MX2012006128A - Composicion farmaceutica que contiene un agente hipometilante y un inhibidor de la histona deacetilasa. - Google Patents

Abstract

Una composición farmacéutica para terapia de inducción que tiene un agente hipometilante y un inhibidor de la histona deacetilasa ("inhibidor HDAC"); en donde el agente hipometilante es un inhibidor de la metilación del ADN e histona tal como cladribina y el inhibidor HDAC es, por ejemplo, entinostat, panobinostat, vorinostat, y/o romidepsina; además, en donde el agente hipometilante y el inhibidor HDAC se combinan en formulaciones para varias administraciones incluyendo, por ejemplo, un sistema de administración continua tal como un parche transdérmico de al menos un depósito o una pluralidad de depósitos, oral, una combinación oral a dosis fija, intravenosa, y combinaciones de los mismos; esta composición farmacéutica para terapia de inducción se utiliza con un anticuerpo monoclonal en el tratamiento de varios cánceres, sarcomas y otras malignidades.

Description

COMPOSICION FARMACEUTICA QUE CONTIENE UN AGENTE HIPOMETILANTE Y UN INHIBIDOR DE LA HISTONA DEACETILASA !' CAMPO DE LA INVENCION Modalidades de la presente invención se refieren al campo de las composiciones farmacéuticas que contienen un agente hipometilante y un inhibidor de la histona deacetilasa para terapia de inducción utilizada con tratamiento de anticuerpos monoclonales de varios cánceres, sarcomas y otras malignidades.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La evolución de terapias para enfermedades asociadas con proliferación anormal de células tal como cáncer ha proporcionado muchas opciones en agentes ¡i terapéuticos para tratamiento clínico. A la fecha, se, han evaluado miles de agentes anticancerígenos potenciales pero el pilar de los tratamientos sigue siendo afectado por complicaciones y efectos colaterales tóxicos. Los agentes terapéuticos actuales están clasificados en seis grupos generales: agentes alquilantes, agentes antibióticos, agentes antimetabólicos , agentes hormonales, agentes derivados de plantas, y agentes biológicos. Para una descripción comoleta de estos agentes, ver la Patente de los Estados Unidos,! No. ll 6, 905, 669.

Los fármacos de anticuerpos monoclonales ("mÁB") son una innovación relativamente nueva en agentes biológicos utilizados en el tratamiento del cáncer. Un anticuerpo i ? monoclonal es una molécula producida en laboratorio que está diseñada para unirse a células cancerígenas específicas. Unos cuantos ejemplos de tratamiento con mAB incluyen: rituximab - para leucemia linfocítica crónica y linfoma no-Hodgkin; gemtuzumab - para ciertos tipos de leucemia mielógena aguda; cetuximab - para cáncer de cabeza, cuello y colon; y alentuzumab - para leucemias y linfornas de células T. Aunque es promisorio como un tratamiento para cánceres, el Uso de mABs como un tratamiento autónomo no ha cumplido con , las expectativas. Por lo tanto, los anticuerpos monoclonales con mayor frecuencia son suplementados con el uso de quimioterapia altamente tóxica y terapia de radiación para mejorar la tasa de supervivencia de los pacientes.

Claramente, aún existe la necesidad de un sistema de fármacos y regímenes de administración más efectivos para j1 el tratamiento de cáncer en una manera específica y relativamente no tóxica.

SUMARIO DE IA INVENCION La presente divulgación se refiere a modalidades de una composición farmacéutica relativamente no tóxica que combina un agente hipometilante, específicamente, un inhibidor de la metilación de ADN e histona, con un inhibidor de histona deacetilasa ("inhibidor HDAC" o "HDACi") para proporcionar un pretratamiento ("terapia de inducción") para tratamiento con mAB de varios cánceres, sarcomas y otras malignidades. Las modalidades de la composición combinan1, un agente hipometilante (por ejemplo, cladribina) y un inhibidor HDAC (por ejemplo, entinostat, panobinostat , y vorinostat) . El agente hipometilante y el inhibidor HDAC se pueden combinar en formulaciones para varias administraciones, por ejemplo, un sistema de suministro continuo tal como un parche transdérmico de al menos un depósito o una pluralidad de depósitos, oral, una combinación oral de dosis fija, intravenosa, y combinaciones de los mismos. La terapia de inducción que combina un agente hipometilante y un inhibidor HDAC tiene como resultado un aumento dramático e inesperado en la eficacia del tratamiento con mAB de cánceres, sarcomas y otras malignidades. Estas y otras ventajas de la invención serán entendidas y apreciadas mejor por aquellos expertos en la técnica por referencia a la siguiente descripción escrita, reivindicaciones y dibujos anexos.

BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS Modalidades de la presente invención serán fácilmente entendidas a través de la siguiente descripción detallada en conjunto con los dibujos acompañantes. i1 La figura 1 ilustra una vista lateral de ; una construcción de parche monolítico.

La figura 2 ilustra una vista lateral de (,una construcción de parche con depósito ("Ravioli") .

La figura 3 ilustra una vista superior de un parche con depósito dual.

La figura 4 ilustra una vista superior de un parche con depósito cuádruple.

La figura 5 ilustra el perfil cinético de entrega transdérmica de cladribina in vitro.

La figura 6 ilustra el perfil cinético de la entrega transdérmica de entinostat in vitro. '' DESCRIPCION DETALLADA DE LAS MODALIDADES En la siguiente descripción detallada, se hace referencia a los dibujos acompañantes que forman parte de la misma, e ilustran modalidades en las cuales se puede practicar la invención. La descripción puede utilizar' las frases "en una modalidad" o "en modalidades", las cuales se pueden referir a una o más de las mismas o diferentes modalidades. Además, se pueden describir varias operaciones como múltiples operaciones discretas a su vez, lo cual puede ser útil en el entendimiento de las modalidades de la presente invención. Sin embargo, el orden de descripción no debiera ser interpretado para implicar que estas operaciones dependen del orden. Se entenderá que se pueden utilizar otras modalidades y que se pueden realizar cambios estructurales o lógicos sin apartarse del alcance de la presente invención.

I Por lo tanto, la siguiente descripción detallada no pretende ser una limitación.

La epigenética es el estudio de cambios heredados en la expresión del fenotipo o gen causados por mecanismos diferentes a los cambios en la secuencia del ADN subyacente.

