espectro de masas ESI: m/z = 516 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.31 min (método X) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 43.2: Ejemplo 50 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fen¡lam¡no]-5-metil- tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémica racémica 50.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-2-metoxi-ciclohexilox¡)- fenilamino]-5-metil-t¡eno[2,3-d]p¡rim¡cl¡na-6-carboxíl¡co racémico Una mezcla de reacción de 0.073 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico, 0.091 g del compuesto intermedio XVII y 0.003 g de ácido p-toluenosulfónico en 1 mi de dioxano se calentó a 110°C durante 10 horas. La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y amoniaco 3M, y se pasó por una frita hidrófoba. La capa orgánica se concentró y el residuo recristalizó a partir de MeOH.

Rendimiento: 0.098 g 50.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cf] pirimidina-6-carboxílico racémico racémico Se preparó de manera análoga a 42.2, a partir de 0.089 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil- tieno[2,3-cflpir¡m¡dina-6-carboxílico racémico (compuesto 50.1).

Rendimiento: 0.075 g 50.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémica racémica Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.073 g de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilam 6-carboxílico (compuesto 50.2).

Rendimiento: 0.041 g Espectro de masas ESI: m/z = 431 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.41 min (método X) Ejemplo 51 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 S,2S)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c(]p¡rimid¡na-6-carboxílico 51.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 S,2S)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)- fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de reacción de 1.832 g de éster metílico de ácido 4- cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico, 1.700 g del compuesto intermedio XXI y 0.130 g de ácido p-toluenosulfónico en 30 mi de dioxano se agitó a 100°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió, se diluyó con agua y se filtró. La torta de filtración se lavó con agua y se secó.

Rendimiento: 3.020 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ R, (HPLC): 2.04 min (método L) 51.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-((1 S,2S)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil- tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxíl¡co Se añadieron 5 mi de una solución de hidróxido sódico (4M) a una mezcla de 2.960 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 S,2S)-2-hidroxi- ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c^ (compuesto 51.1) en 60 mi de metanol/THF (1:1). La mezcla de reacción se agitó a TA durante 3 horas, después se acidificó con HCI acuoso y se diluyó con agua. La mezcla se filtró y la torta de filtración se secó.

Rendimiento: 2.780 g Espectro de masas ESI: m/z = 418 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.85 min (método L) 51.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 S,2S)-2-hidroxi-ciclohexilox¡)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de 0.100 g de ácido 4-[4-fluoro-2-((1S,2S)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c(]pirimidina-6-carboxílico (compuesto 51.2), 2.5 mi de amoniaco en dioxano (0.5M), 0.109 g de HATU y 0.046 mi de DIPEA en 2 mi de DMF se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con agua, se agitó y se filtró. Se secó la torta de filtración.

Rendimiento: 0.086 g Espectro de masas ESI: m/z = 417 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.61 min (Método L) Ejemplo 52 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilam¡no]-5-metil- tieno[2,3-c0p¡r¡m¡dina-6-carboxílico 52.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirim¡d¡na-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 51.1 , a partir de 1.723 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pírimídina-6-carboxílico y 1.600 g del compuesto intermedio XX.

Rendimiento: 2.780 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.02 min (Método L) 52.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilam¡no]-5-metil-tieno[2,3-c/]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 51.2, a partir de 2.750 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5- metil-tieno[2,3-c/]pirimidina-6-carboxíl¡co (compuesto 52.1).

Rendimiento: 2.630 g Espectro de masas ESI: m/z = 418 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.74 min (Método L) 52.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1R,2R)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilico Se preparó de manera análoga a 51.3, a partir de 0.120 g de ácido 4-[4-fluoro-2-((1R,2R)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c/]pirimidina-6-carboxílico (compuesto 52.2).

Rendimiento: 0.095 g Espectro de masas ESI: m/z = 417 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.74 min (Método L) Ejemplo 53 (3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1R,2R)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d)pihmidina-6-carboxilico Una mezcla de 0.096 g de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-hidrox¡-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c]pirimidina-6-carboxílico (compuesto 52.2), 0.081 g de TBTU y 0.088 mi de DIPEA en 15 mi de THF se agitó a TA durante 30 minutos. Luego se añadieron 0.028 mi de dimetilaminopropilamina y se siguió agitando durante una noche. La mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía.

Rendimiento: 0.072 g Espectro de masas ESI: m/z = 502 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.18 min (Método L) Rf (TLC): 0.33 (gel de sílice, cloruro de metileno/metanol/NH390/10/1) Ejemplo 54 (2-Metoxi-etil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 53, a partir de 0.091 g de ácido 4- [4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-cflpirimidina-6-carboxílico (compuesto 52.2) y 0.020 mi de metoxietilamina.

Rendimiento: 0.069 g Espectro de masas ESI: m/z = 475 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.85 min (Método L) f (TLC): 0.43 (gel de sílice, cloruro de metileno/metanol/NH3 90/10/1) Ejemplo 55 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa 55.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 50.1 , a partir de 0.136 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-met¡l-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico y 0.147 g del compuesto intermedio XVI.

Rendimiento: 0.163 g 55.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 42.2, a partir de 0.163 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico (compuesto 55.1).

Rendimiento: 0.149 g 55.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-2-metoxi-ciclohex¡loxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.141 g de ácido 4-[4-fluoro-2-(c¡s-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-cf]pirimidina-6-carboxílico racémico (compuesto 55.2).

Rendimiento: 0.094 g Espectro de masas ESI: m/z = 431 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.40 min (método X) Ejemplo 56 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilam¡no]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa 56.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1, a partir de 0.277 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico y 0.267 g del compuesto intermedio XXXXXIV.

Rendimiento: 0.173 g 56.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilam¡no]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.3, a partir de 0.173 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico racémico.

Rendimiento: 0.123 g 56.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4, a partir de 0.083 g de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico racémico y amoniaco.

Rendimiento: 0.046 g Espectro de masas ESI: m/z = 417 ( +H)+ Rt (HPLC):1.3 min (método X) Ejemplo 57 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-3-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa 57.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(3-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]p¡rimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 0.485 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico y 0.491 g del compuesto intermedio XXXXXVI.

Rendimiento: 0.140 g 57.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-(3-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.3, a partir de 0.48 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(3-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-cGpirim¡dina-6-carboxílico.

Rendimiento: 0.448 g 57.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-3-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4, a partir de 0.445 g de ácido 4-[4-Fluoro-2-(3-hidroxi-ciclohexilox¡)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-c/] pirimidina-6-carboxílico y amoniaco. La separación en isómero cis y trans racémicos se realizó mediante HPLC.

Rendimiento: 0.095 g (compuesto del título, isómero cis) Espectro de masas ESI: m/z = 417 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.3 min (método X) Ejemplo 58 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa 58.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 4.956 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico y 4.6 g del compuesto intermedio II en ¡sopropanol.

Rendimiento: 6.1 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ 58.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se añadieron 2.665 g de hidróxido de litio a una mezcla de 6.5 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico en 350 mi de agua y 70 mi de agua. La mezcla se agitó durante una noche. Después la mezcla se acidificó por adición de ácido cítrico (10% en agua) y se concentró. Se añadió agua y la mezcla se filtró. Se lavó con agua el sólido, y se secó.

Rendimiento: 6.15 g Espectro de masas ESI: m/z = 418 (M+H)+ 58.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4, a partir de 5.6 g de ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico y 100 mi de amoniaco (0.5 M en THF).

Rendimiento: 3.85 g Espectro de masas ESI: m/z = 417 (M+H)+ R, (HPLC):2.55 (método A) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1.4: estereoquímica relativa Ejemplo 79 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilam¡no]-5-metil-tieno [2,3-c/] pirimidina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa 79.1 Éster etílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 0.76 g de éster etílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-c ) pirimidina-6-carboxílico y 0.7 g del compuesto intermedio XXXXI en dioxano.

Rendimiento: 1.04 g Espectro de masas ESI: m/z = 460 (M+H)+ Rt (HPLC): 5.41 (método C) 79.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c ]pirim¡dina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 1 .3, a partir de 1 .02 g de éster etílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico racémico.

Rendimiento: 0.36 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ Rt (HPLC): 4.13 (método C) 79.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4, a partir de 0.15 g de ácido 4-[4-fluoro-2-((trans)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico racémico y amoniaco (7 M en metanol).

Rendimiento: 0.05 g Espectro de masas ESI: m/z = 431 (M+H)+ Rt (HPLC): 3.65 (método C) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1.4: Ejemplo 89 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil- tieno[2,3-d]p¡rimidina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa 89.1 Ester etílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-3-metoxi-ciclohexiloxi)- fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c/]pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 0.52 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-etil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico y 0.43 g del compuesto intermedio XXXX en dioxano.

Rendimiento: 0.82 g Espectro de masas ESI: m/z = 460 (M+H)+ Rt (HPLC): 5.34 (método C) 89.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fen¡lamino]-5-metil-tieno [2,3-0] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.8 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimi-dina-6-carboxílico racémico.

Rendimiento: 0.7 g 89.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis)-3-metoxi-ciclohexilox¡)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d\ pirimidina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4,a partir de 0.3 g de ácido 4-[4-Fluoro-2-((cis)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilico racémico y amoniaco (0.5 M en dioxano).

Rendimiento: 0.25 g Espectro de masas ESI: m/z = 431 (M+H)+ R, (HPLC): 2.13 (método I) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1.4: Ejemplo 110 Amida de ácido 4-[2-((cis)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-c] pirimidina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa 110.1 Éster metílico de ácido 4-[2-((cis)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 2.22 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-cf] pirimidina-6-carboxílico y 1.669 g del compuesto intermedio XXXXII en dioxano.

Rendimiento: 1.82 g Espectro de masas ESI: m/z = 429 (M+H)+ Rt (HPLC): 5.08 (método C) 110.2 Ácido 4-[2-((cis)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-o] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 1.82 g de éster metílico de ácido 4-[2-((cis)-3-metoxi-ciclohexilox¡)-pir¡din-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-a] pirimidina-6-carboxílico racémico.

Rendimiento: 1.75 g Espectro de masas ESI: m/z = 415 (M+H)+ Rt (HPLC): 4.06 (método C) 1 10.3 Amida de ácido 4-[2-((cis)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4, a partir de 0.1 g de ácido 4-[2-((cis)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-cdpirimidina-6-carboxílico racémico y amoniaco (7 M en metanol) usando TBTU en lugar de HATU en D F como disolvente.

Rendimiento: 0.078 g Espectro de masas ESI: m/z = 414 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.32 (método J) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1.4: estereoquímica relativa Ejemplo 131 Amida de ácido 4-[2-((trans)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil- tieno[2,3-cflpir¡midina-6-carboxílico racémica estereoquímica relativa 131.1 Éster metílico de ácido 4-[2-((trans)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pir¡midina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 1.48 g de éster etílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-cd pirimidina-6-carboxílico y 1.1 g del producto intermedio XXXXIII en dioxano.

