MX2008012066A

MX2008012066A - Extractos y metodos que comprenden especies de ganoderma.

Info

Publication number: MX2008012066A
Application number: MX2008012066A
Authority: MX
Inventors: Robert T Gow; George W Sypert; Dan Li; Randall S Alberte
Original assignee: Herbalscience Singapore Pte Ltd
Priority date: 2006-03-23
Filing date: 2007-03-23
Publication date: 2008-10-07
Also published as: KR20090018886A; IL193832A0; CN101410129A; AU2007227383A1; EP2012808A2; BRPI0708825A2; WO2007109801A3; JP2009531330A; WO2007109801A2; US20080112966A1; CA2643785A1; EP2012808A4

Abstract

La presente invención se refiere a extractos de material de planta de especies de ganoderma, preparados por extracciones de CO2 suprecrítico.

Description

EXTRACTOS Y MÉTODOS QUE COMPRENDEN ESPECIES DE GANODERMA CAMPO DE LA INVENCIÓN La invención se refiere a extractos de especies de ganoderma, métodos para prepararlos usando etapas de extracción secuencial, y métodos de tratamiento de los mismos .

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los hongos son considerados una clase especial de alimento, particularmente un "alimento exquisito", debido a su textura única y sabor. Sin embargo, no fue sino hasta los años 1900, cuando los antibióticos fueron obtenidos del moho, Penicilina, que el valor medicinal potencial de los hongos atrajo a la comunidad científica occidental. Se ha mostrado que las propiedades químicas, biológicas y bioquímicas de los constituyentes químicos de los cuerpos de frutos de hongos, son numerosas con muchos beneficios médicos y fisiológicos. Los hongos Basidiomycetes superiores, han sido usados como medicinas herbales alrededor del mundo por cientos de años, particularmente en Asia . Las especies de ganoderma, particularmente G. lucidum ("Lingzhi" en China y "Reishi" o "Mannentake" en Japón) y G. tsuage, han sido ampliamente usadas para promover la salud y longevidad en China, Japón y otros países Asiáticos. Entre los hongos cultivados, las especies de ganoderma son únicas en que el valor farmacéutico en lugar del nutricional, es primordial. Una amplia variedad de productos de G. lucidum están disponibles en varias formas, tales como, polvos, suplementos de dieta y bebidas. Estos productos son producidos a partir de diferentes partes de los hongos, que incluyen micelios, cuerpos de frutos, y esporas. Sin embargo, el contenido constituyente químico de estos productos es sospechoso debido a la gran variación en los constituyentes químicos del material de materia prima de especies de ganoderma. Como muchos constituyentes botánicos, el químico en el material de planta es dependiente de numerosas variables que incluyen sentido genético, métodos de cultivación, temperatura, pH, humedad, medio de crecimiento, sustratos usados, por listar algunas de las variables. Las especies de ganoderma, familia ganodermataceae , son hongos basidiomicetos poliporos que tienen un basidiosporo de doble pared. En total, 219 especies dentro de la familia han sido asignadas al género ganoderma del cual, G. lucidum es el tipo de especie. Debido a la alta plasticidad fenotípica, las características morfológicas para sistemática de ganoderma se piensan son de valor limitado en la identificación de especies de ganoderma para extracción de materia prima del producto. Más recientemente, procedimientos bioquímicos (constituyentes de triterpeno) , genéticos (estudios de apareamiento) , y moleculares (polimorfismos de ADNr) , han sido usados en toxinomia de ganoderma. Aunque la medicina China tradicional (TCM) es usada por su valor medicinal putativo, la TCM es considerada como un nutricéutico y está categorizada como un suplemento nutricional o de dieta en los Estados Unidos, como se define por el Acta de Educación sobre Salud y Suplementos De Dieta (DSHEA) . Uno de los cuestionamientos centrales para cualquier terapia es la dosis efectiva que produce una acción terapéutica deseada sin efectos secundarios adversos. Las especies de ganoderma han sido usadas como un hongo medicinal por más de 2000 años. Sin embargo, no existe acuerdo sobre formulaciones estándares, composiciones constituyentes químicas, o lineamientos que pertenecen a su dosificación, composición química y formulación. Las dosis recomendadas varían desde 0.5 gm hasta 30 mg de extractos comerciales secos de cuerpo de fruto de G. lucidium por día. No ha habido toxicidad significante reportada aún con niveles muy altos de consumo humano. Se han reportado comezón de piel y molestias digestivas ligeras ocasionales en individuos sensibles. La dosis tóxica (TD) y la dosis letal (LD) son muy altas con dosificaciones tan altas como 5 g/kg de administración a ratones por 30 días y 38 g/kg inyectadas como una dosis intra-peritoneal única en animales de laboratorio, son bien toleradas. Por lo tanto, los productos de extracción de especies de ganoderma no poseen limitaciones significantes para el empleo clínico. De importancia es la determinación de la dosis de validación y efectiva (ED) y confirmación científica de beneficios de salud de constituyentes químicos de especies de ganoderma. Como la mayoría de los hongos, las especies de ganoderma están compuestas de aproximadamente 90% de agua en peso. Basados en la literatura científica, un sumario de los constituyentes químicos de G. lucidum en porcentaje en peso de masa seca, se listan en las Tablas 1 y 2. Una de las características de los cuerpos de frutos de G. lucidum es su amargura que varía en grado dependiendo de la cepa, método de cultivo, edad y una variedad de otros factores. Los constituyentes químicos que transportan esta amargura son los triterpenos y han sido usados como un marcador para evaluación farmacológica de los productos de extracción. Los dos constituyentes químicos médicamente y fisiológicamente activos conocidos principales de especies de ganoderma son los triterpenos y los polisacáridos .

Tabla 1. Constituyentes químicos de G. lucidum basados en la literatura.

Bio-activos* principales % en peso seco Compuestos químicos de aceite esencial/volátil 2-8% Terpenoides* Triterpenos* (T) (>100 triterpenoides tipo lanostano altamente oxigenados) Ácidos Ganodéricos (GA) A,B,C,C1,C2,D....T Ácidos lucidénicos (LA) A,B, C, C2, D, Di, K, E, El, F, G,H, I, J, K Ácidos ganolucídicos (GLA) C,D Ganoderioles (G) Lucidona (LC) A, D Lucidumoles (LCM) A, B Ganodermenonol (G) Ganodermadiol (GD) Ganodermatriol (GT) Ganodermanondiol (GDD) Ganodermanonontriol (GDT) Esteroides Vitaminas Fenoles Nucleótidos Proteínas (Pr) 7-8% Glicoproteínas Carbohidratos 26-28% Polisacáridos * ( P) (heteropolímeros-glucosa, xilosa, mañosa, galactosa, fucosa, etc.) ( ß-D-glucanos , particularmente ß-(1—>3)- D-glucanos ) Ganoderanos, A,B Y C Fibra 32-59% Ceniza 8-10% Minerales 8-10% Germanio (Ge) (489 ug/g) Tabla 2. Composición química de materia prima de cuerpo fruto de ganoderma lucidum usada en la presente invención *E1 aceite volátil fue estimado por rendimiento más alto de extracción de C02 a 70C y 500 bar. Los triterpenoide se estimaron por extracción máxima de metanol. El polisacárido y proteína se estimaron por extracto de agua. Los terpenos son una clase de compuestos que se originan naturalmente. Sus esqueletos de carbono están compuestos de unidades de isopreno C5. Muchos son alquenos pero muchos contienen otros grupos funcionales, y muchos son cíclicos. Algunos de los terpenos botánicos se han encontrado por poseer propiedades tales como antiinflamatorias, anti-cancerígenas , hipolipidémicas y otras actividades que promueven la salud. Los triterpenos son una sub-clase de los terpenos y tienen un esqueleto básico de C30. En las especies de ganoderma, la estructura química de los triterpenos se basa en un lanostano, un metabolito de lanosterol, la biosíntesis del cual se basa en ciclización de escualeno. La extracción de los triterpenos a partir de especies de ganoderma es en general, por extracción de solvente usando metanol, etanol, acetona, cloroformo, éter, o una mezcla de estos solventes. Más de 100 triterpenos con composición química conocida y configuración molecular, han sido reportador por ocurrir en especies de ganoderma. Entre estos, la mayoría se encuentra por ser única a especies de ganoderma. La gran mayoría de los triterpenos de ganoderma son ácidos ganodéricos y lucidénicos, pero otros triterpenos, tales como ácidos ganoderales, ganoderioles y ganodéricos, también han sido identificados. Polisacáridos botánicos a partir de una variedad de plantas, han sido reportados por poseer mejoramiento inmune, efectos anti-inflamatorios , anti-úlcera, antivirales y anti-cancerígenos . Las especies de ganoderma son remarcables para producir una variedad de polisacáridos de peso molecular alto. Estos poliglicanos se encuentran en todas las partes de los hongos, así como también en todas las etapas de desarrollo. Los polisacáridos de especies de ganoderma han sido extraídos del cuerpo de fruto, micelios y esporas. Sin embargo, los exo-polisacáridos son producidos por micelios que crecen en termentadores. La glucosa es el principal azúcar en polisacáridos de especies de ganodermas. Las especies de ganodermas sin embargo, son heteropolímeros que también contienen xilosa, mañosa y fucosa en diferentes configuraciones, que incluyen polisacáridos alfa-D (o L) , 1-3, 1-4, 1-6-beta ligados. Los polisacáridos son usualmente extraídos con agua caliente, seguido por precipitación con alcohol. También pueden ser extraídos con agua caliente y álcalis. Las etapas de purificación complejas resultan en compuestos polisacáridos purificados, tales como el polímero de glucosa (98% de glucosa) . Los compuestos polisacáridos que han sido aislados y parcialmente caracterizados a partir de especies de ganoderma incluyen, los Ganoderanos A, B, y C. Más recientemente, otros compuestos polisacáridos de especies de ganoderma han sido aislados. Algunos de estos compuestos polisacáridos han sido mostrados por tener actividades estimulantes y anti-cancerígenas inmunológicas significantes . Proteínas de especies de ganoderma, las cuales están en cantidades inferiores que otros hongos, también han sido reportadas por contribuir a la actividad medicinal de los constituyentes químicos de las especies de ganoderma. Por ejemplo, proteínas de especies de ganoderma pueden exhibir actividad inmunosupresiva . En la mayoría de los botánicos medicinalmente valiosos, los constituyentes químicos de aceite esencial y aceite volátil, hacen contribuciones principales a la bioactividad de los constituyentes químicos de la planta. Sin embargo, los constituyentes químicos de Ganoderma parecen haber sido ignorados en la literatura científica. La combinación de beneficios de salud putativos sin toxicidad, hacen a especies de ganoderma constituyentes químicos deseables para el desarrollo de extracciones terapéuticas efectivas. Aunque extractos de especies de ganoderma han sido usadas por cientos de años como un tratamiento para varias dolencias, es solamente en años recientes que estudios científicos objetivos de extractos de especies de ganoderma y constituyentes químicos han sido realizados. Para resumir brevemente los beneficios terapéuticos de los constituyentes químicos de especies de ganoderma, estudios clínicos y de laboratorio científico recientes, han demostrado los siguientes efectos terapéuticos de varios compuestos químicos, fracciones químicas y productos brutos de extracción de especies de ganoderma, particularmente G. lucidum, que incluyen los siguientes: intensificación inmune (P, Pr, extracto de agua para abreviatura véase la Tabla 1) [1-4]: inmuno-supresión, rechazo anti-transplante , trastornos inmunes (Pr) [5,6]: anti-inflamatorio, anti-artritis , anti-reumatoide, antilupus eritematosis , anti-alergia (T, GA, extracto de acetato de etilo, extracto de alcohol, extracto de agua) [7-10] ; anti-oxidante (T, P-T+P actúa sinergísticamente, extracto de solvente orgánico, extracto de agua) [9,11,12]; anti-agregación de plaquetas (GA, extracto soluble en agua) [13,14]; hipoglicémico, anti-diabético ( P-Ganoderanos , A, B, y C, extracto) [9,15]; ant i-hipertensivo (extracto insoluble en etanol-soluble en agua, extracto crudo) [16,17]; anti-hipercolesterolemia ( triterpenos , extracto crudo) [18]; prevención de enfermedades cardiovasculares (T, P, extracto crudo) [5-18] ; hepatoprotección (T, GA, P, agua y extractos de agua-éter) [19,20]; terapia anti-viral, anti-herpes simple, anti-VIH, anti-herpes zoster, antihepatitis B (polisacáridos unidos a la proteina P, T, extractos solubles en agua y alcohol) [21-24]; actividad anti-bacteriana (T, P, extractos de alcohol y agua) [9,25]M y prevención de cáncer y tratamiento (P, T, agua caliente y extracto de alcohol) [9,26-28]. Lo que se necesitan son nuevos y reproducibles extractos de ganoderma que combinen con el aceite esencial purificado, triterpeno, proteina y los constituyentes químicos de polisacáridos que pueden ser producidos con cantidades estandarizadas y confiables de estos constituyentes químicos de especies de ganoderma fisiológicamente y médicamente benéficas y que actúan sinergísticamente .