Estos cambios pueden permanecer durante divisiones celulares por el resto de la vida de las células y también pueden durar por múltiples generaciones. Sin embargo, no hay cambio en la secuencia del ADN subyacente del organismo; por el contrario, factores no genéticos causan que los genes del organismo se comporten o expresen a si mismos de manera diferente.

La metilación del ADN es una modificación i epigenética de la citosina que es importante para silenciar la transcripción de los genes. Los patrones de metiláción genómica, los cuales permanecen generalmente estables en el adulto, se alteran profundamente en la mayoría de los tumores humanos. (Smet, C.D. et al., DATA hypomethylation in cáncer: Epigenetic scars oí a neoplastic journey, Epigenetícs, 5(3):206-13 (2010)). Adicionalmente, la epigenética tiene una función demostrada e importante en malignidades de ¡i células B. (Debatin, K. , et al. Chronic lymphocytic leukemia: keeping cell death at hay, Cell, 129 (5) : 853-5, I (2007); Martin-Subero, J. , Towards defining the lymphoma methylome. Leukemia, 20 ( 10 ): 1658-60. (2006)). ' La cladribina, también conocida como 2CdA, aótúa como un agente hipometilante del ADN. (Wyczechowska, D, et al., The effects of cladribine and fludarabine on ! DNA methylation in K562 cells, Biochem Pharmacol, 65:219-225 (2003); Yu, M.K., et al., Epigenetícs and chronic lymphocytic leukemia, Am J Hematol., 81(11): 864-9 (2006)). De manera , más 11 especifica, la cladribina es un análogo de la deoxiadendsina I con sustitución de un átomo de hidrógeno con cloro en la posición 2 del anillo de purina. Otros análogos de la purina incluyen fludarabina, pentostatina y clofarabina. Al igual que la fludarabina, pentostatina y clofarabina, la cladribina es un antimetabolito análogo del nucleósido de purina con toxicidad selectiva hacia los linfocitos y monocitos. Dados sus efectos linfotóxicos , la cladribina ha sido desarrollada para el tratamiento de malignidades hematológicas , principalmente malignidades linfoides, y condiciones 1 i ' I , 11 inflamatorias. Actualmente, la cladribina es aprobada por la FDA para el tratamiento de leucemia de células pilosas.

A diferencia de otros análogos del nucleósidoii de purina, la habilidad de la cladribina para interferir cory la síntesis y reparación del ADN toma en cuenta la citotoxicídad contra los linfocitos en reposo y en división. Dado que las malignidades linfoides indolentes se caracterizan por tener una proporción significativa de células que están en la fase GO del ciclo celular, por ejemplo, la fase de reposo, la cladribina ha mostrado ser una promesa terapéutica en el tratamiento de estas malignidades. ¡i Se observa una actividad clínica excelente córi1 la cladribina y rituximab, un mAB contra la proteína CD20,1 en terapia de combinación para linfoma de células del manto, por ejemplo: tasa de remisión completa del 52% con 80% en remisión completa en una media de 22 meses. (Inwards, D.J. et al., Long-term results of the treatment of patients with mantle cell lymphoma with cladribine (2-CDA) alone (95-80^53) or 2-CDA and rituximab (N0189) in the North Central Cáncer Treatment Group. Cáncer, 113 (1) : 108-16 (2008)). En tro estudio en curso, los resultados indican una tasa de remisión completa del 60% con 93% en remisión completa en una media de 25 meses. (Oregon Health and Science University: Clinical i: triáis - manuscrito en preparación) . Este manuscrito es, una retrospectiva, el IRB aprobó la revisión de pacientes tratados con combinaciones de cladribina rituximab desde 1998. Además, la cladribina en combinación con rituximab puede tratar la leucemia linfocitica crónica ("CLL") y leucemia de células del manto ("MCL") , tal como se divulga en WO 2008/116163 y WO 2007/067695, cuyas divulgaciones se incorporan aqui por referencia en su totalidad. .

También existe un segundo mecanismo de acción dé la cladribina recientemente descubierto. Específicamente, se ha mostrado que la cladribina inhibe la metilación de la histona. . (Spurgeon, S. et al., Cladribine: not just another purine analogue? Expert Opin. Investig. Drugs, 18(8):1169-1181, (2009); Epner, E., The epigenetics of mantle cell lymphoma, Abstract, 2010 Mantle Cell Lymphoma Workshop, Lymphoma Research Foundation, March (2010)). También existe i evidencia de que la metilación del ADN y la metilación de la histona están vinculadas, y la inhibición de ambos procesos pueden ser necesarios para la inversión permanente, efectiva del silenciamiento del gen en células cancerígenas. (Cedar, H. et al., Linking DNA methylation and histone modification: patterns and paradigms, Nature Reviews Genetics 10:295-304 (2009) ) . Por lo tanto, la cladribina es un agente hipometilante que inhibe la metilación tanto del ADN como de la histona. i I: También se ha mostrado que los inhibidores de HDAC más la hipometilación del ADN pueden ser aditivos en, el I' tratamiento exitoso de varios cánceres y otras malignidades.

(Cameron, E.E. et al., Synergy of demethylation and histone l deacetylase inhibition in the re-expression of genes silehced in cáncer, Nat Genet, (1999); Garcia-Manero, G., et al. Phase 1/2 study of the combination of 5-aza-2 ' -deoxycytidine with valproic acid in patients with leukemia, Blood, Nov 15;108 (10) .3271-9 (2006)). Combinaciones de HDACi con azacitidina, deoxiazacitidina y análogos de purina han sido estudiadas in vitro y en pruebas clínicas para una variedad de malignidades, particularmente en mielodisplasia ("MDS") y leucemia mieloide aguda ("AML"). (Bouzar A.B., et -al., Valproate synergizes with purine nucleoside analogues to induce apoptosis of B-chronic lymphocytic leukaemia cells, Br. J. Haematol., 144(1) :41-52 (2009); Gore S.D., et -al., Combination DNA methyltransferase and histone deacetylase inhibition in the treatment of myeloid neoplasms, Cáncer Res., 66:6361-9 (2006); Soriano A, et al., Safety and clinícal activity of the combination of 5-azacytidine, valproic acid, and all-trans retinóle acid in acute myeloid leukemia and myelodysplastic syndrome, Blood. 110:2302-8 (2007)). Un discernimiento adicional en al menos, un inhibidor HDAC, vorinostat, indica que se inhibe la tí traslación de la ciclina DI en linfoma de células del manto. (Kawamata, N. et al., Suberoylanilide hydroxamic acid (SÁHA; vorinostat) suppresses translation of cyclin DI in mantle cell lymphoma cells, Blood, 110 ( 7 ): 2667-73 (2007)).

