MX2008011128A

MX2008011128A - Compuestos de n-formil-hidroxilamina.

Info

Publication number: MX2008011128A
Application number: MX2008011128A
Authority: MX
Inventors: Kwangho Lee; Jennifer Leeds
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2006-03-03
Filing date: 2007-03-02
Publication date: 2008-09-08
Also published as: GT200800170A; BRPI0708524A2; ECSP088712A; KR20080095895A; TNSN08344A1; WO2007106670A3; WO2007106670A2; CA2643267A1; MA30285B1; US20090062537A1; NO20084069L; CN101395148A; JP2009529008A; RU2008139192A; AU2007226715A1; ZA200807054B; CR10251A; EP1994027A2; IL193524A0

Abstract

Se dan a conocer novedosos compuestos de N-formil-hidroxilamina y sus derivados. Estos compuestos de N-formil-hidroxilamina inhiben la peptidil-desformilasa (PDF), una enzima presente en los procariotes. Los compuestos son útiles como antimicrobianos y antibióticos. Los compuestos de la invención exhiben una inhibición selectiva de la peptidil-desformilasa contra otras metaloproteinasas, tales como MMPs. También se dan a conocer métodos de preparación y uso de los compuestos.

Description

COMPUESTOS DE N-FORMIL-HIDROXILAMIN A Esta invención se refiere a novedosos compuestos de N-formil-hidroxilamina, a los usos de estos compuestos en diferentes aplicaciones medicinales, incluyendo el tratamiento de trastornos susceptibles al tratamiento mediante inhibidores de peptidil-desformilasa, tal como el tratamiento de infecciones bacterianas, y a composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos. El tratamiento de infección microbiana en los organismos huésped requiere de un medio efectivo para matar al microbio mientras que haga tan poco daño al huésped como sea posible. De conformidad con lo anterior, los agentes que tengan características únicas para un microorganismo causante de la patología, son deseables para el tratamiento. La desformilasa peptídica es una metaloproteinasa que se encuentra en los organismos procarióticos, tales como bacterias. La síntesis de proteína en los organismos procarióticos empieza con la N-formil-metionina (fMet). Después de iniciarse la síntesis de proteína, se remueve el grupo formilo mediante la enzima de peptidil-desformilasa (PDF); esta actividad es esencial para la maduración de las proteínas. Las metaloproteinasas son críticas para muchos aspectos del metabolismo normal. Se han implicado trastornos que involucran a las metaloproteinasas en varias enfermedades tales como cáncer, artritis, y enfermedades autoinmunes. Debido a la importancia de las MMPs en los procesos fisiológicos normales, sería preferible desarrollar agentes que inhiban la PDF, mientras que eviten una inhibición significativa de las MMPs. De una manera alternativa, los inhibidores de PDF que también inhiban las MMPs pueden ser útiles cuando los beneficios terapéuticos de inhibir la PDF sobrepasen al riesgo de los efectos secundarios por la inhibición de MMP. La investigación sobre los inhibidores de PDF es mucho menos extensa que aquélla para los inhibidores de MMPs. Los derivados de N-formil-hidroxilamina se describen en las Solicitudes Internacionales de Patentes Números WO 99/39704 y WO 02/102790. En vista de la importancia de identificar nuevos antibióticos para tratar las bacterias resistentes a los antibióticos existentes, es deseable desarrollar inhibidores novedosos de PDF para su evaluación y uso como agentes antibacterianos y antimicrobianos. La presente invención satisface esta necesidad. En particular, la presente invención proporciona derivados de N-formil-hidroxilamina referidos en la presente de una manera colectiva como los "compuestos de la invención", una sal de los mismos, o un pro-fármaco de los mismos, por ejemplo, un compuesto de la Fórmula (I): (I) en donde R1 es hidrógeno, alquilo, heteroalquilo, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo; R3 es hidrógeno, halógeno, o alcoxilo; y R4 es arilo o heteroarilo; o n es de 0 a 3; una sal del mismo, o un pro-fármaco del mismo. En un aspecto, R es un heteroarilo de la Fórmula (II): en donde cada uno de R6, R7, R8, y Rg es independientemente hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, fenilo, halógeno, hidroxilo, o alcoxilo, por ejemplo en donde: a) R6 y Re son hidrógeno, R9 es hidrógeno o alquilo, y R7 es alquilo, alquilo sustituido o fenilo; b) R6, R7, y R9 son hidrógeno, y R8 es halógeno, alquilo, o alquilo sustituido; c) R7, Re, y R9 son hidrógeno, y R6 es hidroxilo. En un aspecto particularmente útil, el heteroarilo es de la Fórmula (11.1): en donde R6, R7, y Rg son como se definen anteriormente la Fórmula (II), y R8 es halógeno, por ejemplo flúor. En todavía otro aspecto, R4 es de la Fórmula (11.2): (11.2) en donde R6, R7, y Re son como se definen anteriormente la Fórmula (II) anterior. En todavía otro aspecto, R4 es de la Fórmula (11.3): (11.3) en donde R6, R7, y R8 son como se definen anteriormente para la Fórmula (II). En todavía otro aspecto, R4 es de la Fórmula (11.4): (11.4) en donde R6, R7, y Re son como se definen anteriormente la Fórmula (II). En todavía otro aspecto, R4 es de la Fórmula (11.5): (11.5) en donde R6, R7, y Re son como se definen anteriormente para la Fórmula (II). En otro aspecto, R4 es un heteroarilo de la Fórmula (III): d) en donde R6, R7, Re, y R9 son como se definen anteriormente en la Fórmula (II). A menos que se informe de otra manera, los siguientes términos, como se utilizan en la memoria descriptiva, tienen los siguientes significados. El término "cicloalcano" o "cicloalquilo" contiene de 3 a 7 átomos de carbono del anillo, y es de preferencia ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, y ciclohexilo. El término "grupo al if ático" se refiere a los grupos alifáticos saturados o insaturados, tales como alquilo, alquenilo, o alquinilo, cicloalquilo o alquilo sustituido, incluyendo los grupos de cadena recta, de cadena ramificada, y cíclicos que tienen de 1 a 10 átomos de carbono. El término "alquilo" o "alk", siempre que se presente, es un grupo alifático saturado de cadena recta o ramificada de 1 a 10 átomos de carbono, o un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono, más preferiblemente los grupos alquilo son alquilo de 1 a 7 átomos de carbono, en particular alquilo de 1 a 4 átomos de carbono. Los ejemplos de "alquilo" o "alk" incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, propilo normal, isopropilo, butilo normal, isobutilo, butilo secundario, butilo terciario, pentilo normal, neopentilo, hexilo normal o heptilo normal, ciclopropilo, y en especial butilo normal. El término "alquilo sustituido" se refiere a un grupo alquilo que está sustituido con uno o más sustituyentes, de preferencia con 1 a 3 sustituyentes, incluyendo, pero no limitándose a, sustituyentes tales como halógeno, alcoxilo inferior, hidroxilo, mercapto, carboxilo, cicloalquilo, arilo, heteroarilo, y similares. Los ejemplos de los grupos alquilo sustituido incluyen, pero no se limitan a, -CF3, -CF2CF3, hidroxi-metilo, 1- ó 2-hidroxi-etilo, metoxi-metilo, 1 -ó 2-etoxi-etilo, carboxi-metilo, 1- ó 2-carboxi-etilo, y similares. El término "arilo" o "Ar" se refiere a un grupo carbocíclico aromático de 6 a 14 átomos de carbono que tiene un solo anillo (incluyendo, pero no limitándose a, los grupos tales como fenilo), o múltiples anillos condensados (incluyendo, pero no limitándose a, los grupos tales como naftilo o antrilo), y es en especial fenilo. El término "heteroarilo" o "HetAr" se refiere a un heterociclo aromático monocíclico de 4 a 7 miembros o a un biciclo que está compuesto de un heterociclo aromático monocíclico de 4 a 7 miembros y un anillo de benceno fusionado encima. El heteroarilo tiene cuando menos un heteroátomo, de preferencia cuando menos dos heteroátomos, incluyendo, pero no limitándose a, heteroátomos tales como N, O, y S, dentro del anillo. Una fracción de heteroarilo preferida es un heterociclo monocíclico de 6 miembros que tiene 2, 3, ó 4 heteroátomos de nitrógeno en el anillo. Los ejemplos de los grupos heteroarilo son piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, N-óxido de piridazinilo, o benzodioxolanilo, triazina, o tetrazinas. El arilo o heteroarilo puede estar insustituido o sustituido por uno o más sustituyentes, incluyendo, pero no limitándose a, alquilo de 1 a 7 átomos de carbono, en particular alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, tal como metilo, hidroxilo, alcoxilo, acilo, aciloxilo, SCN, ciano, nitro, tioalcoxilo, fenilo, heteroalquil-arilo, alquil-sulfonilo, halógeno, y formilo. El término "heteroalquilo" se refiere a alquilo de 1 a 8 átomos de carbono saturado o insaturado como se define anteriormente, y en especial a heteroalquilo de 1 a 4 átomos de carbono que contiene uno o más heteroátomos, como parte de las cadenas principales, ramificadas, o cíclicas del grupo. Los heteroátomos se pueden seleccionar independientemente a partir del grupo que consiste en -NR-, en donde R es hidrógeno o alquilo, -S-, -O-, y -P-; de preferencia -NR-, en donde R es hidrógeno o alquilo, y/u -O-. Los grupos heteroalquilo pueden estar unidos al resto de la molécula ya sea en un heteroátomo (si está disponible una valencia), o bien en un átomo de carbono. Los ejemplos de los grupos heteroalquilo incluyen, pero no se limitan a, los grupos tales como -0-CH3, -CH2-0-CH3, -CH2-CH2-0-CH3, -S-CH2-CH2-CH3, -CH2-CH(CH3)-S-CH3, y -CH2-CH2-NH-CH2-CH2-. El grupo heteroalquilo puede estar insustituido o sustituido con uno o más sustituyentes, de preferencia con 1 a 3 sustituyentes, incluyendo, pero no limitándose a, alquilo, halógeno, alcoxilo, hidroxilo, mercapto, carboxilo, y en especial fenilo. Los heteroátomos, así como los átomos de carbono del grupo, pueden estar sustituidos. Los heteroátomos también pueden estar en una forma oxidada. El término "alcoxilo", como se utiliza en la presente, se refiere a un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono enlazado con un átomo de oxígeno, o de preferencia alcoxilo de 1 a 7 átomos de carbono, más preferiblemente alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono. Los ejemplos de los grupos alcoxilo incluyen, pero no se limitan a, los grupos tales como metoxilo, etoxilo, butoxilo normal, butoxilo terciario, y aliloxilo. El término "halógeno" o "halo", como se utiliza en la presente, se refiere a cloro, bromo, flúor, yodo, y es en especial flúor. Un "grupo protector" se refiere a un grupo químico que exhibe las siguientes características: 1) reacciona selectivamente con la funcionalidad deseada en un buen rendimiento para dar un sustrato protegido que es estable a las reacciones proyectadas para las cuales se desea protección; 2) se puede remover selectivamente del sustrato protegido para proporcionar la funcionalidad deseada; y 3) se puede remover en un buen rendimiento mediante reactivos compatibles con los otros grupos funcionales presentes o generados en estas reacciones proyectadas. Los ejemplos de los grupos protectores adecuados se pueden encontrar en Greene y colaboradores, "Protective Groups in Organic Synthesis", 2a Edición, John Wiley & Sons, Inc., Nueva York (1991). Los grupos protectores de amino preferidos incluyen, pero no se limitan a, benciloxi-carbonilo (CBz), terbutiloxi-carbonilo (Boc), terbutil-dimetil-sililo (TBDMS), 9-fluorenil-metiloxi-carbonilo (Fmoc), o los grupos protectores fotolábiles adecuados tales como 6-nitro-veratriloxi-carbonilo (Nvoc), nitropiperonilo, pirenil-metoxi-carbonilo, nitrobencilo, dimetil-dimetoxi-bencilo, 5-bromo-7-nitro-indolinilo, y similares. Los grupos protectores de hidroxilo preferidos incluyen Fmoc, TBDMS, los grupos protectores fotolábiles (tales como nitroveratriloxi-metil-éter (Nvom)), Mom (metoxi-metil-éter), y Mem (metoxi-etoxi-metil-éter). Los grupos protectores particularmente preferidos incluyen NPEOC (4-nitro-fenetiloxi-carbonilo) y NPEOM (4-nitro-fenetiloxi-metiloxi-carbonilo). Se apreciará que los compuestos de la Fórmula (I) pueden existir en la forma de isómeros ópticos, racematos, o diaestereoisómeros. Por ejemplo, un compuesto de la Fórmula (I) en donde R3 puede estar en la configuración R ó S. Se debe entender que la presente invención abarca todos los enantiómeros y sus mezclas. Se aplican consideraciones similares en relación con los materiales de partida que exhiban átomos de carbono asimétricos, como se mencionan. Los compuestos de la invención pueden existir en la forma de sales cristalinas sólidas. De una manera preferible, las sales cristalinas son sales de metales, de preferencia de metales divalentes, aunque, para algunos compuestos, es posible formar sólidos cristalinos utilizando contra-iones monovalentes, tales como Na. El contra-ión es de preferencia Mg, Ca, ó Zn. Los compuestos de la invención típicamente pueden estar en la forma de un hidrato o de un solvato/hidrato mixto. Típicamente, la sal cristalina de la invención contiene de aproximadamente 2 a 8 aguas de hidratación, más típicamente de aproximadamente 2 a 6 aguas de hidratación, y todavía más típicamente de aproximadamente 2 a 4 aguas de hidratación. Por consiguiente, la sal cristalina de la invención típicamente comprende más del 2 por ciento de agua, más típicamente de aproximadamente el 4 a aproximadamente el 12 por ciento de agua, y todavía más típicamente de aproximadamente el 8 a aproximadamente el 9 por ciento de agua. Los solvatos pueden ser de uno o más solventes orgánicos, tales como alcoholes de alquilo inferior, tales como metanol, etanol, isopropanol, butanol, o mezclas de los mismos. Los compuestos de la invención, por ejemplo los compuestos de la Fórmula (I), pueden existir en forma libre o en forma de sal, por ejemplo en la forma de una sal farmacéuticamente aceptable. Una "sal farmacéuticamente aceptable" de un compuesto significa una sal fisiológicamente y farmacéuticamente aceptable que posea la actividad farmacológica deseada del compuesto progenitor, y que no imparta efectos toxicológicos indeseados. Estas sales incluyen: (1) sales de adición de ácido, formadas con ácidos inorgánicos, tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, y similares; o formadas con ácidos orgánicos, tales como ácido acético, ácido propiónico, ácido hexanoico, ácido ciclopentan-propiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido 3-(4-hidroxi-benzoil)-benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido metan-sulfónico, ácido etan-sulfónico, ácido 1,2-etan-disulfónico, ácido 1 ,2-hidroxi-etan-sulfónico, ácido bencen-sulfónico, ácido 4-cloro-bencen-sulfónico, ácido 2-naftalen-sulfónico, ácido 4-toluen-sulfónico, ácido canfor-sulfónico, ácido 3-fenil-propiónico, ácido trimetil-acético, ácido butilo terciario-acético, ácido lauril-sulfúrico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido hidroxi-naftoico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido mucónico, y similares; o (2) sales formadas cuando un protón ácido presente en el compuesto progenitor es reemplazado por un ión de metal, por ejemplo un ión de metal alcalino, un ión alcalinotérreo, o un ión de aluminio; o bien se coordina con una base orgánica, tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, trometamina, N-metil-glucamina, y similares. Un compuesto de la invención, por ejemplo los compuestos de la Fórmula (I), puede actuar como un pro-fármaco. "Pro-fármaco" significa cualquier compuesto que libere un fármaco progenitor activo de acuerdo con la Fórmula (I) in vivo, cuando se administre este pro- fármaco a un sujeto mamífero. Los pro-fármacos de un compuesto de la Fórmula (I) se preparan mediante la modificación de los grupos funcionales presentes en el compuesto de la Fórmula (I), de tal manera que las modificaciones se puedan disociar in vivo para liberar el compuesto progenitor. Los pro-fármacos incluyen los compuestos de la Fórmula (I), en donde un grupo hidroxilo, amino, o sulfhidrilo se enlaza con cualquier grupo que se pueda disociar in vivo para regenerar el grupo hidroxilo, amino, o sulfhidrilo libre, respectivamente. Los ejemplos de los pro-fármacos incluyen, pero no se limitan a, esteres (por ejemplo, derivados de acetato, formato, y benzoato), carbamatos (por ejemplo, ?,?-dimetM-amino-carbonilo) de grupos funcionales de hidroxilo en los compuestos de la Fórmula (I), y similares. En los compuestos de la Fórmula (I), se prefieren los siguientes significados individualmente o en cualquier sub-combinación: (1) R4 es un heteroarilo de la Fórmula (11.1), en donde R6, R7, y R9 son hidrógeno, y R8 es flúor; R6, R7, y R9 son hidrógeno y R8 es metilo o trifluoro-metilo; o R6, R7, y Rs son hidrógeno y R9 es flúor; o R6. Re. y R9 son hidrógeno y R7 es etilo o metoxilo; o R7, R8, y R9 son hidrógeno, y R6 es hidroxilo; o R7 y R8 son hidrógeno, R6 es metoxilo, y R9 es metilo; o R4 es un heteroarilo de la Fórmula (II.2), en donde R6, R7, y R8 son hidrógeno, o R4 es un heteroarilo de la Fórmula (II.3), en donde R6, R7, y R8 son hidrógeno; o R4 es un heteroarilo de la Fórmula (II.4), en donde R6, R7, y R8 son hidrógeno; o R4 es un heteroarilo de la Fórmula (II.5), en donde R6, R7, y R8 son hidrógeno. 2. R, es alquilo, de preferencia butilo normal, o cicloalquilo, de preferencia cicloalquilo de 3a 7 átomos de carbono, tal como ciclohexilo, ciclopropilo, o ciclopentilo. 3. R3 es halógeno, de preferencia flúor. Utilidad Los compuestos de la presente invención se pueden utilizar para el tratamiento o la prevención de trastornos infecciosos ocasionados por una variedad de organismos bacterianos o procarióticos. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, bacterias aeróbicas y anaeróbicas gram-positivas y gram-negativas, incluyendo Staphylococci, por ejemplo, S. aureus y S. epidermidis; Enterococci, por ejemplo, E faecalis y E. faecium; Streptococci, por ejemplo, S. pneumoniae; Haemophilus, por ejemplo, H. influenza; Moraxella, por ejemplo, M. catarrhalis; y Escherichia, por ejemplo, E. coli. Otros ejemplos incluyen Mycobacteria, por ejemplo, M. tuberculosis; microbios intercelulares, por ejemplo, Chlamydia y Rickettsiae; y Mycoplasma, por ejemplo, M. pneumoniae; y Pseudomonas, por ejemplo, P. aeruginosa; H. pylori; y parásitos, por ejemplo, Plasmodium falciparum. Los compuestos de la presente invención de preferencia tienen una mejora sustancial en la eficacia microbiológica contra las bacterias gram-positivas o gram-negativas. De una manera específica, los compuestos de la presente invención tienen una mejora significativa en su espectro de actividad microbiológica, al tener una mejor inhibición de las bacterias gram-negativas y/o gram- positivas, tales como H. influenza y S. pneumoniae. Por ejemplo, cuando, en un ejemplo, el índice comparativo promedio (ACI) es mayor de 3 pasos de dilución para la mejor inhibición de H. influenza, y adicionalmente muestra un ACI de 0.4 pasos de dilución para la mejor inhibición de S. pneumonía. En otro ejemplo, el ACI es de3 pasos de dilución para la mejor inhibición de S. pneumonía, y adicionalmente muestra un ACI de 1.2 pasos de dilución para la mejor inhibición de H. influenza. Los compuestos de la invención también tienen de preferencia una mejor seguridad, toxicidad, y propiedades farmacocinéticas, por ejemplo, una disminución o eliminación de los eventos adversos potenciales en seres humanos en relación con los compuestos de la técnica anterior. En un aspecto, se proporcionan composiciones para el tratamiento o la prevención de trastornos infecciosos, los cuales comprenden un compuesto de la invención, una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un pro-fármaco del mismo, como se da a conocer en la presente, en combinación con un vehículo farmacéuticamente aceptable. En otra modalidad, estas composiciones incluyen además otro agente terapéutico. En otro aspecto, se proporciona una cantidad de dosificación de un compuesto de la invención, una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un pro-fármaco del mismo, como se da a conocer en la presente, en una cantidad efectiva para el tratamiento, la prevención, o el alivio de un trastorno, tal como un trastorno infeccioso. Estos compuestos o derivados de los mismos se pueden rastrear para determinar su actividad contra diferentes agentes microbianos, y las dosificaciones apropiadas se pueden determinar empleando los métodos disponibles en este campo. Los compuestos de la invención se pueden utilizar para tratar a un sujeto con el fin de tratar, prevenir, o reducir la severidad de una infección. Los sujetos incluyen animales, plantas, productos sanguíneos, cultivos, y superficies tales como aquéllas del equipo médico o de investigación, tales como vidrio, agujas, equipo quirúrgico y tubería, y los objetos pretendidos para implantarse temporalmente o de una manera permanente en un organismo. Los animales preferidos incluyen mamíferos, por ejemplo ratones, ratas, gatos, perros, vacas, ovejas, cerdos, caballos, puercos, primates, tales como monos Rhesus, chimpancés, gorilas, y más preferiblemente seres humanos. El tratamiento de un sujeto incluye, pero no se limita a, la prevención, reducción, o eliminación de los síntomas clínicos ocasionados por una infección de un sujeto por un microorganismo; la prevención, reducción, o eliminación de una infección de un sujeto por un microorganismo; o la prevención, reducción, o eliminación de la contaminación de un sujeto por un microorganismo. El microorganismo involucrado es de preferencia un procariote, y más preferiblemente una bacteria. En un aspecto, se proporcionan métodos para el tratamiento o la prevención de un trastorno infeccioso en un sujeto, tal como un ser humano u otro sujeto animal, que responda a la inhibición de la peptidil-desformilasa, mediante la administración al sujeto de una cantidad inhibidora efectiva de peptidil-desformilasa de un compuesto de la invención, una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un pro-fármaco del mismo. En una modalidad, el compuesto o su derivado se administra en una forma farmacéuticamente aceptable, opcionalmente en un vehículo farmacéuticamente aceptable. El compuesto de la invención, la sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o el pro-fármaco del mismo, se puede administrar solo o en combinación con otro agente terapéutico. Los ejemplos de estos agentes terapéuticos incluyen, pero no se limitan a, ß-lactama, quinolona, macrólido, glicopéptido, y oxazolidinona. Como se utiliza en la presente, un "trastorno infeccioso" es cualquier trastorno caracterizado por la presencia de una infección microbiana, tal como la presencia de bacterias. Estos trastornos infecciosos incluyen, por ejemplo, infecciones del sistema nervioso central, infecciones del oído externo, infecciones del oído medio, tales como otitis media aguda, infecciones de los senos craneales, infecciones de los ojos, infecciones de la cavidad oral, tales como infecciones de los dientes, de las encías, y de la mucosa; infecciones del tracto respiratorio superior, infecciones del tracto respiratorio inferior, infecciones genitourinarias, infecciones gastrointestinales, infecciones ginecológicas, septicemia, infecciones de los huesos y de las articulaciones, infecciones de la piel y de la estructura de la piel, endocarditis bacteriana, quemaduras, profilaxis antibacteriana de cirugía, profilaxis antibacteriana en los pacientes ¡nmunosuprimidos, tales como los pacientes que reciban quimioterapia de cáncer, o pacientes de trasplante de órganos, y enfermedades crónicas ocasionadas por organismos infecciosos, por ejemplo arterioesclerosis. Los compuestos y las composiciones que comprenden a los compuestos se pueden administrar por vías tales como tópicamente, localmente, o sistémicamente. La aplicación sistémica incluye cualquier método de introducción del compuesto en los tejidos del cuerpo, por ejemplo la administración intratecal, epidural, intramuscular, transdérmica, intravenosa, intraperitoneal, subcutánea, sublingual, nasal, vaginal, rectal, y oral. La dosificación específica del antimicrobiano que se vaya a administrar, así como la duración del tratamiento, se pueden ajustar como sea necesario. En otro aspecto de la presente invención, se proporcionan métodos para inhibir la peptidil-desformilasa. En una modalidad, el método comprende administrar a un sujeto que lo necesite, una cantidad inhibidora de peptidil-desformilasa efectiva de un compuesto de la Fórmula (I), una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un pro-fármaco del mismo. Los términos "sujeto" y "cantidad inhibidora de peptidil-desformilasa efectiva", son como se definen anteriormente. En todavía otro aspecto de la invención, se proporciona también el uso de un compuesto de la Fórmula (I) como se define anteriormente, una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un pro-fármaco del mismo, en la preparación de un medicamento para utilizarse en el tratamiento de las enfermedades mediadas por la peptidil-desformilasa. Administración y Composición Farmacéutica La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de N-formil-hidroxilamina bioactivo, una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o un pro-fármaco del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Las composiciones de la invención incluyen aquéllas en una forma adaptada para uso oral, tópico, o parenteral, y se pueden utilizar para el tratamiento de infección bacteriana en un sujeto, tal como animales, de preferencia mamíferos, más preferiblemente seres humanos. Las composiciones farmacéuticas pueden incluir además otro agente terapéutico, como se describe más adelante. Los compuestos antibióticos, también referidos en la presente como compuestos antimicrobianos, de acuerdo con la invención, se pueden formular para su administración de cualquier manera conveniente para utilizarse en medicina humana o veterinaria, por analogía con otros antibióticos. Estos métodos son conocidos en la materia (véase, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, Easton, PA: Mack Publishing Co.), y no se describen con detalle en la presente. La composición se puede formular para su administración por cualquier vía conocida en este campo, tal como subdérmica, por inhalación, oral, tópica, o parenteral. Las composiciones pueden estar en cualquier forma conocida en la técnica, incluyendo, pero no limitándose a, tabletas, cápsulas, obleas, fusiones rápidas (sin obleas), polvos, gránulos, grageas, cremas, o preparaciones líquidas, tales como soluciones o suspensiones orales o parenterales estériles. Los compuestos también se pueden administrar en formulaciones liposomales, micelares, o en microemulsión. Los compuestos también se pueden administrar como pro-fármacos, en donde el pro-fármaco administrado sufre una biotransformación en el mamífero tratado, hasta una forma que es biológicamente activa. Las formulaciones tópicas de la presente invención se pueden presentar, por ejemplo, como ungüentos, cremas o lociones, soluciones, bálsamos, emulsiones, emplastes, ungüentos para los ojos, y gotas para los ojos y para los oídos, parches impregnados, parches transdérmicos, rocíos y aerosoles, y pueden contener aditivos convencionales apropiados, tales como conservadores, solventes para ayudar a la penetración del fármaco, y emolientes en los ungüentos y cremas. Las formulaciones también pueden contener vehículos convencionales compatibles, tales como bases para cremas o ungüentos, y etanol o alcohol oleílico para las lociones. Estos vehículos pueden estar presentes, por ejemplo, de aproximadamente el 1 por ciento hasta aproximadamente el 99 por ciento de la formulación. Por ejemplo, pueden formar hasta aproximadamente el 80 por ciento de la formulación. Las tabletas y cápsulas para administración oral pueden estar en una forma de presentación en dosis unitaria, y pueden contener excipientes convencionales, tales como agentes aglutinantes, por ejemplo jarabe, acacia, gelatina, sorbitol, tragacanto, o poli vi n i I -pirrolidona; rellenos, por ejemplo lactosa, azúcar, almidón de maíz, fosfato de calcio, sorbitol, o glicina; lubricantes de formación de tabletas, por ejemplo estearato de magnesio, talco, polietilenglicol, o sílice; desintegrantes, por ejemplo almidón de papa; o agentes humectantes aceptables, tales como lauril-sulfato de sodio. Las tabletas se pueden recubrir de acuerdo con los métodos bien conocidos en la práctica farmacéutica estándar. Las preparaciones líquidas orales pueden estar en la forma, por ejemplo, de suspensiones, soluciones, emulsiones, jarabes, o elíxires acuosos u oleosos, o se pueden presentar como un producto seco para reconstituirse con agua o con otro vehículo adecuado antes de usarse. Estas preparaciones líquidas pueden contener aditivos convencionales, tales como agentes de suspensión, por ejemplo sorbitol, metil-celulosa, jarabe de glucosa, gelatina, hidroxi-etil-celulosa, carboxi-metil-celulosa, gel de estearato de aluminio, o grasas comestibles hidrogenadas; agentes emulsionantes, por ejemplo lecitina, mono-oleato de sorbitán, o acacia; vehículos no acuosos (los cuales pueden incluir aceites comestibles), por ejemplo, aceite de almendra, ésteres oleosos, tales como glicerina, propilenglicol, o alcohol etílico; conservadores, por ejemplo p-hidroxi-benzoato de metilo o de propilo, o ácido sórbico, y si se desea, agentes saborizantes o colorantes convencionales. Para la administración parenteral, las formas de dosificación unitaria fluidas se preparan utilizando el compuesto y un vehículo estéril, prefiriéndose agua. El compuesto, dependiendo del vehículo y de la concentración utilizada, se puede suspender o disolver en el vehículo o en otro solvente adecuado. En la preparación de soluciones, el compuesto se puede disolver en agua para inyección, y se puede esterilizar con filtro antes de rellenarse en un frasco o ampolleta adecuada, y de sellarse. De una manera conveniente, en el vehículo se pueden disolver agentes tales como un conservador de anestésico local, y agentes reguladores del pH. Con el objeto de mejorar la estabilidad, la composición se puede congelar después de rellenarse en el frasco y de remover el agua al vacío. Entonces el polvo liofilizado seco se sella en el frasco, y se puede suministrar un frasco acompañante de agua para inyección con el fin de reconstituir el líquido antes de usarse. Las suspensiones parenterales se preparan sustancialmente de la misma manera, excepto que el compuesto se suspende en el vehículo en lugar de disolverse, y la esterilización no se puede llevar a cabo mediante filtración. El compuesto se puede esterilizar mediante su exposición a óxido de etileno antes de suspenderse en el vehículo estéril. De una manera conveniente, se incluye un tensoactivo o agente humectante en la composición para facilitar la distribución uniforme del compuesto. Las composiciones pueden contener, por ejemplo, de aproximadamente el 0.1 por ciento en peso a aproximadamente el 99 por ciento en peso, por ejemplo de aproximadamente el 10 al 60 por ciento en peso del material activo, dependiendo del método de administración. Cuando las composiciones comprenden unidades de dosificación, cada unidad contendrá, por ejemplo, de aproximadamente 1 a 1,000 miligramos del ingrediente activo. La dosificación, como se emplea para el tratamiento de seres humanos adultos, estará en el intervalo, por ejemplo, de aproximadamente 1 a 3,000 miligramos al día, por ejemplo de 1,500 miligramos al día, dependiendo de la vía y frecuencia de administración. Esta dosificación corresponde a de aproximadamente 0.015 a 50 miligramos/kilogramo al día. Adecuadamente, por ejemplo, la dosificación es de aproximadamente 5 a 20 miligramos/kilogramo al día. Las formulaciones farmacéuticas representativas que contienen un compuesto de la Fórmula I se describen en seguida. La presente invención también proporciona un proceso para la preparación de un compuesto de la invención, por ejemplo un compuesto de la Fórmula (I), cuyo proceso comprende hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula (V): en donde y R2 son como se definen anteriormente, e Y es un grupo protector de hidroxilo, o un derivado funcional del mismo, con un compuesto de la Fórmula (VI): (VI) en donde R3 y R4 son como se definen anteriormente, y n es igual a 1, y cuando se requiera, convertir los compuestos resultantes obtenidos en forma libre hasta las formas de sal, o viceversa. Los derivados funcionales de los compuestos de la Fórmula (V) incluyen, por ejemplo, cloruro de ácido, anhídrido de ácido, o un éster activado. Las reacciones anteriores se pueden llevar a cabo de acuerdo con los métodos conocidos en la técnica, o como se da a conocer en los Ejemplos que se encuentran más adelante. La reacción convenientemente se puede llevar a cabo en la presencia de una base, y luego es seguida por hidrogenación, de preferencia en la presencia de un catalizador de hidrogenación. Las bases adecuadas incluyen, por ejemplo, base de Hunig (es decir, di-isopropil-etil-amina), y bases inorgánicas, tales como bicarbonato de sodio. El catalizador de hidrogenación, de preferencia un catalizador de paladio, por ejemplo paladio sobre carbón o negro de paladio, se puede agregar entonces al producto resultante, por ejemplo, después de la concentración, y se agita bajo una atmósfera de hidrógeno, por ejemplo, durante aproximadamente 16 a aproximadamente 24 horas. El catalizador de paladio se puede agregar de preferencia de aproximadamente el 5 por ciento molar a aproximadamente el 10 por ciento molar del producto concentrado. Los compuestos de la Fórmula (V), utilizados como materiales de partida, se pueden preparar, por ejemplo, mediante la reacción de un compuesto de la Fórmula (VII): (VII) en donde R,, R2, e Y son como se definen anteriormente, por ejemplo bajo condiciones básicas suaves, por ejemplo como se conoce en este campo. Típicamente, esta reacción se puede llevar a cabo disolviendo el compuesto de la Fórmula (VII), por ejemplo en una mezcla de un solvente inerte, tal como tetrahidrofurano, N,N-dimetil-formamida, tolueno, dioxano, o CH2CI2, y agua, y se agrega peróxido de hidrógeno, y luego una solución acuosa de la base en agua a la mezcla enfriada. Los ejemplos de la base incluyen, por ejemplo, bicarbonato de sodio, hidróxido de litio, hidróxido de sodio, y similares. La base se puede utilizar de preferencia en de aproximadamente 1.1 a aproximadamente 1.5 equivalentes al compuesto de la Fórmula (VII). Los compuestos de la Fórmula (VII) se pueden producir, por ejemplo, mediante la reacción de un compuesto de la Fórmula (VIII), en donde R2, e Y son como se definen anteriormente, con ácido fórmico como se conoce en este campo. La reacción típicamente se puede llevar a cabo, por ejemplo, a 0°C, mediante la adición de una solución de anhídrido acético en ácido fórmico a una solución de un compuesto de la Fórmula (VIII) en ácido fórmico.