SUMARIO DE LA INVENCIÓN En un aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especie de ganoderma que comprende, una fracción que tiene un cromatograma de espectrometría de Análisis Directo en Tiempo Real (DART) de cualquiera de las Figuras 6 a 29. En una modalidad adicional, el extracto comprende un compuesto seleccionado del grupo que consiste de un aceite esencial, un triterpeno, un polisacárido y combinaciones de los mismos. En una modalidad adicional, el aceite esencial se selecciona del grupo que consiste de ácido 9,12-octadecadienoico, ácido linoelaidico, ácido n-hexadecanoico, ácido octanoico, ácido tetradecanoico, ácido pentadecanoico, ácido 9-octadecenoico, ácido octadecanoico, ácido 2-propenoico, trideciléster , 1-undecanol, 1-dodecanol, 1-tetradecanol , 1-hexadecanol , 1-heptadecanol , 1-eicosanol, y combinaciones de los mismos. En una modalidad adicional, la cantidad de aceite esencial es mayor de 8% en peso. En una modalidad adicional, la cantidad de aceite esencial es desde 25% hasta 90% en peso. En una modalidad adicional, la cantidad de aceite esencial es desde 50% hasta 90% en peso. En una modalidad adicional, la cantidad de aceite esencial es de 75% hasta 90% en peso. En una modalidad adicional, el triterpeno es seleccionado del grupo que consiste de ácido ganodérico, ácido lucidénico, ácido ganolucidico, ganoderiol, lucidona, lucidumol, ganodermenonol , ganodermadiol , ganodermatriol , ganodermanondiol , ganodermanontriol , y combinaciones de los mismos. En una modalidad adicional, la cantidad de triterpeno es mayor de 2% en peso. En una modalidad adicional, la cantidad de triterpeno es desde 25% hasta 90% en peso. En una modalidad adicional, la cantidad de triterpeno es desde 50% hasta 90% en peso. En una modalidad adicional, la cantidad de triterpeno es desde 75% hasta 90% en peso. En una modalidad adicional, el polisacárido se selecciona del grupo que consiste de glucosa, arabinosa, galactosa, ramnosa, xilosa, ácido urónico y combinaciones de los mismos. En una modalidad adicional, la cantidad de polisacárido es mayor de 15% en peso. En una modalidad adicional, la cantidad de polisacárido es mayor de 25% a 90% en peso En una modalidad adicional, la cantidad de polisacárido es mayor de 50% a 90% en peso. En una modalidad adicional, la cantidad de polisacárido es mayor de 75% a 90% en peso. En una modalidad adicional, el extracto comprende un aceite esencial desde 2% hasta 99% en peso, un triterpeno desde 5% hasta 88% en peso, y un polisacárido desde 2% hasta 95% en peso. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un alimento o medicamento que comprende, un extracto de especies de ganoderma de la presente invención. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un método para preparar un extracto de especies de ganoderma que tienen al menos, una característica predeterminada que comprende extraer secuencialmente , un material de planta de especies de ganoderma para proporcionar una fracción de aceite esencial, una fracción de triterpeno, y una fracción de polisacárido mediante a) extraer un material de planta de especies de ganoderma por extracción de dióxido de carbono súper critica para proporcionar una fracción de aceite esencial y un primer residuo; b) extraer el primer residuo de la etapa a) por extracción alcohólica para proporcionar la fracción de triterpeno y un segundo residuo; y c) extraer el segundo residuo de la etapa b) por extracción de agua y precipitar el polisacárido con alcohol para proporcionar la fracción de polisacárido. En una modalidad adicional, la etapa a) comprende: 1) cargar en un recipiente de extracción, material de planta de especies de ganoderma molidas; 2) agregar dióxido de carbono bajo condiciones supercriticas ; 3) contactar el material de planta de especies de ganoderma y el dióxido de carbono por un tiempo; y 4) colectar una fracción de aceite esencial en un recipiente de colección. En una modalidad adicional, el método además comprende la etapa de alterar las proporciones de compuesto químico de aceite esencial, dividiendo la fracción de aceite esencial con un sistema de separación fraccional de dióxido de carbono supercritico . En una modalidad adicional, condiciones súper críticas comprenden 60 bars hasta 800 bars de presión a 35°C hasta 90°C. En una modalidad adicional, las condiciones supercriticas comprenden 60 bars hasta 500 bars de presión a 40°C hasta 80°C. En una modalidad adicional, el tiempo es 30 minutos hasta 2.5 horas. En una modalidad adicional, el tiempo es 1 hora. En una modalidad adicional, la etapa b) comprende: 1) contactar el primer residuo de la etapa a) con un solvente alcohólico por un tiempo suficiente para extraer constituyentes químicos de triterpeno; 2) purificar los constituyentes químicos de triterpeno usando los procesos de extracción de solvente líquido-líquido. En una modalidad adicional, un solvente es cloroformo y el otro solvente es una solución acuosa saturada de NaHC03. En una modalidad adicional, el solvente alcohólico es etanol . En una modalidad adicional, la etapa 1) se realizó a 30°C hasta 100°C. En una modalidad adicional, la etapa 1) se realizó a 60°C hasta 100°C. En una modalidad adicional, el tiempo es 1-10 horas. En una modalidad adicional, el tiempo es 1-5 horas. En una modalidad adicional, el tiempo es 2 horas. En una modalidad adicional, la etapa c) comprende: 1) contactar ya sea material de planta de especies de ganoderma o el segundo residuo de la etapa b) con agua por un tiempo suficiente para extraer polisacáridos ; y 2) precipitar los polisacáridos de la solución acuosa por precipitación de alcohol. En una modalidad adicional, el agua está a 70°C hasta 90°C. En una modalidad adicional, el agua está a 80°C hasta 90°C. En una modalidad adicional, el tiempo es 1-5 horas. En una modalidad adicional, el tiempo es 2-4 horas. En una modalidad adicional, el tiempo es 2 horas. En una modalidad adicional, el alcohol es etanol. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma preparado por los métodos de la presente invención. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma que comprende, ergosterol, ácido ganolucidico A de 25 a 35% en peso del ergosterol, ácido ganolucidico B de 10 hasta 20% en peso del ergosterol, y ácido ganodérico H de 30 a 40% en peso de ergosterol . En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma que comprende, ácido ganodérico H y ácido ganolucidico A de 25 a 35% en peso del ácido ganodérico H. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma que comprende, ácido ganodérico H, ácido lucidénico B de 5 a 15% en peso del ácido ganodérico H, ácidos lucidénicos A/N de 1 a 10% en peso del ácido ganodérico H, y ácido ganolucidico A de 35 a 45% en peso del ácido ganodérico H. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma que comprende, ácido ganodérico H y ganoderal de 5 a 15% en peso del ácido ganodérico H. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma que comprende ácido ganodérico H, ácido ganolucidico A de 35 a 45% en peso del ácido ganodérico H, ácido ganolucidico B de 10 a 20% en peso del ácido ganodérico H y cerevisterol de 30 a 40% en peso del ácido ganodérico H. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma que comprende ácido ganodérico H, ácido ganolucidico B de 10 a 20% en peso del ácido ganodérico H, y ganoderal de 5 a 15% en peso del ácido ganodérico H. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma que comprende ácido ganodérico H, ácido ganolucidico B de 10 a 20% en peso del ácido ganodérico H, metoxicerevisterol de 20 a 30% en peso del ácido ganodérico H, y cerevisterol de 20 a 30% en peso del ácido ganodérico H. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma que comprende ergosterol, ácido ganolucidico A de 30 a 40% en peso del ergosterol, ácido ganolucidico B de 5 a 15% en peso del ergosterol, y ácido ganodérico H de 65 a 75% en peso del ergosterol . En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma que comprende, ácido ganodérico H, ácido ganolucidico B de 30 a 40% en peso del ácido ganodérico H, metoxicerevisterol de 40 a 50% en peso del ácido ganodérico H, y cerevisterol de 35 a 45% en peso del ácido ganodérico H. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma que comprende ergosterol, ácidos ganolucidicos A/B de 1 a 10% en peso de ergosterol, ganoderiol F de 1 a 10% en peso del ergosterol, y lanosterol de 50 a 60% en peso del ergosterol. En otro aspecto, la presente invención se refiere a un extracto de especies de ganoderma que comprende ácido ganodérico H, ácido ganolucidico A de 60 a 70% en peso del ácido ganodérico H, ácido ganolucidico B de 25 a 35% en peso del ácido ganodérico H, y ácidos lucidénicos A/N de 10 a 20% en peso del ácido ganodérico H. Las extracciones de la presente invención son empleadas en proporcionar efectos fisiológicos y médicos que incluyen, pero no se limitan a, mejoramiento inmunológico, rechazo anti-transplante y supresión inmune, actividad anti-oxidante, actividad anti-inflamatoria , anti-artritis, anti-reumatoide, enfermedad anti-auto-inmune, anti-alergia, anti-agregación de plaquetas, actividad hipoglicémica y anti-diabetes , anti-hipertensa, anti-hipercolesterolemia, prevención de enfermedad cardiovascular y apoplejía, actividad anti-mutagénica (prevención de cáncer) , actividad anti-carcinogénica (terapia de cáncer) , anti-viral, anti-VIH, anti-herpes simple, anti-herpes zoster, anti-hepatitis B, actividad anti-bacteriana y hepato-protectora y tratamiento para cirrosis. Estas modalidades de la descripción, otras modalidades y sus características y factores, serán aparentes de la descripción, dibujos y reivindicaciones que siguen .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 representa un método ejemplar para la preparación de una fracción de aceite esencial. La Figura 2 representa un método ejemplar para realizar la extracción por lixiviación de etanol. La Figura 3 representa un método ejemplar para purificación de la fracción de triterpeno. La Figura 4 representa un método ejemplar para purificación de la fracción de triterpeno. La Figura 5 representa un método ejemplar para el proceso de lixiviación de agua y precipitación de polisacárido . La Figura 6 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción de polisacárido de ganoderma de la etapa 6 de los presentes métodos (modo de ión positivo) . La Figura 7 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para fracción de polisacárido de ganoderma de la etapa 6 de los presentes métodos (modo de ión negativo) . La Figura 8 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto de ganoderma del fruto joven de lingzhi rojo (modo de ión positivo) . La Figura 9 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 40°C y 300 bar (modo de ión positivo) . La Figura 10 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 40°C y 500 bar (modo de ión positivo) . La Figura 11 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 70°C y 500 bar (modo de ión positivo) . La Figura 12 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 80°C y 100 bar (modo de ión positivo) . La Figura 13 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 80°C y 300 bar (modo de ión positivo) . La Figura 14 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 40°C y 300 bar (modo de ión positivo) . La Figura 15 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por 'los métodos de SCC02 a 70°C y 500 bar (modo de ión positivo) . La Figura 16 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 70°C y 100 bar (modo de ión positivo) . La Figura 17 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto crudo de etanol de ganoderma ( triterpenoide crudo) de fruto joven de lingzhi rojo (modo de ión positivo) . La Figura 18 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para triterpenoide final de fruto joven de lingzhi rojo (modo de ión positivo) .

La Figura 19 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto de ganoderma de fruto joven de lingzhi rojo (modo de ión negativo) . La Figura 20 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por métodos SCC02 a 40°C y 300 bar (modo de ión negativo) . La Figura 21 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 40°C y 500 bar (modo de ión negativo) . La Figura 22 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 70°C y 500 bar (modo de ión negativo) . La Figura 23 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 80°C y 100 bar (modo de ión negativo) . La Figura 24 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 80°C y 300 bar (modo de ión negativo) . La Figura 25 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 40°C y 300 bar (modo de ión negativo) . La Figura 26 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCCO2 a 70°C y 500 bar (modo de ión negativo) . La Figura 27 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para aceite esencial de ganoderma extraído por los métodos de SCC02 a 70°C y 100 bar (modo de ión negativo) . La Figura 28 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para extracto crudo de etanol de ganoderma ( triterpenoide crudo) de fruto joven de lingzhi rojo (modo de ión negativo) . La Figura 29 representa el Espectro de Masas AccuTOF-DART para triterpenoide final de fruto joven de lingzhi rojo (modo de ión negativo) .

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Definiciones Los artículos "un" y "uno", son usados en la presente para referirse a uno o más de uno (es decir, al menos a uno) del objeto gramatical del artículo. Por medio del ejemplo, "un elemento" significa un elemento o más de un elemento.

El término "especies de ganoderma" es también usado intercambiablemente con lingzhi, reichi, o mannentake y significan estas plantas, clones, variantes y brotes, etc . Como se usa en la presente, el término "uno o más compuestos", significa que al menos un compuesto, tal como 1-heptadecanol (un constituyente químico de aceite esencial soluble en lípido de especies de ganoderma), o ácido ganodérico (un triterpeno soluble en agua-etanol y agua de especies de ganoderma) , o una molécula de polisacárido insoluble en etanol-soluble en agua de especies de ganoderma tales como, pero no limitadas a, Ganoderano A se pretenden o que más de un compuesto, por ejemplo, 1-heptadecanol y ácido Ganodérico A se pretenden. Como es sabido en la técnica, el término "compuesto", no significa una molécula única, sino múltiples o moles de uno o más compuestos. Como se sabe en la técnica, el término "compuesto", significa un constituyente químico específico que posee distintas propiedades físicas y químicas, mientras "compuestos", se refiere a uno o más constituyentes químicos. Como se usa en la presente, el término "fracción" significa que la extracción comprende un grupo específico de compuestos químicos caracterizado por ciertas propiedades físicas, químicas o propiedades físicas o químicas . Como se usa en la presente, el término fracción de aceite esencial comprende compuestos solubles en lípido, insolubles en agua, obtenidos o derivados de especies de ganoderma que incluyen, pero no se limitan a, los compuestos químicos clasificados como 1-heptadecanol , ácido 2-propenoico , tridecil éster, ácido n-hexadecanoico, (Z)-9-octadecen-l-ol , 1-eicosanol, ácido (Z,Z)-9- 12 , octadecadienoico, y ácido linoelaídico . Como se usa en la presente, el término "fracción de triterpeno", comprende los compuestos triterpeno soluble en etanol y soluble en agua, obtenidos o derivados de especies de ganoderma, además que comprende, pero no se limita a, compuestos tales como ácidos Ganodéricos, ácidos lucidénicos, ácidos ganolucídicos , ganoderioles , lucidona y ganodermiatriol . Como se usa en la presente, el término "fracción de polisacárido" , comprende compuestos de polisacárido insolubles en etanol-solubles en agua, obtenidos o derivados de especies de ganoderma. Otros constituyentes químicos de especies de ganoderma también pueden estar presentes en estas fracciones de extracción. Como se usa en la presente, el término fracción "purificada", significa una fracción que comprende un grupo específico de compuestos caracterizados por ciertas propiedades físico-químicas o propiedades físicas o químicas que son concentradas a más de 50% de los constituyentes químicos de la fracción. En otras palabras, una fracción purificada comprende menos de 50% de compuestos de constituyentes químicos que no son caracterizados por ciertas propiedades físicas-químicas deseadas o propiedades físicas o químicas que definen la fracción . Como se usa en la presente, el término "perfil", se refiere a las relaciones en porcentaje en peso de masa de los compuestos químicos dentro de una fracción de extracción o a las proporciones del porcentaje en peso de masa de cada uno de los tres constituyentes químicos de la fracción de especies de ganoderma en una extracción final de especies de ganoderma. Como se usa en la presente, "materia prima", se refiere en general, a material de planta puro, que comprende plantas completas solas, o en combinación en o más partes o etapas constituyentes de una planta que comprende, cuerpos de fruto, micelios, y esporas, en donde la planta o partes constituyentes pueden comprender material que es puro, seco, cocido a vapor, calentado o de otro modo sometido a procesamiento físico para facilitar el procesamiento, el cual puede además comprender material que está intacto, cortado, trozado, cortado en cubos, molido, triturado o de otro modo procesado para afectar el tamaño y la integridad física del material de planta. Ocasionalmente, el término "materia prima", puede ser usado para caracterizar un producto de extracción que es usado como fuente de alimentación para procesos de extracción adicionales . Como se usa en la presente, el término "constituyentes de especies de ganoderma", deben significar compuestos químicos encontrados en especies de ganoderma y deben incluir todos de tales compuestos químicos identificados anteriormente, así como también otros compuestos encontrados en especies de ganoderma que incluyen pero no se limitan a los constituyentes químicos de aceite esencial, triterpenos, proteínas y polisacáridos .