Rendimiento: 1.14 g Espectro de masas ESI: m/z = 443 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.76 (método H) 131.2 Ácido 4-[2-((trans)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 1.1 g de éster etílico de ácido 4-[2-((trans)-3-Metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico racémico.

Rendimiento: 0.92 g Espectro de masas ESI: m/z = 415 (M+H)+ Rt (HPLC):4.15 (método C) 131.3 Amida de ácido 4-[2-((trans)-3-metoxi-ciclohexiloxi)-pir¡din-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4, a partir de 0.11 g de ácido 4-[2-((trans)-3-Metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico racémico y amoniaco (7 M en metanol) usando TBTU en lugar de HATU en DMF como disolvente.

Rendimiento: 0.068 g Espectro de masas ESI: m/z = 414 (M+H)+ R, (HPLC):3.4 (método C) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1.4: estereoquímica relativa Ejemplo 150 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((cis-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil- tieno[2,3-c0pirimidina-6-carboxilico Se añadieron 0.064 g de borohidruro de sodio a una mezcla de 0.7 g de 4-(4-fluoro-2-(4-oxociclohexiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6- carboxamida (ejemplo 21) en 20 mi de metanol a 0 °C. Se permitió calentar la mezcla durante toda la noche. La mezcla de reacción se filtró. El sólido recristalizó a partir de metanol caliente. La mezcla de isómeros cis y trans se separó mediante HPLC.

Isómero cis: Rendimiento: 0.412 g Espectro de masas ESI: m/z = 417 (M+H)+ R, (HPLC): 1.28 (método X) Ejemplo 151 (3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico 151.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 0.218 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico y 0.225 g del compuesto intermedio XXVI en dioxano.

Rendimiento: 0.301 g 151.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.301 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico.

Rendimiento: 0.262 g 151.3 (3-Dimetilamino-propil)-amida de acido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4, a partir de 0. 1 g de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico en DMF.

Rendimiento: 0.113 g Espectro de masas ESI: m/z = 502 (M+H)+ Rt (HPLC):1 ,23 (método X) Ejemplo 152 (3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-clpirimidina-6-carboxílico 152.1 Éster etílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)- fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c(]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 2.756 g de éster etílico de ácido 4-cloro-5-met¡l-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico y 2 g del compuesto intermedio XXVII en dioxano.

Rendimiento: 2.85 g Espectro de masas ESI: m/z = 446 (M+H)+ 152.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil- tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 2.8 g de éster etílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil- tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico.

Rendimiento: 2.29 g Espectro de masas ESI: m/z = 418 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.65 (método K) 152.3 Ácido 4-[2-((trans)-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-a] pirimidina-6-carboxílico Se añadieron 0.072 g de EDC a una mezcla de 0.13 g de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico y 0.054 g de N-Hidroxisuccinimida en DMF (2 mi). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante una noche, luego se diluyó con EtOAc y se lavó con salmuera (2x). La fase orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se evaporó.

El residuo se trató con 2 mi de DMF y se añadieron 213 µ? de 3-dimetilaminopropilamina. La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 40 minutos, luego se diluyó con EtOAc y se lavó con agua y salmuera (2x). La fase orgánica se secó con MgSO-? y se pasó por una frita hidrófoba.

Rendimiento: 0.089 g Espectro de masas ESI: m/z = 502 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.23 (método X) Ejemplo 153 (3-Pirrolidin-1-il-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c(lpirimidina-6-carboxílico Se añadieron 0.309 g de EDC a una suspensión de 0.573 g de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico y 0.231 g de N-Hidroxisuccinimida en 5 mi de DMF. La mezcla de reacción se agitó toda la noche a temperatura ambiente. Luego se añadieron EtOAc y agua. La suspensión se filtró, el filtrado se separó y la fase acuosa se desechó. La fase orgánica se lavó con agua y salmuera (2x), y agua. El disolvente se evaporó y el residuo se suspendió en éter y se filtró. Los residuos se combinaron, se lavaron con más éter y se secaron al aire al vacío.

Rendimiento: 0.707 g 153.2 (3-Pirrolidin-1-il-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-met¡l-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico Se añadieron 175 µ? de 3-pirrolidin-1 -il-propilamina a una solución de 0.12 g del compuesto 153.1 en 1 mi de DMF. La mezcla de reacción se agitó durante 1 h, luego se diluyó con EtOAc/H20. La mezcla se filtró, se lavó el sólido con agua y éter. El sólido se disolvió en d6-DMSO y se evaporó hasta sequedad (Genevac).

Rendimiento: 0.058 g Espectro de masas ESI: m/z = 528 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.24 (método X) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 153.2: Ejemplo 158 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil- tieno[2,3-cdpirimid¡na-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4, a partir de 7 g de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-h¡droxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3- d]pirimidina-6-carboxílico en DMF.

Rendimiento: 2.82 g Espectro de masas ESI: m/z = 417 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.62 (método K) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1.4: Ejemplo 175 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil- tieno[2,3-clpirimidina-6-carboxílico 175.1 Éster etílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)- fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c/]pirirnidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 5.842 g de éster etílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-cf] pirimidina-6-carboxílico y 4.9 g del compuesto intermedio XXXXXVII en dioxano.

Rendimiento: 2.85 g Espectro de masas ESI: m/z = 446 (M+H)+ 175.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cf] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 58.2, a partir de 9.1 g de éster etílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cf] pirimidina-6-carboxílico.

Rendimiento: 6.8 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ Rt (HPLC): 3.17 (método A) 175.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cf] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.1 g de ácido 4-[4 fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-t¡eno [2,3-d] pirimidina-6 carboxílico y amoniaco (7M en metanol).

Rendimiento: 0.072 g Espectro de masas ESI: m/z = 431 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.39 (método X) El siguiente compuesto se preparó de manera análoga a .4: Ejemplo 192 3-Morfol¡n-4-il-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)- fenilamino]-5-metil-tieno[2,3- ]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 153.1 , a partir de 0.267 g de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico y 0.143 g de EDC.

Rendimiento: 0.232 g 192.2 (3-Morfolin-4-il-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 153.2, a partir de 0.161 g del compuesto 192.1 y 222 pl de N-(3-aminopropil)morfolina.

Rendimiento: 0.130 g Espectro de masas ESI: m/z = 558 (M+H)+ R, (HPLC):1.29 (método X) El siguiente compuesto se preparó de manera análoga Ejemplo 200 (Piper¡d¡n-3-ilmetil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c(]pirimidina-6-carboxílico 200.1 Ester terc-butílico de ácido 3-[({4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carbonil}-amino)-metil]-piperidina-1 -carboxílico Se preparó de manera análoga a 153.2, a partir de 0.1 g del compuesto 192.1 y 0.15 g de éster terc-butílico de ácido 3-aminometil-piperidina-1 -carboxílico.

Rendimiento: 0. 19 g 200.2 (Piperidin-3-ilmetil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a IV.2, a partir de 0.119 g de éster terc-butílico de ácido 3-[({4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl p¡rimid¡na-6-carbonil}-amino)-metil]-piperidina-1-carboxílico. Rendimiento: 0.059 g Espectro de masas ESI: m/z = 558 (M+H)+ Ejemplo 201 [3-(3-H¡droxi-p¡rrolid¡n-1-il)-propil]-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metox¡-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-met¡l-tieno [2,3-d] pir¡midina-6-carboxílico 201.1 (3,3-Dietoxi-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metox¡-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-0] pirimidina-6-carboxilico Se preparó de manera análoga a 153.2, a partir de 0.287 g del compuesto 192.1 y 437 µ? de 1-amino-3,3-dietoxipropano.

Rendimiento: 0.266 g 201.2 (3-Oxo-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metox¡-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de 0.261 g del compuesto 201.1 y ácido p-toluenosulfónco en 3 mi de acetona se calentó a reflujo durante 30 minutos. Después se añadieron cloruro de metileno y solución acuosa de carbonato de potasio (10%) y se agitó la mezcla. Después de esto, la mezcla se pasó por una frita hidrófoba. El filtrado se evaporó.

Rendimiento: 0.213 g 201.3 [3-(3-Hidroxi-pirrolid¡n-1-¡l)-prop¡l]-amida de ácido 4-[4-fluoro-2- (trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c(lpirimidina-6-carboxílico Se añadieron 0.155 g de triacetoxiborohidruro de sodio a una solución de 0.21 g de (3-oxo-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-t¡eno [2,3-c j pirimidina-6-carboxílico y 43 µ? de 3-pirrolidinol en cloruro de metileno seguida de la adición de 49 µ? de ácido acético. La mezcla se agitó a TA durante una noche, se diluyó con cloruro de metileno y después se lavó con K2CO3 acuoso al 10%. La mezcla se pasó por una frita hidrófoba. El filtrado se evaporó y se purificó por cromatografía.

Rendimiento: 0.15 g Espectro de masas ESI: m/z = 558 ( +H)+ R, (HPLC): 1.28 (método X) Ejemplo 202 (3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-clpirimid¡na-6-carboxílico 202.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 0.507 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-cflpirimidina-6-carboxílico y 0.5 g del intermedio XXXXXVIII en dioxano.

Rendimiento: 0.905 g Espectro de masas ESI: m/z = 446 (M+H)+ Rt (HPLC):2.22 (método K) 202.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3- ]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.85 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirim¡d¡na-6-carboxílico.

Rendimiento: 0.753 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ Rt (HPLC): 3.22 (método A) 202.3 (3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.1 g de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico y 42 µ? de N,N-dimetil-1 ,3-propanodiamina.

Rendimiento: 0.097 g Espectro de masas ESI: m/z = 516 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.34 (método K) El siguiente compuesto se preparó de manera análoga a 1.4: Ejemplo 204 Amida de ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil- tieno[2,3-cdp¡rim¡d¡na-6-carboxílico 204.1 Éster metílico de ácido 4-[2-(4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3- ¡lamino]-5-metil-tíeno[2,3-c]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 1.78 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3-c lpirimidina-6-carboxílico y 1.53 g del compuesto intermedio XXXXXIX en dioxano.

Rendimiento: 1.8 g 204,2 Ácido 4-[2-(4-hidroxi-ciclohexiloxi)-pirid¡n-3-ilamino]-5-met¡l-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.363 g de éster metílico de ácido 4-[2-(4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-dJpirimidina-6-carboxílico.

Rendimiento: 0.221 g 204.3 Amida de ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimid¡na-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.1 g de ácido 4-[2-(trans-4-hidrox¡-ciclohexiloxi)-p¡ridin-3-¡lam carboxílico y amoniaco en metanol (7M) en DMF. Se separó del isómero cis por cromatografía.