(X) (XI) (XII) Los compuestos de la Fórmula (VIII) se pueden preparar, por ejemplo, mediante la reacción de un compuesto de la Fórmula (IX), en donde F¡1 , R2, e Y son como se definen anteriormente, con una solución de ácido p-toluen-sulfónico, en un solvente orgánico inerte, y una solución de Na2C03, por ejemplo 1M, como se conoce en la materia. Los compuestos de la Fórmula (IX) se pueden preparar, por ejemplo, mediante la reacción de un compuesto de la Fórmula (X), en donde R, es como se define anteriormente, con un compuesto hidroxi-protegido de la Fórmula (XI), en donde Y es arilo, alquilo, aralquilo, o sililo, como se conoce en la técnica. El compuesto de la Fórmula (X) se puede producir, por ejemplo, mediante la reacción de un compuesto de la Fórmula (XII) con cloruro de pivaloílo, en donde R4 es como se define anteriormente, como se conoce en este campo. Hasta donde no se describa particularmente la producción de los materiales de partida, los compuestos son conocidos o se pueden preparar de una manera análoga a los métodos conocidos en la técnica, o como se da a conocer en los Ejemplos que se encuentran posteriormente en la presente. Todas las patentes, solicitudes de patente, y publicaciones citadas en esta solicitud, se incorporan a la presente como referencia en su totalidad para todos los propósitos, hasta el mismo grado como si cada patente, solicitud de patente, o publicación individual fuera así denotada individualmente. Se utilizan las siguientes abreviaturas: AcOH, HOAc Ácido acético. Ac20 = Anhídrido acético. BOC, Boc -- Terbutiloxi-carbonilo. DCM - Dicloro-metano. DIEA Di-isopropil-etil-amina DMF = Dimetil-formamida. DMSO = Sulfóxido de dimetilo. Et Etilo. EtOAc = Acetato de etilo.

Fmoc, FMOC = 9-fluorenil-metiloxi-carbonilo. HATU = Hexafluorofosfato de 0-(7-aza-benzotriazol-1 - il)-N,N,N',N'-tetrametil-uronio. MCPBA = Ácido meta-cloroperoxi-benzoico. Me = Metilo. MeOH = Metanol. MMP = Metaloproteinasa de matriz. NVOM = Nitroveratriloxi-metil-éter. p-TSA = Ácido p-toluen-sulfónico. RT = Temperatura ambiente. TFA = Ácido trifluoro-acético. tBu = Butilo terciario. THF = Tetrahidrof urano. THP = 2-tetrahidropiranilo. TsOH ó p-TSA = Ácido toluen-sulfónico. ESQUEMA SINTÉTICO GENERAL Los compuestos de esta invención se pueden hacer mediante los métodos ilustrados en los esquemas de reacción mostrados más adelante. Los materiales de partida y reactivos utilizados en la preparación de estos compuestos están disponibles con los proveedores comerciales, tales como Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, Wisconsin, EUA), Bachem (Torrance, California, EUA), Emka-Chemie, o Sigma (St. Louis, Missouri, EUA), o bien se preparan mediante los métodos conocidos por los expertos en este campo, siguiendo los procedimientos estipulados en las referencias, tales como Fieser y Fieser's Reagents for Organic Synthesis, Volúmenes 1-15 (John Wiley and Sons, 1991); Rodd's Chemistry of Carbón Compounds, Volúmenes 1-5 y Suplementos (Elsevier Science Publishers, 1989), Organic Reactions, Volúmenes 1-40 (John Wiley and Sons, 1991), March's Advanced Organic Chemistry, (John Wiley and Sons, 4a Edición), y Larock's Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989). Estos esquemas son meramente ilustrativos de algunos métodos mediante los cuales se pueden sintetizar los compuestos de esta invención, y se pueden hacer diferentes modificaciones a estos esquemas, y serán sugeridas para un experto en la técnica habiéndose referido a esta divulgación.