La administración más común de 2CdA e inhibidores HDAC es intravenosa. La administración continua tanto de 2CdA como de HDACi con frecuencia es óptima. Existe un fundamento racional tanto científico como clínico para la entrega continua de cladribina y otros fármacos epigenéticos a fin de lograr la máxima eficacia. (Huynh, E. et al., Cladribine in the treatment of hairy cell leukemia: initial and subsequent results, Leukemia & Lymphoma, 50 (si): 12-17 (2009)). Como resultado, la administración de cualquiera o ambos de 2CdA y HDACi con frecuencia requiere estadías largas en hospital de 5-6 días en ciclos repetidos. Los ciclos pueden ser tan frecuentes como una vez al mes durante 6-8 meses dependiendo del protocolo del tratamiento prescrito y la salud ¡ del paciente. Para superar el costo y la inconveniencia de estadías largas en hospital, una modalidad recientemente desarrollada contempla un sistema de entrega continua1 tal como a través de un parche transdérmico. Además, la eficacia terapéutica y la inversión permanente del silenciamient'o de genes en el cáncer se pueden lograr de manera óptima mediante la infusión continua de fármacos epigenéticos que tienen ¡como objetivo la metilación de histonas, la metilación del ADN y la acetilación de histonas.

Opciones de construcción del dispositivo transdérmico La entrega transdérmica de 2CdA y HDACi antes 'del tratamiento con mAB es atractiva debido a que proporciona un mecanismo para la administración continua de fármacos al mismo tiempo que no confina al paciente al hospital o inmoviliza al paciente para el suministro intravenosoi de fármacos. Hablando en términos generales, las partes principales de un parche transdérmico son: un recubrimiento para proteger el parche durante el almacenamiento - el recubrimiento es removido antes del uso; una composición o fármaco en solución que está en contacto directo con el recubrimiento de liberación; un adhesivo que adhiere i las I partes del parche entre si y adhiere el parche a la piel;, una membrana que controla la liberación del fármaco de'1 un depósito yl parches multicapa; y un respaldo que protege el parche contra el ambiente exterior. Las modalidades de' las opciones de construcción del dispositivo transdérmico incluyen, pero no se limitan a, los siguientes ejemplos.

Un parche monolítico (fármaco-en-adhesivo) 1 (1) 1 (figura 1) incluye un recubrimiento de liberación (10); una matriz adhesiva en contacto con la piel (12) en dond'é la matriz adhesiva contiene, por ejemplo, el fármaco, solubilizantes de fármacos, potenciadores de penetración' en la piel, antiirritantes de la piel, inhibidores ¡ de cristalización; ("composición transdérmica") ; y una película de respaldo oclusivo (14) . En cualquier caso, la penetración de la composición transdérmica también puede ser mej oradá !'por varias formas de pretratamiento de la piel tal como poración de micro-aquja, raspado del estrato córneo, sonicacíón, tratamiento láser, iontoforesis, induciendo cambios en la polaridad de la composición, y reacciones exotérmicas :'que i ocasionan que un parche se caliente cuando se expone al aire.

Otra modalidad (que no se muestra) es un parche transdérmico i -multicapa que tiene múltiples matrices de fármaco-en-adhesivo que son puestas en capas una encima de la otra, en donde cada capa está separada de la otra, por ejemplo, por una membrana o termosello. En un parche transdérmico multicapa, cada icapa de matriz es responsable de la liberación de una composición transdérmica.

En la figura 2 se muestra otra modalidad como un parche con depósito ("parche Ravioli") (2) que incluye un recubrimiento de liberación (10), un adhesivo en contacto con la piel (16), una película de respaldo oclusivo (14) y una membrana permeable al fármaco (18) en comunicación de fluido con un depósito (20) y formando una porción del mismo! que contiene la composición transdérmica, en donde la membrana permeable al fármaco (18) controla la liberación de la composición transdérmica desde el depósito (20). Ejemplos de una membrana permeable al fármaco (18) incluyen 9% de EVA, una membrana de control de tasa, o membrana microporosa. La membrana microporosa puede tener poros con diámetros ert el í rango de aproximadamente 0.05 a aproximadamente 10 micrómetros (µp?) , de preferencia en el rango de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 6.0 µp?.

La figura 3 ilustra una vista superior de una modalidad de un parche con depósito dual (3) con una construcción circular con un recubrimiento de liberación (10), dos depósitos - depósito A (22) y depósito B (24), y un termosello (26) el cual es un sello permanente de la membrana í y el respaldo oclusivo proporcionando el encierro necesario para los depósitos y su separación. En otras modalidades, un parche con depósito dual (3) puede tener depósitos (22 y 24) acomodados en una configuración rectangular o concéntrica. Los depósitos pueden ser formados en una configuración de depósito deseada con base en el tipo y cantidad de fármaco requerido para las relaciones de dosificación deseadas, en donde los depósitos tienen diferentes capacidades de volumen.

I En otra modalidad, la figura 4 ilustra una ista superior de un parche con depósito cuádruple (4) para entrega transdérraica simultánea de cuatro composiciones transdérmicas con un recubrimiento de liberación (10), cuatro depósitos -depósito A (28), depósito B (30), depósito C (32), y depósito I D (34), y un termosello (26). ,.

En otra modalidad (que no se muestra) el parche puede tener un respaldo oclusivo (14) como en las figuras 1 y 2 que se extiende sobre los depósitos mostrados en las figuras 2-4 que excede los bordes de los depósitos por ünos cuantos centímetros. El propósito de un respaldo oclusivo (14) que se extiende sobre los depósitos es asegurar el parche a la piel por un periodo de tiempo prolongado tal pomo pudiera ser necesario en un parche de 1 a 5 días como se describe a continuación.

Estudio de viabilidad de 2CdA y HDACi Se realizó un estudio de viabilidad de entrega transdérmica de cladribina e inhibidores HDAC utilizando el Método de Células de Franz. El alcance del estudio en curso es para determinar la tasa de difusión transdérmica pasiva (perfusión pasiva) de cladribina y múltiples inhbidores HDAC para la creación del suministro transdérmico continuo para terapia de inducción.