Rendimiento: 0.008 g Ejemplo 205 Amida de ácido 4-[2-(cis-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-c )pirimid¡na-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.1 g de ácido 4-[2-(4-hidroxi-cidohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-met¡l-tieno[2,3-clpirimidina-6-carboxílico y amoniaco en metanol (7M) en DMF. Se separó del isómero trans por cromatografía.

Rendimiento: 0.009 g Espectro de masas ESI: m/z = 400 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.26 (método X) Ejemplo 206 (3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico 206.1 Éster metílico de ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 0.262 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico y 0.203 g del compuesto intermedio XXXXXX en dioxano.

Rendimiento: 0.352 g Espectro de masas ESI: m/z = 415 (M+H)+ 206.2 Ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-cd pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 58.2, a partir de 0.352 g de éster metílico de ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-cf] pirimidina-6-carboxílico.

Rendimiento: 0.083 g Espectro de masas ESI: m/z = 401 (M+H)+ 206.3 (3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.083 g de ácido 4- [2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-cfl pirimidina-6-carboxílico y 26 µ? de N,N-dimetil-1 ,3-propanodiamina en THF, usando TBTU en lugar de HATU.

Rendimiento: 0.077 g Espectro de masas ESI: m/z = 485 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.91 (método A) Ejemplo 207 Amida de ácido 4-[2-(trans-4-metoxi-c¡clohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-cf] pirimidina-6-carboxílico 207.1 Éster metílico de ácido 4-(2-hidroxi-piridin-3-ilamino)-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.1 , a partir de 0.2 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-cf] pirimidina-6-carboxílico y 0.1 g de 3-amino-piridin-2-ol en dioxano.

Rendimiento: 0.258 g Espectro de masas ESI: m/z = 317 (M+H)+ 207.2 Éster metílico de ácido 4-[2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo XVI.1 , a partir de 1.215 g de éster metílico de ácido 4-(2-hidroxi-pirid¡n-3-ilam¡no)-5-met¡l-tieno [2,3-c ] pirimidina-6-carboxílico y 0.6 g de cis-4-metoxiciclohexanol usando DTAD y trifenilfosfina (poliméricamente unida de Aldrich).

Rendimiento: 0.24 g Espectro de masas ESI: m/z = 429 (M+H)+ 207.3 Ácido 4-[2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil- tieno [2, 3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.24 g de éster metílico de ácido 4-[2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico.

Rendimiento: 0.21 g 207.4 (3-Dimetilamino-propil)-amida de ácido 4-[2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.005 g de ácido 4-[2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico y amoniaco (0.5 M en THF) en DMF, usando TBTU en lugar de HATU. Rendimiento: 0.034 g Espectro de masas ESI: m/z = 414 (M+H)+ Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1.4: Ejemplo 211 relativa ímica relativa El compuesto intermedio XXXXXXI (243 mg), éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (250 mg) y ácido p- toluenosulfónico (20 mg) en dioxano (3.0 mi) se calentaron a 1 10°C durante 8 h.

La mezcla de reacción se diluyó con DCM y NH4OH, se separó y se filtró. Se lavó el sólido con DCM y agua. El filtrado se separó y la capa orgánica se concentró al vacío. Se suspendió en agua el residuo, y se filtró. Los sólidos combinados se lavaron con agua y éter dietílico, después se secaron al vacío para dar el producto deseado.

Rendimiento: 366 mg 211.2. estereoquímica relativa Se añadió hidróxido de sodio acuoso 2.0 M a una mezcla del compuesto 211.1 (366 mg) en etanol (4.0 mi) y THF (4.0 mi), y se agitó a TA durante 4 h. La mezcla se diluyó con KHSO4 acuoso al 40% y se filtró. La torta de filtración se lavó con agua y éter dietílico y se secó al vacío para dar el producto deseado.

Rendimiento: 342 mg 211.3 2 estereoquímica relativa Se añadió HATU (388 mg) a 0°C a una mezcla del compuesto 211.2 (356 mg) y DI PEA (178 µ?) en DMF (4.0 mi). Después de 30 min, se añadió NH3 7 M en metanol (2.0 mi) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc y agua, y se filtró. La torta de filtración se lavó con EtOAc y agua, luego se suspendió en etanol y se evaporó al vacío. El residuo se suspendió en metanol, se filtró y se secó al vacío para dar el producto deseado.

Rendimiento: 200 mg ESI-EM: m/z = 419 [M+H]+ Rt (HPLC): 1.19 (método X) Ejemplo 212.1 estereoquímica relativa El compuesto intermedio XXXXV (379 mg), éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (344 mg) y ácido p- toluenosulfónico (27 mg) en dioxano (5.0 mi) se calentaron a 110°C durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con K2C03 acuoso al 10% y salmuera. La capa orgánica se concentró al vacío. El residuo se suspendió en metanol y se filtró para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 428 mg 212.2 estereoquímica relativa Se añadió HCI acuoso 2 M (10.0 mi) al compuesto 212.1 (672 mg) en THF (10.0 mi) y la mezcla se calentó a reflujo. Después de 30 minutos, la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se repartió entre cloruro de metileno e hidróxido sódico acuoso 2 M. La mezcla se filtró. La torta de filtración se lavó con éter dietílico y se secó al vacío para dar el producto deseado.

Rendimiento: 406 mg ESI-EM: m/z = 434 [M+H]+ 212.3 estereoquímica relativa Se preparó de manera análoga a 1.3, a partir de 0.333 compuesto 212.2.

Rendimiento: 250 mg Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.249 g del compuesto 212.3 y amoniaco (7 M en metanol).

Rendimiento: 183 mg ESI-EM: m/z = 419 [M+H]+ Rt (HPLC): 1.2 (método X) Ejemplo 213 estereoquímica relativa Una mezcla del compuesto 212.4 (84 mg), 2,2-dimetoxipropan (1.0 mi) y ácido p-toluenosulfónlco (16 mg) en DMF (1.0 mi) se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con K2C03 acuoso al 10%. La capa orgánica se concentró al vacío. Después de triturar con éter dietílico, el residuo se calentó en metanol/agua, se dejó enfriar y se filtró para dar el producto deseado.

Rendimiento: 60 mg ESI-EM: m/z = 459 [M+H]+ Rt (HPLC): 1.4 (método X) Ejemplo 214 oquímica relativa estereoquímica relativa El compuesto intermedio XXXXVI (89 mg), éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (83 mg) y ácido p-toluenosulfónico (7 mg) en dioxano (1.0 mi) se calentaron a 110°C durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y H3 acuoso 3M, y se pasó por una frita hidrófoba. La capa orgánica se concentró al vacío. El residuo se suspendió en metanol y se filtró para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 128 mg ESI-EM: m/z = 446 [M+H]+ El compuesto 214.1 (126 mg) en etanol (1.0 mi), THF (1.0 mi) e hidróxido sódico acuoso 2 M (0.7 mi) se calentaron a reflujo durante 1.5 h. Se añadió HCI 2 M acuoso a la mezcla de reacción y se filtró. La torta de filtración se suspendió en etanol y se concentró al vacío para dar el producto deseado.

Rendimiento: 119 mg 214.3 Se añadió HATU (123 mg) a 0°C a una mezcla del compuesto 214.2 (116 mg) y DIPEA (56 µ?) en DMF (1.5 mi). Después de 30 min, se añadió NH3 7 M en metanol (0.7 mi) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se concentró al vacío y se re-evaporó a partir de tolueno. El residuo se suspendió en metanol, se calentó a reflujo y se enfrió. La mezcla se filtró y la torta de filtración se lavó con éter dietílico para dar el producto deseado.

Rendimiento: 86 mg ESI-EM: m/z = 431 [M+H]+ R, HPLC-MS: 1.32 min (Método X) El siguiente compuesto se preparó de manera análoga Ejemplo 216 El compuesto intermedio XXXXVII (360 mg), éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-t¡eno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (285 mg) y ácido p-toluenosulfónico (22 mg) en dioxano (3.0 mi) se calentaron a 110°C durante 5 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar, se diluyó con cloruro de metileno y K2CO3 acuoso al 10% y se pasó por una frita hidrófoba. La capa orgánica se concentró al vacío para dar el producto deseado.

Rendimiento: 430 mg El compuesto 216.1 (430 mg) en metanol (5.0 mi), THF (5.0 mi) e hidróxido sódico acuoso 2 M (2.4 mi) se calentaron a reflujo durante 20 minutos. Después de la adición de HCI 2 M acuoso a la mezcla de reacción se concentró al vacío. El producto bruto se suspendió en agua, se filtró y se lavó con agua. La torta de filtración se re-evaporó a partir de etanol. El residuo se trituró con metanol caliente, se enfrió, se filtró y se secó al vacío para dar el producto deseado.

Rendimiento: 346 mg 216.3 2 estereoquímica relativa Se añadió HATU (91 mg) a 0°C a una mezcla del compuesto 216.2 (90 mg) y DIPEA (42 µ?) en DMF (1.0 mi). Después de 30 min, se añadió NH3 7 M en metanol (1.0 mi) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante el fin de semana. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se trató con etanol y agua, se filtró y se lavó con agua y éter dietílico. La torta de filtración se re-evaporó a partir de DIVISO para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 20 mg ESI-EM: m/z = 447 [M+H]+ Rt HPLC-MS:1.31 min (método X) El siguiente compuesto se preparó de manera análoga a 1.4: Ejemplo 218 tereoquímica relativa estereoquímica relativa El compuesto intermedio XXXXVIII (139 mg), éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (128 mg) y ácido p-toluenosulfónico (10 mg) en dioxano (2.0 mi) se calentaron a 100°C durante 2 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar y se trató con DCM y. K2CO3 acuoso al 10%. La mezcla se separó. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se trituró con MeOH para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 194 mg 218.2 estereoquímica relativa El compuesto 218.1 (194 mg) en MeOH (2.5 mi), THF (2.5 mi) e hidróxido sódico acuoso 2 M (1.0 mi) se calentaron a reflujo durante 30 minutos. La mezcla de reacción se dejó enfriar y se concentró al vacío. El producto bruto se trató con HCI 2 M acuoso y se filtró. La torta de filtración se lavó con agua, se suspendió en EtOH y se concentró al vacío para dar el producto deseado.

Rendimiento: 153 mg 218.3 Se añadió HATU (158 mg) a 0°C a una mezcla del compuesto 218.2 (150 mg) y DIPEA (72 µ?) en DMF (1.5 mi). Después de 30 min, se añadió NH3 7 M en metanol (0.75 mi) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc y agua, y se filtró. La torta de filtración se lavó con agua y éter dietílico y se purificó por cromatografía para dar el producto deseado.

