MX2008012014A - Terapia tumoral con un anticuerpo contra el factor de crecimiento endotelial vascular y un anticuerpo contra el receptor del factor de crecimiento epitelial tipo 2 humano. - Google Patents

Abstract

La presente invención proporciona un método para el tratamiento de la enfermedad de cáncer de mama en un paciente en el que previamente ha fallado un tratamiento con un anticuerpo anti-VEGF, que comprende la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-HER2 mientras se continúa dicha terapia con anticuerpo anti-VEGF. La invención también proporciona los correspondientes artículos de manufactura y las composiciones farmacéuticas.

Description

TERAPIA TUMORAL CON UN ANTICUERPO CONTRA EL FACTOR DE CRECIMIENTO ENDOTELIAL VASCULAR Y UN ANTICUERPO CONTRA EL RECEPTOR DEL FACTOR DE CRECIMIENTO EPITELIAL TIPO 2 HUMANO Campo de la invención La presente invención está relacionada con una terapia combinada con anticuerpos anti-HER2 y anti-VEGF. En particular, la invención concierne a la Uso de tales anticuerpos para el tratamiento de la enfermedad de cáncer de mama en un paciente en el cual no ha funcionado un tratamiento previo con un anticuerpo anti-VEGF. Antecedentes de la invención La angiogénesis está implicada en la patogénesis de una variedad de trastornos, lo que incluye los tumores sólidos, síndromes neovasculares infraoculares como las retinopatías proliferativas o la degeneración macular asociada a la edad (DME), artritis reumatoide, y soriasis (Folkman J., et al., J. Biol. Chem., 267 (1992) 10931- 10934 ; Klagsbrun M. , et al., Annu. Rev. Physiol., 53 (1991) 217-239; y Garner A., Vascular diseases, en: Pathobiology of ocular disease, A dynamic approach, (Eds.) Garner A. y Klintworth G. K., 2a edición, Marcel Dekker, New York (1994), págs. 1625-1710) . En el caso de los tumores sólidos, la neovascularización permite que las células tumorales adquieran una ventaja en el crecimiento y autonomía proli ferativa comparado con las células normales. De acuerdo con esto, se ha observado una correlación entre la No. Ref . : 196170 densidad de microvasos en secciones de tumor y la supervivencia del paciente en cáncer de mama asi como en muchos otros tumores (Weidner N., et al., N. Engl . J. Med., 324 (1991) 1-6; Horak E . R. , et al., Lancet, 340 (1992) 1120-1124; y Macchiarini P., et al., Lancet, 340 (1992) 145-146). El factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) está involucrado en la regulacióin de la angiogénesis normal y anormal, y en la neovascularización asociada con los tumores y los trastornos intraoculares (Ferrara N . , et al., Endocr. Rev., 18 (1997) 4-25; Berkman R. A., et al., J. Clin. Invest., 91 (1993) 153-159; Brown L. F. , et al., Human Pathol., 26 (1995) 86-91; Brown L. F. , et al., Cáncer Res., 53 (1993) 4727-4735; Mattern J. , et al., Brit. J. Cáncer, 73 (1996) 931-934 ; y Dvorak H. F. , et al., Am. J. Pathol., 146 (1995) 1029-1039). Los anticuerpos neutralizantes anti-VEGF suprimen el crecimiento de una serie de lineas celulares tumorales humanas en ratones (Kim K. J. , et al., Nature, 362 (1993) 841-844; Warren R. S., et al., J. Clin. Invest., 95 (1995) 1789-1797; Borgstrom P., et al., Cáncer Res., 56 (1996) 4032-4039; y elnyk O., et al., Cáncer Res., 56 (1996) 921-924). Las patentes WO 94/10202, WO 98/45332, WO 2005/00900 y WO 00/35956 se refieren a los anticuerpos contra el VEGF. El anticuerpo monoclonal humanizado bevacizumab (comercializado bajo la marca comercial Avastin®) es un anticuerpo anti-VEGF utilizado en la terapia tumoral y es el único agente anti-angiogénico aprobado para el tratamiento del cáncer (WO 98/45331). El HER2 es un miembro de la familia de receptores del factor de crecimiento epidérmico humano y posee una actividad proteina quinasa en su dominio citoplasmático . HER2 está sobreexpresado en las células tumorales y se correlaciona con un mal pronóstico y supervivencia. Por lo tanto, HER2 es una valiosa diana en la terapia del cáncer de mama. Los anticuerpos contra HER2 son conocidos a partir de Takai N., et al., Cáncer, 104 (2005) 2701-2708; Yeon C. H., et al., Invest. New Drugs, 23 (2005) 391-409; ong W. M . , et al., Cáncer Pract., 7 (1999) 48-50; Albanell J. , et al., Drugs Today, (Barc) . 35 (1999) 931-46. El trastuzumab (comercializado bajo la marca comercial Herceptin©) es un anticuerpo monoclonal humanizado anti-HER2 recombinante utilizado para el tratamiento del cáncer de mama metastásico con sobreexpresión de HER2/ amplificación génica de HER2. Los estudios preclinicos han demostrado que el anticuerpo tiene actividad antitumoral in vivo e in vitro. Además, se observó una potenciación aditiva o sinérgica de la actividad antitumoral del trastuzumab en combinación con varios agentes ant itumorales en modelos de ratón. En estudios clínicos, se observó una extensión de la supervivencia en pacientes con cáncer de mama metastásico con sobreexpresión de HER2. De acuerdo con la WO 98/45331, la efectividad de un anticuerpo anti-VEGF en la prevención o tratamiento de la enfermedad puede mejorarse mediante la administración del anticuerpo de forma seriada o en combinación con otro agente que sea efectivo para este propósito, como un anticuerpo capaz de unirse al receptor de HER2. La WO 2005/012531 describe los anticuerpos que pueden combinarse con un anticuerpo anti-VEGF (por ejemplo Avastin®) y/o anticuerpos anti-ErbB (por ejemplo Herceptin®) en el tratamiento del cáncer colorectal, cáncer de mama metastásico y cáncer renal. De acuerdo con la WO 2005/063816, los anticuerpos anti-VEGF pueden combinarse con los anticuerpos anti-ErbB en un tratamiento de cáncer de mama metastásico. La WO 2005/00090 y WO 2003/077841 también describe la combinación de anticuerpos anti-VEGF con anticuerpos anti-ErbB2 para la terapia tumoral. Los oncólogos clínicos están de acuerdo en que el fallo del tratamiento del cáncer no está necesariamente causado por el crecimiento del tumor primario, que generalmente se trata utilizando cirugía, sino por la expansión metastásica hacia diferentes órganos. La regresión de los tumores primarios mediante diferentes fármacos citotóxicos no es siempre indicativa de actividad anti-metastásica per se. Por el contrario, se ha observado una potenciación de la metástasis en respuesta a varios fármacos anticancerígenos (Geldof A. A. , et al., Anticancer Res., 8 (1988) 1335-1339; Murphy S. B., J. Clin. Oncol., 11 (1993) 199-201; y De Larco J. E . , et al., Cáncer Res. 61 (2001) 2857-2861). Claramente, existe una necesidad de desarrollar terapias para el tratamiento que no sólo ataquen el tumor primario, sino que también supriman la metástasis . Sumario de la invención La invención comprende la Uso de un anticuerpo anti-HER2 y un anticuerpo anti-VEGF para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de la enfermedad del cáncer de mama en un paciente en el que previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, y que comprende la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-HER2 y un anticuerpo anti-VEGF.

