MX2008016008A

MX2008016008A - Formas cristalinas de 4-[2-(4-metilfenilsulfonil)-fenil] piperidina con inhibicion combinada de la recaptacion de serotonina y norepinefrina para el tratamiento del dolor neuropatico.

Info

Publication number: MX2008016008A
Application number: MX2008016008A
Authority: MX
Inventors: Heidi Lopez De Diego; Bang-Andersen Benny; Faldt Andre; Bryan Stensboel Tine; Silke Miller
Original assignee: Lundbeck & Co As H
Priority date: 2006-06-16
Filing date: 2007-06-15
Publication date: 2009-01-16
Also published as: US9315459B2; JP2013216669A; US20150073018A1; US20090264465A1; US8299095B2; NO20090250L; JP2009539890A; US20130190352A1; EA200970019A1; JP5318757B2; MA30576B1; EP2044020B1; HK1134287A1; PL2044020T3; CA2656057C; US20170037006A1; WO2007144006A1; AU2007260356B2; EA016054B1; CA2656057A1

Abstract

Se proporcionan formas cristalinas de 4-[2-(4-metilfenilsulfonil)- fenil]piperidina y sales de la misma, por ejemplo, para el tratamiento del dolor neuropático.

Description

FORMAS CRISTALINAS DE 4- [2-(4-METILFENILSULFONIL)-FENIL] PIPERIDINA CON INHIBICIÓN COMBINADA DE LA RECAPTACIÓN DE SEROTONINA Y NOREPINEFRINA PARA EL TRATAMIENTO DEL DOLOR NEUROPÁTICO La percepción del dolor es más complicada que una transmisión directa de señales de una parte lesionada del cuerpo a los receptores específicos del cerebro y donde el dolor percibido es proporcional a la lesión. Más bien, el daño al tejido periférico y la lesión a los nervios pueden causar alteraciones en las estructuras neurales centrales involucradas en la percepción del dolor que afecta con posterioridad a la sensibilidad del dolor. Esta neuroplasticidad puede causar una sensibilización central en respuesta a estímulos nocivos de duración más prolongada, la cual puede manifestarse como por ejemplo., dolor crónico, es decir, que la percepción del dolor permanece aun después que se ha detenido el estímulo nocivo o como hiperalgesia, es decir una respuesta aumentada a un estímulo, que es normalmente doloroso. Uno de los más misteriosos y sorprendentes ejemplos de esto es el "síndrome del miembro fantasma", es decir la persistencia del dolor que existía en un miembro antes de su amputación. Para una revisión reciente de la neuroplasticidad central y el dolor ver Melzack et al in Ann. N. Y. Acad. Sci., 933, 157-174, 2001. El dolor crónico, tal como el dolor neuropático se manifiesta en forma diferente de otros tipos de dolor, por ejemplo el dolor somático o visceral. El dolor con frecuencia se describe como punzante, quemazón, hormigueo, entumecimiento o puñalada. Las causas comunes de dolor neuropático incluyen alcoholismo, amputación, problemas de espalda, pierna y cadera, quimioterapia, diabetes, VIH, esclerosis múltiple, cirugía espinal e infección por virus de herpes zoster. El componente central del dolor crónico puede explicar por qué el dolor crónico, tal como, por ejemplo., dolor neuropático con frecuencia responde mal a los analgésicos clásicos, tales como fármacos anti-inflamatorios no esteroides (NSAIDS, sigla en inglés) y analgésicos opioides. Los antidepresivos tricíclicos (TCA), tipificados por la amitrilina, se han convertido en el tratamiento estándar del dolor neuropático y se considera que el efecto está mediado por el efecto inhibitorio combinado sobre el transportador de serotonina y el transportador de norepinefrina [Clin Ther., 26, 951-979, 2004]. Más recientemente, los denominados antidepresivos de acción dual que tienen efecto inhibitorio sobre la recaptación de serotonina y norepinefrina se han usado para el tratamiento clínico del dolor neuropático [Human Psychopharm., 19, S21-S25, 2004]. Los ejemplos de antidepresivos de acción dual son venlafaxina y duloxetina, y esta clase de antidepresivos con frecuencia se denominan SNRI. Los datos sobre el uso de inhibidores de la recaptación de serotonina selectiva (SSRI) para el dolor neuropático son escasos, pero generalmente sugieren un efecto limitado [Bas. Clin. Pharmacol., 96, 399-409, 2005]. En efecto, se ha planteado que los SSRI son sólo débilmente antinociceptivos en y de sí mismos pero que la inhibición del transportador de serotonina aumenta el efecto antinociceptivo de la inhibición de la recaptación de norepinefrina. Esta noción está respaldada por una revisión de 22 estudios animales y cinco de seres humanos que muestra que los SNRI tienen efecto antinociceptivo superior en comparación con los inhibidores de la recaptación de norepinefrina, que nuevamente son superiores al SSRI [Pain Med. 4, 310-316, 2000]. Datos recientes del antagonista de 5-HT3 odansetron implican que los antagonistas de 5-HT3 pueden tener un efecto analgésico y de este modo ser útiles para el tratamiento del dolor neuropático [Anesth.Analg., 97, 1474-1478, 2003]. El uso de antidepresivos tricíclicos, sin embargo, se asocia con efectos secundarios anticolinérgicos conocidos, tales como por ejemplo somnolencia, ansiedad, inquietud y dificultades cognitivas y de la memoria. En consecuencia, es necesario en el arte hallar caminos alternativos para tratar al dolor neuropático. La solicitud de patente internacional publicada como WO 2003/029232 describe, por ejemplo, el compuesto 4-[2-(4-metilfenilsulfanil)fenil]piperidina como base libre y la correspondiente sal de HCI. Se informa que el compuesto es un inhibidor del transportador de serotonina y el receptor de serotonina 2C (5-HT2c), y se dice que es útil para el tratamiento de los trastornos afectivos, por ejemplo depresión y ansiedad. La invención Los presentes inventores han hallado en forma sorprendente que además del perfil farmacológico ya conocido, la 4-[2-(4-metilfenilsulfanil)-fenil]piperidina es un potente inhibidor de la recaptación de serotonina y la recaptación de norepinefrina, un antagonista del receptor de serotonina 3 (5-HT3), un antagonista del receptor de serotonina 2A (5-??2?), y un inhibidor o receptor ai adrenérgico, y el compuesto puede ser útil como tal en el tratamiento de, por ejemplo, el dolor crónico. Por consiguiente, la invención se refiere al compuesto I, que es 4:[2-(4-metilfenil-sulfanil)fenil]piperidina y sales aceptables para uso farmacéutico en una forma cristalina con la condición de que dicho compuesto no sea la sal de adición clorhidrato de 4-[2-(4-metilfenil-sulfanil)fenil]-piperidina. En una realización, la invención se refiere un compuesto I para su uso en terapia. En una realización, la invención se refiere a un método de tratamiento que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto I a un paciente que requiere del mismo. En una realización, la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende el compuesto I. En una realización, la invención se refiere al uso del compuesto I para la fabricación de un medicamento. Figuras Figura 1 : Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del HBr del compuesto I Figura 2: Patrón de difracción de rayos X del solvato de la sal de adición del HBr del compuesto I Figura 3: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido palmítico del compuesto I Figura 4: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido DL-láctico del compuesto I Figura 5: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido adípico (1:1) del compuesto I (forma a+ß) Figura 6: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido adípico (2:1) del compuesto I Figura 7: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido fumárico (1 : ) del compuesto I Figura 8: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido glutárico (1 :1) del compuesto I Figura 9: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido malónico (1 :1) del compuesto I, forma a Figura 10: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido malónico del compuesto I, forma ß Figura 11: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido oxálico (1 :1) del compuesto I Figura 12: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido sebacoínico (2:1) del compuesto I Figura 13: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido succínico (2:1) del compuesto I Figura 14: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido L-málico (1 :1) del compuesto I, forma a Figura 15: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido L-málico (1 :1) del compuesto I, forma ß Figura 16: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido D-tartárico (1 :1) del compuesto I Figura 17: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido L-aspártico (1 :1) del compuesto I en mezcla con el ácido L-aspártico Figura 18: Patrón de difracción de rayos X del hidrato de la sal de adición del ácido L-aspártico (1 :1) del compuesto I en una mezcla con el ácido L-aspártico Figura 19: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido glutámico (1 :1) del compuesto I en mezcla con el monohidrato del ácido glutámico Figura 20: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido cítrico (2:1) del compuesto I Figura 21 : Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido HCI del compuesto I Figura 22: Patrón de difracción de rayos X de la sal de adición del ácido fosfórico (1 :1) del compuesto I Figura 23: Niveles de dopamina en la corteza prefrontal después de la administración de los compuestos de la presente invención. Figura 24: Niveles de acetilcolina en la corteza prefrontal después de la administración de los compuestos de la presente invención. Figura 25a y 25b: Niveles de acetilcolina en la corteza prefrontal y ventral del hipocampo después de la administración de los compuestos de la presente invención. Descripción detallada de la invención La presente invención se refiere al compuesto I, que es 4-[2-(4-metilfenilsulfanil)-fenil]piperidina y sales aceptables para uso farmacéutico de la misma es una forma cristalina con la condición de que dicho compuesto no sea la sal de adición clorhidrato. La estructura de la 4-[2-(4-metilfenilsulfanil)-feniljpiperidina es El perfil farmacológico de los compuestos de la presente invención se representa en los ejemplos, pero se puede resumir de la siguiente manera. Los compuestos son inhibidores de la recaptación de serotonina y norepinefrina; inhiben a los receptores de serotonina 2A, 2C y 3; e inhiben al receptor a-1 adrenérgico. En una realización, dichas sales aceptables para uso farmacéutico son sales de adición de ácidos que no son tóxicos. Dichas sales incluyen sales preparadas a partir de ácidos orgánicos, tales como ácidos maleico, fumárico, benzoico, ascórbico, succínico, oxálico, bis-metilensalicílico, metansulfónico, etandisulfónico, acético, propiónico, tartárico, salicílico, cítrico, glucónico, láctico, málico, mandélico, cinámico, citracónico, aspártico, esteárico, palmítico, itacónico, glicólico, p-aminobenzoico, glutámico, bencensulfónico, teofilin-acético, además de las 8-haloteofilinas, por ejemplo 8-bromoteofilina. Dichas sales también pueden prepararse a partir de ácidos inorgánicos tales como ácidos clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, sulfámico, fosfórico y nítrico. Se enumeran sales adicionales útiles en la tabla del ejemplo 1d (tabla 1). En una realización, el compuesto de la presente invención, es decir, el compuesto de fórmula I, es la sal de adición del HBr En una realización, el compuesto de la presente invención es la sal de adición del ácido DL-láctico, y en particular la sal 1 :1. En una realización, el compuesto de la presente invención es la sal de adición del ácido L-aspártico, y en particular la sal 1 :1. En una realización, el compuesto de la presente invención es la sal de adición del ácido glutámico y en particular la sal 1 :1. En una realización, el compuesto de la presente invención es la sal de adición del ácido glutárico y en particular la sal 1 :1. En una realización, el compuesto de la presente invención es la sal de adición del ácido malónico y en particular la sal 1 :1 que se ha hallado que existe en dos modificaciones poiimórficas a y ß de las cuales se considera que la forma ß es la más estable sobre la base de una menor solubilidad. En una realización, los compuestos de la presente invención están en forma purificada. El término "forma purificada" indica que el compuesto está esencialmente libre de otros compuestos de otras formas, es decir polimorfos de dicho compuesto, tal como puede ser el caso. Las formas de dosificación oral y en particular los comprimidos y cápsulas, con frecuencia son preferidas por los pacientes y el profesional médico debido a la facilidad de administración y el consecuente mejor cumplimiento del tratamiento. Para los comprimidos y cápsulas, es preferible que los componentes activos sean cristalinos. Los cristales de la presente invención son solvatos, es decir, puede existir como solvatos, es decir cristales donde las moléculas del solvente forman parte de la estructura del cristal. El solvato se puede formar a partir de agua, en cuyo caso los solventes se denominan frecuentemente hidratos. Alternativamente, los solvatos se pueden formar a partir de otros solventes, tales como por ejemplo., etanol, acetona, o acetato de etilo. La cantidad exacta de solvato con frecuencia depende de las condiciones. Por ejemplo, los hidratos generalmente pierden agua a medida que la temperatura aumenta o la humedad relativa disminuye. Se considera que los compuestos, que no cambian o que cambian solo un poco con las condiciones, tales como por ejemplo., cambio de humedad son los más adecuados para las formulaciones farmacéuticas. Se indica que la sal de adición de HBr no forma hidratos cuando se precipita del agua mientras que los compuestos tales como las sales de adición succinato, malato y tartrato lo hacen. Algunos compuestos son higroscópicos, es decir, absorben agua cuando se exponen a la humedad. La higroscopicidad generalmente se considera una propiedad no deseada para los compuestos que se presentan en una formulación farmacéutica, en particular en una formulación seca, tal como los comprimidos o cápsulas. En una realización, la invención proporciona cristales con baja higroscopicidad. Para las formas de dosificación orales que usan componentes activos cristalinos, también es beneficioso si dichos cristales están bien definidos. En el presente contexto, el término "bien definido" en particular significa que la estequiometría está bien definida, es decir que la relación entre los iones que forman la sal es la relación entre números enteros pequeños, tales como 1 :1 , 1:2, 2:1 , 1 :1 :1 , etc. En una realización, los compuestos de la presente invención son cristales bien definidos. La solubilidad de un componente activo también es de importancia para la elección de una forma de dosificación ya que puede tener una influencia directa sobre la biodisponibilidad. Para las formas de dosificación orales, generalmente se considera que una mayor solubilidad del componente activo es beneficiosa a medida que aumenta la biodisponibilidad. Algunos pacientes, por ejemplo., los pacientes de edad avanzada pueden tener dificultades para tragar los comprimidos, y las soluciones de gotas orales puede ser una alternativa adecuada que evita la necesidad de tragar comprimidos. Con el fin de limitar el volumen de una solución de gotas orales, es necesario tener una alta concentración del componente activo en la solución, lo cual requiere nuevamente una alta solubilidad del compuesto. Como se muestra en la tabla 3, las sales de adición del ácido DL-láctico, ácido L-aspártico, ácido glutámico, ácido glutárico y ácido malónico tienen solubilidad excepcionalmente alta. Las formas cristalinas influyen en las propiedades de filtración y procesamiento de un compuesto. Los cristales con forma de aguja tienden a ser más difíciles de manipular en un ambiente de producción ya que la filtración se torna más difícil y lleva más tiempo. La forma exacta del cristal de una sal dada puede depender, por ejemplo, de las condiciones en las que la sal precipita. La sal de adición del ácido HBr de la presente invención desarrolla cristales solvatados con forma de aguja, cuando precipita de etanol, ácido acético y propanol, pero cristales de forma no hidratada, que no son en forma de aguja, cuando la sal de adición del HBr precipita de agua, proporcionando propiedades de filtración superiores. La tabla 3 también ilustra el pH resultante, es decir el pH de la sal en la solución saturada. Esta propiedad es de importancia porque la humedad nunca se pede evitar por completo durante la conservación y la acumulación de la humedad originará una disminución de pH en el comprimido que comprende una sal de pH resultante bajo, que puede reducir la vida útil. Además, una sal con bajo pH resultante puede causar un proceso de corrosión del equipo si los comprimidos se preparan por granulación húmeda. Los datos de la tabla 3 sugieren que las sales de adición del ácido HBr, HCI y adípico pueden ser superiores en este aspecto. En una realización, el compuesto de la presente invención es la sal de adición del HBr en forma cristalina, en particular en una forma purificada. En una realización adicional, dicha sal del HBr presenta picos en un difractograma de rayos X (XRPD) a aproximadamente 6.08°, 14.81°, 19.26° y 25.38° 2T, y en particular dicha sal del HBr tiene un XRPD representado en la figura 1. En una realización, el compuesto de la presente invención es la sal de adición del ácido DL-láctico (1 :1) en forma cristalina, en particular en una forma purificada. En una realización adicional, dicha sal de adición del ácido DL-láctico presenta picos en un XRPD a aproximadamente 5.30°, 8.81°, 9.44° y 17.24° 2T, en particular dicha sal de adición del ácido DL-láctico presenta un XRPD representado en la figura 4. En una realización, el compuesto de la presente invención es la sal de adición del ácido L-aspártico (1 :1) en forma cristalina, en particular en una forma purificada. En una realización adicional, dicha sal de adición del ácido L-aspártico es no solvatada y presenta picos en un XRPD a aproximadamente 1 1.05°, 20.16°, 20.60°, 25.00° 2T, y en particular sal del ácido L-aspártico, cuando se mezcla con ácido L-aspártico presenta un XRPD representado en la figura 17. En una realización, dicha sal de adición del ácido L-aspártico es un hidrato, en particular en forma purificada. En una realización adicional, dicho hidrato de la sal de adición del ácido L-aspártico presenta picos en un XRPD a aproximadamente 7.80°, 13.80°, 14.10°, 19.63° 2T, y en particular dicho hidrato de la sal de adición del ácido L-aspártico, cuando se mezcla con ácido L-aspártico, presenta un XRPD representado en la figura 18.