Rendimiento: 50 mg ESI-E : m/z = 431 [M+H]+ Rt HPLC-MS:1.29 min (método X) Ejemplo 219 El compuesto intermedio XXXXIX (363 mg), éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (330 mg) y ácido p-toluenosulfónico (26 mg) en dioxano (5.0 mi) se calentaron a 110°C durante 4 h. La mezcla de reacción se trató con EtOAc y K2CO3 acuoso al 10%. La mezcla se filtró y la torta de filtración se lavó con éter dietílico. El filtrado se separó. La capa orgánica se concentró al vacío. El producto bruto se suspendió en metanol y se filtró para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 615 mg 219.2 estereoquímica relativa Se añadió HCI acuoso 2 M (10.0 mi) al compuesto 219.1 (644 mg) en THF (10.0 mi) y la mezcla se calentó a reflujo. Después de 20 min, la mezcla de reacción se dejó enfriar y se concentró al vacío. El residuo se repartió entre cloruro de metileno y K2CO3 acuoso al 10%. La mezcla se filtró. La torta de filtración se lavó con éter dietílico y se secó para dar el producto deseado.

Rendimiento: 531 mg El compuesto 219.2 (448 mg) en EtOH (5.0 mi), THF (5.0 mi) e hidróxido sódico acuoso 2 (3.0 mi) se agitaron a temperatura ambiente durante 1.5 horas. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El producto bruto se trató con KHSO4 acuoso al 10% y se filtró. La torta de filtración se lavó con agua y éter dietílico, y se secó para dar el producto deseado.

Rendimiento: 372 mg Se añadió HATU (91 mg) a 0°C a una mezcla del compuesto 219.3 (82 mg) y DIPEA (42 µ?) en DMF (1.0 mi). Después de 30 min, se añadió NH3 7 M en metanol (0.5 mi) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se dividió luego entre EtOAc y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera y agua. La mezcla resultante se filtró. La torta de filtración se lavó con éter dietílico y agua, y se secó para dar el producto deseado.

Rendimiento: 46 mg ESI-EM: m/z = 419 [M+H]+ Rt HPLC-MS:1.21 min (método X) Ejemplo 220 estereoquímica relativa Una mezcla del compuesto 219.4 (218 mg), 2,2-dimetoxipropan (1.0 mi) y ácido p-toluenosulfónico (20 mg) en DMF (1.0 mi) se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Se añadió más ácido p-toluenosulfónico (20 mg) y se siguió agitando a 60°C durante 45 min. La mezcla de reacción se diluyó con K2C03 acuoso al 10% y metanol. La mezcla se filtró para dar el producto deseado.

Rendimiento: 177 mg ESI-EM: m/z = 459 [M+H]+ R, HPLC- S:1.35 min (Método X) Ejemplo 221 relativa ca relativa El compuesto intermedio XXXXX (505 mg), éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (385 mg) y ácido p-toluenosulfónico (60 mg) en dioxano (5.0 mi) se calentaron a 110°C durante 8 h.

La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y K2CO3 acuoso al 10% y salmuera. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se trituró con metanol para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 488 mg 221.2 estereoquímica relativa El compuesto 221.1 (488 mg) en metanol (5.0 mi), THF (5.0 mi) e hidróxido sódico acuoso 2 (2.6 mi) se agitaron a reflujo durante 30 minutos. La mezcla de reacción se dejó enfriar y se trató con KHSO4 acuoso al 10%. La mezcla se filtró. La torta de filtración se lavó con agua y se secó para dar el producto deseado.

Rendimiento: 600 mg Se añadió HATU (228 mg) a 0°C a una mezcla del compuesto 221.2 (230 mg) y DIPEA (104 µ?) en DMF (3.0 mi). Después de 30 min, se añadió NH3 7 M en metanol (1.5 mi) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante el fin de semana. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se trató con THF (3.0 mi) y HCI acuoso 2 M (3 mi) a reflujo durante 20 min. La mezcla se repartió entre EtOAc y agua, y se filtró. La torta de filtración se lavó con agua y éter dietílico para dar el producto deseado.

Rendimiento: 134 mg ESI-EM: m/z = 419 [M+H]+ Rt HPLC-MS: 1.21 min (método X) Ejemplo 222 estereoquímica relativa Se añadió HATU (228 mg) a 0°C a una mezcla de 221.2 (230 mg) y DIPEA (104 µ?) en DMF (3.0 mi). Después de 30 min, se añadió 3- dimetilaminopropilamina (315 µ?) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante el fin de semana. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se trató con THF (3.0 mi) y HCI acuoso 2 M (3 mi) a reflujo durante 20 min. La mezcla se repartió entre EtOAc y K2CO3 acuoso al 10%. La capa orgánica se concentró al vacío. El residuo se trituró con metanol, se filtró y se lavó con éter dietílico para dar el producto deseado.

Rendimiento: 65 mg ESI-EM: m/z = 504 [M+H]+ R, HPLC-MS:1.18 min (método X) Ejemplo 223 relativa relativa Se preparó de manera análoga a 1.1, a partir de 0.091 g del compuesto intermedio XXXXXI y 0.076 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico.

Rendimiento: 76 mg 223.2 estereoquímica relativa El compuesto 223.1 (76 mg) en MeOH (0.5 mi), THF (0.5 mi) e hidróxido sódico acuoso 2 M (0.4 mi) se agitaron a reflujo durante 20 minutos. La mezcla de reacción se dejó enfriar y se trató con KHS04 acuoso al 10%. La mezcla se filtró. La torta de filtración se lavó con agua y se secó para dar el producto deseado.

Rendimiento: 70 mg Se añadió HATU (64 mg) a 0°C a una mezcla del compuesto 223.2 (94 mg) y DIPEA (29 µ?) en DMF (1.0 mi). Después de 30 min, se añadió NH3 7 M en metanol (0.5 mi) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante el fin de semana. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se trató con THF (1.0 mi) y HCI acuoso 2 M (1.0 mi) a reflujo durante 20 min. La mezcla se diluyó con EtOAc y se lavó con agua y K2CO3 acuoso al 10%. La fase orgánica se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía para obtener el producto deseado.

Rendimiento: 15 mg ESI-EM: m/z = 419 [M+H]+ Rt HPLC-MS:1.20 min (método X) Ejemplo 224 estereoquímica relativa El compuesto intermedio XXXXXII (384 mg), éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (429 mg) y ácido p-toluenosulfónico (34 mg) en dioxano (5.0 mi) se calentaron a 110°C durante 4 h. La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y se lavó con K2CO3 acuoso al 10% y salmuera. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se trató con éter dietílico, se filtró y se lavó para dar el producto deseado.

Rendimiento: 480 mg 224.2 estereoquímica relativa El compuesto 224.1 (200 mg) en metanol (1.5 mi), THF (1.5 mi) e hidróxido sódico acuoso 2 M (1.3 mi) se agitaron a reflujo durante 20 minutos. Después de la adición de HCI 2 M acuoso (3.0 mi), la mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se trató con agua, se filtró y se lavó con agua. El producto bruto se re-evaporó a partir de etanol antes de tratarse con éter dietílico. La mezcla se filtró y la torta de filtración se lavó con éter dietílico para dar el producto deseado.

Rendimiento: 156 mg 224.3 Se añadió HATU (207 mg) a 0°C a una mezcla del compuesto 224.2 (156 mg) y DIPEA (95 µ?) en DMF (2.0 mi). Después de 30 min, se añadió NH3 7 M en metanol (1 .0 mi) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se concentró al vacío y se re-evaporó a partir de tolueno. El residuo se trató con metanol caliente. La mezcla se dejó enfriar, luego se filtró para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 78 mg ESI-EM: miz = 403 [M+H]+ Rt HPLC- S:1.28 min (método X) Ejemplo 225 El compuesto intermedio XXXXXIII (990 mg), éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (948 mg) y ácido p-toluenosulfónico (74 mg) en dioxano (10.0 mi) se calentaron a 110°C durante 8 h. La mezcla de reacción se diluyó con cloruro de metileno y K2CO3 acuoso al 10%. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío. El residuo se trató con metanol para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 898 mg 225.2 Ácido 4-(4-fluoro-2-(3-hidroxiciclopentiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d]pirimidina-6-carboxílico 4-(4-Fluoro-2-(3-hidroxiciclopentiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxilato de metilo (150 mg) en metanol (2.0 mi), THF (2.0 mi) e hidróxido de sodio acuoso 2M (0.9 mi) se agitaron a reflujo durante 40 min. Después de añadir HCI acuoso 2 M (8.0 mi), la mezcla de reacción se concentró al vacío. La capa acuosa se filtró y se lavó con agua. El producto bruto se re-evaporó a partir de EtOH para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 141 mg 225.3. 4-(4-fluoro-2-(3-hidroxic¡clopentiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxamida Se añadió HATU (147 mg) a 0°C a una mezcla de ácido 4-(4-fluoro-2-(3-hidroxiciclopentiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (130 mg) y DIPEA (67 µ?) en DMF (2.0 mi). Después de 30 min, se añadió NH3 7 M en MeOH (1.0 mi) y la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente durante el fin de semana. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se trató con MeOH caliente. La mezcla se dejó enfriar, luego se filtró para proveer el producto deseado.

Rendimiento: 88 mg ESI-EM: m/z = 403 [M+H]+ R, HPLC-MS:1.27 min (método X) Ejemplo 226 Se añadió EDC (147 mg) a una mezcla de 268 mg de ácido 4-(4-fluoro-2-(3-hidrox¡ciclopentiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (225.2) y N-hidroxisuccinimida (110 mg) en DMF (3.0 mi). Después de agitar a temperatura ambiente durante una noche, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con agua y salmuera. La capa orgánica se pasó por una frita hidrófoba y se concentró al vacío para proveer el producto deseado. Rendimiento: 314 mg 226.2. N-(3-(dimetilamino) propil)-4-(4-fluoro-2-(3-hidroxiciclopentiloxi) fenilamino)-5-metiltieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 153.2, a partir de 0.145 g del compuesto 226.1 y 3- dimetilaminopropilamina (200 µ?) Rendimiento: 88 mg ESI-EM: m/z = 488 [M+H]+ Rt HPLC-MS:1.22 min (método X) Ejemplo 227 4-(4-Fluoro-2-(3-hidroxiciclopentiloxi)fenilamino)-N-(2-hidroxietil)-5-metilt¡eno[2,3-d]pirimidina-6-carboxamida Se preparó de manera análoga a 153.2, a partir de 0.165 g del compuesto 226.1 y 2-aminoetanol (100 µ?).