En una modalidad preferida, la invención comprende la Uso de trastuzumab y bevacizumab para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de enfermedad del cáncer de mama caracterizada por una sobreexpresión de la proteina del receptor de HER2 en un paciente en el cual previamente ha fallado la terapia con un anticuerpo anti-VEGF como el bevacizumab, lo que comprende la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente efectiva de trastuzumab y bevacizumab . La invención también comprende un método para el tratamiento de la enfermedad del cáncer de mama en un paciente en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, y que comprende la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-HER2 mientras se continúa dicha terapia con anticuerpo anti-VEGF. La invención también comprende un método para el tratamiento de la enfermedad del cáncer de mama, que se caracteriza por una sobreexpresión de la proteina del receptor HER2, en un paciente en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, lo que comprende la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente efectiva de trastuzumab mientras se continúa la terapia con bevacizumab . La invención también comprende un método para aumentar la duración de la supervivencia de un paciente con enfermedad de cáncer de mama en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, y que comprende la administración al paciente de cantidades efectivas de un anticuerpo anti-VEGF y un anticuerpo anti-HER2, en el que la co-administración del anticuerpo anti-VEGF y el anticuerpo anti-HER2 aumenta de forma efectiva la duración de la supervivencia. La invención también comprende un método para aumentar la supervivencia sin progresión de un paciente con enfermedad de cáncer de mama en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, y que comprende la administración al paciente de cantidades efectivas de un anticuerpo anti-VEGF y un anticuerpo anti-HER2, en el que la co-administración del anticuerpo anti-VEGF y el anticuerpo anti-HER2 aumenta de forma efectiva la duración de la supervivencia sin progresión.

La invención también comprende un método para el tratamiento de un grupo de pacientes, con enfermedad de cáncer de mama y en los que previamente ha fallado la terapia con un anticuerpo anti-VEGF, que comprende la administración al paciente de cantidades efectivas de un anticuerpo anti-VEGF y un anticuerpo anti-HER2, en el que la co-administración del anticuerpo anti-VEGF y el anticuerpo anti-HER2 aumenta de forma efectiva la tasa de respuesta en el grupo de pacientes.

La invención también comprende un método para aumentar la duración de la respuesta de un paciente con enfermedad de cáncer de mama en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, que comprende la administración al paciente de cantidades efectivas de un anticuerpo anti-VEGF y un anticuerpo anti-HER2, en el que la co-administración del anticuerpo anti-VEGF y el anticuerpo anti-HER2 aumenta de forma efectiva la duración de la respuesta. La invención también comprende un método para el tratamiento de un paciente con enfermedad de cáncer de mama en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, que comprende la administración al paciente de cantidades efectivas de un anticuerpo anti-VEGF y un anticuerpo anti-HER2, en el que la co-administración del anticuerpo anti-VEGF y el anticuerpo anti-HER2 resulta en una mejora estadísticamente significativa y clínicamente relevante del paciente tratado, lo cual se valora mediante la duración de la supervivencia, la supervivencia sin progresión, la tasa de respuesta o la duración de la respuesta. Esta invención también comprende un método para reducir la metástasis en un paciente con enfermedad de cáncer de mama en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, que comprende la administración al paciente de cantidades efectivas de un anticuerpo anti-VEGF y un anticuerpo anti-HER2, en el que la co-administración del anticuerpo anti-VEGF y el anticuerpo anti-HER2 reduce de forma efectiva la metástasis. La invención también comprende un método para el tratamiento de un grupo de pacientes con enfermedad de cáncer de mama y en los que previamente ha fallado la terapia con un anticuerpo anti-VEGF, que comprende la administración al paciente de cantidades efectivas de un anticuerpo anti-VEGF y un anticuerpo anti-HER2, en el que la co-administración del anticuerpo anti-VEGF y el anticuerpo anti-HER2 reduce de forma efectiva la metástasis en el grupo de pacientes. La invención proporciona un artículo de manufactura que comprende un contenedor, una composición dentro del contenedor que comprende un anticuerpo anti-VEGF y un prospecto con instrucciones para el usuario de la composición para administrar el anticuerpo anti-VEGF y el anticuerpo anti-HER2 a un paciente con enfermedad de cáncer de mama en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF. La invención también proporciona un articulo de manufactura que comprende un contenedor, una composición dentro del contenedor que comprende un anticuerpo anti-HER2 y un prospecto con instrucciones para el usuario de la composición para administrar el anticuerpo anti-HER2 y el anticuerpo anti-VEGF a un paciente con enfermedad de cáncer de mama en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF. La invención también proporciona una composición que comprende un anticuerpo anti-HER2 y un anticuerpo anti-VEGF utilizada en el tratamiento de la enfermedad de cáncer de mama en un paciente en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF. Preferiblemente el anticuerpo anti-HER2 es el trastuzumab. También preferiblemente el anticuerpo anti-VEGF es el bevacizumab. Breve descripción de las figuras Figura 1 Actividad antitumoral del tratamiento combinado trastuzumab y bevaci zumab sobre