En una realización, el compuesto de la presente invención es la sal de adición del ácido glutámico (1 :1) en forma cristalina, en particular en una forma purificada. En una realización adicional, dicha sal de adición del ácido glutámico presenta picos en un XRPD a aproximadamente 7.71 °, 14.01 °, 19.26°, 22.57° 2T, y en particular dicha sal del ácido glutámico, cuando se mezcla con el monohidrato del ácido glutámico, presenta un XRPD representado en la figura 19.

En una realización, el compuesto de la presente invención es la sal de adición del ácido malónico (1 :1) en forma cristalina, en particular en forma purificada. En una realización adicional, dicha sal de adición del ácido malónico es la forma a y presenta picos en un XRPD a aproximadamente 10.77°, 16.70°, 19.93°, 24.01° 2T, o dicha sal de adición del ácido malónico es la forma ß y presenta picos en un XRPD a aproximadamente 6.08°, 10.11°, 18.25°, 20.26° 2T y particular dicha sal de adición del ácido malónico presenta un XRPD representado en la figura 9 o 10. En una realización, el compuesto de la presente invención es la sal de adición del ácido glutárico (1:1) en forma cristalina, en particular en una forma purificada. En una realización adicional, dicha sal de adición del ácido glutárico presenta picos en un XRPD a aproximadamente 9.39°, 11.70°, 14.05° y 14.58° 2T, y en particular dicha sal de adición del ácido glutárico presente un XRPD representado en la figura 8. Como se mencionó anteriormente, los compuestos de la presente invención son particularmente adecuados para el tratamiento del dolor crónico. El dolor crónico incluye indicaciones tales como dolor del miembro fantasma, dolor neuropático, neuropatía diabética, neuralgia pos-herpética (PHN), síndrome del túnel carpiano (CTS, sigla en inglés), neuropatía por HIV, síndrome de dolor regional complejo (CPRS, sigla en inglés), neuralgia trigeminal/neuralgia del trigémino/tic doloroso, intervención quirúrgica (por ejemplo, analgésicos postoperatorios), vasculopatia diabética, resistencia capilar o síntomas diabéticos asociados con insulitis, dolor asociado con angina, dolor asociado con menstruación, dolor asociado con cáncer, dolor dental, cefalea, migraña, cefalea tipo tensional, neuralgia trigeminal, síndrome de la articulación temporomandibular, lesión muscular con dolor miofacial, síndrome de fibromialgia, dolor óseo y de articulaciones (osteoartritis), artritis reumatoide, artritis reumatoide y edema provenientes de trauma asociado con quemaduras, esguinces o dolor de fractura ósea debida a osteoartritis, osteoporosis, metástasis ósea o razones desconocidas, gota, fibrositis, dolor miofacial, síndromes del estrecho torácico, dolor de espalda superior o lumbalgia (donde el dolor de espalda proviene de una enfermedad espinal sistemática, regional o primaria (radiculopatía), dolor pélvico, dolor torácico cardíaco, dolor torácico no cardíaco, dolor asociado con lesión de medula espinal (SCI), dolor central de posaccidente cerebrovascular, neuropatía por cáncer, dolor por SIDA, dolor de la enfermedad de células falciformes o dolor geriátrico. En particular, los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento de los trastornos del estado de ánimo, tales como depresión asociada con las indicaciones de dolor crónico enumeradas con anterioridad. El dolor está definido por la Asociación Internacional para el Estudio del Dolor (IASP, sigla en inglés) como "una experiencia sensorial y emocional desagradable asociada con daño real o potencial del tejido o se describe en términos de tal daño (IASP Classification of chronic pain, 2nd Edition, IASP Press (2002), 210). Aun cuando el dolor es siempre subjetivo, se pueden clasificar sus causas o síndromes. El "dolor neuropático" como subtipo es definido por la IASP como "dolor iniciado o causado por una lesión primaria o disfunción del sistema nervioso". Los ejemplos de diferentes subtipos del dolor neuropático reconocidos por IASP, son • Alodinia, que se define como "un dolor debido a un estímulo que normalmente no provoca dolor". • Causalgia que se define como "un síndrome de dolor de quemazón sostenido, alodinia y hiperpatía después de una lesión nerviosa traumática, con frecuencia combinado con disfunción vasomotora y sudomotora y cambios tróficos posteriores".

