MX2011010710A

MX2011010710A - Composiciones de combinacion de lactona macrociclica, vacunas y metodos para producirlas.

Info

Publication number: MX2011010710A
Application number: MX2011010710A
Authority: MX
Inventors: Majid Hameed Abdul Razzak; Robert William Lachlan Holmes
Original assignee: Merial Ltd
Priority date: 2009-04-14
Filing date: 2010-04-14
Publication date: 2012-01-25
Also published as: CA2758276C; CO6450627A2; US8313752B2; DK2419131T3; ZA201107324B; PL2419131T3; AU2010237070A1; EP2419131A4; BRPI1014571B1; WO2010120195A1; BRPI1014571A2; US20100266628A1; EP2419131A1; BRPI1014571B8; ES2546480T3; PT2419131E; CA2758276A1; EP2419131B1; CY1116630T1; AU2010237070B2

Abstract

Una composición inyectable, capaz de prevenir o controlar infecciones o enfermedades parasíticas, virales o bacterianas, por ejemplo diarrea, en vacas preñadas e infecciones o enfermedades virales en becerros neonatales al administrar parenteralmente a cada vaca en una manada de vacas preñadas, una dosis de una composición de combinación que comprende: (a) por lo menos un componente viral inactivado derivado de rotavirus y/o coronavirus; (b) un compuesto activo de lactona macrocíclica y (c) un portador parenteral farmacéuticamente aceptable y conservador. Las composiciones inyectables que incluyen eprinomectina dan por resultado residuos en la leche extremadamente bajos.

Description

COMPOSICIONES DE COMBINACIÓN DE LACTONA MACROCICLICA, VACUNAS Y MÉTODOS PARA PRODUCIRLAS CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se relaciona a mejoras en el campo de remedios veterinarios y más particularmente a mejoras en relación a formulaciones de vacuna de combinación que proporcionan protección contra parásitos asi como los virus y/o bacterias que son los factores causativos en la diarrea neonatal de becerros.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN El parto exitoso de la vaca y su transición a la lactancia son dos claves criticas para la productividad de la granja de ganado vacuno. Para que el granjero logre su meta de productividad hay dos retos de enfermedad críticos que deben superarse: Parasitismo en la vaca - La demanda de energía del becerro no nacido puede colocar a la vaca preñada bajo gran estrés. Como resultado la condición corporal sufre y el sistema inmune llega a ser menos efectivo en la guardia de la infección. Uno de los mayores tipos de infección es el parasitismo. Usualmente el ganado vacuno adulto tiene un alto grado de inmunidad a la infección parasitaria pero este no es el caso durante el período del parto.

Para ayudar a que la vaca supere cualquier carga de parásitos adquiridos los granjeros pueden tratar vacas durante la preñez con antihelmínticos. Estos productos son fármacos^ diseñados para exterminar poblaciones de gusanos residentes, y en algunos casos, prevenir la infección adicional durante un período de tiempo. Históricamente se han utilizado fármacos tales como levamisol, oxfendazol, fenbendazol, albendazol, abamectina e ivermectina. Estos se administran en forma oral, inyectable o tópica. Sin embargo tienen la desventaja que hay un riesgo de residuos de este fármaco antihelmíntico que está presente en la leche de la vaca después de que el parto ha ocurrido y la lactancia ha comenzado. En algunos países, tales antihelmínticos no se pueden utilizar para tratar animales cuya leche va a ser utilizada para el consumo humano, mientras que en otros países, el período de tratamiento antes del comienzo lactante debe ser en exceso de 60 días.

Diarrea en el Becerro - La causa mucho más común de la morbilidad del becerro en el período neonatal es la diarrea. La mayor causa de esta diarrea es la presencia de bacterias y virus que causan la diarrea, que incluyen Escherichia coli, Clostridium perfringens, Rotavirus y Coronavirus; frecuentemente en combinación y/o con otras bacterias, virus y parásitos intestinales.

Virus - La infección de rotavirus es la causa viral mucho más común de la diarrea en becerros. El rotavirus de los grupos A y B están involucrados, pero el grupo A es mucho más prevalente y clínicamente importante y contiene varios serotipos de diferente virulencia. El rotavirus se replica en la absorción madura y enterocitos que producen enzimas en las vellosidades del intestino delgado, conduciendo a la ruptura y desprendimiento de los enterocitos con liberación del virus para infectar células adyacentes. El rotavirus no infecta las células inmaduras de las criptas. Con cepas virulentas de rotavirus, la pérdida de enterocitos excede la habilidad de las criptas intestinales para reemplazarlos; por consiguiente, la altura vellosa se reduce, con una disminución consecuente en el área de la superficie de absorción intestinal y la actividad enzimática digestiva intestinal .

Coronavixrus también está comúnmente asociado con la diarrea en becerros. Se replica en el epitelio del tracto respiratorio superior y en los enterocitos del intestino, donde produce lesiones similares al rotavirus pero también infecta las células epiteliales del intestino grueso para producir atrofia de los rebordes colónicos.

Bacterias - La infección de E. coli es la causa bacteriana mucho más importante de la diarrea en becerros; por lo menos 2 distintos tipos de enfermedad diarreal se producen por diferentes cepas de este organismo. Un tipo está asociado con E. coli enterotoxigénica , la cual tiene 2 factores de virulencia asociados con la producción de la diarrea. Los antigenos fimbriales permiten que las bacterias se unan a y colonicen las vellosidades del intestino delgado. Las cepas presentes en los becerros poseen mucho más comúnmente K99 (F5) o antigenos fimbriales F41, o ambos. Estos antigenos son el enfoque de la protección inmunológica . La E. coli enterotoxigénica también expresa una enterotoxina termoestable, no antigénica (Sta) que influencia los iones intestinales y la secreción de fluidos para producir una diarrea secretoria no inflamatoria. La diarrea en becerros y corderos también se ha asociado con la E. coli enteropatogénica que se adhiere al intestino para producir una lesión de unión y destructora, con disolución del borde del cepillo y pérdida de la estructura de microvellosidad en el sitio de unión, una disminución en la actividad enzimática y cambios en el transporte de iones en el intestino. Estos enteropatógenos también son llamados "unión y destrucción de E. coli". Algunos producen verotoxina, la cual puede estar asociada con una diarrea hemorrágica más severa. La infección mucho más frecuentemente está en el ciego y el colon, pero el intestino delgado distal también se puede afectar. El daño en infecciones severas puede dar por resultado edema y erosiones mucosas y ulceración, conduciendo a la hemorragia en el lumen intestinal .

Tipos A, B, C y E de Clostridium perfringens producen una variedad de toxinas necrotizantes que causan una enteritis hemorrágica rápidamente fatal en becerros. La enfermedad en becerros es rara y usualmente esporádica.

En la actualidad, el tratamiento antihelmíntico de vacas preñadas se logra con una formulación antihelmíntica dedicada (oral, tópica y/o inyectable) . Estas formulaciones actualmente no contienen cualquier forma de tratamiento de vacuna capaz de proporcionar protección al becerro recién nacido. Sin embargo, un número de vacunas solo para la diarrea son actualmente marcadas para el uso en el ganado vacuno. Estas vacunas son generalmente clasificadas como inactivadas, refiriéndose al hecho que la vacuna contiene virus exterminados o componentes bacterianos. Típicamente estas vacunas contendrán cepas inactivadas que proporcionan protección de un número de elementos causales de diarrea (rotavirus, coronavirus, E. coli, enfermedades clostridiales ) . Las vacas son tratadas con la vacuna usualmente mediante inyección intramuscular profunda con una dosis de entre 2-5 mL. Este tratamiento como un refuerzo anual poco antes del parto proporciona un fuerte incremento en los anticuerpos en el calostro disponible al becerro inmediatamente después del parto. Los becerros alimentados con calostro de vacas vacunadas durante las primeras dos a cuatro semanas de vida han demostrado que tienen: Incidencia reducida de diarrea causada por rotavirus y coronavirus - Desprendimiento reducido de virus debido a la infección con rotavirus o coronavirus Severidad reducida de diarrea causada por E. coli .

Las vacunas de diarrea de esta clase disponibles en los Estados Unidos incluyen: GUARDIAN® (Schering-Plough) . Esta es una vacuna multi-componente que incluye el antigeno K99 de Escherichia coli, dos coronavirus inactivados, dos tipos G de rotavirus inactivados y bacterina-toxoide de Tipos C y D de Clostridium perfringens. GUARDIAN es recomendado para el uso en ganado vacuno preñado como una ayuda en la prevención de diarrea del becerro neonatal causada por K99 de tipo piloso de E. coli enterotoxigénico, rotavirus de Serotipo G6 del Grupo A bovino, enterotoxemia causada por los Tipos C y D de C. perfringens y como una ayuda en el control de diarrea de becerro neonatal causada por coronavirus bovino.

SCOURBOS 9 (Novartis) . Otra vacuna multi-componente que incluye, cuatro diferentes cepas de E. coli, tres rotavirus inactivados (serotipos G10, G6 y G8), Coronavirus inactivado y bacterina-toxoide Tipo C de Clostridium perfringens .

SCOURGUARD (Pfizer) . Una combinación de rotavirus bovino inactivado (serotipos G10, G6) , coronavirus inactivado y bacterina-toxoide K99 de E. coli. Para todas las tres vacunas, una dosis de 2 mL se administra por la vía de la inyección intramuscular profunda. No hay periodo de retención de leche aplicado a cualquiera de los ¦ tratamientos. Los programas de tratamiento dependen de dos programas de tratamiento de dosis en el primer año de uso, luego una sola dosis de refuerzo anual da cada año antes del parto. El tiempo recomendado en el cual los tratamientos deben de ser dados (en semanas antes del parto) se resume en la Tabla 1. Tabla 1.

Primer Año de Tratamiento (tiempo de tratamiento en Refuerzo anual semanas antes del parto) (tiempo de tratamiento en semanas antes Dosis Inicia! Dosis de Refuerzo del parto) GUARDIAN 12 semanas 9-6 semanas 7-5 semanas SCOURBOS 16-8 semanas 4 semanas 10-8 semanas SCOURGUARD 9-6 semanas 6-3 semanas 6-3 semanas La diferencia en los tiempos de tratamiento se explica mediante la efectividad relativa reclamada de los antigenos de vacuna utilizados con cada vacuna. Sin embargo debe ser notado que el número más cercano de semanas al parto en el cual los tres tratamientos son recomendados a ser administrados es 5 semanas (refuerzo anual GUARDIAN) , 4 semanas (Dosis de Refuerzo SCOURBOS) y 3 semanas (Dosis de Refuerzo SCOURGUARD y Refuerzo Anual) . En el mejor de los casos este es solamente 35 días del parto mientras que en el peor de los casos es 21 días del parto.