Rendimiento: 84 mg ESI-EM: m/z = 447 [M+H]+ Rt HPLC-MS: 1.25 min (Método X) Ejemplo 228 Éster terc-butílico de ácido {(1S,3S)-3-[2-(6-carbamoil-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamino)-5-fluoro-fenoxi]-ciclopentil}-carbámico 228.1 Éster metílico de ácido 4-[2-((1S,3S)-3-amino-ciclopentilox¡)- El compuesto intermedio XXXVII (155 mg), éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (121 mg) y ácido p-toluenosulfónico (15 mg) en dioxano (3.0 mi) se calentaron a 1 10°C durante 2 horas bajo irradiación de microondas. La mezcla de reacción se filtró y la torta de filtración se lavó con éter dlisopropílico y se secó para dar el compuesto deseado. Rendimiento: 150 mg ESI-EM: m/z = 417 [M+H]+ 228.2 Éster metílico de ácido 4-[2-((1 S,3S)-3-terc-butoxicarbonilamino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de éster metílico de ácido 4-[2-((1S,3S)-3-amino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c ]pirimidina-6-carboxílico (150 mg), dicarbonato de di-terc-butilo (173 mg) y trietilamina (145 µ?) en THF (10 mi) se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se concentró y el producto bruto se repartió entre DCM y agua. La capa orgánica se secó y se concentró, y el residuo se trituró con éter diisopropílico para dar el compuesto deseado.

Rendimiento: 113 mg ESI-EM: m/z = 517 [M+H]+ Rt HPLC-MS:4.05 min (método A) Rf (TLC): 0.29 (gel de sílice, DCM) 228.3 Ácido 4-[2-((1 S,3S)-3-terc-butoxicarbonilamino-ciclopentiloxi)- 4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c(]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de éster metílico de ácido 4-[2-((1S,3S)-3-ferc-butoxicarbonilamino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (100 mg) e hidróxido de litio (133 mg) en THF/MeOH/H20 1/1/1 (15 mi) se agitó a TA durante el fin de semana. La mezcla de reacción se acidificó con HCI acuoso y se extrajo con DCM. La capa orgánica se secó, se concentró, y el residuo se trituró con éter diisopropílico para dar el compuesto deseado.

Rendimiento: 57 mg ESI-EM: m/z = 503 [M+H]+ Rt HPLC-MS:3.95 min (método A) 228.4 Éster terc-butílico de ácido {(1 S,3S)-3-[2-(6-carbamoil-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ilamino)-5-fluoro-fenoxi]-ciclopentil}-carbámico Quiral Una mezcla de ácido 4-[2-((1S,3S)-3-ferc-butoxicarbonilamino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c ]pirimid¡na-6-carboxílico (115 mg), TBTU (81 mg) y DIPEA (88 µ?) en THF (15 mi) se agitó a TA durante 30 minutos. Después de añadir amoniaco 0.5 M en dioxano (458 µ?) y DMF, la mezcla de reacción se agitó a TA durante la noche. La mezcla de reacción se concentró, se diluyó con agua y se extrajo con DCM. La capa orgánica se concentró al vacío y el producto bruto se purificó por cromatografía para dar el producto deseado.

Rendimiento: 53 mg ESI-EM: m/z = 502 [M+H]+ Rt HPLC-MS:2.78 min (método A) Rf (TLC): 0.69 (gel de sílice, DCM/MeOH/NH3 80/20/1) Ejemplo 229 Trifluoroacetato de amida de ácido 4-[2-((1 S,3S)-3-amino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c(]pirimidina-6-carboxíl¡co Al compuesto 228.4 (310 mg) en DCM 815 mi) se le añadió, a 0°C, TFA (1.7 mi) y se agitó a TA durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró a TA y el producto bruto se trituró con éter diisopropílico para dar el producto deseado.

Rendimiento: 376 mg ESI-EM: m/z = 402 [M+H]+ Rt HPLC-MS:2.56 min (método A) Rf (TLC): 0.37 (gel de sílice, DCM/MeOH/NH3 80/20/1) Ejemplo 230 Amida de ácido 4-[2-((1S,3S)-3-acetilamino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Quiral Se añadió cloruro de acetilo (21 µ?) a 0°C a una mezcla de trifluoroacetato de amida de ácido 4-[2-((1S,3S)-3-amino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c0pirimidina-6-carboxílico (compuesto 229.206 mg) y DIPEA (348 µ?) en DCM (25 mi) y se agitó a TA durante 4 horas. La mezcla de reacción se concentró, se diluyó con agua y se extrajo con DCM. La capa orgánica se secó, se concentró y el producto bruto se purificó por cromatografía para dar el producto deseado.

Rendimiento: 55 mg ESI-EM: m/z = 444 [M+H]+ Rt HPLC-MS:3.04 min (método A) Rf (TLC): 0.74 (gel de sílice, DCM/MeOH 4/1 ) Ejemplo 231 (2-Hidroxi-etil)-amida de ácido 4-[2-((1S,3S)-3-acet¡lamino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-t¡eno[2,3-d]pirim¡dina-6-carboxíl¡co 231.1 Éster metílico de ácido 4-[2-((1S,3S)-3-acetilamino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-c/]pirim¡dina-6-carboxílico Quiral El compuesto intermedio XXXXXXII (155 mg), éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (242 mg) y ácido p-toluenosulfónico (34 mg) en dioxano (4.0 mi) se calentaron a 1 10°C durante 1 hora bajo irradiación de microondas. La mezcla de reacción se concentró, se lavó con agua y se concentró. El producto bruto se purificó por cromatografía y se trituró con éter diisopropílico para dar el compuesto deseado.

Rendimiento: 196 mg ESI-EM: m/z = 459 [M+H]+ Rt HPLC-MS:3.02 min (método A) Rf (TLC): 0.34 (gel de sílice, DCM/MeOH/NH3 90/10/1) 231.2 Ácido 4-[2-((1S,3S)-3-acetilamino-ciclopentiloxi)-4-fl fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Quiral Se preparó de manera análoga al ejemplo 228.3, a partir de éster metílico de ácido 4-[2-((1S,3S)-3-acetilamino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilam¡no]-5-metil-tieno[2,3-c/]p¡rim¡d¡na-6-carboxílico, compuesto 231.1 (1.44 g).

Rendimiento: 1.15 g ESI-EM: m/z = 445 [M+H]+ Rt HPLC-MS:2.72 min (método A) 231.3 (2-Hidroxi-etil)-amida de ácido 4-[2-((1S,3S)-3-acetilamino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-(^pirimid¡na-6-carboxíli8 Se sintetizó de manera análoga al ejemplo 225.3, a partir de ácido 4-[2-((1S,3S)-3-acetilamino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3- d]pirimidina-6-carboxilico (111 mg) y 2-aminoetanol (18 µ?). La mezcla de reacción se concentró, el residuo se repartió entre DCM y agua, y la capa orgánica se secó y se concentró nuevamente. El producto bruto se purificó por cromatografía para obtener el producto deseado.

Rendimiento: 32 mg ESI-EM: m/z = 488 [M+H]+ Rt HPLC-MS:2.43 min (método A) Rf (TLC): 0.21 (gel de sílice, DCM/MeOH/NH3 90/10/1 ) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 231.3: Quiral Ejemplo 240 Amida de ácido 4-{2-[(1S,3S)-3-(acet¡l-metil-amino)-ciclopentiloxi]-4-fluoro- fenilamino}-5-metil-tieno[2,3-c(]pirimidina-6-carboxílico Quiral 240.1 Éster metílico de ácido 4-{2-[(1S,3S)-3-(acetil-metil-am ddopentiloxi]-4-fluoro-fenilamino}-5-metil-tieno[2,3-c(]pirimidina-6-carboxílico Quiral Se preparó de manera análoga al ejemplo 231.1 , a partir del compuesto intermedio XXXVIII (266 mg) y éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (243 mg).

Rendimiento: 242 mg ESI-EM: m/z = 473 [M+H]+ R, HPLC-MS:3.13 min (método A) Rf (TLC):0.52 (gel de sílice, DCM/MeOH/NH3 90/10/1) 240.2 Ácido 4-{2-[(1S,3S)-3-(acetil-metil-amino)-ciclopentiloxi]-4-fluoro-fenilamino}-5-metil-tieno[2,3-c]pirimidina-6-carboxílico Quiral Se preparó de manera análoga al ejemplo 228.3, a partir de éster metílico de ácido 4-{2-[(1S,3S)-3-(acetíl-met¡l-amino)-ciclopentiloxi]-4-fluoro-fenilamino}-5-metil-tieno[2,3-o]pirimidina-6-carboxílico (185 mg).

Rendimiento: 126 mg ESI-EM: m/z = 459 [M+H]+ Rt HPLC-MS:2.80 min (método A) 240.3 Amida de ácido 4-{2-[(1S,3S)-3-(acetil-metil-amino)- ciclopent¡lox¡]-4-fluoro-fenilam¡no}-5-metil-tieno[2,3-c lpirim¡cl¡na-6-carboxíl¡co Quiral Se preparó de manera análoga al ejemplo 225.3, a partir de ácido 4- {2-[(1S,3S)-3-(acetil-metil-amino)-ciclopentilox¡]-4-fluoro-fenilam¡no}-5-met¡ tieno[2,3-cdp¡rimidina-6-carboxílico (126 mg) y amoniaco 0,5 M en dioxano (2,1 mi).

Rendimiento: 37 mg ESI-EM: m/z = 458 [M+H]+ Rt HPLC-MS:2.55 min (método A) Rf (TLC): 0.30 (gel de sílice, DCM/MeOH/NH3 90/10/1 ) Ejemplo 241 Cianometil-amida de ácido 4-[2-(trans-3-Acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 35.1 , a partir del compuesto 35.2 (80 mg) y aminoacetonitrilo (14 mg).

Rendimiento: 70 mg ESI-EM: m/z = 469 [M+H]+ Rt HPLC-MS:1.61 min (método L Ejemplo 242 Separación en 4-(4-fluoro-2-(cis-3-hidroxiciclopentiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxamida y 4-(4-fluoro-2-(trans-3-hidroxiciclopentiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carbox La mezcla cis/trans de 225.3 (50 mg) se separó en los isómeros por cromatografía SFC: Columna: Daicel ASH 250 mm x 4.6 mm Fase móvil: CO2 / Metanol 60:40 (con adición de 0.2% Dietil amina) Primera elución: isómero cis; segunda elución: isómero trans 4-(4-fluoro-2-(cis-3-hidroxiciclopentiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimi^ carboxamida Rendimiento: 5 mg ESI-EM: m/z = 403 [M+H]+ 4-(4-fluoro-2-(trans-3-hidroxiciclopentiloxi)fenilamino)-5-metiltieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxamida Rendimiento: 5 mg ESI-EM: m/z = 403 [M+H]+ Ejemplo 243 Amida de ácido 4-(2-ciclobutoxi-4-fluoro-fenilamino)-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina- 6-carboxílico 243.1 Éster metílico de ácido 4-(4-fluoro-2-hidroxi-fenilamino)-5-met¡l-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3-d]pir¡m¡dina-6-carboxíl¡co (500 mg), 2-amino-5-fluor-fenol (265 mg) y ácido p-toluenosulfónico (75 mg) en dioxano (5 mi) se agitó a 140°C durante 15 minutos bajo irradiación de microondas. La mezcla de reacción se dejó enfriar, se filtró y la torta de filtración se lavó con dioxano, MeOH y éter dietílico para dar el producto deseado.