Extracciones La presente invención comprende extracciones que comprenden una o más fracciones de constituyente químico encontradas en especies de ganoderma y relacionadas. La invención también comprende productos ingeribles que comprenden las extracciones que comprenden extracciones de especies de ganoderma y relacionadas mostradas aquí. Por ejemplo, la presente invención comprende extracciones que comprenden una tableta que se disuelve rápido, que comprende un extracto de especies de ganoderma o relacionadas, en donde al menos una de la fracción de aceite esencial, una sub-fracción de aceite esencial, una fracción de triterpeno, o una fracción de polisacárido, ha sido sustancialmente incrementada en cantidad de porcentaje en peso, con relación a la cantidad de porcentaje en peso de aquella encontrada en el material de planta nativa o en aquella actualmente encontrada en extractos de especies de ganoderma conocidas.

Fracción de Aceite Esencial El aceite esencial de ganoderma con pureza mayor de 95%, se extrajo por técnicas de extracción de dióxido de carbono supercritico (SCC02). El rendimiento de extracción más alto se encontró por ser 1.22% a temperatura de 70°C y presión de 500 bar. Un total de 75 compuestos fueron identificados usando análisis de espectroscopia de masas-cromatografía de gas (GC-EM) . Los compuestos principales encontrados en el aceite esencial de ganoderma son ácidos grasos C11-C20. Los más abundantes son ácido graso C18, ácido 9 , 12-octadecadienoico ( Z , Z )- (CAS : 60-33-3 ) (compuesto 59) y ácido linoelaídico, (E, Z ) -isómero (compuesto 60), ambos son estereoisómeros . El ácido linoelaídico (E,Z)-Isómero, es un ácido graso doblemente insaturado, que se origina ampliamente en glicósidos de planta. Es un ácido graso esencial en nutrición de mamíferos y se usa en la biosíntesis de membranas de células y prostaglandinas. El segundo compuesto abundante es el ácido n-hexadecanoico del ácido graso saturado C16 (CAS : 57-10-3 ) (compuesto 46) . Otros ácidos grasos incluyen: ácido octanoico (C8H1692, CAS: 124-07-2), ácido tetradecanoico (C14H2802, CAS: 544-63-8) , ácido pentadecanoico (C15H30O2, CAS: 1002-84-2) , 9-octadecenoico (C18H3402, CAS : 112-80-1) y ácido octadecanoico (C18H3602, CAS : 57-11- ) . El segundo grupo principal de compuestos son los alcoholes, los cuales incluyen: 1-undecanol (C11H240, CAS: 112-42-5) , 1-dodecanol (C12H260, CAS : 112-53-8 ) , 1-tetradecanol (C14H30O, CAS : 112-72-1 ) , 1-hexadecanol (C16H340, CAS: 36653-82-4) , 1-heptadecanol (C17H360, CAS: 1454-85-9) y 1-Eicosanol (C20H42O, CAS : 629-96-9) et al. Estos alcoholes alifáticos permanecen sin cambio y no se transforman en ésteres. Usando extracción de dióxido de carbono supercrítico, se perfiló la química del aceite esencial de ganoderma y los resultados resumidos se muestran en la Tabla 3.

Tabla 3. Perfil químico de aceite esencial de ganoderma obtenido a diferentes condiciones de SCC02 Los ácidos grasos pueden ser perfilados entre 54% y 85%. En los ácidos grasos totales, el compuesto 59, ácido 9, 12-octadecadienoico (Z,Z)- y compuesto 60, ácido linoelaídico, cuentan por 75%-95% en peso de masa. Los alcoholes pueden ser perfilados entre 10% y 36%. Con respecto a otros compuestos menores presentes en el aceite esencial de ganoderma, los ésteres pueden ser perfilados entre 2.5% y 6% y los aldehidos pueden ser perfilados entre 0.37% y 2.55%. Las concentraciones superiores de ácidos grasos puede obtenerse a presión alta, y concentraciones superiores de alcoholes grasos se pueden obtener a una baja presión de 100 bar y alta temperatura de 80°C.

Fracción de Triterpeno Los triterpenos de ganoderma se extrajeron usando etanol y se purificaron por purificación líquido-líquido usando cambio de solubilidad entre ácidos de triterpeno y sus sales cambiando el pH . En la fracción de triterpeno final purificada, la pureza total de triterpenos se incrementó a 87.5% desde 0.6% en materia prima y 19.9% en extractos crudos de etanol . Tres estándares de referencia por CLAR de triterpeno comercialmente disponible, ácido Ganodérico A, ácido Ganodérico F y ganodermatiol, solamente toman aproximadamente 4% en triterpenos totales de ganoderma .

Fracción de Polisacárido Los polisacáridos de ganoderma se extrajeron por agua destilada y se precipitaron por 60-80% de etanol. El rendimiento fue 1.5%-2%. La pureza de los polisacáridos basada en estándares de referencia de dextrano es 50%-80%, dependiendo de los pesos moleculares diferentes del Dextrano. El peso molecular promedio de polisacárido-glicoproteina precipitada fue 953377, el cual está compuesto de diferentes pesos moleculares de polisacáridos de ganoderma y glicoproteinas , en los cuales, 51% fueron polisacáridos y glicoproteinas, con pesos moleculares altos de 1.6 M. Los polisacáridos-glicoproteinas precipitadas, también son caracterizados por el espectro de masas Accu-TOF DART . El espectro se muestra en las Figuras 6 y 7. Una modalidad de tales extracciones comprende concentraciones predeterminadas de las fracciones de constituyentes químicos purificados y extraídos, en donde la fracción de triterpeno/fracción de aceite esencial de especies de ganoderma, fracción de polisacárido/fracción de aceite esencial, y perfiles de concentración de fracción de polisacárido/fracción de triterpeno (% en peso seco) (proporciones), son mayores o menores que aquellas encontradas en el material de planta seca natural o productos de extracción de especies de ganoderma convencionales. La alteración de las relaciones de concentración (perfiles químicos) de los constituyentes químicos benéficos de las especies de ganoderma individuales, permite la formulación de los productos de extractos de especies de ganoderma nuevas o únicas, diseñados para condiciones o dolencias humanas específicas. Por ejemplo, una nueva y poderosa extracción de ganoderma para mejoramientos inmunes podría tener una fracción de polisacárido purificada mayor y una fracción de aceite esencial reducida y fracción de triterpeno en % en peso de masa que aquella encontrada en el material de planta nativa de ganoderma o productos de extracción convencionales conocidos. Por el contrario, una nueva extracción de ganoderma para actividad anti-viral y actividad anti-gripal podría tener una fracción de triterpeno purificada mayor y una fracción de polisacárido y una fracción de aceite esencial reducida por % en peso de masa que aquella encontrada en el material de planta nativa de ganoderma o productos de extracción conocidos convencionales. Otro ejemplo de un nuevo perfil de extracción de ganoderma para actividad anti-inflamatoria, podría ser un perfil de extracción con una fracción de aceite esencial purificado mayor, fracción de triterpeno purificado y fracción de polisacárido purificado que aquella encontrada en material de planta de ganoderma nativa o productos de extracción de ganoderma convencionales conocidos. Una modalidad de la invención son extracciones que comprenden sub-fracciones de los constituyentes químicos de aceite esencial, en donde la concentración de grupos químicos específicos tales como, pero no limitados a, alcoholes o ácidos grasos, tienen sus respectivas concentraciones incrementadas por reducidas en productos de extracción nuevos.

Extracciones Relativas a Ganoderma Natural Modalidades comprenden extracciones de ganoderma y especies relacionadas que tienen al menos, uno de una concentración de aceite esencial, triterpeno o polisacárido que está en una cantidad mayor que aquella encontrada en el material de planta de especies de ganoderma nativa y relacionadas o productos de extracto de especies de ganoderma actualmente disponibles. Modalidades también comprenden extracciones en donde una o más de las fracciones, que incluyen aceites esenciales, triterpenos, o polisacáridos , se encuentran en una concentración que es mayor que aquella encontrada en material de planta de especies de ganoderma nativa. Modalidades también comprenden extracciones en donde una o más de las fracciones, que incluyen aceites esenciales, triterpenos o polisacáridos, se encuentran en una concentración que es menor que aquella encontrada en especies de ganoderma nativas. Cantidades conocidas de las fracciones de constituyente químico bio-activo de las especies de ganoderma (Tabla 1) , son usados como un ejemplo de la presente invención. Por ejemplo, extracciones de la presente invención comprenden fracciones en donde la concentración de aceites esenciales es desde 0.001 hasta 80 veces la concentración de especies de ganoderma nativa, y/o fracciones en donde la concentración de triterpenos es desde 0.001 hasta 100 veces la concentración de especies de ganoderma nativas, y/o fracciones en donde la concentración de polisacáridos es desde 0.001 hasta 70 veces la concentración de especies de ganoderma nativas. Extracciones de la presente invención comprenden fracciones en donde la concentración de aceites esenciales es desde 0.01 hasta 80 veces la concentración de especies de ganoderma nativa, y/o fracciones en donde la concentración de triterpenos es desde 0.01 hasta 100 veces la concentración de especies de ganoderma nativas, y/o fracciones en donde la concentración de polisacáridos es desde 0.01 hasta 70 veces la concentración de especies de ganoderma nativa. Además, extracciones de la presente invención comprenden sub-fracciones de los constituyentes químicos de aceite esencial que tienen al menos, uno o más de los compuestos químicos presentes en el aceite esencial de material de planta nativo que está en cantidad menor o menor que aquel encontrado en los constituyentes químicos de aceite esencial de material de planta de ganoderma nativa. Por ejemplo, el éster, ácido 2-propenoico, trideciléster , puede tener su intervalo de concentración desde 0.22-2.53% en peso de masa de una sub-fracción de aceite esencial, dependiendo de las condiciones de extracción de SCC02, un intervalo de incremento de 12 veces en concentración. Por el contrario, el ácido graso, ácido n-hexadecanoico, puede tener su intervalo de concentración desde 4.00-9.86 por peso de masa en una sub-fracción de aceite esencial, un intervalo de 2.5 veces en concentración. Además, las relaciones de estos dos compuestos de aceite esencial pueden variar desde 1/15-1/3. Como se documenta en la Tabla 3, diferentes sub-fracciones de aceite esencial pueden contener constituyentes químicos ampliamente diferentes y relaciones de constituyentes químicos. Extracciones de la presente invención comprenden fracciones en donde la concentración de compuestos químicos específicos en tales nuevas sub-fracciones de aceite esencial son ya sea incrementadas por aproximadamente 1.1 hasta aproximadamente 6 veces o reducidas por aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 6 veces que la concentración encontrada en los constituyentes químicos de aceite esencial de ganoderma nativa. Por ejemplo, las extracciones de la presente invención comprenden fracciones en donde la concentración de los constituyentes químicos de aceite esencial es desde 0.001 hasta 100 veces la concentración de material de planta de ganoderma nativa, y/o fracciones en donde la concentración de triterpenos es desde 0.0001 hasta 100 veces la concentración de material de planta de ganoderma nativa, y/o polisacáridos es desde 0.001 hasta 100 veces la concentración de material de planta de ganoderma nativa. En la elaboración de una extracción combinada, se puede usar desde aproximadamente 0.001 mg hasta aproximadamente 200 mg de una fracción de aceite esencial. Adicionalmente, se puede usar desde aproximadamente 0.001 mg hasta aproximadamente 500 mg de una fracción de triterpeno. Además, se puede usar desde aproximadamente 0.001 hasta aproximadamente 500 mg de la fracción de polisacárido insoluble en etanol soluble en agua.

Métodos de Extracción Los métodos de la presente invención comprenden proporcionar nuevas extracciones de ganoderma para tratamiento y prevención de trastornos humanos. Por ejemplo, una nueva extracción de especies de ganoderma para mejorar la actividad inmune, puede tener una concentración incrementada de fracción de polisacárido y aceite esencial reducido y concentraciones de fracción de triterpeno, en % en peso, que aquellas encontradas en el material de planta nativa de especies de ganoderma o productos de extracción conocidos convencionales. Una nueva extracción de especies de ganoderma para prevención y tratamiento de enfermedades virales puede tener una fracción de polisacárido y triterpeno incrementada y una fracción reducida de aceite esencial, en % en peso, que aquella encontrada en el material de planta de especies de ganoderma nativa o productos de extracción conocidos convencionales. Otro ejemplo de una nueva extracción de especies de ganoderma para prevención y tratamiento de cáncer comprende, una fracción que tiene un concentración de fracción de triterpeno incrementada, una fracción de polisacárido incrementada, y una fracción de aceite esencial incrementada que aquella encontrada en material de planta de especies de ganoderma nativa o productos de extracción convencional conocidos. Modalidades adicionales comprenden extracciones que comprenden perfiles alterados (distribución de proporción) de los constituyentes químicos de las especies de ganoderma, en relación a aquellos encontrados en el material de planta nativa o productos de extracto de especies de ganoderma actualmente disponibles. Por ejemplo, la fracción de aceite esencial puede ser incrementada o reducida con relación a las concentraciones de triterpeno y/o polisacárido . De manera similar, los triterpenos o polisacáridos , pueden ser incrementados o reducidos con relación a las otras fracciones de constituyentes del extracto para permitir nuevas extracciones de perfil químico constituyente para efectos biológicos específicos. Los siguientes métodos como se muestran, pueden ser usados individualmente o en combinación con el método o métodos descritos conocidos por aquellos expertos en la técnica . El material de partida para extracción es un material de planta de una o más especies de ganoderma. El material de planta puede ser cualquier porción de la planta, aunque el cuerpo de fruto o micelio son el material de partida más preferido. El material de planta de especies de ganoderma puede someterse a etapas de pre-extracción para proporcionar el material en cualquier forma particular, y cualquier forma tal que es usada para extracción, está contemplada por la presente invención. Tales etapas de pre-extracción incluyen, pero no se limitan a, aquellas en donde el material es trozado, picado, desmenuzado, molido, pulverizado, cortado o roto, y el material de partida antes de las etapas de pre-extracción, es secado o material de planta fresca. Una etapa de pre-extracción preferida comprende triturar y/o pulverizar el material de planta de especies de ganoderma en un polvo fino. El material de partida o material después de las etapas de pre-extracción, puede ser secado o tener humedad agregada en este. Una vez que el material de planta de especies de ganoderma está en una forma para extracción, están contemplados los métodos de extracción por la presente invención. La Tabla 4 lista las fracciones de constituyente químico bioactivo benéfico principal y algunos de los compuestos químicos bioactivos principales encontrados en la materia prima de especies de ganoderma usadas en la presente invención.