el crecimiento tumoral tras el fallo del tratamiento con bevacizumab. Valores medios del volumen del tumor (mm3) representados en el eje y; número de días tras la inyección de células tumorales representados en el eje x. Vehículo {círculos) , trastuzumab a dosis de inicio de 30 mg/kg y dosis de mantenimiento de 15 mg/kg {cuadrados) , bevacizumab a 5 mg/kg hasta el día 55 cuando el tratamiento también incluye trastuzumab a 15 mg/kg {triángulos) . Figura 2 Efecto del tratamiento combinado de trastuzumab y bevacizumab sobre la metástasis de pulmón. El valor medio de la secuencia de DNA humana Alu (ng/ml) cuantificada a partir de tejido de pulmón utilizando PCR a tiempo real está representado en el eje y. Descripción detallada de la invención El término "VEGF" de acuerdo con la invención se refiere al factor de crecimiento de las células endoteliales vasculares (S iss-Prot n° P15692), las formas de corte y empalme alternativo (véase por ejemplo Leung D. ., et al., Science, 246 (1989) 1306-1309; y Houck K. A., et al., Mol. Endocrin., 5 (1991) 1806-1814) y los fragmentos activos, preferiblemente los fragmentos N-terminal, del mismo. El término "anticuerpo anti-VEGF" de acuerdo con la invención es un anticuerpo que se une específicamente al VEGF. El anticuerpo anti-VEGF humanizado o variante del anticuerpo anti-VEGF preferible aquí se une al VEGF humano con un valor de Kd no superior a alrededor de 1><10~8 M y preferiblemente no superior a alrededor de 5?10~9 M. Preferiblemente, el anticuerpo anti-VEGF es un anticuerpo monoclonal que se une al mismo epitopo que el anticuerpo monoclonal humanizado recombinante anti-VEGF, generado de acuerdo con Presta L. G., et al., Cáncer Res. 57 (1997) 4593-4599. Un anticuerpo preferible es el bevacizumab. Los anticuerpos anti-VEGF y los métodos para su manufactura se describen por ejemplo en la US 6.054.297, US 2003/0190317, US 6.632.926, US 6.884.879, y US 2005/0112126. El bevacizumab comprende las regiones marco de la IgGl humana mutadas y las regiones que determinan la complementariedad de unión al antigeno de un anticuerpo monoclonal anti-hVEGF murino que bloquea la unión del VEGF humano a sus receptores. Aproximadamente el 93% de la secuencia de aminoácidos del bevacizumab, lo que incluye la mayoría de las regiones marco, se derivan de la IgGl humana, y alrededor del 7% de la secuencia se deriva del anticuerpo A4.6.1 murino. El bevacizumab tiene un peso molecular de alrededor de 149.000 Dalton y está glicosilado. El bevacizumab y el método para su preparación se describen en la PE 1 325 932. HER2 es un receptor de 185 kDa de un factor de crecimiento también denominado neu y c-erbB-2 (Slamon D. J., et al., Science 235 (1987) 177-182; Swiss-Prot P04626), cuya función está relacionada con la transformación neoplásica en las células de cáncer de mama humanas. La sobreexpresión de esta proteína se ha observado en el 20-30% de pacientes de cáncer de mama, en los que se correlaciona con una enfermedad localmente avanzada, un aumento de la probabilidad de recurrencia del tumor y una supervivencia del paciente reducida. Hasta en un 30-40% de los pacientes con cáncer gástrico, de endometrio, de glándula salival, de pulmón de células grandes, pancreático, ovárico, peritoneal, de próstata o colorectal, también puede encontrarse una sobreexpresión de esta proteina. Los anticuerpos anti-HER2 y los métodos para su manufactura se describen por ejemplo en la US 6.054.297, WO 89/06692, US 6.953.842, US 6.949.245, US 6.399.063, US 6.165.464, US 6.054.297, US 5.772.997, WO 2003/087131, WO 01/00245, WO 01/00238, WO 00/69460, WO 00/52054, WO 99/31140 y WO 98/17797. En una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo anti-HER2 es el trastuzumab. El trastuzumab y el método para su preparación se describen en la PE 0 590 058. El término "sobreexpresión" de la proteina del receptor de HER2 pretende indicar un nivel anormal de expresión de la proteina del receptor de HER2 en una célula de un tumor en un tejido u órgano especifico del paciente en relación con el nivel de expresión en una célula normal de ese tejido u órgano. Los pacientes con un cáncer caracterizado por la sobreexpresión del receptor de HER2 pueden comprobarse mediante ensayos estándar conocidos en la materia. Preferiblemente, la sobreexpresión se analiza en células fijadas de secciones de tejido congelado o incluido en parafina utilizando la detección inmunohistoquimica (IHQ). Si se acopla con una tinción histológica, puede determinarse la localización de la proteina diana y puede medirse la extensión de su expresión en un tumor tanto cualitativamente como semicuantitativamente . Tales ensayos de detección de IHQ son conocidos en la materia e incluyen el ensayo Clinical Trial Assay (CTA) , la prueba comercialmente disponible LabCorp 4D5 y la prueba comercialmente disponible HercepTest® de DAKO (DAKO, Carpintería, Calif.). Este último ensayo utiliza un intervalo específico de tinción de las células de 0 a 3+ (siendo 0 la expresión normal e indicando 3+ la expresión positiva más intensa) para identificar los cánceres con sobreexpresión de la proteína HER2 (véase la información de prescripción completa de Herceptin® (trastuzumab) , Septiembre 1998, Genentech Inc., San Francisco, Calif.) . Así, los pacientes con un cáncer caracterizado por la sobreexpresión de la proteína HER2 en el intervalo de 1+, 2+ o 3+, preferiblemente 2+ o 3+, más preferiblemente 3+ podrían beneficiarse de los métodos de terapia de la presente invención. El término "enfermedad de cáncer de mama" se refiere al crecimiento descontrolado de células anormales en la mama. Ésta incluye el carcinoma ductal in situ, carcinoma ductal invasivo, carcinoma lobular in situ, carcinoma lobular invasivo, carcinoma medular, enfermedad de Paget en el pezón y cáncer metastásico de mama.