A manera de antecedente, la piel consiste de (tres capas principales: estrato córneo exterior, epidermis viable subyacente y junto a ésta, la dermis. En la entrega,, de fármacos transdérmicos, la composición transdérmica que lleva el fármaco o la molécula de difusión debe estar en contacto intimo con el estrato córneo de la piel proporcionando el paso de la molécula desde la composición transdérmica, al estrato córneo. Las moléculas de difusión deben superar la resistencia a la difusión, la membrana del parche yj, la termodinámica de la división entre la composición transdérmica y el estrato córneo. La difusión también está regulada por el tamaño de la molécula y el Kow indica la "habilidad" molecular para transferir desde un medio a otro medio, cuando ambos están en contacto intimo. Mientras más elevado es el valor de Kow más lipofilica es la molécula.

Las moléculas con valores de log Kow en el rangó de 1-3 son más favorables para la partición en la piel a partir de matrices débilmente hidrofilicas tales como hidroge'les. Las moléculas con valores más altos de log Kow > 3 típicamente mostrarán tasas transdérmicas más lentas debido a la extrema disminución de su solubilidad en la epidermis hidrofílica. Por otra parte, las moléculas de muy bajo log Kow < 1, tales como las moléculas polares o ionizadas, son prácticamente insolubles en el estrato córneo y, por lo tanto, su partición i en la piel a partir de cualquier matriz se espera que sea muy baja teniendo como resultado un flujo transdérmico muy bajo.

Sin embargo, es posible incrementar la solubilidad de , las moléculas polares en el estrato córneo mediante el uso!: de sustancias que afectan la estructura del estrato córneo" en una manera en que la estructura lipofílica hermética ;del estrato córneo se abre permitiendo que las moléculas polares pasen a través de la misma sin demasiada resistencia.

¡I Trabajo experimental Se realizó un estudio de tres etapas. Primero se probaron la cladribina y el inhibidor HDAC, entinostat.1 La cladribina tenía 1 > log Kow > 0, el entinostat tenía log Kow = 2. La dosis transdérmica sistémica objetivo de:' la cladribina se fijó en l-2mg/día. La dosis transdérmica sistémica objetivo de entinostat se fijo en 2-3 mg/día.

La cladribina se mezcló con aproximadamente 2 por ciento de una concentración de un espesante que comprendía un componente de celulosa para espesar la composición,, de cladribina. Esto se repitió para el entinostat. ;¡ Los espesantes para composiciones tixotrópicas variaron'' de I: aproximadamente 1 por ciento a aproximadamente 5 por ciénto. Otros espesantes pueden incluir hidroximetilcelul'osa, hidroxipropilcelulosa, hidroxietilcelulosa, ácido poliacrílico, y/o carboximetilcelulosa sódica. La cladribina y el entinostat se mezclaron en etanol/agua y otras soluciones basadas en etanol hasta que se disolvieron completamente y después se agregó la hidroximetilcelulosa y se mezcló la solución hasta que se convirtió en una mezcla tixotrópica homogénea.

Toda la prueba se realizó en una incubadora á 32 i ' grados centígrados. La membrana porosa utilizada tenía un diámetro de poro de 6.0 m que fue separado de manera uniforme a través de la membrana. Se probaron los siguientes sistemas líquidos que contienen cladribina o entinostat!, a concentraciones de saturación, y proporcionan modalidades muestra para uso en las construcciones de parches con j depósitos: (i EJEMPLO 1 Entinostat 50 mg Etanol 1 mL ü Agua 0.5 mL Hidroximetilcelulosa 15 mg I 1 EJEMPLO 2 i Cladribina 23.9 mg Etanol 0.5 mL Agua 0.5 mL \· Hidroximetilcelulosa 10 mg Segundo, se realizaron pruebas in vitro adicionales para determinar el efecto de la aplicación de cierta mejora en la penetración de la piel en el flujo transdérmico utilizando dos potenciadores : dimetilsulfóxido ("DMSO") y ácido oleico. i1 — E—JE—M—PL—O——3 Cladribina 23.9 mg Etanol 0.7 mL Agua 0.7 mL Hidroximetilcelulosa 10 mg EJEMPLO 4 Cladribina 19.4 mg Etanol 0.5 mL DMSO 0.5 mL : Hidroximetilcelulosa 10 mg Tercero, se probó el flujo transdérmico in vitro utilizando epidermis de cadáver humano mediante el método de difusión de Células de Franz. Se construyeron los parches con depósitos con una membrana microporosa de 0.6 um y se colocaron composiciones transdérmicas que contenían cladribina o entinostat a concentraciones de saturación dentro del depósito y fueron selladas por calor. Se cortaron piezas redondas de piel cadavérica humana. Los parches se i, colocaron encima de la piel y se montaron en las Células, de Franz entre el compartimiento donador y los compartimientos receptores de la célula. Los dos compartimientos fueron apretados juntos con una pinza de presión atornillada. Se colocaron las células en la incubadora a 32 grados centígrados y se analizó la solución salina tamponada : con fosfato ("PBS") en la Célula de Franz en busca de ,,una concentración de cladribina o entinostat que pasó a través de la epidermis cadavérica humana durante un periodo de tiempo de 24 horas.

Los resultados del flujo transdérmico fueron graficados como una función de tiempo. (Figuras 5, ' 6) . Conforme a lo indicado por el gráfico en la figura 5, el flujo transdérmico óptimo de la cladribina fue 170 pg/cm2'/día obtenido a partir del parche que contenía la cladribina saturada en etanol/DMSO (50/50) . Después de 10 horas dé un i 1 tiempo muerto, la entrega transdérmica de cladribina fue sostenida. El flujo transdérmico óptimo de entinostat, conforme a lo indicado en la figura 6, fue 29 pg/cm2/día obtenidos del parche que contenía entinostat saturado en etanol/agua (2/1) ; después de 3 horas de tiempo muerto la entrega transdérmica fue sostenida.

Varias formulaciones de la composición pueden permitir el uso de un parche transdérmico. Los siguientes son ejemplos de formulaciones propuestas para un sistema entrega de parche transdérmico .