Alcanzar altos niveles de anticuerpo en el calostro a través del uso de vacunas potentes ha probado extremadamente efectiva en prevenir la diarrea del becerro. El programa de vacunación mucho más efectivo es uno en el cual el nivel de anticuerpos en el sistema de las vacas pico en o solo antes del parto, proporciona protección máxima al becerro por la vía del calostro.

Para este propósito hay un requerimiento de que la vacuna de refuerzo anual sea dada razonablemente cerca del parto. Hay otra razón porque los fabricantes de vacuna necesitan diseñar sus productos con la posibilidad de que la vacunación ocurrirá cerca del parto. Esta razón es que típicamente la vacuna ocurrirá en una base de la manada completa. Las vacas dentro de una manada serán debido a la aparición en diferentes fechas durante un período de varias semanas o meses. La anchura de la duración de parto y la impredecibilidad de la fecha del parto actual hace muy difícil seleccionar el tiempo ideal para el tratamiento. Para un mejor efecto, las vacunas podrían ser administradas 21-35 días (de acuerdo con la vacuna) antes de la fecha del parto esperada primero, dentro de la manada o 21-35 días antes de la fecha del parto esperada media dentro de la manada. Algunas vacas pueden parir pronto después de la vacunación mientras que otras pueden parir muchas semanas después. Además, la impredecibilidad de la fecha del parto actual comparado con la fecha del parto esperada puede significar que algunas vacas parirán mucho menos que 21-35 dias después del tratamiento y potencialmente tan cerca del día de tratamiento. Este corto tratamiento al intervalo de parto elimina la posibilidad de utilizar muchos compuestos activos antihelmínticos diseñados para tratar vacas preñadas de cualquier combinación de vacuna de diarrea potencial.

Las vacunas que contienen tanto lactonas macrocíclicas como antígenos, que incluye por ejemplo peptides, fracciones de membrana, patógenos inactivados y los similares, son un reto para formularse debido a las incompatibilidades de solvente/dispersante. Hay reportes previos de combinar ingredientes activos más plus vacunas, pero muy pocos de estos describen combinar lactonas macrocíclicas más una vacuna. Una razón posible para esto es que es bien conocido en la técnica que las lactonas macrocíclicas son susceptibles a la degradación en la presencia de otros activos o en ciertos sistemas de solvente, particularmente sistemas de solvente acuosos. Por ejemplo, GB-A-2030043 describe combinaciones inyectables de un activo de lactona no macrocíclica (tetramisol) más una vacuna. De manera importe, la aplicación no divulga composiciones que comprenden agentes dispersantes, la cual es un componente importante en las composiciones de lactona macrocíclica acuosas inyectables. Umehara y colaboradores reporta que combinar una lactona macrocíclica, doramectina, con una vacuna de enfermedad de pie y boca puede dar por resultado la interferencia (Rev. Brasil. Parasitol. Vet., 1993, 2(2):141-144). Otros ejemplos incluyen JP-A-62294623, los cuales diuvulgan composiciones orales que* comprenden antibióticos y Salmonella deactivada y GB-A-2267707 , que describe lactonas macrocíclicas en combinación opcional con la vacunación. La Patente Norteamericana 6,746,677B2 por Cobb ( yeth, Fort-Dodge Animal Health) general describe composiciones que comprenden compuestos macrólidos o mezclas de los mismos, un solvente orgánico soluble en agua, un agente dispersante, un adyuvante, por lo menos un antígeno y solución salina o agua o una mezcla de los mismos. Además, la solicitud de patente Norteamericana 2005/0118222 Al por Wolff describe simultáneamente llevar, por medio de una inyección, la lactona macrocíclica y un antígeno contra garrapatas. En otro ejemplo, la Patente Norteamericana 6,663,879 y la Patente Norteamericana 6,214,367 por Harvey describe composiciones inyectables estables que incluyen un agente parasítico no acuoso en una cantidad terapéuticamente efectiva, seleccionada del grupo de avermectina, ivermectina, doramectina, abamectina, milbemicina y moxidectina, y un antígeno en combinación con un portador líquido que también actúa como un adyuvante.

La presente invención resuelve el problema de combinar lactonas macrociclicas con vacunas al utilizar un sistema de solvente novedoso y no obvio. A diferencia de los solventes de alcohol que enseña Cobb, los Solicitantes han encontrado que acetamida de dimetilo (DMA) combinado con surfactantes específicos proporciona una concentración excepcionalmente estable y alta combinada con formulaciones macrociclicas / vacuna. El volumen de dosis efectiva resultante es deseablemente más bajo que las composiciones previas .

Por consiguiente, hay una necesidad real e insatisfecha en la técnica para un medio conveniente de tratar vacas preñadas que: proteger la vaca de los efectos de parasitismo mientras que se evitan residuos antihelmínticos en la leche; reducir el riesgo de diarrea en el becerro recién nacido debido a las enfermedades viral y bacteriana; y proporcionar al granjero con la habilidad de tratar vacas razonablemente cerca del parto.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Por lo tanto el problema dirigido por esta invención es la necesidad de proporcionar un tratamiento antihelmíntico/vacuna conveniente para los granjeros que mantienen la salud de las combinaciones de vaca/becerro asegurando mientras que no haya contaminación de la leche con residuos de fármaco, o que por lo menos proporcionará al granjero con una selección útil. En un aspecto la invención proporciona un método para prevenir o controlar enfermedades parasíticas en vacas preñadas y enfermedades virales en becerros neonatales al administrar parenteralmente a la vaca preñada una cantidad efectiva de una composición de combinación que contiene por lo menos un componente viral, tal como rotavirus inactivado o coronavirus inactivado, junto con uno o más compuestos activos de lactona macrocíclica, por ejemplo, eprinomectina y un portador y conservador parenteral adecuado. El activo o activos de lactona macrocíclica pueden incluir, pero de ninguna manera ser limitados a, abamectina, dimadectina, doramectina, emamectina, eprinomectina, ivermectina, latidectina, lepimectina, selamectina, milbemectina, milbemicina D, milbemicina oxima, moxidectina o nemadectina. Otro aspecto de la presente invención proporciona las composiciones de combinación utilizadas en los método2s.

En otro aspecto el método también puede controlar la infección por bacterias que causan enfermedad tal como E. coli mediante la inclusión con el componente viral inactivado una bacterina-toxoide de E. coli y/o una bacterina-toxoide producida por otras bacterias que causan enfermedad. El mismo volumen de dosis se puede administrar al ganado vacuno que pesa de 400 kg a 800 kg. Esto tiene la ventaja que una manada de vacas preñadas se puede tratar rápidamente al aplicar el mismo volumen de dosis a pesar del peso de cada vaca como una manada típica consiste de vacas dentro de ese intervalo de peso. Alternativamente, los soportes de peso para cada dosis puede ser restringida de modo que la invención puede suministrar una dosis activa de lactona macrocíclica de 200 pg/kg a 400 yg/kg.

En otro aspecto la invención proporciona una composición inyectable para prevenir o controlar tanto enfermedades parasíticas como enfermedades virales en ganado vacuno, a composición que contiene (a) una cantidad efectiva de por lo menos un componente viral seleccionado del grupo que consiste de rotavirus inactivado y coronavirus inactivado, (b) un compuesto activo antihelmíntico de lactona macrocíclica tal como abamectina, doramectina, eprinomectina, ivermectina, moxidectina (c) un portador adecuado y (d) un conservador. La composición inyectable puede incluir una bacterina-toxoide de E. coli.

En otro aspecto la invención proporciona un método para prevenir o controlar enfermedades parasíticas en vacas preñadas y diarrea en becerros neonatales al administrar parenteralmente a la vaca preñada una cantidad efectiva de una composición de combinación que contiene .un compuesto activo de lactona macrocíclica y un componente viral seleccionado del grupo que comprende rotavirus inactivado, coronavirus inactivado y bacterina-toxoide de E. coli. En algunos aspectos, la lactona macrocíclica es eprinomectina.

A menos de que sea definido de otra manera en los ejemplos específicos, el término "cantidad efectiva", como se utiliza en la presente, generalmente significa una cantidad del componente activo o vacuna que es suficiente para causar un "efecto biológicamente útil" en un animal. El "efecto biológicamente útil" puede incluir, por ejemplo: prevención o control de parasites dentro o sobre animales, estimulación de una respuesta inmune que protege a los animales de estimulación subsecuente con la enfermedad o agentes o patógenos que causan la enfermedad, o cualquier otro efecto que una persona experta fácilmente apreciará como que es benéfica, protectora y/o conductiva para el mantenimiento o mejora de la salud del animal, bienestar de, productividad, longevidad, resistencia a la enfermedad y los similares.

Estas y otras modalidades se describen en, o son obvias de y abarcadas por, la siguiente Descripción Detallada .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La siguiente descripción detallada, dada a manera de ejemplos, pero no propuesta para limitar la invención únicamente a las modalidades específicas descritas, puede ser mejor entendida en conjunción con los dibujos acompañantes, en los cuales: La FIG. 1 es una gráfica de residuos de eprinomectina en la leche la FIG. 2 es una gráfica de residuos de ivermectina en la leche la FIG. 3 es una gráfica de residuos de moxidectina en la grasa de la leche la FIG. 4 es una gráfica de residuos de moxidectina en la leche entera la FIG. 5 es una gráfica de residuos de doramectina en la leche la FIG. 6 es una gráfica de residuos medios del grupo en la leche (eprinomectina, ivermectina, doramectina) la FIG. 7 es una gráfica de residuos de moxidectina media del grupo en la leche entera DESCRIPCIÓN DETALLADA Es notado que en esta descripción y particularmente en las reivindicaciones y/o párrafos, los términos tales como "comprende", "comprendido", "que comprende" y los similares pueden tener el significado atribuido a éstos en la ley de Patente Norteamericana; por ejemplo, puede significar "incluye", "incluido", "que incluye" y los similares; y esos términos tales como "esencialmente que consiste de" y "esencialmente consiste de" tienen el significado adscrito al término en la ley de Patente Norteamericana, por ejemplo, permitir elementos no explícitamente recitados, pero excluyen elementos que se encuentran en la técnica previa o que afectan una característica básica o novedosa de la invención.