Tabla 4. Constituyentes químicos bioactivos benéficos principales encontrados en materias prima de ganoderma # Tiempo Compuesto Estructura CAS* Fórmula Pm Máx. de ret. (min) 2-Heptenal, (?)- 18829-55- 1 1 7.16 5 C7H120 2 -Metileno- butirolactona 2 9.63 547-65-9 C5HSQ2 9S 5-metiI-heptanol ••A,-.,.-,, 13 3 10.41 7212-53-5 C8H180 0 éster pentilico del A,-..,., 13 4 11.90 ácido acético (528-63-7 C7H1402 0 Nonanal 14 5 Í2.03 124-19-6 C9H180 2 ácido octanoico • - 14 6 14.3S 124-07-2 CSHÍ602 4 tians-2,2- dimetil-3- 19550-75- 12 7 15.27 hcpítno 5 9HIS 6 3-metil-5 .··- j ·'""···'·'' ''·-'¦ v- - 74630-67- ?6 S 17.18 4 C12H24 8 l,3-bis(l,l- dimetiletil)-henceno ¦ <e. - 19 9 17.50 1014-60-4 14H22 0 2-DodecenaI, (E)- 20407-84- ÍS 10 17.70 5 C12H22C) ·} 2,4-decadienaI ··. ······ .···· .,·····-,·"·· ,?··* 15 11 19.02 2363-88-4 C1 H16O 2 2,2-düiietil-3-deceno 55499-02- Í6 12 19.71 0 C12H24 8 l-dodecin-4-ol 74646-36- 18 13 •20.04 9 C12H220 2 2-isopropil-5- 91337-07- 17 14 20.52 nietil-l-heptanol 4 C11H20 2 1-dodecanol ,,-,,.··..,...^,,-,..-.,·? 18 15 20.97 112-53-8 C12H260 6 éster 2,2-dimetil ciclohexílico del 29S78-49- Cl 1H20O 18 16 21.83 ácido propanoico f 2 4 2-undecanol 16 17 22.65 •2463-77-6 Cl 1H20O 8 1-undecanol ¦·,,·¦¦-...,-?...,-·,.,-,,·-·,;. 17 1S 27.56 12-42-5 C11H240 2 19 31.60 1-dodecanol 112-53-S C12H260 18 Octadecanal 26 42 52.23 638-66-4 C1SH360 8 1-Hexadecanol 36653-82- 24 43 52.50 4 06?340 2 ácido C 1SH340 2S 44 52.93 9-octadecenoico (Z) 112-80- ? 2 2 ácido C1SH34C 28 45 .53.20 9-octadecenoico (E) I 12-S0- ! 2 ácido C 16H320 25 46 53.64 n-Hexadecanoico 57-10-3 2 6 éster 2-hexenil-l-ilo C18H340 28 47 53.84 del ácido dodecanoico 0-00-0 2 2 ni iris tato de n-butilo ,. ? .. C1SH360 28 4S 54.46 ? 0-36- 1 2 4 1,19-eicosadieno 1481 1-95- 27 49 54.71 C20H38 8 octadecil acetato C2 H40O 31 50 55.32 822-23-1 2 1-Eicosino 27 5 i 55.63 765-27-5 C20H38 8 Eicoseno-l-ol, cis-9 11224S- 29 52 5(5.21 30-3 C20H40O 6 acetato de C20H3SO 31 53 56.36 ?-8-octadecen-l-ol 0-00-0 2 0 9-octadecen-l-ol, (Z)- 26 57.13 143-28-2 C 1 SH360 S 9-octadecen-l-ol, 26 55 57.41 (E)- 143-28-2 C1 SH360 8 l-Eicosanol 29 56 5S.21 629-96-9 C20H42O S propanoato de ' -···· -· -- ····· ·· ¦ C1 SH320 28 57 5S.73 dihidrofaracsilo 0-00-0 2 0 .....?.....-.,, , - ..·, ,-. , fitol 29 58 59.02 150-86-7 C2ÜH40O 6 ácido 9,12-octadecadienoico C1 SH320 28 59 6S.77 (Z,Z) 60-33-3 2 0 ácido linoelaídico C1SH320 28 60 61.11 60-33-3 2 0 ácido octadecanoico ,^' , J C 18H360 28 61 62.28 C " 57-11-4 2 4 éster hutílico del "- '¦ 'V C20H40O 31 62 63.67 ácido hexadecanoico 111-06-8 2 Los métodos de extracción de la presente invención comprenden procesos descritos en la presente. En general, los métodos de la presente invención comprenden, en parte, métodos en donde el material de planta de especies de ganoderma es extraído usando extracción de fluido supercrítico (SFE) con dióxido de carbono como el solvente (SCC02) , que es seguido por una o más etapas de extracción de solvente, tales como, pero no limitadas a, agua, hidroalcohólica, y procesos de extracción absorbente de polímero de afinidad. Otros métodos adicionales contemplados por la presente invención comprenden, extracción de material de planta de especies de ganoderma usando otros solventes orgánicos, químicos refrigerantes, gases comprimibles, sonificación, extracción líquida a presión, cromatografía actual por contador de alta velocidad, polímeros impresos moleculares y otros métodos de extracción conocidos. Tales técnicas son conocidas por aquellos expertos en la técnica. En un aspecto, las extracciones de la presente invención pueden ser preparadas por un método que comprende las etapas representadas esquemáticamente en las Figuras 1-5. La invención incluye procesos para concentrar (purificar) y perfilar el aceite esencial y otros compuestos solubles lípidos a partir de material de planta de ganoderma usando tecnología de SCC02. La invención incluye el fraccionamiento de los constituyentes químicos solubles lípidos de ganoderma en, por ejemplo, una fracción de aceite esencial de alta pureza (concentración de constituyente químico de aceite esencial alto) . Sin embargo, la invención incluye un proceso de SCC02, en donde los constituyentes químicos individuales dentro de una fracción de extracción pueden tener sus proporciones o perfiles constituyentes químicos alterados. Por ejemplo, la separación fraccional de SCC02 de los constituyentes químicos dentro de una fracción de aceite esencial, permite la extracción preferencial de ciertos compuestos de aceite esencial, relativos a los otros compuestos de aceite esencial, de manera que una sub-fracción de extracto de aceite esencial puede ser producida con una concentración de ciertos compuestos mayor que la concentración de los otros compuestos. La extracción de los constituyentes químicos de aceite esencial de las especies de ganoderma con SCC02, como se muestra en la presente invención, elimina el uso de solventes orgánicos tóxicos y proporciona fraccionamiento simultáneo de los extractos. El dióxido de carbono es un producto natural y seguro y un ingrediente en muchos alimentos y bebidas. Un diagrama esquemático de los métodos de extracción de los constituyentes químicos biológicamente activos de Ligusticum se ilustra en las Figuras 1-5. El proceso de extracción es típicamente, pero no limitado a 4 etapas. Para referencia en el texto, cuando el número en negritas aparece en corchetes [x] , los números se refieren a los números en las Figuras 1-5. Los métodos analíticos usados en el proceso de extracción están presentados en la sección de Ej emplificación .

Etapa 1: Extracción de Dióxido de Carbono de Fluido Supercritico de Aceite Esencial de Ganoderma Debido a la naturaleza hidrofóbica del aceite esencial, solventes no polares, que incluyen pero no se limitan a SCCO2, hexano, éter de petróleo y acetato de etilo, pueden ser usados para este proceso de extracción. Puesto que algunos de los componentes del aceite esencial son volátiles, la destilación por vapor puede también ser usada como un proceso de extracción. Una descripción generalizada de la extracción de los constituyentes químicos de aceite esencial a partir del rizoma de las especies de ganoderma usando SCC02, es diagramada en la Figura 1-Etapa 1A y IB. La materia prima [10] es cuerpo de fruto de especies de ganoderma trituradas secas (aproximadamente 140 malla) . El solvente de extracción [210] es dióxido de carbono puro. Puede ser usado etanol como un co-solvente. La materia prima es cargada en un recipiente de extracción SFE [20]. Después de pruebas de escape y purga, el proceso comprende C02 licuado que fluye de un recipiente de almacenaje a través de un enfriador a una bomba de C02. El C02 es comprimido a la presión deseada y fluye a través de la materia prima en el recipiente de extracción, en donde la temperatura y presión se mantienen a un nivel deseado. Las presiones para extracción varían desde aproximadamente 60 bar hasta 800 bar y la temperatura varia desde aproximadamente 35°C hasta aproximadamente 90°C. Las extracciones de SCC02 mostradas aquí, son preferiblemente realizadas a presiones de al menos 100 bar y a una temperatura de al menos 35°C, y más preferiblemente, a una presión de aproximadamente 60 bar hasta 500 bar y a una temperatura de aproximadamente 40°C hasta aproximadamente 80°C. El tiempo para extracción para una etapa única de extracción varia desde aproximadamente 30 minutos hasta aproximadamente 2.5 horas, hasta aproximadamente 1 hora. La relación de solvente a alimentación es típicamente aproximadamente 60 a 1 para cada una de las extracciones de SCC02. El C02 es reciclado. Los constituyentes químicos de aceite esencial extraídos, purificados y perfilados [30] , son entonces colectados en un colector o separador, guardados en una botella de vidrio protectora de luz, y almacenados en un refrigerador oscuro a 4°C. El material de materia prima [10] de ganoderma puede ser extraído en un proceso de etapa (Figura 1, Etapa 1A) , en donde la fracción de aceite esencial de ganoderma purificada y extraída resultante [30], es colectada en un colector SFE o sistema SCC02 [20] o en etapas múltiples (Figura 1, Etapa IB) , en donde las sub-fracciones de aceite esencial de ganoderma perfiladas y purificadas extraídas [50, 60, 70, 80], son separadamente y secuencialmente colectadas en un sistema SFE colector [20] .

Alternativamente, como en un sistema SFE fraccional, el material de materia prima de ganoderma extraído por SCC02 puede ser segregado en recipientes colectores (separadores), de manera tal que dentro de cada colector existe una extracción de constituyente químico de aceite esencial de porcentaje relativo diferente (perfil) en cada una de las sub-fracciones de aceite esencial purificado colectadas. El residuo (restante) [40], es colectado, guardado y usado para procesamiento adicional, para obtener fracciones purificadas de las especies de ganoderma triterpenos y polisacáridos . Una modalidad de la invención comprende extraer material de materia prima de especies de ganoderma usando extracción de SCC02 de etapas múltiples a una presión de 60 bar a 500 bar y a una temperatura entre 35°C y 90°C y colectar el material de ganoderma extraído después de cada etapa. Una segunda modalidad de la invención comprende extraer el material de materia prima de especies de ganoderma usando la extracción de SCC02 por fraccionamiento a presiones de 60 bar a 500 bar y a una temperatura entre 35°C y 90°C y colectar el material de ganoderma extraído en recipientes colectores diferentes a condiciones predeterminadas (presión, temperatura y densidad) e intervalos predeterminados (tiempo) . Las sub-fracciones de aceite esencial purificado de ganoderma extraído resultante de cada uno de los extractores de etapas múltiples o en diferentes recipientes colectores (sistema fraccional) , se pueden recuperar y usar independientemente o pueden ser combinadas para formar una o más extracciones de aceite esencial de ganoderma que comprenden una concentración de constituyente químico de aceite esencial predeterminado que es superior o inferior que aquella encontrada en el material de planta nativa o en productos de extracción de ganoderma convencionales. Típicamente, el rendimiento total de la fracción de aceite esencial a partir de especies de ganoderma usando una extracción de SCC02 máxima de etapa única es aproximadamente 1.8% (> 95% de los constituyentes químicos de aceite esencial) por % en peso que tiene una pureza constituyente química de aceite esencial mayor de 95% en peso de masa del extracto. Ejemplos, así como también los resultados de tales procesos de extracción se encuentran abajo y en las Tablas 5 y 6. El procedimiento se puede encontrar en el Ejemplo 1.