El término "en el que previamente ha fallado la terapia con un anticuerpo anti-VEGF" o "fallo del tratamiento" como se usa aquí se refiere a pacientes con un tumor que no han respondido a una terapia previa con un anticuerpo anti-VEGF ("individuos que no responden") o que inicialmente respondieron a una terapia previa, pero en los que la respuesta terapéutica no era mantenida (denominados "individuos que recidivan"). Preferiblemente el término "en el que previamente ha fallado la terapia con un anticuerpo anti-VEGF" se refiere a los individuos que recidivan. El fallo del tratamiento (respectivamente respuesta (R) y no respuesta (NR) ) se establece en base al juicio médico de un facultativo mediante la comprobación de los resultados a partir de datos clínicos y de laboratorio que normalmente son conocidos en la materia para valorar el tratamiento del paciente. Tales datos pueden obtenerse, mediante por ejemplo, a partir de un examen clínico, técnicas citológicas e histológicas, endoscopia y laparoscopia , ultrasonido, escaneos de CT, PET y MRI, rayos X de tórax y mamografía, y midiendo la concentración de marcadores tumorales, como CEA, Cyfra, CA15-3, interleuquina 8 y HER2 soluble. En este contexto el "fallo de tratamiento" se define como la ausencia de mejora clínica. Alternativamente, pueden utilizarse los criterios RECIST para determinar la respuesta tumoral (Therasse P., et al., J. Nat . Cáncer Institute, 92 (2000) 205-216) . En este contexto "fallo de tratamiento" se define como una "respuesta incompleta/ enfermedad estable" o como "enfermedad progresiva". De acuerdo con estos criterios RECIST se categoriza la respuesta tumoral de los tumores sólidos (Therasse P., et al., J. Nat. Cáncer Institute, 92 (2000) 205-216) en función de la progresión o regresión del volumen de los tumores (por ejemplo analizado mediante una CT) en cuatro niveles: respuesta completa (RC) o respuesta parcial (RP) , enfermedad estable (EE) y enfermedad progresiva (EP) (véase la Tabla 1). Además, la Organización Europea para la Investigación y Tratamiento del Cáncer (EORTC) ha propuesto una categori zación en cuatro niveles en función del metabolismo de los tumores, que se mide mediante tomografia por emisión de positrones con 2-[18F]-fluoro-2-deoxiglucosa (FDG-PET) (Young H., et al., Eur. J. Cáncer, 35 (1999) 1773-1782 y Kellof G. J. , et al., Clin. Cáncer Res., 11 (2005) 2785-2808) : respuesta metabólica completa (RMC) o respuesta metabólica parcial (RMP) , enfermedad metabólica estable (EME) y enfermedad metabólica progresiva (EMP) (véase la Tabla 2). Tabla 1: Criterios para CT (de acuerdo con RECIST) Medida de CT: RECIST Cambio del sumatorio de los mayores diámetros Desaparición; confirmada a las 4 semanas (tras RC el inicio del tratamiento) Reducción del 30%; confirmada a las 4 semanas RP No se cumplen los criterios de RP ni EP EE Aumento del 20%, no RC, RP, EE documentados EP antes de la progresión de la enfermedad Tabla 2 : Criterios propuestos para FDG-PET (de acuerdo con EORTC, véase Young H. et al., Eur J Canc 35 (1999) 1773-1782) Así, preferiblemente, la "respuesta (R) " y la "no respuesta (NR) " de acuerdo con esta invención se establecen en base a los datos adquiridos mediante la combinación de tomografía computerizada (CT) y la tomografía por emisión de positrones con 2- [18F] -fluoro-2-desoxiglucosa (FDG-PET) (Kellof G. J. et al., Clin. Cáncer Res., 11 (2005) 2785- 2808, y Young H. et al., Eur. J. Canc. 35 (1999) 1773-1782) utilizando tanto los criterios RECIST como los FDG-PET descritos anteriormente. De forma concordante, la respuesta (R) y no respuesta (NR) de acuerdo con esta invención se determinan preferiblemente como sigue: Respuesta (R) : La RC o RP se establece mediante los criterios de CT-RECIST (Tabla 1) y al mismo tiempo se establece la R C o RMP mediante la FDG-PET (Tabla 2) . Asi, respuesta (RE) significa uno de los siguientes cuatro casos de combinación de las medidas de CT y PET: RC y RMC, RP y RMP, RC y RMP, y RR y RMC. No respuesta (NR) : La EE o EP se establece mediante los criterios de CT-RECIST (Tabla 1) y al mismo tiempo se establece la EME o EMP mediante la FDG-PET (Tabla 2) . Por lo tanto, los siguientes cuatro casos de combinación de las medidas de CT y PET significan no respuesta (NR) : EE y EME, EE y EMP, EP y EME, y EP y EMP. Normalmente la respuesta se determina entre alrededor de 3 y 8 semanas, preferiblemente a alrededor de 6 semanas, tras el inicio del tratamiento. Esta determinación de la respuesta se repite normalmente a intervalos de 4 a 8 semanas, preferiblemente de 6 a 8 semanas. Cuando en una primera determinación se detecta una respuesta (R) significativa, entonces puede detectarse una recidiva (lo que significa una no respuesta (NR) tras la primera determinación) tan pronto como en la segunda determinación de respuesta. En este contexto, el término "paciente en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF" se refiere a un paciente, en el que bien en una primera determinación de la respuesta se establece una no respuesta (NR) ("que no responde"), o bien en una primera determinación de la respuesta se establece una respuesta (R) , y en la segunda o en subsiguientes determinaciones de la respuesta se establece una no respuesta (NR) ("que recidiva"). El término "metástasis" de acuerdo con la invención se refiere a la transmisión de células cancerosas deDEe el tumor primario a uno o más puntos de cualquier otro lugar en un paciente, lo que causa tumores secundarios. Un tumor formado por células que se han extendido se denomina un "tumor metastásico" o una "metástasis". El tumor metastásico contiene células que son como las del tumor original (primario) . Los medios para determinar si un cáncer ha metastatizado son conocidos en la materia e incluyen las pruebas de marcadores tumorales, escaneo óseo, rayos X de tórax, tomografia computerizada (CT), tomografia axial computerizada (TAC), imagen por resonancia molecular (MRI), tomografia por emisión de positrones (PET), tomografia computerizada por emisión de fotones individuales (SPECT), imagen por fluorescencia (FI) e imagen por bioluminiscencia (BLI) y pruebas de marcadores tumorales (véase por ejemplo Helms M. W., et al., Contributions to microbiology 13 (2006) 209-231, y Pantel K., et al., J. Nat. Cáncer Inst., 91 (1999) 1113-1124). Como se utiliza aquí, el término "paciente" preferiblemente se refiere a un humano con necesidad de tratamiento para tratar el cáncer, o un estado o lesión precanceroso . Sin embargo, el término "paciente" también puede referirse a animales no humanos, preferiblemente mamíferos como- perros, gatos, caballos, vacas, cerdos, ovejas y primates no humanos, entre otros, que tienen necesidad de tratamiento.