Rendimiento: 605 mg ESI-EM: m/z = 334 [M+H]+ 243.2 Éster metílico de ácido 4-(2-ciclobutoxi-4-fluoro-fenilamino)-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de éster metílico de ácido 4-(4-fluoro-2-hidroxi-fenilamino)-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (200 mg), carbonato de potasio (166 mg) y bromociclobutano (113 µ?) en DMF (3 mi) se agitó a 60°C durante el fin de semana. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con agua y salmuera. La capa orgánica se concentró y el residuo se trituró con éter dietílico para dar el compuesto deseado.

Rendimiento: 130 mg 243.3 Ácido 4-(2-ciclobutoxi-4-fluoro-fenilamino)-5-metil-tieno[2,3-cflpirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.3, a partir de éster metílico de ácido 4-(2-ciclobutoxi-4-fluoro-fenilamino)-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxíl¡co (130 mg).

Rendimiento: 125 mg 243.4 Amida de ácido 4-(2-ciclobutoxi-4-fluoro-fenilamino)-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4, a partir de ácido 4- (2-ciclobutoxi-4-fluoro-fenilamino)-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico (127 mg) y amoniaco 7 M en MeOH (1 mi).

Rendimiento: 45 mg ESI-EM: miz = 372 [M+H]+ Rt HPLC-MS:1.42 min (método X) Ejemplo 244 Amida de ácido 4-(2-ciclopentoxi-4-fluoro-fenilamino)-5-metil-tieno[2,3-cOpirimidina-6-carboxílico 244.1 Éster metílico de ácido 4-(2-ciclopentoxi-4-fluoro-fenilamino)- 5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 243.2, a partir de éster metílico de ácido 4-(4-fluoro-2-hidroxi-fenilamino)-5-metil-tieno[2,3-clpirimidina-6-carboxílico (67 mg) y bromociclopentano (60 mg).

Rendimiento: 46 mg 244.2 Ácido 4-(2-ciclopentoxi-4-fluoro-fenilamino)-5-metil-tieno[2,3-c/jpirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.3, a partir de éster metílico de ácido 4-(2-ciclopentoxi-4-fluoro-fenilamino)-5-metil-tieno[2,3-cOpirimidina-6-carboxílico (73 mg).

Rendimiento: 62 mg 244.3 Amida de ácido 4-(2-ciclopentoxi-4-fluoro-fenilamino)-5-metil-tieno[2,3-Gf]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga al ejemplo 1.4, a partir de ácido 4-(2-ciclopentoxi-4-fluoro-fenilamino)-5-metil-tieno[2,3-c(]pirimidina-6-carboxílico (59 mg) y amoniaco 7 M en eOH (0.5 mi).

Rendimiento: 27 mg ESI-EM: m/z = 387 [M+H]+ Rt HPLC-MS: 1.45 min (método X) Ejemplo 245 (4-Dimetilam¡no-but-2-inil)-amida de ácido 4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-t¡eno [2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 35.3, a partir de 0.080 g de ácido 4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)- -fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (comp. 35.2) y 0.045 g de 4-(dimetilamino)-but-2-inilamin*2HCI.

Rendimiento: 0.0075 g Espectro de masas ESI: m/z = 525 (M+H) + Ejemplo 246 (2-Amino-ciclopropil)-amida de ácido 4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d]pirimidina-6-carboxílico 246.1 Ester terc-butílico de ácido [2-({4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d]pirimidina-6-carbonil}amino)-ciclopropil]-carbámico Se preparó de manera análoga 35.3, a partir de 0.080 g de ácido 4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (comp. 35.2) y 0.050 g de hidrocloruro de (1 R,2R)-2-aminociclopropilcarbamato de tere-butilo. 246.2 (2-Amino-ciclopropil)-amida de ácido 4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d]pirim¡dina-6-carboxílico A una mezcla de 0.15 g de éster terc-butílico de ácido [2-({4-[2-(trans-3-acetilamino-ciclobutoxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carbonil} amino)-ciclopropil]-carbámico en 5 mi de dioxano se le añadió solución de ácido clorhídrico 1 M en Dioxano y se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por cromatografía.

Rendimiento: 0.014 g Espectro de masas ESI: m/z = 485 (M+H) + Rt (HPLC):1.71 min (método L) Ejemplo 247 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((1R,2R)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de reacción de 1.00 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3d]_pirimidina-6-carboxílico, 1.98 g del compuesto intermedio XVIII y 0.071 g de ácido p-toluenosulfónico en 20 mi de dioxano se calentó a 100°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se dejó alcanzar la TA y se diluyó con agua. La mezcla se filtró. El sólido se lavó con agua. El sólido se secó al vacío a 65°C.

Rendimiento: 1.75 g Espectro de masas ESI: m/z = 446 (M+H) + Rt (HPLC): 2.41 min (método L) Ejemplo 248 Ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilico 248.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxíl¡co Se preparó de manera análoga a 247, a partir de 1.00 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3d]_pirimidina-6-carboxílico y 1.98 g del compuesto intermedio XVIII. 248.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pihmidina-6-carboxíl¡co Una mezcla de 1.75 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico, solución de hidróxido sódico 4M, 20 mi de THF y 20 mi de MeOH se agitó a TA durante una noche.

La mezcla de reacción se acidificó por adición de ácido clorhídrico, se diluyó con 80 mi de agua y se filtró. El sólido se lavó con agua y se secó al vacío a 65°C. Rendimiento: 1.575 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.05 min (método L) Ejemplo 249 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico 249.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-metoxi-c¡clohexiloxi)-fenilamino]-5-met¡l-tieno[2,3-d]pir¡midina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 247, a partir de 1.00 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3d] pirimidina-6-carboxilico y 1.98 g del compuesto intermedio XVIII. 249.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5- metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilico Una mezcla de 1.75 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-((1R,2R)-2-metoxi-c¡clohexilox¡)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pir¡midina-6-carboxílico, solución de hidróxido sódico 4M, 20 mi de THF y 20 mi de MeOH se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se acidificó por adición de ácido clorhídrico, se diluyó con 80 mi de agua y se filtró. El sólido se lavó con agua y se secó al vacío a 65°C.

Rendimiento: 1.575 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.05 min (método L) 249.3 Amida de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-frenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de 0.21 g de ácido 4-[4-fluoro-2-((1 R,2R)-2-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]_pirimidina-6-carboxíclico, 5 mi de amoniaco 0.5 M en dioxano, 0.22 g de HATU, 0.10 mi de DIPEA y 2 mi de DMF se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se filtró. El sólido se secó al vacío a 65°C.

Rendimiento: 0.21 1 g Espectro de masas ESI: m/z = 431 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.80 min (método L) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1 .4, usando TBTU y TEA en lugar de HATU y DIPEA: Ejemplo 256 Enantiómeros puros de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-2- hidrox¡-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (La configuración absoluta no se ha determinado, es decir, el compuesto puede ser la estructura que se muestra o el otro enantiómero).

Se preparó de manera análoga a 247, a partir de 0.437 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3d]_pirimidina-6-carboxílico y 0.410 g del compuesto intermedio XXII.3.

Rendimiento: 0.707 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.08 min (método L) Ejemplo 257 Enantiómeros puros de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-2- hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilam¡no]-5-me (La configuración absoluta no se ha determinado, es decir, el compuesto puede ser la estructura que se muestra o el otro enantiómero).

Se preparó de manera análoga a 247, a partir de 0.451 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3d]_pirimidina-6-carboxílico y 0.420 g del compuesto intermedio XXII.4 Rendimiento: 0.783 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.03 min (método L) Ejemplo 258 Enantiómero puro de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-2-hidroxi-ciclohexiloxi)- fen¡lamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (La configuración absoluta no se ha determinado, es decir, el compuseto puede ser la estructura que se muestra o el otro enantiómero).

Se preparó de manera análoga a 51.2, a partir de 0.630 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-met¡l- tieno[2,3-d]pir¡midina-6-carboxílico (comp. 256) Rendimiento: 0.594 g Espectro de masas ESI: m/z = 418 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.78 min (método L) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1.4, usando TBTU y TEA en lugar de HATU y DI PEA: Ejemplo 262 Enantiómeros puros de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-2-hidroxi- ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico (La configuración absoluta no se ha determinado, es decir, el compuesto puede ser la estructura que se muestra o el otro enantiómero).

Se preparó de manera análoga a 51.2, a partir de 0.72 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(cis-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil- tieno[2,3-d]pirim¡dina-6-carboxílico (comp. 257) Rendimiento: 0.585 g Espectro de masas ESI: m/z = 418 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.77 min (método L) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1.4, usando TBTU en lugar de HATU y sin DIPEA: El siguiente compuesto se preparó de manera análoga a 1.4, usando TBTU y TEA en lugar de HATU y DIPEA: Ejemplo 266 (2-Hidroxi-etil)-amida de ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-p¡rimidin-3- ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico 266.1 Éster metílico de ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-pirimidin- 3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de reacción de 2.913 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3d]_pirimidina-6-carboxílico, 2.5 g del compuesto intermedio XXIV y 0.413 g de ácido p-toluenosulfónico en 60 mi de dioxano se calentó a 110°C en el microondas durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por cromatografía.

Rendimiento: 1.547 g Espectro de masas ESI: m/z = 415 (M+H)+ 266.2 Ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-pirimidin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de reacción de 1.541 g de éster metílico de ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-pirimidin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidin carboxílico, 2.00 g de hidróxido de litio, 13.3 mi de THF, 13.3 mi de MeOH y 13.3 mi de agua se agitó a TA durante una noche. Luego la mezcla se acidificó por adición de ácido clorhídrico y se extrajo con DCM. La fase orgánica se secó, se filtró, y el filtrado se concentró.

Rendimiento: 1.683 g Espectro de masas ESI: m/z = 401 (M+H)+ 266.3 (2-Hidroxi-etil)-amida de ácido 4-[2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)- pirimidin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilico Se preparó de manera análoga a 1 .4, a partir de 0.2 g de ácido 4-[4- fluoro-2-(cis-2-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6- carboxílico y 36 µ? de etanolamina.