Los materiales de partida y los intermediarios de la reacción se pueden aislar y purificar, si se desea, empleando técnicas convencionales, incluyendo, pero no limitándose a, filtración, destilación, cristalización, cromatografía, y similares. Estos materiales se pueden caracterizar empleando medios convencionales, incluyendo las constantes físicas y los datos espectrales. Preparación de los Compuestos de la Fórmula (I) Los compuestos de la Fórmula (I) se pueden preparar mediante métodos bien conocidos en la técnica de la química orgánica. Los procedimientos sintéticos representativos para la preparación de los compuestos de la presente invención se ilustran y se describen con detalle más adelante. Por ejemplo, los compuestos de la Fórmula (I) se pueden preparar como se describe en los siguientes Esquemas A-B. Procedimiento General A: Síntesis de la amida del ácido 1-{2(R)-[(formil-hidroxi-amino)-metil]-alcanoil}-pirrolidin-2(S)-carboxílico: X= CH-, S n» 0,1,2 Paso 1: Ácido 2-n-butil-acrílico (A-2). A una solución del ácido alquil-malónico A-1 (R = butilo normal (107.4 milimoles)) en etanol (200 mililitros), se le agrega piperidina 812.7 mililitros, 128.8 milimoles, 1.2 equivalentes), y formaldehído acuoso al 37 por ciento (40.0 mililitros, 536.9 milimoles, 5 equivalentes). La solución se calienta a 80°C, durante cuyo tiempo, aparece un precipitado, y luego se vuelve a disolver gradualmente durante 1 hora. La mezcla de reacción se agita a 80°C durante la noche, y luego se enfría a temperatura ambiente (rt). Los solventes se remueven bajo presión reducida, y el residuo se disuelve en acetato de etilo, se lava sucesivamente con HCI 1 M y salmuera, se seca sobre Na2S04 anhidro y se filtra. El filtrado se concentra para dar el compuesto del título A2 como un aceite transparente. Paso 2: 4-bencil-3-(2-butil-acriloil)-oxazolidin-2-ona (A-3). El ácido 2-n-butil-acrílico (9.90 gramos, 77.2 milimoles, y 1 equivalente) se disuelve en tetrahidrofurano seco (260 mililitros), y se enfría a -78°C bajo un manto de nitrógeno. Se agregan base de Hunig (17.5 mililitros, 100.4 milimoles, 1.3 equivalentes) y cloruro de pivaloílo (9.5 mililitros, 77.2 milimoles, 1 equivalente), a una velocidad tal que la temperatura permanece debajo de -60°C. La mezcla se agita a -78°C durante 30 minutos, se calienta a temperatura ambiente durante 2 horas, y finalmente se vuelve a enfriar a -78°C. En un matraz separado, la (S)-(-)-4-bencil-2-oxazolidinona (13.49 gramos, 77.24 milimoles) se disuelve en tetrahidrofurano seco (150 mililitros), y se enfría a -78°C bajo un manto de nitrógeno. Se agrega lentamente n-butil-litio (solución de 2.5M en hexanos, 30.9 mililitros, 77.2 milimoles, 1 equivalente) a -78°C, y la mezcla se agita durante 30 minutos a temperatura ambiente. El anión resultante se transfiere lentamente por medio de una cánula al recipiente de reacción original. La mezcla se deja calentar a temperatura ambiente, y se agita durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se apaga con KHC03 1M, y los solventes se remueven bajo presión reducida. El residuo se divide entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lava con salmuera, se seca sobre Na2S04 anhidro, se filtra, y se concentra, para dar un aceite amarillo, el cual se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea (hexano:acetato de etilo = 4:1), para proporcionar el compuesto del título A3 como un sólido blanco (15.0 gramos, 52.2 milimoles, 68 por ciento). Paso 3: 4-bencil-3-[2-benciloxi-amino-metil)-hexanoil]-oxazolidin-2-ona (sal de ácido p-toluen-sulfónico). El compuesto A3 (8.25 gramos, 28.7 milimoles) se mezcla con O-bencil-hidroxilamina (7.07 gramos, 57.4 milimoles, 2 equivalentes), y se agita durante 40 horas a temperatura ambiente bajo nitrógeno. La mezcla se disuelve en acetato de etilo, y se agrega ácido p-toluen-sulfónico (21.84 gramos, 114.8 milimoles, 4 equivalentes) para precipitar el exceso de O-bencil-hidroxilamina como un sólido blanco. El sólido blanco se filtra, y el filtrado se concentra para dar un aceite amarillo crudo (el análisis de HPLC indicó una pequeña traza de material de partida). La carga del aceite amarillo crudo con un exceso de dietil-éter, y el enfriamiento a 0°C durante 30 minutos, dan un sólido, el cual se recolecta mediante filtración, y se seca al vacío, para proporcionar el compuesto del título como un sólido cristalino blanco (un solo diastereómero). Paso 4: 4-bencil-3-[2-(benciloxi-amino-metil]-hexanoil]-oxazolidin-2-ona (A-5). A una solución de la sal de p-TSA (22.9 gramos, 39.3 milimoles) disuelta en acetato de etilo (400 mililitros), se le agregó Na2C03 1 M (200 mililitros, 5 equivalentes), y se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 anhidro, se filtraron, y se concentraron, para dar el compuesto del título como un aceite pálido opaco (15.8 gramos, 36.6 milimoles, 98 por ciento). Paso 5: N-[2-(4-bencil-2-oxo-oxazolidin-3-carbonil)-hexil]-N-benciloxi-formamida (A-6). Una solución del compuesto A-5 (5.38 gramos, 13.1 milimoles, 1 equivalente) en ácido fórmico (7.4 mililitros, 196.6 milimoles, 15 equivalentes) se enfría a 0°C bajo un manto de nitrógeno. En un matraz separado, el ácido fórmico (7.4 mililitros, 196.6 milimoles, 15 equivalentes) se enfría a 0°C bajo un manto de nitrógeno, y se agrega por goteo anhídrido acético (2.47 mililitros, 26.2 milimoles, 2 equivalentes). La solución se agita a 0°C durante 15 minutos. El anhídrido mixto resultante se transfiere lentamente mediante una jeringa al recipiente de reacción original. La mezcla se agita a 0°C durante 1 hora, y luego a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se concentra, se absorbe en dicloro-metano, y se lava sucesivamente con NaHC03 saturado y salmuera. La capa orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro, se filtra, y se concentra, para dar un aceite opaco, el cual se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea (hexano:acetato de etilo = 2:1, y luego dicloro-metano:acetona = 9:1), para dar el compuesto del título como un aceite incoloro. Paso 6: Ácido 2-[(benciloxi-formil-amino)-metil]-hexanoico (A-7). El compuesto A-6 (0.163 gramos, 0.372 milimoles, 1 equivalente) se disuelve en tetrahidrofurano (4.5 mililitros) y agua (1.5 mililitros), y se enfría a 0°C. Se agrega por goteo peróxido de hidrógeno (al 30 por ciento en agua, 228 microlitros, 2.23 milimoles, 6 equivalentes), seguido por la adición lenta de una solución de hidróxido de litio (0.019 gramos, 0.446 milimoles, 1.2 equivalentes) en agua (350 microlitros). La mezcla resultante se agita a 0°C durante 1.5 horas. La mezcla de reacción básica se apaga con resina Amberlite IR-120 (H+) a un pH de 4 a 5, a 0°C. La resina se filtra y se enjuaga con acetato de etilo. La mezcla se concentra para remover el tetrahidrofurano, y luego se absorbe en acetato de etilo. La capa acuosa se separa, y la capa orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro, se filtra y se concentra, para dar un aceite opaco, el cual se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea (dicloro-metano:acetona = 4:1, y luego acetona:metanol = 99:1), para proporcionar el compuesto del título A7 como un aceite incoloro.

Paso 7: Amida del ácido 1 -[2-{(benciloxi-formil-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidin-2-carboxílico. A una solución del compuesto A-7 (0.90 gramos, 0.680 milimoles, 1 equivalente) en dioxano seco (4 mililitros)a temperatura ambiente, bajo nitrógeno, se le agregan sucesivamente base de Hunig (391 microlitros, 2.24 milimoles, 3.3 equivalentes), la amina A-8 (0.748 milimoles, 1.1 equivalentes), y HATU (0.284 gramos, 0.748 milimoles, 1.1 equivalentes). La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 22 horas. La mezcla se divide entre acetato de etilo y ácido cítrico al 10 por ciento. La capa orgánica se lava con salmuera y NaHC03 saturado, se seca sobre Na2S04 anhidro, se filtra, y se concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea (dicloro-metano:acetona = 3:1), para dar el compuesto del título como un aceite incoloro. Paso 2: Amida del ácido 1 -{2-[(formil-hidroxi-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidin-2-carbo ílico (A -9). Se agrega Pd-C (0.059 gramos, 0.1 equivalentes) a una solución del compuesto anterior (0.550 milimoles, 1 equivalente), en una solución de 1:1 de acetato de etilo/etanol (12 mililitros) bajo un manto de nitrógeno. La mezcla se agita bajo una atmósfera de hidrógeno durante 36 horas. El catalizador se remueve mediante filtración a través de un cojín de Celite. El filtrado se concentra, y el residuo se purifica mediante TLC de preparación (dicloro-metano:acetona = 2:1), para dar el compuesto del título como un sólido amorfo (0.121 gramos, 0.334 milimoles, 61 por ciento). Procedimiento General B: Síntesis del éster de 1-{2(R)- [(formil-hidroxi-amino)-metil]-alcanoil}-pirrolidin-2(S)-carboxilato X = CH2, -S-, -CH(OH)-, -CH(OR)-, -CF2-, ó -CH(F)-; n = de 0 a 3. Paso 1: Éster del ácido 1 -{2-[(benciloxi-formil-amino)-metil] hexanoil}-pirrolidin-2-carboxílico.

A una solución del compuesto A-7 (0.680 milimoles, 1 equivalente) en dioxano seco (4 mililitros) a temperatura ambiente, bajo nitrógeno, se le agregan sucesivamente base de Hunig (391 microlitros, 2.24 milimoles, 3.3 equivalentes), la amina A-10 (0.748 milimoles, 1.1 equivalentes), y HATU (0.284 gramos, 0.748 milimoles, 1.1 equivalentes). El procesamiento y la purificación usuales proporcionan el compuesto del título. Paso 2: Ester del ácido 1 -{2-[(formil-hidroxi-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidin-2-carboxílico (A-11 ). Se agrega Pd-C (0.059 gramos, 0.1 equivalentes) a una solución del compuesto anterior (0.550 milimoles) en una solución de 1:1 de acetato de etilo/etanol (12 mililitros) bajo un manto de nitrógeno. La mezcla se agita bajo una atmósfera de hidrógeno durante 36 horas. El catalizador se remueve mediante filtración a través de un cojín de Celite. El filtrado se concentra, y el residuo se purifica mediante TLC de preparación (dicloro-metano.acetona = 2:1), para dar el compuesto del título. Procedimiento General C: Preparación de la piridin-2-il-amida del ácido pirrolidin-2-S-carboxílico (A-8) (X = CH2, n = 1, R, = 2-piridilo). Paso 1: Bencil-éster del ácido 2-S-(piridin-2-il-carbamoil)-pirrolidin-1-carboxílico.

Una solución del Z-procloruro (5.0 gramos, 18.7 milimoles, 1 equivalente) en piridina (40 mililitros) se enfría a 0°C bajo un manto de nitrógeno. Se agrega por goteo 2-amino-piridina (5.27 gramos, 56.0 milimoles, 3 equivalentes) en piridina (10 mililitros). La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 4 horas, y luego se concentra. El aceite residual se disuelve en acetato de etilo, y se lava sucesivamente con agua, ácido cítrico al 10 por ciento, NaHC03 saturado, y salmuera. La capa orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro, se filtra, y se concentra, para dar el compuesto del título (4.21 gramos, 13.0 milimoles, 69 por ciento) como un sólido opaco.