El término "grupo" se refiere a un grupo de pacientes así como a un subgrupo de pacientes. El término "prospecto" se refiere a las instrucciones que comúnmente se incluyen en los embalajes comerciales de los productos terapéuticos, que pueden incluir información sobre las indicaciones, modo de Uso, dosis, administración, contraindicaciones y/o advertencias relacionadas con la Uso de tales productos terapéuticos. El cáncer puede ser, por ejemplo, cáncer de pulmón, cáncer de pulmón de células grandes (NSCL) , cáncer de pulmón de células broncoalveolares , cáncer óseo, cáncer pancreático, cáncer de piel, cáncer de cabeza o cuello, melanoma cutáneo o infraocular, cáncer uterino, cáncer ovárico, cáncer rectal, cáncer de la región anal, cáncer de estómago, cáncer gástrico, cáncer de colon, cáncer de mama, cáncer de útero, carcinoma de las trompas de Falopio, carcinoma de endometrio, carcinoma de cérvix, carcinoma de vagina, carcinoma de vulva, enfermedad de Hodgkin, cáncer de esófago, cáncer de intestino delgado, cáncer del sistema endocrino, cáncer de la glándula tiroidea, cáncer de la glándula paratiroidea , cáncer de la glándula adrenal, sarcoma de tejidos blandos, cáncer de uretra, cáncer de pene, cáncer de próstata, cáncer de vejiga, cáncer de riñon o uretra, carcinoma de células renales, carcinoma de pelvis renal, mesotelioma, cáncer hepatocelular , cáncer biliar, leucemia crónica o aguda, linfomas linfociticos , neoplasias del sistema nervioso central (SNC) , tumores del eje espinal, glioma del tronco encefálico, glioblastoma multiforme, astrocitomas , schwannomas, ependimomas, meduloblastomas , meningiomas, carcinomas de células escamosas, adenomas pituitarios, lo que incluye las versiones refractarias de cualquiera de los tumores anteriores, o una combinación de uno o más de los tumores anteriores. El estado o lesión precancerosa incluye, por ejemplo, el grupo que consiste en leucoplaquia oral, queratosis actinica (queratosis solar), pólipos precancerosos de colon o recto, displasia epitelial gástrica, displasia adenomatosa, síndrome del cáncer de colon sin poliposis hereditario (HNPCC) , esófago de Barrett, displasia de vejiga y estados precancerosos cervicales. En una modalidad preferida, el cáncer a tratar es la enfermedad de cáncer de mama. Además en una modalidad preferida, el cáncer se caracteriza por una sobreexpresión de la proteína del receptor de HER2. La invención comprende un método para el tratamiento de una enfermedad de cáncer de mama en un paciente en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, que comprende la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-HER2 mientras se continúa dicha terapia con el anticuerpo anti-VEGF. El término "tratar" como se usa aquí, a no ser que se indique de otro modo, significa revertir, aliviar, inhibir la progresión o prevenir, parcialmente o completamente, el crecimiento de los tumores, metástasis de los tumores u otras células causantes de cáncer o neoplásicas en un paciente. El término "tratamiento" como se usa aquí, a menos que se indique de otro modo, se refiere a la acción de tratar. La frase "un método para el tratamiento" o su equivalente, cuando se aplica a, por ejemplo, el cáncer se refiere a un procedimiento o el curso de una acción que se dirige a reducir o eliminar el número de células cancerosas en un paciente, o a aliviar los síntomas de un cáncer. "Un método para el tratamiento" del cáncer u otros trastornos proliferativos no significa necesariamente que las células cancerosas o de otros trastornos, de hecho, se eliminarán, que el número de células cancerosas o de otros trastornos, de hecho, se reducirá, o que los síntomas de cáncer o de otros trastornos, de hecho, se aliviarán. A menudo, un método para el tratamiento del cáncer se realizará incluso con una baja probabilidad de éxito, dada la historia médica y la estimación de las expectativas de supervivencia de un paciente, del cual, no obstante, se espera una progresión general beneficiosa. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" o "cantidad efectiva" significa la cantidad del compuesto o combinación sujeto que provocará la respuesta biológica o médica de un tejido, sistema, animal o humano que busca el investigador, veterinario, médico u otros clínicos. La invención también comprende la Uso de un anticuerpo anti-HER2 y un anticuerpo anti-VEGF para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de la enfermedad de cáncer de mama en un paciente en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, que comprende la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-HER2 mientras se continúa con dicha terapia con anticuerpo anti-VEGF. Los anticuerpos pueden administrarse de forma separada o simultanea. El término "método para la manufactura de un medicamento" está relacionado con la manufactura de un medicamento para su Uso en las indicaciones que se especifican aquí y en particular para su Uso en el tratamiento de tumores, metástasis tumorales o cáncer en general. El término está relacionado con el llamado formato de reivindicación de "tipo suizo" en las indicaciones especificadas. En el contexto de esta invención, pueden utilizarse otros agentes adicionales citotóxicos, quimioterapéuticos o anticancerosos, o compuestos que potencian los efectos de tales agentes en la combinación del anticuerpo anti-VEGF más el anticuerpo anti-HER2. Tales agentes incluyen, por ejemplo: agentes alquilantes o agentes con una acción alquilante, como la ciclofosfamida (CTX; por ejemplo cytoxan®) , clorambucil (CHL; por ejemplo leukeran®) , cis-platino (CisP; por ejemplo platinol®) busulfan (por ejemplo myleran®) , melfalan, carmustina (BCNU) , estreptozotocina , trietilenmelamina (TEM) , mitomicina C, y similares; anti-metabolitos , como el metotrexato (MTX) , etopósido (VP16; por ejemplo vepesid®) , 6-mercaptopurina (6MP), 6-tioguanina (6TG), citarabina (Ara-C) , 5-fluorouracilo (5-FU), capecitabina (por ejemplo Xeloda®) , dacarbazina (DTIC), y similares; antibióticos, como la actinomicina D, doxorubicina (DXR; por ejemplo adriamycin®) , daunorubicina (daunomicina) , bleomicina, mitramicina y similares; alcaloides, como los alcaloides de la vinca como la vincristina (VCR) , vinblastina, y similares; y otros agentes antitumorales , como el paclitaxel (por ejemplo taxol®) y derivados del pactitaxel, agentes citostáticos , glucocorticoides como la dexametasona (DEX; por ejemplo decadron®) y corticosteroides como la prednisona, inhibidores de enzimas nucleósidos como la hidroxiurea, enzimas que eliminan aminoácidos como la asparaginasa , leucovorina y otros derivados del ácido fólico, y diferentes agentes antitumorales parecidos. Los siguientes agentes también pueden utilizarse como agentes adicionales: arnifostina (por ejemplo ethyol®) , dactinomicina, mecloretamina (mostaza nitrogenada) , estreptozocina, ciclofosfamida , lomustina (CCNU) , doxorubicina liposoraal (por ejemplo doxil®) , gemcitabina (por ejemplo gemzar®) , daunorrubicina liposomal (por ejemplo daunoxome©) , procarbazina, mitomicina, docetaxel (por ejemplo taxotere®) , aldesleuquina, carboplatino, oxaliplatino, cladribina, camptotecina, CPT 11 (irinotecan) , 10-hidroxi-7 -etil-camptotecina (SN38), floxuridina, fludarabina, ifosfamida, idarrubicina , mesna, interferón beta, interferón alfa, mitoxantrona , topotecan, leuprolida, megestrol, melfalan, mercaptopurina, plicamicina, mitotane, pegaspargasa , pentostatina , pipobroman, plicamicina, tamoxifen, tenipósido, testolactona , tioguanina, tiotepa, mostaza de uracilo, vinorelbina, clorambucil. En el contexto de esta invención, puede utilizarse un agente antihormonal en la combinación de anticuerpo anti-VEGF más anticuerpo anti-HER2. Como se usa aquí, el término "agente antihormonal" incluye compuestos naturales o sintéticos orgánicos o peptidicos que actúan