Rendimiento: 0.051 g Espectro de masas ESI: m/z = 444 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.27 min (método A) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1.4: Ejemplo 271 [3-(2-Oxo-pirrolidin-1-il)-propil]-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi- ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico 271.1 Ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5- metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de reacción de 2.56 g de éster etílico de ácido 4-cloro- 5-metil-tieno[2,3d]_pirimidina-6-carboxílico, 1.86 g del compuesto intermedio XXVII y 0.25 g de ácido p-toluenosulfónico en 50 mi de dioxano se calentó a 100°C durante 1.5 horas. A TA, la mezcla de reacción se diluyó con agua. La mezcla se filtró y el sólido se lavó con agua. El sólido se secó al vacío a 50°C. Al sólido se le añadieron 10 mi de THF, 10 mi de MeOH, 2 mi de solución de hidróxido sódico 2M. Esta mezcla se agitó a TA durante una noche. La mezcla se concentró, se neutralizó con ácido clorhídrico 2M y se filtró. El sólido se lavó con agua y se trituró con éter dietílico. El sólido luego se secó al vacío a 50°C. Rendimiento: 2.14 g Espectro de masas ESI: m/z = 418 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.05 min (método K) 271.2 [3-(2-oxo-Pirrolidin-1-il)-propil]-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans- 4-hidroxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 0.042 g de ácido 4- [4-fluoro-2-(trans-4-hidroxi-ciclohexilox¡)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico y 0.015 g de 1-(3-aminopropil)-2-pirrolidinona. El residuo se purificó por cromatografía.

Rendimiento: 0.034 g Espectro de masas ESI: m/z = 542 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.18 min (método E) Ejemplo 272 Éster metílico de ácido 2-({4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-t¡eno[2,3-d]pirimidina-6-carbonil}-amino)-3-hidroxi-propiónico 272.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohex¡lox¡)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de reacción de 11.2 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3d]_pirimidina-6-carboxílico, 10.0 g del compuesto intermedio XXXXXVII y 1.76 g de ácido p-toluenosulfónico en 95 mi de dioxano se calentó a 90°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se vertió en agua y se filtró. El sólido se lavó con agua y se disolvió en DCM. La fase orgánica se secó y luego se filtró. El filtrado se concentró.

Rendimiento: 15.914 g Espectro de masas ESI: m/z = 446 (M+H)+ 272.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se preparó de manera análoga a 58.2, a partir de 15.914 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil- tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxíl¡co.

Rendimiento: 14.54 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ 272.3 (2S)-2-{[4-({4-Fluoro-2-[(4-metoxiciclohexil)oxi]fenil}amino)-5- metiltieno[2,3-d]pirimidin-6-il]formamido}-3-hidroxipropanoato de metilo Se preparó de manera análoga a 1.4, a partir de 1.50 g de ácido 4- [4-fluoro-2-(trans-4-metoxi-ciclohexiloxi)-fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidin 6-carboxílico y 0.541 g de hidrocloruro de éster métilico de L-(+)-serina.

Rendimiento: 1.648 g Espectro de masas ESI: m/z = 533 (M+H)+ Rt (HPLC): 2.87 min (método A) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1.4: Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 1 .4, usando TBTU en lugar de HATU: Ejemplo 281 Éster metílico de ácido 4-[2-(4-amino-ciclohexiloxi)-piridin-3-¡lamino]-5-metil- tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de reacción de 0.5 g de éster metílico de ácido 4-cloro- 5-metil-tieno[2,3d]_pirimidina-6-carboxílico, 0.636 g del compuesto intermedio XXXXXXIII y 0.04 g de ácido p-toluenosulfónico en 10 mi de isopropanol se calentó a 140°C en el microondas durante 14 min. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por cromatografía.

Rendimiento: 0.36 g Espectro de masas ESI: m/z = 414 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.22 min (método K) Ejemplo 282 Ácido 4-[2-(4-amino-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidi 6-carboxílico Una mezcla de 0.05 g de éster metílico de ácido 4-[2-(4-amino-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno [2,3-d] pirimidina-6-carboxílico y solución de hidróxido sódico 1 M en 5 mi de MeOH se agitó a 70CC durante I nora. La mezcla de reacción se neutralizó con ácido clorhídrico 1 M y se concentró. El residuo se disolvió en DCM y MeOH, se secó y se filtró. El filtrado se concentró. El residuo se trituró con éter dietílico.

Rendimiento: 0.048 g Espectro de masas ESI: m/z = 400 (M+H)+ Ejemplo 283 Amida de ácido 4-[2-(4-amino-ciclohexiloxi)-pir¡din-3-ilam¡no]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico 283.1 Éster metílico de ácido 4-[2-(4- terc-butoxicarbonilamino-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de reacción de 0.2 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3d]_pirimidina-6-carboxílico, 0.506 g del compuesto intermedio XXXXXXIII y 0.4 mi de DIPEA en 6 mi de Isopropanol se calentó a 140°C en el microondas durante 7 horas. La mezcla de reacción se enfrió durante una noche y se filtró. El sólido se lavó con éter dietílico, el residuo se disolvió en DCM+MeOH, se filtró y se concentró.

Rendimiento: 0.140 g Espectro de masas ESI: m/z = 514 ( +H)+ Rt (HPLC): 2.19 min (método K) 283.2 Ácido 4-[2-(4-terc-butoxicarbonilamino-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de 7 g de éster metílico de ácido 4-[2-(4- terc- butoxicarbon¡lamino-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina- 6-carboxílico y solución de hidróxido de sodio 4M (60 mi) y 500 mg de hidróxido de litio en 60 mi de eOH se agitó a 80°C durante 5 horas. A la mezcla de reacción se añadieron 65,2 mi de ácido clorhídrico 4M y la mezcla luego se concentró. El residuo se trituró con agua. El sólido se aisló por filtración, se lavó con agua y se secó en una secante.

Rendimiento: 6.8 g Espectro de masas ESI: m/z = 500 (M+H)+ 283.3 Amida de ácido 4-[2-(4-amino-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5- metil-tieno[2,3-d]pirimid¡na-6-carboxílico Una mezcla de 0.025 g de ácido 4-[2-(4-terc-butoxicarbonilamino- ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico, 0.016 g de TBTU, 17 µ? de DIPEA y 3 mi de DMF/THF 1 :1 se agitó durante 30 minutos a TA. Se añadieron 20 µ? de amoniaco y la mezcla se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se disolvió en DCM. La fase orgánica se lavó con agua, se secó y se filtró. El filtrado se concentró. El residuo se disolvió en 5 mi de DCM, se añadió 1 mi de ácido trifluoroacético y la mezcla se agitó a TA durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por cromatografía.

Rendimiento: 0.020 g Espectro de masas ESI: m/z = 399 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.75 min (método K) Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 283.3: Los siguientes compuestos se prepararon de manera análoga a 283.3, usando DMF en lugar de DMF/THF: Ejemplo 289 Amida de ácido 4-[2-(4-amino-ciclohexilox¡)-piridin-3-ilamino]-5-metil-tieno[2,3- d]pirimidina-6-carboxílico Una mezcla de 0.1 g de ácido 4-[2-(4-terc-butoxicarbonilamino-ciclohexiloxi)-piridin-3-ilamino]-5-met¡l-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico, 39.689 µ? de clor-trimetil-propilenamina, 24 µ? de propilamina, 30.664 µ? de TEA y 5 mi de DCM se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se lavó sucesivamente con ácido clorhídrico 0.1 M y solución de hidróxido sódico 0,1 M, se secó y se filtró. El filtrado se concentró. El residuo se trituró con éter dietílico. Rendimiento: 0.050 g Espectro de masas ESI: m/z = 441 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.10 min (método M) Ejemplo 290 Ácido 4-[4-fluoro-2-(tetrahidro-ciclopenta [1 ,3]d¡oxol-5-iloxi)fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico estereioquímica relativa 290.1 Éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(tetrahidro-ciclopenta [1 ,3]dioxol-5-iloxi)fenil]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxilico estereioquímica relativa Una mezcla de reacción de 1.79 g de éster metílico de ácido 4-cloro-5-metil-tieno[2,3d]_p¡hmidina-6-carboxílico, 1.77 g del compuesto intermedio XXXXVI y 0.422 g de ácido p-toluenosulfónico en 50 mi de isopropanol se calentó a 90°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se vertió en agua y se filtró. El sólido se lavó con agua se trituró con ACN y se secó al vacío a 60°C.

Rendimiento: 72.2 g Espectro de masas ESI: m/z = 446 (M+H)+ Rt (HPLC): 3.30 min (método A) 290.2 Ácido 4-[4-fluoro-2-(tetrahidro-ciclopenta [1 ,3]dioxol-5-iloxi)fenilamino]- 5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico estereioquímica relativa Una mezcla de reacción de 2.1 g de éster metílico de ácido 4-[4-fluoro-2-(tetrahidro-ciclopenta [1 ,3]dioxol-5-iloxi)fenilamino]- 5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico y 0.56 g de hidróxido de litio en 150 mi de THF se agitó a TA durante una noche. Luego la mezcla se acidificó por adición de ácido cítrico al 10 %, se concentró y se filtró. El sólido se secó al vacío a 60°C.

Rendimiento: 1.79 g Espectro de masas ESI: m/z = 432 (M+H)+ Rt (HPLC): 3.02 min (método A) Ejemplo 291 (3-Pirrolidin-1-il-propil)-amida de ácido 4-[4-fluoro-2-(tetrahidro-ciclopenta [1 ,3]dioxol-5-iloxi)fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico estereioquímica relativa Una mezcla de 0.15 g de ácido 4-[4-fluoro-2-(tetrahidro-ciclopenta [113]dioxol-5-iloxi)fenilamino]-5-metil-tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico, 0.045 g de 1-(3-aminopropi)pirrolidina, 0.159 g de HATU y 0,097 mi de TEA en 15 mi de DMF se agitó a TA durante 1 hora. La mezcla de reacción se vertió en agua, se extrajo con DCM, se secó y se filtró. El filtrado se concentró. El residuo se trituró con éter diisopropílico.

Rendimiento: 0.110 g Espectro de masas ESI: m/z = 542 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.28 min (método K) El siguiente compuesto se preparó de manera análoga a 291.3: estereoquímica relativa Ejemplo 293 Amida de ácido (1S.2S) 4-{2-[2-(ciclopropanocarbonil-amino)-ciclopentilox¡]-4-fluoro-fenilamino}-5-metil tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se mezclaron 0.15 g de amida de ácido (1S.2S) 4-[2-(2-amino-ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico y 0.45 mi de ?,?-diisopropiletilamina con DCM. Se añadieron 0.047 g de cloruro de ciclopropanocarbonilo a la mezcla y se agitó durante 1 hora a TA. Luego la mezcla de reacción se diluyó con agua y se filtró. El residuo se disolvió en 3 mi de dioxano y solución de carbonato de sodio y se agitó a TA durante una noche. A la mezcla se le añadieron DCM y agua. La mezcla se filtró y el sólido se secó al aire.