Tabla 5. Porcentaje de área del pico CG-E de extracto de ganoderma lucidum usando SCC02 a diferentes condiciones. # tiempo pi opie lii l lie T = 40 C T = 80 C T = 70 C de de ret. compuesto pico (min) 100 bar 300 bar 500 bar 100 bar 300 bar 500 bar 1 7.16 aldehido 0.54 0.02 2 9.63 lactonas 0.08 0.13 3 10.41 alcohol 0.06 4 1 1.90 éster 0.06 0.03 5 12.03 aldehido 0.04 0.08 0.13 0.02 6 14.38 ácido 0.16 0.02 7 15.27 lqueno 8 17.18 alqueno 0.03 0.14 0.05 compuesto 9 17.50 aromático 0.26 0.3 0.49 0.27 0.42 0.06 10 17.70 aldehido 1.08 0.07 11 19.02 aldehido 0.51 0.03 12 19.71 alqueno 0.05 0.07 0.16 0.05 0.08 13 20.04 alcohol 0.07 0.63 0.2 0.09 0.12 0.07 14 20.52 alcohol 0.06 0.07 0.27 0.05 0.12 15 20.97 alcohol 0.05 0.1 0.1 1 0.12 16 21.83 éster 17 22.65 aldehido 18 27.56 alcohol 0.03 0.07 19 31.60 alcohol 0.21 0.4 0.47 0.28 0.51 0.1 1 20 35.07 alcohol 0.06 0.06 0.28 0.17 0.15 0.18 21 35.17 fenol 22 37.38 alcohol 0.07 23 38.01 alcohol 0.07 24 40.74 lcano 0.06 0.1 0.07 25 41.52 aromático 0.1 1 0.06 26 42.15 alcohol 0.08 0.16 0.06 0.1 27 44.09 éster 0.07 0.2 0.15 0.22 0.07 ¡111 4470 0 ? 2 5^ U 36 0 22 0.38 tl.6» 29 45.1 1 alcano 0.05 0.15 0.19 0.09 0.1 1 0.05 30 45.56 aldehido 0.03 0.08 0.09 0.08 31 47.73 ácido graso 0.1 0.27 32 47.90 alcohol 33 48.66 decano 0.08 0.2 0.11 0.09 34 48.97 aldehido 0.07 35 49.14 alcohol 0.07 0.1 0.07 0.03 36 49.68 aldehido 0.14 0.08 0.16 37 49.77 0.23 0.45 0.29 0.28 0.21 0.44 38 50.07 aldehido 0.2 0.01 39 50.54 ácido graso 0.17 0.18 0.09 0.15 0.39 40 50.69 éster 0.1 0.1 0.07 0.06 0.09 ? ? ? ) ¡Isiíiplil 7 44 *J.0"7 > "> 7» 42 52.23 aldehido 0.05 0.04 0.04 0.08 0.05 43 52.56 alcohol 0.03 0.1 1 0.04 44 52.93 ácido graso 0.14 0.08 0.08 0.23 45 53.20 ácido graso 0.2 0.09 0.34 t¾ I .i M 47 53.84 éster 48 54.46 éster 0.18 0.08 0.07 49 54.71 alqueno 0.05 0.08 0.16 0.07 0.13 0.22 50 55.32 éster 0.03 51 55.63 lqueno 0.09 0.04 52 56.21 alcohol 0.06 0.19 0.09 0.23 55 57.41 alcohol 0.77 0.91 0.35 0.78 2.07 0.66 ¿ i |·¾¾1$^$?¾8ß? ¦+ u 4 55 1 5Ü 8 84 •J 10 57 58.73 ester 0.03 61 62.28 ácido graso 0.73 0.49 0.54 0.69 3.06 0.88 62 63.67 éster 0.68 0.46 1.88 0.89 1.07 0.36 63 66.67 alcohol 0.17 64 67.02 alcohol 0.17 0.14 0.22 0.19 0.37 0.06 65 68.50 aldehido 0.2 0.15 0.1 0.77 0.16 66 70.50 alqueno 0.13 0.16 0.3 67 71.26 aldehido 0.19 0.18 68 71.45 alcohol 4.53 0.25 69 73.00 alcohol 0.09 70 73.25 amida 0.24 0.08 71 74.35 amida 0.08 72 74.62 éster 1.35 2.36 2.15 2.43 0.79 73 76.08 aldehido 0.05 0.15 74 76.52 alcohol 0.06 0.15 0.36 0.36 0.19 0.36 75 76.78 éster 0.27 0.32 0.4 0.51 0.98 0.22 suma 100 99.78 99.89 99.75 99.5 99.36 alcohol 16.6 21.5 14.5 20.0 36.2 10.4 ácido graso 79.52 68.34 80.55 74.19 54.74 84.75 50+60 69.95 58.94 76.01 68.8 41.06 72.76 éster 2.77 5.97 2.82 4.07 5.27 2.55 aldehido 0.37 2.55 0.34 0.41 1.56 0.44 El efecto de temperatura en el rendimiento de extracción total depende de la presión del sistema; a baja presión de 100 bar, el rendimiento de extracción se reduce ya que la temperatura se incrementa. Este hallazgo es atribuido a el gran cambio en densidad cuando la presión se manipula cerca del punto critico de solvente (densidad de C02 a 40C es 0.64 g/cc y densidad de C02 a 80C es 0.227 g/cc) . A presiones superiores de 300 bar y 500 bar, por otro lado, el rendimiento de extracción se incrementa ya que la temperatura se incrementa. Este hallazgo es atribuido al efecto de temperatura sobre presión de vapor del soluto, puesto que la densidad de C02 no cambia mucho con la temperatura. En el intervalo de experimento investigado, se puede notar claramente que para el sistema de hongo ganoderma, la densidad y presión no parecen tener mucho efecto en el rendimiento de extracción. Sin embargo, la temperatura tiene un efecto sustancial. Tanto la presión como temperatura tienen un efecto en la cinética de extracción. Un incremento en la temperatura promueve un mejoramiento en la presión de vapor de los compuestos favoreciendo la extracción. Adicionalmente, el incremento en coeficiente de difusión y la reducción en viscosidad de solvente también ayudan a la extracción de compuestos a partir de la matriz porosa herbácea ya que la temperatura y presión se incrementan a un valor más alto. En conclusión, la temperatura y presión alta deben ser usadas para máxima extracción de SCC02 a partir de tanto cinética como punto de vista de rendimiento. Como se puede notar de las Tablas 4y 5, los compuestos principales encontrados en materias primas de cuerpos de frutos de especies de ganoderma son ácidos grasos C11-C20. Los más abundantes son los ácidos grasos C18 de alcohol superior, ácido 9, 12-octadecandienoico (Z,Z) y ácido linoelaidico (E,Z). Ambos son estereoisómeros . El isómero de ácido linoelaidico (E,Z), es un ácido graso doblemente insaturado que se origina ampliamente en glicósidos de planta. El segundo grupo principal de compuestos encontrado en las fracciones esenciales de aceite son alcoholes. Los más abundantes de estos compuestos son los alcoholes superiores C17, C18 y C20. Estos alcoholes alifáticos permanecen sin cambio con extracción y no se transforman en ésteres. Una alta pureza de compuestos de aceite volátil está presente en la fracción de extracto de aceite esencial de SCC02 de material de materia prima de especies de ganoderma. Sin embargo, fracciones de extracto de aceite esencial de especies de ganoderma, pueden ser perfiladas usando SCC02 (Tabla 3) . Por ejemplo, concentraciones superiores de los alcoholes se pueden obtener a temperaturas de extracción superior tal como 80°C y a presiones bajas tales como 100 bar. Por el contrario, concentraciones superiores de isómeros de ácido graso C18 se pueden obtener a temperaturas de 40-70°C y alta presión tal como 500 bar. El rendimiento de extracción de SCC02 de especies de ganoderma fue aproximadamente 0.6-1.2% en peso de masa de la materia prima a temperaturas de 40-80°C y presiones de 100-500 bar con una relación de solvente/alimentación (S/F) de 180 (Tabla 6) .

Tabla 6. Influencia de temperatura y presión de rendimiento de extracción de aceite esencial de SCC02 (en % en peso de masa de la materia prima) a diferentes tiempos de extracción .

Etapa 2: Proceso de Lixiviación de Etanol para Extracción de Fracción Cruda de Triterpenoide En un aspecto, la presente invención comprende extracción y concentración de los compuestos activos de triterpeno. Una descripción generalizada de esta etapa es diagramada en la Figura 2-Etapa 2. Este proceso de extracción de Etapa 2 es un proceso de lixiviación de solvente. La materia prima para este proceso de extracción es ya sea la materia prima de especie nativa de ganoderma [10] o el residuo [40] después de la extracción de SCC02 de los constituyentes químicos de aceite esencial. El solvente de extracción [220] puede ser etanol acuoso, etanol u otro alcohol. En este método, el residuo de especies de ganoderma y el solvente de extracción, son cargados en un recipiente de extracción [100] y calentados y agitados.

Pueden ser calentados a 90°C, hasta aproximadamente 80°C, hasta aproximadamente 70°C, hasta aproximadamente 60°C, o hasta aproximadamente 60-80°C. La extracción se realiza por aproximadamente 1-10 horas, por aproximadamente 1-6 horas, por aproximadamente 1-3 horas, o por aproximadamente 2 horas. El extracto de fluido resultante es centrifugado [120]. Lo filtrado (sobrenadante), es colectado como producto [120], medido por volumen y contenido sólido en peso de masa seca. El material de residuo de extracción sólido [130], es retenido y guardado para procesamiento adicional (véase Etapa 4). La extracción puede ser repetida tantas veces como sea necesario o se desee. Puede ser repetida 2 o más veces, 3 o más veces, 4 o más veces, etc. Por ejemplo, la Figura 1-Etapa 2, muestra el proceso de tres etapas, en donde la segunda etapa y la tercera etapa usan los mismos métodos y condiciones. Un ejemplo de esta etapa de extracción se encuentra en el Ejemplo 2 y los resultados en las Tablas 7-9.

Tabla 7. Comparación de contenido de triterpeno en extracto crudo de lixiviación de etanol y composición de extracto triterpenoide purificado final Tabla 8. Resultados de análisis de CLAR de fracción de extracto de triterpeno crudo de lixiviación de etanol de ganoderma a concentración de 1.89 mg/ml en metanol.

Tabla 9. Resultados de análisis de CLAR de fracción de extracto de triterpeno purificado de ganoderma a concentración de 1.5 mg/ml en metanol Etapa 3. Purificación de la Fracción de Triterpeno Una descripción generalizada de la extracción y purificación de la fracción de triterpeno a partir de los extractos crudos de triterpeno de especies de ganoderma es diagramado en la Figura 3-Etapa 3 (Apéndice 1). La materia prima [120] es el extracto crudo de triterpeno a partir del proceso de lixiviación de etanol de etapa tres de la Etapa 2. Los solventes son cloroformo [230] y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (NaHC02) (10%) [240]. En este método, la materia prima del extracto de triterpeno crudo []120, y el primer solvente de extracción [230], son cargados en un recipiente de extracción [100] y agitados para disolver la fracción de triterpeno crudo en el solvente. El solvente cloroformo es introducido en un sistema separador [320]. Entonces, el segundo solvente de extracción [240] se agrega a la solución en el sistema separador, se mezcla, ventila y deja reposar para separación del solvente a base de agua (capa superior) a partir del solvente de cloroformo (capa inferior) . La capa de solución a base de agua se colecta [400], mide por volumen y contenido sólido en peso de masa seca. La solución de residuo de cloroformo (capa inferior) [340], puede ser retenida para etapas adicionales de extracción de NaHC02. La extracción de NHC02 puede ser repetida tantas veces como sea necesaria o se desee. Puede ser repetida 2 o más veces, 3 o más veces, 4 o más veces, etc. Por ejemplo, la Figura 3-Etapa 3A, muestra un proceso de tres etapas de NaHC02, en donde la segunda etapa y la tercera etapa usan los mismos métodos y condiciones. Las soluciones a base de agua colectadas de cada etapa de extracción [400+410+420] son combinadas [430]. La solución combinada es acidificada. El ácido es HC1 [250] . El pH final de la solución puede ser aproximadamente 3-5 o aproximadamente 4. La solución acidificada es entonces extraída [340] con el cloroformo de solvente [260], usando un sistema separador de solvente [320] . La capa de solución de cloroformo que contiene los triterpenoides deseados se colecta y guarda [450] . El proceso de extracción de cloroformo puede ser repetido tantas veces como sea necesario o se desee. Por ejemplo, la Figura 3 Etapa 34B, muestra un proceso de dos etapas de cloroformo, en donde la segunda etapa usa los mismos métodos y condiciones. El residuo a base de agua después de la terminación de la extracción, se descarga. El solvente de cloroformo de etapas múltiples [480] se evapora bajo presión reducida usando evaporación rotatoria y se recicla [390]. La fracción de triterpeno purificada se seca [395], removiendo el cloroformo restante y guardando como una fracción de triterpeno purificada [500] . Un ejemplo de esta etapa de extracción se puede encontrar en el Ejemplo 3 y los resultados en la Tabla 4.

El rendimiento total de la fracción purificada de triterpeno es 0.6% en peso de masa, basado en la materia prima original de ganoderma con una pureza de triterpeno de aproximadamente 88%, un incremento de 4 veces en la pureza de la fracción de extracto de triterpeno crudo. De este modo, el rendimiento de triterpenoide es mayor de 65% de los triterpenoides presentes en la materia prima de ganoderma original. Los cromatogramas de CLAR revelan numerosos picos desconocidos los cuales se espera, sean mayores de 130 triterpenos altamente oxigenados y compuestos relacionados que han sido aislados a partir del material de planta de G. lucidum. La concentración total de las tres referencias estándares, ácido ganodérico A, ácido ganodérico F, y ganodermatrio, fue aproximadamente 4%, apoyando la importancia del ensayo de triterpenoide total para control de calidad en procesamiento comercial de una fracción purificada de triterpeno.

Etapa 4. Proceso de Lixiviación de Agua y Precipitación de Polisacárido La fracción de extracto de polisacárido de los constituyentes químicos de especies de ganoderma ha sido definida en la literatura científica como la "fracción de extracción soluble en agua, insoluble en etanol". Una descripción generalizada de la extracción de la fracción de polisacárido a partir de extractos de especies de ganoderma usando procesos de precipitación de etanol y lixiviación de solvente de agua, es diagramada en la Figura 4-Etapa 4. La materia prima [10] o [120], es el polvo del material de planta de especies nativas de ganoderma o el residuo sólido a partir del proceso de extracción de lixiviación de etanol de la Etapa 2. Esta materia prima es lixiviada extraída en dos etapas. El solvente es agua destilada [270] . En este método, la materia prima de las especies de ganoderma [10] o [120] y el solvente de extracción [270], son cargados en un recipiente de extracción [700] y calentados y agitados. Pueden ser calentados a 100°C, hasta aproximadamente 60°C, o hasta aproximadamente 70-80°C. La extracción se realiza por aproximadamente 1-5 horas, por aproximadamente 2-4 horas, o por aproximadamente 2 horas. La extracción puede ser repetida tantas veces como sean necesarias o se deseen. Las soluciones de extracción de etapas múltiples [700+720] son combinadas y la suspensión es filtrada [610], centrifugada [620], y el sobrenadante colectado y evaporado [630] para remover el agua hasta un incremento de aproximadamente 8 veces en la concentración de los químicos en solución [640] . El etanol anhidro [280] es entonces usado para reconstituir el volumen original de la solución haciendo la concentración final de etanol a 60-80% de etanol. Se observa un gran precipitado [650]. La solución se centrifuga [660], se decanta [670] y el residuo de sobrenadante [750] , puede ser guardado para procesamiento adicional o desechado. El producto precipitado [740] después del secado [680], es la fracción purificada de polisacárido [760] que puede ser analizada para determinar polisacáridos usando el método colormétrico usando Dextrano 5,000, 50,000 y 410,000 en peso molecular como estándares de referencia. La pureza de la fracción extraída de polisacárido usando 3 dextranos de peso molecular diferente como estándares es aproximadamente 80, 59, y 52%, respectivamente, con un rendimiento total de 2% en % en peso de masa de la materia prima de ganoderma nativo original. Combinando las medidas de pureza de los 3 estándares dextrano indica un nivel muy alto de pureza mayor de 95%. Las impurezas principales parecen ser las proteínas de lectina deseadas (3% en peso de masa) que también contienen propiedades bioactivas benéficas. Los métodos de la presente invención son además mostrados en el Ejemplo 4. Los resultados se muestran en la Tabla 10. Sin embargo, se usó la espectrometría de masas AccuTOF-DART para perfilar además los pesos moleculares de los compuestos que comprenden la fracción de polisacárido purificada. Los resultados se muestran en las Figuras 6 y 7.

Tabla 10. Análisis de polisacárido y análisis de proteina de extracción de lixiviado acuoso y precipitación de etanol de la fracción de polisacárido * Los rendimientos están en % en peso de masa en base a la materia prima de ganoderma original El rendimiento del polisacárido de ganoderma es aproximadamente 2% en peso de masa en base a la material prima de planta de ganoderma original. La pureza de la fracción de polisacárido es 520-800 mg/g del equivalente estándar de dextrano que indica una pureza de > 90% de constituyentes químicos de polisacárido de ganoderma en la fracción. En base a un número y variedad amplia de procedimientos experimentales, es bastante razonable concluir que el 2% de rendimiento es al menos 100% de los polisacáridos insolubles en etanol y solubles en agua en material de la material primea de especies de ganoderma natural. Además, la principal impureza en la fracción parece ser las proteínas de lecitina deseadas que forma hasta el 3% en peso de masa de la fracción de polisacárido purifico . Se conocen muchos métodos en la técnica para la eliminación de alcohol de la solución. Si se desea mantener el alcohol para reciclar, el alcohol puede ser removido de las soluciones, después de la extracción, por destilación bajo presiones atmosféricas normales o reducidas. El alcohol puede ser reutilizado. Además, también existen muchos métodos conocidos en la técnica para eliminación de agua de las soluciones, ya sea soluciones acuosas o soluciones a partir de la cual el alcohol es removido. Tales métodos incluyen, pero no se limitan a, secado por atomización de las soluciones acuosas en un portador adecuado tal como, pero no se limita a, carbonato de magnesio o maltodextrina , o alternativamente, el liquido puede ser s sequedad por secado por congelamiento o secado de ventana refractiva.