EJEMPLO 5 Cladribina o HDACi 1-20 mg Adhesivo de silicio 80-99 mg (Bio PSA 7-3402) Polivinilpirrolidona ("PVP") 1-10 mg (inhibidor de cristalización) EJEMPLO 6 Cladribina o HDACi 1-40 mg Duro-Tak 87-2677 60-99 mg (y cualesquiera otros adhesivos acrilicos) ? PVP 1-10 mg Acido oleico (potenciador ) 1-10 mg (o cualquier otro potenciador) 1,2 Propilenglicol 10-20 mg ( solubilizante de fármacos ) (Se pueden utilizar solubulizantes adicionales tales ,como glicoles o poliglicoles ) ' EJEMPLO 7 Cladribina o HDACi 1-40 mg Polisobutileno (PIB) 60-99 mg PVP 1-10 mg Acido oleico (potenciador) 1-10 mg 1,2 Propilenglicol 10-20 mg ( solubilizante de fármacos) El PIB en el ejemplo 7 anterior también puede :ser sustituido con cualquier otro caucho o adhesivo híbrido acrílico. ;¡ Con base en estos resultados, en las configuraciones de parche con un solo depósito o con múltiples depósitos, la composición transdérmica puede i1 ser una composición basada en un solo fármaco de cualquiera de un agente hipometilante o un inhibidor HDAC. En otras modalidades, el agente hipometilante y el inhibidor HDÁC se pueden mezclar para formar una mezcla. En una modalidad,, un parche con depósito dual (3) puede contener, por ejemplo, cladribina en un primer depósito (22) y entinostat en un segundo depósito (24) . En otra modalidad, un parche con un solo depósito (2) puede contener, por ejemplo, cladribiha y entinostat en un solo depósito (20) .

En otra modalidad, se pueden utilizar múltiples fármacos de hipometilacion y múltiples HDACi. Al un parche de múltiples depósitos como en la figura 3 o 4, se pueden agregar otros agentes farmacéuticos para mejorar el desempeño de la cladribina y el HDACi individualmente o en combinación. En otra modalidad, cuando se utiliza el parche de fármaco-en-adhesivo monolítico mostrado en la figura 1, se pueden utilizar dos parches separados, uno con un agente hipometilante y uno con un HDACi.

La dosis transdérmica pronosticada de cladribina y algún HDACi de soluciones acuosas saturadas se resumen en la siguiente tabla.

El coeficiente de permeabilidad dérmica p, , la solubilidad en agua y la dosis transdérmica se calcularon utilizando un programa desarrollado por la Agencia de Protección Ambiental de los Estados Unidos y la Corporación de Investigación de Siracusa.

En una modalidad, las dosificaciones entregadas para cada uno de los fármacos proporcionados al individuo pueden ser alteradas con base en una variedad de factores, incluyendo una dosis segura y terapéuticamente efectiva determinada, y el tamaño, edad, salud, etc. del paciente.1 Una dosis efectiva de cada uno de los fármacos entregados entonces depende del individuo particular tratado. Una "dosis efectiva" se puede considerar que es la dosis mínima que produce el efecto deseado. (W.K. Rasheed et al., Hi tone , , h deacetylase inhibitors in cáncer therapy, Expert Op. Invest.

Drugs, 16(5):659-78 (2007)).

Los pacientes pueden ser tratados con agentes hipometilantes del ADN e histonas en combinación con un HDACi como terapia de inducción por uno o más ciclos de tratamiento con mAB para un cáncer especifico, sarcoma y/u otra malignidad, en donde el mAB es especifico para el cáncer, sarcoma y/o malignidad objetivo. La administración y duración de la terapia de inducción se pueden ajustar según sea necesario a los ciclos del tratamiento con mAB. En ' una modalidad, una duración de ciclo de mAB conveniente puede ser 20-30 días, tal como 28 dias. En un protocolo de tratamiento se pueden implementar 10 ciclos de mAB. En otro protocolp de tratamiento se pueden implementar cuatro a seis ciclos de mAB.

En el presente, la cladribina es la única molécula conocida que inhibe la metilación tanto del ADN como de las histonas. A medida que otros agentes hipometilantes sean i descubiertos, éstos podrían sustituir a la cladribina en las formulaciones aquí descritas.

Parche de 1 día Una dosis efectiva de un agente hipometilante tal como la cladribina y un HDACi tal como el entinostat puede ¡i ser entregada en un parche transdérmico de múltiples depósitos o de dos zonas, en donde la concentración de cladribina es aproximadamente 5 a aproximadamente 15 mg/m2 y el entinostat es aproximadamente 10 a aproximadamente^ 20 mg/m2. A esta dosis, el parche transdérmico puede comprender j¦ un "parche de 1 día" y puede ser administrado diario durante 5-7 días antes del ciclo del tratamiento con mAB. En otra modalidad del parche de 1 día, la concentración de cladrioina es aproximadamente 5 a aproximadamente 15 mg/m2 y los inhibidores HDAC, romidepsina o panobinostat, pueden sustituir el' entinostat a la misma concentración 1 de aproximadamente 10 a aproximadamente 20 mg/m2. í Parche de 5 días En otra modalidad, una dosis efectiva de un agente hipometilante tal como cladribina y un HDACi tal como entinostat se puede entregar en un parche transdérmico de 5 días con múltiples depósitos o de dos zonas; en donde la concentración de cladribina es aproximadamente 20 a aproximadamente 100 mg/m2 y el entinostat es aproximadamente 40 a aproximadamente 80 mg/parche. A esta dosis, el parche transdérmico es administrado una sola vez y retirado 5 días después antes del ciclo del tratamiento con mAB. En otra modalidad del parche de 5 días, la concentración de cladribina es aproximadamente 20 a aproximadamente 100 mg/m2 y los inhibidores HDAC, romidepsina o panobinostat, pueden sustituir al entinostat de aproximadamente 40 a aproximadamente 80 mg/m2.

Intravenoso En otra modalidad, una dosis efectiva de un agente hipometilante tal como cladribina y un HDACi tal Como romidepsina son entregados de manera intravenosa ("iv") ; en donde la concentración de cladribina es aproximadamente ! 2 a aproximadamente 2 ' ' 5 mg/m y la romidepsina es aproximadamente 8 a aproximadamente 20 mg/m2. Se tiene contemplado que para cada administración IV aquí descrita, el agente hipometilante y el HDACi se pueden administrar por separado o en una mezcla. A esta dosis, la terapia de inducción IV es h administrada una vez al día durante cinco días antes del ciclo de un tratamiento con itiAB. , En otra modalidad, una dosis efectiva de un agente hipometilante tal como cladribina y un HDACi tal como ^cido valproico es entregada de manera intravenosa; en donde la concentración de cladribina es aproximadamente a aproximadamente 5 mg/m2 y el ácido valproico. es aproximadamente 250 a aproximadamente 1000 mg. A esta dosis, la terapia de inducción IV es administrada una vez al día durante cinco días antes del ciclo de un tratamiento con mAB.