Rendimiento: 0.093 g Espectro de masas ESI: m/z = 470 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.66 min (método L) El siguiente compuesto se preparó de manera análoga a 293: Ejemplo 295 Amida de ácido (1S.2S) 4-{2-[2-(acetil-amino)-ciclopentiloxi]-4-fluoro-fenilamino}- 5-metil tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico Se mezclaron 0.15 g de amida de ácido (1 S.2S) 4-[2-(2-amino- ciclopentiloxi)-4-fluoro-fenilamino]-5-metil tieno[2,3-d]pirimidina-6-carboxílico y 0.32 mi de ?,?-diisopropiletilamina con DCM. Se añadieron 0.027 g de cloruro de acetilo a la mezcla y se agitó durante 1 hora a TA. Luego la mezcla de reacción se diluyó con agua y se filtró. El sólido se secó al aire.

Rendimiento: 0.14 g Espectro de masas ESI: m/z = 444 (M+H)+ Rt (HPLC): 1.53 min (método L)

Claims (21)

REIVINDICACIONES

1.- Un compuesto de fórmula general en la que X es CH o N, R1 es un átomo de hidrógeno o halógeno, R2 es un grupo cicloalquilo 03.7 que está sustituido con uno o dos sustituyentes seleccionados entre oxo, halógeno, alquilo d.3, hidroxi, alcoxi C1.3, alcoxi d-4-carbonilo, amino y morfolinilo, donde los átomos de hidrógeno del grupo amino pueden estar opcionalmente reemplazados independientemente con un grupo alquilo Ci.3, alcoxi Ci-3-(CH2)m-, alcoxi Ci-4-carbonilo, alquil Ci-3-sulfonilo, alquil Ci-3-carbonilo, cicloalquil C3-6-carbonilo o piperidinilo, donde m es 2 ó 3 y donde el grupo piperidinilo puede estar opcionalmente sustituido con un grupo metilo, donde dos sustituyentes, que están unidos al mismo átomo de carbono, pueden formar juntos un grupo -0-(CH2)2-0-, y donde dos sustituyentes, que están unidos a dos átomos de carbono adyacentes, pueden formar juntos un grupo -O-CH2-O- o -0-C(CH3)2-0-, R3 es un grupo alquilo Ci-2 y R4 es un grupo carboxi, alcoxi Ci-3-carbonilo, aminocarbonilo, N-(alquil Ci^-aminocarbonilo o N,N-[di-(alquil Ci-4)]-aminocarbonilo, donde el grupo aminocarbonilo puede estar sustituido con un alquilsulfonilo C1.3, CN, OH, alcoxi Ci-3, cicloalquilo C3.6, -CH2- C=C-CH2-NH2> -CH2-C=C-CH2-NH(alquilo C1-3) o un grupo -CH2-C=C-CH2-N(alquilo 01.3)2 o con un grupo piperidinilo o pirrolidinilo unido mediante un átomo de carbono, y donde los restos alquilo de los grupos N-(alquil Ci- )-amino-carbonilo y N,N-[di-(alquil Ci-4)]-aminocarbonilo anteriormente mencionados pueden estar opcionalmente sustituidos con un grupo aminocarbonilo, N-(alquil d^-aminocarbonilo o N,N-[di-(alquil Ci-3)]-aminocarbonilo, o con un grupo pirrolidinilo, oxazolilo, imidazolilo, piperidinilo o morfolinilo, cada uno unido mediante un átomo de carbono, o, de la posición 2 de un resto etilo, propilo o butilo hacia adelante, con un grupo OH, CN, alcoxi C1.3, amino, N-(alqu¡l Ci-3)-amino, N,N-[di-(alquil Ci-3)]-amino, alquiloxi Ci-5-carbonil-amino, morfolino, piperidino, piperazino, pirrolidino, azetidinilo, aziridinilo o imidazolilo, donde cada uno de los grupos cicloalquilo, pirrolidinilo, oxazolilo, piperidinilo, morfolinilo, piperazinilo y imidazolilo anteriormente mencionados puede estar sustituido con un grupo metilo, amino, hidroxi o alcoxi Ci-3, o una sal de los mismos.

2.- Un compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1 , en el que: X, R1, R2 y R4 se definen como en la reivindicación 1 , y R3 es metilo, o una sal de los mismos.

3. - Un compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1 ó 2, en el que R2 a R4 se definen como en la reivindicación 1 , y X es CH y R1 es un átomo de flúor, o una sal de los mismos.

4. - Un compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1 ó 2, en el que R2 a R4 se definen como en la reivindicación 1 , y X es N y R1 es un átomo de hidrógeno, o una sal de los mismos.

5. - Un compuesto de la fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que X y R1 a R3 se definen como en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, y R4 es carboxi, alcoxi Ci-3-carbonilo, aminocarbonilo o un grupo N-(alquil Ci-3)-aminocarbonilo, donde el resto metilo del grupo N-(metil)-aminocarbonilo anteriormente mencionado puede estar opcionalmente sustituido con un grupo piperidinilo, N-metil-piperidinilo o morfolinilo, cada uno unido mediante un átomo de carbono, y donde el resto etilo resp. propilo del grupo N-(alquil C^-aminocarbonilo anteriormente mencionado puede estar opcionalmente sustituido terminalmente con hidroxi, metoxi, amino, N-metil-amino, ?,?-dimetil-amino, morfolino, imidazolilo, 4-metil-piperazinilo, 1-metil-pirrolidinilo, piperidinilo, pirrolidinilo o un grupo 4-hidroxi-piperidino, o una sal de los mismos.

6. - Un compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 5, en el que X y R1 a R3 se definen como en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, y R4 es aminocarbonilo o un grupo N-(alquilo Ci-3)-, donde el resto metilo del grupo N-(metil)-aminocarbonilo anteriormente mencionado puede estar opcionalmente sustituido con un grupo piperidinilo, N-metil-piperidinilo o morfolinilo, cada uno unido mediante un átomo de carbono, y donde el resto etilo resp. propilo del grupo N-(alquil C2-3)-aminocarbonilo anteriormente mencionado puede estar opcionalmente sustituido terminalmente con hidroxi, metoxi, amino, N-metil-amino, ?,?-dimetil-amino, morfolino, imidazolilo, 4-metil-piperazinilo, 1-metil-pirrolidinilo, piperidinilo, pirrolidinilo o un grupo 4-hidroxi-piperidino, o una sal de los mismos.

7. - Un compuesto de la fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que X, R1, R3y R4 se definen como en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, y R2 es ciclopentilo sustituido con uno o dos grupos hidroxi o metoxi o con un grupo amino, metilcarbonil-amino, N-metil- N-metilcarbonil-amino o donde los dos átomos de carbono adyacentes están unidos entre sí mediante un grupo -0-CH2-0- o -0-C(CH3)2-0-, o ciclohexilo sustituido con uno o dos átomos de flúor o uno o dos grupos hidroxi o metoxi o un grupo oxo, alcoxi d-3-carbonilo, morfolino, metil-piperidinilo o un grupo amino, donde los átomos de hidrógeno del grupo amino pueden estar opcional e independientemente reemplazados con un grupo metilo, metilcarbonilo, 2-metoxi-etilo o metilsulfonilo, o donde dos átomos de carbono adyacentes están unidos entre sí mediante un grupo -0-C(CH3)2-0- o donde dos átomos de hidrógeno unidos al mismo átomo de carbono se reemplazan con un grupo -0-(CH2)2-0-, o una sal de los mismos.

8. - Un compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 7, en el que X, R1, R3 y R4 se definen como en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, y R2 es ciclohexilo sustituido con un grupo hidroxi o metoxi, ciclopentilo sustituido con un grupo hidroxi, metoxi, metilcarbonil-amino o N-metil-N-metilcarbonil-amino o ciclopentilo, donde dos átomos de carbono adyacentes están unidos entre sí mediante un grupo -O-CH2-O-, o ciclobutilo sustituido con un grupo metilcarbonil-amino o metilcarbonil-N(metil)-amino, o un tautómero, enantiómero, diastereómero o sal de los mismos.

9. - Un compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1 , seleccionado entre: o una sal de éste.

10. - Una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9.

11. - Composición farmacéutica que comprende un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal según la reivindicación 10, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable.

12. - Composición farmacéutica según la reivindicación 11 que comprende, además, un agente terapéutico adicional.

13. - Composición farmacéutica según la reivindicación 12, en donde 5 el agente terapéutico adicional se selecciona de un agente antidiabético, un agente reductor de lípidos, un agente cardiovascular, un agente antihipertensivo, un agente diurético, un inhibidor de la agregación de trombocitos, un agente antineoplásico o un agente antiobesidad.

14. - Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 10 o una sal según la reivindicación 10 para uso en la inhibición de la actividad quinasa de Mnk1 o Mnk2 (Mnk2a, Mnk2b) o sus variantes.

15. - Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal según la reivindicación 10 para uso en la profilaxis o terapia de enfermedades metabólicas, trastornos hematopoyéticos, enfermedades ]_ 5 neurodegenerativas, daño renal, trastornos inflamatorios y cáncer, y sus complicaciones y enfermedades consecutivas.

16. - Compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal de según la reivindicación 10 para uso en la profilaxis o terapia de enfermedades metabólicas del metabolismo de 0 carbohidratos y/o lípidos, y sus complicaciones y trastornos consecutivos.

17. - Compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal de acuerdo con la reivindicación 10 para uso en la profilaxis o terapia de la diabetes.

18. - Compuesto de acuerdo con una cualquiera de las 5 reivindicaciones 14 a 17 para administración concomitante o secuencial a un paciente en combinación con un agente terapéutico adicional.

19.- Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una sal de acuerdo con la reivindicación 10 para uso en el tratamiento o la prevención de trastornos asociados con citoquinas.

20.- Compuesto de acuerdo con la reivindicación 19 para administración concomitante o secuencial a un paciente en combinación con un agente terapéutico adicional.

21.- Compuesto de acuerdo con la reivindicación 20, en donde el agente terapéutico adicional se selecciona de un antagonista de histamina, un antagonista de bradiquinina, antagonista de serotonina, leucotrieno, un agente anti-asmático, un AINE, un antipirético, un corticosteroide, un antibiótico, un analgésico, un agente uricosúrico, un agente quimioterapéutico, un agente antigota, un broncodilatador, un inhibidor de la cicloxigenasa-2, un esteroide, un inhibidor de la 5-lipoxigenasa, un agente inmunosupresor, un antagonista de leucotrieno, un agente citostático, un antineoplásico, un inhibidor de mTor, un inhibidor de tirosina quinasa, anticuerpos o fragmentos de los mismos contra citoquinas y partes solubles (fragmentos) de receptores de citoquina.