Se va a entender que tanto la descripción general anterior como la siguiente descripción detallada son ejemplares y explicativas solamente y no son restrictivas de la invención como es reclamada.

La presente invención proporciona composiciones de combinación que son efectivas para prevenir o controlar infecciones parasíticas, bacterianas o virales en ganado vacuno que comprenden (a) una cantidad efectiva de un componente viral, que comprende por lo menos un rotavirus o coronavirus inactivado y (b) por lo menos un agente activo de' lactona macrocíclica en un portador farmacéuticamente aceptable.

El componente viral puede ser una vacuna comercialmente disponible, por ejemplo, vacunas para especia bovino RESPISHIELDMR o RELIANT® de Merial. Las 4 vacunas RELIANT®, por ejemplo, incluyen ochos combinaciones de antígeno, que permiten flexibilidad significante a las composiciones de combinación de la presente invención. El componente viral puede comprender cualquier número de adyuvantes bien conocidos, por ejemplo, adyuvante TS6 de Merial descrito por ejemplo en la Patente Norteamericana 7,371,395 por Parisot y colaboradores. El adyuvante TS6 es actualmente con éxito utilizado, por ejemplo, en vacuna M. hyopneumoniae Libre de Aguja S IVAXMR-MH de Merial para cerdo. El adyuvante también puede ser adyuvante LR4 de Merial, descrito por ejemplo en la Patente Norteamericana US 7,691,368 también por Parisot y colaboradores. La invención por lo tanto se propone abarcar composiciones de combinación que pueden ser útilmente aplicadas a por lo menos animales bovinos y porcinos.

También se proporcionan métodos para la prevención o control de infecciones parasíticas, bacterianas o virales, que comprenden administrar una cantidad efectiva de las composiciones de la invención al animal en necesidad del mismo.

Los compuestos antihelmínticos de lactona macrocíclica contemplados en esta invención son bien conocidos por un profesional ordinariamente experto. Estos compuestos incluyen avermectinas y milbemicinas , colectivamente conocidos como la clase lactona macrocíclica de compuestos activos antihelmínticos. Para las avermectinas, ivermectina y abamectina, la referencia se puede hacer, por ejemplo, por la publicación "Ivermectin and Abamectin", 1989, por M.H. Fischer and H. Mrozik, William C. Campbell, publicada por Springer Verlag., "Macrocyclic Lactones in Antiparasitic Therapy", 2002, por J Vercruysse y RS Rew publicada por CABI Publishing o Albers-Schónberg y colaboradores, (1981), "Avermectins Structure Determination", J. Am. Chem. Soc, 103, 4216-4221. Para la doramectina, "Veterinary Parasitology", volumen 49, No. 1, 5-15 de Julio de 1993, puede ser consultado. Para las' milbemicinas, la referencia se puede hacer, ínter alia, por Davies H.G. y colaboradores, 1986, "Avermectins and Milbemycins", Nat. Prod. Rep., 3, 87-121, Mrozik H. y colaboradores, 1983, Synthesis of Milbemycins from Avermectins, Tetrahedron Lett., 24, 5333-5336, Patente Norteamericana No. 4,134,973 y EP 0 677 054, todas de las cuales son incorporadas en la presente por referencia.

Las lactonas macrociclicas son ya sea productos naturales o son derivados semi-sintéticos de los mismos. Las estructuras de las avermectinas y milbemicinas son estrechamente relacionadas, por ejemplo, al compartir un anillo de lactona macrociclica de 16 miembros complejo; milbemicinas carentes de la porción glicosidica de las avermectinas. Las avermectinas de productos naturales se divulgan en la Patente Norteamericana No. 4,310,519 por Albers-Schónberg y colaboradores y los compuestos 22,23-dihidro avermectina se divulgan en Chabala y colaboradores, Patente Norteamericana No. 4,199,569. La mención también se hace de Kitano, Patente Norteamericana No. 4,468,390, Beuvry y colaboradores, Patente Norteamericana No. 5,824,653, EP 0 007 812 Al, Especificación de Patente U.K. 1 390 336, EP 0 002 916 y Patente de Nueva Zelanda Aneare No. 237 086, Ínter alia. Las milbemicinas que ocurren naturalmente son descritas en Aoki y colaboradores, Patente Norteamericana No. 3,950,360 así como las varias referencias citadas en "The Merck Index" 12- edición, S. Budavari, Ed., Merck & Co., Inc. Whitehouse Station, Nueva Jersey (1996). La latidectina se describe en la "International Nonproprietary ames for Pharmaceutical Substances (INN)", WHO Drug Information, volumen 17, no. 4, páginas 263-286, (2003) . Los derivados semisintéticos de estas clases de compuestos son bien conocidos en la técnica y son descritos, por ejemplo, en las Patentes Norteamericanas No. 5,077,308, Patente Norteamericana No. 4,859,657, Patente Norteamericana No. 4,963,582, Patente Norteamericana No. 4,855,317, Patente Norteamericana No. 4,871,719, Patente Norteamericana No. 4,874,749, Patente Norteamericana No. 4,427,663, Patente Norteamericana No. 4,310,519, Patente Norteamericana No. 4,199,569, Patente Norteamericana No. 5,055,596, Patente Norteamericana No. 4,973,711, Patente Norteamericana No. 4,978,677, Patente Norteamericana No. 4, 920, 148 y EP 0 667 054, todas incorporadas en la presente por referencia.

Ejemplos no limitantes de los compuestos que pertenecen a esta clase son representados por la Fórmula R3 Fórmula (I) Donde la linea quebrada indica un enlace sencillo o doble en las posiciones 22,23; Ri es hidrógeno o hidroxi con la condición de que Ri está presente solamente cuando la linea quebrada indica un enlace sencillo; R2 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o alquenilo de 3 a 6 átomos de carbono o cicloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono; R3 es hidroxi, metoxi o = NOR5 donde R5 es hidrógeno o alquilo inferior; y R4 es hidrógeno, hidroxi o donde R6 es hidroxi, amino, mono- o di-alquilamino inferior alcanoilamino inferior.

En algunas modalidades, los compuestos son avermectina Bla/Blb (abamectina) , 22 , 23-dihidro avermectina Bla/Blb (ivermectina) y el derivado de 4"-acetil-amino-5-cetoximino de avermectina Bla/Blb. Tanto abamectina como ivermectina son aprobadas como agentes antipara-sitíeos de espectro amplio. Las estructuras de abamectina e ivermectina son representadas por la Fórmula (II) : OH en donde Ri y R2 son como se definen en lo anterior para la fórmula (I) . Para la abamectina la línea quebrada representa un enlace doble y Ri no está presente y para la ivermectina el enlace doble representa un enlace sencillo y Ri es hidrógeno; y R2 es isopropilo o sec- butilo.

Los derivados de 4"-acetil amino-5-cetoximino de avermectina Bla/Blb son representadas por la Fórmula (III): donde R2 es isopropilo o sec-butilo.

En algunas modalidades, los productos de avermectina se pueden preparar como un mezcla que comprende por lo menos 80% de un compuesto de acuerdo con la Fórmula (II o III) en donde R2 es sec-butilo y no más de 20% de un compuesto de acuerdo con la Fórmula (II o III) en donde R2 es isopropilo .

En otras modalidades, las avermectinas pueden incluir emamectina, eprinomectina y doramectina. La doramectina tiene una estructura de acuerdo con la Fórmula (IV) : La eprinomectina se describe en la Patente Norteamericana 4,427,663 (incorporada en la presente por referencia) y tiene una estructura de acuerdo con Fórmula (V) : En algunas modalidades de la presente invención, 1 milbemicina es moxidectina, representada por la Fórmula (VI) Algunas modalidades pueden incluir los derivados de avermectina de monosacárido que tienen una sustitución de oxima en la posición 5 del anillo de lactona. Otras modalidades incluyen milbemicinas tal como milbemicina ai, que es representada por la Fórmula (VII) .

?· OH También contempladas dentro del alcance invención son sales de ácido o base de los compuestos en las composiciones de la invención, donde es aplicable.

El término "ácido" contempla todos los ácidos inorgánicos u orgánicos farmacéuticamente aceptables. Los ácidos inorgánicos incluyen ácidos minerales tales como ácidos hidrácidos tales como ácido bromhidrico y ácido clorhídrico, ácido sulfúrico, ácidos fosfóricos y ácido nítrico. Los ácidos orgánicos incluyen todos los ácidos carboxílicos alifáticos, alicíclicos y aromáticos, ácidos dicarboxílicos, ácidos tricarboxílicos y ácidos grasos. En una modalidad de los ácidos, los ácidos son ácidos carboxílicos alifáticos de Ci-C2o de cadena recta o ramificada, saturados o insaturados, que son opcionalmente sustituidos por halógeno o por grupo hidroxilo, o ácidos carboxílicos aromáticos de C6-C12. Ejemplos de tales ácidos son ácido carbónico, ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico, ácido isopropiónico, ácido valérico, ácidos a-hidroxi tales como ácido glicólico y ácido láctico, ácido cloroacético, ácido benzoico, ácido metano sulfónico y ácido salicílico. Ejemplos de ácidos dicarboxílicos incluyen ácido oxálico, ácido málico, ácido succínico, ácido tartárico, ácido fumárico y ácido maleico. Un ejemplo de un ácido tricarboxílico es ácido cítrico. Los ácidos grasos incluyen todos los ácidos carboxílicos saturados o insaturados alifáticos o aromáticos farmacéuticamente aceptables que tienen de 4 a 24 átomos de carbono. Ejemplos incluyen ácido butírico, ácido isobutírico, ácido sec-butírico, ácido laúrico, ácido palmítico, ácido esteático, ácido oleico, ácido linoleico, ácido linolénico y ácido fenilestérico . Otros ácidos incluyen ácido glucónico, ácido glicoheptónico y ácido lactobiónico .