Paso 2: Sal de ácido bromhídrico de la (piridin-2-il)-amida del ácido pirrolidin-2-S-carboxílico.

A-13 Una solución del compuesto anterior (4.21 gramos, 13.0 milimoles, 1 equivalente) en ácido acético (65 mililitros) a temperatura ambiente, se trata con HBr (5.7 M, al 33 por ciento en ácido acético, 110 mililitros, 649 milimoles, 50 equivalentes), y la mezcla se agita a temperatura ambiente durante 2 horas. La carga de la mezcla de reacción con un exceso de dietil-éter, y el enfriamiento a 0°C durante 30 minutos, dan un sólido, el cual se recolecta mediante filtración, y se seca al vacío, para proporcionar el compuesto del título como un polvo castaño.

Procedimiento General D: 5-(metil-piridin-2-il)-amida del ácido 4-R-hidroxi-pirrolidin-2-S-carboxílico.

A-14 El acoplamiento de la prolina protegida por O-terbutilo (1 milimol) con la 5-picolina (1.5 milimoles) en dimetil-formamida (5 mililitros) bajo HATU (1.3 milimoles) y la condición con N,N-di-isopropil-etil-amina (5 milimoles), seguido por la remoción del O-terbutilo con ácido trifluoro-acético/dicloro-etano (1:1), proporcionan el compuesto del título en un rendimiento del 85 por ciento. Procedimiento General E: (5-metil-piridin-2-il)-amida del ácido 4-S-fluor o- pirrolidin-2-S-carbox Mico.

A-15 El compuesto de hidroxilo anterior (2 milimoles) en cloruro de metileno (20 mililitros) se trata con trifluoruro de ?',?-dietil-amino-azufre (DAST; 4 milimoles) a -70°C. Luego la mezcla de reacción se deja agitándose a temperatura ambiente durante 16 horas, y se lava con una solución acuosa fría de bicarbonato de sodio, se seca, y se concentra bajo presión reducida. Se purifica en cromatografía en columna de gel de sílice, para dar el derivado N-protegido, el cual, después del tratamiento con HBr-AcOH, proporciona un compuesto de amino. Procedimiento General F: 2-metil-éster de 1 -terbutil-éster del ácido 4-S-hidroxi-pirrolidin-1 ,2-dicarboxílico.

A-16 A una solución del compuesto de trans-4-hidroxilo (1 milimol), trifenil-fosfina (1.5 milimoies), y ácido benzoico (1.5 milimoies) en tetrahidrofurano (10 mililitros), se le agrega azo-dicarboxilato de N,N-di-isopropilo (1.5 milimoies) en tetrahidrofurano (5 mililitros) por goteo a 0°C. Se deja agitándose a temperatura ambiente durante 16 horas. El solvente se remueve bajo presión reducida, y el residuo se disuelve en éter. Se enfría con hielo para precipitar el óxido de fosfina, el cual se remueve mediante filtración, y el filtrado se concentra bajo presión reducida. El material crudo se trata con metóxido de sodio metanólico durante 2 horas a 0°C, para dar el compuesto de cis-hidroxilo del título. Procedimiento General G: (5-metil-piridin-2-il)-amida del ácido 4-R-f lu oro-pirro lid i ?-2-S-car box Mico.

A-17 La fluoracion del cis-hidroxilo anterior proporciona el derivado de trans-4-flúor, el cual, después de la saponificación, da el ácido correspondiente. La amina se prepara a partir del terbutil-éster del ácido 4-R-fluoro-pirrolidin-1 -carboxílico y la 5-metil-piridin-2-il-amina bajo condiciones con HATU, para dar el derivado de amida de prolina, el cual, después de su tratamiento con HCI 4M en dioxano, proporciona la amina deseada. Ejemplo 1 : (5-f luoro-1 -oxi-piridin-2-il)-amida del ácido 1-[2-ciclopentil-metil-3-(formil-hidroxi-amino)-propionil]-pirrolidin-2-carboxílico.

A-18 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 3-benciloxi-formil-amino-2-ciclopentil-metil-propiónico A7 (R = ciclopentil-metilo), y la piridin-2-il-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CH2, n = 1, ñ- = 5-fluoro-2-piridilo). El ácido 2-ciclopentil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico se prepara a partir del ácido ciclopentil-metil-malónico, como se describe en seguida.

Bromo-metil-ciclopentano A-18a Una solución del ciclopentano-metanol (48.5 gramos, 484 milimoles), Et3N (88.0 mililitros, 631 milimoles), y tetrahidrofurano anhidro (1 litro), se enfría a 4°C, y se agita bajo nitrógeno. Se agrega lentamente cloruro de metan-sulfonilo (45.0 mililitros, 581 milimoles) a la solución en agitación, mientras que se mantiene a 10°C. La mezcla se agita durante 1 hora adicional a 10°C, y se agrega lentamente Li Br (300.0 gramos, 3,454 milimoles) (exotérmica). La mezcla de reacción se agita durante 16 horas adicionales a temperatura ambiente. Se agrega agua para disolver la sal, y la mezcla se extrae con Et20. Las capas de Et20 se combinan, se secan sobre Na2S04, y se concentran cuidadosamente (a 25°C, y a 100 torr). El producto crudo se purifica mediante destilación al vacío (35°C a 1 torr, y el compuesto deseado es la primera fracción que se va a recolectar). Esto da el bromo-metil-ciclopentano (31.4 gramos, rendimiento del 40 por ciento) como un aceite incoloro. Ácido 2-ciclopentil-metil-malónico A-18b Una solución de malonato de dietilo (36.91 gramos, 230.4 milimoles), metanol anhidro (400 mililitros), y NaOMe (al 25 por ciento en metanol, 49.79 gramos, 230.4 milimoles), se agita a reflujo durante 1 hora bajo nitrógeno. Se agrega a la mezcla el bromo-metil-ciclopentano (31.31 gramos, 192.0 milimoles), y se agita durante 3 horas adicionales. Se agrega una solución de NaOH (23.04 gramos, 576.0 milimoles) en agua (400 mililitros), y la mezcla se agita durante 1 hora adicional a reflujo. La mezcla se enfría, se diluye con agua, y se extrae con éter. La capa de éter se desecha, y la capa acuosa se acidifica con HCI 1N a un pH = 1.La capa acuosa se extrae con EtOAc. Las capas de EtOAc se combinan, se secan sobre Na2S04, y se concentran. Esto da el ácido 2-ciclopentil-metil-malónico (21.0 gramos, rendimiento del 59 por ciento) como un sólido blanco. Ácido 2-c icio pe ntil-metil-acr Mico A-18c Una mezcla del ácido 2-ciclopentil-metil-malónico (24.90 gramos, 133.7 milimoles), piperidina (15.9 mililitros, 160.8 milimoles), formaldehído acuoso al 37 por ciento (51.0 mililitros, 647.2 milimoles), y EtOH (250 mililitros), se agita a reflujo durante 16 horas. La reacción se apaga con HCI 1N hasta un pH = 1, y la mezcla se extrae con EtOAc. Las capas de EtOAc se combinan, se secan sobre Na2S04, y se concentran. El producto crudo se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea (Si02, acetona al 10 por ciento en dicloro-metano), lo cual da el ácido 2-ciclopentil-metil-acrílico (17.65 gramos, rendimiento del 86 por ciento) como un aceite. 4-bencil-3-(2-ciclopentil-metil-acriloil)-oxazolidin-2-ona A-18d El ácido 2-ciclopentil-metil-acrílico (17.65 gramos, 114.5 milimoles) se disuelve en tetrahidrofurano anhidro (200 mililitros), y se enfría a -78°C bajo nitrógeno. Se agregan consecutivamente N,N-di-isopropil-etil-amina (25.9 mililitros, 148.7 milimoles) y cloruro de trimetil-acetilo (14.1 mililitros, 114.5 milimoles), a una velocidad tal que la temperatura permanece debajo de -60°C, y que se controla el desprendimiento de gas. La mezcla se agita a -78°C durante 30 minutos, se agita a temperatura ambiente durante 2 horas, y se vuelve a enfriar hasta -78°C. En un matraz separado, la (S)-(-)-4-bencil-2-oxazolidinona (20.30 gramos, 114.6 milimoles) se disuelve en tetrahidrofurano anhidro (400 mililitros), y se enfría a -78°C bajo nitrógeno. Se agrega lentamente BuLi (2.5 M, 45.8 mililitros, 114.5 milimoles) a -78°C, y la mezcla se agita durante 30 minutos a temperatura ambiente. El anión resultante se transfiere lentamente por medio de una cánula hasta el recipiente de reacción original. La mezcla se deja calentar a temperatura ambiente, y se agita durante la noche a temperatura ambiente (16 horas). La mezcla de reacción se apaga con KHC03 1M, y se extrae con EtOAc. Las capas orgánicas se combinan, se lavan con salmuera, se secan sobre Na2S04, y se concentran, para dar un aceite amarillo. El producto crudo se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea (Si02, EtOAc al 20 por ciento en hexano), para dar la 4-bencil-3-(2-ciclopentil-metil-acriloil)-oxazolidin-2-ona (22.9 gramos, 64 por ciento) como un aceite. 4-bencil-3-[2-ciclopentil-metil-3-(tetrahidro-piran-2-¡loxi-amino)-propionil]-oxazolidin-2-ona A-18e La 4-bencil-3-(2-ciclopentil-metil-acriloil)-oxazolidin-2-ona (22.90 gramos, 73.1 milimoles) y la 0-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-hidroxilamina (34.24 gramos, 292.3 milimoles), se combinan y se agitan a 45°C durante 48 horas bajo nitrógeno. El producto crudo se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea (Si02, EtOAc al 30 por ciento en hexano), lo cual da la 4-bencil-3-[2-ciclopentil-metil-3-(tetrahidro-piran-2-iloxi-amino)-propionil]-oxazolidin-2-ona (21.65 gramos, rendimiento del 69 por ciento) como un aceite.

N-[3-(4-bencil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclopentil-metil-3-oxo-propil]-N-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-formamida Una mezcla de ácido fórmico (45.0 mililitros, 1,193 milimoles) y anhídrido acético (90.0 mililitros, 952 milimoles) se agita a 50°C durante 1 hora bajo nitrógeno. Un segundo matraz se carga con la 4-bencil-3-[2-ciclopentil-metil-3-(tetrahidro-piran-2-iloxi-amino)-propionil]-oxazolidin-2-ona (21.62 gramos, 50.2 milimoles), Et3N (170.0 mililitros, 1,220 milimoles), y dicloro-metano anhidro (450 mililitros). Esta segunda mezcla se enfría a 4°C bajo nitrógeno, y la solución de ácido mixta se agrega lentamente al segundo matraz, mientras que se mantienen 10°C. La mezcla combinada se agita durante 30 minutos a 10°C, se apaga y se lava con una solución acuosa saturada de NaHC03, y se extrae con dicloro-metano. Las capas de dicloro-metano se combinan, se secan sobre Na2S04, y se concentran. El producto crudo se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea (Si02, EtOAc al 50 por ciento en hexano), lo cual da la N-[3-(4-bencil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclopentil-metil-3-oxo-propil]-N-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-formamida (20.10 gramos, rendimiento del 87 por ciento) como un aceite. Ácido 2-ciclopentil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico A-18g La N-[3-(4-bencil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclopentil-metil-3-oxo-propil]-N-(tetrah¡dro-piran-2-iloxi)-formam¡da (3.65 gramos, 7.96 milimoles), tetrahidrofurano (125 mililitros), y agua (40 mililitros), se enfría a 4°C. A esta mezcla se le agregan H20 al 30 por ciento (5.2 mililitros, 50.90 milimoles) y monohidrato de LiOH (0.40 gramos, 9.53 milimoles), respectivamente. La mezcla de reacción se agita durante 1.5 horas. La mezcla se apaga lentamente con Na2S03 0.5M, mientras que se mantiene la temperatura debajo de 15°C con un baño de hielo. La mezcla apagada se agita durante 30 minutos adicionales, se concentra al vacío hasta que se remueve el solvente de tetrahidrofurano, y se lava con EtOAc. La mezcla de reacción básica se acidifica con resina Amberlite IR-120 (H+) hasta un pH = 4.5. Se agrega salmuera a la solución ácida, y la mezcla combinada se extrae con EtOAc. Las capas orgánicas del lavado de la solución ácida se combinan, se secan sobre Na2S04, y se concentran al vacío. Esto da el ácido 2-ciclopentil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico (1.20 gramos, rendimiento del 50 por ciento) como un aceite. Ácido 3-(benciloxi-formil-amino)-2-ciclopentil-metil-propiónico. Se prepara a partir del ácido 2-ciclopentil-metil-acrílico y la O-bencil-hidroxilamina, como se describe para la síntesis del bloque de construcción protegido por O-THp correspondiente. 4-bencil-3-(3-benciloxi-amino-2-ciclopent¡l-metil-propionil)-oxazolidin-2-ona A-18h N-[3-(4-bencil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclopentil-metil-3-oxo-propil]-N-benciloxi-formamida (compuestos A-G, en donde: Ri = ciclopentil-metilo, PGi = bencilo).