Purificación de las Extracciones Realizando los métodos de extracción previamente descritos, se encontró que un 50-99% de rendimiento en peso de masa de los constituyentes químicos de aceite esencial que tienen mayor que 95% de pureza de los constituyentes químicos de aceite esencial en la materia prima de corteza de ganoderma seca original de las especies de ganoderma que pueden ser extraídas en la fracción de extracto SCC02 de aceite esencial (Etapa 1A) . Usando los métodos como se muestra en la Etapa IB (Procesos de Extracción y Fraccionamiento de SCC02), el rendimiento de aceite esencial podrá ser reducido debido al fraccionamiento de los constituyentes químicos de aceite esencial en sub-fracciones de aceite esencial muy purificados (>90%) . Además, el proceso de extracción y fraccionamiento SCC02 como se muestra en esta invención, permite las proporciones (perfiles) de los compuestos químicos individuales que comprenden la fracción constituyente químico de aceite esencial para ser alterados de forma tal que los perfiles de sub-fracción de aceite esencial único pueden ser creados para propósitos medicinales particulares. Por ejemplo, la concentración de los constituyentes químicos de aceite esencial de alcohol puede ser incrementada mientras se reduce simultáneamente la concentración de los compuestos de ácido graso o vice versa. Usando los métodos como se muestra en la Etapa 2 de esta invención, se logra una fracción de triterpeno crudo lixiviado de etanol con un 3% de rendimiento en peso de masa a partir de la materia prima de especies de ganoderma original que tiene un 20% de concentración de constituyentes químicos de triterpeno. Esto además se compara a aproximadamente un 66% de rendimiento de los constituyentes químicos relacionados a triterpeno encontrados en el material de planta de especies de ganoderma nativa. Usando los métodos como se muestra en la Etapa 3 de esta invención (Purificación de Fracción de Triterpeno) , se pueden obtener fracciones de triterpeno con purezas de mayor que el 85% en % de masa seca del extracto. Es posible extraer al menos 100% de los triterpenos a partir de la material prima del extracto de lixiviado hidroalcohólico . Esto es comparable a aproximadamente 66% del rendimiento de los constituyentes químicos de ácido triterpeno encontrado en la material de planta de especies de ganoderma nativa. Usando los métodos como se muestra en la Etapa 4 de esta invención, se logra una fracción de polisacárido purificada con un 1.52.0% en peso de masa a partir de la materia prima de especies de ganoderma original que tiene una pureza de polisacárido de mayor del 90%. El rendimiento de polisacárido es al menos 100% de los polisacáridos insolubles en etanol y solubles en agua presentes en el material de materia prima de especies de ganoderma nativa. Los principales constituyentes químicos no de polisacárido en esta fracción parece ser las proteínas de lecitina que contiene hasta 3% en peso de masa de la fracción de polisacárido. Estas proteínas parecen actuar sinergísticamente los polisacáridos intensificando la bioactividad benéfica de la fracción.

Finalmente, los métodos cono se muestra en la presente invención, permite la purificación (concentración) de las fracciones constituyentes químicas de aceite esencial nueva de especies de ganoderma, fracciones o sub-fracciones de aceite esencial nuevas, una fracción de triterpeno nueva y una fracción de polisacárido nueva para ser tanto como 99% en peso de masa de los constituyentes químico deseados en las fracciones de aceite esencial, tanto como el 87% en peso de masa en la fracción de triterpeno y tanto como el 95% en peso de masa en la fracción de polisacárido. Los ambientes de extracción específicos, proporciones de extracción, solventes y tecnología de extracción usados, depende de los perfiles de constituyentes químicos de partida del material de fuente y el nivel de purificación deseada en los productos de extracción final. Los métodos específicos como se muestra en la presente invención, pueden ser fácilmente determinados por aquellos expertos en la técnica usando no más que la experimentación de rutina típica para ajustar un proceso a cuenta para variaciones de muestra en los atributos de materiales de partida que es procesado a un material de salida que tiene atributos específicos. Por ejemplo, en un lote particular de material de planta de especies de ganoderma, las concentraciones iniciales de los constituyentes químicos de aceite esencial, los triterpenos y los polisacáridos se determinan usando métodos conocidos por aquellos expertos en la técnica como se muestra en la presente invención. Un experto en la técnica puede determinar la cantidad de cambio a partir de la concentración inicial de los constituyentes químicos de aceite esencial, por ejemplo, para las cantidades o distribución predeterminadas (perfil) de constituyentes químicos de aceite esencial para el producto de extracción final usando los métodos de extracción, como se describe en este documento, para alcanzar la concentración deseada y/o perfil químico en el producto de extracción de especies de ganoderma final.

Alimentos y Medicamentos Como una forma de alimentos de la presente invención, pueden ser formulados por cualquiera de las formas opcionales, por ejemplo, un estado de gránulo, un estado de grano, un estado de pasta, un estado de gel, un estado sólido o un estado líquido. En estas formas, varios tipos de sustancias convencionalmente conocido por aquellos expertos en la técnica, las cuales se permiten agregar a los alimentos, por ejemplo, un aglutinante, un desintegrante, un espesante, un dispersante, un agente que promueve la reabsorción, un agente de sabor, un amortiguador, un tensoactivo, un auxiliar de disolución, un preservativo un emulsificador , un agente de isotonicidad, un estabilizador o un controlador de pH, etc., puede ser opcionalmente contenido. No es específicamente limitada una cantidad de extracto de baya a ser agregado a alimentos, y por ejemplo, puede ser aproximadamente 10 mg a 5 g, preferiblemente 50 mg a 2 g por día como una cantidad ingerida por un adulto que pesa aproximadamente 60 kg. En particular, cuando se utiliza como alimentos para conservación de salud, alimentos funcionales, etc., se prefiere que contenga el ingrediente efectivo de la presente invención en tal cantidad que los efectos predeterminados de la presente invención son suficientemente mostrados. Los medicamentos de la presente invención pueden ser opcionalmente preparados de conformidad con los métodos convencionalmente conocidos, por ejemplo, como un agente sólido tal como una tableta, un gránulo, un polvo, una cápsula, etc., o como un agente líquido tal como una inyección, etc. Para estos medicamentos, pueden ser formulados cualquiera de los materiales generalmente usados, por ejemplo, tal como un aglutinante, un desintegrante, un espesante, un dispersante, un agente que promueve la reabsorción, un agente de sabor, un amortiguador, un tensoactivo, un auxiliar de disolución, un preservativo, un emulsificador, un agente de isotonicidad, un estabilizador o un controlador de pH. Una cantidad de administración del ingrediente efectivo (extracto de ganoderma) en los medicamentos, puede variar dependiendo de un tipo, una forma de agente, una edad, un peso corporal o un síntoma para ser aplicada de un paciente y similares, por ejemplo, cuando se administra oralmente, se administra una o varias veces al día para un adulto que pesa aproximadamente 60 kg, y se administra en una cantidad de aproximadamente 10 mg a 5 g, preferiblemente aproximadamente 50 mg a 2 g por día. El ingrediente efectivo puede ser uno o varios componentes del extracto de ganoderma. Las extracciones de especies nuevas de ganoderma pueden ser administradas diariamente, por una o más veces, para el tratamiento efectivo de condiciones agudas o crónicas. Un método de la presente invención comprende administrar al menos una vez al día una extracción que comprende compuestos constituyentes de especies de ganoderma. Métodos también comprenden administrar tales extracciones más de una vez al día, más de dos veces al día, más de tres veces al día y en un intervalo de 1 a 15 minutos por día. Tal administración puede ser continuamente, en cada día por un periodo de días, semanas o años, o puede ocurrir a tiempos específicos para tratar o prevenir condiciones específicas. Por ejemplo, una persona puede ser administrada con extractos de especies de ganoderma al menos una vez al día por años para intensificar el sistema inmune, o para prevenir enfermedad cardiovascular o apoplejía, o para prevenir o tratar trastornos inflamatorios y artritis, o para tratar hipertensión, o para prevenir o tratar el resfriado común, influenza u otras enfermedades virales, o para prevenir o tratar enfermedades bacterianas, o para tratar diabetes mellitus, o para tratar hiper-esclerolemia, o para prevenir o tratar cáncer. La descripción precedente incluye la mejor forma actualmente contemplada de llevar a cabo la presente invención. Esta descripción se hace para propósitos de ilustración de los principios generales de la invención y no debe ser tomada en un sentido limitante. Esta invención es ilustrada adicionalmente por los siguientes ejemplos, los cuales no son construidos en cualquier vía imponiendo limitaciones en el alcance de la misma. Por el contrario, será claramente entendido que el recurso puede tener otras modalidades variadas, modificaciones y equivalentes del mismo, los cuales, después de leer la descripción de este documento, puede sugerir por sí misma a aquellos expertos en la técnica sin apartarse del espíritu de la presente invención . Todos los términos usados en este documento se consideran ser interpretados en su utilización normalmente aceptada por aquellos expertos en la técnica. Patente y solicitudes de patentes o referencias citadas en este documento, todas son incorporadas por referencia en sus totalidades.

Ejemplificación Materiales y Métodos Botánicos Se obtienen comercialmente hongos secos de ganoderma lucidum rojos (GL) . La concentración de compuestos activos en material prima se midió interiormente y se lista en la Tabla 11.

Tabla 11. Composición química de hongos ganoderma lucidum Químicos o o en Peso Aceite esencial 1.2 Tritepenoide2 0.9 Polisacárido-glicoproteína3 1.59 1 Aceite esencial se estimó por mayor rendimiento de extracción de SCC02 a 70°C y 500 bar. 2 Triterpenoide se estimó por método de extracto 3 Polisacárido-glicoproteína se estimó por extracto de agua.

Solvente Orgánicos Acetona (CAS: 67-64-1), > 99.5%, reactivo ACS (179124); Acetonitrilo (CAS: 75-05-8); para CLAR, grado gradiente > 99.9% (GC) (000687); Hexano (CAS#: 110-54-3), 95+%, grado espectrofotométrico (248878); Acetato de etilo (CAS#: 141-78-6), 99.5+%, grado ACS (319902); Etanol (CAS: 64-17-5), desnaturalizado con 4.8% de isopropanol (02853); Etanol (CAS: 64-17-5), absoluto (02883); Metanol (CAS#: 67-56-1), 99.93%, grado CLAR ACS; (4391993); Cloroformo (CAS#: 67-66-3), > 99.0% (GC) y Agua (CAS#: 7732-18-5), grado CLAR, (95304). Todos se adquirieron de Sigma-Aldrich. Ácidos y Bases Ácido acético (64-19-7), 99.7%+%, reactivo ACS (320099); Ácido clorhídrico (7647-01-0), solución 1.0N estándar volumétrico en agua (318949); Bicarbonato de sodio (S263-1, Lot #: 037406) se adquirió de Fisher Co . , el reactivo Bradford (Número de producto B 6916) se adquirió de sigma.

Estándares de referencia químicos Albúmina de suero (9048-46-8), cultivo celular en polvo de Fracción V de Albúmina de Bovino (BSA) probado (A9418) se adquirió de sigma; ácido Ganodérico A (lot#: 07057-022), ácido Ganodérico F (lot#: 07068-037) y ganodermatriol (Lot#: 07060-128) todos se adquirieron de sigma. Estándar de Dextrano 5000 (00269), 50, 000 (00891) y 410,000 (00895) certificado de conformidad con DIN se adquirió de fluka. Las estructuras de estos estándares se muestran en la Tabla 12.

Tabla 12. Estructura química de estándares de referencia triterpenoide para ganoderma lucidum. Ácido Ganodérnico A Ácido Ganodérnico F Ganodermatriol Método de CLAR Sistema cromatográfico : sistema Cromatográfico Líquido de alta Resolución LC-10AVP Shimadzu equipado con una bomba LCIOADVP con un detector de arreglo de foto diodo SPD-M 10AVP. Los productos de extracción de etanol se midieron en una columna Júpiter C18 de fase inversa (250x4.6 mm 1. D., 5 µ, 300 Á) (Phenomenex, Parte #: 00G-4053-E0, serie No: 2217520-3, Lote No.: 5243-17). El volumen de inyección es 10 µ? y la relación de flujo de fase móvil es 1 ml/min. La temperatura de columna es 25°C. La fase móvil consiste de A (2.5% de ácido acético acuoso, v/v) y B (acetonitrilo) . El gradiente es programado como sigue: con los primero 12 minutos, B manteniendo al 30%, 12-30 min, solvente B se incrementa linealmente de 30% a 65%, y 30-40 min, B se mantiene a 65%, después 40-45 min, B linealmente de 65% a 85%. Se prepararon soluciones base de metanol de 3 estándares listados en la Tabla 12 disolviendo cantidades pesadas de compuestos estándares en etanol a 5 mg/ml. La solución estándar de referencia mezclada después se diluyó etapa por etapa para proporcionar una serie de soluciones a concentraciones finales de 2, 1, 0.5, 0.1, 0.05 mg/ml, respectivamente. Todas las soluciones base y soluciones de trabajo se usaron dentro de 7 días y se almacenaron en un frigorífico a +4°C y se llevaron a temperatura ambiente antes del uso. Las soluciones se usaron para identificar y cuantificar los compuestos en extractos de ganoderma lucidum. Los tiempos de retención de ácido ganodérico A, ácido ganodérico F u ganodermatriol son aproximadamente 13.33, 21.63 y 34.42 min, respectivamente. Se encontró un primer ajuste lineal que varía de 0.01 a 20 µg . Las ecuaciones de regresión y coeficientes de correlación son como sigue: Ácido ganodérico A: área del pico = 790642 x C (µ?) - 23406, R2 = 0.9994 (N = 6); Ácido ganodérico F: área del pico = 513374 x C (µ?) - 12458, R2 = 0.9999 (N = 6) ; ganodermatriol : área del pico = 753902 x C (yg) - 29095, R2 = 0.9997 (N = 6) . Los resultados de CLAR se muestran en la Tabla 13. Los contenidos de los estándares de referencia en cada muestra se calcularon por interpolación de las curvas de calibración correspondientes en base del área del pico .

Tabla 13. Resultados del Análisis CLAR de estándares de referencia de triterpenoide de ganoderma lucidum a concentraciones de 1 mg/ml en etanol. 1 Se calcularon las placas teóricas por: N = 16 x (tg/W)2.tR es tiempo de retención y W es ancho del pico, https : //www.mn-net . com/web%5CMN-WEB-HPLCKatalog . nsf/WebE/GRUNDLAGEN .

Análisis de GC-EM Se realizó en análisis GC-EM en el sistema Shimadzu GCMS-QP2010. El sistema incluye cromatografía de gas de alta resolución, interface GC/MS acoplada directa, fuente iónica de electro impacto (El) con control de temperatura independiente, quadrupole mass filter et al. El sistema es controlado con el software GCMS solution Ver. 2 para adquisición de datos y análisis ' post-corrida . La separación se llevó a cabo en una columna de sílice capilarmente fusionada Agilent J&W DB-5 (30 m x 0.25 mm i.d., 0.25 µp? de espesor de película) (catálogo: 1225032, serie No. US5285774H) usando el siguiente programa de temperatura. La temperatura inicial es 60 °C, mantenida por 2 min, después se incrementa a 120°C a una proporción de 4°C/min, mantenida por 15 min, después se incrementa a 200°C a una velocidad de 4°C/min, mantenida por 15 minutos, después se incrementa a 240°C a una velocidad de 4°C/min, mantenida por 15 min, con un tiempo de corrida total de 92 minutos. La temperatura de inyección de muestra es 250 °C y 1 µ? de la muestra se inyectó por auto inyector en forma no fraccionada por 1 minuto. El gas portador es helio y la velocidad de flujo se controló por presión a 60 KPa . Bajo tal presión, la velocidad de flujo es 1.03 ml/min y la velocidad lineal es 37.1 cm/min. La temperatura de fuente iónica MS es 230°C, y la temperatura de interfaz GC/MS es 250°C. El detector MS se explora entre m/z de 50 y 500 a velocidad de exploración de 1000 AMU/segundo. La temperatura de corte del solvente es 3.5 min.