en la regulación o inhibición de la acción hormonal en los tumores. Los agentes antihormonales incluyen, por ejemplo: los antagonistas del receptor de esteroides, antiestrógenos como el tamoxifen, raloxifen, 4 ( 5 ) -imidazoles inhibidores de la aromatasa, otros inhibidores de la aromatasa, 42-hidroxitamoxifeno, trioxifeno, keoxifeno, LY 117018, onapristona y toremifeno (por ejemplo Fareston®) ; antiandrógenos como la flutamida, nilutamida, bicalutamida , leuprolida y goserelina; y las sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriores; agonistas y/o antagonistas de hormonas glicoproteicas como la hormona estimuladora del folículo (FSH), hormona estimuladora de la tiroides (TSH) , la hormona luteinizante (LH) y la LHRH (hormona liberadora de la hormona luteinizante) ; el agonista de la LHRH acetato de goserelina, comercialmente disponible como Zoladex® (AstraZeneca) ; el antagonista de la LHRH D-alaninamida de N-acetil-3- (2-naftalenil) -D-alanil- -cloro-D-fenilalanil-3- ( 3-piridinil ) -D-alanil-L-seril-N6- ( 3-piridinilcarbonil ) -L-lisil-N6- (3-piridinilcarbonil ) -D-lisil-L-leucil-N6- ( 1-metiletil ) -L-lisil-L-prolina (por ejemplo Antide®, Ares-Serono) ; el antagonista de la LHRH acetato de ganirelix; los esteroides antiandrógenos acetato de ciproterona (CPA) y acetato de megestrol, comercialmente disponible como Megace® (Bristol-Myers Oncology) ; el antiandrógeno no esteroideo flutamida (2-metil-N-[4,20-nitro-3- (trifluorometil) -fenilpropanamida ) , comercialmente disponible como Eulexin® (Schering Corp.); el antiandrógeno no esteroideo nilutamida ( 5 , 5-dimetil-3- [ 4 -nitro-3- ( trifluorometil-4 ' -nitrofenil) -4, 4-dimetil-imidazolidin-diona ) ; y antagonistas de otros receptores no permisivos, como los antagonistas del RAR (receptor del ácido retinoico) , RXR (receptor X retinoico) , TR (receptor tiroideo), VDR (receptor de la vitamina-D) , y similares. La Uso de agentes citotóxicos y otros agentes anticancerosos descritos anteriormente en los regímenes quimioterapéuticos está generalmente bien caracterizada en la materia de la terapia del cáncer, y su Uso aquí sigue las mismas consideraciones en cuanto a la monitorización de la tolerancia y la efectividad, y el control de las vías de administración y dosis, con algunos ajustes. Por ejemplo, las dosis reales de los agentes citotóxicos pueden variar dependiendo de la respuesta de células cultivadas del paciente que se determina mediante métodos de cultivo histológico. Generalmente, la dosis se reducirá comparado con la cantidad utilizada en ausencia de otros agentes adicionales. La dosificación típica de un agente citotóxico efectivo oscila en los rangos recomendados por el fabricante, y si está indicado por las respuestas in vitro o las respuestas en modelos animales, puede reducirse la concentración o cantidad en hasta un orden de magnitud. Por lo tanto, la dosis real dependerá de la opinión del médico, el estado del paciente y la efectividad del método terapéutico en base a la respuesta in vitro de las células malignas en un cultivo primario o una muestra de cultivo histológico, o las respuestas observadas en los modelos animales apropiados. En el contexto de esta invención, pueden utilizarse agentes antiproliferativos adicionales en la combinación de anticuerpo anti-VEGF más anticuerpo anti-HER2, lo que incluye, por ejemplo: inhibidores de la enzima farnesil protein- transferasa e inhibidores del receptor tirosin-quinasa PDGFR, lo que incluye los compuestos descritos y reivindicados en las patentes estadounidenses U.S. N° 6.080.769, 6.194.438, 6.258.824, 6.586.447, 6.071.935, 6.495.564, 6.150.377, 6.596.735 y 6.479.513, y la publicación internacional WO 01/40217. En el contexto de esta invención, puede efectuarse una cantidad efectiva de radiación ionizante y/o puede utilizarse un radiofármaco además de la combinación de anticuerpo anti-VEGF más el anticuerpo anti-HER2. La fuente de radiación puede ser externa o interna al paciente a tratar. Cuando la fuente es externa al paciente, la terapia se conoce como terapia de radiación de haz externo (EBRT). Cuando la fuente de radiación es interna al paciente, el tratamiento se denomina braquiterapia (BT) . Los átomos radioactivos para su Uso en el contexto de esta invención pueden seleccionarse de entre el grupo que incluye, pero no se limita a, radio, cesio-137, iridio-192, americio-2 1 , oro-198, cobalto-57, cobre-67, tecnecio-99, yodo-123, yodo-131 e indio-111. Si el inhibidor del EGFR quinasa de acuerdo con esta invención es un anticuerpo, también es posible marcar el anticuerpo con tales isótopos radioactivos. La terapia de radiación es un tratamiento estándar para el control de tumores que no pueden extraerse u operarse y/o las metástasis tumorales. Cuando la terapia de radiación se combina con quimioterapia se observa una mejora de los resultados. La terapia de radiación se basa en el principio de que la radiación en altas dosis liberada en un área diana resultará en la muerte de las células reproductivas tanto en el tumor como en los tejidos normales. El régimen de dosis de radiación se define generalmente en términos de dosis absorbida de radiación (Gy) , tiempo y fraccionamiento, y debe estar cuidadosamente definido por el oncólogo. La cantidad de radiación que recibe un paciente dependerá de varias consideraciones, pero las dos más importantes son la localización del tumor en relación con otras estructuras u órganos críticos del cuerpo, y el área a la que el tumor se ha extendido. El curso típico de tratamiento para un paciente sometido a terapia de radiación será una pauta de tratamiento durante un periodo de entre 1 y 6 semanas, con una dosis total de entre 10 y 80 Gy administrados al paciente en una única fracción diaria de alrededor de entre 1.8 y 2.0 Gy, 5 días por semana. En una modalidad preferida de esta invención, existe sinergia cuando los tumores en pacientes humanos se tratan con el tratamiento de combinación de la invención y la radiación. En otras palabras, la inhibición del crecimiento del tumor a través de los agentes que comprende la combinación de la invención se potencia cuando se combina con la radiación, opcionalmente con agentes adicionales quimioterapéuticos o anticancerosos. Los parámetros de las terapias adyuvantes de radiación están, por ejemplo, contenidos en la publicación internacional WO 99/60023. Los anticuerpos se administran a un paciente de acuerdo con los métodos conocidos, mediante administración intravenosa como un bolo o mediante infusión continua durante un periodo de tiempo, o mediante la vía intramuscular, intraperitoneal , intracerebroespinal , subcutánea, intraarticula , intrasinuvial o intratecal. La administración intravenosa o subcutánea de los anticuerpos es preferible. La cantidad administrada de anticuerpos anti-VEGF y anti- HER2, y la pauta temporal de administración dependerá del tipo (especie, género, edad, peso, etc.) y del estado del paciente a tratar, y de la gravedad de la enfermedad o estado a tratar. Las dosis para la administración de los anticuerpos de acuerdo con la invención son de entre alrededor de 1 g/kg y 50 mg/kg (por ejemplo 0.1-20 mg/kg) de anticuerpo mediante una o más administraciones separadas, o mediante infusión continua. Una dosis diaria típica puede oscilar entre alrededor de 1 yg/kg y alrededor de 100 mg/kg. En un aspecto preferido, los anticuerpos se administran cada dos o tres semanas, en un rango de dosis de alrededor de 1 mg/kg a alrededor de 15 mg/kg. Una dosis preferible de bevacizumab es 5 mg/kg una vez cada 14 días como una infusión IV hasta que se detecta progresión de la enfermedad. Una dosis preferible de trastuzumab es una dosis inicial de 4 mg/kg administrada durante un periodo de 90 minutos e infusiones subsiguientes semanales de 2 mg/kg administradas durante un periodo de 30 minutos . La