A-18i Ácido 3-(benciloxi-formil-amino)-2-ciclopentil-metil-propiónico A-18k (5-f luoro-1 -oxi-piridin-2-il)-amida del ácido 1 -[3-benciloxi-formil-amino)-2-ciclopentil-metil-propionil]-pirrolidin-2-carboxílico.

A-181 Ejemplo 2: (5-fluoro-1-ox¡-piridin-2-il)-amida del ácido flúor o-1-{2-[(formil-h¡droxi-amino)-metil]-hexanoil}-p¡rrolidin-2- carboxílico.

A-19 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-[(benciloxi-formil- amino)-metil]-hexanoico A-7 (R = butilo normal), y la piridin-2-il- amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CHF, n = 1, R = 5- fluoro-2-piridilo). [2-amino-5-f luoro-piridin-2-il)-amida del ácido 4-trans-f luoro- pirrolidin-2-carboxílico.

A-19a A una solución en dimetil-formamida (15 mililitros) de Boc-L-Pro-4-F-OH (2.5 gramos, 10.73 milimoles, 1 equivalente), se le agrega base de Hunig (di-isopropil-etil-amina, abreviado como DIEA) (6.73 mililitros, 38.61 milimoles, 3.6 equivalentes), y la mezcla se enfría a 0°C. Esto es seguido por la adición de 2-amino-5-fluoro-piridina (1.44 gramos, 12.87 milimoles, 1.2 equivalentes), y HATU (4.89 gramos, 12.87 milimoles, 1.2 equivalentes) a 0°C. La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla se divide entre un exceso de acetato de etilo y ácido cítrico al 10 por ciento. La capa orgánica se lava con salmuera y NaHC03 saturado, se seca sobre Na2S04 anhidro, se filtra, y se concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía en gel de sílice (hexanos:acetato de etilo = 1:0-7:3) para dar el compuesto del título como un jarabe incoloro (2.5 gramos, 71 por ciento). [2-amino-5-f luoro-piridin-2-il]-amida del ácido 4-trans-f luoro-pirrolidin-2-carboxílico (sal de ácido clorhídrico).

A-19b La Boc-prolina-4-fluoro-piridin-amida (1 gramo, 3.06 milimoles, 1 equivalente) se trata con HCI 4N/dioxano (30 mililitros, 120 milimoles, 40 equivalentes) a temperatura ambiente, y se deja agitándose durante 16 horas. La mezcla se concentra, y el residuo se co-evapora con tolueno dos veces, y se concentra para dar un sólido color rosado-púrpura (1 gramo). (2-amino-5-fluoro-piridin-2-il)-amida del ácido 1 -{2-[(benciloxi-formil-am¡no)-met¡l]-hexano¡l}-4-trans-f luoro-pirrolidin-2-carboxílico.

A-19c A una solución en dimetil-formamida (10 mililitros) de la trans-fluoro-prolina-5-fluoro-amino-piridin-amida, sal de HCI (644 miligramos, 2.15 milimoles, 1.2 equivalentes), se le agregan sucesivamente base de Hunig (2 mililitros, 10.8 milimoles, 5 equivalentes), Verslacid VRI 172 (500 miligramos, 1.79 milimoles, 1 equivalente), y HATU (818 miligramos, 2.15 milimoles, 1.2 equivalentes) a 0°C. La mezcla resultante se agita a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla se divide entre un exceso de acetato de etilo y ácido cítrico al 10 por ciento. La capa orgánica se lava con salmuera y NaHC03 saturado, se seca sobre Na2S04 anhidro, se filtra, y se concentra. El compuesto se purifica mediante cromatografía en gel de sílice, en dicloro-metano:acetona (1:0-86.14), para dar el compuesto del título como un polvo blanco (630 miligramos, 72 por ciento). ES-MS: calculada para C25H30F2 4O5 (504.53); encontrada: 505.4 [M + H]. (2-amino-5-fluoro-piridin-N-óxido-2-il)-am¡da del ácido 1-{2- [(benciloxi-formil-amino)-metil]-hexanoil}-4-trans-fluoro-pirrolidin-2-carboxílico.

A-19d A una solución en dicloro-metano del compuesto (1.25 gramos, 2.56 milimoles, 1 equivalente), se le agregó con éxito MCPBA (1.32 gramos, 7.68 milimoles, 3 equivalentes) a 0°C, y la reacción se agitó durante 16 horas. La mezcla de reacción se divide entre NaHC03 y la capa de dicloro-metano. La capa orgánica se seca sobre Na2S04, y se concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía en gel de sílice, utilizando dicloro-metano:acetona (1:0-9:1), para proporcionar el compuesto del título (1.2 gramos). Ejemplo 3: Pirazin-2-il-amida del ácido 1 -[2-{(formil-hidroxi-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidin-2-carboxílico.

A-20 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-[(benciloxi-formil-amino)-metil]-hexanoico A-7 (R = butilo normal), y la pirazin-2-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CH2, n = 1, R, = 2-pirazinilo). Ejemplo 4: Piridazin-3-il-amida del ácido 1 -{2-[(formil-hidroxi-am¡no)-metil]-hexanoil}-pirrolidin-2-carboxílico.

A-21 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-{[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-metil}-hexanoico A-7 (R= butilo normal), y la piridazin-3-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CH2, n = 1, 3-piridazinilo). Paso 1: Piridazin-3-il-amina.

A-21a A una solución de la 6-cloro-2-amino-piridazina (4 gramos) y NaOH (en polvo, 1.4 gramos) en etanol (150 mililitros), se le agrega Pd/C al 10 por ciento (0.6 gramos). La mezcla de reacción se agita bajo una atmósfera de hidrógeno durante 16 horas. Se filtra a través de Celite, y se concentra el solvente. El residuo resultante se tritura con éter, para proporcionar el compuesto de amino conocido. Paso 2: Terbutil-éster del ácido 2-(piridazin-3-il-carbamoil)-pirrolidin-2-carboxílico.

A-21b A una solución de Boc-Pro-OH (1 equivalente) en dicloro-metano a 0°C, se le agrega reactivo de Ghosez (1.1 equivalentes), y la mezcla de reacción se agita a 0°C durante 1 hora. A esto se le agrega la amina (1.1 equivalentes) en piridina, y la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 16 horas. Luego se concentra para remover todos los volátiles, y se vuelve a disolver en un exceso de dicloro-metano. La capa orgánica se lava con ácido cítrico al 10 por ciento, salmuera, y NaHC03, se seca sobre Na2S04, y se concentra. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea utilizando del 10 al 40 por ciento de acetato de etilo en hexanos, para proporcionar el compuesto del título. HPLC: YMC-Pak Pro C18, S-3 µ?t?, 120A, 50 x 4.6 milímetros, I. D. Columna; eluyente en gradiente del 0 por ciento al 90 por ciento de MeCN durante 8.5 minutos, 1.5 mililitros/minuto; tiempo de retención = 4.14 minutos. ES-MS: calculada para Ci4H2oN403 (292); encontrada 293 [M + H].

Paso 2: Piridazin-3-il-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico.

HPLC: YMC-Pak Pro C18, S-3 µ??, 120A, 50 x 4.6 milímetros I.D. Columna; eluyente en gradiente del 0 por ciento al 90 por ciento de MeCN durante 8.5 minutos, 1.5 mililitros/minuto; Tiempo de retención = 2.398 minutos. ES-MS: calculada para C9H12N40 (192.1); encontrada 193.2 [M + H]. Paso 3: Piridazin-3-il-amida del ácido 1 -(2-{[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-metil}-hexanoil)-pirrolidin-2-carboxílico.

El compuesto del título se prepara bajo condiciones de HATU, como se describe en el Procedimiento General A. HPLC: YMC-Pak Pro C18, S-3 µ??, 120A, 50 x 4.6 milímetros, I. D. Columna; eluyente en gradiente del 20 por ciento al 90 por ciento de MeCN durante 8.5 minutos, 1.5 mililitros/minuto; tiempo de retención = 3.655 minutos. ES-MS: calculada para C22H33N5O5 (447); encontrada 448 [M + H]. Ejemplo 5: (5-fluoro-1 -oxi-piridin-2-il)-amida del ácido 1-[2-ciclopentil-metil-3-(formil-hidroxi-amino)-propionil]-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxílico.

El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclopentil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico, y la piridin-2-il-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CHF, n = 1 , R, = 5-fluoro-2-piridilo). (5-fluoro-1-oxi-piridin-2-il)-amida del ácido 1 -{2-ciclopentil-metil-3-[formM-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propionil]-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxílico.

A-22a Ejemplo 6: Piridazin-3-il-amida del ácido 1 -[2-ciclobutil-metil-3-(formil-hidroxi-amino)-propionil]-pirrolidin-2-carboxílico.

A-23 compuesto del título se prepara de acuerdo con Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclobutil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico A- 7 (R=ciclobutil-metilo), y la piridazin-2-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CH2> n = 1, R1 = 3-piridazinilo). Ejemplo 7: Pirazin-2-il-amida del ácido 1 -[2-ciclobutil-metil-3-(formil-hidroxi-amino)-propionil]-pirrolidin-2-carboxílico.

A-24 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclobutil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico A-7 (R = ciclobutil-metilo), y la pirazin-2-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CH2, n = 1, Ri = 2-pirazinilo). Ejemplo 8: Pirazin-2-il-amida del ácido 1 -[2-ciclopentil-met¡l-3-(formil-hidroxi-amino)-propionil]-pirrolidin-2-carboxílico.

A-25 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclopentil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico A-7 (R ciclopentil-metilo), y la pirazin-2-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CH2, n=1, R^ = 2-pirazinilo). Ejemplo 9: Pirazin-2-il-amida del ácido 4-f luoro-1 -{2-[(formil-hidroxi-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidin-2-carboxíMco.

A-26 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-[(benciloxi-formil-amino)-metil]-hexanoico A-7 (R = butilo normal), y la pirazin-2-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CHF, n=1 , R, = 2-pirazinilo). Ejemplo 10: Pirazin-2-il-amida del ácido 1 -[2-ciclopentil-metil-3-(formil-hidroxi-amino)-propionil]-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxílico.

A-27 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclopentil-metil-3-(formil-hidroxi-amino)-propiónico A-7 (R = ciclopentil-metilo), y la pirazin-2-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X= CHF, n = 1, Ri = 2-pirazinilo). Ejemplo 11 : Pirazin-2-il-amida del ácido 1 -[2-ciclobutil-amino-metil-3-(formil-hidroxi-amino)-propionil]-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxílico.

A-28 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclobutil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico A-7 (R = ciclobutil-metilo), y la pirazin-2-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CHF, n = 1, R, = 2-pirazinilo). El ácido 2-ciclobutil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)- amino]-propiónico se prepara a partir del ácido 2-ciclobutil-metil-malónico, como se describe para la síntesis del derivado de cíclopentil-metilo correspondiente en el Ejemplo 1. Ácido 2-ciclobutil-meti l-malón ico.

A-28a El compuesto del título se prepara a partir del (bromo-metil)-ciclobutano. Ácido 2-ciclobutil-metil-acrílico. 4-bencil-3-(2-ciclobutil-metil-acriloil)-oxazolidin-2-ona. 4-bencil-3-[2-ciclobutil-metil-3-(tetrahidro-piran-2-iloxi-amino)-propionil]-oxazolidin-2-ona.

A-28d N-[3-(4-bencil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclobutil-metil-3-oxo-propil]-N-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-formamida.

A-28e Ácido 2-ciclobutil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico.

A-28f Pirazin-2-il-amida del ácido 1 -{2-ciclobutil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propionil}-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxilico.

A-28g Ejemplo 12: Pirimidin-4-il-amida del ácido 1 -[2-ciclobutil- metil-3-(f ormil-hidroxi-amino)-propionil]-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxilico.