El término "base" contempla todos las bases inorgánicas u orgánicas farmacéuticamente aceptable, que incluyen hidróxidos, carbonatos o bicarbonatos de metal alcalino o metales alcalinotérreos . Sales formadas con tales bases incluyen, por ejemplo, las sales de metal alcalino y metal alcalinotérreo, que incluyen, pero no limitados a, ya sea las sales de litio, sodio, potasio, magnesio o calcio. Sales formadas con bases orgánicas incluyen las sales de amina de hidrocarburo y heterocíclicas comunes, que incluyen, por ejemplo, sales de amonio (NH4+) , sales de alquil- y dialquilamonio y sales de aminas cíclicas tales como las sales de morfolina y piperidina.

Además, los compuestos dentro de las composiciones de la invención pueden existir como hidratos o solvatos, en que una cierta cantidad estequiométrica de agua o un solvente esté asociado con la molécula en la forma cristalina. Las composiciones de la invención pueden incluir hidratos y solvatos de los agentes activos.

Los términos utilizados en la presente tendrán su significado habitual en la técnica a menos de que sea especificado de otra manera. El término "alquilo" se refiere a hidrocarburos de cadena saturada, ramificada, cíclicos, primarios, secundarios o terciarios, que incluyen aquellos que tienen de 1 a 12 átomos. En algunas modalidades, los grupos alquilo incluirán grupos alquilo de Ci-Cio, Ci-Cs, C1-C6 o C1-C4. Ejemplos de alquilo de C1-C10 incluyen, pero no están limitados a, metilo, etilo, propilo, 1-metiletilo, butilo, 1-metilpropilo, 2-metilpropilo, 1 , 1-dimetiletilo, pentilo, 1-metilbutilo, 2-metilbutilo, 3-metilbutilo, 2,2-dimétil-propilo, 1-etilpropilo, hexilo, 1 , 1-dimetilpropilo, 1,2-dimetilpropilo, 1-metilpentilo, 2-metilpentilo, 3-metil-pentilo, 4-metilpentilo, 1 , 1-dimetilbutilo, 1,2-dimetil-butilo, 1, 3-dimetilbutilo, 2, 2-dimetilbutilo, 2,3-dimetil-butilo, 3, 3-dimetilbutilo, 1-etilbutilo, 2-etilbutilo, 1,1,2-trimetilpropilo, 1 , 2 , 2-trimetilpropilo, 1-etil-l-metil-propilo, l-etil-2-metilpropilo, heptilo, octilo, 2-etil-hexilo, nonilo y decilo y sus isómeros. Alquilo de C1-C4 significa por ejemplo metilo, etilo, propilo, 1-metiletilo, butilo, 1-metilpropilo, 2-metilpropilo o 1 , 1-dimetiletilo .

El término "alquilo inferior" se refiere a grupos alquilo como se definen en lo anterior, que tienen 1-3 átomos de carbono.

En algunas modalidades, la presente invención puede incluir composiciones que son efectivas en tratar y/o prevenir infestaciones de endoparásitos . Los endoparásitos pueden incluir helmintos tales como Anaplocephala , Ancylostoma, Anecator, Ascaris, Capillaria, Cooperia, Dipylidium, Dirofilaría , Echinococcus , Enterobius, Fasciola , Haemonchus, Oesophagostumum, Ostertagia , Toxocara , Strongy hides, Toxascaris , Trichinella , Trichuris y Trichostrongylus.

Los helmintos también incluyen Anaplocephala , Ancylostoma, Anecator, Ascaris, Capillaria, Cooperia, Dipylidium, Dirofilaria , Echinococcus , Enterobius , Fasciola , Haemonchus , Oesophagostumum, Ostertagia , Toxocara , Strongy hides, Toxascaris , Trichinella , Trichuris y Trichostrongylus . U otros de la clase de helmintos, tales como de la clase de helmintos, por ejemplo, Ancylostoma duodenale, Ancylostoma ceylanicum, Acylostoma braziliensis , Ancylostoma spp., Ascaris lubricoides, Ascaris spp., Brugia malayi, Brugia timori, Bunostomum spp., Chabertia spp., Chnorchis spp., Cooperia spp., Dicrocoelium spp, Dictyocaulus filaría, Diphyllobothrium latum, Dracunculus medinensis , Echinococcus granulosus , Echinococcus multihcularis, Enterobius vermicularis, Facióla spp., Haemonchus spp., Heterakís spp., Hymenolepis nana, Hyostrongulus spp., Loa Loa, Nematodirus spp., Oesophagostomum spp., Opisthorchis spp., Onchocerca volvulus, Ostertagia spp., Paragonimus spp., Schistosomen spp., Strongyloides fuelleborni, Strongyloides stercoralis, Stronyhides spp., Taenia saginata, Taenia solium, Trichinella spiralis , Trichinella nativa, Trichinella britovi, Trichinella nelsoni, Trichinella pseudopsiralis , Trichostrongulus spp., Trichuris trichuria y Wuchereria bañerofti .

Cuando se administran tópicamente al ganado vacuno, la Eprinomectina no se metaboliza extensivamente y el compuesto de origen constituye 90% de residuos en los tejidos y más de 85% en las heces. La eprinomectina también tiene un coeficiente de plasma en la leche relativamente bajo (< 0.2) que indica mayor división del compuesto fuera de la leche y en el plasma. En contraste, muchos otros compuestos de lactona macrocíclica pueden tener coeficientes de plasma en la leche de alrededor de 1.0. Los compuestos activos que tienen un coeficiente de plasma en la leche igual a 1.0 se definen en la presente (y serán entendidos por una persona ordinariamente experta) que no tiene tendencia a la partición de ya sea cerca o lejos de la leche. Alvinerie y colaboradores, (1999) examine las farmacocinéticas de eprinomectina en el ganado vacuno lactante y concluyó que solamente 0.1% de la dosis total se eliminó en la leche, que fue 50 veces menos que aquella observada para su ivermectina o moxidectina.

Cuando se administra tópicamente eprinomectina u otros compuestos activos de lactona macrocíclica se pueden administrar a una dosis de aproximadamente 500 µg/kg de peso corporal. Cuando se administra por la vía de inyección subcutánea, los tratamientos de lactona macrociclica se administran típicamente a una dosis de aproximadamente 100 pg/kg a aproximadamente 400 g/kg. Estas dosis parecen ser suficientes para lograr la eficacia contra un intervalo amplio de parásitos con niveles variantes de susceptibilidad a los diversos compuestos activos de lactona macrociclica.

En algunas modalidades, las formulaciones o composiciones de acuerdo con la presente invención pueden contener de aproximadamente 0.5% p/v a aproximadamente 10% p/v de eprinomectina u otro compuesto actilvo de lactona macrociclica; la dosis se1 puede suministrar al animal de aproximadamente 100 yg/kg a aproximadamente 400 g/kg, o de aproximadamente 200 yg/kg a aproximadamente 300 g/kg.

En otra modalidad, una dosis y volumen estándar de las formulaciones de acuerdo con la presente invención serán efectivas en prevenir y/o tratar o aliviar, enfermedad, desórdenes o infestaciones en animales que pesan de 400 kg a 800 kg.

En otras modalidades, los animales que pesan 600 kg y más reciben una dosis y volumen estándar mientras que los animales que pesan de 599 kg a 400 kg reciben una dosis de aproximadamente 75% del tamaño de la dosis estándar. La Tabla 2 proporciona tamaños de dosis de muestra cuando las composiciones de acuerdo con la presente invención comprenden Eprinomectina .

En una modalidad, las composiciones de acuerdo con la presente invención comprenden una lactona macrociclica, por ejemplo, eprinomectina, un sistema de solvente de eprinomectina, por lo menos un componente viral y surfactantes que permiten a la lactona macrociclica y el componente viral forma una composición farmacéuticamente aceptable estable.

En una modalidad, la composición comprende eprinomectina, el sistema de solvente comprende DMA (acetamida de dimetilo) y MYGLYOL 840 (diésteres de propilenglicol de ácidos caprilico y cáprico) y el componente viral se deriva de rotavirus o coronavirus.

En otra modalidad, la composición adicionalmente comprende surfactantes tales como Span 20 (Monolaurato de sorbitan) , Span 80 (Monooleato de sorbitan) o TWEEN (surfactantes de polisorbato) tales como Tween 80 (Monooleato de sorbitan de polioxietileno (20)), surfactantes que funcionan para facilitar la formulación de una múltiple emulsión estable entre eprinomectina completamente disuelta, surfactantes y el por lo menos un componente viral. En algunas modalidades, las cantidades de dosis efectivas son indicadas por la Tabla 2.

Tabla 2 — Dosis suministrada de la composición de Eprinomectina por peso del animal.

Tamaño de dosis/concentración de Peso del Animal Dosis suministrada eprinomectina en la formulación 5mL/3.2%p/v 400kg 400 g/kg 5mL/3.2%p/v 500kg 320µß^ß 5mL/3.2% p/v 600kg 266Wg/kg 5mL/3.2%p/v 700kg 228µß??8 5mL/3.2% P/v 800kg 200ug/kg La Tabla 3 proporciona tamaños de dosis de muestra cuando las composiciones de acuerdo con la presente invención comprenden Ivermectina.

Tabla 3 - Dosis suministradas de la composición de Ivermectina por peso del animal.

Tamaño de dosis/concentración de Peso del Animal Dosis suministrada ivermectina en la formulación 3mL / 4.0%p/v 400kg 300µ8^ 3mL/4.0% p/v 500kg 2 0µß^ 3mL/4.0%p/v 599kg 200µß ß 4mL/4.0%p/v 600kg 266µ /k 4mL / 4.0% p/v 700kg 228 g/kg 4mL/4.0%p/v 800kg 200 g/kg En otra modalidad, las composiciones de acuerdo con la presente invención se pueden preparar utilizando las etapas que comprenen: (a) preparar un componente de solución de lactona macrociclica; (b) preparar un componente de vacuna que es adecuado para tratar neonatos; y (c) mezclar los componentes (a) y (b) para producir las composiciones. En todavía otra modalidad, las composiciones son emulsiones estables y adecuadas para inyección en un animal, por ejemplo un animal bovino, porcino, caprino, ovino o equino.

En algunas modalidades donde la eprinomectina se utiliza, el componente de solución de lactona macrociclica puede comprender DMA (acetamida de dimetilo) y MIGLYOL (diésteres de propilenglicol de ácidos caprilico y cáprico) , los surfactantes pueden incluir Lecitina y SPAN, y el componente viral se puede suministrar de rotavirus o coronavirus. Las composiciones pueden comprender además opcionalmente componentes de bacterias o protistas que causan la enfermedad, por ejemplo, bacterina-toxoide de E. coli.