presente invención también proporciona un equipo que comprende un anticuerpo anti-VEGF y un prospecto con las instrucciones para el usuario de la composición para la administración del anticuerpo anti-VEGF y el anticuerpo anti-HER2 a un paciente con la enfermedad de cáncer de mama en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF. En una modalidad preferida, los contenedores del equipo también pueden incluir un transportador farmacéuticamente aceptable. El equipo también puede incluir un diluyente estéril, que se almacena preferiblemente en un contenedor adicional separado. El equipo puede incluir además un prospecto que comprende las instrucciones impresas exponiendo la Uso del tratamiento combinado como un método para la enfermedad del cáncer de mama. La presente invención proporciona además una composición farmacéutica que comprende un anticuerpo anti-HER2 y un anticuerpo anti-VEGF, en particular para su Uso en el tratamiento de la enfermedad de cáncer de mama en la que previamente ha fallado una terapia con anticuerpo anti-VEGF. Tal composición comprende opcionalmente transportadores farmacéuticamente aceptables y/o excipientes. En una modalidad preferida, el anticuerpo anti-VEGF es bevacizumab y el anticuerpo anti-HER2 es trastuzumab. Los siguientes detalles experimentales se proporcionan para un mejor entendimiento de la presente invención, cuyo verdadero alcance se define en las reivindicaciones anexas. Se entenderá que los métodos específicos y los resultados que se discuten son meramente ilustrativos de la invención y no deben considerarse en modo alguno como limitantes. Introducción El estudio actual examina la actividad antitumoral de la combinación de bevacizumab y trastuzumab tras el fallo del tratamiento con sólo bevacizumab en un modelo de injerto heterólogo de mama humano. Otro objetivo del estudio fue examinar los efectos del tratamiento sobre la metástasis. Agentes de prueba Se proporcionó trastuzumab como una solución de partida de 25 mg/ml en Histidina-HCl , alfa-alfa trehalosa (60 mM) , Polysorb al 0.01%, pH 6.0 (Herceptin®) . Se proporcionó bevacizumab como una solución de partida de 25 mg/ml en fosfato' sódico, alfa-alfa Trehalosa (60 mM) , Polysorb al 0.01%, pH 6.0 (Avastin®) . Ambas soluciones se diluyeron de forma apropiada en PBS para las inyecciones. Lineas celulares y condiciones de cultivo La línea celular de cáncer de mama humano KPL-4 se ha establecido a partir de una efusión pleural maligna de un paciente de cáncer de mama con una metástasis inflamatoria en piel y que sobreexpresa los receptores de la familia ErbB (Kurebayashi J. , et al., Br. J. Cáncer, 79 (1999) 707-17). Las células tumorales se cultivan de forma rutinaria en medio DMEM (PAA Laboratories, Austria) suplementado con suero fetal bovino al 10% (PAA) y L-glutamina 2 mM (Gibco) a 37°C en atmósfera saturada en agua al 5% de C02. El pasaje del cultivo se realizó con tripsina/ EDTA lx (PAA) resembrando dos veces por semana. El pasaje de las células P6 se utilizó para el estudio in vivo. Animales Ratones beige SCID (C.B.-17); edad de 10-12 semanas; peso corporal de 18-20 g (Charles River, Sulzfeld, Alemania) se mantuvieron bajo condiciones libres de patógenos específicos con ciclos diarios de 12 h de luz/ 12 h de oscuridad de acuerdo con las directrices internacionales (GV-Solas; Felasa; TierschG) . Tras su llegada, los animales se alojaron en la parte en cuarentena de las instalaciones del estabularlo durante una semana para que se acostumbraran al nuevo ambiente y para su observación. Se realizó una monitorización continua de salud de forma regular. La alimentación (Alltromin) y el agua (acidificada a pH 2.5-3) se proporcionaron a voluntad. Estudios de inhibición del crecimiento tumoral in vivo Las células tumorales se recogieron ( tripsina-EDTA) de los frascos de cultivo (Greiner TriFlask) y se transfirieron a 50 mi de medio de cultivo, se lavaron una vez y se resuspendieron en PBS . Tras un paso de lavado adicional con PBS y una filtración (Cell strainer, Falcon, de ???µ??) , el titulo final de células se ajustó a 0.75 x 108/ mi. La suspensión de células tumorales se mezcló cuidadosamente con una pipeta de transferencia para evitar la agregación celular. La anestesia se realizó utilizando una unidad de inhalación Stephens para animales pequeños con una cámara de preincubación (plexiglás), una máscara nasal para cada ratón individual (silicona) e isoflurano ( Pharmacia-Up ohn , Alemania) en un sistema de circulación cerrado. Dos días antes de la inyección el pelaje de los animales se rasuró. Para la inyección intra mamaria en el panículo adiposo (i.f.m.p.), las células se inyectaron por vía ortotópica con un volumen de 20 µ? en el panículo adiposo mamario inguinal penúltimo derecho de cada ratón anestesiado. Para la implantación ortotópica, la suspensión celular se inyectó a través de la piel bajo el pezón. La inyección de células tumorales corresponde al día 1 del experimento. Monitorización Los animales se controlaron diariamente para la detección de los síntomas clínicos de los efectos adversos. Para la monitori zación a lo largo del experimento, el peso corporal de los animales se documentó dos veces a la semana y el volumen tumoral se midió mediante un calibrador dos veces en semana. El volumen tumoral primario se calculó de acuerdo con el protocolo NCI (T = l/2ab2, en la que a y b son los diámetros mayor y menor del tamaño del tumor en mm, Teicher B., Anticancer drug development guide, Humana Press 5 (1997) 92). El cálculo de los valores se documentó como la media y la desviación estándar. Tratamiento de los animales Los ratones que presentaron tumores se aleatori zaron cuando el volumen del tumor era aproximadamente de 100 mm3 (n=10 para cada grupo) . Cada grupo se seleccionó por una elevada similitud antes del tratamiento, que se inició 20 días tras la inyección de células tumorales. El grupo vehículo (grupo 1) recibió 10 ml/kg de tampón PBS por vía intraperitoneal (i.p.) una vez por semana. El trastuzumab (grupo 2) se administró por vía i.p. a una dosis inicial de 30 mg/kg, seguido de una dosis de 15 mg/kg una vez por semana (dosis de mantenimiento) . El anticuerpo anti-VEGF bevacizumab se administró por vía i.p. a una dosis de 5 mg/kg dos veces a la semana (grupo 3) . En el día 40, el tratamiento del grupo 3 se cambió al tratamiento de combinación de bevacizumab (5 mg/kg dos veces a la semana por vía i.p.) con trastuzumab (15 mg/kg una vez a la semana por vía i.p. ) . Evaluación de la metástasis La expansión de células tumorales al pulmón se determinó en los animales sacrificados. Las metástasis se midieron de acuerdo con Schneider T., et al., Clin. Exp . Metástasis, 19 (2002) 571-582. Brevemente, se recogió el tejido del pulmón y se cuantificaron las secuencias Alu humanas mediante una PCR a tiempo real. Niveles superiores de DNA humano, cuantificados mediante una PCR a tiempo real, corresponden con niveles superiores de metástasis. Resultados El efecto del tratamiento sobre el crecimiento de tumores primarios se muestra en la Figura 1 y la Tabla 3. Los tumores crecieron rápidamente en el grupo vehículo (grupo 1) y los ratones se sacrificaron 38 días tras la inyección de células tumorales a causa de la ulceración de los tumores y del desarrollo de síntomas clínicos. La monoterapia con trastuzumab (grupo 2) no ejerció un efecto significativo sobre el volumen del tumor y por lo tanto los ratones se sacrificaron en el día 44. El tratamiento con bevacizumab suprimió el crecimiento tumoral significativamente; sin embargo, los tumores empezaron a crecer de nuevo alrededor del día 44. El tratamiento de combinación de bevacizumab y trastuzumab iniciado en el día 55 resultó en una inhibición completa del crecimiento del tumor durante la duración del experimento (día 99) y el tratamiento se toleró bien.