• Hiperestesia, que se define como "sensibilidad aumentada a la estimulación, que excluye a los sentidos". • Neuralgia, que se define como "dolor en la distribución de un nervio o nervios". • Neuritis, que se define como "Inflamación de un nervio o nervios". • Neuropatía, que se define como "un disturbio de la función o cambio patológico de un nervio: en un nervio, mononeuropatía, en varios nervios, mononeuropatía múltiple, si es difusa y bilateral, polineuropatía". La neuropatía se pude asociar con, por ejemplo., diabetes, en cuyo caso se denomina neuropatía diabética. • Hiperalgesia, que se define como "una respuesta aumentada a un estímulo que es normalmente doloroso". • Hiperpatía, que se define como "un síndrome doloroso caracterizado por una reacción anormalmente dolorosa a un estímulo, en especial un estímulo repetitivo, además de un umbral aumentado". Los estímulos que provocan el dolor neuropático pueden ser mecánicos o térmicos. El excepcional perfil farmacológico de los compuestos de las presentes invenciones los hace adecuados para el tratamiento de otras enfermedades, que no están directamente relacionados con el dolor crónico. Los receptores 5-HT2c se localizan, por ejemplo., en las neuronas dopaminérgicas donde la activación ejerce una influencia inhibitoria tónica sobre la liberación de dopamina y los antagonistas de 5-HT2c producirán un aumento del nivel de dopamina. Los datos presentados en el ejemplo 2E muestran que los compuestos de la presente invención, en efecto, provocan un aumento dependiente de dosis de los niveles de dopamina extracelulares del cerebro. Con este antecedente se puede plantear que los antagonistas de 5-HT2C son particularmente adecuados para el tratamiento de la depresión refractaria al tratamiento con los inhibidores selectivos de la recaptación de serotonina [Psychopharmacol. Bull., 39, 147-166, 2006]. Esta hipótesis está avalada por varios estudios clínicos que muestran que una combinación de mirtazipina y SSRI es superior al SSRI solo para el tratamiento de los pacientes deprimidos con una respuesta clínica inadecuada (depresión resistente al tratamiento, TRD, o depresión refractaria) [Psychother. Psychosom., 75, 139-153, 2006]. La mirtazapina también es un antagonista de 5-HT2 y 5-HT3, lo cual indica que los compuestos que ejercen la inhibición de la recaptación de serotonina en combinación con el antagonismo con 5-HT2 y 5-HT3, tales como los compuestos de la presente invención, son útiles para el tratamiento del TRD, es decir, aumentará la tasa de remisión para los pacientes que sufren de depresión resistente al tratamiento. Los datos presentados en los ejemplos 2F y 2G muestran que los compuestos de la presente invención originan un aumento del nivel extracelular de acetilcolina en la corteza prefrontal e hipocampo ventral. Existe una antigua evidencia clínica de que aumentar los niveles de acetilcolina en el cerebro es una forma de tratar la enfermedad de Alzheimer y el deterioro cognitivo en general; compárese con el uso de los inhibidores de acetilcolina esterasa en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer. Con estos antecedentes, se considera que los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer y deterioro cognitivo y también de los trastornos del estado de ánimo, tal como depresión asociada con la enfermedad de Alzheimer y deterioro cognitivo. Un segmento de los pacientes deprimidos responderá al tratamiento con, por ejemplo., SSRI en el sentido de que estos mejorarán las escalas de depresión con relevancia clínica, tales como MADRD y HAMD, pero otros síntomas, tales como disturbios del sueño y deterioro cognitivo, continúan. En el presente contexto, estos pacientes se denominan pacientes con respuesta parcial. Debido a los efectos descriptos anteriormente sobre los niveles de acetilcolina, se espera que los compuestos de la presente invención sean útiles para el tratamiento del deterioro cognitivo además de la depresión. Los estudios clínicos han demostrado que el compuesto prazosin, que es un antagonista del receptor -1 adrenérgico reduce los disturbios del sueño [Biol. Psychiatry, 61 , 928-934, 2007]. Además, también se considera que el antagonismo de 5-HT2A y 5-HT2c de los compuestos de la presente invención tiene un efecto sedante, mejorador del sueño [Neuropharmacol, 33, 467-471 , 1994], por lo tanto los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento de los pacientes con respuesta parcial, o dicho de otro modo, que el tratamiento de los pacientes deprimidos con los compuestos de la presente invención reducirá la fracción de pacientes con respuesta parcial. El trastorno de hiperactividad con déficit de atención (ADHD, sigla en inglés) es uno de los trastornos neuropsicológicos más comunes. El ADHD se caracteriza por la presencia de una tríada de deterioros sociales y comunicativos con conductas restringidas, repetitivas o estereotipadas. El ADHD usualmente comienza en la infancia o adolescencia, pero los síntomas pueden continuar en la adultez. La atomoxetina es actualmente el único no estimulante aprobado por la FDA para el tratamiento del DHD [Drugs, 64, 205-222, 2004]. La atomoxetina es un inhibidor de la recaptación de norepinefrina, y esto sugiere que los compuestos de la presente invención se pueden usar en el tratamiento del ADHD. Además, los compuestos de la presente invención pueden tener un efecto sedante debido al antagonismo del receptor a-1 adrenérgico y 5-HT2 descrito con anterioridad, el cual es beneficioso para el tratamiento del ADHD. La melancolía es un subtipo particular de depresión con frecuencia relacionada con la depresión severa; este tipo de depresión también se denomina como depresión melancólica. La melancolía se asocia con ansiedad, temor a futuro, insomnio y pérdida de apetito. Se ha demostrado que los compuestos que inhiben la recaptación de serotonina y norepinefrina, tales como, por ejemplo., venlafaxina, son particularmente efectivos para el tratamiento de los pacientes con depresión severa y melancolía [Depres. Anxiety, 12, 50-54, 2000]. Como se describió con anterioridad, los compuestos que ejercen un antagonismo sobre 5-HT2c aumentan el nivel de dopamina, por lo tanto se esperaría que tales compuestos sean efectivos para el tratamiento de la melancolía [Psychpharm. Bull., 39, 147-166, 2006]. Adicionalmente, se espera que el antagonismo al receptor a-1 adrenérgico y 5-HT2 de los compuestos de la presente invención ayude a normalizar el sueño, por lo tanto dichos compuestos serían útiles en el tratamiento de la melancolía. La FDA ha aprobado recientemente la sertralina y paroxetina, dos SSRI, para el tratamiento del trastorno del estrés pos-traumático (PTSD, sigla en inglés). Además, los compuestos que tienen actividad antagonista de 5-HT2A son útiles ya que se espera que estos puedan contener la agitación, insomnio y carácter explosivo de los pacientes con PTSD [Curr opinión Invest. Drug, 4, 37-41 , 2003]. Por consiguiente, se espera que los compuestos de la presente invención sean útiles para el tratamiento del PTSD. Los sofocos son un síntoma asociado con la transición menopáusica.

Algunas mujeres pueden sufrir hasta un punto en el que interfiere con el sueño o actividades en general, y donde el tratamiento es necesario. La terapia de reemplazo hormonal con estrógenos ha sido una práctica establecida durante décadas, sin embargo recientemente se han manifestado preocupaciones sobre los efectos secundarios, tales como cáncer de mama y eventos cardíacos. Los ensayo clínicos con los SSRI o SNRI han demostrado que estos compuestos presentan un efecto sobre los sofocos, no obstante menos que para los estrógenos [J.Am.Med.Ass., 295, 2057-2071 , 2006]. El tratamiento de los sofocos con compuestos que inhiben la recaptación de serotonina y/o norepinefrina, por ejemplo., los compuestos de la presente invención, sin embargo podrían ser un tratamiento alternativo para las mujeres que no pueden o no desean aceptar los estrógenos. La apnea del sueño o síndrome apnea-hipopnea obstructiva o trastornos respiratorios obstructivos del sueño es un trastorno para el cual no se ha identificado todavía una farmacoterapia efectiva. Varios estudios en animales, sin embargo, sugieren que los antagonistas de 5-HT3, por ejemplo, los compuestos de la presente invención, pueden ser efectivos para el tratamiento de estas enfermedades [Sleep, 21 , 131-136, 1998; Sleep, 8, 871 , 878, 2001]. Se ha demostrado recientemente que el antagonista de 5-HT3 odansetron es efectivo para el tratamiento del ANSI y abuso de alcohol y fármacos [Drug Alc.Depend., 84, 256-263, 2006; Pharmacol Therapeut., 111 , 855-876, 2006]. Esto parece avalar la idea de que los antagonistas de 5-HT3, por ejemplo., los compuestos de la presente invención pueden ser útiles para el tratamiento del ansia, tal como el ansia de alcohol, nicotina o carbohidratos y abuso de alcohol y fármacos.

Otros usos sugeridos de los antagonistas 5-HT3 incluyen emesis, en particular emesis inducida por quimioterapia, trastornos alimentarios, tales como bulimia, y síndrome de intestino irritable (IBS) [Exp. Opin. Ther. Targets, 11, 527-540, 2007]. Se espera que los compuestos de la presente invención dotados de un perfil farmacológico excepcional sean útiles para el tratamiento de trastornos afectivos, depresión, trastorno depresivo mayor, depresión posnatal, depresión asociada con trastorno bipolar, enfermedad de Alzheimer, psicosis o enfermedad de Parkinson, ansiedad, trastorno de ansiedad general, trastorno de ansiedad social, trastorno obsesivo compulsivo, trastorno de pánico, ataques de pánico, fobia, fobia social, agorafobia e incontinencia urinaria. En una realización , la invención se refiere a un método para tratar el dolor crónico, pacientes con respuesta parcial, depresión resistente al tratamiento, enfermedad de Alzheimer, deterioro cognitivo, ADHD, melancolía, PTSD, sofocos, apnea del sueño, ansia de alcohol, nicotina o carbohidratos, abuso de sustancias y abuso de alcohol o fármacos, emesis, IBS, trastornos alimentarios, trastornos afectivos, depresión, trastorno depresivo mayor, depresión posnatal, depresión asociada con trastorno bipolar, enfermedad de Alzheimer, psicosis o enfermedad de Parkinson, ansiedad, trastorno de ansiedad general, trastorno de ansiedad social, trastorno obsesivo compulsivo, trastorno de pánico, ataques de pánico, fobia, fobia social, agorafobia o incontinencia urinaria por estrés, el método que comprende la administración a un paciente que requiere del mismo de una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto I. En una realización, dicho paciente tratado por cualquiera de las enfermedades enumeradas con anterioridad ha sido diagnosticado inicialmente con dicha enfermedad.

En una realización, la invención se refiere a un método para el tratamiento del dolor crónico, el método que comprende administrar a un paciente que requiere del mismo de una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto I. En una realización, dicho dolor crónico se selecciona entre dolor del miembro fantasma, dolor neuropático, neuropatía diabética, neuralgia pos-herpética (PHN), síndrome del túnel carpiano (CTS, sigla en inglés), neuropatía por HIV, síndrome de dolor regional complejo (CPRS), neuralgia trigeminal/neuralgia del trigémino/tic doloroso, intervención quirúrgica (por ejemplo., analgésicos posoperatorios), vasculopatía diabética, resistencia capilar o síntomas diabéticos asociados con insulitis, dolor asociado con angina, dolor asociado con menstruación, dolor asociado con cáncer, dolor dental, cefalea, migraña, cefalea tipo tensional, neuralgia trigeminal, síndrome de la articulación temporomandibular, lesión muscular con dolor miofacial, síndrome de fibromialgia, dolor óseo y de articulaciones (osteoartritis), artritis reumatoide, la artritis reumatoide y edema provenientes de trauma asociado con quemaduras, esguinces o dolor de fractura ósea debida a osteoartritis, osteoporosis, metástasis ósea o razones desconocidas, gota, fibrositis, dolor miofacial, síndromes del estrecho torácico, dolor de espalda superior o lumbalgia (donde el dolor de espalda proviene de una enfermedad espinal sistemática, regional, o primaria (radiculopatía), dolor pélvico, dolor torácico cardíaco, dolor torácico no cardíaco, dolor asociado con lesión de medula espinal (SCI), dolor central posaccidente cerebrovascular, neuropatía por cáncer, dolor por SIDA, dolor de la enfermedad de células falciformes o dolor geriátrico.

En una realización, dicho dolor crónico es dolor neuropático. En una realización, dicho dolor neuropático se selecciona entre hiperpatía, hiperalgesia, neuropatía, neuropatía diabética, neuritis, neuralgia, hiperestesia, causalgia y alodinia. En una realización, el compuesto de la invención se administra en una cantidad de aproximadamente 0.001 a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal por día.

Una dosificación oral típica está en el rango de aproximadamente 0.001 a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal por día, con preferencia de aproximadamente 0.01 a aproximadamente 50 mg/kg de peso corporal por día, administrada en una o más dosis tales como 1 a 3 dosis. La dosificación exacta dependerá de la frecuencia y modo de administración, el sexo, edad, peso y condición general del sujeto tratado, la naturaleza y gravedad de la enfermedad tratada y otros factores evidentes para los expertos en el arte.

Una dosificación oral típica para adultos está en el rango de 1-100 mg/día de un compuesto de la presente invención, tal como 1-30 mg/día, o 5-25 mg/día. Esto típicamente se puede obtener por la administración de 0.1-50 mg, tal como 1-25 mg, tal como 1 , 5, 10, 15, 20 o 25 mg del compuesto de la presente invención una o dos veces por día.

Una "cantidad terapéuticamente efectiva" de un compuesto como se usa en la presente memoria significa una cantidad suficiente para curar, aliviar o detener en forma parcial las manifestaciones clínicas de una enfermedad dada y sus complicaciones en una intervención terapéutica que comprende la administración de dicho compuesto. Una cantidad adecuada para obtener este efecto se define como "una cantidad terapéuticamente efectiva". El término también incluye a las cantidades suficientes para curar, aliviar o detener en forma parcial las manifestaciones clínicas de una enfermedad dada y sus complicaciones en una intervención terapéutica que comprende la administración de dicho compuesto. Las cantidades efectivas para cada propósito dependerán de la gravedad de la enfermedad o lesión así también como del peso y estado general del sujeto. Se considerará que la determinación de una dosificación apropiada será llevada a cabo mediante experimentación de rutina, por medio de la construcción de una matriz de valores y puntos diferentes de prueba en la matriz, lo cual está dentro de la experiencia ordinaria de un médico entrenado. Los términos "tratamiento" y "tratar" como se usan en la presente memoria significan el manejo y cuidado de un paciente con el propósito de combatir una afección, tal como una enfermedad o trastorno. El término pretende incluir el espectro completo de tratamientos para una afección dada, la cual el paciente está sufriendo, tal como administración del compuesto activo para aliviar los síntomas o complicaciones, retrasar el avance de la enfermedad, trastorno o afección, aliviar o calmar los síntomas y complicaciones y/o curar o eliminar la enfermedad, trastorno o afección además de prevenir la afección, donde se entiende por prevención al tratamiento y atención de un paciente con el propósito de combatir la enfermedad, trastorno o afección e incluye la administración de los compuestos activos para prevenir el comienzo de los síntomas o complicaciones. No obstante, el tratamiento profiláctico (preventivo) y terapéutico (curativo) son dos aspectos separados de la invención. El paciente tratado es con preferencia un mamífero, en particular un ser humano.