Las composiciones de acuerdo con la presente invención pueden comprender componentes de acuerdo con las Tablas 4 - 8.

Tabla 4 (% p/v) Eprinomectina (Ivermectina) 8% (4%) Acetamida de dimetilo 15% Miglyol 840 55% Surfactantes 5% Vacuna/adyuvante/mezcla de agua por vol.

Tabla 5 (% p/v) A amectina 4% Acetamida de dimetilo 15% Miglyol 840 55% Surfactantes 5% Vacuna/adyuvante/mezcla de agua por vol .

Tabla 6 (% p/v) Moxidectina 4% Acetamida de dimetilo 15% Miglyol 840 55% Surfactantes 5% Vacuna/adyuvante/mezcla de agua por vol.

Tabla 7 (% p/v) Eprinomectina 4% Acetamida de dimetilo 15% Miglyol 840 55% Surfactantes 5% Vacuna/adyuvante/mezclá de agua por vol .

Tabla 8 (% p/v) Doramectina 4% Acetamida de dimetilo 15% Miglyol 840 55% Surfactantes 5% Vacuna/adyuvante/mezcla de agua por vol .

En una modalidad, un componente de vacuna neonatal acuerdo con la presente invención comprende los ingredientes como se exponen en la Tabla 9.

Tabla 9 - Componente de vacuna neonatal Ingredientes Concentración (dosis por 2 mL) otavirus bovino, cepa UK-Corapton, l* de dosis de vacuna estimula un serotipo G6 P5 (inactivado) titulo de anticuerpo que neutraliza un virus: > 7.7 log2/mL (conejillos de indias) Coronavirus bovino, cepa Medus 1/20 de dosis de vacuna estimula un (inactivado) titulo de anticuerpo de ELISA: > 3.41 loglO/mL (conejillos de indias ) Adhesina de E. coli (K99) 1/20 de dosis de vacuna estimula un anticuerpo de ELISA (OD492 ) : >0.64 (conejillos de indias) Adyuvante Aceite Mineral Claro/Emulsionante 1.40 mL Hidróxido de aluminio 2.45-3.32 mg Excipientes Tiomersal 0.051-0.069 mg Otros constituyentes Formaldehido < 0.34 mg Tiosulfato de sodio No dado Cloruro de Sodio 0.85% p/v Agua para Inyección q.s En una modalidad, un componente de solución de eprinomectina de acuerdo con la presente invención puede comprender los ingredientes como se exponen en la Tabla 10 o Tabla 11.

Tabla 10 - Componente de solución de eprinomectina Ingredientes Concentración (mg/mL) Cantidad por 50 mL Eprinomectina (8%) 80 4.0 g DMA (15%, 20% & 25%) 150/200/250 7.5/10/12.5 g Monooleato de sorbitan (5% 50/100 2.5/5 g & 10%) Miglyol 840 Por volumen final Por volumen final Tabla 11 - Componente de solución de eprinomectina Ingredientes Concentración (mg/mL) Eprinomectina 80 DMA 40 Lecitina (6%) 60 SPAN 20 (1%) 10 MIGLYOL 840 Por volumen final Las composiciones de acuerdo con la presente invención se pueden producir por varios métodos utilizando sistemas de solvente y surfactantes . Además, la identificación de un sistema portador adecuado para producir una composición estable que comprende lactonas macrociclicas y otros activos es un reto y no obvio. Es bien conocido en la técnica que es muy difícil de formular agentes activos de lactona macrocíclica junto con ciertos otros activos debido a diferentes requerimientos de portador y la susceptibilidad de lactonas macrociclicas para la degradación en ciertos solventes. Las avermectinas y milbemicinas, por ejemplo, son pobremente solubles en agua y no son compatibles con condiciones acidicas, mientras que algunos agentes antihelmínticos tales como levamisol son más solubles en agua y requieren condiciones de pH acidicas para la estabilidad óptima (ver la Patente Norteamericana 2006/0128641 Al) . Por ejemplo, la Patente Norteamericana No. 6,489,303 por Jancys y colaboradores, describe aquellas mezclas de una lactona macrocíclica y un agente antihelmíntico insoluble que dio por resultado una proporción incrementada de degradación del agente activo de lactona macrocíclica, requiriendo la adición de exceso de antioxidante para estabilizar la mezcla. Por lo tanto, la combinación de un complejo, vacuna neonatal multi-componente y una lactona macrocíclica, en una sola composición líquida que es tanto estable como eficaz contra un espectro amplio de endoparásitos , y al mismo tiempo provoca respuestas inmunes específicas de patógeno, representa un logro significante en el campo de la medicina veterinaria que ni es predecible ni obvio.

De particular reto experimental se estableció un sistema de solvente que podría disolver adecuadamente las concentraciones relativamente altas de eprinomectina que se requieren para las composiciones para suministrar una dosis efectiva a los animales. De hecho, solamente a través de los métodos inventivos divulgados en la presente podrían ser la alta concentración de la eprinomectina mezclada con componentes inmunogénicos, tales como los componentes de vacuna neonatal discutidos en lo anterior. La experimentación rigurosa estableció que la eprinomectina podría no ser adicionada a los componentes inmunogénicos a menos de que la eprinomectina se disolviera primero en el componente de solvente y luego se combinó con los componentes inmunogénicos que dan por resultado emulsiones de acuerdo con la presente invención .

En una modalidad, las composiciones de combinación de acuerdo con la presente invención se pueden manufacturar al combinar volúmenes iguales de componentes de solución de eprinomectina con componentes de vacuna inmunogénicos o neonatales. En una modalidad, aproximadamente 2 mL de componente de vacuna neonatal se combina con aproximadamente 2 mL de solución de eprinomectina para producir aproximadamente 4 mL de una composición de combinación, que también será referida en la presente como un "producto final".

En otra modalidad, una fase de agua para un componente de vacuna inmunogénico o neonatal de la presente invención se puede preparar de acuerdo con las etapas que comprenden: (a) adicionar agua inyectable; (b) adicionar THIO ERSAL; (c) mezclar hasta que esté clara; (d) adicionar tiosulfato de sodio; (e) mezclar hasta que esté clara; (f) adicionar cloruro de sodio; (g) mezclar hasta que esté clara; (h) adicionar formaldehido; (i) mezclar hasta que esté clara; (j) adicionar concentrados de antigeno, los cuales se pueden derivar de rotavirus y coronavirus; (k) llevar a volumen co agua inyectable para formar la fase de agua. En otra modalidad, la fase de agua se combina con una fase aceitosa, formando una emulsión, la cual es el componente de vacuna inmunogénico o neonatal de la presente invención. La emulsión se puede preparar utilizando aceite mineral cloro u otro emulsionante adecuado y se puede tener una apariencia blanquecina .

En una modalidad, las composiciones de acuerdo con la presente invención pueden ser emulsiones liquidas blancas o blanquecinas lisas con jeringabilidad aceptable. Cualquier separación se puede resuspender fácilmente con agitación suave, aun cuando las composiciones están a aproximadamente 2-8 °C. En una modalidad, el componente de vacuna se puede preparar de virus y/o bacterias originalmente obtenidas en el campo y más específicamente, se pueden preparar de varias combinaciones de coronavirus bovino, rotavirus bovino y E. coli originalmente obtenidos en el campo. Un experto en la técnica puede obtener fácilmente otras cepas apropiadas de depósitos adecuados, fuentes académicas o comerciales.

En otra modalidad, las fracciones virales de la invención, los virus se cultivaron en cultivo celular de aproximadamente 35°C a aproximadamente 39°C, o aproximadamente 37 °C. El virus luego se cosechó y se inactivo con un agente inactivador que no destruye las partículas de virus o antigenicidad de acuerdo con los métodos estándar conocidos en la técnica.

La producción de las fracciones bacterianas similarmente involucró un proceso de crecimiento del organismo bacteriano en un medio de crecimiento para producir cantidades grandes de toxinas. Estas luego se cosechan y se inactivan con un agente inactivador. Cuando se inyectan en el animal estos "toxoides" llegan a ser antígenos los cuales el sistema inmune reconoce como extraños, para de esta manera activar la producción de anticuerpos.

Las composiciones en formas para varias rutas de administración se contemplan por la invención. Y nuevamente, la dosificación y ruta efectiva de administración se determinan por factores conocidos, tales como la edad, sexo, peso y otros procedimientos de exploración que son bien conocidos y no requieren experimentación indebida. Las dosificaciones de cada agente activo pueden ser como en los documentos citados en la presente (o documentos referenciados o citados en los documentos citados en la presente) .

Habiéndose descrito de esta manera en detalle las modalidades preferidas de la presente invención, se va a entender que la invención definida por los párrafos anteriores no va a ser limitada a detalles particulares expuestos en la descripción anterior como muchas variaciones evidentes de las mismas son posibles sin apartarse del espíritu o alcance de la presente invención.

La invención ahora será descrita adicionalmente por medio de los siguientes ejemplos no limitantes.

EJEMPLOS Sin elaboración adicional, se cree que un experto en la técnica puede, utilizar las descripciones precedentes, practicar la presente invención a su máxima extensión. Los siguientes ejemplos detallados van a ser considerados como meramente ilustrativos y no limitaciones de la descripción precedente de cualquier manera. Aquellos expertos en la técnica reconocerán prontamente variaciones apropiadas de los procedimientos tanto como reactivos como condiciones y técnicas de reacción.

Ejemplo 1 — Producción y calidad de varias composiciones de vacuna de combinación/lactona macrociclica Varias combinaciones de componentes de solvente de lactona macrociclica y surfactantes se probaron para identificar ingredientes y métodos que podrían dar lugar a composiciones de combinación adecuadas de acuerdo con la la presente invención. Para la fase de desarrollo inicial, la vacuna comercialmente preparada (ROTAVEC Corona, Intervet) se utilizó como el componente de vacuna neonatal para la formulación terminada / composición de combinación. El componente de solución de eprinomectina se preparó de acuerdo con las siguientes etapas: (a) adicionar DMA y MIGLYOL; (b) adicionar eprinomectina; (c) mezclar hasta que la solución fue clara; (d) adicionar lecitina; (e) mezclar hasta que la solución fue clara; (f) adicionar SPAN; (g) mezclar hasta que la solución fue clara; (h) adicionar MIGLYOL para llevar una solución a entre 85% y 95% de volumen de solución final; (i) calentar la solución de DMA / MIGLYOL / Eprinomectina / Lecitina / SPAN a entre 50 °C y 60°C; (j) enfriar la colusión por abajo de 30°C y luego mezclar hasta que la solución sea clara; (k) ajusfar el volumen al volumen de la solución final al adicionar MIGLYOL; y (1) asépticamente filtrado a través de un filtro de 0.22 µ??.