En otra modalidad, una dosis efectiva de un agente hipometilante tal como cladribina y un HDACi tal ^como belinostat es entregada de manera intravenosa; en donde la concentración de cladribina es aproximadamente 2| a aproximadamente 5 mg/m2 y el belinostat es aproximadamente 500 a aproximadamente 1200 mg/m2. A esta dosis, la terapia de j| inducción IV es administrada una vez al día durante cinco j i días antes del ciclo del tratamiento con mAB.

Composición oral En otra modalidad, una dosis efectiva de un agente hipometilante tal como cladribina y un HDACi tal como vorinostat es entregada en una composición oral que comprende una concentración de cladribina de aproximadamente '5 a aproximadamente 20 mg/m2 y vorinostat de aproximadamente'1200 a aproximadamente 400 mg. Se tiene contemplado que para cada administración oral aquí descrita, el agente hipometilante y I el HDACi pueden ser administrados individualmente o e una i¡ forma de dosis oral de combinación, por ejemplo, combinación de dosis fija ("FDC") . Una FDC es una formulación de dos o más ingredientes activos tal como, pero no limitado al agente hipometilante y un HDACi combinados en una sola forma de dosificación; diferentes preparaciones de dosis están disponibles dentro de los parámetros aquí establecidos. En esta FDC, la terapia de inducción puede ser administrada de ii forma oral una vez al día durante cinco días antes del ciclo del tratamiento con mAB.

En otra modalidad, una dosis efectiva de un agente hipometilante tal como cladribina y un HDACi, tal como ácido valproico, es entregada en una composición oral que comprende una concentración de cladribina de aproximadamente 5 a aproximadamente 20 mg/m2 y ácido valproico de aproximadamente 250 mg a aproximadamente 500 mg. Con esta combinación de fármacos en la terapia de inducción, el ácido valproico oral puede ser administrado tres veces al dia durante cinco días y la cladribina puede ser administrada una vez al dia durante cinco días antes del ciclo obligatorio del tratamiento con mAB. ;> En otra modalidad, una dosis efectiva de un agente hipometilante tal como cladribina y un HDACi tal como á]cido de entinostat es suministrada en una composición oral¦ que comprende una concentración de cladribina de aproximadamente 5 a aproximadamente 20 mg/m2 y entinostat de aproximadamente 5 a aproximadamente 10 mg. En esta forma y a esta dosis'/ la terapia de inducción es administrada de manera oral una1' vez al dia durante cinco días antes del ciclo del tratamiento con mAB.

En otra modalidad, una dosis efectiva de un agente hipometilante tal como cladribina y un HDACi tal como panobinostat es entregada en una composición oral que comprende una concentración de cladribina de aproximadamente 5 a aproximadamente 20 mg/m2 y panobinostat de aproximadamente 10 a aproximadamente 20 mg. En esta FDC, la terapia de inducción es administrada de manera oral una vez al día durante cinco días antes del ciclo del tratamiento con mAB.

La siguiente tabla resume las combinaciones de dosificación para modalidades de la presente 'invención.

La cladribina está fácilmente disponible para formulaciones tópicas, orales e IV. La romidepsina está fácilmente disponible para formulaciones tópicas e IV. El vorinostat está fácilmente disponible para formulaciones orales. El ácido valproico está fácilmente disponible para formulaciones orales e IV. El entinostat está fácilmente i disponible para formulaciones tópicas y orales. El belinostat está fácilmente disponible en formulaciones intravenosas. El panobinostat está fácilmente disponible para formulaciones tópicas y orales.

Las combinaciones de agente hipometilante e inhibidores HDAC presentados son solamente ilustrativas. Un experto en la técnica puede observar que se pueden crear I combinaciones adicionales de un agente hipometilante e inhibidores HDAC para cumplir con los requerimientos , del individuo y/o protocolo de tratamiento. Adicionalmente, la terapia de inducción antes descrita además puede ser mejorada por la inclusión en el régimen del tratamiento de uno o más fármacos adicionales, por ejemplo, un inhibidor del proteasoma, tal como bortezomib, y un inhibidor mTOR (mamíferos objetivo de rapamicina) .

El término "administración" y/o "administrado" tal como aquí se utiliza incluye, por ejemplo, tópica, transdérmica, parenteral, vaginal, rectal, ocular, transmucosal, intranasal e intravenosa. El término "tópica" implica entrega intradérmica . El término "transdérmica" implica entrega sistémica mediante el paso a través de la piel. El término "parenteral" tal como aquí se utiliza incluye, por ejemplo, inyecciones subcutáneas, intravenosa, intramuscular, inyección intracisternal , o técnicas ,, de infusión. "Intravenosa" significa inyección intradérmica, ¡I intramuscular, intramamaria, intraperitoneal, intratecal, retrobulbar, y/o inyección intrapulmonar. El término "portador farmacéuticamente aceptable" tal como aquí se utiliza incluye cualquiera y todos los solventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos!' y antifúngicos, agentes retardantes de la absorción e isotónicos y similares. El uso de dichos medios y agentes para sustancias farmacéuticamente activas es muy conocido en la técnica. || Una composición transdérmica puede ser formulada como una crema, bálsamo, emoliente, espuma, loción, spray líquido, preparación de colágeno, gel, gel semisólidó o Í ungüento. En algunas modalidades, la composición transdérmica I puede ser utilizada "como está" o impregnada sobre una película respirable tal como poliuretano o material no te'jido o un parche dérmico, o parche para piel. En otras modalidades, la composición transdérmica es combinada con sustancias que aumentan la habilidad del fármaco para penetrar la piel a través de la solubilización del fármaco y/o afectando la estructura biológica de la piel que abrevios pasajes transdérmicos . Los potenciadores de penetración típicos son, por ejemplo, miristato de isopropilo, alcohol oleico, ácido oleico, ácido láurico, palmitato de isopropilo, éster de ácidos grasos, DMSO.