Cuantificación rápida de triterpenoides por método de espectrometría de ultravioleta (UV) Instrumento: espectrómetro UV-Vis Shimazu (UV 1700 con sonda UV: S/N: A1102421982LP) .

Estándares Se elabora una solución de ácido Ganodérico F estándar de triterpenoide a concentración 0.2 mg/ml en bicarbonato de sodio saturado (NaHC03) . La solución se diluye a 0.2, 0.1, 0.05, 0.025, 0.0125 mg/ml con bicarbonato de sodio saturado. La absorbancia se registra a 257 nm. Los resultados se muestran en la Tabla 14.

Tabla 14. Cuantificación rápida de triterpenoide total por método de espectrometría UV usando ácido Ganodérico F como estándares.

Análisis de polisacárido (Dubois 1956) Instrumento : Espectrómetro UV-Vis Shimazu (UV 1700 con sonda UV: S/N: A1102421982LP) .

Estándar : Se ha usado el método colorimétrico para análisis de polisacárido. Se elaboran soluciones de dextrano base 0.1 mg/ml ( Pm = 5000, 50,000 y 410,000) en agua destilada. Se toman 0.08, 0.16, 0.24, 0.32, 0.40 mi de solución base y el volumen se rellena a 0.4 mi con agua destilada. Después se agrega en 0.2 mi de solución de fenol al 5% y 1 mi de ácido sulfúrico concentrado. Las mezclas se dejan reposar por 10 minutos antes de realizar la exploración UV. La absorbancia máxima se encontró a 488 nm. Después se fija la longitud de onda a 488 nm y la absorbancia se mide para cada muestra. Los resultados se muestran en la Tabla 15. Las curvas de calibración estándar se obtienen para cada una de las soluciones de dextrano como sigue: Dextran 5K, Absorbancia = 0.01919+ 0.027782 C (µ?) , R2 = 0.97 (N = 5); Dextran 50K, Absorbancia = 0.03481+ 0.036293C (µ?) , R2 = 0.98 (N = 5) .

Tabla 15. Polisacárido de análisis colorimétrico usando Dextrano como estándares de referencia Tubo Solución Agua fenol al ácido Absorbancia a 488 nm de destilada 5% sulfúrico Pm=5K Pm=50K Pm=410 Dextrano (mi) (mi) (mi) (mi) Modelo 0 0.40 0.2 1 0 0 0 1 0.08 0.32 0.2 1 0.238 0.301 0.335 2 0.16 0.24 0.2 1 0.462 0.504 0.678 3 0.24 0.16 0.2 1 0.744 0.752 0.854 4 0.32 0.08 0.2 1 0.907 0.045 1 .247 5 0.40 0.00 0.2 1 1.098 1.307 1 .450 Análisis de peso molecular de polisacárido El análisis de peso molecular del polisacárido es en un sistema CLAR equipado con un detector de índice de refracción RID-10A. La velocidad de flujo se fija a 0.6 ml/min. Se realizaron los análisis usando una columna 300x7.8 mm I. D. TSK-GEL G4000PWXL (tamaño de partícula 10 µp?, tamaño de poro 300 Á, Tosoh Corporation, inato-ku, Tokyo, Japón. Catálogo No: 08022, Columna No: H3463) . La fase móvil es agua destilada y el volumen de inyección es 10 µ?. La temperatura de columna es 35°C y la temperatura de celda RID es 40°C. El tiempo de análisis es 40 minutos. Se prepararon las soluciones base de agua destilada de diferentes pesos moleculares de estándares de Dextrano disolviendo cantidades pesadas de compuestos estándares en agua destilada a concentración de 5 mg/ml. Tiempos de retención de dextrano 5 k, dextrano 25 k, dextrano 50 k, dextrano 270 k y dextrano 410 k son aproximadamente 15.70, 1.82, 12.93, 11.08 y 10.76 min, respectivamente, mostrados en la Tabla 16. Se obtiene un ajuste de la curva lineal tranzando el tiempo de retención (eje X) contra Log Pm (eje Y) . La ecuación de regresión es: Log (Pm) = 9.669 - 0.3817 x Rt (R2 = 0.99859). Se puede calcular el peso molecular desconocido de las muestra por la ecuación anterior por el tiempo de retención conocido de las muestran.

Tabla 16. Resultados del análisis CLAR-RID de estándares de referencia de Dextrano Nombre Pm Log tiempo área Porcenaltura Porcenancho Tiempo tiempo de (Pm) de ret. del taje del de pico taje de de de inicio detención (min) pico pico/área altura pico (%) de pico (%) Dextrano 5 410000 5.6 K 15.7 536282 98.8 5999 94.4 4.62 12.9 17.5 Dextrano 270000 5.4 25K 13.8 555103 94.3 6266 81.4 4.43 11.9 16.4 Dextrano 50000 4.7 50K 12.9 457221 91.6 4758 72.0 4.46 11.0 15.5 Dextrano 25000 4.4 270K 11.1 439369 78.4 4444 46.4 4.57 9.2 13.8 Dextrano 5000 3.7 410K 10.8 366093 71.6 3487 36.7 4.78 9.1 13.8 Análisis Directo en Espectroscopia de Masa en Tiempo Real ( DART ) Instrumentos Espectrómetro de masa en tiempo de vuelo JOEL AccuTOF DART LC (Joel USA, Inc., Peabody, Massachusetts , USA) . Esta tecnología de espectrómetro de masa en tiempo de vuelo (TOF) no requiere cualquier preparación de muestra y rendimientos de masas con precisiones a 0.00001 unidades de masa.

Métodos para análisis de fracción Los ajustes de instrumentos utilizados para fracciones de captura y análisis son como sigue: Para forma de catiónica, el voltaje de aguja DART es 3000 V, elemento de calor a 250°C, Electrodo 1 a 100 V, Electrodo 2 a 250 V, y flujo de gas de helio de 7.45 litros/minuto (1/min) . Para el espectrómetro de masa, el orificio 1 es 10 V, lentes de anillo es 5 V, y orificio 2 es 3 V. El voltaje de picos se fija a 600 V para proporcionar polvo de resolución partiendo de aproximadamente 60 m/z, aún permitiendo resolución suficiente a intervalos de masa mayor. El voltaje de detector de placa de micro-canal (MCP) se fija a 2450 V. Las calibraciones se realizan cada una, por monitoreo previo la introducción de muestra usando un estándar de solución de cafeína 0.5 ( Sigma-Alrich Co., St. Louis, USA). Las tolerancias de calibración se mantienen a = 5 mmu . Las muestras se introducen en plasma de helio DART con fórceps estériles que aseguran que un área de superficie máxima de la muestra se expone al haz de plasma de helio. Para introducir la muestra en el haz, se emplea un movimiento de barrido. Este movimiento permite a la muestra ser expuesta repetidamente en el golpe delantero e inverso por aproximadamente 0.5 seg/barrido y pirólisis preventiva de la muestra. Este movimiento se repite hasta que se observa una señal de Corriente Iónica Total apreciable (TIC) en el detector, entonces la muestra se remueve, permitiendo la normalización de línea base/antecedente. Para forma aniónica, el DART y AccuTOF se alternan a forma iónica negativa. El voltaje de aguja es 3000 V, elemento a 250°C, Electrodo 1 a 100 V, Electrodo 2 a 250 V, y flujo de gas de helio a 7.45 1/min. Para el espectrómetro de masa, orificio 1 es -20 V, lentes de anillo es -13 V, y orificio 2 es -5 V. El voltaje de pico es 200 V. El voltaje MCP se fija a 2450 V. Las muestras se introducen en la misma manera exacta como la forma catiónica. Todos los análisis de datos se conducen usando un software MassCenterMain Suite proporcionado con el instrumento .

Ejemplo 1 Ejemplo de Etapa 1A; Extracción máxima de SFE de etapa única y purificación de fracción de aceite esencial de ganoderma Los experimentos se realizaron usando un SFT 250 adquirido de Supercritical Fluid Tecnhologies , Inc. (Newark, DE) que se designa para presiones y temperaturas hasta 690 bar y 200 °C, respectivamente. Este aparato permite extracciones simples y eficientes en condiciones supercriticas con flexibilidad para operar en cualquiera de las forma dinámica o estática. Los aparatos consisten de tres módulos principales; un horno, una bomba y control, y módulo de colecta. El horno tiene una columna precalentada y un recipiente de extracción de 100 mi. El módulo de bomba es equipado con una bomba que conduce aire comprimido con capacidad de flujo constante de 300 ml/min. El módulo de colecta es un vial de vidrio de 40 mi, sellado con tapas y septo para la recuperación de productos extraídos. El equipamiento se proporciona con válvulas de micrómetro y un medidor de flujo. La presión y temperatura del recipiente de extracción se monitorean y controlan dentro de + 3 bar y ± 1°C. Se cargaron 5 gramos de polvo del fruto Lingzhi joven rojo molido con tamaño abajo de 105 µp? tamizado, medido usando una rejilla (malla 140) en recipientes de extracción de 100 mi para cada experimento. Se colocó lana de vidrio en los dos extremos de la columna para evitar cualquier posible arrastre del material sólido. El horno se precalienta a la temperatura deseada antes que se cargue el recipiente de empaquetado. Después el recipiente se conecta en el horno, se prueba el sistema de extracción para derramar por presurización el sistema con C02 (-850 psig) y se purgó. El sistema se cerró y se presurizó a la presión de extracción deseada usando la bomba de liquido que conduce aire. El sistema después se deja a equilibrio por ~3 min. Un vial de muestreo (40 mi) se pesa y conecta al puerto de muestreo. La extracción se inicia haciendo fluir CO2 a una velocidad de ~5 SLPM (10 g/min) , los cual se controla por una válvula de medidora. El rendimiento se definió por ser la relación de peso de los exactos totales al alimento del material crudo. El rendimiento se definió como el porcentaje en peso del aceite extraído con respecto a la carga inicial del material crudo en el extractor. Un diseño de extracción completa se adoptó variando la temperatura de 40-80°C y de 100-500 bar.

Ejemplo 2 Ejemplo de la Etapa 2: Extracción de Lixiviado de Etanol de la Fracción de Triterpeno Crudo Un ejemplo típico de una extracción de solvente de 3 etapas de los constituyentes químicos de triterpeno de especies de ganoderma es como sigue: La materia prima es 25 gm de residuo SFE del cuerpo del fruto de especies de ganoderma molido a partir de la extracción de SCC02 de la Etapa 1 del aceite esencial (40°C, 300 bar). El solvente es 500 mi de etanol. En este método, el material de materia prima y 500 mi de etanol son separadamente cargados en un recipiente de extracción de 100 mi y se mezcla en un baño de agua caliente a 70°C por 2 horas. La solución de extracción se filtró usando un papel filtro Fisherbrand P4 que tienen un tamaño de retención de partícula de 4-8 ym, se centrifugó a 2000 rmp por 10 minutos. Lo filtrado (sobrenadante) se colectó para cálculo de rendimiento y análisis CLAR. El residuo particulado de la Etapa 1 se extrajo por 2 horas (Etapa 2) y el residuo de la Etapa 2 se extrajo por 2 horas usando los métodos mencionados anteriormente. Los extractos del fluido sobrenadante de las extracciones de la etapa 3 se combinaron y el etanol se evaporó y se recicló usando evaporación rotatoria a presión reducida. El extracto se secó a vacío a 50°C por 12 horas. La fracción del extracto de triterpeno crudo seco se midió por balance de masa, contenido de triterpeno total usando un ensayo triterpenoide total y analizado usando CLAR. El residuo final de la extracción de3 etapas se colectó y conservó para extracción adicional (véase abajo) . El rendimiento total del extracto de triterpeno crudo del proceso de lixiviado de etanol de la etapa 3 es aproximadamente 3% en peso de masa en base a la materia prima de las especies de ganoderma original con una pureza de triterpenoide total de aproximadamente 20%. Para lograr mayor pureza de los constituyentes químicos de triterpeno, se requiere procesamiento adicional (véase, Ejemplo 3).

Ejemplo 3 Ejemplo de la Etapa 3. Purificación de la Fracción de Triterpeno . Un ejemplo experimental típico de purificación de los triterpenos en la fracción de lixiviado de etanol crudo es como sigue: 1 g de la fracción de triterpeno crudo de lixiviado de etanol de la Etapa 2 se disolvió en 50 mi de cloroformo y se agitó por 5 min, en un recipiente de extracción a temperatura ambiente. Esta solución clara se vertió en un embudo deparador de 200 mi. Se agregó 400 mi de solución acuosa de NaHC03 saturada (10%) a la solución de cloroformo. Esta mezcla se sacudió vigorosamente por 15 seg, se liberó la presión y se sacudió vigorosamente por una segunda vez por 15 segundos. Menos de 30 segundos del mezclado total es suficiente para permitir a los solutos llegar al equilibrio entre la fase de cloroformo y la fase de solución a base de agua. Se debe tomar especial cuidado para desfogar la presión como un volumen mayor de CO2 se produce durante este proceso. El embudo separado se deja reposar no perturbado hasta que las dos capas de solución llegan claramente a separarse (aproximadamente 30 min) . Después que la llave de paso del embudo separador es abierta, la capa inferior de cloroformo se drena en el matraz separador y se guarda para dos extracciones adicionales de solvente NaHC03. La solución a base de agua restante se vierte de la parte superior del embudo y se guarda. Se realizan dos etapas adicionales de NaHC03 extraído de la solución de cloroformo usando los mismos métodos. Se combinan las tres etapas de soluciones de extracto NaHC03 (120 mi) y se acidifican usando HC1 6N a un pH de 4 (aproximadamente 3 mi) . La solución acidificada se vierte en un embudo separador de 200 mi limpio. Se introduce 50 mi de cloroformo en el embudo deparador en dos etapas para extraer los compuestos de triterpeno a partir de la solución a base de agua acidificada. Los métodos son como se describen anteriormente a temperatura ambiente. Se colectan las dos capas de cloroformo, se combinan y se guardan. La solución a base de agua restante se desecha. La solución de cloroformo combinada que contiene los constituyentes químicos de triterpeno purificados se evaporan bajo presión reducida usando evaporación rotatoria y el cloroformo reciclado. La fracción de extracción de triterpeno purificado se seca en horno a 50°C removiendo el cloroformo restante. Se calcula el rendimiento por balance de masa, el contenido de triterpeno total usando un ensayo de espectrometría UV de triterpenoide total, y se analiza usando CLAR.