En una realización, la invención se refiere al uso de la presente invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento del dolor crónico, pacientes con respuesta parcial, depresión resistente al tratamiento, enfermedad de Alzheimer, deterioro cognitivo, ADHD, melancolía, PTSD, sofocos, apnea del sueño, ansia por alcohol, nicotina o carbohidratos, abuso de sustancias y abuso de alcohol o fármacos, emesis, IBS, trastornos alimentarios, trastornos afectivos, depresión, trastorno depresivo mayor, depresión postnatal, depresión asociada con trastorno bipolar, enfermedad de Alzheimer, psicosis, o enfermedad de Parkinson, ansiedad, trastorno de ansiedad general, trastorno de ansiedad social, trastorno obsesivo compulsivo, trastorno de pánico, ataques de pánico, fobia, fobia social, agorafobia o incontinencia urinaria por estrés.

En una realización, la invención se refiere al uso de la presente invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento del dolor crónico, tal como dolor neuropático.

En una realización, la invención se refiere un compuesto de la presente invención para el uso como medicamento para el tratamiento del dolor crónico, pacientes con respuesta parcial, depresión resistente al tratamiento, enfermedad de Alzheimer, deterioro cognitivo, ADHD, melancolía, PTSD, sofocos, apnea del sueño, ansia por alcohol, nicotina o carbohidratos, abuso de sustancias y abuso de alcohol o fármacos, emesis, IBS, trastornos alimentarios, trastornos afectivos, depresión, trastorno depresivo mayor, depresión postnatal, depresión asociada con trastorno bipolar, enfermedad de Alzheimer, psicosis o enfermedad de Parkinson, ansiedad, trastorno de ansiedad general, trastorno de ansiedad social, trastorno obsesivo compulsivo, trastorno de pánico, ataques de pánico, fobia, fobia social, agorafobia o incontinencia urinaria por estrés.

En una realización, la invención se refiere a los compuestos de la presente invención para el uso como medicamento para el tratamiento del dolor crónico, tal como dolor neuropático.

Los compuestos de la presente invención se pueden administrar solos como un compuesto puro o en combinación con vehículos o excipientes aceptables para uso farmacéutico, tanto en dosis únicas como múltiples. Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención se pueden formular con vehículos o diluyentes aceptables para uso farmacéutico además de cualquier otro de los adyuvantes y excipientes conocidos de acuerdo con las técnicas convencionales tales como los descriptos en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19 Edition, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 1995. Las composiciones farmacéuticas se pueden formular específicamente para la administración por cualquier vía adecuada tal como la vía oral, rectal, nasal, pulmonar, tópica (que incluye bucal y sublingual), transdérmica, intracisternal, intraperitoneal, vaginal y parenteral (que incluye subcutánea, intramuscular, intratecal, intravenosa e intradérmica), la vía oral es la preferida. Se apreciará que la vía preferida dependerá de la condición general y edad del sujeto tratado, la naturaleza de la enfermedad tratada y el componente activo elegido. Las composiciones farmacéuticas para la administración oral incluyen formas de dosificación oral tales como cápsulas, comprimidos, grageas, pildoras, pastillas, polvos y gránulos. Cuando sea apropiado, estas se pueden preparar con recubrimientos. Las formas de dosificación líquidas para administración oral incluyen soluciones, emulsiones, suspensiones, jarabes y elixires. Las composiciones farmacéuticas para la administración parenteral incluyen soluciones inyectables acuosas y no acuosas estériles, dispersiones, suspensiones o emulsiones además de polvos estériles para ser reconstituidos en soluciones o dispersiones inyectables estériles antes de usar. Otras formas de administración adecuadas incluyen supositorios, aerosoles, ungüentos, cremas, geles, inhalantes, parches dérmicos, implantes. Convenientemente, los compuestos de la invención se administran en una forma de dosificación unitaria que contiene dichos compuestos en una cantidad de aproximadamente 0.1 a 50 mg, tal como 1 mg, 5 mg 10 mg, 15 mg, 20 mg o 25 mg de un compuesto de la presente invención. Para las vías parenterales tales como intravenosa, intratecal, intramuscular y administración similar, generalmente las dosis están en el orden de aproximadamente la mitad de dosis empleada para la administración oral. Para la administración parenteral, las soluciones del compuesto de la invención en una solución acuosa estéril, se puede usar propilenglicol acuoso, vitamina E acuosa o aceite de sésamo o maní. Tales soluciones acuosas deberían ser adecuadamente buferizadas si fuera necesario, y el diluyente líquido primero se tornó isotónico con suficiente solución salina o glucosa. Las soluciones acuosas son particularmente adecuadas para la administración intravenosa, intramuscular, subcutánea e intraperitoneal. Los medios acuosos estériles empelados están fácilmente disponibles por técnicas estándares conocidas por los expertos en el arte. Los vehículos farmacéuticos adecuados incluyen a los diluyentes o rellenos sólidos inertes, solución acuosa estéril y diversos solventes orgánicos. Los ejemplos de vehículos sólidos son lactosa, térra alba, sacarosa, ciclodextrina, talco, gelatina, agar, pectina, acacia, estearato de magnesio, ácido esteárico y alquil éteres inferiores de celulosa. Los ejemplos de vehículos líquidos son jarabe, aceite de maní, aceite de oliva, fosfolípidos, ácidos grasos, aminas de ácidos grasos, polioxietileno y agua. Las composiciones farmacéuticas formadas por la combinación del compuesto de la invención y los vehículos aceptables para uso farmacéutico luego se administran fácilmente en una variedad de formas de dosificación adecuadas para las vías de de administración descriptas. Las formulaciones de la presente invención adecuadas para la administración oral pueden presentarse como unidades discretas tales como cápsulas o comprimidos, cada una que contiene una cantidad predeterminada del componente activo y que puede incluir un excipiente adecuado. Además, las formulaciones disponibles para la vía oral pueden estar en forma de un polvo o gránulos, una solución o suspensión en un líquido acuoso o no acuoso o una emulsión líquida aceite en agua o agua en aceite. Si se usa un vehículo sólido para la administración oral, la preparación puede ser un comprimido, por ejemplo, colocado en una cápsula de gelatina dura, en forma de polvo o pellet o en forma de pastilla de disolución oral o pildora. La cantidad de vehículo sólido puede variar pero usualmente será de aproximadamente 25 mg a aproximadamente 1 g. Si se usa un vehículo líquido, la preparación puede estar en forma de de un jarabe, emulsión, cápsula de gelatina blanda o líquido inyectable estéril tal como una suspensión o solución líquida acuosa o no acuosa. Los comprimidos se pueden preparar por mezclado del componente activo con adyuvantes y/o diluyentes ordinarios seguidos por la compresión de la mezcla en una máquina de comprimir convencional. Los ejemplos de adyuvantes o diluyentes comprenden: almidón de maíz, almidón de papa, talco, estearato de magnesio, gelatina, lactosa, gomas y similares. Se pueden usar cualquiera de los otros adyuvantes o aditivos usualmente usados para tales -propósitos tales como colorantes, saborizantes, conservantes etc. con la condición de que sean compatibles con los componentes activos. Las cápsulas que comprenden un compuesto de la presente invención se pueden preparar por la mezcla de un polvo que comprende dicho compuesto con celulosa microcristalina y estearato de magnesio, luego se coloca dicho polvo en una cápsula de gelatina dura. Opcionalmente, dicha cápsula se puede colorear por medio de un pigmento adecuado. Típicamente, las cápsulas comprenderán 0.25-20% de un compuesto de la presente invención, tal como 0.5-1.0%, 3.0-4.0%, 14.0-16.0% de un compuesto de la presente invención. Estas concentraciones se pueden usar en forma conveniente para administrar 1 , 5, 10, 15, 20 y 25 mg de un compuesto de la presente invención en una forma de dosificación unitaria. Las soluciones para inyecciones se pueden preparar por disolución del componente activo y aditivos posibles en una parte del solvente para inyección, con preferencia agua estéril, ajuste de la solución al volumen deseado, esterilización de la solución y llenado de en ampollas o viales adecuados. Se puede agregar cualquier aditivo adecuado usado convencionalmente en el arte, tal como agentes de tonicidad, conservantes, antioxidantes, etc.

El compuesto I se puede preparar como se describe en WO 2003/029232. Las sales del compuesto I pueden ser por adición de un ácido apropiado seguido por precipitación. La precipitación se puede producir, por ejemplo, por enfriamiento, eliminación del solvente, adición de otro solvente o una mezcla de los mismos.

Todas las referencias, que incluyen a las publicaciones, solicitudes de patentes y patentes, mencionadas aquí están incorporadas por la presente como referencia en su totalidad y en la misma medida que si cada referencia fuera indicada en forma individual y específica como referencia y fuera expuesta en su totalidad en la presente memoria (en el máximo grado permitido por la ley), a pesar de cualquier incorporación provista separadamente de los documentos particulares realizadas en otra parte de la presente memoria.

Se debe interpretar que el uso de los términos "un" y "una" y "el/la" y referentes similares en el contexto de la descripción de la invención abarca tanto el singular como el plural, a menos que se indique lo contrario en la presente memoria o se contradiga claramente con el contexto. Por ejemplo, se entiende que la frase "el compuesto" se refiere a diversos compuestos de la invención o aspecto particular descrito, a menos que se indique lo contrario.

A menos que se indique lo contrario, todos los valores exactos proporcionados en la presente memoria son representativos de los correspondientes valores aproximados (por ejemplo., se puede considerar que todos los valores exactos de los ejemplos provistos con respecto a un factor o medición particular también proporcionan una medición aproximada correspondiente modificada por "aproximadamente", donde sea apropiado).

La descripción en la presente memoria de cualquier aspecto o aspecto de la invención mediante los términos tales como "que comprende", "que tiene" "que incluye" o "que contiene" con referencia a un elemento o elementos pretende proporcionar soporte para un aspecto similar o aspecto de la invención que "consiste en", "consiste esencialmente en" o "que comprende sustancialmente" este elemento o elementos particulares, a menos que se indique lo contrario o se contradiga claramente con el contexto (por ejemplo., una composición descripta en la presente memoria como que comprende un elemento particular se debería entender como que también describe a una composición que consiste en ese elemento, a menos que se indique lo contrario o se contradiga claramente con el contexto).

Ejemplos Métodos analíticos Los difractogramas de rayos X se midieron en un difractómetro de rayos X en PANalytical X'Pert PRO mediante radiación CuKai. Las muestras se midieron en modo de reflexión en el intervalo 2T de 5-40° mediante un detector X'celerator.

La composición elemental (CHN) se midió en un instrumento Elementar Vario EL de Elementar. Se usaron aproximadamente 4 mg de muestra por cada medición y los resultados se dan como el valor medio de dos mediciones.