En modalidades de la presente invención, la composición puede incluir ácido o componentes base. Tal como aquí se utiliza, el término "componente" pretende incluir aquellos compuestos de origen natural y moléculas identificadas así como aquéllos formulados tal como, pero no limitado a, sales farmacéuticamente aceptables, ésteres y combinaciones de los mismos. Por ejemplo, cuando está presente un sustituyente ácido, tal como --COOH, el amonio, 11 sodio, potasio, calcio y sales similares se tienen contemplados como posibles modalidades para administración a un huésped biológico. Cuando está presente un grupo básico tal como amino o un radical heteroarilo básico, tal como piridilo, entonces una sal ácida, tal como clorhidrato, bromhidrato, acetato, maleato, palmoato, fosfato, metansulfonato, p-toluensulfonato, y similares, se tiene contemplada como una posible forma para administración a un huésped biológico.

De manera similar, cuando está presente un grupo ácido, los ésteres farmacéuticamente aceptables del compuesto, por ejemplo, metilo, terbutilo, pivaloiloximetilo, succinilo, y similares son contemplados como posibles formas de los compuestos, esos ésteres son conocidos en la técnica por modificar las características de solubilidad y/o hidrólisis para uso como formulaciones de liberación sostenida o profármaco. Además, algunos componentes pueden formar solvatos con agua o solventes orgánicos comunies. j Dichos solvatos están contemplados como parte de la presente invención también.

Las suspensiones acuosas pueden contener los componentes o compuestos activos en la mezcla con excipientes convenientes para la fabricación de suspensiones acuosas. Dichos excipientes son agentes de suspensión, carboximetilcelulosa sódica, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto y goma arábiga; agentes de dispersión o humectantes pueden ser un fosfátido de origen natural, por ejemplo, lecitina, o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos, por ejemplo, estearato de polioxietileno, o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo, heptadecaetilenoxicetanol, o productos de . , condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y un hexitol tal como monooleato de polioxietilen-sorbitol, o productos de condensación' de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo, monooleato de polietilen-sorbitán . Las suspensiones acuosas también pueden contener uno o más conservadores, por ejemplo, p- hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno o más agentes colorantes, y uno o más agentes, tales como sucrosa.

Las suspensiones aceitosas se pueden formular suspendiendo los componentes en un aceite vegetal, por ejemplo, aceite de cacahuate, aceite de oliva, aceite, de i sésamo, o aceite de coco, o en un aceite mineral o en un portador tal como parafina líquida. Las suspensiones aceitosas pueden contener un agente espesante, por ejemplo, I1 cera de abejas, parafina dura o alcohol acetílico. Otros agentes espesantes pueden incluir hidroximetilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxiletilcelulosa, ácido poliacrílico y/o carboximetilcelulosa sódica.

Polvos y gránulos dispersables convenientes para la preparación de una suspensión acuosa mediante la adición de I agua proporcionan la mezcla de composición activa con un agente de dispersión o humectante, agente de suspensión y uno o más conservadores. Agentes de dispersión o humectantes y agentes de suspensión convenientes son ejemplificados 'por aquellos ya mencionados antes. ! Una modalidad de la composición también puede ser en la forma de emulsiones de aceite-en-agua . La fase aceitosa puede ser un aceite vegetal, por ejemplo aceite de aceite de cacahuate, o un aceite mineral, por parafina liquida o mezclas de éstos. Agentes emulsionantes convenientes pueden ser gomas de origen natural, por ejemplo goma arábiga o goma tragacanto, fosfátidos de origen natural, j! por ejemplo, soya, lecitina y ésteres o ésteres parciales íi derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, i por ¡i ejemplo, monooleato de sorbitán, y productos de condensación de dichos ésteres parciales con óxido de etileno, : jjpor ejemplo, monooleato de polioxietilen-sorbitán. |¡ i i Una modalidad de la composición también puede !ser j¡ en la forma de supositorios para administración rectal de la composición. Estas composiciones pueden ser preparadas, !jpor ] I ejemplo, mezclando la composición con un excipiente1,: no irritante adecuado, el cual sea sólido a temperaturas ordinarias pero líquido a la temperatura rectal y, porj¡ lo tanto, se fundirá en el recto para liberar el fármaco. Dichos materiales son manteca de cacao y glicoles de polietil no, por ejemplo. i Las formulaciones de las composiciones útiles para practicar la presente invención pueden ser preparadas para almacenamiento mezclando la composición seleccionada que tenga el grado deseado de pureza con portadores farmacéuticamente aceptables, excipientes, o estabilizadores fisiológicamente opcionales en la forma de torta liofilizada o una solución acuosa. (Remington's Pharmaceutical Sciences, 18ava edición, A. R. Gennaro, ed. , Mack Publishing Company (1990) ) .

Modalidades de la composición pueden ser estériles. Esto se logra mediante la filtración a través de membranas de filtración estériles, antes o después de la liofilización y reconstitución. Una ' modalidad de la composición para administración parenteral ordinariamente será almacenada en forma liofilizada o en solución.

Modalidades de la composición pueden ser colocadas en un recipiente que tenga un puerto de acceso estéril,' por ejemplo, una bolsa o frasco con solución intravenosa ,' que tenga un tapón perforable por una aguja de inyección 1 hipodérmica. La ruta de administración de la composición es de acuerdo con métodos conocidos, por ejemplo, tópica, o a través de sistemas de liberación sostenida o dispositivos de interacción .

Ejemplos convenientes de preparaciones de liberación sostenida incluyen matrices de polímero semipermeables en la forma de artículos dimensionados, (por ejemplo, películas o microcápsulas . Las matrices ' de liberación sostenida incluyen poliésteres, hidrogeles, poliláctidos (Patente de los Estados Unidos No. 3,773,919, EP 58,481), copolímeros de ácido L-glutámico y gamma glutamato (Sidman, et al., Biopolymers, 22: 547-556 poli (2-hidroxietil-metacrilato) (Langer, et al., J. Biomed. Mater. Res., 15:167-277 (1981) and Langer, Chem. Tech., 12:98-105 (1982), etilenvinilacetato (Langer, o ácido poli-D(-) -3-hidroxibutírico (EP composiciones de liberación sostenida también pueden incluir liposomas, los cuales pueden ser preparados a través de cualquiera de varios métodos conocidos en la técnica ¡(por ejemplo, DE 3,218,121; Epstein, et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 82:3688-3692 (1985); Hwang, et al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 77:4030-4034 (1980); EP 52,322; EP 36,676; EP 88, 046; EP 143, 949) . !¡ Aunque aquí se han ilustrado y descrito algunas modalidades, aquellos expertos en la técnica apreciarán que una amplia variedad de modalidades o implementaciones alternas y/o equivalentes calculadas para lograr los mismos propósitos se pueden sustituir por las modalidades mostradas y descritas sin apartarse del alcance de la presente invención. Aquellos expertos en la técnica fácilmente apreciarán que modalidades de acuerdo con la presente invención pueden ser implementadas en una muy amplia variedad de formas. Esta solicitud pretende cubrir cualesquiera adaptaciones o variaciones de las modalidades áqui analizadas. Por lo tanto, se pretende de manera manifiesta que modalidades de acuerdo con la presente invención queden limitadas solamente por las reivindicaciones y los equivalentes de las mismas.