El desarrollo del componente de solución de eprinomectina planteó retos experimentales significantes debido a la necesidad de incorporar una carga relativamente alta del activo. Una variedad de excipientes se probaron para llegar a la formulación preferida. Las Tablas 12-15 resumen los componentes y resultados (por ejemplo inspección visual de las composiciones de emulsión) para las series A y B de' la fórmula del lote de laboratorio.

Tabla 12 - Componente de solución de eprinomectina serie del lote A Concentración Cantidad por 50 (mg/mL) mL Eprinomectina (8%) 80 4.0 g DMA (15%, 20% & 25%) 150/200/250 7.5/10/12.5 g Monooleato de sorbitan 50/100 2.5/5 g (5% & 10%) Miglyol 840 Q.s Q.s Tabla 13 - Composición de la serie del lote A y apariencia visual Constituyentes del Componente Concentrado de Eprinomectina Lote EprinoDMA Monooleato Miglyol 840 Observación (2 días mectina (% p/v) de (% p/v) después de mezclar (% p/v) Sorbitan con el componente de (% p/v) vacuna neonatal 01 8 15 10 Q.s a 100 Separación de la capa DMA & solidificar el antígeno 02 8 20 10 Q.s a 100 Separación de la capa DMA & solidificar el antígeno 8 25 10 Q.s a 100 Separación de la capa DMA & solidificar el antígeno 8 15 5 Q.s a 100 Separación de la capa DMA & solidificar el antigeno 8 20 5 Q.s a 100 Separación de la capa DMA & solidificar el antígeno 8 25 5 Q.s a 100 Separación de la capa DMA & solidificar el antígeno 8 10 5 Q.s a 100 Separación de la capa DMA & solidificar el antígeno 8 10 10 Q.s a 100 Separación de la capa DMA & solidificar el antígeno 16 8 10 SMO al 5%+ Q.s a 100 Separación de la Tween 80 capa DMA & al 5% solidificar el antigeno 18 8 10 Span 20 al Q.s a 100 Separación de la 10% capa DMA & solidificar el antigeno Tabla 14 - Componente de solución de eprinomectina de la serie del lote B Concentración Cantidad por 50 (mg/mL) raL Eprinomectina 80 4.0 g DMA (15%, 10% & 8%) 150/100/80 7.5/5/4 g Lecitina (6%) 60 3.0 g Span 20 (1%) 10 0.5 g Tween 80 (2%) 20 1.0 g Miglyol 840 Q.s Q.s Composición de la serie del lote B y apariencia Constituyentes del Componente Concentrado de Eprinomectina Lote EprinoDMA Lecitina Miglyol 840 Observación (2 días mectina (% P/v) (% P/v) (% p/v) después de mezclar (% p/v) con el componente de vacuna neonatal 8 15 5 Q. s a 100 Separación de la capa DMA & solidificar el antigeno 8 10 3 Q.s a 100 La apariencia física no es elegante 8 10 2 Q.s a 100 La apariencia física no es elegante 8 8 2 Q.s a 100 La apariencia física no es elegante 8 8 3 Q.s a 100 La apariencia física no es elegante 8 8 5 Q.s a 100 La apariencia física no es elegante 8 8 10 Q.s a 100 La apariencia física no es elegante 8 8 8 Q.s a 100 La apariencia física no es elegante 8 6 5 Q.s a 100 La apariencia física no es elegante 8 8 Leci al 6% Q.s a 100 Separación de la + T een 80 capa DMA & al 2% solidificar el antígeno 8 8 Leci al 6% Q.s a 100 Buena + Span 20 al 2% 8 - - Q.s a 100 Precipitar la (PGMC) eprinomectina 8 8 Leci al 6% Q.s a 100 Buena + Span 20 al 1% 8 8 Leci al 5% Q.s a 100 Buena + Span 20 al 2% 8 Q.s a 100 Precipitar y solidificar la eprinomectina 8 - - Q.s a 100 Precipitar la (Mig 810) eprinomectina 8 Leci al Q.s a 100 Buena 6%+ Span 20 al 1% 8 Leci al Q.s a 100 Buena 5%+ Span 20 al 2% 8 8 Leci al Q.s a 100 Buena 6%+ Span 20 al 1% 30 8 8 Leci al Q.s a 100 Buena 5.5%+ Span 20 al 1.5% 31 8 8 Leci al Q.s a 100 Buena 5%+ Span 20 al 2% 32 8 4 Leci al Q.s a 100 Mejor formulación 6%+ Span basada en la 20 al 1% observación física 33 8 4 Leci al Q.s a 100 Buena 5.5%+ Span 20 al 1.5% 34 8 4 Leci al Q.s a 100 Buena 5%+ Span 20 al 2% Además, DMA se presenta en la mayoría de las formulaciones que tuvieron por lo menos una apariencia de "buena" después de 2 días, pero varias formulaciones "buenas" no poseen DMA (ver por ejemplo los números 27 y 28 del Lote B) . La lecitina por sí misma no parece suficiente para producir formulaciones "buenas" (ver por ejemplo los números 9-19 del Lote B, y la -adición de TWEEN a la composición que contiene Lecitina no parece aliviar el problema (ver el número 20 del Lote B) . La lecitina y SPAN se presentaron en todas las formulaciones que se evaluaron que son por lo menos "buenas" después de 2 días. De las combinaciones probadas de ingredientes probados, el número 32 del Lote B fue la mejor formulación basada en la observación física.

Ejemplo 2 - Residuos ML en la leche y tejido de vacas lecheras lactantes después de una sola administración de dosis de formulaciones de levamisol / eprinomectina Objetivos de Estudio: 1) Para medir los residuos ML en la leche y tejidos de vacas lecheras lactantes después de una sola dosis de una formulación experimental de eprinomectina, ivermectina, moxidectina o doramectina combinada con una vacuna de rotavirus inactivado, coronavirus y Escherichia coli se administró mediante inyección intramuscular a 0.3 y 0.4 mg de lactona macrocíclica/kg de peso corporal. 2) Para evaluar la irritación del tejido local de las formulaciones experimentales cuando son administradas al ganado vacuno mediante inyección intramuscular.

Antecedentes: Las formulaciones de acuerdo con la presente descripción se proponen que sean administradas a las vacas por la vía de la inyección intramuscular hasta 3 semanas antes del parto. Por lo tanto fue necesario determinar si el tratamiento con tal producto bajo el régimen propuesto daría por resultado residuos ML en la leche después del parto.

Diseño Experimental: Las vacas lecheras se seleccionaron de acuerdo con la información resumida proporcionada en la Tabla 16. Las formulaciones experimentales de cada una de las cuatro lactonas macrociclicas se combinaron separadamente con partes iguales de una vacuna registrada, Rotavec® Corona (Schering-Plough) . La dosis recomendada de Rotavec® Corona es 2 mL por animal, la cual se diluyó para producir 4 mL de ML /combinación de vacuna. Cada ML / combinación de vacuna contuvo 40 mg/mL de lactona macrocíclica. La cantidad de ML en las formulaciones se resume en la Tabla 17.

Tabla 16. Información resumida de vaca lechera experimen-tal Especies : Vacas lecheras Raza Friesian y Friesian cross Número 33 Edad: Abierta Peso : 415-576 kg Leche producida: Suministro > 16.1 litros por día (promedio 7 días) Otro: Saludable; no evidencia de mastitis (RTM y palpación el Dia 5 Tabla 17. Información resumida de vaca lechera experimental Nombre Ingrediente CAS Ruta Periodo de activo/ y retención concentración Inyección de 40.17 mg/mL de Eprinomectina eprinomectina eprinomectina 123997-26-2 Rotavec® Corona Inyección de 44.04 mg/mL de Ivermectina Ivermectina ivermectina ¦70288-86-7 Rotavec® Corona Inyección de 40.73 mg/mL de Moxidectina Inyección Carne 91 días Moxidectina moxidectina 113507-06-5 IM Leche 35 días Rotavec® Corona® Inyección de 38.86 mg/mL de Doramectina doramectina doramectina 117704-25-3 Rotavec® Corona *Rotavec Corona es una vacuna inactivada registrada (Schering-Plough, A8132) que contiene los siguientes antigenos: Coronavirus bovino (inactivo); Rotavirus bovino (inactivo) ; Escherichia coli K99 (pili) Métodos: En el día -5, cincuenta y cuatro animales se identificaron para la exploración y se checaron para la mastitis mediante palpación de la glándula mamaria, visualización de las secreciones mamarias y Prueba de Mastitis Rápida (RMT, Immucell, Portland, Maine) . Muestras de leche individuales se recolectaron para el conteo celular somático (SCC) y treinta y tres animales que cumplen el criterio de inclusión se seleccionaron para el estudio. De los treinta y tres animales, la vaca con el rendimiento de leche diaria promedio más alto, como es estimado durante un periodo de siete días, se asignó como el control. Los treinta tres animales restantes se clasificaron de más alto a más bajo en el rendimiento de leche diaria promedio, durante el mismo periodo de tiempo y divididos en cuatro bloques de ocho animales cada uno. Un número aleatorio se generó para cada animal utilizando la función de generador de número aleatorio de Microsoft Excel. Dentro de cada bloque, el número aleatorio más bajo se asignó al Grupo 1, el segundo más bajo al Grupo 2 y secuencialmente a través del Grupo 8, creando ochos grupos de cuatro animales cada uno (Tabla 18) .

En el Dia 0, las vacas se pesaron y las muestras de sangre se recolectaron de todos los animales en los Grupos 1 y 2 para el uso en un ensayo de eprinomectina de plasma subsecuente. Las muestras de sangre se almacenaron congeladas a o más frío que -18°C pendiente del análisis de laboratorio. Cada animal se probó con la formulación indicada en la proporción de dosis apropiada. Las dosis se calcularon basadas en el peso corporal del Día o del animal para proporcionar aproximadamente 40 mg de ML/mL. Las dosis calculadas se redondearon hasta la más cercana de 0.2 mL .