Ejemplo 1a - sal del HBr del compuesto I A 442 gramos del etil éster del ácido 4-(2-p-tolilsulfanil-fenil)-piperidina-1-carboxílico como un aceite agitado y ligeramente calentado (aprox. 45°C) se agregan 545 mi de HBr 33 % en peso en AcOH (5.7 M, 2.5 equiv). Esta mezcla da 10°C de exotermia. Después de la adición final la mezcla de reacción se calienta a 80°C y se deja durante 18 horas. Se retira un muestra y se analiza por HPLC y si la reacción no es completa se debe agregar más HBr 33% en peso en AcOH. Por otra parte la mezcla se enfría a 25°C para hacer que el producto bromhidrato de 4-(2-p-tolilsulfanil-fenil)-piperidina precipite. Después de una hora a 25°C se agregan 800 mi de dietil éter a la suspensión espesa. La agitación continúa durante otra hora antes de aislar el producto por filtración, se lava con 400 mi de dietil éter y se seca al vacío a 40°C durante la noche. El bromhidrato del compuesto I se aisló como un sólido blanco.

Ejemplo 1b - sal del HBr del compuesto I Bromuro de 2-(4-tolilsulfanil)-fen¡lo En un reactor cubierto con nitrógeno agitado se purgó la N-metil-pirrolidona, NMP (4.5 litros) con nitrógeno durante 20 minutos. Se agregó 4-metilbencentiol (900g, 7.25mol) y luego 1 ,2-dibromobenceno (1709g, 7.25mol). Se agregó finalmente ter-butóxido de potasio (813g, 7.25mol) como último reactivo. La reacción fue exotérmica lo cual produjo un aumento de temperatura de la mezcla de reacción a 70°C. La mezcla de reacción luego se calentó a 120°C durante 2-3 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. Se agregó acetato de etilo (4l¡tros) y una solución de cloruro de sodio acuoso (15%, 2.5litros). La mezcla se agitó durante 20 minutos. La fase acuosa se separó y extrajo con otra porción de acetato de etilo (2 litros). La fase acuosa se separó y las fases orgánicas se combinaron y lavaron con solución de cloruro de sodio (15%, 2.5 litros). La fase orgánica se separó, se secó con sulfato de sodio y se evaporó a presión reducida para dar un aceite rojo que contenía 20-30% de NMP. El aceite se diluyó a dos veces el volumen con metanol y la mezcla se reflujo. Se agregó más metanol hasta que se obtuvo una solución roja transparente. La solución se enfrió lentamente a temperatura ambiente mientras se sembraba. El producto cristaliza como cristales blancos, estos se aislaron por filtración y lavaron con metanol y se secaron a 40°C en una estufa de vacío hasta peso constante. 4^idroxi-4-(2-(4-tolilsulfanil)fenil)-piperídin- 1 -carboxilato de etilo En un rector agitado bajo cubierta de nitrógeno se suspendió bromuro de 2-(4-tolilsulfanil)-fenilo (600g, 2.15mol) en heptano (4.5 litros). A temperatura ambiente se agregó BuLi 10M en hexano (235 mi, 2.36 mol) durante 10 minutos. Sólo se advirtió una pequeña exotermia. La suspensión se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente y luego se enfrió a -40°C. Se agregó 1-carbetoxi-4-piperidona (368 g, 2.15 mol) disuelto en THF (1.5 litros) a una velocidad no tan rápida para que la temperatura de reacción se mantuviera por debajo de -40°C. Cuando la reacción se completó, se calentó a 0°C y se agregó HCI 1M (1 litro) manteniendo la temperatura por debajo de 10°C. La fase acuosa ácida se separó y extrajo con acetato de etilo (1 litro). Las fases orgánicas se combinaron y extrajeron con una solución de cloruro de sodio (15%, 1 litro). Las fases orgánicas se secaron con sulfato de sodio y evaporaron para dar una masa semicristalina. Esta se suspendió con éter etílico (250 mi) y se filtró. Se secó en una estufa de vacío a 40°C hasta peso constante. 4-(2-(4-tolilsulfanil)fenil)-piperidin- 1-carboxilato de etilo Se cargó ácido trifluoroacético (2.8 kg, 24.9 mol) y trietilsilano (362 g, 3.1 mol) en un reactor con un agitador eficiente. Se agregó 4-hidroxi-4-(2-(4-tolilsulfanil)fenil)-piperidin-1-carboxilato de etilo (462 g, 1.24 mol) en porciones por medio de un embudo de pólvora. La reacción fue ligeramente exotérmica. La temperatura se elevó a 50°C. Después de finalizada la adición la mezcla de reacción se calentó a 60°C durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. Se agregaron tolueno (750 mi) y agua (750 mi). La fase orgánica se aisló y la fase acuosa se extrajo con otra porción de tolueno (750ml). Las fases orgánicas se combinaron y extrajeron con una solución de cloruro de sodio (15%, 500 mi) y se secaron con sulfato de sodio. El sulfato de sodio se filtró, el filtrado se evaporó a presión reducida para dar un aceite rojo que se procesó adicionalmente en el próximo paso. Bromhidrato de 4-(2-(4-tolilsulfanil)fenil)-piperídina El 4-(2-(4-tolilsulfanil)fenil)-piperidin-1-carboxilato de etilo bruto como un aceite rojo del Ejemplo 3 se mezcló en un reactor agitado con ácido bromhídrico en ácido acético (40%, 545 mi, 3.11 mol). La mezcla se calentó a 80°C durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. Durante el enfriamiento el producto cristaliza. Después de 1 hora a temperatura ambiente se agregó éter etílico (800 mi) a la mezcla de reacción y la mezcla se agitó durante otra hora. El producto se filtró, se lavó con éter etílico y se secó en una estufa de vacío a 50°C hasta peso constante. Ejemplo 1c Recristralización de la sal de HBr del compuesto I Una mezcla de 10.0 gramos de la la sal de HBr del compuesto I, por ejemplo., como se preparó anteriormente se calentó a reflujo en 100 mi de H20.

La mezcla se volvió transparente y se disolvió por completo a 80-90°C. A la solución transparente se agregó 1 gramo de carbón y el reflujo continuó durante 15 minutos antes de filtrar y se dejó enfriar espontáneamente a temperatura ambiente. Durante el enfriamiento se produjo la precipitación del sólido blanco y la suspensión se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. La filtración y el secado al vacío a 40°C durante toda la noche produjeron 6.9 gramos (69%) de la sal de adición del ácido HBr del compuesto I. Ver Figura 1 para XRPD. Análisis elemental: 3.92% N, 59.36% C, 6.16% H (teoría: 3.85% N, 59.34% C, 6.09% H) Ejemplo 1d - Preparación de soluciones patrón de la base libre A una mezcla de 500 mi de acetato de etilo y 200 mi de H2O se agregaron 50 gramos de la sal de HBr del compuesto I produciendo una suspensión de dos fases. A esta suspensión se agregaron aproximadamente 25 mi de NaOH conc que originó la formación de una solución límpida de dos fases (el pH fue medido a 13-14). La solución se agitó vigorosamente durante 15 minutos y la fase orgánica se separó. La fase orgánica se lavó con 200 mi de H20, se secó con Na2SO4, filtró y evaporó al vacío a 60°C produciendo la base libre con un rendimiento de 38 gramos (99%) como un aceite casi incoloro.

La disolución de 10 gramos del aceite y ajuste de volumen a 150 mi mediante acetato de etilo produjo una solución patrón 0.235 M en acetato de etilo de la cual se usaron alícuotas de 1.5 mi (100 mg de la base libre).

La disolución de 10 gramos del aceite y ajuste de volumen a 100 mi mediante EtOH 96% en volumen produjo una solución patrón 0.353 M en EtOH de la cual se usaron alícuotas de 1.0 mi (100 mg de al base libre).

Ejemplo 1e - Formación de sales mediante soluciones patrón de la base libre Las alícuotas dadas se colocaron en tubos de ensayo y mientras se agitaba se agregó la cantidad apropiada de ácido como se indica en la Tabla 1. Si el ácido era líquido se agregó solo, por otra parte este se disolvió en el solvente dado antes de la adición. Después de la mezcla y precipitación, la agitación continuó durante toda la noche y el precipitado se recogió por filtración. Antes de secar al vacío a 30°C se retiró una pequeña muestra de referencia y se secó a temperatura ambiente sin vacío. Este procedimiento se incluyó con el fin de probar los solventes. Algunos resultados se presentan en la Tabla 1. Los difractogramas XRPD se muestran en las Figuras 1-22, y las posiciones de los picos seleccionados se incluyen en la Tabla 2. La Tabla 3 muestra las solubilidades de los compuestos de la presente invención en agua junto con el pH de la solución saturada resultante. La columna "Precipitado" muestra si el precipitado aislado después de la determinación de la solubilidad es idéntico al compuesto disuelto, lo cual es indicativo de la formación de hidratos.