Ejemplo 4 Ejemplo de la Etapa 4: Extracción de la Fracción de Polisacárido Un ejemplo experimental típico de la extracción de solvente y precipitación de los constituyentes químicos de fracción de polisacárido purificada insoluble en etanol, soluble en agua, de especies de ganoderma es como sigue: La materia prima fue el residuo sólido de 25 mg de la extracción de la Etapa 1 SFE y extracción de lixiviación de etanol Etapa 2. La materia prima fue extraída usando 500 mi de agua destilada por dos horas a 70°C en dos etapas. Las dos soluciones de extracción fueron combinadas y la suspensión se filtró usando papel filtro Fisherbrand P4 (tamaño de poro 4-8 µp\) y se centrifugaron a 2, 000 rpm por 20 minutos. El sobrenadante se colectó. Se usó evaporación rotatoria para concentrar la solución de extracto de sobrenadante transparente a partir de 1000 mi a 200 mi. Después, se agregaron 600 u 800 mi de etanol anhidro para elaborar una concentración final de etanol de 60 u 80%. La solución se dejó reposar por 1 hora y se observó un precipitado. La solución de extracción se centrifugó a 2,000 rpm por 20 minutos y el sobrenadante se decantó y ya sea, se guardó para procesamiento adicional o se desechó. Se realizó balance de masa antes y después de la precipitación, para calcular el rendimiento de los polisacáridos y proteínas. Lo precipitado se colectó y se secó en un horno a 50°C por 12 horas. La fracción de polisacárido seca se pesó y disolvió en agua para análisis de polisacárido y pureza de proteina usando un método colormétrico con dextrano como estándar de referencia y el ensayo de proteina Bradford, respectivamente.

Ejemplo 5 Se mezclaron los siguientes ingredientes para la formulación Extracto de cuerpo de fruto de G. lucidum 150.0 mg Fracción de aceite esencial (10 mg, 6.6% en peso seco Fracción polifenólica (120 mg, 80% en peso seco) Polisacáridos (40 mg, 26.6% en peso seco) Esteviósido (Extracto de Estevia) 12.5 mg Carboximetilcelulosa 35.5 mg Lactosa 77.0 mg Total 275.0 mg El nuevo extracto de especies de ganoderma comprende una fracción de aceite esencial, fracción de triterpeno y fracción de polisacárido en % en peso de masa, mayor que aquella encontrada en el material de planta de especies de ganoderma naturales o productos de extracción convencional. Las formulaciones pueden ser elaboradas en cualquier forma de dosificación oral y administradas diariamente o a 15 veces por día, como sea necesario para los efectos fisiológicos, psicológicos y médicos (mejoramiento inmune, diabetes mellitus, agregación antiplaquetas y anti-trombosis , prevención y tratamiento de enfermedad cardiovascular y cerebrovascular, anti-aterosclerosis , anti-hipercolesterolemia , antihipertensión, anti-inflamatorias , anti-alérgicas , anti-artritis, anti-reumática , enfermedades anti-auto inmunes, anti-virales , que incluyen pero no se limitan al resfriado común, influenza, VIH, herpes simple, herpes zoster y hepatitis B, anti-bacteriana, prevención y terapia de cáncer) .

Ejemplo 6 Se mezclaron los siguientes ingredientes para la formulación Extracto de cuerpo de fruto de G. lucidum 150.0 mg Fracción de aceite esencial (30 mg, 20% en peso seco Fracción polifenólica (60 mg, 40% en peso seco) Polisacáridos (60 mg, 40% en peso seco) Vitamina C 15.0 mg Sucralosa 35.0 mg Polvo de Frijol Mung 10:1 50.0 mg Sabor moca 40.0 mg Sabor chocolate 10.0 mg Total 300.0 mg El nuevo extracto de especies de ganoderma comprende fracciones de constituyente químico de aceite esencial, triterpeno y polisacárido en % en peso de masa, mayor que aquella encontrada en el material de planta natural o productos de extracción convencional. La formulación puede ser elaborada en cualquier forma de dosificación oral y administrada diariamente hasta 15 veces por día, como sea necesario para los efectos fisiológicos, psicológicos y médicos deseados (Véase Ejemplo 1, anterior) .

REFERENCIAS CITADAS: 1. ang YY et al. Bioorg ed Chem 10:1057-1062, 2002. 2. Soné Y et al. Agrie Biol Chem 49:2641-2653, 1985. 3. Bao X et al. Carbohydr Res 336:127-140, 2001. 4. Bao X et al. Phyto chemistry 59:175-181, 2002. 5. Van Der Horn L et al. Transplantation 60:438- 443, 1995. 6. Miyasaka N et al. Biochem Biophy Res Commun 186:385-390, 1992. 7. Streeper RT & Satsangi N. SUPELCO 14:1-3, 1995. 8. Giner-Larza EM et al. J Ethnopharmacol 73:61-69, 2000. 9. achtel-Galor S et al. In: Herbal and Traditional Medicine. Molecular Aspects of Health (Packer L, Ong CN, Halliwell B, eds), Marcel Dekker, New York, 2004, pp 179-228. 10. Kohda H et al. Chem Pharm Bull 33:1367-1374, 1985. 11. Lee JM et al. Phytother Res 15:245-249, 2001. 12. Zhu M et al. Phytother Res 13:529-531, 1999. 13. Shimizu A et al. Chem Pharm Bull 33:3012-3015, 1985. 14. Su CY et al. Thromb Res 9:135-145, 2000. 15. Jong SC & Birmingham J . Adv Appl Microbiol 37:101-134, 1992. 16. Lee SY et al. Chem Pharm Bull 38:1359-1364, 1990. 17. Kammatsuse K et al. Yakugaku Zasshi 105:942- 947, 1985. 18. Komoda Y et al. Chem Pharm Bull 37:531-533, 1989. 19. Shieh YH et al. Am J Chin Med 29:501-507, 2001. 20. Park EJ et al. Biol Pharm Bull 20:417-420, 1997. 21. Eo SK et al. J Ethnopharmacol 68:129-136, 1999. 22. Kim YS et al. J Ethnopharmacol 72:451-458, 2000. 23. Oh KW et al. J Ethnopharmacol 72-221 -227, 2000. 24. El-Mekkawy S et al. Phyto chemistry 49:1651- 1657, 1998. 25. Nostro A et al. Lett Appl Microbiol 30:379- 384, 2000. 26. Wu BS et al. J Nat Prod 64:1121-1122, 2001, 27. Zhang QH et al. Int J Mushrooms 1 :207-215, 1999. 28. Lu H et al. Oncol Rep 8:1341-1345, 2001, 29. Bradford M. Anal. Biochem 72:248-254, 1976. 30. Dubois et al. Analytical Chem 28:350-356, 1956. 31. Pharmacopoeia of the People ' s Republic of China. Part II. The State Pharmacopoeia Committee of the People's Republic of China, Beijing Chemical Industry Press, 200.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiéndose descrito la presente se considera como novedad, y por lo tanto, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES 1. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque comprende una fracción que tiene un cromatograma de espectrometría de masas de Análisis Directo en Tiempo Real (DART), de cualquiera de las Figuras 6 a 29. 2. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el extracto comprende un compuesto seleccionado del grupo que consiste de un aceite esencial, un triterpeno, un polisacárido y combinaciones de los mismos. 3. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el aceite esencial se selecciona del grupo que consiste de ácido 9, 12-octadecadienoico, ácido linoelaídico, ácido n-hexadecanoico, ácido octanoico, ácido tetradecanoico, ácido pentadecanoico, ácido 9-octadecenoico, ácido octadecanoico, ácido 2-propenoico, trideciléster , 1-undecanol, 1-dodecanol, 1-tetradecanol , 1-hexadecanol , 1-heptadecanol , 1-eicosanol, y combinaciones de los mismos. 4. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el triterpeno se selecciona del grupo que consiste de ácido ganodérico, ácido lucidénico, ácido ganolucidico, ganoderiol, lucidona, lucidumol, ganodermenonol , ganodermadiol , ganodermatriol , ganodermanondiol, ganodermanontriol y combinaciones de los mismos. 5. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el polisacárido se selecciona del grupo que consiste de glucosa, arabinosa, galactosa, ramnosa, xilosa, ácido urónico y combinaciones de los mismos. 6. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad esencial de aceite es mayor que 8% en peso. 7. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad de aceite esencial es desde 25% hasta 90% en peso . 8. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad de aceite esencial es desde 50% hasta 90% en peso . 9. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad de aceite esencial es desde 75% hasta 90% en peso . 10. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad de triterpeno es mayor de 2% en peso. 11. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad de triterpeno es desde 25% hasta 90% en peso. 12. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad de triterpeno es desde 50% hasta 90% en peso. 13. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad de triterpeno es desde 75% hasta 90% en peso. 14. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad de polisacárido es mayor de 15% en peso. 15. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad de polisacárido es desde 25% hasta 90% en peso. 16. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad de polisacárido es desde 50% hasta 90% en peso. 17. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la cantidad de polisacárido es desde 75% hasta 90% en peso. 18. El extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el extracto comprende un aceite esencial desde 2% hasta 99% en peso, un triterpeno desde 5% hasta 88% en peso, y un polisacárido desde 2% hasta 95% en peso. 19. Alimento o medicamento, caracterizado porque comprende el extracto de especies de ganoderma de conformidad con la reivindicación 1. 20. Un método para preparar un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque tiene al menos una característica predeterminada que comprende extraer secuencialmente un material de planta de especies de ganoderma para proporcionar una fracción de aceite esencial, una fracción de triterpeno, y una fracción de polisacárido mediante a) extraer un materia de planta de especies de ganoderma por extracción de dióxido de carbono súper crítica para proporcionar una fracción de aceite esencial y un primer residuo; b) extraer el primer residuo de la etapa a) por extracción alcohólica para proporcionar la fracción de triterpeno y un segundo residuo; y c) extraer el segundo residuo de la etapa b) por extracción de agua y precipitar el polisacárido con alcohol para proporcionar la fracción de polisacárido . 21. El método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque la etapa a) comprende : 1) cargar en un recipiente de extracción, material de planta de especies de ganoderma molidas; 2) agregar dióxido de carbono bajo condiciones supercriticas ; 3) contactar el material de planta de especies de ganoderma y el dióxido de carbono por un tiempo; y 4) colectar una fracción de aceite esencial en un recipiente de colección. 22. El método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque además comprende la etapa de alterar las relaciones de compuesto químico de aceite esencial dividiendo la fracción de aceite esencial con un sistema de separación fraccional de dióxido de carbono supercrítico . 23. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque las condiciones supercriticas comprenden de 60 bars hasta 800 bars de presión hasta 35°C a 90°C. 24. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque las condiciones supercríticas comprenden de 60 bars hasta 500 bars de presión hasta 40°C a 80°C. 25. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el tiempo es 30 minutos hasta 2.5 horas. 26. El método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el tiempo es 1 hora . 27. El método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque la etapa b) comprende: 1) contactar el primer residuo de la etapa a) con un solvente alcohólico por un tiempo suficiente para extraer constituyentes químicos de triterpeno; 2) purificar los constituyentes químicos de triterpeno usando procesos de extracción de solvente líquido-líquido . 28. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque un solvente es cloroformo y el otro solvente es una solución acuosa saturada de NaHC03. 29. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque el solvente alcohólico es etanol. 30. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque la etapa 1) se realiza a 30°C hasta 100°C. 31. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque la etapa 1) se realiza a 60°C hasta 100°C. 32. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque el tiempo es 1-10 horas . 33. El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque el tiempo es 1-5 horas . 3 . El método de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado porque el tiempo es 2 horas . 35. El método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque la etapa c) comprende : 1) contactar ya sea material de planta de especies de ganoderma o el segundo residuo a partir de la etapa b) con agua, por un tiempo suficiente para extraer polisacáridos ; y 2) precipitar los polisacáridos a partir de la solución de agua por precipitación de alcohol. 36. El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque el agua está a 70°C hasta 90°C. 37. El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque el agua está a 80°C hasta 90°C. 38. El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque el tiempo es 1-5 horas . 39. El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque el tiempo es 2-4 horas . 40. El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque el tiempo es 2 horas . 41. El método de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado porque el alcohol es etanol . 42. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque se prepara por el método de conformidad con la reivindicación 20. 43. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque comprende ergosterol, ácido ganolucidico A de 25 a 35% en peso del ergosterol, ácido ganolucidico B de 10 a 20% en peso del ergosterol y ácido ganodérico H de 30 a 40% en peso del ergosterol. 44. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque comprende ácido ganodérico H y ácido ganolucídico A de 25 a 35% en peso del ácido ganodérico H. 45. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque comprende ácido ganodérico H, ácido lucidénico B de 5 a 15% en peso del ácido ganodérico H, ácidos lucidénicos A/N de 1 a 10% en peso del ácido ganodérico H, y ácido ganolucídico A de 25 a 45% en peso del ácido ganodérico H. 46. Un extracto de especies de ganoderma caracterizado porque comprende ácido ganodérico H y ganoderal de 5 a 15% en peso del ácido ganodérico H. 47. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque comprende ácido ganodérico H, ácido ganolucídico A de 35 a 45% en peso del ácido ganodérico H, ácido ganolucídico B de 10 a 20% en peso del ácido ganodérico H, y cerevisterol de 30 a 40% en peso del ácido ganodérico H. 48. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque comprende ácido ganodérico H, ácido ganolucídico B de 10 a 20% en peso del ácido ganodérico H, y ganoderal de 5 a 15% en peso del ácido ganodérico H. 49. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque comprende ácido ganodérico H, ácido ganolucídico B de 10 a 20% en peso del ácido ganodérico H, metoxicerevisterol de 20 a 30% en peso del ácido ganodérico H, y cerevisterol de 20 a 20% en peso del ácido ganodérico H. 50. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque comprende ergosterol, ácido ganolucidico A de 30 a 40% en peso del ergosterol, ácido ganolucidico B de 5 a 15% en peso del ergosterol, y ácido ganodérico H de 65 a 75% en peso del ergosterol. 51. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque comprende ácido ganodérico H, ácido ganolucidico B de 30 a 40% en peso del ácido ganodérico H, metoxicerevisterol de 40 a 50% en peso del ácido ganodérico H y cerevisterol de 35 a 45% en peso del ácido ganodérico H. 52. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque comprende ergosterol, ácidos ganolucidicos A/B de 1 a 10% en peso del ergosterol, ganoderiol F de 1 a 10% en peso del ergosterol, y lanosterol de 50 a 60% en peso del ergosterol. 53. Un extracto de especies de ganoderma, caracterizado porque comprende ácido ganodérico H, ácido ganolucidico A de 60 a 70% en peso del ácido ganodérico H, ácido ganolucidico B de 25 a 35% en peso del ácido ganodérico H, y ácidos lucidénicos A/N de 10 a 20% en peso del ácido ganodérico H.