Las formulaciones se administraron mediante inyección intramuscular profunda en la región del cuello anterior. Los sitios de inyección se limpiaron y se secaron y se inspeccionaron para las lesiones antes de la inyección. Las inyecciones se administraron con una jeringa de 10 mL diferente para cada producto. Una aguja de lh pulgada calibre 18 estéril se utilizó para cada inyección. El tiempo de tratamiento se registró. La evidencia de dolor en la inyección se estimó. Las vacas se observaron para reacciones adversas a las formulaciones en aproximadamente 30 minutos, 2 y 4 horas después del tratamiento.

Tabla 18. Grupos de tratamiento Grupo n ML Proporción de Ruta dosis nominal 1 4 Eprinomectina 0.3mg/kg IM 2 . 4 Eprinomectina 0.4mg/kg IM 3 . 4 Ivermectina 0.3mg/kg IM 4 4 Ivermectina 0.4mg/kg IM 5 4 Moxidectina 0.3mg kg IM 6 4 Moxidectina 0.4mg/kg IM 7 4 Doramectina 0.3mg/kg IM 8 4 Doramectina 0.4mg/kg IM 9 1 Control Negativo NA NA Las muestras de sangre se recolectaron de todos los animales en los Grupos 1 y 2 para el ensayo de eprinomectina en plasma en los Días 1, 3 y 7 y se almacenaron congelados como es descrito. Se registró el tiempo de la recolección de sangre. Se utilizó el equipo de prueba de manada (De Laval) para recolectar una muestra de aproximadamente 2% representativa de la ordeña completa para cada vaca individual en la ordeña de la mañana en cada uno de los Días 1-10 después del tratamiento, y en la ordeña de la mañana en los Días 14, 21 y 35. Las submuestras duplicadas se decantaron para cada vaca en los Grupos 1-4 y 7-9 y las submuestras triplicadas se decantaron para cada vaca en los Grupos 5-6. Cada muestra de los animales tratados midieron aproximadamente 30 mL. Los tiempos de inicio y acabado para cada ordeña de los 33 animales de estudio se registraron para dar un estimado del tiempo actual de la recolección de la muestra de leche.

Los animales de estudio se ordeñaron después de la manda principal. La linea de leche se lavó completamente con agua fría antes de la ordeña de los animales de estudio. El equipo de prueba de la manada se limpió entres muestras. Se lavó "en línea" con el lavado de planta de ordeño. Los recipientes de muestra luego se limpiaron adicionalmente a través de un lavaplatos. Las conexiones de muestras se limpiaron adicionalmente por inmersión en ácido caliente, luego se enjuagaron. Las producciones de leche en cada ordeña en las cuales las muestras se recolectaron se midieron y se registraron .

Observaciones: Los animales se observaron para el comportamiento y actitud general en los Días 1-10. Los sitios de inyección se examinaron mediante inspección y palpación en la ordeña de la mañana en los Días 1, 3, 7 y 14. Cualquiera de las reacciones visibles o palpables se describieron y se midieron (anchura, longitud y profundidad) . Las reacciones que persistieron después del día 14 se reevaluaron en el Día 21.

La leche se retuvo de la tina hasta el Día 35.

Análisis: Una muestra de leche de cada vaca en los Grupos 5 y 6 en cada punto de tiempo se refrigeró a 2-8 °C y se envió (fresca, refrigerada) al Livestock Improvement Corporation Testlink laboratory, Hamilton, Nueva Zelanda, para la cuantificación de la grasa de la leche utilizando un método fluorométrico ( Fossomatic) . Dos muestras de cada vaca en cada punto de tiempo se congelaron a o más frió que -18 °C. Las muestras principales se enviaron a Hill Laboratory, Ruakura Nueva Zelanda en estado congelado y se analizaron de los residuos ML relevantes utilizando un método validado (extracción de acetonitrilo, limpieza SPE y análisis mediante LC-MS/MS) . Las muestras de las ordeñas del Día 7, 14 y 21 se analizaron primero. Los resultados se presentan en la Tabla 21 y en las FIGs . 1-7. Las muestras de leche reservadas se retuvieron hasta que los ensayos se completaron. Las muestras de sangre se centrifugaron y el plasma se decantó y se almacenó congelado a o más frío que -18°C. Las muestras del animal de control midieron aproximadamente 90 mL. Las muestras de control se analizaron de los residuos ML para proporcionar una comparación de línea de base a los grupos tratados. El excedente de leche del animal de control se utilizó por el laboratorio para crear muestras QC enriquecidas .

Resultados: Los conteos celulares somáticos realizados en las muestras recolectadas en el Dia -5 promediaron 76,500 células/mL a través de todos los animales de estudio y variaron de 18,000 a 144,000 células/mL. La leche diaria promedio de la vaca individual producida durante el periodo de pre-estudio del dia siete promedió 17.6 L/dia a través de todos los animales de estudio y varió de 16.1 a 19.7 L/vaca/dia. Los pesos corporales medidos en el Dia 0 promediaron 482.1 kg a través de todos los animales de estudio y variaron de 415 a 576 kg. Las proporciones de dosis se calcularon a 0.3 mg/kg o 0.4 mg/kg basadas en una concentración ML de 40 mg/mL. Las proporciones de dosis actuales (ajustadas para la concentración ML actual como es determinado por el Certificado de Análisis) son como se muestran en la Tabla 19.

Tabla 19: Proporciones de dosis actual (mg/kg) Eprinomectina Ivermectina Moxidectina Doramectina Concentración (mg/mL) 40.17 4 .039 40.73 38.86 Dosis 0.3 0.3 0.3 0.3 propuesta (mg/kg) Dosis actual (mg/kg) 0.30 0.33 0.31 0.29 Dosis 0.4 0.4 0.4 0.4 propuesta (mg/kg) Dosis actual (mg/kg) 0.40 0.44 0.41 0.39 Los animales se trataron entre 08:55 y 10:03 en la mañana del Día 0. La ordeña de la mañana comenzó en o después de las 07:30 y concluyó en o antes de las 08:09 en cada día que las muestras se recolectaron durante el período hasta el Día 21. Ninguno de los animales mostró signos de dolor en la inyección con cualquiera de las formulaciones. No se observaron eventos adversos después del tratamiento. Las mediciones de reacción en el sitio de inyección en los Días 1, 3, 7, 14 y 21 se muestran en la Tabla 22. Las reacciones fueron firmes, hinchazones discretas del tejido muscular que no parecieron ser dolorosas con la palpación ligera. Un animal en cada uno del Grupo 1 (eprinomectina 0.3 mg/kg), Grupo 2 (eprinomectina 0.4 mg./kg) y Grupo 6 (moxidectina 0.3 mg/kg) tuvo reacciones en el sitio de inyección que persistieron por lo menos hasta 21 días después del tratamiento .

Discusión: La inyección intramuscular con Rotavec Corona causó reacciones en el sitio de inyección en varios animales. La reacción en el sitio de inyección de esta naturaleza se reconoce en las inserciones de etiqueta y empaquetado para Rotavec® Corona, y se sugiere que es debido al aceite en la vacuna. De esta manera, el componente Rotavec® Corona de la formulación inventiva de igual manera contribuyo a las reacciones observadas en el estudio.

Los Limites de Residuo Máximo (MRL) para MLs en la leche bovina se presentan en la Tabla 20. Las Agencia de Medicinas Europea (EMEA) actualmente prohibe el uso de doramectina e ivermectina en bovinos que producen leche para el consumo humano - ninguno de los residuos de estos activos son permitidos. El Codex Alimentarius establece un MRL para eprinomectina, doramectina e ivermectina en la leche bovina pero no establece un MRL para moxidectina en la leche bovina. La ACVM de Nueva Zelanda ha establecido los MRLs para todos los cuatro activos en la leche bovina, que reflejan los MRLs internacionales donde son disponibles. El MRL de ACVM para la moxidectina define el residuo como moxidectina en la grasa de la leche mientras que el MRL de la EMEA para la moxidectina define el residuo como moxidectina en la leche entera .

Tabla 20: MRLs de la leche bovina (mg/kg) ML Definición LOQ MRL de ACVM Código MRL EMEA Eprinomectina Eprinomectina Bla 0.02 0.02 0.02 Ivermectina Ivermectina Bla 0.01 0.01 * Moxidectina Moxidectina 1.0 (en las Ningún MRL 0.04 (en la grasas de la establecido leche) leche) Doracmectina Doracmectina 0.015 0.015 * *No para el uso en bovinos que producen leche para el consumo humano (es decir < LOQ) *No para el uso en bovinos que producen leche para el consumo humano (es decir < LOQ) Conclusión: Los residuos de eprinomectina para todos los animales de estudio estuvieron por debajo del MRL de 0.02 mg/kg (por un factor de diez) a 7 días después del tratamiento y por debajo del limite de la cuantificación (LOQ) a 14 días después del tratamiento. La medición de los residuos cerca o por arriba del MRLs de ACVM se detectaron en 7 días después del tratamiento con doramectina, moxidectina e ivermectina. La medición de los residuos por arriba del LOQ (y por lo tanto por arriba de la tolerancia de EMEA para doramectina e ivermectina) se detectaron a 21 días después del tratamiento con doramectina, moxidectina e ivermectina. Basado en estos datos y con relación a los MRLs que aplican en Europa, el período de retención para la formulación de eprinomectina se estima a 7 días. El período de retención para las variantes que contienen moxidectina, ivermectina y doramectina se esperan que sean más de 21 días y posiblemente hasta 28 días para la moxidectina.