Tabla 1 Tabla 2: Posiciones seleccionadas de picos de rayos X (°2T), 2:1 significa 2 bases a 1 ácido. Todos los valores 0.1° Palmitato 7.00 16.34 22.73 28.21 Estearato 6.70 15.52 21.81 28.91 Lactato 5.30 8.18 9.44 17.24 Hidrato del lactato 11.67 16.70 18.25 21.76 Hidroxil-isobutirato 5.09 16.60 20.38 27.37 Sal del ácido 7.18 12.53 21.11 24.19 sebacoinico Sal del ácido 8.03 13.52 17.90 24.60 adipínico 2:1 Sal del ácido 9.33 14.01 18.72 20.63 adípico 1 :1 a Sal del ácido 15.69 21.53 25.81 31.18 adípico 1:1 ß Glutarato 1 :1 9.39 11.70 14.05 14.58 Succinato 1 :1 11.74 14.33 17.75 26.84 Fumarato 1 :1 8.90 11.47 19.25 22.33 Fumarato 2:1 8.49 12.48 17.78 23.97 Maleato 1:1 12.11 15.51 17.48 22.53 Tabla 3 Acido Solubilidad pH Precipitado (Base:Ácido) (mg/ml) resultant e Acido Palmítico, 0.4 8.6 =comienzo ácido hexadecanoico 1 :1 Ácido Solubilidad PH Precipitado (Base:Ácido) (mg/ml) resultant e Acido DL- >150 6.1 =comienzo (después de Láctico, ácido evaporación) DL-2-hidroxipropiónic o 1 :1 Acido adípico, 2.5 4.0 Sal parcialmente 2:1 ácido 1 ,6-hexanodioico 1 :1 Acido adípico, 1.0 7.8 =comienzo ácido 1 ,6-hexanodioico 2:1 Acido fumárico 0.2 3.3 =comienzo 1 :1 Acido glutárico, 13 4.6 =comienzo ácido 1,5-pentanodioico 1 :1 Acido malónico 5.2 4.0 =nueva forma (ß) 1 :1 (a) Acido oxálico 1.1 2.7 =Comienzo 1 :1 Acido 0.7 5.5 =Comienzo sebacoínico, ácido 1 ,8-octanodioico 2:1 Ácido Solubilidad PH Precipitado (Base:Ácido) (mg/ml) resultant e Acido succínico, 2.0 4.0 Hidrato ácido 1 ,4- butanodioico, 2:1 Acido L-málico, 2.8 4.0 Hidrato ácido L-2- hidroxi butanodioico 1 :1 , P Acido D- 1.8 3.5 Hidrato tartárico, ácido D-2,3-dihidroxi butanodioico 1 :1 Acido L- 39 4.3 Hidrato aspártico 1 :1 Acido glutámico >35 4.6 - 1 :1 Ácido cítrico 0.5 4.7 =Comienzo 2:1 Acido fosfórico 6.0 2.0 ? 1 :1 HCI 4.5 6.8 =Comienzo HBr 2.4 7.0 =Comienzo Ejemplo 2A - Inhibición de la recaptación de serotonina (5-HT) y norepinefrina (NE) Se preincubaron alícuotas del compuesto de ensayo y una preparación de sinaptosoma cortical de rata durante 10 min/37°C, y luego se agregó [3H]NE o [3H]5-HT (concentración final 10 nM). Se determinó recaptación no específica en presencia de 10µ? de talsupram o citalopram y la recaptación total se determinó en presencia del buffer. Las alícuotas se incubaron durante 15 minutos a 37°C. Después de la incubación se separó el [3H]NE o [3H]5-HT tomado por los sinaptosomas por filtración a través de Unifilter GF/C, preembebido en PEI 0.1% durante 30 minutos, mediante un programa Tomtec Cell Harvester. Los filtros se lavaron y contaron en un contador Wallac MicroBeta. Los compuestos de la presente invención NET presentan un valor de IC50 de 23 nM. Los compuestos de la presente invención SERT presentan un valor de IC50 de 8 nM. Ejemplo 2B - Antagonismo de 5-HTgA Se examinaron los compuestos de la presente invención para determinar las afinidades hacia los receptores de serotonina y se halló que exhiben un perfil antagonista con afinidad para los receptores 5-??2? (K¡ 54 nM). La afinidad se calcula a partir de Y = 100/(1+ 1 O(x"l09ic5o)) donde Y indica el % de unión y X indica la concentración del compuesto. Se usaron 5 concentraciones del compuesto (1 , 10, 30, 100, 1000 nM) para calcular el valor de IC50. Ki se calculó a partir de la ecuación de Cheng Prusoff Ki = (IC50/(1+ ([L]/Kd)) La afinidad se determinó con el MDL Pharmaservices, número de catálogo 271650. En células de mamífero que expresan los receptores 5-HT2A humanos, los compuestos de la presente invención presentan propiedades antagonistas competitivas. Los compuestos se unen a los receptores 5-HT2A con una Ki <100 nM y en un ensayo funcional los compuestos que antagonizan a 5-HT produjeron la liberación de Ca2+ de las reservas intracelulares con una Kb de 67 nM. Un análisis de Schild reveló un antagonismo competitivo con una Kb de 100 nM. El experimento se llevó a cabo de la siguiente manera. 2 o 3 días antes del experimento células CHO que expresan 250 fmol/mg de receptores 5-??2? humanos se incuban a una densidad suficiente para producir una capa mono-confluyente en el día del experimento. Las células se cargan con colorante (kit de Ca2+ de Molecular Devices) durante 60 minutos a 37°C en un incubador con 5% de CO2 a una humedad de 95%. Se monitoreó la fluorescencia basal en un lector de placas de imágenes fluorométricas o FLIPR384 de Molecular Devices (Sunnyvale, CA) con una longitud de onda de excitación de 488 nm y un rango de emisión de 500 a 560 nm. La intensidad Lacer se ajustó a un nivel adecuado para obtener valores básales de aproximadamente 8000-10000 unidades de fluorescencia. La variación de fluorescencia basal debe ser menor del 10%. Los valores de EC50 se evalúan mediante concentraciones crecientes del compuesto de ensayo que abarca por lo menos 3 decenas. Los valores de pA2 se miden por la estimulación de curvas de dosis respuesta completas de 5-HT con cuatro concentraciones diferentes del compuesto (150, 400 1500 y 4000 nM). Los valores de Kb también se midieron por estimulación de 2 decenas de concentraciones de las sustancias de ensayo con ECas de 5-HT. Las sustancias de ensayo se agregan a las células 5 minutos antes del 5-HT. Los valores de K¡ se calculan mediante la ecuación de Cheng-Prusoff. Ejemplo 2C - Antagonismo del receptor 5-HTgA En oocitos que expresan los receptores 5-HT3A homoméricos humanos el 5-HT activa corrientes con una EC50 de 2600 nM. Esta corriente se puede antagonizar con los antagonistas de 5-HT3 clásicos tales como ondansetron. El ondansetron exhibe un valor de Ki inferior a 1 nM en este sistema. Los compuestos de la presente invención exhiben un potente antagonismo a bajas concentraciones (0.1 nM - 100 nM) (IC50 ~ 10 nM/ Kb ~ 2 nM) y propiedades agonistas cuando se aplica a concentraciones mayores (100 - 100000 nM) (EC50 ~ 2600 nM) alcanzando una corriente máxima de aproximadamente 70-80% de la corriente máxima estimulada por el propio 5-HT. En oocitos que expresan los receptores 5-HT3A homoméricos de rata, 5-HT activa la corriente con una EC50 de 3,3 µ?. Los experimentos se realizaron de la siguiente manera. Los oocitos se extrajeron quirúrgicamente de la Xenepus laevis hembra madura anestesiada con MS-222 0.4% durante 10-15 min. Los oocitos luego se digirieron a temperatura ambiente durante 2-3 horas con colagenasa 0.5 mg/ml (tipo IA Sigma-Aldrich) en buffer OR2 (82.5 mN de NaCI, 2.0 mM de KCI, 1.0 mM de MgCI2 y 5.0 mM de HEPES, pH 7.6). Se seleccionaron los oocitos privados de la capa de folículos y se incubaron durante 24 horas en buffer salino de Barth modificado [88 mM de NaCI, 1 mM de KCI, 15 mM de HEPES, 2.4 mM de NaHC03, 0.41 mM de CaCI2, 0.82 mM de MgS04, 0.3 mM de Ca(N03)2] suplementado con 2 mM de piruvato de sodio, 0.1 U/l de penicilina y 0.1 pg/l de estreptomicina. Se identificaron los oocitos en estadio IV-IV y se inyectaron con 12-48 ni de nucleasas libre de agua que contenía 14-50 pg de ARNc que codifica a los receptores de 5-HT3A humanos y se incubaron a 18°C hasta que se usaron para los registros electrofisiológicos (1-7 días después de inyección). Los oocitos con la expresión de receptores 5-HT3 humanos se colocaron en un baño de 1 mi y se prefundieron con buffer Ringer (1 15 mM de NaCI, 2.5 mM de KCI, 10 mM de HEPES, 1.8 mM de CaCI2, 0.1 mM de MgCI2, pH 7.5). Las células se atravesaron con electrodos 0.5-1 ?O tapados con agar que contemnían KCI 3 M y el voltaje fijo en -90 mV por un amplificador GeneClamp 500B. Los oocitos se prefundieron completamente con buffer Ringer y los fármacos se aplicaron en el perfundido. Las soluciones agonistas de 5-HT se aplicaron durante 10-30 segundos. Las potencias de los antagonistas del receptor 5-HT3 se examinaron por medición de la concentración-respuesta frente a la estimulación con 10 µ? de 5-HT. Ejemplo 2D - Antagonismo del receptor OCIA Los compuestos de la presente invención se examinaron para determinar las afinidades al receptor OC-IA y se halló que exhiben un perfil antagonista con el medio de afinidad para a,? receptores (Ki = 34 nM). El día de los experimentos, las membranas (ver más adelante la descripción de la preparación de membranas) se descongelan y homogenizan en un buffer mediante un mezclador ultra turrax y se diluyen a la concentración deseada (5 pg/pocillo ~ 5 pg/900 µ?, conservar en hielo hasta el uso).

El experimento se inicia por mezclado de 50 µ? de compuesto de ensayo, 50 µ? de [3H]-Prazosin y 900 µ? de membranas y la mezcla se incuba durante 20 minutos a 25 °C. La unión no específica se determina en presencia de WB-4101 10 µ? y la unión total se determina en presencia del buffer. Después de la incubación, el ligando unido se separa del no unido por filtración a través de Unifilter GF/B, preembebido en PEI al 0.1 % durante 30 minutos, mediante un programa Tomtec Cell Harveste (D4, 2., 4) de 96 pocilios. Los filtros se lavaron tres veces con 1 mi de buffer frío en hielo, se secaron a 50°C y se agregaron 35µ? de líquido de centelleo/pocilio a los filtros. La radiactividad unida se cuenta en un Wallac OY 1450 MicroBeta. La afinidad se calcula a partir de Y = 100/(1+ 10(X" '^'^?5) donde Y indica el % de unión y X indica la concentración del compuesto. Las concentraciones del compuesto que abarcan 2 decenas se usaron para calcular el valor de IC50. La Ki se calculó a partir de la ecuación de Cheng Prusoff Ki = (IC50/(1+ ([L]/Kd)) En un ensayo funcional los compuestos de la presente invención que antagonizan la adrenalina provocaron la liberación de Ca2+ de las reservas intracelulares y un ensayo funcional reveló que los compuestos eran antagonistas. Estos experimentos se realizaron esencialmente como se describe a continuación. Todas las células se cultivaron en un medio DMEM suplementado con 10% de BCS, 4 mM de L-glutamina (o 2 mM en el caso del COS-7), y 100 unidades/ml de penicilina más 100 pg/ml de estreptomicina, a 37°C, en 5% de C02. Veinticuatro horas antes de los ensayos, células CHO que expresan los receptores alfaiA-7 humanos se sembraron en placas de microtitulación de pared negra de 384 pocilios recubiertas con poli-D-lisina. Se aspiró el medio de cultivo y las células se tiñeron con 1.5 µ? de Fluo-4 en buffer de ensayo compuesto de solución salina equilibrada de Hank (138 mM de NaCI, 5 mM de KCI, 1.3 mM de CaCI2, 0.5 mM de MgCI2, 0.4 mM de MgS04, 0.3 mM de KH2PO4, 0.3 mM de Na2HP04, 5.6 mM de glucosa) más 20 mM de HEPES a pH 7.4, 0.05% de BSA y 2.5 mM de probenicid (50 µ?/pocillo) durante 1 hora en 5% de C02 a 37°C. Después de descartar el exceso de colorante, las células se lavaron en buffer de ensayo y se cubrieron con un volumen igual a 45 µ?/pocillo (o 30 ul/pocillo para el ensayo de antagonista). En el caso de la evaluación del antagonista, se agrega antagonista o vehículo en este momento como una alícuota de 15 µ? en un buffer que contiene 4% de DMSO a una concentración final 4x (DMSO final = 1%), seguido por una incubación de 20 min. Se monitoreó la fluorescencia basal en un lector de placa de imágenes fluorométricas o FLIPR384 de Molecular Devices (Sunnyvale, CA) con una longitud de onda de excitación de 488 nm y un rango de emisión de 500 a 560 nm. La energía de excitación Láser se ajustó a un nivel adecuado para obtener valores básales de aproximadamente 8000 unidades de fluorescencia (RFU, sigla en inglés). Luego las células se estimularon a 5 temperatura ambiente con los agonistas diluidos en el buffer de ensayo (15 µ?), y se midieron las RFU con intervalos de 1.5 segundos durante un período de 2.5 min. Se calculó el máximo cambio de fluorescencia para cada pocilio. Las curvas de concentración respuesta derivadas del cambio máximo de fluorescencia se analizaron por regresión no lineal (ecuación de Hill). Para las determinaciones de i o antagonistas, después de 20 min. de incubación del compuesto (como anteriormente), se agregaron las concentraciones fijas del estándar de serotonina agonista. Ejemplo 2E - Aumento de dopamina Una inyección única de los compuestos de la presente invención 15 aumentaron en forma dependiente de la dosis los niveles extracelulares de DA en la corteza frontal de rata. El compuesto de la presente invención a razón de 8.9 mg/kg y 18 mg/kg s.c, aumentaron los niveles de DA en aproximadamente 100% y 150%, respectivamente, sobre los niveles básales representados en la figura 23. Las cantidades se calcularon como base libre. 20 Método.