Tabla 3 : Actividad antitumoral del tratamiento combinado de trastuzumab y bevacizumab sobre el crecimiento del tumor tras un fallo del tratamiento con bevacizumab (datos de la figura 1) . Se proporciona la media del volumen del tumor en mm3 y la desviación estándar (DE) .

Dia VehíDE Trastuzumab DE Trastuzumab + DE culo Bevacizumab 118 31 120 31 119 35 23 150 30 157 57 126 44 27 209 51 164 77 143 67 30 269 76 169 82 138 65 34 348 114 214 114 167 76 37 431 138 293 162 181 78 42 462 275 172 63 44 547 315 211 65 48 226 68 51 266 78 55 324 103 58 318 100 62 248 81 65 232 75 70 209 69 73 224 56 79 213 68 83 173 57 86 178 80 90 150 73 93 141 74 97 134 67 99 130 76 El efecto del tratamiento sobre las metástasis de pulmón se muestra en la Figura 2 y la Tabla 4. La combinación de trastuzumab y bevacizumab tras el fallo del tratamiento con bevacizumab resultó en una pronunciada reducción de la metástasis. Los niveles de secuencias Alu humanas (que correlacionan con la invasión de las células tumorales en el tejido secundario) son significativamente inferiores en animales tratados con una terapia de combinación de 99 días frente a los animales tratados con vehículo que se sacrificaron a los 28 días y frente a los animales tratados con trastuzumab sacrificados en el día 44. Este sorprendente efecto sobre la metástasis contrasta con el efecto observado con otros fármacos citotóxicos (Geldof A. A., et al., Anticancer Res., 8 (1988) 1335-1339; Murphy J., Clin. Oncol. , 11 (1993) 199-201, y De Larco J. E . , et al . , Cáncer Res. 61 (2001) 2857-2861) Tabla 4 : Efecto del tratamiento sobre las metástasis pulmón . El DNA Alu se cuantificó mediante PCR a tiempo real se proporciona para cada animal .

Significación estadistica del tratamiento de combinación *p = 0.001 **p = <0.001 Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (18)

1. Reivindicaciones Habiéndose descrito la invención como antecede se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Uso de un anticuerpo anti-HER2 y un anticuerpo anti-VEGF para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de la enfermedad de cáncer de mama en un paciente en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, que comprende la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-HER2 y un anticuerpo anti-VEGF.
2. 2. Uso de conformidad con la reivindicación 1, en donde el anticuerpo anti-VEGF utilizado en el medicamento es el bevacizumab.
3. 3. Uso de conformidad con las reivindicaciones 1 o 2, en donde el paciente es humano.
4. 4. Uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde el anticuerpo anti-HER2 es el trastuzumab.
5. 5. Uso de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la enfermedad de cáncer de mama se caracteriza por una sobreexpres ión de la proteina del receptor de HER2.
6. 6. Método para el tratamiento de la enfermedad de cáncer de mama en un paciente en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF, caracterizado porque comprende la administración al paciente de una cantidad terapéuticamente efectiva de un anticuerpo anti-HER2 y un anticuerpo anti-VEGF.
7. 7. Método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el anticuerpo anti-VEGF es el bevaci zumab .
8. 8. Método de conformidad con las reivindicaciones 7 u 8, caracterizado porque el paciente es humano.
9. 9. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, caracterizado porque el anticuerpo anti-HER2 es el trastuzumab.
10. 10. Método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9, caracterizado porque la enfermedad de cáncer de mama se caracteriza por una sobreexpresión de la proteína del receptor de HER2.
11. 11. Artículo de manufactura caracterizado porque comprende un contenedor, una composición dentro del contenedor que comprende un anticuerpo anti-VEGF, y un prospecto con las instrucciones para el usuario de la composición para la administración de un anticuerpo anti-VEGF y un anticuerpo anti-HER2, a un paciente con enfermedad de cáncer de mama en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF .
12. 12. Articulo de manufactura de conformidad con la reivindicación 11, caracte izado porque el anticuerpo anti-VEGF es el bevacizumab.
13. 13. Articulo de manufactura de conformidad con la reivindicación 11 o 12, caracterizado porque el anticuerpo anti-HER2 es el trastuzumab.
14. 14. Articulo de manufactura caracterizado porque comprende un contenedor, una composición dentro del contenedor que comprende un anticuerpo anti-HER2, y un prospecto con las instrucciones para el usuario de la composición para la administración de un anticuerpo anti-VEGF y un anticuerpo anti-HER2, a un paciente con enfermedad de cáncer de mama en el cual previamente ha fallado una terapia con un anticuerpo anti-VEGF.
15. 15. Articulo de manufactura de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el anticuerpo anti-VEGF es el bevacizumab.
16. 16. Articulo de manufactura de conformidad con las reivindicaciones 14 o 15, caracterizado porque el anticuerpo anti-HER2 es el trastuzumab.
17. 17. Composición farmacéutica caracterizada porque comprende un anticuerpo anti-HER2 y un anticuerpo anti-VEGF útil en el tratamiento de la enfermedad de cáncer de mama habiendo fallado previamente la terapia con un anticuerpo anti-VEGF.
18. 18. Composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 17, caracterizada porque el anticuerpo anti-VEGF es el bevacizumab y el anticuerpo anti-HER2 es el trastuzumab.