Todas las citas aquí contenidas quedan incorporadas en su totalidad por referencia.

Claims (31)

NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito el presente invento, se considera como una novedad y, por lo tanto, se reclama como prioridad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES

1. - Una composición transdérmica para terapia' de inducción utilizada con un tratamiento de anticuerpo monoclonal, la composición comprende las cantidades terapéuticamente efectivas de: un agente hipometilante de histona y ADN; y un inhibidor de la histona deacetilasa ("HDACi").

2. - La composición de conformidad con : la reivindicación 1, caracterizado porque el agente hipometilante es cladribina.

3. - La composición de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el HDACi comprende romidepsina, entinostat, vorinostat, ácido valproico, belinostat, panobinostat , o una combinación de los mismos. .

4. - La composición de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el HDACi es entinostat.

5. - La composición de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque la composición es preparada para administración a un paciente a través de un parche transdérmico .

6. - La composición de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cladribina comprende aproximadamente 20-100 mg/m2.

7. - La composición de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el HDACi comprende aproximadamente 40-80 mg/m2.

8. - La composición de conformidad con , la reivindicación 2, caracterizado porque la cladribina comprende aproximadamente 5-15 mg/m2.

9. - La composición de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque el HDACi comprende aproximadamente 10-20 mg/m2.

10.- La composición de conformidad con 'la reivindicación 1, caracterizado porque la composición comprende moléculas en donde los valores de log Kow son entre 1-3.

11.- Un parche transdérmico para terapia de inducción utilizado con un tratamiento de anticuerpo monoclonal, el parche comprende: un primer depósito para contener un primer componente; ' una primera membrana microporosa en comunicación de fluido con el primer depósito, la primer primera porosidad; un segundo depósito para co componente; una segunda membrana microporos fluido con el primer depósito, la segund segunda porosidad; en donde el primer componente hipometilante de histona y ADN en una transdérmica y el segundo componente comprende un HDACi ;ien i una segunda composición transdérmica; y ¡ en donde la primera porosidad y la primera composición transdérmica son seleccionadas para transferir i ! una cantidad efectiva del agente hipometilante de histona y ADN a través de la primera membrana sobre un primer periodo de tiempo deseado, y la segunda porosidad y composición transdérmica son seleccionadas para una cantidad efectiva del HDACi a través de la segunda i : i ! membrana sobre un segundo periodo de tiempo deseado. i : i

12. - El parche transdérmico de conformidad conjjla reivindicación 11, caracterizado porque la primera porosi y la segunda porosidad son sustancialmente las mismas.

13. - El parche transdérmico de conformidad con ¡¡la reivindicación 11, caracterizado porque el primer periodo de tiempo deseado y el segundo periodo de tiempo deseado son sustancialmente los mismos.

14. - El parche transdérmico de conformidad con la reivindicación 11, que además comprende una membrana impermeable que separa el primer depósito del segundo depósito.

15. - El parche transdérmico de conformidad con;1 la reivindicación 11, caracterizado porque la primera y segunda membranas microporosas definen una pluralidad de agujeros que tienen un diámetro de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 10 micrómetros, para formar la primera y segunda porosidades. I i¦

16. - El parche transdérmico de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el agente hipometilante de histona y ADN comprende aproximadamente 5-15 mg/m2 de cladribina.

17. - El parche transdérmico de conformidad con j.la reivindicación 11, caracterizado porque el HDACi comprende aproximadamente 10-20 mg/m2. 1

18. - El parche transdérmico de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el HDACi es entinostat y comprende aproximadamente 10-20 mg/m2. ;!

19. - El parche transdérmico de conformidad con la !j reivindicación 11', caracterizado . porque el agente hipometilante de histona y ADN comprende aproximadamente ¿0-100 mg/m2 de cladribina.

20. - El parche transdérmico de conformidad con i la reivindicación 11, caracterizado porque el HDACi comprende aproximadamente 40-80 mg/m2. ,>

21. - El parche transdérmico de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el HDACi es entinostat y comprende aproximadamente 40-80 mg/m2.

22. - Un método de terapia de inducción utilizado con un anticuerpo monoclonal en un tratamiento en un paciente que necesita el mismo, el cual comprende la administración 'ial paciente de una cantidad terapéuticamente efectiva de un agente hipometilante de histona y ADN y un HDACi. ' I 1

23. - El método de conformidad con la reivindicación ' í ' 22, caracterizado porque el agente hipometilante y el HDACi son administrados a través de un parche transdérmico.

24. - El método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque el agente hipometilante es administrado de forma oral, y el HDACi es administrado a través de un parche transdérmico. ,.

25. - El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque el agente hipometilante es cladribina.

26. - El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque el HDACi comprende romidepsina, entinostat, vorinostat, ácido valproico, belinostat, panobinostat , o una combinación de los mismos.

27. - El método de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado porque la cladribina es administrada en una cantidad de aproximadamente 5-20 mg/m2.

28. - El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque el HDACi es administrado en una cantidad de aproximadamente 10-80 mg/m2. ;

29. - El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque la cladribina es administrada en una cantidad de aproximadamente 5-100 mg/m2 y el HDACi es administrado en una cantidad de aproximadamente 10-80 mg/m2:

30. - El método de conformidad con la reivindicación i 22, caracterizado porque el agente hipometilante ¡es administrado a través de un parche transdérmico y el HDACi es administrado de forma oral.

31. - El método de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque el agente hipometilante s cladribina administrada en una cantidad de aproximadamente 5-100 mg/m2 y el HDACi es entinostat administrado en una cantidad de aproximadamente 5-10 mg.