Se usaron ratas macho Sprague-Dawley, con pesos iniciales de 275-300 g. Los animales se mantuvieron bajo un ciclo de 12-horas de luz/oscuridad en condiciones controladas para una temperatura interior regular (21±2°C) humedad y (55±5%) con alimento y agua corriente disponible ad libitum. En los 5 experimentos del tratamiento de tres días se usaron minibombas osmóticas (Alzet, 2ML1). Las bombas se llenaron en condiciones asépticas y se implantaron en forma subcutánea bajo anestesia con sevoflurano. Los experimentos se realizaron con la minibombas incorporadas. Las muestras sanguíneas para medir los niveles plasmáticos del compuesto de ensayo después de 3 días del tratamiento se recogieron al final de los experimentos. Cirugía y experimentos de microdiálisis. Los animales se anestesiaron con hypnorm/dormicum (2 ml/kg) y se implantaron en forma estereotáxica cánulas guía intracerebrales (CMA/12) en el hipocampo, ubicando la punta de la sonda de diálisis en el hipocampo ventral (coordenadas: 5.6 mm anterior al bregma, lateral -5.0 mm, 7.0 mm ventral a dura o en la corteza frontal (coordenadas: 3.2 mm anterior al bregma; lateral, 3.0 mm; 4.0 mm ventral al dura). Se requirieron tornillos de anclaje y cemento acrílico para la fijación de las cánulas guía. La temperatura corporal de los animales se controló por una sonda rectal y se mantuvo a 37°C. Las ratas se dejaron recuperar de la cirugía durante 2 días, albergadas en jaulas individuales. El día del experimento se insertó una sonda de microdiálisis (CMA/12, 0.5 mm de diámetro, 3 mm de longitud) a través de a cánula guía. Las sondas se conectaron por medio de un canal dual pivotante a la bomba de microinyección. La perfusión de la sonda de microdiálisis con solución Ringer filtrada (145 mm de NaCI, 3 mM de KCI, 1 mM de MgCb, 1.2 mM de CaCI2) comenzó poco antes de la inserción de la sonda en el cerebro y continuó durante la duración del experimento a un caudal de flujo constante de 1 (1.3) µ?/min. Después de 180 min de estabilización, se iniciaron los experimentos. Los dializados se recogieron cada 20 (30) min. Después de los experimentos se sacrificaron las ratas por decapitación, se extrajeron los cerebros, se congelaron y se cortaron para la verificación de la ubicación de la sonda. Análisis de los dializados. Se analizó la concentración de dopamina en los dializados por medio de HPLC con detección electroquímica. Se separaron las monoaminas por cromatografía líquida en fase reversa (ODS 150 x 3 mm, 3 µ?). Dopamina: la fase móvil consistió en 90 mM de NaH2P04, 50 mM de citrato de sodio, 367 mg/l de ácido 1-octansulfónico sódico, 50 µ? de EDTA y 8% de acetonitrilo (pH 4.0) a un caudal de flujo de 0.5 ml/min. La detección electroquímica se obtuvo mediante un detector coulométrico; potencial ajustado a 250 mV (célula oclusiva a 350 mV) (Coulochem II, ESA).

Ejemplo 2F - Aumento de acetilcolina El experimento se diseñó para evaluar los efectos de los compuestos de la presente invención en los niveles extracelulares de acetilcolina en la corteza prefrontal de las ratas con movimiento libre. Se usaron ratas Wistar macho (280-350 g; Harían, Zeist, Holanda) para los experimentos. Las ratas se alojaron en forma individual en jaulas de plástico (30 x 30 x 40 cm) y tuvieron acceso ad libitum a comida y agua. Las ratas se anestesiaron con isoflurano (2%, 400 ml/min de N20, 400 ml/min de O2). Se usó lidocaína (10% m/v) para la anestesia local. Cada animal se colocó en una estructura estereotáxica (Kopf ¡nstruments, USA), y se insertaron sondas caseras con forma de I (membrana Hospal AN 69, superficie expuesta de 4 mm) en la corteza prefrontal medial (mPFC) mediante el atlas del cerebro de rata de Paxinos and Watson (1982). Las coordenadas para la punta de la sonda son mPFC [AP = 3.4 mm, L = -0.8 mm, V = 5.0 mm]. La sonda luego se fijó en el cráneo con cemento dental y un tornillo. Se administró flunixina (1 mg/kg s.c.) como analgésico pos-operatorio. Los experimentos se realizaron 24-48 horas después de la cirugía. El día del experimento, las ratas se conectaron con una tubería PEEK flexible a las bombas de microperfusión (CMA 102), y las sondas de diálisis se perfundieron con un buffer Ringer que contiene 147 mM de NaCI, 3.0 mM de KCI, 1.2 mM de CaCb, y 1.2 mM MgCI2, con un caudal de flujo de 1.5 µ?/min. Las muestras de microdiálisis se recogieron a intervalos de 30 min en mini-viales que contenían 55 pL de ácido fórmico 0.02 M para la determinación de acetilcolina. Se recolectaron las muestras con un colector de fracciones automatizadas (CMA 142), y se conservaron a -80°C hasta que se analizaron. Después de completar los experimentos se sacrificaron las ratas. Se extrajeron los cerebros y se curaron con solución de paraformaldehído (4% m/v). La ubicación de cada sonda se comprobó histológicamente de acuerdo con Paxinos y Watson (1982), por la preparación de secciones coronales del cerebro. El compuesto de ensayo se disolvió en 2-OH-propil-beta-ciclodextrina 10% y la administración se produjo por inyecciones subcutáneas de volúmenes de 5 ml/kg en dosis diferentes. Las concentraciones de acetilcolina se determinaron por HPLC con detección por espectrometría de masas en tándem (MS/MS). Se inyectaron alícuotas (25 pl) en al columna de HPLC con un inyector de muestras automatizado (PerkinElmer Instruments, serie 200). Se realizó la separación cromatográfica en una columna analítica de fase reversa 150 x 2.00 mm (4 pm) (Phenomenex Synergy MAX-RP, Bester) protegida por una columna protectora de 4 x 2.0 mm (Phenomenex Synergy MAX-RP AJO-6073, Bester), ambas mantenidas a una temperatura de 30°C. La fase móvil (¡socrática) consistió en agua ultrapurificada (UP), acetonitrilo (ACN), y ácido trifluoroacético (TFA) (UP:ACN:TFA = 95,0:0.5:0.1 % v/v/v). La fase móvil corrió a través del sistema a un caudal de flujo de 0.300 ml/min por una bomba de HPLC (PerkinElmer Instruments, microbomba serie 200). Los análisis de LC/MS se realizaron mediante un sistema API 4000 MS/MS que consiste en un detector API 4000 MS/MS y una interfaz Turbo Ion Spray (ambos de Applied Biosystems, Holanda). Las adquisiciones se realizaron en modo de ionización positiva, con un voltaje de aspersión iónica ajustado a 5.5 kV, la presión del gas nebulizador a 344.5 kPa (50 psig) (en una escala SCIEX 0-90) con una temperatura de la sonda de 600°C. El instrumento se operó en un modo de monitoreo de reacción múltiple (MRM) para la detección de acetilcolina (precursor 146.1 Da, producto 86.8 Da). La energía de colisión fue de 21.0 eV, y la presión del gas de colisión (nitrógeno) se mantuvo a 7 (en una escala SCIEX de 0-12). Los datos se calibraron y cuantificaron mediante el sistema de datos Analysttm (Applied Biosystem, versión 1.2). Se tomaron dos muestras consecutivas de microdiálisis con menos de 50% de variación como niveles básales y se ajustaron a 100%. Los cambios de la concentración de acetilcolina se expresaron como porcentaje respecto del basal para el mismo sujeto. Los datos se muestran en la Figura 24 Ejemplo 2G - Aumento de acetilcolina El experimento se diseñó para evaluar los efectos de los compuestos de la presente invención en los niveles extracelulares de acetilcolina en la corteza prefrontal e hipocampo ventral de las ratas con movimiento libre. Se usaron ratas Wistar macho 275-300 g. Los animales se mantuvieron bajo un ciclo de 12-horas de luz/oscuridad en condiciones controladas para una temperatura interior regular (21±2°C) humedad y (55±5%) con alimento y agua corriente disponible ad libitum. Cirugía y experimentos de microdiálisis. Los animales se anestesiaron con hypnorm/dormicum (2 ml/kg) y se implantaron en forma estereotáxica cánulas guía intracerebrales (CMA/12) en el hipocampo, ubicando la punta de la sonda de diálisis en el hipocampo ventral (coordenadas: 5.6 mm posterior al bregma, lateral -5.0 mm, 7.0 mm ventral al dura o en al corteza frontal (coordenadas: 3.2 mm anterior al bregma; lateral, 0.8 mm; 4.0 mm ventral al dura). Se requirieron tornillos de anclaje y cemento acrílico para la fijación de las cánulas guía. La temperatura corporal de los animales se controló por una sonda rectal y se mantenía a 37°C. Las ratas se dejaron recuperar de la cirugía durante 2 días, albergadas en jaulas individuales. El día del experimento se insertó una sonda de microdiálisis (CMA/12, 0.5 mm de diámetro, 3 mm de longitud) a través de a cánula guía. Las sondas se conectaron por medio de un canal dual pivotante a la bomba de microinyección. La perfusión de la sonda de microdiálisis con solución Ringer filtrada (145 mm de NaCI, 3 mM de KCI, 1 mM de MgCI2, 1.2 mM de CaCI2 que contiene 0.5 µ? de neostigmina) comenzó poco antes de la inserción de la sonda en el cerebro y continuó durante la duración del experimento a un caudal de flujo constante de 1 µ?/min. Después de 180 min de estabilización, se iniciaron los experimentos. Los dializados se recogieron cada 20 min. Después de los experimentos se sacrificaron los animales, se extrajeron los cerebros, se congelaron y se cortaron para la verificación de la ubicación de la sonda. Análisis de los dializados de Acetilcolina Se analizó la concentración de acetilcolina (Ach) en los dializados por medio de HPLC con detección electroquímica mediante una fase móvil que consiste en hidrógeno fosfato de disodio 100 mM, ácido octansulfónico 2.0 mM, cloruro de tetrametilamonio 0.5 mM y 0.005% de MB (ESA), pH 8.0. Una precolumna con enzima del reactor (ESA) que contenía colina oxidasa inmovilizada eliminó colina de la muestra inyectada (10 µ?) antes de la separación de ACh en la columna analítica (ESA ACH-250); caudal de flujo 0.35 ml/min, temperatura: 35°C. Después de la columna analítica la muestra pasó a través de una columna posterior en fase sólida del reactor (ESA) que contenía acetilcolinesterasa y colina oxidasa inmovilizadas. Este último reactor convirtió la ACh a colina y posteriormente la colina a betaína y H2O2. Esta última fue detectada en forma electroquímica por medio de un electrodo de platino (Analytical cell: ESA, model 5040).

Presentación de datos En los experimentos de inyección única, el valor medio de 3 muestras consecutivas de ACh inmediatamente anteriores a la administración del compuesto sirvió como nivel basal para cada experimento y los datos se convirtieron a porcentaje respecto del basal (valores de pre-inyección básales medios normalizados al 100%). Los datos se presentan en las Figuras 25a y 25b.

Los datos presentados en la Figura 24 muestran caídas inesperadas de los niveles de acetilcolina (ver por ejemplo., 8 mg/kg) que son difíciles de explicar y se atribuyen a incertidumbre experimental. En conjunto, ambos conjuntos de datos de los Ejemplos 2F y 2G muestran los mismo, es decir un aumento dependiente de la dosis de los niveles de acetilcolina extracelulares del cerebro. Se espera que este hallazgo preclínico se traduzca en una mejora de la cognición en marco clínico útil, por ejemplo, para el tratamiento de enfermedades caracterizadas por un deterioro cognitivo, tales como por ejemplo, pacientes de Alzheimer, con respuesta parcial, deterioro cognitivo, etc. Ejemplo 3 - Efecto sobre el dolor neuropático Para demostrar la eficacia frente al dolor neuropático, el compuesto de la presente invención se ensayó en el modelo de formalina del dolor neuropático [Neuropharm., 48, 252-263, 2005; Pain, 51, 5-17, 1992]. En este modelo, los ratones reciben una inyección de formalina (4.5%, 20 µ?) en la superficie plantar de la pata trasera izquierda y después se coloca en vasos de precipitado de vidrio individuales (capacidad 2 litros) para observación. La irritación causada por la inyección de formalina estimula una respuesta de conducta bifásica característica, cuantificada por la cantidad de tiempo pasado hasta que el ratón se lame pata lesionada. La primera fase (-0-10 minutos) representa la irritación química directa y nocicepción, mientras que se considera que la segunda (~20-30 minutos) representa el dolor de origen neuropático. Las dos fases se separan por un período latente en el cual la conducta retorna a la normalidad. La medición del tiempo transcurrido en lamer la pata lesionada en las dos fases evalúa la efectividad de los compuestos de ensayo para reducir los estímulos dolorosos. Se ensayaron ocho ratones C57/B6 (ca. 25g) por grupo. La tabla 4 siguiente muestra la cantidad del tiempo transcurrido en lamer la pata lesionada en las dos fases, es decir 0-5 minutos y 20-30 minutos posteriores a la inyección de formalina. La cantidad del compuesto administrado se calcula como base libre.