A-29 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclobutil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico A-7 (R = ciclobutil-metilo), y la pirimidin-4-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CHF, n = 1 , R = 2-pirimidinilo). Ejemplo 13: Piridazin-3-il-amida del ácido 1 -[2-ciclobutil-metil-3-(formil-hidroxi-amino)-propionil]-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxílico.

A-30 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclobutil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico A-7 (R = ciclobutil-metilo), y la piridazin-3-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CHF, n = 1 , Ri = 3-pi ridazi n i lo) . 4-f luoro-2-(piridazin-3-il-carbamoil)-pirrolidin-1 -car box i lato de (2S,4R)-terbutilo.

A-30a A una solución de Boc-Pro(F)-OH (5 gramos, 21.46 milimoles, 1 equivalente) en dicloro-metano a 0°C, se le agrega Reactivo de Ghosez (3.1 mililitros, 23.61 milimoles, 1.1 equivalentes), y la mezcla de reacción se agita a 0°C durante 1 hora. A esto se le agrega la amina (2.65 gramos, 27.9 milimoles, 1.3 equivalentes) en piridina a 0°C, y la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 16 horas. Luego se concentra para remover todos los volátiles, y se vuelve a disolver en un exceso de dicloro-metano. La capa orgánica se lava con ácido cítrico al 10 por ciento, NaCI (saturado), y NaHC03 (saturado), se seca sobre Na2S04, y se concentra. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea utilizando del 10 al 15 por ciento de acetona en dicloro-metano, para proporcionar el compuesto del título. (2S,4R)-4-f luoro-N-(piridazin-3-il)-pirrolidin-2-carboxamida A-30b La amida protegida por Boc se absorbe en HCI 4M/dioxano, y la reacción se agita a temperatura ambiente durante 5 horas. El solvente se remueve bajo presión reducida, y el residuo se tritura con éter para dar los compuestos del título. (2S,4R)-1-((2R)-3-ciclobutil-2-((N-(tetrahidro-2H-piran-2-Moxi)-formamido)-metil)-propanoil)-4-f luoro-N-(piridazin-3-il)-pirrolidin-2-carboxamida.

A-30c A una solución en dimetil-formamida fría (15 mililitros) del Verslacid (500 miligramos, 1.77 milimoles, 1 equivalente), se le agregan DIEA (1.7 mililitros, 9.72 milimoles, 5.5 equivalentes), amina. sal de HCI (550 miligramos, 1.943 milimoles, 1.1 equivalentes), y HATU (739 miligramos, 1.943 milimoles, 1.2 equivalentes). La mezcla de reacción resultante se agita durante 16 horas a temperatura ambiente. La mezcla se divide entre un exceso de acetato de etilo y ácido cítrico al 10 por ciento. La capa orgánica se lava con NaCI saturado y NaHC03 saturado, se seca sobre Na2S04 anhidro, se filtra, y se concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía en gel de sílice utilizando del 10 al 25 por ciento de acetona en dicloro-metano, para dar el compuesto del título (53 por ciento).

Ejemplo 14: (2-oxi-piridazin-3-il)-amida del ácido 1-[2-ciclobutil-metil-3-(formil-hidroxi-amino)-propionil]-4-fluoro-pirrolidin-2-carboxílico.

A-31 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclobutil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico A-7 (R = ciclobutil-metilo), y la piridazin-1 -???-3-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CHF, n=1, R, = N-óxido de 3-piridazinilo) . 1-óxido de 6-((2S,4R)-1-(terbutox¡-carbonil)-4-fluoro-pirroMdin-2-carboxamido)-piridazina.

A-31c A una solución de Boc-Pro(F)-OH (2.047 gramos, 8.154 milimoles, 1 equivalente) en dicloro-metano a 0°C, se le agrega Reactivo de Ghosez (1.2 mililitros, 8.97 milimoles, 1.1 equivalentes), y la mezcla de reacción se agita a 0°C durante 1 hora. A esto se le agrega la amina (1.27 gramos, 11.42 milimoles, 1.4 equivalentes) en piridina a 0°C, y la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 16 horas. Luego se concentra para remover todos los volátiles, y el residuo se disuelve en un exceso de dicloro-metano. La capa orgánica se lava con ácido cítrico al 10 por ciento, NaCI (saturado), y NaHC03 (saturado), se seca sobre Na2S04, y se concentra. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea utilizando del 2 al 15 por ciento de acetona en dicloro-metano, para proporcionar el compuesto del título (61 por ciento). 1 -óxido de 6-((2S,4R)-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxamido)-piridazina.

A-31d La amida protegida por Boc se absorbe en HCI 4M/dioxano, y la reacción se agita a temperatura ambiente durante 5 horas. Todos los volátiles se remueven, y el residuo se tritura con éter para dar los compuestos del título. 1 -óxido de 6-((2S,4R)-1 -((2R)-3-ciclobutil-2-((N-(tetrahidro-2H-p¡ran-2-iloxi)-formamido)-metil)-propanoil)-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxamido)-piridazina.

A-31e A una solución en dimetil-formamida fría (20 mililitros) del Verslacid (571 miligramos, 2 milimoles, 1 equivalente), se le agregan DIEA (2.51 mililitros, 14.4 milimoles, 6 equivalentes), amina. sal de HCI (718 miligramos, 2.4 milimoles, 1.2 equivalentes), y HATU (913 miligramos, 2.4 milimoles, 1.2 equivalentes). La mezcla de reacción resultante se agita durante 16 horas a temperatura ambiente. La mezcla se divide entre un exceso de acetato de etilo y ácido cítrico al 10 por ciento. La capa orgánica se lava con NaCI saturado y NaHC03 saturado, se seca sobre Na2S04 anhidro, se filtra, y se concentra. El residuo se purifica mediante cromatografía en gel de sílice utilizando del 10 al 20 por ciento de acetona en dicloro-metano, y luego utilizando del 2 al 8 por ciento de metanol en dicloro-metano, para dar el compuesto del título (44 por ciento). 1H RMN (D SO-d6). Ejemplo 16: Piridazin-3-il-amida del ácido 1 -[2-ciclopentil-metil-3-(formil-hidroxi-amino)-propionil]-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxílico.

A-32 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclopentil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico A-7 (R = ciclopentil-metilo), y la piridazin-2-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CHF, n = 1, Ri = 3-piridazinilo). (2S,4R)-1-((2R)-3-ciclopentil-2-((N-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)-formamido)-metil)-propano¡l)-4-f luoro-N-(piridazin-3-il)-pirrolidin-2-carboxamida.

A-32b Ejemplo 16: (2-oxi-piridazin-3-il)-amida del ácido 1-[2-ciclopentil-metil-3-(formil-hidrox¡-amino)-propionil]-4-fluoro-pirrolidin-2-carboxílico.

A-33 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclopentil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propionilo A-7 (R = ciclopentil-metilo), y la piridazin-2-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CHF, n = 1, = N-óxido de 3-piridazinilo). 1 -óxido de6-amino-piridazina.

A-33a A una solución de la 6-amino-piridazina en acetona, se le agrega una solución de MCPBA (1 equivalente) en acetona en una porción. La mezcla de reacción se deja agitándose a temperatura ambiente durante 1 hora. El solvente se remueve, y se agrega éter al residuo. El sólido se filtra y se seca para proporcionar el compuesto del título. Éste se utiliza como tal en el siguiente paso. 1 -óxido de 6-((2S,4R)-1-(terbutoxi-carbonil)-4-fluoro-pirrolidin-2-carboxamido)-piridazina.

A-33b A una solución de Boc-Pro(F)-OH (2.047 gramos, 8.154 milimoles, 1 equivalente) en dicloro-metano a 0°C, se le agrega Reactivo de Ghosez (1.2 mililitros, 8.97 milimoles, .1 equivalentes), y la mezcla de reacción se agita a 0°C durante 1 hora. A esto, se le agrega la amina (1.27 gramos, 11.42 milimoles, 1.4 equivalentes)en piridina a 0°C, y la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 16 horas. Luego se concentra para remover todos los volátiles, y el residuo se disuelve en un exceso de dicloro-metano. La capa orgánica se lava con ácido cítrico al 10 por ciento, NaCI (saturado), y NaHC03 (saturado), se seca sobre Na2S04, y se concentra. El residuo resultante se purifica mediante cromatografía por evaporación instantánea utilizando del 2 al 15 por ciento de acetona en dicloro-metano, para proporcionar el compuesto del título (61 por ciento). 1 -óxido de 6-((2S,4R)-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxamido)-piridazina.

La amida protegida por Boc se absorbe en HCI 4M/dioxano, y la reacción se agita a temperatura ambiente durante 5 horas. Todos los volátiles se remueve, y el residuo se tritura con éter para dar los compuestos del título. 1 -óxido de 6-((2S,4R)-1 -((2R)-3-ciclopentil-2-((N-(tetrahidro-2H-piran-2-iloxi)-formamido)-metil)-propanoil)-4-fluoro-pirrolidin-2-carboxamido)-piridazina.

A-33d Ejemplo 17: Piridazin-3-il-amida del ácido 1 -[2-ciclohexil-metil-3-(f ormil-hidroxi-amino)-propionil]-4-f luoro-pirrolidin-2-carboxílico.

A-34 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclohexil-metil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico A-7 (R = ciclohexil-metilo), y la piridazin-3-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CHF, n = 1, = 3-pi ridazin i lo) .

El bloque de construcción del ácido 2-ciclohexil-metil-3-(formil-hidroxi-amino)-propiónico se prepara a partir del ácido 2-ciclohexil-metil-malónico, como se describe para la síntesis del ácido ciclohexil-metil-malónico correspondiente en el Ejemplo 1. Ácido 2-ciclohexil-metil-malónico.

A-34a El compuesto del título se prepara a partir de (bromo-metil)-ciclohexano. Ácido 2-ciclohexil-metil-acrílico.

A-34b 4-bencil-3-(2-ciclohexil-metil-acriloil)-oxazolidin-2- A-34c 4-bencil-3-[2-ciclohexil-metil-3-(tetrahidro-piran-2-iloxi-amino)- propionil]-oxazolidin-2-ona.

A-34d N-[3-(4-bencil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclohexil-metil-3-oxo-propil]-N-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-formamida.

A-34e Ejemplo 18: Pirazin-2-il-amida del ácido 1 -{4-ciclopropil-2- [(formil-hidroxi-amino)-metil]-butiril}-4-fluoro-pirrolidin-2-carboxílico.

A-35 El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-ciclopropil-etil-3-[formil-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propiónico A-7 (R = ciclopropil-etilo), y la pirazin-2-amida del ácido pirrolidin-2-carboxílico A-8 (X = CHF, n = 1, R2 = 2-pirazinilo). El bloque de construcción del ácido 2-ciclopropil-etil-3-(formil-hidroxi-amino)-propiónico se prepara a partir del ácido 2-ciclopropil-etil-malónico, como se describe para la síntesis del ácido ciclopentil-metil-metil-malónico correspondiente en el Ejemplo 1. (Bromo-etil)-ciclopropano El compuesto del título se prepara a partir del 2-ciclopropil-etanol. Ácido 2-c ¡ el oprop¡l-et¡ l-malón ico.

A-35b Ácido 2-ciclopropil-etil-acrílico.

A-35c 4-bencil-3-(2-ciclopropil-etil-acriloil)-oxazolidin-2-ona.

N-bencil-3-[2-ciclopropil-etil-3-(tetrahidro-piran-2-iloxi-amino)-propionil]-oxazolidin-2-ona A-35e N-{3-(4-bencil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclopropil-etil-3-oxo-propil]-N-(tetrahidro-piran-2-iloxi)-formamida.

A-35f Ácido 2-cicloprop¡l-etil-3-[formil-(tetrah¡dro-p¡ran-2-iloxi)-amino]-propiónico.

A-35g Pirazin-2-il-amida del ácido 1 -{2-ciclopropil-etil-3-[formil- (tetrahidro-piran-2-iloxi)-amino]-propionil}-4-fluoro-pirrolidin-2 carboxílico.