Tabla 21. Residuo ML por vaca durante los dias 7, 14 y 21 (en mg/kg) Grupo Residuos analizados Vaca Día 7 Día 14 Dia 21 379 0.0012 0.0010 .ooio 421 0.001 0.0010 0.0010 1 Eprinomectina Bla 432 <0.0010 0.0010 0.0010 563 0.0023 0.001.0 O.OOIO 67 0.0013 0.0010 0.0010 75 <0.0010 .OOIO 0.0010 2 Eprinomectina Bl 336 0.0021 0.0010 0.0010 463 O.OOIO. 0.0010 0.0010 305 0.0088 0.0010 0.0010 338 0.014 0.0031 0.0010 3 Ivermectina B la 384 0.0068 0.0010 0.0010 398 0.0052 0.0010 0.0010 143 0.023 0.0021 0.001 1 246 0.012 0.0011 . 0.0010 .4 Ivermectina B la 288 0.012 0.0017 0.0010 452 0.0093 0.0018 0.0010 140 0.80 0.14 0.059 Moxidectina 342 1.1 0.26 0.080 En la grasa de la leche 347 1.0 0.24 0.068 538 0.75 0.18 0.075 5 140 0.040 0.0078 0.0026 Moxidectina 342 0.063 0.010 0.0040 En la leche entera 347 0.042 0.0099 0.0031 _ . . 69 0.86 0.17 0.091 Moxidectina 0.12 En la grasa de la leche 149 1.2 0.37 ¦ 484 1.5 0.47 0.14 . 597 1.0 0.15 0.057 6 69 0.050 0.0081 0.0055 Moxidectina 149 0.044 0.012 0.0037 En la leche entera 484 0.056 0.015 Ó.0055 597 0.037 0.0069 0.0023 80 0.0058 0.0010 0.0010 192 0.0037 0.0012 0.0010 7 Doramectina 243 0.0077 0.0031 0.0020 2S8 0.0079 0.0015 O.OOIO 147 0.014 0.0025 0.0010 319 0.0061 0.0028 0.0014 8 Doramectina 483 0.011 0.0025 0.0014 502 0.0056 O.OOIO O.OOIO 9 Eprinomectina B la 381 < 0.0010 < 0.0010 < 0.0010 Ivermectina B la 381 <0.0010 0.0010 0.0010 Moxidectina en la grasa de la leche 381 .0200 .0200 O.0200 Moxidectina en la leche entera 381 < 0.0010 < 0.0010 < 0.0010 Doramectina 381 0.0010 0.0010 . 0.0010 Tabla 22. Mediciones de reacción en el sitio de inyección Grupo Tratamiento Vaca Dia l . Día 3 Dia 7 Oia 14 Dia 21 379 40x50x5 70x1 10x 10 50x50x15 30x30x10 20x20x10 421 60x40x5 - - - - EPN 1 432 - - - - 0.3mg/kg 563 - - - - Corneo 0 1 1 1 1 67 80x1 10x10 80x1 10x10 90x1 10x15 70x90x15 70x70x10 75 70x1 10x10 40x50x5 EPN 2 0.4mg kg 336 463 - - - - Conteo 2 . 2 1 1 1 305 338 - -' IV 3 0.3mg/i g 384 40x50x5 . - 398 Conteo 1 0 0 0 0 143 - - - - 246 - - IVN 4 - 0.4mg kg 288 - 452 - Conteo 0 0 0 0· 0 143 - - - 246 - - - - IVN 4 0.4mg kg 288 452 - Conteo 0 0 0 0· 0 140 - .342 - Moxidectin 5 0.3mg/kg 347 ¦ - - · . - ¦- 538 - '.' - Conteo 0 0 0 0 0 69 120x1-30x1 90x90 10 . 80x80x10 60x60x10 80x60x15 149 Moxidectin 6 0.4mg/kg 484 597 - - - Conteo I 1 1 I 0 80 40x50x5 - 40x40x5 - 192 40x50x10 20x20x5 10x10x5 Doramectin 7 0.3mg/kg 243 - 258 . - Conteo 2 1 2 0 0 147 10x10x5 - 319 . - 8 Doracmectina 0.4mg kg 483 502 Conteo - - - Ninguna 381 - 9 Inyección Conteo 0 0 0 0 0 . Todos los documentos citados o referenciados en la presente ("documentos citados en la presente") y todos los documentos citados o referenciados en los documentos citados en la presente, junto con cualquiera de las instrucciones, descripciones, especificaciones del producto y hojas del producto del fabricante para cualquiera de los productos mencionados en la presente o en cualquier documento incorporado por referencia en la presente, son incorporados por la presente aquí por referencia y se pueden emplear en la práctica de la invención.

Como los ejemplos no limitantes anteriores demuestran, las composiciones de la invención que comprenden por lo menos un agente activo de lactona macrociclica y por lo menos un componente de vacuna neonatal muestra estabilidad superior. La invención además se describe por las siguientes reivindicaciones.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición inyectable para prevenir o controlar infecciones o enfermedades parasíticas, bacterianas o virales en ganado vacuno, la composición caracterizada porque comprende: (a) una cantidad efectiva de por lo menos un componente viral de rotavirus o coronavirus inactivado, (b) una cantidad efectiva de por lo menos un compuesto activo de lactona macrocíclica, (c) un portador adecuado, y (d) un conservador.

2. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el activo de lactona macrocíclica es abamectina, doramectina, eprinomectina, ivermectina o moxidectina.

3. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la lactona macrocíclica es eprinomectina.

4. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque además comprende una bacterina-toxoide de E. coli.

5. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque un solo volumen de dosis es efectivo para el tratamiento de vacas que pesan de 400 kg a 800 kg.

6. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque un volumen de dosis es capaz de suministrar por lo menos 200 pg/kg de lactona macrociclica a vacas que pesan de 400 kg a 800 kg y en donde la composición comprende eprinomectina o ivermectina.

7. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque la composición comprende abamectina, doramectina, eprinomectina, ivermectina o moxidectina a una concentración de entre aproximadamente 2% a 6% p/v de la composición.

8. La composición de conformidad con la reivindicación 7, caracterizada porque la concentración es de 3% a 5%.

9. La composición de conformidad con la reivindicación 8, caracterizada porque la concentración es de 3.5% a 4.5% o 4%.

10. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque el volumen de dosis previene que la dosis del compuesto activo de lactona macrociclica exceda una dosis de 400 g/kg.

11. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque la composición se puede administrar a animales tan tarde como 10 días antes de obtener leche que es propuesta para el consumo humano .

12. La composición de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque la composición se puede administrar tan tarde como 9 días.

13. La composición de conformidad con la reivindicación 12, caracterizada porque la composición se puede administrar tan tarde como 8 dias .

14. La composición de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizada porque el portador comprende un sistema de solvente farmacéuticamente aceptable para la lactona macrocíclica.

15. La composición de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque el sistema de solvente comprende por lo menos dos compuestos seleccionados de acetamida de dimetilo (DMA), Miglyol, surfactante o combinaciones de los mismos.

16. La composición de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada porque el surfactante se puede seleccionar del grupo que comprende Span, Tween, Lecitina o combinaciones de los mismos.

17. La composición de conformidad con la reivindicación 16, caracterizada porque el surfactante se puede seleccionar del grupo que comprende Span 20, Tween 80, Lecitina o combinaciones de los mismos.

18. La composición de conformidad con la reivindicación 15, caracterizada porque el Miglyol es Miglyol 840.

19. La composición de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque el sistema de solvente comprende DMA, Miglyol 840, Span 20 y lecitina.

20. Un método para preparar la composición de la reivindicación 1, caracterizado porque comprende las etapas de: a. preparar un componente de solución de lactona macrociclica al disolver completamente la lactona macrociclica en un sistema de solvente farmacéuticamente aceptable; b. preparar un componente de vacuna neonatal; y c. mezclar los componentes de (a) y (b) conjuntamente para producir la composición de la reivindicación 1.

21. El método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el sistema de solvente comprende por lo menos dos compuestos seleccionados de DMA, MYGLYOL, SPAN, LECITINA o combinaciones de los mismos; a. preparar un componente de vacuna neonatal; y b. mezclar los componentes de (a) y (b) conjuntamente para producir la composición de la reivindicación 1.

22. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque la etapa de preparar un componente de solución de lactona macrocíclica comprende las etapas de: a. adicionar DMA y MIGLYOL; b. adicionar eprinomectina; c. mezclar hasta que la solución sea clara; d. adicionar lecitina; e. mezclar hasta que la solución sea clara; f. adicionar SPAN; g. mezclar hasta que la solución sea clara; h. adicionar MIGLYOL para llevar la solución a entre 85% y 95% de volumen de solución final; i. calentar la solución de DMA / MIGLYOL / Eprinomectina / Lecitina / SPAN a entre 45°C y 65°C; / j . enfriar la solución por debajo de 35°C o por debajo de 30°C y luego mezclar hasta que la solución sea clara; k. ajustar el volumen al volumen de solución final al adicionar MIGLYOL; y 1. filtrar asépticamente a través de un filtro de 0.22 µp? para preparar el componente de solución de eprinomectina.

23. Un método para prevenir o controlar enfermedades parasíticas en vacas preñadas y enfermedades virales en becerros neonatales al administrar parenteralmente a la vaca preñada una cantidad efectiva de una composición de combinación que contiene por lo menos un componente viral inactivado que comprende rotavirus o coronavirus junto con una cantidad efectiva de por lo menos un compuesto activo de lactona macrociclica, un portador y conservador farmacéuticamente aceptable.

24. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el activo de lactona macrociclica es abamectina, doramectina, eprinomectina, ivermectina o moxidectina .

25. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el componente viral inactivado además comprende bacterina-toxoide de E. coli.

26. El método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque cada vaca recibe una dosis que contiene entre de aproximadamente 200 g/kg y aproximadamente 400 µg/kg del compuesto activo de lactona macrociclica.

27. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 23 a 26, caracterizado porque el portador farmacéuticamente aceptable comprende un sistema de solvente farmacéuticamente aceptable para la lactona macrociclica.

28. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque el sistema de solvente comprende por lo menos dos compuestos seleccionados de acetamida de dimetilo (DMA), Miglyol, surfactante o combinaciones de los mismos .

29. El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque el surfactante se puede seleccionar del grupo que comprende Span, Tween, Lecitina o combinaciones de los mismos.

30. El método de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado porque el surfactante se puede seleccionar del grupo que comprende Span 20, Tween 80, Lecitina o combinaciones de los mismos.

31. El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque el Miglyol es Miglyol 840.

32. El método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque el sistema de solvente comprende DMA, Miglyol 840, Span 20 y lecitina.

33. Una composición inyectable para prevenir o controlar infecciones o enfermedades parasíticas, bacterianas o virales en ganado vacuno, caracterizada porque la composición sustancialmente como es descrita anteriormente en la presente con referencia a los ejemplos y excluyendo, en su caso, ejemplos comparativos.

34. Un método para prevenir o controlar enfermedades parasíticas en vacas preñadas y enfermedades virales en becerros neonatales al administrar parenteralmente a la vaca preñada una cantidad efectiva de una composición de combinación, caracterizado porque la composición sustancialmente como es descrita anteriormente en la presente con referencia a los ejemplos y excluyendo, en su caso, ejemplos comparativos.