Tabla 4 Los datos de la tabla 4 muestran que el compuesto de la presente invención tiene poco efecto en la primera fase que representa la irritación química directa y nocicepción. Más notablemente, los datos también muestran una disminución clara y dependiente de la dosis del tiempo pasado en lamer las patas de la segunda fase, lo cual indica un efecto del compuesto de la presente invención del tratamiento del dolor neuropático. Ejemplo 4 - Cápsulas El bromhidrato de 4-[2-(4-metilfenilsulfanil)-fenil]piperidina se mezcló con celulosa microcristalina en un primer paso. En un segundo paso se mezcló estearato de magnesio. Se prepararon cápsulas de cuatro concentraciones -el componente activo se indica como base libre Estearato de 20.6 g 21.2 g 21.9 g magnesio Peso del 206 mg 212 mg 21.9 mg contenido de la cápsula Se prepararon 10.000 cápsulas de cada lote.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Compuesto I, que es 4-[2-(4-metilfenil-sulfan¡l)fen¡l]p¡per¡d¡na y sales aceptables para uso farmacéutico de la misma en una forma cristalina con la condición de que dicho compuesto no sea la sal de adición clorhidrato de 4-[2-(4-metilfenilsulfanil)fenil]-piperidina.

2. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , compuesto que es la sal de adición del HBr.

3. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, compuesto que se caracteriza por picos de XRPD a aproximadamente 6.08, 14.81 , 19.26 y 25.38°2T.

4. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, compuesto que se caracteriza por un XRPD representado en la figura 1.

5. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , compuesto que es la sal de adición del ácido DL-láctico.

6. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 5, compuesto que se caracteriza por los picos en un XRPD a aproximadamente 5.30, 8.18, 9.44 y 17.24°2T.

7. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 5, compuesto que se caracteriza por un XRPD representado en la figura 4.

8. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , compuesto que es la sal de adición del ácido glutárico (1 :1).

9. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 8, compuesto que se caracteriza por los picos en un XRPD a aproximadamente 9.39, 11.70, 14.05 y 14.58°2T.

10. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 8, compuesto que se caracteriza por un XRPD representado en la figura 8.

11. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , compuesto que es la sal de adición del ácido malónico (1 :1 ).

12. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 1 , compuesto que se caracteriza por picos en un XRPD a 10.77°, 16.70°, 19.93° y 24.01 °2T, o a 6.08°, 10.1 1 °, 18.25° y 20.26° 2T.

13. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 1 , compuesto que se caracteriza por un XRPD representado en la figura 9 o 10.

14. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , compuesto que es la sal de adición del ácido L-aspártico (1 :1) o el hidrato de la sal de adición del ácido L-aspártico (1 :1).

15. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , compuesto que es la sal de adición del ácido glutámico (1 :1) o el monohidrato de la sal de adición del ácido glutámico.

16. Compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-15 para su uso en terapia.

17. Composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-15 junto con un excipiente aceptable para uso farmacéutico.

18. Método de tratar una enfermedad seleccionada entre dolor crónico, pacientes con respuesta parcial, depresión resistente al tratamiento, enfermedad de Alzheimer, deterioro cognitivo, ADHD, melancolía, PTSD, sofocos, apnea del sueño, ansia por alcohol, nicotina o carbohidratos, abuso de sustancias y abuso de alcohol o fármacos, emesis, IBS, trastornos alimentarios, trastornos afectivos, depresión, trastorno depresivo mayor, depresión posnatal, depresión asociada con trastorno bipolar, enfermedad de Alzheimer, psicosis o enfermedad de Parkinson, ansiedad, trastorno de ansiedad general, trastorno de ansiedad social, trastorno obsesivo compulsivo, trastorno de pánico, ataques de pánico, fobia, fobia social, agorafobia o incontinencia urinaria por estrés, el método que comprende la administración a un paciente que requiere del mismo de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-15.

19. Método de acuerdo con la reivindicación 18, donde dicha enfermedad es dolor crónico.

20. Método de acuerdo con la reivindicación 19, donde dicho dolor crónico se selecciona entre dolor del miembro fantasma, dolor neuropático, neuropatía diabética, neuralgia pos-herpética (PHN), síndrome del túnel carpiano (CTS, sigla en inglés), neuropatía por HIV, síndrome de dolor regional complejo (CPRS, sigla en inglés), neuralgia trigeminal/neuralgia del trigémino/tic doloroso, intervención quirúrgica (por ejemplo analgésicos posoperatorios), vasculopatia diabética, resistencia capilar o síntomas diabéticos asociados con insulitis, dolor asociado con angina, dolor asociado con menstruación, dolor asociado con cáncer, dolor dental, cefalea, migraña, cefalea tipo tensional, neuralgia trigeminal, síndrome de la articulación temporomandibular, lesión muscular con dolor miofacial, síndrome de fibromialgia, dolor óseo y de articulaciones (osteoartritis), artritis reumatoide, artritis reumatoide y edema provenientes de trauma asociado con quemaduras, esguinces o dolor de fractura ósea debida a osteoartritis, osteoporosis, metástasis ósea o razones desconocidas, gota, fibrositis, dolor miofacial, síndromes del estrecho torácico, dolor de espalda superior o lumbalgia (donde el dolor de espalda proviene de una enfermedad espinal sistemática, regional o primaria (radiculopatía), dolor pélvico, dolor torácico cardíaco, dolor torácico no cardíaco, dolor asociado con lesión de medula espinal (SCI), dolor central posaccidente cerebrovascular, neuropatía por cáncer, dolor por SIDA, dolor de la enfermedad células falciformes y dolor geriátrico.

21. Método de acuerdo con la reivindicación 20, donde dicho dolor crónico es dolor neuropático.

22. Método de acuerdo con la reivindicación 21 , donde dicho dolor neuropático se selecciona entre hiperpatía, hiperalgesia, neuropatía, neuropatía diabética, neuritis, neuralgia, hiperestesia, causalgia y alodinia.

23. Uso de un compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-15 para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad seleccionada entre dolor crónico, pacientes con respuesta parcial, depresión resistente al tratamiento, enfermedad de Alzheimer, deterioro cognitivo, ADHD, melancolía, PTSD, sofocos, apnea del sueño, ansia por alcohol, nicotina o carbohidratos, abuso de sustancias y abuso de alcohol o fármacos, emesis, IBS, trastornos alimentarios, trastornos afectivos, depresión, trastorno depresivo mayor, depresión posnatal, depresión asociada con trastorno bipolar, enfermedad de Alzheimer, psicosis o enfermedad de Parkinson, ansiedad, trastorno de ansiedad general, trastorno de ansiedad social, trastorno obsesivo compulsivo, trastorno de pánico, ataques de pánico, fobia, fobia social, agorafobia o incontinencia urinaria.

24. Uso de acuerdo con la reivindicación 23, donde dicha enfermedad es dolor crónico.

25. Uso de acuerdo con la reivindicación 24, donde dicho dolor crónico se selecciona entre dolor del miembro fantasma, dolor neuropático, neuropatía diabética, neuralgia pos-herpética (PHN), síndrome del túnel carpiano (CTS, sigla en inglés), neuropatía por VIH, síndrome de dolor regional complejo (CPRS, sigla en inglés), neuralgia trigeminal/neuralgia del trigémino/tic doloroso, intervención quirúrgica (por ejemplo., analgésicos posoperatorios), vasculopatia diabética, resistencia capilar o síntomas diabéticos asociados con insulitis, dolor asociado con angina, dolor asociado con menstruación, dolor asociado con cáncer, dolor dental, cefalea, migraña, cefalea tipo tensional, neuralgia trigeminal, síndrome de la articulación temporomandibular, lesión muscular con dolor miofacial, síndrome de fibromialgia, dolor óseo y de articulaciones (osteoartritis), artritis reumatoide, artritis reumatoide y edema provenientes de trauma asociado con quemaduras, esguinces o dolor de fractura ósea debidos a osteoartritis, osteoporosis, metástasis ósea o razones desconocidas, gota, fibrositis, dolor miofacial, síndromes del estrecho torácico, dolor de espalda superior o lumbalgia (donde el dolor de espalda proviene de una enfermedad espinal sistemática, regional o primaria (radiculopatía), dolor pélvico, dolor torácico cardíaco, dolor torácico no cardíaco, dolor asociado con lesión de medula espinal (SCI), dolor central posaccidente cerebrovascular, neuropatía por cáncer, dolor por SIDA, dolor de la enfermedad de células falciformes y dolor geriátrico .

26. Uso de acuerdo con la reivindicación 25, donde dicho dolor crónico es dolor neuropático.

27. Uso de acuerdo con la reivindicación 26, donde dicho dolor neuropático se selecciona entre hiperpatía, hiperalgesia, neuropatía, neuropatía diabética, neuritis, neuralgia, hiperestesia, causalgia y alodinia.

28. Compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-15 para utilizar en el tratamiento de una enfermedad seleccionada entre dolor crónico, pacientes con respuesta parcial, depresión resistente al tratamiento, enfermedad de Alzheimer, deterioro cognitivo, ADHD, melancolía, PTSD, sofocos, apnea del sueño, ansia por alcohol, nicotina o carbohidratos, abuso de sustancias y abuso de alcohol o fármacos, emesis, IBS, trastornos alimentarios, trastornos afectivos, depresión, trastorno depresivo mayor, depresión posnatal, depresión asociada con trastorno bipolar, enfermedad de Alzheimer, psicosis o enfermedad de Parkinson, ansiedad, trastorno de ansiedad general, trastorno de ansiedad social, trastorno obsesivo compulsivo, trastorno de pánico, ataques de pánico, fobia, fobia social, agorafobia o incontinencia urinaria por estrés.

29. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 28 para utilizar en el tratamiento del dolor crónico.

30. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 29 para utilizar en el tratamiento del dolor del miembro fantasma, dolor neuropático, neuropatía diabética, neuralgia pos-herpética (PHN), síndrome del túnel carpiano (CTS, sigla en inglés), neuropatía por HIV, síndrome de dolor regional complejo (CPRS, sigla en inglés), neuralgia trigeminal/neuralgia del trigémino/tic doloroso, intervención quirúrgica (por ejemplo, analgésicos posoperatorios), vasculopatia diabética, resistencia capilar o síntomas diabéticos asociados con insulitis, dolor asociado con angina, dolor asociado con menstruación, dolor asociado con cáncer, dolor dental, cefalea, migraña, cefalea tipo tensional, neuralgia trigeminal, síndrome de la articulación temporomandibular, lesión muscular con dolor miofacial, síndrome de fibromialgia, dolor óseo y de articulaciones (osteoartritis), artritis reumatoide, la artritis reumatoide y edema provenientes de trauma asociado con quemaduras, esguinces o dolor de fractura ósea debida a osteoartritis, osteoporosis, metástasis ósea o razones desconocidas, gota, fibrositis, dolor miofacial, síndromes del estrecho torácico, dolor de espalda superior o lumbalgia (donde el dolor de espalda proviene de una enfermedad espinal sistemática, regional o primaria (radiculopatía), dolor pélvico, dolor torácico cardíaco, dolor torácico no cardíaco, dolor asociado con lesión de médula espinal (SCI), dolor central posaccidente cerebrovascular, neuropatía por cáncer, dolor por SIDA, dolor de la enfermedad de células falciformes o dolor geriátrico.

31. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 30 para utilizar en el tratamiento del dolor neuropático.

32. Compuesto de acuerdo con la reivindicación 31 , donde dicho dolor neuropático se selecciona entre hiperpatía, hiperalgesia, neuropatía, neuropatía diabética, neuritis, neuralgia, hiperestesia, causalgia y alodinia.