A-35h Ejemplo 19: Inhibición de la actividad de la peptidil-desformilasa. Se utiliza un ensayo acoplado de PDF/FDH (Lazennec y colaboradores, Anal. Biochem., Volumen 224, páginas 180-182 (1997)). En este ensayo acoplado, el formato liberado por PDF a partir de su sustrato de fMAS, se oxida mediante la enzima de acoplamiento FDH, reduciendo una molécula de NAD+ hasta NADH, lo cual provoca un incremento en la absorción a 340 nanómetros. Todos los ensayos se llevan a cabo a temperatura ambiente en un regulador de HEPES 50 mM, pH de 7.2, NaCI 10 mM, 0.2 miligramos/mililitro de albúmina de suero bovino, en placas de microtitulación de 96 pozos de media área (Corning). La reacción se inicia mediante la adición de una mezcla de 0.5 unidades/mililitro de FDH, NAD+ 1 mM, y fMAS en la concentración deseada. Con el objeto de determinar los valores de IC50 (la concentración necesaria para inhibir el 50 por ciento de la actividad enzimática), la PDF se incuba previamente durante 10 minutos con diferentes concentraciones del inhibidor, y se inicia la reacción de desformilación mediante la adición de la mezcla de reacción que contiene fMAS 4 mM. La velocidad de reacción inicial, y, se mide como la velocidad inicial de aumento de absorción a 340 nanómetros, utilizando un lector de placas SpectraMax (Molecular Devices, Sunnyvale, CA). La concentración inhibidora [In] a la cual se inhibe el 50 por ciento de la enzima, IC50, se calcula utilizando la siguiente fórmula: y = y0/(i + (in)/ic50) en donde y0 es la velocidad de reacción en ausencia de inhibidor. La resolución de esta ecuación para la IC50 en la [In] cuando y = y0/2, proporciona la IC50. La IC5o se calcula basándose en un ajuste de regresión no lineal de mínimos cuadrados, utilizando un paquete de software comercial (Deltapoint, Inc., Chicago, IL.). Utilizando este ensayo, se determina la IC50 de diferentes compuestos. La IC50 para diferentes compuestos se determina contra la enzima desformilasa que contiene níquel y zinc como el ión de metal. Los valores IC50 de los compuestos preferidos de la Fórmula (I) determinados para la desformilasa que contiene zinc, están en el intervalo de aproximadamente 0.001 µ? a aproximadamente 0.2 µ?. Los valores IC50 de los compuestos preferidos de la Fórmula (I) determinados para la desformilasa que contiene níquel, están en el intervalo de aproximadamente 0.005 µ? a aproximadamente 3 µ?. Ejemplo 20: Ensayo para probar la actividad antimicrobiana. Se determinan las concentraciones inhibidoras mínimas (MICs) utilizando el método de microdilución en placas en formato de 96 pozos. Los compuestos se suspenden en sulfóxido de dimetilo a 5 ó 10 miligramos/mililitro, y se almacenan a 4°C hasta que se utilicen. Se diluyen en Caldo de Mueller-Hinton (MHB), o en Caldo de Soya de Tripticasa (TSB), y se utilizan para la determinación de la concentración inhibidora mínima. El intervalo de concentraciones probadas es de 64 a 0.0625 microgramos/mililitro de concentración final, utilizando un sistema de dilución doble. El inoculo se prepara a partir de las células cultivadas en Ágar de Soya de Tripticasa (TSA), y se incuba durante la noche a 35°C. Se utilizan de 5 a 10 colonias para inocular los caldos MHB ó TSB, y el cultivo se incuba durante la noche a 35°C. El cultivo nocturno se diluye a 1:10, se incuba durante 1 hora a 35°C, se diluye hasta el tamaño de inóculo apropiado, y se aplica a los pozos que contienen caldo y compuesto de prueba. Los tamaños de inóculo son de 2x104 unidades formadoras de colonias/mililitro. Las placas se incuban a 35°C durante 48 horas, y se registran las concentraciones inhibidoras mínimas después de 18 horas de incubación para las bacterias. La concentración inhibidora mínima se define como la concentración más baja del compuesto que no produce un crecimiento visible después de la incubación. La concentración inhibidora mínima para diferentes compuestos preferidos de la Fórmula (I) está en el intervalo de aproximadamente 0.25 microgramos/mililitro a aproximadamente 32 microgramos/ mililitro contra H. influenza (cuatro cepas), de aproximadamente 0.001 microgramos/mililitro hasta más de 8 microgramos/mililitro contra S. aureus (cuatro cepas), de aproximadamente 0.016 microgramos/mililitro a aproximadamente 16 microgramos/mililitro contra S. pneumoniae (cuatro cepas), y de aproximadamente 0.008 microgramos/mililitro a aproximadamente 16 microgramos/mililitro contra M. catarrhalis. La enzima desformilasa se obtiene a partir de E. coli. Las siguientes son las formulaciones farmacéuticas representativas que contienen un compuesto de la Fórmula (I). Ejemplo 21 : Formulación de tabletas. Los siguientes ingredientes se mezclan íntimamente, y se comprimen en tabletas con una sola marca: Cantidad por Ingrediente Tableta (mq| Compuesto de esta invención 400 Almidón de maíz 50 Croscarmelosa de sodio 25 Lactosa 120 Estearato de magnesio 5 Ejemplo 22: Formulación de Cápsulas. Los siguientes ingredientes se mezclan íntimamente, y se cargan en una cápsula de gelatina de cubierta dura: Cantidad por Ingrediente Cápsula (mq) Compuesto de esta invención 200 Lactosa, secada por pulverización 148 Estearato de magnesio 2 Ejemplo 23: Formulación de Suspensión. Los siguientes ingredientes se mezclan para formar una suspensión para administración oral: Ingrediente Cantidad Compuesto de esta invención 1.0 g Ácido fumárico 0.5 g Cloruro de sodio 2.0 g Metil-parabeno 0.15 g Propil-parabeno 0.05 g Azúcar granulado 25.0 g Sorbitol (solución al 70 por ciento) 13.00 g Veegum (Vanderblit Co.) 1.0 g Saborizante 0.035 mi Colorantes 0.5 mg Agua destilada c.s. hasta Ejemplo 24: Formulación Inyectable. Los siguientes ingredientes se mezclan para formar una formulación inyectable: Ingrediente Cantidad Compuesto de esta invención 0.2-20 mg Solución reguladora de acetato de sodio, 0.4M 20 mi HCI (1N) ó NaOH (1N) es. hasta un pH adecuado. Agua (destilada, estéril) c.s. hasta 20 mi Ejemplo 25: Formulación de Supositorio. Se prepara un supositorio de un peso total de 2.5 gramos, mediante la mezcla del compuesto de la invención con Witepsol® H-5 (triglicéridos de ácido graso vegetal saturado; Riches-Nelson, Inc., Nueva York), y tiene la siguiente composición: Compuesto de la invención 500 mg Witepsol® H-15 El resto Ejemplo 26: (5-f luoro-piridin-2-¡l)-amida del ácido (2S,4R)-1- ((R)-2-[(formil-hidroxi-amino)-metil]-hexanoil)-4-isopropil-pirrolidin-2-carboxílico. El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-n-butil-3-[formil-N-benciloxi]-amino-propiónico A-7, y la [2-amino-5-fluoro-piridina] del ácido 4-isopropil-pirrolidin-2-carboxí Meo. Ejemplo 27: (5-f luoro-piridin-2-il)-amida del ácido (2S,4R)-1-((R)-2-[(formil-hidroxi-amino)-metil]-hexanoil)-4-isopropil-pirrolidin-2-carboxílico. El compuesto del título se prepara de acuerdo con el Procedimiento General A, a partir del ácido 2-n-butil-3-[formil-N-benciloxi]-amino-propiónico A-7, y el [N-óxido de 2-amino-5-fluoro-piridina] del ácido 4-isopropil-pirrolidin-2-carboxílico. Ejemplo 28: Caracterización bioquímica y estructural de mutantes de peptidil-desf ormilasa G70V/D de Streptococcus pneumoniae. La actividad de la peptidil-desformilasa es esencial para el crecimiento de S. pneumoniae. Los mutantes que se seleccionan sobre NVP-LBM415 no se comprometen para el crecimiento in vitro, y por consiguiente, no se esperaría que las mutaciones en defB que confieran resistencia a estos compuestos alteren dramáticamente la actividad enzimática. Para probar esta hipótesis, se determina la cinética de la actividad de la peptidil-desformilasa utilizando el sustrato de f-Met-Ala-Ser. Tabla 1. Actividad enzimática de la peptidil-desformilasa de Streptococcus pneumoniae de tipo silvestre y mutante Los datos de la Tabla 1 apoyan la hipótesis de que los cambios seleccionados en las enzimas mutantes no alteran dramáticamente la actividad de la peptidil-desformilasa. Es evidente que las enzimas mutantes son capaces de soportar el crecimiento normal de S. pneumoniae, mientras que proporcionan un nivel de protección de ciertos inhibidores de PDF. La prueba preliminar de la concentración inhibidora mínima utilizando los mutantes G70V/D de PDF sugirió que estos mutantes son menos sensibles a un subtipo de inhibidores de PDF relacionados que contienen un componente de N-óxido de P3 que a los compuestos altamente relacionados que carecen de este grupo.

Para investigar adicionalmente, se determinan las IC50s y las MICs de pares específicos de compuestos que difieren solamente en esta característica. La Tabla 2 muestra las estructuras y describe las IC50s y las MICs promedio de tres pares de compuestos similares, más el compuesto de selección original NVP-LBM-415.

Tabla 2. Efecto del constituyente de N-óxido del anillo P3 sobre la inhibición de la actividad de peptidil-desformiiasa de Streptococcus pneumoniae y el crecimiento en cultivo *EI significado de la IC50 incrementada del miembro que contiene N-óxido del par de compuestos contra las enzimas mutantes (G70V/D) se expresa como la evidencia de que el cambio es aleatorio, a un intervalo de confianza del 95 por ciento.

Se llevan a cabo análisis estadísticos que se diseñan para remover la variabilidad en la inhibición de la enzima que se deriva de aspectos de cada compuesto diferente del sustituyente de N-óxido de P3 para cada par de inhibidores. En todos los casos, el incremento en la IC5o promedio para el componente que contiene N-óxido de cada par es estadísticamente significativo, y se correlaciona con una concentración inhibidora mínima (MIC) incrementada para ese agente.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de la Fórmula (I): en donde R, es hidrógeno, alquilo, heteroalquilo, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo; R3 es hidrógeno, halógeno, o alcoxilo; y R4 es arilo o heteroarilo; o n es de 0 a 3, y en el entendido de que fí^ es cicloalquilo, y/o R4 es un anillo de heteroarilo monocíclico de 6 miembros opcionalmente sustituido que tiene 2, 3, ó 4 heteroátomos de nitrógeno en el anillo, en donde uno o más de los heteroátomos de nitrógeno del anillo están opcionalmente oxidados, o una sal del mismo o un pro-fármaco del mismo.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R3 es isopropilo.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde Ri es cicloalquilo.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R4 es un heteroarilo de la Fórmula (II): en donde cada uno de R6, R7, R8, y R9 es independientemente hidrógeno, alquilo, alquilo sustituido, fenilo, halógeno, hidroxilo, o alcoxilo, o una sal del mismo, o un pro-fármaco del mismo.

5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R4 es un heteroarilo de la Fórmula (11-1): (11.1) donde R6, R7, y R9 son hidrógeno, y R8 flúor, una sal del mismo, o un pro-fármaco del mismo.

6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R4 es un heteroarilo de la Fórmula (II.2): (11.2) donde R6, R7, y Re son hidrógeno, una sal del mismo, o un pro-fármaco del mismo.

7. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R4 heteroarilo de la Fórmula (II.3) (11.3) y en donde R6, R7, y R8 son hidrógeno, una sal del mismo, o un pro-fármaco del mismo.

8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R4 es un heteroarilo de la Fórmula (II.4): (II.4) y en donde R6, R7, y R8 son hidrógeno, una sal del mismo, o un pro-fármaco del mismo.

9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R4 es un heteroarilo de la Fórmula (II.5): (II.5) en donde R6, R7, y Re son hidrógeno, una sal del mismo, o un pro-fármaco del mismo.

10. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde se selecciona a partir de ciclohexilo, ciclopentilo, ciclobutilo, o ciclopropilo.

11. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde es un butilo normal.

12. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 10, en donde R4 se selecciona a partir de 2-amino, N-óxido de 5-fluoro-piridina, 2-pirazina, 3-piridazina, 3-pirimidina, 4-pirimidina, N-óxido de 3-piridazina, o 2-amino, 5-fluoro-piridina.

13. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, en donde R4 se selecciona a partir de 2-amino, N-óxido de 5-fluoro-piridina, 2-pirazina, 3-piridazina, 3-pirimidina, 4-pirimidina, N-óxido de 3-piridazina, o 2-amino, 5-fluoro-piridina.

14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 10, en donde R3 es isopropilo.

15. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 11, en donde R3 es isopropilo.

16. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R4 es un heteroarilo de la Fórmula (III):

17. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, donde R4 es un heteroarilo de la Fórmula (III.1): en donde R6, R7, y R9 son hidrógeno, y R8 es flúor, una sal del mismo, o un pro-fármaco del mismo. 5 10 15 25